АНТИГЕЛЬМИНТНОЕ СРЕДСТВО Российский патент 2010 года по МПК C07D271/12 A61K31/4245 A61P33/10 

Изобретение касается области ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения стронгилятозов.

Стронгилятозов желудочно-кишечного тракта в настоящее время насчитывается более 400 видов. Они широко распространены и наносят значительный экономический ущерб, связанный со снижением количества и качества продукции животноводства и большими затратами на лечебно-профилактические мероприятия.

Известен структурный аналог 4- или 6-нитро-5,7-дихлорбензофуроксан формулы

где R₁=NO₂, R₂=Н или R₁=H, R₂=NO₂, обладающий фунгицидной активностью, см. Патент RU №2032678, МПК C07D 271/12, 1995.

Указанные соединения не проявляют антигельминтную активность. Наиболее близким по структуре к заявляемому объекту является 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан формулы

где R₁: 2-хлорфениламин или 2,5-дихлорфениламин или 4,5-дихлорфениламин или 2-гидроксифениламин или 4-гидроксифениламин или 4-бромфениламин или 2-метил-5-хлорфениламин или 4-аминодифенил, обладающие акарицидной и бактерицидной активностью, см. Патент RU №2255935, МПК C07D 271/12, 2005.

Задачей изобретения является применение 5,7-дизамещеного-4,6-динитробензофуроксана с R: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства.

Техническая задача решается применением 5,7-дизамещенного-4,6-динитробензофуроксана общей формулы

где R₁: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства.

Решение технической задачи позволяет применить соединения 5,7-дизамещенного-4,6-динитробензофуроксана общей формулы

где R₁: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства.

Заявляемые вещества, обладают малой токсичностью, проявляют высокую антигельминтную активность в течение короткого времени 3-45 минут.

5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан получают взаимодействием 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана с 4-гидроксифениламином (1) и 4,5-дихлорфениламином (2) в среде диметилсульфоксида или изопропилового спирта по схеме:

Приводим пример получения соединения формулы 5,7-бис-(4-гидроксифениламино)-4,6-динитробензофуроксан (1).

Пример 1.

К раствору 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуроксана (50 г) в растворителе диметилсульфоксиде (450 мл) добавляют раствор 4-гидроксифениламина (68 г) в растворе диметилсульфоксида (400 мл) и выдерживают реакционную смесь при температуре 20-25°С. Полноту протекания реакции контролируют тонкослойной хроматографией. По окончании реакции добавляют в реакционную смесь воду. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 43 г (85%), T_пл 195-196°C (из этилового спирта).

ИК-спектр, см^-1: 1690 (C=N-O), 3360 (NH)

C₁₈H₁₂N₆O₈

Вычислено, %: C 49; H 2,7; N 19

Найдено, %: C 48.9; H 2,69; N 19

Спектр ПМР^1H, ацетон δ м.д. 9,0 (2Н, NH), 7,2 (4Н бензола), 4,0 (2Н ОН).

Пример 2 аналогичен примеру.1, в качестве растворителя берут изопропиловый спирт.

Приводим пример получения соединения формулы 5,7-бис-(4,5-дихлорфениламино)-4,6-динитробензофуроксан (2).

Пример 3.

К раствору 5,7-дихлор-4,6-динитробензофуоксана (50 г) в растворителе диметилсульфоксиде (450 мл) добавляют раствор 4,5-дихлорфениламина (68 г) в растворе диметилсульфоксида (400 мл) и выдерживают реакционную смесь при температуре 60°C. Полноту протекания реакции контролируют тонкослойной хроматографией. По окончании реакции добавляют в реакционную смесь воду. Осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Выход 43 г (85%), T_пл 185-186°C (из этилового спирта).

ИК-спектр, см-¹: 1680 (C=N-O), 3370 (NH)

C₁₈H₈N₆O₆Cl₄

Вычислено, %: C 40; H 1,4; N 15,5; C 126

Найдено, %: C 39.8; H 1,39; N 15,3; Cl 25,8

Спектр ПМР¹⁴, ацетон 5 δ м.д. 9,4 (2Н, NH), 7,5 (3Н бензола).

Пример 4 аналогичен примеру 3, в качестве растворителя берут изопропиловый спирт.

Исследование токсичности 5,7-дизамещенный-4,6-динитробензофуроксан (I) при введении в желудок.

При однократном введении (I) в желудок определяют параметры токсичности и изучают симптомы острого отравления. Острую токсичность изучают на белых крысах весом 170-200 г. Соединения (I) вводят в желудок в виде 10% суспензии через металлический зонт. Животным контрольной группы вводят в соответствующих количествах эмульсию, содержащую только эмульгатор. Учитывают следующие показатели: внешний вид и поведение животных, отношение к корму, подвижность, ритм и частоту дыхания, время возникновения и характер интоксикации, ее тяжесть, обратимость, сроки гибели животных или их выздоровления. Наблюдение за клиническим состоянием животных проводят в течение 10 дней.

Для оценки токсичности определяют максимально переносимую дозу - МПД; дозу, вызывающую гибель 50% животных - ЛД₅₀ и абсолютно смертельную дозу - ЛД₁₀₀. ЛД₅₀ и ее доверительные границы вычисляют по методу Кербера, см., например, Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - М., Медицина, 1963. - 262 с.

После введения соединений (I) в дозах 1000-1500 мг/кг существенных изменений в общем состоянии животных не обнаружено. В дозах от 1500-2000 мг/кг наступало легкое угнетение, отказ от корма, которое через 2-2,5 часа проходило. При введении препарата в дозах от 2000-2500 мг/кг животные становились угнетенными, отказывались от корма в течение 4-5 часов, затем начинали принимать корм. Все функциональные системы животных восстановились в течение 1,5-2 суток. Гибель животных за период наблюдения (10 суток) не происходило. Препарат в дозах более 3000 мг/кг не представлялось возможным вводить в желудок животным, из-за слишком большого объема массы. Результаты исследований приведены в таблице 1.

Таблица 1
Токсичность соединений (1) и (2) для теплокровных животных Острая токсичность, мг/кг 5,7-бис(4-гидроксифениламино)-4,6-динитробензофуроксан (1) МПД ЛД₅₀ ЛД₁₀₀ 1000 -* -* 1500 -* -* 2000 -* -* 2500 -* -* 3000 -* -* 5,7-бис(4,5-дихлорфениламино)-4,6-динитробензофуроксан(2) 1000 -* -* 1500 -* -*

Продолжение таблицы 1 2000 -* -* 2500 -* -* 3000 -* -* - не смогли определить, т.к. даже доза 3000 мг/кг не вызвала гибели животных.

Из таблицы 1 видно, что соединения (I) являются малотоксичными и относятся к 4 классу токсичности.

Антигельминтная активность соединений изучена на нематодах, принадлежащих подотрядам: Ascaridata, Strongylata, Trichocephalata no общепринятой методике, см., например, Беленький М.Л. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - М. Медицина, 1963. - 262 с. Для этого нематод выделяли из свежих способов, взятых от пораженных животных, и по 10-20 штук помещали в чашки Петри, которую пропитывали суспензией, содержащей различные концентрации испытуемых соединений, и в течение 3 часов вели наблюдение и учет погибших гельминтов. Результаты исследований представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, соединения (1) и (2) обладают антигельминтной активностью в течение небольшого времени от 3 до 45 минут.

Заявляемый объект по сравнению с прототипом обладают антигельминтной активностью, а по сравнению с контрольными препаратами превосходит в 2 раза.

Таким образом, заявляемый объект может найти широкое применение в качестве антигельминтного средства.

Изобретение касается ветеринарии и может быть использовано для профилактики и лечения стронгилятозов. Описывается применение 5,7-дизамещенного-4,6-динитробензофуроксана общей формулы

где R₁: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства. Технический результат - изобретение обладает быстродействующей антигельминтной активностью (в течение 3-45 мин). 2 табл.

Применение 5,7-дизамещенного-4,6-динитробензофуроксана общей формулы

где R₁: 4-гидроксифениламин или 4,5-дихлорфениламин в качестве антигельминтного средства.