ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ГИГИЕНЫ ПОЛОСТИ РТА Российский патент 2010 года по МПК A61K35/14 A61K36/185 A61Q11/00 

Изобретение относится к стоматологии, в частности к препаратам для профилактики и лечения хронических заболеваний слизистой оболочки полости рта.

Известно воздействие (при наличии болевых ощущений) на слизистую оболочку полости рта взвеси анестезина и глицерина или раствора анестетиков (1-2% растворы лидокаина, раствор новокаина) в виде ротовых ванночек или аппликаций на патологические очаги в течение 5 минут. Однако местно-обезболивающий эффект указанных препаратов крайне недостаточен вследствие низкой способности диффузии в слизистую оболочку, особенно на воспаленных тканях (см. «Заболевание слизистой оболочки полости рта и губ», Боровский Е.В. и др. М., 2001. - С.119-120).

Известно воздействие на очаги заболевания полости рта антибактериальными средствами пролонгированного действия, а именно антибактериальными органическими синтетическими веществами (хлоргексидин) широкого антимикробного спектра действия и галогенированными гидросифенильными эфирами (триклозан). Полоскание 0,05% раствором хлоргексидина проводится 2-3 раза в день после еды с последующим исключением приема пищи в течение 1 часа. (Клиника, диагностика и лечение заболеваний слизистой оболочки полости рта и губ. Анисимова И.В. и др., М., 2008. - С.106-107). Однако длительное применение данных веществ приводит к снижению количества не только болезнетворных, но и полезных бактерий в полости рта. Кроме того, они имеют побочные действия, связанные с привыканием бактерий к данному антимикробному препарату, с развитием дисбактериоза полости рта, индивидуальной непереносимостью препаратов и т.д., что препятствует массовому внедрению данного вида лекарств в стоматологическую практику.

Научные работы по изучению патогенеза различных заболеваний слизистой оболочки полости рта указывают на значение иммунных нарушений в механизме их развития («Состояние местного иммунитета свободно радикальных процессов и антиоксидантной защиты в слюне при хроническом рецидивирующем автозном стоматите», Ионов В.В. Автореф. дисс... канд. мед. наук. М., 2008.-23 с.; «Иммунные нарушения и патогенетическое обоснование их коррекции у больных хроническими заболеваниями слизистой оболочке полости рта», Спицина В.И. Автореф. дисс. канд. мед. наук. М., 2005. - 23 с.). Это объясняет включение в схему комплексного лечения данных заболеваний различных иммунокоррегирующих препаратов, разрабатываются различные схемы их клинического применения. Но чаще больным назначают Полиоксидоний по 1 таблетке 2 раза в день за 30 минут до еды до полного рассасывания в течение 10 дней или Имудон по 1 таблетке 6-8 раз в день за час до еды до полного рассасывания в полости рта в течение 20 дней.

Известно использование в стоматологической практике для регенерации и эпителизации эрозивно-язвенных поражений на слизистой оболочке полости рта кератопластических средств: каратолина, облепихового масла, масла шиповника, масляного раствора витамина А. Смазывание пораженных участков слизистой проводят 3-4 раза в день после еды (См. там же, а также «Терапевтическая стоматология», Дмитреева Л.А., М., 2003. - С.154-156; Лекарственные формы с каротолином для применения в стоматологии // Современные проблемы фармации: Сб. ст. - Алма-Ата, 1989. - С.163-164). Однако данные средства неудобны в применении и обладают слабым антимикробным действием, а в ряде случаев способствуют разрушению эмали зубов.

Вышеперечисленные группы препаратов используются в виде чередующихся аппликаций или полосканий, в результате чего пациенты длительное время вынуждены находится у стоматолога или лечиться амбулаторно, соблюдая строгую последовательность.

Известны фармацевтические формы комбинированного воздействия («Холисал-гель», «Мундизал»), которые обладают антимикробным, противовоспалительным и обезболивающим эффектом (Клиника, диагностика и лечение заболеваний слизистой оболочки полости рта и губ. Анисимова И.В. и др. М., 2008. - С.106-107). Однако данные препараты имеют синтетическую природу и способны вызывать аллергические реакции организма, что значительно снижает их лечебную ценность. Кроме того, холина солицилат, являющийся главным действующим веществом, обладает всеми отрицательными качествами, характерными для этой группы: раздражение и даже ульцерозный эффект при длительном контакте со слизистой оболочкой.

Известно использование в стоматологической практике растительных экстрактов и отваров, в частности экстракта и отвара бадана, обладающего антимикробным, противовоспалительным, вяжущим свойством, посредством полоскания полости рта при хронических воспалительных процессах (Интернет: http: //www.wildgarden. ru /grass/bergenia.php).

Однако экстракты или отвары бадана обладают лишь кровоостанавливающим, антибактериальным и дезодорирующим свойством. Вместе с тем патология полости рта часто требует коррекции местного иммунологического статуса, улучшения микроциркуляции, уменьшения сроков эпителизации патологических элементов.

Известна лечебно-профилактическая зубная паста «Силапант» - White, отбеливающая, в состав которой кроме фторида натрия, ментола, жемчужного порошка, экстрактов солодки, лимона входит экстракт бадана и пантогематоген (Интернет: URL:http://www. alttpp.ru/news/arch/2008/11/one news 2306-882-77. html npatt-print) - прототип.

Однако действие зубной пасты предназначено для лечения твердых тканей зубов и пародонта и ограничено временем чистки зубов, а при дальнейшем ополаскивании водой активных веществ на слизистой оболочке рта практически не остается, что явно недостаточно для лечения, тем более для лечения патологий характеризующихся тяжелыми хроническими формами, при которых необходимо пролонгированное действие препаратов.

Необходимость назначения широкого спектра фармакологических препаратов и связанная с этим проблема аллергизации, непереносимости и наличия побочных эффектов (свойственных особенно синтетическим средствам) обосновывают поиск и включение в комплексное лечение слизистой оболочки полости рта (СОПР) биологически совместимых средств. Резервом оптимизации терапии эрозивных процессов полости рта является применение препаратов природного происхождения, имеющих ряд преимуществ: более физиологическое действие, низкая токсичность, слабая выраженность побочных эффектов, возможность длительного применения без развития толерантности, активизация функций не только иммунной, но и нервной и эндокринной систем благодаря наличию комплекса биологически активных веществ, оказывающих воздействие на организм в целом.

Однако использование в стоматологии экстрактов и отваров природного сырья ограничивается тем, что практическая стоматология требует применения нескольких препаратов в строгой последовательности, а на приготовление свежих экстрактов и отваров требуется время. Высокая температура при заваривании частично способствует разрушению биологически активных веществ. Кроме этого срок хранения данной препаративной формы лекарственного средства ограничен, а применение консервантов влияет на качество.

Необходима разработка лечебно-профилактического препарата, расширяющего арсенал средств по уходу за полостью рта при использовании природных биологически активных комплексов, удобного в применении, обладающего эффективным лечебным действием, а по сравнению с синтетическими веществами не имеющего побочных действий.

Указанный технический результат достигается тем, что в лечебно-профилактическом препарате для гигиены полости рта на основе биологического материала в качестве последнего используют смесь сухого пантогематогена по ТУ 9158-027-40587098-06 и экстракта бадана сухого по ТУ 9370-27-02068315-04 при следующем соотношении компонентов: пантогематоген:бадан 1:3-1:4.

Сущность изобретения заключается в том, чтобы при использовании двух биологических составляющих лечебно-профилактического препарата для гигиены полости рта исключить отрицательное воздействие ингредиентов друг на друга путем их оптимального сочетания с сохранением антибактериальных и иммуномодулирующих свойств in vitro и in vivo.

Препараты из крови маралов являются, в связи с наличием большого количества действующих начал, очень эффективными в комплексной профилактике и лечении различных соматических состояний, иммунодефицитных и функциональных вегетативных расстройств. Так, наличие макро-, микроэлементов, пептидов, фосфолипидов, жирных кислот, гормонов и факторов роста предполагает поливалентное воздействие на организм человека. Используемый в лечебно-профилактическом средстве препарат из крови марала готовят в период с июня по ноябрь по ТУ 9158-027-40587098-06 путем вакуумной сушки (0,6-0,9 атм), при температуре 38°С.

Экстракт бадана сухой получают из растительного сырья также по уникальной технологии, при которой время экстрагирования не превышает 60 мин, а температура экстрагирования - 55°С, позволяя сохранить весь комплекс биологически активных веществ (ТУ 9370-27-02068315-04). Экстракт бадана широко применяется в медицинской практике. Благодаря биологически активным веществам, входящим в его состав, он обладает кровоостанавливающим, антисептическим, обезболивающим и противовоспалительным действием. Вяжущие вещества, соприкасаясь с поверхностью слизистой оболочки, проникая в межклеточное пространство, в клетки различных тканей и сосуды, осаждают белки ферментов, участвующих в развитии местной воспалительной реакции, образуют плотные пленки альбуминатов. Пленки коагулятов защищают подлежащие ткани от внешних раздражителей, уменьшают болевую чувствительность. Высока и антимикробная активность экстракта бадана. Экстракт бадана имеет в своем составе самый сильный природный антисептик - арбутин. Под действием арбутина замедляют свой рост возбудители различных бактериальных инфекций. Он выражает свои бактерицидные свойства в отношении грамположительных кокковых (стрептококк, стафилококк, микрококк и др.) и особенно грамотрицательных бактерий. Несомненным плюсом арбутина является его "избирательность". Он проявляет свои противомикробные свойства только в отношении патогенных микроорганизмов, сохраняя при этом нормальную микрофлору организма. В организме часть арбутина вступает в реакцию гидролиза, в результате которой освобождается гидрохинон. Это вещество сохраняет антисептические свойства и обладает противовоспалительным действием. Гидрохинон образуется не только в организме, но и содержится в экстракте бадана. В экстракте бадана содержатся также галловая кислота, снижающая рост грамотрицательных бактерий и укрепляющая стенки капилляров; фитонциды, каротин и витамин С, являющиеся антиоксидантами, флавоноиды и дубильные вещества. Наличие дубильных веществ увеличивает проницаемость слизистой оболочки полости рта для биологически активных компонентов, что повышает лечебно-профилактическое действие.

В связи с тем что кровь (сухой пантогематоген) является фактором роста для микроорганизмов при ее добавлении в питательные среды, то необоснованное ее количество в заявленном препарате может спровоцировать рост бактерий. С целью исключения данного фактора, при сохранении всех положительных свойств пантогематогена сухого в составе заявленного препарата были проведены исследования по выявлению оптимальных сочетаний ингредиентов в нем при высокой биологической активности и бактериостатической эффективности препарата (таблица 1).

Таблица 1 № п/п опыта Сочетание ингредиентов: пантогематоген: бадан Биологическая активность %, по ФС 42-2323-95 Бактериостатическая эффективность, % 1 1:1 100 70 2 1:2 100 83 3 1:3 100 96 4 1:4 100 100 5 1:5 84 100 6 1:6 72 100 7 1:7 64 100

Как видно из таблицы 1 (опыт 1), высокое содержание сухого пантогематогена в связи с его вышеуказанным свойством стимулирует рост бактерий, бактериостатическая эффективность составляла 70% в связи с низким содержанием бадана. Увеличение количества бадана в 2 раза (2 опыт) повысило бактериостатическую эффективность препарата на 13%. Таким образом, оптимальным соотношением ингредиентов следует считать соотношение 1:3 и 1:4 при 100% биологической активности и 96-100% бактериостатической эффективности препарата.

Для выявления оптимальных параметров препарата при условии его разведения для использования были изучены антибактериальные и иммуномодулирующие свойства заявленного препарата in vitro и in vivo.

Для проведения микробиологического исследования in vitro были проведены 2 серии опытов при соотношении компонентов 1:4. В первой серии на основе стерильного физиологического раствора приготовлены растворы с различной концентрацией препарата: 10; 5; 3,3 и 2,5 мг/мл, где 1 капсулу препарата растворили в 50, 100, 150 и 200 мл физ. раствора соответственно. По 1 мл каждого образца помещали в стерильные пробирки и добавляли 0,1 мл взвеси культуры исследуемого стандартного штамма микроорганизма в концентрации 10 млн/мл, быстро перемешивая. В качестве тест-культур использовали: Micrococcus luteus, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus pyogenes, Lactobacillus plantarum, Staphylococcus aureus и Enterococcus faecalis. В контрольные пробирки помещали 1 мл стерильного физиологического раствора и 0,1 мл взвеси исследуемой культуры микроорганизмов в известной концентрации - 10 млн/мл. Проводили посевы 0,1 мл полученного разведения в чашки Петри на мясо-пептонный агар, инкубировали в термостате при 37°С 24 часа, через сутки подсчитывали количество микроорганизмов в чашках. При наличии отдельных колоний определяли КОЕ, высчитывая по формуле М=(а-10ⁿ/V), где М - количество клеток в 1 мл взвеси бактерий; а - среднее число колоний, выросших при посеве данного разведения; V - объем посеянной взвеси бактерий; 10ⁿ - коэффициент разведения. При сплошном росте определяли процент занимаемой микроорганизмами площади чашки Петри.

Во второй серии микробиологического исследования in vitro были приготовлены растворы с различной концентрацией препарата: 10; 5; 3,3 и 2,5 мг/мл. По 1 мл каждого образца помещали в стерильные пробирки и добавляли 0,1 мл взвеси культуры исследуемого стандартного штамма микроорганизма в концентрации 10 млн/мл. В контрольные пробирки помещали 1 мл стерильного физиологического раствора и 0,1 мл взвеси культуры исследуемого микроорганизма в концентрации 10 млн/мл. После инкубирования, через сутки производили посев 0,1 мл полученного разведения в чашки Петри на мясо-пептонный агар. Затем посевы повторно инкубировали в термостате при 37°С 24 часа и через сутки подсчитывали колонии микроорганизмов.

Отличие 2 серий исследований заключается во времени инкубации посевной суспензии. Так, в 1-й серии исследований посев производится через 15-20 минут после смешивания, а во 2 серии - только через сутки после инкубации в термостате.

По полученным результатам исследований in vitro можно сделать вывод о том, что заявленный препарат обладает антимикробным действием. В контрольных чашках Петри повсеместно определяется сплошной рост микроорганизмов, в то время как в опытных - рост отдельных колоний. Следует отметить, что в первой и второй серии опытов полностью подавлен рост М. luteus. Во второй части данного исследования отмечено отсутствие роста не только М. luteus, но и St. aureus. Количество каждого исследуемого штамма микроорганизма во второй серии опытов меньше по сравнению с первой. При увеличении концентрации препарата с 2,5 мг/мл до 10 мг/мл усиления антимикробной активности не отмечено, возможно, из-за входящего в его состав пантогематогена.

В связи с тем что для удобства пользования заявленным препаратом его целесообразно готовить на день в 2-3 кратном объеме (тем более с профилактической целью), были проведены исследования по выявлению такой возможности без снижения антибактериального действия препарата. В термостате при температуре 37°С препарат в разведении 1 капсулы (500 мг) в 200 мл воды инкубировали в течение 24 часов. Снижение антимикробных свойств, даже в таких комфортных условиях, как показали исследования, не происходило, напротив, отмечалось полное отсутствие роста М. luteus и St. aureus. В реальных условиях срок хранения препарата (при употреблении утром и вечером) составляет 12-17 часов, что дополнительно гарантирует сохранность свойств заявленного препарата.

Группу исследования in vivo составляли 10 здоровых добровольцев. Препарат назначали в виде ротовых ванночек. Содержимое одной капсулы настаивали 2-3 часа в теплой кипяченой воде (200 мл). Ванночки делали 2 раза в день: утром и вечером после еды и чистки зубов. После процедуры в течение 1-2 часов исключали прием жидкой и твердой пищи. Курс составлял 20 дней.

Микробиологическое исследование проводили дважды: до и после курса процедур. Мазок с слизистой оболочки полости рта брали утром натощак стерильным ватным тампоном. В лаборатории производили посев материала на стандартные микробиологические среды с последующим выделением чистой культуры микроорганизма. Морфологические и тинкториальные признаки штаммов определяли, окрашивая мазки по Граму, биохимическую активность оценивали общепринятыми способами. На основании морфологических, тинкториальных, биохимических признаков проводили идентификацию по бинарной номенклатуре с определением количества выделенного штамма в материале.

Штаммы микроорганизмов, выявленные в ходе исследования in vivo, представлены в таблице 2. До применения заявленного препарата количество микроорганизмов в полости рта у каждого добровольца в среднем составило 3,42±1,10·10³ КОЕ. После курса ротовых ванночек с препаратом показатель был равен в среднем 1,92±0,59·10³ КОЕ (р<0,05). Количество отдельных представителей микрофлоры полости рта снизилось также в среднем в 2 раза (фиг.1). Исключение составили представители нормальной микрофлоры - Str. sanguis и L. casei и условно-патогенный St. saprophiticus, количество которых увеличилось.

Таблица 2   Название микроорганизма % Представитель нормальной микрофлоры полости рта Str. mitis 80 Str.mutans 60 Str. salivarius 40 Str. sanguis 20 Str. pyogenes 20 Lactobacillus casei 40 Условно-патогенная микрофлора полости рта St. epidermidis 40 St. saprophiticus 60 M. luteus 40 N. mucosa 40 Corynebacter 20 C. albicans 100

На диаграмме фиг.1 отражено количество представителей микрофлоры полости рта до и после курса применения препарата.

Антимикробная активность препарата объясняется содержащимся в нем экстрактом бадана, имеющим в своем составе самый сильный природный антисептик - арбутин и галловую кислоту. Следует отметить также противогрибковую активность препарата (фиг.1). Количество грибов рода Candida в полости рта составило в среднем 1,62±0,63·10³ КОЕ и 0,78±0,36·10³ КОЕ, р<0,05 (до и после курсового применения препарата соответственно).

Таким образом, заявленный препарат обладает антимикробной активностью, которая не зависит от его концентрации. После курсового применения препарата в виде ротовых ванночек количество микроорганизмов в полости рта снижается в 1,5 раза, а количество грибов рода Candida - в 2 раза.

Иммуномодулирующую активность препарата выявляли на группе добровольцев. Группу исследования составили 12 здоровых добровольцев обоего пола. В число исследуемых вошли 10 (83,3%) женщин и 2 (16,7%) мужчин в возрасте от 18 до 36 лет. Клиническая группа формировалась по обращаемости после санации полости рта. Проводилась оценка непосредственных и ближайших результатов с занесением данных в регистрационную карту.

Препарат назначался в виде ротовых ванночек по вышеописанной методике.

Материалом для цитологического исследования служили мазки-отпечатки со слизистой оболочки щеки справа ниже линии смыкания зубов.

В мазках определяли реакцию адсорбции микроорганизмов (РАМ) путем подсчета количества бактерий, адсорбированных на поверхности каждой эпителиальной клетки (расчет проводили на 100 клеток) по методике Т.А.Беленчук (1987) в модификации С.И.Токмаковой с соавт (2002). Цитологическое исследование проводилось дважды: до и после курса процедур. Материалом для иммунологического исследования служила смешанная слюна. Оценка функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов в слюне осуществлялась с помощью расчета фагоцитарного индекса (ФИ - число фагоцитирующих нейтрофилов на 100 клеток). Кислородзависимые антиинфекционные системы фагоцита изучали с помощью НСТ-теста в модификации М.А.Темирбаева (1991). Тест ставился в двух параллелях: спонтанный и стимулированный зимозаном. С целью исследования функционального резерва фагоцитирующих клеток было проанализировано соотношение значений показателей спонтанного и стимулированного НСТ-теста с вычислением следующих коэффициентов:

1) коэффициента мобилизации (КМ) нейтрофильных гранулоцитов (Нестеров И.В., 1980) - отношение стимулированного НСТ-теста к спонтанному; 2) коэффициента резервной реактивности нейтрофилов (РАН) - разность между показателями стимулированного и спонтанного НСТ-теста. Определение s-Ig А выполнялось иммуноферментным методом с использованием коммерческого набора s-Ig А-ИФА-БЕСТ ЗАО Вектор-Бест (г.Новосибирск). Использовался твердофазовый метод иммуноанализа, основанный на принципе «сендвича». Результаты учитывали фотометрически. Концентрацию s-Ig А в пробах определяли по калибровочному графику, количественное содержание выражали в мг/л. Лабораторные исследования проводились трижды - до начала курса применения препарата, после курса процедур и спустя 1 месяц после его окончания.

Результаты изучения иммуномодулирующих свойств представлены в таблице 3.

В ходе исследования было установлено, что до применения препарата индекс РАМ варьировал в пределах 66-82% и в среднем составил 75,17±4,80% (табл.3). После курса этот показатель изменялся в пределах 80-88% и в среднем составил 84,67±2,61%, что указывает на повышение показателя неспецифической резистентности полости рта (р<0,05).

Таблица 3 Изучаемый параметр Число наблюдений До курса применения После курса применения Через 1 месяц после окончания курса РАМ(%) 12 75,17±4,80 84,67±2,61* - ФИ(%) 12 63,83±8,72 67,67±8,95 61,33±9,16 НСТ-тест спонт.- у.е. 12 0,71±0,52 0,62±0,15 0,64±0,33 НСТ-тест стимул. - у.е. 12 0,78±0,49 0,98±0,17 1,12±0,32 КМ (у.е.) 12 1,50±1,20 1,67±0,47 1,97±0,78 РАН (у.е.) 12 0,07±0,04 0,36±0,22* 0,48±0,19* s-Ig А (мг/л) 12 490,33±179,58 533,13±102,53 758,90±18,82*°

Примечание:
- * отличие при сравнении с показателями до курса применения достоверно (р<0,05)
-° отличие при сравнении с показателями после курса применения достоверно (р<0,001)  

До применения препарата ФИ варьировал в пределах 54-84% и в среднем составил 63,83±8,72%, что является вариантом нормы (табл.3). После ротовых ванночек с препаратом показатель был равен в среднем 67,67±8,95% (р>0,05). Определяется тенденция к повышению ФИ, что свидетельствует о стимуляции фагоцитоза в нейтрофилах.

До применения природного иммуномодулятора показатели спонтанного, отражающего степень функционального раздражения нейтрофилов, и стимулированного НСТ-теста, характеризующего функциональный резерв нейтрофилов, в среднем были повышены: 0,71±0,52 у.е. и 0,78±0,49 у.е. соответственно (табл.3). После курса отмечено незначительное снижение среднего значения спонтанного НСТ-теста до 0,62±0,15 у.е. с относительной стабилизацией его уровня через 1 месяц после окончания курса (0,64±0,33 у.е.). Значительно повысилось среднее значение стимулированного НСТ-теста сразу после курса и спустя 1 месяц (0,98±0,17 у.е. и 1,12±0,32 у.е. соответственно). Повышение значения показателя стимулированного НСТ-теста может свидетельствовать об усилении функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов.

Коэффициент мобилизации перед применением препарата составил 1,50±1,20 у.е., что находится в пределах нормы, а резервная активность нейтрофилов была снижена и составляла 0,07±0,04 у.е. (0,3 у.е в норме). Исходя из того что данные показатели являются биохимическими критериями готовности нейтрофилов к завершенному фагоцитозу, можно сделать вывод о низком уровне функционального резерва фагоцитирующих клеток. После курса ротовых ванночек с препаратом отмечен положительный эффект: коэффициент мобилизации составил 1,67±0,47 у.е. с последующим увеличением через 1 месяц до 1,97±0,78 у.е. Резервная активность нейтрофилов (фиг.2.) достигла нормативных значений и составила 0,36±0,22 у.е. (р<0,05) с дальнейшим повышением показателя до 0,48±0,19 у.е. через 1 месяц после курса (р<0,05). Увеличение значений данных показателей свидетельствует о повышении кислородзависимой бактерицидной функции и цитотоксического потенциала нейтрофильных гранулоцитов.

На фиг.2 представлена динамика резервной активности нейтрофилов на фоне курсового применения заявленного препарата.

Уровень s-Ig А (табл.3) до применения препарата варьировал в пределах 148,0-646,0 мг/л, в среднем составил 490,33±79,58 мг/л. После 3-недельного курса применения заявленного препарата этот показатель менялся в пределах от 380,0 до 688,0 мг/л, в среднем составляя 533,13±102,53 мг/л (р>0,05), т.е. наблюдается тенденция к увеличению изучаемого параметра. Исследование s-Ig А в ротовой жидкости спустя 1 месяц после окончания курса выявило значительное увеличение его уровня. Концентрация s-Ig А составила 758,90±18,82 мг/л, что достоверно различимо (р<0,001) как с данными до применения природного иммуномодулятора, так и после курса. Следовательно: применение заявленного препарата вызывает стимуляцию выработки s-Ig А и повышение его уровня в ротовой жидкости в 1,5 раза.

После применения препарата в виде ротовых ванночек имело место повышение значений целого ряда показателей: РАМ, ФИ, стимулированного НСТ-теста, РАН. Это свидетельствует об активации функциональной фагоцитарной активности, кислородзависимой бактерицидной функции и цитотоксического потенциала нейтрофильных гранулоцитов в полости рта, то есть усиление функциональной активности клеточного звена иммунитета полости рта.

Достоверное повышение уровня s-Ig А в ротовой жидкости после курса применения препарата свидетельствует об усилении неспецифической резистентности слизистой оболочки, функциональной активности гуморального звена иммунитета полости рта под иммуностимулирующим действием препарата.

Пример. Лечебно-профилактический препарат для гигиены полости рта готовят следующим образом.

Сухой пантогематоген, полученный по ТУ 9158-027-40587098-06, в количестве 1 г смешивают с 4 г сухого экстракта бадана по ТУ 9370-27-02068315-04, после тщательного перемешивания содержимое расфасовывается по 500 мг в капсулы или в полиэтиленовые мешочки. Для лечения ротовой полости 1 капсулу разводят в 200 мл кипяченой, остуженной до комнатной температуры воды, настаивается в течение 1,5-2 часов. Ротовые ванночки проводят после приема пищи и чистки зубов утром и вечером. Вторая половина объема (100 мл) сохраняется при комнатной температуре до вечера. При необходимости количество полосканий можно увеличить. С профилактической целью препарат эффективен при 7-дневном курсе применения. Препарат, представленный в сухом виде, в капсуле, не требует консервантов при хранении, расфасованный в определенной нужной дозе, и не требует при доведении до готовности высоких температурных режимов и длительного времени.

Клинические исследования заявленного препарата проводились на кафедре терапевтической стоматологии ГОУ ВПО Алтайского государственного медицинского университета. Было обследовано 153 человека, из них 25 здоровых и 128 пациентов с заболеваниями слизистой оболочки полости рта (далее СОПР). Среди больных с заболеванием СОПР было выделено 3 группы: пациенты с хроническим афтозным стоматитом (далее ХРАС), пациенты с эрозивно-язвенной формой плоского лишая (далее ПЛ), пациенты с язвенно-некротическим стоматитом (далее ЯНС).

1 группа - пациенты с ХРАС

- Основная подгруппа - 23 человека, среди которых 8 мужчин (34,8%) и 15 женщин (65,2%), средний возраст которых составил 33,7±10,4 года. В схему комплексного лечения патологии СОПР данной группы включался заявленный препарат для полости рта.

- Группа сравнения - 20 человек, получавших лечение по стандартной схеме. Среди них - 8 мужчин (40%) и 12 женщин (60%). Средний возраст данной группы - 35,6±9,7 года.

2 группа - пациенты с эрозивно-язвенной формой ПЛ

- Основная подгруппа - 24 человека, получавшие в схеме комплексного лечения заявленный препарат для полости рта. Средний возраст подгруппы, включавшей 7 мужчин (29,2%) и 17 женщин (70,8%), составил 50,3±8,1 года.

- Группа сравнения - 20 человек, получавших лечение по стандартной схеме. Среди них - 4 мужчин (20%) и 16 женщин (80%). Средний возраст данной группы - 52,9±9,9 года.

3 группа - пациенты с ЯНС на фоне проводимой химиотерапии острого лейкоза

- Основная подгруппа - 21 человек, среди которых 7 мужчин (33,3%) и 14 женщин (66,7%), средний возраст которых составил 37,8±12,9 года. В схему комплексного лечения патологии СОПР данной группы включался заявленный препарат.

- Группа сравнения - 20 человек, получавших лечение по стандартной схеме, включала 8 мужчин (40%) и 12 женщин (60%). Средний возраст данной группы -39,1±15,1 года.

Методы лечения

Всем пациентам основных и групп сравнения проводилось комплексное лечение, которое включало санацию полости рта, проведение профессиональной гигиены, устранение травматических факторов, назначение средств общей и местной терапии.

Группа здоровых лиц прошла курс с применением заявленного препарата для определения его влияния на микробиологические и иммунологические показатели полости рта.

Традиционное лечение эрозивных процессов слизистой оболочки полости рта

Всем пациентам с ХРАС и ПЛ назначали:

1. Антигистаминные препараты (кларитин) - внутрь по 10 мг 1 раз в сутки (перед сном) в течение 10 дней.

2. Стабилизатор мембран тучных клеток (кетотифен) - внутрь по 1 мг 1 раз в сутки, после курса антигистаминных препаратов в течение 1 месяца.

3. Седативные препараты (новопассит) - по 2 таблетки 2 раза в день в течение 1 месяца.

4. Витамин А в капсулах 50000 МЕ/сутки.

Пациентам с ЯНС на фоне острого лейкоза, находившимся на лечении в гематологическом отделении Градской больницы №8 г.Барнаула, общее лечение проводилось врачами-гематологами согласно протоколам.

Местное лечение в подгруппах сравнения проводилось по следующей схеме:

1. Обезболивающая терапия - 5% анестезиновая эмульсия.

2. Антисептическая обработка полости рта 0,05% раствором хлоргексидина 3 раза в сутки в течение 10 дней.

3. Аппликация кератопластиков (масляный раствор витамина А).

Местное лечение пациентов основных групп проводилось с помощью заявленного препарата.

Всем пациентам с ЯНС дополнительно проводились аппликации с протеолитическими ферментами.

Методика применения заявленного препарата

Препарат для полости рта, изготовлен ООО «Пантопроект» г.Бийск (ТУ 9158-029-74701043-08, санитарно-эпидемиологическое заключение №22.01.14.915.П.000769.06.09), представляет собой растворимый в воде порошок светло-коричневого цвета в капсулах для приготовления раствора. Состав 1 капсулы препарата включает 100 мг пантогематогена сухого и 400 мг сухого экстракта бадана.

Противопоказание - индивидуальная непереносимость.

Препарат назначали в виде ротовых ванночек 3 раза в день: утром, в обед и вечером после еды и чистки зубов. Содержимое одной капсулы настаивали 2-3 часа в теплой кипяченой воде (200 мл). После процедуры в течение 1-2 часов исключали прием жидкой и твердой пищи. Курс лечения составлял 20 дней.

В группе здоровых лиц ротовые ванночки назначали 2 раза в день: утром и вечером после еды и чистки зубов. После процедуры в течение 1-2 часов исключали прием жидкости и твердой пищи. Курс применения также составил 20 дней.

По ходу клинических испытаний заявленного препарата были проведены:

- цитологические исследования (для оценки степени эпителизации элементов поражения),

- клинические и морфологические исследования;

- иммунологические исследования;

- микробиологические исследования.

Исследования проводились на группах здоровых лиц, основных подгруппах и подгруппах сравнения.

Результаты исследований показали, что применение заявленного препарата в виде ротовых ванночек в группе здоровых людей приводит к повышению значений целого ряда иммунологических показателей: РАМ (реакция адсорбции микроорганизмов) в среднем на 10% (р<0,05), ФИ (фагоцитарный индекс) - на 7% (р<0,05), стимулированного НСТ-теста (тест восстановления нитросинего тетразолия) - на 20% (р<0,05), РАН (резервная активность нейтрофилов) - на 60% (р<0,05). Это свидетельствует об активации функциональной фагоцитарной активности, кислородзависимой бактерицидной функции и цитотоксического потенциала нейтрофильных гранулоцитов в полости рта, то есть усилении функциональной активности клеточного звена иммунитета полости рта. Уровень s-Ig А (секреторный иммуноглобулин) после 3-недельного курса применения препарата увеличивался в среднем на 17%, составляя 561,86±127,42 мг/л (р>0,05). Исследование ротовой жидкости спустя 1 месяц после окончания курса выявило значительное увеличение его уровня до 756,29±114,25 мг/л (р<0,001). Повышение уровня s-Ig А в ротовой жидкости после курса применения препарата в 1,5 раза свидетельствует об усилении резистентности слизистой оболочки, функциональной активности гуморального звена иммунитета полости рта под иммуностимулирующим действием препарата.

Результаты микробиологического исследования также выявили положительное влияние препарата, выражающееся в уменьшении обсемененности полости рта условно-патогенными микроорганизмами на фоне увеличения процента высеваемости резидентной флоры.

Полученные результаты определили возможность применения заявленного препарата при местном лечении воспалительно-деструктивных заболеваний СОПР.

В клинике при определении эффективности воздействия нового лечебно-профилактического препарата учитывали степень обезболивания, сроки эпителизации патологических элементов, частоту возникновения рецидивов и длительность ремиссии в сравнении с общепринятой схемой местного лечения.

Субъективные ощущения пациентов подтверждали анальгезирующий эффект препарата. В течение 10 дней наблюдали динамику характера и интенсивности болевого симптома у пациентов с ХРАС. Уже на третий день после начала курса с заявленным препаратом 56,5% пациентов отмечали улучшение состояния: отсутствие боли при разговоре и в покое. В группе сравнения этот показатель составил лишь 35%. По результатам исследования болевой чувствительности, проведенного на 7 сутки, значительная болезненность при приеме пищи исчезла у 86,9% больных основной группы и лишь у 65% больных группы сравнения.

Изменение характера и интенсивности болевого симптома у пациентов с ПЛ наблюдали в течение 20 дней. Уже на седьмой день после начала курса с заявленным препаратом 37,5% пациентов отмечали улучшение состояния: отсутствие боли при разговоре и в покое. В группе сравнения этот показатель составил лишь 25%. По результатам исследования болевой чувствительности, проведенного на 14 сутки, значительная болезненность при приеме пищи исчезла у 79,17% больных основной группы и лишь у 60% больных группы сравнения.

Уже через неделю после начала курса лечения заявленным препаратом 52,4% пациентов с ЯНС на фоне острого лейкоза отмечали улучшение состояния: отсутствие боли при разговоре и в покое. В группе сравнения этот показатель составил лишь 30%. На 14 день значительная болезненность при приеме пищи исчезла у 80,9% больных основной группы и лишь у 45% больных группы сравнения.

Ожидаемое сокращение сроков эпителизации после курса с препаратом было подтверждено результатами цитологического метода. В исходном состоянии в цитограммах отмечалось значимое снижение ИДК (индекс дифференцировки клеток) (р<0,001), преимущественно за счет незрелых эпителиальных клеток, что свидетельствовало о наличии интенсивных пролиферативных процессов в пораженных участках слизистой оболочки.

Полная эпителизация, характеризующаяся преобладанием процентного соотношения эпителиоцитов IV и V степени дифференцировки, в основной группе пациентов с ХРАС наступила в течение 6,24±1,06 дней, а в группе сравнения - в течение 9,68±2,35 дней (р<0,001); в основной группе пациентов с ПЛ - в течение 15,27±1,96 дней, а в группе сравнения - в течение 18,65±1,76 дней (р<0,001); в основной группе пациентов с ЯНС - в течение 14,64±2,56 дней, а в группе сравнения - в течение 18,96±3,48 дней (р<0,001). Индекс дифференцировки клеток после курса с препаратом соответствовал нормальному морфо-функциональному строению эпителия.

Отдаленные результаты исследования после наблюдения за пациентами в течение 1 года после проведенного лечения выявили лучшие результаты в основных группах.

Наиболее выраженный противорецидивный эффект в группе больных с ХРАС был получен у пациентов основной группы, где для местного воздействия применялся препарат. В течение года после терапевтического курса рецидивы 1-2 раза в год возникли у 52,2% данной группы исследуемых, 3-4 раза - у 43,5%, 5-6 раз в год - лишь у одного пациента. Длительность ремиссии составила в среднем 5,48±1,86 месяца. Анализ отдаленных результатов в группе сравнения выявил, что противорецидивный эффект был не столь выражен. Рецидивы 1-2 раза в год возникли у 40,0% исследуемых, 3-4 раза - у 55,0%, 5-6 раз в год - у одного пациента, и длительность ремиссии составила в среднем 3,47±2,03 месяца, что ниже по сравнению с основной группой (р<0,05).

Динамическое наблюдение за пациентами с ПЛ выявило, что в основной группе в 13% случаев длительность ремиссии достигла 6 и более месяцев, в 40% - 3-4 месяца, в 38% случаев -1-2 месяца. Лишь у 1 больного рецидив развился уже через 2 недели после курса лечения препаратом, и в 1 случае возникла длительная клиническая ремиссия. Средняя продолжительность ремиссии составила 3,46±1,06 месяца. В группе сравнения отдаленные результаты были не столь положительными. В течение 3-4 месяцев после проведенного курса традиционного лечения рецидив возник у 17 пациентов (85%), причем в 35% случаев - в течение первого месяца. Лишь у 15% больных длительность ремиссии достигла 6 месяцев. Средняя продолжительность ремиссии составила 2,14±1,12 месяца, что достоверно меньше, чем в основной группе (р<0,05).

В процессе динамического наблюдения за пациентами с ЯНС на фоне острого лейкоза отмечено, что в группе, где для профилактики развития стоматита применялся препарат, рецидив на фоне проводимой полихимиотерапии развился у 86% больных. У 3 больных (14%) язвенно-некротический стоматит был предупрежден. В группе сравнения воспалительно-деструктивные изменения возникли в 100% случаев.

Проведенный сравнительный анализ состояния локального иммунитета под влиянием различных методов лечения выявил более выраженное корригирующее влияние местного применения препарата во всех основных группах, проявляющееся в стимуляции сниженного локального иммунитета, о чем свидетельствует повышение показателей клеточного и гуморального иммунитета в ротовой жидкости до значений нормы, которые сохранялись в течение последующего месяца.

Учитывая, что хронические заболевания СОПР сопровождаются существенными изменениями микрофлоры, носящими характер дисбактериозов, что создает условия для возникновения осложнений и прогрессирования заболевания, было изучено состояние микрофлоры полости рта.

Анализ результатов исследования состояния микробиоценоза полости рта у больных с воспалительно-деструктивными заболеваниями СОПР выявил наличие количественных и качественных сдвигов микрофлоры в 100% случаев. Незначительные изменения микробиоценоза, характеризующиеся как дисбиотический сдвиг, зарегистрированы у небольшого числа пациентов. У половины обследованных состояние микрофлоры слизистой оболочки полости рта была оценено как субкомпенсированный дисбактериоз (I-II степени), у значительного числа больных (30-40% пациентов с ХРАС и ПЛ и 60% пациентов с ЯНС) диагностирован декомпенсированный дисбактериоз.

Анализ структурной организации микрофлоры полости рта после проведенного лечения подтверждает преимущества предложенного препарата над традиционными и лекарственными средствами. Так, после курса применения заявленного препарата увеличилась доля дисбактериозов I и II степени в основных группах. Значительно уменьшилось количество дисбактериозов III и IV степени в основной группе.

В группе сравнения динамика была выражена в меньшей степени, и структура дисбактериозов практически не менялась.

После курса традиционного лечения уменьшение обсемененности материала представителями резидентной флоры, которые принято считать стабилизирующими микробиоценоз полости рта, становилось более явным. Отмечено резкое снижение и представителей условно-патогенной и патогенной флоры.

При использовании для местного лечения пациентов заявленного препарата отмечали снижение процента высеваемости условно-патогенных и патогенных микроорганизмов. Вместе с тем, представители стабилизирующей стрептококковой флоры и лактобактерии после лечения в основных группах выделены и идентифицированы у значительного числа пациентов.

Таким образом, сравнительный анализ влияния различных методов лечения при воспалительно-деструктивных заболеваниях СОПР на клиническую картину выявил преимущество применения препарата, что проявлялось в сокращении сроков эпителизации, более быстрым формированием противовоспалительного и аналгетического эффектов. Предложенный препарат позволял повысить местную резистентность СОПР путем коррекции микробиологических и иммунологических нарушений, что привело к снижению числа рецидивов и увеличению продолжительности ремиссии.

Главным преимуществом использования заявленного препарата является отсутствие необходимости введения в местную терапию дополнительных медикаментозных средств.

Таким образом, заявленный лечебно-профилактический препарат для гигиены полости рта обладает эффективным лечебным действием, удобен в применении, что позволяет расширить арсенал средств по уходу и лечению заболеваний полости рта.

Изобретение относится к лечебно-профилактическому средству для гигиены полости рта и используется в стоматологии. Лечебно-профилактический препарат для гигиены полости рта представляет собой смесь сухого пантогематогена и сухого экстракта бадана, взятых в определенном соотношении. Вышеуказанный препарат обладает эффективным антибактериальным, иммуномодулирующим, противовоспалительным, кератопластическим действием, не содержит консервантов и красителей. 2 ил., 3 табл.

Лечебно-профилактический препарат для гигиены полости рта, характеризующийся тем, что представляет собой смесь сухого пантогематогена и сухого экстракта бадана при следующем весовом соотношении компонентов 1:3-1:4.