ПРИМЕНЕНИЕ ПЕПТИДА Arg-Pro-Gly-Pro В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОВИРУСНОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ Российский патент 2011 года по МПК A61K38/03 A61P31/12 

Описание патента на изобретение RU2414235C1

Изобретение относится к биотехнологии и ветеринарии и касается применения пептида Arg-Pro-Gly-Pro в качестве противовирусного средства для животных.

Разработка новых противовирусных препаратов всегда актуальна в связи с широким распространением вирусных заболеваний. Кроме того, в последние годы наблюдается популяционное снижение иммунитета, связанное с ухудшением среды обитания, что также способствует увеличению вирусных заболеваний.

Известен способ профилактики и лечения вирусных инфекций, включающий применение лекарственного средства [Ридостин, Циклоферон, Даларгин, Гриппферон, Арбидол-Лэнс, Ацикловир-Акри]. Однако данный известный способ не во всех случаях эффективен.

Пептид Arg-Pro-Gly-Pro известен из публикации [RU 2286166 С1 от 27.10.2006]. Однако в указанной публикации данный пептид используется в качестве средства, обладающего антикоагулярно-фибринолитической, антитромбоцитарной и антитромболитической активностью. Из данной публикации не следует, что указанный пептид может быть использован в качестве противовирусного средства. Таким образом, ранее из уровня техники не только не было известно применения указанного пептида в качестве противовирусного средства, но указанное применение не следовало из уровня техники. Следовательно, предложенное изобретение является, как новым относительно существующего уровня техники, так и соответствующим условию изобретательский уровень.

Из уровня техники известно противовирусное средство, представляющее собой пептид Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro [RU 2337703 С1 от 10.11.2008]. Данная публикация является наиболее близким аналогом заявленного изобретения. Недостатком ближайшего аналога является большая длина пептида, что повышает затраты на синтез указанного пептида. Недостатком указанного средства также является необходимость вводить его внутрибрюшинно.

Техническим результатом, достигаемым при реализации настоящего изобретения, является расширение ассортимента противовирусных лекарственных средств, повышение эффективности профилактики и лечения вирусных инфекций, снижение стоимости препарата за счет значительного упрощения синтеза предлагаемого тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro вместо гептапептида Селанк.

Указанный технический результат достигается тем, что тетрапептид Arg-Pro-Gly-Pro применяют в качестве средства профилактики и лечения инфекционных заболеваний вирусной этиологии (грипп, вирус энцефаломиокардита мышей).

Достигается указанный технический результат за счет того, что в способе профилактики и лечения вирусных инфекций, предусматривающем применение лекарственного средства, в качестве лекарственного средства используют указанный тетрапептид путем удобного введения его 0,1-1,1%-ного раствора в суточной дозе 0,2-5 мг/сутки на мышь в течение 2-3 дней. Собственными исследованиями было установлено, что препарат на основе указанного тетрапептида способен подавлять репродукцию вирусов гриппа, вируса энцефаломиокардита мышей и может быть применен для профилактики и лечения инфекционных заболеваний, вызванных вирусами, не оказывая при этом неблагоприятного побочного действия. Ниже приведены примеры, иллюстрирующие изобретение.

Пример 1.

Исследование противовирусной активности тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro при экспериментальной инфекции, вызванной вирусом энцефаломиокардита (ВЭМК) in vivo

Опыты проводились на мышах - белых беспородных самцах весом 14-16 г. Действие каждого пептида проверялось на 10-и мышах. Оценивалась выживаемость мышей в каждой группе через 14 дней после заражения при введении препаратов (10-5 М) внутрибрюшинно одновременно с вирусом энцефаломиокардита (ВЭМК).

Полученные результаты приведены в таблице 1.

Исходя из полученных данных в исследованиях in vivo можно заключить, что изученные пептиды обладали выраженной противовирусной активностью в малых концентрациях.

Таблица 1 Выживаемость мышей под действием тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro, введенного внутрибрюшинно одновременно с заражением вирусом энцефаломиокардита (ВЭМК) Пептиды % выживаемости 1 Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro 20 2 Arg-Pro-Gly-Pro 100 3 Pro-Gly-Pro 80 4 Arg-Pro 40 5 Gly-Pro 60 6 контроль 20

Далее, представляло интерес изучить действие пептида в разных концентрациях при разных способах введения мышам, зараженным ВЭМК. Исследования проводились на белых беспородных мышах весом 14-16 г - по 5 мышей на каждую точку. Животных инфицировали ВЭМК в дозе 100 LD 50. Тетрапептид Arg-Pro-Gly-Pro в концентрациях 1%; 0,5%; 0,2%; 0,1% вводили животным внутрибрюшинно, интраназально, перорально по 0,2 мл/мышь в момент заражения. В качестве консерванта раствор содержал нипагин с концентрацией 0,09-0,11% раствора.

Контрольную группу составляли мыши, зараженные гриппом и получавшие плацебо. Срок наблюдения - 15 дней.

Противовирусный эффект пептида оценивали по выживаемости мышей (% выживаемости, % защиты, средняя гармоническая величина времени жизни).

Оценку активности пептида проводили, учитывая:

1) среднюю гармоническую величину времени жизни для каждой группы мышей, включающую в себя информацию обо всех особях, вычисляемую по формуле:

1/τ=(X1/t12/t2+…+Xa/ta):n, где t - день гибели животных, Х - количество погибших животных в день t, а - день наблюдения; n - количество животных в группе (5 мышей);

2) кратность защиты (КЗ) - кратность уменьшения количества заболевших и павших животных в опытной группе по сравнению с контролем, вычисляемую по формуле:

КЗ=% павших животных в контрольной группе/% павших животных в опытной группе;

3) индекс эффективности препарата (ИЭ), вычисляемый по формуле: ИЭ=[(КЗ-1)/КЗ]×100%.

Результаты экспериментов по проверке противогриппозной активности препаратов представлены в таблицах 2-3.

Из представленных данных (таблица 2) видно, что тетрапептид Arg-Pro-Gly-Pro 1% при введении мышам внутрибрюшинно защищал от действия вируса энцефаломиокардита (ВЭМК) 40% животных. Использование пептида в концентрации 0,5% было эффективно при всех способах введения. Введение пептида в концентрации 0,2% - при внутрибрюшинном введении животным защищало 20% мышей. Применение тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro 0,1% приводило к защите также 40% животных от инфекции при пероральном и интраназальном способах введения. Исходя из данных, показывающих % выживших животных, и средней продолжительности жизни мышей, были отмечены наиболее эффективные способы и дозы применения тетрапептида:

Arg-Pro-Gly-Pro 1% (в/б);

0,2% (p/os; i/n; в/б);

0,1% (p/os, i/n).

Показано, что применение тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro по 0,2 мл/мышь 0,1-1% раствор (0,2-5 мг/мышь) с консервантом в виде нипагина с концентрацией 0,09-0,11% при разных способах использования способствовало увеличению срока жизни животных в ряде случаев на 4,5-8,5 дней.

Таблица 2 Противовирусная активность тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro в разных концентрациях при введении его in vivo в/бр, i/n и per/os Способ введения пептида Концентрация пептида % выживаемости % защиты τ* Arg-Pro-Gly-Pro per/os 1% 0 0 6,17 i/n 1% 0 0 6,45 в/бр 1% 40 40 10,0 per/os 0,5% 20 20 8,06 i/n 0,5% 20 20 7,41 в/бр 0,5% 40 40 8,33 per/os 0,2% 0 0 5,56 i/n 0,2% 0 0 5,49 в/бр 0,2% 20 20 6,54 per/os 0,1% 40 40 9,80 i/n 0,1% 40 40 8,33 в/бр 0,1% 20 20 6,25 КОНТРОЛЬ ВЭМК 100 LD50 0 0 5,35 Примечание: *τ - средняя гармоническая величина времени жизни животных.

Таблица 3 Оценка эффективности тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro при гриппе Схема введения пептида Доза пептида КЗ* ИЭ** % Arg-Pro-Gly-Pro per/os 1% 1,0 0 i/n 1% 1,0 0 в/бр 1% 1,67 40 per/os 0,5% 1,25 20 i/n 0,5% 1,25 20 в/бр 0,5% 1,67 40 per/os 0,2% 1,0 0 i/n 0,2% 1,0 0 в/бр 0,2% 1,25 20 per/os 0,1% 1,67 40 i/n 0,1% 1,67 40 в/бр 0,1% 1,25 20 Контроль вируса 100LD50 1,0 0 Примечание: *КЗ - кратность защиты; **ИЭ - индекс эффективности препарата.

Расчет индекса эффективности (ИЭ) пептида при гриппе показал (таблица 3), что при введении тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro ИЭ=40% при использовании 1% и 0,5% при в/бр, а также 0,1% при per/os и i/n он также эффективно защищал животных.

Определение противовирусной активности тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro при разных схемах введения его животным

Исследование противовирусной активности пептидов при экспериментальной инфекции, вызванной вирусом энцефаломиокардита мышей (ВЭМК) in vivo.

Были проведены исследования эффективности ряда пептидов при инфекции, вызванной вирусом энцефаломиокардита мышей (ВЭМК) in vivo при введении пептида мышам по схемам:

профилактика -

1) за 24 часов до заражения,

2) 2 дня подряд за 24 и 48 часов до заражения;

лечение -

1) через 24 часа после заражения,

2) через 24 и 48 часов после заражения,

3) 3 раза подряд через 24, 48 и 72 часа после заражения.

Arg-Pro-Gly-Pro 0,1% i/n.

Заражение проводили вирусом энцефаломиокардита мышей (ВЭМК) в дозе 100 LD50.

Результаты по изучению противовирусной активности тетрапептида при разных схемах введения в отношении вируса гриппа на модели экспериментальной инфекции, вызванной ВЭМК у мышей, представлены в таблице 4. Показано, что тетрапептид защищал животных от действия ВЭМК. Выживших животных было при профилактической схеме введения тетрапептида до 50% больше по сравнению с контролем и до 60% - при использовании тетрапептида для лечения мышей.

Таблица 4 Выживаемость мышей под действием тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro при разных схемах введения при заражении мышей вирусом энцефаломиокардита (ВЭМК) Пептид % выживаемости Arg-Pro-Gly-Pro профилактика 1-разовое введение 60 Arg-Pro-Gly-Pro профилактика 2-разовое введение 70 Arg-Pro-Gly-Pro Лечение 1-разовое введение 60 Arg-Pro-Gly-Pro Лечение 2-разовое введение 70 Arg-Pro-Gly-Pro Лечение 3-разовое введение 80 контроль 20

Полученные данные показали, что наибольший противовирусный эффект в отношении ВЭМК достигался при введении тетрапептида дважды до заражения или в течение трех дней после заражения мышей.

Похожие патенты RU2414235C1

название год авторы номер документа
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ПРОТИВОВИРУСНОГО ПРЕПАРАТА И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЭТИМ ПРЕПАРАТОМ 2009
  • Андреева Людмила Александровна
  • Мезенцева Марина Владимировна
  • Шаповал Ирина Михайловна
  • Щербенко Вахтанг Эдуардович
  • Ершов Феликс Иванович
  • Мясоедов Николай Федорович
RU2429875C2
СРЕДСТВО ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 2007
  • Андреева Людмила Александровна
  • Ершов Феликс Иванович
  • Зозуля Андрей Александрович
  • Мезенцева Марина Владимировна
  • Мясоедов Николай Федорович
  • Середенин Сергей Борисович
  • Сургучева Ирина Михайловна
  • Учакина Ольга Николаевна
  • Учакин Петр Николаевич
RU2337703C1
СРЕДСТВО, ПОВЫШАЮЩЕЕ ВЫЖИВАЕМОСТЬ И ОБЛЕГЧАЮЩЕЕ ТЕЧЕНИЕ ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ - ЭКСТРОМЕЛИИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 1992
  • Бобкова Н.В.
  • Нестерова И.В.
  • Катков Ю.А.
  • Александрова И.Ю.
RU2043115C1
СРЕДСТВО, ОБЛАДАЮЩЕЕ БИОЦИДНЫМ ДЕЙСТВИЕМ 2017
  • Афонина Ирина Васильевна
  • Колобов Александр Александрович
  • Колодкин Николай Иванович
  • Смирнова Мария Павловна
  • Стефаненко Людмила Ивановна
RU2673807C2
Противовирусное иммунотропное средство для лечения ОРВИ 2018
  • Черторижский Евгений Александрович
  • Овчинников Михаил Владимирович
  • Клейменов Алексей Викторович
RU2672888C1
Гуманизированное моноклональное антитело, специфически связывающиеся с RBD S белка вируса SARS-CoV-2, средство и способ для терапии и экстренной профилактики заболеваний, вызываемых вирусом SARS-CoV-2 2021
  • Есмагамбетов Ильяс Булатович
  • Щебляков Дмитрий Викторович
  • Лебедин Юрий Степанович
  • Фаворская Ирина Алексеевна
  • Должикова Инна Вадимовна
  • Деркаев Артем Алексеевич
  • Рябова Екатерина Игоревна
  • Прокофьев Владимир Владимирович
  • Алексеева Ирина Александровна
  • Воронина Дарья Владимировна
  • Зорков Илья Дмитриевич
  • Ковыршина Анна Витальевна
  • Илюхина Анна Алексеевна
  • Ботиков Андрей Геннадьевич
  • Карпов Андрей Павлович
  • Лубенец Надежда Леонидовна
  • Зубкова Ольга Вадимовна
  • Семихин Александр Сергеевич
  • Народицкий Борис Савельевич
  • Логунов Денис Юрьевич
  • Гинцбург Александр Леонидович
RU2765731C1
СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ВИРУСНОГО КЛЕЩЕВОГО ЭНЦЕФАЛИТА, ИНДУЦИРОВАННОГО В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 1986
  • Яворовская В.Е.
  • Саратиков А.С.
  • Федоров Ю.В.
  • Евстропов А.Н.
  • Соляник Р.Г.
  • Аносова Г.В.
  • Прищеп Т.П.
  • Шмидт Е.В.
RU2025126C1
ПРИМЕНЕНИЕ ПЕПТИДА THR-LYS-PRO-ARG-PRO-GLY-PRO (СЕЛАНК) ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ТОКСИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА 2017
  • Андреева Людмила Александровна
  • Немерский Евгений Алимович
  • Петровский Алексей Константинович
  • Петровская Анастасия Юрьевна
  • Смирнов Николай Алексеевич
  • Федоров Владимир Николаевич
  • Федорова Татьяна Борисовна
RU2640133C1
Применение пептида Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанка) для гепатопротекторного воздействия при хроническом эмоционально-болевом стрессе 2016
  • Фоменко Екатерина Владимировна
  • Крюков Алексей Анатольевич
  • Бобынцев Игорь Иванович
  • Иванов Александр Викторович
  • Андреева Людмила Александровна
  • Мясоедов Николай Федорович
RU2629832C1
ПРИМЕНЕНИЕ ТЕТРАПЕПТИДА Pro-Gly-Pro-Leu В КАЧЕСТВЕ СРЕДСТВА ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ДИАБЕТА, СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ДИАБЕТА И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ДИАБЕТА 2008
  • Ляпина Людмила Анисимовна
  • Андреева Людмила Александровна
  • Ульянов Александр Михайлович
  • Оберган Тамара Юрьевна
  • Шубина Татьяна Александровна
  • Пасторова Валентина Ефимовна
  • Мясоедов Николай Федорович
RU2378005C1

Реферат патента 2011 года ПРИМЕНЕНИЕ ПЕПТИДА Arg-Pro-Gly-Pro В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОВИРУСНОГО СРЕДСТВА ДЛЯ ЖИВОТНЫХ

Изобретение относится к ветеринарии. Изобретение раскрывает применение тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro в качестве средства для профилактики и лечения вирусных заболеваний. Фармацевтическая композиция для профилактики и лечения вирусных заболеваний содержит водный раствор тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro, в концентрации 0,1-1%, и нипагин при определенном соотношении компонентов. Способ профилактики вирусных заболеваний, включает введение указанной фармацевтической композиции интраназально, перорально или внутрибрюшинно в дозе 0,2-5 мг в сутки на мышь в течение 2-х суток. Способ лечения вирусных заболеваний включает введение указанной фармацевтической композиции интраназально, перорально или внутрибрюшинно в дозе 0,2-5 мг в сутки на мышь в течение 3-х суток. Изобретение позволяет расширить ассортимент противовирусных лекарственных средств, повысить эффективность профилактики и лечения вирусных инфекций, снизить стоимость препарата. 4 н.п. ф-лы, 4 табл.

Формула изобретения RU 2 414 235 C1

1. Применение тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro в качестве средства для профилактики и лечения вирусных заболеваний.

2. Фармацевтическая композиция для профилактики и лечения вирусных заболеваний, содержащая водный раствор тетрапептида Arg-Pro-Gly-Pro, где композиция содержит тетрапептид Arg-Pro-Gly-Pro в концентрации 0,1-1% и нипагин в качестве консерванта при следующем содержании компонентов, г/л:
тетрапептид Arg-Pro-Gly-Pro 1,0-10,0 нипагин 0,9-1,1 дистиллированная вода до 1 л

3. Способ профилактики вирусных заболеваний, включающий введение фармацевтической композиции по п.2 интраназально, перорально или внутрибрюшинно в дозе 0,2-5 мг в сутки на мышь в течение 2-х суток.

4. Способ лечения вирусных заболеваний, включающий введение фармацевтической композиции по п.2 интраназально, перорально или внутрибрюшинно в дозе 0,2-5 мг в сутки на мышь в течение 3-х суток.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2011 года RU2414235C1

СРЕДСТВО ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ И СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ 2007
  • Андреева Людмила Александровна
  • Ершов Феликс Иванович
  • Зозуля Андрей Александрович
  • Мезенцева Марина Владимировна
  • Мясоедов Николай Федорович
  • Середенин Сергей Борисович
  • Сургучева Ирина Михайловна
  • Учакина Ольга Николаевна
  • Учакин Петр Николаевич
RU2337703C1
ПЕПТИДЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИКОАГУЛЯНТНО-ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ, АНТИТРОМБОЦИТАРНОЙ И АНТИТРОМБОТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТЬЮ 2005
  • Алфеева Людмила Юрьевна
  • Андреева Людмила Александровна
  • Ашмарин Игорь Петрович
  • Мясоедов Николай Федорович
  • Ляпина Людмила Анисимовна
  • Пасторова Валентина Ефимовна
RU2286166C1
СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ЯЗВ ЖЕЛУДКА У ЖИВОТНЫХ 2002
  • Ашмарин И.П.
  • Андреева Л.А.
  • Бакаева З.В.
  • Желязник Н.Я.
  • Жуйкова С.Е.
  • Копылова Г.Н.
  • Мясоедов Н.Ф.
  • Самонина Г.Е.
RU2217158C1
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ НАТУРАЛЬНЫМИ СОКАМИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ 1995
  • Белоусова Анна Ярославовна
RU2080869C1

RU 2 414 235 C1

Авторы

Андреева Людмила Александровна

Мезенцева Марина Владимировна

Шаповал Ирина Михайловна

Щербенко Вахтанг Эдуардович

Мясоедов Николай Федорович

Даты

2011-03-20Публикация

2009-12-29Подача