ПРОТИВОГАСТРИТНОЕ И ПРОТИВОЯЗВЕННОЕ ВЕЩЕСТВО, СОДЕРЖАЩЕЕСЯ В ЭКСТРАКТЕ MOMORDICAE SEMEN, И ВЫДЕЛЕННЫЙ ИЗ НЕГО MOMORDICA САПОНИН Российский патент 2011 года по МПК A61K36/42 A61K31/70 A61P1/04 

Область техники

Настоящее изобретение относится к экстракту Momordicae semen, эффективному в профилактике и лечении гастрита или язвы желудка, и выделенному из него momordica сапонину I.

Уровень техники

Слизистая оболочка желудка, которая защищает желудок, может быть легко повреждена посредством различных факторов. Типичные факторы такого включают кислоту желудка, алкоголь, нестероидные противовоспалительные препараты (НПВС), такие как аспирин, бактерии, такие как Helicobacter pylori [Suzuki. M. и S. Miura, Япония Rinsho, 15 (12), 3154-3158, 1993], расстройство микроциркуляции слизистой оболочки желудка и гипотензия, вызванная посредством стресса [Tadaoki Mizuno, Медиана Йокогамы. Бык, 38 (3,4), 87-97, 1987], и т.д. Когда слизистый слой поврежден посредством вышеуказанных факторов, развивается воспаление, которое сопровождается гиперемией, кровотечением и отеком. В тяжелых случаях это может привести к повреждению в подслизистой оболочке и мышечного слоя, названному язвой желудка. Далее, в двенадцатиперстной кишке, которая находится в прямом контакте с желудком, может развиться воспаление или язва из-за воздействия подобных факторов.

Для лечения воспаления и язвы желудка и двенадцатиперстной кишки, вызванных посредством этих факторов, является важным разработать лекарство, эффективное в ингибировании секреции кислоты в желудке, ингибировании размножения Helicobacter pylori, стимуляции секреции слизи, способствовании регенерации эпителиоцитов, борьбе с воспалением и т.д. В настоящее время самыми типичными препаратами для лечения гастрита и язвы желудка являются H2 антагонисты и ингибиторы протонной помпы, эффективные в ингибировании секреции кислоты в желудке. Показано, что эти препараты имеют превосходный клинический эффект [J. Int. Med. Res. 17(suppl.) 9 A, 1989; Meth. Find. Exp. Clin. Pharmacol. ll(supρl. 1) 87, 1989; N. Eng. ]. Med. 323: 1672, 1990]. Однако эти ингибиторы секреции кислоты в желудке имеют недостаток, который состоит в том, что состояние рецидивирует, когда прекращается введение препаратов [Drug Intell. Clin. Pharm. 21: 493, 1987, Gut 30: 449, 1989 Yale J. Biol. Med. 65: 649, 1992].

Защитное средство для слизистой, которое обеспечивает регенерацию ткани слизистой оболочки для обеспечения защиты против факторов, вызывающих повторное обострение гастрита, для снижения рецидивирования гастрита является важным компонентом лечения гастрита. В настоящее время такие препараты, как ребамипид, софалкон и т.д., доступны как средства для защиты слизистой оболочки желудка. Однако их следует принимать в большом количестве в течение длительного периода времени скорее из-за медленных действий этих препаратов, и таким образом существует потребность в развитии улучшенных препаратов.

Одним из обычно примененных способов оценки эффективности лечения гастрита является применение животной модели для нанесения повреждения слизистой оболочке желудка посредством использования нестероидных противовоспалительных препаратов (NSAID) или этанола и наблюдение за скоростью восстановления. С помощью этих тестов на модели животных в качестве кандидатов для лечения гастрита были зарегистрированы различные травяные экстракты. В частности, на экстракт Artemisia Spps, имеющий превосходный эффект при лечении гастрита, был подан патент [Заявка на патент Кореи Ном. 10-1995-0021957] и Dong-A Pharmaceutical разработали его как коммерческое лекарственное средство с названием Stillen®.

Momordicae semen, примененный в настоящем изобретении, является зрелым семенем Momordica многолетней виноградной лозы, которая широко произрастает в южном Китае и Вьетнаме. Плоды, собранные между сентябрем и ноябрем, рассекают на половины, и семена собирают, когда они еще полусухие. Или плоды помещают в емкости и семена извлекают, когда кожица сгнивает. Momordicae semen, как известно, обладает хорошим противовоспалительным действием и эффективно против ревматической боли, мышечного спазма и т.д. В настоящее время экстракт Momordicae semen, как известно, содержит стерол, олеанолевую кислоту, momordic кислоту и т.д.

Заявители настоящего изобретения предприняли всесторонние усилия для того, чтобы разработать лечение для гастрита. Выполняя это, они обнаружили, что экстракт Momordicae semen и momordica сапонин I, который выделен оттуда, снижают повреждение слизистой оболочки желудка у крыс, вызванное посредством диклофенака и алкоголя. Они также обнаружили, что назначение экстракта Momordicae semen и momordica сапонина снижает кислотность в желудке.

Соответственно, целью настоящего изобретения является предоставление лекарственного средства для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, содержащего экстракт Momordicae semen или momordica сапонин I в качестве действующего вещества, являющегося превосходным в защите слизистой оболочки желудка и подавлении кислоты в желудке.

Раскрытие изобретения

Настоящее изобретение относится к лекарственному средству для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, содержащему в качестве действующего вещества экстракт Momordicae semen.

Настоящее изобретение также относится к лекарственному средству для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, содержащему в качестве действующего вещества momordica сапонин I, который представлен посредством следующей формулы (1).

Здесь дано более подробное описание настоящего изобретения.

Настоящее изобретение относится к лекарственному средству, содержащему экстракт Momordicae semen и выделенному из него momordica сапонину I, которые эффективны при профилактике и лечении гастрита или язвы желудка с хорошей подавляющей способностью против повреждения слизистой оболочки желудка, вызванной посредством алкоголя и нестероидных противовоспалительных препаратов (NSAID), таких как диклофенак, и благоприятным действием подавления секреции кислоты в желудке.

Экстракт Momordicae semen по настоящему изобретению получают посредством экстракции растения Momordicae semen 3-10 весовыми эквивалентами воды или спиртового раствора согласно общепринятой методике, применяемой для получения экстрактов из растений. Предпочтительно указанным спиртом является C₁-C₆ спирт, более предпочтительно - метанол, этанол, бутанол и т.д.

Экстракт Momordicae semen является лиофилизированным для получения экстракта в форме порошка. С хорошим действием для профилактики и лечения повреждения слизистой оболочки желудка, вызванного посредством диклофенака и спирта, этот экстракт, как ожидают, будет очень полезен как лекарственное средство для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка.

Кроме того, momordica сапонин I по настоящему изобретению может быть эффективно выделен из Momordicae semen посредством общепринятой методики, применяющей полярный растворитель. В качестве полярного растворителя может быть применена дистиллированная вода или раствор спирта. Предпочтительно спиртом является C₁-C₆ спирт, более предпочтительно - метанол, этанол, бутанол и т.д.

В частности, для получения momordica сапонина I с лучшей чистотой можно выполнить хроматографию на колонке. Более конкретно, колонку для хроматографии готовят, применяя октадецилсилилированную силикатную смолу и т.д. и подобный подходящий растворитель, как, например, 70% (об./об.) водный раствор метанола и т.д., применяют для избирательного выделения фракции с высокой концентрацией сапонина.

С превосходным действием по предотвращению и лечению повреждения слизистой оболочки желудка, вызванного посредством спирта или диклофенака, и хорошим воздействием по предотвращению секреции кислоты в желудке momordica сапонин 1 является хорошим кандидатом в качестве лекарственного средства для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка.

Экстракт Momordicae semen или momordica сапонин I настоящего изобретения приготавливают в виде таблетки или капсулы посредством общепринятой методики. В случае таблеток таблетка, обладающая действием для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, может быть приготовлена, применяя основу, включающую лактозу, микрокристаллическую клетчатку, стеарат магния и т.д. и действующее вещество, либо Momordicae semen экстракт, либо momordica сапонин I по настоящему изобретению в соотношении 2-10 к 1.

Действующее вещество может быть применено или само по себе или после смешивания с фармацевтически приемлемым носителем, формообразующим веществом, разбавителем для получения формуляции в форме порошка, гранул, капсул и т.д. Дозировка экстракта Momordicae semen или momordica сапонина I по настоящему изобретению может различаться в зависимости от скорости абсорбции, веса тела, возраста, пола, физического состояния, диеты, времени приема, типа назначения, тяжести заболевания и т.п. Как правило, приблизительно 0,1-10 мг на 1 кг веса тела является предпочтительным для экстракта Momordicae semen и приблизительно 0,05-1 мг на 1 кг веса тела является предпочтительным для momordica сапонина I. Лекарственное средство в стандартной лекарственной форме можно применять по индивидуальному плану лечения или несколько раз с предопределенными интервалами в зависимости от решения эксперта, который наблюдает за приемом, или по требованию пациентов.

Лучший вариант осуществления изобретения

Практические и предпочтительные способы осуществления по настоящему изобретению являются иллюстративными, как показано в следующих примерах. Однако будет цениться, если квалифицированные в области техники специалисты с учетом этого раскрытия могут совершать модификации и улучшения в пределах сущности и объема настоящего изобретения.

Подготовительный пример 1: Получение экстракта Momordicae semen

К 1 кг (сухого веса) Momordicae semen, купленного на растительном рынке, добавили 5 л 50% водного раствора этинола. Экстракцию проводили в течение 4 часов, поддерживая температуру на 80°C. Для получения растительного экстракта эту процедуру повторяли дважды. Экстракт фильтровали и концентрировали под сниженным давлением при 60°C, применяя ротационный испаритель. Далее, после полного удаления раствора в вакуумной печи получали 21 г этанолового экстракта в форме порошка.

Подготовительный пример 2: Приготовление экстракта, содержащего momordica сапонин I

1 кг (сухого веса) Momordicae semen, купленного на рынке растений, был измельчен и добавили 5 л 10% водного раствора этилового спирта. Экстракцию проводили в течение 3 часов на водяной бане, установленной на 80°C. Эту процедуру повторяли дважды. Экстракт фильтровали и концентрировали под сниженным давлением при 60°C, применяя ротационный испаритель. Далее, после полного удаления растворителя в вакуумной сушильной печи получили 35-45 г экстракта, содержащего momordica сапонин I в форме порошка.

Подготовительный пример 3: Приготовление momordica фракции сапонина I

Momordica сапонин I был эффективно выделен из экстракта, приготовленного в Подготовительном примере 2, посредством осаждения, применяя органический растворитель (ацетон). 10 г экстракта, приготовленного в Подготовительном примере 2, растворили в 100 мл очищенной воды и для получения 50% (об./об.) водного раствора ацетона добавили 100 мл ацетона. Осадок отфильтровали и к фильтрату далее добавили 400 мл ацетона для получения 80% (об./об.) водного раствора ацетона. Вновь образованный осадок отделили, применяя фильтровальную бумагу, и высушили.

Подготовительный пример 4: Приготовление фракции momordica сапонина I

Провели хроматографию на колонке экстракта, приготовленного в Подготовительном примере 2, или фракции, полученной в Подготовительном примере 3, применяя октадецилсилилированные кремниевые смолы (YMC*GEL ODS 12 нм, С-150 м). Количество смолы было 250 г или 25-кратное количество экстракта или фракции. Прогоняли каждый из 10% (об./об.) и 40% (об./об.) водный раствор метанола в 2-3-кратном количестве от объема смолы и затем прогоняли 70% (об./об.) водный раствор в 2-3-кратном количестве от объема смолы. Полученная фракция элюента была сконцентрирована под приведенным давлением, и растворитель был полностью удален в вакуумном сушильном шкафу.

Подготовительный пример 5: Выделение momordica сапонина I

Momordica сапонин I выделяли из фракции 70% (об./об.) водного раствора метанола Подготовительного примера 4. Проводили высокоэффективную жидкостную хроматографию, применяя смешанный растворитель ацетонитрила и воды (29:71, 0,1% трифторуксусная кислота). Элюирование проводили при скорости 9,5 мл/мин, и пик сапонина был взят на приблизительно 45 минутах. Эту фракцию сконцентрировали под приведенным давлением, и растворитель был полностью удален в вакуумном сушильном шкафу. Применяли YMC J'Sphere ODS-H80 колонку, и измерение проводили при 210 нм.

Данные масс-спектроскопии и данные ЯМР спектроскопии сравнивали с теми, которые были представлены в литературе [Iwamoto, Okabe, Yamauchi, Tanaka, Rokutani, Hara, Mihashi, Higuchi. Studies on the constituents of Momordica cochinchinensis Spreng. I. Isolation and characterization of the seed saponins, momordica saponin I and II. Chemical & Pharmaceutical Bulletin 1985, 33(2):464-478]. Данные совпали с таковыми для momordica сапонина I (3 - β-D-галактопиранозил(l-> 2) - [α-L-рамнопиранозил(l-> 3)]-β-D-глюкуропиранозидо-28-0-β-D-ксилопиранозил(l->3)-β-D-глюкопиранозил(l->3)-[β-D-ксилопиранозил(l-> 4)]-α-L-рамнопиранозил(l->2)-β-D-фукопиранозилгипсогенин), о котором известно, что он присутствует в Momordicae semen.

Молекулярный вес: 1673,77

Точка плавления: 241-244°C

Вращения плоскости поляризации: [α] 19 D =-14,8° (C 0,7, MeOH:H₂O = 1:2)

Содержание momordica сапонина I в экстракте или фракции Подготовительных примеров 2-4 дано в Таблице 1 ниже.

Таблица 1 Категория Подготовительный пример 2 Подготовительный пример 3 Подготовительный пример 4 Содержание momordica сапонина I (%) 7-14 13-25 40-50

Пример 1: Защитное влияние экстракта Momordicae semen при повреждении желудка, вызванного посредством алкоголя

Тест выполняли на крысиной модели, используя 100% этиловый спирт как фактор повреждения желудка для оценки защитного влияния экстракта Momordicae semen на слизистую оболочку желудка. Экстракт Momordicae semen Подготовительного примера 1 растворяли в 0,5% водном растворе карбоксилметилцеллюлозы до 10 мг/мл и применяли как испытательное лекарственное средство. Stillen (экстракт artemisia, Dong-A Pharmaceutical) и Mucosta (ребамипид, Korea Otsuka Pharmaceuticals), растворенные в водном растворе 0,5% карбоксилметилцеллюлозы до 10 мг/мл, были применены как контрольные препараты. Семинедельные самцы крысы Sprague-Dawley, свободные от определенных патогенов, (SPF) были куплены в Charles River. После 1 недели адаптации здоровые крысы весом 220-225 г были отобраны для теста. Пять крыс в каждой группе воздерживали от еды в течение 18 часов со свободно доступной питьевой водой. Экстракт Momordicae semen и контрольные препараты Stillen и Mucosta применяли в дозировке 100 мг/кг. После 1 часа перорально вводили 1,5 мл 100%-ного этилового спирта. 6 часов спустя крыс анестезировали эфиром и извлекали желудок для оценки влияния лекарственного средства, предотвращающего повреждение желудка. Желудок открывали рассечением вдоль большой кривизны и обследовали глазами. Повреждение желудка разделяли на категории: вспышка, застой, кровотечение, воспаление и отек. Тяжесть повреждения оценивали баллами в пределах от 0 до 3.

Таблица 2
Повреждение слизистой оболочки желудка (индекс повреждения слизистой
оболочки желудка) Категория Прилив Гиперемия Кровотечение Эрозия Отек Общее Вода 1,8 ± 0,2 1,6 ± 0,2 2,4 ± 0,4 1,8 ± 0,4 1,8 ± 0,4 9,4 ± 1,3 Stillen 1,8 ± 0,2 1,4 ± 0,2 1,0 ± 0,5 1,2 ± 0,2 1,2 ± 0,4 7,7 ± 1,2 Mucosta 1,3 ± 0,2 1,3 ± 0,4 1,5 ± 0,2 1,8 ± 0,2 1,3 ± 0,2 8,1 ± 0,8 Экстракт Momordicae semen 1,0 ± 0,3 1,0 ± 0,3 0,8 ± 0,2 1,5 ± 0,2 1,0 ± 0,3 6,4 ± 1,3

Как видно из Таблицы 2, экстракт Momordicae semen имел превосходный эффект предотвращения повреждения слизистой оболочки желудка, вызванной посредством алкоголя.

Пример 2: Защитное действие momordica сапонина I при повреждении желудка, вызванного посредством алкоголя

Тест на крысиной модели выполняли, применяя 100% этиловый спирт как фактор повреждения желудка для оценки защитного влияния Momordica сапонина I на слизистую оболочку желудка. Momordica сапонин I, выделенный в Подготовительном примере 5, растворяли в 0,5% водном растворе карбоксилметилцеллюлозы до 2 мг/мл и применяли как испытательное лекарственное средство. Mucosta (ребамипид, Korea Otsuka Pharmaceuticals), растворенный в 0,5% водном растворе карбоксилметилцеллюлозы до 10 мг/мл, применяли как контрольное лекарственное средство.

Семинедельные самцы крысы Sprague-Dawley, свободные от определенных патогенов (SPF), были куплены в Charles River. После 1 недели адаптации здоровых крыс весом 220-225 г выбирали для опыта. Пять крыс в каждой группе воздерживали от еды в течение 18 часов со свободно доступной питьевой водой. Momordica сапонин I применяли в дозировке 20 мг/кг, а контрольное лекарственное средство Mucosta применяли в дозировке 100 мг/кг. После 30 минут 1,5 мл 100%-ного этилового спирта вводили перорально. 3 часа спустя крыс анестезировали эфиром и извлекали желудок для оценки влияния лекарственного средства, предотвращающего повреждение желудка. Желудок открывали рассечением вдоль большой кривизны и визуально обследовали. Повреждение желудка разделяли на категории: вспышка, застой, кровотечение, воспаление и отек. Тяжесть повреждения оценивали баллами в пределах от 0 до 3 (чем выше балл, тем выше тяжесть повреждения).

Таблица 3
Повреждение слизистой оболочки (индекс повреждения слизистой оболочки желудка ± стандартное отклонение) Категория Прилив Гиперемия Кровотечение Эрозия Отек Общее Вода 1,9 ± 0,3 1,5 ± 0,3 2,5 ± 0,5 0,7 ± 0,2 1,3 ± 0,2 7,9 ± 1,5 Mucosta 1,2 ± 0,2 1,4 ± 0,2 1,4 ± 0,2 0,9 ± 0,3 1,2 ± 0,3 6,1 ± 1,2 Momordica сапонин I 1,1 ± 0,2 0,9 ± 0,3 0,9 ± 0,2 0,5 ± 0,1 1 ± 0,3 4,4 ± 1,1

Как видно из Таблицы 3, momordica сапонин I имел превосходный эффект предотвращения повреждения слизистой оболочки желудка, вызванного посредством алкоголя.

Пример 3: Излечивающее влияние экстракта Momordicae semen при повреждении желудка, вызванного посредством диклофенака

Тест на крысиной модели выполняли, применяя диклофенак, репрезентативное нестероидное противовоспалительное лекарственное средство (НПВС) как фактор повреждения желудка для оценки влияния экстракта Momordicae semen Примера 1 для лечения гастрита. Экстракт Momordicae semen был растворен в 0,5% водном растворе карбоксилметилцеллюлозы до 10 мг/мл и был применен как испытательное лекарственное средство. Stillen (экстракт artemisia, Dong-A Pharmaceutical) и Mucosta (ребамипид, Korea Otsuka Pharmaceuticals), растворенные в водном растворе 0,5% карбоксилметилцеллюлозы до 10 мг/мл, были применены как контрольные препараты.

Семинедельные самцы крысы Sprague-Dawley, свободные от определенных патогенов (SPF), были куплены в Charles River. После 1 недели адаптации здоровые крысы весом 220-225 г были отобраны для теста. Пять крыс в каждой группе воздерживали от еды в течение 18 часов со свободно доступной питьевой водой и перорально вводили диклофенак в дозировке 40 мг/кг. После 6 часов от стимуляции повреждения экстракт Momordicae semen и контрольные препараты Stillen и Mucosta вводили в дозировке 100 мг/кг. 18 часов спустя крыс анестезировали эфиром и извлекали желудок для оценки влияния лекарственного средства, предотвращающего повреждение желудка. Желудок открывали рассечением вдоль большой кривизны и визуально обследовали. Повреждение желудка разделяли на категории: вспышка, застой, кровотечение, воспаление и отек. Тяжесть повреждения оценивали баллами в пределах от 0 до 3.

Таблица 4 Категория Прилив Гиперемия Кровотечение Эрозия Отек Общее Вода 2,6 ± 0,2 2,4 ± 0,4 2,6 ± 0,2 2,6 ± 0,2 2,2 ± 0,2 12,4 ± 0,7 Stillen 1,0 ± 0,4 1,8 ± 0,2 1,4 ± 0,2 3,0 ± 0,0 2,6 ± 0,2 9,8 ± 0,5 Mucosta 0,8 ± 0,4 0,8 ± 0,4 1,2 ± 0,2 2,4 ± 0,2 2,2 ± 0,2 7,4 ± 0,7 Экстракт Momordicae semen 0,0 ± 0,0 0,6 ± 0,2 0,6 ± 0,2 1,2 ± 0,2 1,2 ± 0,4 3,6 ± 0,2

Как видно из Таблицы 4, экстракт Momordicae semen Подготовительного примера 1 имел превосходный эффект в лечении поврежденной слизистой оболочки желудка.

Пример 4: Защитный эффект экстракта Momordicae semen при повреждении желудка, вызванного посредством диклофенака

В отличие от Примера 3 диклофенак и тестируемый лекарственный препарат вводили одновременно, и повреждение слизистой желудка наблюдали 6 часов спустя. С целью предотвратить прямое взаимодействие между диклофенаком и испытуемым лекарственнысм препаратом испытуемый лекарственный препарат вводили внутрибрюшинно. Подобно тому, как в Примере 3, диклофенак и испытуемый лекарственный препарат растворяли в 0,5% водном растворе карбоксиметилцеллюлозы до 10 мг/мл.

Семинедельные самцы крысы Sprague-Dawley, свободные от определенных патогенов (SPF), были куплены в Charles River. После 1 недели адаптации здоровые крысы весом 220-225 г были отобраны для теста. Пять крыс в каждой группе воздерживали от еды в течение 18 часов со свободно доступной питьевой водой и перорально вводили диклофенак в дозировке 40 мг/кг, одновременно испытуемый лекарственный препарат или экстракт Momordicae semen и контрольные лекарственные препараты Stillen и Mucosta вводили внутрибрюшинно в дозировке 100 мг/кг. 6 часов спустя крыс анестезировали эфиром и извлекали желудок для оценки влияния лекарственного средства, предотвращающего повреждение желудка. Желудок открывали рассечением вдоль большой кривизны и визуально обследовали. Повреждение желудка разделяли на категории: вспышка, застой, кровотечение, воспаление и отек. Тяжесть повреждения оценивали баллами в пределах от 0 до 3.

Таблица 5 Категория Прилив Гиперемия Кровотечение Эрозия Отек Общее Вода 2,2 ± 0,4 1,4 ± 0,2 2,4 ± 0,4 2,4 ± 0,4 2,0 ± 0,3 10,4 ± 1,4 Stillen 1,8 ± 0,5 0,8 ± 0,2 1,4 ± 0,2 1,8 ± 0,2 1,6 ± 0,2 7,4 ± 1,2 Mucosta 2,6 ± 0,2 2,2 ± 0,4 1,4 ± 0,5 2,4 ± 0,4 1,2 ± 0,2 9,8 ± 1,2 Экстракт Momordicae semen 1,6 ± 0,4 0,8 ± 0,4 0,8 ± 0,4 1,2 ± 0,2 1,4 ± 0,2 5,8 ± 1,4

Как видно из Таблицы 5, экстракт Momordicae semen оказывал лечебный эффект на поврежденную слизистую оболочку желудка в добавление к способности снижать повреждение слизистой оболочки желудка, вызванное посредством НПВС, при введении вместе с НПВС, таким как диклофенак.

Пример 5: Защитное действие momordica сапонина I при повреждении желудка, вызванном посредством диклофенака

Диклофенак и тестируемый лекарственный препарат вводили одновременно, и повреждение слизистой желудка наблюдали 4 часа спустя. Диклофенак растворяли в 0,5% водном растворе карбоксиметилцеллюлозы до 40 мг/мл, и испытуемый препарат готовили, как в Примере 2.

Семинедельные самцы крысы Sprague-Dawley, свободные от определенных патогенов (SPF), были куплены в Charles River. После 1 недели адаптации здоровые крысы весом 220-225 г были отобраны для теста. Пять крыс в каждой группе воздерживали от еды в течение 18 часов со свободно доступной питьевой водой и перорально вводили диклофенак в дозировке 40 мг/кг, одновременно испытуемый лекарственный препарат или экстракт Momordicae semen вводили перорально в дозировке 20 мг/кг, а контрольный лекарственный препарат Mucosta вводили перорально в дозировке 100 мг/кг. 4 часа спустя крыс анестезировали эфиром и извлекали желудок для оценки влияния лекарственного средства в лечении гастрита. Желудок открывали рассечением вдоль большой кривизны и визуально обследовали. Повреждение желудка разделяли на категории: вспышка, застой, кровотечение, воспаление и отек. Тяжесть повреждения оценивали баллами в пределах от 0 до 3 (чем выше балл, тем более тяжелое повреждение).

Таблица 6
Повреждение слизистой оболочки желудка (индекс повреждения слизистой оболочки желудка ± стандартное отклонение) Категория Прилив Гиперемия Кровотечение Эрозия Отек Общее Вода 2 ± 0,3 1,5 ± 0,3 2,6 ± 0,5 2,8 ± 0,5 1,4 ± 0,2 10,3 ± 1,6 Mucosta 2,3 ± 0,3 1,3 ± 0,4 1,5 ± 0,3 2,2 ± 0,4 1,2 ± 0,1 8,5 ± 1,5 Momordica сапонин I 1,3 ± 0,2 0,9 ± 0,3 0,7 ± 0,2 1,3 ± 0,3 1 ± 0,2 5,2 ± 1,2

Как видно из Таблицы 6, Momordica сапонин I обладал способностью снижать повреждение слизистой оболочки желудка, вызванное посредством НПВС, таким как диклофенак.

Пример 6: Тест на подавление секреции кислоты в желудке для momordica сапонина I у крыс

Momordica сапонин I вводили перорально крысам Sprague-Dawley и измеряли кислотность в желудке для оценки эффекта momordica сапонин I на секрецию кислоты в желудке. Momordica сапонин I, выделенный в Подготовительном примере 4, растворяли в 0,5% водном растворе карбоксиметилцеллюлозы до концентрации 0,5, 1,5 и 4,5 мг/мл. Семинедельные самцы крысы Sprague-Dawley, свободные от определенных патогенов (SPF), были куплены в Charles River. После 1 недели адаптации здоровые крысы весом 220-225 г были отобраны для теста. Две крысы в каждой группе воздерживали от еды в течение 18 часов со свободно доступной питьевой водой, и momordica сапонин I вводили в дозировке 5, 15 и 45 мг/кг. 1 час спустя крыс анестезировали эфиром. 0,5 мл желудочного сока, взятого из желудка, развели в 10 раз дистиллированной водой для получения 5 мл образца. рН разбавленного желудочного сока измеряли рН-метром.

Таблица 7 Носитель Momordica сапонин I 5 мг/кг 15 мг/кг 45 мг/кг 2,3 ± 0,6 3,3 ± 0,1 4,3 ± 0,8 5,2 ±0,6

Как видно из Таблицы 7, Momordica сапонин I эффективно снижал кислотность желудочного сока и таким образом является полезным в лечении гастрита или язвы желудка.

Пример 7: Тест на острую токсичность для перорального введения экстракта Momordicae semen на крысах

Острое испытание на токсичность проводили следующим образом, применяя 6-недельных свободных от специфических патогенов (SPF) Sprague-Dawley крыс.

Двум крысам в каждой группе перорально вводили экстракт Momordicae semen, приготовленный в Подготовительном примере 1, единожды в дозировке 1 г/кг. Наблюдали выживание, клинические проявления и изменение веса тела и выполняли гематологические и серологические биохимические анализы. Аутопсию проводили для наблюдения за расстройствами в органах брюшной и грудной полостей. Не было никаких значимых клинических проявлений или смерти. Кроме того, не обнаружили никакой токсичности в изменении веса тела, гематологическом и серологическом биохимическом анализе и аутопсии. Экстракт Momordicae semen по настоящему изобретению не показал никакой токсичности на всех крысах вплоть до дозировки 2000 мг/кг и был утвержден как безопасное вещество с минимальной летальной дозой при пероральном приеме (ЛД₅₀) 2000 мг/кг или больше.

Пример 8: Тест на острую токсичность для перорального приема momordica сапонина I на крысах

Тест на острую токсичность проводили следующим образом, применяя 6-недельных свободных от специфических патогенов (SPF) Sprague-Dawley крыс.

Двум крысам в каждой группе перорально вводили экстракт Momordicae semen, приготовленный в Подготовительном примере 5, единожды в дозировке 400 мг/кг. Наблюдали выживание, клинические проявления и изменение веса тела и выполняли гематологические и серологические биохимические анализы. Аутопсию проводили для наблюдения за расстройствами в органах брюшной и грудной полостей. Не было никаких значимых клинических проявлений или смерти. Кроме того, не обнаружили никакой токсичности в изменении веса тела, гематологическом и серологическом биохимическом анализе и аутопсии. Экстракт Momordicae semen по настоящему изобретению не показал никакой токсичности на всех крысах вплоть до дозировки 400 мг/кг и был утвержден как безопасное вещество с минимальной летальной дозой при пероральном приеме (ЛД₅₀) 400 мг/кг или больше.

Пример подготовки 1: Приготовление таблетки, содержащей экстракт Momordicae semen

Экстракт Momordicae semen по настоящему изобретению приготовили в таблетке для перорального приема посредством влажной грануляции и сухой грануляции

[Композиция]

Экстракт Momordicae semen (200 мг), светлая безводная кремниевая кислота (10 мг), стеарат магния (2 мг), микрокристаллическая целлюлоза (50 мг), натрия крахмала гликолят (25 мг), кукурузный крахмал (113 мг), безводный этанол (в соответствующем количестве).

Пример подготовки 2: Подготовка таблетки, содержащей momordica сапонин I

Momordica сапонин I по настоящему изобретению приготовили в виде таблетки для перорального приема посредством влажной грануляции и сухой грануляции

[Композиция]

Momordica сапонин I (20 мг), светлая безводная кремниевая кислота (10 мг), стеарат магния (2 мг), микрокристаллическая целлюлоза (50 мг), натрия крахмала гликолят (25 мг), кукурузный крахмал (113 мг), безводный этанол (в соответствующем количестве).

Пример подготовки 3: Подготовка мази, содержащей экстракт Momordicae semen

Экстракт Momordicae semen по настоящему изобретению приготовили на основе мази

[Композиция]

Экстракт Momordicae semen (5 г), цетилпальмитат (20 г), кетанол (40 г), стеариловый спирт (40 г), изопропилмиристат (80 г), сорбитанмоностеарат (20 г), полисорбат (60 г), пропил p-гидроксибензоат (1 г), метиловый p-гидроксибензоат (1 г), фосфорная кислая и очищенная вода (в соответствующем количестве).

Пример подготовки 4: Подготовка инъекции, содержащей экстракт Momordicae semen

Экстракт Momordicae semen по настоящему изобретению приготовили в виде инъекции

[Композиция]

Экстракт Momordicae semen (100 мг), маннитол (180 мг), двуосновный натрия дифосфат (25 мг), вода для инъекции (2974 мг).

Пример подготовки 5: Подготовка трансдермального вещества, содержащего экстракт Momordicae semen

Экстракт Momordicae semen по настоящему изобретению готовили в виде трансдермального вещества.

Композиция 1

Экстракт Momordicae semen (0,4 г), полиакрилат натрия (1,3 г), глицерин (3,6 г), алюминиевая гидроокись (0,04 г), метилпарабен (0,2 г), вода (14 г).

Композиция 2

Экстракт Momordicae semen (0,8 г), пропиленгликоль (1,6 г), вазелиновое масло (0,8 г), изопропилмиристат (0,4 g), gelba 1430 (16,4 г).

Пример подготовки 6: Подготовка трансдермального вещества, содержащего momordica сапонин I

Momordica сапонин I по настоящему изобретению приготовили в виде трансдермального вещества.

Композиция 1

Momordica сапонин I (20 мг), полиакрилат натрия (1,3 г), глицерин (3,6 г), алюминиевая гидроокись (0,04 г), метилпарабен (0,2 г), вода (14 г).

Композиция 2

Momordica сапонин I (40 мг), пропиленгликоль (1,6 г), вазелиновое масло (0,8 г), изопропилмиристат (0,4 г), пластинка геля 1430 (16,4 г).

Промышленная применимость

Как следует из вышеуказанного описания, экстракт Momordicae semen в соответствии с настоящим изобретением и momordica сапонин I, выделенный из него, являются очень полезными при профилактике и лечении гастрита или язвы желудка, поскольку они обладают превосходными эффектами по предотвращению повреждения слизистой оболочки желудка, вызванному посредством алкоголя и нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВС), а также ингибированию секреции кислоты в желудке. Квалифицированные специалисты в области техники оценят, что понятия и конкретные способы осуществления, раскрытые в предшествующем описании, могут быть с готовностью использованы как основа для изменения или проектирования других способов осуществления для достижения тех же самых целей настоящего изобретения. Квалифицированные специалисты в области техники также оценят, что такие эквивалентные способы осуществления не отступают от сущности и объема настоящего изобретения согласно приложенной формуле изобретения.

Изобретение относится к фармакологии, в частности к средству для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка. Лекарственное средство для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, включающее экстракт семян Momordicae cochinchinensis в качестве действующего вещества, где экстракт семян Momordicae получен посредством экстракции семян Momordicae cochinchinensis водой или раствором спирта. Лекарственное средство для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, включающее в качестве действующего вещества momordica сапонин I. Вышеописанные средства эффективны для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, предотвращают повреждение слизистой оболочки желудка, вызванное посредством алкоголя, и подавляют секрецию кислоты в желудке. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 7 табл.

1. Лекарственное средство для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, включающее экстракт семян Momordicae cochinchinensis в качестве действующего вещества, где экстракт семян Momordicae получен посредством экстракции семян Momordicae cochinchinensis водой или раствором спирта.

2. Лекарственное средство по п.1, где указанным спиртом является С1-С6 спирт.

3. Лекарственное средство для профилактики и лечения гастрита или язвы желудка, включающее momordica сапонин I, представленный следующей формулой (1):

в качестве действующего вещества.

4. Лекарственное средство по п.3, которое содержит 0,05-1 мг momordica сапонина I на 1 кг веса тела.