СПОСОБ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ РАЗВИТИЯ ЯЗВ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЖЕЛУДКА, ВЫЗВАННЫХ НЕСТЕРОИДНЫМ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫМ ПРЕПАРАТОМ ДИКЛОФЕНАКОМ, В ЭКСПЕРИМЕНТЕ Российский патент 2025 года по МПК G09B23/28 A61K31/315 A61K31/196 A61P1/04 A61P43/00 

Предлагаемое изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной фармакологии, гастроэнтерологии, фармации, и может быть использовано для предупреждения ульцерогенного действия нестероидных противовоспалительных средств.

Известно, что нестероидные противовоспалительные препараты находят широкое применение при лечении различных заболеваний, сопровождающихся воспалительным процессом, любых возрастных групп. Однако, несмотря на несомненную лечебную эффективность этой группы лекарственных средств, они могут вызывать серьезные побочные эффекты, из которых одним из наиболее грозных является ульцерогенное действие, влекущее за собой снижение качества жизни, а иногда и летальные исходы (Вельц, Н.Ю. Нестероидные противовоспалительные препараты: проблемы безопасности применения / Н.Ю. Вельц, Е.О. Журавлева, Т.М. Букатина, Г.В. Кутехова // Безопасность и риск фармакотерапии. - 2018. - Т. 6(1). - С. 11-18; Каратеев, А.Е. Рациональное использование нестероидных противовоспалительных препаратов. Клинические рекомендации / А.Е. Каратеев, Е.Л. Насонов, В.Т. Ивашкин, А.И. Мартынов, Н.Н. Яхно, Г.П. Арутюнов, Л.И. Алексеева, Г.Р. Абузарова, М.А. Евсеев, М.Л. Кукушкин, С.С. Копенкин, A.M. Лила, Т.Л. Лапина, Д.С. Новикова, Т.В. Попкова, А.П. Ребров, К.В. Скоробогатых, Н.В. Чичасова // Научно-практическая ревматология. -2018. - Т. 56. С. 1-29; Хорошун, М.С. Назначение нестероидных противовоспалительных средств: польза и риски / М.С. Хорошун, А.А. Лазарева // Университетский терапевтический вестник. - 2022. - Т. 4(1). - С. 4-10; Камчатнов, П.Р. Нестероидные противовоспалительные препараты и риск сердечной недостаточности / П.Р. Камчатнов, А.В. Чугунов, Д.Т. Чипова, А.Ю. Казаков // РМЖ. - 2023. - №2. - С. 88-95; Minhas, D. Recommendations for the Use of Nonsteroidal Anti-inflammatory Drugs and Cardiovascular Disease Risk: Decades Later, Any New Lessons Learned? / D. Minhas, A. Nidhaan, M.E. Husni // Rheumatic Disease Clinics of North America. - 2023. - V. 49(1). - P. 179-191).

Известно использование в качестве противоязвенных средств Н₂-гистаминовых блокаторов (в частности фамотидина, являющегося ближайшим аналогом соединения N-изопропенилимидазола цинкодиацетата по направленности антиульцерогенного действия) и ингибиторов протоновой помпы, в частности омепразола, однако для отмеченных препаратов характерны серьезные побочные эффекты:

- для Н₂-гистаминовых блокаторов - повышение активности печеночных трансаминаз, гепатоцеллюлярный, холестатический или смешанный гепатит, острый панкреатит, угнетение кроветворения, гемолитическая анемия, брадикардия, AV-блокада, аритмия, галлюцинации, психоз, артралгия, миалгия (Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т.- Т. 1. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - Москва: ООО «Издательство Новая волна», 2021. - 1216 с.);

- для ингибиторов протоновой помпы - повышение рисков развития кишечных инфекций, внебольничной пневмонии, гастрита тела желудка вследствие миграции Helicobacter pylori из антрального отдела в тело желудка с последующими гиперпластическими и диспластическими изменениями, прогрессирования постменопаузального остеопороза, которые могут повлечь за собой остеопоретические переломы бедра и позвоночника, кардиоваскулярных катастроф у пациентов с кардиологической патологией, повышения токсичности метотрексата в случаях использовании его в высоких дозах для лечения онкологических заболеваний (Каратеев, А.Е. Шесть ножей в спину ингибиторам протонной помпы // Научно-практическая ревматология. - 2013. - Т. 51(3). - С. 332-340; Машковский, М.Д. Лекарственные средства: в 2 т.- Т. 1. - 16-е изд., перераб., испр. и доп. - Москва: ООО «Издательство Новая волна», 2021. - 1216 с.).

Задачами настоящего изобретения являются повышение эффективности предупреждения образования язв на слизистой оболочке желудка, расширение арсенала антиульцерогенных лекарственных средств, снижение их токсического воздействия и уменьшение финансовых затрат на их приобретение.

Заявляемый способ предупреждения образования язв на слизистой оболочке желудка при помощи N-изопропенилимидазола цинкодиацетата отличается от известных способов тем, что цинк играет решающую роль в поддержании целостности слизистой оболочки желудка и оказывает гастропротекторное действие. Дотации органических солей цинка педиатрическим пациентам полезны при язвенной болезни желудка или при гастроэзофагеальной рефлюксной болезни (Chao, Н.С.Zinc Deficiency and Therapeutic Value of Zinc Supplementation in Pediatric // Gastrointestinal Diseases.Nutrients. - 2023. - V. 5(19). - P. 4093).

Имидазол, входящий в структуру N-изопропенилимидазола цинкодиацетата, содержится во многих биологически значимых молекулах, включая многие лекарственные препараты, в частности омепразол, обладающий защитным действием при язвенных поражениях желудка, вызванных нестероидными противовоспалительными препаратами (Карева, Е.Н. Рациональный выбор ингибитора протонной помпы у больных, принимающих нестероидные противовоспалительные препараты / Е.Н. Карева, С.Ю. Сереброва, Н.В. Павлова, И.В. Довгалев // Трудный пациент. - 2020. - Т. 18, №4. - С. 17-20).

Сущностью изобретения является то, что при однократном внутрижелудочном введении животным N-изопропенилимидазола цинкодиацетата в дозе 10 мг/кг, а также в дозе 20 мг/кг за 50 мин до введения ульцерогенного средства противоязвенный эффект этого соединения по критериям «количество» и «площадь» язв слизистой оболочки желудка в 1,5 и 1,9, 1,8 и 2,4 раза соответственно превосходит фамотидин.

Технический результат заключается в высокой эффективности соединения N-изопропенилимидазола цинкодиацетата как антиульцерогенного средства и его низкой острой токсичности - средняя летальная доза (ЛД₅₀) для крыс-самцов линии Wistar при пероральном введении составляет 503 мг/кг, то есть в соответствии с ГОСТ12.1.007-76 это вещество является низкотоксичным и может быть отнесено к III классу опасности (вещества умеренно опасные - ЛД₅₀ при введении в желудок находятся в пределах 151-5000 мг/кг).

Синтез N-изопропенилимидазола цинкодиацетата описан ранее (патент RU 2397175).

Преимуществами заявляемого способа предупреждения образования язв слизистой оболочки желудка при помощи N-изопропенилимидазола цинкодиацетата являются его высокая эффективность, относительная дешевизна субстанции, широко доступное сырье для осуществления его синтеза, низкая токсичность и отсутствие серьезных побочных эффектов.

Исследование по оценке противоязвенной активности N-изопропенилимидазола цинкодиацетата проведено в экспериментах на крысах по методу, описанному А.В. Бузламой и соавт. (Бузлама, А.В. Доклинические исследования лекарственных веществ / А.В. Бузлама, В.А. Николаевский, Ю.Н. Чернов, А.И. Сливкин. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2017. - 384 с.). Было сформировано 5 групп животных по 6, 22, 10, 10 и 10 крыс соответственно, из которых 1-я - интактная, 2-я - контроль, 3-я - фамотидин, 4-я и 5-я - N-изопропенилимидазола цинкодиацетат. Животным 2-5-й групп после 24-часовой депривации крыс при свободном доступе к воде моделировали язвенные поражения слизистой оболочки желудка путем однократного внутрижелудочного введения ампульного раствора диклофенака в «ульцерогенной» дозе, равной 50 мг/кг, в объеме 0,2 мл на 100 г массы тела животного.

Референс-препарат фамотидин, являющийся блокатором Н₂-гистаминовых рецепторов, и N-изопропенилимидазола цинкодиацетат вводили однократно внутрижелудочно за 50 мин до применения диклофенака. Фамотидин использовали в дозе 50 мг/кг (3-я группа), а N-изопропенилимидазола цинкодиацетат в дозах 10 мг/кг (4-я группа) и 20 мг/кг (5-я группа). Интактная группа крыс каким-либо воздействиям не подвергалась. Спустя 3 часа после введения диклофенака животных всех 5 групп подвергали эвтаназии путем передозировки хлороформа, извлекали желудки с последующим их вскрытием по малой кривизне и промыванием для осмотра слизистой оболочки, и проведением измерений язвенных повреждений.

Сравнительную оценку эффективности N-изопропенилимидазола цинкодиацетата и фамотидина проводили по двум критериям - градуальному и альтернативному. Используя первый критерий, сопоставляли среднее количество язв в группе на одно животное и суммарную площадь язвенных поражений (в мм²), определяемую планиметрически. Оценку обширности язв проводили путем расчета индекса обширности по формуле (1):

где ИО - индекс обширности, S - суммарная площадь язв в среднем из расчета на одно животное, мм², N - количество язвенных дефектов на одно животное.

Расчет индекса Паулса (Pauls, F. An assay method for antiulcer substances / F. Pauls, A.N. Wick, E.M. Mackey // Gastroenterology. - 1947. - V. 8. - P. 774-782) производили по двум критериям: по количеству язв и их площади, используя формулы (2 и 3):

где IP_n - индекс Паулса по критерию количество язв, n - количество язв в среднем из расчета на одно животное, шт./жив., F - количество животных с язвами в группе, %.

где IP_s - индекс Паулса по критерию площадь язв, S - суммарная площадь язв в среднем из расчета на одно животное, мм², F - процентное количество животных с язвами в группе, %.

Антиульцерогенную активность рассчитывали по формуле (4):

где AU - антиульцерогенная активность исследуемого вещества, IP_k - индекс Паулса в контрольной группе, IP_e - индекс Паулса в опытной группе.

Вещество считали обладающим антиульцерогенным действием, если показатель AU составлял больше или равно 2,0.

Количество животных с малой площадью язв считали, если площадь последних была на 50% меньше, чем их средний показатель в контроле (при применении диклофенака).

Статистическую обработку полученных результатов проводили путем определения средних значений по вариационному ряду ошибки среднего, достоверности различий между соответствующими показателями контрольных и опытных групп животных, оценкой с использованием t-критерия Стьюдента при параметрическом распределении.

В результате проведенных исследований установлено, что у интактной группы крыс каких-либо изменений слизистой оболочки желудка (гиперемии, кровоизлияний, эрозий и язв) не выявлено (рис. 1А - слизистая оболочка желудка интактного животного).

В контрольной группе животных диклофенак (50 мг/кг, однократно внутрижелудочно) в 100% случаев вызывал язвенные повреждения слизистой оболочки желудков, при этом преобладающее большинство язв выглядели глубокими и продолговатыми, занимая значительную площадь (в среднем 30,86 мм², индекс обширности 2,14); количество животных с малой площадью язв составляло 36,36%. Индексы Паулса по критериям «количество» и «площадь» язв были равны 14,91 и 30,86 соответственно (табл., рис. 1Б - слизистая оболочка желудка под воздействием диклофенака).

Фамотидин (50 мг/кг, однократно внутрижелудочно), взятый в качестве референс-препарата, вызывал статистически значимое снижение количества и площади язв соответственно на 80,4 и 80,2%, при этом индекс обширности несколько (тенденция) уменьшался, составляя 43,9%; количество животных с малой площадью язвенных повреждений увеличивалось на 43,64% по сравнению с контролем. Показатели антиульцерогенной активности фамотидина по критериям «количество» и «площадь» язв составили 5,11 и 6,71 соответственно (табл., рис. 1В - слизистая желудка при антиульцерогенном действии фамотидина).

В случаях применения N-изопропенилимидазола цинкодиацетата в дозах 10 мг/кг (однократно внутрижелудочно) и 20 мг/кг (однократно внутрижелудочно) отмечалось снижение количества и площади язв на 85,2 и 88,4, 87,9 и 92,4%, а индекса обширности на 29,0 и 46,7%; количество животных с малой площадью язвенных поражений увеличилось на 53,64 и 63,64% соответственно. Показатели антиульцерогенной активности N-изопропенилимидазола цинкодиацетата в избранных дозах по критериям «количество» и «площадь» язв возрастали, составляя 7,53 и 12,49, 9,20 и 16,33 соответственно (табл., рис. 1Г и 1Д - слизистая оболочка желудка при антиульцерогенном действии N-изопропенилимидазола цинкодиацетата в дозах 10 и 20 мг/кг соответственно).

Таким образом, доказано, что N-изопропенилимидазола цинкодиацетат в дозах 10 и 20 мг/кг в условиях НПВС-индуцированной гастропатии, вызванной диклофенаком у крыс, обладает антиульцерогенной активностью, превосходя по критериям «количество» и «площадь» язв слизистой оболочки желудка фамотидин в 1,5 и 1,9, 1,8 и 2,4 раза соответственно.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии и гастроэнтерологии. Животным за 50 мин до введения ульцерогенного средства, которым является нестероидный противовоспалительный препарат диклофенак, однократно внутрижелудочно вводят N-изопропенилимидазола цинкодиацетат в дозе 10 мг/кг или дозе 20 мг/кг. Способ позволяет при помощи N-изопропенилимидазола цинкодиацетата повысить эффективность предупреждения образования язв на слизистой оболочке желудка, что в свою очередь позволяет расширить арсенал антиульцерогенных лекарственных средств и снизить их токсическое воздействие. 1 ил., 1 табл., 1 пр.

Способ предупреждения развития язв слизистой оболочки желудка, вызванных нестероидным противовоспалительным препаратом диклофенаком, заключающийся в том, что животным за 50 мин до введения ульцерогенного средства однократно внутрижелудочно вводят N-изопропенилимидазола цинкодиацетат в дозе 10 мг/кг или дозе 20 мг/кг.