СПОСОБ КОРРЕКЦИИ ГИПОЭСТРОГЕН-ИНДУЦИРОВАННОЙ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ ЭНАЛАПРИЛОМ В КОМПЛЕКСЕ СО СМЕСЬЮ РАСТВОРОВ ГОМЕОПАТИЧЕСКИХ РАЗВЕДЕНИЙ ПОЛИКЛОНАЛЬНЫХ КРОЛИЧЬИХ АНТИТЕЛ К ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ СИНТАЗЕ ОКСИДА АЗОТА ЧЕЛОВЕКА - С12, С30, С200 Российский патент 2011 года по МПК G09B23/28 A61K31/401 A61K39/395 A61P9/02 

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии.

Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции фуростаноловыми гликозидами из культуры клеток растения dioscorea deltoidea, описанный 27.07. 2008 г. в патенте РФ №2329807.

Основным недостатком способа является то, что коррекция гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфунции связана с эстрогеноподобной активностью фуростаноловых гликозидов. Поэтому результаты коррекции эндотелиальной дисфункции при повреждении в системе L-аргинин-NO, которая связана в основном с недостаточностью эндотелиальной NO-синтазы, с помощью фуростаноловых гликозидов из культуры клеток растения dioscorea deltoidea, обладающих эстрогеноподобной активностью, неудовлетворительны.

В то время как основным механизмом действия смеси растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - C12, C30, C200 является увеличение количества eNOS, тем самым влияя на основное звено патогенеза развития эндотелиальной дисфункции, приводящее к повышению содержания оксида азота в магистральном сосудистом русле и коррекции эндотелиальной дисфункции; основной механизм действия эналаприла при эндотелиальной дисфункции связан с активацией экспрессии эндотелиальной NO-синтазы, что также приводит к коррекции эндотелиальной дисфункции.

Задачей изобретения является способ коррекции гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции, включающий использование эналаприла, относящегося к ингибиторам АПФ, и смеси растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200.

Поставленная задача достигается тем, что на фоне моделирования эндотелиальной дисфункции в эксперименте с помощью билатеральной овариэктомии у лабораторных животных проводится ее коррекция в течение 6 недель внутрижелудочным введением эналаприла в дозе 0,5 мг/кг однократно в сутки и ежедневным введением смеси растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека- С12, С30, С200 добавлением в поилки в количествах, принятых в гомеопатии, со свободным доступом к питью, замена воды в поилках производилась 1 раз в сутки с количественным учетом выпитой жидкости (20±3 мл в среднем на одно животное).

СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ

Опыты проводились на белых крысах-самках линии Wistar массой 200-300 г. Для моделирования гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции крыс наркотизировали этаминалом натрия (50 мг/кг) и проводили билатеральную овариэктомию. На 42 день от начала эксперимента под наркозом (этаминал-натрия 50 мг/кг) вводят катетер в левую сонную артерию для регистрации показателей артериального давления (АД), болюсное введение фармакологических агентов осуществляют в правую бедренную вену. Показатели гемодинамики: систолическое артериальное давление (САД), диастолическое артериальное давление (ДАД) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) измеряют непрерывно посредством датчика TSD104A и аппаратно-программного комплекса МР100 производства Biopac System, Inc., США. Функциональные пробы: эндотелийзависимая вазодилатация (ЭЗВ) - внутривенное введение ацетил-холина (АХ) в дозе 40 мкг/кг, эндотелийнезависимая вазодилатация (ЭНЗВ) - нутривенное введение нитропруссида натрия (НП) в дозе 30 мкг/кг.

Степень развития эндотелиальной дисфункции оценивается с помощью коэффициента эндотелиальной дисфункции (КЭД), являющегося отношением площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение НП к площади треугольника над трендом реакции восстановления АД в ответ на введение АХ.

При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, величину стандартного отклонения. Различия считали достоверными при p<0,05.

ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ

Болюсное внутривенное введение АХ в течение 3-5 сек приводило к резкому падению артериального давления, достигающего пика у интактных животных для систолического давления (САД) 83,9±4,8 мм рт.ст., для диастолического давления (ДАД) - 41,9±2,2 мм рт.ст. и для среднего артериального давления (Ср. АД) 55,8±2,2 мм рт.ст., при этом в течение первых 2-3 сек развивалась резкая брадикардия до 130-150 ударов в минуту (табл.1).

Восстановление АД происходило в среднем за 43,6±2,2 с после нормализации сердечного ритма. Именно этот интеграл нами принимался как сосудистый компонент реакции на АХ и использовался для дальнейших расчетов (табл.2). ЭНЗВ также характеризовалась снижением САД до 91,0±4,6, ДАД до 48,5±2,9 и Ср. АД до 62,7±3,2 мм рт.ст.(табл.1) с последующим полным восстановлением в среднем в течение 40,2±2,4 с (табл.2).

Гипоэстрогенное состояние, через 6 недель после проведения овариэктомии, вызывало артериальную гипертензию (САД - 160,0±6,2, ДАД - 124,9±5,5, СрАД - 136,6±5,6 мм рт.ст.) и приводило к меньшему снижению показателей АД после введения АХ (САД до 91,8±8,0, ДАД до 57,3±7,1, СрАД до 68,8±7,3 мм рт.ст.) и НП (САД до 87,4±7,5, ДАД до 57,8±6,6 и СрАД до 67,7±6,1 мм рт.ст.) по сравнению с интактными животными (табл.1).

Через 6 недель, после проведения самкам крыс линии Wistar билатеральной овариэктомии имело место достоверное снижение интеграла (реакция восстановления АД после введения АХ) до 1022,5±131 усл.ед. по сравнению с интактной группой животных, у которых этот показатель составлял 1673,6±132,4 усл.ед. (табл.1). Напротив, ЭНЗР, являющаяся отражением реакции на введение НП, увеличилась у животных с экспериментальной эндотелиальной дисфункции и ее интеграл составил соответственно 2157,3±167 усл.ед. и 1338,1±121,1 усл.ед. в группе контроля.

Обработка полученных экспериментальных данных при проведении функциональных проб на эндотелийзависимое (ацетилхолин 40 мкг/кг в/в) и эндотелийнезависимое (нитропруссид 30 мг/кг в/в) расслабление сосудов у экспериментальных животных позволили установить, что КЭД у крыс интактной группы составил 0,8, а крыс после моделирования гипоэстроген-индуцированного дефицита оксида азота в 2,5 раза больше - 2,1.

Таблица 1 Динамика показателей АД и ЧСС при моделировании гипоэстроген-индуцированного дефицита оксида азота и ее коррекции эналаприлом в комплексе с смесью растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, С30, С200. Группы животных Функциональные пробы САД, мм рт.ст. ДАД, мм рт.ст. ЧСС, уд. в мин. Интактные Исходные 128,1±6,0 95,7±4 401,0±8,0 АХ 83,9±4,8 41,9±2,2 398,0±11,0 НП 91,0±4,6 48,5±2,9 402,0±10,0 Гипоэстрогенное состояние Исходные 160,0±6,2* 124,9±5,5* 385,0±13,0 АХ 91,8±8,0 57,3±7,1* 385,0±9,0 НП 87,4±7,5 57,8±6,6 397,0±8,0 Гипоэстрогенное состояние + эналаприл Исходные 139,6±7,3** 107,4±4,9** 397,4±12,2 АХ 80,7±4,6 41,9±2,7** 378,7±9,9 НП 81,6±5,8 40,1±4,7** 379,5±13,4 Гипоэстрогенное состояние + эналаприл + смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной NOS человека - C12, С30, С200 Исходные 150,6±9,6* 111,4±6,7** 385,4±14,0 ЭЗВ с АХ 104,4±12,9* 62,4±3,9* 378,4±14,8 ЭНЗВ с НП 113,6±8,8** 72,4±7,7** 385,6±11,0 * - p<0,05 в сравнении с группой интактных; ** - p<0,05 в сравнении с группой с гипоэстрогенным состоянием.

Внутрижелудочное введение эналаприла в дозе 0,5 мг/кг однократно в сутки и добавление в поилки со свободным доступом к питью смеси растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота - С12, C30, С200 («BD Transduction Labs, USA) не приводило к выраженному снижению показателей исходных значений АД (САД - 150,6±9,6, ДАД - 111,4±6,7 мм рт.ст.) (табл.1.).

Однако этой в группе, где на фоне билатеральной овариэктомии в течение 6 недель вводился эналаприл и смесь растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, C30, С200, КЭД составил 0,9, что достоверно ниже, чем в группе с гипоэстрогенным состоянием. Тогда как в группе с монотерапией эналаприлом данный показатель составил 1,3 (табл.2.)

Таблица 2 Показатели, отражающие коррекцию гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции на фоне билатеральной овариэктомии эналаприлом в комплексе с смесью растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, C30 С200. Группы животных Функциональные пробы Прирост падения сосудистой реакции по СрАД (мм рт.ст.) Время сосудистой реакции (сек.) Площадь сосудистой реакции (усл. ед) КЭД, усл.ед Интактные АХ 56,7±4,1 40,5±2,6 1673,6±132,4 0,8±0,1 НП 60,0±4,8 58,3±2,9 1338,1±121,1 Гипоэстрогенное состояние АХ 67,8±7,3* 30,0±5,4* 1022,5±131* 2,1±0,2* НП 79,2±8,8* 46,0±4,5* 2157,3±167* Гипоэстрогенное состояние+эналаприл АХ 63,3±4,2 49,0±2,2** 1573,6±82,0** 1,3±0,1** НП 75,5±9,5 59,4±3,5** 1984,0±262,2* Гипоэстрогенное состояние + эналаприл + смесь растворов гомеопатических разведений поликлональных антител к эндотелиальной NOS человека - С12, C30, С200 АХ 48,1±5,7* 60,4±3,0** 1468,1±214,8** 0,9±0,1** НП 43,6±4,4** 60,4±2,2** 1327,8±168,1** * - p<0,05 в сравнении с группой интактных, ** - p<0,05 в сравнении с группой с гипоэстрогенным состоянием.

Таким образом, полученные результаты позволяют констатировать коррекцию гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной на фоне билатеральной овариэктомии эналаприлом в комплексе с смесью растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, C30, С200, снижая КЭД до уровня такового у интактных животных.

Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной кардиофармакологии, и может быть использовано для коррекции гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции. Для этого на белых крысах-самках линии Wistar моделируют гипоэстроген-индуцированную эндотелиальную дисфункцию путем билатеральной овариэктомии. Коррекцию дисфункции в течение 6 недель после овариэктомии осуществляют ежедневным внутрижелудочным введением эналаприла в дозе 0,5 мг/кг. При этом также вводят смесь растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200. Указанную смесь ежедневно 1 раз в сутки добавляют в поилки к питью животных. Способ обеспечивает эффективную коррекцию, снижая коэффициент эндотелиальной дисфункции у самок до уровня такового у интактных животных за счет воздействия на различные механизмы развития этой дисфункции в условиях гипоэстрогении. 2 табл.

Способ коррекции гипоэстроген-индуцированной эндотелиальной дисфункции, отличающийся тем, что в эксперименте самкам крыс линии Wistar в течение 6 недель после овариэктомии ежедневно внутрижелудочно вводят эналаприл в дозе 0,5 мг/кг и ежедневно 1 раз в сутки вводят добавлением в поилки к питью смесь растворов гомеопатичесих разведений поликлональных кроличьих антител к эндотелиальной синтазе оксида азота человека - С12, С30, С200.