СПОСОБ ВЫЯВЛЕНИЯ СНИЖЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ФОСФАТИДИЛЭТАНОЛАМИНА В МЕМБРАНАХ ЭРИТРОЦИТОВ БЕРЕМЕННОЙ ПРИ ОБОСТРЕНИИ ГЕРПЕС-ВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ НА ФОНЕ УВЕЛИЧЕНИЯ В ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ TNFα Российский патент 2012 года по МПК G01N33/53 

Цель исследования - показать, что при обострении герпес-вирусной инфекции во время беременности увеличивается в периферической крови содержание TNFα, под влиянием которого снижается процентное содержание в мембранах эритроцитов беременной фосфатидилэтаноламина.

Фосфолипиды мембран эритроцитов обеспечивают целостность морфологической структуры эритроцита и прочно удерживаются эритроцитарной мембраной. Воздействие на мембраны интерлейкинов оказывает изменение их вязкоэластических свойств, что влечет за собой снижение стабильности мембран клеток крови.

Одной из вероятных причин изменения количества фосфатидилэтаноламина является его превращение в фосфатидилхолин путем метилирования [1, 2, 5, 6] при нарастании титра антител к вирусу герпеса.

Прототипом к данной работе мы избрали материал, освещающий изменение содержания фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов у больных хроническим бронхитом (Луценко М.Т. Фосфолипиды при нарушении дыхательной функции организма. - Благовещенск, СО РАМН, 2006. - 163 с.) [5]. Автором отмечено, что при хроническом бронхите содержание фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов снижается на 8,1%. При хроническом бронхите количество фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов составляет 16,16±0,41% (контроль - 20,17±0,27%). Однако в отличие от этой работы в нашем исследовании мы отмечаем, что снижение фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов наступает у беременных при обострении герпес-вирусной инфекции, при которой появляется в крови большое количество TNFα. Эти факторы становятся повреждающими фосфолипидную структуру мембран эритроцитов. Таких работ в доступной нам литературе не обнаружено.

При обострении герпес-вирусной инфекции при нарастании титра антител к вирусу герпеса и увеличении содержания в крови TNFα количество фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов беременной снижается.

1. При титре антител к G₁ до 1:800 содержание TNFα составило 62±1,1 пг/мл;

2. При титре антител к G₁ до 1:3200 содержание TNFα составило 60,0±2,3 пг/мл;

3. При титре антител к G₁ до 1:6400 содержание TNFα составило 166,0±3,2 пг/мл;

4. При титре антител к G₁ до 1:12800 содержание TNFα составило 590,0±20,0 пг/мл [5].

Однако проведенные исследования не касались вопроса, на какие из фосфолипидов мембран эритроцитов наиболее сильное повреждающее влияние оказывает TNFα.

Проведенный анализ показал, что при обострении герпес-вирусной инфекции в третьем триместре беременности при титре антител к вирусу герпеса 1:12800 количество фосфатидилэтаноламина снижалось до 20,3±0,80% (контроль - 24,1±1,0%) при нарастании в это время TNFα до 590,0±20,0 пг/мл (контроль - 35,7±1,8 пг/мл). Составленное дискриминантное уравнение показывает, что

D_ф=+1,743×TNFα+(-1,079×Фосфатидилэтаноламин)

D_ф=+1,743×95,0+(-1,079×20,0)

D_ф=165,58+(-21,58)=144,00

D_ф=(144,00)>граничного значения 78,86.

F_ф(144,00) больше граничного значения (78,86), следовательно, при увеличении дифференциальной функции выше граничного значения нарастание содержания TNFα ведет к снижению содержания фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов на фоне обострения герпес-вирусной инфекции.

Заявленный способ имеет следующие приемы:

1. Исследовали периферическую кровь 20 беременных, перенесших герпес-вирусную инфекцию в третьем триместре гестации. Контролем послужили исследования периферической крови 20 беременных, не болевших в течение всего периода гестации. Исследования проводились на базе стационара акушерского отделения клиники Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН учреждения Российской академии медицинских наук. Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. №266.

2. Титр антител к вирусу герпеса определяли иммуноферментным методом на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США).

3. Фосфолипиды в мембранах эритроцитов определяли методом двумерной тонкослойной хроматографии [4].

4. TNFα определяли иммуноферментным способом с помощью наборов ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург) на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA).

Литература

1. Акалаев Р.Н., Абидов А.А. Фосфолипидный состав эритроцитов у больных хронической почечной недостаточностью // Вопросы мед. химии. - 1993. - №5. - С.43-45.

2. Вязова А.В. Фосфолипиды мембран эритроцитов у больных хроническим бронхитом, сочетанным с уролитназом // Патолог.физиология и эксп.терапия. - 2006. - №1. - С.12-15.

3. Ишутина Н.А., Дорофиенко Н.Н., Андриевская И.А. и др. Изменение микровязкости мембран эритроцитов крови беременных, инфицированных вирусом герпеса // Бюлл. физиологии и патологии дыхания СО РАМН, Благовещенск, 2006. - в. 23. - С.16-18.

4. Кирхнер Ю. Тонкослойная хроматография // Пер. с анг. - М.: Мир, 1981. - С.52-115.

5. Луценко М.Т. Фосфолипиды при нарушении дыхательной функции организма. Благовещенск, 2006. - 163 с.

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностическим методам, и описывает способ выявления снижения содержания фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов беременной при обострении в третьем триместре герпес-вирусной инфекции на фоне увеличения в периферической крови TNFα, характеризующийся тем, что в периферической крови беременной определяют содержание TNFα, определяют в мембранах эритроцитов фосфатидилэтаноламин методом двумерной тонкослойной хроматографии, составляют дискриминантное уравнение. D_ф=+1,743×ТNFα+(-1,079×Фосфатидилэтаноламин) и при D_ф больше граничного значения 78,86 выявляют снижение содержания фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов, что оказывает влияние на устойчивость мембран эритроцитов периферической крови беременной. 1 пр., 1 табл.

Способ выявления снижения содержания фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов беременной при обострении в третьем триместре герпес-вирусной инфекции на фоне увеличения в периферической крови TNFα, характеризующийся тем, что в периферической крови беременной определяют содержание TNFα, определяют в мембранах эритроцитов фосфатидилэтаноламин методом двумерной тонкослойной хроматографии, составляют дискриминантное уравнение D_ф=+1,743·TNFα+(-1,079·фосфатидилэтаноламин) и при D_ф больше граничного значения 78,86 выявляют снижение содержания фосфатидилэтаноламина в мембранах эритроцитов, что оказывает влияние на устойчивость мембран эритроцитов периферической крови беременной.