СОСТАВЫ ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ВВЕДЕНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ И РОДСТВЕННЫЕ СПОСОБЫ Российский патент 2013 года по МПК A61K47/24 A61K47/14 A61K47/30 A61K9/107 A61K31/7048 A61P31/10 

ПЕРЕКРЕСТНЫЕ ССЫЛКИ НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

По данной заявке испрашивается приоритет по Предварительной заявке США № 60/940307, поданной 25 мая 2007 года, Предварительной заявке США № 60/976708, поданной 1 октября 2007 года, и Предварительной заявке США № 61/041478, поданной 1 апреля 2008 года. Полное содержание каждой заявки включено в настоящее описание в качестве ссылки.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Каждый год только на Индийском субконтиненте более 500000 индивидуумов выступают в роли хозяина для Leishmania donovani, бессимптомно развивающегося паразита, который проникает в макрофаги, быстро инфильтрует жизненно важные органы и в конечном счете приводит к тяжелой инфекции висцеральной ретикулоэндотелиальной системы. Висцеральный лейшманиоз, также известный как Кала-азар, является наиболее преобладающим среди слабых и молодых в популяции. Оставленные без лечения, почти все инфицированные индивидуумы умирают. Висцеральный лейшманиоз поражает более 200 миллионов людей из 62 стран. Терапевтический арсенал против Leishmania ограничен небольшим числом вводимых парентерально средств, при ежесуточных инъекциях соединения пятивалентной сурьмы. Хотя и более дорогой, чем соединения сурьмы, амфотерицин B (AmpB) обладает 97% эффективностью лечения, и для него не опубликовано устойчивости. Однако, лекарственная терапия включает в себя IV введение в течение 30-40 суток и связана с возникающими при инфузии побочными эффектами (лихорадка, озноб, боль в костях, тромбофлебит). Дозолимитирующая токсичность, которая может даже влиять на возможность достижения лечения, представляет собой почечную недостаточность. Кроме того, из-за непомерно высокой стоимости и сложного способа введения лекарственного средства, амфотерицин B недоступен для многих пациентов.

В развитых странах диссеминированные грибковые инфекции, такие как кандидоз, гистоплазмоз, кокцидиоз и аспергиллез, находятся на подъеме, поражая пациентов с раком, реципиентов транстплантатов органов, пациентов с диабетом и пациентов с HIV/СПИД. У этих пациентов инвазивные грибковые инфекции могут обуславливать настолько много, как 30% смертей. Несмотря на развитие ряда новых противогрибковых средств, амфотерицин B, полученный в виде вводимой IV мицеллы, и липосомных дисперсий, остается одним из наиболее эффективных средств для лечения системных грибковых инфекций. Кроме того, для AmpB изучали ряд подходов к парентеральным составам. Несмотря на эффективность, ограничениями этих парентеральных составов амфотерицина B являются проблемы безопасности, связанные с введением (инфекция постоянного катетера, озноб и потрясающий озноб пациента из-за гемолиза RBC, зависимая от дозы почечная токсичность), возможность введения парентеральных продуктов в отдаленных местах и высокая стоимость лекарственного средства.

Разработка эффективного и безопасного перорального состава амфотерицина B может иметь важные применения в лечении диссеминированных грибковых инфекций и может кардинально расширить доступ к лечению висцерального лейшманиоза. Однако биодоступность AmpB является ничтожной из-за низкой растворимости в воде и нестабильности при низком pH, обнаруженном в желудочном соке. Такие ограничения применимы также к множеству других лекарственных средств, для которых пероральные составы являются желательными.

Существует необходимость в эффективных и безопасных пероральных составах амфотерицина B, так же как многих других лекарственных средств, обеспечивающих расширенную биодоступность и/или увеличенную стабильность интересующего лекарственного средства при низком pH, обнаруженном в желудочном соке. Настоящее изобретение направлено на удовлетворение этих нужд и предоставляет дополнительные родственные преимущества.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к композициям для получения лекарственных средств, составам лекарственных средств на основе композиций, способам введения лекарственных средств с использованием составов и способам лечения состояний и заболеваний с использованием составов.

В одном аспекте изобретение относится к составу амфотерицина B, содержащему

(a) амфотерицин B;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(c) один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

В одном варианте осуществления амфотерицин B присутствует в составе в количестве от приблизительно 0,5 до приблизительно 10 мг/мл состава. В одном варианте осуществления амфотерицин B присутствует в составе в количестве приблизительно 5 мг/мл. В другом варианте осуществления амфотерицин B присутствует в составе в количестве приблизительно 7 мг/мл.

В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 32 до приблизительно 52% по массе моноглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 30 до приблизительно 50% по массе диглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 5 до приблизительно 20% по массе триглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат более приблизительно 60% по массе моно-, ди- и триглицеридов олеиновой кислоты.

В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды содержат сложный эфир насыщенных жирных кислот C8-C22 и соли фосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды содержат соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля выбрана из группы, состоящей из соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 350, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 550, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 750, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 1000, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 2000 и их смесей. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутствует в составе в количестве от 1 мМ до приблизительно 30 мМ на основании объема состава. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля представляет собой соль аммония или соль натрия.

В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот C8-C22. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот C12-C18. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот выбраны из группы, состоящей из сложных эфиров лауриновой кислоты, сложных эфиров пальмитиновой кислоты, сложных эфиров стеариновой кислоты и их смесей. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат полиэтиленоксид, обладающий средней молекулярной массой от приблизительно 750 до приблизительно 2000.

В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет от приблизительно 20:80 до приблизительно 80:20 об./об. В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно 60:40 об./об.

В одном варианте осуществления состав дополнительно содержит глицерин в количестве менее приблизительно 10% по массе.

В одном варианте осуществления состав представляет собой самоэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства.

В другом аспекте изобретение относится к способу введения амфотерицина B, включающему в себя введение состава амфотерицина B по изобретению нуждающемуся в этом субъекту. В одном варианте осуществления состав вводят перорально. В другом варианте осуществления состав вводят местно.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения инфекционного заболевания, поддающегося лечению введением амфотерицина B, включающему в себя введение нуждающемуся в этом субъекту терапевтически эффективного количества состава амфотерицина B по изобретению. В одном варианте осуществления состав вводят перорально. В другом варианте осуществления состав вводят местно.

Заболевания, поддающиеся лечению составами, включают в себя грибковые инфекции, висцеральный лейшманиоз, кожный лейшманиоз, болезнь Чагаса, болезнь Альцгеймера или фебрильную нейтропению. Грибковые инфекции, поддающиеся лечению составами, включают в себя аспергиллез, бластомикоз, кандидоз, кокцидиоидомикоз, критококкоз, гистоплазмоз, мукормикоз, паракокцидиоидомикоз или споротрихоз.

В другом аспекте изобретение относится к составу для доставки лекарственного средства, содержащему

(a) лекарственное средство;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(c) один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

В одном варианте осуществления лекарственное средство присутствует в составе в количестве от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 25 мг/мл состава.

В конкретных вариантах осуществления лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из противораковых средств, антибиотиков, противовирусных лекарственных средств, противогрибковых средств, средств против прионов, противоамебных средств, нестероидных противовоспалительных лекарственных средств, средств против аллергии, иммунодепрессивных средств, лекарственных средств против коронарной недостаточности, анальгетиков, местных анестетиков, анксиолитических средств, седативных средств, снотворных средств, средств, облегчающих мигрень, лекарственных средств против укачивания и противорвотных средств.

В конкретных вариантах осуществления лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из тетрациклина, доксициклина, окситетрациклина, хлорамфеникола, эритромицина, ацикловира, идоксуридина, тромантадина, миконазола, кетоконазола, флуконазола, итраконазола, эконазола, гризеофульвина, амфотерицина B, нистатина, метронидазола, бензоата метронидазола, тинидазола, индометацина, ибупрофена, пироксикама, диклофенака, кромогликата динатрия, нитроглицерина, изосорбида динитрата, верапамила, нифедипина, дилтиазема, дигоксина, морфина, циклоспоринов, бупренорфина, лидокаина, диазепама, нитразепама, флуразепама, эстазолама, флунитразепама, триазолама, альпразолама, мидазолама, темазепама, лорметазепама, бротизолама, клобазама, клоназепама, лоразепама, оксазепама, бусипрона, суматриптана, производных эрготамина, циннаризина, антигистаминных средств, ондансетрона, трописетрона, гранизетрона, метоклопрамида, дисульфирама, витамина K, паклитаксела, доцетаксела, камптотецина, SN38, цисплатина и карбоплатина.

В одном варианте осуществления состав дополнительно содержит второе лекарственное средство.

В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 32 до приблизительно 52% по массе моноглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 30 до приблизительно 50% по массе диглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 5 до приблизительно 20% по массе триглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат более приблизительно 60% по массе моно-, ди- и триглицеридов олеиновой кислоты.

В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды содержат сложный эфир насыщенных жирных кислот C8-C22 и соли фосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды содержат соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля выбрана из группы, состоящей из соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 350, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 550, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 750, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 1000, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 2000 и их смесей. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутствует в составе в количестве от 1 мМ до приблизительно 30 мM на основании объема состава. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля представляет собой соль аммония или соль натрия.

В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот C8-C22. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот C12-C18. В одном варианте осуществления содержащий полиэтиленоксид сложный эфир жирных кислот выбран из группы, состоящей из сложных эфиров лауриновой кислоты, сложных эфиров пальмитиновой кислоты, сложных эфиров стеариновой кислоты и их смесей. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат полиэтиленоксид, обладающий средней молекулярной массой от приблизительно 750 до приблизительно 2000.

В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет от приблизительно 20:80 до приблизительно 80:20 об./об. В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно 60:40 об./об.

В одном варианте осуществления состав дополнительно содержит глицерин в количестве менее приблизительно 10% по массе.

В одном варианте осуществления состав представляет собой самоэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства.

В другом аспекте изобретение относится к способу введения лекарственного средства, включающему в себя введение состава лекарственного средства по изобретению субъекту, нуждающемуся в таком средстве. В одном варианте осуществления состав вводят перорально. В другом варианте осуществления состав вводят местно.

В другом аспекте изобретение относится к композиции для получения лекарственного средства, содержащей

(a) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(b) один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 32 до приблизительно 52% по массе моноглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 30 до приблизительно 50% по массе диглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 5 до приблизительно 20% по массе триглицеридов жирных кислот. В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат более приблизительно 60% по массе моно-, ди- и триглицеридов олеиновой кислоты.

В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды содержат сложный эфир насыщенных жирных кислот C8-C22 и соли фосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды содержат соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля выбрана из группы, состоящей из соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоль 350, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 550, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 750, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 1000, соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 2000 и их смесей. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутствует в составе в количестве от 1 мМ до приблизительно 30 мМ на основании объема состава. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля представляет собой соль аммония или соль натрия.

В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот C8-C22. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот C12-C18. В одном варианте осуществления содержащий полиэтиленоксид сложный эфир жирных кислот выбран из группы, состоящей из сложных эфиров лауриновой кислоты, сложных эфиров пальмитиновой кислоты, сложных эфиров стеариновой кислоты и их смесей. В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат полиэтиленоксид, обладающий средней молекулярной массой от приблизительно 750 до приблизительно 2000.

В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит глицерин в количестве менее приблизительно 10% по массе.

В другом аспекте изобретение относится к способу получения лекарственного средства, включающему в себя комбинирование лекарственного средства с композицией по изобретению для получения лекарственного средства.

ОПИСАНИЕ РИСУНКОВ

Вышеупомянутые аспекты и многие из сопутствующих преимуществ по этому изобретению более легко оценить, поскольку они становятся более понятными со ссылкой на следующее подробное описание, взятое вместе с сопровождающими рисунками.

На фиг.1A проиллюстрирована химическая структура амфотерицина B (AmpB).

На фиг.1B проиллюстрирована химическая структура соли аммония дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 2000 (DSPE-PEG-2000).

На фиг.2 сравнивают концентрацию AmpB (мкг/мл) в составе AmpB/PECEOL® и репрезентативных составах AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000), содержащих DSPE-PEG-2000 в концентрациях 5, 10 и 15 мМ.

На фиг.3A сравнивают спектры УФ-поглощения в течение времени для репрезентативных составов AmpB по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG) в различных концентрациях (0,5-15 мкг/мл), инкубированных в воспроизводимом желудочном соке (SGF).

На фиг.3B сравнивают стандартные кривые по данным на фиг.2A, объединенным с использованием высоты пика при 407 нм для построения стандартных кривых поглощения AmpB в зависимости от концентрации. Различные стандартные кривые получали для каждого состава, где менялась молекулярная масса DSPE-PEG.

На фиг.4 сравнивают стабильность AmpB в репрезентативных составах по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG 350, 550, 750 и 2000) с составом AmpB/PECEOL® при 37°C в воспроизводимом желудочном соке как функции от времени (10, 30 и 120 минут).

НА фиг.5A и 5B сравнивают стабильность AmpB в репрезентативных составах по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG 350, 550, 750 и 2000, обозначенных PEG 350, 550, 750, 2000, соответственно) с составом AmpB/PECEOL® при 37°C в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния (FSSIF) без лецитина (5A) и с лецитином (5B) как функции от времени (10, 30, 60 и 120 минут).

На фиг.6 сравнивают стабильность AmpB в репрезентативных составах по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG 350, 550, 750 и 2000, обозначенных PEG 350, 550, 750, 2000, соответственно) с составом AmpB/PECEOL® при 37°C в воспроизводимой интестинальной жидкости (SIF) с ферментами панкреатина, как функции от времени (10, 30, 60 и 120 минут).

На фиг.7 сравнивают концентрацию Candida albicans (КОЕ/мл) в почках крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл).

На фиг.8 сравнивают концентрацию Candida albicans (КОЕ/мл) в органах крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл).

На фиг.9 сравнивают креатинин в плазме (мг/дл) у крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл) (ноль, 0 часов и 48 часов).

На фиг.10A, 10B и 10C сравнивают концентрацию AmpB (мг/мл) в репрезентативных составах AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14; AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 50/13 и AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 53/10) при различных соотношениях PECEOL®:GELUCIRE® (60:40, 50:50 и 40:60 об./об.) через 2, 4 и 24 часа.

На фиг.11 сравнивают концентрацию AmpB (% исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (0, 1, 5, 7, 15, 21, 28, 36, 43, 49 и 56 суток) для состава AmpB/PECEOL® (обозначенный PECEOL®) и репрезентативных составов AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®GELUCIRE® 44/14, 50/50; и AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, 15 мМ DSPE-PEG-2000).

На фиг.12 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90 и 120 минут) в воспроизводимом желудочном соке (SGF) для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативных составов AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50; и AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, 15 мМ DSPE-PEG-2000).

На фиг.13 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90, 120 и 240 минут) в воспроизводимой интестинальной жидкости сытого состояния (FeSSIF) для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативного состава AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50).

На фиг.14 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90, 120 и 240 минут) в воспроизводимой интестинальной жидкости сытого состояния (FeSSIF) с ферментом для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативного состава AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®GELUCIRE® 44/14, 50/50).

На фиг.15 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90, 120 и 240 минут) в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния (FaSSIF) для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативного состава AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®GELUCIRE® 44/14, 50/50).

На фиг.16 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 10 мг/мл) репрезентативного состава AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, 15 мМ DSPE-PEG-2000) через семь суток при комнатной температуре и при 43°C (AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов после указанного времени).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к композициям для получения лекарственных средств. Композиции являются эффективными для солюбилизации лекарственных средств, в частности, труднорастворимых лекарственных средств. Композиции преимущественно увеличивают биодоступность лекарственных средств. Изобретение относится также к составам лекарственных средств на основе композиций, которые являются эффективными для доставки лекарственных средств, в частности, перорального введения лекарственных средств. Составы амфотерицина B используют здесь в качестве прототипического примера, однако, специалисту в данной области понятно, что такие составы являются применимыми к множеству лекарственных средств. Соответственно, в одном аспекте изобретение относится к составам амфотерицина B на основе композиций. Составы амфотерицина B эффективно солюбилизуют амфотерицин B, обеспечивая составы, обладающие увеличенными концентрациями амфотерицина B и, в то же самое время, обеспечивая увеличенную биодоступность амфотерицина B.

Составы амфотерицина B

В одном аспекте настоящее изобретение относится к составам амфотерицина B, способам получения составов, способам введения амфотерицина B с использованием составов и способам лечения заболеваний, поддающихся лечению амфотерицином B, посредством введения составов.

Амфотерицин B является эффективным противогрибковым средством, и в настоящее время, является лекарственным средством выбора для лечения большинства тяжелых системных грибковых инфекций. Лекарственное средство сильно связывается с эргостеролом, главным стероловым компонентом мембран грибковых клеток, образуя в мембранах поры, вызывающие разрушение мембраны, проницаемость клеток и лизис.

Амфотерицин B обладает ограничениями для клинического введения из-за серьезных неблагоприятных свойств. Во-первых, амфотерицин B обладает сильной аффинностью связывания для холестерина, стерола, присутствующего в большинстве мембран клеток млекопитающих, и таким образом, является способным разрушать клетки-хозяева. Это приводит к почечной токсичности лекарственного средства. Во-вторых, амфотерицин B не всасывается в желудочно-кишечном тракте (GIT) из-за его плохой растворимости и его чувствительности к кислой среде в желудке. Чтобы преодолеть эту проблему, амфотерицин B используют парентерально в форме липосомной (AMBISOME®) или в форме коллоидной дисперсии (FUNGIZONE®, ABELCET®) для лечения конкретных системных грибковых инфекций (Arikan and Rex, 2001. Lipid-based antifungal agents: current status. Curr. Pharm. Des. 5, 393-415).

Однако, внутривенная инъекция и инфузия амфотерицина B обладает значительными недостатками. Во-первых, внутривенная инъекция и инфузия амфотерицина B связана со значительными колебаниями концентраций лекарственного средства в крови и побочными эффектами, такими как нефротоксичность (Miiller et al., 2000, Nanosuspensions Nanosuspensions for the formulation of poorly soluble drugs-rationale for development and what we can expect for the future. In: Nielloud, F., Marti-Mestres, G. (Eds.), Pharmaceutical emulsions and suspensions. Plenum Press/Marcel Dekker, New York, pp. 383-408). Во-вторых, в дополнение к высокой стоимости, инъекция и инфузия состава амфотерицина B обладает также низким соблюдением режима введения и техническими проблемами с введением в эндемических странах.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение преодолевает эти недостатки предоставлением состава амфотерицина B, который можно вводить перорально. Можно ожидать, что пероральные составы амфотерицина B по изобретению могут улучшать соблюдение условий введения пациентом и улучшать фармакокинетику лекарственного средства, и увеличивать всасывание амфотерицина B в GI тракте.

Амфотерицин B представляет собой противогрибковый полиеновый антибиотик, полученный из Streptomyces nodosus M4575. Амфотерицин B химически обозначают как [1R-(1R*,3S*,5R*,6R*,9R*,11R*,15S*,16R*,17R*,18S*,19E,21E,23E,25E, 27E,29E,31E,33R*,35S*,36R*,37S,)]-33-[(3-амино-3,6-дидезокси-β-D-маннопиранозил)окси]1,3,5,6,9,11,17,37-октагидрокси-15,16,18-триметил-13-оксо-14,39-диоксабицикло-[33,3,1]нонатриаконта-19,21,23,25,27,29,31-гептен-36-карбоновую кислоту. Химическая структура амфотерицина B показана на фиг.1A. Кристаллический амфотерицин B является нерастворимым в воде.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к составам амфотерицина B. Составы амфотерицина по изобретению содержат

(a) амфотерицин B;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(c) один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

В репрезентативных составах амфотерицин B присутствует в количестве от приблизительно 0,5 до приблизительно 10 мг/мл состава. В одном варианте осуществления амфотерицин B или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в составе в количестве приблизительно 5 мг/мл. В одном варианте осуществления амфотерицин B или его фармацевтически приемлемая соль присутствует в составе в количестве приблизительно 7 мг/мл.

Составы амфотерицина B содержат один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот, и как правило, смесь сложных эфиров глицерина и жирных кислот. Как применяют в настоящем документе термин «сложные эфиры глицерина и жирных кислот» относится к сложным эфирам, сформированным между глицерином и одной или более жирными кислотами, включая сложные моно-, ди- и три-эфиры (т.е. глицериды). Пригодные жирные кислоты включают в себя насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты, обладающие от восьми (8) до двадцати двух (22) атомов углерода (т.е. жирные кислоты C8-C22). В конкретных вариантах осуществления пригодные жирные кислоты включают в себя жирные кислоты C12-C18.

Сложные эфиры глицерина и жирных кислот, применимые в составах, можно получать из коммерчески доступных источников. Репрезентативным источником сложных эфиров глицерина и жирных кислот является смесь моно-, ди- и триэфиров, коммерчески доступная как PECEOL® (Gattefosse, Saint Priest Cedex, France), с общепринятым обозначением «глицерилолеат» или «глицерилмоноолеат». Когда PECEOL® используют в качестве источника сложных эфиров глицерина и жирных кислот в составах, сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 32 до приблизительно 52% по массе моноглицеридов жирных кислот, от приблизительно 30 до приблизительно 50% по массе диглицеридов жирных кислот и от приблизительно 5 до приблизительно 20% по массе триглицеридов жирных кислот. Сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат более приблизительно 60% по массе моно-, ди- и триглицеридов олеиновой кислоты (C18:1). Другие сложные эфиры глицерина и жирных кислот включают в себя сложные эфиры пальмитиновой кислоты (C16) (менее приблизительно 12%), стеариновой кислоты (C18) (менее приблизительно 6%), линолевой кислоты (C18:2) (менее приблизительно 35%), линоленовой кислоты (C18:3) (менее приблизительно 2%), арахидиновой кислоты (C20) (менее приблизительно 2%) и айкозеновой кислоты (C20:1) (менее приблизительно 2%). PECEOL® может также содержать свободный глицерин (как правило, приблизительно 1%). В одном варианте осуществления сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат приблизительно 44% по массе моноглицеридов жирных кислот, приблизительно 45% по массе диглицеридов жирных кислот и приблизительно 9% по массе триглицеридов жирных кислот, и сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат приблизительно 78% по массе моно-, ди- и триглицеридов олеиновой кислоты (C18:1). Другие сложные эфиры глицерина и жирных кислот включают в себя сложные эфиры пальмитиновой кислоты (C16) (приблизительно 4%), стеариновая кислота (C18) (приблизительно 2%), линолевой кислоты (C18:2) (приблизительно 12%), линоленовой кислоты (C18:3) (менее приблизительно 1%), арахидиновой кислоты (C20) (менее приблизительно 1%) и айкозеновой кислоты (C20:1) (менее приблизительно 1%).

В конкретных вариантах осуществления составы по изобретению могут содержать глицерин в количестве менее приблизительно 10% по массе.

Составы амфотерицина B: Содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды (DSPE-PEG). Составы амфотерицина B содержат один или более полиэтоксилированных липидов. В одном варианте осуществления полиэтоксилированные липиды представляют собой содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды или смесь содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов. В другом варианте осуществления полиэтоксилированные липиды представляют собой содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот или смесь содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

Соответственно, в одном варианте осуществления составы амфотерицина B по изобретению содержат

(a) амфотерицин B;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(c) один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов.

Как применяют в настоящем документе термин «содержащий полиэтиленоксид фосфолипид» относится к фосфолипиду, содержащему группу полиэтиленоксида (т.е. группу полиэтиленгликоля), ковалентно присоединенную к фосфолипиду, как правило, посредством карбаматной или сложноэфирной связи. Фосфолипиды получены из глицерина и могут содержать группу фосфатного сложного эфира и две группы сложного эфира жирных кислот. Пригодные жирные кислоты включают в себя насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты, обладающие от восьми (8) до двадцати двух (22) атомов углерода (т.е. жирные кислоты C8-C22). В конкретных вариантах осуществления пригодные жирные кислоты включают в себя насыщенные жирные кислоты C12-C18. Репрезентативные содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды включают в себя сложные эфиры насыщенных жирных кислот C8-C22 и соли фосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В конкретных вариантах осуществления пригодные жирные кислоты включают в себя насыщенные жирные кислоты C12-C18.

Молекулярную массу группы полиэтиленоксида содержащего полиэтиленоксид фосфолипида можно менять для оптимизации растворимости лекарственного средства (например, амфотерицина B) в составе. Репрезентативные средние молекулярные массы для групп полиэтиленоксида могут составлять от приблизительно 200 до приблизительно 5000 (например, PEG 200-PEG 5000).

В одном варианте осуществления содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды представляют собой соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. Репрезентативные соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля включают в себя соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 350 (DSPE-PEG-350), соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 550 (DSPE-PEG-550), соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 750 (DSPE-PEG-750), соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 1000 (DSPE-PEG-1000), соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 1500 (DSPE-PEG-1500) и соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 2000 (DSPE-PEG-2000). Можно использовать также смеси. Для вышеуказанных солей дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля, число (например, 350, 550, 750, 1000 и 2000) обозначает среднюю молекулярную массу группы полиэтиленоксида. Обозначения для этих солей, применяемые в настоящем документе, указаны в скобках выше.

Пригодные соли дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля включают в себя соли аммония и натрия.

Химическая структура соли аммония дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля 2000 (DSPE-PEG-2000) проиллюстрирована на фиг.1B. Ссылаясь на фиг.1B, содержащий полиэтиленоксид фосфолипид содержит фосфатную сложноэфирную группу и две группы сложных эфиров жирных кислот (стеаратные), и группу полиэтиленоксида, ковалентно присоединенную к аминогруппе фосфатидилэтаноламина посредством карбаматной связи.

Как отмечено выше, содержащий полиэтиленоксид фосфолипид влияет на способность состава солюбилизировать лекарственное средство. Как правило, чем больше количество содержащего полиэтиленоксид фосфолипида, тем больше солюбилизирующая емкость состава для труднорастворимых лекарственных средств. Содержащий полиэтиленоксид фосфолипид может присутствовать в составе в количестве от приблизительно 1 мМ до приблизительно 30 мМ на основании объема состава. В конкретных вариантах осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутствует в составе в количестве от 1 мМ до приблизительно 30 мМ на основании объема состава. В одном варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутствует в составе в количестве приблизительно 15 мМ на основании объема состава.

На фиг.2 сравнивают концентрацию амфотерицина B (мкг/мл) в составе AmpB/PECEOL® (не содержащем содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот) и репрезентативных составах AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000), содержащих DSPE-PEG-2000 в концентрациях 5, 10 и 15 мМ. AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов через 24 часа при 45°C.

В одном варианте осуществления составы амфотерицина B по изобретению содержат

(a) амфотерицин B;

(b) сложнее эфиры олеиновой кислоты и глицерина; и

(c) соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля.

В одном варианте осуществления состав амфотерицина B по изобретению содержит амфотерицин B, PECEOL® и соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В этом варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутствует в количестве вплоть до приблизительно 30 мМ.

Получение и характеризация репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению, включающих содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды, описаны в примере 1.

Составы амфотерицина B, включающие содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды, включают амфотерицин B, который как является частично солюбилизированным (растворенным), так и присутствует в виде твердых частиц для предоставления тонкой дисперсии твердых частиц. Дисперсия состава в водной среде образует нано-/микроэмульсию, обладающую каплями эмульсии, размер которых лежит в диапазоне от приблизительно 50 нм до приблизительно 5 мкм.

Молекулярная масса полиэтиленгликоля не оказывает явного эффекта на размер капель эмульсии в воспроизводимой интестинальной жидкости (таблица 3) после перемешивания в течение периода 2 часов при 37°C. Субмикронные средние диаметры наблюдали в диапазоне 300-600 нм с достаточно широкой полидисперсией. Получили также бимодальное распределение размера частиц, с небольшой субпопуляцией (приблизительно 20%), центрированной в субмикронном диапазоне (150-300 нм) и другой, центрированной в диапазоне 1-2 мкм (приблизительно 80%). AmpB в одном PECEOL® также образует капли сходного размера и распределения в воспроизводимой интестинальной жидкости.

Для определения эффективности в качестве вводимых перорально составов, стабильность репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению оценивали в воспроизводимом желудочном соке. На фиг.3A сравнивают УФ-поглощение спектров с течением времени для репрезентативных составов AmpB по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG) в различных концентрациях (0,5-15 мкг/мл), инкубированных в воспроизводимом желудочном соке (SGF). Не присутствовало изменений высоты пика или соотношения пиков при любой концентрации как функции от времени инкубации вплоть до 60 минут. На фиг.3B сравнивают стандартные кривые по данным на фиг.2A, объединенным с использованием высоты пика при 407 нм для построения стандартных кривых поглощения AmpB в зависимости от концентрации. Различные стандартные кривые получали для каждого состава, где менялась молекулярная масса DSPE-PEG. На фиг.4 сравнивают стабильность AmpB в репрезентативных составах по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG 350, 550, 750 и 2000) с составом AmpB/PECEOL® при 37°C в воспроизводимом желудочном соке как функции от времени (10, 30 и 120 минут). Данные представляют среднее ±SD по трем независимым экспериментам, каждый из которых выполняли в трех повторах. Для каждого из оцениваемых репрезентативных составов по изобретению показали стабильность в воспроизводимом желудочном соке в течение оцениваемого периода времени.

Стабильность репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению оценивали также в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния (FSSIF) без лецитина и с лецитином, и в воспроизводимой интестинальной жидкости с ферментами панкреатина. На фиг.5A и 5B сравнивают стабильность AmpB в репрезентативных составах по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG 350, 550, 750 и 2000, обозначенных PEG 350, 550, 750, 2000, соответственно) с составом AmpB/PECEOL® при 37°C в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния (FSSIF) без лецитина (5A) и с лецитином (5B) как функции от времени (10, 30, 60 и 120 минут). Данные представляют среднее ±SD по трем независимым экспериментам, каждый из которых выполняли в трех повторах. На фиг.6 сравнивают стабильность AmpB в репрезентативных составах по изобретению (PECEOL®/DSPE-PEG 350, 550, 750 и 2000, обозначенных PEG 350, 550, 750, 2000, соответственно) с составом AmpB/PECEOL® при 37°C в воспроизводимой интестинальной жидкости (SIF) с ферментами панкреатина как функции от времени (10, 30, 60 и 120 минут). Данные представляют среднее ±SD по трем независимым экспериментам, каждый из которых выполняли в трех повторах. Для каждого из оцениваемых репрезентативных составов по изобретению показали стабильность в воспроизводимых интестинальных жидкостях в течение оцениваемого периода времени.

Стабильность репрезентативных составов амфотерицина B в жидкостях GI указывает на их стабильность в качестве вводимых перорально составов.

AmpB в PECEOL® стабилизировали, и его растворимость усиливали в 50 раз введением 15 мМ DSPE-PEG, где средняя молекулярная масса PEG варьировала между 350 и 2000. Стабильность лекарственного средства в желудке и кишечнике является критической, чтобы способствовать всасыванию лекарственного средства в GI тракте. Хорошо известно, что AmpB является более растворимым, но относительно нестабильным при низком pH, таким образом, любая защита, обеспечиваемая липидными компонентами состава, может представлять собой значительное преимущество для увеличения пероральной биодоступности AmpB. Важно также знать, влияют ли липидные носители на состояние суперагрегации AmpB, которое, как показано ранее, влияет на растворимость лекарственного средства, так же как на активность in vivo. Картина УФ-спектров AmpB на липидных носителях, описанная в настоящем документе, согласуется с картиной для мономерного AmpB до и после инкубации в воспроизводимых желудочном соке или интестинальных жидкостях (смотрите фиг.3A). Не обнаружили также изменений картины УФ-спектров при хранении при температуре окружающей среды (21°C) в течение периода 4 недель (данные не представлены). Однако взаимодействия между AmpB и липидными компонентами неразведенного состава (в отсутствие используемого для анализа растворителя) или после перорального всасывания in vivo могут отличаться.

Стабильность репрезентативных составов по изобретению в воспроизводимом желудочном соке в течение 2 часов являлась отличной, с неожиданно небольшой изменчивостью между составами, полученными с различными DSPE-PEG или только с PECEOL® (смотрите фиг.4-6). Для всех показали прозрачность на вид без появления преципитатов. Больше изменений в стабильности наблюдали в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния, содержащей соли желчных кислот (смотрите фиг.5A и 5B). Свойства эмульгации солей желчных кислот, лецитина и фосфолипазы в панкреатине могут влиять на стабильность состава и таким образом, стабильность лекарственного средства оценивали в воспроизводимых интестинальных жидкостях, содержащих эти компоненты. Лецитин, по-видимому, можно включать в липидную смесь при включении в воспроизводимую интестинальную жидкость, что обладает способностью либо улучшать связывание амфотерицина B с липидными наполнителями, либо исключать его. Однако, присутствие лецитина не внесло заметной разницы в скорость или степень деградации или порядок деградации по окончании 2 часов (смотрите фиг.5B). Ясно, что содержащие DSPE-PEG 350 составы обеспечивали меньшую стабильность лекарственного средства, чем составы, содержащие PEG с более длинной цепью. В отсутствие лецитина анализ размеров субмикронных частиц не показал значительной популяции ниже 50 нм, которая соответствовала бы мицеллам DSPE-PEG, например, если DSPE-PEG350 самоассоциировал в отдельную популяцию мицелл (смотрите фиг.5A). Более того, не присутствовало значительного эффекта на размер частиц из-за присутствия DSPE-PEG или молекулярной массы полиэтиленгликоля, что позволяет предполагать, что свойства эмульгации в значительной степени происходят от компонента PECEOL®. Однако, возможности, что небольшая фракция мицелл существует в равновесии со смесью липидный наполнитель/лекарственное средство в воспроизводимой интестинальной жидкости, нельзя исключить для любого из составов DSPE-PEG, однако, это по-видимому, не является главным компонентом. Таким образом, возможно, что улучшенная стабильность AmpB в PECEOL®/DSPE-PEG более высокой молекулярной массы может относиться к свойствам поверхности самих капель эмульсии, несмотря на отсутствие прямой зависимости от распределения размера частиц, так что гидрофильные цепи полиэтиленгликоля могут являться ориентированными к поверхности раздела с водой, в то время как фракция PECEOL®/AmpB может оставаться во внутренней масляной фазе и таким образом секвестрировать и защищать AmpB от деградации. Таким образом, существовала тенденция к увеличенной стабильности для PEG молекулярной массой 750 и 2000 по сравнению с 350 и 550. Взаимодействия между AmpB и PECEOL®/DSPE-PEG приводят к форме УФ-спектров, согласующихся с мономерным AmpB, а не с агрегированным AmpB (фиг.3A).

Составы амфотерицина B: Содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот

Как указано выше, составы амфотерицина B содержат один или более полиэтоксилированных липидов, таких как содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды или один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот, и как правило, смесь содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или смесь содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

Соответственно, в одном варианте осуществления составы амфотерицина B по изобретению содержат

(a) амфотерицин B;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(c) один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

Как применяют в настоящем документе, термин «содержащий полиэтиленоксид сложный эфир жирных кислот» относится к сложному эфиру жирных кислот, содержащему группу полиэтиленоксида (т.е. группу полиэтиленгликоля), ковалентно присоединенную к жирной кислоте посредством сложноэфирной связи. Содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот включают в себя сложные моно- и диэфиры жирных кислот и полиэтиленгликоля. Пригодные содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот получены из жирных кислот, включая насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты, обладающие от восьми (8) до двадцати двух (22) атомов углерода (т.е. сложный эфир полиэтиленоксида и жирной кислоты C8-C22). В конкретных вариантах осуществления пригодные содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот получены из жирных кислот, включая насыщенные и ненасыщенные жирные кислоты, обладающие от двенадцати (12) до восемнадцати (18) атомов углерода (т.е. сложный эфир полиэтиленоксида и жирной кислоты C12-C18). Репрезентативные содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот включают в себя сложные эфиры насыщенных жирных кислот C8-C22. В конкретных вариантах осуществления пригодные содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот включают в себя насыщенные жирные кислоты C12-C18.

Молекулярную массу группы полиэтиленоксида содержащего полиэтиленоксид сложного эфира жирных кислот можно менять для оптимизации растворимости лекарственного средства (например, амфотерицина B) в составе. Репрезентативные средние молекулярные массы для групп полиэтиленоксида могут составлять от приблизительно 350 до приблизительно 2000. В одном варианте осуществления средняя молекулярная масса для группы полиэтиленоксида составляет приблизительно 1500.

В этом варианте осуществления составы амфотерицина B содержат один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот, и, как правило, смесь содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот (сложные моно- и диэфиры жирных кислот и полиэтиленгликоля).

Содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот, применимые в составах, можно получать из коммерчески доступных источников. Репрезентативные содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот (смеси сложных моно- и диэфиров) являются коммерчески доступными под наименованием GELUCIRE® (Gattefosse, Saint Priest Cedex, France). Пригодные содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот можно получить как GELUCIRE® 44/14, GELUCIRE® 50/13 и GELUCIRE® 53/10. Числа в этих обозначениях относятся к температуре плавления и к гидрофильному/липофильному балансу (HLB) этих материалов, соответственно.

GELUCIRE® 44/14, GELUCIRE® 50/13 и GELUCIRE® 53/10 представляют собой смеси (a) сложных моно-, ди- и триэфиров глицерина (глицериды) и (b) сложных моно- и диэфиров полиэтиленгликоля (макроголи). GELUCIRE могут также содержать свободный полиэтиленгликоль (например, PEG 1500).

Лауриновая кислота (C12) является преобладающим компонентом жирных кислот в сложных эфирах с глицеридами и полиэтиленгликолем в GELUCIRE® 44/14. GELUCIRE® 44/14 описывают как смесь глицерилдилаурата (сложного диэфира лауриновой кислоты с глицерином) и PEG дилаурата (сложный диэфир лауриновой кислоты с полиэтиленгликолем), и он является общеизвестным как PEG-32 глицериллаурат (Gattefosse) лауроилмакрогол-32 глицериды EP, или лауроилполиoксилглицериды USP/NF. GELUCIRE® 44/14 получают реакцией гидрогенизированного пальмоядрового масла с полиэтиленгликолем (средняя молекулярная масса 1500). GELUCIRE® 44/14 содержит приблизительно 20% моно-, ди- и триглицеридов, приблизительно 72% сложных моно- и диэфиров жирных кислот и полиэтиленгликоля 1500, и приблизительно 8% полиэтиленгликоля 1500.

GELUCIRE® 44/14 содержит сложные эфиры лауриновой кислоты (C12) (30-50%), сложные эфиры миристиновой кислоты (C14) (5-25%), сложные эфиры пальмитиновой кислоты (C16) (4-25%), сложные эфиры стеариновой кислоты (C18) (5-35%), сложные эфиры каприловой кислоты (C8) (менее 15%) и сложные эфиры каприновой кислоты (C10) (менее 12%). GELUCIRE® 44/14 может содержать также свободный глицерин (как правило, менее приблизительно 1%). В репрезентативном составе GELUCIRE® 44/14 содержит сложные эфиры лауриновой кислоты (C12) (приблизительно 47%), сложные эфиры миристиновой кислоты (C14) (приблизительно 18%), сложные эфиры пальмитиновой кислоты (C16) (приблизительно 10%), сложные эфиры стеариновой кислоты (C18) (приблизительно 11%), сложные эфиры каприловой кислоты (C8) (приблизительно 8%) и сложные эфиры каприновой кислоты (C10) (приблизительно 12%).

Пальмитиновая кислота (C16) (40-50%) и стеариновая кислота (C18) (48-58%) являются преобладающими компонентами жирных кислот в сложных эфирах с глицеридами и полиэтиленгликолем в GELUCIRE® 50/13. GELUCIRE® 50/13 известен как PEG-32 глицерилпальмитостеарат (Gattefosse), стеароилмакроголглицериды EP или стеароилполиоксилглицериды USP/NF). GELUCIRE® 50/13 содержит сложные эфиры пальмитиновой кислоты (C16) (40-50%), сложные эфиры стеариновой кислоты (C18) (48-58%) (сложные эфиры стеариновой и пальмитиновой кислот более приблизительно 90%), сложные эфиры лауриновой кислоты (C12) (менее 5%), сложные эфиры миристиновой кислоты (C14) (менее 5%), сложные эфиры каприловой кислоты (C8) (менее 3%) и сложные эфиры каприновой кислоты (C10) (менее 3%). GELUCIRE® 50/13 может содержать также свободный глицерин (как правило, менее приблизительно 1%). В репрезентативном составе GELUCIRE® 50/13 содержит сложные эфиры пальмитиновой кислоты (C16) (приблизительно 43%), сложные эфиры стеариновой кислоты (C18) (приблизительно 54%) (сложные эфиры стеариновой и пальмитиновой кислот приблизительно 97%), сложные эфиры лауриновой кислоты (C12) (менее 1%), сложные эфиры миристиновой кислоты (C14) (приблизительно 1%), сложные эфиры каприловой кислоты (C8) (менее 1%) и сложные эфиры каприновой кислоты (C10) (менее 1%).

Стеариновая кислота (C18) является преобладающим компонентом жирных кислот в сложных эфирах с глицеридами и полиэтиленгликолем в GELUCIRE® 53/10. GELUCIRE® 53/10 известен также как PEG-32 глицерилстеарат (Gattefosse).

В одном варианте осуществления содержащий полиэтиленоксид сложный эфир жирных кислот представляет собой сложный эфир лауриновой кислоты, сложный эфир пальмитиновой кислоты или сложный эфир стеариновой кислоты (т.е. сложные моно- и диэфиры лауриновой кислоты и полиэтиленгликоля, сложные моно- и диэфиры пальмитиновой кислоты и полиэтиленгликоля, сложные моно- и диэфиры стеариновой кислоты и полиэтиленгликоля). Можно использовать также смеси этих сложных эфиров.

Для вариантов осуществления, включающих содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот, соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет от приблизительно 20:80 до приблизительно 80:20 об./об. В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно 30:70 об./об. В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно 40:60 об./об. В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно 50:50 об./об. В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно 60:40 об./об. В одном варианте осуществления соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно 70:30 об./об.

В одном варианте осуществления составы амфотерицина B по изобретению содержат

(a) амфотерицин B;

(b) сложные эфиры олеиновой кислоты и глицерина; и

(c) сложные эфиры лауриновой кислоты и полиэтиленгликоля.

В другом варианте осуществления составы амфотерицина B по изобретению содержат

(a) амфотерицин B;

(b) сложные эфиры олеиновой кислоты и глицерина; и

(c) сложные эфиры пальмитиновой и стеариновой кислоты и полиэтиленгликоля.

В следующем варианте осуществления составы амфотерицина B по изобретению содержат

(a) амфотерицин B;

(b) сложные эфиры олеиновой кислоты и глицерина; и

(c) сложные эфиры стеариновой кислоты и полиэтиленгликоля.

В одном варианте осуществления состав амфотерицина B по изобретению содержит амфотерицин B, PECEOL® и GELUCIRE® 44/14. В другом варианте осуществления состав амфотерицина B по изобретению содержит амфотерицин B, PECEOL® и GELUCIRE® 50/13. В следующем варианте осуществления состав амфотерицина B по изобретению содержит амфотерицин B, PECEOL® и GELUCIRE® 53/10. В этих вариантах осуществления соотношение PECEOL® и GELUCIRE® может составлять от 20:80 до 80:20 (например, 20:80, 30:70; 40:60; 50:50; 60:40; 70:30; и 80:20).

Получение и характеризация репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению, включающих содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот, описаны в примере 1.

Составы амфотерицина B, включающие содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот, включают амфотерицин B, который как является частично солюбилизированным (растворенным), так и присутствует в виде твердых частиц для предоставления тонкой дисперсии твердых частиц. Дисперсия состава в водной среде образует нано-/микроэмульсию.

Предварительные составы SEDDS амфотерицина B (смотрите пример 1) образовывали самоэмульгацию и малый размер капель при дисперсии в физиологическом солевом растворе. Дисперсионные свойства составов на основе CAPTEX® 355 являлись сходными со свойствами составов на основе смесей PECEOL®/GELUCIRE® 44/14 или 50/13, образующих множественные субпопуляции капель эмульсии в субмикронном или 1 мкм диапазоне (смотрите таблицы 1 и 2). Этот размер частиц может являться пригодным для дисперсии лекарственного средства в GI тракте для наилучшего облегчения всасывания.

Растворимость репрезентативных составов амфотерицина B из составов, включающих содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот, проиллюстрированы на фиг.10A-10C. На фиг.10A, 10B и 10C сравнивают концентрацию AmpB (мг/мл) в репрезентативных составах AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®GELUCIRE® 44/14; AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 50/13; и AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 53/10) при различных соотношениях PECEOL®:GELUCIRE® (60:40; 50:50; и 40:60 об./об.) через 2, 4 и 24 часа (AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов после указанного времени при 45°C). На фиг.11 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (0, 1, 5, 7, 15, 21, 28, 36, 43, 49 и 56 суток) для состава AmpB/PECEOL® (обозначенный PECEOL®) и репрезентативных составов AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50; и AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, 15 мМ DSPE-PEG-2000) (AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов после указанного времени при 43°C). Из оцененных составов, для состава AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50, показали наибольшую стабильность, вплоть до 21 суток.

Для определения эффективности в качестве вводимых перорально составов, стабильность репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению оценивали в воспроизводимом желудочном соке.

На фиг.12 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90 и 120 минут) в воспроизводимом желудочном соке (SGF) для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативных составов AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50; и AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, 15 мМ DSPE-PEG-2000) (AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов после указанного времени при 37°C в SGF, 30 мМ NaCl при pH 1,2).

На фиг.13 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90, 120 и 240 минут) в воспроизводимой интестинальной жидкости сытого состояния (FeSSIF) для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативного состава AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50) (AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов через 4 часа в FeSSIF, содержащей хлорид калия (15,2 г/л), тауролаурат натрия (15 мМ), фосфатидилхолин яйца (3,75 мМ) и уксусную кислоту, доведенной до pH 5,0). Для репрезентативного состава по изобретению показывают постоянную концентрацию AmpB в течение вплоть до 2 часов.

На фиг.14 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90, 120 и 240 минут) в воспроизводимой интестинальной жидкости сытого состояния (FeSSIF) с ферментом для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативного состава AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50) (AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов через 4 часа в FeSSIF, содержащей хлорид калия (15,2 г/л), тауролаурат натрия (7,5 мМ), фосфатидилхолин яйца (2,0 мМ), глицерилмоноолеат (5,0 мМ), олеат натрия (0,8 мМ), панкреатин (1000 ед. липазы/л) и уксусную кислоту, доведенной до pH 5,8). Для репрезентативного состава по изобретению показывают постоянную концентрацию AmpB в течение вплоть до 2 часов.

На фиг.15 сравнивают концентрацию AmpB (% от исходной концентрации, 5 мг/мл) с течением времени (10, 30, 45, 60, 90, 120, и 240 минут) в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояни (FaSSBF) для состава AmpB/PECEOL® и репрезентативного состава AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, 50/50) (AmpB измерен по УФ-поглощению центрифугированных образцов через 4 часа в FaSSIF, содержащей хлорид калия (7,7 г/л), двухосновный фосфат калия (3,9 г/л), тауролаурат натрия (3,0 мМ), фосфатидилхолин яйца (0,75 мМ) и уксусную кислоту, доведенной до pH 6,5). Для репрезентативного состава по изобретению показывают постоянную концентрацию AmpB в течение вплоть до 2 часов.

Для каждого из оцененных репрезентативных составов по изобретению показали стабильность в воспроизводимых жидкостях в течение оцениваемого периода времени. Стабильность репрезентативных составов амфотерицина B в жидкостях GI указывает на их пригодность в качестве вводимых перорально составов.

Самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственного средства. Составы амфотерицина B по изобретению могут представлять собой самоэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства. Самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственного средства (SEDDS) представляют собой изотропные смеси масел, поверхностно-активных веществ, растворителей и сорастворителей/поверхностно-активных веществ. SEDDS можно использовать для разработки составов, чтобы улучшить пероральное всасывание высоколипофильных соединений лекарственного средства, такого как амфотерицин B. Когда композиция SEDDS высвобождается в просвет кишечника, композиция диспергируется до образования тонкой эмульсии, так что лекарственное средство остается в растворе в кишечнике, исключая стадию растворения, которая часто ограничивает скорость всасывания гидрофобных лекарственных средств из кристаллического состояния. Применение SEDDS обычно приводит к улучшенной биодоступности и/или более постоянному временному профилю всасывания из кишечника. Описание композиций SEDDS можно найти в C. W. Pouton, Advanced Drug Delivery Reviews 25: 47-58 (1997).

Составы амфотерицина B по изобретению можно вводить перорально в мягких или твердых желатиновых капсулах и они образуют относительно стабильные эмульсии масло-в-воде (o/w) при разведении в воде благодаря осторожному встряхиванию интестинальных жидкостей. Эффективность перорального всасывания соединения лекарственного средства из SEDDS зависит от многих связанных с составом параметров, таких как компоненты составов, полярность эмульсии, размер капель и заряд, все из которых определяют способность к самоэмульгации. Таким образом, только очень конкретные комбинации фармацевтических наполнителей могут приводить к эффективным самоэмульгирующимся системам.

Способы введения амфотерицина B и лечения с его помощью. Введение внутривенного AmpB ограничено его зависимой от дозы почечной токсичностью, которую нельзя предсказать мониторированием концентрации лекарственного средства в плазме и/или сыворотке. Опубликован ряд исследований, что AmpB, солюбилизированный в метаноле, плохо всасывается из желудочно-кишечного (GI) тракта, и таким образом, обычно его вводят не перорально, а внутривенно, что может приводить к вышеупомянутой почечной токсичности. Однако, до настоящего времени опубликовано немного исследований, изучающих разработку и оценивающих противогрибковую активность пероральных составов AmpB.

Эффективность репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению, включающих содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды, для лечения грибковых инфекций описана в примере 2. Эффективность этих составов для лечения против Aspergillus fumigatus и Candida albicans показали в исследованиях на животных.

Обработка крыс, инфицированных Aspergillus fumigatus, репрезентативными составами амфотерицина B по изобретению, включающими содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды, значимо уменьшала общие грибковые концентрации КОЕ, выделенные из всех органов, суммируемые вместе, до 80% по сравнению с необработанными контролями (таблица 4) без значимых изменений в уровнях креатинина в плазме в мг/мл (таблица 5). Обработка ABELCET® значимо уменьшала общие грибковые концентрации КОЕ, выделенные из всех органов, суммируемые вместе, до 88% по сравнению с необработанными контролями (таблица 4) без значимых изменений в уровнях креатинина в плазме в мг/мл (таблица 5).

Результаты для Candida albicans являются сходными с результатами для Aspergillus fumigatus. Анализ грибков в почках инфицированных Candida albicans крыс, обработанных репрезентативным составом AmpB по изобретению, показал значительно уменьшенные общие грибковые концентрации КОЕ по сравнению с контролем. На фиг.7 сравнивают концентрацию Candida albicans (КОЕ/мл) в почках крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл). На фиг.8 сравнивают концентрацию Candida albicans (КОЕ/мл) в органах крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл). Эффективность репрезентативного состава AmpB для уменьшения концентрации Candida albicans являлась сравнимой с эффективностью ABELCET®. Обработка репрезентативным составом AmpB значимо уменьшала общие грибковые концентрации КОЕ, выделенные из почек, без значимых изменений в уровнях креатинина в плазме в мг/мл. На фиг.9 сравнивают креатинин в плазме в мг/мл (мг/дл) для крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл) (ноль, 0 часов и 48 часов). Не наблюдали почечной токсичности, как измеряли по уровням креатинина в плазме.

В другом аспекте изобретение относится к способу лечения инфекционного заболевания, поддающегося лечению введением амфотерицина B. В способе терапевтически эффективное количество состава амфотерицина B по изобретению вводят нуждающемуся в этом субъекту. В одном варианте осуществления состав вводят перорально. В другом варианте осуществления состав вводят местно.

Как применяют в настоящем документе, термины «лечение» и «обработка» относятся к уменьшению тяжести и/или частоты симптомов, исключения симптомов и/или лежащей в основе причины, уменьшению вероятности возникновения симптомов и/или лежащей в основе причины и улучшению или реабилитации после повреждения. Таким образом, «лечение» пациента с помощью активного средства, как представлено в настоящем документе, включает в себя предотвращение конкретного состояния, заболевания или нарушения у чувствительного индивидуума, так же как лечение индивидуума с клиническими симптомами. Как применяют в настоящем документе, «эффективное количество» относится к количеству, охватывающему как терапевтически эффективные количества, так и профилактически эффективные количества. Как применяют в настоящем документе, «терапевтически эффективное количество» относится к количеству, эффективному для достижения желательного терапевтического результата. Терапевтически эффективное количество данного активного средства может, как правило, меняться с учетом таких факторов, как тип и тяжесть нарушения или заболевания, подлежащего лечению, и возраст, пол и масса пациента.

Инфекционные заболевания, поддающиеся лечению посредством способа и составов по изобретению, включают в себя грибковые инфекции (аспергиллез, бластомикоз, кандидоз, кокцидиоидомикоз, критококкоз, гистоплазмоз, мукормикоз, паракокцидиоидомикоз и споротрихоз), висцеральный лейшманиоз, кожный лейшманиоз, болезнь Чагаса и фебрильную нейтропению. Показано, что амфотерицин B связывается с амилоидом и предупреждает образование фибрилл. Показано, что амфотерицин B является применимым для лечения болезни Альцгеймера. Соответственно, состав амфотерицина B по изобретению можно использовать для лечения болезни Альцгеймера.

В общих словах, в одном аспекте настоящее изобретение относится к составам амфотерицина B, которые можно вводить перорально. Составы амфотерицина B по изобретению обеспечивают отличную солюбилизацию лекарственного средства, стабильность лекарственного средства в воспроизводимых желудочной и интестинальных жидкостях, и обладают значительной противогрибковой активностью без зависимой от дозы почечной токсичности, которая хорошо известна для парентеральных составов амфотерицина B.

Составы лекарственного средства

В другом аспекте настоящее изобретение относится к составам для доставки лекарственных средств, способам получения составов и способам введения лекарственных средств с использованием составов.

В одном аспекте изобретение относится к составу для доставки лекарственного средства. Состав лекарственного средства содержит

(a) лекарственное средство;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(c) один или более полиэтоксилированных липидов, таких как один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

В вышеуказанном составе лекарственного средства сложные эфиры глицерина и жирных кислот, содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды и содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот являются такими, как описано выше для составов амфотерицина B. Количества этих компонентов в вышеуказанном составе лекарственного средства также является таким, как описано выше для составов амфотерицина B. Лекарственное средство может присутствовать в составе в количестве от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 25 мг/мл состава. В конкретных вариантах осуществления составы могут дополнительно содержать глицерин в количестве менее приблизительно 10% по массе.

Состав лекарственного средства по изобретению преимущественно солюбилизирует труднорастворимые лекарственные средства. Репрезентативные лекарственные средства, которые можно преимущественно составлять и доставлять посредством составов и способов по изобретению, включают в себя противораковые средства, антибиотики, противовирусные лекарственные средства, противогрибковые средства, средства против прионов, противоамебные средства, нестероидные противовоспалительные лекарственные средства, средства против аллергии, иммунодепрессивные средства, лекарственные средства против коронарной недостаточности, анальгетики, местные анестетики, анксиолитические средства, седативные средства, снотворные средства, облегчающие мигрень средства, лекарственные средства против укачивания и противорвотные средства.

Конкретные лекарственные средства, которые можно преимущественно составлять и доставлять посредством составов и способов по изобретению, включают в себя тетрациклин, доксицилин, окситетрациклин, хлорамфеникол, эритромицин, ацикловир, идоксуридин, тромантадин, миконазол, кетоконазол, флуконазол, итраконазол, эконазол, гризеофульвин, амфотерицин B, нистатин, метронидазол, бензоат метронидазола, тинидазол, индометацин, ибупрофен, пироксикам, диклофенак, кромогликат динатрия, нитроглицерин, изосорбит динитрата, верапамил, нифедипин, дилтиазем, дигоксин, морфин, циклоспорины, бупренорфин, лидокаин, диазепам, нитразепам, флуразепам, эстазолам, флунитразепам, триазолам, альпразолам, мидазолам, темазепам, лорметазепам, бротизолам, клобазам, клонезепам, лоразепам, оксазепам, бусипрон, суматриптан, производные эрготамина, циннаризин, антигистаминные средства, ондансетрон, трописетрон, гранизетрон, метоклопрамид, дисульфирам, витамин K, паклитаксел, доцетаксел, камптотецин, SN38, цисплатин и карбоплатин.

В конкретных вариантах осуществления состав лекарственного средства по изобретению может содержать второе лекарственное средство.

Состав лекарственного средства может представлять собой самоэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства.

В одном варианте осуществления состав лекарственного средства содержит

(a) лекарственное средство;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот (например, сложные эфиры глицерина и олеиновой кислоты); и

(c) один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов (например, соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля).

В одном варианте осуществления состав лекарственного средства по изобретению содержит лекарственное средство, PECEOL®, и соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В этом варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутствует в количестве вплоть до приблизительно 30 мМ.

В другом варианте осуществления, состав лекарственного средства содержит

(a) лекарственное средство;

(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот (например, сложные эфиры глицерина и олеиновой кислоты); и

(c) один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот (например, сложные эфиры лауриновой, пальмитиновой и/или стеариновой кислоты и полиэтиленгликоля).

В одном варианте осуществления состав лекарственного средства по изобретению содержит лекарственное средство, PECEOL®, и GELUCIRE® 44/14. В другом варианте осуществления состав содержит лекарственное средство, PECEOL® и GELUCIRE® 50/13. В дополнительном варианте осуществления состав содержит лекарственное средство, PECEOL® и GELUCIRE® 53/10. В этих вариантах осуществления соотношение PECEOL® и GELUCIRE® может составлять от 20:80 до 80:20 (например, 20:80, 30:70; 40:60; 50:50; 60:40; 70:30; и 80:20).

Состав двух репрезентативных лекарственных средств, эконазола и доцетаксела, описан в примерах 3 и 4, соответственно.

В другом аспекте изобретение относится к способу введения лекарственного средства. В способе терапевтически эффективное количество лекарственного средства вводят с использованием состава лекарственного средства, описанного выше. В одном варианте осуществления состав вводят перорально. В другом варианте осуществления, состав вводят местно.

В следующих аспектах изобретение относится к способам лечения состояний и заболеваний, поддающихся лечению лекарственными средствами, полученными в соответствии с настоящим изобретением. В способах эффективное количество состава терапевтического лекарственного средства по изобретению вводят нуждающемуся в этом субъекту. В способах лечения состояний и заболеваний используют составы семейств лекарственных средств и конкретных лекарственных средств, описанных в настоящем документе.

Носитель лекарственного средства

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к композициям для получения лекарственного средства, способам получения композиции и способам получения лекарственного средства для доставки с использованием композиции.

В одном аспекте изобретение относится к композиции для получения лекарственного средство для доставки. Композиция содержит

(a) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и

(b) один или более полиэтоксилированных липидов, таких как один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов или один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот.

В вышеуказанной композиции сложные эфиры глицерина и жирных кислот, содержащие полиэтиленоксид фосфолипиды и содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот являются такими, как описано выше для составов амфотерицина B. Количество компонентов в вышеуказанной композиции является таким, как описано выше для составов амфотерицина B. В конкретных вариантах осуществления композиции могут дополнительно включать глицерин в количестве менее приблизительно 10% по массе.

Композиция преимущественно солюбилизирует труднорастворимые терапевтические лекарственные средства для их доставки. С введением лекарственного средства композиция может обеспечивать самоэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства.

В одном варианте осуществления композиция содержит

(a) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот (например, сложные эфиры глицерина и олеиновой кислоты); и

(b) один или более содержащих полиэтиленоксид фосфолипидов (например, соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля).

В одном варианте осуществления композиция содержит PECEOL® и соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля. В этом варианте осуществления соль дистеароилфосфатидилэтаноламин полиэтиленгликоля присутсвует в количестве вплоть до приблизительно 30 мМ.

В другом варианте осуществления композиция содержит

(a) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот (например, сложные эфиры глицерина и олеиновой кислоты); и

(b) один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот (например, сложные эфиры лауриновой, пальмитиновой и/или стеариновой кислоты и полиэтиленгликоля).

В одном варианте осуществления композиция содержит PECEOL® и GELUCIRE® 44/14. В другом варианте осуществления композиция содержит PECEOL® и GELUCIRE® 50/13. В следующем варианте осуществления композиция содержит PECEOL® и GELUCIRE® 53/10. В этих вариантах осуществления соотношение PECEOL® и GELUCIRE® может составлять от 20:80 до 80:20 (например, 20:80, 30:70; 40:60; 50:50; 60:40; 70:30; и 80:20).

В другом аспекте изобретение относится к способу получения состава лекарственного средства. В одном варианте осуществления способа лекарственное средство комбинируют с композицией, описанной выше. В другом варианте осуществления способа, лекарственное средство комбинируют с одним из компонентов композиции (например, с одним или более сложными эфирами глицерина и жирных кислот) для предоставления первой комбинации с последующим комбинированием первой комбинации с другим компонентом композиции (например, с одним или более содержащими полиэтиленоксид фосфолипидами, или с одним или более содержащими полиэтиленоксид сложными эфирами жирных кислот).

Составы и композиции по изобретению, описанные в настоящем документе, включают (т.е. содержат) перечисленные компоненты. В конкретных вариантах осуществления составы и композиции по изобретению включают перечисленные компоненты и другие дополнительные компоненты, не влияющие на характеристики составов и композиций (т.е. составы и композиции в основном состоят из перечисленных компонентов). Дополнительные компоненты, влияющие на характеристики составов и композиций, включают в себя такие компоненты, как дополнительные лекарственные средства, которые неблагоприятным образом изменяют терапевтический профиль и эффективность составов или композиций или влияют на них, дополнительные компоненты, которые неблагоприятным образом изменяют способность составов и композиций солюбилизировать перечисленные компоненты лекарственного средства или влияют на нее, и дополнительные компоненты, которые неблагоприятным образом изменяют способность составов и композиций увеличивать биодоступность перечисленных компонентов лекарственного средства или влияют на нее. В других вариантах осуществления составы и композиции по изобретению включают только перечисленные компоненты (т.е. состоят из них).

Следующие примеры представлены с целью иллюстрации, а не ограничения изобретения.

ПРИМЕРЫ

Материалы

Следующие материалы использовали в следующих примерах. Амфотерицин B (из Streptomyces sp., Calbiochem, >86% чистоты) закупали из EMD Biosciences (San Diego, CA) и использовали без дополнительной очистки. Амфотерицин B в форме коммерчески доступной дисперсии дезоксихолатных мицелл (FUNGIZONE®) закупали из аптеки Vancouver General Hospital. Фосфолипиды и поли(этиленгликоль)-липиды все были из Avanti Polar Lipids (Alabaster, AL). Растворители качества ВЭЖХ были из Fluka. PECEOL® (глицерилолеат), LABRASOL® (каприлокапроилмакроголглицериды) и GELUCIRE® 44/14, GELUCIRE® 50/13 и GELUCIRE® 53/10 получены из Gattefosse Canada (Mississauga, Ontario). CAPTEX® 355 и CAPMUL® получены из Abitech. Воспроизводимый желудочный сок (SGF) без ферментов получен из 30 мМ NaCl, титрованного до pH 1,2 с помощью 1 н. HCl. Воспроизводимую интестинальную жидкость с ферментами панкреатина (SIFe) получали согласно способу US Pharmacopeia (USP28), как модифицировано Vertzoni et al., Dissolution media simulating the intralumenal composition of the small intestine: physiological issues and practical aspects, J. Pharmacy and Pharm. 56(4):453-462 (2004), и составляли из 0,2 М NaOH, 6,8 г/л моноосновного фосфата калия и 10 г/л панкреатина (Sigma), доводили до pH 7,5 с помощью NaOH. Воспроизводимую интестинальную жидкость голодного состояния с солями желчных кислот (FaSSIF) (Vertzoni et al.) составляли из 3 мМ таурохолата натрия (Sigma), 3,9 г/л дигидрофосфата натрия, 6,2 г/л NaCl в воде, либо в присутствии, либо в отсутствие 0,75 мМ лецитина, и затем титровали до pH 6,5 с помощью NaOH. Воду очищали посредством установки обратного осмоса и фильтровали (0,2 мкм) перед использованием. Все другие химические вещества являлись чистыми для анализа, закупленными из SigmaAldrich.

ПРИМЕР 1

Получение и характеризация репрезентативных составов амфотерицина B

В этом примере описаны получение и характеризация репрезентативных составов амфотерицина по изобретению.

Получение самоэмульгирующихся систем доставки лекарственного средства (SEDDS). Амфотерицин B (AmpB) смешивали с липидными носителями SEDDS комбинированием порошка лекарственного средства с липидами с последующим нагреванием и перемешиванием (45°C в течение 1-2 часов), защищая от света. Любые видимые оставшиеся твердые частицы лекарственного средства удаляли центрифугированием при 10000Чg в течение 15 минут.

Получение составов AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG. AmpB полностью растворяли в смеси PECEOL® при 5 мг/мл, к этому добавляли 95% этанол (1:3 об./об.), так же как 15 мМ дистеароилфосфатидилэтаноламин (DSPE)-поли(этиленгликоль)_n (PEG) (где n представляет собой среднюю молекулярную массу PEG, 350, 550, 750 или 2000). Концентрация AmpB составляла 3 мг/мл в этаноле и 5 мг/мл в PECEOL®, соответственно, чтобы позволить полную солюбилизацию лекарственного средства в исходной смеси. Раствор перемешивали при 40°C в течение 1 часа, защищая от света, для растворения AmpB и липидов, с последующим выпариванием растворителя при 40°C в вакууме (65 мбар (6500 Па)) в течение нескольких часов в роторном испарителе. Считали, что этанол полностью удален, по достижению исходной массы образца, содержащего AmpB, PECEOL® и липиды, измеренной непосредственно перед добавлением этанола. Получали прозрачную желтую смесь без твердых частиц. После этой переработки не наблюдали деградации или изменений формы спектра AmpB.

Характеризация стабильности амфотерицина B. Концентрации лекарственного средства измеряли обращеннофазовой ВЭЖХ/УФ или спектрофотометрией УФ (λ=407 нм). Для анализа ВЭЖХ AmpB образцы растворяли в 20% (об./об.) метанола в ДМСО и 20 мкл инъецировали на колонку Luna 5 мкм (2,0Ч150 мм) C18 (Phenomenex) при 30°C. Подвижная фаза представляла собой 10 мМ ацетат натрия и ацетонитрил с использованием градиентной программы в системе Waters 996 ВЭЖХ, с детекцией посредством детектора на фотодиодной матрице Waters (λ=408 нм). Время прогона составляло 13 минут и время удержания составляло приблизительно 8,5 минуты. Стабильность AmpB против декомпозиции или суперагрегации при мягком нагревании липидных носителей в ходе солюбилизации лекарственного средства и при хранении (21°C) в течение 14 суток оценивали по анализу сдвига УФ-спектра с использованием УФ/видимого спектрофотометра Thermoscan с λ=250-500 нм.

Растворимость, физическая стабильность и самоэмульгация. Составы SEDDS (самоэмульгирующиеся системы доставки лекарственного средства) обладали растворимостью AmpB, лежащей в диапазоне от 100-500 мкг/мл, как измерено посредством ВЭЖХ, по сравнению с незначительной растворимостью в водном растворе (pH 7). Для тестированных самоэмульгирующихся смесей липидов, 3 мг порошка AmpB комбинировали с 0,3 мл (10 мг/мл) комбинации различных липидов и смесь перемешивали в 1 мл флаконе из желтого стекла при 37°C в течение 2 часов. После смешивания образцы центрифугировали при 10000Чg в течение 15 минут для удаления любых оставшихся твердых частиц лекарственного средства. Эта процедура не осаждает липидные компоненты. Затем образцы диспергировали как разведение 1:1000 (об./об.) в 150 мМ NaCl с интенсивным перемешиванием при 37°C в течение 30 минут.

Результаты для AmpB SEDDS на основе CAPTEX® 355 обобщены в таблице 1. Результаты для AmpB SEDDS PECEOL®/GELUCIRE® обобщены в таблице 2.

Таблица 1
Предварительные SEDDS амфотерицина B на основе CAPTEX® 355 Компоненты (% об./об.) Эффективный гидродинамический диаметр (нм) (коэффициент полидисперсности) Субпопуляции CAPTEX® 355 Tween 80 CAPMUL® MCM NaH₂PO₄ (10 мМ, pH 4,0) Диапазон диаметров (нм) Относительное соотношение 50 17 31 2 186 (0,232) 49-69 79           196-277 21 53 5 40 2 237 (0,278) 24-44 73           111-242 12           614-1334 15 58 10 30 2 216 (0,258) 44-64 51           154-255 5           541-893 44 63 5 30 2 223 (284) 62-89 19           168-241 6           413-648 75 70 10 18 2 168 (0,215) 50-65 82           199-273 18 50 17 31 2 179 (0,24) 55-71 80           214-297 20

Определение распределения частиц по размерам проводили после диспергирования смеси 1:1000 (об./об.) в 150 мМ NaCl при 37°CЧ30 минут. Относительное соотношение основано на распределении кумулятивных вероятностей размеров частиц.

Таблица 2
SEDDS амфотерицина B на основе PECEOL®/GELUCIRE® Компоненты (% об./об.) Эффективный гидродинамический диаметр (нм) (полидисперсность) Субпопуляции (нм) Относительное соотношение PECEOL® GELUCIRE® 44/14 70 30 156 20-43 55     (0,291) 75-132 16       307-621 29 50 50 314 35-62 56     (0,319) 165-332 5       768-1345 59 30 70 252 28-50 63     (0,294) 135-241 7       568-1160 30 PECEOL® GELUCIRE® 50/13   70 30 158 30-47 55     (0,279) 94-168 17       336-599 28 50 50 192 19-22 25     (0,301) 71-145 24       396-704 51 30 70 396 50-99 25     (0,265) 228-527 63       1703-2382 12

Определение распределения частиц по размерам проводили после диспергирования смеси 1:1000 (об./об.) в 150 мМ NaCl при 37°CЧ30 минут. Относительное соотношение основано на распределении кумулятивных вероятностей размеров частиц.

Как показано в таблицах 1 и 2, эффективный гидродинамический диаметр составлял 168-237 нм при равновесии для CAPTEX® 355/CAPMUL® MCM/Tween 80 (таблица 1) и 58-396 нм для PECEOL®/GELUCIRE® 44/14 (таблица 2), но не для составов на основе соевого масла, PECEOL®/LABRASOL® или PECEOL®/GELUCIRE® 50/13 (>1 мкм, данные не представлены). Важно, что наблюдали множество субпопуляций размера капель эмульсии. Для SEDDS на основе CAPTEX® 355 эти субпопуляции включали диаметры, согласующиеся с размером мицелл (например, 20-50 нм), и все популяции оставались в субмикронном диапазоне (таблица 1). Для смесей PECEOL®/GELUCIRE® 44/14 наблюдали три субпопуляции, включая диапазоны 20-50 нм, 1000-200 нм (незначительная популяция) и субпопуляции ближе к 1 мкм в диаметре. Соотношение очень маленьких и больших капель менялось из-за соотношения компонентов. В случае PECEOL®/GELUCIRE® 50/13 наблюдали также три субпопуляции со сходными диапазонами размеров частиц, как и для PECEOL®/GELUCIRE® 44/14, хотя существовала тенденция к немного большему количеству частиц в субпопуляции с наибольшим диаметром, что также увеличивалось при увеличении доли GELUCIRE® 50/13 (таблица 2). Репрезентативные отдельные образцы полностью описаны в таблицах, однако, следует отметить, что для повторных образцов показали постоянство их эффективных диаметров и диапазонов размера частиц в субпопуляциях. Проводили визуальные наблюдения относительно смешиваемости, разделения фаз и осаждения в течение нескольких суток при температуре окружающей среды (21°C). Более составов SEDDS оставались прозрачными и гомогенными. Например, составы SEDDS на основе CAPTEX® все образовывали полупрозрачные смеси после смешивания с 150 мМ NaCl, которые являлись гомогенными для всех соотношений комбинаций CAPTEX®, Tween 80 и фосфата натрия (таблица 1). Комбинации PECEOL® и GELUCIRE® 44/14 в диапазоне 70/30-30/70 (об./об.) образовывали тонкую эмульсию, в то время как некоторое частичное отверждение наблюдали через 24 часа при 21°C при использовании PECEOL® с GELUCIRE® 50/13, что согласуется с высокой температурой плавления GELUCIRE® 50/13 (50°C).

Растворимость AmpB в составах PECEOL®/DSPE-PEG и эмульгация в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния. Для комбинации PECEOL® и DSPE-PEG_n, где средняя молекулярная масса PEG менялась от 350 до 2000, показали даже большую солюбилизацию AmpB (5 мг/мл) по сравнению с предварительными составами SEDDS. При концентрациях ≥10 мг/мл, некоторая преципитация AmpB происходила после стояния при температуре окружающей среды (21°C) в течение 24 часов. При диспергировании в SGF при 37°C при 0,5 мг/мл с последующим перемешиванием в течение 30 минут составы AmpB PECEOL®/DSPE-PEG₂₀₀₀ образуют прозрачные эмульсии с размерами частиц 300-500 нм и без видимого преципитата. В некоторых случаях, по-видимому, существовали две популяции субмикронных частиц, с диаметром некоторых 100 нм, а других более сотен нм.

Стабильность AmpB в воспроизводимых желудочном соке и интестинальных жидкостях. Составы амфотерицина B в PECEOL®/DSPE-PEG (5 мг/мл) получали в трех повторах и инкубировали в воспроизводимом желудочном соке (SGF) как разведение 1:10 (об./об.) или в воспроизводимой интестинальной жидкости в присутствии и в отсутствие лецитина или в присутствии ферментов (как описано выше) как разведение 1:50 (об./об.) при 37°C с энергичным перемешиванием. Время инкубации составляло 0, 10, 30 или 120 минут. В каждой временной точке концентрацию AmpB определяли спектрофотометрически с использованием трех повторов измерения поглощения (407 нм) после полной солюбилизации в 95% этаноле для осветления образцов, таким образом также разводя образцы до линейного диапазона при анализе УФ. Значения нормализовали по фону при 330 нм и рассчитывали концентрации на основании стандартной кривой для амфотерицина B, полученной в жидкости каждого типа (r²>0,99). На линейность стандартной кривой и диапазон концентраций стандартов, полученных в PECEOL®/DSPE-PEG, не влияли тип воспроизводимой GI или время инкубации, однако, отдельные три повтора стандартных кривых получали для каждого состава, содержащего различные молекулярные массы DSPE-PEG (350, 550, 750 или 2000).

Химическую стабильность и состояние агрегации (мономерный по сравнению с самоассоциированным) AmpB оценивали в USP воспроизводимом желудочном соке, так же как в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния в присутствии и в отсутствие солей желчных кислот и панкреатина. Как описано выше, AmpB в одном PECEOL® или в составах PECEOL®/DSPE-PEG (PEG молекулярной массы 350, 550, 750 или 2000) получали при 5 мг/мл и инкубировали в воспроизводимых GI жидкостях в течение общего периода 2 часа. В 30-минутных интервалах оценивали концентрацию AmpB и УФ-спектры. Для AmpB показали 5 главных спектрофотометрических пиков в УФ-диапазоне. Пики 4 и 5 обладали наибольшей амплитудой мономерного AmpB, в то время как присутствовал сдвиг налево, когда AmpB становился самоассоциированным. На фиг.3A показаны типичные УФ-спектры AmpB в PECEOL®/DSPE-PEG на протяжении линейного диапазона в анализе УФ, иллюстрируя преобладание мономерного AmpB. Эта картина сохранялась, когда молекулярная масса PEG менялась от 350 до 2000 (данные не представлены). Такую же картину спектров наблюдали также после инкубации в SGF, что приводило также к почти идентичным стандартным кривым для различных препаратов AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG_n, как показано на фиг.3B.

Относительно химической стабильности, существовала тенденция к немного меньшей стабильности лекарственного средства в составах, полученных с DSPE-PEG 350 или 550, по сравнению с DSPE-PEG 750 или 2000. Один AmpB (например, чистый порошок) являлся нерастворимым в этих средах, и таким образом, его нельзя надлежащим образом использовать в качестве контроля при сравнимых концентрациях из-за отягощающих факторов увеличивающегося растворения с течением времени в противовес деградации. AmpB в одном PECEOL®, полученный в других случаях таким же способом, включали в качестве отрицательного контроля для стабилизирующего эффекта DSPE-PEG в составах. Для AmpB/PECEOL® показали тенденцию к небольшому уменьшению стабильности лекарственного средства в SGF по сравнению с составами, содержащими DSPE-PEG 350 или 2000, как показано на фиг.4. На фиг.5 показано, что стабильность AmpB в воспроизводимой интестинальной жидкости, содержащей соли желчных кислот либо в отсутствие лецитина (фиг.5A), либо в присутствии лецитина (фиг.5B), меньше для AmpB в одном PECEOL® или в PECEOL®/DSPE-PEG 350 по сравнению с составами с использованием PEG с более высокими молекулярными массами.

На фиг.6 проиллюстрирована стабильность AmpB в воспроизводимой интестинальной жидкости с панкреатином, содержащей деструктивные ферменты. Эти данные позволяют предполагать лучшую стабильность составов, содержащих DSPE-PEG 750 или 2000, по сравнению с 350 или 550 или с одним PECEOL®. При оценке деградации AmpB в одном PECEOL®, однако, является важным отметить, что наблюдали плохое перемешивание AmpB/PECEOL® в воспроизводимых жидкостях GI; этот состав проявлял тенденцию всплывать. Не наблюдали изменений, связанных с превращением мономерной формы по сравнению с агрегированным AmpB, таких как разница в соотношениях высоты специфических пиков на УФ-спектрах или общая картина, после полного времени инкубации в различных средах, описанных в настоящем документе (данные не представлены).

Анализ размера частиц. Анализ распределения размера частиц по динамическому рассеянию света (аппарат ZetaPALS, Brookhaven Laboratories, New York, действующий при 650 нм) использовали для оценки свойств самоэмульгации. Размер капель эмульсии измеряли в физиологическом солевом растворе (150 мМ NaCl) с последующей инкубацией 30 минут при 37°C. Для составов AmpB с PECEOL®/DSPE-PEG, средний диаметр измеряли при 37°C каждые 10 минут в предварительных экспериментах и обнаружили, что средний диаметр достигает равновесия через 1 час и остается стабильным. Стабильность лекарственного средства измеряли через 2 часа, таким образом, что 2 часа являлось временной точкой, используемой для представленных анализов размера частиц для образцов, инкубированных в воспроизводимых интестинальных жидкостях. Две модели анализа данных являются доступными в программном обеспечении ZetaPALS (версии 3.88), рассчитывающем средневзвешенный эффективный гидродинамический диаметр на основе логарифмически нормального распределения и мультимодального распределения для идентификации субпопуляций, центрированных на двух или более средних диаметрах. Описаны оба значения, где детектировали бимодальное или мультимодальное распределения, с долей каждой субпопуляции, указанной на основе анализа кумулятивного распределения (программное обеспечение ZetaPALS, версия 3.88).

Изменение молекулярной массы DSPE-PEG не оказывало явного эффекта на размер капель эмульсии в воспроизводимой интестинальной жидкости (таблица 3) с последующим перемешиванием в течение периода 2 часов при 37°C. Субмикронные средние диаметры наблюдали в диапазоне 300-600 нм с достаточно широкой полидисперсностью. Получили также бимодальное распределение размера частиц, с небольшой субпопуляцией, центрированной в субмикронном диапазоне (150-300 нм) и другой, центрированной в диапазоне 1-2 мкм. AmpB в одном PECEOL® также образует капли сходного размера и распределения в воспроизводимой интестинальной жидкости. Эти измерения размера частиц проводили в отсутствие лецитина, который образует очень большие капли эмульсии в используемых условиях смешивания и придает непрозрачность образцам. Результаты представлены в таблице 3.

Таблица 3
Размер частиц состава амфотерицина B в PECEOL®/DSPE-PEG Состав: PECEOL®/DSPE-PEGnn Эффективный диаметр (нм) логарифмически нормальное распределение Коэффициент полидисперсности Субпопуляции (нм) Относительное соотношение 350 370 0,344 129-186 20       888-1282 80 550 600 0,402 108-171 20       1206-1909 80 750 596 0,395 134-210 18       1245-3400 82 2000 533 0,392 119-200 30       1390-2330 70 AmpB в одном PECEOL® 351 0,333 128-194 20     738-1120 80

Анализ распределения размера частиц по динамическому рассеянию света AmpB в PECEOL®/DSPE-PEG, где молекулярная масса PEG менялась от 350 до 2000, с последующей инкубацией 2 часа в воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния (pH 6,8) при 0,5 мг AmpB/мл. Относительное соотношение основано на кумулятивном распределении размера частиц.

ПРИМЕР 2

Эффективность репрезентативных составов амфотерицина B для лечения грибковых инфекций: Aspergillus fumigatus и Candida albicans

В этом примере описана эффективность репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению для лечения грибковых инфекций. Исследования на животных проводили для определения эффективности репрезентативных составов амфотерицина B по изобретению для лечения крыс, инфицированных Aspergillus fumigatus или Candida albicans.

1. Aspergillus fumigatus (2,7-3,3Ч10⁷ колониеобразующих единиц [КОЕ]) инъецировали через яремную вену; через 48 часов самцам белых крыс Sprague-Dawley (350-400 г) вводили однократно через зонд AmpB на основе моноглицерид-DSPE/PEG2000 (10 мг AmpB/кг; n=7), дважды в сутки в течение 2 последовательных суток, или однократную внутривенную (i.v.) дозу ABELCET® (5 мг AmpB/кг; n=4), или физиологический солевой раствор (необработанные контроли; n=9) один раз в сутки в течение 2 последовательных суток. Органы собирали при умерщвлении (сутки 3) и перерабатывали (смотрите ниже). Кровь отбирали до инокуляции (ноль), перед дозированием (0 часов) и через 48 часов после обработки для анализа креатинина в плазме. Самцов белых крыс Sprague-Dawley (350-400 г) закупали из Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Крысам хирургически имплантировали инфузионную систему (Access Technologies) и катетер с доступом к венозной крови, способом, сходным со способом для кроликов. Крыс содержали в отделе для ухода за животными с 12-часовым циклом свет-темнота и с контролируемой температурой и влажностью. Крысам обеспечивали доступ по желанию к воде и стандартному корму для крыс (Purina Rat Chow) в течение продолжительности исследования. Инфузионные системы ежесуточно заполняли нормальным солевым раствором и гепарином для предотвращения закупорок. Животных содержали в соответствии с принципами, введенными в действие Канадским советом по уходу за животными и University of British Columbia.

Инокулят Aspergillus fumigatus. A. fumigatus собирали из пула пациентов с любым диссеминированным аспергиллезом (BC Centre for Disease Control). Культуры выращивали на агаре Сабуро с декстрозой в течение 48 часов при 37°C. Конидии выделяли промыванием агара апирогенным солевым раствором. Конидии суспендировали посредством встряхивания со стеклянными бусинами и разводили апирогенным солевым раствором до получения между 2,7 и 3,3Ч10⁷ конидий в 300 мкл солевого раствора. Конидии подсчитывали с использованием гемоцитометра и выполняли серийные разведения аликвоты 100 мкл, и аликвоты рассевали на чашки с агаром Сабуро с декстрозой на 48 часов при 37°C для определения числа жизнеспособных конидий и чистоты инокулята. Среднее процентное содержание жизнеспособных конидий в инокуляте составляло 62% ±19. Ни одна из суспензий спор не являлась контаминированной каким-либо другим организмом. Крыс инокулировали 300 мкл через постоянную инфузионную систему за 48 часов перед началом обработки, чтобы позволить развитие аспергиллеза.

2. Candida albicans (1-1,35Ч10⁶ колониеобразующих единиц [КОЕ]) инъецировали через яремную вену; через 48 часов самцам белых крыс Sprague-Dawley (350-400 г) вводили однократно через зонд AmpB на основе моноглицерид-DSPE/PEG2000 (10 мг AmpB/кг; n=7) дважды в сутки в течение 2 последовательных суток, или однократную внутривенную (i.v.) дозу ABELCET® (5 мг AmpB/кг; n=3), или физиологический солевой раствор (необработанные контроли; n=9) один раз в сутки в течение 2 последовательных суток. Органы собирали при умерщвлении (сутки 3) и перерабатывали (смотрите ниже). Кровь отбирали до инокуляции (ноль), перед дозированием (0 часов) и через 48 часов после обработки для анализа креатинина в плазме. Самцов белых крыс Sprague-Dawley (350-400 г) закупали из Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Крысам хирургически имплантировали инфузионную систему (Access Technologies) и катетер с доступом к венозной крови, способом, сходным со способом для кроликов. Крыс содержали в отделе для уходя за животными с 12-часовым циклом свет-темнота и контролируемой температурой и влажностью. Крысам обеспечивали доступ по желанию к воде и стандартному корму для крыс (Purina Rat Chow) в течение продолжительности исследования. Инфузионные системы ежесуточно заполняли нормальным солевым раствором и гепарином для предотвращения закупорок. Животных содержали в соответствии с принципами, введенными в действие Канадским советом по уходу за животными и University of British Columbia.

Инокулят Candida albicans. Candida albicans собирали из пула пациентов с любым диссеминированным кандидозом (BC Centre for Disease Control). Культуры выращивали на агаре Сабуро с декстрозой в течение 48 часов при 37°C. Конидии выделяли промыванием агара апирогенным солевым раствором. Конидии суспендировали посредством встряхивания со стеклянными бусинами и разводили апирогенным солевым раствором до получения между 2,7 и 3,3Ч10⁷ конидий в 300 мкл солевого раствора. Конидии подсчитывали с использованием гемоцитометра и выполняли серийные разведения аликвоты 100 мкл, и аликвоты рассевали на чашки с агаром Сабуро с декстрозой на 48 часов при 37°C для определения числа жизнеспособных конидий и чистоты инокулята. Среднее процентное содержание жизнеспособных конидий в инокуляте составляло 62% ±19. Ни одна из суспензий спор не являлась контаминированной каким-либо другим организмом. Крыс инокулировали 300 мкл через постоянную инфузионную систему за 48 часов перед началом обработки, чтобы позволить развитие аспергиллеза.

3. Способы работы с животными. Образцы по одному мл цельной крови отбирали в педиатрические пробирки для сбора образцов (3,6 мг K₂ ЭДТА) до инфекции (ноль), перед дозированием (0 часов) и через 48 часов после обработки (48 часов). Все образцы цельной крови перемешивали переворачиванием и плазму отделяли центрифугированием (15 минут, 3000 об./мин. при 4°C). Образцы плазмы хранили при -20°C для анализа креатинина. После отбора образца крови через 48 часов крыс подвергали эвтаназии с помощью избыточной внутривенной дозы (1 мл) EUTHANYL®, (пентобарбитал натрия, 240 мг/мл). Образцы ткани селезенки, правой почки, печени, легкого, сердца и мозга собирали, взвешивали и помещали в стерильные контейнеры. Добавляли нормальный солевой раствор, 1 мл/г образца и гомогенизировали (Heidolph diax 900). Аликвоту гомогената органа сохраняли при комнатной температуре до рассева на чашки, и остаток образца помещали на -80°C до анализа ВЭЖХ.

Выбор колониеобразующей единицы (КОЕ) в качестве индикатора противогрибковой активности основан на ранее опубликованной работе (K.M. Wasan et al., Assessing the antifungal activity and toxicity profile of Amphotericin B Lipid Complex (ABLC; ABELCET®) in combination with Caspofungin in experimental systemic aspergillosis, Journal of Pharm. Sci. 2004; 93(6): 1382-1389). Каждую из аликвот по 100 мкл концентрированного гомогената органа и разведения 1:10 (стерильным солевым раствором) рассевали распределением по чашкам на чашки с агаром Сабуро с декстрозой в двух повторах. Через 48 часов инкубации при 37°C полученные колонии A. fumigatus или C. albicans подсчитывали и усредняли по двум повторам чашек. Предел детекции анализа составлял 0,1Ч10² КОЕ/мл гомогената.

Почечную токсичность оценивали опосредованно, как описано ранее (K.M. Wasan et al., Assessing the antifungal activity and toxicity profile of Amphotericin B Lipid Complex (ABLC; ABELCET®) in combination with Caspofungin in experimental systemic aspergillosis, Journal of Pharm. Sci. 2004; 93(6):1382-1389), определением концентрации креатинина в плазме с использованием коммерчески доступного набора (Sigma Chemicals Co.). Фон определяли измерением концентрации креатинина в нулевом образце и сравнивали с концентрацией креатинина в плазме в образцах для 0 часов (перед дозированием), для 48 часов. Для целей этого исследования, 50% или большее увеличение концентрации креатинина в плазме по сравнению с фоном считали признаком почечной токсичности.

4. Статистический анализ. Число КОЕ в органах и концентрации креатинина в плазме до и после введения обработки сравнивали между всеми группами обработки вариационным анализом (INSTAT2; GraphPad Inc.). Критические отличия оценивали посредством апостериорных тестов Тьюки. Сравнивали значения креатинина в сыворотке до обработки и через 48 часов после обработки с использованием ANOVA для повторных измерений с апостериорным тестом Тьюки для определения критических различий (Prism 4; Graphpad Inc.). Различие считали значимым, если вероятность объяснения результатов случайностью уменьшалась до менее 5% (p<0,05). Все данные выражали как среднее ± стандартная ошибка среднего.

Противогрибковая активность и почечная токсичность у крыс, инфицированных Aspergillus fumigatus. Пероральная обработка AmpB на основе PECEOL®/DSPE/PEG2000 значимо уменьшала общие концентрации грибковых КОЕ во всех органах, суммированных вместе как 80%, по сравнению с необработанными контролями (таблица 4) без значимых изменений уровней креатинина в плазме (таблица 5). Обработка ABELCET® значимо уменьшала общие концентрации грибковых КОЕ, выделенных из всех органов, суммированные вместе, до 88% по сравнению с необработанными контролями (таблица 4) без значимых изменений уровней креатинина в плазме (таблица 5).

Таблица 4
Грибковый анализ инфицированных Aspergillus fumigates самцов крыс Sprague Dawley, обработанных перорально через зонд дозами нормального солевого раствора (необработанный контроль), амфотерицином-DSPE-PEG200, вводимым в PECEOL® (10 мг/кг дважды в сутки Ч2 суток) или однократной внутривенной дозой ABELCET® (ABLC; 5 мг/кг ежесуточно Ч2 суток). Всем крысам инъецировали 2,9-3,45Ч10 ⁷ жизнеспособных колониеобразующих единиц (КОЕ)/0,3 мл/крысу Aspergillus fumigatus до начала обработки Группы обработки Инфицированные ткани (КОЕ/мл гомогенизированных тканей)   Мозг Легкие Сердце Печень Селезенка Почка Все органы Необработанные контроли (n=9) 3538±1810 74±30 101±63 308±114 1163±772 364±119 5549±2498 ABLC 5 (n=4) 550±445^а 10±4^а 15±3^а 18±5^а 88±44^а 10±0^а 690±419^а AmpB DSPE-PEG-2000 (n=7) 736±186^а 51±18 20±4 180±48 107±32^а 44±10^а 1139±221^{а a}p<0,05 по сравнению с необработанными контролями с использованием T-теста Стьюдента; все данные представлены как среднее ±SEM.
*Следует отметить: предшествующие исследования показали, что один AmpB не обладает поддающимся измерению накоплением при дозах, используемых в настоящей заявке. ABLC: липидный комплекс амфотерицина B.

Таблица 5
Концентрации креатинина в плазме до инфекции (ноль), перед дозированием (0 часов) и через 48 часов после обработки (48 часов)   Ноль 0 48 Креатинин (мг/дл) 0,4 0,5 0,9 Контроль (n=9) ±0,1 ±0,1 ±0,2 AmpB/DSPE-PEG2000/PECEOL® 0,6 0,6 0,5 10 мг/кг (перорально) (n=7) ±0,2 ±0,2 ±0,1   0,3 0,4 0,5 ABLC 5 мг/кг-IV (n=4) ±0,2 ±0,1 ±0,1 Данные представлены как среднее ±SEM

Результаты для Candida albicans являются сходными с результатами для Aspergillus fumigatus. Грибковый анализ почек инфицированных Candida albicans крыс, обработанных репрезентативным составом AmpB по изобретению, показал значимое уменьшение общей концентрации грибковых КОЕ по сравнению в контролем. На фиг.7 сравнивают концентрацию Candida albicans (КОЕ/мл) в почках крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл). На фиг.8 сравнивают концентрацию Candida albicans (КОЕ/мл) в органах крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг), и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл). Эффективность репрезентативного состава AmpB для уменьшения концентрации Candida albicans являлась сравнимой с эффективностью ABELCET®. Обработка репрезентативным составом AmpB значимо уменьшала общие концентрации грибковых КОЕ, выделенных из почек, без значимых изменений уровней креатинина в плазме.

На фиг.9 сравнивают креатинин в плазме (мг/дл) у крыс, инфицированных Candida albicans и обработанных контрольным составом, составом AmpB/PECEOL® (10 мг/кг), репрезентативным составом AmpB по изобретению (AmpB/PECEOL®/DSPE-PEG-2000, обозначенный AmpB/DSPE-PEG-2000, 10 мг/кг) и внутривенным ABELCET® (обозначенный ABLC, 5 мг/мл) (ноль, 0 часов и 48 часов). Не наблюдали почечной токсичности, как измерено по уровням креатинина в плазме.

ПРИМЕР 3

Репрезентативный состав эконазола

В этом примере описаны получение и характеризация репрезентативного состава эконазола по изобретению. Растворимость эконазола в воде составляет <1 мг/мл (19-66°F (-7-19°C)), и растворимость в этаноле составляет ≤20 мг/мл.

Составы нитрата эконазола (10 и 15 мг нитрата эконазола/мл состава) получали способом, сходным со способом получения состава амфотерицина B, описанным в примере 1. К порошкам нитрата эконазола (Sigma) и DSPE-PEG2000 (15 мМ) добавляли при 45°C PECEOL® и полученную смесь встряхивали в течение 2-4 часов при 45°C в инкубаторе с встряхиванием. Этанол не использовали. Образцы центрифугировали, чтобы визуализировать несолюбилизированный материал. Затем смесь оценивали по прозрачности с течением времени.

Продукт состава нитрата эконазола инкубировали при 37°C в течение 2 часов в воспроизводимом желудочном соке (разведение 1:100 об./об.), воспроизводимой интестинальной жидкости голодного состояния и воспроизводимой интестинальной жидкости сытого состояния в присутстствии и в отсутствие панкреатина (все в разведении 1:500 об./об.) для оценки свойств эмульгации. Размер капель эмульсии оценивали немедленно по динамическому рассеянию света (Zetasizer, Malvern Instruments).

Составы оценивали по прозрачности с течением времени. Результаты обобщены в таблице 6.

Таблица 6
Внешний вид составов эконазола Состав эконазола Внешний вид   Сутки 0 24 часа 4 суток 5 суток 10 мг/мл Прозрачный Прозрачный Прозрачный Прозрачный >5 суток 15 мг/мл Некоторое количество твердых частиц, остающееся после центрифугирования Все еще прозрачная часть с твердыми частицами Не тестировали Не тестировали

Анализ размера капель эмульсии проводили для состава эконазола (10 мг/мл) в воспроизводимых желудочном соке и интестинальных жидкостях (SGF, FaSSIF, FeSSIF и FeSSIFe), со средними на основании анализа пиков по объему. Размер капель эмульсии в таблице относится к среднему и половине ширины пика, в диапазоне для каждой субпопуляции. Результаты обобщены в таблице 8.

Таблица 7
Размер капель эмульсии для состава эконазола Среда Коэффициент разбавления Меньший размер (нм) Больший размер (нм) Среднее (нм) SGF 100 30 291 72±46 (71%) и 310±200 (29%) FaSSIF 500 59 333 123±65 (44%) и 342±138 (56%) FeSSIF 500 66 1557 386±182 (10%); 726±143 (5%) и 2503±565 (85%) FeSSIFe 500 510 >5000 650±150 (75%) >5 мкм (25%)

SGF: воспроизводимый желудочный сок

FaSSIF: воспроизводимая интестинальная жидкость голодного состояния

FeSSIF: воспроизводимая интестинальная жидкость сытого состояния

FeSSIFe: воспроизводимая интестинальная жидкость сытого состояния с панкреатическими ферментами (Sigma)

Композиция воспроизводимых желудочного сока/интестинальных жидкостей (1 л), используемая в исследованиях эмульгации для состава эконазола.

SGF (воспроизводимый желудочный сок):

Дистиллированная вода: 1 л

Хлорид натрия: 30 мМ (1740 мг/л)

Соляная кислота: по необходимости для доведения pH до 1,2.

FaSSIF (воспроизводимая интестинальная жидкость голодного состояния):

Двухосновный фосфат калия: 3,9 г

Дистиллированная вода: 1 л

Таурохолат натрия: 3 мМ (1613,04 мг/л)

Фосфатидилхолин яйца: 0,75 мМ (570,07 мг/л)

Хлорид калия: 7,7 г

Соляная кислота: по необходимости для доведения pH до 6,5.

FeSSIF (воспроизводимая интестинальная жидкость сытого состояния):

Дистиллированная вода: 1 л

Уксусная кислота: 8,65 г =9,073 мл

Таурохолат натрия: 15 мМ (8065,2 мг/л)

Фосфатидилхолин яйца: 3,75 мМ (2850,34 мг/л)

Хлорид калия: 15,2 г

Соляная кислота или гидроксид натрия: по необходимости для доведения pH до 5,0.

FeSSIF с панкреатическими ферментами:

Дистиллированная вода: 1 л

Таурохолат натрия: 7,5 мМ (4032,6 мг/л)

Фосфатидилхолин яйца: 2,0 мМ (1520,18 мг/л)

Глицерилмоноолеат: 5,0 мМ (1782,72 мг/л)

Олеат натрия: 0,8 мМ (241,96 мг/л)

Панкреатин: 1000 ед. липазы

Уксусная кислота: 9,073 мл

Хлорид калия: 15,2 г

Соляная кислота или гидроксид натрия: по необходимости для доведения pH до 5,8.

ПРИМЕР 4

Репрезентативный состав доцетаксела

В этом примере описано получение репрезентативного состава доцетаксела по изобретению. Растворимость доцетаксела в воде составляет приблизительно 10-25 мкг/мл.

Состав доцетаксела (10 мг доцетаксела/мл состава) получали объединением порошка доцетаксела (Fluka) с порошком DSPE-PEG2000 и смачиванием объединенных порошков 100% этанолом до 10% об./об. конечного намеченного объема. Этанол не солюбилизировал порошки. К смоченным порошкам добавляли PECEOL®, который предварительно нагревали до 50°C, с последующим перемешиванием с встряхиванием в течение 2 минут с получением в результате прозрачного раствора. Этанол не удаляли.

Этанол использовали с доцетакселом в качестве сорастворителя в этом составе для максимизации растворимости. Доцетаксел является плохо растворимым в воде, однако, обладает полярными областями. Состав оценивали по прозрачности с течением времени. Результаты обобщены в таблице 8.

Таблица 8
Внешний вид составов доцетаксела Состав доцетаксела Внешний вид   Сутки 0 24 часа 4 суток 5 суток 10 мг/мл при 4°C - Отвержденный при 4°C, но прозрачный после быстрого плавления Отвержденный при 4°C, но прозрачный после быстрого плавления Отвержденный при 4°C, но прозрачный после быстрого плавления 10 мг/мл при 21°C Прозрачный Прозрачный Прозрачный Прозрачный 10 мг/мл при -20°C - Отвержденный при -20°C, но прозрачный после быстрого плавления Отвержденный при -20°C, но прозрачный после быстрого плавления Отвержденный при -20°C, но прозрачный после быстрого плавления 10 мг/мл при 50°C - Прозрачный Прозрачный с желтым оттенком* Прозрачный с желтым оттенком* *Согласуется с изменением цвета, наблюдаемым для одного PECEOL® при 50°C для этого промежутка времени.

Составы доцетаксела по изобретению включают в себя составы, как описано выше, но не содержащие этанол.

В то время как иллюстративные варианты осуществления проиллюстрированы и описаны, понятно, что в них можно вносить различные изменения без отклонения от содержания и объема изобретения.

Изобретение относится к составу для доставки амфотерицина В и других лекарственных средств, где состав содержит активный ингредиент, один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот и один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот, где соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно от 20:80 до приблизительно 80:20 об./об. Состав применяется для создания лекарственного средства с улучшенной биодоступностью для лечения инфекционных заболеваний. 7 н. и 6 з.п. ф-лы, 21 ил., 8 табл., 4 пр.

1. Состав для доставки амфотерицина В, содержащий
(a) амфотерицин В, необязательно в количестве от приблизительно 0,5 до приблизительно 10 мг/мл состава;
(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот;
(c) один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот; и необязательно
(d) глицерин в количестве менее приблизительно 10% по массе, где соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет от приблизительно 20:80 до приблизительно 80:20 об./об.

2. Состав по п.1, где сложные эфиры глицерина и жирных кислот содержат от приблизительно 32 до приблизительно 52% по массе моноглицеридов жирных кислот, от приблизительно 30 до приблизительно 50% по массе диглицеридов жирных кислот, от приблизительно 5 до приблизительно 20% по массе триглицеридов жирных кислот и более приблизительно 60% по массе моно-, ди- и триглицеридов олеиновой кислоты.

3. Состав по п.1, где содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот С8-С22, предпочтительно сложный эфир полиэтиленоксида и насыщенных жирных кислот С12-С18, предпочтительно сложный эфир полиэтиленоксида, выбранный из группы, состоящей из сложных эфиров лауриновой кислоты, сложных эфиров пальмитиновой кислоты, сложных эфиров стеариновой кислоты и их смесей, и предпочтительно, где содержащие полиэтиленоксид сложные эфиры жирных кислот содержат полиэтиленоксид, обладающий средней молекулярной массой от приблизительно 750 до приблизительно 2000.

4. Состав по п.1, где состав представляет собой самоэмульгирующуюся систему доставки лекарственного средства.

5. Применение состава по п.1 для получения лекарственного средства для введения амфотерицина В нуждающемуся в этом субъекту, где лекарственное средство необязательно предназначено для перорального или местного применения.

6. Применение терапевтически эффективного количества состава амфотерицина В по п.1 для получения лекарственного средства для лечения у нуждающегося в этом субъекта инфекционного заболевания, поддающегося лечению введением амфотерицина В, где лекарственное средство необязательно предназначено для перорального или местного применения.

7. Применение по п.6, где инфекционное заболевание представляет собой грибковую инфекцию, такую как аспергиллез, бластомикоз, кандидоз, кокцидиоидомикоз, критококкоз, гистоплазмоз, мукормикоз, паракокцидиоидомикоз или споротрихоз; висцеральный лейшманиоз, кожный лейшманиоз, болезнь Чагаса или фебрильную нейтропению.

8. Состав для доставки лекарственного средства, содержащий
(a) лекарственное средство необязательно в количестве от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 25 мг/мл состава;
(b) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и
(c) один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот,
где соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет от приблизительно 20:80 до приблизительно 80:20 об./об.

9. Состав по п.8, где лекарственное средство выбрано из группы, состоящей из противораковых средств, антибиотиков, противовирусных лекарственных средств, противогрибковых средств, средств против прионов, противоамебных средств, нестероидных, противовоспалительных лекарственных средств, средств против аллергии, иммунодепрессивных средств, лекарственных средств против коронарной недостаточности, анальгетиков, местных анестетиков, анксиолитических средств, седативных средств, снотворных средств, облегчающих мигрень средств, лекарственных средств против укачивания и противорвотных средств.

10. Состав по п.8, дополнительно содержащий второе лекарственное средство.

11. Применение состава по п.8 для получения лекарственного средства для введения субъекту, нуждающемуся в таком средстве, где указанное лекарственное средство необязательно предназначено для перорального или местного применения.

12. Композиция для получения лекарственного средства, содержащая
(a) один или более сложных эфиров глицерина и жирных кислот; и
(b) один или более содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот,
где соотношение сложных эфиров глицерина и жирных кислот и содержащих полиэтиленоксид сложных эфиров жирных кислот составляет приблизительно от 20:80 до приблизительно 80:20 об./об.

13. Способ получения лекарственного средства, включающий в себя комбинирование лекарственного средства с композицией по п.12.