СПИРОПРОИЗВОДНЫЕ ПАРТЕНИНА В КАЧЕСТВЕ НОВЫХ ПРОТИВОРАКОВЫХ АГЕНТОВ Российский патент 2013 года по МПК C07D491/107 C07D498/10 A61K31/396 A61K31/4192 A61K31/424 A61P35/00 

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к новым производным партенина. Конкретно, настоящее изобретение относится к некоторым новым производным партенина, включая способы их поучения, и к их противораковой активности.

Предшествующий уровень техники

Сесквитерпенлактоны являются активными составляющими ряда лекарственных растений, используемых в традиционной медицине. Партенин, основной сесквитерпеновый компонент травы Parthenium hysterophorus L. (семейства сложноцветных), демонстрирует сильное лечебное и аллелопатическое действие¹. С медицинской точки зрения было обнаружено, что это соединение представляет интерес благодаря его противораковым, антибактериальным, противоамебным и антималярийным свойствам. В последнее время были разработаны различные модификации партенина с целью получения более эффективных аналогов с пониженной токсичностью и лучшей активностью. В наши дни противораковые свойства различных сесквитерпенов привлекли к себе значительный интерес, и были проведены обширные исследования для выявления противораковой активности, молекулярных механизмов и потенциальных хемопрофилактических и хемотерапевтических применений сесквитерпеноидов. Известно, что цитотоксичность, как и многие другие виды биологической активности сесквитерпенлактонов, опосредуется присутствием потенциально алкилирующих структурных элементов, способных к взаимодействию с биологическими нуклеофилами, за счет которого происходит ингибирование ряда клеточных функций², что приводит клетки к апоптозу^3-6. В прошлом, сесквитерпенлактоны (SL) рассматривали в качестве представляющих интерес потенциальных путей к новому классу противораковых средств в будущем. Противовоспалительная активность SL была подтверждена с использованием различных методик, и некоторые исследования выявили, что они проявляют такую активность за счет ингибирования фактора транскрипции NF-kB^7-10. При использовании в качестве моделей геленалина и партенолида, было точно установлено, что связывание NF-kB с ДНК предотвращается за счет алкилирования цистеина-38 в субъединице p65/NF-kB^7-11. Существуют веские свидетельства того, что указанный механизм является общим для SL, которые обладают α,β-ненасыщенными карбонильными структурами, такими как α-метилен-β-лактоны или α,β-ненасыщенные циклопентеноны. Известно, что такие функциональные группы взаимодействуют с нуклеофилами, особенно с сульфгидрильной группой цистеина в реакции присоединения по Михаэлю (фиг.1). Несмотря на изобилие обнаруженных в литературе экспериментальных исследований по цитотоксичности отдельных сесквитерпенлактонов в отношении многих клеточных линий, о влиянии различных алкилирующих структурных элементов и других структурных факторов на цитотоксичность с точки зрения SAR (связи между структурой и активностью) известно немногое. Это, однако, может стать важным шагом в направлении рациональной оптимизации потенциальных препаратов.

В партенине (1) имеются два таких активных фрагмента; один из них представляет собой α-метилен-γ-бутиролактон, и другой является циклопентеноном. Хотя несколько научных групп в мире проводили работу по структурной модификации партенина^12-16, либо чисто из научного интереса, либо с целью разработки вторичных потенциальных препаратов, насколько известно авторам настоящего изобретения, ни в одном из сообщений указанных групп не проявился целенаправленный и рациональный подход к модификации партенина с целью разработки SHAL (лиганда с высокой аффинностью, представляющего собой малую молекулу) с улучшенной противораковой активностью. Так, например, в литературе имеются сообщения, в которых считается, что основным источником активности сесквитерпеноидов является наличие α-метилен-γ-бутиролактонового фрагмента, тогда как в некоторых сообщениях заявляется о важности как циклопентенона, так и α-метилен-γ-бутиролактонового кольца¹⁷, в то время как в литературе не существует ни конкретной модели SAR для партенина, ни механизма взаимодействия этой молекулы с целевым белком. Хотя в литературе и имеются указания на важность циклопентенонового фрагмента, как потенциальной алкилирующей структуры в партенине/SL, которому было приписано цитотоксическое действие без какой-либо дополнительной рациональной исследовательской работы по определению конкретной молекулярной мишени. Тот факт, что 2-циклопентен-1-он и его производные, включающие циклопентеноновое ядро, как было установлено, являются ингибиторами фактора NF-kB, с противовоспалительной, антипролиферативной, иммунодепрессивной, цитопротекторной и противовирусной активностью¹⁸, побудил авторов предложить механизм действия партенина, влекущий за собой такой подход к разработке и синтезу различных аналогов партенина, при котором авторы смогли бы однозначно установить SAR в отношении мишени взаимодействия. Так, несмотря на многочисленные виды биологической активности партенина, до настоящего времени не было выдвинуто конкретной модели SAR (связи между структурой и активностью) для данной молекулы. Настоящее исследование относится к разработке, синтезу и оценке цитотоксичности производных партенина при помощи системного и рационального подхода к модификации структуры для однозначного определения SAR молекулы, а также к синтезированным авторами улучшенным структурам, которые, как было обнаружено, являются новыми лигандами с более выраженными лекарственными свойствами.

Задачи настоящего изобретения

Основной задачей настоящего изобретения является разработка новых спиропроизводных партенина.

Другой задачей настоящего изобретения является разработка способов получения новых спиропроизводных партенина.

Еще одной задачей изобретения является разработка новых соединений, которые являются более активными по сравнению с исходным соединением.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к некоторым новым спиропроизводным партенина. Конкретно, настоящее изобретение относится к некоторым новым производным партенина, включая способы их получения, и к их противораковой активности. Спиропроизводные партенина получают путем 1,3-диполярного циклоприсоединения различных дипольных молекул, например, нитрилоксидов, нитронов, азидов, нитрилилидов, диазоалканов, нитрилимидов, озона, азометинимидов, азометинилидов. Полученные спиропроизводные полезны в качестве противораковых агентов.

Краткое описание иллюстративного материала

Схема 1: Диполярное циклоприсоединение различных дипольных молекул к экзоциклической двойной связи партенина.

Схема 2: Синтез различных спиропроизводных партенина.

Схема 3: Синтез спироизоксазолиновых производных партенина.

Схема 4: Синтез спироизоксазолидиновых производных партенина.

Схема 5: Синтез спироазиридиновых производных партенина.

Схема 6: Восстановление спиропроизводных партенина.

Таблица 1: Синтез различных спироизоксазолиновых производных партенина.

Таблица 2: Синтез различных спироизоксазолидиновых производных партенина.

Таблица 3: Синтез различных спироазиридиновых производных партенина.

Таблица 4: Значения IC₅₀ различных производных партенина.

Таблица 5: Влияние партенина и его производного, соединения-17, на мышей с асцитной опухолью Эрлиха (EAT).

Таблица 6: Влияние партенина и его производного, соединения-17, на мышей с асцитной карциномой Эрлиха (EAC).

Фиг.1: Взаимодействие партенина с сульфгидрильной группой по типу присоединения Михаэля.

Фиг.2: Анализ апоптоза и некроза с помощью гель-электрофореза ДНК.

Фиг.3: Результаты детектирования фракции Sub G₁ (% апоптоза) в клеточном цикле ДНК, индуцированном «соединением-17», в обработанных этим соединением клетках MOLT-4, с применением поточной цитометрии. A - контроль (необработанные клетки), B стауроспорин 1 мкМ, C, D, E, F - клетки, обработанные аналогом партенина (соеднением-17) в концентрациях 1, 10, 50, 100 мкМ соответственно.

Подробное описание изобретения

Соответственно, настоящее изобретение предоставляет новые спиропроизводные партенина общей структурной формулы 1:

Спиропроизводные

формула 1

где значения X выбраны из группы, состоящей из -C=N-O-, -C-N-O-, -N-, -N-N-N-, -C=N-N-, -C-N-N-, -C-N-C-. Формулы 1a, 1b, 1c и 1d представляют различные спиропроизводные партенина, которые ниже кратко описаны по классам и заявлены в настоящем изобретении, включая соединение-17.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения указанное спиропроизводное представляет собой спироизоксазолин, имеющий общую структурную формулу 1a:

Спироизоксазолиновое производное

формула 1a

где заместитель R выбран из группы, состоящей из водорода, алкильных заместителей, а именно метила, этила, пропила и их высших гомологов, линейных или разветвленных, включая алициклические, такие как циклопентан, циклогексан или кольца с более высоким содержанием членов, конденсированные кольца, алкильные группы, замещенные арилом/гетероарилом, включая бензильную группу или ее высшие гомологи, которые могут включать ненасыщенные алкильные группы, такие как циннамильный, кротильный, пренильный заместители; и R может также представлять собой арильный заместитель в первом положении изоксазолинового кольца структуры 1a, а именно, замещенную фенильную группу, такую как 4-MeOC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 3-NO₂C₆H₄, 3-HOC₆H₄, 2-HOC₆H₄, 4-HOC₆H₄, 2,3-(HO)₂C₆H₃, 2,4-(HO)₂C₆H₃, 2,5-(HO)₂C₆H₃, 3,4-(HO)₂C₆H₃, 3,5-(HO)₂C₆H₃, 2,3-(MeO)₂C₆H₃, 2,4-(MeO)₂C₆H₃, 2,5-(MeO)₂C₆H₃, 2,6-(EtO)₂C₆H₃, 3,5-(MeCH₂CH₂O)₂C₆H₃, 2-HO-5-MeOC₆H₃, 3-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HS-6-MeOC₆H₃, 2-MeO-4-HOC₆H₃, 2,3-(Cl)₂C₆H₃, 2,4-(Cl)₂C₆H₃, 2,5-(Cl)₂C₆H₃, 2,6-(Cl)₂C₆H₃, 4-NMe₂-C₆H₄, 4-NO₂-C₆H₄, 2-Br-C₆H₄, 3,5-(Br)₂C₆H₃, 2-Cl-C₆H₄, 2-Br-3-ClC₆H₃, 2-Br-4-ClC₆H₃, 2-Br-6-ClC₆H₃, 2-Cl-4-FC₆H₃, 2-Cl-6-FC₆H₃, 3-Cl-2-FC₆H₃, 3-Cl-4-FC₆H₃, 4-Cl-3-FC₆H₃, 2-Cl-6-HOC₆H₃, 2-Cl-4-HOC₆H₃, 2-Br-5-FC₆H₃, 3-Br-4-FC₆H₃, 4-Br-2-FC₆H₃, 5-Br-2-FC₆H₃, 2,3,5,6-(F)₄C₆H₁, 2,3,4,5,6-(F)₅C₆, 3-Br-5-Cl-2-HOC₆H₂, 4-AcNHC₆H₄, 3-AcNHC₆H₄, 2-AcNHC₆H₄, 2,4,6-(HO)₃C₆H₂, 2,4,6-(MeO)₃C₆H₂, 3,4-(-OCH₂O-)C₆H₃, 4-HO-3-MeC₆H₃, 3-MeC₆H₄, 2,4-(Me)₂C₆H₄, 2,4,6-(Me)₃C₆H₂, 2-EtC₆H₄, 4-EtC₆H₄, 2-EtOC₆H₄, 3-EtOC₆H₄, 4-EtOC₆H₄, 4-(CH₃)₂CHC₆H₄, 2,4,6-(EtO)₃C₆H₂, 4-HSC₆H₄, 3-MeSC₆H₄, 3-MeCO₂C₆H₄, 2-MeCO₂C₆H₄, 4-EtCO₂C₆H₄, тиенил, фурил, индолил, пиридил, нафтил, антраценил, фенантренил или другие гетероароматические кольцевые системы, такие как пиридинил, индолил, бензофурил, фурил, теофенил, оксазолил, изоксазолил или любая другая одинарная или конденсированная гетероароматическая кольцевая система и т.д.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения указанное спиропроизводное представляет собой спироизоксазолидиновое производное, имеющее общую структурную формулу 1b:

Спироизоксазолидиновое производное

формула 1b

где значения R/R' выбраны из группы, состоящей из водорода, алкильных заместителей, а именно метила, этила, пропила и их высших гомологов, линейных или разветвленных, включая алициклические, такие как циклопентан, циклогексан или кольца с более высоким содержанием членов, конденсированные кольца, алкильные группы, замещенные арилом/гетероарилом, включая бензильную группу или ее высшие гомологи, включая ненасыщенные группы, например пренильную, циннамильную, кротильную группы; и R/R' может также являться арильной группой в первом положении изоксазолидинового кольца структуры 1b, а именно фенильной или замещенной фенильной группой, такой как C₆H₅, 4-ClC₆H₄, 4-MeOC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 3-NO₂C₆H₄, 3-HOC₆H₄, 2-HOC₆H₄, 4-HOC₆H₄, 2,3-(HO)₂C₆H₃, 2,4-(HO)₂C₆H₃, 2,5-(HO)₂C₆H₃, 3,4-(HO)₂C₆H₃, 3,5-(HO)₂C₆H₃, 2,3-(MeO)₂C₆H₃, 2,4-(MeO)₂C₆H₃, 2,5-(MeO)₂C₆H₃, 3,4-(MeO)₂C₆H₃, 2,6-(EtO)₂C₆H₃, 3,5-(MeCH₂CH₂O)₂C₆H₃, 2-HO-5-MeOC₆H₃, 3-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HS-6-MeOC₆H₃, 2-MeO-4-HOC₆H₃, 2,3-(Cl)₂C₆H₃, 2,4-(Cl)₂C₆H₃, 2,5-(Cl)₂C₆H₃, 2,6-(Cl)₂C₆H₃, 3,4-(Cl)₂C₆H₃, 4-NMe₂-C₆H₄, 4-NO₂-C₆H₄, 2-BrC₆H₄, 3,5-(Br)₂C₆H₃, 2-Cl-C₆H₄, 2-Br-3-ClC₆H₃, 2-Br-4-ClC₆H₃, 2-Br-6-ClC₆H₃, 2-Cl-4-FC₆H₃, 2-Cl-6-FC₆H₃, 3-Cl-2-FC₆H₃, 3-Cl-4-FC₆H₃, 4-Cl-3-FC₆H₃, 2-Cl-6-HOC₆H₃, 2-Cl-4-HOC₆H₃, 2-Br-5-FC₆H₃, 3-Br-4-FC₆H₃, 4-Br-2-FC₆H₃, 5-Br-2-FC₆H₃, 2,3,5,6-(F)₄C₆H₁, 2,3,4,5,6-(F)₅C₆, 3-Br-5-Cl-2-HOC₆H₂, 4-AcNHC₆H₄, 3-AcNHC₆H₄, 2-AcNHC₆H₄, 2,4,6-(HO)₃C₆H₂, 2,4,6-(MeO)₃C₆H₂, 3,4-(-OCH₂O-)C₆H₃, 4-HO-3-MeC₆H₃, 3-MeC₆H₄, 4-MeC₆H₄, 2,4-(Me)₂C₆H₄, 2,4,6-(Me)₃C₆H₂, 2-EtC₆H₄, 4-EtC₆H₄, 2-EtOC₆H₄, 3-EtOC₆H₄, 4-EtOC₆H₄, 4-(CH₃)₂CHC₆H₄, 2,4,6-(EtO)₃C₆H₂, 4-HSC₆H₄, 4-MeSC₆H₄, 3-MeSC₆H₄, 3-MeCO₂C₆H₄, 2-MeCO₂C₆H₄, 4-EtCO₂C₆H₄, тиенил, фурил, индолил, пиридил, нафтил, антраценил или другие гетероароматические кольцевые системы, такие как пиридинил, индолил, бензофурил, фурил, теофенил, оксазолил, изоксазолил или любая другая одинарная или конденсированная гетероароматическая кольцевая система и т.д.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения указанное спиропроизводное представляет собой спиротриазолиновое производное, имеющее общую структурную формулу 1c:

Спиротриазолиновое производное

формула 1c

где R выбран из группы, состоящей из водорода, алкильных заместителей, а именно метила, этила, пропила и их высших гомологов, линейных или разветвленных, включая алициклические, такие как циклопентан, циклогексан или кольца с более высоким содержанием членов, конденсированные кольца, алкильные группы, замещенные арилом/гетероарилом, включая бензильную группу или ее высшие гомологи, которые могут включать ненасыщенные алкильные группы, например, циннамил, кротил, пренил; и R может также представлять собой арильную группу (Ar) в первом положении триазолинового кольца структуры 1с, а именно замещенную фенильную группу, такую как 4-MeOC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 3-NO₂C₆H₄, 3-HOC₆H₄, 2-HOC₆H₄, 4-HOC₆H₄, 2,3-(HO)₂C₆H₃, 2,4-(HO)₂C₆H₃, 2,5-(HO)₂C₆H₃, 3,4-(HO)₂C₆H₃, 3,5-(HO)₂C₆H₃, 2,3-(MeO)₂C₆H₃, 2,4-(MeO)₂C₆H₃, 2,5-(MeO)₂C₆H₃, 2,6-(EtO)₂C₆H₃, 3,5-(MeCH₂CH₂O)₂C₆H₃, 2-HO-5-MeOC₆H₃, 3-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HS-6-MeOC₆H₃, 2-MeO-4-HOC₆H₃, 2,3-(Cl)₂C₆H₃, 2,4-(Cl)₂C₆H₃, 2,5-(Cl)₂C₆H₃, 2,6-(Cl)₂C₆H₃, 4-NMe₂-C₆H₄, 4-NO₂-C₆H₄, 2-BrC₆H₄, 3,5-(Br)₂C₆H₃, 2-Cl-C₆H₄, 2-Br-3-ClC₆H₃, 2-Br-4-ClC₆H₃, 2-Br-6-ClC₆H₃, 2-Cl-4-FC₆H₃, 2-Cl-6-FC₆H₃, 3-Cl-2-FC₆H₃, 3-Cl-4-FC₆H₃, 4-Cl-3-FC₆H₃, 2-Cl-6-HOC₆H₃, 2-Cl-4-HOC₆H₃, 2-Br-5-FC₆H₃, 3-Br-4-FC₆H₃, 4-Br-2-FC₆H₃, 5-Br-2-FC₆H₃, 2,3,5,6-(F)₄C₆H₁, 2,3,4,5,6-(F)₅C₆, 3-Br-5-Cl-2-HOC₆H₂, 4-AcNHC₆H₄, 3-AcNHC₆H₄, 2-AcNHC₆H₄, 2,4,6-(HO)₃C₆H₂, 2,4,6-(MeO)₃C₆H₂, 3,4-(-OCH₂O-)C₆H₃, 4-HO-3-MeC₆H₃, 3-MeC₆H₄, 2,4-(Me)₂C₆H₄, 2,4,6-(Me)₃C₆H₂, 2-EtC₆H₄, 4-EtC₆H₄, 2-EtOC₆H₄, 3-EtOC₆H₄, 4-EtOC₆H₄, 4-(CH₃)₂CHC₆H₄, 2,4,6-(EtO)₃C₆H₂, 4-HSC₆H₄, 3-MeSC₆H₄, 3-MeCO₂C₆H₄, 2-MeCO₂C₆H₄, 4-EtCO₂C₆H₄, тиенил, фурил, индолил, пиридил, нафтил, антраценил или другие гетероароматические кольцевые системы, такие как пиридинил, индолил, бензофурил, фурил, теофенил, оксазолил, изоксазолил или любая другая одинарная или конденсированная гетероароматическая кольцевая система и т.д.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения указанное спиропроизводное представляет собой спироазиридиновое производное, имеющее общую структурную формулу 1d:

Спироазиридиновое производное

формула 1d

где R представляет собой арильный фрагмент, выбранный из группы, состоящей из замещенных фенильных фрагментов, таких как 4-MeOC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 3-NO₂C₆H₄, 3-HOC₆H₄, 2-HOC₆H₄, 4-HOC₆H₄, 2,3-(HO)₂C₆H₃, 2,4-(HO)₂C₆H₃, 2,5-(HO)₂C₆H₃, 3,4-(HO)₂C₆H₃, 3,5-(HO)₂C₆H₃, 2,3-(MeO)₂C₆H₃, 2,4-(MeO)₂C₆H₃, 2,5-(MeO)₂C₆H₃, 2,6-(EtO)₂C₆H₃, 3,5-(MeCH₂CH₂O)₂C₆H₃, 2-HO-5-MeOC₆H₃, 3-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HO-4-MeOC₆H₃, 2-HS-6-MeOC₆H₃, 2-MeO-4-HOC₆H₃, 2,3-(Cl)₂C₆H₃, 2,4-(Cl)₂C₆H₃, 2,5-(Cl)₂C₆H₃, 2,6-(Cl)₂C₆H₃, 4-NMe₂-C₆H₄, 4-NO₂-C₆H₄, 2-BrC₆H₄, 3,5-(Br)₂C₆H₃, 2-ClC₆H₄, 2-Br-3-ClC₆H₃, 2-Br-4-ClC₆H₃, 2-Br-6-ClC₆H₃, 2-Cl-4-FC₆H₃, 2-Cl-6-FC₆H₃, 3-Cl-2-FC₆H₃, 3-Cl-4-FC₆H₃, 4-Cl-3-FC₆H₃, 2-Cl-6-HOC₆H₃, 2-Cl-4-HOC₆H₃, 2-Br-5-FC₆H₃, 3-Br-4-FC₆H₃, 4-Br-2-FC₆H₃, 5-Br-2-FC₆H₃, 2,3,5,6-(F)₄C₆H₁, 2,3,4,5,6-(F)₅C₆, 3-Br-5-Cl-2-HOC₆H₂, 4-AcNHC₆H₄, 3-AcNHC₆H₄, 2-AcNHC₆H₄, 2,4,6-(HO)₃C₆H₂, 2,4,6-(MeO)₃C₆H₂, 3,4-(-OCH₂O-)C₆H₃, 4-HO-3-MeC₆H₃, 3-MeC₆H₄, 2,4-(Me)₂C₆H₄, 2,4,6-(Me)₃C₆H₂, 2-EtC₆H₄, 4-EtC₆H₄, 2-EtOC₆H₄, 3-EtOC₆H₄, 4-EtOC₆H₄, 4-(CH₃)₂CHC₆H₄, 2,4,6-(EtO)₃C₆H₂, 4-HSC₆H₄, 3-MeSC₆H₄, 3-MeCO₂C₆H₄, 2-MeCO₂C₆H₄, 4-EtCO₂C₆H₄, нафтил, антраценил или другие гетероароматические кольцевые системы, такие как пиридинил, индолил, бензофурил, фурил, теофенил, оксазолил, изоксазолил или любая другая одинарная или конденсированная гетероароматическая кольцевая система.

В еще одном варианте осуществления настоящего изобретения репрезентативные соединения формулы 1 включают все спиропроизводные партенина, которые охвачены формулами 1a, 1b, 1c и 1d.

Спироизоксазолиновые производные партенина:

(4-метоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-нитрофенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-нитрофенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-гидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-гидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-гидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,3-дигидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4-дигидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,5-дигидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3,4-дигидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3,5-дигидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,3-диметоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4-диметоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,5-диметоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,6-диэтоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3,5-дипропоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-гидрокси-5-метоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-гидрокси-4-метоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-гидрокси-4-метоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-тианил-6-метоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-метокси-4-гидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,3-дихлорфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4-дихлорфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,5-дихлорфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-N,N'-диметилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-нитрофенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-бромфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3,5-дибромфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-хлорфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-бром-3-хлорфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-бром-4-хлорфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-бром-6-хлорфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-хлор-4-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-хлор-6-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-хлор-2-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-хлор-4-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-хлор-3-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-хлор-6-гидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-хлор-4-гидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-бром-5-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-бром-4-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-бром-2-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(5-бром-5-фторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,3,5,6-тетрафторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,3,4,5,6-пентафторфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-бром-5-хлор-2-гидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-N-ацетилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-N-ацетилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-N-ацетилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4,6-тригидроксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4,6-триметоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-гидрокси-3-метилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-метилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4-диметилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4,6-триметилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-этилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-этилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2-этоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-этоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-этоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-изопропилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(2,4,6-триэтоксифенил)спироизоксазолинилпартенин,

(4-тианилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

(3-тиометилфенил)спироизоксазолинилпартенин,

метил-3-(изоксазолил-5-партенил)бензоат,

метил-2-(изоксазолил-5-партенил)бензоат,

этил-4-(изоксазолил-5-партенил)бензоат,

тиенилспироизоксазолинилпартенин,

фурилспироизоксазолинилпартенин,

индолилспироизоксазолинилпартенин,

пиридилспироизоксазолинилпартенин,

нафтилспироизоксазолинилпартенин,

антраценилспироизоксазолинилпартенин.

Спироизоксазолидиновые производные партенина:

N-(4-фторфенил)-C-(4-метоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-фторфенил)-C-(2-нитрофенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-фторфенил)-C-(3-нитрофенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-фторфенил)-C-(3-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-фторфенил)-C-(2-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-фторфенил)-C-(4-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-фторфенил)-C-(2,3-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-хлорфенил)-C-(2,5-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-фторфенил)-C-(3,4-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метилфенил)-C-(3,5-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метилфенил)-C-(2,3-диметоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метилфенил)-C-(2,5-диметоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метилфенил)-C-(2,4-диметоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(2,5-диметоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(2,6-диэтоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(3,5-дипропоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2-гидрокси-5-метоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(3-гидрокси-4-метоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-бромфенил)-C-(2-гидрокси-4-метоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-бромфенил)-C-(2-тианил-6-метоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-хлорфенил)-C-(2-метокси-4-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-хлорфенил)-C-(2,3-дихлорфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-хлорфенил)-C-(2,4-дихлорфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-хлорфенил)-C-(2,5-дихлорфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-гидроксифенил)-C-(4-N,N'-диметилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-гидроксифенил)-C-(4-нитрофенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-гидроксифенил)-C-(2-бромфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-гидроксифенил)-C-(3,5-дибромфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-гидроксифенил)-C-(2-хлорфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-гидроксифенил)-C-(2-бром-3-хлорфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-гидроксифенил)-C-(2-бром-4-хлорфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-гидроксифенил)-C-(2-бром-6-хлорфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-гидроксифенил)-C-(2-хлор-4-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-бромфенил)-C-(2-хлор-6-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-гидроксифенил)-C-(3-хлор-2-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-гидроксифенил)-C-(3-хлор-4-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(4-хлор-3-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2-хлор-6-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2-хлор-4-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2-бром-5-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(3-бром-4-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(4-бром-2-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(5-бром-5-фторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(2,3,5,6-тетрафторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(2,3,4,5,6-пентафторфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(3-бром-5-хлор-2-гидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(4-N-ацетилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(3-N-ацетилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(2-N-ацетилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(2,4,6-тригидроксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(2,4,6-триметоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(3,4-метилендиоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(4-гидрокси-3-метилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(3-метилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2,4-диметилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2,4,6-триметилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2-этилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(4-этилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2-этоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(3-этоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(4-этоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(4-изопропилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-нитрофенил)-C-(2,4,6-триэтоксифенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(4-тианилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-(3-тиометилфенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(2-метоксифенил)-C-метил-3-(изоксазолидинил-5-партенил)бензоат,

N-(2-метоксифенил)-C-метил-2-(изоксазолидинил-5-партенил)бензоат,

N-(2-метоксифенил)-C-этил-4-(изоксазолидинил-5-партенил)бензоат,

N-(4-хлор-3-фторфенил)-C-(тиенил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлорфенил)-C-(фурил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-фторфенил)-C-(индолил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-фторфенил)-C-(пиридил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлорфенил)-C-(нафтил)спироизоксазолидинилпартенин,

N-(4-хлор-3-фторфенил)-C-(антраценил)спироизоксазолидинилпартенин.

Спироазиридиновые производные партенина:

(4-метоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-нитрофенил)спироазиридинилпартенин,

(3-нитрофенил)спироазиридинилпартенин,

(3-гидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-гидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(4-гидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,3-дигидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4-дигидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,5-дигидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(3,4-дигидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(3,5-дигидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,3-диметоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4-диметоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,5-диметоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,6-диэтоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(3,5-дипропоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-гидрокси-5-метоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(3-гидрокси-4-метоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-гидрокси-4-метоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-тианил-6-метоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-метокси-4-гидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,3-дихлорфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4-дихлорфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,5-дихлорфенил)спироазиридинилпартенин,

(4-N,N'-диметилфенил)спироазиридинилпартенин,

(4-нитрофенил)спироазиридинилпартенин,

(2-бромфенил)спироазиридинилпартенин,

(3,5-дибромфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-хлорфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-бром-3-хлорфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-бром-4-хлорфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-бром-6-хлорфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-хлор-4-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-хлор-6-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(3-хлор-2-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(3-хлор-4-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(4-хлор-3-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-хлор-6-гидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-хлор-4-гидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2-бром-5-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(3-бром-4-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(4-бром-2-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(5-бром-5-фторфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,3,5,6-тетрафторфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,3,4,5,6-пентафторфенил)спироазиридинилпартенин,

(3-бром-5-хлор-2-гидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(4-N-ацетилфенил)спироазиридинилпартенин,

(3-N-ацетилфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-N-ацетилфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4,6-тригидроксифенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4,6-триметоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(3,4-метилендиоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(4-гидрокси-3-метилфенил)спироазиридинилпартенин,

(3-метилфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4-диметилфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4,6-триметилфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-этилфенил)спироазиридинилпартенин,

(4-этилфенил)спироазиридинилпартенин,

(2-этоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(3-этоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(4-этоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(4-изопропилфенил)спироазиридинилпартенин,

(2,4,6-триэтоксифенил)спироазиридинилпартенин,

(4-тианилфенил)спироазиридинилпартенин,

(3-тиометилфенил)спироазиридинилпартенин,

метил-3-(азиридинил-2-партенил)бензоат,

метил-2-(азиридинил-2-партенил)бензоат,

этил-4-(азиридинил-2-партенил)бензоат,

тиенилспироазиридинилпартенин,

фурилспироазиридинилпартенин,

индолилспироазиридинилпартенин,

пиридилспироазиридинилпартенин,

нафтилспироазиридинилпартенин,

антраценилспироазиридинилпартенин.

Спиротриазолиновые производные партенина:

(4-метоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-нитрофенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-нитрофенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-гидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-гидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-гидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,3-дигидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4-дигидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,5-дигидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3,4-дигидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3,5-дигидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,3-диметоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4-диметоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,5-диметоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,6-диэтоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3,5-дипропоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-гидрокси-5-метоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-гидрокси-4-метоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-гидрокси-4-метоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-тианил-6-метоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-метокси-4-гидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,3-дихлорфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4-дихлорфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,5-дихлорфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-N,N'-диметилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-нитрофенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-бромфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3,5-дибромфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-хлорфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-бром-3-хлорфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-бром-4-хлорфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-бром-6-хлорфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-хлор-4-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-хлор-6-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-хлор-2-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-хлор-4-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-хлор-3-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-хлор-6-гидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-хлор-4-гидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-бром-5-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-бром-4-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-бром-2-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(5-бром-5-фторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,3,5,6-тетрафторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,3,4,5,6-пентафторфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-бром-5-хлор-2-гидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-N-ацетилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-N-ацетилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-N-ацетилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4,6-тригидроксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4,6-триметоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3,4-метилендиоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-гидрокси-3-метилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-метилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4-диметилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4,6-триметилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-этилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-этилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2-этоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-этоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-этоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-изопропилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(2,4,6-триэтоксифенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(4-тианилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

(3-тиометилфенил)спиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

метил-3-(1,2,3-триазолинил-5-партенил)бензоат,

метил-2-(1,2,3-триазолинил-5-партенил)бензоат,

этил-4-(1,2,3-триазолинил-5-партенил)бензоат,

тиенилспиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

фурилспиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

индолилспиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

пиридилспиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

нафтилспиро-1,2,3-триазолинилпартенин,

антраценилспиро-1,2,3-триазолинилпартенин.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединение формулы 1 демонстрирует потенциальную противораковую активность в отношении линий раковых клеток человека, выбранных из группы, состоящей из SW-620, клеток рака простаты PC-3, DU-145 и острого лимфобластного лейкоза (MOLT-4).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединение проявляет эффективность при ингибировании роста опухоли в диапазоне дозировок 10-200 мг/кг массы тела.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соединение формулы 1 обладает значимым цитотоксическим потенциалом и вызывает зависимый от концентрации апоптоз раковых клеток.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения спиропроизводные формулы 1 демонстрировали сопоставимое ингибирование роста (≥80%) линий раковых клеток человека при концентрации 100 мкМ.

В одном из вариантов осуществления анализ клеточного цикла указывает на увеличение популяции sub G1, блокаду фазы G1 и выраженную картину лестничного типа в анализе фрагментации ДНК.

Соответственно, настоящее изобретение предоставляет способ получения спиропроизводных партенина общей формулы 1, включающий: взаимодействие партенина с дипольным соединением, выбранным из группы, состоящей из нитрилоксидов, нитронов, азидов, нитрилилидов, диазоалканов, нитрилимидов, озона, азометинимидов, азометинилидов, в органическом растворителе при температуре в диапазоне от 0 до 25°C в течение 2-25 ч, гашение реакционной смеси хлоридом аммония и последующую очистку, с получением соответствующего спиропроизводного формулы 1.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения органический растворитель выбирают из группы, состоящей из тетрагидрофурана, бензола, толуола, дихлорметана, дихлорэтана и т.д.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения соотношение партенина и дипольного соединения находится в пределах от 1,0 до 1,2:1,5 эквивалентов.

Можно получить фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы 1, необязательно только с фармацевтически приемлемым эксципиентом, добавкой или разбавителем.

Хотя несколько научных групп по всему миру проводили работу по структурной модификации партенина^12-16, либо из чисто научного интереса, либо с целью разработки вторичных потенциальных препаратов, насколько известно авторам настоящего изобретения, ни в одном из сообщений этих групп не проявился целенаправленный и рациональный подход к модификации партенина для разработки SHAL с улучшенной противораковой активностью. С учетом структурной и фармакологической важности такого сесквитерпеноидного лактона, авторами был разработан системный подход для расшифровки SAR этого природного продукта, направленный на превращение молекул исходных препаратов в более эффективные вторичные препараты.

Для установления роли экзо/эндоциклических двойных связей в наличии противораковой активности, была разработана стратегия, заключавшаяся в селективном введении в реакцию одной из таких двойных связей. Из числа нескольких возможных химических превращений, которые применимы для достижения указанной цели, было выбрано селективное присоединение дипольных молекул, т.е. нитрилоксидов, нитронов и азидов, к экзоциклической двойной связи (схема 1), которое также должно улучшать активность благодаря введению в структуру молекулы основного атома азота. Таким образом, с учетом правила Липинского и возможности введения структурного фрагмента, содержащего азот (алкалоидного типа), при применении указанной стратегии, вероятно, можно получить улучшенные вторичные препараты.

Как эндо-, так и экзоциклические двойные связи являются активными двойными связями, но из-за пространственных препятствий, возникающих вследствие наличия заместителей в циклопентеноновом кольце, нитрилоксиды вступают в селективное циклоприсоединение только по экзоциклической двойной связи. В настоящем изобретении представлено циклоприсоединение нитрилоксидов, нитронов и азидов к экзоциклической двойной связи партенина (схема 2), для формирования направленной библиотеки, состоящей из новых спироизоксазолинов (2)/изоксазолидинов (3) и спироазиридинов (4). С помощью скрининга противораковой активности таких новых спиропроизводных авторы смогли легко определить фармакологическое значение циклопентенонового фрагмента в сравнении с α-метилен-γ-бутиролактоновым кольцом, и, тем самым, однозначно выявить SAR рассматриваемой молекулы.

Результаты

Химические аспекты:

Получение спироизоксазолиновых производных партенина путем 1,3-диполярного присоединения нитрилоксидов к активной двойной связи партенина

Как обсуждалось выше, синтез спироизоксазолиновых производных партенина является примером модифицированного простого способа защиты высоко реакционноспособного α-метилен-γ-бутиролактона, т.е. структурного фрагмента, обычно обнаруживаемого во многих природных сесквитерпенлактонах. Все спироизоксазолиновые производные (2) партенина (схема 3/таблица 1) получали путем 1,3-диполярного циклоприсоединения к партенину (1) различных нитрилоксидов (5) (как стабильных, так и получаемых in situ) согласно методикам, известным из литературы^19,20. Во всех случаях спироизоксазолиновые производные партенина образовывались в виде единственных продуктов (>65%).

Получение спироизоксазолидиновых производных партенина путем 1,3-диполярного присоединения нитронов к экзоциклической двойной связи партенина

Синтез спироизоксазолидиновых производных партенина также является примером модифицированного простого способа защиты высоко реакционноспособного α-метилен-γ-бутиролактонового фрагмента. Все спироизоксазолидиновые производные (3) партенина (схема 4/таблица 2) получали путем 1,3-диполярного циклоприсоединения к партенину (1) различных нитронов (6) согласно методикам, известным из литературы²¹. Во всех случаях спироизоксазолидиновые производные партенина образовывались в виде единственных продуктов (>75%).

Получение спироазиридиновых производных партенина путем 1,3-диполярного присоединения азидов к экзоциклической двойной связи партенина

Спироазиридиновые производные партенина (4) (схема 5/таблица 3) получали путем 1,3-диполярного циклоприсоединения к партенину (1) различных азидов (7) согласно аналогам, известным из литературы^19,20. Во всех случаях спироазиридиновые производные партенина образовывались в виде единственных продуктов (>65%).

Все синтезированные продукты характеризовали при помощи спектроскопии ИК, ¹H, ¹³C ЯМР/DEPT и масс-спектроскопии.

Авторы изобретения протестировали в общей сложности 43 различных производных партенина с точки зрения их возможной противораковой активности против четырех линий раковых клеток. Было обнаружено, что большинство спиропроизводных партенина проявляют желаемую противораковую активность. Среди всех синтезированных спиропроизводных партенина оптимальную цитотоксичность продемонстрировало спироизоксазолиновое производное партенина, а именно соединение-17. Поэтому указанное соединение было использовано авторами для дальнейших исследований.

Восстановление спироизоксазолинового производного партенина

Указанное спироизоксазолиновое производное партенина селективно восстанавливали по стандартной методике¹², используя 5% Pd/C (схема 6). Структуру продукта подтверждали протонным ЯМР, по исчезновению сигналов, соответствующих олефиновым протонам циклопентенонового фрагмента. При исследовании дигидропроизводного партенина на противораковую активность было обнаружено отсутствие активности. Полученный результат ясно показывает, что для проявления противораковой активности важно наличие в партенине эндоциклической двойной связи, как возможного сайта алкилирования биологическими нуклеофилами.

Биологическая активность

Выше было указано, что цитотоксичность, как известно, опосредуется наличием потенциально алкилирующих структурных элементов, способных взаимодействовать с биологическими нуклеофилами, тем самым, ингибируя ряд клеточных функций, что приводит клетки к апоптозу^2,3. В настоящем изобретении авторы предоставили способы получения и изучили противораковую активность полученных спиропроизводных партенина против различных линий раковых клеток. Было исследовано в общей сложности 43 различных производных партенина с точки зрения их возможной активности против трех линий раковых клеток. Среди исследованных соединений большинство спиропроизводных имело активность, сравнимую с активностью исходного соединения, и несколько соединений проявляли даже лучшую активность. Во всей группе, состоявшей из 43 спиропроизводных, соединение-17 почти во всех случаях имело максимальную активность в отношении трех линий раковых клеток. Поэтому данное соединение было использовано в дальнейших исследованиях, и результаты таких исследований суммированы ниже.

Результаты оценки противораковой активности конкретных спиропроизводных партенина

Скрининг in vitro на цитотоксичность по отношению к линиям опухолевых клеток человека

Для определения цитотоксичности клетки на субконфлюентной стадии собирали из колбы путем обработки трипсином (0,5% в PBS, содержащей 0,02% EDTA). Для анализа использовали клетки с выживаемостью более 98%, где выживаемость определяли с применением трипанового синего. Для определения цитотоксичности готовили клеточные суспензии в полной среде роста с гентамицином (50 мкг/мл) с требуемой концентрацией клеток. Полученные клетки (100 мкл/лунка) высевали в 96-луночный планшет для тканевых культур. Клеткам давали расти в течение 24 часов при температуре 37°C во влажной атмосфере с 5% содержанием CO₂ в воздухе. Готовили концентрированный раствор (20 мМ) тестируемого соединения в ДМСО. Концентрированный раствор последовательно разводили полной средой роста, содержащей 50 мкг/мл гентамицина, получая три рабочих тестируемых раствора с концентрацией 1, 2, 5, 10, 50 и 100 мкМ. Значение цитотоксичности in vitro (значение IC₅₀) против линий раковых клеток человека определяли с использованием красителя сульфодамина B^5,6. Результаты суммированы в таблице 4.

Большинство спиропроизводных при концентрации 100 мкМ продемонстрировали сравнимое с исходным соединением (партенином) ингибирование роста (80%) линий человеческих раковых клеток, и несколько соединений имели даже лучшую активность, чем исходное соединение. Среди ряда аналогов партенина «соединение-17», по-видимому, является наиболее перспективным, поскольку оно продемонстрировало на 70% большее ингибирование роста линий человеческих раковых клеток даже при концентрации 5 мкМ для всех клеточных линий, использованных в настоящем исследовании. Максимальное ингибирование роста клеток (85%) наблюдали при концентрации 5 мкМ для линии клеток DU-145 рака простаты, кроме того ингибирование составляло 72% и 71% для клеточных линий SW-620 и Hep-2 рака ободочной кишки и печени, соответственно.

Значения IC₅₀ «соединения-17» (таблица 4) для клеточных линий SW-620, DU-145 и PC-3 составляли 4,3, 4,6 и 4,9 мкМ, соответственно. Соединение наиболее активно против линии SW-620, за которой следуют линии DU-145 и PC-3. Причина этого может заключаться в различных молекулярных характеристиках клеток.

Таким образом, из данных цитотоксичности in vitro и значений IC₅₀ становится понятно, что среди всех спироизоксазолиновых производных «соединение-17» представляет собой наиболее активное соединение, поэтому это соединение выбрали для дальнейших исследований механизма действия.

Механизм действия

Анализ апоптоза и некроза

Гель-электрофорез ДНК

Фрагментацию ДНК определяли с помощью электрофореза геномной ДНК, выделенной из клеток острого лимфобластного лейкоза (MOLT-4). Кратко, экспоненциально растущие клетки (3×10⁶ клеток/мл) в 6-луночных планшетах обрабатывали «соединением-17» (1, 10, 50 и 100 мкМ) в течение 24 часов. Клетки собирали, промывали PBS, осадок растворяли в буфере для лизиса (10 мМ EDTA, 50 мМ буфер Tris, pH 8,0, 0,5% масса/объем SDS и протеиназа K 0,5 мг/мл) и инкубировали при 50°C в течение 1 ч. Затем лизат инкубировали с РНКазой A (0,5 мг/мл) при 50°C в течение 1 ч. Наконец, полученную ДНК быстро нагревали до 70°C, добавляли наполняющий краситель и немедленно разделяли на 1,5% агарозном геле при напряжении 50В в течение 2-3 часов (фиг.2).

ДНК анализ клеточного цикла

Влияние «соединения-17» на содержание ДНК под влиянием распределения фаз клеточного цикла оценивали с использованием клеток человеческого лейкоза MOLT-4. Клетки MOLT-4 (1×10⁶ клеток/мл) инкубировали в среде RPMI-1640 с «соединением-17» (1, 10, 50 и 100 мкМ) в течение 24 часов. Затем клетки дважды промывали ледяным PBS, собирали, фиксировали ледяным PBS в 70% этаноле и выдерживали при -20°C в течение 30 мин. После фиксации клетки инкубировали с РНКазой A (0,1 мг/мл) при 37°C в течение 30 мин, окрашивали пропидиййодидом (50 мкг/мл) в течение 30 мин на льду в темноте и затем измеряли содержание ДНК используя проточный цитометр BD-LSR (Becton Dickinson, USA), обладающий возможностью разделения электронных дублетов, в котором используется возбуждение голубым (488 нм) излучением аргонового лазера. Данные собирали в форме списка на 10 событий для FL2-A относительно FL2-W и анализировали (фиг.3)^3d.

Химикаты и реагенты

RPMI-1640, минимальную эссенциальную среду Дульбекко (DMEM), глутамин, стауроспорин, трипсин, гентамицин, пенициллин, 5-фторурацил, пропидиййодид (PI), агарозу, этидийбромид, додецилсульфат натрия (SDS) приобретали у Sigma Aldrich, U.S.A. Протеиназу-K и РНКазу A, не содержащую ДНКазы, приобретали у Bangalore Genei, India.

Клеточные культуры

Линии раковых клеток человека получали либо в National Center for Cell Science, Pune, India, либо в National Cancer Institute, Frederick, U.S.A. Клетки рака ободочной кишки SW-620, рака простаты PC-3, DU-145 и острого лимфобластного лейкоза (MOLT-4) выращивали и хранили в среде RPMI-1640, pH 7,4, HEP-2. В полученную среду вводили добавки FCS (10%), пенициллина (100 ед/мл), стрептомицина (100 мкг/мл) и глутамина (2 мМ) и клетки выращивали в CO₂ инкубаторе (Hera cell, Heraeus, USA) при 37°C, 90% влажности и 5% содержании CO₂.

Результаты и обсуждение

ДНК исследования клеточного цикла (фиг.3) показали зависимое от концентрации увеличение популяции Sub G₁ в клетках MOLT-4. Популяция Sub G₁ составляла 6,58%, 33,09%, 33,2% и 55% при концентрации «соединения-17» 1, 10, 50 и 100 мкМ соответственно. Дозозависимое увеличение клеточной популяции Sub G₁ в клетках MOLT-4 при действии на клетки «соединения-17» показывает, что «соединение-17» вызывает апоптоз. Кроме того, «соединение-17» продемонстрировало полное блокирование фазы G₁ клеточного цикла при концентрации ДНК 100 мкМ. Фрагментация ДНК является конечным результатом апоптоза, который наблюдается на поздней стадии. В настоящем исследовании также установлено, что лестничные характеристики ДНК наблюдаются при концентрации «соединения-17» 10, 50 и 100 мкМ.

Противораковая активность in vivo

Размещение и содержание животных

В данном исследовании использовали неинбредных домовых мышей альбиносов из собственной колонии. Выбранных экспериментальных животных помещали в клетки из поликарбоната стандартного размера, в которых каждому животному было обеспечено пространство в соответствии с международными рекомендациями. Животным давали сбалансированный корм для мышей, выпускаемый M/s Ashiward Industries, Chandigarh (India), и обработанная в автоклаве вода была доступна без ограничений. Животных содержали в соответствии с руководством по уходу и использованию лабораторных животных (1996), ILAR, Washington DC. Животных содержали в условиях регулируемой температуры (23±2°C), влажности (50-60%) и цикла свет:темнота 12:12 часов. Само исследование и количество использованных животных было одобрено ведомственным комитетом по этике обращения с животными, IIIM, Jammu, India. Исследование проводили согласно протоколам National Cancer Institute (NCI), USA (Geran et al., 1972).

Противоопухолевая активность партенина и его производного соединения-17 в отношении асцитной опухоли Эрлиха (EAT)

Оценивали активность партенина и его производного соединения-17 на моделях солидной асцитной опухоли Эрлиха (EAT) при различных дозировках. Стандартная методика эксперимента заключалась в следующем:

Животным одного пола массой 20±3 г инъецировали внутримышечно в правое бедро 1×10⁷ клеток, извлеченных из брюшной полости неинбредных домовых мышей, у которых имелись опухоли со сроком развития 8-10 дней (в 1-й день). На следующий день животных случайным образом разделяли на тестируемые группы (7 животных в каждой группе) и одну контрольную группу (10 животных). Животным из тестируемых групп интраперитонеально в течение 9 последовательных дней вводили различные дозы партенина (10 мг/кг, 25 мг/кг и 50 мг/кг) и его производного соединения-17 (10 мг/кг, 25 мг/кг, 50 мг/кг, 100 мг/кг и 200 мг/кг) в виде суспензии в 1% гуммиарабике в соответствии с тестируемой группой. Животным из еще одной тестируемой группы вводили 5-FU @ 22 мг/кг i.p., и эти животные служили положительным контролем. Контрольной группе аналогичным образом вводили нормальный солевой раствор (0,2 мл i.p.). Процентное ингибирование роста опухоли измеряли на 13-й день, исходя из массы опухолей у животных (Geran et al., 1972). Измеряли наибольший и наименьший диаметр опухолевой массы с помощью штангенциркуля с нониусом и рассчитывали массу опухоли, используя следующую формулу:

Масса опухоли (мг)=длина (мм)×(ширина (мм)²/2).

Для каждой из групп вычисляли среднюю массу опухоли, и для групп, которым вводили тестируемые соединения, рассчитывали ингибирование роста опухоли в процентах по следующей формуле:

% Ингибирования роста опухоли=100×(средняя масса опухоли в контрольной группе-средняя масса опухоли в тестируемой группе)/средняя масса опухоли в контрольной группе

Противоопухолевая активность партенина и его производного соединения-17 в отношении асцитной карциномы Эрлиха (EAC)

Асцитную карциному Эрлиха (EAC) передавали путем переноса 1×10⁷ клеток из организма животного, у которого имелась асцитная карцинома Эрлиха со сроком развития 8-10 дней, в брюшную полость неинбредной домовой мыши. Для проведения теста выбирали мышей одного пола массой 20±3 грамма, у которых имелась асцитная опухоль. 1×10⁷ клеток, отобранных у животного, в организме которого имелась асцитная опухоль со сроком развития 8-10 дней, инъецировали в брюшную полость всех животных, принимавших участие в тестировании (0-й день). На следующий день животных случайным образом разделяли на тестируемые группы (7 животных в каждой тестируемой группе) и одну контрольную группу (10 животных). Животным из тестируемых групп интраперитонеально в течение 9 последовательных дней вводили различные дозы партенина (10 мг/кг, 25 мг/кг и 50 мг/кг) и его производного соединения-17 (10 мг/кг, 25 мг/кг, 50 мг/кг, 100 мг/кг и 200 мг/кг) в виде суспензии в 1% гуммиарабике в соответствии с тестируемой группой. Животным из еще одной тестируемой группы вводили 5 FU @ 20 мг/кг i.p., и эти животные служили положительным контролем. Контрольной группе аналогичным образом вводили нормальный солевой раствор (0,2 мл i.p.). Процентное ингибирование роста опухоли измеряли на 12-й день исходя из объема асцитной жидкости и количества опухолевых клеток в асцитной жидкости брюшной полости (Geran et al., 1972; Singh et al., 2007).

Процентное ингибирование роста опухоли рассчитывали по следующей формуле:

% Ингибирования роста=100×(среднее количество клеток в контрольной группе-среднее количество клеток в тестируемой группе)/среднее количество клеток в контрольной группе

Результаты

При исследовании действия партенина и его производного соединения-17 на мышей с солидными опухолями было продемонстрировано дозозависимое ингибирование роста опухолей на модели опухоли EAT. Ингибирование роста опухоли с высокой статистической значимостью (p<0,01) до 35,11% наблюдалось у мышей с EAT, которым вводили производное партенина соединение-17 в дозировке 100 мг/кг i.p., тогда как дозировка 200 мг/кг i.p. вызвала смерть всех тестируемых животных после четырех дней введения. Высокий уровень токсичности без значимой противоопухолевой активности был зафиксирован в группах, которым вводили партенин, поскольку он вызывал смерть всех животных на второй и третий день введения соединения в дозировках 25 и 50 мг/кг i.p., соответственно (таблица 5).

В случае мышей с EAC, как партенин, так и его производное соединение-17 продемонстрировали такую же модель дозозависимого ингибирования роста опухоли и токсичности. При дозировке 100 мг/кг i.p. соединение-17 с высокой статистической достоверностью (p<0.01) продемонстрировало ингибирование роста опухоли вплоть до 60,50%, и более высокая доза этого соединения 200 мг/кг i.p. привела к смерти всех тестируемых животных на четвертый день введения. В данном эксперименте партенин также вызвал гибель всех тестируемых животных на 2-й и 3-й день введения партенина в дозировках 25 и 50 мг/кг i.p., соответственно, продемонстрировав высокий уровень токсического воздействия на животных без какой-либо значимой противоопухолевой активности (таблица 6).

Заключение

Представленная совокупность данных позволяет прийти к выводу, что полученные аналоги партенина обладают высоким цитотоксическим потенциалом и вызывают зависимый от концентрации апоптоз раковых клеток. Хотя механизм действия полученных соединений не был установлен полностью, в настоящее время проводятся исследования по определению точного механизма действия и использованию этого механизма в исследованиях по модификации полученных авторами соединений с целью получения более эффективных соединений.

На основании всех проведенных обсуждений, авторы изобретения смогли прийти к следующему заключению о SAR для партенина.

Спиропроизводные партенина, полученные согласно настоящему изобретению, исследовали с точки зрения их цитотоксичности против трех различных линий раковых клеток. Сравнение значений IC₅₀ для цитотоксичности соединений, перечисленных в таблице 2, раскрывает SAR молекул, заключающуюся в том, что α,β-ненасыщенный кетонный фрагмент в молекуле партенина оказывает значительное влияние на цитотоксичность, т.к. удаление α,β-ненасыщенного кетонного фрагмента приводит к почти полной потере цитотоксичности. Модификация α-метилен-γ-бутиролактона за счет реакции диполярного циклоприсоединения нитрилоксидов, нитронов и азидов по экзоциклической двойной связи партенина приводит к соединениям, которые обладают значительной активностью по сравнению с исходной молекулой (I). Было обнаружено, что некоторые спиропроизводные партенина обладают лучшей активностью, чем исходное соединение. Таким образом, экзоциклическую двойную связь удалось с успехом использовать для включения в структуру молекулы липофильных фрагментов или азотистых гетероциклов, для улучшения цитотоксичности исходной молекулы.

Экспериментальный раздел

Следующие ниже примеры приведены в качестве иллюстрации, и их не следует истолковывать, как ограничение объема настоящего изобретения.

Общие замечания: Температуры плавления фиксировали на приборе для измерения температур плавления Buchi D-545; ИК-спектры (диски KBr) регистрировали на приборе Bruker Vector 22. ЯМР спектры регистрировали на приборе Brucker DPX200 в CDCl₃, применяя ТМС в качестве внутреннего стандарта для протонных спектров и сигналы растворителя в качестве внутреннего стандарта для углеродных спектров. Значения химических сдвигов δ указаны в миллионных долях (м.д.), и константы расщепления приведены в Гц. Масс-спектры регистрировали на приборах EIMS (Shimadzu) и ESI-esquire3000 Bruker Daltonics. За ходом всех химических преобразований наблюдали с помощью ТСХ на покрытых силикагелем 60 пластинах 2×5 см F254, толщиной 0,25 мм (Merck). Визуализацию хроматограмм осуществляли УФ светом с длиной волны 254-366 нм и йодом. ТГФ перегоняли над бензофенонкетилнатрием. Металлы, использованные в реакциях, приобретали у Aldrich.

Получение спироизоксазолиновых производных партенина

Соединение-1: К перемешиваемому раствору N-оксида 4-метоксибензонитрила (1,5 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 20 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 232,1°C; [α]_D ²⁵ -14,1;

ИК(KBr,см^-1): 1606, 1724, 1776, 2869, 2942, 3404;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,13 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,36 (с, 3H), 1,40-1,77 (м, 4H), 1,79-2,39 (м, 2H), 3,14-3,20 (кв, 1H), 3,35-3,44 (д, 1H, J=16,9 Гц), 3,59-3,67 (д, 1H, J=16,9 Гц), 3,84 (с, 3H), 5,22 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,23 (д, 1H, J=5,8 Гц), 6,9 (д, 2H, J=8,8 Гц), 7,51 (д, 1H, J=5,8 Гц), 7,61 (д, 2H, J=8,8 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,0, 20,2, 21,8, 31,6, 36,9, 40,0, 55,5, 59,0, 80,6, 84,1, 90,1, 90,5, 114,5, 121,1, 128,7, 131,1, 132,3, 151,3, 156,8, 161,8, 165,1, 174,4, 212,4;

ESI МС: 434 (M+Na);

элементный анализ: вычислено для C₂₃H₂₅NO₆ C=67,14, H=6,12, N=3,40, найдено: C=67,09, H=6,02, N=3,32%.

Соединение-2: К перемешиваемому раствору N-оксида 4-хлорбензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 30 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое светло-желтое вещество, т.пл. 138,2°C; [α]_D ²⁵ -13;

ИК(KBr,см^-1): 1598, 1722, 1776, 2874, 2928, 3441;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 0,12 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,34 (с, 3H), 1,51-1,91 (м, 4H), 2,21-2,43 (м, 2H), 3,15-3,24 (кв, 1H), 3,34-3,43 (д, 1H, J=17 Гц), 3,54-3,63 (д, 1H, J=17 Гц), 5,38 (д, 1H, J=5,4 Гц), 6,21 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,30 (д, 2H, J=8,6), 7,51 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,61 (д, 1H, J=8,6 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,0, 20,0, 21,4, 31,3, 36,2, 39,9, 48,9, 58,9, 77,6, 79,9, 84,5, 90,4, 127,0, 128,0, 129,0, 131,9, 136,6, 155,5, 163,7, 173,3, 210,8;

ESI МС: 434,5 (M+Na);

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₂ClNO₅ C=63,53, H=5,33, N=3,37, найдено: C=63,47, H=5,30, N=3,31%.

Соединение-3: К перемешиваемому раствору N-оксида 2-бромбензонитрила (1,3 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 15 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 25 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое светло-коричневое вещество, т.пл. 210,4°C; [α]_D ²⁵ -20,5;

ИК (KBr,см^-1): 1597, 1721, 1759, 2856, 2924, 3490;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 0,12 (д, 3H, J=7,9 Гц), 1,34 (с, 3H), 1,58-2,03 (м, 4H), 2,06-2,75 (м, 2H), 3,17-3,20 (кв, 1H), 3,41-3,51 (д, 1H, J=17 Гц), 3,59-3,70 (д, 1H, J=17 Гц), 5,21 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,23 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,21-7,39 (м, 2H), 7,51-7,63 (м, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,6, 18,8, 29,3, 30,3, 46,5, 56,3, 66,7, 77,1_, 78,9, 81,4, 88,4, 88,7, 119,1, 127,8, 128,3, 130,0, 131,9, 133,6, 152,5, 163,8, 171,2, 209,4;

ESI МС: 483 (M+Na);

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₂BrNO₅ C=57,40, H=4,82, N=17,36 найдено: C=57,34, H=4,78, N=17,30%.

Соединение-4: К перемешиваемому раствору N-оксида 4-диметиламинобензонитрила (1,3 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 15 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 25 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 295,6°C; [α]_D ²⁵ -32,8;

ИК (KBr,см^-1): 1539, 1599, 1717, 1778, 2872, 2957, 3413;

¹H ЯМР (Ацетон): δ 1,16 (д, 3H, J=7,7 Гц), 1,31 (с, 3H), 1,72-2,04 (м, 4H), 2,06-2,48 (м, 2H), 2,89 (с, 6H) 3,18-3,25 (кв, 1H), 3,50-3,59 (д, 1H, J=17,3 Гц), 3,72-3,81 (д, 1H, J=17,3 Гц), 5,12 (д, 1H, J=5,6 Гц), 6,18 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,19 (д, 1H, J=8,5 Гц), 7,62-7,73 (м, 5H);

¹³C ЯМР (125 МГц, ДМСО-d₆): δ 18,1, 19,9, 21,1, 22,5, 26,8, 31,6, 38,7, 40,3, 49,0, 58,5, 80,2, 83,7, 90,5, 129,3, 133,6, 135,9, 142,3, 152,2, 166,0, 173,8, 211,6;

ESI МС: 437 (M+Na);

элементный анализ: вычислено для C₂₄H₂₈N₂O₅ C=67,93, H=6,65, N=6,60, найдено: C=67,88, H=6,62, N=6,51%.

Соединение-5: К перемешиваемому раствору N-оксида 4-гидроксибензонитрила (1,5 ммоль) в DCM (10 мл) в течение 15 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 25 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое светло-коричневое вещество, т.пл. 129,2°C; [α]_D ²⁵ -30,8;

ИК (KBr,см^-1): 1561, 1599, 1719, 1775, 2927, 2961, 3435;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 0,15 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,43 (с, 3H), 1,61-2,10 (м, 4H), 2,17-2,43 (м, 2H), 3,19-3,29 (кв, 1H), 3,36-3,46 (д, 1H, J=17,5 Гц), 3,67-3,76 (д, 1H, J=17,5 Гц), 5,10 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,12 (д, 1H, J=5,8 Гц), 6,91 (д, 1H, J=5,8 Гц), 7,35 (д, 2H, J=6 Гц), 7,47-7,51 (д, 2H, J=6 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,5, 19,8, 20,2, 27,3, 31,0, 38,1, 40,0, 47,2, 57,9, 80,2, 83,1, 91,1, 126,8, 129,7, 131,6, 131,9, 133,5, 153,6, 170,8, 173,3, 211,1;

ESI МС: 397;

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₃NO₆ C=66,49, H=5,83, N=3,52, найдено: C=66,52, H=5,76, N=3,48%.

Соединение-6: К перемешиваемому раствору N-оксида 2-нитробензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 20 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое желтое вещество, т.пл. 265,0°C; [α]_D ²⁵ -22,4;

ИК (KBr,см^-1): 1561, 1590, 1721, 1779, 2922, 2961, 3440;

¹H ЯМР (Ацетон):, δ 1,15 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,33 (с, 3H), 1,57-2,10 (м, 4H), 2,14-2,40 (м, 2H), 3,15-3,26 (кв, 1H), 3,38-3,45 (д, 1H, J=17,4 Гц), 3,57-3,66 (д, 1H, J=17,4 Гц), 5,11 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,02 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,70 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,78-7,85 (м, 3H), 8,07 (д, 1H, J=7,2 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,5, 19,3, 20,2, 30,5, 37,4, 39,9, 48,4, 57,9, 77,3, 79,0, 83,1, 90,5, 122,1, 123,2, 124,2, 130,0, 131,5, 132,9, 165,5, 172,7, 211,1;

ESI МС: 426;

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₂N₂O₇ C=61,97, H=5,20, N=6,57, найдено: C=61,90, H=5,23, N=6,51%.

Соединение-7: К перемешиваемому раствору N-оксида 3,5-дигидроксибензонитрила (1,5 ммоль) в DCM (10 мл) в течение 15 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 20 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме, и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое коричневатое вещество, т.пл. 135,0°C; [α]_D ²⁵ +10,9;

ИК (KBr,см^-1): 1516, 1601, 1722, 1778, 2931, 3436;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,13 (д, 3H, J=7,7 Гц), 1,35 (с, 3H), 1,36-1,92 (м, 4H), 2,37-2,41 (м, 2H), 3,06-3,17 (кв, 1H), 3,34-3,43 (д, 1H, J=16,9 Гц), 3,48 (с, 3H), 3,55-3,63 (д, 1H, J=16,9 Гц), 5,21 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,21 (д, 1H, J=5,8 Гц), 7,35 (д, 2H, J=8,5 Гц), 7,52-7,59 (м, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,0, 20,0, 21,4, 21,6, 31,3, 36,2, 40,0, 49,0, 58,9, 79,8, 84,6, 90,4, 127,1, 128,1, 129,0, 132,0, 136,6, 154,9, 163,5, 173,2, 210,5;

ESI МС: 427;

элементный анализ: вычислено для C₂₃H₂₅NO₇ C=64,62, H=5,89, N=3,27, найдено: C=64,56, H=5,87, N=3,21%.

Соединение-8: К перемешиваемому раствору N-оксида 3,4-диметоксибензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 20 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое светло-коричневое вещество, т.пл. 151,0°C; [α]_D ²⁵ -10,9;

ИК (KBr,см^-1): 1570, 1602, 1718, 1760, 2886, 2943, 3494;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,15 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,38 (с, 3H), 1,66-2,04 (м, 4H), 2,17-2,38 (м, 2H), 3,12-3,21 (кв, 1H), 3,36-3,45 (д, 1H, J=16,8 Гц), 3,61-3,69 (д, 1H, J=16,8 Гц), 3,92 (с, 6H), 5,25 (д, 1H, J=5,6 Гц), 6,28 (д, 1H, J=5,9 Гц), 6,80 (м, 1H), 7,01 (м, 1H), 7,37 (м, 1H), 7,51 (д, 1H, J=5,9 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,8, 19,5, 20,1, 21,2, 31,3, 38,6, 40,5, 49,2, 57,5, 58,5, 80,3, 83,5, 92,7, 127,5, 128,5, 131,1, 131,8, 134,6, 153,5, 164,4, 171,6, 211,3;

ESI МС: 432;

элементный анализ: вычислено для C₂₄H₂₇NO₇ C=65,89, H=5,29, N=3,20, найдено: C=65,80, H=5,23, N=3,12%.

Соединение-9: К перемешиваемому раствору N-оксида 4-гидрокси-3-метоксибензонитрила (1,5 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 15 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 20 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое бесцветное вещество;

ИК (KBr,см^-1): 1561, 1590, 1721, 1779, 2922, 2961, 3440;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,14 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,38 (с, 3H), 1,57-2,05 (м, 4H), 2,07-2,40 (м, 2H), 3,24-3,32 (кв, 1H), 3,36-3,45 (д, 1H, J=17 Гц), 3,67-3,76 (д, 1H, J=l7 Гц), 5,31 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,31 (д, 1H, J=5,6 Гц), 7,35 (д, 1H, J=5,6 Гц), 7,52-7,59 (м, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,0, 20,0, 21,4, 21,6, 31,3, 36,2, 40,0, 49,0, 58,9, 77,8, 79,8, 84,6, 90,4, 127,1, 128,1, 132,0, 134,5, 136,6, 154,9, 163,5, 173,2, 210,5;

ESI МС: 413;

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₃NO₇ C=63,91, H=5,60, N=3,38, найдено: C=63,85, H=5,61, N=3,30%.

Соединение-10: К перемешиваемому раствору N-оксида 1H-индол-2-карбонитрила (1,5 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 15 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 15 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое желтоватое вещество;

ИК (KBr,см^-1): 1561, 1594, 1719, 1775, 2921, 2970, 3449;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,13 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,37 (с, 3H), 1,51-2,01 (м, 4H), 2,03-2,40 (м, 2H), 3,23-3,31 (кв, 1H), 3,37-3,46 (д, 1H, J=17,2 Гц), 3,66-3,77 (д, 1H, J=17,2 Гц), 5,27 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,02 (д, 1H, J=5,9 Гц), 6,79-6,83 (м, 2H), 6,95 (д, 1H, J=8 Гц), 7,06 (д, 1H, J=8 Гц), 7,31 (с, 1H), 7,26 (д, 1H, J=5,9 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,8, 19,7, 21,0, 21,2, 30,3, 38,5, 41,5, 50,2, 58,4, 80,1, 83,7, 90,7, 127,5, 128,2, 131,5, 131,9, 134,2, 136,0, 136,9, 153,5, 164,3, 172,6, 175,2, 211,0;

ESI МС: 420;

элементный анализ: вычислено для C₂₄H₂₄N₂O₅ C=68,56, H=5,75, N=6,66, найдено: C=68,60, H=5,66, N=6,58%.

Соединение-11: К перемешиваемому раствору N-оксида 3-нитробензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 25 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 1,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое желтоватое вещество;

ИК (KBr,см^-1): 1570, 1591, 1725, 1778, 2919, 2966, 3445;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,16 (д, 3H, J=7,7 Гц), 1,30 (с, 3H), 1,76-2,04 (м, 4H), 2,17-2,41 (м, 2H), 3,14-3,24 (кв, 1H), 3,44-3,53 (д, 1H, J=16,9 Гц), 3,65-3,74 (д, 1H, J=16,9 Гц), 5,27 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,29 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,53 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,58-7,66 (м, 1H), 8,12 (д, 1H, J=7,8 Гц), 8,30 (д, 1H, J=8,1), 8,44 (с, 1H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,6, 19,3, 20,2, 26,1, 31,4, 38,4, 40,4, 50,2, 60,5, 81,3, 86,0, 92,4, 126,2, 127,0, 131,2, 131,7, 133,3, 133,7, 156,1, 164,3, 171,6, 211,2;

ESI МС: 426;

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₂N₂O₇ C=61,91, H=5,20, N=6,57, найдено: C=61,89, H=5,13, N=6,47%.

Соединение-12: К перемешиваемому раствору N-оксида тиофен-2-карбонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 20 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое бесцветное вещество;

ИК (KBr,см^-1): 1559, 1580, 1732, 1780, 2932, 2966, 3460;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,17 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,36 (с, 3H), 1,50-2,27 (м, 4H), 2,36-2,43 (м, 2H), 3,23-3,33 (кв, 1H), 3,41-3,50 (д, 1H, J=17 Гц), 3,57-3,65 (д, 1H, J=17 Гц), 5,25 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,31 (д, 1H, J=5,8 Гц), 6,89-7,09 (м, 2H), 742 (м, 1H), 7,51 (д, 1H, J=5,8 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,2, 19,6, 20,0, 21,5, 37,5, 41,5, 49,1, 58,4, 81,0, 83,7, 91,6, 128,2, 130,8, 131,5, 134,9, 135,6, 153,4, 165,3, 174,6, 211,3;

ESI МС: 387;

элементный анализ: вычислено для C₂₀H₂₁NO₅S C=62,00, H=5,46, N=3,62, найдено: C=61,95, H=5,40, N=3,60%.

Соединение-13: К перемешиваемому раствору N-оксида 2-метилбензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 30 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое светло-коричневое вещество, т.пл. 277°C;

ИК (KBr,см^-1): 1561, 1590, 1721, 1779, 2922, 2961, 3440;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,14 (д, 3H, J=7,7 Гц), 1,37 (с, 3H), 1,41-2,04 (м, 4H), 2,27-2,36 (м, 2H), 2,38 (с, 3H), 3,12-3,21 (кв, 1H), 3,37-3,46 (д, 1H, J=16,8 Гц), 3,62-3,70 (д, 1H, J=16,8 Гц), 5,24 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,21 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,31 (д, 1H, J=5,9), 7,41 (с, 1H), 7,48-7,53 (м, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CD₃OD): δ 16,9, 19,2, 20,0, 21,1, 22,8, 31,2, 35,9, 39,8, 40,5, 49,2, 58,7, 80,2, 83,7, 90,1, 127,1, 128,4, 130,8, 131,5, 138,5, 153,2, 165,3, 171,6, 211,1;

ESI МС: 411;

элементный анализ: вычислено для C₂₃H₂₅NO₅ C=69,86, H=6,37, N=3,54, найдено: C=69,80, H=6,32, N=3,50%.

Соединение-14: К перемешиваемому раствору N-оксида 3-метилбензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 35 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 183°C; [α]_D ²⁵ -68;

ИК (KBr,см^-1): 1561, 1590, 1721, 1779, 2922, 2961, 3440;.

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,13 (д, 3H, J=7,7 Гц), 1,36 (с, 3H), 1,78-2,42 (м, 4H), 2,43-2,53 (м, 2H), 2,54 (с, 3H), 2,55-2,89 (кв, 1H), 3,42-3,50 (д, 1H, J=16,9 Гц), 3,64-3,72 (д, 1H, J=16,9 Гц), 5,22 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,23 (д, 1H, J=5,7 Гц), 7,26-7,47 (м, 3H), 7,37 (д, 1H, J=5,7 Гц);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,0, 20,0, 21,5, 22,8, 31,4, 38,9, 40,1, 49,0, 59,0, 79,6, 84,7, 89,0, 125,8, 127,7, 128,8, 129,8, 131,6, 132,3, 138,3, 157,1, 163,1, 173,3, 210,1;

ESI МС: 411;

элементный анализ: вычислено для C₂₃H₂₅NO₅ C=69,86, H=6,37, N=3,54, найдено: C=69,81, H=6,27, N=3,48%.

Соединение-15: К перемешиваемому раствору N-оксида 4-фторбензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 25 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 193°C; [α]_D ²⁵ -54°;

ИК (KBr,см^-1): 1513, 1602, 1717, 1776, 2876, 2965, 3434;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,13 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,36 (с, 3H), 1,59-2,04 (м, 4H), 2,28-2,40 (м, 2H), 3,18-3,21 (кв, 1H), 3,36-3,44 (д, 1H, J=16,9 Гц), 3,57-3,66 (д, 1H, J=16,9 Гц), 5,22 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,20 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,04-7,13 (м, 2H), 7,52 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,62-7,69 (м, 2H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,0, 20,0, 21,4, 31,4, 31,5, 34,2, 36,4, 40,5, 49,1, 59,0, 79,6, 84,7, 90,2, 115,9, 116,0, 128,8, 128,9, 132,4, 137,3, 155,2, 163,0, 210,5;

ESI МС: 399;

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₂FNO₅ C=66,16, H=5,55, N=3,51, найдено: C=66,10, H=5,51, N=3,44%.

Соединение-16: К перемешиваемому раствору N-оксида 4-цианобензонитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 25 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2,5 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое желтоватое вещество, т.пл. 147°C;

ИК (KBr,см^-1): 1631, 1720, 1776, 2875, 2927, 3461;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,14 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,37 (с, 3H), 1,40-2,04 (м, 4H), 2,17-2,41 (м, 2H), 3,16-3,24 (кв, 1H), 3,38-3,46 (д, 1H, J=16,9 Гц), 3,60-3,68 (д, 1H, J=16,9 Гц), 5,24 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,26 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,53 (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,68-7,85 (м, 4H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 16,9, 18,0, 20,0, 20,3, 21,4, 31,3, 31,8, 35,8, 40,0, 49,9, 58,9, 79,9, 80,4, 84,6, 91,1, 113,9, 118,1, 127,5, 128,6, 132,8, 132,1, 132,9, 155,1, 163,4, 172,9, 210,4;

ESI МС: 406;

элементный анализ: вычислено для C₂₃H₂₂N₂O₅ C=67,97, H=5,46, N=6,89, найдено: C=67,91, H=5,40, N=6,85%.

Соединение-17: К перемешиваемому раствору N-оксида антраценнитрила (1,2 ммоль) в ТГФ (10 мл) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 0-5°C, добавляли партенин (1 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 20 мин, с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР и масс-спектроскопией.

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 162°C;

ИК (KBr,см^-1): 1593, 1626, 1722, 1774, 2870, 2926, 3442;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 1,12 (д, 3H, J=7,6 Гц), 139 (с, 3H), 1,46-1,80 (м, 4H), 2,17-2,41 (м, 2H), 3,37-3,39 (кв, 1H), 3,44-3,53 (д, 1H, J=17,8 Гц), 3,73-3,82 (д, 1H, J=17,8 Гц), 5,36 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,20 (д, 1H, J=5,7 Гц), 7,36-7,61 (м, 5H), 8,02 (д, 2H, J=8 Гц), 8,15 (д, 2H, J=8 Гц), 8,54 (с, 1H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,3, 20,4, 22,1, 31,0, 40,4, 41,2, 49,2, 60,2, 71,2, 78,1, 83,4, 86,8, 90,1, 124,0, 126,9, 127,5, 128,4, 129,6, 130,1, 130,4, 131,5, 132,3, 154,2, 163,6, 164,3, 168,6, 212,0;

ESI МС: 481;

элементный анализ: вычислено для C₃₀H₂₇NO₅ C=74,83%, H=5,65%, N=2,91%, найдено: C=74,80%, H=5,60%, N=2,89%.

Получение спироизоксазолидиновых производных партенина:

Соединение-18: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[4-хлорфенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 183°C; [α]_D ²⁵ +70,58;

ИК (KBr,см^-1): 3450, 2963, 2910,2, 1751,5, 1594, 1366,8, 1220,1, 1070,9;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,5-7,15 (м, 7H), 6,96-6,83 (м, 3H), 6,27 (д, J=5,84 Гц, 1H), 5,26 (д, J=5,38 Гц, 1H), 5,18 (т, J=8,07 Гц, 1H), 3,25-3,1 (м, 1H), 3,05-2,9 (м, 1H), 2,47-1,6 (м, 6H), 1,18 (с, 3H), 1,11 (д, J=7,73 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,41, 20,47, 22,00, 30,11, 40,53, 43,20, 49,73, 60,00, 70,33, 79,92, 85,00, 87,00, 115,31, 118, 122,90, 128,40, 129,25, 132,49, 140,00, 152,00, 164,01, 175,00,,211,00;

ESI МС: 494,1 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₈H₂₈ClNO₅ C=68,08%, H=5,71%, N=2,84%, найдено: C=68,12%, H=5,60%, N=2,89%.

Соединение-19: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[2-метилфенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 181°C; [α]_D ²⁵ +44,66;

ИК (KBr,см^-1): 3450, 2952,5, 2920,8, 2857,4, 1749,3, 1599,7, 1456,6, 1377,2, 802,2;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,74-7,71 (м, 1H), 7,50 (д, J=5,89 Гц, 1H), 7,27-7,10 (м, 5H), 6,94-6,81 (м, 3H), 6,27 (д, J=5,9 Гц, 1H), 5,28 (м, 2H), 3,25-3,15 (м, 1H), 3,04-2,95 (м, 1H), 2,7-1,6 (м, 6H), 2,43 (с, 3H), 1,26 (с, 3H), 1,1 (д, J=4,15 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,93, 19,36, 21,67, 31,40, 40,01, 41,10, 49,25, 58,984, 67,57, 79,50, 84,61, 86,42, 114,25, 117,01, 121,836, 125,98, 126,75, 128,40, 128,73, 130,70, 131,83, 134,60, 151,43, 163,79, 174,36, 210,96;

ESI МС: 474,1 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₉H₃₁NO₅ C=73,55%, H=6,60%, N=2,96%, найдено: C=73,60%, H=5,58%, N=2,92%.

Соединение-20: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[4-бромфенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 185°C; [α]_D ²⁵ +91,07;

ИК (KBr,см^-1): 3451,68, 2962,07, 2925,92, 1774,56, 1754,00, 1722,69, 1596,79, 1488,03, 1011,38, 800,35, 754,89, 713,22;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,56-7,39 (м, 5H), 7,28-7,1,8 (м, 2H), 6,86-6,69 (м, 3H), 6,24 (д, 1H), 5,28(д, 1H), 5,17 (т, 1H), 3,23-3,12 (м, 1H), 3,0-2,87 (м, 1H), 2,54-1,6 (м, 6H), 1,40 (с, 3H), 1,14 (д, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,93, 20,09, 21,63, 31,40, 40,04, 42,68, 49,16, 58,97, 69,88, 79,49, 85,16, 86,57, 114,80, 117,66, 122,41, 128,27, 128,43, 131,96, 139,98, 151,04, 164,76, 474,09, 210,74;

ESI МС: 540,1 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₈H₂₈BrNO₅ C=62,46%, H=5,24%, N=2,60%, найдено: C=62,40%, H=5,26%, N=2,94%.

Соединение-21: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[4-метилфенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое коричневое вещество, т.пл. 114°C; [α]_D ²⁵ +47,44;

ИК (KBr,см^-1): 3427,55, 3019,21, 2960,26, 2924,93, 1772,74, 1722,05, 1597,57, 1514,07, 1020,43, 756,53;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,47-6,86 (м, 10H), 6,2 (д, J=5,83 Гц, 1H), 5,25 (м, 2H), 3,25-3,12 (м, 1H), 3,0-2,875 (м, 1H), 2,6-1,61 (м, 6H), 2,36 (с, 3H), 1,3 (с, 3H), 1,15 (д, J=3,19 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,40, 20,01, 21,07, 31,55, 40,04, 43,00, 49,35, 58,98, 70,40, 79,43, 84,57, 86,30, 114,97, 117,53, 122,19, 127,02, 128,29, 129,30, 131,88, 137,51, 151,33, 163,66, 174,36, 210,88;

ESI МС: 474,3 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₉H₃₁NO₅ C=73,55%, H=6,60%, N=2,96%, найдено: C=73,60%, H=6,58%, N=2,90%.

Соединение-22: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[4-гидрокси-3-нитрофенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 7 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое желтое вещество, т.пл. 167°C; [α]_D ²⁵ +74,10;

ИК (KBr,см^-1): 3571,94, 3512,12, 3377,61, 3059,29, 2945,72, 1757,40, 1703,12, 1539,97, 1486,22, 1339,63, 1240,80, 976,92, 758,45, 696,82;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 8,25-6,8 (м, 9H ), 6,26 (д, J=5,84 Гц, 1H), 5,25-5,1 (м, 2H), 3,2-3,1 (м, 1H), 3,0-2,85 (м, 1H), 2,5-1,5 (м, 6H), 1,3 (с, 3H), 1,25 (д, J=7,67 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,97, 19,98, 21,66, 31,67, 40,08, 42,55, 49,171, 58,97, 69,19, 79,51, 84,65, 86,58, 115,02, 117,86, 120,75, 122,80, 28,57, 128,87, 131,99, 133,44, 135,95, 150,68, 154,587, 163,47, 174,06, 210,66;

ESI МС: 519 (M-1);

элементный анализ: вычислено для C₂₈H₂₈N₂O₈ C=64,61%, H=5,42%, N=5,38%, найдено: C=64,58%, H=5,44%, N=5,42%.

Соединение-23: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-фенил-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 170°C; [α]_D ²⁵ +116,47;

ИК (KBr,см^-1): 3410,10, 3012,68, 2923,80, 1753,32, 1726,45, 1596,79, 1487,14, 1201,64, 974,48, 753,76, 717,70;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,54-7,15 (м, 8H), 7,15-6,87 (м, 3H), 6,18 (д, J=5,86 Гц, 1H), 5,29-5,19 (м, 2H), 3,25-3,15 (м, 2H), 2,96-2,88 (м, 2H), 2,6-1,68 (м, 4H), 1,33 (с, 3H), 1,08 (д, J=3,97 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,92, 19,98, 21,64, 31,54, 39,95, 41,91, 49,13, 58,94, 70,94, 70,48, 79,10, 84,49, 86,46, 114,72, 117,54, 122,10, 126,49, 127,75, 128,69, 131,67, 140,91, 151,38, 164,00, 174,22, 211,33;

ESI МС: 460,2 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₈H₂₉NO₅ C=73,18%, H=6,36%, N=3,05%, найдено: C=73,20%, H=6,32%, N=3,09%.

Соединение-24: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[4-фторфенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 154°C; [α]_D ²⁵ +38,35;

ИК (KBr,см^-1): 3437,14, 2962,44, 2923,96, 1753,52, 1722,45, 1597,89, 1509,65, 1261,62, 1088,42, 1024,40, 801,63;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,52-7,45 (м, 3H), 7,28-6,85 (м, 7H), 6,20 (д, J=5,87 Гц, 1H), 5,26 (д, J=5,58 Гц, H), 5,16 (т, J=7,15 Гц, 1H), 3,25-3,12 (м, 1H), 3,0-2,87 (м, 1H), 2,80-1,6 (м, 6H), 1,34 (с, 3H), 1,12 (д, J=3,55 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): 18,06, 20,22, 22,70, 29,36, 40,14, 42,88, 49,40, 59,06, 70,00, 79,50, 84,70, 86,47, 115,07, 122,52, 128,24, 128,80, 132,08, 151,14, 163,58, 174,10, 210,75;

ESI МС: 478,2 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₈H₂₈FNO₅ C=70,43%, H=5,91%, N=2,93%, найдено: C=73,40%, H=5,96%, N=2,90%.

Соединение-25: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[3-бром-4-метоксифенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 96°C; [α]_D ²⁵ +84,44;

ИК (KBr,см^-1): 3442,92, 2924,86, 1774,12, 1721,68, 1596,72, 1493,09, 1258,31, 1019,69, 715,99;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,73 (д, J=1,88 Гц, 1H), 7,46-6,84 (м, 9H), 6,17 (д, J=5,84 Гц, 1H), 5,24 (д, J=5,56 Гц, 1H), 5,09 (т, 1H), 3,89 (с, 3H), 3,25-3,125 (м, 1H), 2,92-2,82 (м, 2H), 2,47-1,6 (м, 5H), 1,25 (с, 3H), 1,07 (д, J=7,38 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,99, 20,18, 21,68, 31,77, 40,06, 42,92, 49,16, 56,37, 59,01, 69,68, 79,66, 84,59, 86,53, 112,24, 115,03, 117,72, 122,51, 126,99, 128,48, 131,29, 131,82, 134,31, 151,16, 155,52, 163,93, 174,22, 211,22;

ESI МС: 570,2 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₉H₃₀BrNO₆ C=61,27%, H=5,32%, N=2,46%, найдено: C=61,30%, H=5,29%, N=2,50%.

Соединение-26: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[4-цианофенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 7 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 116°C; [α]_D ²⁵ +86,90;

ИК (KBr,см^-1): 3444,38, 2961,88, 2926,46, 2227,78, 1775,62, 1722,78, 1597,46, 1261,25, 1195,57, 1020,23, 802,05, 757,01, 561,81;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,71-7,6 (м, 4H), 7,47 (д, J=5,89 Гц, 1H), 7,3-7,l2 (м, 2H), 7,0-6,8 (м, 3H), 6,19 (д, J=5,86 Гц, 1H), 5,28-5,19 (м, 2H), 3,25-3,15 (м, 1H), 3,1-2,95 (м, 1H), 2,5-1,6 (м, 6H), 1,25 (с, 3H), 1,1 (д, J=7,54 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 17,89, 19,95, 21,72, 31,52, 39,95, 41,89, 49,00, 58,92, 69,72, 79,60, 84,49, 86,54, 114,35, 118,55, 122,41, 127,27, 128,87, 132,80, 146,68, 150,86, 163,72, 174,123, 210,79;

ESI МС: 485,2 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₉H₂₈N₂O₅ C=71,88%, H=5,82%, N=5,78%, найдено: C=71,90%, H=5,76%, N=5,82%.

Соединение-27: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[5-бром-2-метоксифенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 197°C; [α]_D ²⁵ +100;

ИК (KBr,см^-1): 3417,42, 2925,64, 2854,68, 1773,88, 1719,72, 1597,14, 1489,39, 1259,35, 1022,69, 812,91, 749,97;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,8 (д, J=2,39 Гц, 1H), 7,49 (д, J=5,89 Гц, 1H), 7,47-7,19 (м, 3H), 6,96-6,79 (м, 4H), 6,26 (д, J=5,89 Гц, 1H), 5,48 (т, J=7,47 Гц, 1H), 5,29 (д, J=5,62 Гц, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,19-3,09 (м, 2H), 2,36-1,55 (м, 5H), 1,34 (с, 3H), 1,10 (д, J=7,7 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,00, 20,0, 21,8, 31,45, 40,16, 49,27, 55,68, 64,81, 79,22, 84,79, 86,71, 112,14, 113,75, 121,68, 128,0, 129,55, 129,92, 131,20, 131,94, 132,25, 151,41, 155,33, 163,28, 174,06, 210,43;

ESI МС: 485,2 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₉H₃₀BrNO₆ C=61,27%, H=5,32%, N=2,46%, найдено: C=61,30%, H=5,29%, N=2,50%.

Соединение-28: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[2,3-диметоксифенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 9 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое темно-коричневое вещество, т.пл. 99°C; [α]_D ²⁵ +41,66;

ИК (KBr,см^-1): 3543,63, 2992,41, 2962,29, 1764,13, 1724,86, 1597,03, 1508,69, 1207,95, 1031,35, 730,51;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,55-7,4 (м, 2H), 7,28-7,10 (м, 3H), 6,94-6,86 (м, 2H), 6,5-6,47 (м, 2H), 6,21 (д, J=5,86 Гц, 1H), 5,4 (т, J=7,47 Гц, 1H), 5,26 (д, J=5,72 Гц, 1H), 3,86 (с, 3H), 3,8 (с, 3H), 3,125-3,06 (м, 2H), 2,6-1,6 (м, 6H), 1,32 (с, 3H), 1,1 (д, J=4,5 Гц,,3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,09, 20,05, 21,85, 31,50, 40,18, 49,49, 55,54, 59,11, 61,68, 63,73, 65,08, 79,26, 84,74, 86,63, 104,43, 98,54, 114,18, 116,96, 122,00, 128,73, 129,20, 132,11, 151,67, 149,52, 157,33, 160,37, 163,55, 210,96;

ESI МС: 525,8 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₃₀H₃₃NO₇ C=69,35%, H=6,40%, N=2,70%, найдено: C=69,38%, H=6,35%, N=2,75%.

Соединение-29: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[3,4,5-триметоксифенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 119°C; [α]_D ²⁵ +63,12;

ИК (KBr,см^-1): 3418,37, 2935,05, 1755,90, 1724,09, 1594,97, 1463,01, 1348,85 1236,61, 1127,88, 755,42, 696,77;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,49 (д, J=5,9 Гц, 1H), 7,26-7,17 (м, 4H), 7,0-6,87 (м, 2H), 6,75 (с, 1H), 6,27 (д, J=5,9 Гц, 1H), 5,25 (д, J=5,59 Гц, 1H), 5,13 (т, J=6,79 Гц, 1H), 3,86 (с, 9H), 3,2-3,1 (м, 1H), 3,0-2,8 (м, 1H), 2,62-1,55 (с, 6H), 1,12 (д, J=7,7 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): 18,66, 20,92, 22,12, 32,02, 40,70, 43,35, 50,51, 56,09, 59,40, 60,73, 71,29, 79,21, 83,76, 85,95, 103,50, 114,74, 122,07, 128,18, 133,29, 153,56, 164,00, 174,614, 210,00;

ESI МС: 571,8 (M);

элементный анализ: вычислено для C₃₁H₃₅NO₈ C=67,75%, H=6,42%, N=2,55%, найдено: C=67,70%, H=6,39%, N=2,58%.

Соединение-30: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[3,5-диметил-4-гидроксифенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 108°C; [α]_D ²⁵ +65,33;

ИК (KBr,см^-1): 3438,94, 2923,67, 2851,63, 1594,66, 1384,49, 1352,07, 1020,03, 669,20;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,45 (д, J=5,9 Гц, 1H), 7,26-7,10 (м, 4H), 6,93 (м, 3H), 6,22 (д, J=5,88 Гц, 1H), 5,24 (д, J=5,63 Гц, 1H), 5,03 (т, J=2,55 Гц, 1H), 3,12-3,22 (м, 1H), 2,87-2,75 (м, 1H), 2,5-1,5 (м, 6H), 2,4 (с, 6H), 1,28 (с, 3H), 1,1 (д, J=7,57 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (200 МГц, CDCl₃): 16,24, 18,60, 21,24, 21,97, 30,74, 32, 42,14, 46,99, 51,21, 60, 72,71, 78,46, 84,05, 85,45, 115,08, 117, 120,89, 122,56, 126,71, 128,71, 132, 151,33, 151,68, 161,63, 173,52, 210;

ESI МС: 525,8 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₃₀H₃₃NO₆ C=71,55%, H=6,61%, N=2,78%, найдено: C=71,58%, H=6,63%, N=2,81%.

Соединение-31: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[3-хлорфенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 7 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое бледно-желтое вещество, т.пл. 180°C; [α]_D ²⁵ +159,39;

ИК (KBr,см^-1): 3455,41, 3007,02, 2926,19, 1745,20, 1725,74, 1597,96, 1348,89, 976,86, 752,60;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,55 (с, 1H), 7,48 (д, J=5,88 Гц, 1H), 7,35-7,16 (м, 5H), 6,96-6,84 (м, 3H), 6,26 (д, J=5,9 Гц, 1H), 5,26 (д, J=5,62 Гц, 1H), 5,16 (т, J=7,05 Гц, 1H), 3,24-3,12 (м, 1H), 3,05-2,9 (м, 1H), 2,55-1,5 (м, 6H), 1,37 (с, 3H), 1,125 (д, J=7,57 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,06, 20,11, 21,78, 31,55, 40,27, 42,85, 49,36, 59,00, 69,96, 79,49, 85,50, 87,00, 114,75, 122,48, 124,86, 126,63, 128,13, 128,93, 135,00, 163,42, 211,00;

ESI МС: 494,1 (M+1);

элементный анализ: вычислено для C₂₈H₂₈ClNO₅ C=68,08%, H=5,71%, N=2,84%, найдено: C=68,11%, H=5,73%, N=2,81%.

Соединение-32: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[2-нитрофенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое красновато-желтое вещество, т.пл. 158°C; [α]_D ²⁵ +25,60;

ИК (KBr,см^-1): 3432,85, 2926,43, 2871,52, 1776,85, 1721,31, 1597,29, 1524,75, 1348,79, 976,09, 756,99, 696,25;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 8,02-7,92 (м, 2H), 7,6-7,53 (т, J=7,24 Гц, 1H), 7,40 (д, J=5,81 Гц, 1H), 7,17-7,03 (м, 3H), 6,86-6,69 (м, 3H), 6,19 (д, J=5,84 Гц, 1H), 5,74 (т, J=7,52 Гц, 1H), 5,19 (д, J=5,57 Гц, 1H), 3,3-3,2 (м, 1H), 3,05-2,9 (м, 1H), 2,37-1,5 (м, 6H), 1,28 (с, 3H), 1,01 (д, J=7,71 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,03, 20,06, 21,95, 31,51, 40,25, 49,29, 59,00, 66,91, 79,26, 85,00, 87,00, 89,5, 113,46, 117,00, 123,00, 125,01, 128,71, 129,07, 132,36, 134,21, 138,00, 148,00, 151,00, 163,35, 212,11;

ESI МС: 527,1 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₉H₂₉NO₇ C=69,18%, H=5,80%, N=2,78%, найдено: C=69,21%, H=5,77%, N=2,82%.

Соединение-33: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле добавляли N-[2-метоксифенил]-α-фенилнитрон (1,5 эквивалента). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 8,5 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией. Чистый продукт характеризовали ¹H/¹³C-ЯМР и масс-спектроскопией:

Твердое коричневое вещество, т.пл. 111°C; [α]_D ²⁵ +73,61;

ИК (KBr,см^-1): 3410,10, 2923,80, 2871,27, 1753,32, 1726,45, 1596,79, 1487,14, 1201,64, 974,48, 753,76, 717,70;

¹H ЯМР (CDCl₃): δ 7,56-7,45 (м, 3H), 7,31-7,19 (м, 2H), 7,0-6,92, (м, 5H), 6,30 (д, J=5,85 Гц, 1H), 5,3 (д, J=5,72 Гц, 1H), 5,2 (т, 1H), 3,87 (с, 3H), 3,3-3,2 (м, 1H), 3,05-2,9 (м, 1H), 2,62-1,6 (м, 6H), 1,4 (с, 3H), 1,2 (д, J=2,84 Гц, 3H);

¹³C ЯМР (125 МГц, CDCl₃): δ 18,07, 20,13, 21,69, 31,58, 34,83, 40,22, 43,00, 49,57, 55,40, 59,5, 70,40, 79,51, 114,41, 115,40, 117,80, 122,49, 127,92, 129,14, 133,00, 132,12, 152,00, 160,00, 163,615, 172,00, 211,00, 85,5, 87,00;

ESI МС: 512,1 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₉H₃₁NO₆ C=71,15%, H=6,38%, N=2,86%, найдено: C=71,18%, H=6,42%, N=2,79%.

Синтез спироазиридиновых производных партенина:

Соединение-34: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли азидобензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 15 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 245-247°C; [α]_D ²⁵ -16;

ИК (KBr,см^-1): 3439, 2961, 2925, 1779, 1751, 1721, 1590 и 1562;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,14 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,38 (с, 3H), 1,57-2,05 (м, 4H), 2,07-2,40 (м, 2H), 4,85 (д, 1H, J=7,55 Гц), 6,15 (д, 1H, J=5,3 Гц), 6,61 (д, 2H, J=7,8 Гц), 6,95-7,10 (м, 1H), 7,14 (д, 2H, J=7,8 Гц), 7,48 (д, 1H, J=5,3);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 17,0, 20,5, 22,4, 25,6, 29,3, 45,2, 60,2, 77,8, 80,0, 84,6, 90,4, 116,1, 119,1, 124,0, 130,5, 138,6, 159,9, 171,5, 176,2, 210,5;

ESI МС: 376 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₁H₂₃NO₄ C=71,37%, H=6,56%, N=3,96%, найдено: C=70,3%, H=7,1% и N=3,9%.

Соединение-35: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли 1-азидо-3-хлорбензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 16 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

[α]_D ²⁵ -8;

ИК (KBr,см^-1): 3443, 2961, 2918, 1789, 1751, 1726, 1590 и 1568;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,13 (д, 3H, J=7,5 Гц), 1,36 (с, 3H), 1,55-2,10 (м, 4H), 2,07-2,36 (м, 2H), 4,79 (д, 1H, J=7,71 Гц), 6,16 (д, 1H, J=5,7 Гц), 6,52 (д, 1H, J=7,0 Гц), 6,71 (м, 2H), 7,10 (д, 1H, J=7,0 Гц), 7,48 (д, 1H, J=5,7);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 19,0, 21,5, 22,4, 26,6, 29,3, 46,2, 57,2, 75,8, 80,0, 83,6, 90,4, 119,1, 122,1, 124,0, 130,5, 140,6, 155,9, 178,5, 185,2, 208,5;

ESI МС: 410 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₁H₂₂ClNO₄ C=65,03%, H=5,72%, N=3,61%, найдено: C=67,03%, H=5,01% и N=3,19%.

Соединение-36: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли 1-азидо-4-метоксибензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 12 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Т.пл. 245-247°C; [α]_D ²⁵ -16;

ИК (KBr,см^-1): 3443, 2961, 2918, 1789, 1751, 1726, 1590 и 1568;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,17 (д, 3H, J=7,7 Гц), 1,38 (с, 3H), 1,50-2,11 (м, 4H), 2,10-2,37 (м, 2H), 3,77 (с, 3H), 5,29 (д, 1H, J=7,1 Гц), 6,25 (д, 1H, J=5,9 Гц), 6,79 (с, 4H), 7,41 (д, 1H, J=5,9);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 17,3, 19,8, 23,6, 29,7, 35,1, 41,0, 59,1, 77,3, 79,3, 84,5, 114,5, 120,5, 122,1, 132,0, 155,8, 163,6, 210,5;

ESI МС: 406 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₅NO₅ C=68,91%, H=6,57%, N=3,65%, найдено: C=67,03%, H=7,01% и N=3,34%.

Соединение-37: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли 1-азидо-2-метоксибензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 12 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Коричневатая сиропообразная жидкость; [α]_D ²⁵ -4;

ИК (KBr,см^-1): 3436, 2923, 2853, 1746, 1725, 1711, 1590 и 1558;

¹H ЯМР, (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,15 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,34 (с, 3H), 1,49-2,12 (м, 4H), 2,09-2,39 (м, 2H), 3,84 (с, 3H), 5,33 (д, 1H, J=7,33 Гц), 6,23 (д, 1H, J=5,8 Гц), 6,9-7,1 (м, 4H), 7,49 (д, 1H, J=5,8);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 16_r8, 20,8, 25,6, 28,7, 36,1, 44,0, 57,1, 76,3, 76,3, 85,5, 119,5, 122,5, 152,1, 132,0, 156,8, 167,6, 210,6;

ESI МС: 406 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₅NO₅ C=68,91%, H=6,57%, N=3,65%, найдено: C=69,03%, H=6,01% и N=3,84%.

Соединение-38: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли 1-азидо-3-метилбензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 10 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Сиропообразная коричневая жидкость; [α]_D ²⁵ -16;

ИК (KBr,см^-1): 3439, 2961, 2925, 1779, 1751, 1721, 1590 и 1562;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,12 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,37 (с, 3H), 1,53-2,08 (м, 4H), 2,07-2,39 (м, 2H), 2,21 (с, 3H), 5,29 (д, 1H, J=7,2 Гц), 6,26 (д, 1H, J=5,6 Гц), 6,75 (д, 2H, J=8,2 Гц), 7,06 (д, 2H, J=8,2), 7,48 (д, 1H, J=5,6);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 18,3, 20,8, 24,6, 30,7, 35,1, 43,0, 55,1, 79,3, 81,3, 84,5, 113,5, 120,5, 124,1, 132,0, 157,8, 168,6, 183,1;

ESI МС: 390 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₅NO₄ C=71,91%, H=6,87%, N=3,81%, найдено: C=69,93%, H=7,01% и N=4,34%.

Соединение-39: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли 1-азидо-2-нитробензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 8 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Твердое бесцветное вещество, т.пл. 222-224°C; [α]_D ²⁵ -6;

ИК (KBr,см^-1): 3439, 2961, 2925, 1779, 1751, 1721, 1590 и 1562;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,10 (д, 3H, J=7,5 Гц), 1,39 (с, 3H), 1,53-2,08 (м, 4H), 2,07-2,39 (м, 2H), 4,73 (д, 1H, J=7,2 Гц), 6,04 (д, 1H, J=5,7 Гц), 7,30 (д, 2H, J=6,3 Гц), 7,49 (д, 1H, J=5,7), 7,48 (д, 1H, J=5,7), 7,83 (м, 1H);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц) δ 17,3, 20,8, 23,6, 30,7, 36,1, 43,0, 54,1, 79,3, 81,3, 84,5, 113,5, 120,5, 126,2, 132,0, 157,8, 178,6, 183,1, 210,3;

ESI МС: 421 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₁H₂₃N₂O₆ C=63,31%, H=5,57%, N=7,03%, найдено: C=64,93%, H=6,01% и N=6,34%.

Соединение-40: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле (10 мл) добавляли 1-азидо-3-нитробензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 75 до 80°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 15 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Твердое желтое вещество, т.пл. 241-242°C; [α]_D ²⁵ -14;

ИК (KBr,см^-1): 3439, 2961, 2925, 1779, 1751, 1721, 1590 и 1562;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,13 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,38 (с, 3H), 1,57-2,05 (м, 4H), 2,08-2,37 (м, 2H), 4,86 (д, 1H, J=6,7 Гц), 6,2l (д, 1H, J=5,9 Гц), 7,38 (д, 2H, J=7,8 Гц), 7,62 (м, 2H), 7,89 (д, 1H, J=5,9);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц) δ 18,0, 20,5, 21,4, 25,6, 29,3, 48,2, 60,2, 78,8, 80,0, 84,6, 90,4, 100,7, 116,1, 119,1, 124,0, 130,5, 138,6, 159,9, 171,5, 178,2, 210,8;

ESI МС: 421 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₁H₂₂N₂O₆ C=63,31%, H=5,57%, N=7,03%, найдено: C=64,3%, H=4,98% и N=7,39%.

Соединение-41: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли метиловый эфир 3-азидобензойной кислоты (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 15 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Бесцветное твердое вещество, т.пл. 251-253°C; [α]_D ²⁵ -10;

ИК (KBr,см^-1): 3453, 2951, 2924, 1779, 1751, 1746, 1590 и 1578;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,18 (д, 3H, J=7,5 Гц), 1,39 (с, 3H), 1,45-2,10 (м, 4H), 2,12-2,36 (м, 2H), 4,80 (д, 1H, J=7,5 Гц), 6,l4 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,82 (д, 1H, J=7,9 Гц), 7,20-743 (м, 3H), 7,49 (с, 1H, J=5,5 Гц);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц) δ 19,0, 22,5, 22,4, 28,6, 29,3, 36,7, 46,2, 57,2, 75,8, 85,0, 89,6, 90,4, 119,1, 122,1, 124,0, 130,5, 140,6, 159,9, 171,5, 178,2, 210,8;

ESI МС: 434 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₃H₂₅NO₅ C=67,14%, H=6,12%, N=3,40%, найдено: C=66,03%, H=7,67% и N=4,19%.

Соединение-42: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом бензоле (10 мл) добавляли 1-азидо-4-метилбензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 70 до 80°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 16 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Твердое беловатое вещество, т.пл. 241-242°C; [α]_D ²⁵ -12;

ИК (KBr,см^-1): 3493, 2979, 2926, 1869, 1371, 1756, 1589, 1573 и 1235;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,13 (д, 3H, J=7,6, Гц), 1,36 (с, 3H), 1,53-2,08 (м, 4H), 2,07-2,39 (м, 2H), 2,19 (с, 3H), 5,32 (д, 1H, J=7,3 Гц), 6,28 (д, 1H, J=5,5 Гц), 6,78 (д, 1H, J=8,35 Гц), 7,06 (д, 2H, J=8,35 Гц), 7,49 (д, 1H, J=5,5);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 18,5, 20,8, 26,6, 33,7, 35,1, 43,0, 55,1, 76,3, 89,3, 85,5, 113,5, 125,5, 129,1, 132,0, 158,8, 167,6, 185,1, 211,0;

ESI МС: 390 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₅NO₄ C=71,91%, H=6,87%, N=3,81%, найдено: C=70,93%, H=7,21% и N=4,34%.

Соединение-43: К раствору партенина (1 эквивалент) в сухом толуоле (10 мл) добавляли 1-азидо-2-метилбензол (2 эквивалента), поддерживая температуру от 100 до 105°C, и реакционную смесь перемешивали при указанной температуре в течение 22 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией (силикагель 100-200 меш, элюирование градиентом н-гексан/EtOAc), получая чистый продукт. Чистый продукт характеризовали ИК, ¹H ЯМР, ¹³C ЯМР, DEPT и масс-спектроскопией:

Сиропообразная сероватая жидкость; [α]_D ²⁵ -6;

ИК (KBr,см^-1): 3432, 2989, 2916, 1869, 1311, 1756, 1539, 1573 и 1245;

¹H ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 1,12 (д, 3H, J=7,6 Гц), 1,37 (с, 3H), 1,52-2,10 (м, 4H), 2,10-2,39 (м, 2H), 2,34 (с, 3H), 4,79 (д, 1H, J=7,7 Гц), 6,15 (д, 1H, J=5,7 Гц), 6,54 (д, 1H, J=7,0 Гц), 6,72 (м, 3H), 7,09 (д, 1H, J=8,5), 7,48 (д, 1H, J=5,7);

¹³C ЯМР (CDCl₃, 200 МГц): δ 17,5, 23,8, 26,6, 31,7, 35,1, 45,0, 55,1, 76,3, 89,3, 89,5, 95,6, 123,5, 128,5, 134,1, 139,0, 158,8, 167,6, 185,1, 211,0;

ESI МС: 390 (M+23);

элементный анализ: вычислено для C₂₂H₂₅NO₄ C=71,91%, H=6,87%, N=3,81%, найдено: C=71,63%, H=7,25% и N=4,44%.

Список литературы:

1. Herz, W.; Watanabe, H.; Miyazaki, M.; Kishida. Y, J. Am. Chem..Soc. 1962, 84, 2601.

2. Schmidt, T; J., Toxic Activities of Sesquiterpene Lactones structural and Biochemical Aspects, Current Org. Chem. 1999, 3, 577-608.

3. Dirsch, V.M.; Stuppner, H., Vollmar, A.M. Helenalin triggers a CD95 death receptor-independent apoptosis that is not affected by overexpression of BCl-X_L or Bcl-2¹, Cancer Res. 2001, 61, 5817-5823.

4. Monks, D. Seudiero, P. Skehan, R. Shoemaker, K. Paull, D. Vistica, C. Hose, JLangley, P. Cronise, A. Vaigro-WolV, M. Gray-Goodrich, H. Campbell, J. Mayo, M. Boyd, Feasibility of a high-flux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines, J. Natl. Cancer Inst. 1991, 83, 757-766.

5. Skehan, P.; Storeng, R.; Seudiero, D.; Monks, A.; Mcmahon, J,; Vitica, D.; Warren, J.T.; Bokesch, H.; Kenney, S.; Boyd M.R. New colorimetric cytotoxic assay for anticancer drug screening. Journal of National Cancer Institute, 1990, 82, 1107-1112.

6. Krishan, A. Rapid flow cytoflourometric analysis of mammalian cell cycle by propidium iodide staining. Journal of Cell biology, 1975, 66, 188-193.

7. Garcia-Pineres, A.J.; Castro, V.; Mora, G.; Schmidt, T.J.; Strunck, E,; Pahl, H.L.; Merfort, I. J. Biol. Chem. 2001, 276, 39713-39720.

8. Mazor, R.L.; Menendez, I.Y.; Ryan, M.A.; Fiedler, M.A.; Wong, H.R. Cytokine 2000, 12, 239-245.

9. Hehner, S.P.; Hofmann, T.G.; Ratter, F.; Dumont, A.; Droge, W.; Schmitz, M.L. J. Biol. Chem. 1998, 273, 18117-18121.

10. Guido L.; Knorre, A.; Schmidt, T.J.; Pahl, H.L.; Merfort, I. J. Biol. Chem. 1998, 275, 33508-33516.

11. Garcia-Pineres, A.J.; Lindenmeyer, M.T.; Merfort, I. Life Sci. 2004, 75, 841-856.

12. Lee, K.H.; Furukawa, H. Journal of Medicinal Chemistry, 1972, 15, 609.

13. Dhillon, R.S.; Nayyar, K; Singh, S.; Dhaliwal, Z.S. Indian J. Chem., 1994, 33B, 1038.

14. Das, B.; Kashinatham, A.; Madhusudhan, P. Tetrahedron Lett, 1997, 38, 7457.

15. Das, B.; Madhusudhan, P., Kashinatham A. Tetrahedron Lett, 1998, 39, 431.

16. Ruesch, H.; Mabry, T.J. Tetrahedron, 1969, 25, 805.

17. Wagner, S.; Hofmann, A.; Siedle, B.; Terfloth, L.; Merfort,.I.; Gasteiger, J.; J. Med. Chem. 2006, 49, 2241-2252.

18. Santoro. Et al. US patent no. 6391200, 2004.

19. Huisgen, R. Angew. Chern Int. Ed. Engl. 1963, 2, 565.

20. Padwa, A. Angew. Chem. 1976, 88, 131.

21. Hamer, J.; Macaluso, A. Chem. Rev. 1964, 64, 473.

22. Kumar, H.M.S.; Anjaneyulu, S.; Yadav, J.S, Synthetic comm. 1999, 29, 877.

23. Kumar, H.M.S.; Anjaneyulu, S.; Reddy, B.V.S.; Yadav, J.S. Synlett, 1999, 5, 551.

Таблица 1
  a) Все соединения охарактеризованы ¹H ЯМР, масс-спектроскопией.
b) Выходы, полученные после колоночной хроматографии.  

Таблица 2
  a) Все соединения охарактеризованы ¹H ЯМР, масс-спектроскопией.
b) Выходы, полученные после колоночной хроматографии.  

Таблица 3
  a) Все соединения охарактеризованы ¹H ЯМР, масс-спектроскопией.
b) Выходы, полученные после колоночной хроматографии.  

Таблица 4
Значения IC ₅₀ (мкМ) различных производных партенина   IC ₅₀ Соединение SW-620 DU-145 PC-3         Соединение-1 41 20 35 Соединение-2 51 43 49 Соединение-3 - - -         Соединение-4 - - 6,33 Соединение-5   93 - Соединение-6 40 34 37 Соединение-7 69 72 84 Соединение-8 86 84 - Соединение-9 - - - Соединение-10 - - - Соединение-11 49 51 55 Соединение-12 34 19 29 Соединение-13 5 12 10 Соединение-14 - - 66,6         Соединение-15 3,6 13 27

Соединение-16 53 26 32 Соединение-17 4,3 4,6 4,9 Соединение-18 7,5 7 7,8 Соединение-19 6 5,6 6,4 Соединение-20 6,7 6,3 5,8 Соединение-21 8,7 8,1 8,5 Соединение-22 9,4 9,8 8,1 Соединение-23 5,8 5,6 5,7 Соединение-24 7,3 6,4 5,7 Соединение-25 6,8 6,3 5,7 Соединение-26 4,8 5 4,8 Соединение-27 6,1 7,8 8,2 Соединение-28 7,5 11 11 Соединение-29 5,7 5,6 8,6 Соединение-30 - - - Соединение-31 6,1 7,4 8,2 Соединение-32 13 28 8,4 Соединение-33 53 91 81 Соединение-34 87,7 31,4 10,6 Соединение-35 48,4 39,5 86,1 Соединение-36 - - - Соединение-37 47,3 - 52,0 Соединение-38 15,0 62,5 61,5 Соединение-39 33,0 28,0 10,0 Соединение-40 61,0 - 10,1 Соединение-41 30 18,5 10,1 Соединение-42 - - - Соединение-43 22 - 12,5 Партенин 38,7 31,1 40,3

Таблица 5
Влияние партенина и его производного - соединения-17 - на мышей с асцитной опухолью Эрлиха (EAT) Тестируемая группа Дозировка (мг/кг) i.p. Масса опухоли (мг)
средн.±ст.откл. % Ингибирования роста опухоли Контроль 0,2 мл 1708±51,07 - Партенин 10 1542,86±35,24 9,69 Партенин 25 Все животные умерли на 4-й день Партенин 50 Все животные умерли на 2-й день Соединение-17 10 1547,14±36,63 9,44 Соединение-17 25 1445,71±41,52 15,38 Соединение-17 50 1332,14±32,59* 22,03 Соединение-17 100 1108,57±38,02** 35,11 Соединение-17 200 Все животные умерли на 3-й день 5-FU 22 832,28±35,21 51,28 Данные представлены в виде среднего значения±ст.отклонение и % ингибирования роста опухоли (n=7)
p>0,05 = статистически недостоверный результат
* = p<0,05 = статистически достоверный результат
** = p<0,01 = высокая статистическая достоверность.

Таблица 6
Влияние партенина и его производного - соединения-17 - на мышей с асцитной карциномой Эрлиха (EAC) Тестируемая группа Дозировка (мг/кг) i.p. Объем асцитной жидкости (мл) средн.±ст.откл. Количество клеток в асцитной жидкости (×10⁷) средн.±ст.откл. % Ингибирования роста опухоли Контроль 0,2 мл 4,57±0,39 85,00±4,75 - Партенин 10 3,92±0,38 74,41±2,77 12,01 Партенин 25 Все животные умерли на 4-й день Партенин 50 Все животные умерли на 2-й день Соединение-17 10 4,07±0,35 78,42±2,90 7,74 Соединение-17 25 3,62±0,32 68,71±3,16 19,16 Соединение-17 50 2,85±0,37* 61,85±4,20* 27,23 Соединение-17 100 2,07±0,33** 33,57±2,60** 60,50 Соединение-17 200 Все животные умерли на 3-й день 5-FU 20 0 0 100 Данные представлены в виде среднего значения±ст.отклонение и % ингибирования роста опухоли (n=7)
p>0,05 = статистически недостоверный результат
* = p<0,05 = статистически достоверный результат
** = p<0,01 = высокая статистическая достоверность.

Схема 1

Схема 2

Схема 3

Схема 4

Схема 5

Схема 6

Изобретение относится к спиропроизводным партенина формулы 1b, где R/R' выбрано из группы, состоящей из фенила или замещенного фенила, такого как 4-ClC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 2,4-(MeO)₂C₆H₃, 4-MeC₆H₄, и формулы 1d, где R представляет собой 4-MeOC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 3-NO₂C₆H₄, 3-MeC₆H₄, 3-MeCO₂C₆H₄. Также изобретение относится к способам получения указанных спиропроизводных и фармацевтической композиции на их основе. Технический результат - соединения формулы 1b и 1d, обладающие противораковой активностью. 5 н. и 9 з.п. ф-лы, 6 сх., 3 ил., 6 табл.

1. Спиропроизводное партенина, представляющее собой спироизоксазолидиновое производное, имеющее общую структурную формулу 1b:

где значение R/R' выбрано из группы, состоящей из фенила или замещенного фенила, такого как 4-ClC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 2,4-(MeO)₂C₆H₃, 4-MeC₆H₄.

2. Спиропроизводное партенина, представляющее собой спироазиридиновое производное, имеющее общую структурную формулу 1d:

где заместитель R представляет собой замещенный фенил, такой как 4-MeOC₆H₄, 2-NO₂C₆H₄, 3-NO₂C₆H₄, 3-MeC₆H₄, 3-MeCO₂C₆H₄.

3. Спиропроизводное по п.1, где примеры соединений по настоящему изобретению включают:
 

4. Спиропроизводное по п.2, где примеры соединений по настоящему изобретению включают:
 

5. Соединение по любому из пп.1-4 для применения в лечении рака, где линии раковых клеток выбраны из группы, состоящей из спиро-изоксазолидиновых и азиридиновых производных партенина.

6. Соединение по любому из пп.1-4 для применения в лечении рака, причем IC₅₀ находится в интервале от 2,5 до 91 мкМ.

7. Соединение по любому из пп.1-4 для применения в лечении рака, где соединение имеет статистически достоверный цитотоксический потенциал и вызывает зависимый от концентрации апоптоз раковых клеток.

8. Соединение по любому из пп.1-4 для применения в лечении рака, где соединение демонстрируют сопоставимое ингибирование роста (≥80%) линий раковых клеток человека при концентрации 100 мкМ.

9. Соединение по любому из пп.1-4 для применения в лечении рака, где анализ клеточного цикла показывает увеличение популяции sub G1, блокирование фазы G1 и отчетливо выраженную фрагментацию лестничного типа в анализе фрагментации ДНК.

10. Способ получения спиропроизводного партенина, представляющего собой спироизоксазолидиновое производное формулы 1b по п.1;
включающий: взаимодействие партенина с дипольным соединением, выбранным из группы, состоящей из нитронов, в органическом растворителе при температуре в диапазоне от 0 до 25°C в течение 2-25 ч, гашение реакционной смеси хлоридом аммония и последующую очистку, с получением соответствующего спиропроизводного.

11. Способ получения спиропроизводного партенина, представляющего собой спироазиридиновое производное формулы 1d по п.2;
включающий: взаимодействие партенина с дипольным соединением, выбранным из группы, состоящей из азидов, в органическом растворителе при температуре в диапазоне от 0 до 25°C в течение 2-25 часов, гашение реакционной смеси хлоридом аммония и последующую очистку, с получением соответствующего спиропроизводного.

12. Способ по п.10 или 11, где органический растворитель выбирают из группы, состоящей из тетрагидрофурана, бензола, толуола, дихлорметана, этилендихлорида.

13. Способ по п.10 или 11, где соотношение партенина и дипольного соединения составляет интервал от 1,0 до 1,2 : 1,5 эквивалентов.

14. Фармацевтическая композиция, проявляющая противораковую активность, содержащая соединение по любому одному из пп.1-4 в диапазоне дозировок 10-200 мг/кг массы тела, необязательно в комбинации с фармацевтически приемлемым эксципиентом, добавкой или разбавителем.