Настоящее изобретение относится к применению новых производных, которые ингибируют Btk и полезны для лечения аутоиммунных и воспалительных заболеваний, вызванных нарушенной B-клеточной активацией. Описанные здесь новые производные 5-фенил-1H-пиридин-2-она и 6-фенил-2H-пиридазин-3-она полезны для лечения артрита,
Протеинкиназы составляют одно из самых больших семейств ферментов человека и регулируют многочисленные процессы передачи сигнала путем добавления фосфатных групп к белкам (статья Hunter, Cell, 1987, 50, cc.823-829). Более конкретно, тирозинкиназы фосфорилируют белки по фенольной группе тирозиновых остатков. Семейство тирозинкиназы включает членов, которые контролируют клеточный рост, миграцию и дифференциацию. Нарушенная киназная активность присутствует в различных заболеваниях человека, включая рак, аутоиммунные и воспалительные заболевания. Поскольку Протеинкиназы являются ключевыми регуляторами клеточной передачи сигнала, они обеспечивают мишень для модулирования клеточной функции с помощью низкомолекулярных ингибиторов киназы, и таким образом обеспечивают хорошие мишени для разработки лекарственных препаратов. В дополнение к лечению опосредованных киназой заболеваний, селективные и эффективные ингибиторы активности киназы также полезны для исследования процессов клеточной передачи сигналов и идентификации других клеточных терапевтических мишеней.
Существует доказательство того, что В-клетки играют ключевую роль в патогенезе аутоиммунного и/или воспалительного заболевания. Белковые терапевтические лекарственные средства, которые снижают количество B-клеток, такие как ритуксан, эффективны в отношении управляемых аутоантителами воспалительных заболеваний, таких как ревматоидный артрит (статья Rastetter и др., Annu Rev Med, 2004, 55, с.477). Следовательно, ингибиторы протеинкиназ, которые играют роль в B-клеточной активации, могут быть полезными терапевтическими средствами в отношении опосредованных B-клетками патологий, таких как продуцирование аутоантител.
Передача сигнала B-клеточным рецептором (BCR) контролируется рядом B-клеточных откликов, включающих пролиферацию и дифференциацию в зрелых продуцирующих антитела клетках. BCR является ключевой регулирующей точкой B-клеточной активности, и нарушение передачи сигнала может вызывать нарушение регулирования B-клеточной пролиферации и образование патогенных аутоантител, которые приводят к множественным аутоиммунным и/или воспалительным заболеваниям. Тирозинкиназа Брутона (Btk) является киназой, несвязанной с BCR, которая является мембранопроксимальной и находится непосредственно ниже BCR. Недостаток Btk, как было показано, блокирует передачу сигнала BCR, и следовательно, ингибирование Btk могло бы быть полезным для терапевтического подхода для блокирования заболеваний, опосредованными B-клетками.
Btk является членом семейства Тес тирозинкиназ, и как было показано, является критическим регулятором раннего развития В-клеток и активации и выживаемости зрелых В-клеток (статьи Khan и др., Immunity, 1995, 3, с.283; Ellmeier и др., J. Exp. Med., 2000, 192, с.1611). Мутация Btk у людей приводит к состоянию X-связанной агаммаглобулинемии (XLA) (обзоры в Rosen и др., New Eng. J. Med., 1995, 333, с.431 и Lindvall и др., Immunol. Rev., 2005, 203, с.200). Эти пациенты являются иммунокомпромисными и показывают ослабленное развитие B-клеток, пониженный уровень иммуноглобулина и периферийных уровней B-клеток, ослабленные независимые от T-клеток иммунные отклики, а также ослабленную мобилизацию кальция вследствие стимулирования BCR.
Доказательство роли Btk в отношении аутоиммунных и воспалительных заболеваний также приведено для моделей мышей с дефицитом Btk. В предклинических мышиных моделях системной красной волчанки (SLE) мыши с дефицитом Btk показывают заметное улучшение развития заболевания. Кроме того, мыши с дефицитом Btk резистентны к вызванному коллагеном артриту (статья Jansson и Holmdahl, Clin. Exp. Immunol., 1993, 94, с.459). Селективный ингибитор Btk показал дозозависимую эффективность в отношении модели артрита у мышей (статья Pan и др., Chem. Med Chem., 2007, 2, cc.58-61).
Btk также экспрессируется клетками, отличными от В-клеток, которые могут участвовать в заболеваниях. Например, Btk экспрессируется тучными клетками, и тучные клетки костного мозга с дефицитом Btk демонстрируют ослабленное вызванное антигеном дегранулирование (статья Iwaki и др., J. Biol. Chem., 2005, 280, с.40261). Это показывает, что Btk мог бы быть полезным для лечения патологических откликов тучных клеток, таких как аллергия и астма. Также моноциты у пациентов XLA, у которых отсутствует активность Btk, показывают пониженное продуцирование TNF-альфа после стимулирования (статья Horwood и др., J Exp Med, 2003, 197, с.1603). Следовательно, опосредованное TNF-альфа воспаление может модулироваться низкомолекулярными ингибиторами Btk. Также сообщалось, что Btk играет роль в апоптозе (статья Islam и Smith, Immunol. Rev., 2000, 178, с.49,), и следовательно, ингибиторы Btk могут быть полезны для лечения некоторых B-клеточных лимфом и лейкемий (статья Feldhahn и др., J. Exp. Med., 2005, 201, с.1837).
Настоящее изобретение относится к ингибирующим соединениям Btk формул I-III, к способам их применения, как описано ниже.
Изобретение относится к соединению формулы I:
где:
R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил, и необязательно замещен низшим алкилом, гидроксигруппой, низшей алкоксигруппой, галогеном, нитрогруппой, аминогруппой, цианогруппой или галоген-низшим алкилом;
R2 представляет собой -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NH или -S(=O)2;
R3 представляет собой Н или R4; где R4 представляет собой низший алкил, арил, арилалкил, алкиларил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероарилалкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкил или гетероциклоалкилалкил, и необязательно замещен низшим алкилом, гидроксигруппой, низшей алкоксигруппой, галогеном, нитрогруппой, аминогруппой, цианогруппой или галогеннизшим алкилом;
Х представляет собой CH или N;
Y1 представляет собой H или низший алкил;
каждый Y2 независимо представляет собой галоген или низший алкил, где
низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы и галогена;
n имеет значение 0, 1, 2 или 3;
Y3 представляет собой H, галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, аминогруппы и галогена;
m имеет значение 0 или 1;
Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; где Y4a представляет собой H или галоген; Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы и низшей алкоксигруппы; Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы и низшей алкоксигруппы; и Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами;
или его фармацевтически приемлемой соли.
Изобретение также относится к соединению формулы I;
где:
R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил, и необязательно замещен одним или несколькими низшими алкилами, гидроксигруппами, гидроксинизшими алкилами, низшими алкоксигруппами, галогенами, нитрогруппами, аминогруппами, амидогруппами, цианогруппами, оксогруппами или галогеннизшими алкилами;
R2 представляет собой -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR2', -NHC(=O)O, -C(=NH)NR2' или -S(=O)2; где R2' представляет собой Н или низший алкил;
R3 представляет собой Н или R4; где R4 представляет собой низший алкил, аминогруппу, арил, арилалкил, алкиларил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероарилалкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкил или гетероциклоалкилалкил, и необязательно замещен одним или несколькими низшими алкилами, гидроксигруппами, низшими алкоксигруппами, гидроксинизшими алкилами, гидроксинизшими алкоксигруппами, низшими алкилсульфонилами, низшими алкилсульфонамидогруппами, карбаматами, карбоксигруппами, сложными эфирами, амидогруппами, ацилами, галогенами, нитрогруппами, аминогруппами, цианогруппами, оксогруппами или галогеннизшими алкилами;
X представляет собой CH или N;
Y1 представляет собой H, низший алкил или низший галогеналкил;
каждый Y2 независимо представляет собой галоген, оксим или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, низшей галогеналкоксигруппы, низшего галогеналкила, карбоксигруппы, аминогруппы и галогена;
n имеет значение 0, 1, 2 или 3;
Y3 представляет собой H, галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, аминогруппы и галогена;
m имеет значение 0 или 1;
Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; где Y4a представляет собой H или галоген; Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы, цианогруппы и низшей алкоксигруппы; Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы, цианогруппы и низшей алкоксигруппы; и Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами, алкоксинизшими алкилами или гидроксинизшими алкилами;
или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте осуществления формулы I Y1 представляет собой метил.
В одном варианте осуществления формулы I Х представляет собой СН.
В одном варианте осуществления формулы I n имеет значение 1 и m имеет значение 0.
В одном варианте осуществления формулы I Y3 представляет собой Н.
В одном варианте осуществления формулы I Y2 представляет собой метил.
В одном варианте осуществления формулы I Y2 представляет собой гидроксиметил. В одном варианте осуществления формулы I Y2 представляет собой гидроксиэтил. В одном варианте осуществления формулы I Y2 представляет собой галоген.
В одном варианте осуществления формулы I Y4 представляет собой 
, где Y5 представляет собой галоген, низший алкил или низший галогеналкил. В одном варианте осуществления формулы I Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой H, низший алкил или низший галогеналкил. В одном варианте осуществления формулы I Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой Н или низший алкил. В одном варианте осуществления формулы I Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой H, низший алкил или низший галогеналкил.
В одном варианте осуществления формулы I R представляет собой -R1-R2-R3; где R1 представляет собой фенил или пиридил; R2 представляет собой -C(=O); R3 представляет собой R4; и R4 представляет собой морфолин или пиперазин, необязательно замещенный одним или несколькими низшими алкилами.
В одном варианте осуществления формула I представляет собой 6-диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (I-2) формулы:
,
6-диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (I-3) формулы:
или 6-диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (I-1) формулы:
.
Изобретение относится к соединению формулы II:
где:
R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил, и необязательно замещен низшим алкилом, гидроксигруппой, низшей алкоксигруппой, галогеном, нитрогруппой, аминогруппой, цианогруппой или галогеннизшим алкилом;
R2 представляет собой -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NH или -S(=O)2;
R3 представляет собой H или R4; где R4 представляет собой низший алкил, арил, арилалкил, алкиларил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероарилалкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкил или гетероциклоалкилалкил, и необязательно замещен низшим алкилом, гидроксигруппой, низшей алкоксигруппой, галогеном, нитрогруппой, аминогруппой, цианогруппой или галогеннизшим алкилом;
X представляет собой CH или N;
Y1 представляет собой Н или низший алкил;
каждый Y2 независимо представляет собой галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы и галогена;
n имеет значение 0, 1, 2 или 3;
Y3 представляет собой H, галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, аминогруппы и галогена;
m имеет значение 0 или 1;
Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; где Y4a представляет собой H или галоген; Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы и низшей алкоксигруппы; Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы и низшей алкоксигруппы; и Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами;
или его фармацевтически приемлемой соли.
Изобретение также относится к соединению формулы II:
где:
R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил, и необязательно замещен одним или несколькими низшими алкилами, гидроксигруппами, гидроксинизшими алкилами, низшими алкоксигруппами, галогенами, нитрогруппами, аминогруппами, амидогруппами, цианогруппами, оксогруппами или галогеннизшими алкилами;
R2 представляет собой -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NR2' или -S(=O)2; где R2' представляет собой H или низший алкил;
R3 представляет собой H или R4; где R4 представляет собой низший алкил, аминогруппу, арил, арилалкил, алкиларил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероарилалкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкил или гетероциклоалкилалкил, и необязательно замещен одним или несколькими низшими алкилами, гидроксигруппами, гидроксинизшими алкилами, низшими алкоксигруппами, галогенами, нитрогруппами, аминогруппами, цианогруппами или галогеннизшими алкилами;
X представляет собой CH или N;
Y1 представляет собой Н, низший алкил или низший галогеналкил;
каждый Y2 независимо представляет собой галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, низшей галогеналкоксигруппы, низшего галогеналкила, карбоксигруппы, аминогруппы и галогена;
n имеет значение 0, 1, 2 или 3;
Y3 представляет собой H, галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, аминогруппы и галогена;
m имеет значение 0 или 1;
Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; где Y4a представляет собой H или галоген; Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы, цианогруппы и низшей алкоксигруппы; Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы, цианогруппы и низшей алкоксигруппы; и Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами, алкоксинизшими алкилами или гидроксинизшими алкилами; или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте осуществления формулы II Y1 представляет собой метил.
В одном варианте осуществления формулы II X представляет собой CH.
В одном варианте осуществления указанного выше соединения n имеет значение 1 и m имеет значение 0.
В одном варианте осуществления формулы II Y3 представляет собой Н.
В одном варианте осуществления формулы II Y2 представляет собой метил.
В одном варианте осуществления формулы II Y2 представляет собой гидроксиметил.
В одном варианте осуществления формулы II Y2 представляет собой гидроксиэтил.
В одном варианте осуществления формулы II Y2 представляет собой галоген.
В одном варианте осуществления формулы II Y4 представляет собой 
где Y5 представляет собой галоген, низший алкил или низший галогеналкил. В одном варианте осуществления формулы II Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой H, низший алкил или низший галогеналкил. В одном варианте осуществления формулы II Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой Н или низший алкил. В одном варианте осуществления формулы II Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой H, низший алкил или низший галогеналкил.
В одном варианте осуществления формулы II R представляет собой -R1-R2-R3; R1 представляет собой фенил или пиридил; R2 представляет собой -C(=O); R3 представляет собой R4; и R4 представляет собой морфолин или пиперазин, необязательно замещенный одним или несколькими низшими алкилами.
В одном варианте осуществления формула II представляет собой 7-диметиламино-3-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-1Н-хинолин-4-он (II-2) формулы:
,
формулы:
или 7-трет-бутил-3-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-1H-хинолин-4-он (II-1) формулы:
.
Изобретение относится к соединению формулы III:
где:
R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил, и необязательно замещен низшим алкилом, гидроксигруппой, низшей алкоксигруппой, галогеном, нитрогруппой, аминогруппой, цианогруппой или галогеннизшим алкилом;
R2 представляет собой -C(=O), -C(=O)O, -C(=O)NH или -S(=O)2;
R3 представляет собой H или R4; где R4 представляет собой низший алкил, арил, арилалкил, алкиларил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероарилалкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкил или гетероциклоалкил алкил, и необязательно замещен низшим алкилом, гидроксигруппой, низшей алкоксигруппой, галогеном, нитрогруппой, аминогруппой, цианогруппой или галогеннизшим алкилом;
X представляет собой CH или N;
Y1 представляет собой H или низший алкил;
каждый Y2 независимо представляет собой галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы и галогена;
n имеет значение 0, 1, 2 или 3;
Y3 представляет собой Н, галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, аминогруппы и галогена;
m имеет значение 0 или 1;
Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; Y4a представляет собой H или галоген; Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы и низшей алкоксигруппы; Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы и низшей алкоксигруппы; и Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами;
или его фармацевтически приемлемой соли.
Изобретение также относится к соединению формулы III:
где:
R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой арил, гетероарил, циклоалкил или гетероциклоалкил, и необязательно замещен одним или несколькими низшими алкилами, гидроксигруппами, гидроксинизшими алкилами, низшими алкоксигруппами, галогенами, нитрогруппами, аминогруппами, амидогруппами, цианогруппами, оксогруппами или галогеннизшими алкилами;
R2 представляет собой -C(=O), -O, -C(=O)O, -C(=O)NR2' или -S(=O)2; где R2' представляет собой H или низший алкил;
R3 представляет собой H или R4; где R4 представляет собой низший алкил, аминогруппу, арил, арилалкил, алкиларил, гетероарил, алкилгетероарил, гетероарилалкил, циклоалкил, алкилциклоалкил, циклоалкилалкил, гетероциклоалкил, алкилгетероциклоалкил или гетероциклоалкилалкил, и необязательно замещен одним или несколькими низшими алкилами, гидроксигруппами, гидроксинизшими алкилами, низшими алкоксигруппами, галогенами, нитрогруппами, аминогруппами, амидогруппами, ацилами, цианогруппами или галогеннизшими алкилами;
Х представляет собой CH или N;
Y1 представляет собой H, низший алкил или низший галогеналкил;
каждый Y2 независимо представляет собой галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, низшей галогеналкоксигруппы, низшего галогеналкила, карбоксигруппы, аминогруппы и галогена;
n имеет значение 0, 1, 2 или 3;
Y3 представляет собой H, галоген или низший алкил, где низший алкил необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы, аминогруппы и галогена;
m имеет значение 0 или 1;
Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; Y4a представляет собой H или галоген; Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, аминогруппы, цианогруппы и низшей алкоксигруппы; Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена, гидроксигруппы, гидроксинизшего алкила, аминогруппы, цианогруппы и низшей алкоксигруппы; и Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами, алкоксинизшими алкилами или гидроксинизшими алкилами;
или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте осуществления формулы III Y1 представляет собой метил.
В одном варианте осуществления формулы III Х представляет собой СН. В одном варианте осуществления формулы III n имеет значение 1 и m имеет значение 0.
В одном варианте осуществления формулы III Y3 представляет собой Н.
В одном варианте осуществления формулы III Y2 представляет собой метил. В одном варианте осуществления формулы III Y2 представляет собой гидроксиметил. В одном варианте осуществления формулы III Y2 представляет собой гидроксиэтил. В одном варианте осуществления формулы III Y2 представляет собой галоген.
В одном варианте осуществления формулы III Y представляет собой 
где Y5 представляет собой галоген, низший алкил или низший галогеналкил. В одном варианте осуществления формулы III Y представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой H, низший алкил или низший галогеналкил. В одном варианте осуществления формулы III Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой H или низший алкил. В одном варианте осуществления формулы III Y4 представляет собой 
где Y5 и Y6 независимо представляют собой H, низший алкил или низший галогеналкил.
В одном варианте осуществления формулы III R представляет собой -R1-R2-R3; R1 представляет собой фенил или пиридил; R2 представляет собой -C(=O); R3 представляет собой R4; и R4 представляет собой морфолин или пиперазин, необязательно замещенный одним или несколькими низшими алкилами.
В одном варианте осуществления соединение формулы III представляет собой 6-диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он (III-3) формулы:
,
6-диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он (III-2) формулы:
или 6-диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он (III-1) формулы;
.
Изобретение относится к способу лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния, включающему введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения ингибитора Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов.
Изобретение относится к способу лечения артрита, включающему введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения ингибитора Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов.
Изобретение относится к способу ингибирования B-клеточной пролиферации, включающему введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения ингибитора Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов.
Изобретение относится к способу ингибирования активности Btk, включающему введение соединения ингибитора Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов, где соединение ингибитор Btk имеет значение IC50 50 мкМ или менее в биохимическом анализе на активность Btk in vitro.
В одном варианте осуществления описанного способа соединение ингибитор Btk имеет значение IC50 100 нМ или менее в биохимическом анализе на активность Btk in vitro.
В одном варианте осуществления описанного способа соединение ингибитор Btk имеет значение IC50 10 нМ или менее в биохимическом анализе на активность Btk in vitro.
Изобретение относится к способу лечения воспалительного состояния, включающему совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества противовоспалительного соединения в комбинации с соединением ингибитором Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов.
Изобретение относится к способу лечения артрита, включающему совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества противовоспалительного соединения в комбинации с соединением ингибитором Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов.
Изобретение относится к способу лечения лимфомы или клеток лейкемии BCR-ABL1+ введением пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения ингибитора Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов.
Изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей соединение ингибитор Btk любой одной из приведенных выше формул или их вариантов, в смеси по крайней мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.
Настоящее изобретение относится к соединению общих формул I-III, где переменные R, X, Y1, Y2, Y3, Y4, n и m являются такими, как определено выше.
В одном варианте осуществления настоящего изобретения описано соединение общей формулы I, которое включает соединения ингибиторы Btk формул I-1-I-155. В одном варианте осуществления настоящего изобретения описано соединение общей формулы II, которое включает соединения ингибиторы Btk формул II-1 и II-2. В одном варианте осуществления настоящего изобретения описано соединение общей формулы III, которое включает соединения ингибиторы Btk формул III-1-III-36.
Настоящее изобретение относится к производным 5-фенил-1H-пиридин-2-она и 6-фенил-2H-пиридазин-3-она общих формул I-III:
Фраза "как определено выше" относится к наиболее широкому определению каждой группы как здесь описано или наиболее широкому пункту формулы изобретения. Во всех других вариантах осуществления, варианты и воплощения относятся к заместителям, которые могут быть представлены в каждом варианте осуществления, и которые четко оговорены в наиболее широком определении, приведенном в разделе сущности изобретения.
Соединения общих формул I-III ингибируют тирозинкиназу Брутона (Btk). Активация Btk последующими киназами приводит к активации фосфолипазы-Cγ, которая в свою очередь стимулирует высвобождение провоспалительных медиаторов. Соединения общих формул I-III, включающие боковые цепи 1H-хинолин-4-она, 3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она и 2H-изохинолин-1-она в 5-фенил-1H-пиридин-2-оновых и 6-фенил-2H-пиридазин-3-оновых циклических системах проявляют неожиданно высокую ингибирующую активность по сравнению с аналогами с другими боковыми цепями. Соединения формул I-III полезны для лечения артрита и других воспалительных и аутоиммунных заболеваний. Соединения формул I-III, соответственно, полезны для лечения артрита. Соединения формул I-III полезны для ингибирования Btk в клетках и для модулирования B-клеточного развития. Настоящее изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие соединения формул I-III в смеси с фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентами или разбавителями.
Неопределенная форма как здесь используется относится к одному или нескольким значениям из этой группы; например, соединение относится к одному или нескольким соединениям или по крайней мере к одному соединению. Как таковые, термины неопределенной формы, "один или несколько" и "по крайней мере один" могут здесь использоваться взаимозаменяемо.
Фраза "как определено выше" относится к наиболее широкому определению каждой группы как здесь описано в разделе сущности изобретения или наиболее широкому пункту формулы изобретения. Во всех других описанных ниже вариантах осуществления, заместители, которые могут быть представлены в каждом варианте осуществления, и которые четко оговорены в наиболее широком определении, приведены в разделе сущности изобретения.
Как используется в описании, в переходной фразе или в формуле изобретения термины "включать (включает)" и "включающий" должны пониматься как имеющие открытые значения. Так, термины должны интерпретироваться синонимично с фразами "содержащий по крайней мере" или "включающий по крайней мере". При использовании в контексте со способом, термин "включающий" обозначает, что способ включает по крайней мере указанные стадии, но может включать дополнительные стадии. При использовании в контексте соединения или композиции, термин "включающий" обозначает, что соединение или композиция включает по крайней мере указанные особенности или компоненты, но может также включать дополнительные особенности или компоненты.
Как здесь используется, если в описании не предусмотрено иное, слово "или" используется в смысле "включения" "и/или", а не в смысле "исключения" "или/или".
Термин "независимо" используется здесь для указания на то, что значение используется в любом одном из вариантов независимо от наличия или отсутствия значения, имеющего то же или другое определение в одном соединении. Так, в соединении, в котором R" появляется дважды и определено как "независимо атом углерода или азота", оба R" могут представлять собой атом углерода, оба R" могут представлять собой атом азота, или один R" может представлять собой атом углерода, и а другой атом азота.
Когда любое значение встречается более одного раза в любой группе или формуле, изображая и описывая соединения, описанные или заявленные в настоящем изобретении, его определение в каждом случае не зависит от его определения в любом другом случае. Также, комбинации заместителей и/или значений допустимы, только если такие соединения приводят к образованию стабильных соединений.
Символы "*" на конце связи или "
" поперек связи обозначают точку присоединения функциональной группы или другой химической группы к остатку молекулы, частью которой она является. Так, например:
MeC(=O)OR4, где 
или 
.
Связь, изображенная в циклической системе (напротив присоединения к указанному атому), показывает, что связь может быть присоединена к любому и подходящих кольцевых атомов.
Термин "необязательный" или "необязательно" как здесь используется обозначает, что описанный далее случай или обстоятельство может встречаться, а может и нет, и что описание включает варианты, в которых случай или обстоятельство встречаются, и варианты, в которых они отсутствуют. Например "необязательно замещенный" обозначает, что необязательно замещенная группа может включать водород или заместитель.
Фраза "необязательная связь" обозначает, что связь может присутствовать, а может отсутствовать, и что описание включает простую, двойную или тройную связи. Если заместитель обозначен как "связь" или "отсутствует", атомы, связанные с заместителями, соединены непосредственно.
Термин "около" используется для обозначения приблизительно, в области, вокруг или вблизи. Когда термин "около" используется в сочетании с цифровым диапазоном, он модифицирует этот диапазон, расширяя границы выше и ниже указанных цифровых значений. Обычно, термин "около" используется для модификации цифрового значения выше и ниже указанного значения на 20%.
Некоторые соединения формул I-III могут проявлять таутомеризм. Таутомерные соединения могут существовать в виде двух или более взаимопревращающихся видов. Прототропные таутомеры возникают из-за миграции ковалентно связанного атома водорода между двумя атомами. Таутомеры обычно существуют в равновесии, и попытки выделить индивидуальные таутомеры обычно приводят к получению смеси, чьи химические и физические свойства согласуются со смесью соединений. Положение равновесия зависит от химических особенностей молекулы. Например, для многих алифатических альдегидов и кетонов, таких как ацетальдегид, кето-форма преобладает, тогда как для фенолов преобладает енольная форма. Обычные прототропные таутомеры включают кето/енол (-C(=O)-CH-↔-C(-OH)=CH-), амид/имидную кислоту (-C(=O)-NH-↔-C(-OH)=N-) и амидиновые (-C(=NR)-NH-↔-C(-NHR)=N-) таутомеры. Последние два особенно подходят для гетероарильных и гетероциклических колец, и настоящее изобретение включает все таутомерные формы соединений.
Используемые здесь технические и научные термины имеют значение, обычно придаваемое специалистом в данной области техники, к которому относится настоящее изобретение, если не указано иное. Ссылка здесь сделана на различные методики и материалы, известные специалисту в данной области техники. Стандартные источники, раскрывающие общие принципы фармакологии, включают книгу Goodman и Gilman's, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10-ое издание, McGraw Hill Companies Inc., New York (2001). Любые подходящие материалы и/или методы, известные специалисту в данной области техники, могут использоваться для осуществления настоящего изобретения. Однако описаны предпочтительные материалы и методы. Материалы, реагенты и им подобные, на которые сделана ссылка в следующем описании и примерах, получают из коммерческих источников, если не указано иное.
Описанные здесь определения могут присоединяться с образованием химически релевантных комбинаций, таких как "гетероалкиларил", "галогеналкилгетероарил", "арилалкилгетероциклил", "алкилкарбонил", "алкоксиалкил" и им подобные. Когда термин "алкил" используется как продолжение другого термина, как в "фенилалкиле" или "гидроксиалкиле", это обозначает алкильную группу, как определено выше, замещенную одним или двумя заместителями, выбранными из другой конкретно указанной группы. Так, например, "фенилалкил" обозначает алкильную группу, содержащую один или два фенильных заместителя, и таким образом включает бензил, фенилэтил и бифенил. "Алкиламиноалкил" представляет собой алкильную группу, содержащую один или два алкиламинозаместителя. "Гидроксиалкил" включает 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропил, 2-гидроксибутил, 2,3-дигидроксибутил, 2-(гидроксиметил), 3-гидроксипропил и так далее. Соответственно, как здесь используется, термин "гидроксиалкил" как здесь используется обозначает ряд гетероалкильных групп, как определено далее. Термин -(ар)алкил обозначает незамещенную алкильную или аралкильную группу. Термин (гетеро)арил или (гет)арил обозначает арильную или гетероарильную группу.
Термин "ацил" как здесь используется обозначает группу формулы -C(=O)R, где R представляет собой водород или низший алкил как здесь определено. Термин "алкилкарбонил" как здесь используется обозначает группу формулы C(=O)R, где R представляет собой алкил как здесь определено. Термин C1-6ацил обозначает группу -C(=O)R, где R представляет собой водород или C1-5алкил. Термин "арилкарбонил" как здесь используется обозначает группу формулы C(=O)R, где R представляет собой арильную группу; термин "бензоил" как здесь используется обозначает "арилкарбонильную" группу, где R представляет собой фенил.
Термин "алкил" как здесь используется обозначает неразветвленный или разветвленный, насыщенный, моновалентный углеводородный остаток, содержащий 1-10 атомов углерода. Термин "низший алкил" обозначает линейный или разветвленный углеводородный остаток, содержащий 1-6 атомов углерода. "C1-10 алкил" как здесь используется обозначает алкил, состоящий из 1-10 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, низшие алкильные группы, включая метил, этил, пропил, изо-пропил, н-бутил, изо-бутил, трет-бутил или пентил, изопентил, неопентил, гексил, гептил и октил.
Когда термин "алкил" используется как продолжение другого термина, как в "фенилалкиле" или "гидроксиалкиле", это обозначает алкильную группу, как определено выше, замещенную одним или двумя заместителями, выбранными из другой конкретно указанной группы. Так, например, "фенилалкил" обозначает радикал R'R''-, где R' представляет собой фенильный радикал, и R'' представляет собой алкиленовый радикал как здесь определено при условии, что точка присоединения фенилалкильной группы находится в алкиленовом радикале. Примеры арилалкильных радикалов включают, но не ограничиваются ими, бензил, фенилэтил, 3-фенилпропил. Термины "арилалкил" или "аралкил" интерпретируются аналогично, за исключением того, что R' представляет собой арильный радикал. Термины "(гет)арилалкил" или "(гет)аралкил" интерпретируются аналогично, за исключением того, что R' необязательно представляет собой арильный или гетероарильный радикал.
Термины "галогеналкил" или "галогеннизший алкил" или "низший галогеналкил" обозначают линейный или разветвленный углеводородный остаток, содержащий 1-6 атомов углерода, где один или несколько атомов углерода замещены одним или несколькими атомами галогена.
Термин "алкилен" или "алкиленил" как здесь используется обозначает дивалентный насыщенный линейный углеводородный радикал, содержащий от 1 до 10 атомов углерода (например, (CH2)n); или разветвленный насыщенный дивалентный углеводородный радикал, содержащий от 2 до 10 атомов углерода (например, -CHMe- или -CH2CH(изо-Pr)CH2-), если не указано иное. 3а исключением метилена, открытые валентности алкиленовой группы не присоединены к одному и тому же атому. Примеры алкиленовых радикалов включают, но не ограничиваются ими, метилен, этилен, пропилен, 2-метилпропилен, 1,1-диметилэтилен, бутилен, 2-этилбутилен.
Термин "алкоксигруппа" как здесь используется обозначает -O-алкильную группу, где алкил является таким, как определено выше, такую как метокси, этокси, н-пропилокси, изо-пропилокси, н-бутилокси, шо-бутилокси, трет-бутилокси, пентилокси, гексилокси, включая их изомеры. "Низшая алкоксигруппа" как здесь используется обозначает алкоксигруппу с "низшей алкильной" группой, как определено выше. "C1-10алкокси" как здесь используется обозначает -O-алкил, где алкил представляет собой C1-10.
Термин "гидроксиалкил" как здесь используется обозначает алкильный радикал как здесь определено, где 1-3 атома водорода при различных атомах углерода замещены гидроксильными группами.
Термины "алкилсульфонил" и "арилсульфонил" как здесь используется обозначают группу формулы -S(=O)2R, где R представляет собой алкил или арил соответственно, и алкил и арил являются такими, как здесь определено. Термин "гетероалкилсульфонил" как здесь используется обозначает группу формулы -S(=O)2R, где R представляет собой "гетероалкил" как здесь определено.
Термины "алкилсульфониламиногруппа" и "арилсульфониламиногруппа" как здесь используется обозначают группу формулы -NR'S(=O)2R, где R представляет собой алкил или арил соответственно, R' представляет собой водород или C1-3алкил, и алкил и арил являются такими, как здесь определено.
Термин "циклоалкил" как здесь используется обозначает насыщенное карбоциклическое кольцо, содержащее 3-8 атомов углерода, то есть циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил. "C3-7циклоалкил" как здесь используется обозначает циклоалкил, содержащий 3-7 атомов углерода в карбоциклическом кольце.
Термин карбоксиалкил как здесь используется обозначает алкильную группу, где один атом водорода замещен на карбоксил, при условии, что точка присоединения гетероалкильного радикала находится при атоме углерода. Термин "карбоксигруппа" или "карбоксил" обозначает группу -CO2H.
Термин "гетероарил" или "гетероароматический" как здесь используется обозначает моноциклический или бициклический радикал, содержащий от 5 до 12 атомов в цикле, содержащий по крайней мере одно ароматическое кольцо, содержащее 4-8 атомов в кольце, с одним или несколькими N, O или S гетероатомами, причем остальные атомы в кольце являются атомами углерода, при условии, что точка присоединения гетероарильного радикала находится в ароматическом кольце. Как известно специалисту в данной области техники, гетероарильные кольца имеют менее ароматический характер по сравнению с их аналогами, содержащими только атомы углерода. Так, в целях изобретения, гетероарильная группа должна иметь только некоторую степень ароматического характера. Примеры гетероарильных групп, включающие моноциклические ароматические гетероциклы, содержащие 5 или 6 атомов в цикле и 1-3 гетероатома, включают, но не ограничиваются ими, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазол, изоксазол, тиазол, изотиазол, триазолин, тиадиазол и оксадиаксолин, которые необязательно могут быть замещены одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из гидроксигруппы, цианогруппы, алкила, алкоксигруппы, тиогруппы, низшей галогеналкоксигруппы, алкилтиогруппы, галогена, низшего галогеналкила, алкилсульфинила, алкилсульфонила, галогена, аминогруппы, алкиламиногруппы, диалкиламиногруппы, аминоалкила, алкиламиноалкила и диалкиламиноалкила, нитрогруппы, алкоксикарбонила и карбамоила, алкилкарбамоила, диалкилкарбамоила, арилкарбамоила, алкилкарбониламиногруппы и арилкарбониламиногруппы. Примеры бициклических групп включают, но не ограничиваются ими, хинолинил, изохинолинил, бензофурил, бензотиофенил, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол и бензизотиазол. Бициклические группы необязательно могут быть замещены в любом кольце; однако, точка присоединения находится в кольце, содержащем гетероатом.
Термин "гетероциклил", "гетероциклоалкил" или "гетероцикл" как здесь используется обозначает моновалентный насыщенный циклический радикал, состоящей из одного или нескольких колец, предпочтительно одного или двух колец, включающих спироциклические кольцевые системы, содержащие от трех до восьми атомов в кольце, с одним или несколькими кольцевыми гетероатомами (выбранными из N, O или S(O)0-2), и которые необязательно могут быть независимо замещены одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из гидроксигруппы, оксогруппы, цианогруппы, низшего алкила, низшей алкоксигруппы, низшей галогеналкоксигруппы, алкилтиогруппы, галогена, низшего галогеналкила, гидроксиалкила, нитрогруппы, алкоксикарбонила, аминогруппы, алкиламиногруппы, алкилсульфонила, арилсульфонила, алкиламиносульфонила, ариламиносульфонила, алкилсульфониламиногруппы, арилсульфониламиногруппы, алкиламинокарбонила, ариламинокарбонила, алкилкарбониламиногруппы, арилкарбониламиногруппы, если не указано иное. Примеры гетероциклических радикалов включают, но не ограничиваются ими, азетидинил, пирролидинил, гексагидроазепинил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, оксазолидинил, тиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, пиперазинил, пиперидинил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, хинуклидинил и имидазолинил.
Общеиспользуемые сокращения включают: ацетил (Ас), азо-бис-изобутирилнитрил (AIBN), атмосферы (атм), 9-борабицикло[3.3.1]нонан (9-BBN или BBN), трет-бутоксикарбонил (Boc), ди-трет-бутилпирокарбонат или boc-ангидрид (ВОС2О), бензил (Bn), бутил (Bu), регистрационный номер в Chemical Abstracts (CASRN), бензилоксикарбонил (CBZ или Z), карбонилдиимидазол (CDI), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (DABCO), трифторид диэтиламиносеры (DAST), дибензилиденацетон (dba), 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон-5-ен (DBN), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (DBU), N,N'-дициклогексилкарбодиимид (ДЦК), 1,2-дихлорэтан (ДХЭ), дихлорметан (ДХМ), диэтилазодикарбоксилат (DEAD), ди-изо-пропилазодикарбоксилат (DIAD), ди-изо-бутилалюмогидрид (DIBAL или DIBAL-H), ди-изо-пропилэтиламин (DIPEA), N,N-диметилацетамид (DMA), 4-N,N-диметиламинопиридин (ДМАП), N,N-диметилформамид (ДМФА), диметилсульфоксид (ДМСО), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)этан (dppe), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен (dppf), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (EDCI), этил (Et), этилацетат (EtOAc), этанол (EtOH), этиловый эфир 2-этокси-2H-хинолин-1-карбоновой кислоты (EEDQ), диэтиловый эфир (Et2O), O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N, N,N'N'-тетраметилурония гексафторфосфат уксусной кислоты (HATU), уксусная кислота (HOAc), 1-N-гидроксибензотриазол (HOBt), высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), изо-пропанол (IPA), гексаметилдисилазан лития (LiHMDS), метанол (MeOH), точка плавления (tпл), MeSO2- (мезил или Ms), метил (Me), ацетонитрил (MeCN), -м-хлорпербензойная кислота (МСРВА), масс-спектр (ms), метил трет-бутиповът эфир (МТВЕ), N-бромсукцинимид (NBS), N-карбоксиангидрид (NCA), N-хлорсукцинимид (NCS), N-метилморфолин (NMM), N-метилпирролидон (NMP), пиридиния хлорхромат (РСС), пиридиния дихромат (PDC), фенил (Ph), пропил (Pr), изо-пропил (изо-Pr), фунтов на квадратный дюйм (psi), пиридин (pyr), комнатная температура (кт или КТ), трет-бутилдиметилсилил или трет-BuMe2Si (TBDMS), триэтиламин (ТЭА или Et3N), 2,2,6,6-тетраметилпиперидин 1-оксил (TEMPO), трифлат или CF3SO2-(Tf), трифторуксусная кислота (ТФУК), 1,1'-бис-2,2,6,6-тетраметилгептан-2,6-дион (TMHD), O-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилурония тетрафторборат (TBTU), тонкослойная хроматография (ТСХ), тетрагидрофуран (ТГФ), триметилсилил или Me3Si (TMS), моногидрат n-толуолсульфоновой кислоты (TsOH или пTsOH), 4-Ме-C6H4SO2- или тозил (Ts), N-уретан-N-карбоксиангидрид (UNCA). Обычная номенклатура, включающая приставки нормальный (н-), изо- (и-), вторичный (втор-), третичный (трет-) и нео- имеют их обычные значения при использовании с алкильной группой, (книга Rigaudy и Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC, 1979, Pergamon Press, Oxford).
Примеры представительных соединений, охватываемых настоящим изобретением и объемом изобретения, приведены в следующей таблице. Эти примеры и последующие способы получения приведены для того, чтобы специалист в данной области техники более четко понял и осуществил настоящее изобретение. Они не должны рассматриваться как ограничивающие объем изобретения, но только как иллюстрирующие и представляющие его.
Обычно номенклатура, используемая в настоящем описании, основана на программе AUTONOM™ v,4,0, компьютерной системе Beilstein Institute для разработки систематической номенклатуры IUPAC. Если существует отличие приведенной структуры и наименования, приведенного для этой структуры, представленная структура имеет больший вес. Кроме того, если стереохимия структуры или части структуры не показана, например, с помощью жирной или пунктирной линии, структура или часть структуры должны интерпретироваться как включающие все их стереоизомеры.
В таблице I приведены примеры пиридиноновых соединений в соответствии с общими формулами I-III, где Х представляет собой СН или N. Соединения могут быть получены методиками, описанными в примерах.
Описанные здесь производные пиридинона и пиридазинона являются ингибиторами киназы, в частности ингибиторами Btk. Эти ингибиторы могут быть полезны для лечения одного или нескольких заболеваний, связанных с ингибированием киназы, включая заболевания, связанные с ингибированием Btk и/или ингибированим В-клеточной пролиферации, у млекопитающих. Не основываясь на какой-либо теории, предполагается, что взаимодействие соединений по изобретению с Btk приводит к ингибированию активности Btk, и таким образом к фармацевтической полезности этих соединений. Соответственно, настоящее изобретение включает способ лечения млекопитающего, например, человека, имеющего заболевание, чувствительное к ингибированию активности Btk, и/или ингибированию B-клеточной пролиферации, включающий введение млекопитающему, имеющему такое заболевание, эффективного количества по крайней мере одного приведенного здесь химического соединения. Эффективная концентрация может подбираться экспериментально, например, оценкой концентрации в крови соединения, или теоретически, расчетом биодоступности. Другие киназы, на которые можно влиять в дополнение к Btk, включают, но не ограничиваются ими, другие тирозинкиназы и серин/треонинкиназы.
Киназы играют заметные роли в передаче сигналов, контролирующих фундаментальные клеточные процессы, такие как пролиферация, дифференциация и смерть (апоптоз). Нарушенная киназная активность встречается в широком ряде заболеваний, включая многие виды рака, аутоиммунные и/или воспалительные заболевания и острые воспалительные реакции. Многоаспектная роль киназ в ключевых клеточных путях передачи сигнала обеспечивает хорошую возможность для идентификации новых лекарственных препаратов, связывающих киназы и пути передачи сигнала.
Вариант воплощения включает способ лечения пациента, имеющего аутоиммунное и/или воспалительное заболевание или острую воспалительную реакцию, чувствительную к ингибированию активности Btk и/или B-клеточной пролиферации.
Аутоиммунные и/или воспалительные заболевания, на которые можно воздействовать соединениями и композициями по изобретению, включают, но не ограничиваются ими: псориаз, аллергию, болезнь Крона, синдром раздраженного кишечника, болезнь Шегрена, отторжение тканевого трансплантата и гиперострое отторжение трансплантированных органов, астму, системную красную волчанку (и связанный гломерулонефрит), дерматомиозит, рассеянный склероз, склеродерму, васкулит (ANCA-связанный и другие васкулитиды), аутоиммунные гемолитические и тромбоцитопенические состояния, синдром Гудпасчера (и связанный гломерулонефрит и легочное кровоизлияние), атеросклероз, ревматоидный артрит, хроническую идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру (ITP), болезнь Аддисона, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера, диабет, септический шок и астенический бульбарный паралич.
Включены способы лечения, в которых по крайней мере одно описанное здесь химическое соединение вводят в комбинации с противовоспалительным агентом. Противовоспалительные агенты включают, но не ограничиваются ими, NSAID, неспецифические и специфические ингибиторы фермента СОХ-2 циклооксигеназы, соединения золота, кортикостероиды, метотрексат, антагонисты рецептора фактора некроза опухоли (TNF), иммунодепрессанты и метотрексат.
Примеры NSAID включают, но не ограничиваются ими, ибупрофен, флурбипрофен, напроксен и напроксен натрия, диклофенак, комбинации диклофенака натрия и мизопростола, сулиндак, оксапрозин, дифлунизал, пироксикам, индометацин, этодолак, фенопрофен кальция, кетопрофен, натрия набуметон, сульфазалазин, тольметин натрия и гидроксихлорохин. Примеры NSAID также включают специфические ингибиторы COX-2, такие как целекоксиб, вальдекоксиб, лумиракоксиб и/или эторикоксиб.
В некоторых вариантах осуществления противовоспалительный агент представляет собой салицилат. Салицилаты включают, но не ограничиваются ими, ацетилсалициловую кислоту или аспирин, натрия салицилат и холин и салицилаты магния.
Противовоспалительным агентом также может быть кортикостероид. Например, кортикостероидом может быть кортизон, дексаметазон, метилпреднизолон, преднизолон, фосфат преднизолона натрия или преднизон.
В дополнительных вариантах осуществления противовоспалительный агент представляет собой соединение золота, такое как натрийтиомалат золота или ауранофин.
Настоящее изобретение также включает варианты осуществления, в которых противовоспалительный агент представляет собой метаболический ингибитор, такой как ингибитор дигидрофолатредуктазы, такой как метотрексат, или ингибитор дигидрооротатдегидрогеназы, такой как лефлуномид.
Другие варианты осуществления по изобретению включают комбинации, в которых по крайней мере одним противовоспалительным соединением является анти-C5 моноклональное антитело (такое как экулизумаб или пекселизумаб), антагонист TNF, такой как энтанерцепт, или инфликсимаб, который является анти-ТМР-альфа моноклональным антителом.
Другие варианты осуществления изобретения относятся к комбинациям, в которых по крайней мере один активный агент представляет собой соединение-иммунодепрессант, такое как соединение-иммунодепрессант, выбранное из метотрексата, лефлуномида, циклоспорина, такролимуса, азатиоприна и микофенолята мофетила.
B-клетки и B-клеточные предшественники, экспрессирующие BTK, участвуют в патологии B-клеточных злокачественных образований, включая, но не ограничиваясь ими, B-клеточную лимфому, лимфому (включая лимфому Ходжкина и неходжкинские лимфомы), лимфому ворсистых клеток, множественную миелому, хроническую и острую миелогенную лейкемию и хроническую и острую лимфоцитарную лейкемию.
Было показано, что ВТК является ингибитором гибели Fas/APO-1 (CD-95), включая сигнальный комплекс (DISC) в B-родовых лимфоидных клетках. Выживаемость клеток лейкемии/лимфомы может сохраняться в балансе между противоположными проапоптозными действиями каспаз, активированных DISC, и последующим антиапоптозным регулирующим механизмом, включающим ВТК и/или его субстраты (статья Vassilev и др., J. Biol. Chem., 1998, 274, cc.1646-1656).
Также обнаружено, что ингибиторы ВТК полезны в качестве хемочувствительных агентов и, таким образом, полезны в комбинации с другими хемотерапевтическими лекарственными препаратами, в частности лекарственными препаратами, которые вызывают апоптоз. Примеры других хемотерапевтических лекарственных препаратов, которые могут использоваться в комбинации с хемочувствительными ингибиторами ВТК, включают ингибиторы топоизомеразы I (камптотецин или топотекан), ингибиторы топоизомеразы II (например, дауномицин и этопозид), алкилирующие агенты (например, циклофосфамид, мельфалан и BCNU), тубулинонаправленные агенты (например, таксол и винбоастин) и биологические агенты (например, антитела, такие как aHTH-CD20 антитела, IDEC 8, иммунотоксины и цитокины).
Активность Btk также связана с некоторыми лейкемиями, экспрессирующими слитой ген bcr-abl, в результате транслокации частей хромосомы 9 и 22. Это нарушение обычно наблюдается при хронической миелогенной лейкемии. Btk в основном фосфорилируется киназой bcr-abi, которая инициирует нисходящие сигналы выживаемости, которые нарушают апоптоз в клетках bcr-abl. (статья Feldhahn и др., J. Exp.Med., 2005, 201(11), cc.1837-1852).
Соединения настоящего изобретения могут быть введены в широкий ряд дозированных форм и носителей для перорального введения. Пероральное введение может осуществляться в форме таблеток, оболоченных таблеток, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий, сиропов или суспензий. Соединения настоящего изобретения эффективны при введении другими способами введения, включая непрерывное (внутривенное капельное) местное парентеральное, внутримышечное, внутривенное, подкожное, трансдермальное (которое может включать агент для улучшения проникновения), буккальное, назальное, ингаляционное и суппозиторное введение, помимо других способов введения. Предпочтительным способом введения обычно является пероральное, используя обычный режим суточной дозировки, который может подбираться в соответствии со степенью заболевания и откликом пациента на активный ингредиент.
Соединение или соединения настоящего изобретения, а также их фармацевтически приемлемые соли, вместе с одним или несколькими обычными эксципиентами, носителями или разбавителями, могут быть введены в форму фармацевтических композиций и единичных дозировок. Фармацевтические композиции и формы для единичного введения могут включать обычные ингредиенты в обычных пропорциях, с или без дополнительных активных соединений или веществ, и единичные дозированные формы могут содержать любое подходящее эффективное количество активного ингредиента, соизмеримое с предназначенным используемым суточным диапазоном дозировки. Фармацевтические композиции могут использоваться в виде твердых веществ, таких как таблетки или наполненные капсулы, полутвердых веществ, порошков, составов длительного высвобождения или жидкостей, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или наполненные капсулы для перорального применения; или в форме суппозиториев для ректального или вагинального введения; или в форме стерильных инъекционных растворов для парентерального применения. Обычный состав может содержать от около 5% до около 95% активного соединения или соединений (вес.). Термин "состав" или "дозированная форма" включает твердые и жидкие составы активного соединения, и специалисту в данной области техники ясно, что активный ингредиент может существовать в различных составах в зависимости от целевого органа или ткани и от нужной дозы и фармакокинетических параметров.
Термин "эксципиент" как здесь используется обозначает соединение, которое используется для получения фармацевтической композиции, обычно безопасное, нетоксичное и ни биологически, ни иным образом нежелательное, и включает эксципиенты, которые приемлемы для ветеринарного применения, а также для фармацевтического применения для человека. Соединения настоящего изобретения могут вводиться отдельно, но обычно вводятся в смеси с одним или несколькими подходящими фармацевтическими эксципиентами, разбавителями или носителями, выбранными в зависимости от выбранного способа введения и стандартной фармацевтической практики,
"Фармацевтически приемлемый" обозначает, что он полезен для получения фармацевтической композиции, которая является обычно безопасной, нетоксичной и биологически и иначе подходящей, и включает те, которые являются приемлемыми для ветеринарного применения, а также для фармацевтического применения для человека.
Форма "фармацевтически приемлемой соли" активного ингредиента также может изначально придавать нужные фармакокинетические свойства активному ингредиенту, которые отсутствуют для несолевой формы, и часто могут положительно влиять на фармакодинамику активного ингредиента в отношении его терапевтической активности в организме. Фраза "фармацевтически приемлемая соль" соединения обозначает соль, которая является фармацевтически приемлемой, и которая обладает нужной фармакологической активностью исходного соединения. Такие соли включают: (1) кислотные аддитивные соли, образованные с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и им подобные; или образованные с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая кислота, гексановая кислота, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этандисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 4-хлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталенсульфоновая кислота, 4-толуолсульфоновая кислота, камфорсульфоновая кислота, 4-метилбицикло[2.2.2]-окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, триметилуксусная кислота, трет-бутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гидроксинафтойная кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и им подобные; или (2) соли, образованные при наличии кислотного протона в исходном соединении, замещением на ион металла, например, ион щелочного металла, ион щелочноземельного металла или ион алюминия; или координационные соединения с органическим основанием, таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и им подобные.
Твердые формы составов включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, саше, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердым носителем может быть один или несколько веществ, которые также могут выступать в качестве разбавителей, отдушек, солюбилизаторов, лубрикантов, суспендирующих агентов, связующих, консервантов, агентов-разрыхлителей для таблеток или инкапсулирующего материала. В порошках носителем обычно является тонко измельченное твердое вещество, которое представляет собой смесь с тонко измельченным активным компонентом. В таблетках активный компонент обычно представляет собой смесь с носителем, имеющим необходимую связывающую способность, в подходящей пропорции, и имеющую нужный форму и размер. Подходящие носители включают, но не ограничиваются ими, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, низкоплавкий воск, масло какао и им подобные. Твердые формы составов могут содержать, помимо активного компонента, красители, отдушки, стабилизаторы, буферы, искусственные и природные подсластители, диспергирующие добавки, загустители, солюбилизирующие агенты и им подобные.
Жидкие составы, также подходящие для перорального введения, включают жидкий состав, включающий эмульсии, сиропы, эликсиры, водные растворы, водные суспензии. Они включают твердые формы составов, которые должны быть превращены в жидкие формы составов непосредственно перед применением. Эмульсии могут быть получены в форме растворов, например, в растворах в водном пропиленгликоле, или могут содержать эмульгирующие агенты, такие как лецитин, моноолеат сорбита или акацию. Водные растворы могут быть получены растворением активного компонента в воде и добавлением подходящих красителей, отдушек, стабилизаторов и загущающих агентов. Водные суспензии могут быть получены диспергированием тонко измельченного активного компонента в воде с вязким материалом, таким как природные или синтетические смолы, камедь, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза и другими хорошо известными суспендирующими агентами.
Соединения настоящего изобретения могут быть составлены в форму для парентерального введения (например, инъекцией, например, болюсной инъекцией или непрерывной инфузией), и могут присутствовать в единичной дозированной форме в ампулах, предварительно наполненных шприцах, инфузиях малого объема или в емкостях с несколькими дозами с добавлением консерванта. Композиции могут иметь такие формы, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных носителях, например, растворы в водном полиэтиленгликоле. Примеры масляных или неводных носителей, разбавителей, растворителей или добавок включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (например, оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (например, этилолеат), и могут содержать составные агенты, такие как консервирующие, увлажняющие, эмульгирующие или суспендирующие, стеабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Альтернативно, активный ингредиент может находиться в форме порошка, полученного асептическим выделением стерильного твердого вещества или лиофилизацией из раствора для составления перед применением с подходящим носителем, например, стерильной, апирогенной водой.
Соединения настоящего изобретения могут быть составлены в форму для местного нанесения на эпидермис в виде мазей, кремов или лосьонов, или в виде трансдермального пластыря. Мази и кремы, например, могут быть получены с водным или масляным основанием с добавлением подходящих загущающих и/или желирующих агентов. Лосьоны могут быть получены с водным или масляным основанием, и обычно также содержат один или несколько эмульгирующих агентов, стабилизирующих агентов, диспергирующих агентов, суспендирующих агентов, загущающих агентов или окрашивающих агентов. Составы, подходящие для местного введения в ротовую полость, включают лепешки, включающие активные агенты в ароматическом основании, обычно сахарозе и акации или трагаканте; пастилки, включающие активный ингредиент в инертном основании, таком как желатин и глицерин или сахароза и акация; и полоскания для рта, включающие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.
Соединения настоящего изобретения могут быть составлены для введения в виде суппозиториев. Сначала плавится низкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, и активный компонент диспергируется гомогенно, например, перемешиванием. Расплавленную гомогенную смесь затем выливают в обычные размерные формы, оставляют охлаждаться и затвердевать.
Соединения настоящего изобретения могут быть составлены для вагинального введения. Подходят пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или спреи, содержащие в дополнение к активному ингредиенту такие носители, которые известны из предшествующего уровня техники.
Соединения настоящего изобретения могут быть составлены для назального введения. Растворы или суспензии используют непосредственно в назальную полость обычными средствами, например, с помощью капель, пипетки или спрея. Составы могут быть получены в форме единичной дозы или в форме нескольких доз. В последнем случае капель или пипетки это может осуществляться введением пациентом, если подходит, предварительно отмеренного объема раствора или суспензии. В случае спрея это может осуществляться, например, с помощью мерного распыляющего насоса для спрея.
Соединения настоящего изобретения могут быть составлены для аэрозольного введения, особенно для респираторного тракта, и включает интраназальное введение. Соединение обычно имеет малый размер частиц, например, порядка пяти (5) микрон или менее. Такой размер частиц может быть получен способами, известными из предшествующего уровня техники, например, микронизацией. Активный ингредиент вводят в емкость под давлением с подходящим газом-вытеснителем, таким как хлорфторуглерод (CFC), например, дихлордифторметан, трихлорфторметан или дихлортетрафторэтан, или диоксид углерода или другой подходящий газ. Аэрозоль обычно также может содержать поверхностно-активное вещество, такое как лецитин. Доза лекарственного препарата может контролироваться мерным клапаном. Альтернативно, активные ингредиенты могут вводиться в форму сухого порошка, например, порошковой смеси соединения в подходящей основе для порошка, такой как лактоза, крахмал, производные крахмала, такие как гидроксипропилметилцеллюлоза и поливинилпирролидин (PVP). Порошковый носитель может образовывать гель в назальной полости. Порошковая композиция может присутствовать в единичной дозированной форме, например, в капсулах или картриджах, например, желатиновых или блистерных упаковках, из которых порошок может вводиться с помощью ингалятора.
При необходимости, составы могут быть получены с энтеральными покрытиями, подходящими для введения с длительным или контролируемым высвобождением активного ингредиента. Например, соединения настоящего изобретения могут быть введены в устройства для трансдермальной или подкожной доставки лекарственного препарата. Эти системы доставки являются предпочтительными, когда необходимо длительное высвобождение соединения, и когда восприятие пациентом режима лечения является критическим. Соединения в системах трансдермальной доставки часто присоединяют на клеящийся к коже твердый носитель. Интересующее соединение также может быть объединено с усилителем проникновения, например, азоном (1-додецилазациклогептан-2-он). Системы доставки с длительным высвобождением вводят подкожно в подкожный слой хирургически или инъекцией. Подкожные импланты инкапсулируют соединение в липидорастворимой мембране, например, силиконовой резине или в биоразрушающем полимере, например, полимолочной кислоте.
Подходящие составы наряду с фармацевтическими носителями, разбавителями и эксципиентами описаны в книге Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 1995, под ред. E.W.Martin, Mack Publishing Company, 19-oe издание, Easton, Pennsylvania. Специалист в данной области техники может модифицировать составы исходя из описания для получения различных составов для конкретного способа введения, не делая композиции настоящего изобретения нестабильными или не снижая их терапевтическую активность.
Модификация настоящего соединения для придания ему большей растворимости в воде или другом носителе, например, может легко осуществляться минорными модификациями (образование соли, этерификация и т.д.), что известно специалисту в данной области техники. Также специалисту в данной области техники известны модификации путей введения и режима дозировки конкретного соединения для управления фармакокинетикой настоящих соединений для повышения благоприятного действия на пациентов.
Термин "терапевтически эффективное количество" как здесь используется обозначает количество, необходимое для снижения симптомов заболевания у пациента. Доза подбирается в соответствии с индивидуальными требованиями в каждом конкретном случае. Включена та дозировка, которая изменяется в широких пределах в зависимости от многочисленных факторов, таких как степень тяжести излечиваемого заболевания, возраст и общее состояние здоровья пациента, другие лекарственные средства, которыми лечится пациент, способ и форма введения и предпочтения и опыт лечащего врача. Для перорального введения подходит суточная дозировка от около 0,01 до около 1000 мг/кг веса тела в сутки для монотерапии и/или в комбинированной терапии. Предпочтительная суточная дозировка составляет от около 0,1 до около 500 мг/кг веса тела, более предпочтительный от 0,1 до около 100 мг/кг веса тела, и наиболее предпочтительно от 1,0 до около 10 мг/кг веса тела в сутки. Так, для введения пациенту весом 70 кг, диапазон дозировки может составлять от около 7 мг до 0,7 г в сутки. Суточная дозировка может вводиться одной дозой или несколькими дозами, обычно от 1 до 5 доз в сутки. Обычно, обработку начинают с малых доз, которые меньше оптимальной дозы соединения. 3атем дозировку повышают небольшими прибавками до достижения оптимального эффекта конкретным пациентом. Специалист в данной области техники лечения описанных здесь заболеваний способен без проведения дополнительных экспериментов и основываясь на собственном знании, опыте и описании изобретения оценить терапевтически эффективное количество соединений настоящего изобретения для данного заболевания и пациента.
Фармацевтические препараты предпочтительно находятся в единичных дозированных формах. В таких формах препарат разделен на единичные дозы, содержащие подходящие количества активного компонента. Единичная дозированная форма может представлять собой упакованный препарат, упаковку, содержащую дискретные количества препарата, такой как упакованные таблетки, капсулы и порошки в сосудах или ампулах. Также, единичная дозированная форма может представлять собой капсулу, таблетку, саше или лепешку отдельно, или она может представлять собой подходящее количество любых из этих форм в упакованной форме.
Примеры
Пример 1: Этиловый эфир 2-(3-бромфенил)-3-(3-трет-бутилфениламино)акриловой кислоты
Бензиловый эфир (3-бромфенил)уксусной кислоты (1 г, 4,12 ммоля) растворяли в этилформиате (8 мл, 99 ммолей). Добавляли гидрид натрия (60%, 660 мг, 16,5 ммоля). После перемешивания в течение ночи смесь гасили 2 М води. НС1. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали водой, промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, и концентрировали в вакууме.
Этот материал (0,65 г) и 3-трет-бутиланилин (0,37 мл, 2,48 ммоля) перемешивали в 1 мл этанола в течение 18 часов. Смесь концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 5 до 20% этилацетат/гексан) с получением этилового эфира 2-(3-бромфенил)-3-(3-трет-бутилфениламино)акриловой кислоты (0,5 мг), MS (ESI) 402 (M+H)+.
Пример 2: 3-(3-Бромфенил)-7-трет-бутил-1Н-хинолин-4-он
К этиловому эфиру 2-(3-бромфенил)-3-(3-трет-бутилфениламино)акриловой кислоты (151 мг, 0,388 ммоля) добавляли 10 г полифосфорной кислоты. Полученную смесь нагревали при 140°C в течение 90 минут. Добавляли 80 мл воды. Смесь перемешивали в течение 40 минут. Полученный осадок отфильтровывали, промывали водой и сушили на воздухе в течение 3 дней с получением 3-(3-бромфенил)-7-трет-бутил-1H-хинолин-4-она (123 мг, 0,345 ммоля). MS (ESI) 356 (M+H)+.
Пример 3: 7-трет-Бутил-3-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-1H-хинолин-4-он
3-(3-Бромфенил)-7-трет-бутил-1H-хинолин-4-он (119 мг, 0,334 ммоля), бис(пинаколято)диборон (102 мг, 0,401 ммоля) и ацетат калия (98 мг, 1,0 ммоль) помещали в закрытый сосуд с 2 мл ДМСО. Через смесь пропускали аргон в течение 1 минуты. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(II) комплекс с ДХМ (8,0 мг, 0,0098 ммоля). Через смесь пропускали аргон в течение одной минуты, и крышку плотно закрывали. Полученную смесь нагревали при 80°C в течение 18 часов, затем разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 25 до 50% этилацетат/гексан) с получением 7-трет-бутил-3-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)фенил]-1H-хинолин-4-она (77 мг, 0,19 ммоля). MS (ESI) 404,1 (M+H)+.
Пример 4: 7-трет-Бутил-3-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-1H-хинолин-4-он (II-1)
Раствор 5-бром-1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-1H-пиридин-2-она (19 мг, 0,050 ммоля), 7-трет-бутил-3-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-1H-хинолин-4-она (20 мг, 0,05 ммоля), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (6,0 мг, 0,0052 ммоля) и карбоната натрия (16 мг, 0,15 ммоля) в 2 мл 1,2-диметоксиэтана и 1 мл воды подвергали микроволновому облучению при 170°C в течение 12,5 минут. Полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной TCX (5% метанол/ДХМ) с получением 7-трет-бутил-3-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил} фенил)-1H-хинолин-4-она (5,7 мг, 0,0085 ммоля). MS (ESI) 590,1 (M+H)+.
Пример 5: Этиловый эфир 2-(3-бром-2-метилфенил)-3-(3-диметиламинофениламино)акриловой кислоты
Бензиловый эфир (3-бром-2-метилфенил)уксусной кислоты (421 мг, 1,32 ммоля) растворяли в этилформиате (2,5 мл, 31 ммоль). Добавляли гидрид натрия (95%, 67 мг, 2,6 ммоля). После перемешивания в течение 30 минут смесь гасили 1M водн. HCl. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали водой, промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме.
Часть этого материала и N,N-диметилбензол-1,3-диамин (96 мг, 0,70 ммоля) перемешивали в 1 мл этанола в течение 18 часов. Смесь концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 5 до 20% этилацетат/гексан) с получением этилового эфира 2-(3-бром-2-метилфенил)-3-(3-диметиламинофениламино)акриловой кислоты (164 мг, 0,407 ммоля). MS (ESI) 405,0 (M+H)+.
Пример 6: 3-(3-Бром-2-метилфенил)-7-диметиламино-1H-хинолин-4-он
К этиловому эфиру 2-(3-бром-2-метилфенил)-3-(3-диметиламинофениламино)акриловой кислоты (100 мг, 0,248 ммоля) добавляли 4 г полифосфорной кислоты. Смесь перемешивали при 140°C в течение 10 минут. Добавляли 50 мл воды, и смесь перемешивали. Полученный осадок отфильтровывали и промывали водой. Фильтрат экстрагировали раствором 10% метанол/ДХМ. Органический слой сушили безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Полученный остаток объединяли с осадком и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 5% метанол/ДХМ) с получением 3-(3-бром-2-метилфенил)-7-диметиламино-1H-хинолин-4-она (22 мг, 0,062 ммоля). MS (ESI) 357,0 (M+H)+.
Пример 7: 1-Метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он
5-Бром-1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-1Н-пиридин-2-он (1,00 г, 2,55 ммоля), бис(пинаколято)диборон (1,94 г, 7,64 ммоля), ацетат калия (750 мг, 7,64 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенил (121 мг, 0,254 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладий(0) (73 мг, 0,13 ммоля) растворяли в 15 мл дегазированного 1,4-диоксана. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 5 раз. Смесь нагревали при 110°C в течение 3 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 8% метанол/ДХМ) с получением 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1H-пиридин-2-она (0,798 г, 1,81 ммоля). MS (ESI) 441,2(M+H)+.
Пример 8: 7-Диметиламино-3-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил} фенил)-1H-хинолин-4-он (11-2)
К 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-ону (27 мг, 0,062 ммоля), 3-(3-бром-2-метилфенил)-7-диметиламино-1Н-хинолин-4-ону (22 мг, 0,062 ммоля), фосфату калия (26 мг, 0,12 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (1,7 мг, 0,0036 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (1,0 мг, 0,0018 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/н-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°C в течение 1 часа. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной ТСХ (5% метанол/ДХМ) с получением 7-диметиламино-3-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-1H-хинолин-4-она (14 мг, 0,024 ммоля). MS (ESI) 591,1 (M+H)+.
Пример 9: 6-Фтор-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
5-Фториндан-1-он (4,00 г, 26,6 ммоля) растворяли в 40 мл ДХМ и 40 мл метансульфоновой кислоты. Смесь охлаждали до 0°C и добавляли азид натрия (3,46 г, 53,2 ммоля). Через 2 часа раствор подщелачивали медленным добавлением 20% водн. раствора гидроксида натрия. Полученную смесь разделяли между ДХМ и водой. ДХМ слой сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 50 до 100% этилацетат/гексан) с получением 6-фтор-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (2,72 г, 16,5 ммоля). MS (ESI) 166,1 (M+H)+.
Пример 10: 6-Диметиламино-3.4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
6-Фтор-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (1,56 г, 9,45 ммоля) помещали в закрытый сосуд с 25 мл 33% диметиламина в этаноле. Смесь нагревали при 150ºС в течение 7 часов. Полученный раствор разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (элюирование этилацетатом) с получением 6-диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (787 мг, 4,14 ммоля). MS (ESI) 191,1 (M+H)+.
Пример 11: 2-(3-Бромфенил)-6-диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
6-Диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (762 мг, 4,01 ммоля), йодид меди (153 мг, 0,802 ммоля) и карбонат калия (554 мг, 4,01 ммоля) помещали в закрытый сосуд. Добавляли 6 мл ДМСО и 1,3-дибромбензола (1,89 г, 8,01 ммоля). Аргон пропускали через смесь в течение 2 минут, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Добавляли йодид меди (153 мг, 0,802 ммоля), и смесь нагревали при 150ºС в течение 24 часов. Смесь разбавляли дихлорметаном и отфильтровывали через слой целита. Фильтрат разделяли между ДХМ и 5% водн. раствором гидроксида аммония. ДХМ слой сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 25 до 100% этилацетат/гексан) с получением 2-(3-бромфенил)-6-диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (939 мг, 2,72 ммоля). MS (ESI) 345,0 (M+H)+.
Пример 12: 6-Диметиламино-2-[3-(4,4.5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)фенил]-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
2-(3-Бромфенил)-6-диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (163 мг, 0,472 ммоля), бис(пинаколято)диборон (144 мг, 0,567 ммоля) и ацетат калия (138 мг, 1,42 ммоля) помещали в закрытый сосуд с 2 мл ДМСО. Аргон пропускали через смесь в течение 1 минуты. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(II) комплекс с ДХМ (12 мг, 0,015 ммоля). Аргон продолжали пропускать через смесь в течение одной минуты, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 80°C в течение 18 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (30% этилацетат/гексан) с получением 6-диметиламино-2-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (137 мг, 0,349 ммоля). MS (ESI) 393,2 (M+H)+.
Пример 13: 6-Диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (1-1)
5-Бром-1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-1Н-пиридин-2-он (67 мг, 0,17 ммоля), 6-диметиламино-2-[3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)фенил]-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (67 мг, 0,17 ммоля), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (20 мг, 0,017 ммоля) и карбонат натрия (54 мг, 0,51 ммоля) в 2 мл 1,2-диметоксиэтана и 1 мл воды нагревали при 170°C в течение 12,5 минут в микроволновой печи. Полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 5% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (40 мг, 0,069 ммоля). MS (ESI) 579,2 (M+H)+.
Пример 14: 6-Фтор-2H-изохинолин-1-он
6-Фтор-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (149 мг, 0,903 ммоля) растворяли в 3 мл 1,4-диоксана. Аргон пропускали через этот раствор в течение 1 минуты, и добавляли 2,3-дихлор-5,6-дициано-n-бензохинон (205 мг, 0,903 ммоля). Смесь нагревали при 100°С в течение 24 часов. Полученную смесь разделяли между этилацетатом и 1М водн. раствором гидроксида натрия. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (50% этилацетат/гексан) с получением 6-фтор-2H-изохинолин-1-она (54 мг, 0,33 ммоля). MS (ESI) 164,1 (M+H)+.
Пример 15: 6-Диметиламино-2H-изохинолин-1-он
6-Фтор-2H-изохинолин-1-он (54 мг, 0,33 ммоля) помещали в закрытую колбу с 5 мл 33% диметиламина в этаноле. Смесь нагревали при 150ºС в течение 3,5 часов. Смесь концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 50 до 100% этилацетат/гексан) с получением 6-диметиламино-2H-изохинолин-1-она (39 мг, 0,21 ммоля). MS (ESI) 189,1 (M+H)+.
Пример 16: 2-(3-Бромфенил)-6-диметиламино-2H-изохинолин-1-он
6-Диметиламино-2H-изохинолин-1-он (39 мг, 0,21 ммоля), йодид меди (8,0 мг, 0,041 ммоля) и карбонат калия (29 мг, 0,21 ммоля) помещали в закрытый сосуд. Добавляли 3 мл ДМСО и 1,3-дибромбензол (98 мг, 0,42 ммоля). Аргон пропускали через смесь в течение 2 минут, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 150°С в течение 5 часов. Полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (25% этилацетат/гексан) с получением 2-(3-бромфенил)-6-диметиламино-2H-изохинолин-1-она (45 мг, 0,13 ммоля). MS (ESI) 345,0 (M+H)+.
Пример 17: 6-Диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он (III-1)
К 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1H-пиридин-2-ону (58 мг, 0,13 ммоля), 2-(3-бромфенил)-6-диметиламино-2H-изохинолин-1-ону (45 мг, 0,13 ммоля), фосфату калия (56 мг, 0,26 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (3,7 мг, 0,0078 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (2,2 мг, 0,0038 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/н-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°C в течение 2 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной ТСХ (5% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-она(45 мг, 0,078 ммоля). MS (ESI) 577,1 (M+H)+.
Пример 18: 1,3-Дибром-2-бромметилбензол
2,6-Дибромтолуол (2,50 г, 10,0 ммолей) растворяли в 20 мл тетрахлориде углерода. Добавляли N-бромсукцинимид (1,87 г, 10,5 ммоля), затем бензоилпероксид (73 мг, 0,30 ммоля). Полученную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 90 минут. Добавляли 50 мл петролейного эфира. Смесь отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением 1,3-дибром-2-бромметилбензола (3,52 г, 10,7 ммоля). 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 4,83 (s, 3H), 7,02 (t, J=8 Гц, 1H) и 7,55 (d, J=8 Гц, 2H).
Пример 19: 2.6-Дибромбензиловый эфир уксусной кислоты
К 1,3-дибром-2-бромметилбензолу (3,35 г, 10,2 ммоля) добавляли ацетат калия (4,00 г, 40,8 ммоля) и 25 мл N,N-диметилформамида. Смесь нагревали при 70°C в течение 20 минут. Полученную смесь разделяли между водой и этилацетатом. Этилацетатный слой промывали водой, промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 0 до 5% этилацетат/гексан) с получением 2,6-дибромбензилового эфира уксусной кислоты (1,92 г, 6,23 ммоля). 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 2,12 (s, 3H), 5,42 (s, 2H), 7,08 (t, J=8 Гц, 1H) и 7,58 (d, J=8 Гц, 2H).
Пример 20: 2-Бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-1H-изохинолин-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты
6-Диметиламино-2H-изохинолин-1-он (50 мг, 0,27 ммоля), 2,6-дибромбензиловый эфир уксусной кислоты (164 мг, 532 ммоля), йодид меди (10 мг, 0,053 ммоля) и карбонат калия (37 мг, 0,27 ммоля) помещали в закрытый сосуд. Добавляли 3 мл ДМСО. Аргон пропускали через смесь в течение 2 минут, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 150°C в течение 5 часов. Полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 30 до 40% этилацетат/гексан) с получением 2-бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)бензилового эфира уксусной кислоты (48 мг, 0,12 ммоля). MS (ESI) 417,0 (M+H)+.
Пример 21: 2-(6-Диметиламино-1-оксо-1H-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}бензиловый эфир уксусной кислоты
К 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1H-пиридин-2-ону (43 мг, 0,097 ммоля), 2-бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-1H-изохинолин-2-ил)бензиловому эфиру уксусной кислоты (40 мг, 0,097 ммоля), фосфату калия (41 мг, 0,19 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (2,7 мг, 0,0057 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (1,6 мг, 0,0028 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/н-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°С в течение 110 минут. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 5% метанол/ДХМ) с получением 2-(6-диметиламино-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}бензилового эфира уксусной кислоты (33 мг, 0,051 ммоля). MS (ESI) 649,2 (M+H)+.
Пример 22: 6-Диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он (III-3)
К 2-(6-диметиламино-1-оксо-1H-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}бензиловому эфиру уксусной кислоты (29 мг, 0,045 ммоля) в 2 мл ТГФ добавляли 1 мл метанола и 1 мл воды, 1М водн. раствора гидроксида лития (0,13 мл, 0,13 ммоля). После перемешивания в течение 18 часов смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной ТСХ (5% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-она (20 мг, 0,033 ммоля). MS (ESI) 607,2 (M+H)+.
Пример 23: 2-(3-Бром-2-метилфенил)-6-диметиламино-2H-изохинолин-1-он
6-Диметиламино-2H-изохинолин-1-он (50 мг, 0,27 ммоля), йодид меди (10 мг, 0,053 ммоля) и карбонат калия (37 мг, 0,27 ммоля) помещали в закрытый сосуд. Добавляли 3 мл ДМСО и 2,6-дибромтолуол (133 мг, 0,532 ммоля). Аргон пропускали через смесь в течение 2 минут, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 150°C в течение 5 часов. Полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (30% этилацетат/гексан) с получением 2-(3-бром-2-метилфенил)-6-диметиламино-2H-изохинолин-1-она (43 мг, 0,12 ммоля). MS (ESI) 357 (M+H)+.
Пример 24: 6-Диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он (III-2)
К 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1H-пиридин-2-ону (69 мг, 0,16 ммоля), 2-(3-бром-2-метилфенил)-6-диметиламино-2H-изохинолин-1-ону (36 мг, 0,10 ммоля), фосфату калия (43 мг, 0,20 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (2,9 мг, 0,0061 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (1,7 мг, 0,0030 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/н-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°C в течение 110 минут. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 10% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-она (46 мг, 0,078 ммоля). MS (ESI) 591,1 (M+H)+.
Пример 25: 2-(3-Бром-2-метилфенил)-6-диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
6-Диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (150 мг, 0,789 ммоля), йодид меди (30 мг, 0,16 ммоля) и карбонат калия (109 мг, 0,789 ммоля) помещали в закрытый сосуд. Добавляли 3 мл ДМСО и 2,6-дибромтолуола (395 мг, 1,58 ммоля). Аргон пропускали через смесь в течение 2 минут, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Добавляли йодид меди (30 мг, 0,16 ммоля), и смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Смесь разбавляли дихлорметаном и отфильтровывали через слой целита. Фильтрат разделяли между ДХМ и 5% водн. раствором гидроксида аммония. ДХМ слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия. Объединенные водные слои промывали ДХМ. Объединенные ДХМ слои сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 25 до 50% этилацетат/гексан) с получением 2-(3-бром-2-метилфенил)-6-диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (181 мг, 0,504 ммоля). MS (ESI) 361,1 (M+H)+.
Пример 26: 6-Диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он(1-3)
К 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1H-пиридин-2-ону (77 мг, 0,18 ммоля), 2-(3-бром-2-метилфенил)-6-диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-ону (63 мг, 0,18 ммоля), фосфату калия (74 мг, 0,35 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (5,0 мг, 0,010 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (3,0 мг, 0,0052 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/н-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°C в течение 110 минут. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 5% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (33 мг, 0,056 ммоля). MS (ESI) 593,3 (M+H)+.
Пример 27: 2-Бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты
6-Диметиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (150 мг, 0,789 ммоля), 2,6-дибромбензиловый эфир уксусной кислоты (487 мг, 1,58 ммоля), йодид меди (30 мг, 0,16 ммоля) и карбонат калия (109 мг, 0,789 ммоля) помещали в закрытый сосуд. Добавляли 3 мл ДМСО. Аргон пропускали через смесь в течение 2 минут, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Добавляли йодид меди (30 мг, 0,16 ммоля), и смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Смесь разбавляли дихлорметаном и отфильтровывали через слой целита. Фильтрат разделяли между ДХМ и 5% водн. раствором гидроксида аммония. ДХМ слой сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 25 до 50% этилацетат/гексан) с получением 2-бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)бензилового эфира уксусной кислоты (93 мг, 0,22 ммоля). MS (ESI) 417,1 (M+H)+.
Пример 28: 6-Диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил} фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (1-2)
К 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-ону (60 мг, 0,14 ммоля), 2-бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензиловому эфиру уксусной кислоты (46 мг, 0,11 ммоля), фосфату калия (47 мг, 0,22 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (3,1 мг, 0,0065 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (1,9 мг, 0033 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/н-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°C в течение 110 минут. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Ээтилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Смесь растворяли в 2 мл ТГФ, 1 мл метанола и 1 мл воды. Добавляли 1М водн. раствор гидроксида лития (0,33 мл, 0,33 ммоля). После перемешивания в течение 18 часов, полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 5% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (36 мг, 0,059 ммоля). MS (ESI) 609,1 (M+H)+.
Пример 29: 2-Бром-6-(6-метиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты
К раствору 2-бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензилового эфира уксусной кислоты (224 мг, 0,482 ммоля) в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 2,3-дихлор-5,6-дициано-и-бензохинон (109 мг, 0,48 ммоля). После перемешивания в течение 4 часов смесь разделяли между этилацетатом и 1М води. раствором NaOH. Органический слой промывали водой, промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 40 до 50% этилацетат/гексан) с получением 2-бром-6-(6-метиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензилового эфира уксусной кислоты (93 мг, 0,23 ммоля). MS (ESI) 404,8 (M+H)+.
Пример 30: 2-(2-Гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-метиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
К 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-ону (96 мг, 0,22 ммоля), 2-бром-6-(6-метиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)бензиловому эфиру уксусной кислоты (88 мг, 0,22 ммоля), фосфату калия (46 мг, 0,22 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (6,2 мг, 0,013 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (3,7 мг, 0064 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/м-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°С в течение 2 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Смесь растворяли в 2 мл ТГФ, 1 мл метанола и 1 мл воды. Добавляли 1М водн. раствор гидроксида лития (0,65 мл, 0,65 ммоля). После перемешивания в течение 18. часов полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной ТСХ (5% метанол/ДХМ) с получением 2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-метиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (43 мг, 0,072 ммоля). MS (ESI) 595 (M+H)+.
Пример 31: 2-(6-Диметиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты
К 2-бром-6-(6-диметиламино-1 -оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензиловому эфиру уксусной кислоты (422 мг, 1,01 ммоля), бис(пинаколято)диборону (308 мг, 1,21 ммоля) и ацетату калия (298 мг, 3,03 ммоля) в закрытой колбе добавляли 5 мл диметилсульфоксида. Аргон пропускали через эту смесь в течение 3 минут. Добавляли [1,1'-юис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(II) комплекс с ДХМ (25 мг, 0,030 ммоля). Аргон продолжали пропускать через смесь в течение одной минуты, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 80°С в течение 18 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 30 до 50% этилацетат/гексан) с получением 2-(6-диметиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензилового эфира уксусной кислоты (251 мг, 0,541 ммоля). MS (ESI) 487,2 (М+Na)+.
Пример 32: 6-Диметиламино-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил-]фенил}-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
5-Бром-1-метил-3-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-1H-пиридин-2-он (35 мг, 0,13 ммоля), 2-(6-диметиламино-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты (58 мг, 0,13 ммоля), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (14 мг, 0,012 ммоля) и карбонат натрия (40 мг, 0,38 ммоля) растворяли в 2 мл 1,2-диметоксиэтана и 1 мл воды. Смесь подвергали микроволновому облучению при 120°C в течение 30 минут. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Смесь растворяли в 3 мл ТГФ, 1,5 мл метанола и 1,5 мл воды. 1М aq. Добавляли раствор гидроксида лития (0,38 мл, 0,38 ммоля). Смесь перемешивали в течение 3 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной ТСХ (5% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил}-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (39 мг, 0,078 ммоля). MS (ESI) 499,2 (M+H)+.
Пример 33: 1-Метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин
К 5-Бром-2-нитропиридину (2,00 г, 9,85 ммоля) в 10 мл диметилсульфоксида добавляли карбонат калия (2,72 г, 19,7 ммоля), 1-метилпиперазин (1,64 мл, 14,8 ммоля) и йодид тетрабутиламмония (36 мг, 0,097 ммоля), и нагревали при 120°C в течение 18 часов. Смесь подкисляли 1М водн. HCl и разделяли между ДХМ и водой. Водный слой подщелачивали 2М водн. раствором карбоната натрия и экстрагировали ДХМ. Органический слой сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и обрабатывали водой с получением 1-метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазина (1,82 г, 8,19 ммоля). MS (ESI) 223,1 (M+H)+.
Пример 34: 5-(4-Метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламин
1-Метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин (1,748 г, 7,865 ммоля) перемешивали в 30 мл метанола с 175 мг 10% палладия на угле в атмосфере газообразного водорода в течение 5 часов. Смесь отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением 5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламина (1,485 г, 7,724 ммоля). MS (ESI) 193,1 (M+H)+.
Пример 35: 5-Бром-1-метил-3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино]-1H-пиридин-2-он
К 5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламину (1,06 г, 5,53 ммоля), 3,5-дибром-1-метил-1H-пиридин-2-ону (1,23 г, 4,61 ммоля), 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантену (400 мг, 0,691 ммоля) и карбонату цезия (4,50 г, 13,8 ммоля) добавляли 45 мл 1,4-диоксана и трис(дибензилидинацетон)дипалладий(0) (422 мг, 0,461 ммоля). Смесь нагревали в масляной бане при 120°C в течение 6 часов в атмосфере аргона. Смесь разделяли между этилацетатом и разбавленным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 2 до 5% метанол/ДХМ) с получением 5-бром-1-метил-3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино]-1H-пир,идин-2-она (484 мг, 1,28 ммоля). MS (ESI) 380,0 (M+H)+.
Пример 36: 5-Бром-1-метил-3-(5-морфолин-4-илпиридин-2-иламино)-1H-пиридин-2-он
Это соединение получали аналогично 5-бром-1-метил-3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино]-1Н-пиридин-2-ону. MS (ESI) 365,0 (M+H)+.
Пример 37: 6-(Этилметиламино)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он 6-Фтор-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (2,00 г, 12,1 ммоля) помещали в закрытый сосуд с N-этилметиламином (4,0 мл, 47 ммолей). Смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Смесь концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (элюирование этилацетатом) с получением 6-(этилметиламино)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (2,10 г, 10,3 ммоля). MS (ESI) 205,1 (M+H)+.
Пример 38: 2-Бром-6-[6-(этилметиламино)-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил1бензиловый эфир уксусной кислоты
6-(Этилметиламино)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (2,07 г, 10,1 ммоля), 2,6-дибромбензиловый эфир уксусной кислоты (6,25 г, 20,3 ммоля), йодид меди (386 мг, 2,03 ммоля) и карбонат калия (1,40 г, 10,1 ммоля) помещали в закрытый сосуд. Добавляли 30 мл ДМСО. Аргон пропускали через смесь в течение 3 минут, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Добавляли йодид меди (386 мг, 2,03 ммоля), и смесь нагревали при 150°C в течение 24 часов. Смесь разбавляли 300 мл этилацетата и 300 мл воды. После перемешивания в течение 20 минут смесь отфильтровывали через слой целита. Слои разделяли. Этилацетатный слой сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 25 до 50% этилацетат/гексан) с получением 2-бром-6-[6-(этилметиламино)-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]бензилового эфира уксусной кислоты (1,21 г, 2,81 ммоля). MS (ESI) 433,0 (M+H)+.
Пример 39: 5-Бром-1-метил-3-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-1H-пиридин-2-он
3,5-Дибром-1-метил-1H-пиридин-2-он (469 мг, 1,76 ммоля), 1-метил-1H-пиразол-3-иламин (205 мг, 2,11 ммоля), трис(дибензилидинацетон)дипалладий(0) (80 мг, 0,087 ммоля), 2,2'-бис(дифенилфосфино-1,1'-бинафтален (82 мг, 0,13 ммоля) и карбонат цезия (801 мг, 2,46 ммоля) помещали в закрытый сосуд с 10 мл толуола. Смесь нагревали при 130°C в течение 18 часов. Полученную смесь выливали в 50 мл воды. Смесь экстрагировали этилацетатом. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, отфильтровывали, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (элюируя этилацетат/гексан) с получением 5-бром-1-метил-3-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-1H-пиридин-2-она (271 мг, 0,957 ммоля). MS (ESI) 284,9 (M+H)+.
Пример 40: 2-(6-Диметиламино-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты
К 2-бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)бензиловому эфиру уксусной кислоты (420 мг, 1,01 ммоля), бис(пинаколято)диборону (308 мг, 1,21 ммоля) и ацетату калия (298 мг, 3,03 ммоля) в закрытой колбе добавляли 5 мл диметилсульфоксида. Аргон пропускали через эту смесь в течение 3 минут. Добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(II) комплекс с ДХМ (25 мг, 0,030 ммоля). Аргон продолжали пропускать через смесь в течение одной минуты, и крышку плотно закрывали. Смесь нагревали при 80°C в течение 18 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 25 до 50% этилацетат/гексан) с получением 2-(6-диметиламино-1-оксо-1h-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензилового эфира уксусной кислоты (183 мг, 0,396 ммоля). MS (ESI) 463,1 (M+H)+.
Пример 41: 6-Диметиламино-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил}-2H-изохинолин-1-он
5-Бром-1-метил-3-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-1H-пиридин-2-он (47 мг, 0,17 ммоля), 2-(6-диметиламино-1-оксо-1H-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты (77 мг, 0,17 ммоля), тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (19 мг, 0,016 ммоля) и карбонат натрия (53 мг, 0,50 ммоля) растворяли в 2 мл 1,2-диметоксиэтана и 1 мл воды. Смесь подвергали микроволновому облучению при 120°C в течение 30 минут. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Смесь растворяли в 3 мл ТГФ, 1,5 мл метанола и 1,5 мл воды. Добавляли 1М водн. раствор гидроксида лития (0,5 мл, 0,5 ммоля). Смесь перемешивали в течение 3 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной ТСХ (элюирование 5% метанол/ДХМ) с получением 6-диметиламино-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил}-2H-изохинолин-1-она (37 мг, 0,075 ммоля). MS (ESI) 497,1 (M+H)+.
Пример 42: 1-{5-[3-(6-Диметиламино-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-2-гидроксиметилфенил]-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил}-3-этилмочевина
К 1-этил-3-[1-метил-2-оксо-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)-1,2-дигидропиридин-3-ил]мочевине (50 мг, 0,16 ммоля), 2-бром-6-(6-диметиламино-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)бензиловому эфиру уксусной кислоты (65 мг, 0,16 ммоля), фосфату калия (66 мг, 0,31 ммоля), 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенилу (4,4 мг, 0,0092 ммоля) и бис(дибензилидинацетон)палладию(0) (2,6 мг, 0,0045 ммоля) добавляли 4 мл дегазированной смеси 1:3 вода/н-бутанол. Свободное пространство над смесью в сосуде вакуумировали и насыщали аргоном 4 раза. Смесь нагревали при 100°C в течение 2 часов. Смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Смесь растворяли в 2 мл ТГФ, 1 мл метанола и 1 мл воды. Добавляли 1М водн. раствор гидроксида лития (0,47 мл, 0,47 ммоля). После перемешивания в течение 3 часов, полученную смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили безводным сульфатом магния, концентрировали в вакууме и очищали препаративной ТСХ (5% метанол/ДХМ) с получением 1-{5-[3-(6-диметиламино-1-оксо-1Н-изохинолин-2-ил)-2-гидроксиметилфенил]-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил}-3-этилмочевины (33 мг, 0,068 ммоля). MS (ESI) 488,1 (M+H)+.
Пример 43: 5-Бром-1-метил-3-(5-морфолин-4-илметилпиридин-2-иламино)-1H-пиридин-2-он
5-Бром-1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-1Н-пиридин-2-он (2,3 г, 5,9 ммоля) растворяли в 30 мл ТГФ. Добавляли комплекс борана с ТГФ (2,5 г, 29 ммолей). После перемешивания в течение 18 часов смесь концентрировали в вакууме. Добавляли этанол. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение одного часа. Смесь концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией с получением 5-бром-1-метил-3-(5-морфолин-4-илметилпиридин-2-иламино)-1Н-пиридин-2-она (500 мг, 1,32 ммоля). MS (ESI) 381,0 (M+H)+.
Пример 44: (6-Хлорпиридин-3-ил)-(4-метилпиперазин-1-ил)метанон К раствору 6-хлорникотиновой кислоты (3,00 г, 19,0 ммолей) в 30 мл диметилформамида добавляли гексафторфосфат (бензотриазол-1-илокси)трипирролидинофосфония (10,9 г, 20,9 ммоля), 1-метилпиперазин (2,30 г, 22,1 ммоля) и триэтиламин (2,18 г, 21,5 ммоля). После перемешивания в течение 18 часов смесь разделяли между этилацетатом и водой. Этилацетатный слой сушили безводным сульфатом натрия, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (элюирование 3% метанол/ДХМ) с получением (6-хлорпиридин-3-ил)-(4-метилпиперазин-1-ил)метанона (2,50 г, 9,33 ммоля).
Пример 45: 5-Бром-1-метил-3-Г5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)пиридин-2-иламино]-1H-пиридин-2-он
К раствору (6-хлорпиридин-3-ил)-(4-метилпиперазин-1-ил)метанона (2,00 г, 7,46 ммоля) в 10 мл диметилформамида добавляли 3-амино-5-бром-1-метил-1Н-пиридин-2-он (1,80 г, 8,95 ммоля) и гидрид натрия (537 мг, 22,4 ммоля). После перемешивания в течение 18 часов смесь гасили водой. Смесь экстрагировали этилацетатом. Этилацетатный слой сушили безводным сульфатом натрия, концентрировали в вакууме и очищали ускоренной хроматографией (градиент элюирования от 0 до 5% метанол/ДХМ) с получением 5-бром-1-метил-3-[5-(4-метилпиперазин-1-карбонил)пиридин-2-иламино]-1H-пиридин-2-она (900 мг, 1,94 ммоля). MS (ESI) 406,0 (M+H)+.
Пример 56: 6-Хлорпиридазин-3-иламин
3,6-Дихлорпиридазин (7,5 г, 50,35 ммоля) растворяли в этанольном растворе аммиака (100 мл) и нагревали при (130°C) в течение ночи в сосуде под давлением. 3атем этанол упаривали при пониженном давлении, и сырой продукт очищали ускоренной хроматографией на силикагеле (230-400 меш), используя смесь EtOAc/гексан (6:4) с получением указанного в заголовке соединения (4 г, 61%) в виде твердого вещества.
Пример 57: 4-Бром-6-хлорпиридазин-3-иламин
К раствору 6-хлорпиридазин-3-иламина (4 г, 31 ммоль) в метаноле (60 мл) добавляли NaHCO3 (5,2 г, 62 ммоля). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при КТ, затем по каплям добавляли Br2 (4,9 г, 31 ммоль). 3атем полученную реакционную смесь перемешивали дополнительно в течение 16 ч при КТ. После окончания реакции реакционную массу концентрировали при пониженном давлении, сырой продукт очищали хроматографией на силикагеле (100-200 меш), используя смесь EtOAc/гексан (8:2) с получением 4-бром-6-хлорпиридазин-3-иламина (2,3 г, 36%) в виде твердого вещества.
Пример 58: 4-Бром-6-хлор-2H-пиридазин-3-он
К охлажденному раствору (0-5°C) NaNO2 (1 г, 13,20 ммоля) в конц. H2SO4 (15 мл) добавляли 4-бром-6-хлорпиридазин-3-иламин (2,3 г, 11 ммолей) в 50 мл уксусной кислоты. 3атем реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 20 С, затем добавляли воду (75 мл) и перемешивание продолжали в течение 5 ч при КТ. Реакционную смесь экстрагировали EtOAc, сушили Na2SO4, концентрировали при пониженном давлении, и сырой продукт очищали хроматографией на силикагеле (100-200 меш), используя EtOAc/гексан (8:2) с получением соединения 4 (2,2 г, 95%) в виде желтоватого твердого вещества.
Пример 59: 4-Бром-6-хлор-2-метил-2H-пиридазин-3-он
4-Бром-6-хлор-2H-пиридазин-3-он (5,02 г, 23,97 ммоля) растворяли в 40 мл диметилформамида. Добавляли карбонат цезия (9,37 г, 28,76 ммоля). Через 5 мин по каплям добавляли йодметан (5,103 г, 35,95 ммоля) в течение 20 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов при КТ. Осадок отфильтровывали и концентрировали, и полученный остаток обрабатывали 20 мл ДХМ. Нерастворенный материал отфильтровывали снова и промывали ДХМ. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 4-бром-6-хлор-2-метил-2H-пиридазин-3-она (5,223 г, 23,37 ммоля). MS (ESI) 224,9 (M+H)+.
Пример 60: 6-Хлор-2-метил-4-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-2H-пиридазин-3-он
1-Метил-1H-пиразол-3-амин (806 мг, 8,3 ммоля) растворяли в 40 мл диоксана. Добавляли трет-бутоксид калия (1,793 г, 15,98 ммоля). 3атем добавляли 4-бром-6-хлор-2-метил-2H-пиридазин-3-он (1,7 г, 7,61 ммоля), и смесь перемешивали в течение 3 часов при КТ. Реакционную смесь переносили в колбу Эрленмейера объемом 150 мл и подкисляли 15 мл 1 М водного раствора хлористоводородной кислоты, затем обрабатывали насыщенным раствором бикарбоната натрия до достижения значения pH 8. Смесь экстрагировали дважды каждый раз по 100 мл ДХМ; и органическую фазу сушили сульфатом натрия, отфильтровывали и концентрировали в вакууме с получением 1,5 г светло-оранжевого твердого вещества. Этот сырой материал обрабатывали смесью ДХМ и гексана. Суспензию отфильтровывали, и полученный остаток на фильтре сушили в высоком вакууме с получением 6-хлор-2-метил-4-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-2H-пиридазин-3-она (967 мг, 4,03 ммоля). MS (ESI) 240,0 (M+H)+.
Пример 61: 2-(6-Циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-6-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил1бензиловый эфир уксусной кислоты
6-Хлор-2-метил-4-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-2H-пиридазин-3-он (0,09 г, 0,376 ммоля), 2-(6-циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты (0,191 г, 0,414 ммоля) и карбонат цезия (0,428 г, 1,31 ммоля) обрабатывали дегазированным раствором 2 мл диоксана/0,2 мл воды. Через 5 мин перемешивания добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(П) комплекс (0,031 г, 0,038 ммоля), и нагревали при 135°C в течение 30 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь отфильтровывали через целлюлозу, промывали 10 мл диоксана и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (градиент элюирования 0-10% метанола в ДХМ в течение 20 мин) с получением сырого 2-(6-циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-6-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]бензилового эфира уксусной кислоты (0,200 г, 0,371 ммоля). MS (ESI) 540,1 (M+H)+.
Пример 62: 6-Циклопропил-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1 -метил-1H-пиразол-3-иламино-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил}-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
2-(6-Циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-6-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил] бензиловый эфир уксусной кислоты (0,200 г, 0,371 ммоля) растворяли в 2 мл ТГФ, 1 мл воды и 1 мл метанола. Добавляли 1 М водный раствор гидроксида лития (1,1 мл, 1,11 ммоля) и перемешивали в течение нескольких часов при КТ. Смесь экстрагировали ДХМ/раствором хлорида аммония, и органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили сульфатом натрия, отфильтровывали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (градиент элюирования 0-10% метанола в ДХМ в течение 20 мин) с получением 6-циклопропил-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил}-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (0,087 г, 0,175 ммоля). MS (ESI) 597,2 (M+H)+.
Пример 63: 2-(6-Циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино1-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил}бензиловый эфир уксусной кислоты
6-Хлор-2-метил-4-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-2H-пиридазин-3-он (0,070 г, 0,2 ммоля), 2-(6 циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-6-(4,4,5,-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты (0,102 г, 0,221 ммоля) и карбонат цезия (0,228 г, 0,7 ммоля) обрабатывали дегазированным раствором 1 мл диоксана/0,1 мл воды. Через 5 мин перемешивания добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(II) комплекс (0,016 г, 0,02 ммоля), и смесь нагревали при 135°C в течение 30 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь отфильтровывали через целлюлозу; промывали 5 мл диоксана и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (градиент элюирования 0-10% метанола в ДХМ в течение 20 мин) с получением сырого 2-(6-циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил}бензилового эфира уксусной кислоты (0,121 г, 0,187 ммоля). MS (ESI) 671,1 (M+Na)+.
Пример 64: 6-Циклопропил-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2иламино]-6-1,6-дигидропиридазин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
2-(6-Циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил}бензиловый эфир уксусной кислоты (0,121 г, 0,187 ммоля) растворяли в 2 мл ТГФ, 1 мл воды и 1 мл метанола. Добавляли 1М водный раствор гидроксида лития (0,560 мл, 0,561 ммоля), и перемешивали в течение нескольких часов при КТ. Смесь экстрагировали смесью ДХМ/раствор хлорида аммония, и органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили сульфатом натрия, отфильтровывали и концентрировали. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (градиент элюирования 0-10% метанола в ДХМ в течение 20 мин) с получением 6-циклопропил-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-1,6-дигидропиридазин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (0,070 г, 0,115 ммоля). MS (ESI) 607,2 (M+H)+.
Пример 65: Метиловый эфир 4-изопропенил-2-метилбензойной кислоты.
Метиловый эфир 4-бром-2-метилбензойной кислоты (4 г, 17,46 ммоля), пинаколятный эфир изопропенилборной кислоты (3,228 г, 19,21 ммоля) и карбонат цезия (19,913 г, 61,11 ммоля) обрабатывали дегазированным раствором 15 мл диоксана/5 мл воды. Через 5 мин перемешивания добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(II) комплекс (0,718 г, 0,873 ммоля), и нагревали при 120°C в течение 40 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь отфильтровывали через целлюлозу; промывали 20 мл диоксана и концентрировали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на 120 г силикагеля (градиент элюирования 0-50% этилацетата в гексаце в течение 50 мин) с получением метилового эфира 4-изопропенил-2-метилбензойной кислоты (2,94 г, 15.45 ммоля). MS (ESI) 191,3 (M+H)+.
Пример 66: Метиловый эфир 2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензойной кислоты
Получение диазометана: N-Нитрозо-N-метилмочевину (9,1 г, 61,8 ммоля) добавляли порциями при перемешивании к двухфазной смеси 50 мл раствора гидроксида калия (23,9 г в 50 мл воды) и 50 мл диэтилового эфира при 0°C. Окраска органической фазы менялась с бесцветной на желтую. Двухфазную смесь интенсивно перемешивали в течение 40 мин при 0°C. Органический слой, который содержал диазометан, отделяли. Циклопропанирование добавлением раствора диазометана в метилстирол: Метиловый эфир 4-изопропенил-2-метилбензойной кислоты (2,94 г, 15,45 ммоля) растворяли в 15 мл диэтилового эфира и охлаждали до 0°C. Добавляли ацетат палладия (II) (0,173 г, 0,773 ммоля). По каплям добавляли желтую органическую фазу (содержащую диазометан). До окончания реакции добавляли всего 20 мл органической фазы (приблизительно 4 эквив. диазометана). Наблюдалось выделение азота при добавлении диазометана к метилстирольному промежуточному соединению. Реакционную смесь отфильтровывали через целлюлозу; промывали диэтиловым эфиром; концентрировали. Остаток (коричневую жидкость) очищали хроматографией на 40 г силикагеля (градиент элюирования 0-100% этилацетата в гексане в течение 15 мин). Получали 2,9 г сырой светло-желтой жидкости. ЯМР показало наличие 8% метилового эфира 2-метилбензойной кислоты. Сырой остаток очищали снова ускоренной хроматографией на 110 г (градиент элюирования 0-20% EtOAc в Hex в течение 30 мин) с получением метилового эфира 2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензойной кислоты (2,75 г, 13,46 ммоля) MS (ESI) 268,9 (M+Na++ACN).
Пример 67: 2-Метил-4-(1-метилциклопропил)бензойная кислота
Метиловый эфир 2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензойной кислоты (2,75 г, 13,46 ммоля) обрабатывали метанолом и 5М водным раствором гидроксида натрия (20,46 мл, 102,32 ммоля). Этот раствор нагревали при 80°C в течение 4 часов. Реакционную смесь концентрировали до испарения метанола. Получали белое твердое вещество. Твердое вещество растворяли в 50 мл воды при нагревании, затем охлаждали в ледяной бане; подкисляли 10 мл конц. хлористоводородной кислоты. Образовывался белый осадок; его отфильтровывали; промывали водой; сушили в высоком вакууме в течение ночи с получением 2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензойной кислоты (2,18 г, 11,46 ммоля) MS (ESI) 189,1 (M-H)-
Пример 68: 2-Метил-4-(1-метилциклопропил)бензоилхлорид
2-Метил-4-(1-метилциклопропил)бензойную кислоту (2,139 г, 11,243 ммоля) и пентахлорид фосфора (2,575 г, 12,37 ммоля) загружали в колбу объемом 50 мл при перемешивании. Оба этих твердых вещества растворяли при 100°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при 120°C с обратным холодильником в атмосфере N2. После этого полученный оксихлорид фосфора отгоняли при 140°C из реакционной смеси. Полученную реакционную смесь охлаждали до КТ, и реакционная смесь все еще оставалась в виде раствора. Целевой продукт отгоняли дистилляцией К (150°C/4 мбар) с получением 2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензоилхлорида (1,92 г, 9,2 ммоля).
Пример 69: N-[3-Бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензамид
3-Бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фениламин (2,91 г, 9,2 ммоля), 2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензоилхлорид (1,92 г, 9,2 ммоля), N,N-диизопропилэтиламин (2,41 мл, 13,8 ммоля) и 4-диметиламинопиридин (0,112 г, 0,92 ммоля) растворяли в 20 мл безводного ТГФ. Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи; осадок отфильтровывали; концентрировали и экстрагировали этилацетатом; промывали 2 М фосфатным буфером с pH 5,5, затем водой и насыщенным раствором хлорида натрия; сушили сульфатом натрия; отфильтровывали; концентрировали. Получали 4,69 г в виде масла. Сырой продукт очищали хроматографией на 80 г силикагеля (градиент элюирования 0-20% этилацетата в гексане в течение 25 мин, затем 20-100% этилацетата в гексане в течение 30 мин) с получением N-[3-бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензамида (3,51 г, 7,185 ммоля) MS (ESI) 510 (М+Na+).
Пример 70: 2-[3-Бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-3-гидрокси-7-(1-метилциклопропил)-3,4-дигидро-2H-изохииолин-1-он
2,2,6,6-Тетраметилпиперидин (2,28 г, 16,17 ммоля) растворяли в 13 мл безводного ТГФ при перемешивании; охлаждали с помощью бани со смесью этиленгликоль/лед до -15°C. По каплям добавляли бутиллитий, 2,5 М в гексане (6,16 мл, 15,4 ммоля), и температуру поддерживали около -15°C и перемешивали дополнительно в течение 30 мин при -15°C. По каплям добавляли раствор N-[3-бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-2-метил-4-(1-метилциклопропил)бензамида в 20 мл безводного ТГФ в течение 10 минут к реакционной смеси при -15°C. Реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов. После этого добавляли одной порцией 3,55 мл диметилформамида. Реакционную смесь оставляли нагреваться до КТ. Смесь перемешивали в течение 2 часов при КТ, затем охлаждали до 0°C, гасили 25 мл 1М раствора гидросульфата калия; экстрагировали смесью этилацетат/вода; органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия; сушили сульфатом натрия; отфильтровывали и концентрировали. Получали 2,71 г коричневого масла. Кристаллизация с помощью ДХМ и гексана приводила к получению 2-[3-бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-3-гидрокси-7-(1-метилциклопропил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (1,134 г, 2,2 ммоля) MS (ESI) 516,0(M-H)-.
Пример 71: 2-[3-Бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-7-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-он
2-[3-Бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-3-гидрокси-7-(1-метилциклопропил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (1,134 г, 2,2 ммоля) растворяли в 13 мл ДХМ при КТ; добавляли триэтиламин (1,31 мл, 9,44 ммоля), затем метансульфонилхлорид (0,478 г, 4,171 ммоля). Смесь перемешивали в течение 1,5 часов при КТ, но реакция проходила за 10 минут по данным LCMS. Реакционную смесь экстрагировали ДХМ/вода; органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия; сушили сульфатом натрия;
отфильтровывали; концентрировали с получением 2-[3-бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-7-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-она (1,094 г, 2,2 ммоля) MS (ESI) 520,0 (М+Na+).
Пример 72: 2-(2-трет-Бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-он
2-[3-Бром-2-(трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)фенил]-7-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-он (0,102 г, 0,205 ммоля) и 1-метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он (0,1 г, 0,227 ммоля) растворяли в 2,5 мл диоксана при нагревании; добавляли 0,5 мл воды, затем карбонат цезия (0,259 г, 0,795 ммоля). После этого добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладиевый(II) комплекс (0,019 г, 0,023 ммоля), и нагревали при 135°C в течение 30 мин в микроволновой печи. Реакционную смесь отфильтровывали через целлюлозу; промывали диоксаном; концентрировали; остаток очищали хроматографией на 24 г силикагеля (градиент элюирования ДХМ в течение 5 мин, затем 0-10% метанола в ДХМ в течение 25 мин, затем ДХМ 9:1 метанола в течение 10 мин) с получением 2-(2-трет-бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбоннл)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-она (0,095 г, 0,13 ммоля) MS (ESI) 732,2 (M+H)+.
Пример 73: 2-(2-Гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино1-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1 -он
2-(2-трет-Бутилдиметилсиланилоксиметил)-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-он (0,095 г, 0,13 ммоля) растворяли в 3 мл диоксана. Добавляли 3 М водный раствор хлористоводородной кислоты (0,22 мл 0,39 ммоля) при КТ. Смесь перемешивали в течение 30 мин, затем экстрагировали этилацетат/раствор бикарбоната натрия; органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия; сушили сульфатом натрия; концентрировали. Сырой продукт очищали хроматографией на 12 г силикагеля (градиент элюирования 0-10% метанола в ДХМ в течение 30 мин) с получением 2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил} фенил)-6-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-она (0,045 г, 0,0728 ммоля) MS (ESI) 618,3 (M+H)+.
Пример 74: 6-Бром-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
Метансульфоновую кислоту (100 мл) добавляли к раствору 5-броминданона (25 г, 46 ммолей) в CH2Cl2 (200 мл) при 0°C. К этой смеси медленно порциями добавляли азид натрия (10,5 г, 162 ммоля). После окончания добавления азида натрия смесь перемешивали в течение 30 мин, и водную смесь NaOH (20 вес.%) добавляли до получения слегка основной смеси. Смесь экстрагировали метиленхлоридом, и объединенные органические слои упаривали при пониженном давлении. Очистка смеси ускоренной колоночной хроматографией на силикагеле (от 0% до 50% EtOAc/гексан, затем от 0% до 7% MeOH/CH2Cl2) приводила к получению 11,5 г 6-бром-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она. MS (ESI) 226,1 (M+H)+.
Пример 75: 6-Циклопропил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
В круглодонную колбу загружали 6-бром-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (16,9 г, 74,7 ммоля), циклопропилборную кислоту (9,45 г, 1,5 эквив.), трициклогексилфосфин (1,04 мг, 0,025 эквив.), и добавляли гексагидрат К.зР04 (50 г, 2 эквив.) в толуоле (210 мл) и H2O (15 мл) Pd(OAc)2 (100 мг, 0,05 эквив.). Объединенную смесь нагревали в течение 4 ч при 100°C. Реакционную смесь охлаждали, отфильтровывали и промывали толуолом. Органическую фазу разделяли и промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали с получением масла. Добавление гексана приводило к получению 6-циклопропил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она в виде желто-коричневого твердого вещества (13,6 г). MS (ESI) 187,1 (M+H)+.
Пример 76: 2-Бром-6-(6-циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)бензальдегид
В круглодонную колбу загружали 6-циклопропил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (13,4 г, 5 ммолей), 2,6-дибромбензальдегид (47,5 г, 72,0 ммоля), Pd2(dba)3·CHCl3 (660 мг, 0,72 ммоля), ксантфос (832 мг, 1,44 ммоля) и карбонат цезия (46,8 г, 144 ммоля). Сосуд продували аргоном, добавляли 140 мл диоксана, и реакционную смесь нагревали при 110°C в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до КТ, и добавляли 30 мл воды и 60 мл этилацетата, затем отфильтровывали через Solkaflok. Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором хлорида натрия, затем сушили Na2S04. После фильтрации растворитель удаляли, и полученную коричневую массу обрабатывали метиленхлоридом и диэтиловым эфиром с получением 6,5 г 2-бром-6-(6-циклопропил-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензальдегида. Вторую партию 7,5 г материала собирали добавлением дополнительного количества диэтилового эфира. MS (ESI) 370,0 (M+H)+.
Пример 77: 2-(3-Бром-2-гидроксиметилфенил)-6-циклопропил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
К раствору 2-бром-6-(6-циклопропил-1 -оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил)бензальдегида (5,0 г, 13,5 ммоля) в 60 мл толуола и 10 мл ТГФ при -10°C порциями добавляли боргидрид натрия (740 мг, 20 ммолей). Через 30 минут реакционную смесь гасили водой и разделяли диэтиловым эфиром. Органическую фазу промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили сульфатом натрия и отфильтровывали. После концентрирования при пониженном давлении, очистка хроматографией на силикагеле приводила к получению 3,7 г 2-(3-бром-2-гидроксиметилфенил)-6-циклопропил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она в виде бесцветного твердого вещества. MS (ESI) 372,0 (M+H)+.
Пример 78: 6-Циклопропил-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-6-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил}фенил)-3.4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
В колбу загружали 2-(3-бром-2-гидроксиметилфенил)-6-циклопропил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (3,70 г, 9,9 ммоля), 1-метил-6-[4-(морфолин-4-карбонил)фениламино]-4-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он (4,38 г, 9,9 ммоля), Pd2(dba)3·CHCl3 (229 мг, 0,25 ммоля), 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-три-изо-пропил-1,1'-бифенил (238 мг, 0,50 ммоля), и добавляли гексагидрат K3PO4 (7,5 г, 20 ммолей) в 40 мл смеси 4:1 диоксан: вода, и смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 4 ч, охлаждали и отфильтровывали через Solka-Floc®, промывая этилацетатом. Разделяли и промывали органическую фазу водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Сушили сульфатом натрия, отфильтровывали и концентрировали с получением темного масла. Очистка хроматографией на силикагеле (метиленхлорид/метанол) приводила к получению 3,2 г 6-циклопропил-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-6-[4-(морфолин-4-карбонил)фениламино]-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она в виде бесцветного твердого вещества. MS (ESI) 606,1 (M+H)+.
Пример 80: 1-(4-трет-Бутилфенил)-3-хлорпропан-1-он
К хлориду алюминия (29,33 г, 220 ммолей) в ДХМ (300 мл) при 0°C при перемешивании добавляли по каплям раствор трет-бутилбензола (31 мл, 200 ммолей) и 3-хлорпропионилхлорида (19 мл, 200 ммолей) в ДХМ. После окончания добавления реакционную смесь перемешивали при температуре от 0°C до КТ в течение ночи. На следующее утро ТСХ показала, что весь трет-бутилбензол исчез, и реакционную смесь охлаждали до 0°C. При перемешивании по каплям добавляли воду (около 120 мл) до прекращения выделения газа. 3атем слои разделяли, и органический слой промывали водой (3X150 мл) и затем насыщенным раствором хлорида натрия (1X150 мл). ДХМ слой сушили сульфатомом магния, отфильтровывали, концентрировали и сушили досуха с получением указанного в заголовке соединения в виде светлого желто-коричневого порошка (45,6 г).
Пример 81: 5-трет-Бутилиндан-1-он
1-(4-трет-Бутилфенил)-3-хлорпропан-1-он (45,6 г, 447 ммолей) переносили в концентрированную серную кислоту (200 мл), и полученную смесь нагревали при 100°C при перемешивании в течение 2,5 часов. TCX показала, что весь исходный материал прореагировал. После охлаждения до КТ реакционную смесь очень осторожно выливали в 1 кг раскрошенного льда. 3атем добавляли небольшое количество диэтилового эфира, и смесь перемешивали осторожно до охлаждения до КТ. Добавляли этилацетат (1200 мл), и после разделения слои разделяли. Кислотный слой затем далее экстрагировали этилацетатом (2X200 мл). Объединенные этилацетатные слои промывали насыщенным раствором бикарбоната натрия (5X300 мл). 3атем этилацетатный слой сушили сульфатом магния, отфильтровывали, концентрировали и сушили досуха с получением указанного в заголовке соединения в виде бесцветного масла (15,764 г).
Пример 82: 6-трет-Бутил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
К 5-трет-бутилиндан-1-ону (15,7 г, 83,4 ммоля) в ДХМ (150 мл) добавляли метансульфоновую кислоту (100 мл), и полученную смесь охлаждали до 0°C. 3атем осторожно порциями добавляли азид натрия (10,83 г, 2 эквив.) в течение 15 минут. Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение около 2,5 часов. Анализ ТСХ подтвердил, что весь 5-трет-бутилиндан-1-он вступил в реакцию. При перемешивании при 0°C добавляли очень осторожно водный раствор гидроксида натрия (20%) до значения pH=14. 3атем добавляли ДХМ (1000 мл) и воду (500 мл), что приводило к получению эмульсии. Слои разделяли, и водный слой затем экстрагировали дихлорметаном (2Х200 мл). 3атем объединенные ДХМ слои промывали насыщенным раствором хлорида натрия (9X200 мл), сушили сульфатом магния и отфильтровывали через слой целита. После концентрирования и сушки досуха получали 13,5 г сырого продукта в виде желто-коричневого твердого вещества. Очистка на колонке с 400 г Analogix, элюируя градиентом от 10% до 60% этилацетата в гексане, приводила к получению нужного изомера в виде белого порошка (7,22 г) ((M+H)+=204) и нежелательного изомера (1,555 г) в виде белого порошка.
Пример 83: 2-Бром-6-(6-трет-бутил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты
6-трет-Бутил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (4 г, 19,67 ммоля), 2,6-дибромбензиловый эфир уксусной кислоты (12,1 г, 2 эквив.), триосновный фосфат калия (8,35 г, 2 эквив.) и йодид меди (787 мг, 0,2 эквив.) переносили в диоксан (40 мл). 3атем добавляли N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (1,24 мл, 0,4 эквив.), и полученную смесь нагревали при кипении с обратным холодильником в течение 24 часов, после чего добавляли еще йодид меди (394 мг, 0,1 эквив.) и N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (0,62 мл, 0,2 эквив.). Перемешивали в течение 64 часов, и затем добавляли еще йодид меди (400 мг, 0,1 эквив.). Продолжали перемешивать при кипении с обратным холодильником в течение 168 часов. Охлаждали до КТ, и затем добавляли этилацетат (300 мл) и воду (100 мл), разделяли и отделяли слои. Промывали еще водой (2X100 мл), и затем промывали насыщенным раствором хлорида натрия (1X100 мл). Этилацетатный слой сушили сульфатом магния, отфильтровывали и концентрировали с получением 4,45 г сырого продукта. Очистка на колонке с 240 г Analogix приводила к получению указанного в заголовке соединения в виде белого пенистого твердого вещества (516 мг) ((M+H)+=431) и извлеченного 6-трет-бутил-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (2,188 г).
Пример 84: 2-(6-трет-Бутил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}бензиловый эфир уксусной кислоты
1-Метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он (208 мг, 1 эквив.), 2-бром-6-(6-трет-бутил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)бензиловый эфир уксусной кислоты (203 мг, 0,472 ммоля), XPHOS (14 мг, 0,06 эквив.), триосновный фосфат калия (200 мг, 2 эквив.), н-бутанол (2,8 мл) и воду (0,93 мл) загружали в круглодонную колбу объемом 50 мл, и затем газообразный азот пропускали через смесь в течение 10 минут, затем добавляли Pd(dba)2 (8 мг, 0,03 эквив.). Полученную смесь нагревали при 100°C в течение 40 минут, и анализ ТСХ показал отсутствие исходного материала. Реакционную смесь охлаждали до КТ, и затем добавляли этилацетат (150 мл) и воду (40 мл). Разделяли и отделяли слои и промывали далее водой (2X40 мл) и затем насыщенным раствором хлорида натрия (1Х40 мл). 3атем этилацетатный слой сушили сульфатом магния, отфильтровывали и концентрировали, и сушили досуха с получением указанного в заголовке соединения, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки ((M+H)+=664).
Пример 85: 6-трет-Бутил-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино1-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он
2-(6-трет-Бутил-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}бензиловый эфир уксусной кислоты (0,472 ммоля) переносили в ТГФ (7 мл) и метанол (3 мл) и воду (5 мл), и затем добавляли моногидрат гидроксида лития (40 мг, 2 эквив.). Полученную смесь перемешивали при КТ в течение ночи. На следующее утро реакция завершалась по данным ТСХ, и большую часть ТГФ и метанола удаляли при пониженном давлении при 55°C. 3атем добавляли этилацетат (75 мл) и воду (30 мл), и слои разделяли и затем отделяли. 3атем этилацетатный слой промывали водой (2X30 мл), насыщенным раствором хлорида натрия (1Х30 мл), и затем сушили сульфатом магния, отфильтровывали и концентрировали с получением 286 мг сырого продукта. Очистка препаративной тонкослойной хроматографией, элюируя на 20Х40 см 1000 мкМ планшетах 6% метанолом в дихлорметане, приводила к получению указанного в заголовке соединения (99 мг) в виде белого порошка ((M+H)+=622).
Пример 86: трет-Бутиловый эфир [2-(4-метоксибензил)-1-оксо-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]уксусной кислоты (I)
6-Бром-2-(4-метоксибензил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (1,9 г, 5,5 ммоля), Q-phos (0,0632 г, 0,11 ммоля) и Pd(dba)2 (0,0781 г, 0,11 ммоля) в 10 мл ТГФ добавляли к хлориду 2-трет-бутокси-2-оксоэтилцинка 15 мл (0,55 М) в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 16 часов. 3атем добавляли треть от начального количества Q-phos, Pd(dba)2 и энолята цинка, и смесь нагревали в течение 1 часа при 70°C до окончания реакции, Целевой продукт (2 г; выход 95,6%) выделяли ускоренной хроматографией, используя хроматографию на колонке с силикагелем с 10% - 40% этилацетата в гексане в качестве элюента.
Пример 87: 2-(4-Метоксибензил)-1-оксо-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]уксусная кислота (II}
трет-Бутиловый эфир (I) (1 г, 5,7 ммоля) растворяли в 40 мл метанола, и к этому раствору добавляли моногидрат LiOH (0,72 г, 17,3 ммоля) в 6 мл воды. Смесь перемешивали при КТ в течение 16 часов, затем концентрировали в вакууме, подкисляли 2N HCl и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток (1,8 г; выход 97%) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 88: 2-[2-(4-Метоксибензил)-1-оксо-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]ацетамид (III)
К карбоновой кислоте (II) (2,3 г,7 ммолей) в 22 мл хлороформа добавляли EEDQ (2,07 г, 8,4 ммоля) и бикарбонат аммония (1,66 г, 21 ммоль). После перемешивания смеси при КТ в течение 16 часов амид осаждали добавлением воды (20 мл). Твердое вещество отфильтровывали, промывали водой и сушили в вакууме. Остаток обрабатывали 50% этилацетата в гексане, отфильтровывали и сушили в вакууме с получением 1,4 г амида (III), выход 63%.
Пример 89: [2-(4-Метоксибензил)-1-оксо-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]ацетонитрил (IV)
Амид (III) (1,3 г, 4 ммоля) суспендировали в 5 мл ТГФ и 10 мл ДМФА. К этой смеси добавляли хлорангидрид циануровой кислоты (0,370 г, 2 ммоля), и после перемешивания при КТ в течение 0,5 часов реакционную смесь разделяли между этилацетатом и насыщенным раствором хлорида натрия; органический слой промывали 5% бикарбонатом натрия, затем насыщенным раствором хлорида натрия, и затем сушили сульфатом натрия. Очистка ускоренной хроматографией на колонке с силикагелем, используя 75% этилацетата в гексане в качестве элюента, приводила к получению 1,2 г (выход 98%) нитрила (IV).
Пример 90: 1-[2-(4-Метоксибензил)-1-оксо-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]цнклопропанкарбонитрил (V)
К суспензии гидрата натрия (0,228 г, 60%, 5,72 ммоля) в 15 мл ДМФА добавляли нитрил (IV) (1,2 г, 3,9 ммоля), и после перемешивания в течение 15 минут при КТ добавляли 1,2-дибромэтан (1,1 г, 5,8 ммоля) в 1,5 мл ДМФА. Полученную смесь перемешивали в течение 0,5 часа при КТ, и затем добавляли еще гидрат натрия (0,114 г, 2,86 ммоля), и реакционную смесь нагревали в течение около 10 минут при 30-35°C. После охлаждения смесь разделяли между этилацетатом и насыщенным раствором хлорида натрия, органический слой сушили ацетатом натрия и концентрировали в вакууме. Очистка колоночной хроматографией на силикагеле с помощью 30% - 50% этилацетата в гексане приводила к получению соединения (V) 1 г (выход 77%).
Пример 91: 1-[2-(4-Метоксибензил)-1-оксо-1,2,3 Л-тетрагидроизохинолин-6-ил]циклопропанкарбальдегид (VI)
К раствору нитрила (V) (0,722 г, 2,17 ммоля) в 3 мл ДХМ и 9 мл толуола, охлажденному до -50°C, по каплям добавляли DIBAH (4,8 мл, 4,77 ммоля). После перемешивания в течение 1 час при -50°C, реакцию гасили 5 мл HCl IN, оставляли нагреваться до КТ и перемешивали в течение 0,5 часа. 3атем смесь экстрагировали этилацетатом; органический слой промывали 0,5N HCl, 5% раствором карбоната натрия, насыщенным раствором хлорида натрия, затем сушили сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле, используя 30%-60% этилацетата в гексане, с получением 0,075 г альдегида (VI) (выход 10,3%).
Пример 92: 6-(1-Дифторметилциклопропил)-2-(4-метоксибензил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1 -он (VII)
К раствору DAST (0,042 г, 0,26 ммоля) в 1,5 мл дихлорметилена добавляли альдегид (VI) (0,075 г, 0,22 ммоля) в 0,5 мл дихлорметилена. Эту смесь перемешивали при КТ в течение 16 часов. После охлаждения в ледяной бане к реакционной смеси добавляли 5 мл воды, затем этилацетат. Органический слой промывали 5% раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором хлорида натрия, затем сушили сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали преп. ТСХ на силикагеле, получая 0,068 г соединения (VII), выход 87%.
Пример 93: 6-(1-Дифторметилциклопропил)-3Л-дигидро-2H-изохинолин-1-он (VIII)
Соединение (VII) (0,068 г, 0,19 ммоля) растворяли в 1 мл ТФУК, и нагревали при 70°C в течение 1,5 часов. К реакционной смеси, охлажденной до КТ, добавляли этилацетат, и раствор промывали насыщенным раствором хлорида натрия, затем 5% раствором бикарбоната натрия и снова насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали преп. ТСХ на силикагеле с помощью 5% метанола в дихлорметилене, получая 0,030 г соединения (VIII), выход 66%.
Пример 94: 2-Бром-6-[6-(1-дифторметилциклопропил)-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолинбензальдегид (IX)
К смеси соединения (VIII) (0,030 г, 0,12 ммоля), 2,6-дибромбензальдегида (0,064 г, 0,25 ммоля), карбоната цезия (0,054 г, 0,16 ммоля) и ксантфоса (0,002 г, 0,004 ммоля) в пробирке для микроволновой печи в атмосфере аргона добавляли Pd(dba)2 (0,0014 г, 0,0024 ммоля). Пробирку закрывали, и реакционную смесь нагревали при 100 С в течение 16 часов. После охлаждения смесь разделяли между этилацетатом и насыщенным раствором хлорида натрия, органический слой сушили сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали преп. ТСХ на силикагеле с помощью 40% этилацетата в гексане в качестве элюента, получая 0,024 г, выход 48%.
Пример 95: 2-[6-(1-Дифторметилциклопропил)-1-оксо-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил]-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино1-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}бензальдегид (X)
1-Метил-3-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он (0,025 г, 0,057 ммоля) и бензальдегид IX (0,024 г, 0,057 ммоля) растворяли в 0,5 мл н-бутанола. К этому раствору в атмосфере аргона добавляли K3PO4 (0,024 г, 0,114 ммоля), воду 0,150 мл, Xphos (0,0027 г, 0,0057 ммоля) и Pd(dba)2 (0,0016 г, 0,0028 ммоля). Смесь нагревали в течение 1 часа при 100°C, и после охлаждения разделяли между этилацетатом и насыщенным раствором хлорида натрия. Органический слой сушили сульфатом натрия, концентрировали в вакууме, и остаток очищали преп. ТСХ на силикагеле с получением 0,025 г (выход 67%) соединения X.
Пример 96: 6-(1-Дифторметилциклопропил)-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он (XI)
2-[6-(1-Дифторметилциклопропил)-1-оксо-3,4-дигидро-1H-изохинолин-2-ил]-6-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}бензальдегид (0,025 г, 0,038 ммоля) растворяли в ТГФ (2 мл). К этому раствору добавляли NaBH4 (0,006 г, 0,015 ммоля), и смесь перемешивали при КТ в течение 0,5 часов, затем гасили ледяной водой (4 мл) и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным раствором хлорида натрия, сушили сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали препаративной ТСХ с получением 6-(1-дифторметилциклопропил)-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-она (XI), 0,020 г (выход 80%).
Пример 97: Анализ на ингибирование тирозинкиназы Брутона (Btk)
Анализ основан на захвате радиоактивного 33Р фосфорилированного продукта фильтрацией. Взаимодействия Btk, биотинилированного SHz пептидного субстрата (гомология Src) и АТФ приводят к фосфорилированию пептидного субстрата. Биотинилированный продукт связывается с сефарозными гранулами стрептавидина. Все связавшиеся радиоактивно меченые субстраты определяли сцинтилляционным счетчиком.
Анализируемые планшеты представляли собой 96-луночные полипропиленовые (Greiner) и 96-луночные с 1,2 мкм гидрофильным PVDF фильтровальные планшеты (Millipore). 3аписанные концентрации являлись конечными концентрациями анализов: 10- 100 мкМ соединений в ДМСО (Burdick and Jackson), 5-10 нМ фермента Btk (His-меченый, полноцепочечный), 30 мкМ пептидного субстрата (BnoTHH-Aca-AAAEEIYGEI-NHz), 100 мкМ АТФ (Sigma), 8 мМ имидазола (Sigma, pH 7,2), 8 мМ глицерин-2-фосфата (Sigma), 200 мкМ EGTA (Roche Diagnostics), 1 мМ MnCl2 (Sigma), 20 мМ MgCl2 (Sigma), 0,1 мг/мл БСА (Sigma), 2 мМ DTT (Sigma), 1 мкСi 33P АТФ (Amersham), 20% сефарозных гранул стрептавидина (Amersham), 50 мМ EDTA (Gibco), 2 М NaCl (Gibco), 2 М NaCl вес./ 1% фосфорной кислоты (Gibco), microscint-20 (Perkin Elmer).
Определения IC50 рассчитывали из 10 точек данных для соединения, используя данные, полученные в стандартном анализаторе 96-леночных планшет. Одно контрольное соединение и семь неизвестных ингибиторов тестировали для каждой планшеты, и каждую планшету анализировали дважды. Обычно, соединения разбавляли на половину-log, начиная с 100 мкМ и заканчивая при 3 нМ. Контрольным соединением являлся стауроспорин. Фон рассчитывали в отсутствие пептидного субстрата. Общую активность определяли в присутствии пептидного субстрата. Следующую методику использовали для определения ингибирования Btk.
1) Получение образца: Тестируемые соединения разбавляли с возрастанием на половину-log буфером для анализа (имидазол, глицерин-2-фосфат, EGTA, MnCl2, MgCl2, БСА).
2) Получение гранул
а) Гранулы промывали центрифугированием при 500 g
б) Восстанавливали гранулы с помощью PBS и EDTA с получением 20% суспензии гранул
3) Предварительно инкубировали реакционную смесь без субстрата (буфер для анализа, DTT, АТФ, 33P АТФ) и смешивали с субстратом (буфер для анализа, DTT, АТФ, 33P АТФ, пептидный субстрат) при 30°C в течение 15 мин.
4) Для начала анализа предварительно инкубировали 10 мкм Btk в ферментативном буфере (имидазол, глицерин-2-фосфат, БСА) и 10 мкл тестируемых соединений в течение 10 мин при КТ.
5) Добавляли 30 мкл реакционной смеси без или с субстратом к Btk и соединениям.
6) Инкубировали 50 мкл общей смеси для анализа в течение 30 мин при 30°C.
7) Переносили 40 мкл смеси для анализа в 150 мкл суспензии гранул на фильтровальную планшету для остановки реакции.
8) Промывали фильтровальную планшету через 30 мин следующими стадиями:
а. 3×250 мкл NaCl
б. 3×250 мкл NaCl, содержащего 1% фосфорной кислоты
в. 1×250 мкл Н2О
9) Сушили планшету в течение 1 ч при 65°C или в течение ночи при КТ
10) Добавляли 50 мкл microscint-20 и определяли 33P ед. в минуту на сцинтилляционном счетчике.
Рассчитывали процентную активность из ряда данных ед. в минуту:
Процентная активность=(образец-bkg)/(общая активность-bkg)×100
Рассчитывали значение IC50 из процентной активности, используя одностороннюю дозозависимую сигмоидальную модель:
y=A+((B-A)/(1+((x/C)D))))
x = конц. соед., y = % активности, A = мин, B = max, C = IC50, D=1 (наклон)
Некоторые результаты представлены ниже в таблице II:
Пример 98: Ингибирование B-клеточной активации - анализ В-клеток FLIPR в клетках Ramos
Ингибирование B-клеточной активации соединениями настоящего изобретения показано определением эффекта тестируемых соединений на анти-IgM стимулируемые B-клеточные отклики.
Анализ с B-клетками FLIPR клеточным функциональным способом определения действия потенциальных ингибиторов повышения внутриклеточного кальция в ответ на стимулирование анти-IgM антител. Клетки Ramos (клеточная линия лимфомы Буркитта человека. ATCC-No. CRL-1596) выращивали в среде для роста (описана ниже). 3а один день до анализа клетки Ramos суспендировали в свежей среде для роста (такой же, как описано выше) и помещали в концентрации 0,5×10 /мл в колбы для тканевых культур. В день анализа клетки подсчитывали и помещали в концентрации 1×10 /мл в среду для роста с 1 мкМ FLUO-3AM (TefLabs Cat-No. 0116, полученный в безводном ДМСО и 10% плуроновой кислоты) в колбу для тканевых культур, и инкубировали при 37°C (4% CO2) в течение одного часа. Для удаления внеклеточного красителя клетки собирали центрифугированием (5 мин, 1000 об/мин), повторно суспендировали в буфере FLIPR (описан ниже) в концентрации 1×10 клеток/мл, и затем переносили в 96-луночные покрытые поли-O-лизином черные/прозрачные планшеты (BD Cat-No. 356692) в концентрации 1×10 клеток на лунку. Тестируемые соединения добавляли при различных концентрациях в диапазоне от 100 мкМ до 0,03 мкМ (7 концентраций, подробности ниже), и оставляли инкубироваться с клетками в течение 30 мин при КТ. Передачу Ca клетками Ramos стимулировали добавлением 10 мкг/мл анти-IgM (Southern Biotech, Cat-No. 2020-01), и измеряли на FLIPR (Molecular Devices, получение изображений для 96-луночных планшет, используя камеру CCD с аргонным лазером при возбуждении 480 нМ).
Среды/Буферы:
Среда для роста: RPMI 1640 среда с L-глутамином (Invitrogen, Cat-No. 61870-010), 10% сыворотки теленка (FBS, Summit Biotechnology Cat-No. FP-100-05); 1 мМ пирувата натрия (Invitrogen Cat. No. 11360-070).
Буфер FLIPR: HBSS (Invitrogen, Cat-No. 141175-079), 2 мМ CaCl2 (Sigma Cat-No. C-4901), HEPES (Invitrogen, Cat-No. 15630-080), 2,5 мМ пробенецида (Sigma, Cat-No. P-8761), 0,1% БСА (Sigma, Cat-No.A-7906), 11 мМ глюкозы (Sigma, Cat-No. G-7528).
Подробности разбавления соединения: Для достижения наибольшей конечной концентрации для анализа 100 мкМ, 24 мкл 10 мМ стокового раствора соединения (полученного в ДМСО) добавляли непосредственно к 576 мкл буфера FLIPR. Тестируемые соединения разбавляли в буфере FLIPR (используя Biomek 2000 автоматическое пипетирующее устройство), получая следующую схему разбавления: носитель, 1,00×10-4 М, 1,00×10-5, 3,16×10-6, 1,00×10-6, 3,16×10-7, 1,00×10-7, 3,16×10-8.
Внутриклеточные повышения кальция записывали, используя max - min статистику (вычитая остаточную базовую линию из пика, вызванного добавлением стимулирующего антитела) с помощью контрольного и статистического программного обеспечения Molecular Devices FLIPR. 3начения IC50 определяли, используя графики нелинейных кривых (программное обеспечение GraphPad Prism).
Пример 99: Фармацевтические композиции
Композиция для перорального введения (A)
Ингредиенты смешивали и наполняли в капсулы, содержащие около 100 мг каждая; одна капсула содержит приблизительно общую суточную дозировку.
Композиция для перорального введения (Б)
Ингредиенты объединяли и гранулировали, используя растворитель, такой как метанол. Состав затем сушили и спрессовывали в таблетки (содержащие около 20 мг активного соединения) с помощью подходящего устройства для получения таблеток.
Композиция для перорального введения (В)
Ингредиенты смешивали с получением суспензии для перорального введения.
Парентеральный состав (Г)
Активный ингредиент растворяли в части воды для инъекций. 3атем добавляли достаточное количество хлорида натрия при перемешивании до получения изотонического раствора. Раствор доводили до нужного веса оставшимся количеством воды для инъекций, отфильтровывали через фильтр с мембраной 0,2 микрон, и упаковывали в стерильных условиях.
Состав суппозиторий (Д)
Ингредиенты расплавляли вместе и смешивали в паровой бане, и выливали в формы, содержащие 2,5 г общего веса.
Местный состав (Е)
Пример 100: Вызванный коллагеном артрит у мыши (mCIA)
На день 0 мышам вводили в основание хвоста или в несколько участков на спине эмульсию коллагена типа II (чк) в адъюванте Complete Freund (CFA). После иммунизации коллагеном у животных развивался артрит через 21-35 суток. Приступы артрита синхронизировали (поддерживали) систематическим введением коллагена в адъюванте Incomplete Freund (IFA; чк) на день 21. Животных исследовали каждый день после 20 дня на любой приступ умеренного артрита (оценка 1 или 2; см. описание значений ниже), который являлся сигналом для повышения. После повышения мышей отмечали и вводили кандидат терапевтических агентов в течение предварительно определенного времени (обычно 2-3 недели) и с частотой дозы один раз в день (QD) или два раза в день (BID).
Пример 101: Вызванный коллагеном артрит у крыс (rCIA)
На день 0 крысам вводили эмульсию коллагена типа II теленка в адъюванте Incomplete Freund (IFA) чрезкожно (чк) в нескольких местах спины. Стимулятор инъекции коллагеновой эмульсии вводили примерно на 7 день (чк) в основание хвоста или альтернативно в несколько участков спины. Артрит обычно наблюдали на 12-14 сутки после первой коллагеновой инъекции. Животные могут быть оценены на развитие артрита как описано далее (оценка артрита) с 14 дня и далее. Животным вводили кандидат терапевтических агентов профилактическим способом начиная со вторичной обработки и в течение предварительно определенного времени (обычно 2-3 недели) и с частотой дозы один раз в день (QD) или два раза в день (BID).
Пример 102: Оценка артрита
В обеих моделях развитие воспаления лапок и суставов конечностей количественно определяли с помощью оценочной системы, которая включает оценку 4 лапок по критериям, описанным ниже:
Оценка: 1 = опухание и/или покраснение лапки или одной единицы.
2 = опухание двух или более суставов.
3 = сильное опухание лапки с участием более двух суставов.
4 = тяжелый артрит всех лапок и единиц.
Оценки проводили на 0 день для измерения базовой линии, и начинали снова при первых знаках или опухании вплоть до трех раз в неделю до окончания эксперимента. Артритный индекс для каждой мыши получали складыванием четырех оценок отдельных лапок, получая максимальную оценку 16 для животного.
Вышеизложенное изобретение описано более подробно с помощью иллюстраций и примеров с целью ясности и понимания. Специалисту в данной области техники очевидно, что изменения и модификации могут быть проведены в объеме прилагаемой формулы изобретения. Следовательно, следует понимать, что приведенное выше описание предназначено для иллюстрации, и не является ограничивающим. Объем изобретения, следовательно, должен определяться не со ссылкой на приведенное описание, но должен определяться со ссылкой на последующие пункты формулы изобретения, наряду с полным объемом эквивалентов, на которые такие пункты формулы изобретения распространяются.
Все приведенные в описании патенты, опубликованные заявки и научные статьи включены сюда полностью в качестве ссылки в той степени, как если бы каждый патент, опубликованная заявка и научная статья были бы индивидуально включены в качестве ссылки.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ИНГИБИТОРЫ ТИРОЗИНКИНАЗЫ БРУТОНА | 2010 |
|
RU2542585C2 |
| НОВЫЕ ФЕНИЛПИРАЗИНОНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ КИНАЗЫ | 2009 |
|
RU2507202C2 |
| ПИРИДОНОВЫЕ И АЗАПИРИДОНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ | 2011 |
|
RU2617405C2 |
| АМИНОМЕТИЛХИНОЛОНЫ, ПОЛЕЗНЫЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ JNK-ОПОСРЕДОВАННОГО РАССТРОЙСТВА | 2012 |
|
RU2629111C2 |
| СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ | 2012 |
|
RU2621148C2 |
| 1-ГИДРОКСИИМИНО-3-ФЕНИЛ-ПРОПАНЫ | 2011 |
|
RU2579114C9 |
| СОЕДИНЕНИЯ ГЕТЕРОАРИЛА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ТКБ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ | 2015 |
|
RU2742122C2 |
| ПРОИЗВОДНЫЕ КАРБОНОВЫХ КИСЛОТ (ВАРИАНТЫ), ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ И СПОСОБ СЕЛЕКТИВНОГО ИНГИБИРОВАНИЯ СВЯЗЫВАНИЯ αβ ИНТЕГРИНА У МЛЕКОПИТАЮЩЕГО | 2000 |
|
RU2263109C2 |
| НОВЫЕ ИНДОЛИЗИНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ИХ | 2013 |
|
RU2646223C2 |
| ИНГИБИТОРЫ ТИРОЗИНКИНАЗЫ БРУТОНА | 2014 |
|
RU2618529C2 |
Изобретение относится к производным 5-фенил-1H-пиридин-2-она и 6-фенил-2H-пиридазин-3-она общих формул I-III:
где: R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой гетероарил, который обозначает моноциклический радикал, содержащий 5-6 атомов в цикле и один или несколько гетероатомов N, необязательно замещенный одним или несколькими низшими алкилами; R2 представляет собой -C(=O), -C(=O)NR2; где R2 представляет собой H или низший алкил; R3 представляет собой H или R4; где R4 представляет собой низший алкил или гетероциклоалкил, который обозначает моновалентный насыщенный циклический радикал, состоящий из одного кольца, содержащий один или два кольцевых гетероатома, выбранными из N и O; X представляет собой CH или N; Y1 представляет собой Н, низший алкил или низший галогеналкил; каждый Y2 независимо представляет собой низший алкил, который необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы; n имеет значение 0, 1, 2 или 3; Y3 представляет собой H; m имеет значение 0 или 1; Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; где Y4a представляет собой Н; Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего галогеналкила, галогена; Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена; и Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами; или к его фармацевтически приемлемой соли. Кроме того, описаны фармацевтическая композиция, на основе указанных выше соединений, а также применение соединений формул I-III для лечения воспалительного или аутоиммунного состояния. Технический результат - описаны новые соединения, которые могут быть полезны для модулирования активности Btk и лечения заболеваний, связанных с избыточной активностью Btk. 3 н. и 11 з.п. ф-лы, 102 пр., 2 табл.
1. Соединение формул I, II или III:
где:
R представляет собой H, -R1, -R1-R2-R3, -R1-R3 или -R2-R3;
R1 представляет собой гетероарил, который обозначает моноциклический радикал, содержащий 5-6 атомов в цикле и один или несколько гетероатомов N, необязательно замещенный одним или несколькими низшими алкилами;
R2 представляет собой -C(=O), -C(=O)NR2'; где R2' представляет собой H или низший алкил;
R3 представляет собой H или R4; где R4 представляет собой низший алкил или гетероциклоалкил, который обозначает моновалентный насыщенный циклический радикал, состоящий из одного кольца, содержащий один или два кольцевых гетероатома, выбранными из N и О;
X представляет собой CH или N;
Y1 представляет собой H, низший алкил или низший галогеналкил;
каждый Y2 независимо представляет собой низший алкил, который необязательно замещен одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из гидроксигруппы, низшей алкоксигруппы;
n имеет значение 0, 1, 2 или 3;
Y3 представляет собой H;
m имеет значение 0 или 1;
Y4 представляет собой Y4a, Y4b, Y4c или Y4d; где Y4a представляет собой H;
Y4b представляет собой низший алкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего галогеналкила, галогена;
Y4c представляет собой низший циклоалкил, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из низшего алкила, низшего галогеналкила, галогена; и
Y4d представляет собой аминогруппу, необязательно замещенную одним или несколькими низшими алкилами; или его фармацевтически приемлемая соль.
2. Соединение по п.1 формулы I.
3. Соединение по п.1 формулы II.
4. Соединение по п.1 формулы III.
5. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, где Y1 представляет собой метил.
6. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, где X представляет собой CH.
7. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, где n обозначает 1 и m обозначает 0.
8. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, где Y3 представляет собой H.
9. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, где Y2 представляет собой метил, гидроксиметил или гидроксиэтил.
10. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, где Y4 представляет собой 
, где Y5 представляет собой галоген, низший алкил или низший галогеналкил; 
, где Y5 и Y6 независимо представляют собой H или низший алкил.
11. Соединение по любому из пп.2, 3 или 4, в котором R представляет собой -R1-R2-R3; где R1 представляет собой пиридил; R2 представляет собой -C(=O); R3 представляет собой R4; и R4 представляет собой морфолин или пиперазин.
12. Соединение по п.1, выбранное из группы, включающей:
7-трет-Бутил-3-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-1Н-хинолин-4-он,
7-Диметиламино-3-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-1H-хинолин-4-он,
6-Диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2Н-изохинолин-1-он,
6-Диметиламино-2-(3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2Н-изохинолин-1-он,
6-Диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он,
6-Диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-2H-изохинолин-1-он,
6-Диметиламино-2-(2-метил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2Н-изохинолин-1-он,
6-Диметиламино-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он,
2-(2-Гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-метиламино-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он,
6-Диметиламино-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил}-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он,
6-Диметиламино-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил}-2H-изохинолин-1-он,
1-{5-[3-(6-Диметиламино-1-оксо-1H-изохинолин-2-ил)-2-гидроксиметилфенил]-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-ил}-3-этилмочевина,
6-Циклопропил-2-{2-гидроксиметил-3-[1-метил-5-(1-метил-1H-пиразол-3-иламино-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил}-3,4-дигидро-2Н-изохинолин-1-он,
6-Циклопропил-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-1,6-дигидропиридазин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он,
2-(2-Гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-6-(1-метилциклопропил)-2H-изохинолин-1-он,
6-трет-Бутил-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он,
6-(1-Дифторметилциклопропил)-2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)-3,4-дигидро-2H-изохинолин-1-он,
или его фармацевтически приемлемая соль.
13. Фармацевтическая композиция, включающая соединение ингибитор Btk по любому из пп.1-12 в смеси по крайней мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем для лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния.
14. Применение соединения формулы I, II или III по любому из пп.1-12 при изготовлении лекарственного средства для лечения воспалительного и/или аутоиммунного состояния.
| Пресс для выдавливания из деревянных дисков заготовок для ниточных катушек | 1923 |
|
SU2007A1 |
| Пломбировальные щипцы | 1923 |
|
SU2006A1 |
| Пресс для выдавливания из деревянных дисков заготовок для ниточных катушек | 1923 |
|
SU2007A1 |
| Пресс для выдавливания из деревянных дисков заготовок для ниточных катушек | 1923 |
|
SU2007A1 |
| СОЕДИНЕНИЯ, ПРИГОДНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ АГЕНТОВ | 2000 |
|
RU2242474C2 |
