Настоящая заявка, не являющаяся предварительной, подана в соответствии с параграфом 1.53(b) главы 37 свода федеральных нормативных актов США, испрашивает приоритет в соответствии с параграфом 119(е) главы 35 Свода законов Соединенных Штатов Америки на основании предварительной заявки на патент США 61443952, поданной 17 февраля 2011, и предварительной заявки на патент США 61332353, поданной 7 мая 2010, содержание которых полностью включено в настоящее описание посредством ссылки.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение в целом относится к соединениям для лечения нарушений, опосредованных тирозинкиназой Брутона (Btk), включая воспаление, иммунологические нарушения и рак, и, в частности, к соединениям, ингибирующим активность Btk. Изобретение также относится к способам применения указанных соединений для in vitro, in situ и in vivo диагностики или лечения клеток млекопитающего или сопутствующих патологических состояний.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Протеинкиназы - самое большое семейство человеческих ферментов - включают более 500 белков. Тирозинкиназа Брутона (Btk) является представителем Тес-семейства тирозинкиназ и регулятором раннего развития В-клеток, а также активации, передачи сигнала и выживаемости зрелых В-клеток.
Передача сигнала В-клеток через В-клеточный рецептор (BCR) может приводить к широкому спектру биологических явлений, которые, в свою очередь, зависят от стадии развития В-клеток. Величина и продолжительность сигналов BCR должна точно регулироваться. Аберрантная BCR-опосредованная передача сигнала может вызывать нарушение регуляции активации В-клеток и/или образование патогенных аутоантител, приводящих к множественным аутоиммунным и/или воспалительным заболеваниям. Мутация Btk у человека приводит к сцепленной с X-хромосомой агаммаглобулинемии (XLA). Указанное заболевание связано с нарушенным созреванием В-клеток, сниженной выработкой иммуноглобулина, аномальным независимым от Т-клеток иммунным ответам и заметному снижению постоянного кальциевого сигнала при стимуляции BCR.
Доказательство роли Btk в аллергических заболевания и/или аутоиммунных заболеваниях и/или воспалительных заболеваниях было получено в моделях на Btk-дефицитных мышах. Например, в стандартных доклинических моделях системной красной волчанки (СКВ) на мышах было показано, что дефицит Btk приводит к заметному ослаблению развития заболевания. Кроме того, мыши с дефицитом Btk также могут быть устойчивы к развитию коллаген-индуцированного артрита и могут быть менее восприимчивы к стафилококк-индуцированному артриту.
Большое количество данных подтверждает роль В-клеток и гуморальной иммунной системы в патогенезе аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний. Белковые лекарственные средства (такие как Ритуксан), разработанные для истощения В-клеток, представляют собой один из подходов к лечению ряда аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний. Вследствие роли Btk в активации В-клеток ингибиторы Btk могут подходить для применения в качестве ингибиторов патогенной активности, опосредованной В-клетками (такой как выработка аутоантител).
Btk также экспрессируется в остеокластах, тучных клетках и моноцитах, и, как было показано, важна для функционирования данных клеток. Например, дефицит Btk у мышей связан с нарушенной IgE-опосредованной активацией тучных клеток (заметное снижение высвобождения ФНО-альфа и других воспалительных цитокинов), а дефицит Btk у людей связан со значительно сниженной выработкой ФНО-альфа активированными моноцитами.
Таким образом, ингибирование активности Btk может быть полезным для лечения аллергических нарушений и/или аутоиммунных и/или воспалительных заболеваний, таких как: СКВ, ревматоидный артрит, множественные васкулиты, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ITP), миастения, аллергический ринит и астма. Кроме того, сообщалось, что Btk вовлечен в апоптоз; таким образом, ингибирование активности Btk может быть полезным при раке, а также для лечения В-клеточной лимфомы и лейкемии. Кроме того, с учетом роли Btk в функции остеокластов, ингибирование активности Btk может быть полезным для лечения костных нарушений, таких как остеопороз.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение в целом относится к соединениям формулы I, обладающим модулирующей активностью по отношению к тирозинкиназе Брутона (Btk).
Соединения формулы I имеют следующие структуры:
включая их стереоизомеры, таутомеры или фармацевтически приемлемые соли. Различные заместители определены в настоящем документе ниже.
Согласно одному аспекту, изобретение представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы I и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или наполнитель. Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать второй терапевтический агент.
Согласно другому аспекту, изобретение представляет собой способ получения фармацевтической композиции, включающий комбинирование соединения формулы I с фармацевтически приемлемым носителем.
Изобретение включает способ лечения заболевания или нарушения, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения формулы I пациенту с заболеванием или нарушением, выбранным из иммунологических нарушений, рака, сердечно-сосудистого заболевания, вирусной инфекции, воспаления, нарушений метаболической/эндокринной функции, неврологических нарушений и опосредованных тирозинкиназой Брутона.
Изобретение включает набор для лечения состояний, опосредованных тирозинкиназой Брутона, содержащий: а) первую фармацевтическую композицию, содержащую соединение формулы I; и b) инструкции по применению.
Изобретение включает соединение формулы I для применения в качестве лекарственного средства и для применения для лечения заболевания или нарушения, выбранного из иммунологических нарушений, рака, сердечно-сосудистого заболевания, вирусной инфекции, воспаления, нарушений метаболической/эндокринной функции, неврологических нарушений и опосредованных тирозинкиназой Брутона.
Изобретение включает применение соединения формулы I для получения лекарственного средства для лечения иммунологических нарушений, рака, сердечно-сосудистого заболевания, вирусной инфекции, воспаления, нарушений метаболической/эндокринной функции и неврологических нарушений, и где указанное лекарственное средство опосредует тирозинкиназу Брутона.
Изобретение включает способы получения соединения формулы I.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
На Фигуре 1 показан типичный способ синтеза для получения 6-хлор,4-амино пиридазиноновых соединений, включая 6-хлор-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиразин-2-иламино)пиридазин-3(2H)-он 101f, из 3-нитропиразол-5-карбоновой кислоты.
На Фигуре 2 показан типичный способ синтеза трициклических амид-фенильных боронатных соединений, включая 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-он 101m, из 4,5,6,7-тетрагидро-1Н-индола.
На Фигуре 3 показан типичный способ синтеза трициклических амид-фенильных бромидных соединений, включая 2-бром-6-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетат 104h, из 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоновой кислоты.
На Фигуре 4 показан другой типичный способ синтеза трициклических амид-фенильных бромидных соединений, включая 6,б-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 105i, из 3-метилциклопент-2-енона.
На Фигуре 5 показан типичный способ синтеза трициклических соединений 1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2Н)-она в виде боронатных эфиров, включая 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-6]индолизин-2(1H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 118f из 5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-2-карбоновой кислоты.
На Фигуре 6 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 198d из 1,3-дибром-5-фтор-2-иодбензола.
На Фигуре 7 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 4-фтор-2-(1 -метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1 -ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 198g.
На Фигуре 8 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 5-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 210е.
На Фигуре 9 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 5-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она 212c.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ТИПИЧНЫХ ВАРИАНТОВ РЕАЛИЗАЦИИ
Далее будут подробно описаны некоторые варианты реализации изобретения, примеры которых проиллюстрированы прилагаемыми структурами и формулами. Хотя настоящее изобретение описывается по отношению к приведенным вариантам реализации, следует понимать, что они не предназначены для ограничения изобретения до указанных вариантов реализации. Напротив, настоящее изобретение включает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут находиться в рамках настоящего изобретения, определяемых формулой изобретения. Специалистам в данной области техники известны многие способы и вещества, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящей заявке, которые можно использовать при осуществлении на практике настоящего изобретения. Настоящее изобретение никоим образом не ограничено описанными способами и материалами. В случае, если один или несколько из включенных литературных источников, патентов и подобных материалов отличается от настоящей заявки или противоречит ей, включая, но не ограничиваясь этим, определения терминов, использование терминов, описанные технические приемы или т.п., преимущество имеет настоящая заявка.
ОПРЕДЕЛЕНИЯ
В настоящем документе термин "алкил" относится к насыщенному одновалентному углеводородному радикалу с линейной или разветвленной цепью, содержащей от одного до двенадцати атомов углерода (C1-C12), причем указанный алкильный радикал может быть независимо замещен одним или более заместителями, описанными ниже. Согласно другому варианту реализации, алкильный радикал содержит от одного до восьми атомов углерода (C1-C8) или от одного до шести атомов углерода (C1-С6). Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются ими, метил (Me, -СН3), этил (Et, -СН2СН3), 1-пропил (н-Pr, н-пропил, -CH2CH2CH3), 2-пропил (изо-Pr, изопропил, -СН(СН3)2), 1-бутил (н-Bu, н-бутил, -СН2СН2СН2СН3), 2-метил-1-пропил (изо-Bu, изобутил, -СН2СН(СН3)2), 2-бутил (втор-Bu, втор-бутил, -СН(СН3)СН2СН3), 2-метил-2-припил (трет-Bu, трет-бутил, -С(СН3)3), 1-пентил (н-пентил, -СН2СН2СН2СН2СН3), 2-пентил (-СН(СН3)СН2СН2СН3), 3-пентил (-СН(СН2СН3)2), 2-метил-2-бутил (-С(СН3)2СН2СН3), 3-метил-2-бутил (-СН(СН3)СН(СН3)2), 3-метил-1-бутил (-СН2СН2СН(СН3)2), 2-метил-1-бутил (-СН2СН(СН3)СН2СН3), 1-гексил (-СН2СН2СН2СН2СН2СН3), 2-гексил (-СН(СН3)СН2СН2СН2СН3), 3-гексил (-СН(СН2СН3)(СН2СН2СН3)), 2-метил-2-пентил (-С(СН3)2СН2СН2СН3), 3-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН(СН3)СН2СН3), 4-метил-2-пентил (-СН(СН3)СН2СН(СН3)2), 3-метил-3-пентил (-С(СН3)(СН2СН3)2), 2-метил-3-пентил (-СН(СН2СН3)СН(СН3)2), 2,3-диметил-2-бутил (-С(СН3)2СН(СН3)2), 3,3-диметил-2-бутил (-СН(СН3)С(СН3)3, 1-гептил, 1-октил и т.п.
В настоящем документе термин "алкилен" относится к насыщенному двухвалентному углеводородному радикалу с линейной или разветвленной цепью, содержащей от одного до двенадцати атомов углерода (C1-C12), причем указанный алкиленовый радикал может быть независимо замещен одним или более заместителями, описанными ниже. Согласно другому варианту реализации, алкиленовый радикал содержит от одного до восьми атомов углерода (C1-C8), или от одного до шести атомов углерода (C1-С6). Примеры алкиленовых групп включают, но не ограничиваются ими, метилен (-СН2-), этилен (-СН2СН2-), пропилен (-СН2СН2СН2-) и т.п.
Термины "карбоцикл", "карбоциклил", "карбоциклическое кольцо" и "циклоалкил" относятся к одновалентному неароматическому замещенному или частично незамещенному кольцу, содержащему от 3 до 12 атомов углерода (С3-С12) в случае моноциклического кольца или от 7 до 12 атомов углерода в случае бициклического кольца. Бициклические карбоциклы, содержащие от 7 до 12 атомов, могут быть получены, например, в виде бицикло [4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] систем и бициклические карбоциклы, содержащие 9 или 10 атомов в кольце, могут быть получены в виде бицикло [5,6] или [6,6] систем, или в виде мостиковых систем, таких как бицикло[2.2.1]гептан, бицикло[2.2.2]октан и бицикло[3.2.2]нонан. Примеры моноциклических карбоциклов включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил, 1-циклопент-1-енил, 1-циклопент-2-енил, 1-циклопент-3-енил, циклогексил, 1-циклогекс-1-енил, 1-циклогекс-2-енил, 1-циклогекс-3-енил, циклогексадиенил, циклогептил, циклооктил, циклононил, циклодецил, циклоундецил, циклододецил и т.п.
"Арил" означает одновалентный ароматический углеводородный радикал с 6-20 атомами углерода (С6-С20), полученный путем удаления одного атома водорода от единого атома углерода исходной системы ароматического кольца. Некоторые арильные группы обозначены в примерах структур как "Ar". Арил включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные арильные группы включают, но не ограничиваются ими, радикалы, полученные из бензола (фенил), замещенных бензолов, нафталина, антрацена, дифенила, инденила, инданила, 1,2-дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила и т.п. Арильные группы возможно независимо замещены одним или несколькими заместителями, описанными к настоящем документе.
"Арилен" означает двухвалентный ароматический углеводородный радикал, содержащий 6-20 атомов углерода (С6-С20), полученный путем удаления двух атомов водорода от двух атомов углерода исходной системы ароматического кольца. Некоторые ариленовые группы обозначены в типичных структурах как "Ar". Арилен включает бициклические радикалы, содержащие ароматическое кольцо, конденсированное с насыщенным, частично ненасыщенным или ароматическим карбоциклическим кольцом. Типичные ариленовые группы включают, но не ограничиваются ими, радикалы, полученные из бензола (фенилен), замещенных бензолов, нафталина, антрацена, дифенилена, инденилена, инданилена, 1,2-дигидронафталина, 1,2,3,4-тетрагидронафтила и т.п. Ариленовые группы возможно замещены.
В настоящем документе термины "гетероцикл," "гетероциклил" и "гетероциклическое кольцо" применяют взаимозаменяемо, и они относятся к насыщенному или частично ненасыщенному (то есть, имеющему в кольце одну или более двойную и/или тройную связь) карбоциклическому радикалу, содержащему от 3 до примерно 20 атомов в кольце, в котором по меньшей мере один атом в кольце представляет собой гетероатом, выбранный из азота, кислорода, фосфора, серы и кремния, и оставшиеся атомы в кольце представляют собой С, где один или более атом в кольце возможно независимо замещен одним или более заместителем, описанным ниже. Гетероцикл может представлять собой моноцикл, содержащий от 3 до 7 членов в кольце (от 2 до 6 атомов углерода и от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из N, О, Р, и S) или бицикл, содержащий от 7 до 10 членов в кольце (от 4 до 9 атомов углерода и от 1 до 6 гетероатомов, выбранных из N, О, Р, и S), например: бицикло [4,5], [5,5], [5,6] или [6,6] систему. Гетероциклы описаны в Paquette, Leo A.; "Principles of Modem Heterocyclic Chemistry" (W.A. Benjamin, New York, 1968), в частности, Главы 1, 3, 4, 6, 7 и 9; "The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs" (John Wiley & Sons, New York, 1950 до настоящего времени), в частности. Тома 13, 14, 16, 19 и 28; и J. Am. Chem. Soc. (I960) 82:5566. "Гетороциклил" также включает радикалы, в которых радикалы гетероциклов сконденсированы с насыщенным, частично ненасыщенным кольцом или ароматическим карбоциклическим или гетероциклическим кольцом. Примеры гетероциклических колец включают, но не ограничиваются ими, морфолин-4-ил, пиперидин-1-ил, пиперидонил, оксопиперазил, пиперазинил, пиперазин-4-ил-2-он, пиперазин-4-ил-3-он, пирролидин-1-ил, тиоморфолин-4-ил, 8-диоксотиоморфолин-4-ил, азокан-1-ил, азетидин-1-ил, октагидропиридо[1,2-а]пиразин-2-ил, [1,4]диазепан-1-ил, пирролидинил, тетрагидрофуранил, дигидрофуранил, тетрагидротиенил, тетрагидропиранил, дигидропиранил, тетрагидротиопиранил, пиперидине, морфолино, тиоморфолино, тиооксанил, пиперазинил, гомопиперазинил, азетидинил, оксетанил, тиетанил, гомопиперидинил, оксепанил, тиепанил, оксазепинил, диазепинил, тиазепинил, 2-пирролинил, 3-пирролинил, индолинил, 2Н-пиранил, 4Н-пиранил, диоксанил, 1,3-диоксоланил, пиразолинил, дитианил, дитиоланил, дигидропиранил, дигидротиенил, дигидрофуранил, пиразолидинилимидазолинил, имидазолидинил, 3-азабицикло[3.1.0]гексанил, 3-азабицикло[4.1.0]гептанил, азабицикло[2.2.2]гексанил, 3Н-индолилхинолизинил и N-пиридилмочевины. Спиро фрагменты также включены в объем указанного определения. Примерами гетероциклических групп, в которых 2 атома в кольце замещены оксо (=O) фрагментами, являются пиримидинонил и 1,1-диоксотиоморфолинил. В настоящем документе гетероциклические группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными в настоящем документе.
Термин "гетероарил" относится к одновалентному ароматическому радикалу, содержащему 5-, 6- или 7-членные кольца, и включает системы конденсированных колец (по меньшей мере, одно из которых является ароматическим) из 5-20 атомов, содержащих один или более гетероатомов, независимо выбранных их азота, кислорода и серы. Примерами гетероарильных групп являются пиридинил (включая, например, 2-гидроксипиридинил), имидазолил, имидазопиридинил, пиримидинил (включая, например, 4-гидроксипиримидинил), пиразолил, пиразинил, тетразолил, фурил, тиенил, изоксазолил, тиазолил, оксадиазолил, оксазолил, изотиазолил, пирролил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидроизохинолинил, индолил, бензимидазолил, бензофуранил, циннолинил, индазолил, индолизинил, фталазинил, пиридазинил, триазинил, изоиндолил, птеридинил, пуринил, оксадиазолил, триазолил, триадиазолил, фуразанил, бензофуразанил, бензотиофенил, бензотиазолил, бензооксазолил, хиназолинил, хиноксалинил, нафтиридинил и фуропиридинил. Гетероарильные группы возможно независимо замещены одним или более заместителями, описанными в настоящем документе.
Гетероциклические или гетероарильные группы могут быть связанными по углероду (углеродсвязанные) или азоту (азотсвязанные), где это возможно. В качестве примера, а не ограничения, гетероциклы и гетероарилы, связанные по углероду, связаны по положению 2, 3, 4, 5 или 6 для пиридина, положению 3, 4, 5 или 6 для пиридазина, положению 2, 4, 5 или 6 для пиримидина, положению 2, 3, 5 или 6 для пиразина, положению 2, 3, 4 или 5 для фурана, тетрагидрофурана, тиофурана, тиофена, пиррола или тетрагидропиррола, положению 2, 4 или 5 для оксазола, имидазола или тиазола, положению 3, 4 или 5 для изоксазола, пиразола или изотиазола, положению 2 или 3 для азиридина, положению 2, 3 или 4 для азетидина, положению 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 для хинолина или положению 1, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 для изохинолина.
В качестве примера, а не ограничения, гетероциклы и гетероарилы, связанные по азоту, связаны по положению 1 для азиридина, азетидина, пиррола, пирролидина, 2-пирролина, 3-пирролина, имидазола, имидазолидина, 2-имидазолина, 3-имидазолина, пиразола, пиразолина, 2-пиразолина, 3-пиразолина, пиперидина, пиперазина, индола, индолина, 1Н-индазола, положению 2 для изоиндола или изоиндолина, положению 4 для морфилина, и положению 9 для карбазола или β-карболина.
Термины ʺлечитьʺ и ʺлечениеʺ относятся к терапевтическому лечению, причем задачей является замедление (уменьшение) нежелательного физиологического изменения или нарушения, такого как развитие или распространение артрита или рака. Для целей настоящего изобретения, преимущественные или желательные клинические результаты включают, но не ограничиваются ими, смягчение симптомов, уменьшение степени заболевания, стабилизацию (т.е., отсутствие ухудшения) состояния заболевания, отсрочку или замедление развития заболевания, улучшение или временное облегчения состояния заболевания и ремиссию (как частичную, так и полную), как выявленные, так и не выявленные. "Лечение" может также означать продление выживания, по сравнению с ожидаемым выживанием при отсутствии лечения. Нуждающиеся в лечении включают тех, кто обладает указанным состоянием или нарушением.
Выражение "терапевтически эффективное количество" означает количество соединения согласно настоящему изобретению, которое (i) лечит конкретное заболевание, состояние или нарушение, (ii) смягчает, улучшает или устраняет один или более симптомов конкретного заболевания, состояния или нарушения, или (iii) предотвращает или отсрочивает появление одного или более симптомов конкретного заболевания, состояния или нарушения, описанных в настоящем документе. В случае рака, терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшать количество раковых клеток, уменьшать размер опухоли, ингибировать (т.е., замедлять до некоторой степени и, предпочтительно, останавливать) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; ингибировать (т.е., замедлять до некоторой степени и, предпочтительно, останавливать) метастазирование опухоли; ингибировать до некоторой степени рост опухоли; и/или облегчать до некоторой степени один или более симптомов, связанных с раком. В той степени, в которой лекарственное средство может предотвращать рост и/или убивать имеющиеся раковые клетки, оно может быть цитостатическим и/или цитотоксическим. Для терапии рака, эффективность можно измерять, например, путем оценки времени прогрессирования заболевания (ТТР) и/или определения частоты ответа (RR).
В настоящем документе "воспалительное нарушение" может относиться к любому заболеванию, нарушению или синдрому, при котором избыточный или нерегулируемый воспалительный ответ приводит к избыточным воспалительным симптомам, повреждению питающей ткани или потере функции ткани. "Воспалительное нарушение" также относится к патологическому состоянию, опосредованному притоком лейкоцитов и/или хемотаксисом нейтрофилов.
В настоящем документе "воспаление" относится к локализованному защитному ответу, вызванному повреждением или разрушением тканей, который способствует разрушению, разжижению или отделению (изолированию) как поражающего агента, так и поврежденной ткани. Воспаление, в частности, связано с притоком лейкоцитов и/или хемотаксисом нейтрофилов. Воспаление может быть результатом инфицирования патогенными организмами и вирусами, а также неинфекционных способов, таких как травма или реперфузия, последующая за инфарктом миокарда или инсульта, иммунного ответа на чужеродный антиген и аутоиммунных ответов. Соответственно, воспалительные нарушения, поддающиеся лечению соединениями формулы I, охватывают нарушения, связанные с реакциями специфической защитной системы, а также с реакциями неспецифической защитной системы.
"Специфическая защитная система" относится к компоненту иммунной системы, который реагирует на присутствие специфических антигенов. Примеры воспаления вследствие ответа специфической защитной системы включают нормальный ответ на чужеродные антигены, аутоиммунные заболевания и ответ гиперчувствительности замедленного типа, опосредованной Т-клетками. Дополнительными примерами воспалительных реакций специфической защитной системы являются хронические воспалительные заболевания, отторжение твердой трансплантированной ткани и органов, например, почки и трансплантата костного мозга, и реакция трансплантат против хозяина (РТПХ).
В настоящем документе термин "неспецифическая защитная система" относится к воспалительным нарушениям, опосредованным лейкоцитами, которые неспособны к иммунологической памяти (например, гранулоциты и макрофаги). Примеры воспаления, в результате, по меньшей мере частично, реакции неспецифической защитной системы, включают воспаление, связанное с состояниями, такими как респираторный дистресс-синдром у взрослых (острый) (ARDS) или синдромы полиорганной недостаточности; реперфузионное повреждение; острый гломерулонефрит; реактивный артрит; дерматоз с острым воспалительным компонентом; острый гнойный менингит или другие воспалительные нарушения центральной нервной системы, такие как инсульт; термическое повреждение; воспалительное заболевание кишечника; синдромы, связанные с трансфузией гранулоцитов; и цитокин-индуцированная токсичность.
В настоящем документе "аутоиммунное заболевание" относится к любой группе нарушений, при которых повреждение ткани связано с гуморальным или клеточно-опосредованным ответами на собственные части тела.
В настоящем документе "аллергическое заболевание" относится к любым симптомам, повреждениям ткани или потере функции ткани в результате аллергии. В настоящем документе "артритное заболевание" относится к любому заболеванию, характеризующемуся воспалительными патологическими изменениями суставов, свойственными различным этиологиям. В настоящем документе "дерматит" относится к любому из большого семейства заболеваний кожи, характеризующихся воспалением кожи, свойственным различным этиологиям. В настоящем документе "отторжение трансплантата" относится к любой иммунной реакции, направленной против трансплантированной ткани, такой как органы или клетки (например, костный мозг), характеризующейся потерей функции трансплантированной и окружающей тканей, болью, опухолью, лейкоцитозом и тромбоцитопенией. Терапевтические способы согласно настоящему изобретению включают способы лечения нарушений, связанных с воспалительной клеточной активацией.
"Воспалительная клеточная активация" относится к индукции посредством стимула (включая, но не ограничиваясь ими, цитокины, антигены или аутоантитела) пролиферативного клеточного ответа, выработку растворимых медиаторов (включая, но не ограничиваясь ими, цитокины, кислородсодержащие радикалы, ферменты, простаноиды или вазоактивные амины) или клеточную поверхностную экспрессию новых или повышенного числа медиаторов (включая, но не ограничиваясь ими, антигены главного комплекса гистосовместимости или молекулы клеточной адгезии) в воспалительных клетках (включая, но не ограничиваясь ими, моноциты, макрофаги, Т лимфоциты, В-лимфоциты, гранулоциты (т.е., полиморфноядерные лейкоциты, такие как нейтрофилы, бозофилы и эозинофилы), тучные клетки, дендритные клетки, клетки Лангерганса и эндотелиальные клетки). Специалистам в данной области будет понятно, что активация одного или комбинации указанных фенотипов в указанных клетках может способствовать возникновению, сохранению или обострению воспалительного нарушения.
Термин "НПВС" является сокращением от "нестероидные противовоспалительные средства" и представляет собой терапевтический агент с анальгетическим, жаропонижающим (понижающий повышенную температуру тела и облегчающий боль без потери сознания) и, в более высоких дозах, противовоспалительным действием (уменьшающий воспаление). Термин "нестероидные " применяют, чтобы отличить указанные лекарственные средства от стероидов, которые (среди широкого спектра других эффектов) обладают аналогичным эйкозаноид-угнетающим, противовоспалительным действием. В качестве анальгетиков, НПВС необычны тем, что являются ненаркотическими. НПВС включают аспирин, ибупрофен и напроксен. НПВС обычно назначают для лечения острых или хронических состояний, в которых присутствует боль и воспаление. НПВС, в целом, назначают для симптоматического облегчения следующих состояний: ревматоидный артрит, остеоартрит, воспалительные артропатии (например, анкилозирующий спондилит, псориатический артрит), синдрома Рейтера, острой подагры, дисменореи, метастатической боли в костях, головной боли и мигрени, послеоперационной боли, боли от легкой до умеренной вследствие воспаления и повреждения ткани, лихорадки, кишечной непроходимости и почечной колики. Большинство НПВС действует в качестве неселективных ингибиторов фермента циклооксигеназы, ингибирующих оба изофермента циклооксигеназу-1 (ЦОГ-1) и циклооксигеназу-2 (ЦОГ-2). Циклооксигеназа катализирует образование простагландинов и тромбоксана из арахидоновой кислоты (которая получена из клеточного фосфолипидного двойного слоя посредством фосфолипазы А2). Простагландины действуют (помимо прочего) в качестве сигнализирующих молекул в процессе воспаления. Ингибиторы ЦОГ-2 включают целекоксиб, эторикоксиб, лумиракоксиб, парекоксиб, рофекоксиб, рофекоксиб и вальдекоксиб.
Термин "рак" относится к или описывает физиологическое состояние у млекопитающего, которое обычно характеризуется неконтролируемым ростом клеток. "Опухоль" содержит одну или более раковых клеток. Примеры рака включают, но не ограничиваются ими, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкемию или лимфолейкоз. В частности, примеры таких раков включают плоскоклеточный рак (например, эпителиальный плоскоклеточный рак), рак легких, включая мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого ("НМРЛ"), аденокарциному легких и плоскоклеточный рак легкого, рак брюшины, гепатоклеточный рак, рак желудка или рак желудка, включая рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластома, рак шейки матки, рак яичников, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатома, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак прямой кишки, колоректальный рак, карцинома эндометрия или карцинома матки, карцинома слюнных желез, рак почки или почечный рак, рак предстательной железы, рак вульвы, рак щитовидной железы, карцинома печени, карцинома анального канала, рак полового члена, а также рак головы и шеи.
"Химиотерапевтический агент" представляет собой химическое соединение, подходящее для лечения рака, независимо от механизма действия. Классы химиотерапевтических агентов включают, но не ограничиваются ими: алкилирующие агенты, антиметаболиты, растительные алкалоиды с веретенным ядом, цитотоксичные/противоопухолевые антибиотики, ингибиторы топоизомеразы, антитела, фотосенсибилизаторы и ингибиторы киназы. Химиотерапевтические агенты включают соединения, применяемые в "таргетной терапии" и традиционной химиотерапии. Примеры химиотерапевтических агентов включают: эрлотиниб (Тарцева®, Genentech/OSI Pharm.), доцетаксел (Таксотер®, Sanofi-Aventis), 5-FU (фторурацил, 5-фторурацил, CAS №51-21-8), гемцитабин (Гемзар®, Lilly), PD-0325901 (CAS №391210-10-9, Pfizer), цисплатин (цис-диамин, дихлорплатина (II), CAS №15663-27-1), карбоплатин (CAS №41575-94-4), паклитаксел (Таксол®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, NJ), трастузумаб (Герцептин®, Genentech), темозоломид (4-метил-5-оксо-2,3,4,6,8-пентазабицикло[4.3.0]-нона-2,7,9-триен-9-карбоновая кислота, CAS №85622-93-1, Темодар®, Темодал®, Schering Plough), тамоксифен ((Z)-2-[4-(1,2-дифенилбут-1-енил)фенокси]-N,N-диметилэтанамин, Нолвадекс®, Истубал®, Валодекс®) и доксорубицин (Адриамицин®), Akti-1/2, HPPD (гидроксифенил-пируват диоксигеназа) и рапамицин.
Также примеры химиотерапевтических агентов включают: оксалиплатин (Элоксатин®, Sanofi), бортезомиб (Велкейд®, Millennium Pharm.), сутент (Сунитиниб®, SU11248, Pfizer), летрозол (Фемара®, Novartis), мезилат иматиниба (Гливек®, Novartis), XL-518 (ингибитор МЭК, Exelixis, WO 2007/044515), ARRY-886 (ингибитор МЭК, AZD6244, Array BioPharma, Astra Zeneca), SF-1126 (ингибитор PI3K, Semafore Pharmaceuticals), BEZ-235 (ингибитор PI3K, Novartis), XL-147 (ингибитор PI3K, Exelixis), PTK787/ZK 222584 (Novartis), фулвестрант (Фаслодекс®, AstraZeneca), лейковорин (фолиевой кислоты), рапамицин (сиролимус, Рапамун®, Wyeth), лапатиниб (Тайкерб®, GSK572016, Glaxo Smith Kline), лонафарниб (Сарасар™, SCH 66336, Schering Plough), сорафениб (Нексавар®, BAY43-9006, Bayer Labs), гефитиниб (Иресса®, AstraZeneca), иринотекан (Камптосар®, СРТ-11, Pfizer), типифарниб (ZARNESTRA™, Johnson & Johnson), Абраксан™ (без кремофора), сконструированная на основе альбумина композиция из наночастиц паклитаксела (American Pharmaceutical Partners, Шаумберг, II), вандетаниб (rINN, ZD6474, Зактима®, AstraZeneca), хлорамбуцил, AG1478, AG1571 (SU 5271; Sugen), темсиролимус (Торизел®, Wyeth), пазопаниб (GlaxoSmithKline), санфосфамид (TELCYTA®, Telik), тиотепа и циклофосфамид (Цитоксан®, Неозар®); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбохон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая альтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилоломеламин; ацетогенины (в частности, буллатацин и буллатацинон); камптотецин (включая синтетический аналог топотекан); бриостатин; каллистатин; СС-1065 (включая его синтетические аналоги адозелезин, карзелезин и безелезин); криптофицины (в частности, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги, KW-2189 и СВ1-ТМ1); элеутеробин; панкратистатин; саркодиктиин; спонгистатин; азотные иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлоретамин, мехлорэтамин оксид гидрохлорид, мелфалан, новембихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, урациловый иприт; нитрозомочевины, такие как кармустин, хлорозотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимнустин; антибиотики, такие как энедииновые антибиотики (например, калихеамицин, калихеамицин гамма II, калихеамицин омега II (Angew Chem Inti Ed Engi (1994) 33:183-186); динемицин, динемицин А; бисфосфонаты, такие как клодронат; эсперамицин, а также неокарциностатиновый хромофор и родственные хромопротеиновые энедииновые антибиотические хромофоры), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, кактиномицин, карабицин, карминомицин, карзинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, морфолино-доксорубицин, цианоморфолино-доксорубицин, 2-пирролино-доксорубицин и деоксидоксорубицин), эпирубицин, эсорубицин, идарубицин, неморубицин, марцелломицин, митомицины, такие как митомицин С, микофенольная кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, порфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пурина, такие как флюдарабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидина, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидеоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин; андрогены, такие как калустерон, дромостанолон пропионат, эпитиостанол, мепитиостан, тестолактон; антиадреналиновые средства, такие как аминоглутетимид, митотан, трилостан; вещество, пополняющее запас фолиевой кислоты, такое как фролиновая кислота; ацеглатон; альдофосфамидный гликозид; аминолевулиновая кислота; энилурацил, амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демекольцин; диазиквон; элфорнитин; эллиптиний ацетат; эпотилон; этоглюцид; нитрат галлия; гидроксимочевина; лентинан; лонидамин; мейтансиноиды, такие как мейтансин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопидамол; нитракрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; подофиллиновая кислота; 2-этилгидразид; прокарбазин; PSK® полисахаридный комплекс (JHS Natural Products, Юджин, Орегон); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновая кислота; триазихон; 2,2',2''-трихлортриэтиламин; трихотецены (в частности, Т-2 токсин, верракурин А, роридин А и ангуидин); уретан; виндезин; дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-С"), циклофосфамид; тиотепа; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин; платина; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин; винорелбин (Навелбин®); новантрон; тенипозид; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; капецитабин (Кселода®, Roche); ибандронат; СРТ-11; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота; и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше соединений.
Также включены в это определение "химиотерапевтический агент": (i) антигормональные агенты, которые действуют для регулирования или ингибирования действия гормонов на опухоли, такие как анти-эстрогены и селективные модуляторы эстрогеновых рецепторов (SERMs), включая, например, тамоксифен (включая Nolvadex®; тамоксифен цитрат), ралоксифен, дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY 117018, онапристон и Фарестон® (торемифен цитрат); (ii), ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазы, который регулирует выработку эстрогена в надпочечниках, такие как, например, 4(5)-имидазолы, аминоглютетимид, Megase® (ацетат мегестрола), Аромазин® (экземестан, Pfizer), форместани, фадрозол, RIVISOR® (ворозол), Фемара® (летрозол, Novartis), и Arimidex® (анастрозол, AstraZeneca); (iii) антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид, бикалутамид, лейпролид и гозерелин; а также троксацитабин (нуклеозидный аналог 1,3-диоксоланцитозина); (iv) ингибиторы протеинкиназы, такие как ингибиторы МЕК (WO 2007/044515); (v) ингибиторов липидкиназы; (vi) антисмысловые олигонуклеотиды, в частности, олигонуклеотиды, ингибирующие экспрессию генов пути передачи сигнала, участвующих в нежелательной пролиферации клеток, такие как, например, РКС-альфа, Raf, H-Ras, такие как облимерсен (Genasense®, Inc Genta.); (vii) рибозимы, такие как ингибиторы экспрессии VEGF (например, ANGIOZYME®) и ингибиторы экспрессии HER2; (vii) вакцины, такие как вакцины, применяемые в генотерапии, например, например вакцина Алловектин®, вакцина Лейвектин® и вакцина Ваксид®; Пролейкин® RIL-2; ингибитор топоизомеразы 1 Луртотекан®; Абареликс® rmRH; (ix) антиангиогенные агенты, такие как бевацизумаб (Авастин®, Genentech) и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из вышеуказанных соединений.
Также включены в это определение "химиотерапевтический агент" терапевтические антитела, такие как алемтузумаб (Campath), бевацизумаб (Авастин®, Genentech); цетуксимаб (Эрбитукс®, ImClone); панитумумаб (Vectibix®, Amgen), ритуксимаб (Ритуксан®, Genentech/Biogen Idec), пертузумаб (OMNITARG™, 2C4, Genentech), трастузумаб (Герцептин®, Genentech), тозитумомаб (Bexxar, Corixia), и нагруженное лекарственным средством антитело, гемтузумаб озогамицин (Mylotarg®, Wyeth).
Гуманизированные моноклональные антитела с терапевтическим потенциалом к качестве химиотерапевтических агентов в комбинации с ингибиторами Btk согласно настоящему изобретению включают: алемтузумаб, аполизумаб, аселизумаб, алтизумаб, бапинейзумаб, бевацизумаб, биватузумаб, мертанзин, кантузумаб мертанзин, цеделизумаб, цертолизумаб пегол, цидфуситузумаб, цидтузумаб, даклизумаб, экулизумаб, эфализумаб, эпратузумаб, эрлизумаб, фелвизумаб, фонтолизумаб, гемтузумаб озогамицин, инотузумаб озогамицин, ипилимумаб, лабетузумаб, линтузумаб, матузумаб, меполизумаб, мотавизумаб, мотовизумаб, натализумаб, нимотузумаб, ноловизумаб, нумавизумаб, окрелизумаб, омализумаб, паливизумаб, паскозумаб, пецфуситузумаб, пецтузумаб, пертузумаб, пекселизумаб, раливизумаб, ранибизумаб, ресливизумаб, реслизумаб, ресивизумаб, ровелизумаб, руплизумаб, сибротузумаб, сиплизумаб, сонтузумаб, такатузумаб тетраксетан, тадоцизумаб, тализумаб, тефибазумаб, тоцилизумаб, торализумаб, трастузумаб, тукотузумаб целмолейкин, туцизитузумаб, умавизумаб, уртоксазумаб и визилизумаб.
"Метаболит" представляет собой продукт, полученный посредством метаболизма специфичного соединения или его соли в теле. Метаболиты соединения можно идентифицировать с использованием обычных способов, известных в данной области техники, и их активность определяют с использованием тестов, описанных в настоящем документе. Такие продукты могут быть результатом, например, окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, деамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п., введенного соединения. Соответственно, изобретение включает метаболиты соединений изобретения, включая соединения, полученные согласно способу, включающему приведение в контакт соединения формулы I согласно настоящему изобретения с млекопитающим в течение периода времени, достаточного для получения его метаболического продукта.
Термин "инструкция по применению" применяют для обозначения инструкций, обычно включенных в коммерческие упаковки терапевтических продуктов, содержащих информацию по показаниям, способам применения, дозе, способах введения, противопоказаниям и/или предупреждениям относительно применения таких терапевтических продуктов.
Термин "хиральный" относится к молекулам, которые обладают свойством несовместимости со своим зеркальным отображением, тогда как термин "ахиральный" относится к молекулам, которые являются совместимыми со своим зеркальным отображением.
Термин "стереоизомеры" относится к соединениям, которые обладают одинаковым химическим составом, но отличаются по расположению атомов или групп в пространстве.
"Диастереомер" относится к стереоизомеру с двумя или более центрами хиральности и молекулы которого не являются зеркальными отражениями друг друга. Диастереомеры обладают различными физическими свойствами, например температурой плавления, температурой кипения, спектральными свойствами и реактивностями. Смеси диастереомеров можно разделять аналитическими способами с высоким разрешением, такими как электрофорез и хроматография.
"Энантиомеры" относятся к стереоизомерам соединений, которые являются неналагающимися зеркальными изображениями друг друга.
Стереохимические определения и соглашения, используемые в настоящем документе, в основном согласуются с S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York; и Eliel, E. и Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Соединения согласно изобретению могут содержать асимметричные или хиральные центры и, следовательно, существовать в различных стереоизомерных формах. Полагают, что все стереоизомерные формы соединений согласно изобретению, включая, но не ограничиваясь ими, диастереомеры, энантиомеры и атропоизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, являются частью настоящего изобретения. Многие органические соединения существуют в оптически активных формах, т.е. они обладают способностью вращать плоскость плоскополяризованного света. При описании оптически активного соединения для обозначения абсолютной конфигурации молекулы рядом с ее хиральным центром(ами) используют префиксы D и L или R и S. Префиксы d и 1 или (+) и (-) используют для обозначения знака вращения плоскополяризованного света соединением, где (-) или 1 означает, что соединение является левовращающим. Соединение с префиксом (+) или d является правовращающим. Для данной химической структуры эти стереоизомеры являются идентичными за исключением того, что они являются зеркальными отображениями друг друга. Конкретный стереоизомер также можно обозначить как энантиомер, а смесь таких изомеров часто называют энантиомерной смесью. Смесь энантиомеров 50:50 обозначают как рацемическую смесь или рацемат, который может образовываться, когда при химической реакции или процессе нет стереоселективности или стереоспецифичности. Термины "рацемическая смесь" и "рацемат" относятся к эквимолярной смеси двух энантиомерных молекул, лишенной оптической активности. Согласно одному аспекту, стереоизомер согласно настоящему изобретению может находиться в преобладающей форме, например, более 50% эй (энантиомерного избытка), более 80% эй, более 90% эй, более 95% эй или более 99% эй.
Термины "таутомер" или "таутомерная форма" относятся к структурным изомерам с различными энергиями, которые могут взаимопревращаться за счет низкого энергетического барьера. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) осуществляют взаимопревращения за счет миграции протона, такой как процессы кето-енольной и имин-енаминной изомеризации. Характерным примером протонного таутомера является имидазольная группа, где протон может мигрировать между двумя атомами азота в кольце. Валентные таутомеры включают взаимопревращения за счет реорганизации некоторых связывающих электронов.
Термин "диастереомер" относится к стереоизомерным молекулам, которые не являются энантиомерами. Диастереомеры включают цис-транс изомеры и конформационные изомеры, обладающие одинаковой молекулярной формулой, но имеющие различную геометрическую структуру.
В настоящем документе выражение "фармацевтически приемлемая соль" относится к фармацевтически приемлемым органическим или неорганическим солям соединений настоящего изобретения. Примеры солей включают, но не ограничиваются ими, сульфат, цитрат, ацетат, оксалат, хлорид, бромид, иодид, нитрат, бисульфат, фосфат, кислый фосфат, изоникотинат, лактат, салицилат, кислый цитрат, тартрат, олеат, таннат, пантотенат, битартрат, аскорбат, сукцинат, малеат, гентисинат, фумарат, глюконат, глюкуронат, сахарат, формиат, бензоат, глутамат, метансульфонат "мезилат", этансульфонат, бензолсульфонат, пара-толуолсульфонат и памоат (то есть 1,1'-метилен-бис(2-гидрокси-3-нафтоат)). Фармацевтически приемлемая соль может содержать включения других молекул, таких как ионы ацетата, ионы сукцината или другие противоионы. Указанный противоион может быть любым органическим или неорганическим фрагментом, который стабилизирует заряд на исходном соединении. Кроме того, фармацевтически приемлемая соль может содержать более одного заряженного атома в своей структуре. В случаях когда несколько заряженных атомов являются частью фармацевтически приемлемой соли, такая соль может иметь несколько противоионов. Следовательно, фармацевтически приемлемая соль может содержать один или более из заряженных атомов и/или один или более из противоионов.
Если соединение настоящего изобретения представляет собой основание, желательную фармацевтически приемлемую соль можно получить любым подходящим способом, известным специалистам в данной области, например обработкой свободного основания неорганической кислотой, такой как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, метансульфоновая кислота, фосфорная кислота и т.п., или органической кислотой, такой как уксусная кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, миндальная кислота, фумаровая кислота, малоновая кислота, пировиноградная кислота, щавелевая кислота, гликолевая кислота, салициловая кислота, пиранозидильная кислота, такая как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота, альфа-гидроксикислоты, такие как лимонная кислота или винная кислота, аминокислоты, такие как аспарагиновая кислота или глутаминовая кислота, ароматические кислоты, такие как бензойная кислота или коричная кислота, сульфоновые кислоты, такие как пара-толуолсульфоновая кислота или этансульфоновая кислота или т.п.
Если соединение настоящего изобретения представляет собой кислоту, желательную фармацевтически приемлемую соль можно получить любым подходящим способом, например обрабатывая свободную кислоту неорганическим или органическим основанием, таким как амин (первичный, вторичный или третичный), гидроксидом щелочного металла или гидроксидом щелочноземельного металла или т.п. Иллюстративные примеры подходящих солей включают, но ими не ограничиваются, органические соли, полученные из аминокислот, таких как глицин и аргинин, аммиака, первичных, вторичных и третичных аминов и циклических аминов, таких как пиперидин, морфолин и пиперазин, и неорганические соли, полученные с натрием, кальцием, калием, магнием, марганцем, железом, медью, цинком, алюминием и литием.
Выражение "фармацевтически приемлемые" означает, что вещество или композиция должны быть совместимы химически и/или токсикологически с другими ингредиентами, содержащимися в композиции, и/или с организмом млекопитающего, которого ими лечат.
Термин "сольват" относится к ассоциации или комплексу молекул одного или более из растворителей и соединения настоящего изобретения. Примеры растворителей, которые образуют сольваты, включают, но ими не ограничиваются, воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин.
Термины "соединение согласно изобретению" и "соединения согласно настоящему изобретению" включают соединения формулы I и их стереоизомеры, таутомеры, сольваты, метаболиты и фармацевтически приемлемые соли и пролекарства.
Любая формула или структура, приведенная в настоящем документе, включая соединения формулы I, также предназначена для обозначения гидратов, сольватов и полиморфов таких соединений, а также их смесей.
Любая формула или структура, приведенная в настоящем документе, включая соединения формулы I, также предназначена для обозначения непомеченных форм, а также изотопно меченых форм, указанных соединений. Изотопно меченые соединения имеют структуры, изображенные формулами, приведенными в настоящем документе, за исключением того, что один или более атомов заменен атомов, имеющим выбранную атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые можно включать в соединения согласно изобретению, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как, но не ограничиваясь ими, 2Н (дейтерий, D), 3Н (тритий), 11С, 13С, 14С, 15N, 18F, 31Р, 32Р, 35S, 36Cl и 125I. Различные изотопно меченые соединения согласно настоящему изобретению, например, те, в которые включены радиоактивные изотопы, такие как 3Н, 13С и 14С. Такие изотопно меченые соединения могут быть полезны для изучения метаболизма, изучения кинетики реакции, техник регистрации и отображения, таких как позитронно-эмиссионная томография (ПЭТ) или однофотонная эмиссионная компьютерная томография (SPECT), включая анализы распределения в тканях лекарственных средств или субстратов, или в радиоактивном лечении пациентов. Меченые или замещенные дейтерием терапевтические соединения согласно изобретению могут улучшать свойства DMPK (метаболизм лекарственных средств и фармакокинетику), относящиеся к распределению, метаболизму и выделению (ADME). Замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, может обеспечить некоторые терапевтические преимущества вследствие улучшенной метаболической стабильности, например, в виде увеличенного периода полувыведения in vivo или уменьшенных требований к дозе. Соединение меченое 18F может быть полезным для исследований ПЭТ или SPECT. Изотопно меченые соединения согласно настоящему изобретению и их пролекарства, в целом, можно получать путем осуществления методик, раскрытых на схемах или в примерах и примерах получения, описанных ниже, путем замещения непомеченного изотопом реагента на доступный меченый изотопом реагент. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, в частности, дейтерием (т.е., 2Н или D) может обеспечить некоторые терапевтические преимущества вследствие улучшенной метаболической стабильности, например, в виде увеличенного периода полувыведения in vivo, уменьшенных требований к дозе или улучшенного терапевтического индекса. Следует понимать, что дейтерий в указанном контексте рассматривают в качестве заместителя в соединении формулы I. Концентрацию такого тяжелого изотопа, в частности, дейтерия, можно определять через показатель изотопного обогащения. В соединениях согласно настоящему изобретению любой атом, специально непомеченный как конкретный изотоп, означает любой стабильный изотоп указанного атома. Если не указано иное, когда позиция обозначена, в частности, как "Н" или "водород", следует понимать, что указанная позиция содержит водород в его распространенном в природе изотопном составе. Соответственно, в соединениях согласно настоящему изобретению, любой атом, специфично обозначенный как дейтерий (D) означает дейтерий.
ПИРИДОНОВЫЕ И АЗАПИРИДОНОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ
В настоящем изобретении предложены пиридоновые и азапиридоновые соединения формулы I, включая формулы 1a-bf, и их фармацевтически приемлемые соли, которые потенциально подходят для лечения заболеваний, состояний и/или нарушений, модулируемых киназой Btk,
,
включая их стереоизомеры, таутомеры или фармацевтически приемлемые соли, где:
R1 представляет собой Н, D, F, Cl, CN, -NH2, -NHCH3, -N(СН3)2, -ОН, -ОСН3, -ОСН2СН3, -ОСН2СН2ОН, гетероарил, выбранный из имидазолила и пиразолила, гетероциклил, выбранный из оксетанила и азетидинила, и C1-С3 алкил;
R2, R3 и R4 независимо выбраны из Н, D, F, Cl, -NH2, -NHCH3, -N(СН3)2, -ОН, -ОСН3, -ОСН2СН3, -OCH2CH2OH и C1-С3 алкила;
R5 представляет собой возможно замещенный С6-С20 арил, С3-С12 карбоциклил, С2-С20 гетероциклил, C1-C20 гетероарил, -(С6-С20 арил)-(С2-С20 гетероциклил), -(C1-C20 гетероарил)-(С2-С20 гетероциклил), -(C1-C20 гетероарил)-(С1-С6 алкил) или -(C1-C20 гетероарил)-С(=O)-(С2-С20 гетероциклил);
R6 представляет собой Н, F, -NH2, -ОН или возможно замещенный C1-С3 алкил;
Х представляет собой S, S(=O), S(=O)2, N, NR6, О или CR7;
R7 независимо выбран из Н, D, F, Cl, -СН3, -СН2СН3, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -NH2, -ОН и -ОСН3;
Y1 и Y2 независимо выбраны из CR6 и N;
Z1, Z2, Z3 и Z4 независимо выбраны из С, CR7 и N;
Z5 выбран из -C(R3)2-, -С(=O)-, -N(R6)-, -C(R3)2C(R3)2-, -C(R3)2C(=O)-, -CR3=CR3-, -CR3=N-, -N(R6)C(R3)2-, -N(R6)C(R3)2C(R3)2- и -OC(R3)2C(R3)2-;
один из Z1 и Z2 или Х и Z1, где Х не представляет собой S, S(=O) или S(=O)2, образует пяти, шести или семичленное арильное, карбоциклильное, гетероциклильное или гетероарильное кольцо;
где алкил, карбоциклил, гетероциклил, арил и гетероарил возможно замещены одной или более группой, независимо выбранной из D, F, Cl, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН(СН3)2, -CH2OH, -CH2CH2OH, -С(СН3)2OH, -СН(ОН)СН(СН3)2, С(СН3)2CH2OH, -CH2CH2SO2CH3, -CH2OP(O)(ОН)2, -CN, -CH2F, -CHF2, -CF3, -СО2Н, -СОСН3, -CO2CH3, -CO2C(СН3)3, -СОСН(ОН)СН3, -CONH2, -CONHCH3, -CON(CH3)2, -С(СН3)2CONH2, -NO2, -NH2, -NHCH3, -N(CH3)2, -NHCOCH3, -N(СН3)СОСН3, -NHS(O)2CH3, -N(СН3)С(СН3)2CONH2, -N(СН3)CH2CH2S(O)2СН3, =О, -ОН, -ОСН3, -OCH2CH2N(СН3)2, -ОР(O)(ОН)2, -S(O)2N(CH3)2, -SCH3, -CH2OCH3, -S(O)2СН3, циклопропила, азетидинила, 1-метилазетидин-3-ил)окси, N-метил-N-оксетан-3-иламино, азетидин-1-илметила, оксетанила и морфолино.
Согласно одному аспекту, соединения формулы I представляют собой 3-амино-5-фенилпиридин-2(1Н)-он Ia, где Y1 и Y2 представляют собой CR6, 4-амино-6-фенилпиридазин-3(2Н)-он Ib, где Y1 представляет собой N и Y2 представляет собой CR6, и 3-амино-5-фенилпиразин-2(1Н)-оны 1 с, где Y1 представляет собой CR6 и Y2 представляет собой N.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают соединения формул Ia-Ibf:
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда группа:
образует структуры:
,
где волнистая линия указывает на место присоединения.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда группа центрального фенильного кольца замещена или не замещена, например:
(i) каждый из R1, R2, R3, и R4 представляет собой Н; (ii) или один или более из R1, R2, R3 и R4 представляет собой F; (iii) R1 выбран из F, -СН3, -CH2F, -CHF2 и -CF3; (iv) R1 представляет собой -CH2OH; (v) R3 представляет собой F; и (vi) R1 представляет собой -CH2OH, каждый из R2 и R4 представляет собой Н, и R3 представляет собой F.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда R5 представляет собой возможно замещенный С6-С20 арил, выбранный из фенила и нафтила.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда R5 представляет собой возможно замещенный C3-C12 карбоциклил, выбранный из циклопропила, циклобутила, циклопентила, циклогексила и циклогептила.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда R5 представляет собой возможно замещенный С2-С20 гетероциклил, выбранный из оксетанила, азетидинила, пирролидинила, тетрагидрофурила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила и тетрагидропиранила.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда R5 представляет собой возможно замещенный C1-C20 гетероарил, выбранный из пиразолила, пиридинила, пиримидинила, 5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-ила, 5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-ила, 6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с] [1,4]оксазин-2-ила и 1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ила).
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда R5 выбран из структур:
где волнистая линия указывает на место присоединения,
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда R6 представляет собой Н.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда Y1 представляет собой CR6 и Y2 представляет собой N.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда Y1 представляет собой N и Y2 представляет собой CR6.
Примеры вариантов реализации соединений формулы I включают варианты, когда каждый из Y1 и Y2 представляет собой CR6.
Каждая сплошная/пунктирная линия, 
, в пятичленном кольце, образованном X, Z1, Z2, Z3 и Z4 в структурах соединений формулы I обозначает одинарную связь или двойную связь, при условии, что любые две двойные связи в кольце не примыкают друг к другу.
Соединения формулы I согласно изобретению могут содержать центры асимметрии или хиральные центры, и, следовательно, существовать в различных стереоизомерных формах. Полагают, что все стереоизомерные формы соединений согласно изобретению, включая, но не ограничиваясь ими, диастереомеры, энантиомеры и атропоизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, являются частью настоящего изобретения.
Кроме того, настоящее изобретение охватывает все диастереомеры, включая цис-транс (геометрические) изомеры и конформационные изомеры. Например, если соединение формулы I содержит двойную связь или конденсированное кольцо, цис- и транс-формы, а также их смеси, включены в объем настоящего изобретения.
В структурах, приведенных в настоящем документе, когда стереохимия любого конкретного хирального атома не уточнена, тогда все стереоизомеры следует считать и включать в качестве соединений согласно изобретению. Когда стереохимия уточнена с помощью сплошного клина или пунктирной линии, определяющей конкретную конфигурацию, тогда указанный стереоизомер уточнен и определен.
Соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в несольватированных, а также в сольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п., и полагают, что настоящее изобретение охватывает как сольватированные, так и несольватированные формы.
Соединения согласно настоящему изобретению могут также существовать в различных таутомерных формах, и все такие формы включены в объем настоящего изобретения. Термины "таутомер" или "таутомерная форма" относятся к структурным изомерам с различными энергиями, которые могут взаимопревращаться за счет низкого энергетического барьера. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) осуществляют взаимопревращения за счет миграции протона, такой как процессы кето-енольной и имин-енаминной изомеризации. Валентные таутомеры включают взаимопревращения за счет реорганизации некоторых связывающих электронов.
БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА
Относительную эффективность соединений формулы I в качестве ингибиторов ферментативной активности (или другой биологической активности) можно установить путем определения концентраций, при которых каждое соединение ингибирует активность до заданного значения и, затем, сравнения результатов. Обычно предпочтительным определением является концентрация, которая ингибирует 50% активности в биохимическом исследовании, т.е., 50% концентрация ингибирования или "IC50". Определение значений IC50 можно осуществлять с применением традиционных методов, известных в уровне техники. В целом, IC50 можно определять путем измерения активности данного фермента в присутствии диапазона концентраций изучаемого ингибитора. Затем экспериментально полученные значения активности фермента соотносят с концентрациями применяемого ингибитора. В качестве значения IC50 берут концентрацию ингибитора, которая демонстрирует 50% активность фермента (по сравнению с активностью в отсутствие любого ингибитора). Аналогично, можно определять другие концентрации ингибирования через подходящие определения активности. Например, в некоторых случаях может быть желательным устанавливать 90% концентрацию ингибирования, т.е., IC90, и т.д.
Соединения формулы I исследовали с помощью стандартного биохимического анализа киназы Btk (Пример 901).
Общей методикой для стандартного клеточного анализа киназы Btk, который можно использовать для тестирования соединений формулы I является Анализ Btk на клетках Ramos (Пример 902).
Стандартный клеточный анализ пролиферации В-клеток можно использовать для тестирования соединений формулы I с В-клетками, очищенными из селезенок мышей Balb/c (Пример 903).
Стандартный клеточный анализ пролиферации Т-клеток можно использовать для тестирования соединений формулы I с В-клетками, очищенными из селезенок мышей Balb/c (Пример 904).
Анализ ингибирования CD86 можно проводить на соединениях формулы I на определение ингибирования активности В-клеток с применением суммарных спленоцитов мышей, очищенных из селезенок мышей Balb/c в возрасте 8-16 недель (Пример 905).
Анализ выживаемости клеток B-ALL можно проводить на соединениях формулы I для измерения числа жизнеспособных B-ALL клеток в культуре (Пример 906).
Анализ цельной крови на CD69 можно проводить на соединениях формулы I для определения способности соединений ингибировать CD69 В-лимфоцитами в человеческой цельной крови, активированной путем перекрестного сшивания поверхностного IgM с козьим F(ab')2 античеловеческим IgM (Пример 907).
Типичные соединения формулы I в Таблицах 1, 2 и 3 были получены, охарактеризованы и исследованы на ингибирование Btk в соответствии со способами согласно настоящему изобретению, и имеют следующие структуры и соответствующие названия (ChemDraw Ultra, Version 9.0.1 и ChemBioDraw, Version 11.0, CambridgeSoft Corp., Cambridge MA). Когда более чем одно название связано с соединением формулы I или промежуточным веществом, соединение должна определять химическая структура.
ВВЕДЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I
Соединения по настоящему изобретению можно вводить любым путем, подходящим для состояния, подлежащего лечению. Подходящие пути включают пероральный, парентеральный (включая подкожный, внутримышечный, внутривенный, интраартериальный, интрадермальный, интратекальный и эпидуральный), чрескожный, ректальный, назальный, местный (включая буккальный и сублингвальный), вагинальный, интраперитонеальный, интрапульмонарный и интраназальный. Для местного иммуносупрессивного лечения, соединения можно вводить внутрь очага поражения, включая перфузионное введение или какой-либо иной способ контактирования трансплантата с ингибитором перед трансплантацией. Следует понимать, что предпочтительный путь можно варьировать в зависимости, например, от состояния реципиента. Когда соединение вводят перорально, оно может быть сформулировано в виде пилюли, капсулы, таблетки и т.д. с фармацевтически приемлемым носителем или наполнителем. Когда соединение вводят парентерально, оно может быть сформулировано с фармацевтически приемлемым парентеральным носителем и в стандартную лекарственную форму для инъекций, как подробно описано ниже.
Доза для лечения человека, который является пациентом, может составлять от примерно 10 мг до примерно 1000 мг соединения формулы I. Типичная доза может составлять от примерно 100 мг до примерно 300 мг соединения. Дозу можно вводить один раз в день (QID), два раза в день (BID) или чаще, в зависимости от фармакокинетических и фармакодинамических свойств, включая абсорбцию, дистрибуцию, метаболизм и экскрецию конкретного соединения. Кроме того, факторы токсичности могут влиять на дозу и режим введения. При пероральном введении, пилюлю, капсулу или таблетку можно принимать ежедневно или реже в течение определенного периода времени. Режим можно повторять в течение нескольких циклов терапии.
СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I
Соединения формулы I согласно настоящему изобретению подходят для лечения человеческих или животных пациентов, страдающих от заболевания или нарушения, вызванного аномальным клеточным ростом, функцией или поведением, связанным с киназой Btk, такого как иммунологическое нарушение, сердечно-сосудистое заболевание, вирусная инфекция, воспаление, нарушение метаболической/эндокринной функции или неврологическое нарушение, которое можно лечить в соответствии со способом, включающим введение пациенту соединения согласно настоящему изобретению, описанному выше. Человеческого или животного пациента, страдающего от рака, можно также лечить в соответствии со способом, включающим введение пациенту соединения согласно настоящему изобретению, описанному выше. Таким образом, может быть улучшено или облегчено состояние пациента.
Соединения формулы I могут подходить для in vitro, in situ и in vivo диагностики и лечения клеток, организмов млекопитающих, связанных с ними патологических состояний, таких как системное и локальное воспаление, иммуновоспалительные заболевания, например, ревматоидный артрит, иммуносупрессия, отторжение трансплантата органа, аллергии, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, дерматит, астма, системная красная волчанка, синдром Шегрена, рассеянный склероз, склеродермия/системный склероз, идиопатическая тромбоцитопеническая пурпура (ITP), васкулит, ассоциированный с антинейтрофильными цитоплазматическими антителами (ANCA), хроническая обструктивная болезнь легких (COPD), псориаз и для общего защитного действия на суставы.
Способы согласно изобретению также включают лечение таких заболеваний как артритные заболевания, такие как ревматоидный артрит, односуставной артрит, остеоартрит, подагрический артрит, спондилоартрит, болезнь Бехчета, сепсис, септический шок, эндотоксический шок, грамотрицательный сепсис, грамположительный сепсис и синдром токсического шока; синдром полиорганной недостаточности на фоне септицемии, травма или кровоизлияние; офтальмологические нарушения, такие как аллергический конъюнктивит, весенний конъюнктивит, увеит и офтальмопатия, связанная с щитовидной железой, эозинофильная гранулема, расстройства легких или органов дыхания, такие как астма, хронический бронхит, аллергический ринит, ОРДС, хроническое легочное воспалительное заболевание (например, хроническая обструктивная болезнь легких), силикоз, легочный саркоидоз, плеврит, альвеолит, васкулит, эмфизема, пневмония, бронхоэктазы и легочное отравление кислородом; реперфузия миокарда, головного мозга или конечностей; фиброз, такой как кистозный фиброз, келоидные образования или образования рубцовой ткани; атеросклероз; аутоиммунные заболевания, такие как системная красная волчанка (СКВ), аутоиммунный тиреоидит, рассеянный склероз, некоторые формы сахарного диабета, и синдром Рейно, и расстройства отторжения трансплантата, такие как РТПХ и отторжение трансплантата, хронический гломерулонефрит; воспалительные заболевания кишечника, такие как хронические воспалительные заболевания кишечника (CIBD), болезнь Крона, язвенный колит и некротический энтероколит; воспалительные дерматозы, такие как контактный дерматит, атопический дерматит, псориаз или крапивница, лихорадка и миалгия из-за инфекции, воспалительные нарушения центральной или периферической нервной системы, такие как менингит, энцефалит и повреждение мозга или спинного мозга из-за незначительных травм, синдром Шегрена, заболевания, сопровождающиеся диапедезом лейкоцитов, алкогольный гепатит, бактериальная пневмония; заболевания, опосредованные комплексом антиген-антитело, гиповолемический шок; сахарный диабет I типа, острая гиперчувствительность и гиперчувствительность замедленного типа, болезнь вследствие дискразии лейкоцитов и метастазирования, термическая травма, синдромы, связанные с переливанием гранулоцитов, а также цитокин-индуцированная токсичность.
Способы согласно изобретению можно применять для лечения субъектов, которые имеют или могут иметь реперфузионное повреждение, т.е., повреждение в результате ситуации, когда ткань или орган испытывает период ишемии с последующей реперфузией. Термин "ишемия" относится локализованной анемии ткани вследствие обструкции притока артериальной крови. Временная ишемия с последующей реперфузией приводит в активации нейтрофилов и переносу через эндотелий кровеносных сосудов в пораженную область. Накопление активированных нейтрофилов, в свою очередь, приводит к образованию метаболитов с активным кислородом, которые повреждают компоненты задействованных тканей и органов. Указанное явление "реперфузионное повреждение" обычно связывают с состояниями, такими как сосудистый инсульт (включая общую и фокальную ишемию), геморрагический шок, ишемия миокарда или инфаркт, пересадка органа и спазм сосудов головного мозга. Например, реперфузионное повреждение возникает по окончании процедур кардиошунтирования или в течение остановки сердца, когда сердце без получения крови начинает реперфузировать. Полагают, что ингибирование активности Btk может привести к уменьшенному количеству реперфузионных повреждений в указанных ситуациях.
ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОСТАВЫ
Для применения соединения согласно настоящему изобретению для терапевтического лечения млекопитающих, включая человека, обычно его формулируют, в соответствии со стандартной фармацевтической практикой, в фармацевтическую композицию. В соответствии с этим аспектом настоящего изобретения, предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение согласно настоящему изобретению в ассоциации с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем.
Типичный состав получают путем смешивания соединения согласно настоящему изобретению и носителя, разбавителя или наполнителя. Подходящие носители, разбавители и наполнители хорошо известны специалистам в данной области и включают такие материалы, как углеводы, воски, растворимые и/или набухающие в воде полимеры, гидрофильные или гидрофобные материалы, желатин, масла, растворители, воду и подобные вещества. Конкретный используемый носитель, разбавитель или наполнитель зависит от способов применения соединения согласно настоящему изобретению и его назначения. Растворители, в целом, выбирают на основании тех растворителей, которые специалистам в данной области известны как безопасные (GRAS) для введения млекопитающему. В целом, безопасные растворители представляют собой нетоксичные водные растворители, такие как вода и другие нетоксичные растворители, которые являются растворимыми в воде или смешиваемыми с водой. Подходящие водные растворители включают воду, этанол, пропиленгликоль, полиэтиленгликоли (например, PEG 400, PEG 300) и т.д. и их смеси. Композиции также могут включать один или несколько буферов, стабилизаторов, поверхностно-активных веществ, смачивающих агентов, смазывающих агентов, эмульгаторов, суспендирующих веществ, консервантов, антиоксидантов, веществ, делающих препарат непрозрачным, скользящих агентов, вспомогательных добавок для лучшей обрабатываемости, красителей, подсластителей, ароматизаторов, отдушек и других известных добавок для получения привлекательной на вид формы лекарственного препарата (т.е. соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтической композиции) или облегчения изготовления фармацевтического продукта (т.е. лекарственного средства).
Составы можно получить с использованием традиционных процедур растворения и смешивания. Например, основное количество лекарственного вещества (т.е. соединения согласно настоящему изобретению или стабилизированной формы соединения (например, комплекса с циклодекстриновым производным или другим известным комплексобразующим агентом) растворяют в подходящем растворителе в присутствии одного или нескольких наполнителей, описанных выше. Соединение согласно настоящему изобретению типично формулируют в фармацевтические дозированные формы для обеспечения легко контролируемой дозы лекарственного средства и для обеспечения возможности для пациента следовать назначенному режиму.
Фармацевтическая композиция (или состав) для применения может быть упакована с использованием различных способов упаковки, в зависимости от применяемого способа введения лекарственного средства. В целом, устройство для распределения включает контейнер, содержащий помещенный в него фармацевтический состав в подходящей форме. Подходящие контейнеры хорошо известны специалистам в данной области и включают такие материалы, как бутыли (пластиковые и стеклянные), саше, ампулы, пластиковые пакеты, металлические цилиндры и подобные. Контейнер также может включать защитные уплотнительные перегородки, препятствующие неосторожному доступу к содержимому упаковки. Кроме того, контейнер имеет этикетку на внешней поверхности, указывающую содержимое контейнера. Этикетка также может включать соответствующие предупреждения.
Фармацевтические составы соединений согласно настоящему изобретению могут быть получены для различных путей и типов введения. Например, соединение формулы I, имеющее желательную степень чистоты, необязательно, может быть смешано с фармацевтически приемлемыми разбавителями, носителями, наполнителями или стабилизаторами (Remington's Pharmaceutical Sciences (1980) 16th edition, Osol, A. Ed.), в форме лиофилизированной композиции, тонкодисперсного порошка или водного раствора. Состав можно получить путем смешивания при температуре окружающей среды, при подходящем рН и при желательной степени чистоты, с физиологически приемлемыми носителями, т.е. носителями, которые нетоксичны для реципиентов при применяемых дозах и концентрациях. рН состава в основном зависит от конкретного применения и концентрации соединения, но может составлять от примерно 3 до примерно 8. Состав в ацетатном буфере при рН 5 представляет собой подходящий вариант реализации.
Соединение обычно можно хранить в виде твердой композиции, лиофилизированного состава или в виде водного раствора.
Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно формулировать, дозировать и вводить способами, т.е. в количествах, концентрациях, с использованием схем введения, курса введения, носителей и путей введения, которые соответствуют нормальной медицинской практике. Факторы, которые следует учитывать в связи с этим, включают конкретное нарушение, подлежащее лечению, конкретного млекопитающего, подлежащего лечению, клиническое состояние конкретного пациента, причину нарушения, место доставки средства, способ введения, схему введения и другие факторы, известные практикующим врачам. "Терапевтически эффективное количество" соединения, которое вводят, выбирают, исходя из таких соображений, и оно представляет собой минимальное количество, необходимое для облегчения или лечения гиперпролиферативные нарушения.
В качестве общего предложения, начальное фармацевтически эффективное количество ингибитора, вводимого парентерально, в расчете на дозу должно составлять примерно 0,01-100 мг/кг, а именно, примерно 0,1-20 мг/кг массы тела пациента в день, при этом типичный начальный диапазон применяемого соединения составляет 0,3-15 мг/кг/день.
Приемлемые разбавители, носители, наполнители и стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов при используемых дозах и концентрациях, и включают буферы, такие как фосфатный, цитратный и другие органические кислоты; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (такие как октадецилдиметилбензиламмонийхлорид; гексаметонийхлорид; бензалконийхлорид, бензетонийхлорид; феноловый, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехин; резорцин; циклогексанол; 3-пентанол; и м-крезол); низкомолекулярные (меньше чем около 10 остатков) полипептиды; белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатообразующие вещества, такие как EDTA; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, Zn-белковые комплексы); и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN, PLURONICS или полиэтиленгликоль (PEG). Активные фармацевтические ингредиенты также могут быть заключены в микрокапсулы, полученные, например, методами коацервации или межфазной полимеризации, например, гидроксиметилцеллюлозные или желатиновые микрокапсулы и микрокапсулы из поли-(метилметацилат)а, соответственно, в коллоидных системах доставки лекарственного средства (например, липосомах, альбуминовых микросферах, микроэмульсиях, наночастицах и нанокапсулах) или в макроэмульсиях. Такие методы раскрыты в Remington's Pharmaceutical Sciences 16th edition, Osol, A. Ed. (1980).
Могут быть получены препараты замедленного высвобождения соединений формулы I. Подходящие примеры препаратов замедленного высвобождения включают полупроницаемые матрицы из твердых гидрофобных полимеров, содержащие соединение формулы I, при этом такие матрицы представлены в виде формованных изделий, например, пленок или микрокапсул. Примеры матриц замедленного высвобождения включают полиэфиры, гидрогели (например, поли(2-гидроксиэтил-метакрилат) или поливиниловый спирт)), полилактиды (Патент США 3773919), сополимеры L-глутаминовой кислоты и гамма-этил-L-глутамата, неразлагаемый этилен-винилацетат, разлагаемые сополимеры молочной кислоты - гликолевой кислоты, такие как LUPRON DEPOT (микросферы для инъекций, состоящие из сополимера молочной кислоты - гликолевой кислоты и леупролидацетата) и поли-D-(-)-3-гидроксимасляная кислота.
Составы включают составы, подходящие для способов введения, подробно описанных в настоящей заявке. Составы могут быть удобным образом представлены в единичной дозированной форме, и их можно получить любым способом, хорошо известным в фармацевтике. Способы получения и композиции, в целом, можно найти в Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA). Такие способы включают стадию приведения активного ингредиента в ассоциацию с носителем, который представляет собой один или несколько необходимых ингредиентов. В целом, составы получают путем приведения активного ингредиента в однородную и тесную ассоциацию с жидкими носителями или тонкодисперсными твердыми носителями, или и теми и другими, и затем, если это необходимо, формования продукта.
Составы соединения формулы I, подходящие для перорального введения, можно получить в виде дискретных единиц, таких как пилюли, капсулы, саше или таблетки, каждая из которых содержит предварительно определенное количество соединения формулы I. Прессованные таблетки можно получить путем прессования в подходящей машине активного ингредиента в свободно текучей форме, такой как порошок или гранулы, необязательно смешанного со связующим, смазывающим веществом, инертным разбавителем, консервантом, поверхностно-активным или диспергирующим веществом. Формованные таблетки можно получить путем формования в подходящей машине смеси порошкообразного активного ингредиента, смоченного инертным жидким разбавителем. Таблетки, необязательно, могут иметь покрытие или насечку и, необязательно, могут быть сформулированы таким образом, чтобы обеспечивать замедленное или контролируемое высвобождение из них активного ингредиента. Таблетки, драже, лепешки, водные или масляные суспензии, диспергируемые порошки или гранулы, эмульсии, твердые или мягкие капсулы, например, желатиновые капсулы, сиропы или эликсиры можно получить для перорального применения. Составы соединений формулы I, предназначенные для перорального применения, можно получить в соответствии с любым способом, известным из уровня техники для получения фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать одно или несколько веществ, включающих подсластители, отдушки, красители и консерванты, с получением имеющего приятный вкус препарата. Приемлемыми являются таблетки, содержащие активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми наполнителями, которые являются подходящими для получения таблеток. Такие наполнители могут представлять собой, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция или натрия, лактоза, фосфат кальция или натрия; гранулирующие вещества и дезинтегранты, такие как кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие вещества, такие как крахмал, желатин или аравийская камедь; и смазывающие вещества, такие как стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть без покрытия или могут иметь покрытие, нанесенное известными способами, включая микроинкапсулирование для замедления разложения и адсорбции в желудочно-кишечном тракте, с получением, таким образом, замедленного действия в течение продолжительного периода времени. Например, можно использовать вещества, замедляющие высвобождение, такие как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, отдельно или вместе с воском.
Для лечения глаз или других внешних тканей, например, полости рта и кожи, составы, предпочтительно, наносят в виде мази или крема для местного введения, содержащих активный ингредиент(ы) в количестве, например, от 0,075 до 20% мас./мас. Когда препарат сформулирован в виде мази, активные ингредиенты можно использовать либо с парафиновой, либо смешиваемой с водой основой для мази. Альтернативно, активные ингредиенты могут быть сформулированы в крем с использованием основы для крема масло-в-воде. Если желательно, водная фаза основы для крема может включать многоатомный спирт, т.е. спирт, содержащий две или более гидроксильные группы, такой как пропиленгликоль, бутан 1,3-диол, маннит, сорбит, глицерин и полиэтиленгликоль (включая PEG 400) и их смеси. Желательно, когда композиции для местного применения включают соединение, которое усиливает абсорбцию или проникновение активного ингредиента через кожу или другие пораженные участки. Примеры таких усилителей проникновения через кожу включают диметилсульфоксид и соответствующие аналоги. Масляная фаза эмульсий согласно настоящему изобретению может быть образована из известных ингредиентов известным способом. Хотя такая фаза может включать только эмульгатор, желательно, когда она включает смесь, по меньшей мере, одного эмульгатора с жиром или маслом, или и жиром и маслом. Предпочтительно, гидрофильный эмульгатор включают вместе с липофильным эмульгатором, который действует как стабилизатор. Также предпочтительно, когда включают и масло и жир. Вместе эмульгатор(ы) со стабилизатором(стабилизаторами) или без него составляют так называемый эмульгирующий воск, и воск вместе с маслом и жиром составляют так называемую основу мази, которая образует масляную дисперсную фазу композиций крема. Эмульгаторы и стабилизаторы эмульсии, подходящие для использования в композициях по настоящему изобретению, включают Tween® 60, Span® 80, цетостеариловый спирт, бензиловый спирт, миристиловый спирт, глицерилмоностеарат и натрия лаурилсульфат.
Водные суспензий соединений формулы I содержат активные вещества в смеси с наполнителями, подходящими для получения водных суспензий. Такие наполнители включают суспендирующий агент, такой как натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы, кроскармелоза, повидон, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, камедь трагаканта и аравийская камедь, и диспергирующие или смачивающие вещества, такие как природный фосфатид (например, лецитин), продукт конденсации алкиленоксида с жирной кислотой (например, полиоксиэтиленстеарат), продукт конденсации этиленоксида с длинноцепочечным алифатическим спиртом (например, гептадекаэтиленоксицетанол), продукт конденсации этиленоксида неполным эфиром, полученным из жирной кислоты и гекситолгидрида (например, полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат). Водная суспензия также может содержать один или несколько консервантов, таких как этил или н-пропил п-гидроксибензоат, один или несколько красителей, одну или несколько отдушек и один или несколько подсластителей, таких как сахароза или сахарин.
Фармацевтические композиции соединений формулы I могут быть в форме стерильного препарата для инъекций, такого как стерильная водная или масляная суспензия для инъекций. Такая суспензия может быть сформулирована в соответствии со способами, известными из уровня техники, с использованием таких подходящих диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих веществ, которые были указаны выше. Стерильный препарат для инъекций также может представлять собой стерильный раствор или суспензию для инъекций в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, такой как раствор в 1,3-бутандиоле, или может быть получен в виде лиофилизированного порошка. Из приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, можно указать воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, в качестве растворителя или среды для суспендирования традиционно можно использовать стерильные нелетучие масла. Для этих целей можно использовать любое светлое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, жирные кислоты, такие как олеиновая кислота, также можно использовать в препаратах для инъекций.
Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с материалом носителя для получения единичной дозированной формы, варьируется в зависимости от хозяина, которого лечат, и конкретного пути введения. Например, композиция с рассчитанным по времени высвобождением, предназначенная для перорального введения человеку, может содержать примерно от 1 до 1000 мг активного вещества, скомпаундированного с подходящим и удобным количеством вещества носителя, которое может варьироваться от около от 5 до около 95% от общего количества композиции (мас.:мас.). Фармацевтическая композиция может быть получена для обеспечения легко отмеряемых количеств для введения. Например, водный раствор, предназначенный для внутривенной инфузии, может содержать от примерно от 3 до 500 мкг активного ингредиента на миллилитр раствора, чтобы можно было обеспечить инфузию подходящего объема со скоростью примерно 30 мл/час.
Составы, подходящие для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, вещества, препятствующие размножению бактерий, и растворенные вещества, которые делают композицию изотоничной с кровью предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие вещества и загустители.
Составы, подходящие для местного введения в глаз, также включают глазные капли, где активный ингредиент растворен или суспендирован в подходящем носителе, в частности, водном растворителе для активного ингредиента. Активный ингредиент, предпочтительно, присутствует в таких композициях в концентрации около 0,5-20% мас./мас., например, около 0,5-10% мас./мас., например, около 1,5% мас./мас.
Составы, подходящие для местного введения в полость рта, включают лепешки, включающие активный ингредиент основе, который был придан приятный вкус, обычно представляющей собой сахарозу и аравийскую камедь или трагакант; пастилки, включающие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и аравийская камедь; и средства для полоскания рта, включающие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.
Составы для ректального введения могут быть представлены в виде суппозитория с подходящей основой, включающей, например, масло какао или салицилат.
Составы, подходящие для внутрилегочного или назального введения, имеют размер частиц, например, от 0,1 до 500 микрон (включая размеры частиц от 0,1 до 500 микрон с инкрементами, такими как 0,5, 1, 30 микрон, 35 микрон и т.д.), которые вводят путем быстрой ингаляции через носовой проход или путем ингаляции через рот так, чтобы можно было достичь альвеолярных мешочков. Подходящие композиции включают водные или масляные растворы активного ингредиента. Композиции, подходящие для введения в форме аэрозоля или сухого порошка, можно получить в соответствии с традиционными способами, и они могут быть доставлены с другими терапевтическими средствами, такими как соединения, которые до настоящего времени использовали для лечения или профилактики нарушений, описанные ниже.
Составы, подходящие для вагинального введения, могут быть представлены в виде композиций вагинальных суппозиториев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или спреев, содержащих в дополнение к активному ингредиенту такие носители, которые являются подходящими, как это известно из уровня техники.
Составы могут быть упакованы в однодозовые или многодозовые контейнеры, например, запаянные ампулы и флаконы, и их можно хранить в виде высушенных замораживанием (лиофилизированных) композиций, требующих только добавления стерильного жидкого носителя для инъекций, например воды, непосредственно перед использованием. Растворы и суспензии для инъекции, которые не были приготовлены заранее, могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток описанного выше типа. Предпочтительные единичные дозированные формы представляют собой такие, которые содержат суточную дозу или дробную единицу суточной дозы, как указано выше в настоящей заявке, или подходящую часть такой дозы, активного ингредиента.
В настоящем изобретении, кроме того, предложены композиции для применения в ветеринарии, содержащие, по меньшей мере, один активный ингредиент, определенный выше, вместе с приемлемым в ветеринарии носителем. Приемлемые в ветеринарии носители представляют собой материалы, подходящие для целей введения композиции, и могут представлять собой твердые, жидкие или газообразные материалы, которые также являются инертными или приемлемыми для использования в ветеринарии и являются совместимыми с активным ингредиентом. Эти композиции для использования в ветеринарии можно вводить парентерально, перорально или любым другим желательным путем.
КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ
Соединения формулы I можно использовать отдельно или в комбинации с другими терапевтическими агентами для лечения заболеваний или нарушений, описанных в настоящем документе, таких как воспаление или гиперпролиферативное нарушение (например, рак). Согласно некоторым вариантам реализации, соединение формулы I комбинируют в фармацевтическом комбинированном составе или схеме лечения, такой как комбинированная терапия, со вторым терапевтическим соединением, которое обладает противовоспалительными или антигиперпролиферативными свойствами или которое является полезным для лечения воспаления, нарушения иммунного ответа или гиперпролиферативного нарушения (например, рака). Второй терапевтический агент может представлять собой НПВС противовоспалительный агент. Второй терапевтический агент может представлять собой химиотерапевтический агент. Второе соединение в фармацевтическом комбинированном составе или схеме лечения, предпочтительно, обладает активностью, дополняющей активность соединения формулы I таким образом, чтобы они не оказывали негативного влияния друг на друга. Является подходящим, когда такие соединения присутствуют в комбинации в количествах, которые являются эффективными для предполагаемого назначения. Согласно одному из вариантов реализации, композиция согласно настоящему изобретению содержит соединение формулы I, или его стереоизомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, в комбинации с терапевтическим средством, таким как НПВС.
Комбинированную терапию можно вводить в режиме одновременного или последовательного введения. При последовательном введении, комбинацию можно вводить в два или более введений. Комбинированное введение включает совместное введение с использованием отдельных составов или одного фармацевтического состава и последовательное введение в любом порядке, где, предпочтительно, должен быть период времени, в течение которого оба (или все) активных средства одновременно проявляют свою биологическую активность.
Подходящие дозы для любого из указанных выше совместно вводимых агентов представляют собой такие, которые используют в настоящее время, и они могут быть снижены, благодаря объединенному действию (синергизм) нового представленного агента и других терапевтических агентов или лечений.
Комбинированная терапия может обеспечить "синергизм" и быть "синергической", т.е. эффект, достигаемый, при использовании вместе активных ингредиентов, больше, чем сумма эффектов, которые являются результатом использования соединений по отдельности. Синергический эффект может достигаться, когда активные ингредиенты: (1) совместно сформулированы, и их введение или доставку осуществляют одновременно в комбинированной стандартной лекарственной форме; (2) доставку осуществляют поочередно или параллельно в отдельных составах; или (3) по какой-либо другой схеме. При доставке посредством чередующейся терапии, синергический эффект может достигаться, когда соединения вводят или доставляют последовательно, например, путем разных инъекций в отдельных шприцах, отдельных пилюль или капсул или отдельных инфузий. В целом, в процессе чередующейся терапии эффективную дозу каждого активного ингредиента вводят последовательно, т.е. поочередно, тогда как при комбинированной терапии эффективные дозы двух или более активных ингредиентов вводят вместе.
В конкретном варианте реализации терапии соединение формулы I или его стереоизомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемую соль или пролекарство можно объединять с другим терапевтическим, гормональным средством или агентом на основе антител, таким как агенты, описанные в настоящем документе, а также сочетать с хирургическим лечением и радиационной терапией. Комбинированная терапия в соответствии с настоящим изобретением, таким образом, включает введение по меньшей мере одного соединения формулы I или его стереоизомера, таутомера, сольвата, метаболита или фармацевтически приемлемой соли или пролекарства и применение по меньшей мере одного другого способа лечения рака. Количества соединения(соединений) формулы I и другого фармацевтически активного терапевтического агента(агентов) и соответствующее время введения выбирают таким образом, чтобы достигался желательный объединенный терапевтический эффект.
МЕТАБОЛИТЫ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I
Также в объем настоящего изобретения входят продукты in vivo метаболизма соединений формулы I, описанные в настоящем документе. Такие продукты могут быть образованы, например, в результате окисления, восстановления, гидролиза, амидирования, дезамидирования, этерификации, деэтерификации, ферментативного расщепления и т.п. вводимого соединения. Соответственно, настоящее изобретение включает метаболиты соединений формулы I, включая соединения, полученные способом, включающим приведение в контакт соединения согласно настоящему изобретению с млекопитающим в течение периода времени, достаточного для получения его метаболического продукта.
Продукты, являющиеся метаболитами, типично идентифицируют путем получения радиомеченного (например, 14С или 3H) изотопа соединения согласно настоящему изобретению, его парентерального введения в детектируемой дозе (например, больше чем около 0,5 мг/кг) животному, такому как крыса, мышь, морская свинка, обезьяна, или человеку, оставляя достаточно времени для метаболизма (типично от около 30 секунд до 30 часов) с выделением продуктов его конверсии из мочи, крови или других биологических образцов. Эти продукты можно легко выделить, поскольку они являются меченными (другие выделяют с использованием антител, способных связываться с эпитопами, выживающими в метаболите). Структуры метаболитов определяют традиционными способами, например, при помощи МС, ЖХ/МС или ЯМР анализа. Как правило, анализ метаболитов осуществляют таким же образом, как способы исследования метаболизма традиционных лекарственных средств, которые хорошо известны специалистам в данной области. Продукты метаболизма, если только они иным образом не обнаружены in vivo, являются полезными в диагностических анализах для подбора терапевтических доз соединений согласно настоящему изобретению.
ИЗДЕЛИЯ
Согласно другому варианту реализации настоящего изобретения предложено изделие или "набор", содержащий материалы, подходящие для лечения заболеваний и нарушений, описанных выше. Согласно одному из вариантов реализации набор содержит контейнер, содержащий соединение формулы I или его стереоизомер, таутомер, сольват, метаболит или фармацевтически приемлемую соль или пролекарство. Набор может дополнительно содержать этикетку или инструкцию по применению на внешней стороне контейнера или прилагаемый к контейнеру. Термин "инструкция по применению" используется как относящийся к инструкциям, обычно включенным в коммерческие упаковки терапевтических продуктов, которые содержат информацию о показаниях, применении, дозах, введении, противопоказаниях и/или предупреждения, касающиеся применения таких терапевтических продуктов. Подходящие контейнеры включают, например, бутыли, флаконы, шприцы, блистерные упаковки и т.д. Контейнер может быть выполнен из различных материалов, таких как стекло или пластик. Контейнер может содержать соединение формулы I или состав такого соединения, который является эффективным для лечения нарушения, и может иметь стерильное устройство для доступа (например, контейнер может представлять собой упаковку с внутривенным раствором или флакон, имеющий пробку, которую можно проколоть иглой для подкожных инъекций). По меньшей мере один активный агент в композиции представляет собой соединение формулы I. Этикетка или инструкция по применению указывает, что композицию используют для лечения выбранного состояния, такого как рак. Кроме того, этикетка или инструкция по применению могут указывать, что пациент, подлежащий лечению, является пациентом, у которого имеет место нарушение, такое как гиперпролиферативное нарушение, нейродегенерация, гипертрофия сердца, боль, мигрень или нейротравматическое заболевание или явление. Согласно одному из вариантов реализации этикетка или инструкция по применению указывает, что композицию, содержащую соединение формулы I, можно использовать для лечения нарушения, являющегося результатом аномального клеточного роста. Этикетка или инструкция по применению также могут указывать, что композицию можно использовать для лечения других нарушений. Альтернативно или дополнительно, изделие может дополнительно содержать второй контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая вода для инъекций (BWFI), фосфатно-буферный физиологический раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. Оно также может содержать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения или с точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.
Набор может дополнительно содержать указания по введению соединения формулы I и, если он присутствует, второй фармацевтический состав. Например, если набор содержит первую композицию, содержащую соединение формулы I, и второй фармацевтический состав, набор может дополнительно содержать инструкции для одновременного, последовательного или отдельного введения первой и второй фармацевтической композиции пациенту, нуждающемуся в этом.
Согласно другому варианту реализации наборы подходят для доставки твердых пероральных форм соединения формулы I, таких как таблетки или капсулы. Такой набор, предпочтительно, содержит несколько стандартных доз. Такие наборы могут содержать карту, включающую дозы, расположенные в порядке их предполагаемого использования. Примером такого набора является "блистерная упаковка". Блистерные упаковки известны в промышленности упаковок и широко используются для упаковок фармацевтических стандартных лекарственных форм. Если желательно, может быть обеспечена памятка, например в форме цифр, букв или других символов или с прилагаемым календарем, где обозначены дни в схеме лечения, в которые можно вводить дозы.
Согласно одному из вариантов реализации, набор может содержать (а) первый контейнер с содержащимся в нем соединением формулы I; и возможно (b) второй контейнер с содержащейся в нем вторым фармацевтическим составом, где второй фармацевтический состав содержит второе соединение с антигиперпролиферативной активностью. Альтернативно или дополнительно, набор может дополнительно содержать третий контейнер, содержащий фармацевтически приемлемый буфер, такой как бактериостатическая вода для инъекций (BWFI), фосфатно-буферный физиологический раствор, раствор Рингера и раствор декстрозы. Он также может содержать другие вещества, желательные с коммерческой точки зрения или с точки зрения пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы и шприцы.
Согласно некоторым другим вариантам реализации, где набор содержит композицию формулы I и второй терапевтический агент, набор может содержать контейнер для содержания отдельных композиций, такой как разделенная бутыль или разделенная упаковка из фольги, однако, отдельные композиции также могут содержаться в одном, неразделенном контейнере. Типично, набор содержит указания по введению отдельных компонентов. Форма набора является особенно преимущественной, когда отдельные компоненты, предпочтительно, вводят в разных лекарственных формах (например, пероральной и парентеральной), вводят с разными интервалами доз, или когда лечащий врач, выписывающий такое средство считает, что нужно титрование отдельных компонентов комбинации.
ПОЛУЧЕНИЕ СОЕДИНЕНИЙ ФОРМУЛЫ I
Соединения формулы I можно синтезировать посредством способов синтеза, включающих процессы аналогичные процессам, хорошо известным в области химии, особенно в свете приведенного описания, и процессам, описанным для других гетероциклов в: Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Editors Katritzky и Rees, Elsevier, 1997, например, Том 3; Liebigs Annalen der Chemie, (9): 1910-16, (1985); Helvetica Chimica Acta, 41:1052-60, (1958); Arzneimittel-Forschung, 40(12):1328-31, (1990), каждый из которых включен посредством ссылки. Исходные материалы, в целом, доступны из коммерческих источников, таких как Aldrich Chemicals (Milwaukee, WI) или их можно легко получить с использование способов, хорошо известных специалистам в данной области техники (например, получить по способам, в целом, описанным в Louis F. Fieser и Mary Fieser, Reagents в течение Organic Synthesis, v.1-23, Wiley, N.Y. (1967-2006 ed.) или Beilsteins Handbuch der organischen Chemie, 4, Aufl. ed. Springer-Verlag, Berlin, включая приложения (также доступны через базу данных Beilstein online).
Превращения синтетической химии и методология защитных групп (защита и снятие защиты) подходят для синтеза соединений формулы I и необходимые реагенты и промежуточные соединения известны в данной области техники и включают, например, описанные в R. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers (1989); Т.W. Greene и P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed., John Wiley и Sons (1999); и L. Paquette, ed., Encyclopedia of Reagents в течение Organic Synthesis, John Wiley и Sons (1995), а также в их последующих редакциях.
Соединения формулы I можно получать поодиночке или в виде библиотек химических соединений, содержащих по меньшей мере 2, например от 5 до 1,000 соединений или от 10 до 100 соединений. Библиотеки соединений формулы I можно получать посредством комбинаторного «смешай и раздели» подхода или множественного параллельного синтеза, используя либо жидкофазную, либо твердофазную химию, посредством процедур известных специалистам в данной области техники. Таким образом, согласно другому аспекту изобретения, предложена библиотека соединений, содержащая по меньшей мере 2 соединения или их фармацевтически приемлемая соль.
Чертежи и Примеры обеспечивают типичные способы получения соединений формулы I. Специалистам в данной области техники будет понятно, что можно использовать другие способы синтеза для синтеза соединения формулы I. Хотя конкретные исходные материалы и реагенты приведены и обсуждены на Чертежах и в Примерах, их можно легко заменять другими исходными материалами и реагентами для обеспечения различных производных и/или условий реакций. Кроме того, множество примеров соединений, полученных по указанным способам, можно дополнительно модифицировать в свете приведенного описания, с использованием традиционной химии, известной специалистам в данной области.
При получении соединений формулы I может понадобится защита удаленных функциональных групп (например, первичный или вторичный амин) промежуточных соединений. Необходимость такой защиты зависит от природы удаленных функциональных групп и условий способов получения. Подходящие амино-защитные группы включают ацетил, трифторацетил, трет-бутоксикарбонил (ВОС), бензилоксикарбонил (CBz) и 9-фторенилметиленоксикарбонил (Fmoc). Необходимость такой защиты может быть легко определена специалистом в данной области техники. Общее описание защитных групп и их применение см. в Т.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1991.
Общие процедуры получения
Общая Процедура А Сочетание по методу Сузуки
Реакция сочетания по методу Сузуки подходит для образования связей углерод-углерод при присоединении колец соединений формулы I и промежуточных соединений, таких как А-3 (Suzuki (1991) Pure Appl. Chem. 63:419-422; Miyaura и Suzuki (1979) Chem. Reviews 95(7):2457-2483; Suzuki (1999) J. Organometal. Chem. 576:147-168). Сочетание по методу Сузуки представляет собой реакцию кросс-сочетания арилгалида при содействии палладия, такого как B-2 или B-5, с бороновой кислотой, такой как A-1 или А-2. Например, B-2 можно комбинировать с примерно 1.5 эквивалентами 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксоборолан) и растворить в примерно 3 эквивалентах карбоната натрия в виде 1 молярного раствора в воде и эквивалентном объеме ацетонитрила. Добавляют каталитическое количество или более низковалентного палладиевого реагента, такого как дихлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II). В некоторых случаях вместо карбоната натрия применяют ацетат калия для доведения рН водного слоя. Реакционную смесь затем нагревают до примерно 140-150°С под давлением в микроволновом реакторе, таком как Biotage Optimizer (Biotage, Inc.) в течение 10-30 минут. Содержимое экстрагируют этилацетатом или другим органическим растворителем. После выпаривания органического бороновый эфир А-1 можно подвергнуть очистке на диоксиде кремния или при помощи обращенно-фазовой ВЭЖХ. Заместители Y1, Y2, R5 и R6 такие, как определено, или их защищенные формы или прекурсоры. Также, бромидное промежуточное соединение В-5 может быть боронилированно с получением А-2. Заместители Y1, Y2, R1, R2, R3, R4, Z1, Z2, Z3, Z4 и Х такие, как определено, или их защищенные формы или прекурсоры.
Сочетание по методу Сузуки В-2 и А-2 или А-1 и В-5 приводит к получению соединения формулы I или промежуточного соединения А-3. Бороновый эфир (или кислота) (1.5 экв.) А-1 и А-2 и палладиевый катализатор, такой как хлорид бис(трифенилфосфин)палладия(II) (0.05 экв.) добавляют к смеси галогенного промежуточного соединения (1 экв.) В-2 или В-5 в ацетонитриле и 1 М водном растворе карбоната натрия (эквивалентный объем к ацетонитрилу). Реакционную смесь нагревают до примерно 150°С в микроволнах в течение примерно 15 мин. ЖХ/МС указывает на завершение реакции. К смеси добавляют воду и осажденный продукт отфильтровывают и очищают при помощи ВЭЖХ с получением продукта А-3. Заместители R1’, R2’, R4’ могут представлять собой R1, R2, R4, как определено, или их защищенные формы или прекурсоры.
На стадии сочетания по методу Сузуки можно применять различные палладиевые катализаторы. В реакции Сузуки можно применять различные низковалентные катализаторы Pd(II) и Pd(0), включая PdCl2(PPh3)2, Pd(трет-Bu)3, PdCl2 dppf CH2Cl2, Pd(PPh3)4, Pd(OAc)/PPh3, Cl2Pd[(Pet3)]2, Pd(DIPHOS)2, Cl2Pd(бипиридин), [PdCl(Ph2PCH2PPh2)]2, Cl2Pd[P(o-т)3]2, Pd2(dba)3/P(o-tol)3, Pd2(dba)/Р(фурил)3, Cl2Pd[Р(фурил)3]2, Cl2Pd(PMePh2)2, Cl2Pd[Р(4-Р-Ph)3]2, Cl2Pd[P(C6F6)3]2, Cl2Pd[P(2-COOH-Ph)(Ph)2]2, Cl2Pd[P(4-COOH-Ph)(Ph)2]2, и инкапсулированные катализаторы Pd EnCat™ 30, Pd EnCat™ ТРРЗО, и Pd(II)EnCat™ BINAP30 (US 2004/0254066).
Общая Процедура В Реакция Бухвальда
Реакция Бухвальда подходит для амидирования 6-бром промежуточных соединений В-1 (Wolf и Buchwald (2004) Org. Synth Coll. Vol.10:423; Paul et al (1994) Jour. Amer. Chem. Soc. 116:5969-5970). К раствору галоген промежуточного соединения В-1 в ДМФА добавляют подходящий амин R5-NH2 (200 мол. %), Cs2CO3 (50 мол. %), Pd2(dba)3 (5 мол. %) и КСАНТФОС (10 мол %). Реакционную смесь нагревают до примерно 110°С под давлением в микроволновом реакторе Biotage optimizer в течение примерно 30 мин. Полученный раствор концентрируют в вакууме с получением В-2. Также подходят другие палладиевые катализаторы и фосфиновые лиганды.
N-ариламидные промежуточные соединения В-5 можно также получать при условиях Бухвальда циклическими амидными промежуточными соединениями B-3 и арилбромидами B-4.
На Фигуре 1 показан типичный способ синтеза для получения 6-хлор,4-амино пиридазиноновых соединений, включая 6-хлор-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин-3(2H)-он 101f, из 3-нитропиразол-5-карбоновой кислоты.
На Фигуре 2 показан типичный способ синтеза трициклических амид-фенильных боронатных соединений, включая 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-a]индол-1(2H)-он 101 т, из 4,5,6,7-теграгидро-1Н-индола.
На Фигуре 3 показан типичный способ синтеза трициклических амид-фенильных бромидных соединений, включая 2-бром-6-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетат 104h, из 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоновой кислоты.
На Фигуре 4 показан другой типичный способ синтеза трициклических амид-фенильных бромидных соединений, включая 6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5Я-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 105i, из 3-метилциклопент-2-енона.
На Фигуре 5 показан типичный способ синтеза трициклических соединений 1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2Н)-она в виде боронатных эфиров, включая 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-2(1H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 118f из 5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-2-карбоновой кислоты.
На Фигуре 6 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 198d из 1,3-дибром-5-фтор-2-иодбензола.
На Фигуре 7 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 198g.
На Фигуре 8 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 5-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 210е.
На Фигуре 9 показан типичный способ синтеза промежуточного соединения 5-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она 212c.
СПОСОБЫ РАЗДЕЛЕНИЯ
В способах получения соединений формулы I может быть преимущественным разделение продуктов реакции с отделением их один от другого и/или от исходных материалов. Желательные продукты каждой стадии или ряда стадий разделяют и/или очищают до желательной степени гомогенности методами, традиционно используемыми в данной области. Типично такие разделения включают мультифазную экстракцию, кристаллизацию из растворителя или смеси растворителей, дистилляцию, сублимацию или хроматографию. Хроматография может включать любое количество способов, включая, например: хроматографию с обращенной фазой и нормальной фазой; исключения по размеру; ионообменную; способы и устройства для жидкостной хроматографии высокого, среднего и низкого давления; аналитической в небольшом масштабе; с моделированным движущимся слоем сорбента (SMB) и препаративную хроматографию в тонких или толстых слоях, а также методы тонкослойной и флэш-хроматографии в небольшом масштабе.
Другой класс способов разделения включает обработку смеси реагентом, выбранным для связывания или выделения каким-либо иным образом желательного продукта, непрореагировавшего исходного материала, побочного продукта реакции или подобных веществ. Такие реагенты включают адсорбенты или абсорбенты, такие как активированный уголь, молекулярные сита, ионно-обменные среды или подобные. Альтернативно, реагенты могут представлять собой кислоты в случае основных веществ, основания в случае кислотных веществ, связывающие реагенты, такие как антитела, связывающие белки, селективные хелатообразующие агенты, такие как краун эфиры, реагенты для ионной экстракции жидкость/жидкость (LIX) или подобные. Выбор подходящих способов разделения зависит от природы веществ, присутствующих в каждом случае. Например, температуры кипения и молекулярной массы в дистилляции и сублимации, присутствия или отсутствия полярных функциональных групп в хроматографии, стабильности веществ в кислотной и щелочной среде в мультифазной экстракции и подобных факторов.
Диастереомерные смеси можно разделить на составляющие их индивидуальные диастереомеры на основании их физических и химических отличий способами, хорошо известными специалистам в данной области, такими как хроматография и/или фракционированная кристаллизация. Энантиомеры можно разделить путем преобразования энантиомерной смеси в диастереомерную смесь посредством взаимодействия с подходящим оптически активным соединением (например, хиральным вспомогательным веществом, таким как хиральный спирт или хлорангидрид кислоты Mosher), разделения диастереомеров и преобразования (например, путем гидролиза) индивидуальных диастереоизомеров в соответствующие чистые энантиомеры. Также, некоторые соединения согласно настоящему изобретению могут представлять собой атропизомеры (например, замещенные биарилы), и они рассматриваются как часть настоящего изобретения. Энантиомеры также можно разделить с использованием хиральной ВЭЖХ колонки.
Отдельный стереоизомер, например, энантиомер, по существу, не содержащий его стереоизомера, можно получить путем разделения рацемической смеси с использованием способа, такого как образование диастереомеров с использованием оптически активных агентов разделения (Eliel, Е. и Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds," John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994; Lochmuller, С. часов., (1975) J. Chromatogr., 113(3):283-302). Рацемические смеси хиральных соединений согласно настоящему изобретению можно разделить и выделить любым подходящим способом, включая: (1) образование ионных диастереомерных солей с использованием хиральных соединений и разделение путем фракционированной кристаллизации или другими способами, (2) образование диастереомерных соединений с использованием хиральных агентов дериватизации, разделение диастереомеров и преобразование в чистые стереоизомеры, и (3) разделение, по существу, чистых или обогащенных стереоизомеров непосредственно в хиральных условиях. См.: "Drug Stereochemistry, Analytical Methods и Pharmacology," living W. Wainer, Ed., Marcel Dekker, Inc., New York (1993).
В условиях способа (1), диастереомерные соли могут быть образованы путем взаимодействия энантиомерно чистых хиральных оснований, таких как бруцин, хинин, эфедрин, стрихнин, α-метил-β-фенилэтиламин (амфетамин) и подобных, с асимметрическими соединениями, содержащими кислотные функциональные группы, такими как карбоновая кислота и сульфоновая кислота. Разделение диастереомерных солей можно индуцировать при помощи фракционированной кристаллизации или ионной хроматографии. Для разделения оптических изомеров аминосоединений, добавление хиральной карбоновой или сульфоновой кислоты, такой как камфорсульфоновая кислота, винная кислота, миндальная кислота или молочная кислота, может привести к образованию диастереомерных солей.
Альтернативно, с использованием способа (2) субстрат, подлежащий разделению, подвергают взаимодействию с энантиомером хирального соединения с образованием диастереомерной пары (Е. и Wilen, S. "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994, p.322). Диастереомерные соединения могут быть образованы путем взаимодействия асимметрических соединений с энантиомерно чистыми хиральными агентами дериватизации, такими как ментиловые производные, с последующим разделением диастереомеров и гидролизом с получением чистого или обогащенного энантиомера. Способ определения оптической чистоты включает получение хиральных сложных эфиров, таких как ментиловый сложный эфир, например, (-) ментилхлорформиат, в присутствии основания, или сложного эфира Mosher, α-метокси-α-(трифторметил)фенилацетата (Jacob III. J. Org. Chem. (1982) 47:4165), рацемической смеси и анализа спектра 1Н ЯМР на присутствие двух атропизомерных энантиомеров или диастереомеров. Стабильные диастереомеры атропизомерных соединений можно разделить и выделить с использованием хроматографии с нормальной или обращенной фазой, следуя способам разделения атропизомерных нафтил-изохинолинов (WO 96/15111). При помощи способа (3) рацемическую смесь двух энантиомеров можно разделить при помощи хроматографии с использованием хиральной неподвижной фазы ("Chiral Liquid Chromatography" (1989) W.J. Lough, Ed., Chapman и Hall, New York; Okamoto, J. Chromatogr., (1990) 513:375-378). Обогащенные или очищенные энантиомеры можно получить способами, используемыми для получения других хиральных молекул с асимметрическими атомами углерода, такими как оптическое вращение и круговой дихроизм.
ПРИМЕРЫ
Пример 101 2-(2-метил-3-(5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 101
Пример 101а (3-нитpo-1H-пиpaзoл-5-ил)мeтaнoл 101а
Трехгорлую круглодонную колбу емкостью 3 л, снабженную механической мешалкой, капельной воронкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 3-нитропиразол-5-карбоновую кислоту (28.0 г, 178 ммоль) и ТГФ (420 мл), и охлаждали до -5°С с помощью бани лед/ацетон. Раствор комплекса боран-ТГФ (1.0 М, 535 мл, 535 ммоль) добавляли со скоростью, позволяющей поддержать внутреннюю температуру реакции ниже 5°С. После завершения добавления охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до -5°С с помощью бани лед/ацетон, добавляли воду (70 мл) и 4N соляную кислоту (70 мл) и реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 1 часа для разрушения боранового комплекса пиразолом. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении до объема приблизительно 30 мл. Добавляли этилацетат (175 мл) и смесь перемешивали в течение 15 минут. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (4×200 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (2×50 мл), солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия, осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 101а с 94% выходом (24.0 г) в виде светло-желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 13.90 (br s, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.58 (t, 1H, J=5.4 Гц), 4.53 (d, 2H, J=5.1 Гц); MS (ESI+) m/z 144.0 (M+H).
Пример 101b (1-(2-бромэтил)-3-нитро-1H-пиразол-5-ил)метанол 101b
Трехгорлую круглодонную колбу емкостью 1 л, снабженную механической мешалкой и терморегулятором, продували азотом и помещали в нее (3-нитро-1H-пиразол-5-ил)метанол 101а (25.0 г, 175 ммоль), ДМФА (250 мл) и карбонат цезия (70.0 г, 215 ммоль), нагревали при 104°С в течение 5 минут. Затем реакционную смесь охлаждали до 0°С с помощью бани лед/ацетон и добавляли по порциям (без выделения тепла) дибромэтан (329 г, 1.75 моль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1, затем при комнатной температуре в течение 4 часов. По прошествии указанного времени медленно добавляли раствор КН2РO4 (40 г) в воде (400 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли этилацетат (450 мл) и водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (200 мл), солевым раствором (200 мл), сушили над сульфатом натрия и осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 86% выхода (37.5 г) неочищенного 101b в виде оранжевого масла: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6.85 (s, 1H), 4.82 (d, 2H, J=5.4 Гц), 4.66 (t, 2H, J=6.3 Гц), 3.83 (t, 2H, J=6.3 Гц); MS (ESI+) m/z 249.9 (M+H).
Пример 101с 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1H-пиразол 101с
Трехгорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой, подводом азота и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее (1-(2-бромэтил)-3-нитро-1H-пиразол-5-ил)метанол 101b (37.0 г, 148 ммоль) и хлороформ (160 мл). Реакционную смесь охлаждали до -5°С с помощью бани лед/ацетон и добавляли по порциям трибромид фосфора (40.0 г, 148 ммоль). Охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до -5°С и добавляли насыщенный водный бикарбонат натрия (250 мл) до достижения рН 8.5. Смесь экстрагировали этилацетатом (3×150 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным карбонатом натрия (2×50 мл), солевым раствором (75 мл), сушили над сульфатом натрия и осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением желтого остатка, который растворяли с осторожным нагреванием в хлористом метилене (60 мл). Добавляли гексаны (приблизительно 20 мл) и раствор становился мутным. Смесь нагревали до образования твердого осадка, добавляли хлористый метилен (9 мл) и раствор становился прозрачным. Раствор оставляли охлаждаться до комнатной температуры и после 4 часов полученные кристаллы собирали с помощью вакуумной фильтрации. Фильтрационный остаток промывали ледяной смесью 1:2 хлористый метилентексаны (2×20 мл) с получением 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1H-пиразола (19.7 г). Объединенные фильтраты выпаривали и процедуру повторяли снова с получением дополнительных 9.70 г 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1Н-пиразола. Твердые вещества объединяли и сушили в высоком вакууме в течение 18 часов с получением 57% выхода (26.0 г) 101с в виде белых кристаллов: тк 95-97°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6.93 (s, 1H), 4.63 (t, 2H, J=6.0 Гц), 4.54 (s, 2H), 3.86 (t, 2H, J=6.0 Гц).
Пример 101d 5-метил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин 101d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 1 л, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали ТГФ (350 мл), 101 с (10.0 г, 32.2 ммоль), 2М раствор метиламина в ТГФ (113 мл, 225 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 72 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении и полученное твердое вещество перемешивали со смесью этилацетата (75 мл) и 10% водного карбоната калия (75 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×75 мл). Объединенные органические экстракты промывали 10% водным карбонатом калия (75 мл), с последующим промыванием солевым раствором (50 мл), и сушили /шд сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 101d с 97% выходом (5.70 г) в виде желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6.62 (s, 1Н), 4.28 (t, 2H, J=5.4 Гц), 3.67 (s, 2H), 2.95 (t, 2H, J=5.4 Гц), 2.52 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 183.0 (M+H).
Пример 101е 5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-амин 101е
Бутыль реактора Парра емкостью 500 мл продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 800 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 5-метил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразина 101d (4.00 г, 2.20 ммоль) в этаноле (160 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 45 psi и встряхивали в течение 2 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (1.0 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×75 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением 99% выхода 101е (3.31 г) в виде оранжевого твердого вещества: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 5.34 (s, 1Н), 3.98 (t, 2H, J=5.4 Гц), 3.52 (s, 3H), 2.84 (t, 2H, J=5.7 Гц), 2.45 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 153.1 (M+H).
Пример 101f 6-хлор-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиразин-2-иламино)пиридазин-3(2H)-он 101f
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником и подводом азота, помещали 1,4-диоксан (5.0 мл), 101e (152 мг, 1.00 ммоль), 4-бром-6-хлорпиридазин-3(2Н)-он (209 мг, 1.00 ммоль) и 1 М раствор LiHMDS в ТГФ (5.0 мл, 5.00 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (49 мг, 0.05 ммоль) и трис(дибензилиденацетон) дипалладия(0) (59 мг, 0.085 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду (10 мл). рН доводили до 6.5 с помощью 2 N соляной кислоты. Полученный осадок собирали с помощью вакуумной фильтрации, промывали водой (2×25 мл), абсорбировали на силикагеле и очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 74% выхода (210 мг) 101f в виде светло-коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 12.94 (s, 1Н), 9.55 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.04 (t, 1H, J=5.7 Гц), 3.53 (s, 2H), 2.82 (t, 2H, J=5.7 Гц), 2.36 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 281.1 (M+H).
Пример 101g 2,2,2-трихлор-1-(4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-ил)этанон 101g
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, холодильником и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол (3.00 г, 24.8 ммоль), хлорангидрид трихлоруксусной кислоты (13.5 г, 74.4 ммоль) и 1,2-дихлорэтан (50 мл). Раствор перемешивали при 85°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 100% выхода (6.50 г) 101g в виде черного полутвердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 11.94 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 2.62 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.47 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.80 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 266.0 (M+H).
Пример 101h этил-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101h
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 101g (6.50 г, 24.8 ммоль), этилат натрия (17.0 мг, 0.25 ммоль) и этанол (40 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 100% выхода (4.80 г) 101h в виде коричневого твердого вещества: тк 70-72°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 9.08 (s, 1H), 6.75 (s, 1H), 4.25 (q, 2H, J=7.2 Гц), 2.65 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.56 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.85 (m, 4H), 1.28 (t, 3H, J=7.2 Гц); MS (ESI+) m/z 194.1 (M+H).
Пример 101i Этил-1-(цианометил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101i
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 125 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 101h (5.76 г, 29.8 ммоль) и ДМФА (50 мл). Раствор охлаждали до 0°С с применением ледяной бани. Добавляли NaH (60% дисперсию в минеральном масле, 1.43 г, 35.8 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли бромацетонитрил (1.43 г, 35.8 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток разделяли между этилацетатомом (150 мл) и водой (450 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 55% выхода (3.80 г) этил-1-(цианометил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилата 101i в виде желтого полутвердого вещества: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 6.66 (s, 1H), 5.29 (s, 2H), 4.28 (q, 2H, J=7.2 Гц), 2.62 (t, 2H, J=6.3 Гц), 2.49 (t, 2H, J=6.3 Гц), 1.92 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.33 (t, 3H, J=7.2 Гц); MS (ESI+) m/z 233.1 (M+H).
Пример 101j Этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101j
Бутыль реактора Парра емкостью 200 мл продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 1.28 г в пересчете на сухое вещество), этил-1-(цианометил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101l (3.00 г, 12.9 ммоль), 12% соляную кислоту (6.5 мл, 25 ммоль), этилацетат (60 мл) и этанол (40 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 6 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (4.0 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×20 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и 10% водным карбонатом калия (100 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×75 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток измельчали с этанолом (5 мл) с получением 71% выхода (1.71 г) этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилата 101j в виде белого твердого вещества: тк 102-104°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 6.61 (s, 1H), 6.22 (br, 2H), 4.15 (m, 4H), 2.77 (m, 2H), 2.59 (t, 2H, J=6.5 Гц), 2.42 (t, 2H, J=6.5 Гц), 1.70 (m, 2H), 1.62 (m, 2H), 1.23 (t, 3H, J=7.0 Гц); MS (APCI+) m/z 237.2 (M+H).
Пример 101k Этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101k
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101j (1.80 г, 7,63 ммоль), этилат натрия (1.55 г, 22.8 ммоль) и этанол (50 мл). Смесь перемешивали при 55°С в течение 5 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток разделяли между этилацетатом (200 мл) и водой (100 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 42% выхода (605 мг) этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилата 101k в виде белого твердого вещества: тк 207-209°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 7.41 (s, 1Н), 6.36 (s, 1H), 3.84 (t, 2H, J=6.0 Гц), 3.42 (m, 2H), 2.51 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.42 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.76 (m, 2H), 1.65 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H).
Пример 101l 2-(3-бром-2-метилфенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-он 101l
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101k (560 мг, 2.95 ммоль), 2,6-дибромтолуол (1.47 г), карбонат цезия (1.92 г, 5.90 ммоль), N,N’-диметилэтилендиамин (260 мг, 2.95 ммоль) и 1,4-диоксан (25 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли N,N’-диметилэтилендиамин меди (260 мг, 2.95 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С (температура масляной бани) в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (20 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3 х 30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 57% выхода (600 мг) 2-(3-бром-2-метилфенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-a]индол-1(2H)-она 101l в виде белого твердого вещества: тк 163-165°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 7.57 (dd, 1H, J=8.0, 0.5 Гц), 7.32 (d, 1H, J=7.5 Гц), 7.21 (t, 1H, J=8.0 Гц), 6.50 (s, 1H), 4.11 (m, 3H), 3.75 (m, 1Н), 2.59 (m, 2H), 2.45 (m, 2H), 2.21 (s, ЗН), 1.78 (m, 2H), 1.68 (m, 2H); (APCI+) m/z 358.6 (M+H).
Пример 101m 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-он 101m
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 2-(3-бром-2-метилфенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-он 1011 (600 мг, 1.67 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (1.70 г, 6.70 ммоль), ацетат калия (656 мг, 6.68 ммоль) и 1,4-диоксан (25 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут, добавляли XPhos (159 мг, 0.334 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (153 мг, 0.167 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С (температура масляной бани) в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (75 мл) и водой (20 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 109% выхода (740 мг) неочищенного 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-она 101m в виде желтого масла: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.75 (dd, 1Н, J=6.6, 2.1 Гц), 7.26 (m, 2H), 6.80 (s, 1Н), 4.10 (m, 3Н), 3.75 (m, 1Н), 2.54 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 1.87 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.25 (s, 12H); MS (APCI+) m/z 407.7 (M+H).
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-он 101m (740 мг, 1.67 ммоль), 6-хлор-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин-3(2H)-он 6 (422 мг, 1.34 ммоль), карбонат натрия (568 мг, 5.36 ммоль), ДМФА (5 мл), воду (5 мл) и 1,4-диоксан (20 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (155 мг, 0.134 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 15 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением 17% выхода (120 мг) 101 в виде беловатого твердого вещества: тк 195-197°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 12.95 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.34 (m, 2H), 7.29 (m, 1H), 6.50 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.14 (m, 1H), 4.08 (m, 2 Н), 3.95 (m, 2H), 3.77 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 2.78 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.60 (m, 2H), 2.46 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.35 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.78 (m, 2H), 1.68 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 521 (M+H).
Пример 102 2-(2-метил-3-(5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 102
Пример 102а Этил-1-(цианометил)-1H-индол-2-карбоксилат 102а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее этилиндол-2-карбоксилат (10.0 г, 52.9 ммоль) и ДМФА (100 мл). Раствор охлаждали до 0°С с применением ледяной бани. Добавляли NaH (60% дисперсию в минеральном масле, 2.54 г, 63.5 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли бромацетонитрил (7.62 г, 63.5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток разделяли между этилацетатом (300 мл) и водой (900 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×300 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 66% выхода (8.00 г) 102а в виде беловатого твердого вещества: тк 65-67°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.72 (d, 1H, J=8.1), 7.44 (m, 3H), 7.25 (m, 1H), 5.62 (s, 2H), 4.42 (q, 2H, J=7.2 Гц), 1.43 (t, 3H, J=7.2 Гц); MS (ESI+) m/z 229.1 (M+H).
Пример 102b 3,4-дигидропиразино[1,2-a]индол-1(2H)-он 102b
Бутыль реактора Парра емкостью 500 мл продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 3.47 г в пересчете на сухое вещество), 102а (8.00 г, 35.0 ммоль), 12% соляную кислоту (17.5 мл, 70 ммоль), этилацетат (150 мл) и этанол (100 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 6 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (10.0 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×50 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении. Остаток разделяли между этилацетатом (400 мл) и 10% водным карбонатом калия (300 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток измельчали с этанолом (5 мл) с получением 70% выхода (4.57 г) 102b в виде беловатого твердого вещества: тк 228-230°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.73 (d, 1H, J=8.1 Гц), 7.34 (m, 3H), 7.18 (m, 1H), 6.75 (br s, 1H), 4.29 (t, 2H, J=5.4 Гц), 3.84 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 187.1 (M+H).
Пример 102с 2-(3-бром-2-метилфенил)-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-он 102с
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 102b (1.00 г, 5.37 ммоль), (2.69 г, 10.7 ммоль), карбонат цезия (3.49 г, 10.7 ммоль), N,N’-диметилэтилендиамин (473 мг, 5.37 ммоль) и 1,4-диоксан (45 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут, добавляли иодид меди (510 мг, 2.69 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С (температура масляной бани) в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (200 мл) и водой (40 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 62% выхода (1.18 г) 102 с в виде беловатого твердого вещества: тк 178-180°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.74 (dt, 1Н, J=8.2, 1.0 Гц), 7.58 (dd, 1H, J=7.8, 1.2 Гц), 7.37 (m, 3H), 7.19 (m, 3H), 4.45 (m, 2H), 4.21 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 2.38 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 355.0 (M+H).
Пример 102d 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-1(2H)-он 102d
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 102 с (1.18 г, 3.32 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5’-oктaмeтил-2,2'-ди(1,3,2-диoкcaбopoлaн) (929 мг, 3.65 ммоль), ацетат калия (491 мг, 4.98 ммоль) и 1,4-диоксан (25 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут, добавляли XPhos (317 мг, 0.664 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (561 мг, 0.332 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С (температура масляной бани) в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (40 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 57% выхода (760 мг) 102d в виде беловатого твердого вещества: тк 193-195°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.80 (dd, 1H, J=7.0, 1.7 Гц), 7.74 (d, 1H, J=8.2 Гц), 7.37 (m, 3H), 7.28 (m, 2H), 7.19 (m, 1H), 4.45 (m, 2H), 4.22 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 2.50 (s, 3H), 1.35 (s, 12H); MS (ESI+) m/z 403.2 (M+H).
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 102d (760 мг, 1.89 ммоль), 101f (379 мг, 1.35 ммоль), карбонат натрия (430 мг, 4.05 ммоль), ДМФА (5 мл), воду (2.5 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут, добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (437 мг, 0.378 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением 26% выхода (183 мг) 102 в виде беловатого твердого вещества: тк 188-190°С (dec); 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 12.99 (s, 1H), 9.23 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.71 (d, 1H, J=8.1 Гц), 7.61 (d, 1H, J=7.9 Гц), 7.38 (m, 4H), 7.14 (m, 2H), 5.97 (s, 1H), 4.63 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.27 (m, 1H), 4.12 (m, 3H), 3.51 (s, 2H), 2.79 (t, 2H, J=5.1 Гц), 2.35 (s, 3H), 2.18 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 521.2 (M+H).
Пример 103 4-{2-метил-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]фенил}-7-тиа-4-aзaтpициклo[6.4.0.02,6]дoдeкa-1(8),2(6),9,11-тетраен-5-он 103
Пример 103а Метил-3-(бромметил)бензо[6]тиофен-2-карбоксилат 103а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, подводом азота и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее метил-3-метилбензо[b]тиофен-2-карбоксилат (2.00 г, 9.70 ммоль) и бензол (20 мл). Добавляли N-бромсукцинимид (1.72 г, 9.70 ммоль) и 2,2'-азобисизобутиронитрил (160 мг, 1.00 ммоль) и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали четыреххлористым углеродом (20 мл) и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 103а с выходом 82% (2.27 г) в виде белого твердого вещества: тк 101-102°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.97 (m, 1Н), 7.86 (m, 1H), 7.51 (m, 2H), 5.22 (s, 2H), 3.97 (s, 3H).
Пример 103b 3-((3-бром-2-метилфениламино)метил)бензо[b]тиофен-2-карбоновая кислота 103b
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 103а (2.26 г, 7.92 ммоль), 3-бром-2-метиланилин (1.77 г, 9.51 ммоль) и ацетонитрил (50 мл). Добавляли карбонат цезия (7.75 г, 23.8 ммоль) и смесь перемешивали при 50°С в течение 14 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок растворяли в ТГФ (15 мл), метаноле (15 мл) и воде (15 мл) и обрабатывали моногидратом гидроксида лития (1.30 г, 31.0 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 14 часов растворитель удаляли при пониженном давлении и полученный осадок подкисляли 2 М соляной кислотой до рН 5. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл) и органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 103b с выходом 59% (1.70 г) в виде белого твердого вещества: тк 120-121°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.30 (d. 1H, J=12.5 Гц), 7.98 (d, 1H, J=12.5 Гц), 7.46 (m, 2H), 6.77 (m, 3H), 4.97 (s, 2H), 2.15 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 378.9 (M+H).
Пример 103с 2-((3-бром-2-метилфенил)-1Нбензотиено[2,3-с]пиррол-3(2H)-он 103с
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 103b (1.70 г, 4.51 ммоль), триэтиламин (914 мг, 9.00 ммоль) и безводный ДМФА (25 мл). Добавляли бензотриазол-1-ил-окси-трис(диметиламино)-фосфония гексафторфосфат (ВОР, 2.60 г, 5.90 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и полученную суспензию фильтровали. Фильтрационный остаток растворяли в хлористом метилене (40 мл) и раствор промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (10 мл), водой (10 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 78% выхода 103с (1.26 г) в виде белого полутвердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.97 (m, 1H), 7.80 (m, 1H), 7.60 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.49 (m, 2H), 7.28 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.16 (t, 1H, J=8.0 Гц), 4.85 (s, 2H), 2.37 (s, 3H).
Пример 103d 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-1H-бензотиено[2,3-с]пиррол-3(2H)-он 103d
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 103 с (1.26 г, 3.51 ммоль), 4,4,4',4’,-5,5,5',5'-oктaмeтил-2,2'-ди(1,3,2-диoкcaбopoлaн) (2.23 г, 8.80 ммоль), ацетат калия (1.00 г, 10.20 ммоль) и 1,4-диоксан (30 мл). Поток азота пропускали через полученную суспензию в течение 30 минут. Добавляли [1,1-Бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладий(II) (260 мг, 0.355 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между водой (25 мл) и этилацетатом (50 мл) и фильтровали через пробки из Целита 521. Органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением количественного выхода (1.84 г) 103d в виде желтого полутвердого вещества: 1H ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.97 (m, 1Н), 7.80 (m, 2H), 7.47 (m, 2H), 7.35 (d, 1H, J=7.5 Гц), 7.28 (d, 1Н, J=7.5 Гц), 4.86 (s, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.35 (s, 12H).
Пример 103е 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2H)-он 103е
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 4-бром-6-хлорпиридазин-3(2Н)-он (1.00 г, 4.77 ммоль) и ДМФА (15 мл). Добавляли в одной порции гидрид натрия (60% по массе масла, 229 мг, 5.73 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 10 минут добавляли иодметан (1.02 г, 7.16 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 часов. Реакцию затем гасили насыщенным водным бикарбонатом натрия (10 мл) и полученный раствор выливали в воду (150 мл). Смесь затем экстрагировали этилацетатом (250 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия. Осушитель затем удаляли с помощью фильтрации, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении до осадка. В результате очистки с помощью колоночной хроматографии получали 103е с 68% выходом (722 мг) в виде белого твердого вещества: тк 107-108°С; 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.62 (s, 1Н), 3.81 (s, 3H).
Пример 103f 6-хлор-2-метил-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридазин-3(2H)-он 103f
В трехогорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2H)-он 103е (1.90 г, 8.53 ммоль), 101е (1.18 г, 7.75 ммоль) и 1,4-диоксан (40 мл). Колбу продували азотом и охлаждали до 0°С. Добавляли 1 М раствор гексаметилдисилазида лития в ТГФ (39 мл, 39.0 ммоль). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут, добавляли Ксантфос (381 мг, 0.659 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (355 мг, 0.388 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли водой (10 мл). рН раствора доводили до 7.6 с помощью 2 N соляной кислоты. Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×40 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле с получением 76% выхода (1.74 г) ЮЗГв виде беловатого твердого вещества: тк 184-186°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 9.62 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.04 (t, 2H, J=5.1 Гц), 3.65 (s, 3H), 3.53 (s, 2H), 2.82 (t, 2H, J=5.1 Гц), 2.37 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 295.1 (M+H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 150 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 103d (580 мг, 1.43 ммоль), 103f (300 мг, 1.00 ммоль), карбонат натрия (320 мг, 3.00 ммоль), 1,4-диоксан (8 мл), ДМФА (5 мл) и воду (2.5 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия (120 мг, 0.103 ммоль). Поле нагревания с обратным холодильником в течение 14 часов, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 103 с выходом 44% (240 мг) в виде беловатого твердого вещества: тк 175-176°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.28 (s, 1H), 8.20 (m, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.56 (m, 3H), 7.40 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.12 (s, 1H), 3.97 (t, 2H, J=5.5 Гц), 3.76 (s, 3H), 3.51 (s, 2H), 2.79 (t, 2H, J=8.5 Гц), 2.35 (s, 3H), 2.17 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 538.2 (M+H).
Пример 104 5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 104
Пример 104а N-метокси-N-метил-4,5,6,7-тетрагидробензо[6]тиофен-2-карбоксамид 104а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом, помещали в нее 4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоновую кислоту (3.00 г, 16.5 ммоль), хлористый метилен (80 мл) и ДМФА (60 мг, 0.825 ммоль) и охлаждали до 0°С. К полученному раствору по каплям добавляли оксалил хлорид (2.31 г, 18.2 ммоль). После завершения добавления реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении. Полученное белое твердое вещество растворяли в хлористом метилене (80 мл) и раствор охлаждали до 0°С. Затем добавляли триэтиламин (5.00 г, 49.5 ммоль) и N,O-диметилгидроксиламин (1.61 г, 16.5 ммоль). После завершения добавления охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разделяли между водой (100 мл) и этилацетатом (200 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (100 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл), с последующим промыванием солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 88% выхода 104а (3.29 г) в виде белого твердого вещества: тк 36-37°С; 1H ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.79 (s, 1Н), 3.76 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 2.78 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.62 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.82 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 226.3 (M+H).
Пример 104b 3-хлор-1-(4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-ил)пропан-1-он 104b
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 104а (2.70 г, 12.0 ммоль) и безводный ТГФ (45 мл), и раствор охлаждали до -10°С с помощью бани ацетон/лед. Добавляли по каплям 1.0 М раствор бромида винилмагния в ТГФ (13.2 мл, 13.2 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 4 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разделяли между этилацетатом (100 мл) и 2 М водной соляной кислотой (40 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (40 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл), с последующим промыванием солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в хлористом метилене (30 мл) и добавляли 2 М раствор хлороводорода в диэтиловом эфире (15 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа растворители удаляли при пониженном давлении. В результате очистки полученного осадка с помощью колоночной хроматографии получили 29% выход (804 мг) 104b в виде беловатого твердого вещества: тк 57-58°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.41 (s, 1Н), 3.89 (t, 2H, J=7.0 Гц), 3.30 (t, 2H, J=7.0 Гц), 2.81 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.64 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.83 (m, 4H); MS (ECI+) m/z 229.1 (M+H).
Пример 104с 5,6,7,8-тетрагидро-1H-бензо[b]циклопента[d]тиофен-3(2H)-он 104с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 104b (800 мг, 3.51 ммоль) и 98% серную кислоту (8 мл). После перемешивания при 95°С в течение 16 часов реакционную смесь выливали в лед (50 г) и полученную суспензию экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 104с с выходом 47% (320 мг) в виде беловатого твердого вещества: тк 75-76°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 2.89 (m, 2H), 2.87-2.83 (m, 4H), 2.56 (t, 2H, J=6.5 Гц), 1.84 (m, 4H).
Пример 104d оксим 5,6,7,8-тетрагидро-1H-бензо[b]циклопента[d]тиофен-3(2H)-она 104d
В одногорлу ю круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную механической мешалкой и подводом азота, помещали гидрохлорид гидроксиламина (573 мг, 8.25 ммоль) и метанол (10 мл). Смесь охлаждали до 0°С с применением ледяной бани. Добавляли ацетат натрия (677 мг, 8.25 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли 104 с (319 мг, 1.65 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь концентрировали и полученный осадок измельчали с водой (10 мл). Полученное твердое вещество собирали и сушили в вакуумной печи при 45°С с получением 84% выхода (287 мг) 104d в виде беловатого твердого вещества: тк 173-174°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 10.38 (s, 1H), 2.97 (m, 2H), 2.77-2.73 (m, 4H), 2.47 (m, 2H), 1.75 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 208.3 (M+H).
Пример 104е 3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 104е
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 104d (285 мг, 1.38 ммоль) и полифосфорную кислоту (15 г). После перемешивания при 80°С в течение 16 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду (30 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 30 минут и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали водой (20 мл) и сушили в вакуумной печи при 45°С с получением 75% выхода (215 мг) 104е в виде беловатого твердого вещества: тк 203°С dec; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 5.62 (s, 1H), 3.59 (t, 2H, J=7.0 Гц), 2.81 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.72 (t, 2H, J=7.0 Гц), 2.48 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.84 (m, 4H). MS (APCI+) m/z 208.3 (M+H).
Пример 104f 2-бром-6-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетат 104f
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 104е (214 мг, 1.04 ммоль), 2,6-дибромбензилацетат 104g (519 мг, 2.08 ммоль), карбонат цезия (678 мг, 2.08 ммоль), N,N'-диметилэтилендиамин (92 мг, 1.04 ммоль) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли иодид меди (99 мг, 0.520 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С (температура масляной бани) в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 30% выхода (138 мг) 2-бром-6-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетата 104Гв виде желтого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.59 (dd, 1H, J=7.0, 1.5 Гц), 7.30-7.24 (m, 2H), 5.23 (m, 2H), 4.06 (m, 1H), 3.77 (m, 1H), 2.98 (m, 1H), 2.83-2.77 (m, 3H), 2.50 (m, 2H), 2.04 (s, 3H), 1.85 (m, 4H).
Пример 104g 2,6-дибромбензилацетат 104g
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 2,6-дибромтолуол (2.50 г, 10.0 ммоль), N-бромсукцинимид (1.78 г, 10.0 ммоль) и четыреххлористый углерод (40 мл). Раствор нагревали до 80°С (температура масляной бани) и добавляли 2,2'-азобисизобутиронитрил (164 мг, 1.00 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали четыреххлористым углеродом (2×20 мл). Фильтрат разбавляли этилацетатом (200 мл) и промывали водой (40 мл), насыщенным водным бикарбонатом натрия (40 мл) и солевым раствором (40 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением количественного выхода (3.28 г) 1,3-дибром-2-(бромметил)бензола в виде желтого твердого вещества: тк 77-78°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.55 (d, 2H, J=8.1 Гц), 7.07 (t, 1H, J=8.1 Гц), 4.83 (s, 2H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 1,3-дибром-2-(бромметил)бензол (3.28 г, 10.0 ммоль), ацетат калия (3.93 г, 40.0 ммоль) и ДМ ФА (100 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разбавляли водой (900 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 88% выхода (2.70 г) 2,6-дибромбензилацетата 104g в виде беловатого твердого вещества: тк 62-65°С; 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.57 (d, 2H, J=8.0 Гц), 7.07 (t, 1H, J=7.9 Гц), 5.42 (s, 2H), 2.11 (s, 3H); MS (ESI+).
Пример 104h 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 104h
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и терморегулятором, продували азотом и помещали в нее 5-бром-1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)пиридин-2(1Н)-он 109b (300 мг, 1.07 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (534 мг, 2.14 ммоль), ацетат калия (210 мг, 2.14 ммоль) и 1,4-диоксан (10 мл). Поток азота пропускали через полученную суспензию в течение 30 минут. Затем добавляли [1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен] дихлорпалладий(II), комплекс с дихлорметаном (PddppfCl2⋅CH2Cl2, 39 мг, 0.054 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 95°С в течение 30 минут. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между водой (40 мл) и этилацетатом (60 мл) и фильтровали через пробки из Целита 521. Органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 104h в виде черного масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS (ESI+) m/z 329.1 (М+Н).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 104f (136 мг, 0.313 ммоль), неочищенный 104h (1.07 ммоль, предположительно количественного выхода), карбонат натрия (100 мг, 0.940 ммоль), 1,4-диоксан (5 мл) и воду (1 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли смесь тетракис(трифенилфосфин)палладия (636 мг, 0.031 ммоль). После нагревания при 100°С в течение 3 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли карбонат калия (500 мг, 3.62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 104 с выходом 26% (42 мг) в виде белого твердого вещества: тк>250°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.17 (s, 1H), 8.71 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.64 (s, 1H), 8.29 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.52 (d. 1H, J=2.5 Гц), 7.45 (t, 1H, J=7.5 Гц), 7.36-7.30 (m, 3H), 4.84 (t, 1H, J=3.5 Гц), 4.36 (m, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.60 (s. 3H), 2.96 (m, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.58-2.46 (m, 2H), 1.79 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 514.2 (M+H).
Пример 105 10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[б.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 105
Пример 105а 3,3-диметилциклопентанон 105а
Трехгорлую круглодонную колбу емкостью 1 л, снабженную магнитной мешалкой, капельной воронкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее диэтиловый эфир (200 мл) и иодид меди (I) (54.46 г, 0.286 моль). Смесь охлаждали до 0°С, в течение 1.5 часов к реакционной смеси добавляли по каплям метиллитий (1.6 М в диэтиловом эфире, 357.5 мл, 0.572 моль) и перемешивали при 0°С в течение дополнительных 2 часов. По прошествии указанного времени добавляли по каплям в течение 1.5 часов раствор 3-метилциклопент-2-енона (25 г, 0.260 моль) в диэтиловом эфире (150 мл). Затем реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 часов и выливали в декагидрат сульфата натрия (300 г). Полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. По прошествии указанного времени смесь фильтровали и промывали диэтиловым эфиром (1000 мл). Фильтрат концентрировали и перегоняли при пониженном давлении с получением 70% выхода (20.5 г) 3,3-диметилциклопентанона 105а в виде бесцветной жидкости: тк 50-55°С (при 10 mmHg); 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 2.31 (t, 2H, J=7.8 Гц), 2.05 (s, 2H), 1.79 (t, 2H, J=7.8 Гц); MS (ESI+) m/z 113.3 (M+H).
Пример 105b этил-5,5-диметил-5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-2-карбоксилат 105b
Трехгорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником, капельной воронкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее ДМФА (9.49 г, 0.100 моль) и хлористый метилен (100 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и в течение 30 минут к реакционной смеси добавляли по каплям оксихлорид фосфора (14.1 г, 0.920 моль). После завершения добавления реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли по каплям в течение 1 часа раствор 105а (11.2 г, 0.100 моль) в хлористом метилене (100 мл). Затем реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в смесь дробленого льда (400 мл) и ацетата натрия (100 г, 1.22 моль). Полученную смесь перемешивали в течение 45 минут. По прошествии указанного времени водный слой отделяли и экстрагировали хлористым метиленом (2×500 мл). Затем объединенные органические слои промывали водой (2×200 мл), с последующим промыванием солевым раствором (200 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель затем удаляли с помощью фильтрации, и фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта 2-хлор-4,4-диметилциклопент-1-енкарбальдегида, который помещали в трехгорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную механической мешалкой, обратным холодильником и подводом азота. Затем добавляли хлористый метилен (200 мл), этил-2-меркаптоацетат (11.0 г, 0.092 моль) и триэтиламин (30 г, 0.207 моль). Затем реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 6 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали до вязкого оранжевого осадка. Добавляли этанол (200 мл) и триэтиламин (30.0 г, 0.207 моль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 12 часов. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок разбавляли диэтиловым эфиром (600 мл). Полученную смесь промывали 1 М соляной кислотой (150 мл), солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 105b с выходом 34% (7.70 г) в виде бесцветной жидкости: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.48 (s, 1H), 4.33 (q, 2H, J=7.2 Гц), 2.72 (s, 2H), 2.56 (s, 2H), 1.38 (t, 3H, J=1.8 Гц), 1.17 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 225.1.
Пример 105с 5,5-диметил-5,6-дигидро-4Я-циклопента[b]тиофен-2-карбоновая кислота 105с
В одногорлой круглодонной колбе емкостью 250 мл, снабженной магнитной мешалкой и обратным холодильником, растворяли 105b (4.00 г, 17.8 ммоль) в этаноле (50 мл). Добавляли ТГФ (50 мл), воду (50 мл) и гидроксид лития (854 мг, 35.6 ммоль) и смесь перемешивали при 60°С в течение 4 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и подкисляли 2М соляной кислотой до рН 1.5, и затем экстрагировали этилацетатом (2×200 мл). Органический слои объединяли, промывали водой (2×100 мл), с последующим промыванием солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Затем с помощью фильтрации отделяли осушитель. После выпаривания полученного фильтрата, получали 105с с выходом 91% (3.2 г) в виде белого твердого вещества: тк 170-172°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 12.77 (s, 1Н), 7.46 (s, 1H), 2.71 (s, 2H), 2.53 (s, 2H). 1.20 (s, 6H); MS (ESI-) m/z 195.0.
Пример 105d 5,5-диметил-5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-2-карбоновая кислота 105d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником и барботером, размещенном на холодильнике, помещали 105с (2.30 г, 11.6 ммоль), толуол (25 мл), тионилхлорид (4.09 г, 34.9 ммоль) и ДМФА (1 капля). Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа и затем выпаривали при пониженном давлении на роторном испарителе при 45°С. Полученный кислотный хлорид разбавляли хлористым метиленом (20 мл).
В отдельной трехгорлой круглодонной колбе емкостью 250 мл, снабженной магнитной мешалкой, в атмосфере азота растворяли гидрохлорид N,O-диметилгидроксиламина (2.26 г, 23.2 ммоль) и N,N-диизопропилэтиламин (2.97 г, 23.0 ммоль) в безводном хлористом метилене (20 мл) и раствор охлаждали до 0°С на бане лед/вода. Добавляли раствор кислотного хлорида и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь экстрагировали водой (100 мл), 10% водной лимонной кислотой (50 мл) и смесью 1:1 насыщенного водного бикарбоната натрия и воды (100 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия и выпаривали при пониженном давлении на роторном испарителе с получением 93% выхода (2.60 г) 105d в виде светло-желтого твердого вещества: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.66 (s, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.35 (s, 3H), 2.74 (s, 2H), 2.58 (s, 2H), 1.23(s, 6H).
Пример 105е 3-хлор-1-(5,5-диметил-5,6-дигидро-4H-циклопента[b]тиофен-2-ил)пропан-1-он 105е
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 105d (2.41 г, 10.0 ммоль) и безводный ТГФ (20 мл). Раствор охлаждали до -70°С и добавляли 1 М бромид винилмагния в ТГФ (11 мл, 11.0 ммоль) и поддерживали температуру реакции ниже -60°С. Реакционную смесь перемешивали при -13 - -7°С в течение 2 часов и затем нагревали до комнатной температуры в течение 30 минут. Реакционную смесь снова охлаждали до -70°С и добавляли 2 М раствор хлороводорода в диэтиловом эфире (22.5 мл, 45 ммоль). Затем реакционную смесь хранили в морозильной камере при -10°С в течение ночи. По прошествии указанного времени смесь выпаривали при пониженном давлении на роторном испарителе и полученный осадок разделяли между водой (100 мл) и диэтиловым эфиром (100 мл). Эфирный экстракт сушили над сульфатом натрия и выпаривали при пониженном давлении на роторном испарителе с получением неочищенного 105е (2.86 г, 118%) в виде коричневого масла с приблизительно 75% чистотой (с помощью ЯМР): 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.45 (s, 1Н), 3.89 (t, 2H, J=6.9 Гц), 3.30 (t, 2H, 7=6.9 Гц), 2.75 (s, 2H), 2.59 (s, 2H), 1.24 (s, 6H).
Пример 105f 6,6-диметил-1,2,6,7-тетрагидродициклопента[b,d]тиофен-3(5H)-он 105f
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали неочищенный 105е (2.86 г, 10.0 ммоль предположительно количественного выхода) и 98% серную кислоту. Реакционную смесь нагревали на 90°С масляной бане в течение ночи. Реакционную смесь помещали в баню лед/ацетон и добавляли одну порцию холодного (5°С) раствора гидроортофосфата калия (105 г, 0.603 моль) в воде (300 мл). Полученную смесь встряхивали с этилацетатом (300 мл) и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали этилацетатом (100 мл). Слой этилацетата фильтрата отделяли, сушили над сульфатом натрия и выпаривали при пониженном давлении на роторном испарителе. Полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 80:20 гексаны/этилацетат) с получением 105f с выходом 37% за две стадии (683 мг) в виде аморфного коричневого твердого вещества: тк 60-62°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 2.92-2.87 (m, 4H), 2.79 (s, 2H), 2.53 (s, 2H), 1.26 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 207.0 (M+H).
Пример 105g 6,6-диметил-1,2,6,7-тетрагидродициклопента[b,d]тиофен-3(5H)-он 105g
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали гидрохлорид гидроксиламина (688 мг, 9.90 ммоль), ацетат натрия (812 мг, 9.90 ммоль) и метанол (10 мл). Смесь оставляли при комнатной температуре на 30 минут. По прошествии указанного времени при комнатной температуре добавляли по каплям раствор 105f (680 мг, 3.30 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов в атмосфере азота. До завершения реакции добавляли гидрохлорид гидроксиламина (1.15 г, 16.5 ммоль) и ацетат натрия (1.35 г, 16.5 ммоль) и продолжали перемешивание при комнатной температуре в течение 58 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом (150 мл) и водой (100 мл) и слои разделяли. Органический слой промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали с получением неочищенного 105g в количественном выходе (730 мг) в виде желтого полутвердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки: тк 122-124°C; 1H ЯМР для основного изомера (500 МГц, CDCl3) δ 3.13-3.11 (m, 2Н), 2.85-2.83 (m, 2H), 2.77 (s, 2Н), 2.49 (s, 2Н), 1.24 (s, 6Н); MS (ESI+) m/z 222.0 (М+Н).
Пример 105h 6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 105h
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, механической мешалкой и подводом азота, помещали 105g (700 мг, 3.16 ммоль) и полифосфорную кислоту (25 г). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 13 часов в атмосфере азота. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до 0°C и добавляли по каплям воду (50 мл) осторожно поддерживая внутреннюю температуру между 10-45°C. Смесь разбавляли хлористым метиленом/метанолом 90:10 (100 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (50 мл) и объединенные органические слои промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (50 мл), солевым раствором (150 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 95:5 хлористый метилен/метанол) с получением 6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-она 105h с выходом 90% (630 мг) в виде аморфного беловатого твердого вещества: тк 205-207°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 5.51 (s, 1Н), 3.60-3.56 (m, 2H), 2.76-2.73 (m, 4H), 2.49 (s, 2H), 1.26 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 222.0 (M+H).
Пример 105i (2-бром-6-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}фенил)метилацетат 105i
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 105h (624 мг, 2.82 ммоль), 2,6-дибромбензилацетат 104g (1.73 г, 5.65 ммоль), карбонат цезия (1.84 г, 5.65 ммоль), N,N-диметилэтилендиамин (249 мг, 2.82 ммоль) и 1,4-диоксан (15 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли иодид меди (269 мг, 1.41 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×30 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 70:30 гексаны/этилацетат) с получением 105i с выходом 52% (660 мг) в виде белого твердого вещества: тк 126-128°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.60 (dd, J=7.5, 1.5 Гц, 1Н), 7.29-7.24 (m, 2H), 5.24 (s. 2H), 4.05-3.99 (m, 1Н), 3.78-3.74 (m, 1Н), 3.06-2.99 (m, 1H), 2.84-2.80 (m, 1Н), 2.77 (s, 2H), 2.52 (s, 2H), 2.05 (s, 3H), 1.27 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 448.0 (M+H).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 105i (250 мг, 0,558 ммоль), неочищенный 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 104h, полученный выше (400 мг, 0.951 ммоль, предположительно количественного выхода с предыдущей стадии), карбонат натрия (177 мг, 1.67 ммоль), ДМФА (2 мл), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут, добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (129 мг, 0.112 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 12 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом/метанолом 90:10 (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок растворяли в ТГФ (5 мл), воде (5 мл) и метаноле (5 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (117 мг, 2.79 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом/метанолом 90:10 (100 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×75 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 90:10 хлористый метилен/метанол) и с помощью препаративной ВЭЖХ (70:30 вода/ацетонитрил) с получением 105 с выходом 14% (42 мг) в виде аморфного беловатого твердого вещества: тк 252-254°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.18 (s, 1Н), 8.71 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.30 (d, J=6.0 Гц, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.47 (t, J=7.5 Гц, 1Н), 7.37-7.31 (m, 3H), 4.86-4.85 (m, 1H), 4.40-4.32 (m, 2H), 4.05-4.00 (m, 1H), 3.88-3.84 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.05-2.99 (m, 1H), 2.91-2.88 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.57-2.53 (m, 2H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 528.2 (M+H).
Пример 106 2-(3-(5-(5-циклопропил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 106
Пример 106 получали с применением тех же процедур, как и в примере 136е и примере 136, за исключанием применения 113а и 136d, с выходом 20 мг 106 в виде белого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 525 (M+Н).
Пример 107 2-(2-(гидpoкcимeтил)-3-(1-мeтил-5-(5-мopфoлинoпиpидин-2-илaминo)-6-oкco-1,6-дигидpoпиpидин-3-ил)фeнил)-3,4,6,7,8,9-гeкcaгидpoпиразино[1,2-a]индол-1(2Н)-он 107
Пример 107 получали с применением тех же процедур, как и в примере 301 с применением 255с и 114а в качестве исходного материала с выходом 122 мг 107 в виде белого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 581 (М+Н).
Пример 108 2-(3-(5-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 108
Пример 108а 2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин 108а
В герметичную пробирку, снабженную магнитной мешалкой, помещали 0.5М аммиачный раствор (200 мл) 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1H-пиразола 101с (4 г, 12.9 ммоль) в диоксане. Полученную смесь осторожно нагревали до 50°С в течение ночи. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к осадку добавляли Н2О (50 мл) и ЕtOАс (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали ЕtOАс (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 100% выхода (2.1 г) неочищенного 2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразина 108а.
Пример 108b 1-(2-нитро-6,7-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-5(4Н)-ил)этанон 108b
В круглодонную колбу емкостью 200 мл помещали 2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин 108а (2.1g, 12.9 ммоль), триэтиламином (5.5 мл, 38.7 ммоль), ацетилхлорид (1.1 мл, 15.5 ммоль) и СН2Сl2 (100 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к осадку добавляли H2O (50 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали ЕtOАс (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл). Объединенные водные экстракты обратно экстрагировали смесью 9:1 СН2Сl2:МеОН (2×50 мл). Объединенные органические вещества сушили над сульфатом натрия. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом СН2Сl2 - 9:1 CH2Cl2:MeOH с получением 84% выхода (2.3 г) 1-(2-нитро-6,7-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-5(4Н)-ил)этанона 108b.
Пример 108с 1-(2-амино-6,7-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-5(4Н)-ил)этанон 108с
В бутыль для гидрирования Парра емкостью 500 мл помещали 1-(2-нитро-6,7-дигидро-пиразоло[1,5-а]пиразин-5(4Н)-ил)этанон 108b (2.3 г, 10.9 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 570 мг в пересчете на сухую массу) и этанол (100 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 2 часов на устройстве для гидрирования Парра. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита 521, промывая смесью 1:1 СН2Сl2:МеОН (500 мл). Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 95% выхода (1.9 г) неочищенного 1-(2-амино-6,7-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-5(4Н)-ил)этанона 108с.
Пример 108d 3-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 108d
Герметичную пробирку снабжали магнитной мешалкой и помещали в нее 1-(2-амино-6,7-дигидропиразоло[1,5-а]пиразин-5(4Н)-ил)этанон 108 с (860 мг, 4.8 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.8 г, 6.7 ммоль) и карбонат цезия (3.4 г, 10.5 ммоль) в 1,4-диоксане (67 мл). После барботирования указанного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (330 мг, 0.6 ммоль) и трис(дибензилиденацетон) дипалладия(0) (300 мг, 0.3 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени добавляли Н2O (50 мл) и ЕtOАс (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали ЕtOАс (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 41% выхода (720 мг) 3-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-она 108d.
Пример 108е 2-(5-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 108е
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 3-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 108d (120 мг, 0.3 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (200 мг, 0.4 ммоль), ДМЭ (4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1 мл). После барботирования азотом в течение 15 минут добавляли Рd(РРh3)4 (19 мг, 0.02 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 15 минут.По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали ЕtOАс (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом СН2Сl2 - 60:35:5 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 33% выхода (69 мг) 2-(5-(5-ацетил-4,5,б,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 108е.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой помещали 2-(5-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 108е (69 мг, 0.11 ммоль), гидроксид лития (8 мг, 0.3 ммоль), ТГФ (1 мл), изо-РrОН (1 мл) и воду (2 мл). Смесь перемешивали при кг в течение 2 часов. По прошествии указанного времени добавляли EtOAc (3 мл) и воду (3 мл). Отделенный водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом СН2Сl2 - 7 смесью 5:18:7 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 63% выхода (40 мг) 2-(3-(5-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1 (2Н)-она 108. MS (ESI+) m/z 582.3 (M+Н).
Пример 109 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 109
Пример 109а 2-бром-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 109а
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 101k (720 мг, 3.78 ммоль), 2,6-дибромбензилацетат 104g (2.33 г, 7.57 ммоль), карбонат цезия (2.47 г, 7.57 ммоль), N,N’-диметилэтилендиамин (333 мг, 3.78 ммоль) и 1,4-диоксан (31 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли иодид меди (360 мг, 1.89 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С (температура масляной бани) в течение 3 дней. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (200 мл) и водой (40 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматограф и с получением 31% выхода (490 мг) 2-бром-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата109а.
Пример 109b 5-бром-1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)пиридин-2(1Н)-он 109b
Раствор пиримидин-4-амина (2.0 г, 21 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (6.2 г, 23.1 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (0.96g, 1.1 ммоль), Ксантфоса (1.03 г, 1.79 ммоль) и карбоната цезия (7.5 г, 23 ммоль) в диоксане (25 мл) нагревали в герметичной пробирке при 130°С в течение 18 часов. Смесь разбавляли СН2Сl2 (100 мл) и фильтровали через пробки из Целита. Раствор концентрировали в вакууме на роторном испарителе. Затем материал растворяли в минимальном количестве СН2Сl2 (5 мл) и измельчали с Et2O (80 мл). Затем продукт фильтровали и промывали Et2O (100 мл) с получением 2.9 г (49%) 109b.
Пример 109с 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 109с
Раствор 5-бром-1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)пиридин-2(1Н)-она 109b (600 мг, 2.13 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолана) (596 мг, 2.35 ммоль), [1,1'-Бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(И), комплекса с дихлорметаном (174 мг, 0.213 ммоль), ацетата калия (628 мг, 6.40 ммоль) в диоксане (4.5 мл) герметизировали в пробирке для микроволнового реактора и нагревали до 130°С в течение 10 минут. Раствор фильтровали через пробки из Целита и концентрировали. Неочищенный 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 109с применяли на следующей стадии без очистки.
Раствор 109с (неочищенный, 2.13 ммоль), 109а (300 мг, 0.719 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (83 мг, 0.0719 ммоль) и карбоната натрия (229 мг, 2.16 ммоль) в диоксане (4.5 мл) и воды (2.3 мл) герметизировали в пробирке для микроволнового реактора и нагревали до 130°С в течение 10 минут. Органический слой отделяли от водного и фильтровали через пробки из Целита. Затем материал адсорбировали на Целит и очищали посредством хроматографии на силикагеле с применением 0-100% этилацетата в гексанах, с последующим переходом на 0-15% метанол в дихлорметане с получением 105 мг (27%) 109.
Пример 110 2-(3-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 110
Пример 110а 2-нитро-6,7-дигидро-4H-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин 110а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 101с (3.00 г, 9.59 ммоль) и 4М водную бромоводородную кислоту (120 мл) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 24 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении до приблизительно объема в 6 мл и остаток перемешивали в 2М водном гидроксиде натрия (40 мл) в течение 2 часов. По прошествии указанного времени добавляли хлористый метилен (40 мл) и смесь перемешивали в течение 15 минут. Водный слой отделяли и экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 62% выхода (1.01 г) 110а в виде белого твердого вещества: тк 110-112°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) 6.68 (s, 1Н), 4.87 (s, 2H), 4.28 (t, 2H, J=5.4 Гц), 4.20 (t, 2H, J=5.1 Гц); MS (ESI+) m/z 170.0 (M+H).
Пример 110b 6,7-дигидро-4H-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-амин 110b
Бутыль для гидрирования Парра емкостью 500 мл продували азотом и помещали в нее 110а (1.01 г, 5.92 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 125 мг в пересчете на сухую массу) и этанол (50 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 25 psi и встряхивали в течение 2 часов на устройстве для гидрирования Парра. Затем откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита 521 и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с применением 400 см3 силикагеля и элюировали 3% метанолом в хлористом метилене. После концентрирования при пониженном давлении фракции, содержащие 110b, собирали с получением 73% выхода (601 мг) 110b в виде желтого твердого вещества: тк 74-76°С 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 5.37 (s, 1Н), 4.72 (s, 2H), 4.07 (t, 2H, J=5.1 Гц). 3.98 (t, 2H, J=5.1 Гц), 3.57 (br s, 2H); MS (ESI+) m/z 140.4 (M+H).
Пример 110с 5-бром-3-(6,7-дигидро-4H-пиразоло[5,1-с][1,4]окзапин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 110с
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником и подводом азота, помещали 1,4-диоксан (20 мл), 110b (600 мг, 4.31 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.44 г, 5.40 ммоль) и карбонат цезия (3.08 г, 9.48 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (300 мг, 0.52 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (320 мг, 0.35 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между этилацетатом (75 мл) и водой (75 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×25 мл). Органические слои объединяли и промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с применением 500 см3 силикагеля и элюирования 1% метанолом в хлористом метилене. После концентрирования при пониженном давлении фракции, содержащие 110с, собирали с получением 31% выхода (433 мг) 110 с в виде зеленого твердого вещества: тк 195- 197°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) 7.92 (d, 1Н, J=2.4 Гц), 7.44 (s, 1H), 6.90 (d, 1H, J=2.4 Гц), 5.65 (s, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.13 (s, 2H), 3.61 (s, 5H); MS (ESI+) m/z 324.9 (M+H).
Пример 110d 2-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-е][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,б-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 110d
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 5-бром-3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 110 с (130 мг, 0.4 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (220 мг, 0.5 ммоль), ДМЭ (4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1.2 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Рd(РРh3)4 (23 мг, 0.02 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 20 минут. По прошествии указанного времени добавляли EtOAc (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 89% выхода (210 мг) 110d.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой помещали 110d (210 мг, 0.4 ммоль), гидроксид лития (45 мг, 1.1 ммоль), ТГФ (3.6 мл), изо-РrОН (3.6 мл) и воду (7.2 мл). Смесь перемешивали при кг в течение 3 часов. По прошествии указанного времени добавляли EtOAc (10 мл) и воду (10 мл). Отделенный водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом СН2Сl2 - 60:35:5 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 57% выхода (110 мг) 110. MS (ESI+) m/z 541.3 (M+Н).
Пример 111 5-[2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-5-оксо-6-(пиридин-3-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 111
Пример 111a 2-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 111а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 104f (1.18 г, 2.72 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан (2.04 г, 8.16 ммоль), ацетат калия (800 мг, 8.16 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл). Поток азота пропускали через полученную суспензию в течение 30 минут.Затем добавляли [1,1-Бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II) (398 мг, 0.544 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 8 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между водой (25 мл) и этилацетатом (50 мл) и фильтровали через пробки из Целита 521. Органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматограф и с получением 77% выхода (1.01 г) 111a в виде коричневого твердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.81 (d, 1Н, J=7.0 Гц), 7.41 (t, 1H, J=7.0 Гц), 7.37 (d, 1H, J=7.0 Гц), 5.49 (d, 1H, J=11.5 Гц), 5.23 (d, 1H. J=11.5 Гц), 4.01 (m, 1H), 3.76 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.81-2.75 (m, 3H), 2.50 (m, 2H), 1.99 (s, 3H), 1.86 (m, 4H), 1.33 (s, 12H); MS (ESI+) m/z 482.2 (M+H).
Пример 111b 5-бром-1-метил-3-(пиридин-3-иламино)пиразин-2(1H)-он 111b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником и подводом азота, помещали ТГФ (15 мл), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-он (1.00 г, 3.73 ммоль), 3-аминопиридин (351 мг, 3.73 ммоль) и трет-бутоксид натрия (789 мг, 8.21 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли ди-мю-бромобис(три-т-бутилфосфино)дипалладий(I) (29 мг, 0.037 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2.5 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разделяли между этилацетатом (50 мл) и водой (50 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×25 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 35% выхода (370 мг) 111b в виде коричневого твердого вещества: тк>250°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.75 (s, 1H), 9.08 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.32 (m, 1H), 8.24 (dd, 1H, J=5.0, 1.5 Гц), 7.40 (s, 1H), 7.36 (dd, 1H, J=8.5, 4.5 Гц), 3.45 (s, 3H); MS (APCI+) m/z 281.0 (M+H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 111a (134 мг, 0.279 ммоль), 111b (71 мг, 0.253 ммоль), карбонат натрия (80 мг, 0.759 ммоль), 1,4-диоксан (5 мл) и воду (1 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия (29 мг, 0.025 ммоль). После нагревания при 100°С в течение 3 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли карбонат калия (500 мг, 3.62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов, реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 111с выходом 38% (49 мг) в виде белого твердого вещества: тк 164-165°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.54 (s, 1H), 9.14 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.42 (m, 1H), 8.18 (dd, 1H, J=4.5, 1.5 Гц), 7.54 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.49-7.46 (m, 2H), 7.34 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.30 (dd, 1H, J=8.0, 4.5 Гц), 4.81 (m, 1H), 4.49 (dd, 1H, J=11.0, 3.5 Гц), 4.43 (dd, 1H, J=11.0, 6.5 Гц), 4.02 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 2.95 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.58-2.46 (m, 2H), 1.79 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 514.2 (M+H).
Пример 112 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 112
Пример 112а 5-бром-1-метил-3-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 112а
В герметичную пробирку емкостью 250 мл с магнитной мешалкой помещали 5-метил-1H-пиразол-3-амин (0.91 г, 9.36 ммоль), 3,5-дибром-1-метил-1Н-пиридин-2-он (2.1 г, 7.87 ммоль), карбонат цезия (7.6 г, 23.56 ммоль) и 1,4-диоксан (78 мл). После дегазирования в течение 10 минут добавляли трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0.72 г, 0.8 ммоль) и Ксантфос (0.91g, 1.57 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 115°С в течение 48 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между дихлорметаном (50 мл) и водой (30 мл). Органическую фазу отделяли, и водный слой экстрагировали дихлорметаном (3×30 мл). Объединенные органические фазы сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 9:1 хлористый метилен/метанол) с получением 85% выхода (1.88 г) 112a в виде твердого вещества: MS (ESI+) m/z 285.0 (М+Н).
В виалу для микроволнового реактора емкостью 10 мл с магнитной мешалкой помещали 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (181 мг, 0.39 ммоль), 112a (85 мг, 0.3 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (1.2 мл, 1.2 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (3 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 10 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (18 мг, 0.015 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 10 минут в микроволновом реакторе. Затем добавляли этилацетат (10 мл) и воду (5 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×10 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) с получением 100 мг смеси 112b и 112 в виде желтого остатка. Остаток растворяли в смеси ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл) и изопропанола (1 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (31 мг, 0.74 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом/метанолом 90:10 (10 мл) и водой (5 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×10 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) с получением 18% выхода (две стадии, 28 мг) 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она 112 в виде белого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 499.3 (М+Н).
Пример 113 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 113
Пример 113а 2-бром-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидро-1Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил)-бензиловый эфир уксусной кислоты 113а
В герметичную пробирку емкостью 350 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 3,4,6,7,8,9-гексагидро-2Н-пиразино[1,2-а]индол-1-он 101k (5.0 г, 0.026 моль), 2,6-дибромбензилацетат 104g (16.2 г, 0.052 моль) N,N'-диметилэтилендиамин (2.6 мл, 0.026 моль), Сs2СО3 (17.0 г, 0.052 моль) и 1,4-диоксан (80 мл). После пропускания потока азота через полученную суспензию в течение 30 минут добавляли CuI (2.5 г, 0.013 моль) и полученную реакционную смесь перемешивали при 95°С в течение 16 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между EtOAc (50 мл) и водой (50 мл) и органическую фазу экстрагировали EtOAc (30 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (20 мл × 2) и солевым раствором (20 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:МеОН, 97:3) с получением 35% выхода (4.5 г) 113а в виде белого твердого вещества.
Пример 113b 2-{1-метил-5-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидро-пиридин-3-ил}-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидро-1Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил)-бензиловый эфир уксусной кислоты 113b
В стеклянный сосуд емкостью 10 мл, снабженный якорем магнитной мешалки помещали 1-метил-3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диокса-боролан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он 197Т (210 мг, 0.49 ммоль), 113а (250 мг, 0.60 ммоль), Рd(РРh3)4 (50 мг, 0.043 ммоль) в 2 N Na2CO3 (2 мл) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл). Сосуд герметизировали мембраной и помещали в углубление микроволнового реактора. После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 7 минут ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 85:15) с получением 34% (105 мг) 2-{1-метил-5-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидро-пиридин-3-ил}-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидро-1Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил)-бензилового эфира уксустной кислоты 113b в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 113b (105 мг, 0.17 ммоль), LiOH⋅H2O (35 мг, 0.83 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол (2 мл) и воду (1 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 80% выхода (79 мг) 2-(2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидро-пиридин-3-ил}-фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-2Н-пиразино[1,2-а]индол-1-она 113; MS (ESI+) m/z 594.3 (М+Н).
Пример 114 2-(3-(6-(1-циклопропил-1Н-пиразол-4-иламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1 (2Н)-он 114
Пример 114а 2-(2-(ацетоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 114а
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 2-(3-бром-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 113а (1.96 г, 4.70 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2',-ди(1,3,2-диоксаборолан) (1.79 г, 7.05 ммоль), Cl2Pd(dppf)2⋅CH2Cl2 (306.9 мг, 0.376 ммоль), КОАс (4.77 г, 18.79 ммоль) и диоксан (33.6 мл). Смесь нагревали при 95°C в течение ночи. Полученную смесь фильтровали через Целит, промывали этилацетатом (200 мл). Органическую фазу промывали водой (50 мл), сушили над MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме с получение неочищенного продукта 114а, который непосредственно использовали в качестве исходного материала других синтезов.
Пример 114b 5-бром-3-(1-циклопропил-1Н-пиразол-4-иламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он 114b
В герметичную пробирку, снабженную магнитным якорем, добавляли 1-циклопропил-1Н-пиразол-4-амин (600 мг, 4.87 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-он (1.96 г, 7.31 ммоль), Pd2(dba)3 (223.1 мг, 0.244 ммоль), Ксантфос (225.5 мг, 0.390 ммоль), Cs2CO3 (5.25 г, 16.08 ммоль) и диоксан (12 мл). Пробирку герметизировали и нагревали при 100°C в течение ночи. К полученной смеси добавляли CH2Cl2 (200 мл) и раствор CH2Cl2 промывали водой (30 мл×3). Осадок в водной фазе фильтровали в качестве чистого продукта 114b. Органическую фазу сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. К осадку добавляли СН2Сl2/диэтиловый эфир (1:2, 3 мл) и смесь обрабатывали ультразвуком. Осадок фильтровали, объединяли с твердыми веществами из водной фазы и сушили. Получили 5-бром-3-(1-циклопропил-1Н-пиразол-4-иламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он 114b в виде желтого твердого вещества.
Пример 114с 2-(6-(1-циклопропил-1Н-пиразол-4-иламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил) бензилацетат 114с
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 114b (200 мг, 0.645 ммоль), 114а (0.903 ммоль), водный раствор Рd(РРh3)4, Nа2СО3 (1.0 N, 2.13 мл, 2.13 ммоль), ДМЭ (2.0 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 135°С в течение 15 минут. Добавляли ДХМ (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии с силикагелем (МеОН:ДХМ=5:95) получали 2-(6-(1-циклопропил-1Н-пиразол-4-иламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 114с, который непосредственно был использован на следующей стадии.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 114с ТГФ (1.25 мл), изо-РrOН (1.25 мл), Н2O (1.25 мл), LiOH H2O (135 мг). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Весь растворитель удаляли в вакууме и в результате колоночной хроматографии с силикагелем (МеОН:ДХМ=10:90) получали 38.6 мг 2-(3-(6-(1-циклопропил-1Н-пиразол-4-иламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-(гидроксиметил)-фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она 114 в виде желтого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 526.3 (М+Н).
Пример 115 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 115
Пример 115b трет-Бутил(2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилокси)диметилсилан 115b
В герметичную пробирку с магнитной мешалкой, помещали 104е (1.11g, 5.37 ммоль), 115а (4.24g, 10.7 ммоль), карбонат цезия (3.49g, 10.7 ммоль), N,N'-диметилэтилендиамин (0.47g, 5.37 ммоль) и 1,4-диоксан (45 мл). После дегазирования в течение 10 минут, добавляли иодид меди (0.51g, 2.68 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С в течение 2 дней. Добавляли другую порцию N,N'-диметилэтилендиамина (0.47g, 5.37 ммоль) и иодида меди (0.51g, 2.68 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С в течение дополнительных 5 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (50 мл) и водой (40 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, Этилацетат/Гексаны) с получением 40% выхода (1.14 г) соединения 115b в виде желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 524.1 (M+H).
В виалу для микроволнового реактора емкостью 10 мл с магнитной мешалкой помещали 115b (157 мг, 0.3 ммоль), 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 109с (148 мг, 0.45 ммоль), раствор 1М карбоната натрия (1.2 мл, 1.2 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (3 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 10 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (18 мг, 0.015 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. Реакцию повторяли в том же масштабе и реакционную смесь объединяли. Добавляли этилацетат (20 мл) и воду (10 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×10 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором, и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) с получением 400 мг смеси соединений 115с и 115 в виде желтого остатка. Указанный остаток растворяли в метаноле (5 мл), добавляли 10-камфорсульфокислоту (350 мг, 1.5 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. По прошествии указанного времени смесь подщелачивали насыщенным бикарбонатом натрия. Водный слой экстрагировали хлористым метиленом (2×10 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором, и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, Этилацетат/Гексаны) с получением 33% выхода (88 мг) соединения 115 в виде бледно-желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 532.2 (М+Н).
Пример 116 5-[3-(6-{[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 116
Пример 116а 1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-4-нитро-1H-пиразол 116а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником и магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 4-нитро-1H-пиразол (500 мг, 4.42 ммоль), (2-бромэтокси)(трет-бутил)диметилсилан (2.12 г, 8.85 ммоль), карбонат цезия (5.76 г, 17.7 ммоль) и безводный ДМФА (5 мл). После нагревания при 70°С в течение 1 часа смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли хлористым метиленом (50 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (2×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 92% выхода (1.11 г) 116а в виде белого твердого вещества: тк 63-64°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.20 (s, 1Н), 8.08 (s, 1H), 4.24 (t, 2H, J=4.5 Гц), 3.95 (t, 2H, J=4.5 Гц), 0.84 (s, 9H), -0.04 (s, 6H).
Пример 116b 1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-1H-пиразол-4-амин 116b
Бутыль реактора Парра емкостью 250 мл продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 150 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 116а (1.11 г, 4.10 ммоль) в этаноле (20 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 3 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (1.00 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×25 мл), и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением 100% выхода 116b (985 мг) в виде оранжевого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.18 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.09 (t, 2H, J=5.5 Гц), 3.89 (t, 2H, J=5.5 Гц), 3.25 (br s, 2H), 0.86 (s, 9H), -0.32 (s, 6H). MS (ESI+) m/z 242.2 (M+H).
Пример 116с 5-бром-3-(1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-1H-пиразол-4-иламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он 116с
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 116b (400 мг, 1.66 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-он (443 мг, 1.66 ммоль), карбонат цезия (1.19 г, 3.65 ммоль) и 1,4-диоксаном (20 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут, добавляли Ксантфос (144 мг, 0.249 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (152 мг, 0,166 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и фильтрационный остаток промывали хлористым метиленом (2×20 мл). Фильтраты объединяли и концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 51% выхода (353 мг) 116с в виде желтого твердого вещества: тк 172-173°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.17 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.70 (s. 1H), 4.28 (t, 2H, J=5.0 Гц), 3.97 (t, 2H, J=5.5 Гц), 3.51 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), -0.79 (s, 6H); MS (APCI+) m/z 428.3 (M+H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 116с (150 мг, 0.312 ммоль). 111a (133 мг, 0.312 ммоль), карбонат натрия (99 мг, 0.936 ммоль), 1,4-диоксан (5 мл) и воду (1 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис-(трифенилфосфин)палладий (36 мг, 0.031 ммоль). После нагревания при 100°С в течение 3 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли карбонат калия (500 мг, 3.62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток повторно растворяли в ТГФ (5 мл) и добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (500 мг, 1.58 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 часов растворитель удаляли при пониженном давлении и полученный осадок промывали водой (10 мл). Полученное твердое вещество очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 116 с выходом 27% (47 мг) в виде беловатого твердого вещества: тк 171-172°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.56 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.58 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.44 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.33-7.32 (m, 2H), 4.86 (m, 1H), 4.81 (t, 1Н, J=5.5 Гц), 4.51 (dd, 1H, J=11.0, 6.5 Гц), 4.44 (dd, 1H, J=11.0, 6.5 Гц), 4.06 (t, 2H, J=5.5 Гц), 4.02 (m, 1H), 3.68 (t, 2H, J=5.5 Гц), 3.88 (m, 1H), 3.68 (q, 2H, J=5.5 Гц), 3.52 (s, 3H), 2.98 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.58-2.46 (m, 2H), 1.79 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 547.2 (M+H).
Пример 117 2-(2-метил-3-(5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-2,3,4,9-тетрагидро-1Н-пиридо[3,4-b]индол-1-он 117
Пример 117а 9-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2,3,4,9-тетрагидро-1H-пиридо[3,4-6]индол-1-он 117а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом, и помещали в нее безводный ДМФА (4 мл) и 60% дисперсию гидрида натрия в минеральном масле (181 мг, 4.52 ммоль), и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Добавляли 1,2,3,4-тетрагидро-1-оксо-бета-карболин (841 мг, 4.52 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 15 минут. По прошествии указанного времени добавляли 2-(триметилсилил)этоксиметил хлорид (829 мг, 4.97 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 часа. Затем реакционную смесь разделяли между водой (10 мл) и этилацетатом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 117а с выходом 57% (818 мг) в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.67 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.65 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.46 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.27 (t, 1H, J=8.0 Гц), 6.14 (s, 2H), 5.72 (br s, 1H), 3.75 (t, 2H,.7=7.0 Гц), 3.66 (t, 2H, 7=8.0 Гц), 3.14 (t, 2H, J=7.0 Гц), 0.96 (t, 2H, J=8.0 Гц), -0.25 (s, 9H).
Пример 117b 2-(3-бром-2-метилфенил)-9-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2,3,4,9-тетрагидро-1H-пиридо[3,4-b]индол-1-он 117b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 117а (400 мг, 1.27 ммоль), 2,6-дибромтолуол (633 мг, 2.53 ммоль), карбонат цезия (828 мг, 2.54 ммоль), N-метилэтилендиамин (112 мг, 1.27 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли иодид меди (121 мг, 2.54 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью флэш-колонки с получением 117b с выходом 41% (251 мг) в виде желтого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.71 (d, 1Н,У=8.0 Гц), 7.68 (d, 1Н, J=8.0 Гц), 7.63 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.47 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.32-7.28 (m, 2H), 7.21 (t, 1H, J=8.0 Гц), 6.13 (s, 2H), 4.15 (m, 1H), 3.93 (m, 1H), 3.69 (m, 2H), 3.29 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 0.95 (t, 2H, J=8.0 Гц), -0.07 (s, 9H).
Пример 117с 2-(2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-9-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2,3,4,9-тетрагидро-1H-пиридо[3,4-6]индол-1-он 117с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником и подводом азота, помещали 117b (250 мг, 0.515 ммоль), 4,4,4',4',-5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан (157 мг, 0.619 ммоль), ацетат калия (152 мг, 1.55 ммоль) и 1,4-диоксан (5 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли [1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладий(II)/СН2Сl2 (38 мг, 0.052 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 95°С в течение 5 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и водой (20 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 117с с выходом 97% (242 мг) в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.85 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.72 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.68 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.46 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.39-7.28 (m, 2H), 7.21 (t, 1H, J=8.0 Гц), 6.19 (d, 1H, J=10.5 Гц), 6.15 (d, 1H, J=10.5 Гц), 4.16 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 3.68 (m, 2H), 3.29 (m, 2H), 2.45 (s, 3H), 0.95 (t, 2H, J=8.0 Гц), 1.34 (s, 12H), -0.07 (s, 9H).
Пример 117d 4-бром-6-хлор-2-((2-(триметилсилил)этокси)метил)пиридазин-3(2H)-он 117d
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее безводный ДМФА (150 мл) и 4-бром-6-хлорпиридазин-3(2Н)-он (10.0 г, 47.8 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли гидрид натрия. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 20 минут. По прошествии указанного времени добавляли 2-(триметилсилил)этоксиметил хлорид (11.9 г, 71.6 ммоль) и удаляли охлаждающую баню, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем реакцию гасили насыщенным водным бикарбонатом натрия (30 мл). Смесь экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 117d с выходом 56% (9.00 г) в виде желтого масла: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 8.02 (s, 1Н), 5.42 (s, 2H), 3.79 (t, 2H, J=5.4 Гц), 0.96 (t, 2H, 7=5.4 Гц), 0.01 (s, 9Н).
Пример 117е 6-хлор-4-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-2-((2-(триметилсилил)этокси)метил)пиридазин-3(2H)-он 117е
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 117d (1.12 г, 3.29 ммоль), 103е (500 мг, 3.29 ммоль), карбонат цезия (3.22 г, 9.87 ммоль) и 1,4-диоксан (25 мл). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут, добавляли Ксантфос (286 мг, 0.494 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (301 мг, 0.329 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (30 мл) и хлористым метиленом (60 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (60 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия и фильтровали, и растворитель удаляли от фильтрата при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 72% выхода (977 мг) 117е в виде желтого твердого вещества: тк 68-69°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.85 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 5.70 (s, 1H), 5.47 (s, 2H), 4.16 (t, 2H, J=5.5 Гц), 3.73 (m, 2H), 3.63 (s, 2H), 2.94 (t, 2H, J=5.5 Гц), 2.51 (s, 3H), 0.98 (m, 2H), 0.12 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 411.2 (M+H).
Пример 117f 2-(2-метил-3-(5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-9-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-2,3,4,9-тетрагидро-1H-пиридо[3,4-6]индол-1-он 117f
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником и подводом азота, помещали 1,4-диоксан (5 мл), воду (1 мл) и карбонат натрия (143 мг, 1.35 ммоль). После барботирования полученной смеси азотом в течение 30 минут добавляли 117с (240 мг, 0.451 ммоль), 117е (185 мг, 0.451 ммоль) и тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (52 мг, 0.045 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (25 мл) и хлористым метиленом (50 мл). Органический слой отделяли, промывали солевым раствором (75 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении до темного масла, которое очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 89% выхода (315 мг) 117f в виде желтого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.88 (s, 1H), 7.66 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.45 (m, 3H), 7.39 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.34 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.24 (t, 2H, J=8.0 Гц), 6.12 (d, 1H, J=10.5 Гц), 6.05 (d, 1H, J=10.5 Гц), 5.69 (s, 1H), 5.63 (d, 1H, 7=10.5 Гц), 5.52 (d, 1H, J=10.5 Гц), 4.09 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.75 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 3.59 (m, 2H), 3.26-3.17 (m, 4H), 2.61 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 0.98 (t, 2H, J=8.0 Гц), 0.85 (t, 2H, J=8.0 Гц), -0.01 (s, 9H), -0.07 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 781.4 (M+H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 117f (315 мг, 0.404 ммоль), анизол (438 мг, 4.04 ммоль), хлористый метилен (3 мл) и трифторуксусную кислоту (3 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь концентрировали, и полученный осадок разделяли между 1 М водным дигидроортофосфатом калия (10 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×10 мл). Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 117 с выходом 23% (49 мг) в виде белого твердого вещества: тк 254°С с разложением; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 12.97 (s, 1H), 11.74 (s, 1H), 9.21 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.65 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.44-7.37 (m, 3H), 7.34 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.26 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.08 (t, 1H, J=8.0 Гц), 5.75 (s, 1H), 4.17 (m, 1H), 3.97 (t, 2H, J=5.0 Гц), 3.84 (m, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.17 (m, 2H), 2.79 (t, 2H, J=5.0 Гц), 2.35 (s, 3H), 2.18 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 521.2 (M+H).
Пример 118 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2Н)-он 118
Пример 118а метил-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-2-карбоксилат 118а
Круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-2-карбоновую кислоту (30.4 г, 184 ммоль), ДМФА (1.00 г, 13.6 ммоль) и хлористый метилен (300 мл). Раствор охлаждали до 0°С с применением ледяной бани. Добавляли по каплям оксалил хлорид (28.0 г, 221 ммоль) и реакционную смесь нагревали до комнатной температуры в течение 30 минут и перемешивали в течение 5 часов. По прошествии указанного времени полученный раствор концентрировали с получением коричневого твердого вещества. Указанное твердое вещество растворяли в безводном метаноле (400 мл) и раствор охлаждали до 0°С. К реакционной смеси добавляли триэтиламин (57 г, 552 ммоль) и перемешивали ее в течение дополнительных 2 часов при комнатной температуре. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении. Остаток разбавляли хлористым метиленом (300 мл) и промывали водой (200 мл) и насыщенным водным бикарбонатом натрия (200 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок титровали с гексаном (200 мл) с получением 118а с выходом 58% (19.1 г) в виде белого твердого вещества: тк 72-74°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 7.13 (s, 1H). 6.23 (s, 1H), 3.93 (t, 2H, 7=6.0 Гц), 3.77 (s, 3H), 2.75 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.93 (m, 2H), 1.80 (m, 2H); (APCI+) m/z 180.1 (M+H).
Пример 118b Метил-3-(пианометил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-2-карбоксилат 118b
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную дополнительной воронкой, термометром, помещали 118а (6.70 г, 37.4 ммоль), иодацетонитрил (12.5 г, 74.9 ммоль), сульфатированный гептагидрат железа(II) (5.20 г, 18.7 ммоль) и диметилсульфоксид (250 мл). К смеси в течение через поршневой насос 1 часа добавляли по каплям перекись водорода (35%, 18.2 г, 187 ммоль) при комнатной температуре с применением водяной бани. К реакционной смеси породами добавляли гептагидрат сульфата железа(II) (от 2 до 3 эквивалентов) с поддержанием температуры от 25°С до 35°С до изменения цвета реакционную смесь на темно-красный. Если ТСХ показывала, что реакция не завершена, тогда добавляли больше перекиси водорода (2-3 эквивалент) и таким же образом добавляли больше гептагидрата сульфата железа(II) (1-2 эквивалентов) до завершения реакции. По прошествии указанного времени реакционную смесь разделяли между насыщенным раствором бикарбоната натрия (200 мл) и этилацетата (400 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором тиосульфата натрия (50 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 78% выхода (6.40 г) 118b в виде желтого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 6.23 (s, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.94 (t, 2H, J=6.5 Гц), 3.81 (s, 3H), 2.74 (t, 2H, J=6.5 Гц), 2.00 (m, 2H), 1.83 (m, 2H); (APCI+) m/z 219.3 (M+H).
Пример 118с гидрохлоридная соль метил-3-(2-аминоэтил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-2-карбоксилата 118с
Промежуточное соединение 118b гидрировали с катализатором из оксида платины под давлением 50 psi водорода в этаноле и этилацетате в присутствии хлороводорода в течение ночи при комнатной температуре с получением 118с (380 мг, 1.74 ммоль), которое применяли непосредственно на следующей стадии.
Пример 118d 3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2H)-он 118d
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее гидрохлоридную соль метил-3-(2-аминоэтил)-5,6,7,8-тетрагидроиндолизин-2-карбоксилата 118с (расчетные 1.74 ммоль, предположительно количественного выхода), этилат натрия (354 мг, 5.22 ммоль) и этанол (20 мл). Смесь перемешивали при 55°С в течение 5 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток разделяли между этилацетатом (200 мл) и водой (100 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 67% выхода (220 мг) 118d в виде белого твердого вещества: тк 195-197°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 6.76 (s, 1H), 5.89 (s, 1H), 3.78 (t, 2H, J=6.5 Гц), 3.35 (m, 2H), 2.66 (m, 4H),1.87 (m, 2H), 1.72 (m, 2H); (APCI+) m/z 191.3 (M+H).
Пример 118е 2-бром-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-2(1H)-ил)бензилацетат 118е
Трехогорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 118d (1.50 г, 7.89 ммоль), 2,6-дибромбензилацетат 104g (4.80 г, 15.7 ммоль), карбонат цезия (5.11 г, 15.7 ммоль), N,N’-диметилэтилендиамин (695 мг, 7.89 ммоль) и 1,4-диоксан (100 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 20 минут добавляли иодид меди (752 мг, 3.95 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 95°С (температура масляной бани) в течение 12 часов. И затем добавляли N,N'-диметилэтилендиамин (695 мг, 7.89 ммоль) и иодид меди (752 мг, 3.95 ммоль), и нагревали при 95°С в течение дополнительных 12 часов, повторяли указанную процедуру до превращения большего количества 118d в 118е, примерно 48 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (300 мл) и водой (100 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 27% выхода (905 мг) 118е в виде беловатого твердого вещества: тк 176-178°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 7.64 (dd, 1H, J=7.5, 1.8 Гц), 7.37 (m, 2H), 5.99 (s, 1H), 5.00 (d, 2H, J=6.0 Гц), 4.00 (m, 1H), 3.85 (m, 2H), 3.62 (m, 1H), 2.93 (t, 2H, J=6.1 Гц), 2.67 (t, 2H, J=6.1 Гц), 2.00 (d, 3H, J=6.0 Гц), 1.90 (m, 2H), 1.75 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 417.0 (M+H).
Пример 118f 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-2(1H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 118f
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 118е (1.20 г, 2.88 ммоль), 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (2.20 г, 8.65 ммоль), ацетат калия (1.13 г, 11.5 ммоль) и 1,4-диоксан (50 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 20 минут добавляли [1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II) (210 мг, 0.288 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 95°С в течение 8 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали этилацетатом (40 мл). Фильтрат разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (40 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 100% выхода (1.35 г) неочищенного 118f в виде желтого масла.
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 118f (400 мг, 0.862 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)пиридин-2(1Н)-он 109b (241 мг, 0.862 ммоль), карбонат натрия (365 мг, 3.45 ммоль), воду (4 мл) и 1,4-диоксан (20 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 20 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (100 мг, 0.086 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и фильтрационный остаток промывали смесью 1:10 метанола и хлористого метилена (30 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого остатка. В другую одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали остаток, полученный выше, ТГФ (5 мл), этанол (5 мл), воду (5 мл) и гидроксид лития (83.0 мг, 3.45 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 23% (106 мг) выхода 118 в виде беловатого твердого вещества: тк 173-175°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 7.16 (s, 1Н), 8.72 (s, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.29 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.55 (s, 1H), 7.45 (t, 1H, J=7.5 Гц), 7.29 (m, 3H), 6.00 (s, 1H), 4.75 (t, 1H, J=5.0 Гц), 4.31 (d, 2H, J=5.0 Гц), 4.00 (m, 1H), 3.96 (m, 1H), 3.81 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.00 (m, 1H), 2.91 (m, 1H), 2.71 (t, 2H, J=5.5 Гц), 1.92 (m, 2H), 1.75 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 497.2 (M+H).
Пример 119 5-[2-(гидроксиметил)-3-(5-{[5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тpидeкa-1(9),2(7)-диeн-6-oн 119
Пример 119а Метил-3-амино-1-метил-1Н-пиразол-5-карбоксилат 119а
В колбу для гидрирования Парра емкостью 250 мл помещали метил- 1-метил-3-нитро-1Н-пиразол-5-карбоксилат (530 мг, 2.9 ммоль), растворенный в этилацетате (15 мл) и этанол (15 мл), к которому добавляли 10% Pd/C (тип Degussa) (100 мг). Смесь помещали в устройство Парра и наполняли водородом до 50 PSI и встряхивали в течение 2.5 часов. Реакционную смесь фильтровали через подложку из Целита, которую промывали этилацетатом. Растворитель удаляли в вакууме с получением 119а в виде белого твердого вещества (450 мг, 2.9 ммоль, количественного выхода).
Пример 119b Метил-3-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)-1-метил-1Н-пиразол-5-карбоксилат 119b
В трехгорлую КДК помещали 119а (500 мг, 3.2 ммоль), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (725 мг, 3.2 ммоль), карбонат цезия (2.3g, 7.0 ммоль), и Ксантфос (160 мг, 8.5 моль%). Колбу вакуумировали и наполняли азотом ЗХ. Добавляли диоксан (20 мл) и смесь дегазировали в течение 25 минут с барботированием азотом. Затем добавляли трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (150 мг, 5 моль%) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 6 часов. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли EtOAc (125 мл) и насыщенным водным NaHCO3 (50 мл), слои разделяли и экстрагировали EtOAc (2×100 мл). Органические вещества промывали солевым раствором 3Х, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии: 40 г силикагеля ISCO, ЕtOАс/гексаны, с получением 119b.
Пример 119с 6-хлор-4-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-2-метилпиридазин-3(2Н)-он 119с
В круглодонную колбу емкостью 100 мл, содержащую 119b (500 мг, 1.7 ммоль) в атмосфере азота, добавляли безв. ТГФ (20 мл) и безв. толуол (5 мл) и смесь перемешивали и охлаждали до -20 - -30°С. Затем медленно добавляли 3.0М бромид метилмагния в диэтиловом эфире (1.6 мл, 4.75 ммоль). После добавления реакционной смеси позволяли медленно нагреться до комнатной температуры и перемешивали ее в течение примерно 3 часов, после чего реакцию гасили 1N HCl. Концентрировали для удаления ТГФ, разбавляли этилацетатом и водой, затем доводили рН до ~6-7 1М NaOH. Разделяли и экстрагировали 2Х этилацетатом, промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии: 24 г силикагеля ISCO, этилацетат/гексаны, с получением 119с.
Пример 119d 2-(5-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 119d
В виалу для микроволнового реактора помещали 119 с (150 мг, 0.50 ммоль) и 111a (240 мг, 0.50 ммоль) и ДМЭ (4 мл), с последующим добавлением 1N Nа2СО3 (1.1 мл). После дегазирования с помощью барботирования аргоном в течение 5 минут, 20 добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (29 мг, 5 моль%) и смесь нагревали в микроволновом реакторе при 130°С в течение 15 минут. Добавляли дополнительные 40 мг 111a и смесь дополнительно нагревали 10 минут. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и водой, слой этилацетата отделяли, промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии: 12 г силикагеля ISCO, элюируя метанолом и CH2Cl2, с получением 119d (170 мг, 56% выход).
В виалу, содержащую 119d (170 мг, 0.28 ммоль), растворенный в ТГФ (1.5 мл) и изо-пропаноле (1.5 мл), добавляли 1N LiOH/вода (1.4 мл, 1.4 ммоль) и смесь перемешивали в течение ночи, после чего завершение реакции подтверждали с помощью ЖХ-МС. Смесь концентрировали, затем разбавляли этилацетатом и водой и добавляли 1N HCl и 1N NaOH с доведением рН до 7. Слой этилацетата отделяли, промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Отстаток измельчали с этилацетатом и твердые вещества собирали фильтрованием с получением 119 (98 мг, 61% выход). MS (ESI+) m/z 575.2 (М+Н).
Пример 120 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 120
Пример 120а трет-бутил-6-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилат 120а
Смесь трет-бутил-6-амино-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилата (3 г, 12 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она (2.68 г, 10 ммоль) и триэтиламина (1.5 г, 15 ммоль) в ИПС (50 мл) нагревали при 70°С в течение 15 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Полученные желтые твердые вещества собирали фильтрацией и сушили в вакууме с получением 120а в виде желтого твердого вещества (2.83 г, 65%). MS: [M+H]+ 435.
Пример 120b 4-фтор-2-[4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил}метилацетат 120b
Согласно примеру 150b, 482 мг 218b и 435 мг 120а подвергали взаимодействию с получением 362 мг (51%) 120b в виде желтого твердого вещества MS: [M+H]+ 711.
Согласно примеру 149, 200 мг 120b превращали в 120 в виде белого твердого вещества (78 мг, 42%). 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 7.72 (s, 1Н), 7.58 (d, J=8.0, 1H), 7.39 (m, 2H), 7.21 (ss, J=9.5,1H), 7.10 (d, J=8.5,1H), 4.62 (d, J=12,1H), 4.50 (d, J=12, 1H), 4.11 (m, 3H), 3.98 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.28 (s, 2H), 2.95 (m. 4H), 2.85 (s, 2H), 2.60 (m, 2H), 1.9 (m,4H).
Пример 121 5-[2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-{[4-(пиперидин-4-ил)фенил]-амино}-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 121
Пример 121a трет-бутил-4-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)-пиперидин-1-карбоксилат 121а
Соединение 121а синтезировали с применением той же процедуры, как в примере 112а, за исключением применения трет-бутил-4-(4-аминофенил)пиперидин-1-карбоксилата (0.83 г, 3.0 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она (0.88 г, 3.3 ммоль), карбоната цезия (1.27 г, 3.9 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (0.275 г, 0.3 ммоль), Ксантфоса (0.26 г, 0.45 ммоль) и 1,4-диоксана (30 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение ночи. Выделяли и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, этилацетат/гексаны) с получением 80% выхода (1.1 г) 121а в виде твердого вещества: MS (ESI+) m/z 465.0 (M+H).
Пример 121b 5-[2-(ацетоксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-{[4-(пиперидин-4-ил)фенил]-амино}-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)диен-6-он 121b
В виалу для микроволнового реактора емкостью 10 мл с магнитной мешалкой помещали 111a (173 мг, 0.36 ммоль), 121а (139 мг, 0.3 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (1.2 мл, 1.2 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (3 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 10 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (18 мг, 0.015 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (15 мл) и воду (10 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×20 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, этилацетат/гексаны) с получением соединения 121b в виде желтого масла (240 мг).
Соединение 121b растворяли в хлористом метилене (10 мл). Добавляли трифторуксусную кислоту (0.3 мл, 3.9 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. По прошествии указанного времени смесь подщелачивали насыщенным бикарбонатом натрия и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (2×15 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали, и полученный осадок 121 с растворяли в смеси ТГФ (1.5 мл), воды (0.8 мл) и изопропанола (1.5 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (56 мг, 1.32 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом/метанолом 90:10 (10 мл) и водой (5 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×10 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, хлористый метилен/метанол) с получением 35% выхода (3 стадии, 63 мг) соединения 121 в виде светло-розового твердого вещества: MS (ESI+) m/z 596.3 (М+Н).
Пример 122 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(морфолин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрициклор[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 122
Пример 122а 5-бром-1-метил-3-(4-морфолинофениламино)пиразин-2(1Н)-он (3-3) 122а
В виалу для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-он (1.97 г, 7.4 ммоль), 4-морфолинобензоламин (1.97 г, 11.1 ммоль) и изопропанол (25 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. Ее нагревали при 90°С в течение 16 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 5:1 петролейный эфир/этилацетат с получением 122а (2.3 г, 85%). ЖХМС: [М+Н]+ 365.
Пример 122b 4-метил-6-(4-морфолинофениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-илбороновая кислота 122b
В виалу для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 122а (764 мг, 2.1 ммоль), (PinB)2 (2.75 г, 10 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (0.1 г, 0.13 ммоль), КОАс (0.6 г, 6 ммоль) и ДМФА (5 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. Реакционную смесь затем нагревали при 105°С в течение 1 часа, затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 122b, который использовали без дополнительной очистки. ЖХМС: [М+Н]+ 331.
Пример 122с [4-фтор-2-(4-метил-6-{[4-(морфолин-4-ил)фенил]амино}-5-оксопиразин-2-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 122с
В виалу емкостью 25 мл помещали (2-бром-4-фтор-6-{б-оксо-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил)метилацетат 212а (300 мг, 0.67 ммоль), 122b (440 мг, 1.33 ммоль), суспендированную в 1,2-диметоксиэтане (15 мл), и воду (1 мл). Полученный оранжевый раствор нагревали в течение 30 минут в микроволновом реакторе Biotage, поддерживаемый при постоянной температуре 130°С. После реакции остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в смеси 1:6 вода/CH3CN с получением 122с в виде коричневого твердого вещества (200 мг, 46%). MS: (M+H)+ 658.
К раствору 122с (220 мг, 0.33 ммоль) в пропан-2-оле (7 мл), тетрагидрофурапа (7 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (804 мг, 33 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 122 в виде желтого твердого вещества (82 мг, 40%). MS: (M+H)+ 616. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.89 (s, 5H), 2.55-2.63 (m, 2H), 2.94 (s, 2H), 3.11-3.13 (t, 5H), 3.64 (s, 3H), 3.82-3.84 (t, 4H), 3.93-3.98 (m, 1H), 4.07-4.14 (m, 1H), 4.43-4.53 (m, 2H), 6.97-6.99 (d, 2H), 7.18-7.20 (d, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.36-7.38 (d, 1H), 7.62-7.64 (d, 2H).
Пример 123 5-(3-{5-[(5-циклопропил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-2-(гидроксиметил)фенил)-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 123
Пример 123а 1-циклопропил-3-нитро-1H-пиразол 123а
Трехогорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную обратным холодильником и магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 3-нитро-(1Н)пиразол (1.30 г, 11.5 ммоль), циклопропилбороновую кислоту (1.98 г, 23.0 ммоль), карбонат натрия (3.66 г, 34.5 ммоль), 2,2'-дипиридил (3.58 г, 23.0 ммоль), дихлорэтан (60 мл) и ацетат меди(II) (2.08 г, 11.5 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°С (температура масляной бани) в течение 3 часов. По прошествии указанного времени добавляли другую порцию циклопропилбороновой кислоты (1.98 г, 23.0 ммоль) и смесь нагревали в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (350 мл) и водой (40 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 100% этилацетат/гексаны) с получением 85% выхода (1.49 г) 123а в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.53 (d, 1H, J=2.4 Гц), 6.87 (d, 1H, J=2.5 Гц), 3.71 (m, 1H), 1.25 (m, 2H), 1.12 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 154.1 (M+H).
Пример 123b 1-циклопропил-1H-пиразол-3-амин 123b
Бутыль реактора Парра емкостью 250 мл, продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 137 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 123а (600 мг, 3.92 ммоль) в этаноле (70 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 3 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (1.00 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×25 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением 93% выхода 123b (450 мг) в виде пурпурного масла: 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.17 (d, 1H, J=2.4 Гц), 5.55 (d, 1H, J=2.4 Гц), 3.43 (m, 1H), 2.92 (br s, 2H), 1.01 (m, 2H), 0.93 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 124.1 (M+H).
Пример 123с 5-бром-3-(1-циклопропил-1H-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1H)-он 123с
В трехогорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 123b (444 мг, 3.61 ммоль), 2,5-дибром-1-метилпиразин-6-он (1.06 г, 3.97 ммоль), карбонат цезия (3.52 г, 10.8 ммоль) и 1,4-диоксан (45 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (177 мг, 0.306 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (165 мг, 0.180 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Отстаток измельчали с метанолом (20 мл) с получением 63% выхода (700 мг) 123 с в виде беловатого твердого вещества: тк 161-163°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 8.42 (s, 1Н), 8.00 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.57 (d, 1H, J=2.4 Гц), 7.38 (d, 1H, J=2.5 Гц), 6.05 (d, 1H, J=2.4 Гц), 3.61 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 0.95 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 309.0 (M+H).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 150 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 123с (247 мг, 0.800 ммоль). 111a (770 мг, 1.60 ммоль), карбонат натрия (254 мг, 2.40 ммоль), ДМФА (5 мл), воду (2.5 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (93 мг, 0.080 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в смеси ТГФ (8 мл), метанола (4 мл) и воды (4 мл). К полученному раствору добавляли моногидрат гидроксида лития (167 мг, 3.40 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре и затем концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 19% выхода (84 мг) 123 в виде беловатого твердого вещества: тк 200-201°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 11.75 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.418 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.31 (d, 1H, J=7.5 Гц), 7.27 (d, 1H, J=7.5 Гц), 7.21 (s, 1H), 5.78 (s, 1H), 4.79 (m, 1H), 4.36 (m, 2H), 4.12 (m, 1H), 3.80 (m, 1H), 3.56 (s, 3Н), 2.95 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 2.78 (s. 2H), 1.80 (m, 5H), 0.87 (m, 2H), 0.62 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 542.1 (M+H).
Пример 124 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил} фенил]-1-метил-3-[(5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1,2-дигидропиридин-2-он 124
Пример 124а 1-метил-3-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 124а
В виалу для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 5-бром-1-метил-3-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 112а (2.3 г, 8.3 ммоль), (PinB)2 (11 г, 41 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (0.4g, 0.5 ммоль), КОАс (2.4 г, 25 ммоль) и 1,4-диоксан (150 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 0.5 часов в микроволновом излучении. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 5:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 124а (0.57 г, 21%). ЖХМС: [М+Н]+ 331.
Пример 124b 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-бензилацетат 124b
Смесь 124а (330 мг, 1 ммоль), 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 197d (434 мг, 1 ммоль), PdCl2(dppf) (82 мг, 0.1 ммоль), 2.0М Na2CO3 (2.0 эквив.) в ДМЭ (10 мл) нагревали при 120°С в микроволновом излучении в течение 0.5 часов. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением титульного соединения (160 мг, 29%). ЖХМС: [М+Н]+ 559.
Смесь 124b (150 мг, 0.27 ммоль) и LiOH (324 мг, 14 ммоль) в изопропаноле/ТГФ (1:1,10 мл) и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (10 мл × 2). Объединенный этилацетатный экстракт концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 124 (60 мг, 43%). ЖХМС: [М+Н]+ 517. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 11.74 (s, 1Н), 8.00 (m, 2H), 7.30 (m, 2H), 7.16 (dd, J=9.5, 1H), 6.52 (s, 1Н), 5.87 (s, 1Н), 4.87 (m, 1Н), 4.33 (m, 2H), 4.12 (m, 3Н), 3.87 (m, 1Н), 3.56 (s, 3Н), 2.59 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.45 (s, 3Н), 1.70 (m, 4H).
Пример 125 3-[(5-этил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-он 125
Эксперимент 125а 5-бром-3-(5-этил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 125а
В герметичную пробирку емкостью 350 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 3,5-дибром-1-метил-1H-пиридин-2-он (3.2 г, 0.012 моль), 5-этил-1H-пиразол-3-амин (2.0 г, 0.018 моль), Pd2(dba)3 (0.55 г, 0.60 ммоль), 9,9-диметил-4,5-бис(дифенилфосфино)ксантен (0.49 г, 0.00084 моль), Cs2CO3 (7.8 г, 0.024 моль) и 1,4-диоксан (80 мл). После перемешивания реакционной смеси при 105°С в течение 16 часов, ее охлаждали до комнатной температуры, разделяли между дихлорметаном (50 мл) и водой (30 мл) и органическую фазуз экстрагировали дихлорметаном (30 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (30 мл × 2) и солевым раствором (20 мл × 1), сушили (Na2SO4) и фильтровали через подложку из Целита, и полученный фильтрат концентрировали. К неочищенному продукту добавляли дихлорметан (20 мл) и диэтиловый эфир (100 мл). Смесь обрабатывали ультразвуком в течение 10 минут и полученные осадки фильтровали с получением 42% выхода (1.5 г) 5-бром-3-(5-этил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (125а) в виде твердого вещества.
Пример 125b 2-(5-(5-этил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 125b
В стеклянный сосуд емкостью 10 мл, снабженный якорем магнитной мешалки, помещали 125а (116 мг, 0.39 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (200 мг, 0.43 ммоль), Pd(PPh3)4 (30 мг, 0.0.26 ммоль) в 2 N Na2CO3 (2 мл) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл). Сосуд герметизировали мембраной и помещали в углубление микроволнового реактора. После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 7 минут, ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 85:15) с получением 23% (50 мг) 125b в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 125b (50 мг, 0.090 ммоль), LiOH⋅H2O (20 мг, 0.83 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 50% выхода (23 мг) 2-(3-(5-(5-этил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она 125 MS (ESI+) m/z 513.3 (М+Н).
Пример 126 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1,б-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 126
Эксперимент 126а 5-бром-1-метил-3-(4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 126а
В круглодонную колбу емкостью 50 мл с магнитной мешалкой и обратным холодильником помещали 3-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 108d (250 мг, 0.7 ммоль), водный NaOH (5N, 6 мл), этанол (6 мл). Смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2х5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 91% выхода (200 мг) неочищенного 5-бром-1-метил-3-(4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она (126а).
Пример 126b 2-(1-метил-6-оксо-5-(4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 126b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 126а (210 мг, 0.65 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (330 мг, 0.7 ммоль), ДМЭ (6 мл) и 1М водный карбонат натрия (1.9 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (38 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 135°С в течение 15 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (10 мл) и воду (10 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 9:1 CH2Cl2:МеОН, с получением 36% выхода (140 мг) 126b.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 126b (140 мг, 0.24 ммоль), гидроксид лития (50 мг, 1.2 ммоль), ТГФ (1.2 мл), изо-пропанол (1.2 мл) и воду (2.4 мл). Смесь перемешивали при кг в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 33% выхода (42 мг) 126. MS (ESI+) m/z 540.3 (M+Н).
Пример 127 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(4-морфолинофениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 127
Пример 127а 4-фтор-2-(4-метил-6-(4-морфолинофениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 127а
Смесь 4-метил-6-(4-морфолинофениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-илбороновой кислоты 122b (330 мг, 1 ммоль), 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 197d (434 мг, 1 ммоль), PdCl2(dppf) (82 мг, 0.1 ммоль), 2.0М Na2CO3 (1 мл, 2.0 эквив.) в ДМЭ (10 мл) нагревали при 130°С в микроволновом излучении в течение 0.5 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 127а (200 мг, 45%). ЖХМС: [М+Н]+ 641.
Смесь 127а (200 мг, 0.31 ммоль) и LiOH (372 мг, 16 ммоль) в изо-PrOH/ТГФ (1:1, 10 мл) и H2O (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (10 мл × 2). Объединенный экстракт концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 127 (58 мг, 33%). ЖХМС: [М+Н]+ 599 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.13 (s, 1Н), 7.81 (m, 2H), 7.43 (s, 1H), 7.34 (m, 2H), 6.89 (m, 2H), 6.52 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.14 (m, 1H), 3.72 (m, 3Н), 3.56 (m, 3H), 3.07 (m, 4H), 2.63 (m, 3Н), 2.47 (m, 2H), 1.75 (m, 4H).
Пример 128 2-(3-(5-(5-(3-гидроксиазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 128
Пример 128а 1-(6-нитропиридин-3-ил)азетидин-3-ол 128а
В круглодонную колбу емкостью 50 мл с магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 3-гидроксиазетидин-НС! (2 г, 18.4 ммоль), 5-бром-2-нитропиридин (2.1 г, 10.2 ммоль), диизопропилэтиламин (5.4 мл, 30.7 ммоль), иодид тетрабутиламмония (5.7 г, 15.4 ммоль) и N,N-диметилацетамид (10 мл). Смесь перемешивали при 120°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали и добавляли этилацетат (25 мл) и воду (25 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом 4:1 гексаны: этилацетат - 100 этилацетат, с получением 52% выхода (1.9 г) 128а.
Пример 128b 1-(6-аминопиридин-3-ил)азетидин-3-ол 128b
В бутыль для гидрирования Парра емкостью 500 мл помещали 128а (1.9 г, 9.6 25 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 570 мг в пересчете на сухую массу) и этанол (100 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 24 часов на устройстве для гидрирования Парра. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита 521, промывая смесью 1:1 CH2Cl2:МеОН (500 мл). Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом 100% ДХМ - 100% 3:1 ДХМ:МеОН с получением 70% выхода (1.1 г) 128b.
Пример 128с 5-бром-3-(5-(3-гидроксиазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 128с
Герметичную пробирку снабжали магнитной мешалкой и помещали в нее 128b (375 мг, 2.3 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (848 г, 3.2 ммоль) и карбонат цезия (1.7 г, 5 ммоль) в 1,4-диоксане (24 мл). После барботирования указанного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (160 мг, 0.3 ммоль) и трис(дибензилиденацетон) дипалладия(0) (150 мг, 0.2 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 5 дней. По прошествии указанного времени добавляли H2O (20 мл) и EtOAc (20 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 9:1 CH2Cl2:МеОН, с получением 39% выхода (430 мг) 128с.
Пример 128d 2-(5-(5-(3-гидроксиазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 128d
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 128 с (220 мг, 0.6 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (350 мг, 0.8 ммоль), ДМЭ (7 мл) и 1М водный карбонат натрия (1.9 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (36 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 135°С в течение 15 минут.По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (10 мл) и воду (10 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:МеОН, с получением 30% выхода (110 мг) 128d.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 128d (110 мг, 0.2 ммоль), гидроксид лития (38 мг, 0.9 ммоль), ТГФ (0.9 мл), изо-пропанол (0.9 мл) и воду (1.8 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре (кг) в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:МеОН, с получением 12% выхода (12 мг) 128. MS (ESI+) m/z 567.2 (M+Н).
Пример 129 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 129
Пример 129а трет-бутил-6-(6-(2-(ацетоксиметил)-5-фтор-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)фенил)-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилат 129а
Смесь 482 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 210d и 435 мг трет-бутил-6-(б-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)-3,4-дигидро-изохинолин-2(1Н)-карбоксилата 120а, PdCl2(dppf) (1110 мг, 0.015 ммоль), 2 М раствора Na2CO3 (3 мл) в ДМЭ (16 мл) нагревали при 120°С в микроволновом излучении в течение 0.5 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 129а в виде желтого твердого вещества (362 мг, 51%). MS: [M+H]+ 711.
Пример 129b 4-фтор-2-(4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 129b
К раствору 129а (360 мг 0.51 ммоль) в ДХМ (30 мл) добавляли 3М HCl в 15 диоксане (8 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. После завершения реакции растворитель удаляли при пониженном давлении с получением 129b в виде желтого твердого вещества (310 мг, 99%).
Согласно примеру 149, 250 мг 129b превращали в 129 в виде белого твердого 20 вещества (98 мг, 42%). 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 7.62 (s, 1H), 7.55 (dd, J=7.0, 1H), 7.41 (dd, J=9.5,1H), 7.38 (s, 1H), 7.20 (dd, J=9.5,1H), 7.04 (d, J=8.5, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.59 (d, J=12, 1H), 4.8 (d, J=11.5, 1H), 4.20 (m, 3H), 4.00 (m, 3H), 3.64 (s, 3H), 3.13 (m, 2H), 2.86 (m, 2H), 2.64 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 1.88 (m, 2H), 1.78 (m, 2H).
Пример 130 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 130
Пример 130а 5-(1-метил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-2-нитропиридин 130а
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 1-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,2,3,6-тетрагидропиридин (1.50 г, 6.72 ммоль), 5-бром-2-нитропиридин (1.64 г, 8.07 ммоль), Pd(PPh3)4 (388 мг, 0.336 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 Ν, 20.2 мл, 20.2 ммоль), диоксан (60.6 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 10 часов. К полученной смеси добавляли CH2Cl2 (200 мл), и затем промывали ее водой (30 мл×3). Добавляли CH2Cl2 (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл×3), солевым раствором (30 мл×1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:ДХМ=5:95) получали 5-(1-метил-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-ил)-2-нитропиридин (130а) в виде желтого твердого вещества.
Пример 130b 5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-амин 130b
В бутыль для гидрирования добавляли 130а (1.25 г, 5.73 ммоль), EtOH (100 мл), 10% Pd/С (304 ммоль, 0.286 ммоль). Смесь гидрировали при 55 psi в течение 2 часов, фильтровали через Целит и промывали МеОН (20 мл). Растворитель удаляли в вакууме и получали 5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-амин 130b (1.13 г, 100%) в виде беловатых твердых веществ.
Пример 130с 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 130с
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 130b (1.08 г, 5.65 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (2.26 г, 8.47 ммоль), Pd2(dba)3 (517 мг, 0.565 ммоль), Ксантфос (523 мг, 0.903 ммоль), Cs2CO3 (6.07 г, 18.6 ммоль) и диоксан (28.3 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение ночи. Добавляли CH2Cl2 (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3). Добавляли CH2Cl2 (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Добавляли CH2Cl2 диэтиловый эфир (1:2, 5 мл), с последующей обработкой ультразвуком, осадок фильтровали и сушили. Получали соединение 130с в виде зеленого твердого вещества, 784 мг (37%).
Пример 130d 2-(1-метил-5-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 130d
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 130с (250 мг, 0.663 ммоль), 2-(2-(гидроксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 114а (338 мг, 0.729 ммоль), Pd(PPh3)4 (38.3 мг, 0.033 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 2.19 мл, 2.19 ммоль), ДМЭ (2 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 135°С в течение 15 минут. Добавляли CH2Cl2 (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН: ДХМ=5:95) получали 130d.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 130d ТГФ (1.25 мл), изо-PrOH (1.25 мл), H2O (1.25 мл), LiOH Н2О (135 мг). Полученную смесь перемешивали при кг в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный осадок добавляли к CH2Cl2 (200 мл), раствор промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:CH2Cl2=10:90) получали 130 в виде беловатого твердого вещества, 39 мг. MS (ESI+) m/z 593.4 (М+Н).
Пример 131 5-(3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(1-этил-1H-пиразол-4-иламино)пиразин-2(1H)-он 131
Пример 131а 2-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 131а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 105i (411 мг, 0.917 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан (698 мг, 2.75 ммоль), ацетат калия (360 мг, 3.66 ммоль) и 1,4-диоксан (15 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Pd(dppf)Cl2*CH2Cl2 (35 мг, 0.047 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 14 часов. По прошествии указанного времени добавляли больше Pd(dppf)Cl2*CH2Cl2 (70 мг, 0.094 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов при 90°С. По прошествии указанного времени смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 70:30 гексаны/этилацетат) с получением 131а с выходом 82% (373 мг) в виде аморфного беловатого твердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.81 (dd, J=7.5, 1.5 Гц, 1Н), 7.41 (t, J=7.5 Гц, 1Н), 7.35 (dd, J=7.0,1.5 Гц, 1Н), 5.51 (d, J=11.5 Гц, 1Н), 5.26 (d, J=11.5 Гц, 1Н), 4.03-3.98 (m, 1Н), 3.77-3.72 (m, 1Н), 3.05-2.98 (m, 1Н), 2.82-2.76 (m, 1Н), 2.76 (s, 2H), 2.52 (s, 2H), 1.99 (s, 3Н), 1.33 (s, 12H), 1.27 (s, 3Н), 1.26 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 496.2 (M+H).
Пример 131b 5-бром-3-(1-этил-1H-пиразол-4-иламино)-1-метилпиразин-2(1H)-он 131b
Согласно примеру 111b, в результате реакции 1-этил-1H-пиразол-4-амина (500 мг, 4.50 ммоль) и 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она (1.33 г, 4.95 ммоль) получали 75% выход (1.01 г) 131b в виде беловатого твердого вещества: тк 237-239°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 9.90 (s, 1Н), 8.02 (s, 1Н), 7.73 (s, 1Н), 7.20 (s, 1Н), 4.11 (q, 2H, J=7.5 Гц), 3.41 (s, 3Н), 1.34 (t, 3Н, J=7.3 Гц); MS (ESI+) m/z 298.0 (M+H).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 131b (200 мг, 0.670 ммоль), боронат 131а (365 мг, 0.737 ммоль), карбонат натрия (184 мг, 1.73 ммоль), ДМФА (2 мл), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (134 мг, 0.116 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок растворяли в смеси ТГФ (5 мл), воды (5 мл) и метанола (5 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (121 мг, 2.89 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×75 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 90:10 хлористый метилен/метанол) с получением 131с выходом 26% (96 мг) в виде аморфного желтого твердого вещества: тк 138-140°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.56 (s, 1Н), 8.16 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.56 (dd, J=7.5, 1.0 Гц, 1H), 7.46 (t, J=8.0 Гц, 1H), 7.34 (dd, J=7.5, 1.0 Гц, 1H), 7.31 (s, 1H), 4.85-4.82 (m, 1H), 4.56-4.53 (m, 1H), 4.47-4.44 (m, 1H), 4.08-4.02 (m, ЗН), 3.90-3.86 (m, 1H), 3.52 (s, 3Н), 3.03-3.00 (m, 1H), 2.92-2.87 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.54 (d, J=5.0 Гц, 2Н), 1.32 (t, J=7.5 Гц, 3Н), 1.23 (s, 6Н); MS (ESI+) m/z 545.1 (M+H).
Пример 132 2-(2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 132
Пример 132а 2-(2-(ацетоксиметил)-3-(5-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 132а
Согласно примеру 119d, 119 с (150 мг, 0.50 ммоль), 113а (257 мг, 0.55 ммоль), 1N Na2CO3 (1.1 мл) и татракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (29 мг, 5 моль%) подвергали взаимодействию с получением 132а (160 мг, 53% выход). Согласно примеру 132,132а (160 мг, 0.27 ммоль), 1N LiOH (1.3 мл), ТГФ (2 мл) и изопропанол (2 мл) подвергали взаимодействию с получением 132 (118 мг, 78% выход) в виде белого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 558.3 (М+Н).
Пример 133 2-(2-(гидроксиметил)-3-(6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 133
Пример 133а 6-хлор-4-(пиримидин-4-иламино)пиридазин-3(2H)-он 133а
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 1 л, снабженную механической мешалкой, подводом азота и обратным холодильником, помещали 4-бром-6-хлорпиридазин-3(2H)-он (7.30 г, 35.0 ммоль), 2-аминопиримидин (3.33 г, 35.0 ммоль), карбонат цезия (25.0 г, 76.8 ммоль) и 1,4-диоксан (345 мл). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (1.71 г, 2.96 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (1.60 г, 1.74 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали хлористым метиленом (3×50 мл) и водой (3×20 мл), и сушили в вакуумной печи в течение ночи при 45°С с получением 133а (5.54 г, 71%) в виде желто-коричневого твердого вещества: тк>300°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 13.28 (br s, 1Н), 9.90 (br s, 1H), 8.91 (s, 1H), 8.51 (d, 1H, J=6.0 Гц), 8.39 (s, 1H), 7.53 (dd, 1H, J=1.5, 6.0 Гц); MS (ESI+) m/z 224.1 (M+H).
Согласно примеру 119d, 133а (145 мг, 0.650 ммоль) и 111a (313 мг, 0.650 ммоль) приводили к получению 18% выхода (60 мг) 133 в виде розового твердого вещества: тк 150-151°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 13.30 (s, 1H), 9.81 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.48 (m, 2H), 7.43 (m, 2H), 4.66 (m, 1H), 4.44 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.53 (m, 1H), 1.79 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 501.1 (M+H).
Пример 134 2-(2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 134
Пример 134а Метил-3-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-1-метил-1H-пиразол-5-карбоксилат 134а
Согласно примеру 119а, 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (2.0 г, 7.5 ммоль) превращали в 134а.
Пример 134b 5-бром-3-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1H-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 134b
Согласно примеру 119b, 132а (330 мг, 0.97 ммоль) и 3.0М в диэтиловом эфире MeMgBr (5.8 ммоль, 1.9 мл) в ТГФ (10 мл) подвергали взаимодействию с получением 134b (270 мг, 82% выход).
Пример 134с 2-(5-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагадропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 134с
Согласно примеру 119, 113b (120 мг, 0.35 ммоль), 113а (180 мг, 0.39 ммоль), 1N Na2CO3 (0.8 мл) и тетракис палладий (20 мг, 5 моль%) подвергали взаимодействию с получением 134 с (85 мг, 40% выход).
Согласно примеру 119, подвергали взаимодействию 134 с (80 мг, ОЛЗммоль), 1N LiOH (0.7 мл), ТГФ (1.5 мл) и изопропанол (1.5 мл). Продукт очищали с помощью колоночной хроматографии, силикагель, МеОН/CH2Cl2, затем измельчали с EtOAc с получением 134 (18 мг, 25% выход). MS (ESI+) m/z 557.3 (М+Н).
Пример 135 2-(3-(5-(5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 135
Пример 135а 5-циклопропил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин 135а
Смесь 1-(2-бромэтил)-5-(бромметил)-3-нитро-1Н-пиразола 101 с (4 г, 12.9 ммоль) и циклопропанамина (7.35 г, 129 ммоль) в ТГФ (40 мл) перемешивали при 30°С в течение ночи. После завершения реакции смесь отфильтровали и твердое вещество промывали ТГФ (100 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 135а (2.68 г, 99%). MS: [M+H]+ 209.
Пример 135b 5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-амин 135b
Смесь 5-циклопропил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразина 135а (2.68 г, 12.9 ммоль), Fe (3.6 г, 64.4 ммоль) и NH4Cl (4.1 г, 77.4 ммоль) в этаноле (30 мл) и воды(5 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и твердое вещество промывали этанолом (150 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали метанолом/хлористым метиленом (1/7). Объединенные экстракты сушили над Na2SO4 и выпаривали. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 135b (1.8 г, 75%). MS: [М+Н]+ 179.
Пример 135 с 5-бром-3-(5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 135с
Смесь 5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-амина 135b (1.39 г, 7.8 ммоль), Ксантфоса (450 мг, 0.78 ммоль), Pd2dba3 (476 мг, 0.52 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1.72 г, 6.5 ммоль) и Cs2CO3 (6.3 mg. 19.5 ммоль) в 1,4-диоксане (30 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. После завершения реакции смесь отфильтровали, и твердое вещество промывали метанолом (60 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 135с (0.84 г, 30%). MS: [M+H]+ 364.
Пример 135d 2-(5-(5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,б-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 135d
Смесь 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,б,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (105 мг, 0.26 ммоль), 135 с (100 мг, 0.28 ммоль), PdCl2(dppf) (29 мг, 0.039 ммоль), K2PO4 (100 мг), и NaOAc (50 мг) в MeCN (10 мл) и воды (3 мл) нагревали при 110°С в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 135d (100 мг, 60%). MS: [M+H]+ 640.
Смесь 135d (100 мг, 0.16 ммоль) и гидрата LiOH (100 mg. 2.3 ммоль) в изопропаноле (10 мл) и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (10 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 135 (40 мг, 42%). MS: [M+H]+ 598. 1H ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 7.89 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.20 (d, J=9.0, 2H), 6.72 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.52-4.44 (m, 2H), 4.22-4.18 (m, 3H), 4.03-3.97 (m, 3H), 3.81 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.15-3.13 (m, 2H), 2.67-2.61 (m, 2H), 2.57-2.51 (m, 2H), 1.96-1.87 (m, 3H), 1.81-1.75 (m, 2H), 0.62-0.58 (m, 2H), 0.53-0.49 (m, 2H).
Пример 136 5-(3-{5-[(5-циклопропил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 136
Пример 136а 3-циклопропил-3-оксопропаннитрил 136а
К раствору CH3CN (0.34 мл, 6.58 ммоль) в ТГФ (3 мл) при -78°С в защитной атмосфере N2 добавляли по каплям ЛДА (3.3 мл, 6.58 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 3 часов. Затем добавляли этилциклопропанкарбоксилат (0.5 г, 4.38 ммоль) в ТГФ (2 мл) и смесь позволяли нагреться до комнатной температуры в течение 1 часа. Добавляли воду (2 мл) и растворители удаляли при пониженном давлении. Добавляли CH2Cl2 (2 мл) и рН смеси доводили 5 с помощью 2N HCl. Затем ее экстрагировали CH2Cl2 (5 мл × 2), сушили над Na2SO4, и концентрировали с получением 136а в виде желтого масла, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 136b 3-циклопропил-1Н-пиразол-5-амин 136b
К раствору 136а (477 мг, 4.38 ммоль) в МеОН (5 мл) добавляли N2H4.H2O (80%) (5 мл). Реакционную смесь нагревали при 75°С в течение 15 часов. МеОН удаляли при пониженном давлении. Остаток экстрагировали CH2Cl2 (2×8 мл), сушили над Na2SO4, и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-колонки, элюируя 100:1 CH2Cl2/МеОН, с получением 136b в виде желтого масла (37%, за две стадии). ЖХМС: (M+H)+ 124.
Пример 136с трет-бутил-5-амино-3-циклопропил-1Н-пиразол-1-карбоксилат 136с
К смеси 136b (0.25 г, 2 ммоль) и К2СО3 (0.828 г, 6 ммоль) в ТГФ (5 мл) добавляли (Вос)2O (0.436 г, 2 ммоль) в ТГФ (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Затем ее фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью флэш-колонки, элюируя смесью 6:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 136 с в виде белого твердого вещества (240 мг, 54%). ЖХМС: (M-Boc)+ 124.
Пример 136d 5-бром-3-(3-циклопропил-1Н-пиразол-5-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 136d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1,4-диоксан (15 мл), 136с (455 мг, 1.95 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (0.40 г, 1.5 ммоль) и карбонат цезия (1.22 г, 3.75 ммоль). После барботирования полученной смеси азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (87 мг, 0.15 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (70 мг, 0.075 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 15 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между этилацетатом (30 мл) и водой (30 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над Na2SO4. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на флэш-колонке, элюируя 50:1 CH2Cl2/MeOH, с получением 136d в виде желтого твердого вещества (320 мг, 50%). ЖХМС: (М+H)+ 309. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 11.85 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.02 (d, J=2.5, 1H), 7.35 (d, J=2.5, 1H), 5.77 (d, J=2, 1H), 3.46 (s, 3Н), 1.83 (m, 1H), 0.90 (m, 2H), 0.64 (m, 2H).
Пример 136е (2- {5-[(5-циклопропил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксопиридин-3-ил}-4-фтор-6-{б-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил)метилацетат 136е
В герметичную виалу емкостью 25 мл помещали (4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-l,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-метилацетат 212b (580 мг, 1.16 ммоль), 136d (300 мг, 0.97 ммоль), CH3COONa (160 мг, 1.94 ммоль), K3PO4 (410 мг, 1.94 ммоль), PdCl2(dppf) (100 мг, 0.12 ммоль), CH3CN (12 мл) и H2O (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Реакционную смесь выпаривали, и остаток очищали с помощью флэш-колонки, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, содержащей 0.5% триэтиламин, с получением 136е в виде черного твердого вещества (300 мг, 52%).
К раствору 136е (300 мг, 0.50 ммоль) в пропан-2-оле (3 мл), тетрагидрофурана (3 мл) и воды (3 мл) добавляли LiOH (1.0 г, 25 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем добавляли 20 мл H2O и экстрагировали ЭА (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое затем очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 136 в виде белого твердого вещества (200 мг, 70%). ЖХМС: (М+Н)+ 560 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.78 (s, 1Н), 7.25 (d, J=2.5, 1H), 7.21 (m, 2H), 5.79 (s, 1H), 4.48 (m, 2H), 4.15 (m, 1H), 4.00 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.07 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.85 (m, 2H), 2.61 (m, 2H), 1.89 (m, 5H), 0.96 (m, 2H), 0.73 (m, 2H).
Пример 137 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксопиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 137
Пример 137а 5-[5-фтор-3-[1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло-[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксопиридин-3-ил]бензилацетат]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 137а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали (4-фтор-2-{б-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-l,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 212b (990 мг, 2 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,б,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 252а (500 мг, 1.3 ммоль), CHaCOONa (220 мг, 2.6 ммоль), K3PO4 (700 мг, 2.6 ммоль) и PdCl2(dppf) (110 мг, 0.13 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл), и H2O (1 мл). Смесь перемешивали при 110°С в течение 2 часов. Затем растворитель выпаривали, и остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 20:1 СНгСУметанол, с получением 137a в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 35%). MS: (М+Н)+ 673.
К раствору 137a (270 мг, 0.4 ммоль) в пропан-2-оле (8 мл), тетрагидрофурана (8 мл) и воды (1.5 мл) добавляли LiOH (964 мг, 40 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 137 в виде желтого твердого вещества (84 мг, 33%). MS: (M+H)+ 631. 1H ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.87 (s, 4H), 2.52-2.56 (d, 2H), 2.83-2.90 (d, 5H), 3.01 (s, 1H), 3.56-3.74 (t, 6H), 3.96-4.01 (t, 4H), 4.44-4.48 (t, 2H), 4.63 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 5.87 (s, 1H), 7.16-7.18 (d, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.89 (s, 1H).
Пример 138 2-(3-(5-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 138
Пример 138а 1-этил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин 138а
В герметичную пробирку, снабженную магнитным якорем, добавляли 5-бром-2-нитропиридин (3.00 г, 14.78 ммоль), 1-этилпиперазин (5.06 г, 44.34 ммоль), иодид тетрабутиламмония (273 ммоль, 0.739 ммоль), K2CO3 (6.128 г, 44.34 ммоль) и ДМСО (30 мл). Пробирку герметизировали и нагревали при 90°C в течение ночи. Добавляли воду (200 мл) и осадок фильтровали с получением 138а в виде желтого твердого вещества, 1.24 г.
Пример 138b 5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-амин 138b
В бутыль для гидрирования добавляли 138а (2.59 г, 10.96 ммоль), EtOH (100 мл), 10% Pd/С (580 мг, 0.55 ммоль). Смесь гидрировали при 55 psi в течение 2 часов и затем фильтровали через Целит и промывали МеОН (20 мл). Растворитель удаляли в вакууме и 138b (2.51 г, 82%) в виде розовых твердых веществ.
Пример 138с 5-бром-3-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 138с
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 138b (2.52 г, 12.22 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (4.89 г, 18.32 ммоль), Pd2(dba)3 (1.12 г, 1.22 ммоль), Ксантфос (1.13 мг, 1.96 ммоль), Cs2CO3 (13.14 г, 40.33 ммоль) и диоксан (50 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение ночи. К полученной смеси добавляли CH2Cl2 (200 мл), и затем полученную смесь промывали водой (30 мл×3). Добавляли CH2Cl2 (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл×3), солевым раствором (30 мл×1), сушили над MgSO4, фильтровали, и растворитель удаляли в вакууме. Добавляли CH2Cl2 / диэтиловый эфир (1:2, 5 мл), с последующей обработкой ультразвуком, осадок фильтровали в виде 138с, желтое твердое вещество, 2.718 г (57%).
Пример 138d 2-(5-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 138d
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 138с (250 мг, 0.637 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (325.5 мг, 0.701 ммоль), Pd(PPh3)4 (36.8 мг, 0.0319 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 2.10 мл, 2.10 ммоль), ДМЭ (2.0 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 135°С в течение 15 минут. Добавляли CH2Cl2 (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл х 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:CH2Cl2=5: 95) получали 2-(5-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 138d.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 138d, ТГФ (5.0 мл), изо-PrOH (5.0 мл), H2O (5.0 мл), LiOH Н2О (200 мг). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 2 часов. Весь растворитель удаляли в вакууме и полученный осадок добавляли к CH2Cl2 (200 мл), раствор промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:CH2Cl2=10:90) получали 138 в виде серого твердого вещества, 60 мг. MS (ESI+) m/z 608.3 (М+Н).
Пример 139 3-{[4-(3-гидрокси-3-метилазетидин-1-ил)фенил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиразин-2-он 139
Согласно примеру 301, 1-(4-аминофенил)-3-метилазетидин-3-ол превращали в 99 мг 139 в виде белого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 581 (М+Н).
Пример 140 2-(3-(6-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-иламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 140
Пример 140а 5-бром-3-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-иламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он 140а
В колбу, снабженную магнитной мешалкой, помещали 1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-1Н-пиразол-4-амин 116b (1.7 г, 7.1 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-он (1.25 г, 4.7 ммоль) и ИПС (25 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 6 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат, с получением 140а (1.7 г, 78%). ЖХМС: [M+H]+ 314.
Пример 140b 2-(6-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-иламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 140b
Смесь 140а (595 мг, 1.9 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (882 мг, 1.9 ммоль), CH3COONa (309 мг, 3.8 ммоль), PdCl2(dppf) (153 мг, 0.19 ммоль) и K3PO4 (1 г, 3.8 ммоль), суспендированного в CH3CN (30 мл), и H2O (2 мл) нагревали при 110°С в течение 15 часов в атмосфере аргона. После реакции CH3CN выпаривали и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в смеси 1:4 вода/CH3CN, с получением 140b в виде коричневого твердого вещества (477 мг, 44%). ЖХМС: [М+Н]+ 572.
Смесь 140b (410 мг, 0.72 ммоль) и LiOH (372 мг, 16 ммоль) в мзо-PrOH/ТГФ (1:1, 10 мл) и H2O (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали EtOAc (10 мл × 2). Объединенный экстракт концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 140 (200 мг, 54%). ЖХМС: [М+Н]+ 530 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.71 (s, 1Н), 7.68 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 7.36 (m, 2H), 7.27 (m, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.43 (d, J=12,1H), 4.21 (m, 4H), 4.04 (m, 2H), 4.01 (m, 3H), 3.63 (s, 3H), 2.55 (dt, J=14.5, 4H), 1.78 (m, 4H).
Пример 141 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 141
Пример 141а 5-метил-4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридин-2-амин 141а
Раствор 1-метил-4-пиперидона (11.3 г, 100 ммоль) в 2-пропаноле (80 мл) нагревали до 50°С. К расвору последовательно добавляли раствор цианамида (4.2 г, 100 ммоль) в 2-пропаноле (25 мл) и порошок серы (3.2 г). После к нему добавляли каталитическое количество пирролидина (1.3 мл), полученную смесь перемешивали при или выше 50°С в течение 2 часов. Реакционной смеси позволяли охладиться до комнатной температуры, с последующим перемешиванием в течение ночи. Полученную смесь охлаждали до или ниже 10°С на ледяной бане и перемешивали в течение 1 часа при той же температуре. Осажденные кристаллы собирали фильтрацией и промывали 2-пропанолом (20 мл). Влажные кристаллы сушили при пониженном давлении, с получением 141а (10 г, 60%). ЖХМС: [М+Н]+ 170 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 6.70 (s, 2Н), 3.31 (s, 2Н), 2.61 (t, J=5.5,2H), 2.45 (m, 2H), 2.33 (s, 3H).
Пример 141b 5-бром-1-метил-3-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 141b
Согласно примеру 110с, 3 г 141а и 4 г 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она подвергали взаимодействию с получением 141b в виде желтого твердого вещества (2.8 г, 52%). ЖХМС: [М+Н]+ 357
Пример 141с 2-(1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 141с
Согласно примеру 147b, 232 мг 114а и 178 мг 141b подвергали взаимодействию с получением 141с в виде желтого твердого вещества (240 мг, 80%). ЖХМС: [М+Н]+ 613.
Согласно примеру 148, 240 мг 141 с превращали в 141 в виде белого твердого вещества (112 мг, 50%). ЖХМС: [М+Н]+ 571.
Пример 142 2-(3-(5-(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 142
Пример 142а 5-бром-3-(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 142а
Раствор 5-бром-1-метил-3-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-она 112а (2.8g, 9.9 ммоль) в безводном ДМФА (10 мл) обрабатывали 60% дисперсией NaH в минеральном масле (0.5 г, 13 ммоль) при перемешивании в атмосфере азота. После выделения газа реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 30 минут. В это же время реакционную смесь обрабатывали MeI (0.98 г, 7 ммоль) и продолжали перемешивать в атмосфере азота в течение 2 часов. Медленно добавляли воду (50 мл) и смесь фильтровали и затем концентрировали. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат, с получением 142а (0.7 г, 24%), который использовали непосредственно без дополнительной очистки. ЖХМС: (М+Н)+ 297.
Пример 142b 2-(5-(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 142b
Смесь 142а (510 мг, 1.7 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (882 мг, 1.9 ммоль), CH3COCNa (309 мг, 3.8 ммоль), PdCl2(dppf) (153 мг, 0.19 ммоль) и K3PO4 (1 г, 3.8 ммоль), суспендированного в CH3CN (30 мл), и Н2О (2 мл) нагревали при 110°С в течение 15 часов в атмосфере аргона. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 1:4 вода/CH3CN, с получением 142b в виде коричневого твердого вещества (200 мг, 21%). ЖХМС: [М+Н]+ 555.
Смесь 142b (210 мг, 0.38 ммоль) и LiOH (372 мг, 16 ммоль) в изо-PrOH/ТГФ (1:1, 10 мл) и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали EtOAc (10 мл × 2). Объединенный экстракт концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 142 (95 мг, 50%). ЖХМС: [М+Н]+ 513. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.88 (s, 1Н), 7.43 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.30 (m, 1H), 7.21 (m, 1H), 6.84 (s, 1H), 5.71 (s, 1H), 4.58 (d, J=11.5, 1H), 4.38 (d, J=11.5, 1H), 4.13 (m, 3H), 3.94 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 2.57 (m, 4H), 2.21 (s, 3H), 1.78 (m, 4H).
Пример 143 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 143
Пример 143а 1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-илбороновая кислота 143а
К раствору 5-бром-1-метил-3-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидро-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 252а (1 г, 2.64 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолана) (2 г, 7.92 ммоль) в диоксане (40 мл) добавляли PdCl2(dppf) (215 мг, 0.26 ммоль) и СН3СООК (776 мг, 7.92 ммоль). Смесь перемешивали при 100°С в течение 6 часов в атмосфере аргона. После реакции смесь фильтровали и выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combiflash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в смеси 1:3 вода/CH3CN, с получением 143а в виде белого твердого вещества (300 мг, 33%). MS: (M+H)+ 346.
Пример 143b 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 143b
В виалу емкостью 25 мл помещали 143а (238 мг, 0.7 ммоль), 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 197d (300 мг, 0.7 ммоль), Na2CO3 (147 мг, 1.4 ммоль), PdCl2(dppf) (56 мг, 0.07 ммоль), суспендированный в ДМЭ (15 мл), и H2O (1 мл). Полученную оранжевую смесь нагревали в течение 30 минут в микроволновом реакторе Biotage при 130°С. После реакции остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в смеси 1:7 вода/CH3CN, с получением 143b в виде коричневого твердого вещества (150 мг, 33%). MS: (М+Н)+ 656.
К раствору 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 143b (120 мг, 0.18 ммоль) в пропан-2-оле (5 мл), тетрагидрофурана (5 мл) и воды (1.5 мл) добавляли LiOH (440 мг, 18 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем реакционную смесь выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 143 в виде желтого твердого вещества (50 мг, 45%). MS: (M+H)+ 614. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.79 (s, 2H), 1.90 (s, 2H), 2.54-2.56 (t, J=6.5 Гц, 2Н), 2.63-2.67 (m, 2H), 2.86-2.88 (t, J=6 Гц, 2H), 3.59 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.76-3.79 (m, 1H), 4.00-4.07 (m, 3H), 4.21 (s, 3H), 4.48-4.53 (m, 2H), 4.64-4.67 (t, J=6.5 Гц, 2H), 4.75-4.78 (t, J=7 Гц, 2H), 5.90 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 7.20-7.27 (m, 3Н), 7.91-7.92 (d, 1H).
Пример 144 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-(5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксопиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 144
Пример 144а 3-(5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 144а
Смесь 5-бром-3-(5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]-пиразин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 135с (0.9 г, 2.48 ммоль), бис(пинаколато)диборона (1.26 г, 4.96 ммоль), PdCl2(dppf) (272 мг, 0.37 ммоль) и КОАс (486 мг, 4.96 ммоль) в 1,4-диоксане (40 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 15 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали этилацетатом (100 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток очищали на колонке с силикагелем с получением 144а (407 мг, 40%). MS: [М+Н]+.
Пример 144b 5-[5-фтор-3-[1-метил-5-(5-циклопропил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксопиридин-3-ил]бензилацетат]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 144b
Смесь 144а (300 мг, 0.73 ммоль), (2-бром-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил)метилацетата (212а) (297 мг, 0.66 ммоль), PdCl2(dppf) (73 мг, 0.1 ммоль) и 2М раствора Ыа2СОз (2 мл) в ДМЭ (8 мл) нагревали при 120°С в микроволновом излучении в течение 0.5 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 144b (173 мг, 40%). MS: [M+H]+ 657.
Смесь 144b (170 мг, 0.26 ммоль) и гидрата LiOH (104 мг, 2.6 ммоль) в изо-PrOH (15 мл) и H2O (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали EtOAc (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 144 (50 мг, 31%). MS: [M+H]+ 615. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 7.89 (d, J=2.0, 1H), 7.26 (d, J=2.0, 1H), 7.22-7.18 (m, 2H), 5.89 (s, 1H), 4.52-4.46 (m, 2H), 4.17-4.11 (m, 1H), 4.02-3.97 (m, 3H), 3.82 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.16-3.14 (m, 2H), 3.10-3.03 (m, 1H), 2.96-2.90 (m, 1H), 2.87-2.85 (m, 2H), 2.65-2.53 (m, 2H), 1.97-1.85 (m, 5H), 0.62-0.58 (m, 2H), 0.53-0.50 (m, 2H).
Пример 145 2-(2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-(4-(пиперидин-4-ил)фениламно)-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 145
Пример 145а трет-бутил-4-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)-пиперидин-1-карбоксилат 145а
Соединение 145а синтезировали с применением той же процедуры, как в Примере 112а, за исключением применения трет-бутил-4-(4-аминофенил)пиперидин-1-карбоксилата (0.83g, 3.0 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она (0.88 г, 3.3 ммоль), карбоната цезия (1.27 г, 3.9 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (0.275 г, 0.3 ммоль), Ксантфоса (0.26 г, 0.45 ммоль) и 1,4-диоксана (30 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение ночи. Выделяли и очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, этилацетат/гексаны) с получением 80% выхода (1.1 г) трет-бутил-4-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)-пиперидин-1-карбоксилата 145а в виде твердого вещества: MS (ESI+) m/z 465.0 (М+Н).
Пример 145b
Смесь соединения 145b синтезировали с применением той же процедуры, как в Примере 121b, за исключением применения 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (162 мг, 0.35 ммоль), трет-бутил-4-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)-пиперидин-1-карбоксилата 145а (135 мг, 0.3 ммоль), 1М раствора карбоната натрия (1.2 мл, 1.2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (18 мг, 0.015 ммоль) и 1,2-диметоксиэтана (3 мл). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, этилацетат/гексаны) получали 145b (120 мг) в виде желтого масла.
Пример 145с
Смесь соединения синтезировали с применением той же процедуры, как в Примере 121с, за исключением применения 145b (120 мг), трифторуксусной кислоты (0.5 мл, 6.5 ммоль) в хлористом метилене (7 мл). Выделяли и концентрировали досуха с получением соединения 145 с в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без очистки.
Соединение 145 синтезировали с применением той же процедуры, как в Примере 121, за исключением применения смеси ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл) и изопропанола (1 мл), соединения 145с и моногидрата гидроксида лития (50 мг, 1.30 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, хлористый метилен/20% ТЭА в метаноле) получали желтое твердое вещество (68 мг), которое снова вымывали из колонки на основе алюминия (этилацетат) с получением 15% выхода (3 стадии, 25 мг) 145 в виде белого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 579.4 (М+Н).
Пример 146 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 146
Пример 146а 5-бром-1-метил-3-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 146а
Суспензию 5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-амина 101е (1 г, 6.6 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1.7 г, 6.6 ммоль), Ксантфоса (380 мг, 0.66 ммоль), Pd2(dba)3 (602 мг, 0.66 ммоль) и Cs2CO3 (4 г, 13.2 ммоль) в диоксане (30 мл) нагревали в герметичной пробирке при 120°С в течение 2 часов в атмосфере азота. После реакции растворитель фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме с получением желтого твердого вещества. Желтое твердое вещество промывали EtOAc (10 мл × 3) с получением 146а в виде желтого твердого вещества (1 г, 45%), которое использовали без дополнительной очистки. MS: (М+Н)+ 338.
Пример 146b 2-(1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 146b
В виалу емкостью 25 мл помещали 5-бром-1-метил-3-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 145а (500 мг, 1.48 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (664 мг, 1.48 ммоль), СН3СООНа (243 мг, 2.96 ммоль). PdCl2(dppf) (121 мг, 0.148 ммоль) и K3PO4 (790 мг, 2.96 ммоль), суспендированный в CH3CN (50 мл), и Н2О (3 мл). Затем ее нагревали при 110°С в течение 12 часов в атмосфере аргона. После реакции смесь выпаривали, и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в смеси 1:5 вода/, получением 146b в виде коричневого твердого вещества (200 мг, 23%). MS: (М+Н)+ 596.
К раствору 2-(1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 146b (180 мг, 0.3 ммоль) в пропан-2-оле (9 мл), тетрагидрофурана (9 мл) и воды (3 мл) добавляли LiOH (726 мг, 30 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. После реакции смесь выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 146 в виде белого твердого вещества (67 мг, 41%). MS: (M+H)+ 554. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.80 (s, 2Н), 1.90 (s, 2Н), 2.49 (s, 3Н), 2.54-2.57 (t, 2Н), 2.63-2.67 (m, 2Н), 2.93-2.96 (t, J=5.5 Гц, 2Н), 3.64 (s, 2Н), 3.70 (s, 3Н), 4.02-4.06 (m, 3 Н), 4.18-4.23 (m, 3Н), 4.49-4.57 (m, 2Н), 5.89 (s, 1Н), 6.72 (s, 1H), 7.23 (s, 1Н), 7.36-7.38 (d, 1H), 7.41-7.42 (d, 1H), 7.49-7.52 (t, 1H), 7.1 (s, 1H).
Пример 147 2-(3-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-c][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 147
Пример 147а 6-хлор-4-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-2-метилпиридазин-3(2Н)-он 147а
Смесь 6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-амина 110b (0.8 г, 5.76 ммоль), ксантфоса (360 мг, 0.623 ммоль), Pd2dba3 (384 мг, 0.42 ммоль), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазип-3(2Н)-она 103е (1.28 г, 5.76 ммоль) и Cs2CO3 (5.05 g. 17.3 ммоль) в 1,4-диоксане (40 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали МеОН (60 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 147а (1.3 г.81%). MS: [М+Н]+ 282.
Пример 147b 2-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 147b
Смесь 6-хлор-4-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-2-метилпиридазин-3(2Н)-она 147а (400 мг, 1.42 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-бензилацетата 114а (660 мг, 1.42 ммоль), PdCl2(dppf) (155 мг, 0.21 ммоль), K3PO4 (150 мг) и NaOAc (50 мг) в MeCN (20 мл), и Н2О (4 мл) нагревали при 110°С в герметичной пробирке в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 147b (273 мг, 33%). MS: [М+Н]+ 584.
Смесь 2-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 147b (410 мг, 0.7 ммоль) и гидрата LiOH (590 мг, 14 ммоль) в изо-PrOH (20 мл), и H2O (4 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на преп-ВЭЖХ с получением 147 (120 мг, 32%). MS: [М+Н]+ 542. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.30 (s, 1Н), 7.90 (s, 1H), 7.49-7.46 (m, 1H), 7.41-7.37 (m, 2H), 6.51 (s, 1H), 6.04 (s, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.62-4.60 (m, 1H), 4.48-4.45 (m, 1H), 4.39-4.35 (m, 1H), 4.18-4.06 (m, 3H), 4.04-3.95 (m, 4H), 3.90-3.85 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 2.60-2.56 (m, 2H), 2.51-2.45 (m, 2H), 1.82-1.74 (m, 2H), 1.73-1.64 (m, 2H).
Пример 148 2-(3-(5-(5-фторпиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 148
Пример 148а 5-бром-3-(5-фторпиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 148а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1,4-диоксан (50 мл), 5-фторпиридин-2-амин (0.67 г, 6 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.34 г, 5 ммоль) и карбонат цезия (4.89 г, 15 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (576 мг, 1 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (460 мг, 0.5 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 15 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 2). Органические слои объединяли и промывали солевым раствором (50 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток промывали ацетонитрилом (30 мл) и фильтровали с получением 148а (900 мг, 61%). MS: [M+H]+.
Пример 148b 2-(5-(5-фторпиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 148b
В герметичную пробирку помещали смесь 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (232 мг, 0.5 ммоль), 148а (148 мг, 0.50 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (25 мг, 0.03 ммоль), K3PO4.3H2O (266 мг, 1.0 ммоль) и NaOAc (82 мг, 1.0 ммоль) в CH3CN (18 мл). Систему вакуумировали и повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 ДХМ/МеОН, с получением 148b в виде желтого твердого вещества (200 мг, 72%). MS: [M+H]+ 556.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 148b (200 мг, 0.36 ммоль) в ТГФ/ИПС/H2O (6 мл/б мл/2 мл) добавляли LiOH (87 мг, 3.6 ммоль). Указанную смесь перемешивали в течение 0.5 часов. Затем добавляли 20 мл Н2О и экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получение твердого желтого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 148 в виде белого твердого вещества (110 мг, 59%). ЖХМС: [М+Н]+ 514. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.77 (s, 1Н), 8.62 (d, J=2.0, 1H), 8.16 (d, J=2.5, 1H), 7.59 (m„ 1H), 7.47 (t, J=7.5,1H), 7.39-7.14 (m, 2H), 7.34 (m, 2H), 6.52 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.35 (d, J=4.0, 2H), 4.17 (m, 2 H), 4.10 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.60 (m, 2H), 2.48 (m, 2H), 1.80 (t, J=5.5, 2H), 1.70 (m, 2H).
Пример 149 2-(3-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-c][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 149
Пример 149а 2-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 149а
Смесь 2-(ацетоксиметил)-5-фтор-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)фенилбороновой кислоты 210d (150 мг, 0.38 ммоль), 5-бром-3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 110 с (122 мг, 0.38 ммоль), PdCl2(dppf) (41 мг, 0.056 ммоль), K3PO4 (100 мг) и NaOAc (50 мг) в MeCN (10 мл), и H2O (3 мл) нагревали при 110°С в герметичной пробирке в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 149а (120 мг, 53%). MS: [М+Н]+ 601.
Смесь 149а (120 мг, 0.2 ммоль) и гидрата LiOH (84 мг, 2 ммоль) в изо-PrOH (10 мл) и H2O (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (10 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 149 (60 мг, 54%). MS: [М+Н]+ 559. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 7.82 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.10 (d, J=9.0,2H), 6.62 (s, 1H), 5.77 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.43-4.35 (m, 2H), 4.11-4.07 (m, 3Н), 4.00-3.99 (m, 2H), 3.93-3.90 (m, 3Н), 3.60 (s, 3H), 2.55-2.52 (m, 2H), 2.46-2.43 (m, 2H), 1.82-1.78 (m, 2H), 1.71-1.67 (m, 2H).
Пример 150 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}пиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 150
Пример 150а 3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 150а
Смесь 5-бром-3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 110 с (1.3 г, 4.0 ммоль), бис(пинаколато)диборон (2.03 г, 8 ммоль), PdCl2(dppf) (439 мг, 0.6 ммоль) и КОАс (784 мг, 8.0 ммоль) в 1,4-диоксане (60 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 15 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали EtOAc (100 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток очищали на колонке с силикагелем с получением 150а (446 мг, 30%). MS: [М+H]+ 373.
Пример 150b [4-фтор-2-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}пиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 150b
Смесь 150а (260 мг, 0.70 ммоль), (2-бром-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил)метилацетата 218а (225 мг, 0.50 ммоль), PdCl2(dppf) (55 мг, 0.075 ммоль), 2 М раствора Na2CO3 (1.5 мл) в ДМЭ (8 мл) нагревали при 120°С в микроволновом излучении в течение 0.5 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 150b (154 мг, 50%). MS: [M+H]+ 618.
Смесь 150b (150 мг, 0.24 ммоль) и гидрата LiOH (96 мг, 2.4 ммоль) в изо-PrOH (15 мл) и H2O (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на преп-ВЭЖХ с получением 150 (70 мг, 51%). MS: [M+H]+ 576. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) 5 8.22 (s, 1Н), 8.00 (s, 1H), 7.32-7.29 (m, 2H), 7.17-7.15 (m, 1H), 5.93 (s, 1H), 4.86-4.85 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.36-4.28 (m, 2H), 4.10-3.84 (m, 7H), 3.57 (s, 3H), 3.02-2.92 (m, 1H), 2.90-2.76 (m, 3H), 1.86-1.74 (m, 4H).
Пример 151 2-(3-(5-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 151
Пример 151a 2-(5-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 151а
В герметичную пробирку емкостью 44 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 3-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 155n (60 мг, 0.18 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (110 мг, 0.23 ммоль), Pd(PPh3)4 (21 мг, 0.0.18 ммоль) в 2 N Na2CO3 (3 мл), ДМЭ (2 мл), и диоксан (3 мл). После перемешивания реакционной смеси при 100°С в течение 14 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:МеОН, 85:15) с получением 40% (40 мг) 2-(5-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 151а в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 151а (40 мг, 0.068 ммоль), LiOH⋅H2O (20 мг, 0.48 ммоль), ТГФ (2 мл), изо-PrOH (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 88% выхода (33 мг) 151; MS(ESI+) m/z 551.3 (M+H).
Пример 152 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]бензимидазол-1-он 152
Пример 152а N-(2-гидроксиэтил)-1H-бензо[d]имидазол-2-карбоксамид 152а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 1Н-бензо[d]имидазол-2-карбоновую кислоту (1.50 г, 9.26 ммоль) и тионилхлорид (10 мл). После нагревания с обратным холодильником в течение 16 часов, суспензию охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали толуолом (10 мл) и сушили в вакууме при комнатной температуре в течение 5 часов. Полученное твердое вещество помещали в одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, с последующим помещением хлороформа (10 мл) и 2-гидроксиэтиламина (559 мг, 9.17 ммоль). После перемешивания при кипячении с обратным холодильником в течение 16 часов реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок измельчали с водой (20 мл), и сушили в вакуумной печи при 45°С с получением 73% выхода (1.41 г) 152а в виде белого твердого вещества: тк 194-195°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 13.13 (s, 1Н), 8.74 (s, 1H), 7.71-7.29 (m, 4H), 4.80 (s, 1H), 3.55 (dd, 2H, J=10.5, 5.5 Гц), 3.38 (dd, 2H, J=10.5, 5.5 Гц); MS (APCI+) m/z 206.6 (M+H).
Пример 152b 3,4-дигидропиразино[1,2-а]бензимидазол-1-он 152b
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 152а (1.41 г, 6.84 ммоль) и ДМФА (10 мл) и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Добавляли по каплям раствор тионилхлорида (896 мг, 7.53 ммоль) в ДМФА (5 мл). Реакционную смесь нагревали при 150°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный осадок разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 52% выхода (672 мг) 152b в виде коричневого твердого вещества: тк>250°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.53 (s, 1H), 7.76 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.66 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.40 (t, 1H, J=9.0 Гц), 7.31 (t, 1H, J=9.0 Гц), 4.41 (t, 2H, J=6.0 Гц), 3.71 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 188.4 (M+H).
Пример 152с 3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]бензимидазол-1-он 152с
В реактор высокого давления из нержавеющей стали емкостью 250 мл помещали 10% палладий на углероде (50% полной массы, 150 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 152b (670 мг, 3.58 ммоль) в уксусной кислоте (25 мл). Реактор вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 350 psi и перемешивали при 95°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и в реактор помещали азот. ДобавлялиЦелит 521 (1.00 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×25 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении. К полученному осадку добавляли воду (10 мл), с последующим добавлением карбоната калия с доведением рН до 9. Смесь экстрагировали хлористым метиленом (4×20 мл) и органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 71% выхода 152с (487 мг) в виде белого твердого вещества: тк>250°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 7.86 (s, 1Н), 3.98 (t, 2H, J=6.5 Гц), 3.51 (m, 2H), 2.50 (m, 4H), 1.75 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 192.6 (M+H).
Пример 152d 2-бром-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-a]бензимидазол-2-ил)бензилацетат 152d
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 152 с (485 мг, 2.54 ммоль), 104g (1.56 г, 5.08 ммоль), карбонат цезия (1.66 г, 5.08 ммоль), N,N'-диметилэтилендиамин (447 мг, 5.08 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли иодид меди (484 мг, 2.54 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С (температура масляной бани) в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением желтого масла, которое растворяли в хлористом метилене (5 мл). Добавляли ацетилхлорид (506 мг, 2.54 ммоль) и триэтиламин (1.28 г, 12.7 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разбавляли хлористым метиленом (50 мл) и насыщенным водным бикарбонатом натрия (20 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 13% выхода (140 мг) 152d в виде желтого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.60 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.27 (t, 1H, 7=8.0 Гц), 7.18 (d, 1H, J=8.0 Гц), 5.26 (d, 1H, J=12.0 Гц), 5.14 (d, 1H, 7=12.0 Гц), 4.32 (m, 1H), 4.24 (m, 1H), 4.14 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.56 (m, 2H). 2.07 (s, 3H), 1.83 (m, 4H); MS (APCI+) m/z 418.8 (M+H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 152d (140 мг, 0.335 ммоль), 104h (140 мг, 0.426 ммоль), карбонат натрия (106 мг, 1.00 ммоль), 1,4-диоксан (5 мл) и воду (1 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия (39 мг, 0.033 ммоль). После нагревания при 100°С в течение 5 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли карбонат калия (500 мг, 3.62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 152с выходом 9% (15 мг) в виде желтого твердого вещества: тк 205-206°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.18 (s, 1H), 8.70 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.64 (m, 1H), 8.30 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.51-7.47 (m, 2H), 7.39 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.35 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.31 (d, 1H, J=6.0 Гц), 4.92 (t, 1H, J=4.5 Гц), 4.36 (m, 2H), 4.27 (m, 2H), 4.19 (m, 1H), 3.97 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.63 (m, 2H). 2.52 (m, 2H), 1.87 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 498.2 (M+H).
Пример 153 2-(2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 153
Пример 153а 5-бром-1-метил-3-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1H)-он 153а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 120а (1.14 г, 2.62 ммоль), хлористый метилен (10 мл) и трифторуксусную кислоту (10 мл). Раствор перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. По прошествии указанного времени раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между хлористым метиленом (100 мл) и 1 М водным гидроортофосфатом калия (30 мл). Водный слой экстрагировали а 20% (об./об.) растворе метанола в хлористом метилене (3×100 мл). Органические экстракты объединяли, промывали солевым раствором (20 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 68% выхода (600 мг) 153а в виде беловатого твердого вещества: тк 170-171°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 9.30 (s, 1Н), 7.62 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 6.97 (d. 1H, J=7.8 Гц), 4.10 (br s, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.43 (s, 3H), 2.96 (t, 2H, J=5.7 Гц), 2.68 (t, 2H, J=5.7 Гц); MS (ESI+) m/z 334.0 (M+H).
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 153а (168 мг, 0.500 ммоль), 111a (289 мг, 0.600 ммоль), карбонат натрия (159 мг, 1.50 ммоль), ДМФА (5 мл), воду (2.5 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (58 мг, 0.050 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли метанол (2 мл), воду (2 мл) и моногидрат гидроксида лития (42 мг, 1.00 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре и затем концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали а 20% (об./об.) растворе метанола в хлористом метилене (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 4% выхода (12 мг) 153 в виде беловатого твердого вещества: 209-210°С dec; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.04 (s, 1Н), 7.74 (s, 1H), 7.61 (d, 1H, J=7.4 Гц), 7.53 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.46 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.40 (s, 1H), 7.32 (d, 1H, J=7.4 Гц), 6.90 (d, 1H, J=8.3 Гц), 4.77 (m, 1H), 4.53 (m. 1H), 4.43 (m, 1H), 4.02 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.77 (s, 2H), 3.58 (s, 3H), 2.91 (m, 4H), 2.79 (s, 2H), 2.63 (m, 2H), 1.78 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 568.1 (M+H).
Пример 154 2-(2-(гидроксиметил)-3-(6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 154
Пример 154а 5-бром-3-(пиримидин-4-иламино)пиридин-2(1H)-он 154а
В трехогорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 2-аминопиримидин (376 мг, 3.95 ммоль), 3,5-дибромпиридин-2(1Н)-он (1.00 г, 3.95 ммоль), 1 М раствор гексаметилдисилазида лития в ТГФ (20 мл, 20.0 ммоль) и 1,4-диоксан (25 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (194 мг, 0.211 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (165 мг, 0.197 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью флэш-хроматографии, с последующим измельчением с этилацетатом (20 мл) с получением 24% выхода (250 мг) 154а в виде беловатого твердого вещества: тк 150-151°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 12.03 (s, 1H), 9.27 (s, 1H), 8.54 (s, 1H), 8.20 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.85 (s, 1H), 6.64 (d, 1H, J=6.0 Гц); MS (ESI+) m/z 268.2 (M+H).
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 154а (175 мг, 0.655 ммоль), 111a (315 мг, 0.655 ммоль), карбонат натрия (208 мг, 2.00 ммоль), ДМФА (2.5 мл), воду (1.2 мл) и 1,4-диоксан (4 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (76 мг, 0.065 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли метанол (2 мл), воду (2 мл) и моногидрат гидроксида лития (82 мг, 1.95 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре и затем концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×150 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 5% выхода (15 мг) 154 в виде беловатого твердого вещества: тк 200-201°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 11.99 (s, 1Н), 9.34 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.21 (d, 1H, J=6.0 Гц), 8.00 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.44 (t, 1H, J=7.5 Гц), 7.35 (d, 1H, J=7.0 Гц), 6.70 (d, 1H, J=5.5 Гц), 5.05 (br s, 1H), 4.28 (t, 1H, J=11.0 Гц), 4.18 (d, 1H, J=10.0 Гц), 3.96 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 2.84 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 1.76 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 500.1 (M+H).
Пример 155 5,5,6,6,7,7-гексадейтеро-2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 155
Пример 155с этил-4,4,5,5,6,6-гексадейтеро-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксилат 155
Промежуточное соединение 155а (1.53 г) подвергали взаимодействию с этил-2-меркаптоацетатом (1.57 г) с применением такой же общей процедуры, как описано в Примере 105b. Промежуточное соединение 155с получали в виде прозрачного масла с выходом 51% (1.46 г): 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.46 (s, 1H), 4.31 (q, 2H, 7=7.5 Гц), 2.77 (s, 2H), 1.35 (t, 3H, J=7.5 Гц); MS (ESI+) m/z 217 (M+H).
Пример 155d 4,4,5,5,6,6-гексадейтеро-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоновая кислота 155d
Промежуточное соединение 155d (1.34 г) омыляли с применением такой же общей процедуры, как описано в Примере 105 с.Промежуточное соединение 155d получали в виде белого твердого вещества с выходом 94% (1.10 г): тк 192-193°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 12.75 (br s, 1Н), 7.40 (s, 1H), 2.73 (s, 2H).
Пример 155е 4,4,5,5,6,6-гексадейтеро-N-метокси-N-метил-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-карбоксамид 155е
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом, помещали 155d (5.67 г, 30.1 ммоль), хлористый метилен (100 мл), и ДМФА (110 мг, 1.50 ммоль) и охлаждали до 0°С. К полученному раствору добавляли по каплям оксалил хлорид (4.21 г, 33.1 ммоль). После завершения добавления реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлористом метилене (100 мл) и полученный раствор охлаждали до 0°С. Добавляли триэтиламин (9.15 г, 90.3 ммоль) и гидрохлорид N,О-диметилгидроксиламина (3.23 г, 33.1 ммоль). После завершения добавления охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разделяли между водой (100 мл) и этилацетатом (200 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (100 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл), с последующим промыванием солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 100% этилацетат/гексаны) с получением 90% выхода 155е (6.29 г) в виде белого твердого вещества: тк 47-48°С; 1H ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.62 (s, 1H), 3.76 (s, 3Н), 3.31 (s, 3H), 2.77 (s, 2H); MS (ESI+) m/z 232.1 (М+Н).
Пример 155f 1-(4,4,5,5,6,6-гексадейтеро-4,5,6,7-тетрагидробензо[6]тиофен-2-ил)проп-2-ен-1-он 155f
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 155е (6.29 г, 27.2 ммоль) и безводный ТГФ (60 мл) и полученный раствор охлаждали до -25°С с помощью бани ацетон/лед. Добавляли по каплям 1.0 М раствор бромида винилмагния в ТГФ (32.3 мл, 32.6 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 часа. По прошествии указанного времени реакционную смесь разделяли между этилацетатом (250 мл) и 2 М соляной кислотой (50 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом (40 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл), с последующим промыванием солевым раствором (100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного количественного выхода 155f (5.39 г) в виде полутвердого вещества. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 155g 3-хлор-1-(4,4,5,5,6,6-гексадейтеро-4,5,6,7-тетрагидробензо[b]тиофен-2-ил)пропан-1-он 155g
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 155f (5.39 г, 27.2 ммоль), хлористый метилен (60 мл) и полученный раствор охлаждали до 0°С. Добавляли 2 М раствор хлороводорода в диэтиловом эфире (34 мл). После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 часов растворители удаляли при пониженном давлении. В результате очистки полученного осадка с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 50% этилацетат/гексаны) получали количественный выход (6.38 г) 155g в виде беловатого твердого вещества: тк 51-53°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 7.41 (s, 1H), 3.89 (t, 2H, J=7.0 Гц), 3.30 (t, 2H, J=7.0 Гц), 2.79 (s, 2H); MS (ESI+) m/z 235.1 (M+H).
Пример 155h 6,6,7,7,8,8-гексадейтеро-5,6,7,8-тетрагидро-1Н-бензо[b]циклопента[d]тиофен-3(2H)-он 155b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 155g (6.38 г, 27.2 ммоль) и 98% серную кислоту (50 мл). После перемешивания при 95°С в течение 14 часов, реакционную смесь выливали в лед (50 г) и полученную суспензию экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 50% этилацетат/гексаны) с получением 155h с выходом 56% (3.03 г) в виде беловатого твердого вещества: тк 43-44°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 2.91 (m, 6H).
Пример 155i оксим 6,6,7,7,8,8-гексадейтеро-5,6,7,8-тетрагидро-1H-бензо[b]циклопента[d]тиофен-3(2H)-оно 155i
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную механической мешалкой и подводом азота, помещали гидрохлорид гидроксиламина (1.59 г, 22.9 ммоль) и метанол (40 мл). Смесь охлаждали до 0°С с применением ледяной бани. Добавляли тригидрат ацетата натрия (3.19 г, 22.9 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли 155h (3.03 г, 15.3 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь концентрировали, повторно растворяли в хлористом метилене (200 мл) с водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 84% выхода (2.72 г) 155i в виде беловатого твердого вещества: тк 174-176°С; 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 3.12 (m, 2Н), 2.82 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 214.1 (M+H).
Пример 155i 5,5,6,6,7,7-гексадейтеро-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 155j
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 155i (2.72 г, 12.8 ммоль) и полифосфорную кислоту (150 г). После перемешивания при 80°С в течение 14 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и добавляли воду (300 мл). Полученную смесь перемешивали в течение 30 минут и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали водой (20 мл) и сушили в вакуумной печи при 45°С с получением 74% выхода (2.00 г) 155j в виде беловатого твердого вещества: тк 204-205°С; 1H ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 5.58 (s, 1H), 3.58 (m, 2Н), 2.79 (s, 2Н), 2.71 (t, 2Н, J=7.0 Гц); MS (ESI+) m/z 214.1 (M+H).
Пример 155k 2-бром-6-(5,5,6,6,7,7-гексадейтеро-1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-c]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетат 155k
В трехогорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 155j (1.00 г, 4.69 ммоль), 104g (2.89 г, 9.38 ммоль), карбонат цезия (4.59 г, 14.1 ммоль), N,N'-диметилэтилендиамин (412 мг, 4.69 ммоль) и 1,4-диоксан (35 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли иодид меди (447 мг, 2.35 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 80°С (температура масляной бани) в течение 20 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 40% этилацетат/гексаны) с получением 35% выхода (715 мг) 155k в виде беловатого твердого вещества: тк 74-75°C; 1H ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.59 (m, 1Н), 7.31 (m, 2H), 5.15 (d, 1H, J=12.0 Гц), 5.04 (d, 1H, J=12.0 Гц), 3.99 (m, 1H), 3.65 (m, 1H), 2.81 (m, 1H), 2.74 (s, 2H), 2.06 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 440.1 (M+H).
Пример 155l 2-(5,5,6,6,7,7-гексадейтеро-1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 155l
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 155k (710 мг, 1.61 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (819 мг, 3.22 ммоль), ацетат калия (474 мг, 4.83 ммоль) и 1,4-диоксан (12 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладий(II) (118 мг, 0.161 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 1551 (785 мг) в количественном выходе. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной обработки.
Пример 155m трет-бутил-3-(6-(6-бром-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридин-4-иламино)пиридин-3-ил)азетидин-1 -карбоксилат 155m
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали трет-бутил-3-(6-аминопиридин-3-ил)азетидин-1-карбоксилат (333 мг, 1.33 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (350 мг, 1.33 ммоль), карбонат цезия (870 мг, 2.70 ммоль) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (66 мг, 0.114 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (61 мг, 0.066 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 105°С в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрационный остаток промывали хлористым метиленом (2×10 мл) и объединенные фильтраты концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с получением 79% выхода (460 мг) 155m в виде зеленого твердого вещества: тк 134-136°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.75 (s, 1Н), 8.65 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.66 (dd, 1H, J=8.5, 2.0 Гц), 7.51 (s, 1H), 7.35 (d, 1H, J=8.5 Гц), 4.21 (t, 2H, J=8.0 Гц), 3.81 (m, 2H), 3.51 (s, 3H), 1.40 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 436.1 (M+H).
Пример 155n 3-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1H)-он 155n
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 155m (1.20 г, 2.76 ммоль), хлористый метилен (10 мл) и трифторуксусную кислоту (10 мл). Раствор перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. По прошествии указанного времени раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли между хлористым метиленом (100 мл) и 1 М водным гидроортофосфатом калия (30 мл). Водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×100 мл). Органические экстракты объединяли, промывали солевым раствором (20 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением количественного выхода (920 мг) 155n в виде беловатого твердого вещества: тк 123-124°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 8.72 (s, 1H), 8.65 (d, 1H, J=2.3 Гц), 8.19 (d, 1H, J=2.1 Гц), 7.71 (dd, 1H, J=8.6, 2.2 Гц), 7.51 (d, 1H, J=2.3 Гц), 7.33 (d, IH,J=8.2 Гц), 3.74 (m, 3H), 3.58 (m, 2H), 3.52 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 335.1 (M+H).
Пример 155о 2-(5-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(5,5,6,6,7,7-гексадейтеро-1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетат 155о
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали неочищенный 1551 (785 мг, предположительно 1.61 ммоль), 155n (450 мг, 1.34 ммоль), карбонат натрия (426 мг, 4.02 ммоль), ДМФА (10 мл), воду (5 мл) и 1,4-диоксан (16 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (155 мг, 0.134 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 14 часов. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 155о. Материал использовали на следующей стадии без дополнительной обработки.
Пример 155р 2-(3-(5-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-5,5,6,6,7,7-гексадейтеро-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено [2,3-с] пиридин-1(2H)-он 155р
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали неочищенный 155о с предыдущей стадии, ТГФ (8 мл), метанол (4 мл), воду (4 мл) и моногидрат гидроксида лития (420 мг, 10.0 ммоль) добавляли. Смесь перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре и затем концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 15% выхода (140 мг) 155р в виде беловатого твердого вещества: тк 140-142°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.65 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.53 (s, 1H), 8.10 (d, 1H, J=2.4 Гц), 7.67 (m, 1H), 7.45 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.31 (m, 4H), 4.81 (t, 1H, J=5.0 Гц), 4.35 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.71 (m, 3Н), 3.59 (s, 3Н), 3.55 (m, 2H), 2.96 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.77 (s, 2H); MS (ESI+) m/z 574.3 (M+H).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 150 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом, помещали 155р (140 мг, 0.244 ммоль), 37% раствор формальдегида в воде (26 мг, 0.317 ммоль) и метанол (10 мл). Добавляли суспензию цианоборогидрида натрия (48 мг, 0.732 ммоль) и хлорид цинка (50 мг, 0.366 ммоль) в метаноле (4 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 45% выхода (65 мг) 155 в виде белого твердого вещества: тк 190-192°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.65 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.58 (s, 1H), 8.15 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.67 (dd, 1H, J=8.5, 2.5 Гц), 7.46 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.33 (m, 4H), 4.81 (t, 1H, J=4.0 Гц), 4.35 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.85 (m, 3Н), 3.64 (m, 1H), 3.59 (s, 3Н), 3.42 (m, 2H), 2.98 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.47 (s, 3Н); MS (ESI+) m/z 588.2 (M+H).
Пример 156 2-(3-(5-(5-((3,3-дифторазетидин-1-ил)метил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 156
Пример 156а Метил-5-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилат 156а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 5-нитро-lH-пиразол-3-карбоновую кислоту (0.86 г, 5.5 ммоль) и безводный метанол (10 мл), и реакционную смесь охлаждали до 0°С в охлаждающей бане лед/вода. К полученному раствору добавляли по каплям тионилхлорид (1.7 г, 14.4 ммоль). После завершения добавления, баню удаляли и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении с получением количественного выхода 15ба (0.94 г) в виде белого твердого вещества: MS (ESI-) m/z 170 (М-Н).
Пример 156b Метил-1-метил-3-нитро-1H-пиразол-5-карбоксилат 156b
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее метил-5-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилат (156а) (0.94 г, 5.5 ммоль), безводный N,N-диметилформамид (11 мл), йодистый метил (0.85 г, 6 ммоль) и карбонат калия (0.83 г, 6.1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разбавляли водой (40 мл) и экстрагировали хлористым метиленом (3×25 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок подвергали флэш-хроматографии (силикагель, этилацетат/гексаны) с получением метил-1-метил-3-нитро-1H-пиразол-5-карбоксилата 156b с выходом 66% (0.67 г) в виде белого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 186.0 (М+Н). Также выделяли региоизомер метил-1-метил-5-нитро-1H-пиразол-3-карбоксилата с выходом 15% (0.15 г) в виде белого твердого вещества: MS (ESI-) m/z 186.0 (М+Н).
Пример 156с (1-метил-3-нитро-1H-пиразол-5-ил)метанол 156с Трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, капельной воронкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее 156b (0.67 г, 3.6 ммоль), ТГФ (20 мл) и охлаждали до 0°С с применением ледяной бани. 2 М раствор борогидрида лития (3.6 мл, 7.2 ммоль) добавляли по каплям со скоростью позволяющей поддержать внутреннюю температуру реакции ниже 5°С. После завершения добавления охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь охлаждали до 0°С с применением ледяной бани и добавляли по каплям насыщенный водный бикарбонат натрия (30 мл). Слои разделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, этилацетат/гексаны) с получением количеств, выхода (0.56 г) (1-метил-3-нитро-1H-пиразол-5-ил)метанола (156с) в виде беловатого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 158.1 (М+Н).
Пример 156d 5-(бромметил)-1-метил-3-нитро-1H-пиразол 156d
Круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 156с (0.56 г, 3.6 ммоль) и хлороформ (10 мл). Реакционную смесь охлаждали до 0°С с применением ледяной бани и добавляли по каплям трибромид фосфора (0.98 г, 3.6 ммоль). Охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до 0°С и разбавляли хлористым метиленом (25 мл). Насыщенный водный бикарбонат натрия добавляли до достижения рН 8.5. Слои разделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×25 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (30 мл), сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением количественного выхода (0.79 г) 156d в виде беловатого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 222.1 (М+Н).
Пример 156е 5-((3,3-дифторазетидин-1-ил)метил)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразол 156е
В герметичную пробирку с магнитной мешалкой помещали ДМФА (5 мл), 5-(бромметил)-1-метил-3-нитро-1H-пиразол 156d (0.39 г, 1.78 ммоль), гидрохлорид 3,3-дифторазетидина (276 мг, 2.13 ммоль) и DIPEA (0.8 мл, 4.45 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 65°С в течение 3-5 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали досуха при пониженном давлении и полученный осадок разбавляли смесью этилацетата (15 мл) и воды (15 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×15 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением количественного выхода 156е в виде желтого масла, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS (ESI+) m/z 233.0 (М+Н).
Пример 156f 5-((3,3-дифторазетидин-1-ил)метил)-1-метил-1Н-пиразол-3-амин 156f
Бутыль реактора Парра продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (30% полной массы, 150 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 156е (1.78 ммоль) в этаноле (25 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 40 psi и встряхивали в течение 2 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и реакционную смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×25 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением количественного выхода 156f (360 мг) в виде желтого масла: MS (ESI+) m/z 203.1 (М+Н).
Пример 156g 5-бром-3-(5-((3,3-дифторазетидин-1-ил)метил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 156g
Промежуточное соединение 156g синтезировали с применением той же процедуры, как в Примере 112а, за исключением применения 156f (360 мг, 1.78 ммоль), 3,5-дибром-1-метил-1Н-пиридин-2-она (0.43 г, 1.6 ммоль), карбоната цезия (1.56 г, 4.8 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (0.15 г, ОЛбммоль), Ксантфоса (0.18 г, 0.32 ммоль) и 1,4-диоксана (18 мл). Реакционную смесь нагревали при 115°С в течение 24 часов. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 38% выход (0.23 г) 156g в виде зеленого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 390.1 (М+Н).
Согласно примеру 121с, за исключением применения 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (165 мг, 0.35 ммоль), 156g (115 мг, 0,3 ммоль), 1М раствора карбоната натрия (1.2 мл, 1.2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (18 мг, 0.015 ммоль) и 1,2-диметоксиэтана (3 мл). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 156h (смесь соединения 156 и его ацетата) в виде желтого масла (190 мг). Со смеси (0.3 ммоль) снимали защиту с применением смеси ТГФ (2 мл), воды (1 мл) и изопропанола (2 мл) и моногидрата гидроксида лития (80 мг, 1.90 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 12% выход (2 стадии, 22 мг) 156 в виде белого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 604.4 (М+Н).
Пример 157 2-(2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-метокси-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 157
Пример 157а 5-бром-3-(5-метокси-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 157
В герметичную пробирку, снабженную магнитной мешалкой и помещали 5-метокси-1Р-пиразол-3-амин (1.9 г, 17 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (4.9 г, 18 ммоль) и карбонат цезия (12 г, 37 ммоль) в 1,4-диоксане (160 мл). После барботирования указанного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (1.1 г, 2 ммоль) и трис(дибензилиденацетон) дипалладия(0) (1.1 г, 1.2 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени добавляли H2O (50 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении до почти полной степени высушивания и желаемый продукт выпал в растворе. В результате фильтрования и промывания Et2O (10 мл) получали 12% выход (590 мг) неочищенного 157а.
Пример 157b 2-(5-(5-метокси-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 157b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 157а (94 мг, 0.3 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (180 мг, 0.4 ммоль), ДМЭ (4 мл) и 1М водный карбонат натрия (0.9 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (18 мг, 0.02 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 25 минут. По прошествии указанного времени добавляли EtOAc (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 19% выхода (33 мг) 157b.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой помещали 157b (33 мг, 0.06 ммоль), гидроксид лития (10 мг, 1.2 ммоль), ТГФ (0.3 мл), изо-PrOH (0.3 мл) и воду (0.6 мл). Смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли EtOAc (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:Et2O:MeOH, с получением 76% выхода (23 мг) 157. MS (ESI+) m/z 515.4 (M+Н).
Пример 158 5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло [7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 158
Пример 158а трет-бутил-2-(дифенилметиленамино)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат 158а
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли трет-бутил-2-хлор-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат (1.09 г, 4.05 ммоль), дифенилметанимин 26 (2.20 г, 12.14 ммоль), Pd(OAc)2 (181.6 мг, 0.809 ммоль), BINAP (503.8 мг, 0.809 ммоль), Cs2CO3 (6.59 г, 20.23 ммоль) и толуол (16 мл). Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 дней. Реакционную смесь фильтровали, и растворитель удаляли в вакууме. Остаток 158а непосредственно использовали на следующей стадии.
Пример 158b трет-бутил-2-амино-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат 158b
Промежуточное соединение 158а добавляли в круглодонную колбу. Добавляли МеОН (50 мл) и NH2OH HCl (1.76 г, 25.3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 5 часов. Растворители удаляли в вакууме и в результате применения колонки с силикагелем (МеОН:ДХМ=10:90) получили 158b в виде темного масла, 851 мг (84%, 2 стадии).
Пример 158с трет-бутил-2-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат 158с
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 158b (851 мг, 3.41 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.37 г, 5.12 ммоль), Pd2(dba)3 (312.5 мг, 0.341 ммоль), Ксантфос (316 мг, 0.546 ммоль), Cs2CO3 (3.67 г, 11.3 ммоль) и диоксан (17 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение ночи. К полученной смеси добавляли ДХМ (200 мл), и затем полученную смесь промывали водой (30 мл×3). Добавляли ДХМ (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл×3), солевым раствором (30 мл×1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Добавляли ДХМ/диэтиловый эфир (1:2,5 мл), с последующей обработкой ультразвуком, осадок фильтровали в виде 158с, зеленые твердые вещества, 865 мг (58%).
Пример 158d 5-[2-(ацетоксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 158d
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 158с (300 мг, 0.689 ммоль), бороновый эфир 111а (365 мг, О.758 ммоль), Pd(PPh3)4 (39.8 мг, 0.034 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 Ν, 2.27 мл. 2.27 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (3.0 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН: хлористый метилен=5:95) получали 158d.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 158d, ТГФ (5 мл), изо-пропанол (5 мл), воду (5 мл), моногидрат LiOH (278 мг). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=10:90) получали 158 в виде желтого твердого вещества (145 мг). MS (ESI+) m/z 568.3 (М+Н).
Пример 159 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]имидазо[4,5-с]пиридин-1-он 159
Пример 159а 3-нитро-4-(пиперидин-1-ил)пиридин 159а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную обратным холодильником и магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 3-нитро-4-хлорпиридин (10.0 г, 63.3 ммоль), пиперидин (16.2 г, 190 ммоль) и этанол (200 мл). После нагревания при 70°С в течение 2 часов растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток разделяли между этилацетатом (200 мл) и 10% водным карбонатом калия (100 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 100% выхода (15.2 г) 159а в виде желтого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.81 (s, 1H), 8.31 (d, 1H, J=6.0 Гц), 6.86 (d, 1H, J=6.0 Гц), 3.22 (t, 4H, J=4.5 Гц), 1.72 (m, 6H); MS (APCI+) m/z 208.4 (M+H).
Пример 159b 6,7,8,9-тетрагидропиридо[3,4-b]имидазо[4,5-с]пиридин 159b
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную обратным холодильником и магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 159а (6.00 г, 29.0 ммоль) и триэтилфосфит (200 мл). После нагревания при 110°С в течение 24 часов триэтилфосфит удаляли при пониженном давлении и остаток разделяли между хлористым метиленом (200 мл) и водой (100 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 53% выхода (2.66 г) 159b в виде желтого твердого вещества: тк 94-95°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.98 (s, 1Н), 8.37 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.22 (d, 1H, J=6.0 Гц), 4.09 (t, 2H, J=6.0 Гц), 3.11 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.15 (m, 2H), 2.05 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 174.1 (M+H).
Пример 159с 2-оксид 6,7,8,9-тетрагидропиридо[3,4-b]имидазо[4,5-с]пиридина 159с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником и магнитной мешалкой, помещали 159b (2.50 г, 14.4 ммоль) и хлористый метилен (50 мл), и реакционную смесь охлаждали до 0°С. Добавляли 3-хлорпербензойную кислоту (4.99 г, 28.9 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 часов. По прошествии указанного времени растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 83% выхода (2.26 г) 159с в виде желтого твердого вещества: тк 178-179°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.71 (s, 1H), 8.15 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.19 (d, 1H, J=6.0 Гц), 4.12 (t, 2H, J=6.0 Гц), 3.12 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.18 (m, 2H), 2.05 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 190.4 (M+H).
Пример 159d 6,7,8,9-тетрагидропиридо[3,4-b]имидазо[4,5-с]пиридин-1-он 159d,
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную обратным холодильником и магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 159с (2.26 г, 12.0 ммоль) и уксусный ангидрид (90 мл). После нагревания при 140°С в течение 1.5 часов растворитель удаляли при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 62% выхода (1.40 г) 159d в виде желтого твердого вещества: тк >250°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 11.3 (s, 1H), 7.24 (d, 1H, J=7.0 Гц), 6.39 (d, 1H, J=6.0 Гц), 4.07 (t, 2H, J=6.0 Гц), 3.11 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.13 (m, 2H), 2.02 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 190.7 (M+H).
Пример 159е 3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]имидазо[4,5-с]пиридин-1-он 159e
В реактор высокого давления из нержавеющей стали емкостью 250 мл помещали 10% палладий на углероде (50% полной массы, 250 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 159d (1.07 г, 5.66 ммоль) в уксусной кислоте (50 мл). Реактор вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 350 psi и перемешивали при 85°С в течение 48 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и реактор наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (1.00 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×25 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении. К полученному осадку добавляли воду (10 мл), с последующим добавлением карбоната калия для доведения рН до 9. Смесь экстрагировали хлористым метиленом (4 х 20 мл) и органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 69% выхода 159e (749 мг) в виде белого твердого вещества: тк >250°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 5.28 (s, 1H), 3.85 (t, 2H, J=6.0 Гц), 3.62 (m, 2H), 2.92 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.81 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.03 (m, 2H), 1.94 (m, 2H); MS (APCI+) m/z 192.7 (M+H).
Пример 159f 2-бром-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]имидазо[4,5-с]пиридин-2-ил)бензилацетат 159f
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 159е (745 мг, 3.90 ммоль), 104g (2.40 г, 7.80 ммоль), карбонат цезия (2.54 г, 7.80 ммоль), иодид меди (743 мг, 3.90 ммоль) и 1-метил-2-пирролидинон (7 мл). После нагревания при 120°С (температура масляной бани) в течение 16 часов смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между хлористым метиленом (100 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением желтого масла, которое растворяли в хлористом метилене (5 мл). Добавляли ацетилхлорид (306 мг, 3.90 ммоль) и триэтиламин (1.97 г, 19.5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разбавляли хлористым метиленом (50 мл) и насыщенным водным бикарбонатом натрия (20 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×50 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 6% выхода (100 мг) 159f в виде розового масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.60 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.34 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.16 (d, 1H, J=8.0 Гц). 5.18 (m, 2H), 4.18 (m, 1H), 4.04 (m. 1H), 3.87 (m, 1H), 3.79 (m, 1H), 3.16 (m, 1H), 3.05 (m, 1H), 2.95 (m, 2H), 2.09-1.99 (m, 7H); MS (APCI+) m/z 418.9 (M+H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 159f (100 мг, 0.239 ммоль), 104h (350 мг, 1.07 ммоль), карбонат натрия (183 мг, 1.72 ммоль), 1,4-диоксан (8 мл) и воду (2 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (66 мг, 0.057 ммоль). После нагревания при 100°С в течение 5 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли карбонат калия (500 мг, 3.62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 159 с выходом 10% (12 мг) в виде светло-коричневого твердого вещества: тк >250°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.16 (s, 1Н), 8.71 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.64 (s, 1H), 8.29 (dd, 1H, J=6.0, 1.5 Гц), 7.53 (s, 1H), 7.45 (td, 1H,.7=6.0, 1.5 Гц), 7.31 (m, 3H), 4.75 (m, 1H), 4.32 (m, 2H), 4.02 (m, 2H), 3.88 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.05 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.76 (t, 2H, J=5.5 Гц), 1.95 (m, 2H), 1.86 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 498.2 (M+H).
Пример 160 3-({4-[(2R)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3H,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиразин-2-он 160
Согласно примеру 121b, 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (167 мг, 0.36 ммоль), 5-бром-3-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он 160а (WO 2009/039397; 122 мг, 0.3 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (0.9 мл, 0.9 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (18 мг, 0.015 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (3 мл). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали смесь 2-(5-(4-(1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил)фениламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата 160b и 160 в виде желтого масла. Со смеси (0.3 ммоль) снимали защиту с применением смеси ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл) и изопропанола (1 мл), и моногидрата гидроксида лития (80 мг, 1.90 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 37% выход соединения 160 (2 стадии, 70 мг) в виде белого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 622.4 (M+H).
Пример 161 2-(3-(5-(1-(2-гидроксиэтил)-5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 161
Пример 161а 5-бром-3-(1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 161а
Раствор 5-бром-1-метил-3-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-она 112а (1.08 г, 3.8 ммоль) в безводном ДМФА (10 мл) обрабатывали 60% дисперсией NaH в минеральном масле (0.17 г, 4.3 ммоль) при перемешивании в атмосфере азота. После выделения газа реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 30 минут.В это же время реакционную смесь обрабатывали (2-бромэтокси)(трет-бутил)диметилсиланом (15-1) (0.908 г, 3.8 ммоль) и продолжали перемешивание в атмосфере азота в течение 10 часов. После реакции медленно добавляли воду (50 мл) и смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат, с получением 161а (1 г, 35%), который непосредственно использовали без дополнительной очистки. ЖХМС: (М+Н)+ 443.
Пример 161b 2-(5-(1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 161b
Смесь 161а (750 мг, 1.7 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (882 мг, 1.9 ммоль), CH3COONa (309 мг, 3.8 ммоль), PdCl2(dppf) (153 мг, 0.19 ммоль) и K3PO4 (1 г, 3.8 ммоль), суспендированного в CH3CN (30 мл) и H2O (2 мл) нагревали при 110°С в течение 12 часов в атмосфере аргона. После реакции смесь выпаривали и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в 1:4 вода/CH3CN, с получением 161b в виде коричневого твердого вещества (210 мг, 18%). ЖХМС: [М+Н]+ 699.
Пример 161с 2-(3-(5-(1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 161с
Смесь 161b (210 мг, 0.4 ммоль) и LiOH (372 мг, 16 ммоль) в изопропаноле/ТГФ (1:1, 10 мл) и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенный экстракт концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на преп-ВЭЖХ с получением 161с. ЖХМС: [М+Н]+ 657
Раствор 161с, камфорсульфокислоты (330 мг, 1.5 ммоль) в метаноле (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. После реакции выпаривали метанол и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 161 в виде коричневого твердого вещества (63 мг, 29%, две стадии). ЖХМС: [М+Н]+ 543. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.96 (m, 1Н), 7.45 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.24 (m, 1H), 6.51 (s, 1H), 5.87 (s, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.77 (m, 1H), 4.36 (m, 2H), 4.15 (m, 3H), 3.90 (m, 3H), 3.64 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 2.51 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.19 (s, 3H),1.79 (m, 4H).
Пример 162 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(2-метилпиримидин-4-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 162
Пример 162а 2-метилпиримидин-4-амин 162а
В сосуд стойкий к давлению, выполненный из нержавеющей стали, имеющий внутренний объем 500 мл, помещали 3-метоксипропаннитрил (10 г, 120 ммоль), 1.1.1-триметоксиэтан (39 г, 324 ммоль) и 40.0 г (560 ммоль, 24% от массы раствора аммиак-метанол). Смесь перемешивали при 130°С в течение 8 часов. После завершения реакции ее фильтровали и концентрировали с получением желтого твердого вещества. Твердое вещество промывали этилацетатом (50 мл), сушили в вакууме с получением 162а (7.8 г, 60%). ЖХМС: [М+Н]+ 110.
Пример 162b 5-бром-1-метил-3-(2-метилпиримидин-4-иламино)пиридин-2(1Н)-он 162b
Согласно примеру 148а, 2.0 г 162а и 4.0 г 3,5-дибром-1-метил-пиридин-2(1Н)-она подвергали взаимодействию с получением 162b в виде желтого твердого вещества (2.3 г, 50%). ЖХМС: [М+Н]+ 357 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.20 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.26 (d, J=4.5, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.18 (d, J=4.5, 1H), 3.59 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
Пример 162с 2-(1-метил-5-(2-метилпиримидин-4-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 162с
Согласно примеру 148b, 464 мг 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а и 443 мг 162b подвергали взаимодействию с получением 162с в виде желтого твердого вещества (386 мг, 70%). ЖХМС: [М+Н]+ 553.
Согласно примеру 148 160 мг 162с гидролизировали с получением 162 в виде белого твердого вещества (90 мг, 60%). ЖХМС: [М+Н]+ 514. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.04 (s, 1Н), 8.87 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.55 (s. 1H), 7.48 (s, 1H), 7.36 (t,J=6.5, 1H),7.12 (s, 1H), 6.52 (s, Н), 4.85 (s, 1H), 4.40 (s, 1H), 4.17-4.10 (m, 3Н), 3.92 (m, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.60 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.42 (S, 3H), 1.80 (m, 2H), 1.69 (m, 2H).
Пример 163 2-(3-(5-(1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 163
Пример 163а 5-бром-3-(1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 163а
Смесь 1-(2-(тэтрет-бутилдиметилсилилокси)этил)-1Н-пиразол-3-амина 116b (1.2 г, 5 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1.3 г, 5 ммоль), Ксантфоса (300 мг, 0.5 ммоль), Pd2(dba)3 (460 мг, 0.5 ммоль) и Cs2CO3 (4 г, 2.5 ммоль) в диоксане (30 мл) нагревали в герметичной пробирке при 120°С в течение 2 часов в атмосфере азота. После реакции смесь фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме с получением желтого твердого вещества, которое затем промывали этилацетатом (6 мл × 3) с получением 163а в виде желтого твердого вещества (0.80 г, 38%) и которое использовали без дополнительной очистки. MS: (M+H)+ 427.
Пример 163b 2-(5-(1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 163b
Смесь 163а (800 мг, 1.88 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (1.3 г, 2.82 ммоль), ацетата натрия (308 мг, 3.76 ммоль), PdCl2(dppf) (153 мг, 0.188 ммоль) и K3PO4 (1 г, 3.76 ммоль), суспендированного в CH3CN (50 мл) и воды (3 мл) нагревали при 110°С в течение 12 часов в атмосфере аргона. Затем смесь выпаривали, и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в 1:5 вода/CH3CN, с получением 163b в виде коричневого твердого вещества (350 мг, 29%). MS: (M+H)+ 685.
Пример 163с 2-(3-(5-(1-(2-(трет-бутилдиметилсилилокси)этил)-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-163с
К раствору 163b (460 мг, 0.67 ммоль) в пропан-2-оле (15 мл), тетрагидрофурана (15 мл) и воды (5 мл) добавляли моногидрат LiOH (1.6 г, 67 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 a 1:4 вода/CH3CN, с получением 163с в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 70%). MS: (M+H)+ 643.
Раствор 163с (300 мг, 0.50 ммоль), камфорсульфокислоты (330 мг, 1.5 ммоль) в метаноле (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем его выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 163 в виде коричневого твердого вещества (140 мг, 57%). MS: (M+H)+ 529. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.79 (s, 2H), 1.89 (s, 2H), 2.54-2.56 (t, J=5.5 Гц, 2H), 2.62-2.66 (m, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.84-3.86 (t, J=5.5 Гц, 2H), 4.01-4.02 (m, 1H), 4.09-4.11 (t, J=5.5 Гц, 2H), 4.17-4.22 (m, 3H), 4.49-4.57 (m, 2H), 6.05-6.06 (d, 1H), 6.71 (s, 1H), 7.22-7.23 (d, 1H), 7.35-7.37 (d, 1H), 7.40-7.42 (d, 1H), 7.48-7.51 (m, 2H), 7.94-7.95 (d, 1H).
Пример 164 5-[3-(5-{[5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксопиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 164
Пример 164b трет-бутил-3-(2-цианоацетил)азетидин-1-карбоксилат 164b
Согласно примеру 136а, 1-трет-бутил-3-этилазетидин-1,3-дикарбоксилат 164а превращали в 164b в виде желтого масла (неочищенного). ЖХМС: (М+Н)+ 424. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 12.1 (dd, J=2, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.04 (d, J=2.5, 1H), 7.36 (s, J=2.5, 1H), 6.06 (d, J=2.5, 1H), 4.18 (s, 2H), 3.80 (m, 1H), 3.49 (s, 3H), 1.39 (s, 9H).
Пример 164с трет-бутил-3-(5-амино-1Н-пиразол-3-ил)азетидин-1-карбоксилат 164с
Согласно примеру 136b, 164b превращали в 164с, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 164d трет-бутил-5-амино-3-(1-(трет-бутоксикарбонил)азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-1-карбоксилат 164d
Согласно примеру 136с, 164с превращали в 164d с выходом 26%.
Пример 164е трет-бутил-(5-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-1Н-пиразол-3-ил)азетидин-1-карбоксилат 164е
Согласно примеру 136d, 164d превращали в 164е с выходом 50%.
Пример 164е [2-(5-{[5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-ил]трет-бутоксикарбониламино}-1-метил-6-оксопиридин-3-ил)-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 164e
Согласно примеру 136е, 164d и (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02б7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 112b подвергали взаимодействию с получением 164е с выходом 39%.
Пример 164f [2-(5-{[5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксопиридин-3-ил)-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 164f
К раствору 164е (300 мг, 0.42 ммоль) в диоксане (2 мл) при комнатной температуре добавляли по каплям HCl/диоксан (4М, 6 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. После завершения реакции ее концентрировали с получением 164f (неочишенный продукт) в виде черного твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки. ЖХМС: (М+Н)+ 617.
Согласно примеру 136, 164f превращали в 164 с выходом 20%. ЖХМС: (М+Н)+ 575. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.78 (s, 1Н), 7.28 (d, J=1.5, 1H), 7.223 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.21 (s, 1H), 4.50 (m, 2H), 4.14 (m, 1H), 4.00 (m, 3H), 3.90 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.09 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.86 (m, 2H), 2.60 (m, 2H), 1.88 (m, 4H).
Пример 165 2-(3-(5-(5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 165
Пример 165а трет-бутил-3-(3-(5-(2-(ацетоксиметил)-5-фтор-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)фенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-1Н-пиразол-5-ил)азетидин-1-карбоксилат 165а
Согласно примеру 164f, 164е и 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210(1 подвергали взаимодействию с получением 165а с выходом 20%. ЖХМС: (М+Н)+ 700.
Пример 165b 2-(5-(5-(азетидии-3-ил)-1H-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 165b
Согласно примеру 164g, 165а превращали в неочищенный 165b, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: (М+Н)+ 600.
Согласно примеру 164, 165b превращали в 165 с выходом 40% (две стадии). ЖХМС: (М+H)+ 558. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.78 (s, 1Н), 7.28 (d, J=1.5, 1H), 7.22(s, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.21 (s, 1H), 4.50 (m, 2H), 4.14 (m, 1H), 4.00 (m, 3H), 3.90 (m, 2H), 3.71 (s, 3H), 3.09 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.86 (m, 2H), 2.60 (m, 2H), 1.88 (m, 4H).
Пример 166 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 166
Пример 166а трет-бутил-2-(5-(2-(ацетоксиметил)-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)фенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат 166а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли трет-бутил-2-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат 158с (300 мг, ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а (352 мг, 0.758 ммоль), Pd(PPh3)4 (39.8 мг, 0.035 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 Ν, 2.27 мл, 2.27 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан(3.5 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°C в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл×3), солевым раствором (30 мл×1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=5:95) получали 166а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 166а и хлористый метилен (10 мл). Раствор охлаждали до 0°C на ледяной бане. Добавляли TFA (1 мл) и полученный раствор перемешивали в течение ночи. Все летучие вещества удаляли в вакууме, и в бутыль добавляли ТГФ (10 мл), изо-PrOH (10 мл), H2O (10 мл), LiOH H2O (1.00 г). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Весь растворитель удаляли в вакууме и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (3X30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=10:90) получали 166 в виде светло-коричневого твердого вещества, 53 мг. MS (ESI+) m/z 551.3 (М+Н).
Пример 167 10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 167
Пример 167а (Е)-этил-3-(2-хлор-4,4-диметилциклопент-1-енил)акрилат 167а
Две следующие процедуры были адаптированы из Organic Preparations и Procedures Int., 29(4):471-498. В одногорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 2-хлор-4,4-диметилциклопент-1-енкарбальдегид (38 г, 240 ммоль) в бензоле (240 мл). К раствору добавляли этоксикарбонилметилен трифенилфосфоран (84 г, 240 ммоль). Смесь перемешивали в течение 14 часов. По прошествии указанного времени растворитель выпаривали и отстаток измельчали с гексанами (2 L) с экстрагированием продукта от побочных продуктов PPh3. Органический слой сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с применением градиента 100% гексан - 1:1 гексан/этилацетат, с получением 37% выхода (20 г) 167а.
Пример 167b этил-5,5-диметил-1,4,5,6-тетрагидроциклопента[b]пиррол-2-карбоксилат 167b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 167а (17 г, 74 ммоль) в ДМСО (100 мл). К раствору добавляли азид натрия (9.6 г, 150 ммоль). Смесь затем нагревали до 75°С и перемешивали в течение 8 часов. После охлаждения до кт добавляли Н2О (100 мл) и CH2Cl2 (200 мл) и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали CH2Cl2 (50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с применением градиента 100% гексан - 1:1 гексан/этилацетат, с получением 37% выхода (5.7 г) 167b.
Пример 167 с Этил-1-(цианометил)-5,5-диметил-1,4,5,6-тетрагидроциклопента[b]пиррол-2-карбоксилат 167с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 167b (6.2 г, 30 ммоль) в ДМФА (57 мл). К раствору добавляли NaH (80% дисперсию в минеральном масле, 1.26 г, 42.1 ммоль). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 90 минут.По прошествии указанного времени добавляли бромацетонитрил (2.94 мл, 42 ммоль). Смесь перемешивали в течение 14 часов. По прошествии указанного времени добавляли воду (100 мл) и этилацетат (200 мл) и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 95% выхода (7 г) 167с.
Пример 167d гидрохлорид этил-1-(2-аминоэтил)-5,5-диметил-1,4,5,6-тетрагидроциклопента[b]пиррол-2-карбоксилата 167d
Бутыль реактора Парра емкостью 500 мл продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 2.0 г в пересчете на сухое вещество), 167с (4.5 г, 18 ммоль), 12% соляную кислоту (9.2 мл, 37 ммоль), этилацетат (80 мл) и этанол (52 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 6 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (10.0 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×50 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении. Неочищенный остаток 167d переносили на следующую стадию без дополнительной очистки.
Пример 167е 4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 167е
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, продували азотом и помещали в нее неочищенный 167d (~18 ммоль), этилат натрия (6.2 г, 92 ммоль) и этанол (120 мл). Смесь перемешивали при 55°С в течение ночи. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и остаток разделяли между этилацетатом (200 мл) и водой (100 мл). Раствор фильтровали. Твердое вещество промывали этилацетатом (15 мл) с получением 850 мг 167е. Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (2×100 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении до практически полной степени высушивания. Раствор фильтровали и твердое вещество (1.44 г) промывали этилацетатом (15 мл). Объединенные твердые вещества сушили в вакууме с получением 61% выхода (2.3 г) 167е.
Пример 167f 2-бром-6-(9-оксо-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-10-ил)бензилацетат 167f
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 167е (301 мг, 1.47 ммоль), 2,6-дибромбензилацетат 104g (1.1 г, 3.0 ммоль), Cul (140 мг, 0.7 ммоль), Cs2CO3 (961 мг, 3.0 ммоль), N',N',N',N'-тетраметилэтилендиамин (0.22 мл, 1.5 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан(4.1 мл). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 150°С в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь фильтровали и полученное твердое вещество промывали смесью 9:1 CH2Cl2/МеОН (50 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (20 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом гексаны - этилацетат с получением 32% выхода (200 мг) 167f.
Пример 167g 10-[2-(ацетоксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 167g
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 109с (210 мг, 0.64 ммоль), 167f (140 мг, 0.3 ммоль), 1,2-диметоксиэтан(4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (18 мг, 0.02 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 25 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:метанол, с получением 53% выхода (93 мг) 167g.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 167g (93 мг, 0.17 ммоль), гидроксид лития (35 мг, 0.8 ммоль), ТГФ (0.8 мл), изопропанол (0.8 мл) и воду (1.7 мл). Смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:метанол, с получением 76% выхода (23 мг) 167. MS (ESI+) m/z 511.8 (M+H).
Пример 168 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 168
Пример 168а 3-(5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 168а
К раствору трет-бутил-(3-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-1Н-пиразол-5-ил)азетидин-1-карбоксилата 164е (1 г, 2.36 ммоль) в диоксане (10 мл) при комнатной температуре добавляли по каплям HCl/диоксан (4М, 20 мл). Затем реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. После завершения реакции ее концентрировали с получением 168a в виде желтого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без очистки. ЖХМС: (М+Н)+ 325.
Пример 168b 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 168b
К раствору 3-(5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-она 168a (неочищенный, 2.36 ммоль) в метаноле (30 мл) и уксусной кислоты (5 мл) при 0°С добавляли СН2О (30% масс. в Н2О) (12 г, 120 ммоль), с последующим добавлением NaBH4 (1.8 г, 47.2 ммоль) небольшими порциями в течение 1 часа при 0°С. После завершения реакции смесь доводили до рН>7 с помощью 2N вод. NaOH. Затем ее экстрагировали хлористым метиленом (60 мл × 3), сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали на флэш-колонке, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, содержащей 0.5% триэтиламина, с получением 168b в виде желтого твердого вещества (50%, две стадии).
Пример 168с 2-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 168с
Согласно примеру 136е, 168b и 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а подвергали взаимодействию с получением 168с с выходом 20%.
Согласно примеру 136, 168 с превращали в 168 с выходом 54%. ЖХМС: (М+Н)+ 554. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.05 (s, 1Н), 8.01 (s, 1H), 7.45 (t, J=8, 1H), 7.31 (m, 2H), 7.24 (d, J=2.5, 1H), 6.50 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.37 (m, 2H), 4.14 (m, 3H), 3.88 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.53 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 3.03 (m, 2H), 2.61 (m, 2H), 2.47 (m, 3H), 2.23 (s, 3H), 1.78 (m, 2H), 1.69 (m, 2H).
Пример 169 5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5- ({4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-ил}амино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 169
Пример 169а {2-[1-этил-6-оксо-5-({4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-ил}амино)1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил}метилацетат 169a
Смесь 5-бром-3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 110с (500 мг, 1.54 ммоль), (2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,2,3-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 111a (750 мг, 1.56 ммоль), PdCl2(dppf) (170 мг, 0.23 ммоль), K3PO4 (150 мг) и ацетата натрия (60 мг) в MeCN (25 мл) и воды (5 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 169а (369 мг, 40%). MS: [М+Н]+ 600.
Смесь 169а (440 мг, 0.73 ммоль) и гидрата LiOH (308 мг, 7.3 ммоль) в изопропаноле (20 мл) и H2O (4 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. И остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 169 (104 мг, 26%). MS: [М+Н]+ 333. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.93 (s, 1Н), 7.46-7.39 (m, 3H), 7.31-7.24 (m, 3H), 5.73 (s, 1H), 4.78 (s, 2H), 4.61 (d, J=11.5, 1H), 4.42-4.20 (m, 2H), 4.14-3.98 (m, 4H), 3.90-3.82 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.04-2.80 (m, 4H), 2.60-2.46 (m, 2H), 1.94-1.82 (m, 4H).
Пример 170 5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(морфолин-4-ил)карбонил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 170
Пример 170а (6-аминопиридин-3-ил)(морфолино)метанон 170а
К раствору морфолина (9.00 г, 103 ммоль) в EtOH (400 мл) добавляли EDCI (10.0 г, 52.2 ммоль), HOBt (7.00 г 51.8 ммоль) и 6-аминоникотиновую кислоту (6.00 г, 43.4 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов полученную суспензию фильтровали. Твердое вещество измельчали со смесью МеОН (100 мл) и хлористого метилена (100 мл) с получением 170а в виде белого твердого вещества (2.7 г, 30%). ЖХМС: (M+H)+ 208.
Пример 170b 5-бром-1-метил-3-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 170b
Согласно примеру 136е, 170а и 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он подвергали взаимодействию с получением 170b с выходом 21%. ЖХМС: (М+Н)+ 394. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 8.84 (d, J=2.5, 1H), 8.42 (d, J=2, 1H), 7.72 (m, 1H), 7.42 (d, J=2, 1H), 7.11 (d, J=8.5, 1H), 3.72 (m, 8H), 3.63 (s, 3H).
Пример 170с {2-[1-метил-5-({5-[(морфолин-4-ил)карбонил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин3-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил}метилацетат 170c
Согласно примеру 136е, 170b и (2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-l,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 111a подвергали взаимодействию с получением 170с с выходом 65%. ЖХМС: (М+Н)+ 668.
Согласно примеру 148, 170с превращали в 170 с выходом 71%. ЖХМС: (М+Н)+ 626. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.95 (s, 1H), 8.72 (d, J=2, 1H), 8.25 (d, J=2, 1H), 7.64 (dd, J=8.5, 1H), 7.45 (m, 2H), 7.35 (m, 3H), 4.85 (t, J=4, 1H), 4.35 (m, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.59 (m, 7H), 3.49 (m, 4H), 2.98 (m, 1H), 2.85 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 1.79 (m, 4H).
Пример 171 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 171
Пример 171а 2-(1-метил-5-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 171а
Согласно примеру 136d, 5-бром-1-метил-3-(5-(морфолин-4-карбонил)пиридин-2-иламино)пиридии-2(1Н)-он 170а и 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а подвергали взаимодействию с получением 171а с выходом 27%. ЖХМС: (М+Н)+ 651.
Согласно примеру 170, 171а превращали в 171 с выходом 60%. ЖХМС: (М+Н)+ 609. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.85 (d, J=2, 1Н), 8.32 (d, J=1.5, 1H), 7.71 (dd, J=8.5, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.43 (m, 3H), 7.35 (m, 3H), 7.11 (d, J=8, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.56 (m, 2H), 4.21 (s, 3H), 4.03 (m, 1H), 3.71 (m, 11H), 2.65 (m, 2H), 2.55 (m, 2H), 1.89 (m, 2H), 1.80 (m, 1H).
Пример 172 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 172
Пример 172а 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 172а
Смесь 3-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-она 155n (469 мг, 1.4 ммоль), 37% водного расвора формальдегида (4 г, 50 ммоль), NaBH3CN (261 мг, 4.2 ммоль), и 1М хлорида цинка в 1,2-диэтоксиэтане (4 мл, 4.2 ммоль) и метанола (40 мл) перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре. Смесь добавляли к воде (20 мл) и экстрагировали хлористым метиленом (50 мл × 3). Органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 10:1 хлористый метилен/метанол, с получением 172а в виде желтого твердого вещества (0.3 г, 83%). MS: [М+Н]+ 348.
Пример 172b 2-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 172b
В герметичную пробирку помещали смесь 172а (167 мг, 0.48 ммоль), 2-(2-(гидроксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она 114а (231 мг, 0.48 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (39 мг, 0.048 ммоль) и Na2CO3 (101 мг, 0.96 ммоль) в N,N-диметилформамиде (18 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 150°С в микроволновом излучении в течение 1 часа. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 172b в виде коричневого твердого вещества (140 мг, 50%). MS: [М+Н]+ 606.
К раствору 172b (150 мг, 0.25mol) в ТГФ/изопропил ацетат/Н2О (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (346 мг, 14 ммоль), при перемешивании при комнатной температуре. Затем смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем добавляли 20 мл воды и смесь экстрагировали этилацетатом (60 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 172 в виде белого твердого вещества (50 мг, 35%). MS: [М+Н]+ 565. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.66 (s, 1Н), 8.54 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.65 (d, J=8, 1H), 7.46 (m, 1H), 7.31 (m, 4H), 6.51 (s, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.13 (m, 3H), 3.85 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.53 (m, 2H), 3.35 (m, 1H), 3.02 (m, 2H), 2.60 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.23 (s, 3H), 1.77 (m, 4H).
Пример 173 10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 173
Пример 173а 10-[2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-l,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 173а
В стеклянный сосуд емкостью 10 мл, снабженный якорем магнитной мешалки, помещали 1-метил-3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он 197е (210 мг, 0.49 ммоль), 10-[2-(ацетоксиметил)-3-бромфенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 167f(143 мг, 0.33 ммоль), Pd(PPh3)4 (30 мг, 0.0.26 ммоль) в 2 N Na2CO3 (2 мл) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл). Сосуд герметизировали мембраной и помещали в углубление микроволнового реактора. После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 7 минут ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан: метанол, 85:15) с получением 26% (50 мг) 173а в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 173а (50 мг, 0.077 ммоль), LiOH⋅H2O (20 мг, 0.83 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (3×5 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 75% выхода (35 мг) 173. MS (ESI+) m/z 608.4 (M+H).
Пример 174 2-(2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 174
Пример 174а трет-бутил-6-(6-(2-(ацетоксиметил)-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)фенил)-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилат 174а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли трет-бутил-6-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилат 120а (300 мг, 0.689 ммоль), 114а (352 мг, 0.758 ммоль), Pd(PPh3)4 (39.8 мг, 0.0345 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 2.27 мл, 2.27 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (3.5 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=5:95) получали 174а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 174а и хлористый метилен (50 мл). Раствор охлаждали до 0°С на ледяной бане. Добавляли TFA (1 мл) и полученный раствор перемешивали в течение ночи. Все летучие вещества удаляли в вакууме и в бутыль добавляли ТГФ (10 мл), изопропанол (10 мл), воду (10 мл), моногидрат LiOH (1.00 г). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=10:90) получали 174 в виде желтого твердого вещества, 28 мг. MS (ESI+) m/z 551.4 (М+Н).
Пример 175 10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5- {4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 175
Пример 175а 3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 175а
В герметичную пробирку, снабженную магнитной мешалкой, помещали 5-бром-3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он (110с) (250 мг, 0.77 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (290 мг, 1.2 ммоль), ацетат калия (230 мг, 2.3 ммоль) и 1,4-диоксан (5.5 мл). Затем после барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли комплекс [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II) с CH2Cl2 (PdCl2dpp:CH2Cl2 (1:1), 63 мг, 0.08 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 105°С в течение 90 минут. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между водой (20 мл) и этилацетатом (20 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный 175а применяли на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 175b 10-[2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 175b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 175а (120 мг, 0.31 ммоль), 167f (130 мг, 0.3 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1 мл). После барботирования nz в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (18 мг, 0.02 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 10 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:метанол, с получением 74% выхода (140 мг) 175b.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 175b (140 мг, 0.23 ммоль), гидроксид лития (49 мг, 1.2 ммоль), ТГФ (1.2 мл), изо-PrOH (1.2 мл) и воду (2.4 мл). Смесь перемешивали при кт в течение 90 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:метанол, с получением 79% выхода (100 мг) 175. MS (ESI+) m/z 555.3 (M+Н).
Пример 176 2-(2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 176
Пример 176а 5-(метоксиметил)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразол 176а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали СН3ОН (50 мл), 5-(бромметил)-1-метил-3-нитро-1H-пиразол 156d (8.8 г, 40 ммоль) и CH3ONa (4.3 г, 80 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток разделяли между этилацетатом (60 мл) и водой (60 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 2). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 176а в виде желтого масла (6.1 г, 90%). ЖХМС: [М+Н]+ 172.
Пример 176b 5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-амин 176b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 17ба (4 г, 23 ммоль), Pd/C (1g) и C2H5OH (100 мл). Смесь гидрировали при комнатной температуре в течение 15 часов. Затем ее фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 176b в виде желтого масла (3.3 г, 99%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: [M+H]+ 142.
Пример 176с 5-бром-3-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 176с
Согласно примеру 148а, 1.7 г 176b и 3.2 г 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он подвергали взаимодействию с получением 176с в виде желтого твердого вещества (2.8 г, 70%). MS: [М+Н]+ 327. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.86 (d, J=2.5, 1H), 7.38 (s, 1H), 6.88 (d, J=2.5, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.58 (s, 3H), 3.36 (s, 3H).
Пример 176d 2-(5-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 176d
Согласно примеру 148b, 557 мг 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а и 327 мг 5-бром-3-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 176с подвергали взаимодействию с получением 176d в виде желтого твердого вещества (420 мг, 72%). ЖХМС: [М+Н]+ 585.
Согласно примеру 148, 240 мг 176d превращали в 176 в виде белого твердого вещества (133 мг, 60%). ЖХМС: [М+Н]+ 542. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.91 (d, J=2, 1H), 7.43 (m, 3H), 7.30 (d, J=2, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.60 (d, J=6, 1H), 4.40 (m, 3H), 4.16 (m, 3H), 3.94 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 2.60 (m, 4H), 1.89 (m, 2H), 1.78 (m, 2H).
Пример 177 5-[2-(гидроксиметил)-3-(5-{[5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)диен-6-он 177
Пример 177а [2-(5-{[5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3- ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 177а
Согласно примеру 176d, 327 мг 5-бром-3-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 176b и 481 мг 111a подвергали взаимодействию с получением 177а в виде желтого твердого вещества (420 мг, 70%). ЖХМС: [М+Н]+ 602.
Согласно примеру 176, 240 мг 177а превращали в 177 в виде белого твердого вещества (112 мг, 50%). ЖХМС: [М+Н]+ 560. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.90 (s, 1H), 7.44-7.38 (m, 3H), 7.30-7.24 (m, 2H), 5.94 (s, 1H), 4.62 (d, J=11.5, 1H), 4.37 (m, 3H), 4.26 (d, J=10.5, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 2.85 (m, 4H), 2.54 (s, 2H), 1.89 (s, 5H).
Пример 178 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 178
Пример 178а 4-фтор-2-(5-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 178а
В герметичную пробирку помещали смесь 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (230 мг, 0.48 ммоль), 5-бром-3-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 176 с (156 мг, 0.48 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (39 мг, 0.048 ммоль), Na2CO3 (101 мг, 0.96 ммоль) в ДМФА (18 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 178а в виде коричневого твердого вещества (160 мг, 53%). MS: [М+Н]+ 603.
К раствору 178а (160 мг, 0.27 моль) в ТГФ/ИПС/Н2О (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (346 мг, 14 ммоль) при перемешивании при комнатной температуре. Указанную смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем добавляли 20 мл воды и смесь экстрагировали этилацетатом (60 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 178 в виде белого твердого вещества (60 мг, 40%). ЖХМС: [М+Н]+ 561. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.16 (s, 1Н), 7.99 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 7.18 (m, 1H), 6.52 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.38 (m, 2H), 4.31 (m, 2H), 4.17 (m, 3H), 3.90 (m, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.63 (m, 2H), 2.51 (m, 2H), 1.70 (m, 4H).
Пример 179 5-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 179
Пример 179а [2-(1-метил-5-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2- ил]амино}-6-оксо-1,б-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрициклор[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 179а
Согласно примеру 176d, 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 172а и (2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 111a подвергали взаимодействию с получением 179а с выходом 55%. ЖХМС: (M+H)+ 624.
Согласно примеру 176, 179а превращали в 179 с выходом 42%. ЖХМС: (М+Н)+ 582. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 8.73 (s. 1H), 8.17 (s, 1H), 7.74 (m, 1H), 7.51 (m, 1H), 7.40 (m, 3H), 7.10 (d, J=3.5, 1H), 4.55 (m, 2H). 4.31 (m, 2H), 4.13 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.99 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.05 (m, 1H), 2.94 (m, 6H), 2.59 (m, 2H), 1.89 (m, 4H).
Пример 180 6-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3H,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил} фенил]-2-метил-4-[(5-{[метил(пропан-2-ил)амино]метил}пиридин-2-ил)амино]-2,3-дигидропиридазин-3-он 180
Пример 180а метил-6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)никотинат 180а
Согласно примеру 186b, 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он 103е (4.0g, 17.9 ммоль), 186а (2.7g, 17.9 ммоль), карбонат цезия (12.8g, 39.4 ммоль) и Ксантфос (880 мг, 8.5 моль%), диоксан (120 мл) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (820 мг, 5 моль%) подвергали взаимодействию с получением 180а (3.0 г, 57% выхода).
Пример 180b 6-хлор-4-(5-(гидроксиметил)пиридин-2-иламино)-2-метилпиридазин-3(2Н)-он 180b
Согласно примеру 186 с, 180а (3.0g, 10.2 ммоль), хлористый метилен (100 мл) и 1.0M DIBAL-H в хлористом метилене (30.5 мл, 30.5 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 180b (2.3 г, 86% выхода).
Пример 180с (6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-иламино)пиридин-3-ил)метилметансульфонат 180с
Промежуточное соединение 180b обрабатывали метансульфохлоридом и диизопропилэтиламином в хлористом метилене при 0°С с получением 180c.
Пример 180d 6-хлор-4-(5-((изопропил(метил)амино)метил)пиридин-2-иламино)-2-метилпиридазин-3 (2H)-OH 180d
Согласно примеру 186с, 180c и метилизопропиламин подвергали взаимодействию с получением 180d.
Пример 180е 2-(5-(5-((изопропил(метил)амино)метил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 180е
Согласно примеру 179a, 180d (125 мг, 0.39 ммоль), 114а (215 мг, 0.47 ммоль), 1N Na2CO3 (0.86 мл) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (23 мг, 5 моль%) подвергали взаимодействию с получением 180е (150 мг, 61% выхода).
Согласно примеру 179, 180е (150 мг, 0.24 ммоль), 1N LiOH (1.2 мл), ТГФ (2 мл) и изопропанол (2 мл) подвергали взаимодействию и смесь очищали с помощью колоночной хроматографии, силикагель, метанол/хлористый метилен с получением 180 (105 мг, 75% выхода). MS (ESI+) m/z 582.5 (М+Н).
Пример 181 5-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 181
Пример 181а 5-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(ацетоксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 181a
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 5-бром-3-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 138с (250 мг, 0.637 ммоль), бороновый эфир 111a (308 мг, 0.701 ммоль), Pd(PPh3)4 (36.8 мг, 0.0319 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 2.10 мл, 2.10 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (3.0 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=5:95) получали 181а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 181а, ТГФ (5 мл), изопропанол (5 мл), воду (5 мл), моногидрат LiOH (300 мг). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Весь растворитель удаляли в вакууме, и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=10:90) получали 181 в виде твердого вещества кирпичного цвета, 101 мг, MS (ESI+) m/z 625 А (М+Н).
Пример 182 5-(3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)пиридин-2(1H)-он 182
Пример 182а трет-бутил-(2,6-дибром-4-фторбензилокси)диметилсилан 182а
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 197b (5.00 г, 17.6 ммоль), имидазол (6.00 г, 88.0 ммоль) и хлористый метилен (125 мл). Добавляли хлорид трет-бутилдиметилсилила (7.96 г, 52.8 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь разбавляли водой (100 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (100 мл). Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и растворитель выпаривали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 96% выхода (6.75 г) 182а в виде бесцветного масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.30 (d, 2H, J=8.0 Гц), 4.93 (s, 2H), 0.93 (s, 9H), 0.15 (s, 6H).
Пример 182b 2-(3-бром-2-((трет-бутилдиметилсилилокси)метил)-5-фторфенил)-6-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 182b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 105h (400 мг, 1.81 ммоль), 182а (1.44 г, 3.62 ммоль), карбонат цезия (1.18 г, 3.62 ммоль), N,N’-диметилэтилендиамин (159 мг, 1.81 ммоль) и 1,4-диоксан (15 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли иодид меди (174 мг, 0.905 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×30 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 182b с выходом 57% (554 мг) в виде белого твердого вещества: тк 38-39°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.32 (dd, 1H, J=8.0, 2.5 Гц), 7.00 (dd, 1H, J=8.0, 2.5 Гц), 4.74 (s, 2H), 3.93 (m, 2H), 2.98 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 2.77 (s, 2H), 2.52 (s, 2H), 1.28 (s, 3H), 1.27 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).
Пример 182с 2-((трет-бутилдиметилсилилокси)метил)-5-фторфенил- 6-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил-он 182с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 182b (554 мг, 1.03 ммоль), 4,4,4',4’,5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан (785 мг, 3.09 ммоль), ацетат калия (404 мг, 4.12 ммоль) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Pd(dppf)Cl2⋅CH2Cl2 (75 мг, 0.103 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 8 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии с получением 182с с выходом 91% (600 мг) в виде белого твердого вещества: тк 41-42°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.52 (dd, 1H, J=8.0, 2.5 Гц), 7.02 (dd, 1H, J=8.0, 2.5 Гц), 5.14 (d, 1H, J=10.5 Гц), 5.70 (d, 1Н, J=10.5 Гц), 3.93 (m, 2H), 2.98 (m. 1H), 2.80 (m, 1H), 2.77 (s, 2H), 2.52 (s, 2H), 1.34 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 1.26 (s, 12H), 0.84 (s, 9H), 0.04 (s, 6H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 182с (300 мг, 0.513 ммоль), 109b (111 мг, 0.394 ммоль), карбонат натрия (125 мг, 1.18 ммоль), 1,4-диоксан (8 мл) и воду (2 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (46 мг, 0.039 ммоль). После нагревания с обратным холодильником в течение 2 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (372 мг, 1.18 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 182 с выходом 41% (88 мг) в виде беловатого твердого вещества: тк >250°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.22 (s. 1H), 8.72 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.65 (s, 1H), 8.29 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.57 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.34 (dd, 1H, J=8.5, 3.0 Гц), 7.31 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.29 (dd, 1H, J=8.5, 3.0 Гц), 4.87 (m, 1H), 4.31 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.03 (m, 1H), 2.89 (m. 1H), 2.75 (s, 2H), 2.53 (m, 2H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 546.2 (M+H).
Пример 183 5-(3-(6,б-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(6,7-дигидро-4H-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-3-иламино)пиридин-2(1H)-он 183
Согласно примеру 184, в результате реакции 131а (300 мг, 0.606 ммоль) с 110с (151 мг, 0.466 ммоль) получали 51% выход (129 мг) 183 в виде беловатого твердого вещества: тк 167-168°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.18 (s, 1H), 7.95 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.44 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.33 (dd, 1H, 7=8.0, 1.0 Гц), 7.29 (dd, 1H, 7=8.0, 1.0 Гц), 7.23 (d, 1H, J=2.0 Гц), 5.92 (s, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.36 (m, 2H), 4.01 (m, 3H), 3.94 (m, 2H), 3.85 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.02 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 572.3 (M+H).
Пример 184 5-(3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(пиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 184
Пример 184а 5-бром-1-метил-3-(пиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 184а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, подводом азота и обратным холодильником, помещали 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (936 мг, 3.51 ммоль), 2-аминопиридин (300 мг, 3.19 ммоль), карбонат цезия (3.11 г, 9.57 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл). После барботирования полученного раствора азотом в течение 20 минут добавляли Ксантфос (184 мг, 0.319 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (146 мг, 0.160 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 42% выхода (376 мг) 184а в виде беловатого твердого вещества: тк 153-154°С; 1H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 8.75 (s, 1Н), 8.69 (d, 1H, J=2.4 Гц), 8.26 (dd, 1H, J=5.4, 1.5 Гц), 7.61 (m, 1H), 7.54 (d, 1H, J=2.4 Гц), 7.33 (d, 1H, J=5.4 Гц), 6.86 (m, 1H), 3.45 (s, 3H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 131а (300 мг, 0.606 ммоль), 184а (131 мг, 0.466 ммоль), карбонат натрия (148 мг, 1.40 ммоль), 1,4-диоксан (8 мл) и воду (2 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (54 мг, 0.047 ммоль). После нагревания при 100°С в течение 3 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли карбонат калия (500 мг, 3.62 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов, реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 184 с выходом 49% (118 мг) в виде белого твердого вещества: тк 150-151°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.66 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.57 (m, 1H), 8.16 (dd, 1H, J=5.0, 1.0 Гц), 7.57 (m, 1H), 7.45 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.38 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.28 (d, 1H, J=8.0 Гц), 6.78 (dd, 1H, J=11.0, 5.0 Гц), 4.82 (m, 1H), 4.35 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.01 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.53 (m, 2H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 527.2 (M+H).
Пример 185 5-(3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(1,5-диметил-1H-пиразол-4-иламино)пиридин-2(1H)-он 185
С применением той же общей процедуры, как описано для получения 184, в результате реакции 131а (300 мг, 0.606 ммоль) с 142а (138 мг, 0.466 ммоль) получали а 41% выход (104 мг) 185 в виде желтого твердого вещества: тк 164-165°С; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 7.93-7.92 (m, 2H), 7.44 (t, 1H, J=7.5 Гц), 7.33 (dd, 1H, J=7.5, 1.0 Гц), 7.29 (dd, 1H, J=7.5, 1.0 Гц), 7.21 (d, 1H, J=2.0 Гц), 5.88 (s, 1H), 4.83 (m, 1H), 4.36 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.03 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 544.2 (M+H).
Пример 186 2-(2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-((изопропил(метил)амино)метил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 186
Пример 186а метил-6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)никотинат 186а
В герметичную пробирку емкостью 300 мл помещали 3,5-дибром-!-метилпиридин-2(1Н)-он (4.0 г, 15.0 ммоль), метил-6-аминоникотинат (2.3g, 15.0 ммоль), карбонат цезия (10.7 г, 33 ммоль) и Ксантфос (740 мг, 8.5 моль%). Колбу вакуумировали и наполняли азотом ЗХ. Добавляли диоксан (100 мл) и смесь дегазировали в течение 25 минут посредством барботирования азотом. Затем добавляли трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (690 мг, 5 моль%), сосуд герметизировали и реакционную смесь нагревали до 120°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали и разбавляли этилацетатом (500 мл) и насыщенным водным NaHCO3 (150 мл), слои разделяли и экстрагировали этилацетатом 2Х. Органические вещества промывали солевым раствором 3Х, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии: 80 г силикагеля ISCO, этилацетат/гексаны, с получением 186а.
Пример 186b 5-бром-3-(5-(гидроксиметил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 186b.
В колбе в атмосфере N2 суспендировали 186а (500 мг, 1.5 ммоль) в хлористом метилене и охлаждали до -78°С на бане сухой лед/ацетон. Через шприц медленно добавляли 1.0M DIBAL-H в хлористом метилене (4.4 мл, 4.4 ммоль). После завершения добавления реакционой смеси позволяли нагреться до -20°С, при этом баню сухой лед/ацетон заменяли на баню лед/вода, и реакционную смесь перемешивали дополнительные 0.5 часа, при этом ее медленно гасили 1N HCl (~5 мл). Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом и позволяли перемешиваться и нагреваться до комнатной температуры более ~1 часа. рН доводили до ~7 с помощью 1N NaOH и добавляли 50 мл насыщенной водной соли Рошеля, и смесь нагревали и перемешивали при 40°С в течение 1 часа, в течение которого смесь стала прозрачной. Слои разделяли, органические вещества промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением 186b в виде белого твердого вещества (420 мг, 90% выхода).
Пример 186d 5-бром-3-(5-((изопропил(метил)амино)метил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1H)-он 186d
В колбе в атмосфере N2, суспендировали 186b (350 мг, 1.13 ммоль) в хлористом метилене (20 мл), затем добавляли диизопропилэтиламин (0.89 мл, 5.09 ммоль) и реакционную смесь охлаждали до 0°С на бане лед/вода. Добавляли метансульфохлорид (518 мг, 0.35 мл, 4.52 ммоль) и реакционной смеси позволяли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ~1 часа. Реакционную смесь разбавляли хлористым метиленом и добавляли насыщенный водный бикарбонат натрия. Слои разделяли, и органические вещества снова промывали бикарбонатом, затем сушили над безв. сульфатом магния, фильтровали и концентрировали с получением мезилата 186с, которое использовали непосредственно для получения 186d путем растворения 186с в ДМФА (10 мл) и последующего переноса раствора в колбу высокого давления. Добавляли N-метилпропан-2-амин (1.2 мл, 830 мг, 11.3 ммоль), колбу герметизировали и нагревали до 80°С в течение ночи. Реакционной смеси позволяли охладиться, затем разбавляли этилацетатом и водой, и слои разделяли. Органические вещества промывали солевым раствором 4Х, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением 186d.
Пример 186f 2-(5-(5-((изопропил(метил)амино)метил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 186f
Стадия 1: В колбу высокого давления помещали 186d (205 мг, 0.56 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (213 мг, 0.84 ммоль), ацетат калия (220 мг, 2.24 ммоль) и комплекс 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладия (II) дихлорида и дихлорметана (817 мг, 0.1 моль%). Колбу вакуумировали и наполняли N2 3Х, добавляли диоксан (5 мл), сосуд герметизировали и нагревали до 90°С в течение ~3 часов. Реакционной смеси позволяли охладиться, затем разбавляли этилацетатом и фильтровали через подложку из Целита, и концентрировали при пониженном давлении с получением 186е, который использовали непосредственно на следующей стадии.
Стадия 2: 186е растворяли в ДМЭ (5 мл) и переносили в колбу высокого давления, содержащую 109а (187 мг, 0.45 ммоль), 1N Na2CO3 (1.2 мл) и тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (32 мг, 5 моль%). Колбу герметизировали и нагревали до 100°С в течение ночи. Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом и водой, разделяли, промывали солевым раствором, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии: 12 г силикагеля ISCO, элюируя метанолом и CH2Cl2, с получением 186f (110 мг, 32% выход за 2 стадии).
Согласно примеру 119, 186f (110 мг, 0.18 ммоль), 1N LiOH (0.88 мл), ТГФ (2 мл) и изопропанол (2 мл) подвергали взаимодействию и очищали с помощью колоночной хроматографии, 12 г силикагеля ISCO, метанол/хлористый метилен, с получением 186 (80 мг, 77% выход). MS (ESI+) m/z 581.4 (М+Н).
Пример 187 2-(2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 187
Пример 187а 6-хлор-4-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-2-метилпиридазин-3(2Н)-он187а
Смесь 5-(метоксиметил)-1-метил-lH-пиразол-3-амина 176b (600 мг, 4.26 ммоль), Ксантфоса (300 мг, 0.51 ммоль), Pd2dba3 (310 мг, 0.34 ммоль), 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-она (103е) (1.22 г, 5.53 ммоль) и Cs2CO3 (4.2 g. 12.8 ммоль) в 1,4-диоксане (40 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали метанолом (100 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 187а (1.13 г, 94%). MS: [M+H]+.
Пример 187b 2-(5-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 187b
Смесь 6-хлор-4-(5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-2-метилпиридазин-3(2Н)-он 187а (300 мг, 1.06 ммоль), 2-(ацетоксиметил)-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино [1,2-а]индол-2(1 Н)-ил)фенилбороновой кислоты 114а (500 мг, 1.3 ммоль), PdCl2(dppf) (116 мг, 0.16 ммоль), K3PO4 (100 мг), и NaOAc (50 мг) в MeCN (15 мл) и воды (3 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 187b (310 мг, 50%). MS: [M+H]+ 586.
Смесь 187b (310 мг, 0.53 ммоль) и гидрата LiOH (222 мг, 5.3 ммоль) в изопропаноле (20 мл) и воды (4 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 187 (103 мг, 36%). MS: [М+Н]+ 544. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.25 (s, 1Н), 7.89 (s, 1H), 7.50-7.47 (m, 1H), 7.42-7.38 (m, 2H), 6.51 (s, 1Н), 6.22 (s, 1H), 4.63-4.60 (m, 1H), 4.48-4.45 (m, 1H), 4.40-4.35 (m, 3H), 4.20-4.05 (m, 3H), 3.90-3.86 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.67 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 2.65-2.54 (m, 2H), 2.48-2.42 (m, 2H), 1.84-1.74 (m, 2H), 1.74-1.64 (m, 2H).
Пример 188 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 188
Пример 188а трет-бутил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 188а
К раствору 5-бром-2-нитропиридина (30 г, 148 ммоль) в ДМСО (1L) добавляли К2СО3 (40 г, 296 ммоль) и трет-бутилпиперазин-1-карбоксилат (28g, 148 ммоль). Смесь перемешивали при 65 градусах в течение ночи. После охлаждения ее выливали в воду (2 л). Осажденное твердое вещество собирали и сушили в вакууме. Затем ее дополнительно очищали с помощью флэш-колонки, элюируя смесью 20:1 петролейный эфир/этилацетат и затем хлористым метиленом, с получением 188а в виде желтого твердого вещества (17 г, 37%). MS: [M+H]+ 309.
Пример 188b трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 188b
Бутыль емкостью 500 мл продували азотом и помещали в нее 188а (3.1 г, 10 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 1.0 г) и этанол (100 мл). Ее вакуумировали, наполняли газообразным водородом и перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Затем откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 188b (2.7 г, 97%). MS: [M+H]+ 279.
Пример 188с трет-бутил-4-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 188с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1,4-диоксан (50 мл), 188b (1.3 г, 4.7 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.24 г, 4.7 ммоль) и карбонат цезия (3.8 г, 12 ммоль). После барботирования полученной смеси азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (272 мг, 0.47 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (430 мг, 0.47 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 2). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на флэш-колонке, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 188с (1.3 г, 59%). MS: [M+H]+ 464.
Пример 188d 5-бром-1-метил-3-(5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 188d
Смесь 188с (3.6 г, 7.8 ммоль) и 4.0 М HCl/диоксан (10 мл) перемешивали в течение 5 часов при комнатной температуре. Затем ее концентрировали при пониженном давлении. Остаток подщелачивали водным 1.0M NaOH и экстрагировали хлористым метиленом. Объединенные органические слои промывали водой и концентрировали при пониженном давлении с получением 188d (2.46 г, 87%). MS: [M+H]+ 364.
Пример 188е 5-бром-1-метил-3-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1 Н)-он 188е
Смесь 188d (2.75 г, 7.5 ммоль), оксетан-3-она (1.6 г, 22.7 ммоль), NaBH3CN (4.75 г, 22.5 ммоль) и хлорида цинка (3 г, 22.7 ммоль) в метаноле (125 мл) перемешивали в течение 5 часов при 50 градусах. Смесь добавляли к воде и экстрагировали хлористым метиленом три раза. Органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 25:1 хлористый метилен/метанол, с получением 188е (1.92 г, 61%). MS: [M+H]+ 420. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.58 (d, J=2.5, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.94 (d, J=3, 1H), 7.54 (d, J=2.5, 1H), 7.39 (dd, J=3, 1H), 7.25 (d, J=4, 1H), 4.56 (t, J=6.5, 2H), 4.46 (t, J=6.5, 2H), 3.50 (s, 3H), 3.43 (m, 1 H), 3.01 (m, 4H), 2.40 (m, 4H).
Пример 188f 2-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 188f
Согласно примеру 148b, 464 мг 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 114а и 420 мг 188е подвергали взаимодействию с получением 188f в виде желтого твердого вещества (360 мг, 54%). ЖХМС: [М+Н]+ 678.
Согласно примеру 148, 270 мг 188f превращали в 188 в виде белого твердого вещества (144 мг, 54%). ЖХМС: [М+Н]+ 635. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ: 8.55 (d, J=2.5, 1H), 7.89 (d, J=3, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.47-7.41 (m, 3H), 7.26-7.21 (m, 2H), 6.85 (s, 1H), 6.83 (d, J=8.5, 1H), 4.72-4.65 (m, 3H), 4.59 (d, J=10.5, 1H), 4.43-4.36 (m, 2H), 4.20-4.13 (m, 3 H), 3.93-3.89 (m, 1H), 3.59-3.57 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.05 (m, 1H), 2.6-2.51 (m, 7H), 1.89 (s, 2H), 1.78 (s, 2H).
Пример 189 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло-[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 189
Пример 189а 2-бром-4-фтор-6-(9-оксо-4,4-диметил-1,10 диазатрицикло[6.4.0.02,6]-додека-2(6),7-диен-10-ил)бензилацетат 189а
Герметичную пробирку снабжали магнитной мешалкой и помещали в нее 167е (740 мг, 3.6 ммоль), 2,6-дибром-4-фторбензилацетат 197с (2.4 г, 7.2 ммоль) и карбонат цезия (2.6 г, 7.9 ммоль) в 1,4-диоксане (36 мл). После барботирования указанного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (250 мг, 0.43 ммоль) и трис(дибензилиденацетон) дипалладия(0) (260 мг, 0.29 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени добавляли Н2О (50 мл) и этилацетат (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом 100% гексаны - 100% этилацетат, с получением 56% выхода (910 мг) 189а.
Пример 189b 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 189b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 109с (170 мг, 0.5 ммоль), 189а (150 мг, 0.33 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (19 мг, 0.02 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°C в течение 10 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 хлористый метилен:диэтиловый эфир:метанол, с получением 37% выхода (71 мг) 189b.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 189b (71 мг, 0.12 ммоль), гидроксид лития (26 мг, 0.6 ммоль), ТГФ (0.6 мл), изопропанол (0.6 мл) и воду (1.2 мл). Смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2X5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом CH2Cl2 - 60:35:5 CH2Cl2:диэтловый эфир:метанол, с получением 58% выхода (38 мг) 189. MS (ESI+) m/z 529.7 (Μ+Η).
Пример 190 10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 190
Пример 190а 3-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 190а
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 5-бром-3-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 138с (305.6 мг, 0.696 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (185.4 г, 0.730 ммоль), Pd2(dba)3 (63.7 мг, 0.070 ммоль), X-Phos (66.3 мг, 0.139 ммоль), КОАс (102.4 мг, 1.043 ммоль) и диоксан (5 мл). Смесь нагревали при 90°С в течение 4 часов. Полученную смесь фильтровали через Целит, промывали этилацетатом (200 мл). Органическую фазу промывали водой (50 мл), сушили над MgSO4 и растворитель удаляли в вакууме с выходом неочищенного продукта 190а, который использовали непосредственно на следующей стадии.
Пример 190b 10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(ацетоксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 190b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли бромид 167f (150 мг, 0.348 ммоль), 190а (306 мг, 0.696 ммоль), Pd(PPh3)4 (40.2 мг, 0.0348 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 1.15 мл, 1.15 ммоль), ДМЭ (4 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=5:95) получали 190b.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 190b, ТГФ (3 мл), изопропанол (3 мл), воду (3 мл), моногидрат LiOH (200 мг). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Весь растворитель удаляли в вакууме, и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН: хлористый метилен=10:90) получали 190 в виде желтого твердого вещества, 16 мг. MS (ESI+) m/z 622.5 (М+Н).
Пример 191 10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 191
Пример 191 а 10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,б-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(2),7-диен-9-он 191а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 3-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 150а (200 мг, 0.5 ммоль), 189а (150 мг, 0.34 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (19 мг, 0.02 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 10 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:метанол, с получением 59% выхода (125 мг) 191а.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 191а (130 мг, 0.2 ммоль), гидроксид лития (43 мг, 1.0 ммоль), ТГФ (1 мл), изопропанол (1 мл) и воду (2 мл). Смесь перемешивали при кт в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 60:35:5 CH2Cl2:диэтиловый эфир:метанол, с получением 59% выхода (68 мг) 191. MS (ESI+) in/z 573.4 (M+H).
Пример 192 6-(3-(5-(6,7-дигидро-4H-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-2,3-(5,5-диметил-5,6-дигидро-4H-циклопента)-5,6-дигидротиено[2,3-с]пиридин-7(4H)-он 192
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 182с (300 мг, 0.513 ммоль), 110с (167 мг, 0.513 ммоль), карбонат натрия (218 мг, 2.05 ммоль), воду (6 мл) и 1,4-диоксан (30 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 20 минут, добавляли тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (60.0 мг, 0.051 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 4 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и фильтрационный остаток промывали смесью 1:10 метанола и хлористого метилена (30 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого остатка. В одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали полученный остаток, фторид тетрабутиламмония (1.0М в ТГФ, 2 мл, 2.00 ммоль) и ТГФ (6 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 36% (110 мг) выхода 192 в виде беловатого твердого вещества: тк 170-172°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.21 (s, 1Н), 7.99 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.32 (dd, 1H, J=9.0, 3.0 Гц), 7.28 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.15 (dd, 1H, J=9.0,3.0 Гц), 5.93 (s, 1H), 4.86 (t, 1H, J=5.0 Гц).
Пример 193 5-(2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил))-1-метил-3-(пиридин-3-иламино)пиразин-2(1H)-он 193
Согласно примеру 204, в результате реакции 111b (132 мг, 0.466 ммоль) и 131а (300 мг, 0.606 ммоль) получали 31% выход (75 мг) 193 в виде беловатого твердого вещества: тк 135-136°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.53 (s, 1H), 9.15 (d, 1H, J=1.9 Гц), 8.42 (m, 1H), 8.17 (dd, 1H, J=4.5, 1.4 Гц), 7.54 (dd, 1H, J=7.4, 1.0 Гц), 7.47 (m, 2H), 7.34 (dd, 1H, J=8.0, 1.5 Гц), 7.30 (m, 1H), 4.82 (m, 1H), 4.46 (m, 2H), 4.01 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.02 (m, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.54 (d, 2H, J=6.0 Гц), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 528.2 (M+H).
Пример 194 5-(2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-1-метил-3-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Л)-он 194
Согласно примеру 204, в результате реакции 197е (176 мг, 0.466 ммоль) и 131а (300 мг, 0.606 ммоль) получали коричневый остаток. В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали указанный выше неочищенный остаток, ТГФ (8 мл), метанол (4 мл), воду (4 мл) и моногидрат гидроксида лития (196 мг, 4.66 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре и затем концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 33% выхода (95 мг) 194 в виде беловатого твердого вещества: тк 142-143°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.54 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.33 (s, 1H), 7.85 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.45 (t, 1H, J=7.4 Гц), 7.35 (m, 2H), 7.32 (m, 2H), 7.20 (d, 1H, J=9.3 Гц), 4.84 (m, 1H), 4.32 (m, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.03 (m, 5H), 2.87 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.43 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 625.3 (M+H).
Пример 195 5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3H,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино-[1,2-а]индол-2-ил} фенил]-1-метил-3-({5-[4-(пропан-2-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-он 195
Согласно примеру 138, 5-бром-1-метил-3-(5-(4-(1-метилэтил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 220а превращали в 75 мг 195 в виде белого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 622 (M+Н).
Пример 196 10-(3-{5-[(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 196
Пример 196а 3-(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 196а
В герметичную пробирку, снабженную магнитной мешалкой, помещали 5-бром-3-(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 142а (380 мг, 1.4 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (690 мг, 2.7 ммоль), ацетат калия (401 мг, 4.1 ммоль) и 1,4-диоксан (34 мл). Затем после барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли комплекс [1,1’-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладия(II) и хлористого метилена (PdCl2dppf:CH2Cl2 (1:1), 110 мг, 0.14 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 105°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между водой (20 мл) и этилацетатом (20 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×10 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный 196а применяли на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 196b 10-(3-{5-[(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(ацетоксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 196b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 19ба (450 мг, 1.3 ммоль), 189а (240 мг, 0.5 ммоль), ДМЭ (4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1.5 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (31 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 10 минут. По прошествии указанного времени добавляли EtOAc (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 60:35:5 хлористый метилен:диэтиловый эфир:метанол, с получением 83% выхода (260 мг) 196b.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 196b (260 мг, 0.5 ммоль), гидроксид лития (94 мг, 2.2 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол (2 мл) и воду (5 мл). Смесь перемешивали при кт в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с применением колонки Biotage KPNH 12+М, элюируя градиентом гексаны - этилацетат, с получением 46% выхода (110 мг) 196. MS (ESI+) m/z 545.4 (M+H).
Пример 197 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 197
Пример 197а 2,6-дибром-4-фторбензальдегид 197а
К раствору 1,3-дибром-5-фтор-2-иодбензола (50 г, 132 ммоль) безводном толуоле (300 мл), охлажденному до -35°С, в течение 30 минут добавляли раствор хлорида изопропилмагния (84 мл, 171 ммоль, 2.0 М в диэтиловом эфире), при поддержании внутренней температуры ниже -25°С. Получали светлый коричневый раствор. Перемешивание продолжали в течение 1.5 часов. Затем в течение 30 минут добавляли безводный ДМФА (34 мл, 436 ммоль). Температуру реакционной смеси повышали до -19°С. Реакционную смесь течение часа нагревали до 10°С (комнатная температура) в 1 часа и перемешивали при указанной температуре в течение 1.5 часов. Реакцию гасили насыщенным водным NH4Cl (100 мл), фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат: от 50:1 до 20:1) с получением 197а (20 г, выход 54%) в виде желтого твердого вещества.
Пример 197b 2,6-(дибром-4-фторфенил)метанол 197b
К раствору 197а (20 г, 71 ммоль) в этаноле (500 мл) добавляли NaBH4 (10 г, 284 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре (10°С) в течение 4 часов. ТСХ показала исчезновение исходного материала. Реакцию гасили раствором HCl (150 мл, 1 М). Большую часть этанола выпаривали при пониженном давлении. Остаток экстрагировали этилацетатом (3×500 мл). Органические слои объединяли и сушили безводным Na2SО4, выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат: от 50:1 до 20:1) с получением 197b (15 г, выход 75%) в виде белого твердого вещества.
Пример 197с 2,6-дибром-4-фторбензилацетат 197с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 197b (23.0 г, 81.0 ммоль), триэтиламин (25.0 г, 247 ммоль) в безводном хлористом метилене (100 мл). Добавляли уксусный ангидрид (10.0 г, 98.0 ммоль) и указанную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом (100 мл) и промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (100 мл). Слои разделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 50% этилацетат/гексаны) с получением 197с с выходом 87% (23.0 г) в виде белого твердого вещества.
Пример 197d 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 197d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро- 1Я-индол-2-карбоксилат 101k (3.8 г, 20 ммоль), 197с (20 г, 60 ммоль), Ксантфос (1.2g, 2 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (1.8g, 2 ммоль), Cs2CO3 (16 г, 50 ммоль) и 1,4-диоксан (120 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 16 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 5:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 197d с выходом 60% (5.2 г) в виде белого твердого вещества. MS: [М+Н]+ 435. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.70 (dd, J=3, 1H), 7.48 (dd, J=3, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.01 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.73 (m, 1H), 2.60 (m, 2H), 2.45 (m, 2H), 1,98 (s, 3H), 1.77 (m, 2 H), 1.68 (m, 2H).
Пример 197f 1-метил-3-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он 197f
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 1 л, снабженную магнитной мешалкой и терморегулятором, продували азотом и помещали в нее 197е, полученный согласно патенту США 2009/0318448, (10.0 г, 0.027 моль), бис(пинаколато)диборон (8.06 г, 0.032 моль), ацетат калия (10.4 г, 0.11 моль) и 1,4-диоксан (200 мл). После пропускания в течение 30 минут через полученную суспензию потока азота добавляли Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2 (582 мг, 0.795 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры, разделяли между водой (400 мл) и этилацетатом (600 мл) и фильтровали через подложку из Целита. Органическую фазу экстрагировали, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Отстаток измельчали со смесью диэтилового эфира (50 мл) и гексанов (250 мл) и указанную суспензию фильтровали. Фильтрационный остаток сушили в вакууме при комнатной температуре с получением 27% выхода (3.04 г) 197f в виде коричневого твердого вещества.
Пример 197g 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-a]индол-2(1H)-ил)бензилацетат 197g
В стеклянный сосуд емкостью 10 мл, снабженный якорем магнитной мешалки, помещали 197f (244 мг, 0.58 ммоль), 197d (200 мг, 0.46 ммоль), Pd(PPh3)4 (33 мг, 0.030 ммоль) в 2 N Na2CO3 (1 мл) и ДМЭ (2 мл). Сосуд герметизировали мембраной и помещали в углубление микроволнового реактора. После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 7 минут ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 85:15) с получением 30% (90 мг) 197g в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 197g (90 мг, 0.14 ммоль), гидрат LiOH (60 мг, 1.4 ммоль), ТГФ (2 мл), изо-PrOH (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4), и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 81% выхода (69 мг) 197. MS (ESI+) m/z 612.5 (M+H).
Пример 198 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-l,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 198
Пример 198а 2,б-дибром-4-фторбензальдегид 198а
К раствору 1,3-дибром-5-фтор-2-иодбензола (50 г, 132 ммоль) в безводном толуоле (300 мл), охлажденному до -35°, в течение 30 минут добавляли раствор хлорид изопропилмагния (84 мл, 171 ммоль, 2.0 М в Et2O), при поддержании внутренней температуры ниже -25° (Фигура 6). Получали светлый коричневый раствор. Перемешивание продолжали в течение 1.5 часов. Затем в течение 30 минут добавляли безводный ДМФА (34 мл, 436 ммоль). Температуру реакционной смеси повышали до -19°. Реакционную смесь нагревали до 10° (комнатная температура) в течение 1 часа и перемешивали при указанной температуре в течение 1.5 часов. Реакцию гасили насыщенным водным NH4Cl (100 мл), фильтровали и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат: от 50:1 до 20:1) с получением 198а (20 г, выход 54%) в виде желтого твердого вещества.
Пример 198b 2,6-дибром-4-фторфенил)метанол 198b
К раствору 198а (20 г, 71 ммоль) в EtOH (500 мл) добавляли NaBH4 (10 г, 284 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре (10°С) в течение 4 часов. ТСХ показала исчезновение исходного материала. Реакцию гасили раствором HCl (150 мл, 1 М). Большую часть EtOH выпаривали при пониженном давлении. Остаток экстрагировали этилацетатом (3×500 мл). Органические слои объединяли и сушили безв. Na2SO4, выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле (элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат: от 50:1 до 20:1) с получением 198b (15 г, выход 75%) в виде белого твердого вещества.
Пример 198с 2,6-дибром-4-фторбензилацетат 198с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 198b (23.0 г, 81.0 ммоль), триэтиламин (25.0 г, 247 ммоль) в безводном хлористом метилене (100 мл). Добавляли уксусный ангидрид (10.0 г, 98.0 ммоль) и указанную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом (100 мл) и промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (100 мл). Слои разделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 50% этилацетат/гексаны) с получением 198с с выходом 87% (23.0 г) в виде белого твердого вещества.
Пример 198d 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 198d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали этил-1-(2-аминоэтил)-4,5,6,7-тетрагидро-1H-индол-2-карбоксилат 101k (3.8 г, 20 ммоль), 198с (20 г, 60 ммоль), Ксантфос (1.2g, 2 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дилалладий(0) (1.8g, 2 ммоль), Cs2CO3 (16 г, 50 ммоль) и 1,4-диоксан (120 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 16 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 5:1 ПЭ/ЭА, с получением 198d с выходом 60% (5.2 г) в виде белого твердого вещества. MS: [М+Н]+ 435. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.70 (dd, J=3, 1Н), 7.48 (dd, J=3, 1H), 6.52 (s, 1H), 5.01 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.73 (m, 1H), 2.60 (m, 2H), 2.45 (m, 2H), 1.98 (s, 3H), 1.77 (m, 2H), 1.68 (m, 2H).
Пример 198е 5-бром-1-метил-3-[5-(4-метилпилеразин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-1Н-пиридин-2-он 198e
Стадия 1: 1-метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин
Согласно патенту США 2009/0318448, к раствору 5-бром-2-нитропиридина (2.0 г, 9.85 ммоль) в ДМСО (10 мл) добавляли К2СО3 (2.72 г, 19.7 ммоль) и 1-метилшшеразин (1.64 мл, 14. 8 ммоль), и иодид тетрабутиламмония (36 мг). Смесь перемешивали при 120 градусах С в течение ночи. Ей позволяли охладиться и подкисляли 1N HCl. Смесь экстрагировали ДХМ. Водный слой подщелачивали насыщенным Na2CO3 и дополнительно экстрагировали ДХМ. Объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением коричневого твердого вещества, которое промывали небольшим количеством воды. Твердое вещество сушили в вакууме с получением 2.16 г 1-метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазина (99% выход) в виде желтого порошка. ЖХМС: (М+Н)+ 223.
Стадия 2: 5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-амин
Суспензию 1-метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазина (5 г, 22.5 ммоль), NH4Cl (12 г, 225 ммоль) и Fe (5 г, 5 ммоль) перемешивали в EtOH/H2O (1:1) (100 мл) при 80°С в течение 3 часов. ТСХ показала исчезновение исходного материала 1-метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазина. После фильтрации на подложке из Целита растворитель удаляли в вакууме. К смеси добавляли ЭА и солевой раствор и органический слой отделяли, сушили над Na2SO4 и концентрировали при пониженном давлении с получением 2.5 г 5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-амина (выход 60%). ЖХМС: (М+Н)+ 193.
Стадия 3: к диоксану (30 мл) в герметичной пробирке добавляли 5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-амин (1 г, 10.5 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.87 г, 7 ммоль) и Cs2CO3 (5 г, 21 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 15 минут добавляли Ксантфос (405 мг, 0.7 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дилалладий(0) (320 мг, 0.35 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 0.5 часа. После фильтрации твердое вещество промывали теплым ЭА и фильтрат концентрировали с получением неочищенного продукта в виде черного твердого вещества. Неочищенный продукт перекристаллизировали из МеОН с получением 1.26 г (64%) 198е. ЖХМС: (М+Н)+ 380. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.57 (d, J=2.5,1Н), 8.54 (s, 1H), 7.93 (d, J=3, 1H), 7.44 (d, J=2.5, 1H), 7.38 (dd, J=3.5, 2H), 7.24 (d, J=4.5, 1H), 3.50 (s, 3Н), 3.07 (m, 4Н), 2.44 (m, 4H), 2.21 (s, 3H).
Пример 198f 1-метил-3-[5-(4-метилпилеразин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-1Н-пиридин-2-он 198f
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 1 л, снабженную магнитной мешалкой и терморегулятором, продували азотом и помещали в нее 198е (10.0 г, 0.027 моль), бис(пинаколато)диборон (8.06 г, 0.032 моль), ацетат калия (10.4 г, 0.11 моль) и 1,4-диоксан (200 мл). После пропускания минут через полученную суспензию в течение 30 потока азота добавляли Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2 (582 мг, 0.795 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 3 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры, разделяли между водой (400 мл) и этилацетатом (600 мл) и фильтровали через подложку из Целита. Органическую фазу экстрагировали, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали. Остаток измельчали со смесью диэтилового эфира (50 мл) и гексанов (250 мл) и указанную суспензию фильтровали. Фильтрационный остаток сушили в вакууме при комнатной температуре с получением 27% выхода (3.04 г) 198f в виде коричневых твердых веществ.
Пример 198g 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 198g
В стеклянный сосуд емкостью 10 мл, снабженный якорем магнитной мешалки, помещали 198f (244 мг, 0.58 ммоль), 198d (200 мг, 0.46 ммоль), Pd(PPh3)4 (33 мг, 0.030 ммоль) в 2 N Na2CO3 (1 мл) и ДМЭ (2 мл). Сосуд герметизировали мембраной и помещали в углубление микроволнового реактора. После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 7 минут ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:МеОН, 85:15) с получением 30% (90 мг) 198g в виде твердого вещества.
Согласно примеру 148, 198g превращали в 75 мг 198 в виде белого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 626.6 (М+Н).
Пример 199 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(1-метилазетидин-3-ил)окси]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 199
Пример 199а трет-бутил-3-иодазетидин-1-карбоксилат 199а
Раствор трет-бутил-3-гидроксиазетидин-1-карбоксилат (25-3) (3.5 г, 0.02 моль) в толуоле (200 мл) обрабатывали имидазолом (4.08 г, 0.06 моль), PPh3 (0.6 г, 0.04 моль), и I2 (7.62 г, 0.03 моль). Смесь нагревали при 100°С в течение 1 часа и охлаждали до комнатной температуры. Затем ее выливали в насыщенный раствор NaHCO3 (30 мл). Избыток PPh3 разрушали путем добавления иода до тех пор, пока цвет 1з не закрепился в органическом слое. Смесь промывали 5% раствором Na2SO3, сушили над Na2SO4 и выпаривали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением 199а (5.31 г, 93%). MS: [М+Н]+ 284.
Пример 199b трет-бутил-3-(6-нитропиридин-3-илокси)азетидин-1-карбоксилат 199b
Смесь 199а (2.24 г, 7.9 ммоль), 6-нитропиридин-3-ол (1 г, 7.2 ммоль) и Cs2CO3 (2.6 г, 7.9 ммоль) в ДМФА (8 мл) нагревали при 125°С в герметичной пробирке в течение ночи. Смесь отфильтровали и промывали этилацетатом (20 мл × 2). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-Oash с получением 199b (1.25 г, 59%). MS: [M+H]+ 296.
Пример 199с трет-бутил-3-(б-аминопиридин-3-илокси)азетидин-1-карбоксилат 199с
Бутыль для гидрирования Парра емкостью 100 мл продували азотом и помещали в нее 199b (1.07 г, 3.6 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 0.3 г) и метанол (60 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 25 psi и встряхивали в течение 2 часов на устройстве для гидрирования Парра. Затем откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 199с (0.95 г, 99%). MS: [М+Н]+ 266.
Пример 199d трет-бутил-3-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-илокси)азетидин-1-карбоксилат 199d
Смесь 199с (950 мг, 3.6 ммоль), Ксантфоса (125 мг, 0.29 ммоль), Pd2dba3 (260 мг, 0.29 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1.03 г, 3.9 ммоль) и Cs2CO3 (1.8 g. 7.2 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали метанолом (100 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 199d (1.46 г, 91%). MS: [М+Н]+ 451.
Пример 199е гидрохлорид 3-(5-(азетидин-3-илокси)пиридин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-она 199е
Смесь 199d (1.46 г, 3.2 ммоль) и HCl/1,4-диоксан (3.2 мл, 12.8 ммоль, 4 М) в метаноле (20 мл) нагревали при 80°С в течение 1 часа. Смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 199е (1.24 г, 99%). MS: [М+Н]+ 351.
Пример 199f 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-илокси)пиридин-2-иламино)-пиридин-2(1Н)-он 199f
Смесь 199е (1.24 г, 3.2 ммоль), раствора НСНО (15 мл, 37% в воде), уксусной кислоты (1 мл) и NaBH(ОАс)3 (1.36 г, 6.4 ммоль) в метаноле (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3). Объединенные экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 199f (940 мг, 80%). MS: [М+Н]+ 365.
Пример 199g {4-фтор-2-[1-метил-5-({5-[(1-метилазетидин-3-ид)окси]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил}метилацетат 199g
Смесь 199f (434 мг, 1.2 ммоль), (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 212b (600 мг, 1.2 ммоль), PdCl2(dppf) (134 мг, 0.18 ммоль), K3PO4 (150 мг) и NaOAc (100 мг) в MeCN (8 мл) и воды (2 мл) нагревали при 110°С в герметичной пробирке в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 199g (320 мг, 41%). MS: [M+H]+ 658.
Смесь 199g (320 мг, 0.49 ммоль) и гидрата LiOH (409 мг, 9.8 ммоль) в изопропаноле (20 мл) и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 199 (30 мг, 10%). MS: [М+Н]+ 616. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.52 (d, J=2.0, 1Н), 7.82 (s, 1H), 7.75 (d, J=2.5,1H), 7.48 (d, J=2.0, 1H), 7.16-7.14 (m, 1H), 7.11-7.09 (m, 1H), 6.98-6.96 (m, 1H), 6.79 (d, J=9.0, 1H), 4.76-7.72 (m, 1H), 4.56 (d, J=11.5, 1H), 4.32-4.25 (m, 1H), 4.19-4.07 (m, 2Н), 3.97-3.80 (m, 3H), 3.69 (s, 3Н), 3.23-3.15 (m, 2Н), 3.00-2.81 (m, 4H), 2.59-2.50 (m, 2Н), 2.47 (s, 2Н), 1.93-1.83 (m, 4H).
Пример 200 2-(3-(5-(5-(Азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 200
Пример 200а 5-(Азетидин-1-илметид)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразол 200а
Согласно примеру 156е, 5-(бромметил)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразол 156d (1.76 г, 8 ммоль), азетидин (550 мг, 9.6 ммоль), диизопропилэтиламин (1.75 мл, 10 ммоль) и хлористый метилен (40 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 3-5 часов. Выделяли и концентрировали при пониженном давлении с получением 5-(азетидин-1-илметид)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразола 200а (количеств.) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS (ESI+) m/z 197.1 (М+Н).
Пример 200b 5-(Азетидин-1-илметил)-1-метил-lH-пиразол-3-амин 200b
Согласно примеру 156f, 10% палладий на углероде (30% полной массы, 480 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 200а (1.6 г, 8 ммоль) в этаноле (50 мл) подвергали взаимодействию. Реакционную смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×30 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением 5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-амина 200b (количественный) в виде желтого масла. MS (ESI+) m/z 167.1 (М+Н).
[0001] Пример 200с 3-(5-(Азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 200с
Согласно примеру 156г, 200b (350 мг, 2 ммоль), 3,5-дибром-1-метил-1Н-пиридин-2-он (0.54 г, 2 ммоль), карбонат цезия (1.3 г, 4 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дилалладий(0) (0.18 г, 0.2 ммоль), Ксантфос (0.23 г, 0.4 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл) нагревали при 100°С в течение 8 часов. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 3:1 хлористый метилен/метанол) получали 98% выход (0.69 г) 3-(5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-она 200с в виде желтого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 354.1 (М+Н).
Пример 200d 2-(5-(5-(Азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 200d
Согласно примеру 121b, 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (202 мг, 0.42 ммоль), 3-(5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 200с (105 мг, 0.3 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (1.2 мл, 1.2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (18 мг, 0.015 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (3 мл) нагревали при 130°С в течение 10 минут в микроволновом реакторе. Выделяли и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 3:1 хлористый метилен/метанол) с получением 180 мг соединения 200d (количеств., содержал 3% 200) в виде желтого остатка: MS (ESI+) m/z 628.1 (М+Н).
С промежуточного соединения 200d (0.3 ммоль) снимали защиту с применением Примера 121, с применением ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл), изопропанола (1 мл) и моногидрата гидроксида лития (80 мг, 1.93 ммоль). Выделяли и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) с получением 25% выхода (две стадии, 45 мг) 200 в виде светло-розового твердого вещества: MS (ESI+) m/z 586.6 (М+Н).
Пример 201 2-(5-(5-(4-этилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензиловый спирт 201
Пример 201b 2-(5-(5-(4-этилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 201b
В герметичную пробирку емкостью 44 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 138е (190 мг, 0.49 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан (200 мг, 0.79 ммоль), ацетат калия (190 мг, 2.0 ммоль) и 1,4-диоксан (5 мл). После дегазирования смеси в течение 30 минут добавляли Pd(dppf)Cl2⋅CH2Cl2 (40 мг, 0.049 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при 105°С в течение 6 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через подложку из Целита. Фильтрат концентрировали и неочищенный боронолатный продукт повторно растворяли в ДМЭ (2 мл) и переносили в сосуд для микроволновой реакции емкостью 10 мл. К раствору добавляли 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 197d (171 мг, 0.39 ммоль), Pd(PPh3)4 (30 мг, 0.025 ммоль) и 2 N Na2CO3 (2 мл). Затем реакционную смесь дегазировали в течение 5 минут и помещали в углубление микроволнового реактора. После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 7 минут ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:МеОН, 85:15) с получением 46% (120 мг) 201b в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 2-(5-(5-(4-этилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 201b (120 мг, 0.18 ммоль), LiOH⋅H2O (80 мг, 1.8 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол(2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (3X5 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (2X5 мл) и солевым раствором (5 мл), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 40% выход (45 мг) 201; MS(ESI+) m/z 626.4 (М+Н).
Пример 202 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-он 202
Пример 202а 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 202а
Согласно примеру 142а, 5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-амин (500 мг, 2 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (0.54 г, 2 ммоль), карбонат цезия (1.9 г, 6 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0.18 г, 0.2 ммоль), Ксантфос (0.23 г, 0.4 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл) нагревали при 100°C в течение 8 часов. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 9:1 хлористый метилен/метанол) получали 82% выход (0.6 г) 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 202а в виде зеленого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 365.0 (М+Н).
Согласно примеру 121b, 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (338 мг, 0.7 ммоль), 202а (181 мг, 0.5 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (2 мл, 2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (29 мг, 0.025 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл) подвергали взаимодействию. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 3:1 хлористый метилен /метанол) получали смесь (200 мг) 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1H)-ил)бензилацетата и 202 в виде желтого остатка.
С указанного выше остатка снимали защиту согласно примеру 121, за исключением применения смеси ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл), изопропанола (1 мл) и моногидрата гидроксида лития (55 мг, 1.2 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 32% выход (60 мг) 202 в виде желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 597.4 (М+Н).
Пример 203 5-(3-(6,6-диметил-5,7-дигидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)пиридин-2(1H)-он 203
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 105i (226 мг, 0.506 ммоль), 109с (200 мг, 0.610 ммоль), карбонат натрия (160 мг, 1.51 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (60 мг, 0.052 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом/метанолом 90:10 (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок растворяли в смеси ТГФ (3 мл), воды (3 мл) и метанола (3 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (61 мг, 1.45 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (50 мл), и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью хлористый метилен/метанол 90:10 (2×75 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен), с последующим измельчением с метанолом (10 мл), с получением 203 с выходом 37% (57 мг) в виде аморфного белого твердого вещества: тк 170-171°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.18 (s, 1Н), 8.74 (d, 1H, J=3.5 Гц), 8.65 (s, 1Н), 8.29 (d, 1H, J=10.0 Гц), 7.93 (d, 1Н, J=10.0 Гц), 7.57 (d, 1Н, J=3.5 Гц), 7.43 (t, 1Н, J=13.0 Гц), 7.32 (m, 2H), 7.24 (d, 1H, J=13.0 Гц), 7.19 (d, 1H, J=13.0 Гц), 4.83 (m, 1H), 4.38 (d, 2H, J=6.5 Гц), 3.60 (s, 3H), 2.90 (s, 2H), 2.74 (s, 2H), 1.28 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 526.2 (М+Н).
Пример 204 5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-1-метил-3-(5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1H) 204
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 197е (170 мг, 0.450 ммоль), 182с (300 мг, 0.513 ммоль), карбонат натрия (143 мг, 1.35 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (52 мг, 0.045 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли хлористым метиленом (100 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого остатка.
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее указанный выше остаток, ТГФ (10 мл) и 1 М раствор фторида тетрабутиламмония в ТГФ (4.50 ммоль, 4.5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом (100 мл) и промывали водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 53% выхода (154 мг) 204 в виде беловатого твердого вещества: тк 143-145°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.54 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.35 (s, 1H), 7.86 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.34 (m, 3H), 7.21 (d, 1H, J=8.9 Гц), 7.17 (dd, 1H, J=9.3, 3.0 Гц), 4.85 (m, 1H), 4.32 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.03 (m, 5H), 2.87 (m, 1H), 2.75 (s, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.43 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 643.3 (М+Н).
Пример 205 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 205
Пример 205а 5-бром-1-метил-3-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 205а
трет-бутил-2-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-7,8-дигидро-1,6-нафтиридин-6(5Н)-карбоксилат 158с (3.2 г, 7.4 ммоль) суспендировали в хлористом метилене (20 мл), добавляли по каплям насыщенный хлороводород в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 минут и концентрировали при пониженном давлении с получением 205а, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ/МС: m/z 336 (М+Н)+
Пример 205b 5-бром-1-метил-3-(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 205b
Смесь 205а (2.75 г, 7.5 ммоль), формальдегида (37 процентный в воде, 30 мл, 375 ммоль), NaBH(OAc)3 (4.75 г, 22.5 ммоль) и уксусной кислоты (25 мл, 150 ммоль) в метаноле (125 мл) перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре. Затем смесь доводили до основного состояния с помощью насыщенного раствора NaOH и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над Na2SO4 и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 4:1 этилацетат/метанол, с получением 205b (2.0 г, 77%). ЖХ/МС: m/z 349 (М+Н)+.
Пример 205с 4-фтор-2-(1-метил-5-(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 205с
В виалу для микроволнового реактора емкостью 15 мл с магнитной мешалкой, помещали 205b (0.35 г, 1 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (0.48 г, 1 ммоль), фосфат калия (0.54 г, 2 ммоль), ацетат натрия (0.17 г, 2 ммоль), ацетонитрилом (10 мл), воду (1 мл) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроценпалладий(II) дихлорид дихлорметан (0.08 г, 0.1 ммоль). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов в атмосфере аргона. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 40:1 DMC/метанол, с получением 205с (0.22 г, 36%). ЖХ/МС: m/z 625 (М+Н)+.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали соединение 4-фтор-2-(1-метил-5-(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 205с (0.2 г, 0.32 ммоль), LiOH (2 г, 48 ммоль), ТГФ(5 мл), изопропанол (5 мл) и воду (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 205 (100 мг, 53%). ЖХ/МС: m/z 583 (М+Н)+. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.79 (d, J=2, 1Н), 8.45 (s, 1H), 7.44 (d, J=2, 1H), 7.31 (m, 2H), 7.20 (m, 1H), 7.08 (d, J=9, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.34 (m, 2H), 4.17 (m, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.38 (m, 2H), 2.75 (m, 2H), 2.62 (m, 4H), 2.51 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 1.70 (m, 4H).
Пример 206 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(1-(2-(метиламино)этил)-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 206
Пример 206а 2-(2-(3-нитро-1Н-пиразол-1-ил)этил)изоиндолин-1,3-дион 206а
Раствор 4-нитро-1Н-пиразола (10 г, 88.5 ммоль) в безводном ДМФА (250 мл) обрабатывали 60% дисперсией NaH в минеральном масле (4.6 г, 115 ммоль) при перемешивании в атмосфере азота. После выделения газа реакционную смесь перемешивали в течение дополнительных 30 минут. В то же время реакционную смесь обрабатывали 2-(2-бромэтил)изоиндолин-1,3-дионом (18-2) (25 г, 97.3 ммоль) и продолжали перемешивать в атмосфере азота в течение 3 часов. Затем медленно добавляли воду (50 мл) и смесь фильтровали с получением 206а в виде белого твердого вещества (20 г, 80%), которое использовали непосредственно без дополнительной очистки. ЖХМС: (М+Н)+ 287.
Пример 206b 2-(3-нитро-1Н-пиразол-1-ил)этанамин 206b
К раствору 20ба (2.0 г, 7.0 ммоль) в этаноле (30 мл) добавляли гидразин-гидрат (1 мл, 21 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь выпаривали, и остаток очищали с помощью силикагеля, элюируя смесью 10:1 хлористый метилен/метанол, с получением 206b в виде белого твердого вещества (0.8 г, 80%). MS: (М+Н)+ 157.
Пример 206c трет-бутил-2-(3-нитро-1Н-пиразол-1-ил)этилкарбамат 206с
К раствору 206b (18 г, 115 ммоль) в хлористом метилене (400 мл) добавляли (Вос)2O (50 г, 230 ммоль) и триэтиламин (35 г, 346 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Затем ее выпаривали и очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 1:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 206с в виде белого твердого вещества (24 г, 80%). MS: (M+H)+ 257.
Пример 206d трет-бутилметил(2-(3-нитро-1Н-пиразол-1-ил)этил)карбамат 206d
К раствору 206с (5 г, 19.5 ммоль) в ТГФ (40 мл) добавляли NaH (938 мг, 23.4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Иодметан (1.7 мл, 25.4 ммоль) добавляли и смесь перемешивали в течение дополнительных 15 часов. Затем ее выпаривали и очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 2:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 206d в виде белого твердого вещества (4.5 г, 85%). MS: (M+H)+ 271.
Пример 206е трет-бутил-2-(3-амино-1Н-пиразол-1-ил)этил(метил)карбамат 206е
К раствору 206d (4.5 г, 1.7 ммоль) в этаноле (40 мл) добавляли Fe (4.7 г, 8.5 ммоль) и NH4Cl (900 мг, 17 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Затем ее выпаривали и очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 2:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 206е в виде коричневого твердого вещества (3.2 г, 80%). MS: (М+Н)+ 241.
Пример 206f трет-бутил-2-(3-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-1Н-пиразол-1-ил)этил(метил)карбамат 206f
Смесь (206е (2 г, 8.3 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (2.2 г, 8.3 ммоль), Ксантфоса (482 мг, 0.83 ммоль), Pd2(dba)3 (762 мг, 0.83 ммоль) и Cs2CO3 (6.8 г, 21 ммоль) в диоксане (80 мл) нагревали при 100°С в течение 15 часов в атмосфере азота. Затем ее фильтровали, выпаривали в вакууме и очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 1:2 петролейный эфир/этилацетат, с получением 206f в виде желтого твердого вещества (2.7 г, 77%). MS: (M+H)+ 426.
Пример 206п 2-(5-(1-(2-(трет-Бутоксикарбонил(метил)амино)этил)-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 206g
Смесь 206f (800 мг, 1.9 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата (114а) (873 мг, 1.9 ммоль), CH3COONa (309 мг, 3.8 ммоль), PdCl2(dppf) (153 мг, 0.19 ммоль) и К3РО4 (1 г, 3.8 ммоль), суспендированного в CH3CN (30 мл), и Н2О (2 мл) нагревали при 110°С в течение 15 часов в атмосфере аргона. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в 1:4 вода/CH3CN, с получением 206g в виде коричневого твердого вещества (800 мг, 63%). MS: (М+Н)+ 684.
Пример 206h трет-бутил-2-(3-(5-(2-(гидроксиметил)-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)фенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-1H-пиразол-1-ил)этил(метил)карбамат 206b
К раствору 206g (750 мг, 1.1 ммоль) в пропан-2-оле (15 мл), тетрагидрофурана (15 мл) и воды (5 мл) добавляли LiOH (2.6 г, 110 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в 1:3 вода/CH3CN, с получением 206h в виде коричневого твердого вещества (500 мг, 71%). MS: (M+H)+ 642.
Раствор 206h (500 мг, 0,78 ммоль) в HCl/этилацетате (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем его выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 206 в виде коричневого твердого вещества (134 мг, 35%). MS: (М+Н)+ 542. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.79 (s, 2Н), 1.89 (s, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.54-2.56 (t, J=6 Гц, 2 H), 2.63-2.67 (m, 2H), 2.97-2.99 (t, J=6 Гц, 2H), 3.71 (s, 3H), 4.00-4.03 (m, 1H), 4.14-4.23 (m, 5H), 4.50-4.60 (m, 2H), 6.06-6.07 (d, 1H), 6.71 (s, 1H), 7.23-7.24 (d, 1H), 7.37-7.43 (m, 2H), 7.49-7.52 (m, 2H), 8.01-8.02 (d, 1H).
Пример 207 2-(3-(5-(5-(3-гидрокси-3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 207
Пример 207а 3-метил-1-(6-нитропиридин-3-ил)азетидин-3-ол 207а
Смесь 5-бром-2-нитропиридина (3.28 г, 16.3 ммоль), Ксантфоса (1.13 г, 1.96 ммоль), Pd2dba3 (1.19 г, 1.30 ммоль), гидрохлорида 3-метилазетидин-3-ола (2 г, 16.3 ммоль) и Cs2CO3 (15.9 g. 48.9 ммоль) в 1,4-диоксане (70 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали МеОН (100 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 207а (2.5 г, 71%). MS: [M+H]+ 210.
Пример 207b 1-(6-аминопиридин-3-ил)-3-метилазетидин-3-ол 207b
Бутыль для гидрирования Парра емкостью 100 мл продували азотом и помещали в нее 207а (2.3 г, 11 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 1.0 г) и метанол (100 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 25 psi и встряхивали в течение 2 часов на устройстве для гидрирования Парра. Затем откачивали водород, и бутыль наполняли азотом. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 207b (1.85 г, 92%). MS: [M+H]+ 180.
Пример 207c 5-бром-3-(5-(3-гидрокси-3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 207с
Смесь 207b (1.84 г, 10.3 ммоль), Ксантфоса (714 мг, 1.24 ммоль), Pd2dba3 (755 мг, 0.82 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (3.27 г, 12.3 ммоль) и Cs2CO3 (10 g. 30.9 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали МеОН (100 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 207с (2.11 г, 54%). MS: [М+Н]+ 365.
Пример 207d 2-(5-(5-(3-гидрокси-3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 207d
Смесь 207 с (364 мг, 1.0 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-гетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (510 мг, 1.1 ммоль), PdCl2(dppf) (110 мг, 0.15 ммоль), K3PO4 (100 мг), и NaOAc (50 мг) в MeCN (20 мл) и воды (4 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 207d (267 мг, 43%). MS: [M+H]+ 623.
Смесь 207d (350 мг, 0.56 ммоль) и гидрата LiOH (236 мг, 5.6 ммоль) в изо-PrOH (20 мл) и воды (4 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. И остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 207 (130 мг, 40%). MS: [М+Н]+ 581. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.48 (s, 1Н), 8.25 (s, 1Н), 7.48-7.44 (m, 2H), 7.34-7.28 (m, 3H), 7.17 (d, J=8.5, 1Н), 6.89-6.87 (m, 1H), 6.51 (s, 1Н), 5.47 (s, 1Н), 4.84-4.83 (m, 1Н), 4.33 (d, J=4.5, 2H), 4.18-4.06 (m, 3H), 3.90-3.86 (m, 1Н), 3.70 (d, J=7.5, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.53-3.52 (m, 2H), 2.64-2.54 (m, 2H), 2.47-2.45 (m, 2H), 1.82-1.75 (m, 2H), 1.73-1.65 (m, 2H), 1.43 (s, 3H).
Пример 208 2-(3-(5-(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 208
Пример 208а 2-(5-(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 208а
Согласно примеру 136е, 5-бром-3-(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он и 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d превращали в 208а с выходом 42%. ЖХМС: (М+Н)+ 639.
Согласно примеру 136, 208а превращали в 208 с выходом 40%. ЖХМС: (М+Н)+ 597. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.80 (d, J=2, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.45 (d, J=2, 1H), 7.31 (m, 2H), 7.20 (dd, J=10,1H), 7.07 (d, J=9, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.36 (s, 2H), 4.14 (m, 3H), 3.90 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 2.74 (m, 2H), 2.68 (m, 2H), 2.59 (m, 2H), 2.47 (m, 3H), 1.79 (m, 2H), 1.69 (m, 2H), 1.08 (t, J=7.5, 3H).
Пример 209 5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил]пиридин-2-ил)амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридска-1(9),2(7)-диен-6-он 209
Пример 209а {2-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксопиридин-3-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил}метилацетат 209а
Согласно примеру 148с, 481 мг 111a и 420 мг 5-бром-1-метил-3-(5-(4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 188е подвергали взаимодействию с получением 209а в виде желтого твердого вещества (347 мг, 50%). MS: [M+H]+ 695.
Согласно примеру 148, 230 мг 209а превращали в 209 в виде белого твердого вещества (108 мг, 50%). MS: [M+H]+ 653. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.56 (d, J=2.5, 1Н), 8.37 (s, 1H), 7.86 (d, J=3.0, 1Н), 7.45 (d, J=7.5, 1H), 7.36-7.30 (m, 4H), 7.23 (d, J=9.0, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.55 (t, J=6.5, 2H), 4.45 (t, J=6.0, 2H), 4.35 (s, 2H), 4.02 (m, 1H), 3.82 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.42 (m, 2H), 3.06 (t, J=4.5, 4H), 2.92-2.80 (m, 2H), 2.78 (s, 2H), 2.53 (m, 1H), 2.38 (s, 4H), 1.80 (s, 4H).
Пример 210 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гбксагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 210
Пример 210а 5-бром-1-метил-3-[5-(4-трем-бутоксикарбонилпилеразин-1-ил)-пиридин-2-иламин 210а
Стадия 1: трет-бутил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пилеразин-1-карбоксилат
К раствору 5-бром-2-нитропиридина (30 г, 148 ммоль) в ДМСО (1 л) добавляли K2CO3 (40 г, 296 ммоль) и трет-бутилпилеразин-1-карбоксилат (28 г, 148 ммоль). Смесь перемешивали при 65°С в течение ночи. После охлаждения ее выливали в воду (2 л). Твердый осадок собирали и сушили в вакууме. Затем его очищали с помощью флэш-колонки, элюируя ПЭ:ЭА (20:1) и затем ДХМ, с получением 17 г трет-бутил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пилеразин-1-карбоксилат в виде желтого твердого вещества (37% выход). MS: [М+Н]+ 309.
Стадия 2: трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)пилеразин-1-карбоксилат
Бутыль емкостью 500 мл продували азотом и помещали в нее трет-бутил-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат (3.1 г, 10 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 1 г) и этанол (100 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом и перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. Затем откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)пилеразин-1-карбоксилата (2.7 г, 97%). MS: [М+Н]+ 279.
Стадия 3: В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1,4-диоксан (50 мл), трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)пилеразин-1-карбоксилат, полученный согласно патенту США 7456168, (1.3 г, 4.7 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.24 г, 4.7 ммоль) и карбонат цезия (3.8 г, 12 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (272 мг, 0.47 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дилалладий(0) (430 мг, 0.47 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Органические слои объединяли и промывали солевым раствором (50 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на флэш-колонке, элюируя ДХМ:МеОН (50:1), с получением 210а (1.3 г, 59%). MS: [M+H]+ 464.
Пример 210b 5-бром-1-метил-3-[5-(пилеразин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-1Н-пиридин-2-он 210b
Соединение 210a (3.6 г, 7.8 ммоль) суспендировали в 4.0 М HCl/диоксане (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 часов при комнатной температуре и концентрировали при пониженном давлении. Желаемый продукт подщелачивали 1.0 М водным NaOH и экстрагировали хлористым метиленом. Объединенные органические слои промывали H2O и концентрировали при пониженном давлении с получением 2.46 г 210b с выходом 87%. MS: [M+H]+ 364.
Пример 210с 5-бром-1-метил-3-[5-(4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-1Н-пиридин-2-он 210с
Смесь 210b (2.75 г, 7.5 ммоль), оксетан-3-она (1.6 г, 22.7 ммоль), NaBH3CN (4.75 г, 22.5 ммоль) и хлорида цинка (3 г, 22.7 ммоль) в метаноле (125 мл) перемешивали в течение 5 часов при 50 градусах. Смесь добавляли к воде и три раза экстрагировали хлористым метиленом. Органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя хлористым метиленом: метанолом=25:1, с получением 210 с (1.92 г, 61%). MS: [M+H]+ 420. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.58 (d, J=2.5, 1H), 8.55 (s, 1H), 7.94 (d, J=3, 1H), 7.54 (d, J=2.5, 1H), 7.39 (dd, J=3, 1H), 7.25 (d, J=4, 1H), 4.56 (t, J=6.5, 2H), 4.46 (t, J=6.5, 2H), 3.50 (s, 3H), 3.43 (m, 1 Н), 3.01 (m, 4H), 2.40 (m, 4H).
Пример 210d 2-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 210d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 197d (3.8 г, 8.65 ммоль), бис(пинаколато)диборон (11 г, 43.25 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (0.4 г, 0.5 ммоль), КОАс (2.5 г, 26 ммоль) и 1,4-диоксан (150 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 15 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 5:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 210d с выходом 77% (3.2 г) в виде желтого твердого вещества. MS: [М+Н]+ 483.
Пример 210e 5-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 210е
В герметичную пробирку помещали смесь 210d (337 мг, 0.7 ммоль), 210 с (294 мг, 0.7 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (33 мг, 0.04 ммоль), K3PO4.3H2O (372 мг, 1.4 ммоль) и NaOAc (115 мг, 1.4 ммоль) в 20 мл CH3CN. Систему вакуумировали и повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 ДХМ/МеОН, с получением 210е с выходом 54% (263 мг) в виде желтого твердого вещества. MS: [М+Н]+ 696.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 210е (250 мг, 0.36 моль) в ТГФ/изопропанол/вода (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (87 мг, 3.6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часов. Затем добавляли 20 мл воды и экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получение желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 210 в виде белого твердого вещества (134 мг, 57% выхода). ЖХМС: [М+Н]+ 654. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 8.53 (d, J=2.5, 1Н), 7.93 (d, J=3, 1H), 7.42 (dd, J=3, 1H), 7.34 (d, J=2.5, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.03 (d, J=4.5, 1H), 6.72 (s, 1H), 4.73 (t, J=2, 2H), 4.64 (t, J=1.5, 2H), 4.51 (m, 2H), 4.21 (s, 3H), 4.03 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.57 (m, 1H), 3.17 (t, J=4.5, 4H), 2.65 (m, 2H), 2.55 (m, 6H), 1.90 (m, 2H), 1.79 (m, 2H).
Пример 211 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 211
Пример 211a {4-фтор-2-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил)фенил}метилацетат 211а
Согласно примеру 148h, 400 мг (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 212b и 336 мг 5-бром-1-метил-3-(5-(4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 210с подвергали взаимодействию с получением 211а в виде желтого твердого вещества (319 мг, 56%). ЖХМС: (М+Н)+ 713.
Согласно примеру 148, 270 мг 211а превращали в 211 в виде белого твердого вещества (120 мг, 48%). ЖХМС: [М+Н]+ 671. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.56 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.38-7.16 (m, 5H), 4.8 (s, 1H), 4.56 (t, J=6.5 2H), 4.46 (t, J=6.5, 2H), 4.33 (s, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.43 (t, J=6, 2H), 3.06 (m, 4H), 2.88-2.78 (m, 4H), 2.38 (t, J=5, 1H), 1.79 (m, 4H).
Пример 212 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 212
Пример 212а 2-бром-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетат 212а
Раствор 104е (3 г, 14.5 ммоль), 2,6-дибром-4-фторбензилацетата 197с (14 г, 43.5 ммоль), Ксантфоса (839 мг, 1.45 ммоль), Pd2(dba)3 (1,33 г, 1.45 ммоль) и Cs2CO3 (9.4 г, 29 ммоль) в диоксане (200 мл) нагревали при 100°С в течение 15 часов в атмосфере азота. После фильтрации фильтрат выпаривали в вакууме и очищали с помощью флэш-колонки, элюируя этилацетатом/петролейным эфиром (1:1), с получением 212а (5 г, выхода 77%) в виде желтого твердого вещества. ЖХМС: (М+Н)+ 452. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.71 (dd, J=2.5, 1H), 7.51 (dd, J=3, 1H), 5.04 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.68 (m, 1H), 2.86 (m, 2H), 2.77 (m, 2H), 2.55 (m, 3H), 1.98 (s, 3H), 1.78 (m, 4H).
Пример 212b 2-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-2(1H)-ил)бензилацетат 212b
К раствору 212а (3 г, 6.65 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-бис(1,3,2-диоксаборолана) (10 г, 40 ммоль) в диоксане (160 мл) добавляли PdCl2(dppf) (543 мг, 0.66 ммоль) и СН3СООК (3.9 г, 40 ммоль). Смесь перемешивали при 100° в течение 15 часов в атмосфере аргона. Смесь фильтровали и выпаривали в вакууме и очищали с помощью флэш-колонки, элюируя этилацетатом/петролейным эфиром (1:2), с получением 212b (2.5 г, выход 76%) в виде желтого твердого вещества. ЖХМС: (М+Н)+ 500.
Пример 212c [4-фтор-2-(1-метил-5-{[5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 212с
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали 212b (990 мг, 2 ммоль), 5 бром-1-метил-3-(5-(4-метилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 198е (500 мг, 1.3 ммоль), CH3COONa (220 мг, 2.6 ммоль), K3PO4 (700 мг, 2.6 ммоль) и PdCl2(dppf) (110 мг, 0.13 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл), и воду (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Ее выпаривали, и остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 212с в виде коричневого твердого вещества (500 мг, 56%). ЖХМС: [М+Н]+ 670.
К раствору 212с (500 мг, 0.75 ммоль) в пропан-2-оле (8 мл), тетрагидрофурана (8 мл) и воды (1.5 мл) добавляли LiOH (964 мг, 40 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем добавляли 20 мл H2O и смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 212 в виде белого твердого вещества (200 мг, 48%). ЖХМС: [М+Н]+ 629. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.56 (d, J=2, 1Н), 8.37 (s, 1Н), 7.85 (d, J=2.5, 1Н), 7.34 (m, 3H), 7.19 (m, 2H), 4.86 (s, 1H), 4.32 (s, 2H), 4.05 (m, 1Н), 3.87 (m, 1Н), 3.57 (s, 3H), 3.02 (m, 4H), 2.96 (m, 1Н), 2.87 (m, 1Н), 2.77 (m, 2H), 2.54 (m, 1Н), 2.43 (m, 4H), 2.19 (s, 3H), 1.79 (m, 4H).
Пример 213 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 213
Пример 213а 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 213а
Согласно примеру 148b, 482 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d и 350 мг 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 172а, подвергали взаимодействию с получением 213а в виде желтого твердого вещества (324 мг, 52%). MS: [М+Н]+ 625.
Согласно процедурам, описанным для 148, и, начиная с 220 мг 213а, получали соединение 213 в виде белого твердого вещества (82 мг, 40%). MS: [М+Н]+ 583. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.64 (d, J=2.0, 1Н), 8.13 (d, J=2.5, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.58 (m, 1H), 7.50 (d, J=2.5, 1H), 7.16 (dd, J=9.0, 1H), 6.96 (dd, J=8.5, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.83 (d, J=8.5, 1H), 4.55 (d, J=11.5, 1H), 4.40 (s, 1H), 4.30 (s, 1H), 4.16 (m, 2H), 3.91 (m, 1H), 3.72 (m, 5H), 3.60 (m, 1H), 3.14 (t, J=7.0, 2H), 2.59 (m, 4H), 2.38 (s, 3H), 1.90-1.79 (m, 5H).
Пример 214 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(4-(1-(оксетан-3-ил)пилеридин-4-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 214
Пример 214а 5-бром-1-метил-3-(4-(пилеридин-4-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-он 214а
Соединение 214а синтезировали с применением той же процедуры, как и в случае 121с, за исключением применения трет-бутил-4-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)-пилеридин-1-карбоксилата (121а) (0.53 г, 1.08 ммоль), трифторуксусной кислоты (0.9 мл, 10.8 ммоль) и хлористого метилена (20 мл). В результате выделения и концентрации получали количественный выход 214а (390 мг) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Пример 214b 5-бром-1-метил-3-(4-(1-(оксетан-3-ил)пилеридин-4-ил)фениламино)-пиразин-2(1Н)-он 214b
Герметичную пробирку емкостью 100 мл с магнитной мешалкой продували азотом и помещали в нее 214а (390 мг, 1.08 ммоль), оксетан-3-он (800 мг, 11 ммоль) и метанол (10 мл). Добавляли суспензию цианоборогидрида натрия (208 мг, 3.3 ммоль) и хлорида цинка (225 мг, 1.65 ммоль) в метаноле (10 мл), и реакционную смесь нагревали при 48°С в течение 12 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали и остаток разделяли между этилацетатом (50 мл) и 10% водным карбонатом калия (10 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) с получением 60% выхода (270 мг) 5-бром-1-метил-3-(4-(1-(оксетан-3-ил)пилеридин-4-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-она (214b) в виде желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 421.2 (M+H).
Пример 214c 4-фтор-2-(4-метил-6-(4-(1-(оксетан-3-ил)пилеридин-4-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ид)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 214с
Согласно примеру 121b, 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (217 мг, 0.45 ммоль), 214b (158 мг, 0.375 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (1.5 мл, 1.5 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (22 мг, 0.019 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (3.5 мл) нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 62% выход (160 мг) 214с в виде коричневого масла: MS (ESI+) m/z 696.1 (М+Н).
Соединение 214 синтезировали с применением той же процедуры, как и в случае 121, за исключением применения смеси ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл) и изопропанола (1 мл), 214 с (160 мг, 0.23 ммоль) и моногидрата гидроксида лития (80 мг, 2 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 34% выход (52 мг) 214 в виде желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 653.6 (М+Н).
Пример 215 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 215
Пример 215а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 215а
В герметичную пробирку емкостью 44 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 298с (160 мг, 0.48 ммоль), 4,4,4’,4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди-1,3,2-диоксаборолан (180 мг, 0.71 ммоль), ацетат калия (188 мг, 1.9 ммоль) и 1,4-диоксан (5 мл). После дегазирования смеси в течение 30 минут добавляли Pd(dppf)Cl2⋅CH2Cl2 (39 мг, 0.048 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при 105°С в течение 4 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через подложку из Целита. Фильтрат концентрировали и неочищенную смесь повторно растворяли в 1,2-диметоксиэтане (2 мл) и переносили в сосуд для микроволновой реакции емкостью 10 мл. К раствору добавляли 10-[2-(ацетоксиметил)-3-бром-5-фторфенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 189а (172 мг, 0.38 ммоль), Pd(PPh3)4 (30 мг, 0.024 ммоль) и 2 N Na2CO3 (2 мл). Затем реакционную смесь дегазировали в течение 5 минут и помещали в углубление микроволнового реактора. После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 10 минут ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 3:1) с получением 20% (49 мг) 215а.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 215а (49 мг, 0.077 ммоль), LiOH⋅H2O (16 мг, 0.38 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (3×5 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (2×5 мл) и солевым раствором (5 мл), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученный осадок фильтровали с получением 74% выхода (34 мг) 215. MS (ESI+) m/z 597.5 (M+H).
Пример 216 двунатриевый 2-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидро-пиридин-3-ил)-6-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)бензилфосфат 216
Пример 216а Бис(2-цианоэтил)-2-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено-[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)бензилфосфат 216а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 105 (850 мг, 1.61 ммоль), 1H-тетразол (451 мг, 6.44 ммоль) и хлористый метилен (20 мл). При комнатной температуре добавляли раствор бис(2-цианоэтил)-N,N-диизопропилфосфорамидита (1.31 г, 4.83 ммоль) в хлористом метилене (5 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов в атмосфере азота. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли по каплям 5.5 М раствор трет-бутилгидропероксида в декане (2,00 мл, 11.0 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 часов в атмосфере азота. По прошествии указанного времени смесь концентрировали при пониженном давлении до объема 5 мл и полученную суспензию загружали в колонку с силикагелем и элюировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол с получением 216а с выходом 39% (450 мг) в виде белого полутвердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.77 (d, J=0.5 Гц, 1Н), 8.73 (d, J=2.0 Гц, 1Н), 8.36 (d, J=5.5 Гц, 1Н), 8.17 (s, 1H), 7.55 (t, J=7.5 Гц, 1Н), 7.38-7.35 (m, 2H), 7.09 (d, J=2.0 Гц, 1Н), 6.76 (dd, J=6.0, 1.5 Гц, 1Н), 5.21-5.14 (m, 2H), 4.15-4.04 (m, 5H), 3.86-3.83 (m, 1Н), 3.72 (s, 3H), 3.21-3.18 (m, 1Н), 2.90-2.82 (m, 1Н), 2.79 (d, J=3.5 Гц, 2H), 2.63-2.48 (m, 6H), 1.28 (s, 3H), 1.27 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 714.2 (M+H).
Пример 216b двунатриевый 2-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидро-пиридин-3-ил)-6-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)бензилфосфат 216b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 216а (450 мг, 0.631 ммоль) и ацетонитрил (8 мл), и смесь охлаждали до 0°С. Добавляли триэтиламин (4 мл), с последующим добавлением бистриметилсилил трифторацетамида (4 мл) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 часов. По прошествии указанного времени смесь концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 40:20:40 хлороформ/ метанол/аммиак) с получением 216b с выходом 52% (210 мг) в виде аморфного желтого твердого вещества: тк 260-262°С d; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.12 (s, 1Н), 8.66 (a, 1H), 8.62 (d, J=2.0 Гц, 1H), 8.27 (d, J=4.0 Гц, 1Н), 7.54 (s, 1H), 7.43 (t, J=7.5 Гц, 1H), 7.32-7.27 (m, 3H), 7.15 (br s, 2H), 4.69 (d, J=9.0 Гц, 1H), 4.46 (d, J=7.0 Гц, 1H), 3.87-3.83 (m, 3H), 3.57 (s, 3H), 3.36-3.17 (br s, 8H), 2.77-2.63 (m, 3H), 1.23 (s, 3H), 1.21 (a, 3H); MS (ESI+) m/z 608.2 (M+H для C29H30N5O6PS).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 200 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 216b (210 мг, 0.327 ммоль), метанол (10 мл) и воду (5 мл). При комнатной температуре добавляли 0.1 М раствор гидроксида натрия в воде (6.50 мл, 0.65 ммоль) и смесь перемешивали в течение 30 минут. По прошествии указанного времени смесь концентрировали при пониженном давлении и сушили в вакууме при 45°С в течение 14 часов с получением 216 с выходом 92% (197 мг) в виде аморфного желтого твердого вещества: тк 256-258°С dec; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6/D2O (смесью 15:1)) δ 8.65 (s, 1H), 8.63 (d, J=1.5 Гц, 1H), 8.28 (d, J=6.0 Гц, 1H), 8.09 (d, J=1.5 Гц, 1H), 7.47 (t, J=7.5 Гц, 1H), 7.38 (d, J=7.5 Гц, 1Н), 7.24 (d, J=7.5 Гц, 1Н), 7.16 (d, J=6.0 Гц, 1H), 4.72 (d, J=9.5 Гц, 1H), 4.45 (d, J=8.0 Гц, 1H), 4.23-4.21 (m, 1H), 3.83-3.78 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.48-3.41 (m, 1H), 2.78-2.73 (m, 3H), 2.59-2.49 (m, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.22 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 608.2 (M+H для C29H30N5O6PS).
Пример 217 5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-3-(5-(4-(2-фторэтил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1H)-он 217
Пример 217а 1-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин 217а
В трехогорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 2-нитро-5-бромпиридин (5.00 г, 24.6 ммоль), пиперазин (5.66 г, 65.7 ммоль) и ацетонитрил (70 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 20 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом (200 мл) и промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (100 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок титровали смесью гексан/этилацетат (1:1, 30 мл) с получением 217а с выходом 41% (2.10 г) в виде желтого твердого вещества: тк 113-115°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.23 (d, 1Н, J=3.5 Гц), 8.13 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.44 (dd, 1H, J=9.0, 3.5 Гц), 3.41 (t, 4H, J=5.0 Гц), 2.82 (t, 4H, J=5.0 Гц), 1.90 (s, 1H); MS (ESI+) m/z 209.1 (M+H).
Пример 217b 1-(2-фторэтил)-4-(6-нитропиридин-3-ил)пиперазин 217b
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, обратным холодильником, и подводом азота, помещали 217а (598 мг, 2.87 ммоль), 1-бром-2-фторэтан (1.09 г, 8.61 ммоль), карбонат калия (1.19 г, 8.61 ммоль), ТГФ (10 мл) и ДМФА (10 мл). Реакционную смесь нагревали при 85°С в течение 14 часов в атмосфере азота. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (75 мл), и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (50 мл), и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 95:5 хлористый метилен/метанол) с получением 217b с выходом 63% (460 мг) в виде желтого полутвердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.16 (d, J=9.0 Гц, 1H), 8.14 (d, J=3.0 Гц, 1H), 7.21 (dd, J=9.0, 2.0 Гц, 1H), 4.67 (t, J=5.0 Гц, 1H), 4.57 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 3.49 (t, J=5.0 Гц, 4Н), 2.81 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 2.75 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 2.73 (t, J=5.5 Гц, 4H); MS (ESI+) m/z 255.1 (M+H).
Пример 217c 5-(4-(2-фторэтил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-амин 217с
Бутыль реактора Парра емкостью 25 мл продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 75 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 217b (455 мг, 1.79 ммоль) в этаноле (20 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 3 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (3.50 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×50 мл), и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением количественного выхода 217с (425 мг) в виде желтого полутвердого вещества: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.75 (d, J=3.0 Гц, 1Н), 7.20 (dd, J=9.0, 3.0 Гц, 1Н), 6.51 (d, J=8.5 Гц, 1Н), 4.66 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 4.56 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 4.35-4.15 (br s, 2H), 3.08 (t, J=5.0 Гц, 4Н), 2.79 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 2.74 (t, J=4.5 Гц, 1Н), 2.71 (t, J=5.0 Гц, 4Н); MS (ESI+) m/z 225.1 (M+H).
Пример 217d 5-бром-3-(5-(4-(2-фторэтил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1H)-он 217d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 217с (402 мг, 1.79 ммоль), 3,5-дибром-1-метил-пиридин-2(1Н)-он (478 мг, 1.79 ммоль), карбонат цезия (1.75 г, 5.37 ммоль) и 1,4-диоксан (15 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (93 мг, 0.161 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дилалладий(0) (82 мг, 0.090 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 95:5 хлористый метилен/метанол) с получением 217d с выходом 62% (459 мг) в виде аморфного желтого твердого вещества: тк 141-143°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.57 (d, J=2.0 Гц, 1Н), 7.99 (d, J=3.0 Гц, 1Н), 7.74 (s, 1Н), 7.24 (d, J=3.0 Гц, 1Н), 6.93 (d, J=2.0 Гц, 1H), 6.76 (d, J=9.0 Гц, 1Н), 4.67 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 4.57 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 3.59 (s, 3H), 3.16 (t, J=5.0 Гц, 4Н), 2.80 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 2.75 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 2.73 (t, J=5.5 Гц, 4Н); MS (ESI+) m/z 410.1 (М+Н).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 217d (177 мг, 0.431 ммоль), 182с (315 мг, 0.539 ммоль), карбонат натрия (100 мг, 0.862 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий(0) (100 мг, 0.086 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 1 часа. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (75 мл), и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок растворяли в смеси ТГФ. Добавляли 1.0 М раствор фторида тетрабутиламмония в ТГФ (1.10 мл, 1.10 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (75 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 95:5 хлористый метилен/метанол) с получением 217 с выходом 25% (73 мг) в виде аморфного желтого твердого вещества: тк 158-160°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.55 (d, J=2.0 Гц, 1Н), 8.35 (s, 1Н), 7.86 (d, J=3.0 Гц, 1Н), 7.37-7.31 (m, 3H), 7.22 (d, J=9.0 Гц, 1Н), 7.17 (dd, J=9.5,3.0 Гц, 1Н), 4.85 (t, J=4.0 Гц, 1Н), 4.61 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 4.51 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 4.35-4.30 (m, 2H), 4.08-4.02 (m, 1Н), 3.87-3.82 (m, 1Н), 3.58 (s, 3H), 3.05-2.99 (m, 5H), 2.91-2.87 (m, 1Н), 2.75 (s, 2H), 2.68 (t, J=5.0 Гц, 1Н), 2.62 (t, J=4.5 Гц, 1Н), 2.57-2.53 (m, 4H), 2.52 (d, J=4.5 Гц, 2Н), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 675.3 (М+Н).
Пример 218 5-(3-{5-[(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6- нафтиридин-2-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-8-тиа-5-азатрицикпо[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 218
Пример 218а (2-{5-[(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил)метилацетат 218а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали (2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ид)фенил)-метилацетат (212b) (893 мг, 1.8 ммоль), 5-бром-3-(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он (500 мг, 1.4 ммоль), CH3COONa (226 мг, 2.75 ммоль), K3PO4 (733 мг, 2.75 ммоль), PdCl2(dppf) (112 мг, 0.14 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл) и H2O (1 мл). Смесь перемешивали при 110°С в течение 2 часов. После реакции растворитель выпаривали и остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 218а в виде коричневого твердого вещества (400 мг, 44%). MS: (M+H)+ 656.
К раствору 218а (350 мг, 0.53 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.28 г, 53 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. После реакции смесь выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 218 в виде желтого твердого вещества (124 мг, 38%). MS: (M+H)+ 614. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.06-1.09 (t, J=7.5 Гц, 3Н), 1.80 (s, 4Н), 2.55-2.58 (m, 2Н), 2.67-2.68 (d, 2Н), 2.74-2.79 (d, 4Н), 2.85-2.98 (m, 2Н), 3.43 (s, 2Н), 3.60 (s, 3Н), 3.87-3.89 (m, 1Н), 4.05-4.07 (m, 1Н), 4.37-4.38 (d, 2Н), 4.87-4.89 (t, J=4.5 Гц, 1Н), 7.07-7.09 (d, 1Н), 7.19-7.21 (m, 1Н), 7.29-7.34 (m, 2Н), 7.45-7.46 (d, 1Н), 8.46 (s, 1Н), 8.79-8.80 (d, 1Н).
Пример 219 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 219
Пример 219а 5-бром-1-метил-3-(6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 219а
Смесь гидрохлорида 5-бром-1-метил-3-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 205а (800 мг, 2.16 ммоль), оксетан-3-она (778 мг, 10.8 ммоль), NaBH3CN (681 мг, 10.8 ммоль) и хлорида цинка (1.47 г, 10.8 ммоль) в метаноле (30 мл) перемешивали в течение 4 часов при 50°C. Смесь добавляли к Н2О (30 мл) и экстрагировали ДХМ (50 мл×3). Органические слои концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 10:1 этил ацетат/метанол, с получением 219а в виде желтого твердого вещества (750 мг, 89%). MS:[М+Н]+ 391.
Пример 219b [4-фтор-2-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 219b
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали (2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 212b (512 мг, 1.0 ммоль), 219а (400 мг, 1.0 ммоль), CH3COONa (168 мг, 2.0 ммоль), K3PO4 (546 мг, 2.0 ммоль) и PdCl2(dpp0 (84 мг, 0.1 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл), и H2O (1 мл). Смесь перемешивали в при 110°С в течение 2 часов. После реакции смесь выпаривали, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 10:1 хлористый метилен/метанол, с получением 219b в виде коричневого твердого вещества (450 мг, 64%). MS: (М+Н)+ 684.
К раствору 219b (400 мг, 0.58 ммоль) в пропан-2-оле (12 мл), тетрагидрофурана (12 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.4 г, 58 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. После реакции смесь выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 219 в виде желтого твердого вещества (213 мг, 57%). MS: (М+Н)+ 642. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.80 (s, 4H), 2.55-2.58 (m, 3H), 2.77-2.79 (d, 4H), 2.85-2.89 (m, 1H), 2.96-2.98 (m, 1H), 3.36 (s, 2H), 3.60-3.61 (d, 4H), 3.87-3.89 (m, 1H), 4.05-4.07 (m, 1H), 4.37-4.38 (d, 2H), 4.50-4.52 (t, J=5 Гц, 2H), 4.59-4.62 (t, J=6.5 Гц, 2H), 4.87-4.90 (t, J=4 Гц, 2H), 7.08-7.10 (d, 1H), 7.19-7.21 (m, 1H), 7.29-7.34 (m, 2H), 7.45-7.46 (d, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.79-8.80 (d, 1H).
Пример 220 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5- ({5-[4-(пропан-2-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 220
Пример 220а 5-бром-3-(5-(4-изопропилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 220а
Смесь 5-бром-1-метил-3-(5-(пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 188d (1.2 г, 3.3 ммоль) и ацетона (1.0 г, 16.5 ммоль) в метаноле/уксусной кислоте (30 мл/3 мл) перемешивали в течение 5 минут при комнатной температуре с последующим добавлением NaBH(OAc)3 (3.5 г, 16.5 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 2 часов. Ее охлаждали до комнатной температуры и добавляли H2O (50 мл). Смесь три раза экстрагировали ДХМ (50 мл). Органические слои концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 25:1 ДХМ/метанол, с получением 220а (2.97 г, 81%). MS: [M+H]+ 406. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.58 (d, J=3.0, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.92 (d, J=3.0, 1H), 7.44 (d, J=2.5, 1H), 7.37 (d, J=2.5, 1H), 7.25 (d, J=8, 1H), 3.51 (s, 3H), 3.06 (t, J=4.5, 4H), 2.69 (s, 1H), 2.57-2.50 (m, 4H), 1.00 (d, J=7, 6H).
Пример 220b {4-фтор-2-[1-метил-6-оксо-5-({5-[4-(пропан-2-ил)пилеразин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил}метилацетат 220b
Согласно процедурам, описанным для 148b и, начиная с 400 мг (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 212b и 340 мг 5-бром-3-(5-(4-изопропилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 220а, получали соединение 220b в виде желтого твердого вещества (446 мг, 82%). MS: [М+Н]+ 699.
Согласно процедурам, описанным для 148 и, начиная с 200 мг 220b, получали соединение 220 в виде белого твердого вещества (70 мг, 37%). MS: [M+H]+ 657. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.56 (d, J=2.5, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.85 (d, J=2.5,1H), 7.34 (m, 3H), 7.23 (m, 2H), 4.68 (s, 1H), 4.32 (s, 2Н), 4.06 (s, 1H), 3.85 (s, 1Н), 3.58 (s, 3H), 3.02 (s, 4H), 2.78 (m, 4H), 2.55 (m, 7H), 1.80 (d, J=3.5, 4H), 1.00 (d, J=7, 6H).
Пример 221 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1 (9),2(7)-диен-6-он 221
Пример 221a 5-бром-1-метил-3-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1Н)-он 221а
К раствору трет-бутил-6-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилата 120а (3.6 г, 8.3 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли по каплям насыщенный раствор хлороводорода в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 минут и концентрировали при пониженном давлении с получением 221а, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ/МС: m/z 336 (М+Н)+.
Пример 221b 5-бром-1-метил-3-(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин- 2(1Н)-он 221b
Смесь 221а (2.75 г, 7.5 ммоль), формальдегида (37% в H2O, 30 мл, 375 ммоль), NaBH(OAc)3 (4.75 г, 22.5 ммоль) и АсОН (25 мл, 150 ммоль) в метаноле (125 мл) перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре. Затем смесь доводили до основного состояния насыщенным раствором NaOH и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над Na2SO4 и выпаривали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 4:1 этилацетат/метанол, с получением 221b. (0.9 г, 34.4%) ЖХ/МС: m/z 350 (М+Н)+.
Пример 221с (4-фтор-2-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-6- {6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5- ил}фенил)метилацетат 221с
В виалу для микроволнового реактора емкостью 15 мл с магнитной мешалкой помещали 5-бром-1-метил-3-(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1Н)-он (0.42 г, 1.2 ммоль), 212b (0.6 г, 1.2 ммоль), фосфат калия (0.64 г, 2.4 ммоль), ацетат натрия (0.2 г, 2.4 ммоль), ацетонитрил (10 мл), воду (1 мл) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(II) дихлорид дихлорметан (0.1 г, 0.12 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов в атмосфере аргона. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 40:1 DMC/метанол, с получением 221с (0.667 г, 86.6%). ЖХ/МС: m/z 642 (М+Н)+.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл магнитной мешалкой, помещали 221с (0.647 г, 1.0 ммоль), LiOH (2.1 г, 50 ммоль), ТГФ (10 мл), изопропанол (10 мл) и воду (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 221. ЖХ/МС: m/z 600 (М+Н)+. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.13 (s, 1Н), 7.80 (s, 1H), 7.62 (d, J=8.5,1H), 7.51 (s, 1H), 7.39 (d, J=10, 1H), 7.30 (d, J=6.5, 1H), 6.97 (d, J=8.5, 1H), 4.86 (m, 1H), 44.51 (m, 3H), 4.41 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.55 (m, 6H), 2.77 (m, 3H), 2.55 (m, 3H), 2.31 (m, 3H), 1.80 (m, 4H).
Пример 222 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 222
Пример 222а 5-бром-1-метил-3-(2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1Н)-он 222а
Смесь 5-бром-1-метил-3-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1Н)-она 221а (2.75 г, 7.5 ммоль), оксетан-3-она (2.5 г, 37.5 ммоль), NaBH3CN (4.75 г, 22.5 ммоль) и хлорида цинка (5 г, 37.5 ммоль) в метаноле (125 мл) перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 ДХМ/метанол, с получением 222а (0.76 г, 25.9%). ЖХ/МС: m/z 392 (М+Н)+.
Пример 222b [4-фтор-2-(4-метил-6-{[2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6- {6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5- ил}фенил]метилацетат 222b
В круглодонную колбу емкостью 250 мл с магнитной мешалкой помещали 222а (0.31 г, 0.8 ммоль), (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-метилацетат 212b (0.4 г, 0.8 ммоль), фосфат калия (0.43 г, 1.6 ммоль), ацетат натрия (0.13 г, 1.6 ммоль), ацетонитрил (30 мл), воду (2 мл) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(II)дихлорид дихлорметан (0.07 г, 0.08 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере аргона. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 40:1 хлористый метилен/метанол, с получением 222b (0.491 г, 89.3%). ЖХ/МС: m/z 684 (М+Н)+.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл магнитной мешалкой помещали 222b (0.471 г, 0.69 ммоль), LiOH (1.45 г, 34.5 ммоль), ТГФ(10 мл), изопропанол (10 мл) и воду (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 222 в виде белого твердого вещества (20 мг, 11%). ЖХ/МС: m/z 642 (М+Н)+. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.14 (s, 1Н), 7.82 (s, 1H), 7.63 (d, J=8.5, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.39 (d, J=10, 1H), 7.30 (d, J=6.5, 1H), 6.97 (d, J=8.5, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.84 (m, 2H), 4.51 (m, 3H), 4.41 (m, 1H), 4.05 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.55 (m, 5H), 2.88 (m, 1H), 2.77 (m, 1H), 2.53 (m, 4H), 1.80 (m, 4H), 1.23 (m, 2H).
Пример 223 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 223
Пример 223а (4-фтор-2-{1-метил-5-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5- ил}фенил)метилацетат 223а
Согласно процедурам, описанным для 136е и, начиная с 5-бром-1-метил-3-(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 205b и (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 212b, получали соединение 223а с выходом 50%.
Согласно процедурам, описанным для соединения 136f и, начиная с 223а, получали соединение 223 с выходом 33%. ЖХМС: (М+Н)+ 600. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 8.87 (d, J=2, 1H), 7.40 (d, J=2.5, 1H), 7.35 (d, J=8, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.88 (d, J=8, 1H), 4.56 (m, 2H), 4.16 (m, 1H), 4.01 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.57 (s, 2H), 3.05 (m, 1H), 2.95 (m, 3H), 2.84 (m, 4H), 2.59 (m, 2H), 2.49 (s, 3H), 1.90 (m, 4H).
Пример 224 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(5-{[метил(пропан-2-ил)амино]метил}пиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикпо[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 224
Пример 224а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-{1-метил-5-[(5-{[метил(пропан-2-ил)амино]метил}пиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 224а
Согласно примеру 186f, 186е (365 мг, 0.64 ммоль) и 189 (230 мг, 0.51 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 224а (80 мг, 20% выход).
Согласно примеру 186, 224а (80 мг, 0.12 ммоль), 1N LiOH (0.61 мл), ТГФ (2 мл) и изопропанол (2 мл) подвергали взаимодействию и измельчали с EtOAc с получением 224 (57 мг, 76% выход). MS (ESI+) m/z 613.6 (M+Н).
Пример 225 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-1H-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2H)-он 225
Применяя ту же общую процедуру, как описано для 118, в результате реакции 112а (200 мг, 0.706 ммоль) и 118f (330 мг, 0.710 ммоль) получали 17% выход (60 мг) 225 в виде желто-зеленого твердого вещества: тк 199-200°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 11.69 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.41 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.25 (d, 3H, J=8.5 Гц), 6.00 (s, 1H), 5.86 (s, 1H), 4.69 (br s, 1H), 4.31 (m, 2Н), 3.97 (m, 1Н), 3.91 (m, 1Н), 3.79 (m, 2Н), 3.56 (s, 3H), 3.01 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 2.70 (m, 2Н), 2.15 (s, 3H), 1.90 (m, 2Н), 1.74 (m, 2Н); MS (ESI+) m/z 499.2 (М+Н).
Пример 226 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(5,6,7,8-тетрагидро-2,6-нафтиридин-3-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2H)-он 226
Пример 226а трет-бутил-7-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-3,4-дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-карбоксилат 226а
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, подводом азота и обратным холодильником, помещали 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (536 мг, 2.01 ммоль), 7 трет-бутил-7-амино-3,4-дигидро-2,6-нафтиридин-2(1H)-карбоксилат (500 мг, 2.01 ммоль), карбонат цезия (1.44 г, 4.40 ммоль) и 1,4-диоксан (30 мл). После барботирования полученной смеси азотом в течение 20 минут добавляли Ксантфос (98.4 мг, 0.170 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дилалладий(0) (91.6 мг, 0.100 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 6 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 96% выхода (840 мг) 226а в виде желтого твердого вещества: тк 126-128°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.60 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.10 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 6.95 (d, 1H, J=2.5 Гц), 6.55 (s, 1H), 4.53 (s, 2Н), 3.64 (t, 2Н, J=5.0 Гц), 3.59 (s, 3H), 2.77 (t, 2Н, J=5.0 Гц), 1.49 (s, 9Н); MS (ESI+) m/z 435.0 (М+Н).
Пример 226b 5-бром-1-метил-3-(5,6,7,8-тетрагидро-2,6-нафтиридин-3-иламино)пиридин-2(1H)-он 226b
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 226а (840 мг, 1.94 ммоль) и хлористый метилен (12 мл). Добавляли трифторуксусную кислоту (6 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь выпаривали при пониженном давлении. Остатое 226b непосредственно использовали на следующей стадии.
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1/2 количества неочищенного 226b, полученного выше (0.898 ммоль, предположительно), 118f (416 мг, 0.898 ммоль), карбонатом натрия (381 мг, 3.59 ммоль), воду (4 мл) и 1,4-диоксан (20 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 20 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (104 мг, 0.090 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 4 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и фильтрационный остаток промывали смесью 1:10 метанола и хлористого метилена (30 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого остатка. В другую одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали остаток, полученный выше, ТГФ (10 мл), этанол (10 мл), воду (10 мл) и гидроксид лития (86.0 мг, 3.59 ммоль). Смесь перемешивали при 50°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 7.7% (38 мг) выхода 226 в виде беловатого твердого вещества: тк 197-199°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.53 (d, 1Н, J=2.0 Гц), 8.23 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.43 (t, 1H, J=7.5 Гц), 7.35 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.28 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 6.93 (s, 1H), 6.00 (s, 1H), 4.72 (t, 1H, J=5.0 Гц), 4.32 (d, 2H, J=5.0 Гц), 3.96 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.82 (m, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.00 (m, 1H), 2.94 (m, 1H), 2.90 (t, 2H, J=5.0 Гц), 2.70 (m, 2H), 2.56 (m, 2H), 1.92 (m, 2H), 1.76 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 551.2 (M+H).
Пример 227 2-(3-(5-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2H)-он 227
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 155n (312 мг, 0.931 ммоль), 118f (472 мг, 1.12 ммоль), карбонат натрия (296 мг, 2.79 ммоль), ДМФА (2 мл), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (215 мг, 0.186 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок растворяли в смеси ТГФ (5 мл), воды (5 мл) и метанола (5 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (195 мг, 4.66 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×75 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 90:10 хлористый метилен/метанол) с получением 227 с выходом 7% (36 мг) в виде аморфного беловатого твердого вещества: тк 227-229°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.66 (d, J=1.5 Гц, 1Н), 8.53 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.68 (d, J=7.0 Гц, 1H), 7.44 (t, J=8.0 Гц, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.29 (m, 3H), 6.01 (s, 1H), 4.72 (t, J=4.5 Гц, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.99-3.88 (m, 3H), 3.84-3.75 (m, 2Н), 3.59 (m, 3H), 3.51 (m, 5H), 3.02-2.91 (m, 2H), 2.72 (t, J=5.5 Гц, 2H), 1.92 (t, J=5.0 Гц, 2H), 1.77-1.73 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 551.2 (M+H).
Пример 228 2-(2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-7-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2H)-он 228
Применяя те же общие процедуры, как описано для получения 226, в результате реакции 153а (400 мг, 1.19 ммоль) и 118f (718 мг, 1.55 ммоль), с последующим гидролизом получали выход 12% (88 мг) 228 в виде белого твердого вещества: тк 218-220°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.03 (s, 1Н), 7.73 (s, 1H), 7.63 (dd, 1H, J=7.5, 2.0 Гц), 7.52 (dd, 1H, J=7.5, 2.0 Гц), 7.43 (t, 2H, J=8.0 Гц), 7.25 (dd, 1H, J=7.5, 1.0 Гц), 6.90 (d, 1H, J=8.0 Гц), 6.00 (s, 1H), 4.71 (dd, 1H, J=7.0, 3.5 Гц), 4.46 (m, 2H), 3.94 (m, 2H), 3.82 (m, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.00 (m, 1H), 2.93 (m, 1H), 2.90 (t, 2H, J=5.0 Гц), 2.70 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.62 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.45 (m, 1Н), 1.92 (m, 2H), 1.76 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 551.2 (М+Н).
Пример 229 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2H)-он 229
Пример 229а 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метидпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 229а
Применяя те же общие процедуры, как описано для получения 226b, в результате реакции 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.51 г, 5.65 ммоль) и 5-(1-метилпирролидин-2-ил)-2-аминопиридина (1.00 г, 5.65 ммоль) получали 81% выход (1.65 г) 229а в виде желтого твердого вещества: тк 143-145°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 8.73 (a, 1H), 8.68 (d, 1H, J=2.4 Гц), 8.15 (d, 1H, J=2.1 Гц), 7.55 (dd, 1H, J=8.9, 2.1 Гц), 7.52 (s, 1H), 7.30 (d, 1H, J=8.9 Гц), 3.52 (s, 3H), 3.13 (t, 1H, J=7.5 Гц), 2.99 (t, 1H, J=7.5 Гц), 2.19 (m, 1H), 2.10 (m, 1H), 2.05 (s, 3H), 1.79 (m, 2H), 1.71 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 363.3 (М+Н).
Применяя те же общие процедуры, как описано для получения 226, в результате реакции 229а (500 мг, 1.38 ммоль) и 118f (705 мг, 1.52 ммоль), с последующим гидролизом, получали 27% выход (215 мг) 229 в виде белого твердого вещества: тк 146-148°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.67 (dd, 1H, J=2.0 Гц), 8.52 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.53 (dd, 1H, J=8.5, 2.5 Гц), 7.44 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.39 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.29-7.24 (m, 3H), 6.00 (s, 1H), 4.72 (t, 1H, J=5.0 Гц), 4.32 (d, 2H, J=5.0 Гц), 3.99 (m, 1H), 3.90 (m, 1H), 3.81 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.1 1 (t, 1H, J=8.0 Гц), 3.00 (m, 1H), 2.93 (m, 2H), 2.71 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.17 (q, 1H, J=9.0 Гц), 2.06 (m, 1H), 2.03 (s, 3H), 1.92 (t, 2H, J=6.0 Гц), 1.83-1.72 (m, 4H), 1.59 (m, 1H); MS (ESI+) m/z 579.2 (M+H).
Пример 230 10-[3-(5-{[5-(Азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 230
Пример 230а 2-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-4-фтор-6-(9-оксо-4,4-диметил-1,10диазатрицикло[6.4.0.02,6]-додека-2(6),7-диен-10-ил)бензилацетат 230а
Согласно примеру 211d, 2-бром-4-фтор-6-(9-оксо-4,4-диметил-1,10диазатрицикло[6.4.0.02,7]-додека-2(6),7-диен-10-ил)бензилацетат 189а (450 мг, 1.0 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (635 мг, 2.5 ммоль), ацетат калия (393 мг, 4.0 ммоль), комплекс бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладия(II) с CH2Cl2 (Pd Cl2dppf:CH2Cl2 (1:1), 66 мг, 0.08 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл) нагревали при 100°С в течение 5 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этилацетатом (2×25 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением соединения 230а (количественного выхода) в виде черного масла, которое использовали непосредственно на следующей стадии. MS (ESI+) m/z 497.3 (M+H).
Пример 230b 10-[3-(5-{[5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(ацетоксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 230b
Пример 230b синтезировали с применением той же процедуры, как в 121b, за исключением применения соединения 230а (223 мг, 0.45 ммоль), 3-(5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (200с) (160 мг, 0.45 ммоль), 1М раствора карбоната натрия (1.5 мл, 1.5 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (26 мг, 0.022 ммоль) и 1,2-диметоксиэтана (4.5 мл). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 9:1 хлористый метилен/метанол) получали 43% выход (120 мг) соединения 230b в виде коричневого масла: MS (ESI+) m/z 643.1 (М+Н).
Согласно той же процедуре, как в 121, за исключением применения смеси ТГФ (1 мл), воду (0.5 мл) и изопропанол (1 мл), соединение 230b (120 мг, 0.2 ммоль) и моногидрат гидроксида лития (50 мг, 1.2 ммоль) подвергали взаимодействию. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 30% выход (36 мг) соединения 230 в виде светло-зеленого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 600.6 (М+Н).
Пример 231 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(2-метилизоиндолин-5-иламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 231
Пример 231 в 5-Нитроизоиндолин 231а
К суспензии изоиндолина (2 г, 16.8 ммоль) в 98% H2SO4 (10 мл) при 0°С добавляли по каплям смесь концентрированной азотной кислоты (2 мл) и 98% серной кислоты (2 мл). Смесь перемешивали при 0°С в течение 45 минут. Затем полученный желтый раствор выливали в ледяную воду. Белый твердый осадок собирали с помощью фильтрации. Твердое вещество промывали водой (20 мл × 2) и сушили в вакууме с получением 231а в виде белого твердого вещества (700 мг, 51%). MS: [M+H]+ 165.
Пример 231b трет-бутил-5-нитроизоиндолин-2-карбоксилат 231b
Смесь 5-нитроизоиндолина (600 мг, 3.66 ммоль) и (Вос)2O (1.6 г, 7.31 ммоль) в ТГФ (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем полученный красный раствор концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 5:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 231b в виде желтого твердого вещества (750 мг, 80%). MS: [М+Н]+ 209.
Пример 231с трет-бутил-5-аминоизоиндолин-2-карбоксилат 231с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали трет-бутил-5-нитроизоиндолин-2-карбоксилат (650 мг, 2.5 ммоль) и С2Н5ОН (50 мл). Указанный расвор гидрировали с Pd/C (160 мг) при комнатной температуре в течение 15 часов. Затем его фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 231с в виде желтого масла (585 мг, 99%), которое применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: [М+Н]+ 179.
Пример 231d трет-бутил-5-(б-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)изоиндолин-2-карбоксилат 231d
Согласно процедурам, описанным для 129а, и, начиная с 600 мг 7 трет-бутил-5-аминоизоиндолин-2-карбоксилата (231с) и 685 мг 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она, получали 231d в виде желтого твердого вещества (732 мг, 68%). MS: [M+H]+ 421.
Пример 231e 5-бром-3-(изоиндолин-5-иламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он 231е
Согласно процедурам, описанным для 129b, и, начиная с 460 мг мрем-бутил-5-(б-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)изоиндолин-2-карбоксилата, получали 231е в виде желтого твердого вещества (352 мг, 99%). MS: [М+Н]+ 321.
Пример 231f 5-бром-1-метил-3-(2-метилизоиндолин-5-иламино)пиразин-2(1Н)-он 231f
Согласно процедурам, описанным для 220а, и, начиная с 336 мг 5-бром-3-(изоиндолин-5-иламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-она, получали соединение 231f в виде желтого твердого вещества (237 мг, 75%). MS: [М+Н]+ 337. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.31 (s, 1Н), 7.67 (s, 1H), 7.52 (t, J=7.0, 1H), 7.18 (d, J=8.0, 1H), 6.74 (s, 1H), 3.94 (s, 2H), 3.89 (s, 2H), 3.52 (s, 3H), 2.60 (s, 3H).
Пример 231g 4-фтор-2-(4-метил-6-(2-метилизоиндолин-5-иламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 231g
Согласно процедурам, описанным для соединение 148h, и, начиная с 400 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d и 278 мг 5-бром-1-метил-3-(2-метилизоиндолин-5-иламино)пиразин-2(1Н)-она 231f, получали соединение 231g в виде желтого твердого вещества (258 мг, 51%). MS: [M+H]+ 611.
Согласно примеру 148, 231g превращали в 231 в виде белого твердого вещества (116 мг, 50%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.23 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.73 (d, J=8, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.37 (dd, J=10.0, 1H), 7.31 (dd, J=10.0, 1H), 7.13 (d, J=8.0, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.50 (d, J=8.0, 1H), 4.50 (d, J=11.5, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.13 (m, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.78 (m, 4H), 3.52 (s, 3H), 2.59 (m, 2H), 2.48 (m, 5H), 1.79 (s, 2H), 1.70 (s, 2H).
Пример 232 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 232
Пример 232а (4-фтор-2-{4-метил-6-[(2-метил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5- ил}фенил)метилацетат 232а
Согласно процедурам, описанным для 148h, и, начиная с 499 мг (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 212b и 335 мг 5-бром-1-метил-3-(2-метилизоиндолин-5-иламино)пиразин-2(1Н)-она, получали соединение 232а в виде желтого твердого вещества (320 мг, 51%).MS: [М+Н]+ 628.
Согласно процедурам, описанным для 148, и, начиная с 300 мг 232а, получали соединение 232 в виде белого твердого вещества (117 мг, 42%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.23 (9, 1Н), 7.90 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.51 (d, J=8.0, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.05 (s, 1H), 3.87 (s, 1H), 3.78 (d, J=6.5, 4H), 3.56 (s, 3H), 3.33 (s, 3H), 2.97 (s, 1H), 2.87 (s, 1H), 2.79 (s, 2Н), 2.50 (m, 3H), 1.80 (s, 4H).
Пример 233 5-[3-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 233
Пример 233а [2-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 233а
Согласно процедурам, описанным для 136е, и, начиная с 5-бром-3-(5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (250а) и (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 212b, соединение 233а получали in 67% выхода. ЖХМС: (М+Н)+ 597.
Согласно процедурам, описанным для 136, и, начиная с 233а, получали соединение 233 с выходом 58%. ЖХМС: (М+Н)+ 614. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.66 (d, J=2, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.11 (d, J=2, 1H), 7.65 (dd, J=9, 1H), 7.41 (d, J=2, 1H), 7.33 (dd, J=9.5, 1H), 7.28 (d, J=8, 1H), 7.18 (dd, J=9, 1H), 4.86 (t, J=4, 1H), 4.32 (d, J=4.5, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.49 (m, 3H), 2.97 (m, 3H), 2.86 (m, 1H), 2.78 (m, 2H), 2.56 (m, 1H), 2.40 (m, 2H), 1.79 (m, 4H), 0.87 (t, J=7, 3H).
Пример 234 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 234
Пример 234а {4-фтор-2-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{1-оксо-1Н,2Н,3H,4Н,-6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил}метилацетат 234а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат (210d) (500 мг, 1.0 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он (146а) (350 мг, 1.0 ммоль), CH3COONa (170 мг, 2.0 ммоль), K3PO4 (552 мг, 2.0 ммоль), PdCl2(dppf) (85 мг, 0.1 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл, и Н2О (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 234а в виде коричневого твердого вещества (400 мг, 63%). MS: (М+Н)+ 614.
К раствору 234а (400 мг, 0.65 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.57 г, 65 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 234 в виде желтого твердого вещества (119 мг, 32%). MS: (M+H)+ 572. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 1.78-1.80 (t, 2H), 1.89-1.90 (d, 2H), 2.49 (s, 3H), 2.54-2.56 (t, J=6 Гц, 2H), 2.64-2.66 (m, 2H), 2.94-2.96 (t, 2H), 3.64 (s, 2H), 3.67 (s, 3H), 4.04-4.06 (m, 3H), 4.20 (s, 3H), 4.46-4.51 (m, 2H), 5.89 (s, 1H), 6.72 (s, 1H), 7.20-7.22 (d, 2H), 7.26-7.27 (d, 1H), 7.91 (s, 1H).
Пример 235 5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)фенил)-1-метил-3-(2-метилизоиндолин-5-иламино)пиразин-2(1H)-он 235
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 231е (150 мг, 0.447 ммоль), 131а (340 мг, 0.581 ммоль), карбонат натрия (142 мг, 1.34 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис-(трифенилфосфин)палладий(0) (52 мг, 0.045 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли хлористым метиленом (100 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого остатка. Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее неочищенный остаток, ТГФ (10 мл) и 1 М раствор фторида тетрабутиламмония в ТГФ (4.50 ммоль, 4.5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли хлористым метиленом (100 мл) и промывали водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали хлористым метиленом (3×30 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 44% выхода (120 мг) 235 в виде беловатого твердого вещества: тк 218-220°С (dec); 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 9.21 (s, 1Н), 7.89 (d, 1Н, J=1.0 Гц), 7.70 (dd, 1H, J=8.1,2.0 Гц), 7.50 (s, 1Н), 7.34 (dd, 1Н, J=9.9, 3.0 Гц), 7.30 (dd, 1Н, J=9.1,2.5 Гц), 7.13 (d, 1Н, J=8.0 Гц), 4.82 (m, 1Н), 4.50 (m, 1Н), 4.04 (m, 1Н), 4.04 (m, 1Н), 3.84 (m, 1Н), 3.75 (m, 4H), 3.54 (s, 3H), 3.02 (m, 1Н), 2.89 (m, 1Н), 2.75 (s, 2H), 2.53 (d, 2H, J=6.5 Гц), 2.46 (s, 3H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 600.2 (М+Н).
Пример 236 5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-3-(5-(3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1H)-он 236
Пример 236а 5-(3-метилазетидин-1-ил)-2-нитропиридин 236а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 500 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали бензолсульфонат 3-метилазетидина (4.02 г, 17.5 ммоль), 2-нитро-5-бромпиридин (3.56 г, 17.5 ммоль), карбонат цезия (28.5 г, 87.7 ммоль) и 1,4-диоксан (50 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (862 мг, 1.50 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (800 мг, 0.900 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 80% этилацетат/гексаны) с получением 236а с выходом 69% (2,35 г) в виде аморфного желтого твердого вещества: тк 141-143°С; 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.12 (d, 1Н, J=9.0 Гц), 7.60 (d, 1H, J=2.5 Гц), 6.66 (dd, 1H, J=9.0,2.5 Гц), 4.23 (t, 2H, J=8.5 Гц), 3.68 (m, 2H), 2.99 (m, 1H), 1.36 (d, 3H, J=7.0 Гц; MS (ESI+) m/z 194.0 (М+Н).
Пример 236b 5-(3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-амин 236b
Бутыль реактора Парра емкостью 250 мл, продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 800 мг в пересчете на сухую массу) и раствор 23ба (2.58 г, 13.4 ммоль) в смеси этанола (25 мл) и этилацетата (25 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 3 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (3.50 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×50 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением количественного выхода 236b (2.21 г) в виде пурпурного масла: 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 7.19 (d, 1H, J=3.0 Гц), 6.66 (dd, 1H, J=9.0, 3.0 Гц), 6.36 (d, 1H, J=8.5 Гц), 5.13 (br s, 2H), 3.81 (t, 2H, J=7.5 Гц), 3.21 (t, 2H, J=6.5 Гц), 2.70 (m, 1H), 1.18 (d, 3H, J=7.0 Гц); MS (ESI+) m/z 164.1 (М+Н).
Пример 236c 5-бром-1-метил-3-(5-(3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 236с
Применяя ту же процедуру, как описано для получения 121а, в результате реакции 236b (1.04 г, 6.40 ммоль) и 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1.90 г, 7.12 ммоль) получали 44% выход (980 мг) 236с в виде коричневого твердого вещества: тк 135-136°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.49 (d, 1H, J=5.5 Гц), 8.42 (s, 1H), 7.50 (d, 1H, J=4.5 Гц), 7.41 (d, 1H, J=7.0 Гц), 7.20 (d, 1H, J=14.5 Гц), 6.85 (dd, 1H, J=14.5, 5.0 Гц), 3.91 (m, 2H), 3.49 (s, 3H), 3.34 (m, 2H), 2.75 (m, 1H), 1.21 (d, 3H, J=11.5 Гц; MS (ESI+) m/z 350.2 (M+H).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 236с (140 мг, 0.400 ммоль), 182с (304 мг, 0.520 ммоль), карбонат натрия (130 мг, 1.23 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (50 мг, 0.043 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл), и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок растворяли в ТГФ. Добавляли 1 М раствор фторида тетрабутиламмония в ТГФ (1.20 мл, 1.20 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (75 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл), и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 10% хлористый метилен/метанол) с получением 236 с выходом 14% (35 мг) в виде аморфного коричневого твердого вещества: тк 170-171°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.45 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.22 (s, 1H), 7.31 (m, 2H), 7.15 (m, 2H), 6.83 (dd, 1H, J=9.0,3.0 Гц), 4.83 (t, 1H, J=4.5 Гц), 4.32 (m, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.88 (m, 3H), 3.02 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.54 (m, 4H); MS (ESI+) /m/z 614.3 (М+Н).
Пример 237 6-(3-(5-(4-(оксетан-3-ил)пилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-2,3-(5,5-диметил-5,6-дигидро-4H-циклопента)-5,6-дигидротиено[2,3-с]пиридин-7(4H)-он 237
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 210с (160 мг, 0.382 ммоль), 182с (300 мг, 0.512 ммоль), карбонат натрия (162 мг, 1.53 ммоль), воду (6 мл) и 1,4-диоксан (30 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 20 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (44.0 мг, 0.038 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 4 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и фильтрационный остаток промывали смесью 1:10 метанола и хлористого метилена (30 мл). Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением коричневого остатка. В другую одногорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали остаток, полученный выше, фторид тетрабутиламмония (1.0 М в ТГФ, 1.54 мл, 1.54 ммоль) и ТГФ (10 мл), Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 24% (86 мг) выход 237 в виде желтого твердого вещества: тк 175-177°С; 1Н-ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.55 (d, 1Н, J=2.0 Гц), 8.36 (s, 1Н), 7.86 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.35 (m, 3H), 7.22 (d, 1Н, J=9.0 Гц), 7.16 (dd, 1Н, J=9.0, 3.0 Гц), 4.85 (t, 1Н, J=5.0 Гц), 4.55 (t, 2H, J=6.5 Гц), 4.45 (t, 2H, J=6.0 Гц), 4.32 (m, 2H), 4.04 (m, 1Н), 3.86 (m, 1Н), 3.58 (s, 3H), 3.44 (m, 1Н), 3.06 (t, 4H, J=4.5 Гц), 3.03 (m, 1Н), 2.89 (m, 1Н), 2.75 (s, 2H), 2.52 (m, 2H), 2.38 (t, 4H, J=4.5 Гц); MS (ESI+) m/z 685.4 (М+Н).
Пример 238 10-[3-(5-{[5-(4-этилпилеразин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ид)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикпо[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 238
Пример 238а 10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(ацетоксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 238а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 189а (381.9 мг, 0.850 ммоль), 3-(5-(4-этилпилеразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он (201а) (560 мг, 1.275 ммоль), Pd(PPh3)4 (49.1 мг, 0.043 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 Ν, 2.81 мл, 2.81 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°C в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл×3), солевым раствором (30 м×1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=5:95) получали 238а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 238а, ТГФ (5 мл), изо-PrOH (5 мл), H2O (5 мл), LiOH H2O (200 мг). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (30 мл×3). солевым раствором (30 мл×1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:хлористый метилен/10:90) получали 238 в виде розового твердого вещества, 143 mg. MS (ESI+) m/z 640.6 (Μ+Η).
Пример 239 5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-3-(5-(4-изопропилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил пиридин-2(1H)-он 239
Применяя ту же процедуру, как в описано для 236, в результате взаимодействия 220а (165 мг, 0.410 ммоль) с 182с (312 мг, 0.533 ммоль) получали 21% выход (57 мг) 239 в виде беловатого твердого вещества: тк 191-192°C; 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ8.54 (d, 1Н, J=2.0 Гц), 8.34 (s, 1Н), 7.85 (d, 1Н, J=3.0 Гц), 7.33 (m, 3Н), 7.20 (d, 1Н, J=9.0 Гц), 7.15 (dd, 1Н, J=9.0, 3.0 Гц), 4.84 (t, 1H, J=4.0 Гц), 4.32 (m, 2Н), 4.04 (m, 1Н), 3.84 (m, 1Н), 3.57 (s, 3Н), 3.02 (m, 5Н), 2.87 (m, 1Н), 2.75 (br s, 2Н), 2.63 (m, 1Н), 2.55 (m, 6Н), 1.22 (s, 6Н), 0.98 (d, 6Н, J=3.0 Гц); MS (ESI+) m/z 671.3 (М+Н).
Пример 240 5-(3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 240
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 182с (300 мг, 0.513 ммоль), 205b (138 мг, 0.394 ммоль), карбонат натрия (125 мг, 1.18 ммоль), 1,4-диоксан (8 мл) и воду (2 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия (46 мг, 0.039 ммоль). После нагревания с обратным холодильником в течение 2 часов, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористый метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в ТГФ (3 мл) и добавляли тригидрат фторида тетрабутиламмония (372 мг, 1.18 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 2 часов, реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 240 с выходом 22% (53 мг) в виде желтого твердого вещества: тк 142-143°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.77 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.43 (s, 1H), 7.44 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.31 (dd, 1H, J=9.5, 2.5 Гц), 7.27 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.19 (dd, 1H, J=9.5, 2.5 Гц), 7.06 (d, 1H, J=8.0 Гц), 4.86 (m, 1H), 4.38 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.38 (s, 2H), 3.03 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.75 (s, 4H), 2.62 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 614.3 (M+H).
Пример 241 5-(3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 241
Применяя те же общие процедуры, как описано для получения 240, в результате реакции 5-бром-3-(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она (143 мг, 0.394 ммоль) и 182с (300 мг, 0.513 ммоль) получали 28% выход (70 мг) 241 в виде желтого твердого вещества: тк 134-135°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.78 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.43 (s, 1H), 7.44 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.31 (dd, 1H, J=9.5, 2.5 Гц), 7.28 (d, 1H, J=8.0 Гц), 7.18 (dd, 1H, J=9.5,2.5 Гц), 7.06 (d, IH,.7=8.0 Гц), 4.86 (m, 1H), 4.38 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.43 (s, 2H), 3.03 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.75 (s, 4H), 2.62 (m, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.50 (m, 2H), 1.23 (s, 6H), 1.08 (t, 3H,.7=7.0 Гц); MS (ESI+) m/z 628 (M+H).
Пример 242 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3H,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил)фенил]-1-метил-3-{[5-(1-метилпилеридин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-он 242
Пример 242а 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(1-метилпилсридин-4-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 242а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпилерицин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он (130с) (240 мг, 0.636 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (336 мг, 0.763 ммоль), Pd(PPh3)4 (37 мг, 0.0318 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 2.1 мл, 2.1 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4.2 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол:хлористый метилен=5:95) получали 242а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 242а, ТГФ (5 мл), изо-PrOH (5 мл), Н2О (5 мл), LiOH H2O (300 мг). Полученную смесь перемешивали при кг в течение 1 часа. Весь растворитель удаляли в вакууме и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:хлористый метилен=10:90) получали 242 в виде коричневого твердого вещества, 56 мг. MS (ESI+) m/z 611.5 (М+Н).
Пример 243 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 243
Пример 243а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 243а
Пример 243а синтезировали с применением той же процедуры, как в 121b, за исключением применения соединения 230а (446 мг, 0.9 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она (229а) (281 мг, 0.8 ммоль), 1М раствора карбоната натрия (2.7 мл, 2.7 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)-палладия(0) (47 мг, 0.040 ммоль) и 1,2-диметоксиэтана (6.5 мл). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 9:1 хлористый метилен/метанол) получали 67% выход (350 мг) 243а в виде коричневого масла: MS (ESI+) m/z 653.1(М+Н).
Согласно примеру 121, за исключением применения смеси ТГФ (2 мл), воды (1 мл) и изопропанола (2 мл), соединения 243а (350 мг, 0.54 ммоль) и моногидрата гидроксида лития (150 мг, 3.5 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 29% выход (95 мг) соединения 243 в виде бледно-желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 611.5 (M+H).
Пример 244 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-6-({4-[1-(оксетан-3-ил)пилеридин-4-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 244
Пример 244а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-[4-метил-6-({4-[1-(оксетан-3-ил)пилеридин-4-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 244а
Согласно примеру 121b, за исключением применения соединения 230а (188 мг, 0.38 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(4-(1-(оксетан-3-ил)пилеридин-4-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-она 214b (160 мг, 0.38 ммоль), 1М раствора карбоната натрия (1.5 мл, 1.5 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (22 мг, 0.019 ммоль) и 1,2-диметоксиэтана (5 мл). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали смесь (270 мг) соединения 244а и 244 в виде желтого масла.
Со смеси из 244а (270 мг) снимали защиту с применением той же процедуры, как в 121, за исключением применения смеси ТГФ (2 мл), воды (1 мл) и изопропанола (2 мл) и моногидрата гидроксида лития (85 мг, 2 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 63% выход (167 мг) соединения 244 в виде бледно-желтого вещества: MS (ESI+) m/z 667.6 (M+H).
Пример 245 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-({5-[4-(пропан-2-ил)пилеразин-1-ил]-пиридин-2-ил}амино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 245
Пример 245а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-({5-[4-(пропан-2-ил)пиперазин-1-ил]-пиридин-2-ил)амино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 245а
В герметичную пробирку емкостью 44 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 220а (400 мг, 1.0 ммоль), 7 (508 мг, 2.0 ммоль), ацетат калия (392 мг, 4.0 ммоль) и 1,4-диоксан (10 мл). После дегазирования смеси в течение 30 минут добавляли Pd(dppf)Cl2⋅CH2Cl2 (82 мг, 0.10 ммоль). Полученную реакционную смесь перемешивали при 105°С в течение 6 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через подложку из Целита. Фильтрат концентрировали и неочищенную смесь повторно растворяли в ДМЭ (2 мл) и переносили в сосуд для микроволновой реакции емкостью 10 мл. К раствору добавляли 10-[2-(ацетоксиметил)-3-бром-5-фторфенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло-[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он (189а) (270 мг, 0.60 ммоль), Pd(PPh3)4 (50 мг, 0.050 ммоль) и 2 N Na2CO3 (2 мл). Затем реакционную смесь дегазировали в течение 5 минут и помещали в углубление микроволнового реактора После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 7 минут ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 85:15) с получением 49% (150 мг) 245а.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 245а (150 мг, 0.22 ммоль), LiOH⋅H2O (100 мг, 2.2 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 3 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 49% выхода (70 мг) 245. MS(ESI+) m/z 654.6 (М+Н).
Пример 246 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 246
Пример 246а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 246а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 5-бром-1-метил-3-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 14ба (210 мг, 0.6 ммоль), 230а (460 мг, 0.9 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (8 мл) и 1М водный карбонат натрия (2 мл). После барботирования Nz в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (36 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 135°С в течение 15 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол, с получением 37% выхода (140 мг) 246a.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 246a (140 мг, 0.2 ммоль), гидроксид лития (200 мг, 4.8 ммоль), ТГФ (3 мл), изопропанол (3 мл) и воду (2 мл). Смесь перемешивали при кг в течение 1 часа. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный, слой экстрагировали этилапетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с применением колонки Biotage KPNH 12+М, элюируя градиентом гексаны - этилацетат, с получением 86% выхода (120 мг) 246. MS (ESI+) m/z 586.6 (М+Н).
Пример 247 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2- метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 247
Пример 247а (2-бром-6-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фторфенил)метилацетат 247а
Смесь 4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она (105h) (2 г, 9.05 ммоль), 2,6-дибром-4-фторбензилацетата (197с) (8.8 г, 27.15 ммоль), Ксантфоса (524 мг, 0.9 ммоль), Pd2(dba)3 (828 мг, 0.9 ммоль) и Cs2CO3 (5.9 г, 18 ммоль) в диоксане (200 мл) нагревали при 100°С в течение 15 часов в атмосфере азота. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 1:1 этилацетат/петролейный эфир, с получением 247а в виде желтого твердого вещества (3 г, 71%). MS: (М+Н)+ 466.
Пример 247b (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10- азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 247b
К раствору 247а (3 г, 6.45 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолана) (9.8 г, 38.7 ммоль) в диоксане (160 мл) добавляли PdCl2(dppf) (525 мг, 0.65 ммоль) и СН3СООК (3.8 г, 38.7 ммоль). Смесь перемешивали при 100°С в течение 15 часов в атмосфере аргона. После реакции смесь фильтровали и выпаривали в вакууме, и остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 1:2 этилацетат/петролейный эфир, с получением 247b в виде желтого твердого вещества (2.5 г, 76%). MS: (М+Н)+ 514.
Пример 247с (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10- азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил)метилацетат 247с
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали 247b (590 мг, 1.15 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1 Н)-он 221b (400 мг, 1.15 ммоль), CH3COONa (189 мг, 2.3 ммоль), K3PO4 (611 мг, 2.3 ммоль), PdCl2(dppf) (94 мг, 0.11 ммоль), суспендированный в CHaCN (25 мл) и воду (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали, и остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 247с в виде коричневого твердого вещества (400 мг, 53%). MS: (М+Н)+ 656.
К раствору 247с (400 мг, 0.61 ммоль) в пропан-2-оле (8 мл), тетрагидрофурана (8 мл) и воды (1.5 мл) добавляли LiOH (1.46 г, 61 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 247 в виде желтого твердого вещества (124 мг, 33%). MS: (M+H)+ 614. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.29 (s, 6Н), 2.46 (s, 3Н), 2.59-2.60 (d, 2H), 2.74-2.76 (t, 2Н), 2.81 (s, 2Н), 2.93-2.98 (m, 3Н), 3.07-3.09 (m, 1Н), 3.59 (s, 2Н), 3.64 (s, 3Н), 3.95-3.97 (m, 1Н), 4.01-4.12 (m, 1Н), 4.48-4.51 (d, 1Н), 4.58-4.61 (d, 1Н), 7.03-7.05 (d, 1Н), 7.18-7.21 (m, 1Н), 7.38-7.41 (m, 2Н), 7.52-7.54 (d, 1Н), 7.64 (s, 1Н).
Пример 248 10-(3-{6-[(2-этил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 248
Пример 248а 5-бром-3-(2-этил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-1-метилпиразин-2(1Н)-он 248а
Согласно процедурам, описанным для 220а, и, начиная с 385 мг 5-бром-1-метил-3-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1Н)-она (221а), получали 248а в виде желтого твердого вещества (292 мг, 70%). MS: [M+H]+ 364.
Пример 248b 2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-{6-[(2-этил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-4-фторфенил)метилацетат 248b
Согласно процедурам, описанным для 129а, и, начиная с 400 мг (2-{4,4-диметнл-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1 (8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата (247b) и 283 мг 5 бром-3-(2-этил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ипамино)-1-метил-пиразин-2(1Н)-она, получали 248b в виде желтого твердого вещества (260 мг, 50%).
Согласно процедурам, описанным для 148, и, начиная с 230 мг 248b, получали 127 мг 248 в виде белого твердого вещества (59%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.15 (s, 1Н), 7.81 (9,1H), 7.63 (dd, J=8, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.39 (dd, J=9.5, 1H), 7.31 (d, J=9.5, 1H), 6.97 (d, J=8.0, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.50 (s, 1H), 4.45 (s, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.47 (8, 2H), 3.03 (m, 1H), 2.91 (m, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.62-2.45 (m, 6H), 1.23 (8, 6Н), 1.08 (t, J=7.5, 3H).
Пример 249 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 249
Пример 249а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4-метил-6-{[2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)метилацетат 249а
Согласно процедурам, описанным для 148b, и, начиная с 247b и 305 мг 222а, 277 мг, получали 249а в виде желтого твердого вещества (51%). MS: [М+Н]+ 698.
Согласно процедурам, описанным для соединения 148, и, начиная с 250 мг 249а, получали 117 мг 249 в виде белого твердого вещества (50%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.17 (s, 1Н), 7.85 (d, J=1.5, 1H), 7.65 (dd, J=8, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.39 (dd, J=9.5, 1H), 7.31 (d, J=9.5, 1H), 6.97 (d, J=8.0, 1H), 4.80 (s, 1H), 4.61 (m, 2H), 4.52 (m, 1H), 4.43 (m, 1H), 4.04 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.56 (m, 4H), 3.34 (s, 2H), 3.01-2.57 (m, 6H), 2.53 (m, 5H), 1.23 (в, 6Н).
Пример 250 2-(3-(5-(5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 250
Пример 250а 5-бром-3-(5-(1-этипазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 250а
К раствору 3-(5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1Н)-она 155n (неочищенный, 4.6 ммоль) в метаноле (50 мл) и уксусной кислоты (5 мл) при 0°С добавляли СН3СНО (40% масс. в Н2О) (10 г, 92 ммоль), с последующим добавлением NaBH(СН3О)3 (20 г, 92 ммоль) небольшими порциями в течение 1 часа. После завершения реакции смесь доводили до рН>7 с помощью 2N NaOH. Затем смесь экстрагировали ДХМ (80 мл × 3), сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое очищали на флэш-колонке, элюируя смесью 50:1 ДХМ/МеОН, содержащей 0.5% Et3N, с получением 250а в виде желтого твердого веществ (43%, две стадии). ЖХМС: (М+Н)+ 364. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.72 (s, 1Н), 8.66 (d, J=3, 1Н), 8.21 (d, J=3,1H), 7.68 (dd, J=9, 1H), 7.52 (d, J=2.5, 1H), 7.32 (d, J=9, 1H), 3.54 (m, 6H), 2.99 (m, 2H), 2.42 (m, 2H), 0.89 (t, J=7, 3H).
Пример 250b 2-(5-(5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 250b
Согласно примеру 136е, начиная с 250а и 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,б,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d, получали 65% выход 250b. ЖХМС: (М+Н)+ 639.
Согласно примеру 135, начиная с 250b, получали 63% выход 250. ЖХМС: (М+Н)+ 597. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.66 (d, J=2, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.11 (d, J=1.5, 1H), 7.66 (dd, J=8.5,1H), 7.42 (d, J=2.5, 1H), 7.33 (dd, J=9.5, 1H), 7.28 (d, J=8.5, 1H), 7.19 (dd, J=9, 1H), 6.53 (s, 1H), 4.87 (t, J=4, 1H), 4.31 (d, J=4.5, 2H), 4.15 (m, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.59 (a, 3H), 3.47 (m, 3H), 2.97 (m, 2H), 2.62 (m, 3H), 2.40 (m, 3H), 1.79 (m, 2H), 1.69 (m, 2H), 0.88 (t, J=7, 3H).
Пример 251 5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)-3-(5-(1-метилазетидин-3-илокси))-1-метялпиридин-2(1H)-он 251
Пример 251a трет-бутил-3-(6-нитропиридин-3-илокси)азетидин-1-карбоксилат 251а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 2-нитро-5-гидроксипиридин (2.00 г, 14.3 ммоль), трет-бутил-3-иодазетидин-1-карбоксилат (6.06 г, 21.5 ммоль), гидрид натрия (800 мг, 20.2 ммоль) и ДМФА (30 мл). Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 24 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли этилацетатом (200 мл) и промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (100 мл). Органический слой сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью флэш-хроматографии с получением 251а с выходом 95% (4.00 г) в виде желтого масла: 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.27 (d, 1Н, J=9.0 Гц), 8.14 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.26 (dd, 1H, J=9.0, 3.0 Гц), 5.04 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 4.06 (m, 2H), 1.44 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 196.1 (М-Вос+Н).
Пример 251b трет-бутил-3-(6-аминопиридин-3-илокси)азетидин-1-карбоксилат 251b
Бутыль реактора Парра емкостью 25 мл, продували азотом и помещали в нее оксид платины (200 мг), 251а (2.00 г, 6.78 ммоль), этилацетат (30 мл) и этанол (30 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 20 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (10.0 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали метанолом (2×50 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением 100% выхода (2.01 г) 251b в виде белого твердого вещества: тк 83-84°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 7.53 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.04 (dd, 1H, J=9.0, 3.0 Гц), 6.41 (d, 1H, J=9.0 Гц), 5.32 (br s, 2H), 4.21 (t, 2H, J=6.5 Гц), 3.75 (t, 2H, J=6.5 Гц), 3.25 (m, 1H), 1.37 (s, 9H); MS (ESI+) m/z 266.2 (M+H).
Пример 251 трет-бутил-3-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-илокси)азетидин-1-карбоксилат 251с
Применяя ту же процедуру, как описано для получения 250а, в результате реакции 251b (1.01 г, 3.80 ммоль) и 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (1.01 г, 3.80 ммоль) получали 81% выход (1.40 мг) 251с в виде коричневого твердого вещества: тк 120-121°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.70 (s, 1H), 8.57 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.86 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.48 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.35 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.28 (m, 1H), 4.95 (m, 1H), 4.3 (m, 2H), 3.80 (m, 2H), 3.50 (s, 3Н), 1.38 (s, 9Н); MS (ESI+) m/z 452.3 (M+H).
Пример 251d 3-(5-(азетидин-3-илокси)пиридин-2-иламино)-5-бром-1-метилпиридин-2(1H)-он 251d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 251с (1.14 г, 3.10 ммоль), хлористый метилен (10 мл) и трифторуксусную кислоту (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок разбавляли хлористым метиленом (100 мл) и промывали насыщенным водным бикарбонатом натрия (50 мл). Водный слой экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл) и объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением 92% выхода (1.10 г) 251d в виде бесцветного масла. Указанное соединение непосредственно на следующей стадии без какой-либо очистки: 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.65 (s, 1H), 8.55 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.82 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.48 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.30 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.21 (m, 1H), 4.95 (t, 1H, J=6.0 Гц), 3.76 (m, 1H), 3.48 (m, 5H); MS (ESI+) m/z 353.0 (M+H).
Пример 251e 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-илокси)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 251е
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, продували азотом и помещали в нее 251d (1.10 г, 2.95 ммоль), 37% раствор формальдегидав воде (111 мг, 3.70 ммоль) и метанол (15 мл). Добавляли суспензию цианоборогидрида натрия (540 мг, 8.60 ммоль) и хлорида цинка (600 мг, 4.40 ммоль) в метаноле (10 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали и остаток разделяли между смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (250 мл) и 10% водным карбонатом калия (100 мл). Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (3×150 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 50% метанол/хлористый метилен) с получением 80% выхода (830 мг) 251е в виде коричневого твердого вещества: тк 100-101°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.66 (s, 1Н), 8.55 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.86 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.47 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.31 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.24 (dd, 1H, J=9.5, 3.5 Гц), 4.76 (m, 1H), 3.77 (t, 2H, J=7.5 Гц), 3.50 (s, 3H), 3.03 (t, 2H, J=7.5 Гц), 2.26 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 366.0 (М+Н).
Применяя ту же процедуру, как описано для получения 239, в результате взаимодействия 251е (145 мг, 0.400 ммоль) и 182с (304 мг, 0.520 ммоль) получали 15% выход (37 мг) 251 в виде беловатого твердого вещества: тк 160-161°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.53 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.49 (s, 1H), 7.77 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.36 (d, 1H, J=2.0 Гц), 7.32 (dd, 1H, J=9.0, 2.5 Гц), 7.27 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.22 (dd, 1H, J=9.0, 2.5 Гц), 7.16 (dd, 1H, J=9.0,2.5 Гц), 4.84 (t, 1H, J=4.0 Гц), 4.69 (m, 1H), 4.30 (m, 2H), 3.84 (m, 1H), 3.69 (m, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.02 (m, 1H), 2.92 (m, 3H), 2.75 (m, 2H), 2.54 (m, 2H), 2.27 (s, 3H); MS (ESI+) m/z 630.3 (M+H).
Пример 252 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 252
Пример 252а 5-бром-1-метил-3-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 252а
Согласно примеру 214b, 5-бром-1-метил-3-(4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 126а (250 мг, 0.78 ммоль), оксетан-3-он (600 мг, 8.3 ммоль) растворяли в метаноле (8 мл). Добавляли цианоборогидрид натрия (148 мг, 3 ммоль) и хлорид цинка (165 мг, 1.5 ммоль) в метаноле (8 мл) и реакционную смесь нагревали при 48°С в течение 12 часов. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 34% выход (100 мг) 252а в виде светло-зеленого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 382.1 (М+Н).
Согласно примеру 121b, за исключением применения 230а (135 мг, 0.26 ммоль), 252а (100 мг, 0.26 ммоль), 1М раствора карбоната натрия (1 мл, 1 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (15 мг, 0.013 ммоль) и 1,2-диметоксиэтана (2.5 мл). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали смесь (80 мг) 252b и 252 в виде желтого масла. С указанной смеси (80 мг) снимали защиту с применением той же процедуры, как в 121, за исключением применения смеси ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл) и изопропанола (1 мл) и моногидрата гидроксида лития (25 мг, 0.6 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этипацетат/гексаны) получали 40% выход (30 мг) 252 в виде белого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 628.5 (М+Н).
Пример 253 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[(2R)-1-метилпирролидин-2-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-он 253
Пример 254 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1H,2H,3H,4H,6H,7H,8H,9H-пиразино[1,2-a]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[(2S)-1-метилпирролидин-2-ип]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-он 254
Примеры 253 и 254 представляют собой энантиомеры рацемата 202. Рацемическую смесь 202 подвергали хиральному разделению на колонке Chiralpak AD, 4.6×50 mm, 3 мкм (подвижная фаза 55% изопропанол (m/0.1% триэтиламин)/45% CO2, скорость потока 5 мл/мин) при 40°С с получением отдельных энантиомеров, с первоначальным элюированием 254, с последующим 253. Примеры 253 MS (ESI+) m/z 597.4 (М+Н). Примеры 254 MS (ESI+) m/z 597.4 (М+Н).
Пример 255 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(морфолин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-он 255
Пример 255а 4-(6-нитропиридин-3-ил)морфолин 255а
Согласно процедурам, описанным для 188а, и, начиная с 2 г 5-бром-2-нитропиридина и 968 мг морфолина, получали 255а в виде желтого твердого вещества (1 г, 50%). MS: [М+Н]+ 210. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.18 (d, J=9.0, 1Н), 8.15 (d, J=3.0,1Н), 7.22 (dd, J=3.0, 1Н), 3.90 (t, J=5.0, 4H), 3.42 (t, J=5.0, 4H).
Пример 255b 5-морфолинопиридин-2-амин 255b
Согласно процедурам, описанным для 188b, и, начиная с 1 г 4-(6-нитропиридин-3-ип)морфолина, получали 255b в виде желтого твердого вещества (840 мг, 98%). MS: [М+Н]+ 210.
Пример 255c 5-бром-1-метил-3-(5-морфолинопиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 255с
Согласно процедурам, описанным для 188с, и, начиная с 3,5-дибром-1-метилпиридип-2(1Н)-она (1.15 г, 4.3 ммоль) и 5-морфолинопиридин-2-амина (770 мг, 4.3 ммоль), получали 255с в виде желтого твердого вещества (986 мг, 63%). MS: [М+Н]+ 365.
Пример 255d 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-морфолинопиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 255d
Согласно процедурам, описанным для 148с, и, начиная с 400 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d и 302 мг 5-бром-1-метил-3-(5-морфолинопиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она, получали 255d в виде желтого твердого вещества (281 мг, 53%). MS: [M+H]+ 641.
Согласно процедурам, описанным для 148, и, начиная с 270 мг 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-морфолинопиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата, получали 255 в виде белого твердого вещества (103 мг, 41%). MS: [M+H]+ 599. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.56 (d, J=2.0, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.87 (d, J=3.0,1H), 7.36-7.32 (m, 3Н), 7.25 (d, J=9.5, 2H), 7.19 (d, J=9.0, 1H), 6.52 (a, 1H), 4.87 (s, 1H), 4.32 (d, J=4, 2H), 4.15 (m, 3Н), 3.82 (m, 1H), 3.72 (t, J=4.0, 1H), 3.50 (a, 3Н), 3.02 (t, J=4.5, 3Н), 2.61 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 1.80 (s, 2H), 1.68 (s, 2H).
Пример 256 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 256
Пример 256а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)метилацетат 25ба
Согласно примеру 148b, начиная с 400 мг (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 247b и 284 мг 5-бром-1-метил-3-(5-морфолинопиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 255с, получали 277 мг 256а в виде желтого твердого вещества (53%). MS: [М+Н]+ 672.
Согласно примеру 148, начиная с 270 мг 256а, 103 мг 256 получали в виде белого твердого вещества (41%). MS: [М+Н]+ 630. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.56 (d, J=2.0, 1Н), 8.38 (s, 1Н), 7.88 (d, d, J=3.0, 1H), 7.36-7.32 (m, 3Н), 7.25 (d, J=9.5, 2H), 7.19 (d, J=9.0, 1Н), 4.85 (s, 1Н), 4.32 (d, J=4, 2H), 4.07 (m, 3H), 3.86 (m, 1H), 3.72 (t, J=4.0, 1Н), 3.50 (s, 3H), 3.02 (t, J=4.5, 3H), 2.89 (m, 1Н), 2.76 (s, 2H), 2.53 (m, 2H), 1.23 (s, 6H).
Пример 257 10-[3-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2- ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 257
Пример 257а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фторфенил)метилацетат 257а
Согласно примеру 13ба, начиная с 5-бром-3-(5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 250а и (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 247b, получали соединение 257а с выходом 37%.
Согласно примеру 136, начиная с 257а, получали соединение 257 с выходом 46%. ЖХМС: (М+Н)+ 628. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.66 (d, J=2, 1Н), 8.55 (s, 1H), 8.12 (d, J=2.5,1H), 7.65 (dd, J=8.5, 1H), 7.42 (d, J=2, 1H), 7.33 (dd, J=9.5, 1H), 7.28 (d, J=9, 1H), 7.19 (dd, J=9,1H), 4.86 (t, J=4, 1H), 4.33 (m, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.49 (m, 3H), 3.04 (m, 1H), 2.97 (m, 2H), 2.89 (m, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.55 (m, 2H), 2.40 (m, 2H), 1.79 (m, 4H), 1.23 (s, 6H), 0.88 (t, J=7, 3H).
Пример 258 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ип)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 258
Пример 258а трет-бутип-6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилат 258а
В круглодонную колбу емкостью 100 мл помещали трет-бутил-6-амино-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-карбоксилат (2 г, 8 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.8 г, 6.7 ммоль), карбонат цезия (4.4 г, 13.4 ммоль), Ксантфос (0.41 г, 0.7 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0.64 г, 0.7 ммоль) и 1,4-диоксан (50 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 25:1 дихлорметан/метанол, с получением 258а (2.18 г, 63%). ЖХ/МС: m/z 435 (М+Н)+.
Пример 258b 5-бром-1-метил-3-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиридин-2(1Н)-он 258b
Соединение 258а (2.18 г, 5 ммоль) суспендировали в диоксане (10 мл). Добавляли по каплям насыщенный водный хлороводород в диоксане (20 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 минут и концентрировали при пониженном давлении с получением 258b, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ/МС: m/z 335 (М+Н)+.
Пример 258с 5-бром-1-метил-3-(2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино) пиридин-2(1Н)-он 258с
Смесь 258b (1.7 г, 5 ммоль), оксетан-3-она (1.8 г, 25 ммоль), NaBH3CN (1 г, 15 ммоль) и хлорида цинка (3.4 г, 25 ммоль) в метаноле (50 мл) перемешивали в течение 4 часов при комнатной температуре. Смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 25:1 дихлорметан/метанол, с получением 258с (1.8 г, 92%). ЖХ/МС: m/z 391 (М+Н)+.
Пример 258d 4-фтор-2-(1-метил-5-(2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-a]индол-2(1H)-ил)бензилацетат 258d
В виалу для микроволнового реактора емкостью 15 мл с магнитной мешалкой, помещали 258с (0.39 г, 1 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (0.48 г, 1 ммоль), фосфат калия (0.54 г, 2 ммоль), ацетат натрия (0.17 г, 2 ммоль), ацетонитрил (10 мл), воду (1 мл) и 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен-палладий(II)дихлорид дихлорметан (0.08 г, 0.1 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов в атмосфере аргона. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 40:1 дихлорметан /метанол, с получением 258d (0.3 г, 50%). ЖХ/МС: m/z ббб (М+Н)+.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл магнитной мешалкой, помещали 258d (0.6 г, 0.9 ммоль), LiOH (2 г, 48 ммоль), ТГФ (5 мл), изопропанол (5 мл) и воду (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 258. ЖХ/МС: m/z 624 (М+Н)+. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.62 (s, 1Н), 7.82 (s, 1H), 7.34 (m, 3H), 7.20 (m, 1H), 7.09 (m, 2H), 6.94 (m, 1H), 4.86 (m, 1H), 4.96 (m, 1H), 4.60 (m, 2H), 4.51 (m, 2H), 4.31 (m, 2H), 4.14 (m, 3H), 3.87 (m, 1H), 3.58 (m, 4H), 3.33 (m, 3H), 2.75 (m, 2H), 2.60 (m, 3H), 2.50 (m, 3H), 1.78 (m, 4H).
Пример 259 5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ип]фенил]-8-тиа-5-азатрицикпо[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 259
Пример 259а {2-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5- а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5- ил}фенил}метилацетат 259а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали (2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-метилацетат 111a (571 мг, 1.2 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 14ба (400 мг, 1.2 ммоль), СН3СООКа (195 мг, 2.4 ммоль), K3PO4 (631 мг, 2.4 ммоль), PdCl2(dppf) (97 мг, 0.12 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл) и Н2О (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, о получением 259а в виде коричневого твердого вещества (500 мг, 69%). MS:(M+H)+ 613.
К раствору 259а (500 мг, 0.82 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.96 г, 82 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 259 в виде желтого твердого вещества (159 мг, 34%). MS: (М+Н)+ 571. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.79 (s, 4Н), 2.35 (s, 2Н), 2.53-2.55 (m, 1Н), 2.76-2.79 (m, 4Н), 2.84-2.88 (m, 1Н), 2.96-2.98 (m, 1Н), 3.48 (s, 2Н), 3.57 (s, 3Н), 3.87-3.93 (m, 3Н), 3.99-4.03 (m, 1Н), 4.35 (s, 2Н), 4.81 (s, 1Н), 5.88 (s, 1Н), 7.23-7.24 (d, 2Н), 7.29-7.34 (m, 2Н), 7.43-7.46 (d, 1Н), 7.97-7.98 (d, 1Н), 8.10 (s, 1Н).
Пример 260 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 260
Пример 2б0а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ип]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 260а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 130 с (162 мг, 0.429 ммоль), бороновый эфир 212b (347 мг, 0.700 ммоль), Pd(PPh3)4 (24.8 мг, 0.022 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 1.42 мл, 1.42 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4.0 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 15 минут. Добавляли дихлорметан (200 мл) и полученную смесь промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол:дихлорметан=5:95) получали 260а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 260а, ТГФ (5 мл), изо-PrOH (5 мл), Н2О (5 мл), LiOH H2O (300 мг). Полученную смесь перемешивали при кг в течение 1 часа. Весь растворитель удаляли в вакууме и полученный осадок добавляли к дихлорметану (200 мл), раствор промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (МеОН:дихлорметан=10:90) получали спирт 260 в виде желтых твердых веществ, 48 мг. MS (ESI+) m/z 625.5 (М+Н).
Пример 261 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрипикпо[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 261
Пример 2б1а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-{1-метил-5-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 261а
В сосуд для микроволновой реакции емкостью 10 мл, снабженный якорем магнитной мешалки, помещали 5-бром-1-метил-3-(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ипамино)пиридин-2(1Н)-он 205b (150 мг, 0.43 ммоль), 10-[2-(ацетоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-5-фторфенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 230а (248 мг, 0.50 ммоль), Pd(PPh3)4 (30 мг, 0.026 ммоль) в 2 N Na2CO3 (2 мл) и 1,2-диметоксиэтан (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 10 минут, ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 3:1) с получением 36% (100 мг) 261 а в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 261а (100 мг, 0.16 ммоль), LiOH⋅H2O (200 мг, 4.8 ммоль), ТГФ (2 мл), изопропанол (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 2 часов, ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (2×5 мл) и солевым раствором (5 мл), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученный осадок фильтровали с получением 36% выхода (34 мг) 261. MS(ESI+) m/z 597.5 (М+Н).
Пример 262 10-[3-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 262
Примеры 262а и 262b Согласно примеру 271а, получали 262b с применением 250а (305 мг, 0.84 ммоль) на стадии 1 и с применением 189а (302 мг, 0.67 ммоль) на стадии 2 в Пример 271b. Указанный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии: 12 г силикагеля ISCO, 0-10% МеОН, с получением желаемого продукта 262b (105 мг, 19% выход).
Согласно примеру 119, 2б2а (105 мг, 0.36 ммоль), 1N LiOH (0.8 мл), ТГФ (2 мл) и изопропанол (2 мл) подвергали взаимодействию с получением 262 (85 мг, 87% выход). MS (ESI+) m/z 611.5 (М+Н).
Пример 263 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(5-(2-метоксипиримидин-4-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 263
Пример 263а 5-бром-3-(2-метоксипиримидин-4-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 263а
Согласно примеру 112а, 2-метоксипиримидин-4-амин (0.625 г, 5 ммоль), 3,5-дибром-1-метил-1Н-пиридин-2-он (1.34 г, 5 ммоль), карбонат цезия (4.88 г, 15 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0.465 г, 0.5 ммоль), Ксантфос (0.58 г, 1 ммоль) и 1,4-диоксан (50 мл) нагревали при 100°С в течение 24 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали смесью 9:1 хлористый метилен/метанол (2×25 мл) и объединенные фильтраты концентрировали досуха. Указанный остаток растворяли в хлористом метилене, добавляли диэтиловый эфир и полученный осадок фильтровали с получением количественного выхода (1.57 г) 263а в виде зеленого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 313.1 (М+Н).
Пример 263b 4-фтор-2-(5-(2-метоксипиримидин-4-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 263b
Согласно примеру 121b, 263а (158 мг, 0.5 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (242 мг, 0.5 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (2 мл, 2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (29 мг, 0.025 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл) нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 98% выход (290 мг) 263b в виде желтого масла: MS (ESI+) m/z 587.6 (М+Н).
Согласно примеру 121, смесь ТГФ (2 мл), воды (1 мл) и изопропанола (2 мл), 263b (290 мг, 0.5 ммоль), и моногидрата гидроксида лития (105 мг, 2.5 ммоль) подвергали взаимодействию. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 26% выход (70 мг) 263 в виде твердого вещества: MS (ESI+) m/z 545.1 (М+Н).
Пример 264 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 264
Пример 264а трет-Бутил-4-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)пиперидин-1-карбоксилат 264а
Согласно примеру 112а, трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)пиперидин-1-карбоксилат (1.9 г, 5.5 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.47 г, 5.5 ммоль), карбонат цезия (5.36 г, 16.5 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0.53 г, 0.55 ммоль), Ксантфос (0.63 г, 1.1 ммоль) и 1,4-диоксан (50 мл) нагревали при 100°С в течение 8 часов. Выделяли и концентрировали досуха. Промывали полученное твердое вещество диэтиловым эфиром, фильтровали и получали 56% выход (1.4 г) 264а в виде серого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 465.2 (М+Н).
Пример 264b 5-бром-1-метил-3-(5-(пиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 264b
Согласно примеру 121с, подвергали взаимодействию 264а (0.58 г, 1.25 ммоль), трифторуксусную кислоту (0.96 мл, 12.5 ммоль) и хлористый метилен (20 мл). Выделяли и концентрировали с получением количественного выхода 264b (454 мг) в виде желтого масла, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS (ESI+) m/z 365.2 (М+Н).
Пример 264с 5-бром-1-метил-3-(5-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 264с
Согласно примеру 214b, перемешивали 264b (450 мг, 1.25 ммоль), оксетан-3-он (800 мг, 11.1 ммоль) в метаноле (10 мл). Добавляли цианоборогидрид натрия (236 мг, 3.75 ммоль) и хлорид цинка (256 мг, 1.88 ммоль) в метаноле (10 мл) и реакционную смесь нагревали при 48°С в течение 12 часов. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 30% выход (160 мг) 264с в виде светло-зеленого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 421.1 (М+Н).
Согласно примеру 121b, 264с (160 мг, 0.38 ммоль), 230а (188 мг, 0.38 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (1.5 мл, 1.5 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)-палладий(0) (22 мг, 0.019 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (3.5 мл) нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 9:1 хлористый метилен/метанол) получали смесь (110 мг) соединения 264с и 264 в виде желтого масла. С указанной смеси (110 мг) снимали защиту с применением той же процедуры, как и в случае 121, за исключением применения смеси ТГФ (1 мл), воды (0.5 мл) и изопропанола (1 мл), и моногидрата гидроксида лития (50 мг, 1.2 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 56% выход (60 мг) соединения 264 в виде желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 667.6 (М+Н).
Пример 265 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 265
Пример 265а 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 265а
Согласно примеру 121b, 264с (210 мг, 0.5 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d (242 мг, 0.5 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (2 мл, 2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (29 мг, 0.025 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл) нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 9:1 хлористый метилен/метанол) получали 69% выход (240 мг) 265а в виде коричневого масла: MS (ESI+) m/z 695.5 (М+Н).
Согласно примеру 121, подвергали взаимодействию смесь ТГФ (2 мл), воды (1 мл) и изопропанола (2 мл), 265а (240 мг, 0.35 ммоль), и моногидрата гидроксида лития (100 мг, 2.5 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (NH-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 30% выход (70 мг) 265 в виде желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 653.6 (М+Н).
Пример 266 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрипикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 266
Пример 266а 5-бром-1-метил-3-(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолип-6-иламино)пиридин-2(1Н)-он 266а.
В круглодонную колбу емкостью 100 мл с магнитной мешалкой, помещали 258b (350 мг, 0.8 ммоль), формальдегид (37% водный раствор, 4.1 ммоль), NaBH3CN (150 мг, 2.4 ммоль), ZnCl2 (170 мг, 1.2 ммоль) в метаноле (46 мл). Смесь перемешивали в течение 16 часов при комнатной температуре. По прошествии указанного времени смесь концентрировали при пониженном давлении и 10% водным К2СО3 (25 мл). Из указанной смеси выделяли желаемый продукт и фильтровали. После промывания диэтиловым эфиром (20 мл) получили 85% выход (240 мг) 266а.
Пример 266b 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ип}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрипикпо[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 266b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 266а (240 мг, 0.7 ммоль), 210d (460 мг, 0.9 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (8 мл) и 1М водный карбонат натрия (2 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (40 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 120°С в течение 10 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 9:1 хлористый метилен:метанол, с получением 27% выхода (120 мг) 266b.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 266b (120 мг, 0.2 ммоль), гидроксид лития (40 мг, 0.9 ммоль), ТГФ (1 мл), изопропанол (1 мл) и воду (2 мл). Смесь перемешивали при кт в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с применением колонки Biotage KPNH 12+М, элюируя градиентом гексаны - этилацетат, с получением 45% выхода (50 мг) 266. MS (ESI+) m/z 597.4 (М+Н).
Пример 267: 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 267
Пример 267а [4-фтор-2-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 267а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 130с (400 мг, 1.0 ммоль), (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикдо[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 247b (534 мг, 1.0 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (87 мг, 0.1 ммоль), K3PO4.3Н2О (569 мг, 2.0 ммоль) и NaOAc (175 мг, 2.0 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. и реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 10:1 хлористый метилен/метанол, с получением 267а в виде коричневого твердого вещества (350 мг, 49%). MS: [М+Н]+ 670.
К раствору 267а (100 мг, 0.15 ммоль) в пропан-2-оле (5 мл), тетрагидрофурана (5 мл) и воды (1 мл) добавляли LiOH (358 мг, 15 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 267 в виде желтого твердого вещества (18 мг, 19%). MS: (М+Н)+ 628. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 1.83-1.96 (m, 8Н), 2.53-2.66 (m, 8H), 2.85 (t, 2H), 2.92-2.97 (m, 1H), 3.04-3.07 (m, 1H), 3.23-3.26 (d, 2H), 3.98-4.01 (m, 1H), 4.12-4.15 (m, 1H), 4.48-4.55 (m, 2H), 7.05 (d, 1H), 7.20-7.23 (m, 2H), 7.39 (d, 1H), 7.55-7.57 (m, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.65 (s, 1H).
Пример 268 5-{3-[5-({5-[2-(диметиламино)этокси]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил}-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 268
Пример 268а N,N-диметил-2-(6-нитропиридин-3-илокси)этанамин 268а
Смесь 6-нитропиридин-3-ола (0.5 г, 3.57 ммоль), гидрохлорида 2-хлор-N,N-диметилэтанамина (0.61 г, 4.29 ммоль) и Cs2CO3 (2.56 г, 7.85 ммоль) в ДМФА (7 мл) перемешивали при 120°С в герметичной пробирке в течение 15 часов. Смесь фильтровали, и фильтрат обрабатывали этилацетатом и водой. Водную фазу экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на флэш-колонке с получением 268а (0.46 г, 61%). MS: [M+H]+ 212.
Пример 268b 5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-амин 268b
Бутыль для гидрирования Парра емкостью 100 мл продували азотом и помещали в нее 268а (0.92 г, 4.36 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 0.2 г) и метанол (30 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 25 psi и встряхивали в течение 2 часов на устройстве для гидрирования Парра. Затем откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 268b (0.66 г, 83%). MS: [М+Н]+ 182.
Пример 268c 5-бром-3-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 268с
Смесь 268b (570 мг, 3.15 ммоль), Ксантфоса (109 мг, 0.19 ммоль), Pd2dba3 (230 мг, 0.25 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-она (918 мг, 3.46 ммоль) и Cs2CO3 (2.05 г 6.3 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. После завершения реакции смесь отфильтровали и промывали метанолом (100 мл). Фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 268с (922 мг, 80%). MS: [M+H]+ 367.
Пример 268d {2-[5-({5-[2-(диметиламино)этокси]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрипикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5- ил}фенил}метилацетат 268d
Смесь 268 с (360 мг, 0.99 ммоль), (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрипикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 212b (494 мг, 0.99 ммоль), PdCl2(dppf) (86 мг, 0.12 ммоль), К3РО4 (150 мг) и NaOAc (50 мг) в MeCN (6 мл), и воды (2 мл) нагревали при 110°С в герметичной пробирке в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 268d (367 мг,60%). MS: [М+Н]+ 660.
Смесь 268d (700 мг, 1.06 ммоль) и гидрата LiOH (446 мг, 10.6 ммоль) в изопропаноле (15 мл) и воды (5 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 268 (94 мг, 14%). MS: [М+Н]+ 618. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.54 (d, J=2.0, 1Н), 7.95 (d, J=3.0, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.48 (d, J=2.5, 1H), 7.23-7.21 (m, 1H), 7.16-7.14 (m, 1H), 6.98-6.96 (m, 1H), 6.81 (d, J=9.0, 1H), 4.57 (d, J=11.5, 1H), 4.30 (t, J=10.5, 1H), 4.20-4.02 (m, 4H), 3.87-3.80 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.00-2.84 (m, 4H), 2.75-2.73 (m, 2H), 2.59-2.48 (m, 2H), 2.37 (s, 6H), 1.94-1.83 (m, 4H).
Пример 269 5-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ип)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 269
Пример 269а 5-[3-(5-{[5-(4-этиппиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 269а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 5-бром-3-(5-(4-этил-пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 138с (300 мг, 0.765 ммоль), бороновый эфир 212b (420.1 мг, 0.841 ммоль), Pd(PPh3)4 (44.2 мг, 0.038 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 2.52 мл, 2.52 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4.0 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 15 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол: хлористый метилен=5:95) получали ацетат 269а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 2б9а, ТГФ (5 мл), изопропанол (5 мл), воду (5 мл), LiOH Н2О (300 мг). Полученную смесь перемешивали при кг в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол:хлористый метилен=10:90) получали 269 в виде светло-коричневого твердого вещества, 158 mg. MS (ESI+) m/z 643.4 (М+Н).
Пример 270 3-(5-((2-(диметиламино)этил)(метил)амино)пиридин-2-иламино)-5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента-[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-ил)фенил)-1-метилпиридин-2(1H)-он 270
Пример 270а N1,N1,N2-триметил-N2-(6-нитропиридин-3-ип)этан-1,2-диамин 270а
В круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 1е (3.00 г, 14.8 ммоль), N1,N1,N2-триметилэтан-1,2-диамин (2.26 г, 22.2 ммоль) и N,N-диметилацетамид (10 мл). Добавляли N,N-диизопропипэтиламин (3.69 г, 28.6 ммоль) и иодид тетрабутиламмония (8.18 г, 22.8 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 90°С в течение 14 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и выливали в воду (20 мл). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органический слой отделяли и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. В результате очистки полученного осадка с помощью колоночной хроматографии получали 270а с выходом 75% (2.50 г) в виде желтого масла: 1Н ЯМР (300 МГц, CDCl3) δ 8.15 (d, 1H, J=9.1 Гц), 7.98 (d, 1H, J=3.2 Гц), 7.00 (dd, 1H, J=9.1, 3.2 Гц), 3.58 (t, 1H, J=6.9 Гц), 3.14 (s, 3H), 2.52 (t, 2H, J=7.1 Гц), 2.29 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 225.1 (М+Н).
Пример 270b N5-(2-(диметиламино)этил)-N5-метилпиридин-2,5-диамин 270b
Бутыль реактора Парра емкостью 25 мл, продували азотом и помещали в нее 10% палладий на углероде (50% полной массы, 1.00 г в пересчете на сухое вещество) и раствор 270а (2.20 г, 9.80 ммоль) в этаноле (150 мл). Бутыль присоединяли к гидрогенизатору Парра, вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 3 часов. По прошествии указанного времени откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Добавляли Целит 521 (1.00 г) и смесь фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали этанолом (2×25 мл), и объединенные фильтраты концентрировали досуха при пониженном давлении с получением количественного выхода 270b (1.91 г) в виде пурпурного масла: 1Н ЛМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.67 (d, 1Н, J=2.9 Гц), 7.05 (dd, 1H, J=8.5, 2.9 Гц), 6.48 (dd, 1H, J=8.9, 0.5 Гц), 4.04 (br s, 2H), 3.28 (t, 2H, J=7.1 Гц), 2.84 (s, 3Н), 2.43 (t, 2H, J=7.4 Гц), 2.26 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 195.2 (M+H).
Пример 270c 5-бром-3-(5-((2-(диметиламино)этил)(метил)амино)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1H)-он 270с
В двухгорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 270b (1.00 г, 5.20 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.53 г, 5.72 ммоль), карбонат цезия (5.09 г, 15.6 ммоль) и 1,4-диоксан (52 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (257 мг, 0.442 ммоль) и трим(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (239 мг, 0.260 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток измельчали с метанолом (20 мл) с получением 63% выхода (700 мг) 270 с в виде беловатого твердого вещества: тк 161-163°С; 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-d6) δ 8.50 (d, 1Н, J=2.3 Гц), 8.39 (s, 1H), 7.75 (d, 1Н, J=2.4 Гц), 7.40 (d, 1Н, J=2.4 Гц), 7.17 (m, 2H), 3.50 (s, 3Н), 3.56 (t, 2H, J=6.9 Гц), 2.86 (s, 3Н), 2.35 (t, 2H, J=7.1 Гц), 2.16 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 380.1 (M+H).
Пример 270d 3-(5-((2-(диметиламино)этил)(метил)амино)пиридин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1H)-он 270d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 270с (500 мг, 1.32 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди-1,3,2-диоксаборолан (668 мг, 2.63 ммоль), ацетат калия (389 мг, 3.96 ммоль) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли [1,1’-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II) (97 мг, 0.132 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 часа. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 270d с количественным выходом неочищенного вещества. Указанный остаток применяли бездополнительной очистки.
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную обратным холодильником, магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 247а (420 мг, 0.901 ммоль), 270d (290 мг, 0.690 ммоль), карбонат натрия (220 мг, 2.07 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (80 мг, 0.069 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в смеси ТГФ (10 мл), метанола (10 мл) и воды (10 мл). К полученному раствору добавляли моногидрат гидроксида лития (420 мг, 10.0 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре и затем концентрировали в вакууме. Остаток разделяли между этилацетатом (150 мл) и водой (30 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали 20% (об./об.) раствором метанола в хлористом метилене (3×150 мл). Объединенные органические слои сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии (силикагель, от 0% до 20% метанол/хлористый метилен) с получением 14% выхода (53 мг) 270 в виде беловатого твердого вещества: тк 106-107°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.45 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.20 (s, 1H), 7.69 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.32 (m, 2H), 7.17 (m, 3H), 4.84 (t, 1H, J=4.0 Гц), 4.33 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.84 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.03 (m, 1H), 2.89 (m, 1H), 2.75 (9, 2H), 2.53 (d, 2H, J=8.9 Гц), 2.32 (t, 2H, J=7.2 Гц), 2.14 (s, 6Н), 1.23 (s, 6Н); MS (ESI+)+ 645.3 (М+Н).
Пример 271 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 271
Пример 271а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-ип]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 271а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он (172a) (216 мг, 0.6 ммоль), 230а (390 мг, 0.8 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (8 мл) и 1М водный карбонат натрия (2 мл). После барботирования Na в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (36 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 15 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 9:1 хлористый метилен:метанол, с получением 30% выхода (120 мг) 271а.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 271а (110 мг, 0.2 ммоль), гидроксид лития (40 мг, 0.9 ммоль), ТГФ (1 мл), изопропанол (1 мл) и воду (2 мл). Смесь перемешивали при кг в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии с применением колонки Biotage KPNH 12+М, элюируя градиентом гексаны - этилацетат, с получением 88% выхода (94 мг) 271. MS (ESI+) m/z 597.4 (М+Н).
Пример 272 10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 272
Пример 272а 10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ип)-5-фтор-2-(ацетоксиметил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 272а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 182b (270 мг, 0.579 ммоль), 3-(5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 201а (382 мг, 0.868 ммоль), Pd(PPh3)4 (34 мг, 0.029 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N,1.91 мл, 1.91 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4.0 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 15 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол:хлористый метилен=5:95) получали 272а.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 272а, ТГФ (5 мл), изопропанол (5 мл), воду (5 мл), LiOH Н2О (300 мг). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (30 мл × 3), солевым раствором (30 мл × 1), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол:хлористый метилен=10:90) получали 272 в виде желтых твердых веществ, 143 мг. MS (ESI+) m/z 657.6 (М+Н).
Пример 273 10-{5-фтор-3-[5-({5-[4-(2-фторэтил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-2-(гидроксиметил)фенил}-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 273
Пример 273b 10-{5-фтор-3-[5-({5-[4-(2-фторэтил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-2-(ацетоксиметил)фенил}-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 273b
Согласно примеру 186f, 273a (который получали in situ в 217d с применением условий аналогичных условиям, примененным для получения 270d) (200 мг, 0.49 ммоль) и 189а (176 мг, 0.39 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 273b (115 мг, 33% выход).
Согласно примеру 186, 273b (115 мг, 0.16 ммоль), 1N LiOH (0.82 мл), ТГФ (3 мл) и изопропанол (3 мл) подвергали взаимодействию и очищали посредством ВЭЖХ (ацетонитрил/вода/ТФУ). К остатку добавляли этилацетат и насыщенный водима бикарбонат натрия и смесь перемешивали в течение ~15 минут. Слои разделяли, и органические вещества промывали солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 273 (23 мг, 22% выход). MS (ESI+) m/z 658.5 (М+Н).
Пример 274 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-илметил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 274
Пример 274а 5-бром-1-метил-3-(5-(морфолинометил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 274а
Согласно примеру 186d, получали соединение 274а.
Пример 274с 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-илметил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 274с
Согласно примерам 186е и 186f, 274а (300 мг, 0.79 ммоль) на стадии 1 с получением 274b in situ и затем взаимодействие с 189а (284 мг, 0.63 ммоль) на стадии 2 приводили к получению 274 с (250 мг, 46% выход).
Согласно примеру 119, 274с (250 мг, 0.36 ммоль), 1N LiOH (1.5 мл), ТГФ (3 мл) и изопропанол (3 мл) подвергали взаимодействию, очищали посредством колоночной хроматографии: 12 г силикагель ISCO, 0-10% метанол, затем измельчали с хлористым метиленом/диэтиловым эфиром с получением 274 (89 мг, 39% выход). MS (ESI+) m/z 627.5 (М+Н).
Пример 275 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2H)-он 275
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 197е (210 мг, 0.560 ммоль), 118f (330 мг, 0.710 ммоль), карбонат натрия (175 мг, 1.70 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (8 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (64 мг, 0.055 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок растворяли в смеси ТГФ (3 мл), воды (3 мл) и метанола (3 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (100 мг, 2.40 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×75 мл) и объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 10% метанол/хлористый метилен) с получением 275 с выходом 8% (35 мг) в виде аморфного беловатого твердого вещества: тк 180-181°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.54 (d, 1H, J=2.5 Гц), 8.31 (s, 1H), 7.84 (d, 1H, J=2.5 Гц), 7.42 (t, 1H, J=8.0 Гц), 7.35 (m, 1H), 7.26 (d, 2H, J=8.0 Гц), 7.19 (d, 1H, J=9.0 Гц), 6.00 (а, 1H), 4.69 (t, 1H, J=5.0 Гц), 4.31 (d, 2H, J=4.5 Гц), 3.99 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 3.88 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.05 (m, 5H), 2.90 (m, 1H), 2.70 (t, 2H, J=6.0 Гц), 2.42 (m, 5H), 2.19 (s, 3H), 1.91 (m, 2H), 2.73 (m, 2H); MS (ESI+) m/z 594.3 (М+Н).
Пример 276 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 276
Пример 276а 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 276а
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 5-бром-1-метил-3-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 112а (150 мг, 0.5 ммоль), 230а (350 мг, 0.7 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (6.4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1.6 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (31 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 15 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 60:35:5 хлористый метилен:диэтиловый эфир:метанол, с получением 16% выхода (50 мг) 276а.
Круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 276а (50 мг, 0.1 ммоль), гидроксид лития (18 мг, 0.4 ммоль), ТГФ (0.4 мл), изопропанол (0.4 мл) и воду (1 мл). Смесь перемешивали при кг в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия и фильтровали. Смесь концентрировали при пониженном давлении до почти полной степени высушивания, когда желаемый продукт выделяли и фильтровали. После промывания диэтиловым эфиром (10 мл) получили 87% выход (40 мг) 276. MS (ESI+) m/z 531.4 (Μ+Н).
Пример 277 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(5-{[метил(пропан-2-ил)амино]метил}пиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 277
Пример 277а 5-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-{1-метил-5-[(5-{[метил(пропан-2-ил)амино]метил}пиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 277а
Согласно примеру 186, 186е (270 мг, 0.74 ммоль) полученный in situ подвергали взаимодействию с 212а (267 мг, 0.59 ммоль) на стадии 2. Очищали с помощью колоночной хроматографии: 12 г силикагеля ISCO, 50-100% этилацетат/гексаны, затем 0-15% MeOH/CH2Cl2, с получением 277а (270 мг, 55% выход).
Согласно примеру 119, 277а (270 мг, 0.41 ммоль), 1N LiOH (2.0 мл), ТГФ (4 мл) и изопропанол (4 мл) подвергали взаимодействию и измельчали с эфиром с получением 277 (185 мг, 73% выход). MS (ESI+) m/z 616.4 (Μ+Η).
Пример 278 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 278
Пример 278а 10-[(5-фтор)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)бензилацетат]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло-[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 278а
Согласно примеру 136d, 282с и (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 247b подвергали взаимодействию с получением 278а с выходом 62%. ЖХМС: (М+Н)+ 684.
Согласно примеру 136, 278а превращали в 278 с выходом 39%. ЖХМС: (М+Н)+ 642. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО)δ 9.22 (s, 1Н), 7.90 (s, 1Н), 7.87 (s, 1Н), 7.48 (s, 1Н), 7.36 (dd, J=9.5, 1H), 7.31 (dd, J=9, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.46 (m, 2H), 4.05 (m, 2H), 3.85 (m, 2H), 3.54 (s, 3H), 3.01 (m, 1H), 2.92 (m, 3H), 2.75 (s, 2H), 2.53 (m, 2H), 2.44 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.13 (m, 2H), 1.70 (m, 4H), 1.22 (s, 6H).
Пример 279 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 279
Пример 279а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил)метил ацетат 279а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали 5-бром-1-метил-3-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 146а (340 мг, 1.0 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 247b (480 мг, 1.0 ммоль), CH3COONa (168 мг, 2.0 ммоль), K3PO4 (546 мг, 2.0 ммоль), PdCl2(dppf) (84 мг, 0.1 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл) и воду (1 мл). Смесь нагревали при 110°C в течение 2 часов, выпаривали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 279а в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 46%). MS: (М+Н)+ 645.
К раствору 279а (300 мг, 0.46 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.1 г, 57 ммоль). Смесь перемешивали при 30°C в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 279 в виде белого твердого вещества (99 мг, 35%). MS: (М+Н)+ 603. 1H ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 1.29 (d, 6Η), 2.49 (s, 3Η), 2.59 (d, 2Η), 2.81 (s, 2Η), 2.94-2.97 (m, 3H), 3.07-3.14 (m, 1H), 3.64 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 3.97-3.99 (m, 1H), 4.05.4.07 (t, 2H), 4.12-4.15 (m, 1H), 4.47-4.54 (m, 2H), 5.89 (s, 1H), 7.19-7.22 (m, 2H), 7.26 (d, 1H), 7.91 (s, 1H).
Пример 280 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 280
Пример 280а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)метилацетат 280а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали 5-бром-1-метил-3-(6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 219а (400 мг, 1.0 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 247b (493 мг, 1.0 ммоль), CH3COONa (168 мг, 2.0 ммоль), K3PO4 (546 мг, 2.0 ммоль), PdCl2(dppf) (84 мг, 0.1 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл) и Н2О (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол (20:1), с получением 280а в виде коричневого твердого вещества (400 мг, 56%). MS: (M+H)+ 698.
К раствору 280а (400 мг, 0.57 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.4 г, 57 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 280 в виде белого твердого вещества (52 мг, 14%). MS: (M+H)+ 656. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 1.29 (d, 6H), 2.56-2.63 (q, 2H), 2.70-2.72 (t, 2H), 2.81 (s, 2H), 2.93-2.99 (m, 3H), 3.08-3.12 (m, 1H), 3.47 (s, 2H), 3.72-3.74 (m, 4H), 3.96-4.01 (m, 1H), 4.13-4.18 (m, 1Η), 4.51-4.60 (q, 2Η), 4.68-4.71 (t, 2Η), 4.76-4.79 (t, 2Η), 6.89 (d, 1Η), 7.21-7.23 (d, 2Η), 7.34 (d, 1Η), 7.40 (s, 1Η), 8.78 (s, 1Η).
Пример 281 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 281
Пример 281а [4-фтор-2-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил]метилацетат 281а
Согласно примеру 136d, 282с и (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 212b подвергали взаимодействию с получением 281а с выходом 73%. ЖХМС: (М+Н)+ 670.
Согласно примеру 136, 281а превращали в 281 с выходом 70%. ЖХМС: (М+Н)+ 628. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО)δ 9.21 (s, 1Н), 7.87 (s, 1Н), 7.85 (s, 1Н), 7.47 (s, 1H), 7.35 (dd, J=10, 1Н), 7.30 (dd, J=9, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 4.84 (m, 1H), 4.48 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 2.96 (m, 1H), 2.87 (m, 4H), 2.78 (m, 2H), 2.42 (m, 2H), 2.19 (s, 3H), 1.96 (m, 2H), 1.80 (m, 4H), 1.62 (m, 5H).
Пример 282 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(4-(1-метилпиперидин-4-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 282
Пример 282а трет-бутил-4-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)пиперидин-1-карбоксилат 282а
Смесь трет-бутил-4-(4-аминофенил)пиперидин-1-карбоксилата (2.5 г, 9.06 ммоль) и 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она (2.2 г, 8.23 ммоль) в изопропаноле (30 мл) нагревали при 85°С в течение 15 часов. После завершения реакции ее фильтровали и твердое вещество промывали изопропанолом с получением 282а в виде белого твердого вещества (2.9 г, 80%). ЖХМС: (М+Н)+ 463.
Пример 282b 5-бром-1-метил-3-(4-(пиперидин-4-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-он 282b
Согласно примеру 247а, 282а превращали в 282b с выходом 99%.
Пример 282с 5-бром-1-метил-3-(4-(1-метилпиперидин-4-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-он 282с
Согласно примеру 247b, 282b превращали в 282с с выходом 65%.
Пример 282d 4-фтор-2-(4-метил-6-(4-(1-метилпиперидин-4-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 282d
Согласно примеру 247с, 282с и 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d подвергали взаимодействию с получением 282d с выходом 41%.
Согласно примеру 136,282d превращали в 282 с выходом 36%. ЖХМС: (М+Н)+ 611. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.22 (s, 1Н), 7.90 (s, 1Н), 7.88 (s, 1Н), 7.49 (s, 1H), 7.36 (dd, J=9.5,1Н), 7.30 (dd, J=9.5, 1Н), 7.17 (s, 1Н), 7.15 (s, 1Н), 6.54 (s, 1Н), 4.47 (m, 2H), 4.15 (m, 3H), 3.88 (m, 2H), 2.91 (m, 2H), 2.59 (m, 2H), 3.05 (m, 1Н), 2.46 (m, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.07 (m, 2H), 1.80 (m, 2H), 1.70 (m, 6H).
Пример 283 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 283
Пример 283а 4-фтор-2-(4-метил-6-(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 283а
Согласно примеру 148b, 290 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d и 209 мг 5-бром-1-метил-3-(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)пиразин-2(1Н)-она 221b подвергали взаимодействию с получением 283а в виде желтого твердого вещества (217 мг, 58%). MS: [M+H]+ 699.
Согласно примеру 148, 283а превращали в 283 в виде белого твердого вещества (84 мг, 43%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.15 (s, 1Н), 7.82 (s, 1Н), 7.65 (d, J=8, 1Н), 7.52 (s, 1Н), 7.39 (dd, J=10, 1Н), 7.31 (dd, J=10, 1Н), 6.96 (d, J=8.0, 1Н), 6.53 (s, 1Н), 4.87 (s, 1Н), 4.49 (m, 1Н), 4.42 (m, 1Н), 4.13 (m, 3H), 3.88 (m, 1Н), 3.54 (s, 3H), 3.41 (s, 2H), 3.30 (s, 1Н), 2.76 (d, J=5.5, 6H), 2.58 (m, 5H), 23.2 (s, 3H), 1.79 (s, 2H), 1.70 (s, 2H).
Пример 284 10-(3-{5-[(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 284
В герметичную пробирку емкостью 48 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 5-бром-1-метил-3-(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он (143 мг, 0.4 ммоль), 10-[2-(ацетоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил[1,3,2]-диоксаборолан-2-ил)-5-фторфенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]-додека-2(6),7-диен-9-он 230а (496 мг, 1.0 ммоль), Pd(PPh3)4 (23 мг, 0.020 ммоль) в 2 N Na2CO3 (4 мл) и ДМЭ (4 мл). После перемешивания реакционной смеси при 100°С в течение 1 часа ее очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 3:1) с получением 7% (18 мг) 284 MS (ESI+) m/z 611.5 (М+Н).
Пример 285 10-(3-[5-({5-этил-4H,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-a]пиразин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил}-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 285
Пример 285а 5-этил-2-нитро-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин 285а
В герметичную пробирку, снабженную магнитной мешалкой, помещали 1-(2-бромэтип)-5-(бромметил)-3-нитро-1H-пиразол 101с (2.8 г, 9 ммоль) 2М раствор этиламина в ТГФ (27 мл). Полученную смесь нагревали до 35°С в течение ночи. По прошествии указанного времени реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и к остатку добавляли воду (50 мл) и этилацетат (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 100% выхода (1.8 г) неочищенного 285а.
Пример 285b 5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-амин 285b
В бутыль для гидрирования Парра емкостью 500 мл помещали 285а (1.8 г, 9 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 500 мг в пересчете на сухую массу) и этанол (100 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом до давления 50 psi и встряхивали в течение 1 часа на устройстве для гидрирования Парра. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита 521, промывая смесью 1:1 хлористый метилен:метанол (500 мл). Полученный раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 71% выхода (1.7 г) неочищенного 285b.
Пример 285c 5-бром-3-(5-этил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 285с
Герметичную пробирку снабжали магнитной мешалкой и помещали в нее 285b (1.1 г, 6.4 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он 5 (1.7 г, 6.4 ммоль) и карбонат цезия (4.6 г, 14 ммоль) в 1,4-диоксане (64 мл). После барботирования указанного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (440 мг, 0.8 ммоль) и трис(дибензилиденацетон) дипалпадия(0) (400 мг, 0.5 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени добавляли воду (50 мл) и этилацетат (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этипацетатом (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя с градиентом хлористый метилен - 60:35:5 хлористый метилен:диэтиловый эфир:метанол, с получением 28% выхода (620 мг)285с.
Пример 285d 10-{3-[5-({5-этил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(ацетоксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикпо[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 285d
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 285с (190 мг, 0.5 ммоль), 230а (350 мг, 0.7 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (6.4 мл) и 1М водный карбонат натрия (1.6 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (31 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 15 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 60:35:5 хлористый метилен:диэтиловый эфир:метанол, с получением 35% выхода (120 мг) 285d.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 285d (120 мг, 0.2 ммоль), гидроксид лития (40 мг, 1 ммоль), ТГФ (1 мл), изопропанол (1 мл) и воду (2 мл). Смесь перемешивали при кг в течение 30 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия и фильтровали. Смесь концентрировали при пониженном давлении до почти полной степени высушивания, когда желаемый продукт выделяли и фильтровали. В результате промывания диэтиловым эфиром (10 мл) получали 78% выход (90 мг) 285. MS (ESI+) m/z 600.6 (М+Н).
Пример 286 2-(3-(5-(5-((2-(диметиламино)этил)(метил)амино)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 286
Согласно примеру 270, в результате взаимодействия 212а (550 мг, 1.20 ммоль) и 270d (428 мг, 1.00 ммоль) получали 8% выход (49 мг) 286 в виде беловатого твердого вещества: тк 122-123°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.45 (d, 1Н, J=2.0 Гц), 8.20 (s, 1Н), 7.69 (d, 1H, J=2.4 Гц), 7.31 (m, 2H), 7.17 (m, 3H), 4.83 (t, 1H, J=4.6 Гц), 4.32 (d, 2H, J=4.3 Гц), 4.06 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 2.96 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.83 (s, 3H), 2.78 (m, 2H), 2.54 (m, 1H), 2.32 (t, 2H, J=7.0 Гц), 2.14 (s, 6H), 1.80 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 631.3 (M+H).
Пример 287 5-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5H-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2Н)-ил)фенил)-1-метил-3-(5-(1-метилпирролидин-3-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1H)-он 287
Пример 287а 1-метил-3-(5-(1-метилпирролидин-3-ил)пиридин-2-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1H)-он 287а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 202а (481 мг, 1.33 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди-1,3,2-диоксаборолан (675 мг, 2.66 ммоль), ацетат калия (392 мг, 3.99 ммоль) и 1,4-диоксан (12 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Pd(dppf)Cl2 (97.0 мг, 0.133 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 3 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 287а с количественным выходом (548 мг) в виде коричневого полутвердого вещества. Неочищенную смесь применяли в следующей реакции без дополнительной очистки: MS (ESI+) m/z 411.2 (М+Н).
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали неочищенный 287а (274 мг, 0.668 ммоль, предположительно количественного выхода), 247а (420 мг, 0.865 ммоль), карбонат натрия (207 мг, 1.99 ммоль), воду (2 мл) и 1,4-диоксан (10 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (151 мг, 0.133 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 1 часа. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×50 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок растворяли в ТГФ (5 мл), воде (5 мл) и метаноле (5 мл). Добавляли моногидрат гидроксида лития (47 мг, 1.12 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли 90:10 хлористым метиленом/метанолом (100 мл) и водой (50 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали смесью 90:10 хлористый метилен/метанол (2×75 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 80:20 хлористый метилен/метанол) с получением 287 с выходом 27% (110 мг) в виде аморфного беловатого твердого вещества; тк 181-183°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.64 (d, J=2.0 Гц, 1Н), 8.49 (s, 1H), 8.07 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 7.54 (dd, J=8.5, 2.5 Гц, 1Н), 7.40 (d, J=2.0 Гц, 1Н), 7.34 (dd, J=9.0, 2.5 Гц, 1Н), 7.25 (d, J=8.5 Гц, 1Н), 7.19 (dd, J=9.5,2.5 Гц, 1Н), 4.86 (t, J=4.0 Гц, 1Н), 4.34-4.32 (m, 2H), 4.10-4.03 (m, 1H), 3.87-3.83 (m, 1Н), 3.59 (s, 3H), 3.25-3.20 (m, 1Н), 3.05-2.99 (m, 1Н), 2.91-2.87 (m, 1Н), 2.81-2.77 (m, 1Н), 2.75 (s, 2H), 2.60-2.58 (m, 2H), 2.55-2.50 (m, 2H), 2.49-2.32 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.22-2.17 (m, 1H), 1.71-1.67 (m, 1H), 1.23 (s, 6H); MS (ESI+) m/z 628.3 (M+H).
Пример 288 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 288
Согласно примеру 286, в результате реакции 212а (450 мг, 1.04 ммоль) и 287b (328 мг, 0.810 ммоль) получали 26% выход (130 мг) 288 в виде беловатого твердого вещества: тк 164-166°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.67 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.55 (s, 1H), 8.06 (d, 1H, J=2.4 Гц), 7.53 (dd, 1H, J=8.5, 2.4 Гц), 7.41 (d, 1H, J=2.4 Гц), 7.32 (dd, 1H, J=9.1, 2.1 Гц), 7.26 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.19 (dd, 1H, J=9.0, 2.0 Гц), 4.85 (t, 1H, J=4.2 Гц), 4.32 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.13 (m, 1H), 2.95 (m, 2H), 2.84 (m, 1H), 2.78 (m, 2H), 2.54 (m, 1H), 2.18 (q, 1H, J=4.0 Гц), 2.04 (m, 4H), 1.80 (m, 6H), 1.58 (m, 1Н); MS (ESI+) m/z 614.3 (M+H).
Пример 289 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-морфолинопиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидробензотиено[2,3-с]пиридин-1(2H)-он 289
Пример 289а 1-метил-3-(5-морфолинопиридин-2-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1H)-он 289а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и подводом азота, помещали 255с (610 мг, 1.70 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди-1,3,2-диоксаборолан (850 мг, 3.40 ммоль), ацетат калия (492 мг, 5.00 ммоль) и 1,4-диоксан (20 мл). После барботирования полученной суспензии азотом в течение 30 минут добавляли Pd(dppf)Cl2/CH2Cl2 (122 мг, 0.200 ммоль). К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 2 часов. По прошествии указанного времени смесь разбавляли этилацетатом (100 мл) и водой (75 мл) и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (50 мл) и объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл), и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали посредством измельчения со смесью гексаны/этилацетат (80:20, 25 мл) с получением 289а с количественным выходом (688 мг) в виде коричневого твердого вещества: тк 100-101°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.45 (d, 1H, J=1.5 Гц), 8.21 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.89 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.66 (d, 1H, J=6.5 Гц), 7.14 (d, 1H, J=9.0 Гц), 3.73 (t, 4H, J=4.5 Гц), 3.55 (s, 3H), 3.05 (t, 4H, J=4.5 Гц), 1.29 (s, 12H); MS (ESI+) m/z 413.0 (M+H).
Одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее 289а (485 мг, 0.415 ммоль), 247а (488 мг, 1.10 ммоль), карбонат натрия (264 мг, 2.50 ммоль), 1,4-диоксан (8 мл) и воду (2 мл). Указанную смесь дегазировали азотом в течение 30 минут. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладия (96 мг, 0.083 ммоль). После нагревания при 100°С в течение 2 часов реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между водой (40 мл) и хлористым метиленом (100 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×50 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок растворяли в метаноле (5 мл) и добавляли карбонат калия (745 мг, 5.40 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа реакционную смесь разделяли между водой (20 мл) и хлористым метиленом (20 мл). Слои разделяли и водную фазу экстрагировали хлористым метиленом (2×20 мл). Органические экстракты объединяли, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии (силикагель, от 0% до 15% метанол/хлористый метилен) с получением 289 с выходом 51% (130 мг) в виде желтого твердого вещества: тк 220-221°С; 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-d6) δ 8.55 (d, 1H, J=2.0 Гц), 8.37 (s, 1H), 7.87 (d, 1H, J=3.0 Гц), 7.34 (m, 3Н), 7.23 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.16 (dd, 1H, J=9.5, 3.0 Гц), 4.83 (t, 1H, J=4.0 Гц), 4.32 (m, 2H), 4.05 (m, 1H), 3.86 (m, 1H), 3.71 (t, 4H, J=4.5 Гц), 3.58 (s, 3Н), 3.01 (t, 4H, J=4.5 Гц), 2.98 (m, 1H), 2.87 (m, 1H), 2.77 (m, 2H), 2.54 (m, 1H), 1.79 (m, 4H); MS (ESI+) m/z 616.2 (M+H).
[0002] Пример 290 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(2S)-1-метилпирролидин-2-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 290
[0003] Пример 291 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(2R)-1-метилпирролидин-2-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 291
Соединения 290 и 291 представляют собой энантиомеры рацемата 243. Указанную рацемическую смесь 243 подвергали хиральному разделению на колонке Chiralpak AD, 4.6х50 мм, 3 мкм (подвижная фаза 45% изопропанол (м/0.1% триэтиламин)/55% CO2, скорость потока 5 мл/мин) при 40°С с получением индивидуальных энантиомеров, с первоначальным элюированием 290: MS (ESI+) m/z 611.5 (M+H) и затем элюирования примера 291: MS (ESI+) m/z 611.5 (M+H).
Пример 292 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 292
Пример 292а 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 292а
В сосуд для микроволновой реакции емкостью 10 мл, снабженный якорем магнитной мешалки, помещали 5-бром-1-метил-3-(6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 219а (250 мг, 0.64 ммоль), 10-[2-(ацетоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-5-фторфенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 230а (635 мг, 1.3 ммоль), Pd(PPh3)4 (37 мг, 0.03 ммоль) в 2 N Na2CO3 (2 мл) и 1,2-диметоксиэтан (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при 125°С в течение 10 минут, е очищали с помощью флэш-хроматографии (дихлорметан:метанол, 3:1) с получением 12% (50 мг) 292а в виде твердого вещества.
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 25 мл, снабженную якорем магнитной мешалки, помещали 292а (50 мг, 0.078 ммоль), LiOH⋅H2O (50 мг, 1.2 ммоль), ТГФ (2 мл), изо-PrOH (2 мл) и воду (2 мл). После перемешивания реакционной смеси при комнатной температуре в течение 2 часов ее разделяли между дихлорметаном (5 мл) и водой (5 мл) и органическую фазу экстрагировали дихлорметаном (5 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали водой (5 мл × 2) и солевым раствором (5 мл × 1), сушили (Na2SO4) и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в дихлорметане (3 мл). К раствору добавляли гексан (10 мл) и полученные осадки фильтровали с получением 12% выхода (6 мг) 292 MS (ESI+) m/z 639.5 (М+Н).
Пример 293 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-илокси)пиридин-2-ипамино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 293
Пример 293а 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(1-метилазетидин-3-илокси)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 293а
Смесь 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилазетидин-3-илокси)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 199f (200 мг, 0.55 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (270 мг, 0.56 ммоль), PdCl2(dppf) (40 мг, 0.055 ммоль), K3PO4 (150 мг), NaOAc (50 мг) в MeCN (8 мл) и воды (2 мл) нагревали при 110°С в герметичной пробирке в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-Hash с получением 293а (307 мг, 70%). MS: [М+Н]+ 641.
Смесь 293а (287 мг, 0.45 ммоль) и гидрата LiOH (188 мг, 4.5 ммоль) в изопропаноле (25 мл) и воды (5 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. И остаток очищали на преп-ВЭЖХ с получением 293 (60 мг, 25%). MS: [М+Н]+ 599. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.51 (s, 1Н), 7.81 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.16-7.14 (m, 1H), 7.11-7.09 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.79 (d, J=9.0, 1H), 4.76-4.72 (m, 1H), 4.53 (d, J=8.5, 1H), 4.34-4.25 (m, 2H), 4.20-4.13 (m, 3H), 3.95-3.84 (m, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.24-3.13 (m, 2H), 2.64-2.52 (m, 4H), 2.46 (s, 3H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.81-1.75 (m, 2H).
Пример 294 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 294
Пример 294а (2-{4,4-диметил-9-оксо-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-10-ип}-4-фтор-6-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)метилацетат 294а
Согласно примеру 150b, 282 с и (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 230а подвергали взаимодействию с получением 294а с выходом 81%. ЖХМС: (М+Н)+ 667
Согласно примеру 150 294а превращали в 294 с выходом 47%. ЖХМС: (М+Н)+ 625. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.20 (s, 1Н), 7.89 (s, 1Н), 7.87 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.36 (dd, J=10, 1H), 7.31 (dd, J=9.5, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.85 (m, 1H), 4.49 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 4.20 (m, 2H), 4.12 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 2.84 (d, J=10.5, 1H), 2.57 (s, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.38 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.93 (t, J=9, 2H), 1.66 (m, 4H), 1.22 (s, 6H).
Пример 295 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикпо[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 295
Пример 295а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикпо[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)метилацетат 295а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 282с (350 мг, 0.93 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 247b (448 мг, 0.93 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (76 мг, 0.09 ммоль), K3PO4.3Н2О (495 мг, 1.86 ммоль) и NaOAc (153 мг, 1.86 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 295а в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 47%). MS: [М+Н]+ 684.
К раствору 295а (250 мг, 0.37 ммоль) в пропан-2-оле (8 мл), тетрагидрофурана (8 мл) и воды (1 мл) добавляли LiOH (878 мг, 37 ммоль), раствор перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем его выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 295 в виде желтого твердого вещества (76 мг, 32%). MS: (M+H)+ 642. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 1.29 (d, 6Н), 1.94-2.02 (m, 2Н), 2.18 (d, 2H), 2,56-2.64 (m, 2 часов), 2.81 (s, 2Н), 2.94-3.03 (m, 5Н), 3.08-3.19 (m, 3H), 3.66 (d, 1Н), 3.74 (s, 3Н), 3.92-3.97 (m, 1H), 4.14-4.19 (m, 1H), 4.50 (s, 1H), 7.21-7.28 (m, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.95(d, 1H), 8.13 (s, 1H).
Пример 296 10-{3-[5-({5-[2-(диметиламино)этокси]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил}-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 296
Пример 296а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-[5-({5-[2-(диметиламино)этокси]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-4-фторфенил)метилацетат 296а
Смесь 5-бром-3-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 268с (244 мг, 0.67 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 247b (342 мг, 0.67 ммоль), PdCl2(dppf) (59 мг, 0.08 ммоль), K3PO4 (150 мг) и NaOAc (50 мг) в MeCN (6 мл), и воды (2 мл) нагревали при 110°С в герметичной пробирке в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 296а (287 мг, 60%). MS: [М+Н]+ 674.
Смесь 29ба (186 мг, 0.28 ммоль) и гидрата LiOH (116 мг, 2.8 ммоль) в изопропаноле (25 мл), и воды (5 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на преп-ВЭЖХ с получением 296 (126 мг, 71%). MS: [М+Н]+ 632.
Пример 297 2-(3-(5-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 297
Пример 297а 2-(5-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-4-фтор-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензипацетат 297а
Смесь 5-бром-3-(5-(2-(диметиламино)этокси)пиридин-2-ипамино)-1-метилпиридин-2(1Н)-она 268с (205 мг, 0.56 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ип)бензилацетата 210d (270 мг, 0.56 ммоль), PdCl2(dppf) (51 мг, 0.07 ммоль), K3PO4 (100 мг) и NaOAc (40 мг) в MeCN (6 мл), и воды (2 мл) нагревали при 110°С в герметичной пробирке в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 297а (206 мг, 50%). MS: [М+Н]+ 643.
Смесь 297а (186 мг, 0.29 ммоль) и гидрата LiOH (122 мг, 2.9 ммоль) в изопропаноле (15 мл), и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (20 мл × 2). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 297 (84 мг, 48%). MS: [М+Н]+ 601. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.53 (d, J=2.5, 1H), 7.94 (d, J=3.0,1H), 7.80 (s, 1H), 7.47 (d, J=2.0,1H), 7.23-7.21 (m, 1H), 7.16-7.14 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.81 (d, J=9.0, 1H), 4.55 (d, J=10.5, 1H), 4.40-4.26 (m, 2H), 4.22-4.15 (m, 3H), 4.15-4.04 (m, 2H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.75-2.73 (m, 2H), 2.62-2.54 (m, 4H), 2.37 (s, 6H), 1.92-1.86 (m, 2H), 1.82-1.76 (m, 2H).
Пример 298 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил]амино}-5-оксопиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 298
Пример 298а трет-бутил-3-(4-аминофенил)азетидин-1-карбоксилат 298а
Смесь трет-бутил-3-иодазетидин-1-карбоксилата (1 г, 3.53 ммоль), 4-аминофенилбороновой кислоты (630 мг, 4.59 ммоль), NiI2 (66 мг, 0.212 ммоль), NaHMDS (1.94 г, 10.6 ммоль), (1R,2S)-2-аминоцикпогбксанола (24 мг, 0.212 ммоль) в изопропаноле (8 мл) перемешивали при 150°С в микроволновом реакторе в течение 2 часов. Затем ее выпаривали, и остаток растворяли водой и этилацетатом. Водную фазу отделяли и экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии с получением 298а (360 мг, 40%). MS: [M+H]+ 249.
Пример 298b трет-бутил-3-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)азетидин-1-карбоксилат 298b
Смесь 298а (500 мг, 2.02 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она (536 мг, 2.02 ммоль) и триэтиламина (0.6 мл, 4.04 ммоль) в изопропаноле (10 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 4 дней. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 298b (690 мг, 66%). MS: [M+H]+ 435.
Пример 298с гидрохлорид 3-(4-(азетидин-3-ил)фениламино)-5-бром-1-метилпиразин-2(1Н)-она 298с
Смесь 298b (690 мг, 1.6 ммоль) и HCl/1,4-диоксана (8М, 8 мл) в метаноле (30 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 298с (100 мг, 17%). MS:[M+H]+ 335.
Пример 298d 5-бром-1-метил-3-(4-(1-метилазетидин-3-ил)фениламино)пиразин-2(1H)-он 298d
Смесь 298с (100 мг, 0.24 ммоль), NaBH(OAc)3 (100 мг, 0.48 ммоль), НСНО (10 мл) и уксусной кислоты (1 мл) в метаноле (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток нейтрализовали раствором NaHCO3 до достижения рН 8. Смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные экстракты сушили над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении с получением 298d (100 мг), который применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: [M+H]+ 349.
Пример 298е (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4-метил-6-{[4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)метилацетат 298е
В герметичную пробирку помещали смесь (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 247b (100 мг, 0.19 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(4-(1-метилазетидин-3-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-она 298d (68 мг, 0.19 ммоль), PdCl2(dppf) (14 мг, 0.019 ммоль), K3PO4 (60 мг) и NaOAc (30 мг) в MeCN (5 мл), и воду (1 мл). Ее нагревали при 110°С в течение 2 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на обращенно-фазовой Combi-flash с получением 298е (100 мг, 82%). MS: [M+H]+ 656.
Смесь 298е (100 мг, 0.16 ммоль) и гидрата LiOH (66 мг, 1.6 ммоль) в изопропаноле (10 мл) и воды (2 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении. И остаток очищали на преп.-ВЭЖХ с получением 298 (60 мг, 63%). MS: [М+Н]+ 614. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.29 (s, 1Н), 7.72 (d, J=7.5, 2H), 7.55 (s, 1H), 7.45-7.43 (m, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.01-6.99 (m, 1H), 4.56 (d, J=11.5, 1H), 4.41-4.30 (m, 2H), 4.10-4.05 (m, 1H), 3.90-3.85 (m, 1H), 3.82-3.72 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.22-3.10 (m, 2H), 3.04-2.97 (m, 1H), 2.93-2.88 (m, 1H), 2.79 (s, 2H), 2.57-2.50 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.27 (s, 6H).
Пример 299 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 299
Согласно примеру 121b, подвергали взаимодействию соединение 247b (256 мг, 0.5 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(5-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 264е (210 мг, 0.5 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (2 мл, 2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (29 мг, 0.025 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл). Реакционную смесь нагревали при 130°С в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 9:1 хлористый метилен/метанол) получали смесь соединения 299а и 299 в виде желтого масла.
С указанного выше остатка (0.5 ммоль) снимали защиту с применением той же процедуры, как в 121, за исключением применения смеси ТГФ (2 мл), воды (1 мл) и изопропанола (2 мл) и моногидрата гидроксида лития (105 мг, 2.5 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (ΝΗ-силикагель, этилацетат/гексаны) получали 12% выход (40 мг) 299 в виде бледно-желтого вещества: MS (ESI+) m/z 684.5 (М+Н).
Пример 300 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 300
Пример 300а 5-бром-3-(2-метоксипиримидин-4-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 300а
Согласно примеру 121а, подвергали взаимодействию 2-метоксипиримидин-4-амин (0.625 г, 5 ммоль), 3,5-дибром-1-метил-1Н-пиридин-2-он (1.34 г, 5 ммоль), карбонат цезия (4.88 г, 15 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0.465 г, 0.5 ммоль), Ксантфос (0.58 г, 1 ммоль) и 1,4-диоксан (50 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 24 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, и фильтровали через подложку из Целита 521. Фильтрационный остаток промывали смесью 9:1 хлористый метилен/метанол (2X25 мл), и объединенные фильтраты концентрировали досуха. Остаток растворяли в хлористом метилене, добавляли диэтиловый эфир и полученный осадок фильтровали с получением а количественного выхода (1.57 г) 300а в виде зеленого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 313.1 (М+Н).
Пример 300b 10-[5-фтор-2-(ацетоксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 300b
Согласно примеру 121b, подвергали взаимодействию 300а (242 мг, 0.5 ммоль), 230а (210 мг, 0.5 ммоль), 1М раствор карбоната натрия (2 мл, 2 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия(0) (29 мг, 0.025 ммоль) и 1,2-диметоксиэтан (5 мл). Реакционную смесь нагревали при 130°C в течение 15 минут в микроволновом реакторе. В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (силикагель, 60:35:5 хлористый метилен/диэтиловый эфир/метанол) получали 67% выход (200 мг) 300b в виде желтого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 602.4 (М+Н).
Согласно примеру 121, подвергали взаимодействию смесь ТГФ (2 мл), воды (1 мл) и изопропанола (2 мл), 300b (200 мг, 0.33 ммоль), и моногидрата гидроксида лития (105 мг, 2.5 ммоль). В результате выделения и колоночной флэш-хроматографии (ΝΗ-силикагель. Этилацетат/Гексаны) получали 29% выход (55 мг) соединения 300 в виде белого твердого вещества: MS (ESI+) m/z 559.4 (М+Н).
Пример 301 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино [1,2-а]индол-1(2Н)-он 301
Пример 301а трет-бутил-4-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 301а
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат (2.00 г, 7.18 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (2.87 г, 10.77 ммоль), Pd2(dba)3 (657 мг, 0.718 ммоль), Ксантфос (665 мг, 1.15 ммоль), Cs2CO3 (7.72 г, 23.7 ммоль) и диоксан (40 мл). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 40 часов. Добавляли этилацетат (200 мл) и полученную смесь промывали водой (30 мл×3), солевым раствором (30 мл×1). сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. Добавляли смесь хлористый метилен/диэтиловый эфир (1:2,5 мл), с последующей обработкой ультразвуком, осадок фильтровали с получением 301а, желтые твердые вещества, 1.946 г (58%).
Пример 301b трет-бутил-4-(6-(5-(2-(ацетоксиметил)-3-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино [1,2-а]индол-2(1Н)-ил)фенил)-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 301b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитным якорем, добавляли 301а (500 мг, 1.077 ммоль), 2-(2-(гидроксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 114а (546 мг, 1.292 ммоль), Pd(PPh3)4 (62 мг, 0.054 ммоль), водный раствор Na2CO3 (1.0 N, 3.55 мл, 3.55 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4.3 мл). Смесь подвергали взаимодействию в микроволновом реакторе при 130°С в течение 10 минут. Добавляли хлористый метилен (200 мл) и полученную смесь промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате колоночной хроматографии на силикагеле (метанол:хлористый метилен=5:95) получали 301b.
В круглодонную колбу, снабженную магнитным якорем, добавляли 301b, хлористый метилен (10 мл). Раствор охлаждали до 0°С на ледяной бане. Добавляли ТФУ (1 мл) и полученный раствор перемешивали в течение ночи. Все летучие вещества удаляли в вакууме, и в бутыль добавляли ТГФ (5 мл), изопропанол (5 мл), H2O (5 мл), моногидрат LiOH (300 мг). Полученную смесь перемешивали при кт в течение 1 часа. Весь растворитель удаляли в вакууме, и полученный осадок добавляли к хлористому метилену (200 мл), раствор промывали водой (3×30 мл), солевым раствором (30 мл), сушили над MgSO4, фильтровали и растворитель удаляли в вакууме. В результате применения колонки с силикагелей (метанол: хлористый метилен - 10:90), с последующей преп.-ВЭЖХ, получали 301 в виде желтого твердого вещества, 9 мг. MS (ESI+) m/z 580.4 (М+Н).
Пример 302 10-(3-{5-[(1-этил-5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 302
Пример 302а 5-бром-3-(1-этил-5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 302а
Герметичную пробирку снабжали магнитной мешалкой и помещали в нее 1-этил-5-метил-1Н-пиразол-3-амин (870 мг, 7 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.9 г, 7 ммоль) и карбонат цезия (5 г, 15 ммоль) в 1,4-диоксане (69 мл). После барботирования указанного раствора азотом в течение 30 минут, добавляли Ксантфос (480 мг, 0.8 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладия(0) (450 мг, 0.5 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 16 часов. По прошествии указанного времени добавляли воду (50 мл) и этилацетат (50 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (100 мл) и сушили над сульфатом натрия. Смесь концентрировали при пониженном давлении до почти полной степени высушивания, затем желаемый продукт выделяли и фильтровали. В результате промывания диэтиловым эфиром (10 мл) получали 40% выход (870 мг) 302а.
Пример 302b 10-(3-{5-[(1-этил-5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(ацетоксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 302b
В пробирку для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали 302а (170 мг, 0.5 ммоль), 230а (350 мг, 0.7 ммоль), 1,2-диметоксиэтан (4 мл) и 1M водный карбонатом натрия (1.6 мл). После барботирования N2 в течение 15 минут добавляли Pd(PPh3)4 (31 мг, 0.03 ммоль). Смесь нагревали в микроволновом реакторе до 130°С в течение 15 минут. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя градиентом хлористый метилен - 60:35:5 хлористый метилен:диэтиловый эфир:метанол, с получением 60% выхода (190 мг) 302b.
В круглодонную колбу емкостью 25 мл с магнитной мешалкой, помещали 302b (190 мг, 0.3 ммоль), гидроксид лития (70 мг, 1.6 ммоль), ТГФ (1.6 мл), изопропанол (1.6 мл) и воду (3.2 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. По прошествии указанного времени добавляли этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Отделенный водный слой экстрагировали этилацетатом (2×5 мл). Объединенные органические вещества промывали солевым раствором (10 мл), сушили над сульфатом натрия и фильтровали. Смесь концентрировали при пониженном давлении до почти полной степени высушивания, затем желаемый продукт выделяли и фильтровали. В результате промывания диэтиловым эфиром (10 мл) получали 51% выход (90 мг) 302. MS (ESI+) m/z 559.4 (M+Н).
Пример 303 5-[5-фтор-2-(гидооксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил)амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 303
Согласно примеру 299, соединение 212b превращали в 303. MS (ESI+) m/z 670.3 (М+Н).
Пример 304 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 304
К раствору (2-{4,4-диметил-9-оксо-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-10-ил}-4-фтор-6-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил)метилацетата (200 мг, 0.28 ммоль) в смеет ТРФ/изоРА/Н2О (6 мл/6 мл/2 мл) при комнатной температуре при перемешивании добавляли LiOH (70 мг, 2.9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часов. Затем добавляли 20 мл Н2О и смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенные органические слои сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое далее очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 304 в виде белого твердого вещества (100 мг, 53%). ЖХМС: [М+Н]+ 668. 1Н ЯМР (500 МГц, DMSO): δ 1.23 (s, 6H), 2.37-2.39 (m, 5H), 2.53-2.57 (m, 2H), 3.07 (s, 4H), 3.43-3.45 (m, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.85-3.87 (m, 1H), 4.16-1.19 (m, 3Н), 4.32 (d, J=6.0 Гц, 2H), 4.45.4.50 (m, 2H), 4.54-4.58 (m, 2H), 4.86 (s, 1H), 6.47-6.51 (m, 1H), 7.18-7.25 (m, 2H), 7.34-7.39 (m, 3H), 7.83.7.86 (m, 1H), 8.35-8.37 (m, IH), 8.53-8.56 (m, 1H).
Пример 305 5-[2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-6-({4-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 305
Пример 305а {2-[4-метил-6-({4-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил)фенил}метилацетат 305а
Согласно примеру 136е, в результате взаимодействия 5-бром-1-метил-3-(4-(1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-она 214b и (2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 111a получали 305а с выходом 68%. ЖХМС: (М+Н)+ 694.
Согласно примеру 136,305а превращали в 305 с выходом 51%. ЖХМС: (М+Н)+ 652. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.18 (s, 1Н), 7.88 (s, 1Н), 7.86 (s, 1H), 7.52 (d, J=7.5, 1H), 7.46 (t, J=7.5, 1Н), 7.38 (s, 1Н), 7.17 (s, 1Н), 7.32 (d, J=7.5, 1Н), 7.15 (d, J=8.5, 2H), 4.78 (m, 1H), 4.52 (m, 3H), 4.43 (m, 3H), 4.01 (m, 1H), 3.87 (m, 1H), 3.54 (s, 3H), 3.37 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.86 (m, 1H), 2.78 (m, 4H), 2.43 (m, 2H), 1.82 (s, 6H), 1.72 (m, 2H), 1.60 (m, 2H).
Пример 306 10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридазин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 306
Пример 306b 10-[2-(ацетоксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридазин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 306b
Стадия 1: В колбу высокого давления помещали 5-хлор-1-метил-3-(пиримидин-4-ипамино)пиридазин-2(1Н)-он (300 мг, 1.26 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-окгаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолан) (577 мг, 2.27 ммоль), ацетат калия (247 мг, 2.32 ммоль), X-Phos (2-жициклогексинфосфино-2',4',6'-триизопропилдифенил) (120 мг, 20 моль%), и трис(дибензилиденацбтон)дипалладий(0) (115 мг, 10 моль%) Колбу вакуумировали и наполняли N2 3X, добавляли диоксан (12 мл), сосуд герметизировали и нагревали до 90°С в течение 2 часов. Реакционной смеси позволяли охладиться, затем разбавляли этилацетатом и фильтровали через подложку из Целита, и концентрировали при пониженном давлении, с получением 306а который использовали непосредственно на следующей стадии.
Стадия 2: 306а растворяли в диоксане (7 мл) и переносили в колбу высокого давления, содержащую 189а (448 мг, 1.0 ммоль), 10% К2СО3/вода (2.5 мл) и бис(ди-трет-бутил(4-диметиламинофенил)фосфин)дихлорпалладий(II) (45 мг, 5 моль%). Указанную колбу герметизировали и нагревали до 100°С в течение ночи. Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом и водой, разделяли, промывали солевым раствором 3X, сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии: 24 г силикагеля ISCO, элюируя смесью 50-100% этилацетат/гексаны, с получением 306b (250 мг, 35% выхода за 2 стадии).
Согласно примеру 119, подвергали взаимодействию 306b (250 мг, 0.44 ммоль), 1N LiOH (2.2 мл), ТГФ (4.5 мл) и изопропанол (4.5 мл). Продукт измельчали с диэтиловым эфиром и сушили в вакууме с получением 306 (185 мг, 80% выход) в виде беловатого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 529.3 (М+Н).
Пример 307 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 307.
Пример 307а 6-хлор-2-метил-4-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он 307а
Согласно примеру 119b, подвергали взаимодействию 4-бром-6-хлор-2-метилпиридазин-3(2Н)-он (1.5 г, 6.7 ммоль), 5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламин (1.3 г, 6.7 ммоль), карбонат цезия (4.8 г, 39.4 ммоль) и Ксантфос (330 мг, 8.5 моль%), диоксан (50 мл), и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (307 мг, 5 моль%). Очищали посредством колоночной хроматографии: 40 г силикагеля ISCO, 50-100% этилацетат/гексаны, затем 0-10% метанол, с получением 307а (1.2 г, 53%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Пример 307c 2-(2-(ацетоксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпипсразин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 307с
Согласно примеру 306b, 307а (422 мг, 1.26 ммоль) превращали в бороновое промежуточное соединение 307b, которое сочетали в условиях Сузуки с 109а (420 мг, 1.0 ммоль). Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии: 24 г силикагеля ISCO, 50-100% этилацетат/гексаны, затем 0-10% МеОН, с получением 307с (285 мг, 36% выход).
Согласно примеру 119, подвергали взаимодействию 307 с (285 мг, 0.45 ммоль), 1N LiOH (2.2 мл), ТГФ (5 мл) и изопропанол (5 мл), измельчали с этилацетатом и сушили в вакууме с получением 307 (115 мг, 43% выхода) в виде немного желтого твердого вещества. MS (ESI+) m/z 595.6 (М+Н).
Пример 308 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпирролидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 308
Согласно примеру 270, в результате реакции бороната 212b и бромида 202а получали 308. MS (ESI+) m/z 614.3 (М+Н).
Пример 309 5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-3-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,2-дигидропиридин-2-он 309
Согласно примеру 270, в результате реакции бороната 113а и бромида 110 с получали 309. MS (ESI+) m/z 541.2 (М+Н).
Пример 310 3-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-он 310
Согласно примеру 270, в результате реакции бороната 113а и бромида 138с получали 310. MS (ESI+) m/z 608.3 (М+Н).
Пример 311 10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 311
Пример 311a (2-{4,4-диметил-9-оксо-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-10-ил}-6-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил)метилацетат 311а
В герметичную пробирку помещали смесь (2-{4,4-диметил-9-оксо-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-10-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата (335 мг, 0.7 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 188е (294 мг, 0.7 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (33 мг, 0.04 ммоль), K3PO4.3H2O (372 мг, 1.4 ммоль) и NaOAc (115 мг, 1.4 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и повторно наполняли N2 Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/метанол, с получением 311а в виде желтого твердого вещества (208 мг, 43%). MS: [М+Н]+ 696.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 311а (200 мг, 0.29 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (70 мг, 2.9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часов. Затем добавляли 20 мл воды, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 311 в виде белого твердого вещества (100 мг, 53%). ЖХМС: [М+Н]+ 635. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.22 (s, 6H), 2.37-2.42 (m, 6H), 2.56 (d, J=11.0 Гц, 1Н), 3.06 (d, J=4.5 Гц, 4H), 3.41-3.44 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.85.3.90 (m, 1H), 4.08-4.21 (m, 3H), 4.35 (d, J=4.5 Гц, 2H), 4.45-4.47 (m, 2Н), 4.54-4.57 (m, 2H), 4.84-4.86 (m, 1H), 6.45 (s, 1Н), 7.22 (d, J=9.0 Гц, 1Н), 7.31-7.47 (m, 4H), 7.86 (d, J=3.0 Гц, 1Н), 8.37 (s, 1Н), 8.56 (d, J=2.0 Гц, 1Н).
Пример 312 10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил)амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 312
Пример 312а (2- {4,4-димстил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,7]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил)метилацетат 312а
Согласно примеру 136е, 5-бром-1-метил-3-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он (24-7) и (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 131а превращали в 312а с выходом 63%. ЖХМС: (М+Н)+ 709.
Согласно примеру 136, 312а превращали в 312 с выходом 60%. ЖХМС: (М+Н)+ 667. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 8.52 (s, 1H), 7.93 (m, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.42 (m, 3H), 7.30 (s, 1H), 7.05 (m, 1H), 4.73 (t, J=6.5,2H), 4.64 (t, J=6, 2H), 4.56 (m, 2H), 4.14 (m, 1H), 3.98 (m, 1H), 3.71 (a, 3H), 3.67 (m, 1H), 3.16 (m, 4H), 3.11 (m, 1H), 2.96 (m, 1H), 2.81 (s, 2H), 2.60 (m, 2H), 2.53 (s, 4H), 1.29 (d, J=3,6H).
Пример 313 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(2S)-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрипикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 313
Пример 314 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(2R)-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 314
Соединения 313 и 314 представляют собой энантиомеры рацемата 288. Рацемическую смесь 288 подвергали хиральному разделению на колонке Chiralpak AD, 4.6×50 mm, 3 мкм (подвижная фаза 55% изопропанол (м/0.1%триэтиламин)/45% CO2, скорость потока 5 мл/мин) при 40°С с получением отдельных энантиомеров, первоначально элюируя 313, и затем элюируя 314.
Пример 315 5-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 315
Пример 315а [2-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ип)-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил} фенил]метилацетат 315а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 130 с (400 мг, 1.06 ммоль), (2- {б-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 111a (512 мг, 1.06 ммодь), Pd(dppf)Cl2 (87 мг, 0.1 ммоль), K3PO4.3H2O (566 мг, 2.12 ммоль) и NaOAc (174 мг, 2.12 ммоль) в CH3CN (25 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 10:1 хлористый метилен/метанол, с получением 315а в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 43%). MS: [М+Н]+ 652.
К раствору 315а (250 мг, 0.38 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (1.5 мл) добавляли LiOH (922 мг, 38 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали, и остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-Hash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в смеси 1:4 вода/CH3CN, с получением 315 в виде белого твердого вещества (37 мг, 16%). MS: (M+H)+ 610. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 1.74-1.84 (m, 4H), 1.87-1.95 (m, 4H), 2.13-2.18 (t, J=11.5, 2H), 2.32 (s, 3 часов), 2.52-2.61(m, 3H), 2.85-2.87 (t, J=4.5, 2H), 2.92-3.06 (m, 4H), 3.71(s, 3H), 3.99-4.03 (m, 1H), 4.12-4.17 (m, 1H), 4.52-4.59 (m, 2H), 7.03 (d, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.56 (d, 1H), 8.08 (s, 1H), 8.62 (s, 1H).
Пример 316 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил)амино)-1,2-дигидропиразин-2-он 316
Пример 316а 4-фтор-2-(4-метил-6-(4-(1-метилазетидин-3-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 316а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(4-(1-метилазетидин-3-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-она 298с (200 мг, 0.58 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (280 мг, 0.58 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (40 мг, 0.06 ммоль), K3PO4.3H2O (300 мг, 1.16 ммоль) и NaOAc (100 мг, 1.16 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 3 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 216а в виде коричневого твердого вещества (150 мг, 42%). MS: [М+Н]+ 625.
К раствору 316а (130 мг, 0.21 ммоль) в пропан-2-оле (7 мл), тетрагидрофурана (7 мл) и воды (1 мл) добавляли LiOH (500 мг, 21 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 316 в виде белого твердого вещества (14 мг, 12%). MS: (M+H)+ 583. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 1.77.1.81 (m, 2H), 1.89-1.95 (m, 2H), 2.46 (s, 3H), 2.55 (t, J=6, 2 часов), 2.60.2.68 (m, 2H), 3.64 (a, 3H), 3.73-3.77 (m, 1H), 3.85(s, 2H), 4.16-4.27 (m, 1H), 4.46-4.59 (m, 2H), 6.72 (s, 1H), 7.19-7.21 (d, 1H), 7.8-7.30 (d, 2H), 7.31-7.41 (dd, 2H), 7.78 (d, 2H).
Пример 317 10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 317
Пример 317а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-(1-метил-5- {[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)метилацетат 317а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагндропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 252а (275 мг, 0.7 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикдо[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 131а (356 мг, 0.7 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (59 мг, 0.07 ммоль), K3PO4.3H2O (317 мг, 1.4 ммоль) и NaOAc (118 мг, 1.4 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/метанол, с получением 317а в виде желтого твердого вещества (300 мг, 61%). MS:[M+H]+ 669.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 317а (300 мг, 0.5 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (70 мг, 2.9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часа. Затем добавляли 20 мл Н2О и смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 317 в виде белого твердого вещества (93 мг, 28%). MS: [M+H]+ 627. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.24 (s, 6H), 2.65 (s, 1H), 2.75 (d, J=8.5 Гц, 4H), 2.88-2.91 (m, 1H), 3.00-3.03 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.67 (t, J=6.0 Гц, 1H), 3.84-3.89 (m, 1H), 3.93 (t, J=6.0 Гц, 2H), 4.00-4.05 (m, 1H), 4.34-4.36 (m, 2H), 4.49 (t, J=6.0 Гц, 2H), 4.59 (t, J=7.0 Гц, 2H), 4.83 (d, J=5.0 Гц, 1H), 5.91 (s, 1H), 7.24 (d, J=2.0 Гц, 1H), 7.24-7.35 (m, 2H), 7.45 (t, J=7.0 Гц, 1H), 7.98 (d, J=2.0 Гц, 1H), 8.13 (s, 1H).
Пример 318 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 318
Пример 318а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10- азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(1-метил-5-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)метилацетат 318а
В герметичную пробирку помещали смесь (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ид)фенил)метилацетата 247b (300 мг, 0.584 ммоль), 5-бром-1-метил-3-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 252а (222 мг, 0.584 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (48 мг, 0.0584 ммоль), K3PO4.3H2O (311 мг, 1.168 ммоль) и NaOAc (96 мг, 1.168 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/ метанол, с получением 318а в виде желтого твердого вещества (304 мг, 74%). MS: [M+H]+ 687.
К раствору 318а (300 мг, 0.44 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (6 мл/6 мл/2 мл) при комнатной температуре добавляли LiOH (100 мг, 4.16 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часа. Затем добавляли 20 мл Н2О и смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 318 в виде белого твердого вещества (68.7 мг, 52.3%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.17(s, 1H), 7.98 (d, J=6 Гц, 1Н), 7.30 (t, 2H), 7.17 (t, 1H), 5.91 (s, 1H), 4.88 (t, 1H), 4.58 (t, 2H), 4.48 (t, 2H), 4.32 (d, 1H), 4.05 (t, 1H), 4.02 (m, 3H), 3.94 (m, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.30 (s, 1H), 3.02 (m, 1H), 2.88 (s, 4Н), 2.73 (s, 2H), 1.20 (s, 6Н).
Пример 319 2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 319
Пример 319а [2-(1-метил-5-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]метилацетат 319а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 252а (265 мг, 0.7 ммоль), 2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 114а (320 мг, 0.7 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (56 мг, 0.07 ммоль), K3PO4.3H2O (367 мг, 1.4 ммоль) и NaOAc (113 мг, 1.4 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/ метанол, с получением 319а в виде желтого твердого вещества (200 мг, 38%). MS: [M+H]+ 638.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 319а (150 мг, 0.24 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (70 мг, 2.9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часа. Затем добавляли 20 мл воды, и смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 319 в виде белого твердого вещества (50 мг, 28%). MS: [M+H]+ 596. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.23 (t, J=7.0 Гц, 2H), 1.70.2.08 (m, 5H), 2.74-2.76 (m, 2H), 3.50 (s, 2H), 3.57 (s, 3H), 3.67 (s, 1H), 3.91-3.94 (m, 3H), 4.03-4.16 (m, 4H), 4.35 (s, 2H), 4.48-4.50 (m, 2H), 4.58-4.60 (m, 2H), 4.61 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 6.51 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.30.7.34 (m, 2H), 7.44-7.47 (m, 1H), 7.98 (d, J=2.0 Гц, 1H), 8.12 (s, 1H).
Пример 320 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 320
Пример 320а N-метил(1-метил-3-нитро-1H-пиразол-5-ил)метанамин 320а
К перемешиваему раствору MeNH2 (30% масс. в Н2О) (2.5 г, 20 ммоль) в ацетоне (10 мл) при 0°С (ледяная баня) добавляли К2СО3 (415 мг, 3 ммоль), с последующим добавлением по каплям раствора 5-(бромметил)-1-метил-3-нитро-1Н-пиразола (220 мг, 1 ммоль) в ацетоне (5 мл). Затем реакционную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов. Растворитель удаляли, и остаток экстрагировали хлористым метиленом (15 мл × 3), сушили над Na2SO4 и концентрировали с получением 320а в виде желтого масла (170 мг, 99%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС: (М+Н)+ 171.
Пример 320b N-метил-N-((1-метил-3-нитро-1Н-пиразол-5-ил)метил)оксетан-3-амин 320b
К смеси 320а (170 мг, 1 ммоль) в метаноле (4 мл) при комнатной температуре в защитной атмосфере азота добавляли ZnCl2 (1 ммоль/л в диэтиловом эфире) (2 мл, 2 ммоль) и оксетан-3-он (150 мг, 2 ммоль), с последующим добавлением NaBH3CN (130 мг, 2 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 50°С и перемешивали в течение 3 часов. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры и удаляли растворитель. Остаток очищали на флэш-колонке, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 320b в виде желтого твердого вещества (180 мг, 80%, две стадии). ЖХМС: (М+Н)+ 227. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 6.99 (s, 1Н), 4.52 (t, J=6.5, 2H), 4.42 (t, J=6, 2H), 3.98 (9, 3Н), 3.63 (m, 1H), 3.50 (s, 2H), 2.03 (s, 3H).
Пример 320c 1-метил-5-((метил(оксетан-3-ил)амино)метил)-1Н-пиразол-3-амин 320с
К раствору 320b (1.8 г, 7.96 ммоль) в этаноле (20 мл) и воды (20 мл), добавляли NH4Cl (3.3 г, 63.6 ммоль) и железный порошок (1.80 г, 31.8 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 70°С в течение 2 часов. После смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат выпаривали, и остаток экстрагировали хлористым метиленом (30 мл × 3), сушили Na2SO4 и концентрировали с получением неочищенного продукта, который очищали на флэш-колонке, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, содержащей 0.5% триэтиламин, с получением 320с в виде желтого масла (1.3 г, 83%). ЖХМС: (М+Н)+ 197.
Пример 320d 5-бром-1-метил-3-(1-метил-5-((метил(оксетан-3-ил)амино)метил)-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 320d
Согласно примеру 136d, 320с и 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он подвергали взаимодействию с получением 320d с выходом 63%. ЖХМС: (М+Н)+ 383. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.35 (s, 1H), 7.99 (d, J=2.5, 1H), 7.36 (d, J=2.5, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.50 (t, J=7, 2H), 4.40 (t, J=6.5, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.57 (m, 1H), 3.49 (a, 3H), 3.35 (s, 2H), 2.01 (s, 3H).
Пример 320е 4-фтор-2-(1-метил-5-(1-метил-5-((метил(оксетан-3-ил)амино)метил)-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,б-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 320е
Согласно примеру 136е, 210d превращали в 320е с выходом 71%.
Согласно примеру 136, 320е превращали в 320 с выходом 66%. ЖХМС: (М+Н)+ 616. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.07 (s, 1Н), 7.97 (s, 1H), 7.30 (m, 2H), 7.17 (d, J=9.5, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.88 (m, 1H), 4.50 (t, J=6.5, 2H), 4.40 (t, J=5.5, 2H), 4.32 (s, 2H), 4.14 (m, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.57 (m, 4H), 2.59 (m, 2H), 2.47 (m, 2H), 2.00 (s, 3H), 1.80 (m, 2H), 1.70 (m, 2H).
Пример 321 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ил)амино]метил}-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 321
Пример 321a (2-{4,4-диметил-9-оксо-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-10-ил}-4-фтор-6-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ил)амино]метил}-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)метил 321а
Согласно примеру 136e, 5-бром-1-метил-3-(1-метил-5-((метил(оксетан-3-ил)амино)метил)-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 320d и 230а подвергали взаимодействию с получением 321а с выходом 65%. ЖХМС: (М+Н)+ 672.
Согласно примеру 136, 321а превращали в 321 с выходом 59%. ЖХМС: (М+Н)+ 630. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.07 (s, 1H), 7.97 (d, J=2.5, 1H), 7.33 (d, J=2.5, 1H), 7.31 (d, J=3,1H), 7.29 (d, J=2, 1H), 7.17 (dd, J=9.5, 1H), 6.51 (s, 1H), 6.02 (s, 1H), 4.89 (t, J=4.5, 1H), 4.50 (t, J=6.5, 2H), 4.40 (t, J=6, 2H), 4.33 (d, J=4.5, 2H), 4.21 (m, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.88 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.57 (m, 4H), 2.57 (s, 2H), 2.42 (s, 2H), 2.00 (s, 3H), 1.22 (s, 6H).
Пример 322 10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ил)амино]метил}-1H-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 322
Пример 322а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикпо[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ип)амино]метил}-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил)метилацетат 322а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(1-метил-5-((метил(оксетан-3-ип)амино)метил)-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-она 320d (250 мг, 0.65 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-4-фтор-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 247b (334 мг, 0.65 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (55 мг, 0.07 ммоль), K3PO4.3H2O (345 мг, 1.3 ммоль) и NaOAc (105 мг, 1.3 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/метанол, с получением 322а в виде желтого твердого вещества (300 мг, 56%). MS:[M+H]+ 689.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 322а (250 мг, 0.35 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (70 мг, 2.9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часа. Затем добавляли 20 мл воды и смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 322 в виде белого твердого вещества (94 мг, 36%). MS: [М+Н]+ 647. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.23 (s, 6H), 2.01 (s, 3H), 2.50-2.52 (m, 2H), 2.76 (s, 2H), 2.88-2.91 (m, 1H), 3.04 (s, 1H), 3.55-3.57 (m, 4H), 3.70 (s, 3H), 3.86 (t, J=6.0 Гц, 1H), 4.06 (d, J=5.5 Гц, 1H), 4.33-4.41 (m, 4H), 4.50 (t, J=6.5 Гц, 2H), 4.88 (t, J=5.0 Гц, 1H), 6.02 (s, 1H), 7.16-7.18 (m, 1H), 7.29-7.34 (m, 2H), 7.97 (d, J=2.5 Гц, 1H), 8.07 (s, 1H).
Пример 323 10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксопиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикпо[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он 323
Пример 323а (2-{4,4-диметил-9-оксо-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-10-ил}-6-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксопиридин-3-ил)фенил)метилацетат 323а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 282с (376 мг, 1.0 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-1,10-диазатрицикло[6.4.0.0^{2,6}]додека-2(6),7-диен-10-ил}-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 304а (478 мг, 1.0 ммоль), CH3COONa (168 мг, 2.0 ммоль), K3PO4 (546 мг, 2.0 ммоль), PdCl2(dppf) (84 мг, 0.1 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл) и Н2О (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 323а в виде коричневого твердого вещества (278 мг, 43%). MS: (M+H)+ 649.
К раствору 323а (200 мг, 0.3 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.1 г, 57 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 323 в виде белого твердого вещества (41 мг, 22%). MS: (М+Н)+ 607. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.65 (s, 1Н), 8.50 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.46 (m, 3H), 7.31 (d, J=8.5, 1H), 6.50 (s, 1H), 4.83 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.03 (m, 1H), 2.91 (m, 3H), 2.84 (m, 2H), 2.64 (m, 1H), 2.46 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.80 (m, 2H), 1.60 (m, 4H), 1.22 (s, 6H).
Пример 324 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ил)амино]метил}-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-он 324
Пример 324а (4-фтор-2-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ил)амино]метил}-1H-пиразол-3-ид)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил}фенил)метилацетат 324а
В герметичную пробирку помещали смесь 5-бром-1-метил-3-(1-метил-5-((метил(оксетан-3-ил)амино)метил)-1Н-пиразол-3-иламино)пиридин-2(1Н)-она 320d (150 мг, 0.39 ммоль), (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-5-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетата 247b (195 мг, 0.39 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (33 мг, 0.04 ммоль), K3PO4.3H2O (207 мг, 0.78 ммоль) и NaOAc (63 мг, 0.78 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и повторно наполняли N2. Реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/метанол, с получением 324а в виде желтого твердого вещества (150 мг, 56%). MS: [М+Н]+ 675.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 324а (150 мг, 0.22 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (6 мл/6 мл/2 мл) добавляли LiOH (70 мг, 2.9 ммоль). Смесь перемешивали в течение 0.5 часа. Затем добавляли 20 мл Н2О и экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 324 в виде белого твердого вещества (43 мг, 31%). MS: [M+H]+ 633. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 1.75-1.80 (m, 4H), 2.00 (s, 4H), 2.85 (s, 4H), 2.36 (s, 1H), 2.64 (s, 1H), 2.78 (s, 2H), 2.83-2.89 (m, 1H), 2.94-3.01 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.86-3.89 (m, 1H), 4.02-4.07 (m, 1H), 4.32 (d, J=3.0 Гц, 2H), 4.39 (t, J=6.5 Гц, 2Н), 4.49 (t, J=6.5 Гц, 2H), 4.85 (d, J=4.5 Гц, 1H), 6.01 (s, 1H), 7.15-7.18 (m, 1H), 7.28-7.32 (m, 2H), 7.96 (d, J=2.0 Гц, 1H), 8.06 (s, 1H).
Пример 325 10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксопиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он 325
Пример 325а (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-(1-метил-5- {[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксопиридин-3-ил)фенил)метилацетат 325а
В герметичную пробирку емкостью 25 мл помещали 5-бром-1-метил-3-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 282 с (376 мг, 1.0 ммоль), (2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6}]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 131а (495 мг, 1.0 ммоль), CH3COONa (168 мг, 2.0 ммоль), K3PO4 (546 мг, 2.0 ммоль), PdCl2(dppf) (84 мг, 0.1 ммоль), суспендированный в CH3CN (25 мл), и воду (1 мл). Смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 325а в виде коричневого твердого вещества (278 мг, 42%). MS: (М+Н)+ 666.
К раствору 325а (200 мг, 0.3 ммоль) в изопропаноле (10 мл) и тетрагидрофурана (10 мл), и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.1 г, 57 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 325 в виде белого твердого вещества (54 мг, 29%). MS: (М+Н)+ 624. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.66 (s, 1Н), 8.50 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.51 (m, 2H), 7.46 (m, 3H), 7.31 (d, J=8.5, 1H), 4.83 (m, 1H), 4.39 (m, 2H), 4.13 (m, 1H), 3.85 (m, 1H), 3.59 (s, 3Н), 3.03 (m, 1H), 2.91 (m, 3H), 2.84 (m, 2H), 2.64 (m, 1H), 2.46 (m, 1H), 2.23 (s, 3H), 1.80 (m, 2H), 1.66 (m, 4H), 1.20 (s, 6H).
Пример 326 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 326
Пример 326а 4-фтор-2-(1-оксо-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 326а
Согласно примерам 102с и 102d, получали 326а.
Пример 326b 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 326b
Согласно примеру 148h, 478 мг 326а и 378 мг 5-бром-1-метил-3-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-она 197d подвергали взаимодействию с получением 326b, который был получен в виде желтого твердого вещества (324 мг, 50%). MS: [М+Н]+ 650.
Согласно примеру 148, 260 мг 326b превращали в 326 в виде белого твердого вещества (100 мг, 41%). MS: [М+Н]+ 607. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.58 (d, J=2.0, 1Н), 8.39 (s, 1H), 7.87 (d, J=3.0, 1H), 7.73 (d, J=8.0, 1H), 7.63 (d, J=8.0, 1H), 7.46 (dd, J=9.0, 1H), 7.36(m, 3H), 7.23 (m, 2H), 7.17 (m, 2H), 4.99 (d, J=4.5, 1H), 4.65(m, 1H), 4.50 (m, 1H), 4.38 (s, 2H), 4.29 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.04 (t, J=4.0, 4H), 4.36 (t, J=4.0, 4H), 2.20 (s, 3H).
Пример 327 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(4-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а] индол-1(2Н)-он 327
Пример 327а трет-бутил-4-(4-нитрофенил)пиперазин-1-карбоксилат 327а
Согласно примеру 188а, 1-фтор-4-нитробензол (2.8 г, 20 ммоль) и N-Boc-пиперазин (11 г, 60 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 327а в виде желтого твердого вещества (3 г, 51%). MS: [М+Н]+ 308.
Пример 327b трет-бутил-4-(4-аминофенил)пиперазин-1-карбоксилат 327b
Согласно примеру 188b, 327а восстанавливали до 327b в виде желтого твердого вещества (1.35 г, 99%). MS: [М+Н]+ 278.
Пример 327с трет-бутил-4-(4-(6-бром-4-метил-3-оксо-3,4-дигидропиразин-2-иламино)фенил)пиперазин-1-карбоксилат 327с
Согласно примеру 188с, 327b (2.6 г, 9.4 ммоль) и 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-он (2.5 г, 9.4 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 327с в виде желтого твердого вещества (2.96 г, 68%). MS: [M+H]+ 464.
Пример 327d 5-бром-1-метил-3-(4-(пиперазин-1-ил)фениламино)пиразин-2(1H)-он 327d
Согласно примеру 188d, с 327с снимали защиту с получением 327d в виде желтого твердого вещества (1.57 г, 99%). MS: [M+H]+ 364.
Пример 327е 5-бром-1-метил-3-(4-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)фениламино)пиразин-2(1Н)-он 327е
Согласно примеру 188е, 1.2 г (3 ммоль) 327d превращали в 327е в виде желтого твердого вещества (943 мг, 75%). MS: [М+Н]+ 420.
Пример 327f 4-фтор-2-(4-метил-6-(4-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)фениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 327f
Согласно примеру 148h, 300 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетат 210d и 287 мг 327е подвергали взаимодействию с получением 327f в виде желтого твердого вещества (220 мг, 51%). ЖХМС: [М+Н]+ 696.
Согласно примеру 148, 220 мг 327f превращали в 327 в виде белого твердого вещества (87 мг, 42%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.11 (s, 1H), 7.81 (d, J=8.5, 1H), 7.43 (9, 1H), 7.35 (t, J=7.0, 1H), 7.29 (d, J=9.0, 1H), 6.88 (d, J=8.5, 2H), 6.53 (s, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.56 (t, J=6.5, 2H), 4.67 (d, J=5.5, 3H), 4.42 (m, 1H), 4.11 (m, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.43 (s, 1H), 3.10 (t, J=4.5,4H), 2.62 (m, 2H), 2.46 (m, 2H), 2.39 (t, J=4.5,4H), 1.79 (s, 2H), 1.70 (s, 2H).
Пример 328 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 328
Пример 328а 4-(6-(6-хлор-2-метил-3-оксо-2,3-дигидропиридазин-4-ил-амино)пиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 328а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1,4-диоксан (50 мл), трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 188b (2.0 г, 7.2 ммоль), 4-бром-6-хлор-2-метил-пиридин-3(2Н)-он (1.6 г, 7.2 ммоль) и карбонат цезия (4.7 г, 14.4 ммоль). После барботирования полученной смеси азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (500 мг, 0.9 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (450 мг, 0.45 ммоль) и реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 2). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на флэш-колонке, элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат, с получением 328а (1.4 г, 43%). MS: [M+H]+ 421.
Пример 328b гидрохлорид 6-хлор-2-метил-4-(5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-она 328b
Промежуточное соединение 328а (1.4 г, 3.3 ммоль) суспендировали в 4.0 М HCl/диоксан (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и концентрировали при пониженном давлении с получением 328b (1.1 r,96%). MS:[M+H]+ 321.
Пример 328с 6-хлор-2-метил-4-(5-(4-(оксетан-3-ип)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридазин-3(2Н)-он 328с
Смесь 328b (1.2 г, 3.5 ммоль), оксетан-3-она (0.5 г, 7.0 ммоль), NaBH3CN (0.44 г, 7.0 ммоль) и хлорида цинка (0.93 г, 7.0 ммоль) в метаноле (125 мл) перемешивали при 50 градусах в течение 3.5 часов. Указанную смесь добавляли к воде и экстрагировали хлористым метиленом. Органические слои объединяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 25:1 хлористый метилен/метанол, с получением 328 с (0.63 г, 50%). MS:[M+H]+ 377.
Пример 328d 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 328d
В герметичную пробирку помещали смесь 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (420 мг, 0.9 ммоль), 328с (300 мг, 0.78 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (66 мг, 0.078 ммоль), K3PO4.3H2O (360 мг, 1.56 ммоль) и NaOAc (130 мг, 1.56 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/метанол, с получением 328d в виде желтого твердого вещества (400 мг, 72%). MS: [М+Н]+ 696.
К раствору 328d (350 мг, 0.5 моль) в ТГФ/ИПС/Н2О (6 мл/6 мл/2 мл) при перемешивании при комнатной температуре добавляли LiOH (600 мг, 25 ммоль). И Указанную смесь перемешивали в течение 0.5 часа. Затем добавляли 20 мл воды, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 328 в виде белого твердого вещества (100 мг, 27%). 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.25 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.97 (d, J=3.5 Гц, 1H), 7.39-7.45 (m, 3H), 7.25-7.28 (m, 1H), 6.52 (s, 2H), 4.66 (t, J=5.0 Гц, 2H), 4.55 (t, J=6.5 Гц, 2H), 4.41-4.46 (m, 3H), 4.31-4.34 (m, 1H), 4.11-4.18 (m, 3H), 3.85-3.87 (m, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.43 (t, J=6.5 Гц, 1H), 3.12 (t, J=5.0 Гц, 4H), 2.54-2.63 (m, 2H), 2.46 (t, J=6.0 Гц, 2H), 2.39 (t, J=5.0 Гц, 4H), 1.79 (t, J=5.5 Гц, 2H), 1.69 (s, 2H).
Пример 329 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,б-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),10,12- тетраен-6-он 329
Пример 329а (2Z)-3-(1-бензотиофен-3-ил)проп-2-еновая кислота 329а
Суспензию бензо[b]тиофен-3-карбальдегид (4.9 г, 30 моль), малоновой кислоты (6.6 г, 60 ммоль) и пиперидина (1 мл) в 100 мл безводного пиридина нагревали при 110°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и растворитель удаляли в вакууме. Остаток помещали в 100 мл воды и добавляли 1 N соляную кислоту для доведения рН указанного раствора до 3. Полученную суспензию фильтровали и собирали желтое твердое вещество, промывали водой (3×30 мл), сушили в вакууме с получением 329а в виде желтого твердого вещества (5.5 г, 89%). MS:[M+H]+ 205.
Пример 329b 3-(1-бензотиофен-3-ил)пропионовая кислота 329b
Суспензию 329а (5.5 г, 27 ммоль) и 10% Pd/C (600 мг) в смеси 1:1 метанол/этилацетат (100 мл) гидрировали в устройстве Парра при 50 psi в течение ночи. Смесь фильтровали через подложку из Целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного 329b в виде коричневого твердого вещества (5.0 г, 90%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: [М+Н]+ 207. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 2.81-2.84 (t, J=8.5, 2H), 3.18-3.21 (m, 2H), 7.16 (s, 1H), 7.34-7.41 (m, 2H), 7.74-7.76 (d, 1H), 7.85-7.87 (d, 1H).
Пример 329c 3-(1-бензотиофен-3-ил)пропионилхлорид 329с
Промежуточное соединение 329b (5.0 г, 24 ммоль) в тионилхлориде (15 мл) нагревали при 100°С в течение 4 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры, и растворитель выпаривали в вакууме. К остатку добавляли 30 мл хлористого метилена и полученную смесь выпаривали при пониженном давлении с получением 329с в виде коричневого твердого вещества (5.3 г, 97%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: [М+Н]+ 225.
Пример 329d 7-тиатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6),9,11- тетраен-5-он 329d
К 329с (5.0 г, 22.3 ммоль) в хлористом метилене (50 мл) добавляли безводный хлорид алюминия (5.9 г, 44.6 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор выпаривали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 329d в виде желтого твердого вещества (2.3 г, 55%). MS: [M+H]+ 189. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 3.05-3.07 (m, 2H), 3.21-3.23 (m, 2H), 7.45-7.52 (m, 2H), 7.88-7.91 (m, 2H).
Пример 329е N-[(5Z)-тиатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6),9,11-тетраен-5-илиден]гидроксиламин 329е
К раствору NH2OH.HCl (18.4 г, 266 ммоль) в МеОН (600 мл) при 0°С медленно добавляли CH3COONa (21.8 г, 266 ммоль). После перемешивания при 0°С в течение 30 минут добавляли 329d (10 г, 53 ммоль). Реакционному раствору позволяли нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Затем его выпаривали в вакууме. К остатку добавляли 100 мл воды и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (500 мл × 3). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 329е в виде желтого твердого вещества (10 г, 92%). MS: [M+H]+ 203.
Пример 329f 8-тиа-5-азатрипикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),10,12-тетраен-6-он 329f
Раствор 329е (5 г, 25 ммоль) in PPA (80 мл) перемешивали при 150°С на масляной бане в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли 150 мл смеси вода/лед. Твердое вещество собирали с помощью фильтрации, промывали 3×50 мл воды и сушили в вакуумной печи при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 1:1 этилацетат/петролейный эфир, с получением 329f в виде желтого твердого вещества (3 г, 60%). MS:[M+H]+ 204.
Пример 329g (2-бром-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),10,12-тетраен-5-ил}фенил)метилацетат 329g
Смесь 329f(700 мг, 3.4 ммоль), 197 с (3.35 г, 10.2 ммоль), Ксантфоса (200 мг, 0.34 ммодь), Pd2(dba)3 (316 мг, 0.34 ммоль) и Cs2CO3 (2.25 г, 6.8 ммоль) в диоксане (50 мл) нагревали при 100°С в течение 15 часов в атмосфере аргона. Затем ее фильтровали и выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 1:3 этилацетат/петролейный эфир, с получением 329g в виде белого твердого вещества (500 мг, 33%). MS: [М+Н]+ 448.
Пример 329h [4-фтор-2-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-5азатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7),10,12-тетраен-5-ил}фенил]метил 329h
В герметичную пробирку помещали смесь 329g (300 мг, 0.66 ммоль), 1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-илбороновой кислоты 197f (690 мг, 1.32 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (54 мг, 0.066 ммоль) и Na2CO3 (141 мг, 1.32 ммоль) в ДМФА (22 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 130°С в микроволновом реакторе в течение 1 часа. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 329h в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 67%). MS: [M+H]+ 667.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 329h (250 мг, 0.38 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (10 мл/10 мл/2 мл) добавляли L10H (90 мг, 38 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем добавляли 20 мл воды и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 329 в виде коричневого твердого вещества (37 мг, 16%). MS: [М+Н]+ 625. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 1.31 (s, 3Н), 2.39 (s, 4Н), 2.65-2.69 (m, 4H), 3.30-3.33 (m, 2H), 3.68 (s, 3H), 4.11-4.16 (m, 1H), 4.24-4.30 (m, 1H), 4.50-4.56 (m, 2H), 6.99 (d, 1H), 7.20 (d, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.36-7.38 (m, 1H), 7.47-7.54 (m, 2H), 7.89-7.95 (m, 2H), 7.97 (d, 1H), 8.53 (s, 1H).
Пример 330 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 330
Пример 330а трет-бутил-4-(6-аминопиридазин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 330а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 6-хлорпиридазин-3-амин (2.58 г, 20 ммоль) и N-boc-пиперазин (22.3 г, 120 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 140°С и перемешивали в течение 2 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры, и полученное твердое вещество промывали этилацетатом (100 мл), и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/метанол, с получением 330а в виде желтого твердого вещества (3.5 г, 60%). MS: [M+H]+ 280.
Пример 330b трет-бутил-4-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридазин-3-ил)пиперазин-1-карбоксилат 330b
Согласно примеру 188 с, 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (536 мг, 2.0 ммоль) и 330а (558 мг, 2.0 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 330b в виде желтого твердого вещества (560 мг, 60%). MS: [М+Н]+ 467.
Пример 330c 5-бром-1-метил-3-(6-(пиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 330с
Согласно примеру 188d, с 560 мг (1.2 ммоль) 330b снимали защиту с получением 330с в виде желтого твердого вещества (440 мг, 99%). MS: [M+H]+ 367.
Пример 330d 5-бром-1-метил-3-(6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)пиридин-2(1Н)-он 330d
Согласно примеру 210а, 400 мг (1.1 ммоль) 330 с превращали в 330d в виде желтого твердого вещества (312 мг, 68%). MS: [M+H]+ 421.
Пример 330е 4-фтор-2-(1-метил-5-(6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 330е
Согласно примеру 210а, 207 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (0.43 ммоль) и 180 мг 330d (0.43 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 330е в виде желтого твердого вещества (156 мг, 51%). MS:[M+H]+ 697.
Согласно примеру 210, 330е (150 мг 0.22 ммоль) гидролизировали с получением 330 в виде желтого твердого вещества (60 мг, 42%). ЖХМС: [М+Н]+ 655. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.67 (d, J=2.5, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.48 (d, J=2.0, 1H), 7.12 (dd, J=8.5, 1H), 6.98 (m, 3H), 6.86 (s, 1H), 4.69 (m, 4H), 4.51 (d, J=11, 1H), 4.20 (m, 5H), 3.86 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.56 (m, 5H), 2.60 (m, 4H), 2.47 (m, 4H), 1.90 (s, 2H), 1.80 (s, 2H).
Пример 331 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ипамино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н) 331
Пример 331a 5-бром-1-метил-3-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-иламино)пиразин-2(1Н)-он 331а
Смесь 6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-амина (1 г, 5.2 ммоль), полученного согласно патенту США 2009/0318448, 3,5-дибром-1-метилпиразин-2(1Н)-она (1.7 г, 6.2 ммоль),и изопропанола (20 мл) перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 16 часов. После завершения реакции растворитель удаляли с получением 331а в виде коричневого твердого вещества (500 мг, 30%). MS: [M+H]+ 379.
Пример 331b 4-фтор-2-(4-метил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-иламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1H)-ил)бензилацетат 331b
В герметичную пробирку помещали смесь 331а (400 мг, 1 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (578 мг, 1.2 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (82 мг, 0.1 ммоль), K3PO4.3Н2О (760 мг, 2 ммоль) и NaOAc (164 мг, 2 ммоль) в CH3CN (10 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2, и реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 2 часов. Затем смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 331b в виде желтого твердого вещества (100 мг, 14%). MS: [M+H]+ 655.
К раствору 331b (100 мг, 0.15 ммоль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (2 мл/2 мл/1 мл) добавляли LiOH (15 мг, 0.75 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 30°С в течение 1 часа. Затем добавляли 20 мл воды и смесь экстрагировали этилацетатом (90 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 331 в виде желтого твердого вещества (42 мг, 45%). MS: [М+Н]+ 613. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 9.26 (s, 1H), 8.67 (d, J=2.5, 1H), 8.35 (q, J=2.5,1H), 7.44 (s, 1H), 7.32 (m, 2H), 6.82-6.80 (d, J=9, 1H), 6.52 (s, 1H), 4.46-4.36 (m, 2H), 4.16-4.09 (m, 3H), 3.88-3.87 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.40-3.34 (m, 5H), 2.60-2.57 (m, 2H), 2.51-2.45 (m, 2H), 2.39-2.37 (m, 4H), 2.20 (s, 3H), 1.79-1.69 (m, 4H).
Пример 332 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метил-2-оксопиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 332
Пример 332а трет-бутил-3-оксопиперазин-1-карбоксилат 332а
В сухую одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитным якорем, добавляли пиперпзин-2-он (5.0 г, 50 ммоль), безводный дихлорметан (60 мл) и Et3N (3.2 мл, 22.5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Органический слой концентрировали при пониженном давлении с получением 332а (10 г, 99%).
Пример 332b трет-бутил-4-(6-нитропиридин-3-ил)-3-оксопиперазин-1-карбоксилат 332b
В виалу для микроволнового реактора помещали 332а (1.5 г, 7.5 ммоль) в 30 мл безводного 1,4-диоксана, 5-бром-2-нитропиридин (1.27 г, 6.25 ммоль), диацетоксипалладий (71.8 мг, 0.32 ммоль), Ксантфос (278 мг, 0.48 ммоль) и Cs2CO3 (2.04 г, 6.25 ммоль). После трех циклов вакуумирования/обработки аргоном ее нагревали при 120°С под воздействием микроволнового излучения в течение 1.5 часов. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью 3:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 332b в виде желтого твердого вещества (1.1 г, 54%). MS: [M+H]+ 323. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.68 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 8.31 (d, J=9 Гц, 1Н), 8.15 (m, 1Н), 4.33 (s, 2H), 3.91 (m, 4H).
Пример 332c трет-бутил-4-(6-аминопиридин-3-ил)-3-оксопиперазин-1-карбоксилат 332с
К раствору 332b (1.1 г, 3.4 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли Pd/C (10%) (250 мг). После трех циклов вакуумирования/обработки Н2 смесь перемешивали в атмосфере Н2 при комнатной температуре в течение 10 часов. Смесь фильтровали, и фильтрат выпаривали в вакууме с получением 332с (946 мг, 95%), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS: [М+Н]+ 293.
Пример 332d трет-бутил-4-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)-3-оксопиперазин-1-карбоксилат 332d
В реакционный сосуд помещали 332с (946 мг, 3.2 ммоль) в 40 мл безводного 1,4-дмоксана, 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.11 г, 4.2 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (146 мг, 0.16 ммоль), Ксантфос (185 мг, 0.32 ммоль) и Cs2CO3 (2.6 г, 8.0 ммоль). После трех циклов вакуумирования/обработки аргоном ее перемешивали при 110°С в течение 4 часов. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат выпаривали в вакууме. Неочищенный очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 332d в виде желтого твердого вещества (706 мг, 46%). MS:[M+H]+ 479.
Пример 332e 1-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)пиперазин-2-он 332е
В круглодонную колбу емкостью 50 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали HCl в 1,4-диоксане (20 мл) и 332d (706 мг, 1.47 ммоль). Смесь перемешивали в течение при 65°С в течение 6 часов. Затем ее концентрировали при пониженном давлении с получением 332е в виде желтого твердого вещества (500 мг, 90%). MS: [M+H]+ 379.
Пример 332f 1-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)-4-метилпиперазин-2-он 332f
К раствору 1-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино) пиридин-3-ил)пиперазин-2-она (332е) (500 мг, 1.32 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли Na(OAc)3BH (2.0 г, 13.2 ммоль), формальдегид (30% водн., 8 мл) и уксусную кислоту (2.7 мл, 45 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4 часов. рН реакционной смеси доводили до 11~13 путем добавления NaOH (1M). Затем ее три раза экстрагировали хлористым метиленом. Объединенный органический экстракт сушили над безводным Na2SO4, фильтровали и выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колонки с силикагелем, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 332f в виде серого твердого вещества (312 мг, 60%). MS: [М+Н]+ 393. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.61 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 8.17 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 7.88 (s, 1H), 7.45 (dd, J=9 Гц, 1Н), 6.92 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 6.74 (d, J=9 Гц, 1Н), 3.64 (m, 2H), 3.53 (s, 3Н), 3.22 (s, 2H), 2.74 (m, 2H), 2.35 (s, 3Н).
Пример 332g 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-метил-2-оксопиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 332g
В реакционный сосуд помещали смесь 1-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)-4-метилпиперазин-2-она (332f) (0.3 г, 0.76 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (0.37 г, 0.76 ммоль), PdCl2(dppf) (65 мг, 0.076 ммоль), К3РО4 (325 мг, 1.53 ммоль) и NaOAc (125 мг, 1.53 ммоль) в MeCN (15 мл), и воду (1 мл). Затем ее барботировали аргоном в течение 15 минут и нагревали при 110°С в течение 3 часов. После выпаривания растворителя в вакууме остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 332g (0.4 г, 63%). MS: [M+H]+ 668.
Смесь 332g (350 мг, 0.52 ммоль) и гидрата LiOH (1.1 г, 26 ммоль) в изопропаноле (3 мл), ТГФ (3 мл) и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 1 часа. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали хлористым метиленом (30 мл × 3). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 332 в виде желтого твердого вещества (120 мг, 32%). MS: [M+H]+ 626. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.78 (d, J=2 Гц, 1Н), 8.17 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 7.58 (dd, J=8.5 Гц, 1Н), 7.42 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 7.23 (s, 1Н), 7.21 (s, 1Н), 7.12 (d, J=9 Гц, 1Н), 6.73 (s, 1Н), 4.53 (m, 2H), 4.22 (s, 2H), 4.03 (m, 1H), 3.73 (s, 4H), 3.27 (s, 2H), 2.87 (m, 2H), 2.65 (m, 1Н), 2.55 (m, 2H), 2.43 (s, 3Н), 1.89 (m, 2H), 1.79 (m, 2H).
Пример 333 2-(5-фтор-2-(метоксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 333
К раствору 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она 197 (200 мг, 0.33 ммоль) и К2СО3 (135 мг, 0.99 ммоль) в ДМФА (30 мл) добавляли при комнатной температуре раствор иодметана (70 мг, 0.50 ммоль) в ДМФА (5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. Затем ее фильтровали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 333 в виде желтого твердого вещества (165 мг, 80%). MS: [М+Н]+ 626. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.59 (d, J=2.0, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 7.97 (d, J=2.0, 1Н), 7.44 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 7.32 (m, 2H), 7.17 (m, 1H), 6.52 (s, 1Н), 4.31 (s, 2H), 4.14 (m, 3H), 3.88 (s, 1Н), 3.56 (s, 3H), 3.54 (s, 4H), 3.44 (s, 4H), 3.12 (s, 6H), 2.58 (m, 2H), 2.46 (s, 2H), 1.79 (s, 2H), 1.68 (s, 2H).
Пример 334 {4-фтор-2-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил}фенил}метилацетат 334
Пример 334а 3-хлорбицикло[2.2.1]гепт-2-ен-2-карбальдегид 334а
Трехгорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, продували азотом и помещали в нее безводный 1,2-дихлорэтан (24 мл) и безводный ДМФА (9.12 г, 125 ммоль). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и в течение 5 минут добавляли оксихлорид фосфора (15.3 г, 100 ммоль), при поддержании температуры реакции между 0 и 10°С. Охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли раствор бицикло[2.2.1]гептан-2-она (5.50 г, 50.0 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (10 мл) и полученную смесь нагревали при 80°С в течение ночи. По прошествии указанного времени реакционную смесь выливали в раствор гидрофосфата калия (43.5 г, 250 ммоль) в воде (200 мл) и перемешивали в течение 15 минут. Органический слой отделяли и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в хлористом метилене (300 мл) и промывали водой (2×50 мл). Слой хлористого метилена сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 1:100 этилацетат/петролейный эфир, с получением 334а в виде желтого масла (2.2 г, 28%). MS: [M+H]+ 157. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 9.80 (s, 1H), 3.42 (s, 1H), 3.07 (d, J=1.7 Гц, 1H,), 1.95-1.77 (m, 2H), 1.67 (t, J=8.9 Гц, 1Н), 1.41-1.17 (m, 3H).
Поимев 334b (Е)-этил-3-(3-хлорбицикло[2.2.1]гепт-2-ен-2-ил)акрилат 334b
К раствору 334а (9.0 г, 57.7 ммоль) в хлористом метилене (250 мл) добавляли этил-2-(трифенил-λ5-фосфанилиден)ацетат (20 г, 57.7 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После реакции реакционный раствор выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 1:100 этилацетат/петролейный эфир, с получением 334b в виде желтого масла (6.0 г, 46%). MS: [М+Н]+ 227.
Пример 334с этил-3-азатрицикло[5.2.1.02,6]дека-2(6),4-диен-4-карбоксилат 334с
К раствору 334b (5.0 г, 22 ммоль) в ДМСО (30 мл) добавляли NaN3 (2.2 г, 33 ммоль) и смесь нагревали при 105°С в течение 6 часов. После охлаждения до комнатной температуры к реакционной смеси добавляли воду (13 мл) и полученную смесь экстрагировали хлористым метиленом (50 мл × 3). Органическую фазу сушили (Na2SO4) и выпаривали досуха. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 334с в виде коричневого твердого вещества (2.7 г, 60%). MS: [M+H]+ 206. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 11.51 (s, 1H), 6.45 (dd, 1H), 4.14-4.19 (m, 2H,), 3.25 (d, 2H,), 1.79-1.82 (m, 2H), 1.73 (d, 1H), 1.22-1.25 (t, J=6.5, 3H), 0.89-0.91 (m, 2H).
Пример 334d этил-3-(цианометил)-3-азатрицикло[5.2.1.02,6]дека-2(6),4-диен-4-карбоксилат 334d
К раствору 334с (3.0 г, 14.6 ммоль) в безводном ДМФА (30 мл) добавляли NaH (880 мг, 22 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли 2-бромацетонитрил (3.5 г, 29.3 ммоль) и полученную смесь нагревали при 65°С в течение 1 часа. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. После реакции добавляли воду (30 мл) и реакционную смесь экстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Органическую фазу выпаривали досуха. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 334d в виде коричневого твердого вещества (2.6 г, 72%). MS: [М+Н]+ 245.
Пример 334e этил-3-(2-аминоэтил)-3-азатрицикло[5.2.1.02,6]дека-2(6),4-диен-4-карбоксилат 334е
Суспензию 334d (4.0 г, 16 ммоль) и Ni Ренея (400 мг) в метаноле (60 мл) гидрировали в устройстве Парра при 50 psi в течение ночи. Смесь фильтровали через подложку из Цепита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 334е в виде желтого твердого вещества (2 г, 50%). MS: [М+Н]+ 249.
Пример 334f 3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека- 2(10),8-диен-7-он 334f
К раствору этил-3-(2-аминоэтил)-3-азатрицикло[5.2.1.02,6]дека-2(6),4-диен-4-карбоксилата (334е) (1.8 г, 7.2 ммоль) в этаноле (40 мл) добавляли метилат натрия (2.5 г, 36 ммоль). Смесь нагревали при 65°С в течение 12 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры. Растворитель выпаривали досуха. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 20:1 хлористый метилен/метанол, с получением 334f в виде коричневого твердого вещества (800 мг, 53%). MS: [М+Н]+ 203.
Пример 334р (2-бром-4-фтор-6-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил} фенил)метилацетат 334g
В герметичную пробирку помещали 334f (800 мг, 4 ммоль) и 197 с (3.8 г, 12 ммоль) в диоксане (25 мл), и карбонат цезия (2.6 г, 8 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут, добавляли Ксантфос (230 мг, 0.4 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (362 мг, 0.4 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 4 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл). Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (20 мл × 3) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 1:5 этилацетат/петролейный эфир, с получением 334g в виде коричневого твердого вещества (1.3 г, 72%). MS: [M+H]+ 447.
Пример 334h (4-фтор-2-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил}-6-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 334b
К раствору 334g (450 мг, 1.0 ммоль) и 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-ди(1,3,2-диоксаборолана) (770 мг, 3.0 ммоль) в диоксане (40 мл) добавляли PdCl2(dppf) (82 мг, 0.1 ммоль) и СН3СООК (593 мг, 6 ммоль). Смесь перемешивали при 100°С в течение 12 часов в атмосфере аргона. После реакции смесь фильтровали и выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 1:4 этилацетат/петролейный эфир, с получением 334b в виде коричневого твердого вещества (400 мг, 80%). MS: [М+Н]+ 495.
Пример 334i {4-фтор-2-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил} фенил}метилацетат 334i
В герметичную пробирку помещали 334h (300 мг, 0.6 ммоль), 188е (254 мг, 0.6 ммоль), Na2CO3 (129 мг, 1.2 ммоль), PdCl2(dppf) (50 мг, 0.06 ммоль), суспендированный в ДМФА (20 мл), и H2O (1 мл). Указанную смесь перемешивали при 80°С в течение 5 часов. После реакции смесь разделяли между этилацетатом и водой. Органическую фазу промывали водой (2Х), сушили над сульфатом натрия и концентрировали. Остаток очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в 1:5 вода/CH3CN, с получением 334i в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 70%). MS: (M+H)+ 708.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 334i (280 мг, 0.4 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (10 мл/10 мл/2 мл) добавляли LiOH (950 мг, 40 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем добавляли 20 мл воды и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (3×30 мл). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-Hash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в 1:4 вода/CH3CN, с получением 334 в виде белого твердого вещества (160 мг, 67%). MS: [М+Н]+ 666. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 8.53 (s, 1Н), 7.93 (d, 1H), 7.43 (d, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.20-7.22 (m, 2H), 7.04 (d, 1H), 6.67 (s 1H), 4.72-4.75 (t, J-6.5,1H), 4.63-4.66 (t, J=6,2H), 4.47-4.56 (M, 2H), 4.21-4.39 (m, 3H), 3.98-4.06 (m, 1H), 3.71 (s, 3Н), 3.56-3.60 (m, 1H), 3.48 (s, 1H), 3.17-3.19 (t, J=4.5, 4H), 2.71 (s, 1H), 2.53-2.55 (t, J=5,4H), 1.88-1.95 (m, 3Н), 1.67-1.69 (m, 1H), 1.04-1.17 (m, 2H).
Пример 335 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(5-метил-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1 (2Н)-он 335
Пример 335а трет-бутил-5-(6-нитропиридин-3-ил)-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-карбоксилат 335а
Согласно примеру 188а, в результате взаимодействия 404 мг трет-бутил-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-карбоксилата (2 ммоль) и 566 мг 5-фтор-2-нитропиридина (1.1 ммоль) получали 335а в виде желтого твердого вещества (234 мг, 35%). MS: [M+H]+ 335. 1H ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.18 (d, J=9.0, 1H), 7.87 (d, J=3.5, 1H), 7.06 (dd, J=9.0, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.55 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 3.18 (s, 2H), 3.05 (s, 2H), 1.39 (s, 9H).
Пример 335b трет-бутил-5-(6-аминопиридин-3-ил)-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-карбоксилат 335b
Согласно примеру 188b, 234 мг 335а (0.7 ммоль) восстанавливали с получением 335b в виде желтого твердого вещества (213 мг, 99%). MS: [M+H]+ 305.
Пример 335c трет-бутил-5-(6-(5-бром-1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-3-иламино)пиридин-3-ил)-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-карбоксилат 335с
Согласно примеру 188 с, 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (212 мг, 0.79 ммоль) и 335b (200 мг, 0.66 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 335с в виде желтого твердого вещества (194 мг, 60%). MS: [M+H]+ 492.
Пример 335d 5-бром-3-(5-(гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1H)-ил)пиридин-2-иламино-1-метилпиридин-2(1Н)-он 335d
Согласно примеру 188d, 194 мг (0.4 ммоль) 335с снимали защиту с получением 335d в виде желтого твердого вещества (154 мг, 99%). MS: [M+H]+ 392.
Пример 335с 5-бром-1-метил-3-(5-(5-метил-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 335е
Согласно примеру 188е, 154 мг (0.4 ммоль) 335d метилировали с получением 335е в виде желтого твердого вещества (119 мг, 75%). MS: [M+H]+ 404.
Пример 335f 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(5-метил-гексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гбксагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 335f
Согласно примерам 148h, 142 мг 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (0.29 ммоль) и 119 мг 335е (0.29 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 335f в виде желтого твердого вещества (100 мг, 51%). ЖХМС: [М+Н]+ 680.
Согласно примеру 148, 100 мг 335f (0.15 ммоль), получали 335 в виде белого твердого вещества (39 мг, 42%). 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.45 (d, J=2.0, 1H), 7.70 (d, J=2.5, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.42 (d, J=2.5, 1H), 7.17 (m, 1H), 7.04 (dd, J=9.0, 1H), 6.95 (dd, J=6.0, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.79 (d, J=9.0, 1H), 4.54 (d, J=11.0, 1H), 4.31 (m, 1H), 4.16 (m, 3H), 3.91 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.27 (s, 2H), 3.18 (s, 2H), 2.99 (s, 2H), 2.83 (s, 2H), 2.59 (m, 4H), 2.46 (m, 2H), 2.38 (s, 3H), 1.90 (s, 2H), 1.80 (s, 2H).
Пример 336 2-(5-фтор-3-(5-(5-(3-(фторметил)-4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гбксагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 336
Пример 336а 1-трет-бутил-2-метил-4-бензилпиперазин-1,2-дикарбоксилат 336а
В сухую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитным якорем в атмосфере N2 добавляли 1-трет-бутил-2-метилпиперазин-1,2-дикарбоксилат (5 г, 20.5 ммоль), безводный ацетонитрил (60 мл), бромистый бензил(2.7 мл, 22.5 ммоль) и триэтиламин (8.5 мл, 61.5 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 71°С в течение 45 минут и концентрировали при пониженном давлении. Затем ее разбавляли хлористым метиленом и промывали водой и солевым раствором. Органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенное соединение очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 8:1 петролейный эфир/этилацетат с получением 336а (4.5 г, 66%). MS: [М+Н]+ 335. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 7.28 (m, 5Н), 4.60 (m, 1H), 3.78 (m, 4H), 3.57 (m, 1H), 3.43 (m, 1H), 3.28 (m, 2H), 2.77 (m, 1H), 2.19 (m, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.47 (s, 5Н), 1.42 (s, 4H).
Пример 336b (4-бензил-1-метилпиперазин-2-ил)метанол 336b
К раствору 336а (1 г, 2.99 ммоль) в 100 мл безводного тетрагидрофурана медленно добавляли алюмогидрид лития (342 мг, 8.98 ммоль) при 0°С и смесь перемешивали в течение 30 минут. Затем ее кипятили с обратным холодильником в течение 3 часов и реакционную смесь порциями выливали в лед. Полученную смесь фильтровали, и фильтрат выпаривали в вакууме. После добавления к остатку 100 мл солевого раствора его экстрагировали хлористым метиленом (100 мл × 3). Объединенный органический слой сушили над Na2SO4, фильтровали и концентрировали с получением 336b в виде желтого масла (0.60 г, 91%). MS: [M+H]+ 221.
Пример 336c 4-бензил-2-(фторметил)-1-метилпиперазин 336с
К ледяному раствору диэтиламинотрифторида серы (10.8 мл, 81.8 ммоль) в хлористом метилене в атмосфере N2 добавляли по каплям 336b (9.0 г, 40.9 ммоль) в хлористом метилене. Желтый раствор перемешивали при 0°С в течение 1 часа и затем при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь затем разбавляли NaHCO3 и органический слой отделяли и сушили над Na2SO4. Неочищенный продукт очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 336с в виде желтого масла (3.0 г, 33%). MS: [М+Н]+ 223. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.28 (m, 5Н), 4.50 (m, 0.5H), 4.43 (m, 1H), 4.35 (m, 0.5H), 3.45 (s, 2H), 2.67 (m, 2H), 2.60 (m, 1H), 2.29 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 2.20 (m, 1H), 2.11 (m, 1H), 1.94 (m, 1H).
Пример 336d 2-(фторметил)-1-мбтилпиперазин 336d
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 336е (3.0 г, 13.5 ммоль), метанол (80 мл) и Pd/C (10%) (300 мг). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в атмосфере Н2 в течение 15 часов. После завершения реакции ее фильтровали и концентрировали с получением 336d в виде желтого масла (1.6 г, 90%).
Пример 336е 2-(фторметил)-1-метил-4-(б-нитропиридин-3-ил)пиперазин 336е
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1,4-диоксан (50 мл), 336d (1.6 г, 12.1 ммоль), 5-бром-2-нитропиридин (3.7 г, 18.2 ммоль) и карбонат цезия (9.9 г, 30.2 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (700 мг, 0.12 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (550 мг, 0.06 ммоль). После трех циклов вакуумирования/обработки аргоном реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 15 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали с получением черного твердого вещества в качестве неочищенного продукта, который дополнительно очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 100:1 хлористый метилен/метанол, с получением 336е в виде желтого твердого вещества (2.6 г, 76%). MS: [М+Н]+ 255. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 8.20 (m, 2Н), 7.52 (dd, J=9, 1H), 4.72 (m, 0.5H), 4.64 (m, 1H), 4.56 (m, 0.5H), 4.01 (m, 1H), 3.94 (m, 1H), 3.19 (m, 1H), 3.06 (m, 1H), 3.00 (m, 1H), 2.50 (m, 2Н), 2.46 (s, 3H).
Пример 336f 5-(3-(фторметил)-4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-амин 336f
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 336е (2.6 г, 10.2 ммоль), метанол (50 мл) и Pd/C (10%) (260 мг). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере На в течение 15 часов. После завершения реакции ее фильтровали и концентрировали с получением 336f в виде черного масла, которое применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. MS:[M+H]+ 225.
Пример 336g 5-бром-3-(5-(3-(фторметил)-4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метилпиридин-2(1Н)-он 336g
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 1,4-диоксан (60 мл), 336f (неочищенный, 14.1 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (4.5 г, 16.9 ммоль), и карбонат цезия (11.5 г, 35.2 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (820 мг, 1.41 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (645 мг, 0.7 ммоль). После трех циклов вакуумирования/обработки аргоном реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 15 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали с получением черного твердого вещества, которое очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью хлористый метилен/метанол (от 100:1 до 50:1), с получением 336g в виде желтого твердого вещества (3.1 г, 50%). MS: [M+H]+ 410.
Пример 336h 4-фтор-2-(5-(5-(3-(фторметил)-4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 336b
В реакционый сосуд помещали смесь 336g (1 г, 2.4 ммоль), 4-фтор-2-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1H)-ил)-6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензилацетата 210d (1.3 г, 2.68 ммоль), PdCl2(dppf) (190 мг, 0.24 ммоль), K3PO4 (1 г, 4.8 ммоль) и NaOAc (390 мг, 4.8 ммоль) в MeCN (15 мл), и воды (1.5 мл). Затем ее барботировали азотом в течение 30 минут и затем нагревали при 110°С в течение 3 часов. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью 5:1 хлористый метилен/метанол, с получением 336b (0.80 г, 45%). MS: [М+Н]+ 686.
Смесь 336b (750 мг, 1.09 ммоль) и гидрата LiOH (2.3 г, 55 ммоль) в изопропаноле (10 мл), ТГФ (10 мл) и воды (10 мл) перемешивали при 30°С в течение 1 часа. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали хлористым метиленом (30 мл × 3). Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении, и остаток очищали на колонке с силикагелем, элюируя смесью 50:1 хлористый метилен/метанол, с получением 336 в виде желтого твердого вещества (700 мг, 93%). MS: [М+Н]+ 644. 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 8.54 (d, J=2 Гц, 1Н), 7.92 (d, J=1.5 Гц, 1Н), 7.42 (m, 1Н), 7.33 (m, 1Н), 7.22 (s, 1Н), 7.20 (s, 1Н), 7.02 (m, 1Н), 6.72 (s, 1Н), 4.46-4.69 (m, 4H), 4.20 (s, 3Н), 4.02 (m, 1Н), 3.70 (s, 3Н), 3.49 (d, J=11.5 Гц, 1Н), 3.42 (d, J=11.5 Гц, 1Н), 2.94 (m, 1Н), 2.85 (m, 1Н), 2.71 (m, 1Н), 2.64 (m, 2H), 2.56 (m, 4H), 2.44 (s, 3Н), 1.88 (m, 2H), 1.79, (m, 2H).
Пример 337 6-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-6-оксо-5- [(пиримидин-4-ил)амино]-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-7-он 337
Пример 337а (4-фтор-2-{1-метил-6-оксо-5-[(пиримидин-4-ил)амино]-1,6-дигидро-пиридин-3-ил}-6-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил}фенил)метилацетат 337а
В герметичную пробирку помещали (2-бром-4-фтор-6-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло-[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил} фенил)метилацетат 334g (400 мг, 0.9 ммоль), 1-метил-3-(пиримидин-4-иламино)-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиридин-2(1Н)-он 109с (294 мг, 0.9 ммоль), Na2CO3 (190 мг, 1.8 ммоль) и PdCl2(dppf) (73 мг, 0.09 ммоль), суспендированный в ДМФА (20 мл), и воду (1 мл). Смесь перемешивали при 60°С в течение 6 часов. Затем ее разделяли между водой и этилацетатом. Органическую фазу промывали водой и выпаривали досуха. Остаток очищали с помощью колоночной хроматографии, элюируя смесью 15:1 хлористый метилен/метанол, с получением 337а в виде коричневого твердого вещества (300 мг, 58%). MS: [М+Н]+ 569.
При комнатной температуре при перемешивании к раствору 337а (270 мг, 0.47 моль) в смеси ТГФ/изопропанол/вода (10 мл/10 мл/2 мл) добавляли LiOH (1.1 г, 47 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов. Затем добавляли 20 мл воды и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (30 мл × 3). Объединенный органический слой сушили Na2SO4 и концентрировали с получением желтого твердого вещества, которое дополнительно очищали с помощью обращенно-фазовой Combi-flash, элюируя 0.3% NH4HCO3 в 1:5 вода/CH3CN, с получением 337 в виде белого твердого вещества (138 мг, 48%). MS: [М+Н]+ 527. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 8.87 (s, 1Н), 8.67 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 7.55 (s, 1Н), 7.22-7.24 (m, 2H), 7.10 (d, 1H), 6.68 (d, 1H), 4.48-4.55 (m, 2H), 4.18-4.40 (m, 3H), 3.98-4.06 (m, 1H), 3.72 (s, 3H), 3.45-3.48 (m, 1H), 1.88-1.98 (m, 3H), 1.67-1.69 (m, 1H), 1.30 (m, 1H), 1.12-1.17 (m, 1H), 1.02-1.07 (m, 1H).
Пример 338 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метил-1,4-диазепан-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 338
Пример 338а 1-метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)-1,4-диазепан 338а
К раствору 1-метил-1,4-диазепана (1 г, 8.8 ммоль) в ДМСО (20 мл) добавляли К2СО3 (2.4 г, 18 ммоль) и 5-бром-2-нитропиридин (51-7) (1.78 г, 8.8 ммоль). Смесь перемешивали при 65°С в течение ночи. Затем ей позволяли охладиться до комнатной температуры и выливали в воду. Полученное твердое вещество собирали и сушили в вакууме. Твердое вещество дополнительно очищали с помощью флэш-колонки, элюируя смесью 3:1 петролейный эфир/этилацетат и затем хлористым метиленом, с получением 338а в виде желтого твердого вещества (800 мг, 69%). MS: [M+H]+ 236.
Пример 338b 1-метил-4-(6-нитропиридин-3-ил)-1,4-диазепан 338b
Бутыль емкостью 500 мл продували азотом и помещали в нее 338а (0.8 г, 3.4 ммоль), 10% палладий на углероде (50% полной массы, 100 мг) и метанол (100 мл). Бутыль вакуумировали, наполняли газообразным водородом и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем откачивали водород и бутыль наполняли азотом. Катализатор удаляли посредством фильтрации через подложку из Целита и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 338b (0.6 г, неочищенного). MS: [М+Н]+ 207.
Пример 338c 5-бром-1-метил-3-(5-(4-метил-1,4-диазепан-1-ил)пиридин-2-иламино)пиридин-2(1Н)-он 338с
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой и обратным холодильником, помещали 338b (968 мг, 4.7 ммоль), 3,5-дибром-1-метилпиридин-2(1Н)-он (1.24 г, 4.7 ммоль) и карбонат цезия (3.8 г, 12 ммоль). После барботирования полученного раствора азотом в течение 30 минут добавляли Ксантфос (272 мг, 0.47 ммоль) и трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (430 мг, 0.47 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. По прошествии указанного времени реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разделяли между этилацетатом (100 мл) и водой (100 мл) и фильтровали. Водный слой отделяли и экстрагировали этилацетатом (2×50 мл). Органические слои объединяли, промывали солевым раствором (50 мл) и сушили над сульфатом натрия. Осушитель удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на флэш-колонке, элюируя смесью петролейный эфир/этилацетат, с получением 338с (918 мг, 50%). MS: [M+H]+ 392.
Пример 338d 4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-метил-1,4-диазепан-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 338d
В герметичную пробирку помещали смесь 338 с (274 мг, 0.7 ммоль), 210d (337 мг, 0.7 ммоль), Pd(dppf)Cl2 (33 мг, 0.04 ммоль), K3PO4.3H2O (372 мг, 1.4 ммоль) и NaOAc (115 мг, 1.4 ммоль) в CH3CN (20 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. И реакционную смесь нагревали при 110°С в микроволновом излучении в течение 3 часов. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 30:1 хлористый метилен/метанол, с получением 338d в виде желтого твердого вещества (120 мг, 43%). MS: [M+H]+ 668.
К раствору 338d (120 мг, 0.18 ммоль) в пропан-2-оле (10 мл), тетрагидрофурана (10 мл) и воды (2 мл) добавляли LiOH (1.1 г, 57 ммоль). Смесь перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Затем ее выпаривали и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 338 в виде белого твердого вещества (60 мг, 54%). MS: (М+Н)+ 626.16 1Н ЯМР (500 МГц, MeOD) δ 8.18 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.06 (m, 3H), 6.88 (d, J=11.5, 2H), 6.59 (s, IH), 4.38 (m, 2H), 4.07 (m 3H), 3.87 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.42 (m, 2H), 3.31 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.60 (m, 2H), 2.50 (m, 4H), 2.42 (m, 2H), 1.75 (m, 6H).
Пример 339 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3(4)-триен-6-он 339
Пример 339а [4-фтор-2-(1-метил-5-{[5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3-триен-5-ил}фенил]метилацетат 339а
Согласно примеру 210е, 150 мг (0.30 ммоль) (4-фтор-2-{б-оксо-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3-триен-5-ил}-6-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 341b превращали в 339а в виде желтого твердого вещества (129 мг, 60%). MS: [M+H]+ 712.
Согласно примеру 148, 120 мг 339а (0.17 ммоль) превращали в 339 в виде белого твердого вещества (56 мг, 50%). MS: [M+H]+ 700. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 8.56 (d, J=3.0 Гц, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.88 (d, J=3.0 Гц, 1H), 7.37 (m, 4H), 7.23 (d, J=9.5 Гц, 1H), 4.60 (t, J=10.0 Гц, 1H), 4.56 (t, J=13.0 Гц, 2H), 4.46 (t, J=12.0 Гц, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.43 (m, 1H), 3.07 (t, J=9.0 Гц, 4H) 2.93 (s, 2H), 2.85 (s, 2H), 2.38 (t, J=9.0 Гц, 4H), 1.87 (m, 4H).
Пример 340 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-илпириди11-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 340
Пример 340а {4-фтор-2-[1-метил-5-({5-[4-метилпиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-6-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил}фенил}метилацетат 340а
В виалу для микроволнового реактора, снабженную магнитной мешалкой, помещали (2-бром-4-фтор-6-{7-оксо-3,6-диазатетрацикло[9.2.1.02,10.03,8]тетрадека-2(10),8-диен-6-ил}фенил)метилацетат 334g (293 мг, 0.65 ммоль), 1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-илбороновую кислоту 197f (450 мг, 1.3 ммоль), PdCl2(dppf) (54 мг, 0.065 ммоль), 2.0 М Na2CO3 (2.0 эквив.) и 1,2-диметоксиэтан (18 мл). После трех циклов вакуумирования/обработки аргоном, смесь нагревали при 130°С в микроволновом излучении в течение 0.5 часов. Затем ее фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 10:1 дихлорметан/метанол, с получением 340а в виде коричневого твердого вещества (130 мг, 33%). ЖХМС: [М+Н]+ 666.
Смесь 340а (130 мг, 0.20 ммоль) и LiOH (470 мг, 20.0 ммоль) в изопропаноле/ТГФ (1:1,10 мл) и воды (3 мл) перемешивали при 30°С в течение 2 часов. Смесь выпаривали в вакууме, и остаток экстрагировали этилацетатом (30 мл × 2). Объединенный этилацетатный экстракт концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали с помощью преп.-ВЭЖХ с получением 340 (50 мг, 41%). ЖХМС: [М+Н]+ 624. 1Н ЯМР (500 МГц, MEOD) δ 8.54 (s, 1Н), 7.93 (a, 1H), 7.41-7.43 (m, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.20-7.22 (m, 2H), 7.02-7.04 (d, J=9.0 Гц, 1H), 6.67-6.68 (d, J=3.0 Гц, 1H), 4.46-4.55 (m, 2H), 4.18-4.38 (m, 3Н), 3.98-4.06 (m, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.46-3.48 (m, 1H), 3.14-3.18 (m, 4H), 2.62-2.64 (t, J=4.5 Гц, 4Н), 2.36 (s, 3Н), 1.88-1.95 (m, 3H), 1.67-1.69 (m, 1H), 1.01-1.30 (m, 2H).
Пример 341 5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3- триен-6-он 341
Пример 341а (2-бром-4-фтор-6-{6-оксо-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3-триен-5-ил}фенил)метилацетат 341а
В одногорлую круглодонную колбу емкостью 100 мл, снабженную магнитной мешалкой, помещали 8-тиа-4,5-диазатрипикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3-триен-6-он (1 г, 4.85 ммоль), 2,6-дибром-4-фторбензилацетат 197с (4.8 г, 14.6 ммоль), иодид меди(I) (553 мг, 2.9 ммоль), N1,N2-диметилэтан-1,2-диамин (512 мг, 5.82 ммоль), Cs2CO3 (3.2 г, 9.7 ммоль) и 1,4-диоксан (50 мл). Систему вакуумировали и затем повторно наполняли N2. К колбе присоединяли обратный холодильник и реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 16 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный осадок очищали с помощью колоночной флэш-хроматографии, элюируя смесью 5:1 петролейный эфир/этилацетат, с получением 341а в виде желтого твердого вещества (437 мг, 20%). MS: [М+Н]+ 451.
Пример 341b (4-фтор-2-{6-оксо-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3-триен-5-ил}-6-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил)метилацетат 341b
Согласно примеру 210d, 341а (400 мг 0.88 ммоль) превращали в 34Ib в виде желтого твердого вещества (353 мг, 80%). MS: [M+H]+ 499.
Пример 341c [4-фтор-2-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-{6-оксо-8-тиа-4,5-диазатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7),3-триен-5-ил}фенил]метилацетат 341с
Согласно примеру 210а, 180 мг (0.36 ммоль) 341b превращали в 341 с в виде желтого твердого вещества (120 мг, 50%). MS: [М+Н]+ 670.
Согласно примеру 148, 120 мг 341с (0.18 ммоль) превращали в 341 в виде белого твердого вещества (46 мг, 41%). MS: [М+Н]+ 628. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.58 (d, J=2.5, 1Н), 8.26 (s, 1H), 7.95 (d, J=3.0, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.45 (d, J=2.0, 1H), 7.31 (m, 1H), 7.25(m, 1H), 7.11 (dd, J=8.0, 1H), 6.82 (d, J=9.0, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.01(s, 1H), 3.71 (s, 3H), 3.15 (t, J=4.5, 4H), 2.99 (t, J=5.0, 2H), 2.87 (t, J=5.5, 2H), 2.60 (t, J=5.0,4H), 2.37 (s, 3H), 1.99 (s, 4H).
Пример 342 2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридазин-3-ипамино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он 342
Пример 342а 6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридазин-3-амин 342а
В герметичную пробирку, снабженную магнитной мешалкой, помещали 6-хлор-пиридазин-3-амин (1.3 г, 10 ммоль) и 1-метилпиперазин (15 мл). Реакционную смесь нагревали при 170°С в течение 3 часов. Затем ее охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Полученный осадок промывали CH3CN (20 мл) с получением 342а в виде желтого твердого вещества (1.5 г, 78%), MS: [M+H]+ 194. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО) δ 7.12 (d, J=9.0 Гц, 1H), 6.74 (d, J=9.0 Гц, 1H), 5.72 (s, 2H), 3.27 (t, J=4.5 Гц, 4H), 2.40 (t, J=4.5 Гц, 4H), 2.20 (s, 3H).
Пример 342b 5-бром-1-метил-3-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)-пиридин-2(1Н)-он 342b
Согласно примеру 188с, 342а (580 мг, 3.0 ммоль) превращали в 342b в виде желтого твердого вещества (920 мг, 80%). MS: [М+Н]+ 381.
Пример 342c 4-фтор-2-(1-метил-5-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетат 342с
Согласно примеру 188f, 482 мг 342b (1.0 ммоль) и 379 мг 5-бром-1-метил-3-(6-(4-метилпиперазин-1-ип)пиридазин-3-иламино)пиридин-2(1Н)-она (1.0 ммоль) подвергали взаимодействию с получением 342с в виде желтого твердого вещества (261 мг, 40%). MS: [М+Н]+ 655.
Согласно примеру 188, 342с (150 мг 0.23 ммоль) превращали в 342 в виде белого твердого вещества (73 мг, 52%). ЖХМС: [М+Н]+ 613. 1Н ЯМР (500 МГц, CDCl3) δ 8.68 (d, J=2.5 Гц, 1Н), 7.76 (s, 1H), 7.46 (d, J=2.0 Гц, 1H), 7.12 (dd, J=9.0 Гц, 1Н), 7.0 (m, 2H), 6.90 (dd, J=9.0 Гц, 1H), 6.86 (s, 1H), 4.50 (dd, J=11.0 Гц, 1H), 4.27 (m, 2H), 4.16 (m, 3Н), 3.88 (m, 1H), 3.71 (s, 3Н), 3.54 (m, 4H), 2.58 (m, 7H), 2.35 (s, 3Н), 1.90 (m, 2Н), 1.71 (m, 2Н).
Пример 901 Биохимический анализ Btk
Распространенным способом стандартного биохимического анализа киназы Btk, который можно использовать для тестирования соединений формулы I, является следующий. Получают не содержащую фермент Btk основную смесь, включающую буфер для киназы, участвующей в передаче клеточного сигнала IX (25 мМ Трис-HCl, рН 7,5,5 мМ β-глицерофосфат, 2 мМ дитиотрейтол, 0,1 мМ Na3VO4, 10 нМ MgCl2), 0,5 мкМ субстрата 2 биотинилированного пептида Promega РТК и 0,01% BSA (бычий сывороточный альбумин). Получают содержащую фермент Btk основную смесь, включающую буфер для киназы, участвующей в передаче клеточного сигнала IX, 0,5 мкМ субстрата 2 биотинилированного пептида РТК, 0,01% BSA и 100 нг/лунку (0,06 мкг/лунку) фермента Btk. Фермент Btk получают следующим образом: человеческую Btk дикого типа полной длины (регистрационный номер NM-000061) с С-концевым V5 и меткой 6× His субклонируют в вектор pFastBac для получения бакуловируса, несущего данную Btk с меченым эпитопом. Получение бакуловируса осуществляют на основе инструкций фирмы Invitrogen, детально описанных в ее опубликованном протоколе "Bac-toBac Baculovirus Expression Systems" (Бакуловирусные экспрессирующие системы Bac-toBac) (№ по каталогу 10359-016 и 10608-016). Вирус пассажа 3 используют, чтобы инфицировать клетки Sf9 с целью сверхэкспрессии рекомбинантного белка Btk. Затем белок Btk очищают до гомогенности, используя колонку Ni-NTA. Чистота конечного белкового препарата превышает 95%, основываясь на чувствительном окрашивании Sypro-Ruby. Раствор 200 мкМ АТФ готовят в воде и подводят до рН 7,4 с помощью 1 н. NaOH. Соединения в количестве 1,25 мкл в 5% ДМСО переносят в 96-луночный полистироловый планшет Costar 1/2 площади. Соединения тестируют раздельно и с помощью 11-точечной дозозависимой кривой (исходная концентрация 10 мкМ; разведение 1:2). Не содержащую фермент основную смесь (в качестве отрицательного контроля) и содержащую фермент основную смесь в количестве 18,75 мкл переносят в соответствующие лунки в 96-луночном полистироловом планшете Costar площади 1/2. 5 мкл 200 мкМ АТФ добавляют к данной смеси в 96-луночном полистироловом планшете Costar площади 1/2 для получения конечной концентрации АТФ 40 мкМ. Реакции позволяют инкубироваться в течение 1 часа при комнатной температуре. Реакцию останавливают буфером для детекции Perkin Elmer IX, содержащим 30 мМ ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота), 20 нМ SA-APC и 1 нМ Ab (антитело) РТ66. Планшет читают, используя флуоресценцию с разрешением во времени, с помощью Perkin Elmer Envision при использовании возбуждающего фильтра 330 нм, эмиссионного фильтра 665 нм и 2-го эмиссионного фильтра 615 нм. Затем рассчитывают значения IC50. Альтернативно, можно использовать анализ Lanthascreen для оценки активности Btk по количественному определению фосфорилированного пептидного продукта. Уровень FRET, которая происходит между флуоресценом на пептидном продукте и тербием на антителе для детекции, снижается при добавлении ингибиторов Btk, которые уменьшают фосфорилирование пептида. В конечном объеме реакции 25 мкл Btk(h) (0,1 нг/25 мкл реакции) инкубируют с 50 мМ Hepes pH 7,5, 10 мМ MgCl2, 2 мМ MnCl2, 2 мМ DTT (дитиотрейтол), 0,2 мМ NaVO4, 0,01% BSA и 0,4 мкМ флуоресцеин поли-GAT. Реакцию инициируют добавлением АТФ до 25 мкМ (Km АТФ). После инкубирования в течение 60 минут при комнатной температуре реакцию останавливают добавлением конечной концентрации 2 нМ антитела для детекции Tb-PY20 в 60 мМ ЭДТА в течение 30 минут при комнатной температуре. Детекцию проводят на приборе Perkin Elmer Envision с возбуждением при 340 нм и эмиссии при 495 и 520 нм. Примеры значений IC50 ингибированя Btk приведены Таблицах 1, 2 и 3.
Пример 902 Исследование Btk на клетках Ramos
Другим распространенным способом стандартного клеточного анализа киназы Btk, который можно использовать для тестирования соединений формулы I, является следующий. Клетки Ramos инкубируют при густоте 0,5×107 клеток/мл в присутствии тест-соединения в течение 1 часа при 37°С. Затем клетки стимулируют инкубированием с 10 мкг/мл F(ab)2 к человеческому IgM в течение 5 минут при 37°С. Клетки осаждают, лизируют, проводят анализ белка на осветленном лизате. Равные количества белка из каждого образца подвергают SDS-PAGE (электрофорез в полиакриламидном геле с использованием додецилсульфата натрия) и вестерн-блоттингу либо с антителом к фосфо-Btk(Tyr223) (Cell Signaling Technology No 3531; Epitomics, No по каталогу 2207-1), либо с антителом к фосфо-Btk (Tyr551) (BD Transduction Labs No 558034) с целью оценки аутофосфорилирования Btk или с антителом к Btk (BD Transduction Labs No 611116) для контроля общих количеств Btk в каждом лизате.
Пример 903 Исследование пролиферации В-клеток
Распространенным способом стандартного клеточного анализа пролиферации В-клеток, который можно использовать для тестирования соединений формулы I, является следующий. В-клетки очищают из селезенок мышей Balb/c в возрасте 8-16 недель, используя набор для выделения В-клеток (Miltenyi Biotech, No по каталогу 130-090-862). Тестируемые соединения разводят в 0,25% ДМСО и инкубируют с 2,5×105 очищенных В-клеток селезенки мышей в течение 30 минут перед добавлением 1 мкг/мл антитела к IgM мыши (Southern Biotechnology Associates No по каталогу 1022-01) в конечном объеме 100 мкл. После инкубирования в течение 24 часов добавляют 1 мкКи 3Н-тимидина и инкубируют планшеты в течение дополнительных 36 часов перед сбором, используя протокол изготовителя для системы анализа поглощения SPA[3H]-тимидина (Amersham Biosciences No RPNQ0130). Флуоресценцию на основе SPA-частиц подсчитывают на микро-счетчике (Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer).
Пример 904 Исследование пролиферации Т-клеток
Распространенным способом стандартного анализа пролиферации Т-кпеток, который можно использовать для тестирования соединений формулы I, является следующий. Т-клетки очищают из селезенок мышей Balb/c в возрасте 8-16 недель, используя набор для выделения Т-клеток пэннингом (Miltenyi Biotech, No no каталогу 130-090-861). Тестируемые соединения разводят в 0,25% ДМСО и инкубируют с 2,5×105 очищенных Т-клеток селезенки мышей в конечном объеме 100 мкл в прозрачных планшетах с плоским дном, предварительно покрытых в течение 90 минут при 37°С 10 мкг/мл каждого из антител, к CD3 (ВО No 553057) и к CD28 (BD No 553294). После инкубирования в течение 24 часов добавляют 1 мкКи 3Н-тимидина и инкубируют планшеты в течение дополнительных 36 часов перед сбором, используя протокол изготовителя для системы анализа поглощения SPA[3Н]-тимидина (Amersham Biosciences No RPNQ 0130). Флуоресценцию на основе SPA-частиц подсчитывают на микро-счетчике (Wallace Triplex 1450, Perkin Elmer).
Пример 905 Исследование ингибирования CD86
Распространенным способом стандартного клеточного анализа ингибирования активности В-клеток, который можно использовать для тестирования соединений формулы I, является следующий. Суммарные спленоциты мышей очищают из селезенок мышей Balb/c в возрасте 8-16 недель путем лизиса красных кровяных клеток (BD Phanningen No555899). Тестируемые соединения разводят в 0,5% ДМСО и инкубируют с 1,25×106 спленоцитов в конечном объеме 200 мкл в прозрачных планшетах с плоским дном (Falcon 353072) в течение 60 минут при 37°С. Затем клетки стимулируют добавлением 15 мкг/мл IgM (Jackson ImmunoResearch 115-006-020) и инкубируют в течение 24 часов при 37°С, 5% СО2. После инкубирования в течение 24 часов клетки переносят в прозрачные 96-луночные планшеты с коническим дном и осаждают центрифугированием при 1200×g×5 минут. Клетки предварительно блокируют CD16/CD32 (BD Pharmingen No 553142) с последующим тройным окрашиванием CD19-FITC (BD Phanningen No 553785), CD86-PE (BD Pharmmgen No 553692) и 7AAD (BD Phanningen No 51-6898 IE). Клетки подвергают сортингу на BD FACSCalibur и пропускают на популяции CD19+/7AAD-. Уровни поверхностной экспрессии CD86 на пропускаемой популяции измеряют относительно концентрации тест-соединения. Типичные результаты приведены в Таблице 4.
Пример 906 Исследование выживаемости клеток b-all
Следующее представляет собой способ стандартного исследования выживаемости клеток B-ALL (острого лимфобластного лейкоза) с использованием снятия показаний ХТТ для измерения числа жизнеспособных клеток. Данный анализ можно использовать для тестирования соединений формулы I на их способность ингибировать выживаемость клеток B-ALL в культуре. Одной из линий человеческого В-клеточного острого лимфобластного лейкоза, которую можно использовать, является SUP-B 15, линия человеческих пре-В-клеток ALL, которая имеется в АТСС (американской коллекции типовых культур).
Клетки пре-B-ALL SUP-B 15 помещают во множество 96-луночных планшетов для микротитрования в 100 мкл среды Iscove's + 20% FBS (сыворотка телячьих эмбрионов) в концентрации 5×105 клеток/мл. Затем добавляют тест-соединения в конечной концентрации 0,4% ДМСО. Клетки инкубируют при 37°С с 5% CO2 до 3 дней. Через 3 дня клетки разделяют в соотношении 1:3 в свежие 96-луночные планшеты, содержащие тест-соединение, и позволяют расти в течение дополнительных 3 дней. После каждого 24-часового периода в одну из повторностей 96-луночных планшетов добавляют 50 мкл раствора XTTn (Roche) и проводят считывания поглощения в точках 2, 4 и 20 часов согласно инструкциям изготовителя. Затем берут результат считывания, проведенного с OD (оптической плотностью) для клеток, обработанных только ДМСО, в линейной области анализа (0,5-1,5) и измеряют долю жизнеспособных клеток в лунках, обработанных соединением, относительно клеток, обработанных только ДМСО.
Пример 907 Анализ цельной крови на CD69
Человеческую кровь получали от здоровых добровольцев со следующими ограничениями: 1 неделя без приема лекарств, некурящие. Кровь (приблизительно 20 мл для 8 соединений) собирали путем венопункции в пробирки Vacutainer® (Becton, Dickinson и Со.) с гепарином натрия,
Растворы соединений формулы I в количестве 10 мМ в ДМСО разбавляют 1:10 в 100% ДМСО, затем проводят трехкратное разбавление в 100% ДМСО для построения десятиточечной дозозависимой кривой. Далее соединения разбавляют 1:10 в PBS и, затем, аликвоту в количестве 5.5 мкл каждого соединения помещают в дупликатах на 2 мл 96-луночный планшет; в качестве контроля и нестимулирумых лунок добавляют 5.5 мкл 10% ДМСО в PBS. В каждую лунку добавляют человеческую цельную кровь - HWB (100 мкл). После перемешивания планшеты инкубируют при 37°С, 5% СО2, 100% влажности в течение 30 минут. В каждую лунку (кроме нестимулирумых лунок) добавляют F(ab*)2 козий античеловеческий IgM (10 мкл 500 мкг/мл раствора, 50 мкл/мл конечного) с перемешиванием и планшеты инкубируют в течение дополнительных 20 часов. После 20 часовой инкубации образцы инкубируют с меченными флуоресцином антителами в течение 30 минут при 37°С, 5% СО2, 100% влажности. Стимулируют контроль, неокрашенные и однократно окрашенные для корректировки установок и начального напряжения. Затем образцы лизируют с помощью PharM Lyse™ (BD Biosciences Phanningen) согласно инструкции производителя. Затем образцы переносят в 96 луночные планшеты, подходящие для работы на BD Biosciences HTS 96 луночной системе на машине LSRII. Данные и значения средней интенсивности флуоресценции получают с использованием программного обеспечения BD Biosciences DIVA. Вначале результаты анализируют программным обеспечением для анализа FACS (Flow Jo). IC50 для тестовых соединений определяют как концентрацию, которая уменьшает на 50% процент CD69 позитивных клеток, которые также представляют собой CD20 позитивные, стимулированные анти-IgM (среднее из 8 контрольных лунок, после вычитания среднего 8 лунок для нестимулирумого фона). Значения IC50 рассчитывают с помощью Prism version 5, с использованием подбора кривой криволинейной регрессии.
Типичные значения IC50 соединений, выбранных из Таблиц 1, 2 и 3 в анализе цельной крови на CD69, включают:
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| БИЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ ПИПЕРАЗИНА | 2012 |
|
RU2628616C2 |
| ИНГИБИТОРЫ ТИРОЗИНКИНАЗЫ БРУТОНА | 2010 |
|
RU2542585C2 |
| ИНГИБИТОРЫ СЕРИН/ТРЕОНИНОВЫХ КИНАЗ | 2013 |
|
RU2650501C2 |
| НОВЫЕ ПИРИДИНОНЫ И ПИРИДАЗИНОНЫ | 2009 |
|
RU2505538C2 |
| ГЕТЕРОАРИЛ ПИРИДОНЫ И АЗАПИРИДОНЫ С ЭЛЕКТРОФИЛЬНОЙ ФУНКЦИОНАЛЬНОСТЬЮ | 2014 |
|
RU2646758C2 |
| СОЕДИНЕНИЯ 8-ФТОРФТАЛАЗИН-1(2Н)-ОНА В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ТИРОЗИНКИНАЗЫ БРУТОНА | 2012 |
|
RU2622391C2 |
| ПЕРВИЧНЫЕ КАРБОКСАМИДЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ BТK | 2014 |
|
RU2708395C2 |
| ИНГИБИТОРЫ ТРАНСГЛУТАМИНАЗЫ 2 (TG2) | 2019 |
|
RU2781370C2 |
| ИНГИБИТОРЫ КАТЕХОЛ-О-МЕТИЛТРАНСФЕРАЗЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ПСИХОТИЧЕСКИХ РАССТРОЙСТВ | 2011 |
|
RU2586974C2 |
| ЗАМЕЩЕННЫЕ АМИДЫ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ИХ ОСНОВЕ, СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЯ, ЧУВСТВИТЕЛЬНОГО К Btk, СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РАКОВЫХ КЛЕТОК К ХИМИОТЕРАПИИ, СПОСОБ УМЕНЬШЕНИЯ ОШИБОК ПРИ ПРИЕМЕ ЛЕКАРСТВА И УЛУЧШЕНИЯ СОБЛЮДЕНИЯ СХЕМЫ ЛЕЧЕНИЯ, СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ ГИДРОЛИЗА АТФ, СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРИСУТСТВИЯ Btk В ОБРАЗЦЕ И СПОСОБ ИНГИБИРОВАНИЯ АКТИВНОСТИ В-КЛЕТОК | 2008 |
|
RU2470923C2 |
Изобретение относится к соединению, выбранному из формулы I, или его стереоизомерам, или фармацевтически приемлемым солям, где R1 представляет собой необязательно замещенный C1-С3 алкил; R2, R3 и R4 независимо выбраны из Н, F, Cl; R5 выбран из (i) необязательно замещенного C6-С20 арила, выбранного из фенила; (ii) необязательно замещенного С5-С20 гетероарила, выбранного из пиразолила, пиридинила, пиримидинила, тетрагидроизохинолинила, 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразинила, 6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазинила, 4,6,7-тригидропиразоло[3,2-с][1,4]оксазинила, 5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридинила, 2,3-дигидро-1Н-изоиндолила, 4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридинила; (iii) необязательно замещенного -(C6-С20 арил)-(C3-С20 гетероциклила), где гетероциклил выбран из азетидинила, пиперидинила, морфолино, пиперазинила; (iv) необязательно замещенного -(С5-С20 гетероарил)-(C3-С20 гетероциклила), где гетероарил выбран из пиридинила и пиридазинила и гетероциклил выбран из азетидинила, пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, 1,4-диазепанила, 2,6-диазаспиро[3.3]гептанила, 7,9-диазабицикло[3.3.1]нонанила, гексагидропирроло[3,4-с]пирролила, морфолино; (v) необязательно замещенного -(C5-С20 гетероарил)-(C1-С6 алкила), где гетероарил выбран из пиразолила и пиридинила; или (vi) необязательно замещенного -(C5-С20 гетероарил)-С(=O)-(C3-С20 гетероциклила), выбранного из (пиридинил)-С(=O)-(морфолино); R6 представляет собой Н или C1-С3 алкил; Y1 и Y2 независимо выбраны из CR6 и N; где C1-С3 алкил, C3-С20 гетероциклил, C6-С20 арил и C5-С20 гетероарил необязательно замещены от одной до трех групп, независимо выбранных из D, F, Cl, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН(СН3)2, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -CH2F, -ОС(O)СН3, -СОСН3, -NHCH3, -N(CH3)2, =O, -ОН, -ОСН3, -OCH2CH2N(CH3)2, -ОР(O)(ОН)2, -СН2ОСН3, циклопропила, азетидинила, 1-(метилазетидин-3-ил)окси, N-метил-N-оксетан-3-иламино, азетидин-1-илметила, оксетанила и морфолино; где группа (а), образованная Z1, Z2, Z3, Z4, Z5, X и NC(O), образует структуры, приведенные в формуле изобретения, и при этом волнистая линия указывает на место присоединения. Изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения состояния, опосредованного тирозинкиназой Брутона, содержащей соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или наполнитель. Соединения формулы (I) предназначены для применения в качестве лекарственного средства для лечения рака, опосредуемого тирозинкиназой Брутона. Технический результат – пиридоновые и азапиридоновые соединения для лечения нарушений, опосредованных тирозинкиназой Брутона (Btk). 7 н. и 13 з.п. ф-лы, 9 ил., 4 табл., 907 пр.
(а)
1. Соединение, выбранное из формулы I:
или его стереоизомеры, или фармацевтически приемлемые соли, где:
R1 представляет собой необязательно замещенный C1-С3 алкил;
R2, R3 и R4 независимо выбраны из Н, F, Cl;
R5 выбран из:
- необязательно замещенного C6-С20 арила, выбранного из фенила;
- необязательно замещенного С5-С20 гетероарила, выбранного из пиразолила, пиридинила, пиримидинила, тетрагидроизохинолинила, 4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразинила, 6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазинила, 4,6,7-тригидропиразоло[3,2-с][1,4]оксазинила, 5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридинила, 2,3-дигидро-1Н-изоиндолила, 4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридинила;
- необязательно замещенного -(C6-С20 арил)-(C3-С20 гетероциклила), где гетероциклил выбран из азетидинила, пиперидинила, морфолино, пиперазинила;
- необязательно замещенного -(С5-С20 гетероарил)-(C3-С20 гетероциклила), где гетероарил выбран из пиридинила и пиридазинила и гетероциклил выбран из азетидинила, пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, 1,4-диазепанила, 2,6-диазаспиро[3.3]гептанила, 7,9-диазабицикло[3.3.1]нонанила, гексагидропирроло[3,4-с]пирролила, морфолино;
- необязательно замещенного -(C5-С20 гетероарил)-(C1-С6 алкила), где гетероарил выбран из пиразолила и пиридинила;
или
- необязательно замещенного -(C5-С20 гетероарил)-С(=O)-(C3-С20 гетероциклила), выбранного из (пиридинил)-С(=O)-(морфолино);
R6 представляет собой Н или C1-С3 алкил;
Y1 и Y2 независимо выбраны из CR6 и N;
где C1-С3 алкил, C3-С20 гетероциклил, C6-С20 арил и C5-С20 гетероарил необязательно замещены от одной до трех групп, независимо выбранных из D, F, Cl, Br, I, -СН3, -СН2СН3, -СН2СН(СН3)2, -СН2ОН, -СН2СН2ОН, -С(СН3)2ОН, -CH2F, -ОС(O)СН3, -СОСН3, -NHCH3, -N(CH3)2, =O, -ОН, -ОСН3, -OCH2CH2N(CH3)2, -ОР(O)(ОН)2, -СН2ОСН3, циклопропила, азетидинила, 1-(метилазетидин-3-ил)окси, N-метил-N-оксетан-3-иламино, азетидин-1-илметила, оксетанила и морфолино;
где группа:
образует структуры:
при этом волнистая линия указывает на место присоединения.
2. Соединение по п. 1, выбранное из формул Ia-с:
3. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что каждый из R2, R3 и R4 представляет собой Н.
4. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой -CH2OH.
5. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R3 представляет собой F.
6. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой -CH2OH, каждый из R2 и R4 представляет собой Н и R3 представляет собой F.
7. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R5 представляет собой возможно замещенный C5-С20 гетероарил, выбранный из пиразолила, пиридинила, пиримидинила, 5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-ила, 5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-ила, 6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-ила и 1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ила).
8. Соединение по п. 7, отличающееся тем, что R5 замещен одной или более группами, выбранными из F, Cl, -СН3, циклопропила, азетидинила, оксетанила и морфолино.
9. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R5 выбран из структур:
при этом волнистая линия указывает на место присоединения.
10. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R6 представляет собой Н.
11. Соединение по п. 1, выбранное из:
2-(2-метил-3-(5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(2-метил-3-(5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
4-{2-метил-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил]фенил}-7-тиа-4-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6),9,11-тетраен-5-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
2-(3-(5-(5-циклопропил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-морфолинопиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(3-(5-(5-ацетил-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(3-(5-(6,7-дигидро-4Н-пиразоло[5,1-с][1,4]оксазин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-5-оксо-6-(пиридин-3-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(3-(6-(1-циклопропил-1Н-пиразол-4-иламино)-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[3-(6-{[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]амино}-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиридо[3,4-b]индолизин-1(2Н)-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-(5-{[5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-{[4-(пиперидин-4-ил)фенил]амино}-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(морфолин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-(3-{5-[(5-циклопропил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-2-(гидроксиметил)фенил)-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-[(5-этил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(4-морфолинофениламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(3-(5-(5-(3-гидроксиазетидин-1-ил)пиридин-2-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она; и
5-(3-(6,6-диметил-3,4,6,7-тетрагидро-5Н-циклопента[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1(2Н)-ил)-2-(гидроксиметил)фенил)-1-метил-3-(1-этил-1Н-пиразол-4-иламино) пиразин-2(1Н)-она.
12. Соединение по п. 1, выбранное из:
2-(2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-иламино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридазин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридазин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-3-{[5-(2-гидроксипропан-2-ил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-({5-циклопропил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-(3-{5-[(5-циклопропил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
3-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-{[4-(3-гидрокси-3-метилазетидин-1-ил)фенил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиразин-2-она;
3-{[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиразин-2-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-метил-4,5,6,7-тетрагидротиазоло[5,4-с]пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
3-[(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-{3-[5-({5-циклопропил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил}-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[4-(пиперидин-4-ил)фенил]амино}-1,2-дигидропиразин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
6-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-2-метил-4-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-2,3-дигидропиридазин-3-она;
3-[(5-фторпиридин-2-ил)амино]-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
3-{[5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
11-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-1,8,11-триазатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-2(7),8-диен-10-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-5-оксо-6-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-3-[(5-метокси-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
3-({4-[(2R)-1,4-диметил-3-оксопиперазин-2-ил]фенил}амино)-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиразин-2-она;
3-{[1-(2-гидроксиэтил)-5-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(2-метилпиримидин-4-ил)амино]-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-{[1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-3-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[3-(5-{[5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
3-{[5-(азетидин-3-ил)-1Н-пиразол-3-ил]амино}-5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-(5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-иламино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-илкарбонил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(морфолин-4-илкарбонил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-1,2-дигидропиразин-2-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-3-{[5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-(5-{[5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-3-{[5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиридин-2-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-(3-{5-[(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
6-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-4-{[5-(метоксиметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-2-метил-2,3-дигидропиридазин-3-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-5-оксо-6-(пиридин-3-иламино)-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-(3-{5-[(1,5-диметил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(1-метилазетидин-3-ил)окси]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
3-{[5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6),11-триен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({1-[2-(метиламино)этил]-1Н-пиразол-3-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-{[5-(3-гидрокси-3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-[(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
2-(5-фтор-2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидро-2Н-бензо[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({4-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]фенил}амино)-1,2-дигидропиразин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
[(2-{4,4-диметил-9-оксо-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-10-ил}-6-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил)метокси]фосфоновой кислоты;
5-(3-{5-[(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-3-(5,6,7,8-тетрагидро-2,6-нафтиридин-3-иламино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-{[5-(азетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-3-(1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-иламино)-1,2-дигидропиразин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[3-(5-{[5-(азетидин-1-илметил)-1-метил-1Н-пиразол-3-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(2-метил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-ил)амино]-1,2-дигидропиразин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[3-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(3-метилазетидин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-(3-{5-[(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-6-({4-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-(3-{6-[(2-этил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-4-метил-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
3-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(1-метилазетидин-3-ил)окси]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[(2R)-1-метилпирролидин-2-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[(2S)-1-метилпирролидин-2-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(морфолин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[3-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[2-(оксетан-3-ил)-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(6-метил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[3-(5-{[5-(1-этилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-3-[(2-метоксипиримидин-4-ил)амино]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{4-метил-6-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-{3-[5-({5-[2-(диметиламино)этокси]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил}-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилазетидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[3-(5-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-илметил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-метил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-1,2-дигидропиразин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(2-метил-1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-6-ил)амино]-1,2-дигидропиразин-2-она;
10-(3-{5-[(6-этил-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-{3-[5-({5-этил-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил}-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(морфолин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(2S)-1-метилпирролидин-2-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[(2R)-1-метилпирролидин-2-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[6-(оксетан-3-ил)-5,6,7,8-тетрагидро-1,6-нафтиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[(1-метилазетидин-3-ил)окси]пиридин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилпиперидин-4-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-{3-[5-({5-[2-(диметиламино)этокси]пиридин-2-ил}амино)-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил}-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
3-({5-[2-(диметиламино)этокси]пиридин-2-ил}амино)-5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-{[4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил]амино}-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{5-[(2-метоксипиримидин-4-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[5-(пиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-(3-{5-[(1-этил-5-метил-1Н-пиразол-3-ил)амино]-1-метил-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-5-фтор-2-(гидроксиметил)фенил)-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-[4-метил-6-({4-[1-(оксетан-3-ил)пиперидин-4-ил]фенил}амино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридазин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
6-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-2-метил-4-{[5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-2,3-дигидропиридазин-3-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпирролидин-3-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-3-{4Н,6Н,7Н-пиразоло[3,2-с][1,4]оксазин-2-иламино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
3-{[5-(4-этилпиперазин-1-ил)пиридин-2-ил]амино}-5-[2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-1-метил-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(2S)-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(2R)-(1-метилпирролидин-2-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]-8-тиа-5-азатрицикло[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[2-(гидроксиметил)-5-[1-метил-5-({4-[1-метилпиперидин-4-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-[(4-(1-метилазетидин-3-ил)фенил)амино]-1,2-дигидропиразин-2-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-a]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло-[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-(оксетан-3-ил)-4Н,5Н,6Н,7Н-пиразоло[1,5-а]пиразин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло-[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
2-(2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(оксетан-3-ил)-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-а]пиразин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиридо[3,4-b]индолизин-2-ил}фенил]-3-{1-метил-5-(N-метил, N-оксетан-3-иламинометил-1Н-пиразол-3-ил)амино}-1,2-дигидропиридин-2-она;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ил)амино]метил}-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он;
10-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-метил-5-[(1-метил-5-{[метил(оксетан-3-ил)амино]метил}-1Н-пиразол-3-ил)амино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}фенил]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-он;
10-[2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-{[5-(1-метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксопиридин-3-ил)фенил]-4,4-диметил-1,10-диазатрицикло[6.4.0.02,6]додека-2(6),7-диен-9-он;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-5-[1-метил-5-({1-метил-5-(N-метил, N-оксетан-3-иламинометил)-1Н-пиразол-3-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-5-азатрицикло-[7.4.0.02,7]тридека-1(9),2(7)-диен-6-она;
10-[2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[1-(метилпиперидин-4-ил)пиридин-2-ил]амино}-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил]]-4,4-диметил-7-тиа-10-азатрицикло-[6.4.0.02,6]додека-1(8),2(6)-диен-9-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4-дигидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]фениламино}-1,2-дигидропиразин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-2-метил-4-{[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]фениламино}-2,3-дигидропиразин-3-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4-дигидро-2Н-[1]бензотиоло[2,3-с]пиридин-1-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридазин-2-ил}амино)-1,2-дигидропиридин-2-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-{1-оксо-1Н,2Н,3Н,4Н,6Н,7Н,8Н,9Н-пиразино[1,2-а]индол-2-ил}фенил]-1-метил-3-{[4-метилпиперазин-1-ил]фениламино}-1,2-дигидропиразин-2-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метил-2-оксопиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(метоксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)-пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(5-метилгексагидропирроло[3,4-с]пиррол-2(1Н)-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-он;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метил-3-фторметилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(пиримидин-4-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метил-1,4-диазепан-1-илпиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил))-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7),3(4)-триен-6-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-илпиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил))-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
5-[5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-[1-метил-5-({5-[4-метилпиперазин-1-ил]пиридин-2-ил}амино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил]фенил]-8-тиа-4,5-диазатрицикло[7.4.0.02,7]-тридека-1(9),2(7),3(4)-триен-6-она; и
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она.
13. Соединение по п. 1, выбранное из:
2-(5-фтор-2-(метоксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метил-2-оксопиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридазин-3-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-иламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилморфолин-2-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(9-метил-3-окса-7,9-диазабицикло[3.3.1]нонан-7-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(4-метил-6-(6-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-3-иламино)-5-оксо-4,5-дигидропиразин-2-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(3-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пирид-6-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(6-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(6-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пирид-6-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(6-метил-2,6-диазаспиро[3.3]гептан-2-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
3-(5-фтор-2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[6-(4-метилпиперазин-1-ил)-пиридазин-3-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-фенил)-6,7,8,9-тетрагидро-3Н-бензо[4,5]тиено[2,3-d]пиридазин-4-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(3-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридазин-6-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
3-(5-фтор-2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[6-(4-оксетан-3-ил-пиперазин-1-ил)-пиридазин-3-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-фенил)-6,7,8,9-тетрагидро-3Н-бензо[4,5]тиено[2,3-d]пиридазин-4-она;
2-(5-фтор-2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[6-(4-оксетан-3-ил-пиперазин-1-ил)-пиридазин-3-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидро-2Н-бензо[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-6-оксо-5-(3-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридазин-6-иламино)-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидро-6,9-метанопиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
4-фтор-2-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)-6-(1-оксо-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-2(1Н)-ил)бензилацетата;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-(оксетан-3-ил)пиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-6,7,8,9-тетрагидро-[1,2,4]триазино[4,5-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(5-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-6,7,8,9-тетрагидро-[1,2,4]триазино[4,5-а]индол-1(2Н)-она;
2-(5-фтор-2-(гидроксиметил)-3-(1-метил-5-(4-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-2-иламино)-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил)фенил)-3,4,6,7,8,9-гексагидропиразино[1,2-а]индол-1(2Н)-она; и
2-(5-фтор-2-гидроксиметил-3-{1-метил-5-[5-(4-оксетан-3-ил-[1,4]диазепан-1-ил)-пиридин-2-иламино]-6-оксо-1,6-дигидропиридин-3-ил}-фенил)-3,4,5,6,7,8-гексагидро-2Н-бензо[4,5]тиено[2,3-с]пиридин-1-она.
14. Фармацевтическая композиция для лечения состояния, опосредованного тирозинкиназой Брутона, содержащая соединение по любому из пп. 1-13 и фармацевтически приемлемый носитель, скользящее вещество, разбавитель или наполнитель.
15. Способ лечения заболевания или нарушения, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-13 пациенту с заболеванием или нарушением, выбранным из артрита, отторжения трансплантата органа, системной красной волчанки.
16. Способ лечения заболевания или нарушения, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-13 пациенту с заболеванием или нарушением, где указанное заболевание или нарушение представляет собой ревматоидный артрит.
17. Способ лечения заболевания или нарушения, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп. 1-13 пациенту с заболеванием или нарушением, где указанное заболевание или нарушение представляет собой системную красную волчанку.
18. Набор для лечения состояния, опосредуемого тирозинкиназой Брутона, содержащий:
a) фармацевтическую композицию по п. 14; и
b) инструкции по применению.
19. Соединение по любому из пп. 1-13 для применения в качестве лекарственного средства для лечения рака, опосредуемого тирозинкиназой Брутона.
20. Применение соединения по любому из пп. 1-13 для получения лекарственного средства для лечения рака, опосредуемого тирозинкиназой Брутона.
| Колосоуборка | 1923 |
|
SU2009A1 |
| Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок | 1923 |
|
SU2008A1 |
| Приспособление для суммирования отрезков прямых линий | 1923 |
|
SU2010A1 |
| Колосоуборка | 1923 |
|
SU2009A1 |
| RU 2007137190 А, 20.04.2009. | |||
