СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ЛЕЙКОЗА МОЛОДНЯКА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2015 года по МПК A61K36/00 A61K31/95 A61K31/66 

Изобретение относится к ветеринарной медицине, касается способа профилактики вирусных болезней крупного рогатого скота, в частности лейкоза, и может быть использовано для обеспечения эпизоотического и ветеринарного благополучия, повышения продуктивного здоровья, количества и качества животноводческой продукции.

Лейкоз крупного рогатого скота - хроническая инфекционная болезнь опухолевой природы, этиологическим фактором которой является вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС). Инфицированию ВЛКРС и развитию болезни способствуют генетическая предрасположенность и дефекты иммунитета. Инфекционный процесс при лейкозе развивается при глубоких сбоях в иммунных процессах. Так, снижается активность Т-лимфоцитов и макрофагов, отмечаются дефекты в фагоцитарной, бактерицидной и асцессорной функциях макрофагов в результате незавершенности дифференцировки клеток и влияния на них различных ингибирующих факторов. Огромное значение в развитии лейкоза имеет неспецифическая резистентность и иммунологическая реактивность, особенно параметры клеточной системы [1]. Нарушения неспецифических защитных механизмов могут привести к расстройству клеточного взаимодействия, необходимого для индукции иммунного ответа. Вероятность инфицирования животных ВЛКРС при снижении естественной резистентности возрастает на 25-30% [2]. Экономический ущерб от лейкоза складывается из потерь по причине гибели, преждевременной выбраковки и вынужденного убоя продуктивных животных, снижения продуктивности, утраты племенной ценности, ограничений в реализации молока и племенных животных. Молоко и мясо, полученное от больных животных, содержит метаболиты, обладающие выраженными канцерогенными свойствами. Лейкоз рассматривается как болезнь, представляющая потенциальную опасность для генофонда племенного молочного скота и при отсутствии планомерной борьбы имеет тенденцию к дальнейшему нарастанию [3].

Известны способы профилактики и лечения лейкоза крупного рогатого скота коррекцией иммунного статуса в прогнозируемые периоды развития иммунодефицитов, включающие применение иммуномодуляторов. Так, для профилактики лейкоза использовали интерферон альфа-2 в пяти модификациях телятам 1-6-месячного возраста [4]. Однако продолжительность курса и низкий профилактический эффект поставили под сомнение целесообразность практического применения этого способа. Коррекцию клеточных и гуморальных факторов активности иммунной системы и естественной резистентности, особенно на фоне иммунодефицита, обеспечивает использование иммуномодуляторов природного происхождения Т- и В-активинов [5], для чего 6 мг лиофилизированного порошка В-активина растворяют в 0,01% растворе Т-активина. Т- и В-активины в комбинации вводят телятам 20-30-суточного возраста, т.е. в период завершения колострального иммунитета и начала активного функционирования собственной иммунной системы, когда под влиянием негативных факторов внешней среды возможно развитие иммунодефицитных состояний, на фоне которых животные чаще заражаются возбудителями бактериальной и вирусной природы. Восстановление активности иммунной системы и естественной резистентности до показателей физиологической нормы позволяет профилактировать появление РИД-положительных реакций у животных раннего возраста при слабой профилактической роли у животных более старшего возраста. Кроме того, сочетанное применение Т- и В-активинов стимулирует активность всех субпопуляций Т-лимфоцитов, в том числе и Т-супрессоров, что является нежелательным при лейкозном процессе.

В качестве предпочтительного аналога нами рассматривается способ профилактики и лечения лейкоза крупного рогатого скота, включающий введение лигфола по следующей схеме: 1 раз в месяц в дозах: коровам 5,0 мл, телятам в первый месяц жизни 0,1 мл, во второй 0,2 мл, в третий 0,3 мл, в четвертый 0,4 мл, в пятый и последующие 0,5 мл; введение лигфола осуществляют до достижения устойчивого благополучия [6]. Лигфол оказывает стимулирующее действие на иммуноантиоксидантные механизмы, в результате чего нормализуется состояние белой и красной крови, биохимический гомеостаз, состояние лимфоидных и паренхиматозных органов, улучшается продуктивность. Однако применение Лигфола не позволяет сдерживать инфекционный процесс, что делает его неэффективным для управления эпизоотическим процессом.

Задача изобретения - повышение эффективности профилактики лейкоза путем повышения устойчивости к заражению ВЛКРС и стабилизации лейкозного процесса.

Техническим результатом является повышение эффективности профилактики лейкоза крупного рогатого скота с использованием комплекса препаратов, обладающих низким уровнем токсичности на живой организм, отсутствием побочных эффектов (аллергизирующего, эмбриотоксического и тератогенного действия) и кумуляции (накопления токсических веществ).

Использование данного комплекса препаратов обеспечивает коррекцию и сохранение в пределах физиологической нормы активности иммунных систем и показателей естественной резистентности.

Поставленная задача решается использованием комплекса препаратов (лигфола, фоспренила и Е-селена), обеспечивающих комплексную активизацию защитных систем организма (иммунной, антиоксидантной систем и факторов естественной резистентности).

Фоспренил - 0,4%-ный раствор продукта фосфорилирования хвойных полипренолов - полиизопреноидных спиртов, относящихся к классу терпеноидов, в комплексном водном растворителе. Фоспренил стимулирует продукцию цитокинов, активизирует метаболические процессы, рост и развитие, стимулирует макрофагальные клетки организма, продукцию интерлейкинов, фактора некроза опухолей, активность естественных киллеров, фагоцитоз, усиливает гуморальный иммунный ответ [7, 8].

Е-селен - водорастворимый комплекс витамина Е и селена в виде раствора для инъекций и перорального применения. Е-селен способствует повышению эффективности витамина Е, усиливает действие витаминов А и Д₃, регулирует окислительно-восстановительные процессы, влияет на углеводно-жировой обмен, повышает сопротивляемость организма. Селен входит в состав глутатион-пероксидазы - фермента, обезвреживающего самые опасные и агрессивные свободные радикалы [9].

Способ осуществляется следующим образом.

Телкам 6-месячного возраста, свободным от ВЛКРС по результатам серологических (РИД) и молекулярно-биологических (ПЦР) исследований в комплексе, назначают лигфол, фоспренил и Е-селен, которые вводят внутримышечно по следующей схеме: лигфол и фоспренил в дозе 5 мл/гол. 1 раз в месяц, Е-селен трехкратно с интервалом в 2 месяца в дозе 3 мл/гол., увеличивая дозу каждый раз на 1 мл/гол. Продолжительность курса - 6 месяцев.

Сущность способа поясняется примерами.

Эффективность способа профилактики лейкоза крупного рогатого скота с использованием комплекса препаратов (лигфола, фоспренила и Е-селена) определяли в научно-производственных опытах в условиях хозяйства с уровнем инфицированности животных ВЛКРС 10-20% на 6-месячных телках черно-пестрой породы. Животных подбирали по принципу аналогов с учетом возраста, живой массы, клинического состояния и иммунологического статуса.

Пример 1. Влияние заявленного комплекса препаратов, вводимых по оригинальной схеме, на устойчивость молодняка крупного рогатого скота к заражению ВЛКРС определяли на клинически здоровых телках 6-месячного возраста, полученных от РИД-отрицательных коров-матерей, с отрицательными результатами серологических исследований (РИД с гликопротеидным антигеном ВЛКРС) и ПЦР, распределенных на 2 группы - опытную и контрольную. Животным опытной группы в течение 6 месяцев назначались лигфол, фоспренил и Е-селен, которые вводили внутримышечно по следующей схеме: лигфол и фоспренил в дозе по 5 мл/гол. 1 раз в месяц, Е-селен трехкратно с интервалом в 2 месяца в дозе 3 мл/гол., увеличивая дозу каждый раз на 1 мл/гол. Контрольным телкам-аналогам вводился стерильный физиологический раствор по такой же схеме. Все группы животных находились на одном скотном дворе с одинаковыми условиями кормления и ухода. Лабораторные исследования на лейкоз и иммунобиологические исследования проводили до начала опыта и через 6 месяцев после окончания опыта. За животными вели клинические наблюдения. Результаты исследований представлены в таблице 1.

Как видно из таблицы 1, до начала опыта отсутствовали достоверные различия в показателях у животных опытных и контрольной групп. После окончания опыта у животных опытной группы отмечено достоверное уменьшение абсолютного и относительного числа лимфоцитов на 13,4 и 39,0% соответственно, абсолютного числа лейкоцитов на 29,0%, уровня ВНСММ на 23%, достоверное увеличение сегментоядерных нейтрофилов на 70,9%, лизоцимной активности сыворотки крови на 69%, бактерицидной активности сыворотки крови на 17%, в сравнении с контрольными животными, что свидетельствовало об активизации как клеточного, так и гуморального иммунитета. Снижение ЦИК (на 15,7% по сравнению с фоновым показателем и на 33,4% по сравнению с контрольной группой) указывало на снижение антигенной нагрузки. Положительно реагирующих в РИД телок в 12-месячном возрасте в опытной группе не выявлено, в контрольной группе выявлено 20% серопозитивных животных.

Пример 2. Возможность стабилизации лейкозного процесса с использованием заявленного комплекса препаратов, вводимых по оригинальной схеме, определяли на телках 6-месячного возраста, полученных от РИД-положительных коров-матерей, с положительными результатами серологических исследований (РИД с гликопротеидным антигеном ВЛКРС) и ПНР, распределенных на 2 группы - опытную и контрольную. Схема опыта, как в примере 1. Результаты представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, до начала опыта все показатели у животных опытной и контрольной группы не имели достоверных различий. У животных опытной и контрольной групп после окончания опыта сохранились РИД-положительные реакции, однако титр антител к антигенам ВЛКРС у части контрольных телок повысился до 1:16, тогда как у всех животных опытной группы не превышал 1:8. У серопозитивных животных контрольной группы, по сравнению с опытной группой, повысился уровень ВНСММ на 30,1% и ЦИК на 7,4%, уменьшился процент сегментоядерных нейтрофилов на 42,6%, ЛАС - на 11,1%, БАС - на 9,1%. По данным гематологических исследований, у серопозитивных животных контрольной группы, по сравнению с опытной группой, увеличилось относительное и абсолютное число лимфоцитов на 8,4 и 23,5% соответственно, что может быть обусловлено повышением иммунометаболического статуса животных. Полученные нами данные подтверждают и дополняют данные других исследований о том, что активация лейкозного процесса происходит на фоне низкого уровня функционирования иммунной и метаболической систем организма.

Пример 3. Сравнительную эффективность заявленного и известного способов профилактики лейкоза молодняка крупного рогатого скота определяли на клинически здоровых телках 6-месячного возраста, полученных от РИД-отрицательных коров-матерей, с отрицательными результатами серологических исследований (РИД с гликопротеидным антигеном ВЛКРС) и ПЦР, распределенных на 3 группы - 2 группы опытные, 1 группа - контрольная. Животным первой опытной группы в течение 6 месяцев назначались лигфол, фоспренил и Е-селен, которые вводили внутримышечно по следующей схеме: лигфол и фоспренил в дозе по 5 мл/гол. 1 раз в месяц, Е-селен трехкратно с интервалом в 2 месяца в дозе 3 мл/гол., увеличивая дозу каждый раз на 1 мл/гол. Животным второй опытной группы лигфол вводили внутримышечно в дозе 5,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение 3 месяцев и в дозе 10,0 мл на животное 1 раз в месяц в течение следующих 3 месяцев. Животным контрольной группы вводили стерильный физиологический раствор. Все группы животных находились на одном скотном дворе с одинаковыми условиями кормления и ухода. Эффективность оценивали по клинико-физиологическим показателям (таблица 3).

Как видно из таблицы 3, клинико-физиологические данные подтвердили эффективность заявленного способа в сравнении с известным способом. Так, в первой опытной группе РИД⁺ животных не выявлено. Одно РИД* животное (10%) выявлено во второй опытной группе, 2 РИД⁺ животных (20%) - в контрольной группе, но титр антител к антигенам ВЛКРС во второй опытной группе был в 6 раз ниже, чем в контрольной группе. Телки опытных групп отличались большей упитанностью, они лучше развивались, и у них отмечали получение полноценной половой охоты.

Таким образом, заявленный способ профилактики лейкоза под контролем иммунобиологических параметров обеспечивает эффективное повышение иммунного статуса и стимуляцию естественной резистентности животных, способствует снижению постнатального инфицирования телят вирусом лейкоза КРС, снижению заболеваемости, повышению сохранности молодняка крупного рогатого скота, увеличению прироста их массы тела, а также профилактирует вероятное развитие у инфицированных животных лейкозного процесса, что свидетельствует о высокой потенциальной возможности для сдерживания инфекционного и управления эпизоотическим процессом в системе противолейкозных мероприятий.

Источники информации

1. Шубинский Т.З. Функциональные свойства Т-лимфоцитов у больных хроническим лимфолейкозом - Иммунология, 1983, №44, С. 62-65.

2. Федоров Ю.Н., Верховский О.А. Иммунодефицит домашних животных, Москва, 1996, С. 96.

3. Сюрин В.Н., Самуйленко А.Я., Соловьев Б.В., Фомин Н.В. Вирусные болезни животных, Москва: ВНИТИБП, 1998, С. 383.

4. Ивановский А.А. Использование препаратов иммуномодуляторов для профилактики лейкоза крупного рогатого скота // Сельскохозяйственная наука Северо-Востока Европейской части России. - 1995. - Т.3. - С. 26-29.

5. RU 2188655 C2, 2002.

6. RU 2320357 C1, 2008.

7. Пронин, А.В. Противовирусное действие фоспренила при гриппозной инфекции / А.В. Пронин [и др.] // Ветеринария и кормление. - 2005. - №6. - С. 26.

8. Инструкция по применению фоспренила для стимуляции неспецифической резистентности и для лечения вирусных инфекций у животных и птиц: Утв. 10 мая 2009 г.

9. Озерова В.М. Сера и селен - микроэлементы против рака / В.М. Озерова - СПб.: И.Г. «Весь», 2005. - 128 с.

Изобретение относится к области ветеринарной медицины. Сущность изобретения заключается в следующем: в течение 6 месяцев телкам 6-месячного возраста, свободным от ВЛКРС по результатам серологических (РИД) и молекулярно-биологических (ПЦР) исследований в комплексе, назначают лигфол, фоспренил и Е-селен, которые вводят внутримышечно по следующей схеме: лигфол и фоспренил в дозе 5 мл/гол. 1 раз в месяц, Е-селен трехкратно с интервалом в 2 месяца в дозе 3 мл/гол., увеличивая дозу каждый раз на 1 мл/гол. В результате коррекции основных иммунобиологических показателей и повышения естественной резистентности обеспечивается снижение постнатального инфицирования телят вирусом лейкоза КРС и профилактика вероятного развития у инфицированных животных лейкозного процесса. 3 табл., 3 пр.

Способ профилактики лейкоза молодняка крупного рогатого скота, включающий внутримышечное введение препарата лигфол, отличающийся тем, что дополнительно внутримышечно вводят препараты фоспренил и селен-Е по следующей схеме: лигфол и фоспренил 1 раз в месяц в дозе 5 мл/гол., Е-селен трехкратно с интервалом в 2 месяца в дозе 3 мл/гол., увеличивая дозу каждый раз на 1 мл/гол., а введение осуществляют телкам в 6-месячном возрасте в течение 6 месяцев.