Область техники
Изобретение относится к фармацевтической композиции и, в частности, к фармацевтической композиции для замедления прогрессирования рака печени, улучшения функций печени, уменьшения фиброза печени, цирроза печени и воспаления печени, и способствования регенерации поврежденной печени.
Сведения о предшествующем уровне техники
Гепатоцеллюлярная карцинома (HCC, рак печени) занимает пятое место среди причин смерти от рака в мире у мужчин, восьмое в женщин. HCC с трудом поддается выявлению на ранней стадии. Таким образом, задержка своевременного лечения встречается постоянно. С клинической точки зрения, гепатэктомия или пересадка печени являются лучшими способами лечения HCC. Однако, так как большая часть пациентов с HCC диагностируются на поздней стадии, по этой причине только 15% пациентов могут проходить лечение путем гепатэктомии, при этом степеь восстановления составляет меньше чем 5%. Дополнительно могут применяться другие способы лечения, включая транскатетерную артериальную химиоэмболизацию (TACE), радиочастотную катетерную абляцию (RFA) и радиационную терапию, однако, частота рецидивов HCC составляет более 80%. Когда у пациентов с клиническими проявлениями диагностируется HCC, средняя продолжительность их жизни составляет только около 6 месяцев, поэтому не только коэффициент смертности от HCC является высоким, но также и их прогноз является очень слабым. В настоящее время эффективность стандартных химиотерапевтических лекарственных средств, применяющихся для лечения HCC, например, фторурацила, пирарубицина, оксалиплатина, цисплатина и т.п., является ограниченной. Новый лекарственный препарат таргетной терапии Nexavar® (Сорафениб) в качестве ингибитора многочисленных киназ был одобрен для поздней стадии HCC или первичной HCC. Нексавар улучшает выживаемость при HCC. В 2008 году мировой рынок противоопухолевых средств составил 53.1 биллионов долларов (Nature Review in Cancer) и рынок лекарственных препаратов против рака печени составил примерно 2.5 биллиона долларов. Таким образом, разработка новых лекарственных средств, предназначенных для лечения HCC, является нереализованной потребностью в области медицины.
Краткое изложение сущности изобретения
В одном варианте осуществления изобретения предложена фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, улучшения функции печени, уменьшения фиброза печени, цирроза печени и воспаления печени, способствования регенерации поврежденной печени и/или обратному развитию фиброза печени, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве; и фармацевтически приемлемый носитель или соль, при этом мономерные звенья проантоцианидина имеют следующую формулу:
В формуле в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар.
В изобретении после экспериментальных испытаний было обнаружено, что фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться для лечения различных заболеваний печени, включая (1) рак печени, вызванный хроническим вирусным гепатитом B или инфекционным вирусным гепатитом C. Фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться отдельно или в качестве вспомогательного средства для других различных способов лечения, которые могут улучшать функцию печени пациентов с HCC, уменьшать прогрессирование HCC, увеличивать показатель операбельности и показатель успешности хирургической операции у пациентов с HCC, уменьшать послеоперационную частоту рецидивов, увеличивать показатель выживаемости и продлевать выживаемость пациентов с HCC, кроме того, улучшать качество жизни пациентов с HCC. (2) Фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться отдельно или в комбинации с другими клиническими лекарственными средствами для лечения пациентов с фиброзом печени. (3) Фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться отдельно или в комбинации с другими клиническими лекарственными средствами для лечения пациентов с жировой инфильтрацией печени, а также для улучшения функций печени для предотвращения цирроза печени и HCC.
Таким образом, изобретение представлено далее следующими пунктами.
1. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерное звено проантоцианидина имеет следующую формулу:
в которой, в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(β)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
2. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 1, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-C6 связи или C2-O7 связи.
3. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 1, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30.
4. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 1, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры при C2, C3 или C4.
5. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 1, в которой мономерные звенья проантоцинидина включают флавоноидные соединения.
6. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 5, в которой флавоноидные соединения включают катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
7. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 1, в которой мономерное звено проантоцианидина включает флаван-3-ол.
8. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 1, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
9. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 8, в которой растение включает семейство вересковые (Ericaceae), семейство розовые (Rosaceae), семейство сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или семейство крапивные (Urticaceae).
10. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования HCC, как описано в пункте 9, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) включает бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
11. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерное звено проантоцианидина имеет следующую формулу:
в которой в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой ОН, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
12. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 11, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-С6 связи или С2-O7 связи.
13. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 11, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30.
14. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 11, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры при С2, C3 или C4.
15. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 11, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флавоноидные соединения.
16. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 11, в которой флавоноидные соединения включают катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
17. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 11, в которой мономерное звено проантоцианидина включает флаван-3-ол.
18. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 11, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
19. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 18, в которой растение включает семейство вересковые (Ericaceae), семейство розовые (Rosaceae), семейство сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или семейство крапивные (Urticaceae).
20. Фармацевтическая композиция для улучшения функций печени, как описано в пункте 19, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) включает бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
21. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерное звено проантоцианидина имеет следующую формулу:
в которой в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
22. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 21, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-C6 связи или C2-O7 связи.
23. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 21, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30.
24. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 21, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры при C2, C3 или C4.
25. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 21, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флавоноидные соединения.
26. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 25, в которой флавоноидные соединения включают катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
27. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 21, в которой мономерное звено проантоцианидина включает флаван-3-ол.
28. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 21, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
29. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 28, в которой растение включает семейство вересковые (Ericaceae), семейство розовые (Rosaceae), семейство сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или семейство крапивные (Urticaceae).
30. Фармацевтическая композиция для уменьшения фиброза печени, как описано в пункте 29, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) включает бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
31. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерное звено проантоцианидина имеет следующую формулу:
в которой в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
32. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 31, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-C6 связи или C2-O7 связи.
33. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 31, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30.
34. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 31, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры при C2, C3 или C4.
35. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 31, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флавоноидные соединения.
36. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 35, в которой флаваноидные соединения включают катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
37. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 31, в которой мономерное звено проантоцианидина включает флаван-3-ол.
38. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 31, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
39. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 38, в которой растение включает семейство вересковые (Ericaceae), семейство розовые (Rosaceae), семейство сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или семейство крапивные (Urticaceae).
40. Фармацевтическая композиция для уменьшения цирроза печени, как описано в пункте 39, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) включает бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
41. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерное звено проантоцианидина имеет следующую формулу:
в которой, в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
42. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 41, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-C6 связи или C2-O7 связи.
43. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 41, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30.
44. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 41, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры при C2, C3 или C4.
45. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 41, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флавоноидные соединения.
46. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 45, в которой флаваноидные соединения включают катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
47. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 41, в которой мономерное звено проантоцианидина включает флаван-3-ол.
48. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 41, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
49. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 48, в которой растение включает семейство вересковые (Ericaceae), семейство розовые (Rosaceae), семейство сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или семейство крапивные (Urticaceae).
50. Фармацевтическая композиция для уменьшения воспаления печени, как описано в пункте 49, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) включает бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
51. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерное звено проантоцианидина имеет следующую формулу:
в которой в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
52. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 51, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-C6 связи или C2-O7 связи.
53. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 51, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30.
54. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 51, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры при C2, C3 или C4.
55. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 51, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флавоноидные соединения.
56. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 55, в которой флаваноидные соединения включают катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
57. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 51, в которой мономерное звено проантоцианидина включает флаван-3-ол.
58. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 51, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
59. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 58, в которой растение включает семейство вересковые (Ericaceae), семейство розовые (Rosaceae), семейство сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или семейство крапивные (Urticaceae).
60. Фармацевтическая композиция для способствования регенерации поврежденной печени, как описано в пункте 59, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) включает бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
61. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерное звено проантоцианидина имеет следующую формулу:
в которой в случае, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH, и R4 представляет собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
62. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 61, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-C6 связи или C2-O7 связи.
63. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 61, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30.
64. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 61, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры при C2, C3 или C4.
65. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 61, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флавоноидные соединения.
66. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 65, в которой флаваноидные соединения включают катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
67. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 61, в которой мономерное звено проантоцианидина включает флаван-3-ол.
68. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 61, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
69. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 68, в которой растение включает семейство вересковые (Ericaceae), семейство розовые (Rosaceae), семейство сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или семейство крапивные (Urticaceae).
70. Фармацевтическая композиция для способствования обратному развитию фиброза печени, как описано в пункте 69, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) включает бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
71. Применение фармацевтической композиции для замедления прогрессирования рака печени, улучшения функции печени, уменьшения фиброза печени, цирроза печени и воспаления печени, способствования регенерации поврежденной печени и/или обратному развитию фиброза печени, как описано по любому пункту 1-70.
72. Фармацевтическая композиция для замедления прогрессирования рака печени, улучшения функции печени, уменьшения фиброза печени, цирроза печени и воспаления печени, способствования регенерации поврежденной печени и/или обратному развитию фиброза печени, как описано по любому пункту 1-70.
Подробное описание представлено в следующих вариантах осуществления с обращением на сопровождающие чертежи.
Краткое описание чертежей
Изобретение может быть полностью понятно при прочтении нижеследующего подробного описания и примеров со ссылками, сделанными на сопровождающие чертежи, на которых:
На ФИГ.1a-1f представлен 3-флаванол, 3,4-флаванол, катехин и эпикатехин;
На ФИГ.2a-2e представлены масс-спектры, полученные методом пиролитической газовой хроматографии - масс-спектрометрии, проантоцианидина после повторной очистки 95% этанольного проантоцианидин-содержащего экстракта бомерии белоснежной Boehmeria nivea L. Gaud.;
На ФИГ.3 представлен инфракрасный спектр поглощения проантоцианидина после повторной очистки 95% этанольного экстракта бомерии белоснежной Boehmeria nivea L. Gaud.;
На ФИГ.4a-4b представлены масс-спектры, полученные методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (+/-), проантоцианидина после повторной очистки 95% этанольного экстракта бомерии белоснежной Boehmeria nivea L. Gaud.;
На ФИГ.5a-5c представлены спектры 13C ЯМР и 1H ЯМР проантоцианидина после повторной очистки 95% этанольного экстракта бомерии белоснежной Boehmeria nivea L. Gaud.;
На ФИГ.6a-6b, соответственно, показано связывание посредством C4-C8 связи и C4-C6 связи в соответствии с детектированными спектрами 1H ЯМР и 13C ЯМР, в изобретении мономерные звенья очищенного проантоцианидинового полимера связаны друг с другом, главным образом, посредством C4-C8 связи;
На ФИГ.7a-7c представлены масс-спектры, полученные методом времяпролетной масс-спектрометрии с лазерной ионизацией и десорбцией из жидкой матрицы (MALDI-TOF), проантоцианидина после повторной очистки 95% этанольного экстракта бомерии белоснежной Boehmeria nivea L. Gaud.;
На ФИГ.8 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на показатель выживаемости, в изобретении, трансгенных мышей с HCC, индуцированной геном X вируса гепатита B;
На ФИГ.9 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на HCC у трансгенных мышей с HCC, индуцированной геном X вируса гепатита B, в изобретении оцененный по соотношению масса печени/масса тела;
На ФИГ.10 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на функцию печени у трансгенных мышей с HCC, индуцированной геном X вируса гепатита B, в изобретении оцененный по показателю функции печени - аланинаминотрансферазы (ALT);
На ФИГ.11 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на функцию печени у трансгенных мышей с HCC, индуцированной геном X вируса гепатита B, в изобретении оцененный по показателю функции печени - аспартатаминотрансферазы (AST);
На ФИГ.12 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на фиброз печени, индуцированный химическим веществом DEN у крыс, в изобретении оцененный по содержанию гидроксипролина;
На ФИГ.13 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на фиброз печени, индуцированный химическим веществом DEN у крыс, в изобретении оцененный по области окрашивания α-SMA;
На ФИГ.14 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на фиброз печени, индуцированный химическим веществом DEN у крыс, в изобретении оцененный по содержанию гидроксипролина;
На ФИГ.15-16 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на показатель выживаемости у крыс с фиброзом печени/раком печени, в изобретении индуцированным химическим веществом DEN; и
На ФИГ.17 показан эффект фармацевтических композиций (BEL-X) на регенерацию печени у крыс с фиброзом печени, индуцированным химическим веществом DEN, в изобретении оцененный по коэффициенту регенерации объема печени.
Подробное описание изобретения
В последующем подробном описании, для целей пояснения, многочисленные конкретные детали изложены для того, чтобы предоставить исчерпывающее понимание раскрытых вариантов осуществления изобретения. Однако, может быть очевидно, что один или несколько вариантов могут быть осуществлены на практике без этих конкретных деталей. В других случаях широко известные структуры и устройства показаны схематически для того, чтобы облегчить описание чертежей.
Изобретение рассматривает проантоцианидин в качестве активного ингредиента фармацевтической композиции (BEL-X) с целью достижения замедления прогрессирования HCC, улучшения функций печени, уменьшения фиброза печени, цирроза печени и воспаления печени, и способствования регенерации поврежденной печени.
В изобретении проантоцианидин, обладающий эффектом по замедлению прогрессирования HCC, улучшению функций печени, уменьшению фиброза печени, цирроза печени и воспаления печени, и способствованию регенерации поврежденной печени, может быть экстрагирован из растения. В одном варианте используемое растение может включать семейство вересковые (Ericaceae), розовые (Rosaceae), сосновые (Pinaceae), виноградовые (Vitaceae) или крапивные (Urticaceae), предпочтительно бомерию белоснежную семейства крапивные (Urticaceae Boehmeria nivea L. Gaud.). Подлежащие экстрагированию части растения могут включать корни, стебли, листья и/или фрукты.
В изобретении экстрагирование из растения может быть проведено с использованием известных стандартных способов. В одном варианте высушенные корни, стебли, листья и/или фрукты растения режут или измельчают. Затем растение экстрагируют с использованием экстрагирующего раствора. В одном варианте для экстрагирования выбраны корни и/или стебли бомерии белоснежной Boehmeria nivea L. Gaud.
Экстрагирующий раствор может быть выбран из воды или раствора, состоящего из смеси воды и растворителей с полярностями, отличающимися от воды. К растворителям с отличающимися от воды полярностями относятся спирт, ацетон, метанол или этилацетат. Растворители могут использоваться отдельно, в смеси друг с другом или в смеси с водой. Соотношение экстрагирующего раствора и растения не имеет конкретного ограничения. В одном варианте соотношение экстрагирующего раствора и растения составляет 1:10 (масса/масса).
Во время экстракции температура экстракции может незначительно изменяться в зависимости от выбранного экстрагирующего раствора. В одном варианте растение может быть погружено в экстрагирующий раствор при комнатной температуре. В другом варианте экстрагирующий раствор может быть нагрет до его температуры кипения (60-100°C). Время экстракции составляет примерно от 2 часов до семи дней в зависимости от температуры экстракции. К тому же, в процессе экстракции в экстрагирующий раствор при необходимости может быть добавлен, например, хлорид натрия, разбавленная неорганическая кислота (например, разбавленная соляная кислота) или органическая кислота (например, витамин С или винная кислота) для регулирования величины pH экстрагирующего раствора.
Затем, экстракт, содержащий активный ингредиент проантоцианидин, концентрируют и сушат, или, в случае необходимости, проводят частичную или полную очистку экстракта. В одном варианте, в случае способа частичной очистки, высушенный экстракт повторно растворяют в 95% спирте и/или водном растворе метанола. Затем полученный раствор экстрагируют с использованием различных по полярности растворителей для частичного удаления примесей, например, с использованием аполярного растворителя (например, н-гексана) для удаления липидов и аполярных веществ, и затем с использованием трихлорметана и/или этилацетата для удаления низкомолекулярных фенольных соединений. Затем экстрагированную растворителем жидкую фазу концентрируют и сушат с получением частично очищенного проантоцианидина.
Способ полной очистки может включать следующие стадии. Частично очищенный экстракт растворяют в спирте или водном растворе метанола и помещают в колонку с молекулярными ситами. Затем выполняют элюирование с использованием различных растворов и/или смесей растворов для очистки и отделения проантоцианидина. В одном варианте порядок элюирования различными растворами является следующим: 95% спирт, 95% спирт/метанол (1:1, об/об), 50% метанол и 50% водный раствор ацетона. Растворы, которые были элюированы посредством каждого элюента, собирали в партии. Затем очищенный проантоцианидин в элюированном растворе детектировали с использованием жидкостной хроматографии (280 нм). Растворы проантоцианидина с различными молекулярно-массовыми распределениями могут быть получены путем сбора растворов, элюированных посредством различных элюентов. Затем элюированный раствор концентрировали при температуре ниже 40°C и сушили вымораживанием с получением очищенного проантоцианидина. В одном варианте колонка с молекулярными ситами, используемая для элюирования, представляет собой колонку Sephadex LH-20 (приобретенную у компании German Amersham Corporation).
В изобретении, мономерные звенья очищенного проантоцианидина имеют следующую формулу.
В одном варианте, когда R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H. В другом варианте, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой H и R3 представляет собой H. В другом варианте, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой ОН и R3 представляет собой H. В другом варианте, когда R1 представляет собой OH, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой OH. В формуле R4 может представлять собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар.
Мономерные звенья проантоцианидина могут содержать R или S оптические изомеры при C2, C3 или C4.
Структура мономерных звеньев проантоцианидина может содержать флавоноидные соединения, например, катехин, эпикатехин, эпиафзетихин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины. В одном варианте мономерные звенья проантоцианидина могут содержать флаван-3-ол или производные флавана.
В изобретении проантоцианидин имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 30, предпочтительно от 3 до 20. Мономерные звенья проантоцианидина могут быть связаны друг с другом посредством C4-C8 связи, C4-С6 связи или C2-O7 связи. Проантоцианидин имеет среднюю молекулярную массу, изменяющуюся от 600 до 10000.
В одном варианте очищенный проантоцианидин может включать проантоцианидин с одной степенью полимеризации. В другом варианте очищенный проантоцианидин может включать смесь проантоцианидина с различными степенями полимеризации.
В изобретении экстрагированный проантоцианидин может быть приготовлен в форме фармацевтической композиции, предназначенной для замедления прогрессирования рака печени, улучшения функции печени, уменьшения фиброза печени, цирроза печени и воспаления печени, и способствования регенерации поврежденной печени, которая содержит проантоцианидин и фармацевтически приемлемый носитель или соль.
Фармацевтически приемлемый носитель может включать, но без ограничения, растворитель, дисперсионную среду, покрытие, антибактериальное средство, противогрибковое средство, изотонический агент, замедляющий поглощение агент, или фармацевтический компатибилизатор. Для различных способов введения фармацевтическая композиция может быть изготовлена в форме различных пригодных лекарственных форм с использованием известных способов.
Фармацевтически приемлемая соль может включать, но без ограничения, неорганические соли или органические соли. Неорганические соли могут включать, например, соли щелочных металлов, такие как соли натрия, соли калия или соли амина, соли щелочноземельных металлов, такие как соли магния или соли кальция, или соли двухвалентных или четырехвалентных катионов, такие как соли цинка, соли алюминия или соли циркония. Органические соли могут включать соли дициклогексиламина, соли метил-в-глюкамина или соли аминокислот, такие как соли аргинина, соли лизина, соли гистидина или соли глутамина.
В изобретении способы введения фармацевтической композиции (BEL-X) могут включать пероральное, непероральное введение, введение посредством ингаляции-распыления или посредством имплантированного резервуара. Непероральные способы включают подкожные, внутрикожные, внутривенные, внутримышечные, интраартикулярные, внутриартериальные, интрасиновиальные, интрастернальные, интратекальные или интралезиональные инъекции или методы перфузии.
Лекарственные формы для перорального введения могут включать, но без ограничения, таблетки, капсулы, эмульсии, водные суспензии, дисперсии или растворы.
В изобретении, после проведения экспериментальных испытаний было обнаружено, что фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться для лечения различных болезней печени, включая (1) рак печени, ассоциированный с хронической инфекцией, вызванной вирусом гепатита В или вирусом гепатита С. Фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться в качестве основного средства или вспомогательного средства для других различных способов лечения, которые могут улучшать функции печени пациентов с HCC, уменьшать прогрессирование рака печени, увеличивать показатель операбельности и показатель успешности хирургической операции пациентов с HCC, уменьшать послеоперационную частоту рецидивов, увеличивать показатель выживаемости и продлевать выживаемость пациентов с HCC, а также улучшать качество жизни пациентов с HCC.(2) Фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться отдельно или в сочетании с другими лекарственными средствами, предназначенными для лечения фиброза печени. (3) Фармацевтическая композиция (BEL-X) может применяться отдельно или в сочетании с другими лекарственными средствами для лечения пациентов с жировой инфильтрацией печени и улучшения функций печени для предотвращения цирроза печени и рака печени.
Примеры
Пример 1
Определение структуры мономерных звеньев проантоцианидинового полимера
Структуру мономерных звеньев проантоцианидина определяли методом пиролитической газовой хроматографии - масс-спектрометрии (PGC/MS). Метод детектирования предусматривает помещение твердого очищенного проантоцианидина (образец, очищенный автором изобретения) непосредственно в пиролитическую камеру газовой хроматографии и постепенное или мгновенное нагревание в ступенчатом режиме (от 50°C до 500°C), или в режиме одной температуры. Термически разложенный образец разделяли посредством специальной металлической колонки для пиролитической газовой хроматографии. Структуру мономерных звеньев проантоцианидинового полимера определяли по спектрам, полученным с помощью масс-спектрометрического детектора. Масс-спектр и анализ структуры проантоцианидинового полимера показаны на ФИГ.2a и 2b, соответственно, где левые части ФИГ.2b-2e представляют собой значения m/z и химические структуры, представленные пиками на ФИГ.2a, и их правые части представляют собой анализ пиков мономерных звеньев в левых частях. Формула установленной структуры мономерного звена проантоцианидинового полимера представлена следующим образом:
в которой R1 представляет собой OCH3, R2 представляет собой OH и R3 представляет собой H, или R1 представляет собой OH и R2 и R3 представляют собой H, или R1 и R2 представляют собой OH и R3 представляет собой H, или R1, R2 и R3 представляют собой OH.
Измеренные масс-спектры продуктов термического разложения показали пики сигналов гликозидов. Таким образом, был сделан вывод о том, что R4 может представлять собой 3-(α)-OH, 3-(β)-OH, 3-(α)-O-сахар или 3-(β)-O-сахар.
Анализ инфракрасных спектров поглощения
Очищенный образец проантоцианидина и хлорид калия смешивали, таблетировали и регистрировали спектры ИК-пропускания. Результат показан на ФИГ.3, где максимальные пики поглощения приходятся на длину волны 3412.38 нм, 1610.57 нм, 1521.40 нм, 1441.14 нм, 1284.86 и 1100.88 нм.
Спектральный анализ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии
Очищенный образец проантоцианидина детектировали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии (масс-спектрометрия с электрораспылением (+/-), HPLC/ESI+, HPLC/ESI-)(Micromass Quattro/Waters 2690). Детектировали мономерные звенья и полимеры проантоцианидина со степенью полимеризации, изменяющейся от 1 до 6, и 164-гликозид (например, молекулярные массы мономерных звеньев и молекулярную массу 164 гликозида). (+/-) Массовые спектры высокоэффективной жидкостной хроматографии - масс-спектрометрии очищенного проантоцианидина показаны на ФИГ.4a и 4b.
Спектральный анализ 13C ЯМР и 1H ЯМР
Очищенный образец проантоцианидина детектировали с помощью 13C ЯМР и 1H ЯМР. Результаты детектирования С ЯМР показаны на ФИГ.5a-5c, на которых при 142-145.7 ppm, дополнительно к пикам дублет дублетов, других пиков не показано. Результат указывает на то, что мономерные звенья содержат антоцианидин без дельфинидина (например, с тремя-OH-группами в его кольце B). Результаты анализа аналогичны результатам EGA/MS. На Фиг.5b, R1=H или OH, R2=H или OH, или OCH3.
В соответствии с детектированными спектрами 1H ЯМР и 13C ЯМР, в изобретении мономерные звенья очищенного проантоцианидинового полимера связаны друг с другом, главным образом, посредством C4-C8 связи. Связь C4-C8 и связь C4-C4 показаны на ФИГ.6a и 6b, соответственно.
Спектральный анализ методом времяпролетной масс-спектрометрии с лазерной ионизацией и десорбцией из жидкой матрицы (MALDI-TOF)
Молекулярно-массовое распределение частично очищенного проантоцианидина детектировали методом времяпролетной масс-спектрометрии с лазерной ионизацией и десорбцией из жидкой матрицы (MALDI-TOF). Результаты показаны на ФИГ.7a-7c. Результаты детектирования указывают на то, что молекулярно-массовое распределение частично очищенного проантоцианидина составило от 500 до 5000. Это означает, что полимер имеет степень полимеризации, изменяющуюся от 2 до 18 в соответствии с результатами детектирования молекулярно-массового распределения.
Пример 2
Приготовление проантоцианидин-содержащего экстракта (1)
Корни и стебли, соединяющиеся с корнями, лекарственного материала бомерии белоснежной Boehmeria nivea L. Gaud, промывали водой и сушили в естественных условиях. Высушенный лекарственный материал резали на куски толщиной примерно 5 мм и хранили при 4°C. После хранения лекарственный материал Boehmeria nivea L. Gaud, измельчали на мельнице и пропускали через сито 20 меш. Полученный порошок диспергировали в 95% этаноле (10 раз по массе) (1:10, масса/масса) и кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов (дважды). После охлаждения до комнатной температуры экстрактный раствор собирали. Экстрактный раствор центрифугировали и фильтровали на центрифуге. Фильтрат затем концентрировали на концентраторе пониженного давления при температуре ниже 40°C и сушили вымораживанием с получением проантоцинидин-содержащего экстракта.
Пример 3
Приготовление проантоцианидин-содержащего экстракта (2)
Высушенный лекарственный материал из Примера 2, хранящийся при 4°C, измельчали на мельнице и пропускали через сито 20 меш. Полученный порошок диспергировали в воде, очищенной с помощью обратного осмоса (10 раз по массе) (1:10, масса/масса), и кипятили с обратным холодильником в течение 2 часов (дважды). После охлаждения до комнатной температуры экстрактный раствор собирали. В экстрактный раствор добавляли 50%-95% этанол и охлаждали для вызывания осаждения. Супернатант центрифугировали и фильтровали на центрифуге. Фильтрат затем концентрировали на концентраторе пониженного давления при температуре ниже 40°C и сушили вымораживанием с получением проантоцинидин-содержащего экстракта.
Пример 4
Очистка проантоцианидин-содержащего экстракта (1)
Проантоцианидин-содержащий экстракт из Примера 2 или 3 добавляли в н-гексан (1:10, масса/объем) и кипятили с обратным холодильником (на аппарате Сокслета) в течение 6 часов для удаления липидов из экстракта. Полученное твердое вещество растворяли в 70% водном растворе метанола и/или 0.3% водном растворе витамина C, и концентрировали при пониженном давлении в концентраторе при температуре ниже 40°C для удаления растворителя. Затем концентраты добавляли в трихлорметан (трихлорметан : концентраты = 1:1, об/об) и осциллировали в течение 30 мин при помощи осциллятора (мультиэкстракция). Этилацетат добавляли в жидкую фазу (этилацетат : жидкая фаза = 1:1, об/об) и осциллировали в течение 30 минут (мультиэкстракция). Жидкую фазу затем концентрировали на концентраторе пониженного давления при температуре ниже 40°C и сушили вымораживанием с получением частично очищенного проантоцианидина.
Пример 5
Очистка проантоцианидин-содержащего экстракта (2)
Проантоцианидин-содержащий экстракт из Примера 2 или 3 растворяли в смеси вода/этанол (1:10, масса/объем). Затем добавляли н-гексан (1:10, об/об) и осциллировали в течение 30 минут при помощи осциллятора (мультиэкстракция) для удаления липидов из экстракта. Этилацетат добавляли в жидкую фазу (этилацетат : жидкая фаза = 1:1, об/об) и осциллировали в течение 30 минут (мультиэкстракция). Жидкую фазу добавляли в н-бутанол (1:10, об/об) и осциллировали в течение 30 минут при помощи осциллятора (мультиэкстракция). Жидкую фазу затем концентрировали на концентраторе пониженного давления при температуре ниже 40°C и сушили вымораживанием с получением частично очищенного проантоцианидина.
Пример 6
Очистка проантоцианидин-содержащего экстракта (3)
Частично очищенный проантоцианидин, полученный в Примере 4, повторно очищали колоночной хроматографией на молекулярных ситах (колонка гель-проникающей хроматографии, Sephadex LH-20, диаметр 4 см × длина 45 см). Сначала элюирование выполняли с использованием растворов различной полярности для удаления примесей. Затем 2.5 г частично очищенного проантоцианидина растворяли в 0.5 мл 95% этанола. Растворенный образец затем помещали в колонку с молекулярными ситами и непрерывно элюировали серией растворителей (элюентов). Элюаты, элюированные посредством различных растворителей (элюентов), собирали. Элюентами служили 300 мл 95% этанола, 300 мл смеси 95% этанол/метанол (1/1, об/об), 300 мл метанола, 300 мл 50% водного раствора метанола и 300 мл 50% водного раствора ацетона, последовательно. За исключением элюата, элюированного посредством элюента, представляющего собой 300 мл 95% этанола, другие элюированные элюаты затем концентрировали на концентраторе пониженного давления при температуре ниже 40°C и сушили вымораживанием с получением частично очищенного и полностью очищенного проантоцианидина. Высушенное вещество хранили при -20°C.
Пример 7
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на показатель выживаемости трансгенных мышей с раком печени, индуцированным геном X вируса гепатита B
Экспериментальные животные: Животные, используемые в эксперименте, имели родительское происхождение самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита В (C57BL/6J-HBx (A0112 линия)), опубликовано BBRC1 2006.
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: Мышей разделяли на 6 групп, включая одну контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-20М), одну лекарственную контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанных BEL-X 9-20M), одну контрольную группу трансгенных мышей (Tg mock 9-20M) и три лекарственные тестируемые группы трансгенных мышей (Tg обработанные BEL-X): введение перорально лекарственного средства BEL-X (фармацевтическая композиция по изобретению) мышам один раз в день, соответственно, с возраста 9 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 9-20M), с возраста 12 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 12-20M) и с возраста 15 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 15-20M). В контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-20M) и контрольной группе трансгенных мышей (Tg mock 9-20M) питьевую воду давали мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 20 месяцев. В лекарственной контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанных BEL-X 9-20M) пероральное лекарственное средство BEL-X вводили мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 20 месяцев. Доза лекарственного средства BEL-X составила 1000 мг/кг/день. Заключение:
1. Как показано на ФИГ.8, 100% самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита В, индуцировали рак печени в возрасте 20 месяцев, и показатель их выживаемости составил примерно 64% (Tg mock 9-20M). Показатель выживаемости мышей, которых кормили лекарственным средством BEL-X в разном возрасте, составил, соответственно, 70% (возраст 9-20 месяцев, Tg обработанные BEL-X 9-20M), 100% (возраст 12-20 месяцев, Tg обработанные BEL-X 12-20M) и 58% (возраст 15-20 месяцев, Tg обработанные BEL-X 15-20M).
С помощью статистического анализа хи-квадрат показатель выживаемости самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита В, которым вводили лекарственное средство BEL-X в возрасте 12-20 месяцев, составил 100% в возрасте 20 месяцев.
3. Кормление самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита B, BEL-X на ранней стадии может улучшить показатель выживаемости.
Пример 8
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на замедление HCC у трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита B
Экспериментальные животные: Животные, используемые в эксперименте, имели родительское происхождение самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита В (C57BL/6J-HBx (A0112 линия)), опубликовано BBRC1 2006.
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: Мышей разделяли на 6 групп, включающих одну контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-20M), одну лекарственную контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанных BEL-X 9-20M), одну контрольную группу трансгенных мышей (Tg mock 9-20M) и три лекарственных экспериментальных группы трансгенных мышей (Tg обработанных BEL-X): введение перорального лекарственного средства BEL-X (фармацевтическая композиция изобретения) мышам один раз в день, соответственно, с возраста 9 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанных BEL-X 9-20M), с возраста 12 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанных BEL-X 12-20M), и с возраста 15 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанных BEL-X 15-20M). В контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-20M) и контрольной группе трансгенных мышей (Tg mock 9-20M) питьевую воду давали мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 20 месяцев. В лекарственной контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанных BEL-X 9-20M), пероральное лекарственное средство BEL-X вводили мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 20 месяцев. Доза лекарственного средства BEL-X составила 1000 мг/кг/день.
Определение соотношения массы печени и массы тела: Животных умерщвляли и иссекали для взятия образцов печени (содержащие опухоли печени). Измеренную массу печени делили на массу тела мышей для получения отношения массы печени к массе тела.
Заключение:
1. Как показано на ФИГ.9, соотношение массы печени и массы тела нормальных нетрансгенных мышей (Non-Tg mock) составило примерно 5%. Соотношение массы печени и массы тела самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита В (Tg mock), увеличилось примерно до 13% из-за возникновения рака печени в возрасте 20 месяцев. Статистический анализ ANOVA показал значительное различие в соотношении массы печени и массы тела между трансгенными мышами и нормальными нетрансгенными мышами.
2. После кормления нормальных нетрансгенных мышей BEL-X в течение одного года (возраст 9-20 месяцев, Non-Tg обработанные BEL-X 9-20M), соотношение массы печени и массы тела составило 5%, такое же, как для группы, которая не получала лекарственное средство. Результат указывает на то, что эффект лекарственного средства на нормальные животные отсутствовал.
3. Кормление самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита B, лекарственного средства BEL-X в разном возрасте привело к тому, что соотношение массы печени и массы тела уменьшилось примерно до 8% в трех группах. Различие в соотношении массы печени и массы тела между группами мышей, получавшими лекарственное средство в возрасте 9-20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 9-20M) и мышами в возрасте 12-20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 12-20M), и группами, не получавшими лекарственное средство (Tg mock 9-20M), было статистически значимым.
Пример 9
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на функции печени трансгенных мышей с HCC, индуцированной геном X вируса гепатита B (1)
Экспериментальные животные: Животные, используемые в эксперименте, имели родительское происхождение самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита B (C57BL/6J-HBx (A0112 линия)), опубликовано BBRC1 2006.
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: Мышей разделяли на 6 групп, включающих одну контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-18M), одну лекарственную контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанную BEL-X 9-18M), одну контрольную группу трансгенных мышей (Tg mock 9-18M) и три лекарственные экспериментальные группы трансгенных мышей (Tg обработанных BEL-X): введение перорального лекарственного средства BEL-X (фармацевтической композиции изобретения) мышам один раз в день, соответственно, с возраста 9 месяцев до 18 месяцев (Tg обработанные BEL-X 9-18M), с возраста 12 месяцев до 18 месяцев (Tg обработанные BEL-X 12-18M) и с возраста 15 месяцев до 18 месяцев (Tg обработанные BEL-X 15-18M). В контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-18M) и контрольной группе трансгенных мышей (Tg mock 9-18M) питьевую воду давали мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 18 месяцев. В лекарственной контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанных BEL-X 9-18M) пероральное лекарственное средство BEL-X вводили мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 18 месяцев. Доза лекарственного средства BEL-X составила 1000 мг/кг/день.
Определение функции печени - ICG: Мышам внутривенно вводили индоцианин зеленый (ICG). Через 10 минут концентрацию (мг/дл) ICG, оставшуюся в крови, определяли как показатель функции печени. Этот эксперимент проводили 2 раза, соответственно, в возрасте мышей 12 месяцев и 18 месяцев.
Заключение:
1. Как показано в следующей Таблице 1, метаболическая величина ICG нормальных нетрансгенных мышей в возрасте 18 месяцев (Non-Tg mock 9-18M) составила 2.25±0.89 мг/дл. Не было значительного различия между этим результатом и результатом группы, которой вводили BEL-X в возрасте 18 месяцев (Non-Tg обработанные BEL-X 9-18M).
2. Метаболизм ICG самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита В (Tg mock 9-18M) замедлялся и величина увеличивалась до 4.46±1.17 мг/дл из-за возникновения рака печени в возрасте 18 месяцев. С помощью непараметрического статистического анализа различие в метаболизме ICG между трансгенными мышами и нормальными нетрансгенными мышами было значительным.
3. Кормление самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита B, лекарственным средством BEL-X в разном возрасте в трех группах привело к тому, что величины метаболизма ICG в трех группах были ниже, чем в группе, которая не получала лекарственное средство (Tg mock 9-18M). Различие в метаболической величине ICG между группой, которую кормили лекарственным средством BEL-X в возрасте 9 месяцев (Tg обработанный BEL-X 9-18M), и группой, которая лекарственное средство не получала (Tg mock 9-18M), было статистически значимым. Результат указывает на то, что BEL-X может улучшать функции печени животных с HCC.
Пример 10
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на функции печени трансгенных мышей с HCC, индуцированной геном X вируса гепатита B (2)
Экспериментальные животные: Животные, используемые в эксперименте, имели родительское происхождение самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита B (C57BL/6J-HBx (A0112 линия)), опубликованная BBRC1 2006.
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: Мышей разделяли на 6 групп, включающих одну контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-20M), одну лекарственную контрольную группу нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанные BEL-X 9-20M), одну контрольную группу трансгенных мышей (Tg mock 9-20M) и три лекарственные экспериментальные группы трансгенных мышей (Tg обработанные BEL-X): введение перорального лекарственного средства BEL-X (фармацевтической композиции изобретения) мышам один раз в день, соответственно, с возраста 9 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 9-20M), с возраста 12 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 12-20M) и с возраста 15 месяцев до 20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 15-20M). В контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg mock 9-20M) и контрольной группе трансгенных мышей (Tg mock 9-20M) питьевую воду давали мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 20 месяцев. В лекарственной контрольной группе нетрансгенных мышей (Non-Tg обработанных BEL-X 9-20M) пероральное лекарственное средство BEL-X вводили мышам один раз в день с возраста 9 месяцев до 20 месяцев. Доза лекарственного средства BEL-X составила 1000 мг/кг/день.
Определение функций печени - аланинаминотрансфераза (ALT) и аспартатаминотрансфераза (AST): У всех мышей брали кровь (из челюсти или сердца) регулярно один раз в месяц. Цельную кровь выдерживали в пробирке типа в Эппендорф при комнатной температуре в течение более 30 минут. После коагуляции образцы крови центрифугировали со скоростью 1800 × г в течение 10 минут. После центрифугирования сыворотку переносили в новую пробирку типа Эппендорф и хранили при -20°C до дня тестирования. Величины ALT и AST в сыворотке крови определяли с помощью биохимического анализатора сыворотки (HITACHI 7080). С возраста 9 месяцев измеренные показатели функции печени (ALT и AST) мышей в возрасте 9-20 месяцев каждой группы всесторонне анализировали каждые 3 месяца по причине корреляции между поражениями печени и возрастом самцов трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита В.
Заключение:
1. Как показано на ФИГ.10 и 11, различие в ALT и AST между нормальными нетрансгенными мышами (Non-Tg mock 9-20M) и трансгенными мышами, несущими ген X вируса гепатита B (Tg mock 9-20M), возникало с возраста 12 месяцев. Не было значительного различия в показателях функции печени между группой нормальных нетрансгенных мышей, получавших BEL-X (Non-Tg BEL-X обработанные 9-20M), и группой, не получавшей лекарственное средство (Non-Tg mock 9-20M).
2. Кормление лекарственным средством BEL-X трансгенных мышей, несущих ген X вируса гепатита B, в разном возрасте привело к тому, что ALT и AST трех групп были ниже, чем группы, не получавшей лекарственное средство (Tg mock 9-18M). Различие в ALT и AST между группами, получавшими лекарственное средство в возрасте 9-20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 9-20M) и в возрасте 12-20 месяцев (Tg обработанные BEL-X 12-20M), и группой, не получавшей лекарственное средство (Tg mock 9-20M), было статистически значимым. Результат указывает на то, что BEL-X может эффективно улучшать функции печени животных с HCC.
Пример 11
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на фиброз печени у крыс, индуцированный химическим веществом DEN (1)
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: 8-недельных крыс линии Wistar кормили диэтилнитрозамином (DEN) (100 ppm, добавленный в воду) в течение 6 недель (группа D6) и 9 недель (группа D9) для индуцирования фиброза печени и рака печени. В других двух группах крыс кормили одновременно DEN и лекарственным средством BEL-X (1000 мг/кг массы тела) (добавленные в пищу и кормили каждый день в течение 6 недель (группа D6H6) и 9 недель (группа D9H9)). Степень рака печени крыс анализировали в разные моменты времени. В контрольных группах в течение всего процесса лекарственные средства не вводили. Каждая экспериментальная группа состояла из 10 крыс. После патологического иссечения и окрашивания степень фиброза печени/рака печени анализировали с использованием биохимического анализа гидроксипролина. Увеличение содержания гидроксипролина в печени использовали в качестве показателя фиброза печени. Печень крыс каждой группы собирали в разные моменты времени для определения содержания гидроксипролина. Затем печень иссекали и проводили анализ на α-SMA-иммуноокрашивание. Увеличение содержания α-актина гладких мышц (α-SMA) также использовали в качестве другого показателя фиброза печени. На 9-й неделе печень крыс каждой группы собирали и проводили α-SMA-иммуноокрашивание. Клетки печени наблюдали с использованием микроскопа и рассчитывали количество клеток, содержащих метку.
Заключение:
1. Как показано на ФИГ.12, в группе, в которой DEN вводили в непрерывном режиме в течение 9 недель (группа D9), содержание гидроксипролина в печени значительно увеличилось. Результат указывает на то, что DEN индуцировал фиброз печени. Однако в экспериментальной группе, которая получала BEL-X в непрерывном режиме (группа D9H9), содержание гидроксипролина значительно уменьшилось. Результат указывает на то, что BEL-X предотвращал фиброз печени, вызванный химическим веществом DEN.
2. Как показано на ФИГ 13, в группе, которая получала DEN в непрерывном режиме в течение 9 недель (группа D9), содержание α-актина гладких мышц (α-SMA) в печени значительно увеличилось. Результаты указывают на то, что DEN индуцировал фиброз печени. Однако в экспериментальной группе, которая получала BEL-X (группа D9H9) в непрерывном режиме, содержание α-актина гладких мышц (α-SMA) значительно уменьшилось. Результат указывает на то, что BEL-X предотвращает фиброз печени, вызванный химическим веществом DEN.
3. Содержание α-актина гладких мышц (α-SMA) также значительно уменьшилось в экспериментальной группе, которой непрерывно вводили DEN и BEL-X в течение 6 недель (группа D6H6). Результат указывает на то, что BEL-X предотвращал фиброза печени на ранней стадии, вызванный химическим веществом DEN.
Пример 12
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на фиброз печени, индуцированный химическим веществом DEN у крыс (2)
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: 8-недельных крыс линии Wistar кормили диэтилнитрозамином (DEN) (100 ppm, добавленный в воду) для индуцирования фиброза печени и рака печени. В других трех группах крыс кормили одновременно DEN и лекарственным средством BEL-X (1000 мг/кг массы тела). BEL-X вводили 3 разным группам с 3 по 6 неделю (DEN-BEL-X 3-6), с 6 по 9 неделю (DEN-BEL-X 6-9) и с 9 по 12 неделю (DEN-BEL-X 9-12) соответственно. Степень рака печени у крыс анализировали в соответствующие моменты времени. В контрольной группе (DEN) лекарственное средство не вводили на всем протяжении процесса кормления DEN. Каждая экспериментальная группа состояла из 10 крыс. Степень фиброза печени/рака печени анализировали визуальным методом с использованием биохимического анализа гидроксипролина. Увеличение содержания гидроксипролина в печени использовали в качестве показателя фиброза печени. Печень крыс каждой группы собирали на 12-ой неделе для определения содержания гидроксипролина.
Заключение:
1. Как показано на ФИГ.14, в необработанной группе (DEN), в которой DEN непрерывно вводили в течение 9 недель, содержание гидроксипролина в печени значительно увеличилось. Результат указывает на то, что DEN индуцировал фиброз печени. В противоположность этому, содержание гидроксипролина значительно уменьшалось на ранних стадиях кормления для групп BEL-X (DEN-BEL-X 3-6 и DEN-BEL-X 6-9). Результаты показывают, что BEL-X изменял направление развития фиброза, вызванного химическим веществом DEN.
Пример 13
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на показатель выживаемости крыс с фиброзом печени, индуцированным химическим веществом DEN
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: 8-недельных крыс линии Wistar кормили диэтилнитрозамином (DEN) (50 ppm, добавленный в воду) в течение 10.5 недель для индуцирования фиброза печени и рака печени (группа В). Крыс кормили одновременно DEN и лекарственным препаратом BEL-X (1000 мг/кг массы тела) (добавленные в пищу и кормили каждый день, соответственно, с 0-ой по 10.5-ой неделю (группа C), с 3-ей по 10.5-ой неделю (группа D) и с 6-ой по 10.5-ой неделю (группа E). BEL-X вводили в течение 3 недель после остановки кормления DEN (группа F). Степень рака печени у крыс анализировали в соответствующие моменты времени. В контрольной группе (группа A) на протяжении всего процесса лекарственное средство не вводили. Во время эксперимента записывали случаи смертельного исхода животных. Показатель выживаемости каждой группы анализировали путем непараметического статистического метода.
Заключение:
1. Как показано на ФИГ.15, на основании результатов анализа показателя выживаемости в каждой группе на 13.5-ой неделе (94-й день) можно сделать вывод о том, что в группе B, которую кормили только DEN, показатель выживаемости составил всего лишь примерно 40%. В противоположность этому, показатели выживаемости при кормлении BEL-X в различные периоды составил более 80%. Результаты указывают на то, что BEL-X эффективно улучшал показатель выживаемости у крыс с фиброзом печени и раком печени.
2. Как показано на ФИГ.16, на основании анализа показателя выживаемости крыс, получавших лекарственное средство BEL-X в течение 3 недель после индуцирования рака печени с помощью DEN (группа F) на 15-ой неделе (104-й день), можно сделать вывод о том, что показатель выживаемости крыс составил 100% в период введения BEL-X (74-й-94-й день). Более того, случаев смертельных исходов в течение пяти дней (95-й-99-й день) после остановки введения лекарственного средства BEL-X не было. Показатель выживаемости на 15-ой неделе (104-й день) составил 62%, что все еще выше, чем показатель выживаемости 40% на 13.5-ой неделе (94-й день) группы B, которую кормили только DEN. Результаты указывают на то, что BEL-X может эффективно продлевать время выживаемости, а также улучшать показатель выживаемости крыс с циррозом печени и раком печени.
Пример 14
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на регенерацию поврежденной DEN печени после гепатэктомии (1)
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: 8-недельных крыс линии Wistar кормили диэтилнитрозамином (DEN) (100 ppm, добавленный в воду) в течение 9 недель для индуцирования фиброза печени и рака печени (группа, не получающая лекарственное средство). Обрабатываемых крыс кормили одновременно лекарственным средством BEL-X (разделенные на группу с высокой дозой BEL-X (1000 мг/кг массы тела) и группу с низкой дозой BEL-X (250 мг/кг массы тела) с 6-ой по 9-ю неделю. После завершения введения лекарственного средства 50% долей печени иссекали на 9-ой неделе. Через 2 дня собирали образец печени и иссекали, и проводили окрашивание H&E. Затем наблюдали митоз клеток печени под микроскопом в качестве основы регенерации печени. Митоз клеток печени рассчитывали следующим образом. От каждой крысы получали, по меньшей мере, три среза. Каждый срез содержал 10 полей. Количество митотических клеток подсчитывали под микроскопом при увеличении 400X. В конце получали среднюю величину числа митотических клеток крыс каждой группы.
Заключение:
1. Как показано в следующей таблице 2, выполнение гепатэктомии после индуцирования фиброза печени и рака печени химическим веществом DEN привело к тому, что число митозов (7.6±4.6) в печени крыс группы, не получавшей лекарственное средство, было значительно более низким, чем число митозов (12±5.5 или 13.0±5.6) в печени крыс, получавших одновременно высокую или низкую дозу лекарственного средства BEL-X в течение 3 недель. Результаты указывают на то, что регенерация печени может быть эффективно улучшена в поврежденной химическим DEN печени.
Пример 15
Эффект лекарственных средств (BEL-X) на регенерацию поврежденной DEN печени после гепатэктомии (2)
Экспериментальные группы и дизайн эксперимента: 8-недельных крыс линии Wistar кормили диэтилнитрозамином (DEN) (100 ppm, добавленный в воду) в течение 9 недель для индуцирования фиброза печени и цирроза печени (группа DEN). Обрабатываемых крыс кормили одновременно лекарственным средством BEL-X (1000 мг/кг массы тела) с 6-ой по 9-ю неделю (группа BEL-X). Крысы, не получавшие DEN и BEL-X, служили в качестве контрольной группы. После завершения кормления лекарственным средством проводили магнитно-резонансное исследование и 30% долей печени иссекали на 9-ой неделе. В контрольной группе, не получавшей DEN и BEL-X, проводили такую же хирургическую операцию. Через 2 недели проводили второе магнитно-резонансное исследование и крыс умерщвляли. Случаи смертельных исходов записывали во время эксперимента. После хирургической операции наблюдали за временем потребления пищи и потребляемым количеством пищи крыс каждой группы. Для каждой группы рассчитывали показатель выживаемости крыс.
Заключение:
1. На ФИГ.17 показано определение коэффициента регенерации объема печени. В контрольной группе общий объем регенерации печени у крыс с нормальной печенью составил 92±11% объема резекции. В группе DEN (группа цирроза печени) общий объем регенерации печени крыс составил 32±7% объема резекции. В группе BEL-X (лечебная группа) общий объем регенерации печени крыс составил 79±6% объема резекции. Степень регенерации печени в группе BEL-X (лечебная группа) значительно увеличилась до степени регенерации в группе DEN (группа цирроза печени). В противоположность этому, не было статистически значимого различия в степени регенерации с контрольной группой.
2. Как показано в следующей Таблице 3, после выполнения гепатэктомии на крысах с циррозом печени, время потребления пищи (27 часов) было значительно длиннее, чем время потребления пищи (11 часов) контрольной группы. Однако в группе BEL-X время потребления пищи (16 часов) после гепатэктомии было значительно короче, чем группы DEN (группа цирроза печени). К тому же, потребление пищи (42%) группы DEN (группа цирроза печени) было ниже, чем контрольной группы (91%). Потребление пищи (83%) группы BEL-X было значительно выше, чем группы DEN (группа цирроза печени) и аналогично контрольной группе. Результаты указывают на то, что лекарственное средство BEL-X имеет хороший эффект на цирроз печени крыс после гепатэктомии, увеличивая потребление пищи и уменьшая время потребления пищи.
3. К тому же показатель выживаемости крыс с циррозом печени составил 55%. Однако при кормлении крыс с циррозом печени BEL-X показатель выживаемости был аналогичен контрольной группе, достигая 100%. Результаты указывают на то, что лекарственное средство BEL-X без сомнения повысило показатель выживаемости.
Для специалистов в данной области очевидно, что могут быть сделаны различные модификации и варианты раскрытых в данном описании вариантов осуществления. Предполагается, что описание и примеры могут рассматриваться только в качестве примера, при этом фактический объем изобретения представлен следующими пунктами формулы изобретения и их эквивалентами.
| название | год | авторы | номер документа |
|---|---|---|---|
| ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ИНГИБИРОВАНИЯ АУТОФАГИИ ДВИГАТЕЛЬНЫХ НЕЙРОНОВ И ЕЁ ПРИМЕНЕНИЕ | 2012 |
|
RU2585372C1 |
| НОВОЕ ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕАЛКОГОЛЬНОГО СТЕАТОГЕПАТИТА И ФИБРОЗА | 2017 |
|
RU2762280C2 |
| НОВЫЕ СОЕДИНЕНИЯ | 2019 |
|
RU2812934C2 |
| Фармацевтическая композиция на основе пептида HAEE для лечения нейродегенеративных заболеваний | 2019 |
|
RU2709539C1 |
| МОДЕЛИ РАКА И СООТВЕТСТВУЮЩИЕ СПОСОБЫ | 2014 |
|
RU2707531C2 |
| ФОСФОР(N)АМИДАТАЦЕТАЛЬНЫЕ И ФОСФ(ОН)АТАЦЕТАЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ | 2019 |
|
RU2796403C2 |
| ПРИМЕНЕНИЕ АНТАГОНИСТОВ РЕЦЕПТОРА СВ1 ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ КОМПОЗИЦИИ, ПРИГОДНОЙ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ ПЕЧЕНИ | 2005 |
|
RU2402328C2 |
| ПТЕРИДИНЫ, ПОЛЕЗНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ HCV, И СПОСОБЫ ПОЛУЧЕНИЯ ПТЕРИДИНОВ | 2006 |
|
RU2447074C2 |
| УСОВЕРШЕНСТВОВАННОЕ СОЕДИНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СЕРДЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ | 2018 |
|
RU2794975C2 |
| МОНОКЛОНАЛЬНЫЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ КЛАУДИНА 1 ДЛЯ ПРОФИЛАКТИКИ И ЛЕЧЕНИЯ ГЕПАТОЦЕЛЛЮЛЯРНОЙ КАРЦИНОМЫ | 2016 |
|
RU2770021C2 |
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к композиции для стимуляции регенерации поврежденной печени в результате гепатэктомии. Фармацевтическая композиция для стимуляции регенерации поврежденной печени в результате гепатэктомии, содержащая: проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерные звенья проантоцианидина имеют следующую формулу:
в которой в случае, когда R1 представляет собой ОСН3, R2 представляет собой ОН и R3 представляет собой Н, когда R1 представляет собой ОН, R2 представляет собой Н и R3 представляет собой Н, когда R1 представляет собой ОН, R2 представляет собой ОН и R3 представляет собой Н, или когда R1 представляет собой ОН, R2 представляет собой ОН и R3 представляет собой ОН, и R4 представляет собой 3-(α)-ОН, 3-(β)-ОН, 3-(α)-О-сахар или 3-(β)-O-сахар; и фармацевтически приемлемый носитель или соль, где фармацевтически приемлемая соль выбрана из группы, состоящей из неорганических солей натрия, калия, амина, магния, кальция, цинка, алюминия или циркония, и органических солей дициклогексиламина, метил-d-глюкамина, аргинина, лизина, гистидина или глутамина. Вышеописанная композиция эффективна для стимуляции регенерации поврежденной печени в результате гепатэктомии. 9 з.п. ф-лы, 17 ил., 3 табл., 15 пр.
1. Фармацевтическая композиция для стимуляции регенерации поврежденной печени в результате гепатэктомии, содержащая:
проантоцианидин в эффективном количестве, при этом мономерные звенья проантоцианидина имеют следующую формулу:
в которой в случае, когда R1 представляет собой ОСН3, R2 представляет собой ОН и R3 представляет собой Н, когда R1 представляет собой ОН, R2 представляет собой Н и R3 представляет собой Н, когда R1 представляет собой ОН, R2 представляет собой ОН и R3 представляет собой Н, или когда R1 представляет собой ОН, R2 представляет собой ОН и R3 представляет собой ОН, и R4 представляет собой 3-(α)-ОН, 3-(β)-ОН, 3-(α)-О-сахар или 3-(β)-O-сахар; и
фармацевтически приемлемый носитель или соль, где фармацевтически приемлемая соль выбрана из группы, состоящей из неорганических солей натрия, калия, амина, магния, кальция, цинка, алюминия или циркония, и органических солей дициклогексиламина, метил-d-глюкамина, аргинина, лизина, гистидина или глутамина.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой мономерные звенья проантоцианидина связаны друг с другом через образование связи в положениях С4-С8 или С4-С6.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой проантоцианидин имеет степень полимеризации в диапазоне от 2 до 30.
4. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой мономерные звенья проантоцианидина содержат R или S оптические изомеры в положениях С2, С3 или С4.
5. Фармацевтическая композиция по пункту 1, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флавоноидные соединения.
6. Фармацевтическая композиция по п. 5, в которой флавоноидные соединения включают в себя катехин, эпикатехин, эпиафзетехин, галлокатехин, галлоэпикатехин, эпигаллокатехин, галлаты, флавонолы, флавандиолы, лейкоцианидины или процинидины.
7. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой мономерные звенья проантоцианидина включают флаван-3-ол.
8. Фармацевтическая композиция по п. 1, в которой проантоцианидин экстрагирован из растения.
9. Фармацевтическая композиция по п. 8, в которой растение выбрано из семейства вересковые (Ericaceae), семейства розовые (Rosaceae), семейства сосновые (Pinaceae), семейства виноградовые (Vitaceae) или семейства крапивные (Urticaceae).
10. Фармацевтическая композиция по п. 9, в которой растение семейства крапивные (Urticaceae) представляет собой бомерию белоснежную Boehmeria nivea L. Gaud.
| CN101822372 А, 08.09.2010 | |||
| JP 2009242374 A, 22.10.2009 | |||
| CN 1443533 A, 24.09.2003 | |||
| CN 19338818 A, 21.03.2007 |
