ИНЪЕКЦИОННАЯ АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/455 A61K31/7048 A61K47/00 A61K9/08 A61P31/04 

Изобретение относится к области ветеринарной медицины, а именно к фармацевтике, и может быть использовано для лечения инфекций бактериальной этиологии.

Одной из главнейших задач современного сельского хозяйства является интенсификация производства животноводческой продукции.

Животноводство обеспечивает население высокоценными продуктами питания, а промышленность - сырьем и ценными удобрениями. Для увеличения производства животноводческой продукции на предприятии основным критерием является здоровое поголовье. Однако болезни сельскохозяйственных животных, несмотря на неоспоримые достижения отечественной и зарубежной науки по их диагностике, лечению и профилактике, продолжают оставаться одной из основных причин, сдерживающих развитие животноводства и наносящих значительный экономический ущерб.

Наиважнейшим компонентом терапии является борьба с бактериальными инфекциями. Борьба с данными патогенами должна опираться на специфическую иммунопрофилактику или химиопрофилактику, однако зачастую болезнь приходится лечить, а не профилактировать. При своевременном выявлении болезни и немедленном начале лечения эффективным антибиотиком или химиотерапевтическим средством у 85-90% животных стойкое улучшение клинической картины наблюдается уже в течение первых 24 часов.

Как правило, в развитии болезни этиотропным фактором являются ассоциации микроорганизмов, поражающие несколько органов и систем. В связи с этим наиболее эффективными оказываются препараты широкого спектра действия. При этом желательно использовать инъекционные формы препаратов, которые имеют целый ряд преимуществ: повышенную биодоступность, быстроту действия, точность и удобство дозирования лекарственных веществ, возможность введения лекарственных препаратов ослабленным животным с анорексией и обезвоживанием.

Таким образом, поиск новых более эффективных инъекционных препаратов для профилактики и лечения бактериальных инфекций имеет большое теоретическое и практическое значение.

Известна инъекционная композиция для лечения инфекций бактериальной этиологии у животных на основе азитромицина (см., например, RU 2512683 С2, 10.04.2014).

Композиция пригодна для внутривенного, внутримышечного, подкожного, внутриматочного и интрацистернального введения, однако, так как содержит в качестве активного вещества только азитромицин, спектр ее действия ограничен спектром действия азитромицина.

Известна инъекционная композиция для лечения инфекций бактериальной этиологии у животных, содержащая азитромицин и доксициклина гидрохлорид (см., например, CN 102846649 А, 02.01.2013).

Известны следующие инъекционные композиция для лечения инфекций бактериальной этиологии у животных, содержащие:

- флуниксин и хлорамфеникол (см., например, MY 135791 А, 30.06.2008);

- флуниксин и энрофлоксацин (см., например, ЕР 1875913 А1, 09.01.2008 или CN 102697784 А, 03.10.2012);

- флуниксин, энрофлоксацин, сульфадиазин, триметоприм и дексаметазон (см., например, CN 101829124 А, 15.09.2010);

- флуниксин, энрофлоксацин, триметоприм, тилозин и сульфаметоксазол (см., например, CN 102697784 А, 03.03.2010);

- флуниксин и окситетрациклин (PL 335878 A1, 22.05.2000);

- флуниксин или одну из его фармацевтически приемлемых солей и флорфеникол (RU 2512683 С2, 10.04.14).

Все указанные выше композиции обладают широким спектром действия, стабильны при хранении, обладают пролонгированным действием и высоким лечебным эффектом. Однако все эти лекарственные средства производятся за рубежом и недоступны для лечения животных в России.

Наиболее близкой к заявленной является антибактериальная инъекционная фармацевтическая композиция, включающая флуниксин, азитромицин в форме дигидрата и вспомогательные вещества (US 2005148519 A1, 07.07.2005).

Данная композиция также разработана иностранной - американской - компанией, а в качестве вспомогательных веществ содержит пропиленгликоль и стабилизированный глицеринформал, которые используются для усиления стабильности препарата.

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является создание эффективной стабильной при хранении отечественной фармкомпозиции на основе флуниксина или его солей и азитромицина для лечения болезней животных бактериальной этиологии, пригодной для парентерального введения и оказывающей стимулирующее влияние на показатели гуморального иммунитета.

Поставленная задача решается тем, что разработана инъекционная антибактериальная композиция, которая содержит флуниксин или одну из его фармацевтически приемлемых солей, азитромицин в форме дигидрата, лимонную кислоту и воду для инъекций при следующем соотношении ингредиентов (мг/мл): азитромицина дигидрат - 60,0-120,0, флуниксин или одна из его фармацевтически приемлемых солей - 38,0-50,0, лимонная кислота - 0,01-1,0, вода для инъекций - до 1 мл.

Технический результат, полученный в результате реализации заявленного изобретения, заключается в том, что инъекционная фармацевтическая композиция обладает выраженным антимикробным действием как на грамотрицательную, так и грамположительную микрофлору, при этом эффективно действует как на вегетативные, так и споровые формы бактерий, безвредна, позволяет эффективно лечить широкий спектр болезней бактериальной этиологии у животных в условиях отсутствия данных о возбудителе инфекции и его чувствительности к антибиотикам, не обладает аллергенными свойствами, оказывает стимулирующее влияние на показатели гуморального иммунного ответа и стабильна при хранении.

Добавление лимонной кислоты к комплексу азитромицин + флуниксин способствует:

- восстановлению гематологических и биохимических показателей быстрее, чем у животных, получавших только композицию азитромицин + флуниксин_+ вода;

- ускорению выведения остаточных количеств азитромицина и флуниксина из организма телят и поросят;

- сокращению срока предубойной выдержки.

Заявленная фармкомпозиция по степени воздействия на организм относится к умеренно опасным веществам (3 класс опасности по ГОСТ 12.1.007-76).

Изобретение иллюстрируется следующими примерами, которые, однако, не ограничивают объем притязаний заявителя.

Пример 1. Получение препарата

Препарат получают путем смешивания компонентов. Порядок смешивания компонентов не является существенным. Состав композиции в одном из вариантов ее выполнения следующий (мг/мл раствора):

Азитромицина дигидрат 100,0 Флуниксин меглумин 44,0 Лимонная кислота 0,5 Вода для инъекций до 1 мл

По внешнему виду препарат представляет собой прозрачный раствор светло-желтого цвета.

Пример 2. Исследование фармакокинетики азитромицина и флуниксина в крови телят и поросят после введения им заявленной фармкомпозиции

Результаты исследования фармакокинетики азитромицина в сыворотке крови поросят показали, что через 0,05, 0,12 и 0,33 часа поле применения препарата концентрация азитромицина в сыворотке крови нарастает и достигает максимума к 0,5 часа (около 828 нг/мл). В дальнейшем наблюдается плавное снижение концентрации компонента в сыворотке крови телят, и по истечении 96 часов она составляет около 5 нг/мл.

Максимальная концентрация флуниксина была обнаружена через 1 час после применения препарата и составила около 966 нг/мл, затем концентрация снижалась, и через 96 часов составила около 9 нг/мл.

Пример 3. Исследование фармакокинетики азитромицина и флуниксина в органах и тканях телят и поросят после введения им заявленной фармкомпозиции

Все животные, участвующие в эксперименте, содержались в стандартных условиях хозяйства. Телята и поросята не получали ранее каких-либо химиотерапевтических препаратов и были клинически здоровы. Забой животных с целью отбора органов и тканей производили через 30, 35 и 40 суток после однократного внутримышечного введения заявленной фармкомпозиции в дозе 1 мл на 20 кг массы животного. После подготовки образцов тканей проводили твердофазную экстракцию азитромицина и флуниксина и анализировали пробы на хроматографе. Для проведения качественного и количественного анализа полученных экстрактов применяли процедуру градуировки хроматографических данных. Процедура градуировки имеет следующие цели: определение времени удерживания анализируемого компонента для его последующей идентификации (качественный анализ проб), определение времени удерживания внутреннего стандарта и определение концентрации аналита при помощи калибровочного графика (количественный анализ с использованием метода внутреннего стандарта).

Согласно полученным результатам наибольшие концентрации азитромицина отмечаются в образцах почек, печени и месте вкола (163,2: 127,3 и 126,1 нг/г соответственно) на 30 сутки. На 35 сутки концентрация азитромицина снижалась и во всех органах и не превышала 28,8 нг/г. С течением времени остаточные количества азитромицина снижаются, и через 40 дней после применения препарата его содержание в тканях не превышает пределов количественного определения методики.

В образцах органов и тканей телят и поросят на всех сроках исследования содержание флуниксина во всех органах было ниже предела количественного определения.

Пример 3. Клинические исследования

В результате проведенных исследований установлено, что заявленная композиция особенно подходит для крупного и мелкого рогатого скота и свиней. Заявленная инъекционная фармкомпозиция была испытана в качестве средства терапии бактериальных инфекций органов дыхания у крупного и мелкого рогатого скота и свиней, вызываемых Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Haemophilus somnus, для терапии некробактериоза у свиней, а также для лечения инфекций, вызываемых Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Actinobacillus pleuropneumoniae и Streptococcus suis, рожи свиней, спирохетоза и микоплазменных инфекций, инфекций кожи и мягких тканей - рожи, импетиго, вторично инфицированных дерматозов; хламидиоза, болезни Лайма (боррелиозе), заболеваниях, сопровождающихся повышением температуры, в том числе и желудочно-кишечных. Животных разделили на следующие группы: а) группа животных, получавших только азитромицин, б) группа животных, получавших только флуниксин, в) группа животных, получавших азитромицин и флуниксин одновременно, но в разных композициях, г) группа животных, получавших азитромицин и флуниксин одновременно в составе предложенной фармацевтической композиции. При этом были испытаны композиции, содержащие флуниксин в количестве от 38,0 до 50,0 мг/мл, азитромицин - от 60,0 до 120 мг/мл и лимонную кислоту - в количестве от 0,01 до 1,0 мг/мл.

Фармкомпозицию вводили крупному и мелкому рогатому скоту и свиньям один раз в сутки внутримышечно в дозе 1 мл на 20 кг массы животного в течение 3-5 дней подряд.

Максимальная доза для введения заявленной фармкомпозиции в одну точку тела составила: крупному рогатому скоту - 20 мл, мелким животным - 5-10 мл.

Если объем вводимого раствора превышал указанный выше, его вводили животным в несколько мест.

В результате клинических испытаний установлена высокая степень эффективности лечения группы животных, получавших азитромицин и флуниксин одновременно в составе предложенной фармацевтической композиции, по сравнению с группами, получавшими только азитромицин или только флуниксин, а также с группой, получавшей азитромицин и флуниксин одновременно, но в разных композициях.

При указанных выше схемах введения препарата побочных явлений и осложнений не установлено. У небольшого количества животных (<3%) в месте введения фармкомпозиции отмечалась отечность, которая быстро проходила и не требовала лечения.

Пример 4. Динамика гематологических и биохимических показателей крови телят и поросят после внутримышечного введения заявленной композиции

Под опыт взяты 15 телят и 15 поросят, которых разделили на 3 группы:

- первой группе телят и поросят вводили в терапевтической дозе 1,0 мл на 20 кг массы животного внутримышечно один раз в день 3 дня подряд инъекционную антибактериальную фармкомпозицию, состоящую из: азитромицина - 100 мг/мл, флуниксин меглумина - 44 мг/мл, вода - до 1 мл;

- второй группе телят и поросят вводили заявленную инъекционную антибактериальную фармкомпозицию с добавлением лимонной кислоты в той же дозе - 1,0 мл/20 кг массы животного один раз в день в течение 3-х дней;

- третьей (контрольной) группе телят и поросят вводили внутримышечно физраствор в течение 3-х дней один раз в день в дозе 1 мл/20 кг массы животного.

Через 10 дней после последнего введения препарата проводили гематологические и биохимические исследования (см. табл.).

Как показали исследования, картина крови (гематологические и биохимические показатели) нормализовалась до физиологического уровня во 2-й группе телят и поросят быстрее, чем в 1-й.

При изучении сроков выведения остаточных количеств азитромицина и флуниксин меглумина в органах и тканях поросят и телят после 3-кратного введения инъекционной антибактериальной фармкомпозиции в терапевтической дозе (1,0 мл на 20 кг массы животного) без добавления лимонной кислоты (группа 1) - остаточные количества азитромицина в концентрациях порядка 3-7 нг/г обнаруживались в печени и почках поросят на 42 сутки, телят - на 45 сутки после последнего введения. Остаточные количества флуниксин меглумина в концентрациях порядка 2-5 нг/г обнаруживались в печени и почках поросят на 25 сутки, телят - на 30 сутки после последнего введения.

Во 2-й группе, где вводили заявленную инъекционную антибактериальную фармкомпозицию с добавлением лимонной кислоты в той же терапевтической дозе, элиминация азитромицина и флуниксин меглумина из внутренних органов происходила быстрее: у поросят на 40 сутки отмечали только следовые количества антибиотика (1-3 нг/г), (на 42 сутки азитромицин в органах и тканях поросят не обнаруживался), а флуниксин меглумина на 21 сутки определялись следовые количества (1-2 нг/г); на 23 сутки флуниксин меглумина не обнаруживался. У телят на 40 сутки регистрировали содержание азитромицина в печени и почках на уровне 2-5 нг/г, на 45 сутки остаточные количества антибиотика в этих органах не обнаруживались. Флуниксин меглумина обнаруживался на 24 сутки - следовые количества (1-2 нг/г), а на 27 сутки флуниксин меглумина не обнаруживался.

Таким образом, добавление к комбинации макролид-НПВС лимонной кислоты способствует восстановлению гематологических и биохимических показателей быстрее, чем у животных, получавших только комбинацию макролид-НПВС, а также способствует ускорению выведения остаточных количеств азитромицина и флуниксина из организма телят и поросят.

Ускорение же элиминации из организма чужеродных веществ играет важную роль при терапии инфекционных заболеваний и позволяет сократить срок предубойной выдержки.

Испытания показали, что заявленная фармацевтическая композиция стабильна в течение двух лет при хранении при температуре от 5°C до 25°C в сухом, защищенном от прямых солнечных лучей месте.

Как следует из приведенных выше данных, поставленная задача решена -получена стабильная при хранении фармацевтическая композиция, обладающая широким спектром антибактериального действия при внутримышечном введении животным, нетоксичная, не вызывающая при применении осложнений и побочных эффектов, способствующая ускорению выведения из организма остаточных количеств азитромицина и флуниксина и тем самым позволяющая сократить срок предубойной выдержки животных.

Изобретение относится к области ветеринарной медицины, а именно к фармацевтике, и может быть использовано для лечения инфекций бактериальной этиологии. Композиция содержит флуниксин или одну из его фармацевтически приемлемых солей, азитромицин в форме дигидрата, лимонную кислоту и воду для инъекций при следующем соотношении ингредиентов (мг/мл): азитромицина дигидрат - 60,0-120,0, флуниксин или одна из его фармацевцевтически приемлемых солей - 38,0-50,0, лимонная кислота - 0,01-1,0, вода для инъекций - до 1 мл. Композиция стабильна при хранении, обладает широким спектром антибактериального действия при внутримышечном введении животным, нетоксична, не вызывает при применении осложнений и побочных эффектов, способствует ускорению выведения из организма остаточных количеств азитромицина и флуниксина и тем самым позволяет сократить срок предубойной выдержки животных. 1 табл., 4 пр.

Инъекционная антибактериальная фармацевтическая композиция, содержащая флуниксин или одну из его фармацевтически приемлемых солей, азитромицин в форме дигидрата, лимонную кислоту и воду при следующем соотношении ингредиентов (мг/мл):
Азитромицин в форме дигидрата 60,0-120,0
Флуниксин или одна из его  

фармацевтически приемлемых солей 38,0-50,0
Лимонная кислота 0,01-1,0
Вода для инъекций до 1 мл