НОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ГИПЕРПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ Российский патент 2015 года по МПК A61K45/06 A61P35/00 

Перекрестная ссылка на родственную заявку

Данная заявка заявляет приоритет предварительной заявки США № 61/127883, поданной 16 мая, 2008 г, и предварительной заявки США № 61/212072, поданной 7 апреля, 2009, содержания которых включены в данное описание ссылкой во всей их полноте.

Уровень техники

Согласно Всемирной организации здравоохранения, пять миллионов человек ежегодно умирают от рака. Лечение лекарственными средствами представляет собой одну из трех основных терапий для рака. В настоящее время, противораковые предписания представляют собой следующее: препятствовать делению или ингибировать деление клеток, регулировать цикл размножения клеток, активировать опухолевую клетку до апоптоза, ингибировать ангиогенез, ингибировать онкоген, активировать ген подавления опухоли, антиген опухоли, ингибитор теломеразы и препятствовать переносу информации опухолевых клеток.

В связи с высокими коэффициентами смертности, связанными с аномальными пролиферативными заболеваниями, включающими рак, в данной области существует потребность в эффективном лечении доброкачественных пролиферативных заболеваний, а также рака.

Сущность изобретения

Данное изобретение основано на открытии, что комбинация некоторых известных лекарственных средств является эффективной в лечении гиперпролиферативных заболеваний, включая рак.

В одном аспекте, изобретение относится к композиции, которая включает первое средство (А), которое обладает противовоспалительной активностью, или ацетаминофен, фенацетин, трамадол и тому подобное, второе средство (В), которое может представлять собой ингибитор окислительного фосфорилирования, ионофор или активатор протеинкиназы, активируемой аденозин-5'-монофосфатом (АМРК), и третье средство (С), которое проявляет или поддерживает активность серотонина.

Первое средство может представлять собой любое подходящее противовоспалительное соединение (например, нестероидные противовоспалительные соединения) или ацетаминофен, фенацетин, трамадол и тому подобное. Примеры включают аспирин, диклофенак (например, диклофенак калий или диклофенак натрий), ибупрофен (например, дексибупрофен или дексиибупрофен лизин), индометацин, нимесулид, и ингибитор СОХ-2 (например, ингибитор СОХ-2 на основе оксида азота или целебрекс^® (4-[5-(4-метилфенил)-3-(трифторметил)-1Н-пиразол-1-ил]бензолсульфонамид)). Другие примеры первого средства включают аспирин-аргинин, алксилинг, L-аргинин ацетилсалициловую кислоту; аспирин-DL-лизин; висмута салицилат основной; висмута салицилат; магния салицилат; диэтиламин салицилат; натриевую соль салициловой кислоты; имидазол салицилат; натрия аминосалицилат; ионизированный аминосалицилат; физостигмин салицилат; прегненолон ацетилсалицилат; холин трисалицилат магния (трилисат); салициловую кислоту цинка оксид; натрия салицилат и натрия иодид; раствор салициловой кислоты и ледяной уксусной кислоты; и метил салицилат.

Второе средство представляет собой ингибитор окислительного фосфорилирования, ионофор или активатор АМРК. Термин “ингибитор окислительного фосфорилирования” относится к любым подходящим средствам, которые ингибируют окислительное фосфорилирование, таким как разобщающие агенты окислительного фосфорилирования. Ионофор представляет собой растворимую в липидах молекулу, способную транспортировать ион вдоль липидного бислоя клеточных мембран; и активатор АМРК представляет собой средство, которое активирует АМРК, чтобы фосфорилировать ее субстраты, например, ацетил-КоА-карбоксилазу и малонил-КоА-декарбоксилазу. Примеры второго средства включают метформин (например, метформина хлорид), фенформин и буформин.

Третье средство может представлять собой соединение, проявляющее или сохраняющее одну из активностей серотонина, и при использовании в комбинации с первым и вторым средствами эффективно лечит одно или несколько целевых заболеваний данного изобретения. Примеры включают серотонин (например, серотонина сульфат, серотонин креатинин сульфатный комплекс или серотонина гидрохлорид) и ингибитор обратного захвата серотонина.

Предпочтительная композиция по данному изобретению содержит аспирин, гидрохлорид метформина и серотонин креатинин сульфатный комплекс.

В другом аспекте, изобретение относится к композиции, состоящей в основном из первого средства, которое обладает противовоспалительной активностью, или ацетаминофена, фенацетина, трамадола и тому подобного, и второго средства, которое может представлять собой ингибитор окислительного фосфорилирования, ионофор или активатор АМРК, и третьего средства, которое проявляет активность серотонина. Выражение “состоящая по существу из”, используемое а настоящем описании, ограничивает композицию до трех определенных средств, и таких, которые по существу не влияют на ее основные и новые характеристики, т.е., на эффективность в лечении целевого заболевания, описанного в данном документе. Пример такой композиции содержит вышеуказанные три средства и фармацевтически приемлемый носитель. Описанная выше композиция может содержать 5-5000 мг (например, 5-3000 мг, 5-1500 мг или 5-1000 мг) первого средства, 5-5000 мг (например, 1-3000 мг, 1-1000 мг, 1-500 мг или 1-100 мг) второго средства и 0,1-1000 мг (например, 0,1-100 мг, 0,1-50 мг или 0,1-30 мг) третьего средства, или в количествах при тех же соотношениях, которые вычислены на основе вышеприведенных количеств.

В еще другом аспекте, изобретение относится к способу лечения гиперпролиферативных заболеваний. Способ включает введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества одной или нескольких композиций, описанных выше. Указанные выше заболевания включают также связанные с ними расстройства.

Термин “лечащий” или “лечение”, используемый в настоящем описании, относится к введению одной или нескольких вышеописанных композиций субъекту, имеющему вышеописанное заболевание, симптом такого заболевания или предрасположенность к такому заболеванию, с целью предоставления терапевтического эффекта, чтобы лечить, ослаблять, изменять, влиять, снижать интенсивность или предотвращать заболевание или его симптом или предрасположенность к нему.

Описанная выше композиция может существовать в форме, подходящей для любого способа введения. Например, когда композицию вводят перорально, данное изобретение в некоторых вариантах осуществления может быть введено в любой фармацевтически приемлемой пероральной лекарственной форме, включающей твердые вещества (например, таблетки, капсулы), жидкости (например, сиропы, растворы и суспензии), перорально растворяющиеся лекарственные формы (например, перорально расщепляющиеся лекарственные формы, лепешки и пастилки), порошки или гранулы.

Композиции могут быть также приготовлены для парентерального введения как раствор или суспензия. Композиции могут быть также в сухой форме, готовой для воссоздания (например, с добавлением стерильной воды для инъекции) перед парентеральном введении. Парентеральное введение включает введение в любую часть тела или ткань, например, внутривенное, внутриартериальное, внутримышечное и подкожное. В случае, где намеченный сайт действия представляет собой солидную опухоль, в некоторых вариантах осуществления композиция может быть введена инъекцией прямо в опухоль.

В некоторых других вариантах осуществления изобретения, одно или несколько активных соединений по данному изобретению объединены с веществом носителя, таким как соединение или молекула (например, антитело), чтобы облегчать транспорт одного или нескольких активных соединений к предполагаемому участку действия. В некоторых предпочтительных вариантах осуществления, активное соединение В (используемое для лечения чрезмерно разрастающейся ткани) ковалентно присоединено к антителу, которое соответствует маркеру, расположенному на гиперпролиферативной ткани. Согласно данному аспекту изобретения предусматривается, что токсичность и вредные эффекты могут быть снижены, так как более низкие уровни активного средства способны обеспечивать желаемый терапевтический эффект по сравнению с введением активного средства, которое не объединено с веществом носителя.

Описанные выше первые, вторые и третьи средства включают активные соединения, а также любые фармацевтически приемлемые производные, такие как их соли, пролекарства и сольваты, если целесообразно. Соль, например, может быть создана между анионом и положительно заряженной группой (например, амино) на средстве. Примеры подходящих анионов включают хлорид, бромид, иодид, сульфат, нитрат, фосфат, цитрат, метансульфонат, трифторацетат, ацетат, хлорфеноксиацетат, малат, тозилат, тартрат, фумарат, глутамат, глюкуронат, лактат, глутарат, бензоат, эмбонат, гликолат, памоат, аспартат, парахлорфеноксиизобутират, формиат, сукцинат, циклогексанкарбоксилат, гексаноат, октоноат, деканоат, гексадеканоат, октодеканоат, бензолсульфонат, триметоксибензоат, паратолуолсульфонат, адамантанкарбоксилат, гликоксилат, пирролидонкарбоксилат, нафталинсульфонат, 1-глюкозофосфат, сульфит, дитионат и малеат. Аналогично, соль также может быть создана между катионом и отрицательно заряженной группой (например, карбоксилат) на средстве. Примеры подходящих катионов включают ион натрия, ион калия, ион магния, ион кальция и ион аммония, такой как ион тетраметиламмония. В некоторых вариантах осуществления средства также включают соли, содержащие четвертичные атомы азота. Примеры пролекарств включают сложные эфиры и другие фармацевтически приемлемые производные, которые, при введении субъекту, способны давать активные соединения. Сольват относится к комплексу, созданному между активным соединением и фармацевтически приемлемым растворителем. Примеры фармацевтически приемлемых растворителей включают воду, этанол, изопропанол, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин.

Другие примеры солей включают соли аргинина, L-аргинина; DL-лизина; висмута салицилат основной; висмута салицилат; магния; диэтиламина; натриевую соль; имидазола; натрия аминосалицилат; изониазид аминосалицилат; физостигмина; прегненолон ацетилсалицилат; холин трисалицилат магния (трилисад); оксида цинка; иодид; раствор ледяной уксусной кислоты и метил.

Также в пределах охвата данного изобретения находится одна или несколько композиций, описанных выше, для применения в лечении заболевания, описанного в настоящем документе, и применение такой композиции в изготовлении лекарственного средства для лечения заболевания, описанного в настоящем изобретении.

Подробности одного или нескольких вариантов осуществления изобретения представлены в описании ниже. Другие особенности, объекты и преимущества изобретения будут очевидны из описания и пунктов формулы изобретения.

Подробное описание

В некоторых вариантах осуществления, композиция данного изобретения включает три средства.

Примеры первого средства могут включать стероидные противовоспалительные лекарственные средства и нестероидные противовоспалительные лекарственные средства. Примеры стероидных противовоспалительных лекарственных средств включают глюкокортикоиды, гидрокортизон, кортизон, беклометазон, дипропионат, бетаметазон, дексаметазон, преднизон, метилпреднизолон, триамцинолон, флуоцинолон ацетонид, флудрокортизон и беклометазон пропионат.

Примеры нестероидных противовоспалительных лекарственных средств (НПВС/NSAIDs) включают А183827, АВТ963, ацеклофенак, ацеметацин, ацетилсалициловую кислоту, AHR10037, аклофенак, алминопрофен, ампироксикам, амтолметин гуацил, апазон, атлипрофенметиловый сложный эфир, AU8001, беноксапрофен, дензидамин флуфенамат, бермопрофен, безпиперилон, BF388, BF389, BIRL790, BMS347070, бромфенак, буклоксовую кислоту, бутибуфен, BW755C, C53, C73, C85, карпрофен, CBS1108, целекоксиб, CHF2003, хлоробифенил, холин трисалицилат магния, СНХ108, цимикоксиб, цинноксикам, клиданак, CLX1205, ингибиторы СОХ-2, СР331, CS502, CS706, D1367, дарбуфелон, дераксоксиб, декскетопрофен, DFP, DFU, диклофенак калий, диклофенак натрий, диклофенак натрий мизопростол, дифлунисал, DP155, DRF4367, E5110, E6087, элтенак, ER34122, эсфлурбипрофен, эторикоксиб, этодолак, F025, фелбинак этил, фенбуфен, фенклофенак, фенклозовую кислоту, фенклозин, фенопрофен, фентиазак, фепразон, филенадол, флобуфен, флорифенин, флосулид, флубихин метансульфонат, флуфенамовую кислоту, флупрофен, флубипрофен, FPL62064, FR122047, FR123826, FR140423, FR188582, FS205397, фурофенак, GR253035, GW406381, HAI105, HAI106, HCT2035, HCT6015, HGP12, HN3392, HP977, HX0835.HYAL AT2101, ибуфенак, ибупроксам-бета-циклодекстрин, икодулинум, IDEA070, игуратимод, имрексоксиб, индопрофен, IP751, изоксепак, изоксикам, KC764, кетопрофен, L652343, L745337, L748731, L752860, L761066, L768277, L776967, L783003, L784520, L791456, L804600, L818571, LAS33815, LAS34475, ликофелон, LM4108, лобупрофен, ломоксикам, лумиракоксиб, мабупрофен, меклофенамовую кислоту, меклофенамат натрия, мефенаминовую кислоту, мелоксикам, меркаптоэтилгуанидин, мезопорфирин, метоксибутропат, миропрофен, мофебутазон, мофезолак, МХ1094, набуметон, напроксен натрий, напроксен-натрий/метоклопрамид, NCX1101, NCX284, NCX285, NCX4016, NCX4215, NCX530, нифлумовую кислоту, нимесулид, НПВС/NSAIDs на основе оксида азота (NitroMed, Lexington, MA), нитрофенак, нитрофлурбипрофен, нитронапроксен, NS398, масло базилика священного, ONO3144, орпаноксим, оксапрозин, оксинданак, окспинак, оксикодон, ибупрофен, оксифенбутазон, Р10294, Р54, Р8892, памикогрел, парцетасал, парекоксиб, PD138367, PD145246, PD164387, пелубипрофен, пемедолак, фенилбутазон, пиразолак, пироксикам, пироксикам бета-циклодекстрин, пироксикам пивалат, пирпрофен, пранопрофен, ресвератрол, R-кетопрофен, R-кеторолак, рофекоксиб, RP66364, RU43526, RU54808, RWJ63556, S19812, S2474, S33516, салициловую кислоту, салсалат, сатигрел, SC236, SC57666, SC58125, SC58451, SFPP, SKF105809, SKF86002, салицилат натрия, судоксикам, сульфасалазин, сулиндак, супрофен, SVT2016, T3788, TA60, талметацин, талнифлумат, тазофелон, тебуфелон, тенидап, теноксикам, тепоксалин, тиапрофеновую кислоту, тилмакоксиб, тилнопрофен армабел, тиноридин, тиопинак, тиоксапрофен, толфенамовую кислоту, толметин, трифлусал, тропесин, TY10222, TY10246, TY10474, UR8962, урсолевую кислоту, вальдекоксиб, WAY120739, WY28342, WY41770, ксимопрофен, YS134, зальтопрофен, зидометацин и зомепирак. Другие примеры первого средства включают ацетаминофен, фенацетин, трамадол и тому подобное.

Еще другие примеры первого средства включают аспирин-аргинин, алксилинг, L-аргинин ацетилсалициловую кислоту; аспирин-DL-лизин, висмута салицилат основной; салицилат висмута; салицилат магния; диэтиламин салицилат; натриевую соль салициловой кислоты; имидазол салицилат; натрия аминосалицилат; изониазид аминосалицилат; физостигмин салицилат; прегненолон ацетилсалицилат; холин трисалицилат магния (трилисад); салициловую кислоту и цинка оксид; натрия салицилат и натрия иодид; раствор салициловой кислоты и ледяной уксусной кислоты; и метил салицилат.

Примеры второго средства могут включать, кроме описанных выше средств, 4,6-динитро-о-крезол, разобщающие белки (например, UCP1, UCP2 или UCP3), карбонил цианид п-(трифторметокси)фенилгидразон, карбонил цианид м-хлорфенилгидразон, С5 генные продукты, динитрофенол (например, 2,4-динитрофенол), эфрапептин (А23871), гуанетидин, хлорпромазин, амитал, секобарбитал, ротенон, прогестерон, антимицин А, нафтохинон, 8-гидроксихинолин, монооксид углерода, цианиды, азиды (например, NaN₃), дикумарин, билирубин, желчный пигмент, эфедрин, гидросульфид, тетраиодотиронин, кверцетин, 2,4-бис(п-хлоранилино)пиримидин, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу, олигомицин, хлорид трибутилолова, ауровертин, рутамицин, вентурицидин, меркуриалы, дициклогексилкарбдиимид, дио-9, м-хлорфенилгидразон мезоксалонитрил, иономицин, кальция ионофоры (например, А23187, NMDA, CA 1001, или энниатин В), соединения, которые повышают концентрацию Са⁺² в митохондриях (например, атрактилозид, бонгкрековую кислоту, тапсигаргин, аминокислотные нейротрансмиттеры, глутамат, N-метил-D-аспарагиновую кислоту, карбахол, ионофоры, индукторы деполяризации калия), апоптогены (т.е., соединения, которые вызывают апоптоз), валиномицин, грамицидин, нонактин, нигерицин, ласалоцид и моненсин. Второе средство может представлять собой активатор АМРК (например, метформин или фенформин, буформин, AICAR, тиенопиридоны, ресвератрол, нооткатон, тиазол, адипонектин, тиазолидиндионы, розиглитазон, пиоглитазон или дитиолетионы).

Третье средство включает серотонин и его функциональные эквиваленты. Примеры функциональных эквивалентов серотонина включают:

1А агонисты серотонина, такие как: (например, арилпиперазиновые соединения, азагетероциклилметильные производные бензодиоксанов, конденсированных с гетероциклами, или буспирон, 3-аминодигидро-[1]-бензопираны и бензотиопираны, (S)-4-[[3-[2-(диметиламино)этил]-1Н-индол-5-ил]метил]-2-оксазолидинон - 311С90) и 8-ОН-DPAT), малеатная соль гемиэтанолата 5-карбоксамидотриптамина, малеатная соль N,N-дипропил-5-карбоксамидотриптамина, R(+)-UH-301 HCl, S15535, гепирон, псилоцибин, ксалипроден HCl и тандоспирон;

1В агонисты серотонина, такие как: CGS-12066a, дималеатная соль N-метилквипазина, ризатриптан и наратриптан;

1С агонисты серотонина, такие как: декснорфенфлурамин;

1А, 1В, 1D и 1F агонисты серотонина, такие как: суматриптан и малеатная соль гемиэтанолата 5-карбоксамидотриптамина;

1В и 1D агонисты серотонина, такие как: дигидроэрготамин и GR46611;

1А и 1D агонисты серотонина, такие как: LY-165163;

1А и 1E агонисты серотонина, такие как: эргоновин и малеатная соль BRL 54443;

5-НТ 2А/2С агонисты, такие как: DOI (2,5-диметокси-4-иодамфетамин), mCPP (м-хлорфенилпиперазин), TFMPP (3-трифторметилфенилпиперазин), мескалин, DMT, псилоцин, 2C-B, лоркасерин, laleaste соль метилсеротонина и 1-(3-хлорфенил)пиперазин HCl;

2B агонисты серотонина, такие как: BW 723C86$

2C модуляторы серотониновых рецепторов, такие как: (например, BVT933, DPCA37215, IK264, PNU22394, WAY161503, R-1065, YM348, VER-3323 гемифумарат и модуляторы, раскрытые в патенте U.S. No. 3914250, WO 01/66548, WO 02/10169, WO 02/36596, WO 02/40456 и WO 02/40457, WO 02/44152, WO 02/48124, WO 02/51844 и WO 03/3479), раскрытия которых включены ссылкой во всей их полноте;

5-НТ 3 агонисты, такие как: фенилбигуанид, О-метилсеротонин HCl, SR 57227 и 1-(3-хлорфенил)бигуанид HCl;

5-НТ 4 агонисты, такие как: цисаприд, мосаприд цитрат дигидрат и ML 10302;

агонисты 5НТ7-рецепторов, такие как: 4-(2-пиридил)пиперазины, LP 12 гидрохлорид гидрат, LP44 и производные хинолина;

ингибиторы транспортера серотонина, такие как: имипрамин;

ингибиторы обратного захвата серотонина, такие как: (например, арилпирролидиновые соединения, фенилпиперазиновые соединения, бензилпиперидиновые соединения, пиперидиновые соединения, трициклические гамма-карболины, производные дулоксетина, пиразинохиноксалиновые соединения, пиридоиндольные соединения, пиперидининдольные соединения, милнаципран, циталопрам, метаболит сертралина, деметилсертралин, норфлуоксетин, десметилциталопрам, эсциталопрам, 1-фенфлурамин, фемоксетин, ифоксетин, цианодотиепин, литоксетин, дапоксетин, нефазодон, церикламин, тразодон, миртазапин, флувоксамин, индальпин, инделоксазин, милнаципран, пароксетин, сибутрамин, зимелдин, тразодон гидрохлорид, дексфенфлурамин, бицифадин, вилазодон, десвенлафаксин, дулоксетин, амитриптилин, бутриптилин, дезипрамин, досулепин, доксепин, лофепрамин, нортриптилин, протриптилин, тримипрамин, амоксапин, мапротилин, адгиперфорин, бромофенирамин, хлорфенирамин, декстрометорфан, дифенгидрамин, гиперфорин, кетамин, нефазодон, петидин, фенилциклидин, фенирамин, пропоксифен и ингибиторы в патенте U.S. No. 6365633, WO 01/27060 и WO 01/162341), раскрытия которых включены ссылкой во всей их полноте, EPTI, 8-OH-DPAT, Prozac® (флуоксетина гидрохлорид) и Zoloft® (серталина гидрохлорид);

ингибиторы обратного захвата норадреналина и серотонина, такие как: (например, венлафаксин, О-десметилвенлафаксин - метаболит венлафаксина, кломипрамин и десметилкломипрамин - метаболит кломипрамина);

ингибиторы обратного захвата моноаминов, такие как: (например, амиды);

пиридазиноновые ингибиторы альдозоредуктазы, такие как (например, пиридазиноновые соединения);

серотонергические агенты, которые также являются стимуляторами серотониновых рецепторов, такие как (например, эрголоид мезилат или перголид мезилат);

стимуляторы синтеза серотонина, такие как (например, витамин В1, витамин В3, витамин В6, биотин, S-аденозилметионин, фолиевая кислота, аскорбиновая кислота, магний, коэнзим Q10 или пирацетам);

агонисты серотониновых рецепторов, такие как: раувольсцин, иохимбин, альфа-метил-5-гидрокситриптамин, 1-(1-нафтил)пиперазин, метоклопрамид, HTF-919, R-093877, золмитриптан, 5-метокси-N,N-диметилтриптамин, гидрат гидрохлорида 5-МЕО-DIPT и диэтиламид лизергиновой кислоты;

прекурсоры серотонина, такие как триптофан;

средства, которые стимулируют высвобождение серотонина из нервных окончаний, такие как: фенфлурамин и норфенфлурамин.

Все из соединений, указанныъ выше, представляют собой известные лекарственные средства и легко доступны для населения. Некоторые из данных лекарственных средств могут быть приобретены у химических компаний, таких как Сигма-Алдрич (Sigma-Aldrich St. Louis, MO). В случае, когда лекарственные средства нелегко доступны, в некоторых вариантах осуществления, обычный специалист в данной области примет во внимание, что соединения могут быть изготовлены органическим синтезом и идентифицированы согласно принятым стандартам, таким как можно найти в Merck Index, Remington's Pharmaceutical Sciences, USP/NF и в зарубежных публикациях. В некоторых вариантах осуществления, режимы для введения данных лекарственных соединений являются хорошо известными и, если нужно, могут быть легко воспроизведены специалистом в области техники. Эффективные дозы будут меняться, как идентифицировано специалистами в данной области, в зависимости от типа и степени заболевания, подвергаемого лечению; субъекта, его массы, возраста и пола; способа введения; использования эксципиентов; скорости метаболизма, скорости экскреции и возможного использования вместе с другим терапевтическим лечением. В некоторых вариантах осуществления, введение вместе с другими лекарственными средствами может приводить к повышенному или пониженному метаболизму и или экскреции, требующих индивидуальный подбор дозы. В некоторых других вариантах осуществления, где одно или несколько активных средств связаны с белками плазмы, введение совместно с другими лекарственными средствами, которые действуют на степень связывания, может также требовать индивидуальный подбор дозы. Суточная доза описанных выше композиций может составлять 5-10000 мг (например, 10-5000 или 10-3000 мг) первого средства, 1-5000 мг (например, 2-1000 или 2-3000 мг) второго средства и 0,1-1000 мг (например, 1-50 мг) третьего средства.

В некоторых предпочтительных вариантах осуществления, доза композиции по данному изобретению для человека составляет примерно 5-5000 мг метформина, примерно 1-5000 мг аспирина и примерно 0,1-1000 мг серотонин креатинин сульфатного комплекса. В некоторых более предпочтительных вариантах осуществления, доза композиции для человека составляет примерно 1000 мг метформина, примерно 400 мг аспирина и примерно 4 мг серотонин креатинин сульфатного комплекса, введенных в виде кратных суточных доз. В некоторых дополнительных предпочтительных вариантах осуществления, данная доза введена три раза в сутки.

Один аспект данного изобретения выделяет способ введения эффективного количества одной или нескольких вышеприведенных композиций субъекту для лечения заболевания, описанного в данном документе. Такой субъект может быть идентифицирован профессионалом медико-санитарной помощи, таким как практикующий врач на основе результатов от любого подходящего диагностического метода. “Эффективное количество” относится к количеству одной или нескольких композиций, описанных в настоящем документе, которое требуется, чтобы давать терапевтический эффект на субъекте, подвергаемому лечению.

Чтобы использовать способ по данному изобретению, в некоторых вариантах осуществления, одна или несколько вышеописанных композиций могут быть введены парентерально, перорально, назально, ректально, местно или трансбуккально. Термин “парентеральный”, как он используется в настоящем описании, относится к подкожной, внутрикожной, внутривенной, внутримышечной, внутрисуставной, внутриартериальной, интрасиновиальной, внутригрудинной, внутриоболочечной, внутриочаговой или внутричерепной инъекции, а также к любой подходящей процедуре инфузии или инъекции.

Стерильная впрыскиваемая композиция может представлять собой раствор или суспензию в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, таком как раствор в 1,3-бутандиоле. Примеры приемлемых наполнителей и растворителей, которые могут быть использованы, представляют собой манит, воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, нелетучие масла обычно используются как растворитель или суспендирующая среда (например, синтетические моно- или диглицериды). Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицеридные производные, применимы для приготовления составов для инъекций, так как являются природными фармацевтически приемлемыми маслами, такими как оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированных вариантах.

Данные масляные растворы или суспензии могут также содержать спиртовой разбавитель с длинной цепью или диспергатор, карбоксиметилцеллюлозу или подобные диспергирующие средства. С целью приготовления препарата также могут быть использованы другие, обычно используемые поверхностно-активные вещества, такие как твины и спаны или другие подобные эмульгаторы или усилители биодоступности, обычно используемые при изготовлении фармацевтически приемлемых твердых, жидких или других лекарственных форм.

Композиция для перорального введения может представлять собой любую перорально приемлемую лекарственную форму, включающую капсулы, таблетки, эмульсии и водные суспензии, дисперсии и растворы. В случае таблеток, обычно используемые носители включают лактозу и кукурузный крахмал. Обычно также добавляют лубриканты, такие как стеарат магния. Для перорального введения в форме капсул обычные разбавители включают лактозу и высушенный кукурузный крахмал. Когда водные суспензии или эмульсии вводят перорально, активный ингредиент может быть суспендирован или растворен в масляной фазе, объединенной с эмульгаторами или с суспендирующими средствами. Если желательно, то могут быть добавлены некоторые подсластители, вкусовые ароматизаторы или окрашивающие вещества.

Назальный аэрозоль или композиция для ингаляции могут быть приготовлены методиками, хорошо известными в области создания фармацевтических препаратов. Например, такая композиция может быть приготовлена как раствор в физиологическом растворе с использование бензилового спирта или других подходящих консервантов, стимуляторов абсорбции для усиления биодоступности, фторуглеродов и/или других солюбилизирующих или диспергирующих средств, известных в данной области.

Композиция для местного введения может быть приготовлена в форме мази, геля, пластыря, эмульсии, лосьона, пены, крема из смешанной фазы или системы ампифильной эмульсии (смешанная фаза масло/вода-вода/масло), липосомы, трансферсомы, пасты или порошка.

Любая из композиций, описанных выше, может быть также введена в форме суппозиториев для ректального введения. Это может быть сделано таким образом, что композиция высвобождается в кишечнике. Например, композицию заключают в твердую субъединицу или компартмент капсулы, который имеет соответственно матрицу или стенку или перегородку, содержащую энтеросолюбильный полимер, который растворяется или диспергирует при рН тонкого или толстого кишечника с высвобождением лекарственного вещества в кишечнике. Такие подходящие полимеры описаны выше, например, ссылкой на патент США № 5705189.

В некоторых вариантах осуществления, носитель в фармацевтической композиции должен быть “приемлемый” в том смысле, что он совместим с активным ингредиентом композиции (и предпочтительно, способен стабилизировать активный ингредиент) и не вреден для субъекта, подвергающегося лечения. Один или несколько солюбилизаторов могут быть использованы в качестве фармацевтичских эксципиентов для доставки активного соединения. Примеры других носителей включают коллоидный оксид кремния, стеарат магния, целлюлозу, лаурилсульфат натрия и D&C Yellow # 10.

Доброкачественные опухоли

Соединения и способы данного изобретения также подходят для лечения множества доброкачественных опухолей. Типичные доброкачественные опухоли включают: опухоли надпочечников, такие как аденома, феохромоцитома надпочечников и ганглионейрома надпочечников; опухоли головного мозга, такие как менингиома и аденома; опухоли периферической нервной системы, такие как нейрофиброма и шваннома; опухоли печени, такие как аденома; опухоли щитовидной железы, такие как фолликулярная аденома; опухоли паращитовидной железы, такие как аденома; опухоли тимуса, такие как тимома; опухоли слюнной железы, такие как плеоморфная аденома; опухоль тонкого кишечника, такая как ворсинчатая аденома; опухоли толстой кишки, такие как трубчато-ворсинчатая аденома, аденоматозный полип толстой кишки и полипоз коли; опухоли поджелудочной железы, такие как серозная цистаденома: инсуломы, такие как панкреатическая инсулома; назофарингеальные опухоли, такие как назальная ангиофиброма; опухоли яичников, такие как нетипичная пролиферативная слизеобразующая неоплазма, опухоль Бреннера яичника, слизистая цистаденома, сосочковая цистаденома, дермоидная киста яичника, яичниковая тератома, яичниковая фиброма, лутеома и струма яичников; опухоли матки, такие как маточная клеточная лейомиома и лейомиома; опухоли плаценты, такие как хорионангиома, частичный пузырный занос, полный пузырный занос и занос; опухоли костей, такие как кавернозная гемангиома и гигантоклеточная опухоль; опухоли мягких тканей, такие как кавернозная гемангиома, десмоидная опухоль, липома, миелолипома и остеохондрома; опухоли суставов, такие как синовиальный хондроматоз; опухоли легких, такие как карциноидная опухоль, зернисто-клеточная опухоль и гемангиома; опухоли миокардия, такие как артиальная миксома; опухоли молочной железы, такие как фиброаденома, внутрипротоковая папиллома и шваннома; опухоли почек, такие как врожденная мезобластическая нефрома; и опухоли кожи, такие как гигантский врожденный интрадермальный невус.

Данная композиция может быть введена для лечения гиперпролиферативных нарушений. Термин “гиперпролиферативные нарушения” относится к избыточной пролиферации клеток, которая не регулируется обычным ограничением нормального роста. Термин указывает на злокачественные а также незлокачественные популяции клеток. Избыточная пролиферация клеток может быть определена отсылкой относительно обычной популяции и/или относительно определенного пациента, например, в более ранний момент в жизни пациента. Гиперпролиферативные клеточные нарушения могут происходить в разных типах животных и в людях, и давать различные физические проявления, зависящие от измененных клеток.

Гиперпролиферативные клеточные нарушения включают опухоли, а также и неопухоли. “Опухоль” относится в данном описании к аномальной массе ткани, которая получается от избыточного деления клеток, которое является неконтролируемым и прогрессирующим, также называемым неоплазмой.

Примеры опухолей включают множество солидных опухолей, таких как ларингеальные опухоли, опухоли головного мозга, другие опухоли головы и шеи; опухоли ободочной кишки, прямой кишки и простаты; опухоли молочной железы и торакальные солидные опухоли; яичниковые и маточные опухоли; опухоли пищевода, желудка, поджелудочной железы и печени; опухоли мочевого пузыря и желчного пузыря; опухоли кожи, такие как меланомы, и тому подобное; и жидкая опухоль, такая как лейкоз.

“Солидная опухоль”, как она используется в настоящем описании, относится к аномальной массе ткани, которая обычно не содержит кисты или участки с жидкостью. Солидные опухоли могут быть доброкачественными (нераковыми), или злокачественными (раковыми). Солидные опухоли имеют особую структуру, которая воспроизводит структуру нормальных тканей и содержит два разных, но взаимосвязанных компартмента: паренхиму (клетки, относящиеся к опухоли) и строму, которая вызывает относящиеся к опухоли клетки и в которой они диспергированы. Разные типы солидных опухолей названы по типу клеток, которые их образуют. Примеры солидных опухолей представляют собой саркомы, карциномы и лимфомы.

“Солидная опухоль” означает очаг опухолевых клеток, где большинство клеток представляет собой клетки опухоли или клетки, связанные с опухолью.

Предпочтительнее, опухоль в данном описании относится как к доброкачественным (нераковым), так и к злокачественным опухолям.

Злокачественные опухоли

Примеры злокачественных опухолей включают, но без ограничения: рак молочной железы, такой как:

1. Дуктальная карцинома: А1. Дуктальная карцинома внутриэпителиальная (DCIS): комедокарцинома, решетчатая, папиллярная, микропапиллярная; А2. Инфильтрующая дуктальная карцинома (IDC): тубулярная карцинома, слизеобразующая (коллоидная) карцинома, медуллярная карцинома, папиллярная карцинома, метапластическая карцинома, воспалительная карцинома;

2. Лобулярная карцинома: В1. Лобулярная карцинома внутриэпителиальная (LCIS); В2. Инвазивная лобулярная карцинома;

3. Болезнь Пагета соска.

Женская репродуктивная система

Шейка матки: цервикальная внутриэпителиальная неоплазия, степень I, цервикальная внутиэпителиальная неоплазия, степень II, цервикальная внутриэпителиальная неоплазия, степень III, (плоскоклеточный рак I внутриэпителиальный), кератинизирующий плоскоклеточный рак, некератинизирующий плоскоклеточный рак, сосочковый рак, аденокарцинома внутриэпителиальная, аденокарцинома внутриэпителиальная, эндоцервикальный тип, эндометриоидная аденокарцинома, светлоклеточная аденокарцинома, аденосквамозная карцинома, аденокистозная карцинома, мелкоклеточный рак, недифференцируемый рак.

Тело матки: эндометриоидная карцинома, аденокарцинома, аденокантома (аденокарцинома с плоскоклеточной метаплазией), аденосквамозная карцинома (смешанная аденокарцинома и плоскоклеточный рак), слизеобразующая аденокарцинома, серозная аденокарцинома, светлоклеточная аденокарцинома, плоскоклеточная аденокарцинома, недифференцируемая аденокарцинома.

Яичник: серозная цистаденома, серозная цистаденокарцинома, слизеобразующая цистаденома, слизеобразующая цистаденокарцинома, эндометриоидная опухоль, эндометриоидная аденокарцинома, светлоклеточная опухоль, светлоклеточная цистаденокарцинома, неклассифицированная опухоль.

Влагалище: плоскоклеточный рак, аденокарцинома.

Вульва: вульварная внутриэпителиальная неоплазия, степень I, вульварная внутриэпителиальная неоплазия, степень II, вульварная внутриэпителиальная неоплазия, степень III (плоскоклеточный рак внутриэпителиальный), плоскоклеточный рак, сосочковый рак, болезнь Педжета вульвы, аденокарцинома, NOS, базалиома, NOS, карцинома бартолиновых желез.

Мужская репродуктивная система

Пенис: плоскоклеточный рак.

Простата: аденокарцинома, саркома, переходно-клеточный рак простаты.

Яичко: семиномная опухоль, несеминомная опухоль, тератома, эмбриональная карцинома, опухоль желточного мешка, хориокарцинома.

Кардиальная: саркома (ангиосаркома, фибросаркома, рабдомиосаркома, липосаркома), миксома, рабдомиома, фиброма, липома и тератома.

Респираторная система

Гортань: плоскоклеточный рак.

Плевральная мезотелиома: первичная плевральная мезотелиома.

Глотка: плоскоклеточный рак.

Легкое

1. Плоскоклеточный рак (эпидермоидный рак), вариант: веретеноклеточный;

2. Мелкоклеточный рак, другой клеточный рак, промежуточный клеточный тип, комбинированный овсяноклеточный рак;

3. Аденокарцинома: ацинозная аденокарцинома, папиллярная аденокарцинома, бронхиолоальвеолярная карцинома, солидная карцинома с образованием слизи;

4. Крупноклеточный рак: гигантоклеточный рак, светлоклеточный рак, саркома.

Желудочно-кишечный тракт

Фатерова ампула: первичная аденокарцинома, карциноидная опухоль, лимфома.

Анальный канал: аденокарцинома, плоскоклеточный рак, меланома.

Экстрапеченочные желчные протоки: карцинома внутриэпителиальная, аденокарцинома, папиллярная аденокарцинома, аденокарцинома, кишечный тип, слизеобразующая аденокарцинома, светлоклеточная аденокарцинома, перстневидный клеточный рак, аденосквамозная карцинома, плоскоклеточный рак, мелкоклеточный (овсяноклеточный) рак, недифференцируемая карцинома, карцинома, NOS, саркома, карциноидная опухоль.

Ободочная кишка и прямая кишка: аденокарцинома внутриэпителиальная, аденокарцинома, слизеобразующая аденокарцинома (коллоидный тип; более чем 50% слизеобразующая карцинома), перстневидный клеточный рак (более чем 50% перстневидных клеток), плоскоклеточный (эпидермоидный) рак, аденосквамозная карцинома, мелкоклеточный (овсяноклеточный) рак, недифференцируемая карцинома, карцинома, NOS, саркома, лимфома, карциноидная опухоль.

Пищевод: плоскоклеточный рак, аденокарцинома, лейомиосаркома, лимфома.

Желчный пузырь: аденокарцинома, аденокарцинома, кишечный тип, аденосквамозная карцинома, карцинома внутриэпителиальная, карцинома, NOS, светлоклеточная аденокарцинома, слизеобразующая аденокарцинома, папиллярная аденокарцинома, перстневидный клеточный рак, мелкоклеточный (овсяноклеточный) рак, плоскоклеточный рак, недифференцируемая карцинома.

Губа и полость рта: плоскоклеточный рак.

Печень: гепатома (печеночно-клеточный) рак, холангиокарцинома, гепатобластома, ангиосаркома, печеночно-клеточная аденома, гемангиома.

Экзокринная поджелудочная железа: протоковая карцинома, плеоморфный гигантоклеточный рак, гигантоклеточный рак, остеокластоидный тип, аденокарцинома, аденосквамозная карцинома, слизеобразующая (коллоидная) карцинома, цистаденокарцинома, железистый рак, папиллярный рак, мелкоклеточный (овсяноклеточный) рак, смешанный клеточный тип, карцинома, NOS, недифференцируемый рак, эндокринные клеточные опухоли, возникающие в островках Лангерхана, карциноид.

Слюнные железы: железистый рак, аденокистозная карцинома (цилиндрома), аденокарцинома, плоскоклеточный рак, карцинома в плеоморфной аденоме (злокачественная смешанная опухоль), слизеобразующий плоскоклеточный рак, хорошо дифференцируемый (низкая стадия), слабо дифференцируемый (высокая стадия).

Желудок: аденокарцинома, папиллярная аденокарцинома, тубулярная аденокарцинома, слизеобразующая аденокарцинома, перстневидный клеточный рак, аденосквамозная карцинома, плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак, недифференцируемая карцинома, лимфома, саркома, карциноидная опухоль.

Тонкий кишечник: аденокарцинома, лимфома, карциноидные опухоли, саркома Карпоши, лейомиома, гемангиома, липома, нейрофиброма, фиброма.

Мочевая система

Почка: рак почки, карцинома собирательных протоков Беллини, аденокарцинома, папиллярная, тубулярная карцинома, гранулярно-клеточная карцинома, светлоклеточный рак (гипернефрома), саркома почки, нефробластома.

Почечная лоханка и мочеточник: переходно-клеточный рак, папиллярный переходно-клеточный рак, плоскоклеточный рак, аденокарцинома.

Уретра: переходно-клеточный рак, плоскоклеточный рак, аденокарцинома.

Мочевой пузырь: карцинома внутриэпителиальная, переходно-клеточный уротелиальный рак, папиллярный переходно-клеточный рак, плоскоклеточный рак, аденокарцинома, недифференцируемая.

Мышца, кость и мягкая ткань

Кость: А. Кость-образующая: остеосаркома; В. хрящ-образующая: хондросаркома, мезенхимная хондросаркома; С. Гигантоклеточная опухоль, злокачественная; D. Саркома Эвинга; Е. Васкулярные опухоли: гемангиоэндотелиома, гемангиоперицитома, ангиосаркома; F. Соединительнотканные опухоли: фибросаркома, липосаркома, злокачественная мезенхимома, недифференцируемая саркома; G. Другие опухоли: хордома, адамантинома трубчатых костей.

Мягкие ткани: альвеолярная саркома мягких тканей, ангиосаркома, эпителиоидная саркома, экстраскелетная хондросаркома, фибросаркома, лейомиосаркома, липосаркома, злокачественная фиброзная гистиоцитома, злокачественная гемангиоперицитома, злокачественная мезенхимома, злокачественная шваннома, рабдомиосаркома, синовиальная саркома, саркома, NOS.

Нервная система: череп (остеома, гемангиома, гранулома, ксантома, деформирующий остит), мозговые оболочки головного и спинного мозга (менингиома, менингиосаркома, глиоматоз), головной мозг (астроцитома, медуллобластома, глиома, эпендимома, герминома (пилеалома), глиобластома полиморфная, олигодендроглиома, шваннома, ретинобластома, врожденные опухоли), нейрофиброма спинного мозга, менингиома, глиома, саркома).

Гематология: кровь (миелоидный лейкоз (острый и хронический), острый лимфобластический лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз, миелопролиферативные заболевания, множественная миелома, миелодиспластический синдром), болезнь Ходжкина, лимфома не-Ходжкина (злокачественная лимфонома).

Эндокринная система

Щитовидная железа: папиллярная карцинома (включая карциному с фолликулярными очагами), фолликулярная карцинома, медуллярная карцинома, недифференцируемая (анапластическая) карцинома.

Нейробластома: симпатикобластома, симпатикогониома, злокачественная ганглионейрома, ганглиосимпатикобластома, ганглионейрома.

Кожа

Плоскоклеточный рак, веретеноклеточный вариант плоскоклеточного рака, базально-клеточный рак, аденокарцинома, развивающаяся из потовой или сальной железы, злокачественная меланома.

Глаз

Конъюнктива: карцинома конъюнктивы

Веко: базально-клеточный рак, плоскоклеточный рак, себоцейная карцинома.

Слезная железа: аденокарцинома, аденоидная кистозная карцинома, карцинома в плеоморфной аденоме, мукоэпидермоидная карцинома, плоскоклеточный рак.

Веко: меланома века.

Увеальный тракт: веретеноклеточная меланома, смешанная клеточная меланома, эпителиоидно-клеточная меланома.

Саркома глазницы: опухоль мягкой ткани, саркома кости.

Ретинобластома: ретинобластома.

Примеры неопухолевых гиперпролиферативных нарушений включают, но без ограничения только ими, миелодиспластические нарушения; цервикальную карциному, внутриэпителиальную; семейные кишечные полипозы, такие как синдром Гарднера; оральные лейкоплакии; гистиоцитозы; келоиды; гемангиомы; воспалительный артрит, гиперкератоз и папулосквамозные сыпи, включающие артрит. Также включенными являются обычные индуцированные гиперпролиферативные заболевания, такие как бородавки и заболевания, вызванные EBV (например, инфекционный мононуклеоз), формирование шрамов, пролиферативные нарушения кровеносных сосудов, такие как рестеноз, атеросклероз, внутристентовый стеноз, сосудистый трансплантационный рестеноз, и т.д.; фиброзные расстройства; псориаз; гломерулярный нефрит; макулярные дегенеративные нарушения; доброкачественные ростовые расстройства, такие как гипертрофия простаты и липомы; аутоиммунные нарушения и тому подобное.

Данная композиция также может быть введена для лечения сердечных аритмий, включающих, но без ограничения, синдром Вольфа-Паркинсона-Уайта и атриовентрикулярную узловую реентритахикардию, желудочковую тахикардию (VT), предсердные тахикардии, трепетание предсердий и тахиформы предсердной наджелудочковой фибрилляции.

Данная композиция также может быть введена для лечения эндометриоза, маточной фиброзной меннорагии (лейомиома матки), эрозии шейки, полипа шейки, и тому подобного.

Данная композиция также может быть введена для лечения дефектов или нарушений межпозвоночных дисков, включающих, но без ограничения, кольцевые трещины, дробление студенистого ядра межпозвоночного диска центральной пульпы, сдерживание грыжеобразования на межпозвоночном диске с грыжей, дегенеративные межпозвоночные диски.

Описанные выше композиции могут быть предварительно отобраны по их эффективности в лечении вышеописанных заболеваний анализом in vitro и затем подтверждены опытом на животных (см. примеры 1-9 ниже) и клиническим опытом. При наличии информации, представленной в данном изобретении, другие методы станут также понятными квалифицированным специалистам в данной области.

Конкретные примеры, представленные ниже, следует рассматривать как просто иллюстративные и не ограничительные для остатка раскрытия безотносительно к любому случаю. Без дальнейшего уточнения полагают, что квалифицированный специалист в данной области может использовать данное изобретение в его наивысшей степени. Все публикации, цитированные в настоящем описании, включены ссылкой полностью.

Подробное описание предпочтительных вариантов осуществления

Клетки могут существовать в различных периодах клеточного цикла, а именно: клетки в фазе G1, клетки в фазе S (указывая синтез и удвоение ДНК) и клетки в фазе G2. При сравнении раковых клеток с нормальными клетками, устанавливается снижение в доле клеток в фазе G1 при раке, увеличение в доле клеток в синтезе при раке и увеличение в доле клеток в фазе G2 и фазе S.

Пример 1

В примере 1, B20L (метформин 1 мМ + аспирин 0,4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,002 мМ) и В20Н (метформин 10 мМ + аспирин 4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,02 мМ) тестировали, для определения действия на клеточный цикл клеток рака поджелудочной железы после 24 часов. Каждый из образцов клеток затем тестировали в проточном цитометре. Использованные методология тестирования и оборудование приведены как следует ниже. Клетки собирали и промывали дважды фосфатно-солевым буферным раствором (PBS) и выдерживали в 70% холодном этаноле при 4°С в продолжение ночи. Перед анализом, клетки промывали дважды с помощью PBS, содержащего 1% бычьего сывороточного альбумина (BSA), затем повторно суспендировали с 400 мкл PBS и обрабатывали c помощью 100 мкг/мл Rnase A (Roche Diagnostics) и 50 мкг/мл иодида пропидия (PI) (Sigma). После инкубирования в течение 30 минут при 37°С, клетки подвергали анализу на содержание ДНК. Флуоресценцию иодида пропидия (PI) анализировали FASCCalibur проточным цитометром (Becton Dickinson). Данные, по меньшей мере, от 10000 клеток анализировали программным обеспечением. Результаты контрольной группы, а также двух групп с активной терапией приведены в таблице 1 ниже.

Таблица 1
Действие B20L (метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс) и В20Н (метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс) на клетки рака поджелудочной железы после 24 часов Группа G1 S G2 Контроль 63% 35,5% 1,5% B20L (метформин 1 мМ + аспирин 0,4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,002 мМ) 87,30% 9,40% 3,30% Метформин 10 мМ + аспирин 4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,02 мМ 88,70% 7,80% 3,40%

Данные результаты показывают, что метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс может блокировать клетки рака поджелудочной железы в фазе G1 от прогрессирования в фазу S и фазу G2 спустя 24 часа, так как две группы с терапией имеют более высокую долю раковых клеток в фазе G1.

Пример 2

В примере 2, по методике вышеприведенного примера 1 проводили процедуру тестирования в течение 48 и 72 часов, сравнивая контрольную группу с группой с терапией посредством B20L. Результаты приведены в таблице 2 ниже.

Таблица 2
Действие B20L (метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс) на клетки рака поджелудочной железы после 48 и 72 часов Действие B20L на клеточный цикл за 48 часов Группа G1 S G2 Контроль 47% 46,2% 6,60% Метформин 1 мМ + аспирин 0,4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,002 мМ 71,70% 25,40% 2,90% Действие B20L на клеточный цикл за 72 часа Группа G1 S G2 Контроль 57% 37,4% 5,80% Метформин 1 мМ + аспирин 0,4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,002 мМ 63,80% 31,50% 4,60%

Данные результаты показывают, что метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс может блокировать клетки рака поджелудочной железы в фазе G1 от прогрессирования в фазу S и фазу G2 спустя 24, 48 и 72 часа, так как две группы с терапией имеют более высокую долю раковых клеток в фазе G1.

Пример 3

В примере 3, разные дозировки смеси метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс тестировали, чтобы определить действие на клеточный цикл клеток рака молочной железы после 24 часов. Каждый из образцов клеток затем тестировали в проточном цитометре, следуя процедурам, приведенным в примере 1 выше. Результаты контрольной группы, а также двух групп с активной терапией приведены в таблице 3 ниже.

Таблица 3
Действие различных дозировок смеси метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс на клетки рака молочной железы после 24 часов Группа G1 S G2 Контроль 43% 46,10% 10,6% (Метформин 1 мМ + аспирин 0,4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,002 мМ) 59,60% 36,30% 4,10% Метформин 10 мМ + аспирин 4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,02 мМ 73,80% 20,00% 6,20%

Данные результаты показывают, что различные дозировки В20 из смеси метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс могут блокировать клетки рака молочной железы в фазе G1 от прогрессирования в клетки фазы S спустя 24 часа, так как две группы с терапией имеют более низкую долю раковых клеток в фазе S.

Пример 4

В примере 4, разные дозировки смеси метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс тестировали для определения действия на скорость пролиферации клеток рака поджелудочной железы после 24, 48 и 72 часов. Использованные методология тестирования и оборудование приведены как следует ниже. Клетки рака поджелудочной железы пересевали в 96-луночные планшеты в количестве приблизительно 4×10⁴ клеток на мл и им позволяли прилипать в течение 24 часов при 37°С перед тем как обрабатывать лекарственным средством. Жизнеспособность клеток оценивали, используя тест-систему для подсчета клеток Dojindo Cell Counting Kit-8. Жизнеспособность клеток была в прямой пропорции к оптической плотности при 450 нм. В соответствии с этим, жизнеспособность клеток выражали в виде оптической плотности при 450 нм. Все опыты проводили в трех повторах на трех отдельных вариантах. Результаты контрольной группы, а также двух групп с активной терапией приведены в таблице 4 ниже.

Таблица 4
Действие различных дозировок смеси метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс на скорость пролиферации клеток рака поджелудочной железы после 24, 48 и 72 часов Группа 24 ч 48 ч 72 ч Контроль 0,40±0,023 0,89±0,053 1,805±0,033 Метформин 1 мМ + аспирин 0,4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,002 мМ 0,335±0,021∗ 0,725±0,047∗∗ 0,787±0,066∗∗ Метформин 10 мМ + аспирин 4 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,02 мМ 0,296±0,017∗∗ 0,491±0,034∗∗ 0,565±0,060∗∗ ∗p<0,05, ∗∗p<0,01

Данные результаты показывают, что различные дозировки смеси метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс могут ингибировать пролиферацию клеток рака поджелудочной железы и данные эффекты являются время и дозозависимыми.

Пример 5

В примере 5, метформин 5 мМ; метформин 5 мМ + аспирин 2 мМ; и метформин 5 мМ + аспирин 2 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,001 мМ тестировали для определения действия на клеточный цикл на В16 (клетки меланомы мышей) в течение клеточных фаз G1, S и G2. Процедуру для тестирования с использованием проточного цитометра выполняли, как приведено в примере 1 выше. Результаты приведены в таблице 5 ниже.

Таблица 5
Действие метформина 5 мМ, смеси метформин 5 мМ + аспирин 2 мМ и смеси метформин 5 мМ + аспирин 2 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,01 мМ на клетки В16 мышиной меланомы в течение клеточных фаз G1, S и G2. Группа G1 S G2 Контроль 64 12,8 23,1 метформин 5 мМ 71,8 4,6 23,6 метформин 5 мМ + аспирин 2 мМ 82,4 6,0 11,6 метформин 5 мМ + аспирин 2 мМ + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,01 мМ 85,1 6,9 8,0

Данные результаты показывают, что метформин был эффективен. Метформин + аспирин проявил лучший эффект чем один метформин, тогда как метформин + аспирин + серотонин креатинин сульфатный комплекс является более эффективным чем метформин + аспирин.

Пример 6

В примере 6, метформин 50 мМ, метформин 100 мМ, метформин 150 мМ и метформин 200 мМ тестировали, чтобы определить подавляющее действие на клетки рака молочной железы через 3, 12 и 24 часов. Использованные методология тестирования и оборудование приведены как следует ниже. Клетки рака молочной железы пересевали в 96-луночные планшеты в количестве приблизительно 4×10⁴ клеток на мл, и им позволяли прилипать в течение 24 часов при 37°С перед тем как обрабатывать лекарственным средством. Жизнеспособность клеток оценивали, используя тест-систему для подсчета клеток Dojindo Cell Counting Kit-8. Жизнеспособность клеток была в прямой пропорции к оптической плотности при 450 нм. В соответствии с этим, жизнеспособность клеток выражали в виде оптической плотности при 450 нм. Все опыты проводили в трех повторах на трех отдельных вариантах. Результаты приведены в таблице 6 ниже с указанием показателя гибели (по сравнению с контрольной группой) при различных концентрациях и разных временных периодах действия метформина на клетках MCF-7 (клетки рака молочной железы).

Таблица 6
Действие метформина на показатель гибели клеток MCF-7 рака молочной железы после 3, 12 и 24 часов Концентрация Время 3 ч (%) 12 ч (%) 24 ч (%) Метформин 50 нм 0,139±0,041∗∗ 0,397±0,042∗∗ 0,404±0,061∗∗ Метформин 100 нм 0,123±0,057∗∗ 0,353±0,083∗∗ 0,542±0,095∗∗ Метформин 150 нм 0,318±0,032∗∗ 0,488±0,036∗∗ 0,887±0,068∗∗ Метформин 200 нм 0,321±0,07∗∗ 0,769±0,088∗∗ 0,983±0,018∗∗ ∗p<0,05, ∗∗p<0,01

Данные результаты показывают, что метформин был эффективен, может уничтожать клетки рака молочной железы и данные эффекты являются время и дозозависимыми.

Пример 7

В примере 7, метформин + серотонин креатинин сульфатный комплекс + различные соединения с противовоспалительной активностью или ацетаминофен или трамадол (другое первое средство) тестировали, чтобы определить подавляющее действие на клетки рака печени через 24 и 48 часов. Использованную методологию тестирования и оборудование применяли как приведено в примере 6 выше. Результаты приведены в таблице 7 ниже с указанием показателя гибели (по сравнению с контрольной группой) при различных концентрациях и разных временных периодах действия на клетках HepG-2 (клетки рака печени).

Таблица 7
Показатель гибели при различных композициях и различных временных периодах действия на клетках HepG-2   24 ч (%) 48 ч (%) Метформин 100 мМ+аспирин 40 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,975±0,004∗∗ 0,995±0,004∗∗ Метформин 100 мМ+индометацин 30 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,953±0,010∗∗ 0,985±0,008∗∗ Метформин 100 мМ+нимесулид 30 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,935±0,022∗∗ 0,974±0,007∗∗ Метформин 100мМ+целебрекс 30 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,925±0,027∗∗ 0,971±0,005∗∗ Метформин 100мМ+пироксикам 33мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,957±0,015∗∗ 0,975±0,009∗∗ Метформин 100 мМ+диклофенак 25 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,964±0,016∗∗ 0,981±0,007∗∗ Метформин 100 мМ+ацетаминофен 17 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,757±0,005∗∗ 0,969±0,008∗∗ Метформин 100 мМ+трамадол гидрохлорид 17 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,884±0,015∗∗ 0,978±0,014∗∗08 (∗p<0,05, ∗∗p<0,01)

Данные результаты показывают, что метформин + серотонин креатинин сульфатный комплекс + различные соединения с противовоспалительной активностью или ацетаминофен или трамадол (другое первое средство) могут хорошо уничтожать клетки рака печени, и данный эффект лучше чем у одного метформина.

Пример 8

В примере 8, фенформин (другое второе средство) + серотонин креатинин сульфатный комплекс + различные соединения с противовоспалительной активностью или ацетаминофен или трамадол тестировали для определения подавляющего действия на клетки рака печени через 24 и 48 часов. Использованную методологию тестирования и оборудование применяли как описано в примере 6 выше. Результаты приведены в таблице 8 ниже с указанием показателя гибели (по сравнению с контрольной группой) при различных концентрациях и разных временных периодах действия на клетках HepG-2.

Таблица 8
Показатель гибели от различных композиций и различных временных периодов действия на клетках HepG-2   24 часа (%) 48 часов (%) Фенформин 2 мМ+аспирин 40 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,936±0,016∗∗ 0,991±0,006∗∗ Фенформин 2 мМ+индометацин 30 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,762±0,032∗∗ 0,920±0,02∗∗ Фенформин 2 мМ+нимесулид 30мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,789±0,039∗∗ 0,956±0,012∗∗ Фенформин 2 мМ+целебрекс 30мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,817±0,028∗∗ 0,957±0,002∗∗ Фенформин 2 мМ+пироксикам 33 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,973±0,004∗∗ 0,994±0,007∗∗ Фенформин 2 мМ+диклофенак 25 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,965±0,006∗∗ 0,992±0,005∗∗ Фенформин 2 мМ+ацетаминофен 17 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,940±0,022∗∗ 0,991±0,005∗∗ Фенформин 2 мМ+трамадол гидрохлорид 17 мМ+серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,2 мМ 0,721±0,027∗∗ 0,9409±0,004∗∗ (∗p<0,05, ∗∗p<0,01)

Данные результаты показывают, что фенформин (другое второе средство)+ серотонин креатинин сульфатный комплекс + соединения с различной противовоспалительной активностью или ацетаминофен или трамадол могут хорошо уничтожать клетки рака печени, и данный эффект лучше чем у одного метформина.

Пример 9

В примере 9, эффект В10 (метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг) тестировали для определения действия на объем гепатомы мышей линии Kunming (KM) по сравнению с группой с 10% физиологическим раствором глюкозы (GS). Лекарственные средства вводили внутриопухолевой инъекцией, дважды в сутки в течение 3 суток. Объем измеряли перед и после обработки по каждой группе. Результаты, включающие изменение в объеме, приведены в таблице 9 ниже.

Таблица 9
Действие В10 (метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг) на объем гепатомы у мышей КМ Группа Перед лекарственным средством После лекарственного средства 10% G.S. (физиологический раствор глюкозы) 321±54 388±275 Метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг 219±68 13±6∗∗ (n=4, ∗p<0,05, ∗∗p<0,01)

Данные результаты показывают, что В10 (метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг) может устранять объем гепатомы у мышей КМ с показателем в 94,1%.

Пример 10

В примере 10, эффект В10 (метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг) тестировали для определения действия на массу и объем трансплантированной гепатомы человека в безволосых мышей по сравнению с группой с 10% GS и группой с дегидратированным спиртом. Процедуры для проведения данного теста были следующими. Клетки Hep G2 готовили в концентрации 25∗10⁶ клетки/мл и 0,2 мл данной клеточной суспензии (5∗10⁶ клеток) вводили инъекцией в доступное скопление жировой ткани около молочной железы мыши. Когда опухоли достигали требуемого размера (0,5 см³), животных обрабатывали 50 мкл смеси В10, дегидратированным спиртом или 10% раствором глюкозы один раз в сутки в течение 6 суток. В течение 12 суток после последней инъекции, оценивали объем опухоли определением размеров опухоли (длина (L) и ширина (S)) и оценивали в виде V=0,52∗L∗S². На двенадцатые сутки после последней инъекции, мышей обезглавливали и опухоли иссекали, взвешивали и хранили в растворе формалина для дальнейшей оценки. Измеряли объем перед и после обработки по каждой группе. Результаты, включающие изменение в объеме, приведены в таблице 10 ниже.

Таблица 10
Действие B10 на массу и объем гепатомы у мышей КМ Группа Объем перед обработкой после обработки изменения 10% G.S. 172±65,5 444±199 ↑158% Дегидратированный этанол 188±119 89±120∗∗ ↓52,7% Метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг 180±128 1,05±2,09∗∗ ↓99,4% (n=4, ∗p<0,05, ∗∗p<0,01)

Данные результаты показывают, что В10 устраняет объем гепатомы у безволосых мышей с показателем 99,4% по сравнению с показателем группы с дегидратированным спиртом, равным 52,7%.

Пример 11

В примере 11, эффект В3 (метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг) тестировали, чтобы определить действие на метастаз раковых клеток Н22 гепатомы. Пятьдесят тысяч (50000) раковых клеток Н22 гепатомы мышей впрыскивали в брюшную полость мышей КМ, и затем вводили 10% G.S. в контрольной группе, или смесь метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг два раза в сутки в течение только первых 30 суток в группе активной терапии. После завершения терапии наблюдали время выживания. Результаты по группе активной терапии и группе с 10% G.S. приведены в таблице 11 ниже.

Таблица 11
Данные по выживанию мышей КМ, обработанных смесью метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг три раза в сутки в течение 30 суток Группа Число выживших через 120 суток Время выживания 10% G.S. 2/12 64,8±27,8 метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг 9/12 95±37,9∗ (n=12, ∗p<0,05, ∗∗p<0,01)

Данные результаты показывают, что со смесью метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг 9 мышей выживали 120 дней, и в контрольной группе только 2 мыши выживали 120 суток. Время выживания в группе с активным лекарственным средством было также больше, чем время выживания в контрольной группе, указывая на то, что данная лекарственная терапия может продлевать время выживания мышей и уменьшать скорость трансплантации раковых клеток.

Пример 12

В примере 12, эффект В3 и В10 тестировали для определения действия на скорость онкогенеза раковых клеток Н22 гепатомы у мышей КМ. Пятьдесят тысяч (50000) раковых клеток Н22 гепатомы мышей вводили инъекцией мышам КМ подкожно. Группы терапии, состоящие из В3 и В10, вводили три раза в сутки в течение 30 суток. После окончания введения лекарственного средства мышей наблюдали на присутствие опухолевой ткани, чтобы определить, имел ли место онкогенез. Результаты групп терапии В10 и В3 и группы G.S. приведены в таблице 12 ниже.

Таблица 12
Скорость онкогенеза в течение 1, 2, 3, 4, 6 и 8 недель после инокуляции и обработки с помощью В10 (метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг) и В3 (метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг) Группа Время после введения лекарственного средства и скорость онкогенеза 1 н 2 н 3 н 4 н 6 н 8 н G.S. 60 70 70 80 90 90 Метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг 10 20 20 20 20 20 Метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг 30 50 50 50 50 50

Данные результаты показывают, что восемь недель спустя после того как вводили лекарственные средства, группа метформин 50 мг/кг + аспирин 40 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг имела только 20% скорость онкогенеза. Группа метформин 50 мг/кг + целебрекс 10 мг/кг + серотонин креатинин сульфатный комплекс 0,4 мг/кг имела только 50% скорость онкогенеза. Обе группы активных лекарственных средств имели меньшие скорости онкогенеза, чем контрольная группа (90%). Поэтому данные лекарственные средства могут снижать скорость трансплантации опухолевых клеток.

Другие варианты осуществления

Все особенности, раскрытые в данном описании, могут быть объединены в любой комбинации. Каждое свойство, раскрытое в данном описании, может быть заменено альтернативным свойством, служащим той же, эквивалентной или подобной цели. Таким образом, если словесно не оговорено особо, каждый раскрытый признак представляет собой только пример общей серии эквивалентных или подобных признаков. Из вышеприведенного описания, специалист в данной области может легко определить существенные характеристики данного изобретения и без отступления от его сущности и охвата может делать различные изменения и модификации изобретения, чтобы приспособить его к разным применениям и условиям. Таким образом, другие варианты осуществления также находятся в рамках охвата последующей формулы изобретения.

Группа изобретений относится к медицине и касается композиций для лечения гиперпролиферативного заболевания, содержащих первое средство, выбранное из группы, включающей аспирин или целекоксиб, второе средство, которым является метформин, и третье средство, которое представляет собой серотонин креатинин сульфатный комплекс. Группа изобретений обеспечивает синергетический эффект при лечении гиперпролиферативного заболевания. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 12 табл., 12 пр.

1. Композиция для лечения гиперпролиферативного заболевания, состоящая из:
(a) первого средства, которым является аспирин;
(b) второго средство, которым является метформин; и
(c) третьего средства, которое проявляет или поддерживает активность серотонина, которое представляет собой серотонин креатинин сульфатный комплекс.

2. Композиция для лечения гиперпролиферативного заболевания, состоящая из:
(a) первого средства, которым является целекоксиб;
(b) второго средства, которым является метформин; и
(c) третьего средства, которое проявляет или поддерживает активность серотонина, которое представляет собой серотонин креатинин сульфатный комплекс.

3. Композиция по п. 1 или 2, где композиция содержит 1-5000 мг первого средства, 5-5000 мг второго средства и 0,1-1000 мг третьего средства.

4. Композиция по п. 3, где композиция содержит 1-3000 мг первого средства, 5-1500 мг второго средства и 0,1-500 мг третьего средства.

5. Композиция по п. 4, где композиция содержит 1-1000 мг первого средства, 5-1000 мг второго средства и 0,1-100 мг третьего средства.

6. Композиция по п. 1 или 2, где композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель.