Изобретение относится к медицине, а именно к детской стоматологии и биохимии, и может быть использовано для оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита у детей до трехлетнего возраста.
Проблема воспалительных заболеваний слизистой оболочки полости рта у детей занимает одно из важнейших мест в стоматологии. Особое место здесь занимает острый герпетический стоматит, так как на его долю приходится более 80% всех заболеваний слизистой оболочки полости рта у детей (Дроботько Л.Н., Страхова СЮ. Острый герпетический стоматит у детей. - Российская стоматология, 2009. - N 1. - С. 26-29.; Леонтьев В.К., Пахомов Г.Н. Профилактика стоматологических заболеваний. - М., 2006. - 416 с.). Острый герпетический стоматит занимает не только первое место среди всех поражений слизистой оболочки полости рта, но и входит в лидирующую группу среди всех инфекционных заболеваний детского возраста. В 70-90% случаев острый герпетический стоматит распространен у детей в возрасте от 1 года до 3 лет. Лечение острого герпетического стоматита затруднено, так как в основном пациентами становятся дети ясельного возраста. Несмотря на применение в детской стоматологии новых противовирусных препаратов, у каждого 7-10-го ребенка острый герпетический стоматит рано переходит в хронический рецидивирующий герпетический стоматит с преобладанием тяжелой формы заболевания. Поэтому актуальной задачей является разработка способа, позволяющего оценить эффективность лечения этого заболевания у детей.
Известны некоторые аналоги, которые были ранее предложены для оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита. Для контроля за эффективностью проводимой терапии предлагалось использовать следующие клинические критерии: нормализация общего состояния, температуры тела, уменьшение острых воспалительных явлений, болезненности при приеме пищи, эпителизация элементов поражения (Персии Л.С., Елизарова В.М., Дьякова C.B. Стоматология детского возраста. - 5-e изд., перераб. и доп. - М.; Медицина, 2003. - 640 с.).
Недостатки данного способа оценки эффективности лечения детей при герпетическом стоматите, особенно в дошкольном возрасте, связаны со следующими причинами:
- субъективность оценки врачом клинической картины заболевания;
- невозможность оценить эффективность лечения у неконтактных детей и детей с отклонениями в нервно-психическом развитии.
Прототипом способа оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита у детей является рост числа HLA-DR+ клеток в крови, уменьшение соотношения аэробной и анаэробной микрофлоры на слизистой оболочке переходной складки полости рта (Белоусова Л.Г. Иммунопатогенетическое обоснование комплексного лечения острого герпетического стоматита у детей до трех лет: Автореф. дис.на соиск. учен, степ. к.м.н.: Спец. 14.00.21: Спец. 14.00.36. - Самара: 2003).
Недостатками данного способа оценки эффективности лечения детей при герпетическом стоматите являются:
- определение числа HLA-DR+ клеток, микробиологические и иммунологические исследования требуют дорогостоящего оборудования, достаточно длительны во времени и малодоступны для рядовых лабораторий;
- возросшее в последние годы количество заболеваний, передающихся парентеральным путем (в том числе, группа вирусных гепатитов, синдром приобретенного иммунодефицита человека), и болезненность процедуры взятия крови ведет к отказу от инвазивных анализов (особенно у детей дошкольного возраста).
Технический результат изобретения - разработка простого, атравматичного, быстрого, экономически эффективного способа оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита у детей.
Указанный результат по оценке эффективности лечения острого герпетического стоматита у детей достигается путем определения в ротовой жидкости детей содержания кальция и меди спектрофотометрическим методом. Предложен коэффициент соотношения содержания Cu/Ca в ротовой жидкости детей. При величине этого коэффициента свыше 45 лечение острого герпетического стоматита у детей можно считать эффективным. Определение содержания кальция и меди в биологических жидкостях входит в число стандартных показателей работы рядовых биохимических лабораторий, занимают небольшой интервал времени для исследования, а их экономическая эффективность в несколько раз выше иммунологических показателей.
Способ осуществляется следующим образом.
Объектом исследования является ротовая жидкость. За 12 часов до сбора ротовой жидкости у ребенка исключают прием пищи и лекарственных препаратов для того, чтобы избежать разведения ротовой жидкости и влияния медикаментов на секрецию и биохимический состав слюны. Ротовую жидкость собирают утром натощак путем сплевывания в чистые сухие пробирки или отсасывают со дна полости рта одноразовыми атравматичными пипетками в контейнер в количестве 0,5-1 мл. Непосредственно перед сбором слюны рот следует прополоскать водой без использования раздражающих средств и ополаскивателей. Ротовую жидкость центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 минут, в надосадочной жидкости определяют содержание меди и кальция.
Содержание меди в ротовой жидкости детей определяют спектрофотометрически по методу Landers J.W., Zak В. (Landers J.W., Zak В. Determination of serum copper and iron in a single small sample // Am. J. Clin. Path. - 1958. - V. 29, №6. - P. 590-592) и кальция по методу Barnett R.N. et al. (Baraett R.N., Skodon S.B., Goldberg, M.H. et al. Performance of «kits» used for clinical chemical analysis of calcium in serum // Am. J. Clin. http://Path.-1973.-Vol. 59, №6. - P. 836-845).
Принцип метода определения меди основан на способности батокупроина образовывать с ионами одновалентной меди устойчивый комплекс оранжевого цвета, пригодный для фотометрического определения.
Используемые реактивы (например, набор реактивов фирмы «PLIVA-Lachema», Чехия).
1. Стандартный раствор меди сернокислой 3 ммоль/л
2. Батокупроин: 2,9-диметил-4,7-дифенил-1,10-фенантролин-3,6-дисульфокислоты натриевая соль 0,44 ммоль/л, ацетат натрия 2 моль/л
3. Восстанавливающий реактив гидроксиламин сернокислый 1,25 г
4. Реактив для осаждения белков: трихлоруксусная кислота 0,6 моль/л, соляная кислота 2 моль/л
В контрольную, стандартную и опытную пробирки добавляют по 0,5 мл раствора, содержащего 12,5 мг восстанавливающего реактива гидроксиламина сернокислого в 0,6 моль/л трихлоруксусной кислоте и 2 моль/л соляной кислоте. Дополнительно в контрольную пробу добавляют 0,5 мл дистиллированной воды, в стандартную - 0,5 мл 3 ммоль/л раствор сернокислой меди, содержащей 30 мкмоль Cu2+/л, в опытную пробирку - 0,5 мл ротовой жидкости.
Пробы перемешивают и через 30 минут центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин. Надосадочную жидкость в количестве 0,5 мл перемешивают с 0,5 мл 2 моль/л раствора 2,9-диметил-4,7-дифенил-1,10-фенантролин-3,6-дисульфокислоты натриевой соли и в интервале времени от 5 до 90 минут измеряют оптическую плотность пробы (A1) и стандарта (A2) против контрольного раствора при длине волны 480 нм (от 460 до 500 нм) в кювете с толщиной оптического слоя 1 см.
В состав реакционной смеси входят: батокупроин 0,22 ммоль/л, трихлоруксусная кислота 0,15 моль/л, соляная кислота 0,50 моль/л, ацетат натрия 1,0 моль/л, гидроксиламин сернокислый 0,04 моль/л. Объемное соотношение ротовая жидкость/реакционная смесь = 1/2.
Расчет содержания меди производят по формуле:
A=30·(E1/E2),
где A - содержание меди, мкмоль/л;
E1 - оптическая плотность опытной пробы;
E2 - оптическая плотность стандартной пробы;
30 - коэффициент пересчета.
Принцип метода определения кальция основан на способности кальция в щелочной среде образовывать окрашенный комплекс с о-крезолфталеинкомплексоном. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации кальция в пробе.
Используемые реактивы (например, набор реактивов фирмы «Ольвекс диагностикум», Санкт-Петербург, Россия).
1. 1M 2-амино-2-метилпропаноловый буфер, pH 10,7
2. O-крезолфталеинкомплексон - 0,026 М, 8-гидроксихинолин - 9 мМ, детергенты, стабилизаторы
3. Калибратор - 2,5 ммоль/л (10 мг/100 мл)
Все реактивы стабильны в течение 6 месяцев в темноте при комнатной температуре в плотно закрытой посуде.
В контрольную, опытную и калибровочную пробу вносят по 1 мл 1 M 2-амино-2-метилпропанового буфера (pH 10,7) и по 1 мл 0,026 M о-крезолфталеинкомплексона. Затем добавляют по 0,05 мл ротовой жидкости в опытную пробу, калибратора с концентрацией кальция 2,5 ммоль/л - в калибровочную и бидистиллированной воды - в контрольную пробу. Реакционные смеси перемешивают и инкубируют в течение 5 минут при температуре 18-25°C. Измеряют оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной пробы при длине волны 570 нм.
Расчет содержания кальция производят по формуле:
A=(Eпр/Eк)×2,5,
где A - содержание кальция в пробе, ммоль/л;
Eпр - оптическая плотность опытной пробы
Eк - оптическая плотность калибровочной пробы
2,5 ммоль/л - концентрация кальция в растворе калибратора.
Рассчитывают коэффициент соотношения содержания в ротовой жидкости меди к уровню кальция. У здоровых детей коэффициент соотношения этих минеральных веществ в ротовой жидкости равен 94-99. В разгар острого герпетического кератита средней степени тяжести коэффициент Cu/Ca меньше 30, а при тяжелом герпетическом стоматите - меньше 10. Лечение острого герпетического стоматита может считаться эффективным при величине коэффициента Cu/Ca выше 45.
Примеры конкретного выполнения
Пример 1. Больная С., 1 год 4 мес. Диагноз: Острый герпетический стоматит легкой степени тяжести. После проведенного лечения при выписке содержание в ротовой жидкости меди - 16 мкмоль/л, кальция - 0,44 ммоль/л. Значение коэффициента Cu/Ca равно 36. Проведенное лечение неэффективно, лечение следует продолжать.
Пример 2. Больной Ж., 2 года 4 мес. Диагноз: Острый герпетический стоматит легкой степени тяжести. После проведенного лечения при выписке содержание в ротовой жидкости меди - 11 мкмоль/л, кальция - 0,15 ммоль/л. Значение коэффициента Cu/Ca равно 73. Проведенное лечение следует считать эффективным.
Пример 3. Больной В., 2 года. Диагноз: Острый герпетический стоматит средней степени тяжести. После проведенного лечения при выписке содержание в ротовой жидкости меди - 14 мкмоль/л, кальция - 0,21 ммоль/л. Значение коэффициента Cu/Ca равно 67. Проведенное лечение следует считать эффективным.
Пример 4. Больной О., 2 года. Диагноз: Острый герпетический стоматит средней степени тяжести. После проведенного лечения при выписке содержание в ротовой жидкости меди - 15 мкмоль/л, кальция - 0,34 ммоль/л. Значение коэффициента Cu/Ca равно 44. Проведенное лечение следует считать неэффективным.
Пример 5. Больной Б., 1 год 11 мес. Диагноз: Тяжелый острый герпетический стоматит. После проведенного лечения при выписке содержание меди в ротовой жидкости - 14 мкмоль/л, кальция - 0,78 ммоль/л. Значение коэффициента Cu/Ca равно 18. Проведенное лечение следует считать неэффективным.
Положительный эффект
При воспалении тканей полости рта неинвазивное исследование слюны является альтернативой анализу крови, что особенно актуально в педиатрической практике. Исследуемый параметр - содержание меди и кальция в ротовой жидкости здоровых детей - стабильный показатель. Метаболические процессы ротовой жидкости тесно связаны с обменными процессами слизистой оболочки полости рта. У детей при остром герпетическом стоматите нарушается целостность тканей и происходит цитолиз клеток слизистой оболочки полости рта, а следовательно, увеличивается содержание кальция в ротовой жидкости. Подобные изменения обусловлены морфологической незрелостью гистогематических барьеров, тонким эпителиальным покровом и низкой дифференцировкой структур соединительной ткани слизистой оболочки полости рта у детей младшего возраста. Содержание меди в ротовой жидкости при средней степени тяжести и легкой форме стоматита увеличивается почти в 2-3 раза, тогда как при тяжелом остром герпетическом стоматите достоверно снижается в 1,5-2 раза по сравнению с контролем. После лечения содержание меди при всех формах заболевания достоверно не отличается от контроля, а уровень кальция, в целом, нормализуется только в ротовой жидкости после перенесенного острого герпетического стоматита легкой степени.
Предложенный коэффициент соотношения уровня Cu/Ca ротовой жидкости после лечения острого герпетического стоматита у детей при значении, равном и ниже 45, свидетельствует о неэффективной терапии и дает возможность предположить раннее рецидивирование герпетического стоматита. При значении коэффициента соотношения уровня Cu/Ca ротовой жидкости выше 45 исследуемые биохимические параметры ротовой жидкости детей после лечения острого герпетического стоматита достоверно не отличаются от этих показателей у здоровых детей, что позволяет считать проведенное лечение эффективным.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ ПРОЯВЛЕНИЙ СТОМАТИТА У ПАЦИЕНТОВ С ОСТРЫМИ ЛЕЙКОЗАМИ ПО ИЗМЕНЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ АНТИТЕЛ К ТРАНСГЛУТАМИНАЗЕ КЛАССОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ А И G В РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ | 2014 |
|
RU2572696C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРОГО ГЕРПЕТИЧЕСКОГО СТОМАТИТА У ДЕТЕЙ | 2011 |
|
RU2444372C1 |
СПОСОБ МЕСТНОГО ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ОСНОВНЫХ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДЕТЕЙ С ХРОНИЧЕСКОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖЕВАТЕЛЬНОГО ФИТОСУБСТРАТА | 2012 |
|
RU2503458C1 |
СПОСОБ МЕСТНОГО ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ОСНОВНЫХ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ДЕТЕЙ С ЦЕРЕБРАЛЬНЫМ ПАРАЛИЧОМ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖЕВАТЕЛЬНОГО ФИТОКОМПЛЕКСА | 2014 |
|
RU2558800C1 |
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ДИСБАКТЕРИОЗА ПОЛОСТИ РТА | 2021 |
|
RU2782992C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО АФТОЗНОГО СТОМАТИТА | 2015 |
|
RU2602684C1 |
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО ГЕРПЕТИЧЕСКОГО СТОМАТИТА | 2018 |
|
RU2709842C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО ГЕРПЕТИЧЕСКОГО СТОМАТИТА, ОСЛОЖНЕННОГО СОМАТОФОРМНЫМ БОЛЕВЫМ РАССТРОЙСТВОМ | 2005 |
|
RU2304971C2 |
СПОСОБ МЕСТНОГО ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ОСНОВНЫХ СТОМАТОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ У ЛИЦ ПОЖИЛОГО И СТАРЧЕСКОГО ВОЗРАСТА С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖЕВАТЕЛЬНОГО ФИТОСУБСТРАТА | 2013 |
|
RU2521373C1 |
СПОСОБ МЕСТНОГО ЛЕЧЕНИЯ КРАСНОГО ПЛОСКОГО ЛИШАЯ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ РТА С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖЕВАТЕЛЬНОГО ФИТОСУБСТРАТА | 2014 |
|
RU2554777C1 |
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита. Сущность способа состоит в том, что в ротовой жидкости ребенка спектрофотометрически определяют величину содержания меди и кальция и при соотношении величины содержания меди к величине содержания кальция свыше 45 лечение считают эффективным. Использование заявленного способа позволяет повысить эффективность лечения острого герпетического стоматита у детей по биохимическому анализу ротовой жидкости. 5 пр.
Способ оценки эффективности лечения острого герпетического стоматита у детей, заключающийся в том, что в ротовой жидкости ребенка спектрофотометрически определяют величину содержания меди и кальция и при соотношении величины содержания меди к величине содержания кальция свыше 45 лечение считают эффективным.
ТИМОФЕЕВ В.И | |||
и др | |||
Макро- и микроэлементный состав зубов и слюны у детей Якутии // Микроэлементы в медицине, 4(4), 2003, с | |||
Выбрасывающий ячеистый аппарат для рядовых сеялок | 1922 |
|
SU21A1 |
Способ диагностики хронического рецидивирующего афтозного стоматита | 1990 |
|
SU1774220A1 |
Способ магнитного испытания материалов | 1936 |
|
SU49437A1 |
ТАРАСЕНКО Л.М | |||
и др Биохимия органов полости рта | |||
Учебное пособие | |||
Полтава | |||
Станок для изготовления деревянных ниточных катушек из цилиндрических, снабженных осевым отверстием, заготовок | 1923 |
|
SU2008A1 |
Устройство для электрической сигнализации | 1918 |
|
SU16A1 |
БЕЛЬСКАЯ Л.В | |||
и др | |||
Вариации элементного состава патогенных минералов |
Авторы
Даты
2015-10-20—Публикация
2014-05-22—Подача