СПОСОБ ОЦЕНКИ УГРОЗЫ РАЗВИТИЯ ПЛОДА ВСЛЕДСТВИЕ ОБОСТРЕНИЯ ЦИТОМЕГАЛОВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ НА ПЕРВОМ ТРИМЕСТРЕ ГЕСТАЦИИ, ВЫЗЫВАЮЩЕЙ СНИЖЕНИЕ СИНТЕЗА ДЕГИДРОЭПИАНДРОСТЕРОНСУЛЬФАТА И ЭСТРИОЛА Российский патент 2015 года по МПК G01N33/50 

1. Цель изобретения - выявить влияние цитомегаловирусной инфекции на синтез дегидроэпиандростеронсульфата (ДЭАС), являющегося предшественником синтеза эстрогенов.

2. Изобретение относится к медицине, а именно к разработке способа оценки снижения синтеза дегидроэпиандростеронсульфата - предшественника гормонов эстриолового ряда, приводящего к угрозе внутриутробного развития плода.

3. Раскрытие изобретения

Существование зависимости в синтезе стероидов между провизорными и дефинитивными тканями широко используется в клинике, когда определение предшественников или конечных продуктов синтеза гормонов в крови или моче матери дает основание судить о функции плаценты и плодовых тканей (4). Отмечается корреляция между уровнем эстрогенов в моче беременных и строением плаценты в условиях различной акушерской патологии - уродствах плода. Поэтому многочисленные исследования позволили считать, что уровень эстрогенов отражает уровень развития всего плода (1, 2, 3). Однако недостаточно данных, объясняющих, какие факторы могут привести к данной корреляции. Совершенно не изучено влияние персистирующих инфекций (вирус простого герпеса, цитомегаловирус) на характер синтеза эстрогенов на различных этапах гестации. Снижение эстриола с 40 пмоль/л до 15 пмоль/л за 1-2 суток приводит к гибели плода (5, 6). ДЭАС (дегидроэпиандростеронсульфат) и 16α-дегидроксиэпиандростеронсульфат, формирующиеся из прегненолона, поступают из плаценты в надпочечники плода. Десульфатирование этих соединений происходит с помощью фермента 3β-гидроксистероиддегидрогеназы, вырабатываемой опять же в плаценте уже на первых неделях гестации, образуя новое соединение - 16α-гидроксиандростерондион, а затем 16α-гидрокситестостерон. Ароматизация 16α-гидрокситестостерона приводит к образованию эстрадиола, а затем эстриола. Из этого следует, что промежуточным предшественником синтеза эстрогенов является 16α-дегидроксиэпиандростеронсульфат, поэтому определение ДЭАС в крови беременной на первых неделях гестации становится надежным показателем синтеза эстрогенов, крайне необходимых для выполнения различных функций в период гестации. Снижение содержания ДЭАС является свидетельством подавления синтеза эстрогенов, конкретно эстриола, и развития плода в целом.

4. Новая техническая задача

Найти способ оценки угрозы внутриутробного развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции, подавляющей синтез дегидроэпиандростеронсульфата - предшественника синтеза гормонов эстриолового ряда в плаценте беременной.

5. В доступной литературе аналогов по данному вопросу не отмечено.

6. Осуществление изобретения

6.1. Обследовано 20 рожениц в возрасте 18-25 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на первом триместре гестации (основная группа) и 20 беременных без таковой патологии (контрольная группа). Диагноз обострения ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г.

Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.2. Оценку показателей гормональной активности фетоплацентарной системы беременных выполняли на основе полученных величин содержания в крови и гомогенате ДЭАС - ЗАО «Алкор Био» (Санкт-Петербург), а также эстриола - «DRG» (США).

6.3. Методика вариационно-статистического анализа. Для каждой группы при статистической обработке определялись следующие показатели: среднее арифметическое (χ), стандартная ошибка среднего значения (m), доверительный интервал для средних значений (M±m), где t устанавливался по таблице граничных значений критерия Стьюдента при доверительном уровне 95% и числе степеней свободы f=n-l (n - число наблюдений). Для определения достоверности различий между средними значениями сравниваемых параметров использовался парный (p+) и непарный (p) критерии Стьюдента. Учитывались уровни значимости различий 0,05; 0,01; 0,001. Различия считались достоверными при p<0,05.

В процессе исследования установлено, что обострение хронической цитомегаловирусной инфекции до титра антител к цитомегаловирусу 1:1600 на первом триместре гестации приводит к снижению синтеза дегидроэпиандростеронсульфата на 12-й неделе гестации в плаценте (гомогенат) до 1,20±0,08 мкмоль/л (контроль - 2,80±0,05 мкмоль/л). В периферической крови беременной содержание ДЭАС составляло на 12-й неделе гестации 7,53 мкмоль/л (контроль - 10,40 мкмоль/л; p<0,01). Это приводило к снижению в первом триместре синтеза эстриола и в крови организма матери до 2,70±0,15 пмоль/л (контроль - 5,8±0,09 пмоль/л; p<0,01). Снижение синтеза ДЭАС, влияющего на синтез эстриола, создает угрозу развития плода.

Литература

1. Кобозева Н.В., Гуркин Ю.А. Перинатальная эндокринология. Ленинград. «Медицина». 1986. 310 с.

2. Кулаков В.И., Черная В.В. Фетоплацентарная недостаточность и ее радиоиммунологическая диагностика. В кн: Радиоиммунологическая диагностика фетоплацентарной недостаточности в гормональной адаптации новорожденных: Сб. научных трудов. МОНИИАГ. М.: 1983. С. 5-11.

3. Савченко О.Н., Степанова Н.А. Плацента. В кн: Физиология эндокринной системы: Руководство по физиологии. Л. 1979. Гл. 11. С. 396-413.

4. Цирельников Н.И. Гистофизиология плаценты человека. Новосибирск. Изд. «Наука» Сибирское отделение Академии Наук СССР. 1980. 183 с.

5. Panigel В., Chavinie J. Interet des dosages de l′oestion au cours des grosses pathologiques // Gynec. et Obstet. 1970. Vol. 69. №1. 3. 43-54.

6. Selim A.G., Wells C.A. Immunohistochemical localization of androgen reception in apocrine metaplasia and progesterone reception // J. Clin. Pathol. 1999. Vol. 52. №11. P. 838-841.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторным методам диагностики, и может быть использовано для оценки угрозы развития плода при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации. Способ включает определение на первом триместре гестации в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, содержание в гомогенате плаценты на 12-й неделе беременности дегидроэпиандростеронсульфата, содержание в периферической крови дегидроэпиандростеронсульфата и эстриола. При нарастании титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, содержания в гомогенате плаценты

дегидроэпиандростендиолсульфата до 1,20 мкмоль/л и снижении в периферической крови беременной дегидроэпиандростеронсульфата до 7,53 мкмоль/л и эстриола до 2,70 пмоль/л определяют угрозу развития плода.

Способ оценки угрозы развития плода, включающий определение на первом триместре гестации в периферической крови титра антител к цитомегаловирусу, содержание в гомогенате плаценты на 12-й неделе беременности дегидроэпиандростеронсульфата, содержание в периферической крови дегидроэпиандростеронсульфата и эстриола и при нарастании титра антител к цитомегаловирусу до 1:1600, содержания в гомогенате плаценты дегидроэпиандростендиолсульфата до 1,20 мкмоль/л и снижении в периферической крови беременной дегидроэпиандростеронсульфата до 7,53 мкмоль/л и эстриола до 2,70 пмоль/л определяют угрозу развития плода