Способ определения имплантации зародыша человека в слизистую оболочку матки в зависимости от содержания в хорионе активных рецепторов к эстрогенам при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации Российский патент 2017 года по МПК G01N33/48 

1. Цель изобретения - показать отрицательное влияние обострения цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации на имплантацию зародыша человека на 7-8 неделе беременности в связи со снижением содержания в клетках хориона рецепторов к эстрогенам (ERα).

2. Изобретение относится к медицине, а именно к оценке влияния обострения цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации на снижение содержания в хорионе рецепторов к эстрогенам, приводящее к нарушению процесса имплантации зародыша в слизистую оболочку матки.

3. Раскрытие изобретения

Количество и функционирование рецепторов к стероидным гормонам - эстрогенам является показателем благополучия имплантации зародыша в слизистую оболочку матки на первых неделях беременности [1, 2]. Рецепторы к эстрогенам относятся к внутриклеточным рецепторам гормонов. Для благополучной имплантации зародыша в слизистую матки необходимо согласование по времени готовности к этому процессу эндометрия матки. Для имплантации необходима эндокринная регуляция гормонами [3, 4]. Эстрогены усиливают синтез собственных рецепторов и рецепторов прогестерона и андрогенов. Рецепторы эстрогенов влияют на процесс формирования ворсинок плаценты и образования в слизистой матки кровеносных сосудов [5]. Недостаточное содержание эстрогеновых рецепторов или их функциональное подавление приводит к нарушению имплантации зародыша и дальнейшему развитию эмбриона, что создает угрозу самопроизвольного выкидыша.

4. Новая техническая задача

Разработать способ оценки неблагоприятного влияния обострения цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации, подавляюще действующей на содержание эстрогеновых рецепторов в хорионе, создавая угрозу самопроизвольного выкидыша.

5. В доступной литературе имеется много сведений о роли эстрогеновых рецепторов на ранних этапах гестации [1], однако практически нет литературы, освещающей подавление активности эстрогеновых рецепторов при вирусных процессах, сопровождающих первые недели гестации. В настоящем исследовании содержание активных эстрогеновых рецепторов проводилось в гомогенате хориона на 7-8 неделях гестации при обострении цитомегаловирусной инфекции, снижающей содержание активных эстрогеновых рецепторов.

6. Осуществление изобретения

6.1. Обследовано 20 беременных в возрасте 18-26 лет с хронической цитомегаловирусной инфекцией (ХЦМВИ) в стадии обострения на 7-8 неделях в первом триместре гестации. 15 беременных было обследовано без заболевания на всем периоде беременности. Диагноз обострение ХЦМВИ устанавливался при комплексном исследовании периферической крови на наличие IgM к ЦМВ или четырехкратного и более нарастания титра антител IgG в парных сыворотках в динамике через 10 дней до 1:1600, индекса авидности более 65%, а также наличия ДНК ЦМВ. Исследования проводились с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных исследований с участием человека» с поправками 2008 г. и правилами клинической практики в Российской Федерации, утвержденными приказом Министерства РФ №266 от 19.06.2003 г. Верификация ЦМВ, определение типоспецифических антител, индекс авидности осуществлялись методами ИФА на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (США) с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск), методами ПЦР на аппарате ДТ-96 с использованием наборов НПО «ДНК-технология» (Москва).

6.2. Рецепторы к эстрогенам определялись в гомогенате хориона, полученного после медицинского аборта, выполненного вследствие обострения ХЦМВИ, то есть по медицинским показаниям.

6.3. Рецепторы к эстрогенам (ERα) определялись методом иммуноферментного анализа на спектрофотометре «Stat Fax 2100» (США) с использованием наборов, полученных в ЗАО «БиоХим МАК» (Москва).

6.4. Статистический анализ и обработка данных проводилась с использованием пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Характеристика вариационных рядов: средняя арифметическая (М), стандартная ошибка (m), коэффициент вариации 95%, доверительный интервал для средних значений M±m, где t определялось по таблице граничных значений критерия Стьюдента при доверительном уровне 95% и числе степеней свободы F=n₁+n₂-2. Для определения достоверности различий использовался непарный параметрический критерий Стьюдента. Принимались во внимание р<0,05; 0,01; 0,001. Для определения достоверности различий в случае негауссовых распределений, непараметрические критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни.

7. Полученные данные

Выполненные исследования показали, что обострение ХЦМВИ на 7-8 неделях гестации при наличии антител IgG к ЦМВ 1:1600 в гомогенате хориона снижает содержание рецепторов к эстрогенам (ERα) до 3,62±0,91 нмоль/л (контроль - 10,4±0,95 нмоль/л), что создает угрозу нормально протекающей имплантации зародыша на 7-8 неделях гестации.

Пример. Беременная К. Возраст 25 лет, забеременела впервые. На 7 неделе гестации появились признаки воспаления верхних дыхательных путей. Лабораторный анализ установил обострение ЦМВИ с титром 1:1600 IgG к ЦМВ. На 8 неделе у беременной произошел выкидыш.

Литература

1. Розен В.Б., Смирнов А.Н. Рецепторы и стероидные гормоны. М.: Изд. МГУ. 1981. 210 с.

2. Crum С.Р., Lee K.L. Diagnostic gynecologic and obstetric pathology // Elsevier Saunders. 2006.

3. Farhi J., Weissman A., Steinfeld Z. Estradiol supplementation during the luteal phase may improve the pregnancy rate in patients undergoing in vitro fertilization - embryptransfer cycles // Fertil. Steril. 2000. Vol. 73, №4. P. 761-766.

4. Gregory L. Ovarian markers of implantation potential in assisted reproduction // Hum. Reprod. 1998. Vol. 13. Suppl. 4. P. 117-132.

5. Lessey B.A. Two pathways of progesterone action in the human endometrium; implication for implication and contraception // Steroids. 2003. Vol. 68. P. 809-815.

Изобретение касается определения угрозы нарушения имплантации зародыша в слизистую оболочку матки при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации. Сущность способа: определяют титр антител IgG к ЦМВ на 7-8 неделях беременности и определяют содержание активных рецепторов к эстрогенам (ERα) в гомогенате хориона, и при определении титра антител IgG к цитомегаловирусу до 1:1600, снижении содержания ERα в гомогенате хориона до 3,62±0,51 нмоль/л определяют угрозу нарушения имплантации зародыша в слизистую оболочку матки, что может привести к его гибели в виде самопроизвольного выкидыша. 1 пр.

Способ определения угрозы нарушения имплантации зародыша в слизистую оболочку матки при обострении цитомегаловирусной инфекции на первом триместре гестации, характеризующийся тем, что определяют титр антител IgG к ЦМВ на 7-8 неделях беременности и определяют содержание активных рецепторов к эстрогенам (ERα) в гомогенате хориона, и при определении титра антител IgG к цитомегаловирусу до 1:1600, снижении содержания ERα в гомогенате хориона до 3,62±0,51 нмоль/л определяют угрозу нарушения имплантации зародыша в слизистую оболочку матки, что может привести к его гибели в виде самопроизвольного выкидыша.