СПОСОБ ПРОФИЛАКТИКИ ВАРИАБЕЛЬНОГО ИММУНОДЕФИЦИТА С ПРЕОБЛАДАЮЩИМИ ОТКЛОНЕНИЯМИ В КОЛИЧЕСТВЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ В-КЛЕТОК У ДЕТЕЙ СТАРШЕ 3 ЛЕТ, ПОТРЕБЛЯЮЩИХ ПИТЬЕВУЮ ВОДУ С ОСТАТОЧНЫМИ КОЛИЧЕСТВАМИ ПРОДУКТОВ ГИПЕРХЛОРИРОВАНИЯ Российский патент 2015 года по МПК A61K31/496 A61K31/66 A61P37/00 

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для предупреждения развития вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток (D83.0) в отношении детского населения, потребляющего питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования (хлороформ, тетрахлорметан, дихлорэтан, дихлорбромметан и дибромхлорметан) с суммарным превышением, по критерию суммы отношений обнаруженных концентраций к величине предельно допустимой концентрации (ПДК), выше 1,0 и наличием неприемлемого риска развития вариабельного иммунодефицита.

Актуальность предлагаемого способа определяется тем, что повышенный уровень продуктов гиперхлорирования в воде может явиться причиной патологии иммунной системы, причем может быть преимущественно клеточного звена иммунитета (с преимущественным нарушением иммунорегуляторных Т-клеток), или гуморального (с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток), или с поражением клеток моноцитарно-макрофагальной системы иммунитета. По данным Фонда обязательного медицинского страхования детей в возрасте 3-14 лет, проживающих на территориях с неудовлетворительным качеством питьевой воды, содержащей остаточные количества продуктов гиперхлорирования, обращаемость за медицинской помощью по поводу вариабельного иммунодефицита в 4 раза выше среднекраевого уровня.

Из уровня техники известен ряд патентов, касающихся коррекции гуморального звена иммунитета, т.е. с преобладанием отклонений в количестве и функциональной активности В-клеток.

Из журнала «Иммунология», 1988, № 50, с. 5-11, известно, что регуляцию иммунного ответа осуществляют целым рядом химиотерапевтических средств и веществами биоорганического происхождения, вызывающими как снижение, так и усиление иммунного ответа. К числу первых можно отнести цитостатики, например циклофосфан, которые способны ингибировать реакции в различных звеньях иммунного ответа путем воздействия на пролиферирующую фракцию клеток иммунной системы. Ко вторым можно отнести липополисахариды бактериального происхождения, способные стимулировать преимущественно В-клеточную систему иммунитета.

Известен способ профилактики острых респираторных инфекций у детей с частыми повторными заболеваниями респираторного тракта (Патент РФ №2336874), заключающийся в одновременном приеме арбидола по 1 таблетке (50 мг) 2 раза в неделю в течение 3-4 недель, и селен-актива по 1/2 таблетки (25 мкг по селену) 1 раз в день в течение 3-4 недель. При этом применение селен-актива способствует нормализации гуморального и фагоцитарного звеньев иммунитета, процессов перекисного окисления липидов, антиоксидантной защиты. Недостатком указанного способа является слабый иммуномодулирующий эффект и отсутствие патогенетического (гепатопротекторного) компонента, купирующего негативное воздействие хлорорганических соединений на показатели иммунной системы.

Также известен способ иммунокоррекции клеточного и гуморального звена иммунитета у детей при папилломавирусной инфекции кожи (Заявка на патент РФ №2011125957), при котором детям в возрасте от 3 до 7 лет и детям от 8 до 11 лет в составе комплексной терапии дополнительно вводят иммуномодулятор «Генферон Лайт» в возрастной дозировке 125000 ME и 250000 ME соответственно по 1 суппозиторию 2 раза в день с 12-часовым интервалом в течение 10 дней после деструкции.

Его недостатком является не комфортный для детей путь введения препарата, возможны местные аллергические реакции (ощущение зуда и жжения в прямой кишке).

Также из уровня техники известен Способ профилактики и коррекции нарушений в системе иммунитета при воздействии феноксигербицидов (Заявка на патент РФ №98102592) путем перорального приема комплекса витаминов А и Е, обладающих свойством коррекции функций и повышения жизнеспособности фагоцитирующих клеток. Так же, как и в предлагаемом способе, речь идет о коррекции иммунодефицита при воздействии на организм человека химического хлортоксиканта - феноксигербицида. Однако указанные в известном решении препараты не обеспечат профилактику вариабельного иммунодефицита с преобладанием отклонений в количестве и функциональной активности В-клеток у детей, потребляющих питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования.

При этом из уровня техники не были выявлены известные способы профилактики вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток у детей, возникшими из-за потребления питьевой воды с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому объекту не представляется возможным.

Технический результат, достигаемый предлагаемым изобретением, заключается в обеспечении эффективности предупреждения развития у детей старше 3 лет вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток (D83.0), связанного с остаточными количествами токсикантов - продуктов гиперхлорирования, поступающих в организм из питьевой воды, и в повышении при этом резистентности организма к указанным токсикантам.

Поставленный технический результат достигается предлагаемым способом профилактики вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток у детей старше 3 лет, потребляющих питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования, согласно которому осуществляют сочетанное применение курсом 2 раза в год лекарственных средств: Полиоксидоний инъекционным путем внутримышечно в дозе по 0,1 мг/кг массы ребенка инъекций с интервалом 1-2 дня курсом 10 дней; Эслидин перорально в возрасте от 3 до 7 лет - по 1 капсуле 2 раза в сутки, старше 7 лет - по 1 капсуле 3 раза в сутки, в течение 21 дня.

Указанный технический результат достигается за счет следующего.

Для понимания существа вопроса следует пояснить: по результатам идентификации опасности установлено, что повышенный уровень продуктов гиперхлорирования в воде может явиться причиной патологии иммунной системы. На территориях с неудовлетворительным качеством питьевой воды, содержащей остаточные количества продуктов гиперхлорирования (при оценке по критерию суммы отношений обнаруженных концентраций к величине ПДК от 1,46 до 2,53), риск развития заболеваний, в том числе с вовлечением иммунных механизмов, превышает приемлемый уровень, т.е. величину, равную 1 (коэффициент опасности HQ=1,8). Среди показателей качества воды ведущее место по величине коэффициента опасности (HQ) занимает хлороформ (HQ для него до 1,28).

В процессе исследований были установлены причинно-следственные связи между уровнем загрязнения воды системы хозяйственно-питьевого водоснабжения хлорорганическими соединениями (хлороформ, тетрахлорметан, дихлорэтан, дихлорбромметан и дибромхлорметан) и показателями заболеваемости детей болезнями иммунной системы (доказательством этому служат данные: показатель отношения шансов OR=3,78; его 95% доверительный интервал DI=1,12-4,27).

Повышенная частота регистрации вариабельного иммунодефицита у детей в условиях несоответствия питьевой воды гигиеническим нормативам обусловлена особенностями воздействия остаточных количеств продуктов гиперхлорирования на функционирование иммунной системы. При комбинированном воздействии хлорорганических соединений в концентрациях, превышающих гигиенические нормативы до 1,5 раз, наблюдается иммуносупрессия по Т- или В-клеточному типу, а при повышении концентраций указанных химических соединений более 1,5 раз - угнетение как клеточного, так и гуморального звеньев иммунной системы.

Помимо прямого иммунотоксического действия хлорорганических соединений реализуются и опосредованные эффекты иммуносупрессии, связанные с формированием гепатоцеллюлярных нарушений (снижение активности глутатионпероксидазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, повышение активности глутатион-8-трансферазы, нарушение синтеза белков и незаменимых аминокислот, необходимых для синтеза иммуноглобулинов - IgG и IgA, интерферона (π; β; γ), антител, витаминов).

Иммуносупрессивное действии хлорорганических соединений усугубляется нарушением работы антиоксидантных систем (снижение антиоксидантной активности сыворотки крови, повышение уровня малонового диальдегида плазмы, гидроперекисей липидов).

У детей с вариабельным иммунодефицитом с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток (D83.0), ассоциированным с употреблением питьевой воды с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования доказаны достоверные причинно-следственные связи нарушений иммунного ответа (снижение уровня В-лимфоцитов, дефицит IgG и IgA), дисбаланса окислительных и антиоксидантных процессов (повышение/снижение антиоксидантной активности сыворотки крови, повышение уровня малонового диальдегида плазмы, гидроперекиси липидов) и нарушения ферментативной активности клеток (снижение активности глутатионпероксидазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, повышение активности глутатион-S-трансферазы), развития синдрома цитолиза (увеличение уровня аспартатаминотрансферазы - АСАТ, и аланин-аминотрансферазы - АЛАТ), наличия ультразвуковых признаков реактивных изменений печени с повышением содержания в крови хлороформа, тетрахлорметана, дихлорэтана, дихлорбромметана и дибромхлорметана (доля дисперсии зависимой переменной составила: R²=0,24-0,51; p≤0,01-0,0001).

Благодаря сочетанному применению лекарственных средств, рекомендуемых предлагаемым способом, обеспечивается высокая эффективность профилактики вариабельного иммунодефицита с поражением преимущественно гуморального звена иммунитета с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток у детей старше 3 лет, потребляющих питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования.

«ЭСЛИДИН» - комбинированный препарат, основой фармакологического действия которого являются эссенциальные фосфолипиды и метионин. Обладая взаимно потенцирующим действием, эссенциальные фосфолипиды и метионин восстанавливают целостность мембран поврежденных клеток печени, активируя их фосфолипидзависимые ферменты и нормализуя тем самым проницаемость мембран. Эссенциальные фосфолипиды и метионин улучшают функциональное состояние гепатоцитов и усиливают дезинтоксикационный и экскреторный потенциал клеток печени. Эслидин® - действующие вещества - липоид ППЛ-400 300 мг, метионин 100 мг - капе; бл. 10 кор. 3 шт.; ЛСР - 001048/08 от 26.02.2008; производитель: ЗАО «МАКИ3-ФАРМА» (Россия);

ПОЛИОКСИДОНИЙ® (Polyoxidonium®). Фармакологическая группа: Иммуномодуляторы. ATX: L03 Иммуностимуляторы. Действующее вещество - Азоксимера бромид. Обладает иммуномодулирующим, детоксицирующим, антиоксидантным и мембраностабилизирующим свойствами. Основой механизма иммуномодулирующего действия полиоксидония является прямое воздействие на фагоцитирующие клетки и естественные киллеры, стимуляция исходно пониженной продукции цитокинов и усиление антителообразования В-лимфоцитами. Полиоксидоний существенно усиливает функциональную активность как факторов врожденного, так и приобретенного иммунитета. При его воздействии регистрируется усиление продукции провоспалительных цитокинов - ИЛ-1, ИЛ-6, ФНО и интерферона. Это способствует увеличению функциональной активности как клеточного, так и гуморального иммунитета. Препарат активирует лимфоидные клетки, находящиеся в бронхах, носовой полости и пазухах, евстахиевых трубах, повышает устойчивость этих органов к инфекционным агентам, восстанавливает иммунные реакции, нарушенные респираторными инфекциями у детей с РОБ. Наряду с иммуномодулирующим действием, полиоксидоний обладает выраженной антиоксидантной активностью в связи с активным подавлением процессов перекисного окисление липидов. Обладая отчетливым дезинтоксикационным действием, полиоксидоний способствует выведению из организма токсинов и солей тяжелых металлов. Код ATX: L03AX.

Опытным путем было установлено, что только использование комплексной схемы применения вышеуказанных лекарственных препаратов обеспечивает синергизм в достижении поставленного технического результата. Использованием их по отдельности не достигается увеличение сроков ремиссии, не обеспечивается максимально возможное воздействие на гуморальное звено иммунитета с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток.

При реализации предлагаемого способа осуществляют следующие операции в нижеуказанной последовательности:

1) производят выбор территории, имеющей повышенное содержание в воде остаточных количеств продуктов гиперхлорирования и формирующих неприемлемый риск развития вариабельного иммунодефицита (неудовлетворительное качество питьевой воды по содержанию остаточных количеств продуктов гиперхлорирования: хлороформ, тетрахлорметан, дихлорэтан, дихлорбромметан и дибромхлорметан, с суммарным превышением по критерию суммы отношений обнаруженных концентраций к величине ПДК выше 1,0, на территории проживания детей (ребенка) или размещения учреждений дошкольного/школьного образования);

2) производят отбор детей с этой территории для проведения у них профилактических мероприятий (профилактические программы реализуются у детей в период субкомпенсации/компенсации основного патологического процесса). Модель пациента: дети в возрасте старше 3 лет, с наличием вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток (D83.0 - Международная классификация болезней (МКБ-10), сайт в интернете: http://www.rlsnet.ru/mkb_index_id_1990.htm), с содержанием в крови и моче продуктов гиперхлорирования (хлороформ, тетрахлорметан, дихлорэтан, дихлорбромметан и дибромхлорметан и др.) выше референсного уровня более чем в 1,5 раза. О том, что у отобранных детей имеется вариабельный иммунодефицит с поражением преимущественно гуморального звена иммунитета, используют медико-биологические критерии, приведенные в таблице 1.

3) осуществляют клинико-лабораторное обследование указанных детей с определением: нормативных соотношений В-лимфоцитов в крови (в абсолютных числах и процентном отношении), функциональной активности В-лимфоцитов, суммарной концентрации иммуноглобулинов и количества иммуноглобулинов разных классов (IgA, IgG), баланса окислительных и антиоксидантных процессов на клеточном уровне (антиоксидантной активности крови, уровня малонового диальдегида плазмы); ферментативной активности клеток (активности глутатионпероксидазы и/или глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, активности глутатион-S-трансферазы), биохимии крови (АСАТ аспартатаминотрансфераза, и АЛАТ - аланинаминотрансфераза).

Объем исследований включает показатели, выполненные унифицированными общеклиническими, биохимическими и иммуноферментными методами, позволяющими оценить состояние и функции органов и систем с использованием диагностического оборудования:

- спектрофотометр ПЭ-5300в (Россия, г. С-Петербург) (ОАО Экохим) (антиоксидантная активность крови, малоновый диальдегид);

- автоматический биохимический анализатор "Konelab 20" (Финляндия) (ThermoFisher), регистрационный номер ФС N 2006/2924 (аспарагиновая и аланиновая аминотрансферазы);

- анализатор иммуноферментный микропланшетный автоматический «Infinite F50», (Тесап, Австрия) №1008007750 (гидроперекиси липидов, глутатионпероксидаза, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, глутатион-S-трансфераза);

- аппаратно-программный комплекс на базе газового хроматографа «Хроматэк-Кристалл-5000.2», (США), с галогенселективным детектором (детектор электронного захвата), для идентификации хлорорганических соединений в крови и моче. Регистрационный номер в Государственном реестре №ФСР 2009/04091, ТУ 9443-004-12908609-99;

- изучение маркеров клеточной дифференцировки методом проточной цитофлуориметрии с определением популяций и субпопуляций лимфоцитов на проточном цитометре "FACSCalibur" фирмы «Becton Dickinson» с использованием универсальной программы "CellQuestPrO".

- ультразвуковое сканирование печени сканером Toshiba «АРЫО XG» и Toshiba «Viamo SSA-640A» с использованием линейных датчиков частотой от 7,5 до 13 МГц (ФС №2006/2522, РОСС JP. ИМ 02. В 14629. ГОСТ Р 50460 - 92) по стандартной методике.

В качестве критериев оценки отклонений лабораторных показателей используются возрастные физиологические уровни, а для содержания хлороформа, тетрахлорметана, дихлорэтана, дихлорбромметана и дибромхлорметана в крови и моче - референтные уровни.

Далее осуществляют математическую обработку доказательной базы оценки эффективности рекомендуемого способа с помощью непараметрических методов статистики с построением и анализом двумерных таблиц сопряженности, метода однофакторного дисперсионного анализа, методов линейного и нелинейного регрессионного анализа. Для оценки достоверности полученных результатов используют критерий Фишера (оценка адекватности моделей), критерий Стьюдента (сравнение групп по количественным признакам), критерий xI-квадрат (сравнение структуры признаков). Сравнительную оценку вероятностной взаимосвязи между признаками в группах оценивают по показателю отношения шансов (odd ratio - OR) с анализом доверительного интервала (ДI). Различия полученных результатов считают статистически значимыми при p<0,05.

4) проводят профилактику отобранным в результате вышеприведенного обследования детям старше 3 лет с целью достижения допустимого уровня риска развития общего вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток, связанного с экспозицией остаточных количеств продуктов гиперхлорирования питьевой воды, путем комплексного назначения двух лекарственных средств по схеме, приведенной в таблице 2.

Пример конкретного осуществления

1. Выбор территории проживания. Наиболее значимыми компонентами остаточных количеств продуктов гиперхлорирования, присутствующих в питьевой воде в концентрациях выше одного ПДК: хлороформ - в 2,5 раза; тетрахлорметан - в 1,8 раза; дихлорэтан - в 1,3 раза; дихлорбромметан - в 1,2 раза; дибромхлорметан - в 1,5 раза.

2. Обследовано 243 человека в возрасте от 3 до 14 лет, у 26 из которых (из них девочки - 14 чел., мальчики - 12 чел.) диагностирован вариабельный иммунодефицит, с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток (D83.0).

Клинические и анамнестические критерии при отборе детей приведены в таблице 1.

У детей с вариабельным иммунодефицитом с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток (D83.0), ассоциированным с употреблением питьевой воды с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования, доказаны достоверные причинно-следственные связи нарушений иммунного ответа (снижение уровня В-лимфоцитов, дефицит IgG и IgA), дисбаланса окислительных и антиоксидантных процессов (повышение/снижение антиоксидантной активности сыворотки крови, повышение уровня малонового диальдегида плазмы, гидроперекиси липидов) и нарушения ферментативной активности клеток (снижение активности глутатионпероксидазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, повышение активности глутатион-S-трансферазы), развития синдрома цитолиза (увеличение уровня аспартатаминотрансферазы - АСАТ, и аланинаминотрансферазы - АЛАТ), наличия ультразвуковых признаков реактивных изменений печени с повышением содержания в крови хлороформа, тетрахлорметана, дихлорэтана, дихлорбромметана и дибромхлорметана (доля дисперсии зависимой переменной составила: R²=0,24-0,51; p≤0,01-0,0001).

Указанные данные показывают, что отобранные в соответствии с критериями по таблице 1 дети (вышеуказанные 26 человек) с нарушением В-клеточного звена иммунитета, характеризуются развитием вариабельного иммунодефицита, ассоциированными именно с воздействием остаточных продуктов гиперхлорирования. Поэтому в дальнейшем они и проходили курс профилактики, согласно предлагаемому способу, схема реализации которого приведена в таблице 2.

Данные по эффективности профилактики предлагаемым способом детей с вариабельным иммунодефицитом с поражением преимущественно гуморального звена иммунитета, ассоциированным с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования в питьевой воде, приведены ниже (по данным катамнеза через 12 месяцев) и сопровождаются:

- иммуномодулирующим эффектом (восстановление у 25-53% детей сниженного уровня В-лимфоцитов, активацией функциональной активности гуморального звена у 32-47%),

- нормализацией баланса окислительных и антиоксидантных процессов (антиоксидантной активности сыворотки крови, малонового диальдегида плазмы, гидроперекиси липидов) у 24-51%,

- и восстановлением ферментативной активности клеток (повышение активности глутатионпероксидазы и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, нормализация глутатион-Б-трансферазы) у 31-45% детей,

- снижением активности синдрома цитолиза (нормализация уровня АСАТ и АЛАТ) у 33-41%,

- уменьшением на 25-37% числа детей с наличием ультразвуковых признаков умеренного (реактивного) диффузного поражения печени;

- снижение количества случаев ОРВИ за год у 45-65%) детей.

Для доказательства синергизма воздействия в заявляемом способе именно двух предлагаемых лекарственных средств, ниже приводим таблицу 3, отражающую клиническую эффективность в катамнезе (через год) при различных схемах приема лекарств.

Как показали исследования и данные, приведенные в таблице 3, эффект предлагаемого способа не является следствием простого действия используемых препаратов, а имеет место выраженный положительный синергизм лекарственных средств по профилактике вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток у детей старше 3 лет, потребляющих питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования (сумма эффектов отдельных препаратов в тех же дозах дает эффект существенно менее выраженный, чем при их сочетанном применении).

Кроме того, повысилась резистентность организма к накоплению остаточных продуктов гиперхлорирования: произошло снижение содержания хлороформа, тетрахлорметана, дихлорэтана, дихлорбромметана и дибромхлорметана через 12 мес. на 47-66%, несмотря на то, что дети, прошедшие лечение, продолжали проживать на той же территории.

Таким образом, предложенный способ сочетанного применения полиоксидония и эслидина у детей с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток и контаминацией биосред промышленными токсикантами гиперхлорирования - хлороформом, тетрахлорметаном, дихлорэтаном, дихлорбромметаном и дибромхлорметаном, поступающих в организм ребенка с питьевой водой, способствует улучшению общей иммунорезистентности, повышает уровень и восстанавливает функциональную активность В-лимфоцитов, снижает активность синдрома цитолиза, нормализует баланс окислительных и антиоксидантных процессов.

Изобретение относится к медицине и предназначено для предупреждения развития вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток. Осуществляют сочетанное применение курсом 2 раза в год лекарственных средств: полиоксидоний инъекционным путем внутримышечно в дозе по 0,1 мг/кг массы ребенка инъекций с интервалом 1-2 дня курсом 10 дней; эслидин перорально в возрасте от 3 до 7 лет - по 1 капсуле 2 раза в сутки, старше 7 лет - по 1 капсуле 3 раза в сутки, в течение 21 дня. Способ позволяет предупредить развитие вариабельного иммунодефицита в отношении детского населения, потребляющего питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования (хлороформ, тетрахлорметан, дихлорэтан, дихлорбромметан и дибромхлорметан), и повысить при этом резистентность организма к указанным токсикантам. 3 табл., 1 пр.

Способ профилактики вариабельного иммунодефицита с преобладающими отклонениями в количестве и функциональной активности В-клеток у детей старше 3 лет, потребляющих питьевую воду с остаточными количествами продуктов гиперхлорирования, характеризующийся тем, что осуществляют сочетанное применение курсом 2 раза в год лекарственных средств: полиоксидоний инъекционным путем внутримышечно в дозе по 0,1 мг/кг массы ребенка инъекций с интервалом 1-2 дня курсом 10 дней; эслидин перорально в возрасте от 3 до 7 лет - по 1 капсуле 2 раза в сутки, старше 7 лет - по 1 капсуле 3 раза в сутки, в течение 21 дня.