НОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ И/ИЛИ ЛЕЧЕНИЯ ДЕГЕНЕРАТИВНЫХ РАССТРОЙСТВ ЦЕНТРАЛЬНОЙ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ Российский патент 2016 года по МПК C07D211/18 C07D211/96 A61K31/445 A61P25/00 A61P25/16 

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА СМЕЖНУЮ ЗАЯВКУ

[0001] Данная заявка заявляет приоритет по предварительной заявке США №.61/252803, поданной 19 октября 2009 г., содержание которой включено в данный документ ссылкой.

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0002] Настоящее изобретение относится к новым соединениям, известным как фармакологические шапероны, а также композициям и способам с их использованием для предупреждения и/или лечения дегенеративных расстройств центральной нервной системы. В частности, настоящее изобретение обеспечивает способы для предупреждения и/или лечения болезни Паркинсона.

ПРЕДПОСЫЛКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0003] Множество дегенеративных расстройств центральной нервной системы ассоциированы с паталогической агрегацией белков или липидов. Например, синуклеопатии являются группой заболеваний, которые возникают из-за нарушения гомеостаза белка синуклеина. В частности, агрегация альфа-синуклеина связана с патологическими состояниями, характеризующимися тельцами Леви, такими как болезнь Паркинсона, деменция с тельцами Леви, и мультисистемная атрофия. Аналогично, фрагмент альфа-синуклеина, non-Abeta компонент, найден в амилоидных бляшках заболевания Альцгеймера. Недавно показано, что усиление активности глюкоцереброзидазы (бета-глюкозидазы; GBA) в мозге предотвращает накопление синуклеина в мозге (Sean dark, Ying Sun, You-Hai Xu, Gregory Grabowski и Brandon Wustman, "A biochemical link between Gaucher and Parkinson's disease and a potential new approach to treating synucleinopathies: a pfarmacologial chaperone for beta-glucocerebrosidase prevents accumulation of alpha-synuclein in a Parkinson's mouse model," представленная Society for Neuroscience Annual Meeting, San Diego, CA, 2007). Таким образом, средства, которые увеличивают активность GBA, могут обеспечивать облегчение для пациентов с риском развития или выявлеными дегенеративными расстройствами центральной нервной системы.

[0004] Существует потребность в новых терапевтических соединениях, которые можно использовать для предупреждения и/или лечения дегенеративных расстройств центральной нервной системы, которые обеспечат пациентам более высокое качество жизни и достигнут лучшего клинического результата. В частности, существует потребность в новых терапевтических соединениях для предупреждения и/или лечения синуклеопатии, такой как болезнь Паркинсона и болезнь Альцгеймера, которые обеспечат пациентам более высокое качество жизни и достигнут лучшего клинического результата.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0005] Настоящее изобретение относится к новым соединениям, а также композициям и способам с их использованием для предупреждения и/или лечения дегенеративного расстройства центральной нервной системы у пациента с риском развития или диагнозом этого заболевания, которые включают введение пациенту, при необходимости, эффективного количества соединения, описанного в настоящем документе.

[0006] В одном аспекте, это обеспечивает соединение, а также композиции и способы их использования для предупреждения и/или лечения дегенеративного расстройства центральной нервной системы у пациента с риском развития или диагнозом этого заболевания, которые включают введение нуждающемуся в лечении пациенту эффективного количества соединения, определенного формулой I:

,

где

R¹ представляет собой C(R²)(R³)(R⁴);

R² представляет собой водород, -ОН или галоген;

R³ представляет собой водород, -ОН, галоген или C_1-8 алкил;

R⁴ представляет собой галоген, C_1-8 алкил, замещенный С_1-8 алкил, арил, замещенный арил, алкилциклоалкил или замещенный алкилциклоалкил;

R³ и R⁴ могут быть соединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием циклоалкильного кольца, которое может быть необязательно замещенным, предпочтительно галогеном, и более предпочтительно одним или несколькими атомами фтора;

R⁶ представляет собой водород, C_1-8 алкил, замещенный C_1-8 алкил, арилалкил, замещенный арилалкил, алкиларил, или замещенный алкиларил;

Z является необязательным, если Z присутствует, то представляет собой -(CH₂)_1-8-, -С(=O)-, -S(=O)₂NH-, -S(=O)₂-,

-C(=S)NH-, -S(=O)₂-СН₃, C(=O)-NH-, -S(=O)₂-NR⁹R¹⁰, -C(=O)C_1-8 алкил или -С=(O)СН(NH₂)СН₃;

R⁹ представляет собой водород, C_1-8 алкил или замещенный C_1-8 алкил;

R¹⁰ представляет собой водород, C_1-8 алкил или замещенный C_1-8 алкил;

R⁵ представляет собой водород, C_1-8 алкил, замещенный С_1-8 алкил, арил, замещенный арил, C_1-8 алкенил, замещенный С_1-8 алкенил, арилалкил, замещенный арилалкил, алкиларил, замещенный алкиларил, аминоарилалкил или замещенный аминоарилалкил;

R⁷ представляет собой -ОН или галоген; и

R⁸ представляет собой водород, галоген или C_1-8 алкил,

при условии, что R² и R³ оба не могут быть атомами водорода, если R⁴ представляет собой галоген, Z не присутствует, R⁷ представляет собой -ОН, R⁵, R⁶ и R⁸ представляют собой атомы водорода.

[0007] В другом аспекте, это обеспечивает соединение, а также композиции и способы с их использованием для предупреждения и/или лечения а дегенеративного расстройства центральной нервной системы у пациента с риском развития или диагнозом этого заболевания, которые включают введение нуждающемуся в лечении пациенту эффективного количества соединения, определенного формулой II:

,

где

R¹ представляет собой C(R²)(R³)(R⁴);

R² представляет собой водород, -ОН или галоген;

R³ представляет собой водород, -ОН, галоген или -СН₃;

R⁴ представляет собой галоген, -СН₃, фенил, фторфенил, метилфенил, циклогексилметил, где, если R⁴ представляет собой галоген, R² и R³ оба не могут быть атомами водорода;

R³ и R⁴ могут быть соединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием циклоалкильного кольца, которое может быть необязательно замещено одним или несколькими атомами галогена;

R⁶ представляет собой водород, фенилалкил или замещенный фенилалкил;

Z является необязательным, если Z присутствует, то представляет собой -(СН₂)-, -С(=O)-, -S(=O)₂NH-, -S(=O)₂-, -S(=O)₂-СН₃,

C(=O)-NH-, -S(=O)₂NR⁹R¹⁰, -C(=S)-NH- или -С(=O)₂-СН₃,

R⁹ представляет собой водород или СН₃;

R¹⁰ представляет собой водород или СН₃;

R⁵ представляет собой водород или аминофенилалкил;

R⁷ представляет собой -ОН или галоген; и

R⁸ представляет собой водород, галоген или -СН₃,

при условии, что R² и R³ оба не могут быть атомами водорода, если R⁴ представляет собой галоген, Z не присутствует, R⁷ представляет собой -ОН, R⁵, R⁶ и R⁸ представляют собой атомы водорода.

[0008] В другом аспекте, это обеспечивает соединение, а также композиции и способы с их использованием для предупреждения и/или лечения дегенеративного расстройства центральной нервной системы у пациента с риском развития или диагнозом этого заболевания, которые включают введение нуждающемуся в лечении пациенту эффективного количества соединения, определенного формулой III:

,

где:

R¹ представляет собой C(R²)(R³)(R⁴);

R² представляет собой водород, -ОН или галоген;

R³ представляет собой водород, -ОН, галоген или -СН₃;

R⁴ представляет собой галоген, -СН₃, фенил, фторфенил, метилфенил, циклогексилметил, где если R⁴ представляет собой галоген, оба R² и R³ не могут быть атомами водорода;

R³ и R⁴ могут быть соединены с атомом углерода, к которому они присоединены, с образованием циклоалкильного кольца, которое может быть необязательно замещено одним или несколькими атомами галогена;

R⁷ представляет собой -ОН или галоген; и

R⁸ представляет собой водород, галоген или -СН₃,

при условии, что R² и R³ оба не могут быть атомами водорода, если R⁴ представляет собой галоген, R⁷ представляет собой -ОН и R⁶ и R⁸ представляют собой атомы водорода.

[0009] Средний специалист в данной области техники понимает, что R², R³ и R⁴ в вышеупомянутых формулах I, II, и III не будут выбраны так, чтобы привести к нестабильной молекуле.

[0010] В еще одном аспекте, здесь обеспечивается соединение, а также композиции и способы с их использованием для предупреждения и/или лечения дегенеративного расстройства центральной нервной системы у пациента с риском развития или диагнозом этого заболевания, которые включают введение нуждающемуся в лечении пациенту эффективного количества соединения, выбранного из следующего:

или его фармацевтически приемлемая соль, сольват или пролекарство.

[0011] В одном варианте осуществления соединение представляет собой (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или пролекарство. В одном варианте осуществления соединение представляет собой (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или пролекарство. В одном варианте осуществления соединение представляет собой (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или пролекарство. В одном варианте осуществления соединение представляет собой (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол или его фармацевтически приемлемую соль, сольват или пролекарство.

[0012] В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство - синуклеопатия. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство характеризуется тельцами Леви. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство - болезнь Паркинсона, деменция с тельцами Леви, мультисистемная атрофия или болезнь Альцгеймера. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство связано с агрегацией по меньшей мере одного белка. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство связано с агрегацией альфа-синуклеина. В одном варианте осуществления, дегенеративное расстройство связано с агрегацией non-Abeta компонента. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство связано с накоплением по меньшей мере одного гликолипида. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство связано с накоплением по меньшей мере одного гликосфинголипида. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство связано с накоплением глюкоцереброзида. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство связано с мутацией в глюкоцереброзидазе. В одном варианте осуществления способ дополнительно содержит введение эффективного количества по меньшей мере одного другого терапевтического средства. В одном варианте осуществления по меньшей мере одно другое терапевтическое средство является леводопой, антихолинергическим средством, ингибитором катехол-O-метил трансферазы, агонистом рецептора дофамина, ингибитором моноаминоксидазы, ингибитором периферической декарбоксилазы или противовоспалительным средством.

[0013] Настоящее изобретение также обеспечивает способы для предупреждение и/или лечение болезни Паркинсона у пациента с риском развития или диагнозом этого заболевания, которые включают введение нуждающемуся в лечении пациенту эффективного количества любого из вышеупомянутых соединений или их фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства или любой комбинации двух или нескольких из этих соединений.

[0014] В одном варианте осуществления способ включает введение соединения (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства. В одном варианте осуществления способ включает введение соединения (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства. В одном варианте способ осуществления включает введение соединения (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства. В одном варианте осуществления способ включает введение соединения (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола или его фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства.

[0015] В одном варианте осуществления, способ содержит введение эффективного количества по меньшей мере одного другого терапевтического средства. В одном вариант осуществления, по меньшей мере одно другое терапевтическое средство - леводопа, антихолинергическое средство, ингибитор катехол-O-метил-трансферазы, агонист рецептора дофамина, ингибитор моноаминоксидазы, ингибитор периферической декарбоксилазы или противовоспалительное средство.

[0016] Настоящее изобретение также обеспечивает наборы, содержащие:

- контейнер, содержащий эффективное количество любого из соединений настоящего изобретения, отдельно или в комбинации; и

- инструкции по его применению для предупреждения и/или лечения дегенеративного расстройства центральной нервной системы.

В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство центральной нервной системы - болезнь Паркинсона. В одном варианте осуществления дегенеративное расстройство центральной нервной системы - болезнь Альцгеймера.

ДЕТАЛЬНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0017] Как используется в настоящем документе, следующие термины имеют определения изложенные ниже.

[0018] Используемая в настоящем документе фраза "дегенеративное расстройство центральной нервной системы" означает любое расстройство, связанное с преждевременной дегенерацией любого компонента центральной нервной системы, такого как нейроны, миелиновая оболочка или аксоны. Такие расстройства включают, но не ограничиваясь, мультиинфарктную деменцию, болезнь Хантингтона, болезнь Пика, амиотрофический латеральный склероз, болезнь Крейцфельдта - Якоба, дегенерацию лобной доли, корта кобазальную дегенерацию, прогрессивный надъядерный паралич, болезнь Паркинсона, деменцию с тельцами Леви, мультисистемную атрофию или болезнь Альцгеймера.

[0019] Используемое в настоящем документе выражение "лечение" означает улучшение одного или нескольких симптомов, связанных с упомянутым расстройством.

[0020] Используемое в настоящем документе выражение "предупреждение" означает ослабление симптома упомянутого расстройства.

[0021] Используемая в настоящем документе фраза "эффективное количество" означает количество, эффективное для предупреждения и/или лечения пациента с риском развития или с диагнозом упомянутого расстройства, и, таким образом, дающее желаемый терапевтический эффект.

[0022] Используемое в настоящем документе выражение "пациент" означает млекопитающее (например, человека).

[0023] Ниже перечислены химические определения различных выражений, используемых для описания настоящего изобретения. Эти определения применяется к выражениям, как они используются на всем протяжении настоящего описания, кроме ограничений в отдельных случаях, или по-отдельности или как часть большей группы.

[0024] Выражение "алкил" относится к незамещенным углеводородным группам с прямой или разветвленной цепью из 1-20 атомов углерода, предпочтительно 1-8 атомов углерода, более предпочтительно 1-6 атомов углерода. Выражение "низший алкил" относится к незамещенным алкильным группам из 1-4 атомов углерода.

[0025] Выражение "замещенный алкил" относится к алкильной группе, замещенной, например, одним-четырьмя заместителями, такими как, галоген, гидрокси, алкокси, оксо, алканоил, арилокси, алканоилокси, амино, алкиламино, ариламино, аралкиламино, двузамещенные амины, у которых 2 аминозаместителя выбираются из алкила, арила или аралкила; алканоиламино, ароиламино, аралканоиламино, замещенный алканоиламино, замещенный ариламино, замещенный аралканоиламино, тиол, алкилтио, арилтио, аралкилтио, алкилтионо, арилтионо, аралкилтионо, алкилсульфонил, арилсульфонил, аралкилсульфонил, сульфонамидо, например SO₂NH₂, замещенный сульфонамидо, нитро, циано, карбокси, карбамил, например CONH₂, замещенный карбамил, например CONHалкил, CONHарил, CONHаралкил или, в некоторых случаях, двумя заместителями на азоте, выбранными из алкила, арила или аралкила; алкоксикарбонил, арил, замещенный арил, гуанидино и гетероциклы, такие как, индолил, имидазолил, фурил, тиенил, тиазолил, пирролидил, пиридил, пиримидил и т.п. В случаях, отмеченных выше, где заместитель является дополнительно замещенным, это будет замещение алкилом, алкокси, арилом или аралкилом.

[0026] Выражение "галоген" или "галогено" относится к фтору, хлору, брому и йоду.

[0027] Выражение "арил" относится к моноциклическим или бициклическим ароматическим углеводородным группам, имеющим 6-12 атомов углерода в участке кольца, таком как фенильная, нафтильная, бифенильная и дифенильная группы, каждая из которых может быть замещенной.

[0028] Выражение "аралкил" относится к арильной группе, связанной непосредственно через алкильную группу, такую как бензил. Аналогично, выражение "алкиларил" относится к алкильной группе, связанной непосредственно с арильной группой, такой как метилбензил.

[0029] Выражение "замещенный арил" относится к арильной группе, замещенной, например, одним-четырьмя заместителями, такими как алкил, замещенный алкил, галоген, трифторметокси, трифторметил, гидрокси, алкокси, алканоил, алканоилокси, амино, алкиламино, аралкиламино, диалкиламино, алканоиламино, тиол, алкилтио, уреидо, нитро, циано, карбокси, карбоксиалкил, карбамил, алкоксикарбонил, алкилтионо, арилтионо, арилсульфониламин, сульфоновая кислота, алкисульфонил, сульфонамидо, арилокси и т.п. Заместитель может быть дополнительно замещен гидрокси, алкилом, алкокси, арилом, замещенным арилом, замещенным алкилом или аралкилом.

[0030] Выражение "гетероарил" относится к необязательно замещенной ароматической группе, например, которая является 4-7-членной моноциклической, 7-11-членной бициклической или 10-15-членной трициклической кольцевой системой, имеющей по меньшей мере один гетероатом и по меньшей мере одно содержащее углеродные атомы кольцо, например, пиридин, тетразол, индазол.

[0031] Выражение "алкенил" относится к углеводородным группам с прямой или разветвленной цепью из 2-20 атомов углерода, предпочтительно 2-15 атомов углерода и наиболее предпочтительно 2-8 атомов углерода, имеющим одну-четыре двойные связи.

[0032] Выражение "замещенный алкенил" относится к алкенильной группе, замещенной, например, одним-двумя заместителями, такими как, галоген, гидрокси, алкокси, алканоил, алканоилокси, амино, алкиламино, диалкиламино, алканоиламино, тиол, алкилтио, алкилтионо, алкилсульфонил, сульфонамидо, нитро, циано, карбокси, карбамил, замещенный карбамил, гуанидино, индолил, имидазолил, фурил, тиенил, тиазолил, пирролидил, пиридил, пиримидил и т.п.

[0033] Выражение "алкинил" относится к углеводородным группам с прямой или разветвленной цепью из 2-20 атомов углерода, предпочтительно 2-15 атомов углерода и наиболее предпочтительно 2-8 атомов углерода, имеющим одну-четыре тройные связи.

[0034] Выражение "замещенный алкинил" относится к алкинильной группе, замещенной, например, заместителем, таким как, галоген, гидрокси, алкокси, алканоил, алканоилокси, амино, алкиламино, диалкиламино, алканоиламино, тиол, алкилтио, алкилтионо, алкилсульфонил, сульфонамидо, нитро, циано, карбокси, карбамил, замещенный карбамил, гуанидин и гетероцикло, например имидазолил, фурил, тиенил, тиазолил, пирролидил, пиридил, пиримидил и т.п.

[0035] Выражение "циклоалкил" относится к необязательно замещенным насыщенным циклическим углеводородным кольцевым системам, предпочтительно содержащим 1-3 кольца и 3-7 углеродов на кольцо, которые могут быть дополнительно слиты с ненасыщенным С3-С7 карбоциклическим кольцом. Примерные группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклоктил, циклодецил, циклододецил и адамантил. Примерные замесители включают одну или более алкильных групп, как описано выше, или одну или более групп, описанных выше, как алкильные заместители.

[0036] Выражения "гетероцикл", "гетероциклический" и "гетероцикло" относятся к необязательно замещенной, полностью насыщенной или ненасыщенной, ароматической или неароматической циклической группе, например, которая является 4-7-членной моноциклической, 7-11-членной бициклической или 10-15-членной трициклической кольцевой системой, имеющей по меньшей мере один гетероатом в по меньшей мере одном кольце, содержащем углеродные атомы. Каждое кольцо гетероциклической группы, содержащей гетероатом, может иметь 1, 2 или 3 гетероатома, выбранных из атомов азота, кислорода и серы, где гетероатомы азота и серы могут также необязательно быть окислены и гетероатомы азота могут также необязательно быть кватеринизированы. Гетероциклическая группа может присоединяться к любому гетероатому или атому углерода.

[0037] Примерные моноциклические гетероциклические группы включают пирролидинил, пирролил, индолил, пиразолил, оксетанил, пиразолинил, имидазолил, имидазолинил, имидазолидинил, оксазолил, оксазолидинил, изоксазолинил, изоксазолил, тиазолил, тиадиазолил, тиазолидинил, изотиазолил, изотиазолидинил, фурил, тетрагидрофурил, тиенил, оксадиазолил, пиперидинил, пиперазинил, 2-оксопиперазинил, 2-оксопиперидинил, 2-оксопирролидинил, 2-оксазепинил, азепинил, 4-пиперидонил, пиридил, N-оксо-пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, тетрагидропиранил, морфолинил, тиаморфолинил, тиаморфолинил сульфоксид, тиаморфолинил сульфон, 1,3-диоксолан и тетрагидро-1, 1-диоксотиенил, диоксанил, изотифзолидинил, тиетанил, трииранил, триазинил и триазолил, и т.п.

[0038] Примерные бициклические гетероциклические группы включают 2,3-дигидро-2-оксо-1Н-индолил, бензотиазолил, бензоксазолил, бензотиенил, хинуклидинил, хинолинил, хинолинил-N-оксид, тетрагидроизохинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, бензопиранил, индолизинил, бензофурил, хромонил, кумаринил, циннолинил, хиноксалинил, индазолил, пирролопиридил, фуропиридинил (такой как фуро[2,3-с]пиридинил, фуро[3,1-b]пиридинил] или фуро[2,3-b]пиридинил), дигидроизоиндолил, дигидрохиназолинил (такой как 3,4-дигидро-4-оксо-хиназолинил), бензизотиазолил, бензизоксазолил, бензодиазинил, бензофуразанил, бензотиопиранил, бензотриазолил, бензпиразолил, дигидробензофурил, дигидробензотиенил, дигидробензотиопиранил, дигидробензотиопиранила сульфон, дигидробензопиранил, индолинил, изохроманил, изоиндолинил, нафтиридинил, фталазинил, пиперонил, пуринил, пиридопиридил, хиназолинил, тетрагидрохинолинил, тиенофурил, тиенопиридил, тиенотиенил и т.п.

[0039] Примерные заместители включают одну или более алкильных или аралькильных групп, как описано выше, или один или несколько групп, описанных выше как алкильные заместители.

[0040] Также включенными являются более мелкие гетероциклы, такие как, эпоксиды и азиридины.

[0041] Выражение "гетероатомы" будет включать кислород, серу и азот.

[0042] Болезнь Паркинсона может быть диагностирована у пациентов в соответствии с клиническими диагностическими критериями компьютерного банка мозга общества болезни Паркинсона Объединенного Королевства (см, Hughes et al., Accuracy of clinical diagnosis of idiopathic Parkinson's disease: a clinico-pathological study of 100 cases. J Neurol Neurosurg Psychiatry 1992; 55:181-184) и/или критериями, описанными Gelb et al., Diagnostic Criteria for Parkinson's disease. Arch Neurol. 1999; 56(1):33-39. Аналогично, тяжесть болезни Паркинсона может быть определена с использованием унифицированной оценочной шкалы болезни Паркинсона. См., например, Fahn и Eiton, Members of the Unified Parkinson's disease Rating Scale Development Committee. Unified Parkinson's disease Rating Scale. B: Fahn et al., Recent developments in Parkinson's disease. Пью Йорк: Macmillan, 1987: 153-163.

[0043] Болезнь Альцгеймера может быть диагностирована у пациентов в соответствии с критериями деменций типа Альцгеймера в Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4^th ed.: DSM-IV. Washington, D.C.: American Psychiatric Association, 1994. Аналогично, кретирии для предполагаемого заболевания Альцгеймера могут быть определены на основе критериев National Institute of Neurological and Communicative Disorders and Stroke and the Alzheimer's Disease and Related Disorders Association. См. также, McKhann et al., Clinical diagnosis of Alzheimer's Disease: report of the NINCDS-ADRDA work group under the auspices of Department of Health and Human Services Task Force on Alzheimer's Disease. Neurology 1984; 34:939-944.

[0044] Мультисистемная атрофия (MSA) характеризуется глиальными цитоплазматическими включениями (также известными как Папп-Лантос тельца) в центрах движения, равновесия и различных центров автоматии головного мозга. Наиболее известный первый признак MSA - проявление "акинетического-ригидного синдрома" (т.е. медлительность начала движения наподобие болезни Паркинсона) обнаруженного в 62% при первом проявлении. Другие известные признаки при появлении включают проблемы с равновесием (обнаруженные в 22%), последующие генито-уринальные проблемы (9%). Для мужчин, первым признаком может быть нарушение эрекции (неспособность достигать или поддерживать эрекцию). И мужчины, и женщины часто сталкиваются с проблемами мочевого пузыря, включая неотложный позыв к мочеиспучканию, частоту, неполное опорожнение мочевого пузыря или неспособность к мочеиспусканию (задержка). Около 1 из 5 пациентов с MSA будут страдать ослабеванием в первый год заболевания. Пока заболевание прогрессирует, три группы симптомов преобладают. Это: (i) паркинсонизм (медленные, неуклюжие движения, почерк становится мелким и тонким, похожим на паутину); (ii) мозжечковая дисфункция (затруднение координации движений и удержания равновесия); и (iii) вегетативная дисфункция (нарушение автоматических функций тела) включая: позотоническую или ортостатическую гипотензию, приводящую к головокружению или обмороку при вставании, недержание мочи, импотенция; констипация; сухость во рту и кожи; затрудненная регуляция температуры тела за счет аномального потоотделения; аномальное дыхание во время сна. Причем, не все эти симптомы проявляются у всех пациентов.

[0045] Деменция с тельцами Леви (DLB) один из наиболее известных типов прогрессирующей деменции. Основной особенностью DLB является прогрессирующее снижение когнитивных способностей, комбинированное с тремя дополнительными определяющими особенностями: (1) ярко выраженными "флуктуациями" в восприимчивости и внимательности, такими как частая сонливость, заторможенность, длительное смотрение в пространство, или дезорганизация речи; (2) периодические зрительные галлюцинации, и (3) паркинсоновские моторные симптомы, такие как ригидность и утрата спонтанных движений. Люди могут также страдать от депрессии. Симптомы DLB обусловлены накоплением телец Леви - скопившихся частиц белка альфа-синуклеина - внутри ядер нейронов в областях мозга, которые контролируют определенные аспекты памяти и регуляцию моторики. Исследователи не знают точно, почему альфа-синуклеин накапливается в тельцах Леви или как тельца Леви обуславливают симптомы DLB, но они знают, что накопление альфа-синуклеина также связано с заболеванием Паркинсона, мультисистемной атрофией, и несколькими другими расстройствами, которые упоминают как "синуклеопатии." Сходство симптомов между DLB и заболеванием Паркинсона, и между DLB и заболеванием Альцгеймера, часто может создавать трудности для врача в постановке точного диагноза. К тому же Тельца Леви часто также обнаруживаются в мозге людей с болезнями Паркинсона и Альцгеймера. Такие данные означают, что либо DLB связана с этими другими случаями деменции, либо, что личность может иметь оба заболевания в одно время. DLB обычно встречается спорадически, у людей, в семейной истории болезни которых не встречается данное заболевание. Однако переодически описывались редкие наследственные случаи.

Соединения

[0046] Ниже представлены новые соединения настоящего изобретения:

(3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)пиперидин-3,4-диол

(стереоизомер А)

(3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)пиперидин-3,4-диол

(стереоизомер В)

(3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол

(стереоизомер А)

(3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол

(стереоизомер В)

(3R,4R,5S)-5-этилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-изопропилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-3,4-диол

(4R,5R)-3,3-дифтор-5-(гидроксиметил)пиперидин-4-ол

(4R,5R)-5-(гидроксиметил)-3-метилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(1,1-дифторэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(трифторметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(2,2-дифторэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(2-фторэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-циклопропилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(2,2-дифторциклопропил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S,6S)-6-этил-5-(фторметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S,6R)-6-этил-5-(фторметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S,6S)-5-(дифторметил)-6-этилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S,6R)-5-(дифторметил)-6-этилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-1-бензил-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5R)-5-((S)-гидрокси(фенил)метил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-1-бутил-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-1-аллил-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол

1-((3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидроксипиперидин-1-ил)пентан-1-он

(3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-(3-метоксибензил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-(4-метилбензил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-(метилсульфонил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-(4-фторбензил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5R)-5-((4-фторфенил)(гидрокси)метил)пиперидин-3,4-диол

(3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-пропилпиперидин-1-карбоксамид

(3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-тозилпиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(4-метилбензил)пиперидин-3,4-диол

(3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-фенилпиперидин-1-карбоксамид

(3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-фенилпиперидин-1-карботиоамид

(3S,4R,5R)-N-бутил-3-(дифторметил)-4,5-дигидроксипиперидин-1-карбоксамид

(3S,4R,5R)-N-бутил-3-(дифторметил)-4,5-дигидроксипиперидин-1-карботиоамид

(3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N,N-диметилпиперидин-1-сульфонамид

(3R,4R,5R)-5-(2-циклогексил-1-гидроксиэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(2-циклогексил-1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(4-фторбензил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5R)-5-((3,5-дифторфенил)(гидрокси)метил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-((3,5-дифторфенил)фторметил)пиперидин-3,4-диол

1-((3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидроксипиперидин-1-ил)этанон

((3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидроксипиперидин-1-ил)(фенил)метанон

(3R,4R,5R,6S)-6-(2,4-дифторбензил)-5-(гидроксиметил)пиперидин-3,4-диол

(3S,4R,5R)-3-фтор-5-(гидроксиметил)пиперидин-4-ол гидрохлорид

(3R,4R,5R)-5-(гидроксиметил)-1-(2-нитробензил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5R)-1-(3-аминобензил)-(гидроксиметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5R)-5-(гидроксиметил)-1-(3-нитробензил)пиперидин-3,4-диол

(S)-2-амино-1-((3R,4R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)пиперидин-1-ил)-4-метилпентан-1-он

(R)-2-амино-1-((3R,4R,5R)-3,4-дигидрокси-5-(гидроксиметил)пиперидин-1-ил)-4-метилпентан-1-он

(3R,4R,5S)-5-(фторметил)пиперидин-3,4-диол

гидрохлорид

(3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-((S)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол

Химический процесс

[0047] Композиции настоящего изобретения могут быть получены согласно одной или нескольким следующим схемам.

Схема процесса 1

[0048] ((2S,3S,4aR,8R,8aR)-2,3-Диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин-8-ил)метанол гидрохлорид(2). Раствор 1 (20,0 г, 55,0 ммоль) в МеОН (500 мл) объединяли с Pd(OH)₂ (4-6 g) и формиатом аммония (14 г, 220 ммоль) и смесь нагревали при 50-55ºС. Дополнительные количества (3×100,0 ммоль) формиата аммония добавляли в течение следующих 8 часов. После заключительного добавления реакционную смесь дополнительно перемешивали и нагревали дополнительно 16 часов при 50-55ºС. Катализатор удаляли путем фильтрации и фильтрат выпаривали в вакууме. Неочищенный продукт растворяли в ацетоне (150 мл), отфильтровывали и добавляли HCl в 2-PrOH. После затравки и затем охлаждения в ледяной бане продукт собирали в виде белого кристаллического твердого вещества (11,0 г, 71%). ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 9,45 (s, 2H), 4,80 (t, 1Н, ex), 3,85 (m, 1Н), 3,0-3,75 (m, 11H), 2,8 (q, 2H), 1,95 (m, 1Н), 1,2 (2, 6H).

[0049] ((2S,3S,4aR,8R,8aR)-6-бензил-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин-8-ил)метанол (3). В раствор 2 (14,85 г, 50,0 ммоль) в DMF (200 мл) добавляли K₂СО₃ (17,25 г, 125 ммоль) и смесь перемешивали при 40ºС в течение приблизительно 4 часов. На этой стадии добавляли одну часть BnCl (5,7 мл, 50,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 40ºС в течение ночи. Растворитель выпаривали в вакууме и остаток суспендировали в воде (600 мл) и HCl добавляли для растворения остатка. Раствор промывали Et₂O и затем превращали в основание при помощи Na₂CO₃. Раствор экстрагировали с помощью EtOAc (2x) и объединенные экстракты промывали водой и затем рассолом и затем сушили над MgSO₄. Раствор фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме с получением названного соединения (17,2 г, >95%) в виде бесцветного или бледно-желтого вязкого масла, которое использовали без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (CDCl₃) 7,3 (m, 5H), 3,6-3,8 (m, 2H), 3,5 (s, 3Н), 3,4 (t, 1Н), 3,26 (s, 3Н), 3,268 (s, 3Н), 2,9 (m, 2H), 2,2 (br s, 1Н), 2,05 (m, 1Н), 1,85 (t, 1Н), 1,28 (s, 3Н), 1,26 (s, 3Н).

[0050] ((2S,3S,4aR,8R,8aR)-6-бензил-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин-8-ил)карбоксальдегид (Общая методика А) (4). В раствор DMSO (7,3 г, 96,9 ммоль) в CH₂Cl₂ (150 мл) охлажденный до -78ºС добавляли раствор оксалилхлорида (6,1 мл, 72,8 ммоль) по каплям в СН₂Сl₂. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали дополнительно 30 минут, при этом раствор 3 (17,0 г, 48,4 ммоль) в CH₂Cl₂ добавляли по каплям. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при -78ºС и затем диизопропилэтиламин (34,4 мл, 193 ммоль) добавляли по каплям. После завершения этого добавления охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до 0ºС, после чего добавляли насыщенный NaHCO₃. Смесь разбавляли некоторым количеством дополнительного CH₂Cl₂ и затем органический слой отделяли и сушили над MgSO₄. После фильтрации растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (Нех/EtOAc) с получением названного соединения (12,7 г, 75%) в виде вязкого масла. ¹Н ЯМР (CDCl₃) 9,73 (s, 1H), 7,2 (m, 5H), 3,75 (m, 2H), 3,5 (q, 2H), 3,2 (2s, 6H), 2,7-3,0 (m, 3Н), 2,05 (m, 2H), 1,25 (2s, 6H).

[0051] ((2S,3S,4aR,8S,8aR)-6-бензил-8,8-дифторметил-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин гидрохлорид (Общая методика В) (5). В раствор DAST (1,4 мл, 10,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл) охлажденный до -15ºС добавляли раствор 4 (2,4 г, 6,9 ммоль) по каплям. Через 10 минут ледяную баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. На этой стадии реакционную смесь снова охлаждали в ледяной бане и реакцию гасили путем добавления насыщенного NaHCO₃ (сначала по каплям, поскольку это дает в результате легкий экзотермический эффект). Органический слой разделяли и сушили над Na₂SO₄, отфильтровывали и растворитель выпаривали в вакууме с получением желтого масла. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Нех/EtOAc) с получением названного соединения (1,6 г, 62%) в виде бесцветного масла. ¹H ЯМР (CDCl₃) 7,2 (m, 5H), 6,0 (dt, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,55 (m, 3Н), 3,2 (2s, 6H), 2,95 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 2,3 (m, 2H), 1,5 (br s, 1H), 1,2 (2s, 6H).

[0052] (3R,4R, 5S)-5-(дифторметил)пиперидин 3,4-диол гидрохлорид (Общая методика С) (6). Соединение 5 (1,6 г, 4,3 ммоль) нагревали при возгонке в смеси EtOH/H₂O/HCl (40 мл/40 мл/5 мл) и реакцию наблюдали при помощи ВЭЖХ, пока исходный материал не будет больше определяться. Растворитель выпаривали в вакууме и затем совместно выпаривали 2х с EtOH. Остаток растворяли в MeOH и гидрировали над Pd(OH)₂. При завершении катализатор удаляли путем фильтрации и фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток перекристаллизовывали из EtOH (50 мл) до названного соединения (0,55 г, 66%) в виде белого твердого вещества (т.пл. 168-170ºС). ¹Н ЯМР (D₂О) 6,15 (dt, 1Н), 4,3-4,8 (m, 2H), 3,0 (t, 1H), 2,85 (t, 1H), 2,3 (m, 1H).

[0053] (R) и (S)-1-((2S,3S,4aR,8R,8aR)-6-бензил-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин-8-ил)этанол Общая методика D(15/16). В раствор 4 (7,0 г, 20,0 ммоль) в сухом THF (100 мл) добавляли MeMgBr (20,0 мл, 1,4 M в 3:1 THF/толуол) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакцию гасили насыщенным NH₄Cl и смесь экстрагировали при помощи EtOAc (2x). Объединенные экстракты промывали рассолом, сушили над Na₂SO₄ и фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (гексан/2-PrOH) с получением основного изомера (15) (1,6 г, 24,6%). ¹H ЯМР (CDCl₃)7,3 (m, 5H), 4,15 (m, 1H), 3,5-3,9 (m, 3Н), 3,3 (2s, 6H), 2,85 (m, 2H), 2,0 (2m, 4H), 1,3 (2s, 6H), 1,2 (d, 3Н). Побочный изомер (16) был также выделен (0,55 г, 7,5%) 7,3 (m, 5H), 3,75 (m, 2H), 3,5 (m, 2H), 3,2 (2s, 6H), 2,8 (m, 2H), 2,0 (t, 1H), 1,75 (m, 2H), 1,2 (2s, 6H), 1,0 (d, 3Н).

[0054] (3R,4R, 5R)-5((R)-1-гидроксиэтил)пиперидин 3,4-диол (17). Соединение 15 (0,55 г, 1,5 ммоль) перемешивали в смеси 9/1 TFA:H₂O (20 мл) пока исходный материал больше не будет определяться при помощи ВЭЖХ. Летучие соединения удаляли и остаток совместно выпаривали 2-3х с EtOH и затем растворяли в EtOH и обрабатывали твердым K₂СО₃. После фильтрации твердого вещества фильтрат выпаривали в вакууме и остаток превращали в соль HCl и гидрировали на Pd(OH)₂. Катализатор отфильтровывали и фильтрат выпаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали с применением ионообменной смолы (Dowex 50WX8-200) с элюированием 0,1 N NH₄OH. Соответствующие фракции объединяли и лиофилизировали с получением названного соединения (0,12 г, 50%). 1H ЯМР (D20) 4,2 (q, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,45 (m, 3Н), 2,8 (m, 2H), 1,65 (m, 1H), 1,15 (d, 3Н).

[0055] (3R,4R, 5R)-5((S)-1-гидроксиэтил)пиперидин 3,4-диол (10). С соединения 16 (0,34 г, 0,93 ммоль) снимали защитные группы, как описано выше, с получением названного соединения (0,11 г, 75%). ¹H ЯМР (D20) 4,15 (m, 2H), 3,5 (m, 1H), 3,35 (t, 1H), 3,15 (m, 2H), 1,8 (m, 1H), 1,1 (d, 3Н).

[0056] ((2S,3S,4aR,8R,8aR)-6-бензил-8(S)-(1фторэтил)-2,3-Диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин (11). Соединение 15 (1,8 г, 5,0 ммоль) фторировали с применением общей методики В. Хроматографией на силикагеле (Нех/EtOAc) получали названное соединение (0,42 g, 23%). ¹H ЯМР (CDCl₃) 7,25 (m, 5H), 4,7-4,9 (dq, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,4 (m, 2H), 3,2 (2s, 6H), 2,8 (m, 2H), 2,0 (m, 3H), 1,35 (dd, 3H), 1,2 (2s, 6H).

[0057] (3R,4R,5R)-5((S)-1-фторэтил)пиперидин 3,4-диол гидрохлорид (13). С соединения 11 (0,42 г, 1,14 ммоль) снимали защитные группы, как описано в основной методике С. После удаления катализатора фильтрат выпаривали в вакууме и затем совместно выпаривали с EtOH (2x). Полученный остаток перетирали с ацетоном с получением названного соединения (0,20 г, 88%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (DMSO-d₆) 9,0 (br s, 2H), 5,6 (d, 1H, ex), 5,4 (d, 1H, ex), 5,0-5,2 (dq, 1H), 3,55 (m, 1H), 3,2 (m, 2H), 2,9 (t, 1H), 2,7 (t, 1H), 2,2 (m, 1H), 1,3 (dd, 3H).

[0058] ((2S,3s,4aR,8R,8aR)-6-бензил-8(R)-(1фторэтил)-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин (12). Соединение 16 (0,55 г, 1,5 ммоль) фторировали с применением общей методики В с получением названного соединения (0,22 г, 40%). ¹Н ЯМР (CDCl₃)) 7,3 (m, 5H), 5,0 (dq, 1H), 3,8 (m, 1H), 3,5-3,75 (m, 3H), 3,3 (2s, 6H), 3,0 (d, 1H), 2,9 (m, 1H), 2.1 (m, 2H), 1,85 (m, 1H), 1,3 (2s, 6H).

[0059] (3R,4R,5R)-5((R)-(1-фторэтил)пиперидин 3,4-диол гидрохлорид (14). С соединения 12 (0,22 г, 0,6 ммоль) снимали защитные группы, как описано в основной методике С. После удаления катализатора фильтрат выпаривали в вакууме и затем совместно выпаривали с EtOH (2x). Полученный остаток перетирали с ацетоном с получением названного соединения (0,08 г, 67%) в виде белого твердого вещества. ¹H ЯМР (D20) 5,1 (dq, 1H), 3,5 (m, 4H), 2,8 (m, 2H), 1,8 (m, 1H), 1,3 (dd, 3H).

Схема процесса 2

[0060] ((2S,3S,4aR,8R,8aR)-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин-8-ил)метанол гидрохлорид(2). Раствор 1 (20,0 г, 55,0 ммоль) в MeOH (500 мл) объединяли с Pd(OH)₂ (4-6 g) и формиатом аммония (14 г, 220 ммоль) и смесь нагревали при 50-55ºС. Дополнительные количества (3×100,0 ммоль) формиата аммония добавляли в течение следующих 8 часов. После заключительного добавления реакционную смесь дополнительно перемешивали и нагревали дополнительно 16 часов при 50-55ºС. Катализатор удаляли путем фильтрации и фильтрат выпаривали в вакууме. Неочищенный продукт растворяли в ацетоне (150 мл), отфильтровывали и добавляли HCl в 2-РrОН. После затравки и затем охлаждения в ледяной бане продукт собирали в виде белого кристаллического твердого вещества (11,0 г, 71%). ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 9,45 (s, 2H), 4,80 (t, 1Н, ex), 3,85 (m, 1H), 3,0-3,75 (m, 11H), 2,8 (q, 2H), 1,95 (m, 1H), 1,2 (2, 6H).

[0061] ((2S,3S,4aR,8R,8aR)-6-бензил-2,3-диметокси-2,3-Диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин-8-ил)метанол (3). В раствор 2 (14,85 г, 50,0 ммоль) в DMF (200 мл) добавляли K₂СО₃ (17,25 г, 125 ммоль) и смесь перемешивали при 40ºС в течение приблизительно 4 часов. На этой стадии добавляли одну часть BnCl (5,7 мл, 50,0 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 40ºС в течение ночи. Растворитель выпаривали в вакууме и остаток суспендировали в воде (600 мл) и добавляли HCl для растворения остатка. Раствор промывали Et₂O и затем превращали в основание при помощи Na₂CO₃. Раствор экстрагировали EtOAc (2x) и объединенные экстракты промывали водой и затем рассолом и затем сушили над MgSO₄. Раствор фильтровали и фильтрат выпаривали в вакууме с получением названного соединения (17,2 г, >95%) в виде бесцветного или бледно-желтого вязкого масла, которое в дальнейшем использовали без дополнительной очистки. ¹Н ЯМР (CDCl₃) 7,3 (m, 5Н), 3,6-3,8 (m, 2H), 3,5 (s, 3Н), 3,4 (t, 1H), 3,26 (s, 3Н), 3,268 (s, 3Н), 2,9 (m, 2H), 2,2 (br s, 1H), 2,05 (m, 1H), 1,85 (t, 1H), 1,28 (s, 3Н), 1,26 (s, 3Н).

[0062] ((2S,3S,4aR,8R,8aR)-6-бензил-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин-8-ил)карбоксальдегид (Общая методика А) (4). В раствор DMSO (7,3 г, 96,9 ммоль) в CH₂Cl₂ (150 мл) охлажденный до -78ºС добавляли раствор оксалилхлорида (6,1 мл, 72,8 ммоль) в CH₂Cl₃ по каплям. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали дополнительно 30 минут, при этом раствор 3 (17,0 г, 48,4 ммоль) в CH₂Cl₂ добавляли по каплям. После завершения добавления реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа при -78ºС и затем диизопропилэтиламин (34,4 мл, 193 ммоль) добавляли по каплям. После завершения этого добавления охлаждающую баню удаляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до 0ºС, после чего добавляли насыщенный NaHCO₃. Смесь разбавляли некоторым количеством дополнительного CH₂Cl₂ и затем органический слой отделяли и сушили над MgSO₄. После фильтрации растворитель выпаривали в вакууме и неочищенный продукт очищали хроматографией на силикагеле (Нех/ЕtOАс) с получением названного соединения (12,7 г, 75%) в виде вязкого масла. ¹Н ЯМР (CDCl₃) 9,73 (s, 1Н), 7,2 (m, 5H), 3,75 (m, 2H), 3,5 (q, 2H), 3,2 (2s, 6H), 2,7-3,0 (m, 3H), 2,05 (m, 2H), 1,25 (2s, 6H).

[0063] ((2S,3S,4aR,8S,8aR)-6-бензил-8,8-дифторметил-2,3-диметокси-2,3-диметилоктагидро-[1,4]диоксино[2,3-с]пиридин гидрохлорид (Общая методика В) (5). В раствор DAST (1,4 мл, 10,3 ммоль) в CH₂Cl₂ (50 мл) охлажденный до -15ºС добавляли раствор 4 (2,4 г, 6,9 ммоль) по каплям. Через 10 минут ледяную баню удаляли и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. На этой стадии реакционную смесь снова охлаждали в ледяной бане и реакцию гасили путем добавления насыщенного NaHCO₃ (сначала по каплям, поскольку это дает в результате легкий экзотермический эффект). Органический слой разделяли и сушили над Na₂SO₄, отфильтровывали и растворитель выпаривали 6 вакууме с получением желтого масла. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (Нех/EtOAc) с получением названного соединения (1,6 г, 62%) в виде бесцветного масла. ¹Н ЯМР (CDCl₃) 7,2 (m, 5H), 6,0 (dt, 1Н), 3,75 (m, 1Н), 3,55 (m, 3H), 3,2 (2s, 6H), 2,95 (m, 1Н), 2,85 (m, 1Н), 2,3 (m, 2H), 1,5 (br s, 1Н), 1,2 (2s, 6H).

[0064] (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин 3,4-диол гидрохлорид (Общая методика С) (6). Соединение 5 (1,6 г, 4,3 ммоль) нагревали при возгонке в смеси EtOH/Н₂О/HCl (40 мл/40 мл/5 мл) и реакцию наблюдали при помощи ВЭЖХ, пока исходный материал не будет больше определяться. Растворитель выпаривали в вакууме и затем совместно выпаривали 2х с EtOH. Остаток растворяли в MeOH и на Pd(OH)₂. При завершении катализатор удаляли путем фильтрации и фильтрат выпаривали в вакууме. Остаток перекристаллизовывали из EtOH (50 мл) до названного соединения (0,55 г, 66%) в виде белого твердого вещества (т.пл. 168-170ºС). ¹Н ЯМР (D₂O) 6,15 (dt, 1Н), 4,3-4,8 (m, 2H), 3,0 (t, 1Н), 2,85 (t, 1Н), 2,3 (m, 1Н).

[0065] (3R,4R, 5S)-1.бутил-5-(дифторметил)пиперидин 3,4-диол (Общая методика D) (7a; R⁵=Bu). Смесь 6 (0,30 г, 1,4 ммоль), К₂СО₃ (0,48 г, 3,5 ммоль) и BuBr (0,20 г, 1,4 ммоль) объединяли в DMF (10 мл) и нагревали в течение ночи при 60ºС. Растворитель выпаривали в вакууме и остаток растворяли в EtOAc, промывали водой и затем рассолом и сушили над Na₂SO₄. После фильтрации фильтрат выпаривали в вакууме с получением неочищенного продукта, который очищали хроматографией (CH₂Cl₂/(9:1) MeOH/NH₄OH) с получением названного соединения (0,25 г, 80%) в виде бесцветного сиропа. MH⁺=224. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 6,2 (t, 1Н, J=57 Гц), 5,13 (d, 1H, ex), 4,91 (d, 1H, ex), 3,3 (m, 1H), 3,1 (m, 1H), 2,9 (m, 2H), 2,3 (m, 2H), 1,95 (m, 2H), 1,75 (t, 1H), 1,2-1,5 (2m, 4H), 0,9 (t, 3H).

[0066] (3R,4R, 5S)-1.аллил-5-(дифторметил)пиперидин 3,4-диол (7b; R⁵=аллил). Следуя общей методике D с применением аллилбромида (0,17 г, 1,4 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,22 г, 76%). MH⁺=208. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 6,2 (t, 1H, J=57 Гц), 5,8 (m, 1H), 5,2 (m, 3H), 4,92 (d, 1H), 3,3 (m, 1H), 3,1 (1H), 2,95 (d, 2H), 2,85 (d, 2H), 1,9 (br m, 2H), 1,75 (t, 1H).

[0067] (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-(4-фторбензил)пиперидин 3,4-диол (7 с; R⁵=4-фторбензил). Следуя общей методике D, исключая тот факт, что реакцию проводили при комнатной температуре и с применением 4-фторбензилбромида (0,26 г, 1,4 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,22 г, 56%). МН⁺=276. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 7,4 (m, 2H), 7,15 (m, 2H), 6,2 (t, 1H, J=57 Гц), 5,2 (d, 1H, ex), 4,9 (d, 1H, ex), 3,5 (q, 2H), 3,3 (m, 1H), 3,1 (m, 1H), 2,8 (m, 2H), 2,0 (m, 2H), 1,8 (t, 1H).

[0068] (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-(4-метилбензил)пиперидин 3,4-диол (7d; R⁵=4-метилбензил). Следуя общей методике D, исключая тот факт, что реакцию проводили при комнатной температуре и с применением 4-метилбензилбромида (0,26 г, 1,4 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,30, 81%). MH⁺=272. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 7,2 (m, 4H), 6,2 (t, 1H, J=57 Гц), 5,2 (d, 1H, ex), 4,9 (d, 1H, ex), 3,5 (q, 2H), 3,3 (1H), 3,05 (m, 1H), 2,8 (m, 2H), 2,5 (s, 3H), 1,95 (m, 2H), 1,8 (t, 1H).

[0069] (3R,4R,5S)-5-(Дифторметил)-1-(4-метоксилбензил) пиперидин 3,4-диол (7е; R⁵=4-метоксилбензил). Следуя общей методике D за исключением того, что реакцию проводили при комнатной температуре и с применением 4-метоксилбензилхлорида (0,26 г, 1,4 ммоль), получали названное соединение в виде бесцветного сиропа (0,19 г, 49%). МН⁺=288. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 7,3 (m, 1H), 6,85 (m, 3H) 6,2 (t, 1H, J=57 Гц), 5,2 (d, 1H, ex), 4,9 (d, 1H, ex), 3,75 (s, 3H), 3,5 (q, 2H), 3,4 (m, 1H), 3,1 (m, 1H), 2,85(m, 2H), 1,95 (m, 2H), 1,8 (t, 1H).

[0070] 1-((3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидроксипиперидин-1-ил)пентан-1-он (8а; Z=СО; R⁵=бутил). Следуя общей методике D за исключением того, что реакцию проводили при комнатной температуре и с применением пентаноилхлорида (0,17 г, 1,4 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,26 г, 71%). MH⁺=252. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 5,9-6,5 (dt, 1H), 5,35 (m, 1H, ex), 5,25 (m, 1H), ex), 4,2 (dd, 1H), 3,75 (dd, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,1 (m, 1H), 2,85 (m, 1H), 2,3 (t, 2H), 1,9 br m, 1H), 1,4 (m, 2H), 1,25 (m, 2H), 0,85 (t, 3H).

[0071] (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-(метансульфонил)пиперидин 3,4-диол (8b; Z=SO₂; R⁵=Me) Следуя общей методике D за исключением того, что реакцию проводили при комнатной температуре и с применением метансульфонилхлорида (0,16 г, 1,4 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,17 г, 51%). ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 6,2 (t, 1H, J=53 Гц), 5,43 (d, 1H, ex), 5,38 (d, 1H, ex), 3,2-3,7 (m, 4H), 2,95 (s, 3H), 2,85 (m, 1H), 2,7 (t, 1H), 2.1 (br s, 1H). (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-1-тозилпиперидин 3,4-диол (8b; Z=SO₂; R⁵=Ph) Следуя общей методике D, исключая тот факт, что реакция проходила при комнатной температуре и с применением толуолсульфонилхлорида (0,26, 1,4 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,35 г, 67%). ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 7,6 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 6,25 (t, 1H, J=53 Гц), 5,4 (2d, 2H, ex), 3,3-3,55 (m, 4H), 3,2 (m, 1H), 2,5 (m, 3H), 2,4 (t, 1H), 2.1 (m, 1H).

[0072] (3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-пропилпиперидин-1-карбоксамид (Общая методика Е) (9а; Х=О; R⁵=пропил). В раствор 6 (свободное основание) (0,29 г, 1,2 ммоль) в сухом DMF (5 мл) добавляли пропилизоцианат (0,10 г, 1,2 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель выпаривали в вакууме и остаток очищали хроматографией (CH₂Cl₂/MeOH) с получением названного соединения в виде белого твердого вещества (0,14 г, 48%). МН⁺=253. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 6,7 (t, 1H), 6,22 (t, 1H, J=53 Гц), 5,25 (d, 1H, ex), 5,15 (d, 1H, ex), 4,05 (d, 1H), 3,9 (d, 1H), 3,3 (m, 2H), 3,0 (q, 2H), 2,5 (m, 1H), 1,8 (br d, 1H), 1,4 (m, 2H), 0,85 (t, 3H).

[0073] (3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-фенилпиперидин-1-карбоксамид (9b; X=O; R⁵=фенил). Следуя общей методике Е и применяя фенилизоцианат (0,14 г, 1,2 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,21 г, 62%). MH⁺=287. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 8,7 (s, 1H), 7,45 (d, 2H), 7,3 (t, 2H), 6,95 (t, 1H), 6,3 (t, 1H, J=53 Гц), 5,35 (d, 1H), 5,25 (d, 1H), 4,1 (t, 2H), 3,3 (m, 2H), 2,85 (t, 1H), 2,75 (t, 1H), 1,95 (br d, 1H).

[0074] (3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-бутилпиперидин-1-карбоксамид (9с; Х=О; R⁵=бутил). Следуя общей методике Е и применяя бутилизоцианат (0,12 г, 1,2 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,24 г, 76%). MH⁺=267. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 6,6 (t, 1H), 6,2 (t, 1H, J=53 Гц), 5,25 (d, 1H), 5,1 (d, 1H), 4,05 (d, 1H), 3,9 (d, 1H), 3,35 (m, 2H), 3,05 (q, 2H), 2,65 (t, 1H), 2,45 (m, 1H), 1,8 (br d, 1H), 1,2-1,4 (2m, 4H), 0,85 (t, 3H).

[0075] (3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-бутилпиперидин-1-карботиоамид (9d; X=S; R⁵=бутил). Следуя общей методике Е и применяя бутилизотиоцианат (0,14 г, 1,2 ммоль), получали названное соединение в виде бесцветного сиропа (0,21 г, 63%). MH⁺=283. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 7,85 (t, 1H), 6,25 (t, 1H), 5,35 (2d, 2H), 4,8 (d, 1H), 4,45 (d, 1H), 3,45 (m, 2H), 3,25 (m, 1H), 3,05 (t, 1H), 2,8 (t, 1H), 1,85 (br d, 1H). 1,4 (m, 2H), 1,35 (m, 2H), 1,1 (m, 1H), 0,95 (t, 3H).

[0076] (3S,4R,5R)-3-(дифторметил)-4,5-дигидрокси-N-фенилпиперидин-1-карботиоамид (9e; X=S; R⁵=фенил). Следуя общей методике Е и применяя фенилизотиоцианат (0,16 г, 1,2 ммоль), получали названное соединение в виде белого твердого вещества (0,31 г, 86%). MH⁺=303. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆) 9,5 (s, 1H), 7,3 (m, 4H), 7,1 (t, 1H), 6,35 (t, 1H), 5,35 (2d, 2H), 4,85 (d, 1H), 4,55 (d, 1H), 3,45 (m, 2H), 3,2 (t, 1H), 3,0 (t, 1H), 2,05 (br d, 1H).

[0077] Соединения по настоящему изобретению также могут быть получены специалистом настоящей области с применением следующих общих схем:

Схема 3

Схема 4

Схема 5

Схема 6

Схема 7

Соли, сольваты и пролекарства

[0078] Соединения настоящего изобретения включают фармацевтически приемлемые соли, сольваты и пролекарственные средства раскрытых здесь соединений. Фармацевтически приемлемые соли включают соли, полученный из неорганических оснований, таких как Li, Na, K, Ca, Mg, Fe, Cu, Zn, Mn; соли органических оснований, таких как N,N'-диацетилэтилендиамин, глюкамин, триэтиламин, холин, гидроксид, дициклогексиламин, метформин, бензиламин, триалкиламин, тиамин; хиральные основания, такие как алкилфениламин, глицинол, фенилглицинол, соли природных аминокислот, таких как глицин, аланин, валин, лейцин, изолейцин, норлейцин, тирозин, цистин, цистеин, метиопип, пролин, гидрокси пролин, гистидин, омитин, лизин, аргинин, серин; неприродные аминокислоты, такие как D-изомеры или замещенные аминокислоты; гуанидин, замещенный гуанидин, где заместители выбраны из нитро, амино, алкила, алкенила, алкинила, аммониевых или замещенных аммониевых солей и солей алюминия. Соли могут включать кислотно-аддитивные соли, приемлемыми из которых являются гидрохлориды, сульфаты, нитраты, фосфаты, перхлораты, бораты, гидрогалиды, ацетаты, тартаты, малеаты, цитраты, сукцинаты, пальмоаты, метансульфонаты, бензоаты, салицилаты, бензолсульфонаты, аскорбаты, глицерофосфаты, кетоглутараты. В одном варианте осуществления, фармацевтически приемлемая соль соединений, раскрытых в настоящем изобретении является гидрохлоридной солью.

[0079] "Сольват» обозначает физическую ассоциацию соединения с одной или несколькими молекулами растворителя. Эта физическая ассоциация включает различные степени ионнной и ковалентной связи, включая водородную связь. В некоторых случаях сольват может быть способен к изоляции, например, когда одна или несколько молекул растворителя включаются в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. «Сольват» охватывает как фазу раствора, так и выделяемые сольваты. «Гидрат» представляет собой сольват, в котором растворителем является молекула Н₂О. Другие неограничивающие примеры подходящих сольватов включают спирты (например, этанолаты, метаполаты и т.п.).

[0080] Пролекарства представляют собой соединения, которые превращаются in vivo в активную форму (см., например, R.В.Silverman, 1992, "The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action", Academic Press, Глава 8, включенную в настоящий документ посредством ссылки). Дополнительно, обсуждение пролекарств представлено в Т.Higuchi и V.Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Volume 14 of the A.C.S. Symposium Series, и в Bioreversible Carriers in Drug Design, Edward В. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and P ergamon Press, 1987, оба из которых включены в настоящий документ посредством ссылки на них. Пролекарства могут использоваться для изменения биораспределения (например, допускать соединения, которые обычно не могут попасть в реакционноспособный участок протеазы) или фармакокинетики для отдельного соединения. Например, карбоксильная кислотная группа, может быть подвергнута эстерификации, например, метильной группой или этильной группой, давая сложный эфир. Когда сложный эфир вводится субъекту, сложный эфир расщепляется, ферментативно или неферментативно, восстановительно, окислительно или путем гидролиза, открывая анионную группу. Анионная группа может быть эстерифицирована компонентами (например, ацилоксиметиловыми сложными эфирами), которые расщепляются, высвобождая промежуточное соединение, которое затем разлагается, давая активное соединение.

[0081] Примеры пролекарств и их использование хорошо известны в настоящем уровне техники (см., например, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66:1-19). Пролекарства могут готовиться in situ во время финального выделения и очистки соединений или отдельно реакцией очищенного соединения с подходящим средством для получения производных. Например, гидроксильные группы могут превращаться в сложные эфиры путем воздействия карбоновой кислоты в присутствии катализатора. Примеры расщепляемых спиртовых пролекарственных фрагментов включают замещенные и незамещенные, разветвленные или неразветвленные низшие алкильные сложноэфирные фрагменты, (например, этиловые сложные эфиры), низшие алкениловые сложные эфиры, динизшие алкил-аминовые низшие-алкиловые сложные эфиры {например, диметиламиноэтиловый сложный эфир), ациламиновые низшие алкиловые сложные эфиры, ацилокси низшие алкиловые сложные эфиры {например, пивалоилоксиметиловый сложный эфир), ариловые сложные эфиры (фениловый сложный эфир), арил-низшие алкиловые сложные эфиры (например, бензиловый сложный эфир), замещенные (например, метилом, галогеном или метокси заместителем) ариловые и арил-низшие алкиловые сложные эфиры, амиды, низшие алкиловые амиды, динизшие алкиловые амиды и гидрокси амиды.

[0082] Все стереоизомеры (например, геометрические изомеры, оптические изомеры и т.п.) соединений раскрытых в настоящем документе (включая соли, сольваты и пролекарства этих соединений, а также соли и сольваты пролекарств), такие как те, что могут существовать благодаря асимметричным углеродам в различных заместителях, включая энантиомерные формы (которые могут существовать даже в отсутствие асимметричных углеродов), ротамерные формы, атропизомеры и диастереомерные формы, предусматриваются внутри объема настоящего изобретения. Отдельные стереоизомеры этих соединений могут, например, быть в основном свободными от других изомеров, или могут быть смешанными, например, как рацематы или со всеми другими, или другими выбранными, стереоизомерами. Хиральные центры вышеупомянутых соединений могут иметь S или R конфигурацию, как определяется в Рекомендации IUPAC 1974. Применение выражений «соль», «сольват», «пролекарство» и т.п., подразумевает равное применение к соли, сольвату и пролекарству энантиомеров, стереоизомеров, ротамеров, таутомеров, рацематов или пролекарств соединения настоящего изобретения, раскрытых в настоящем документе.

Составы

[0083] Терапевтическое(ие) средство(средства) может(гут) составляться подходящими для любого пути введения, включая, например, пероральный в форме таблеток или капсул, или жидкости, или в стрерильном водном растворе для инъекций. Когда терапевтическое(ие) средство(средства) составляется(ются) для перорального введения, таблетки или капсулы могут готовиться обычным способом с фармацевтически приемлемым наполнителем, таким как вяжущие вещества (например, желатинированный маисовый крахмал, поливинилпирролидон или гидроксипропил метилцеллюлоза); наполнители (например, лактоза, мироккристаллическая целлюлоза или кальций водород фосфат); скользящие вещества (например, стеарат магния, тальк или кремнезем); разрыхлители (например, картофельный крахмал или натрия крахмал гликолят); или смачивающие средства (например, натрия лаурил сульфат). Таблетки могут покрываться способами хорошо известными в настоящем уровне техники. Жидкие препараты для перорального введения могут принимать форму, например, растворов, сиропов или суспензий, или они могут быть в виде сухого продукта для разбавления водой или другим подходящим растворителем перед применением. Такие жидкие препараты могут быть приготовлены обычным способом с фармацевтически приемлемыми добавками, такими как суспендирующие средства (например, сироп сорбита, производные целлюлозы или гидрогенизированные пищевые жиры); эмульгирующие средства (например, лецитин или гуммиарабик); неводные растворители (например, миндальное масло, жирные сложные эфиры, этиловый спирт или фракционированные растительные масла) или консерванты (например, метил или пропил-р-гидроксибензоаты или сорбиновая кислота). Жидкие препараты также могут содержать приемлемые буферные соли, ароматизаторы, красящие средства или подсластители при необходимости. Препараты для перорального введения могут составляться соответсвенно, чтобы давать контролируемое или длительное высвобождение терапевтического (их) средства (средств).

[0084] В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения, терапевтическое(ие) средство(средства) вводится(ятся) в лекарственной форме, предусматривающей системное поглощение, так, чтобы терапевтическое(ие) средство(средства) могло(и) пересекать гематэнцефалический барьер, так, чтобы оказывать влияние на нервные клетки. Например, фармацевтические составы терапевтического(их) средства (средств), подходящие для парентерального/инъекционного применения, обычно включают стерильные водные растворы (если растворимы в воде), или дисперсии и стерильные порошки для немедленного приготовления стерильных инъекционных растворов или дисперсий. Во всех случаях, форма должна быть стерильной и должна быть жидкой до такой степени, чтобы существовала возможность ее легкого введение через шприц. Она должна быть стабильной в условиях производства и хранения и должна предохраняться от загрязняющего воздействия микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. Носитель может быть растворителем или дисперсионной средой, содержащей, например, воду, этанол, полиол (например, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и т.п.), их подходящие смеси или растительные масла. Соответствующая текучесть может поддерживаться, например, применением оболочки, такой как лецитин, поддержанием требуемого размера частиц в случае дисперсий и применением поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов может обуславливаться различными антибактериальными и противогрибковыми средствами, например, парабенами, хлорбутанолом, фенолом, бензиловым спиртом, сорбиновой кислотой и т.п. Во многих случаях будет иметь смысл включение изотонических средств, например, Сахаров или хлорида натрия. Продленная адсорбция инъекционных композиций может обуславливаться применением в композиции средств, задерживающих адсорбцию, например, моностеарата алюминия или желатина.

[0085] Стерильные инъекционные растворы готовят включением терапевтического(их) средства(средств) в требуемом количестве в соответствующий растворитель с различными другими ингредиентами перечисленными выше, при необходимости, с последующей фильтрацией или терминальной стерилизацией. Обычно дисперсии готовят введением различных простерилизованных активных ингредиентов в стерильный растворитель, содержащий основную дисперсионную среду и требуемые другие ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для приготовления стерильных инъекционных растворов предпочтительными способами приготовления являются вакуумная сушка и лиофилизация, дающие порошок активного ингредиента с добавлением любых дополнительных желательных ингредиентов из их раствора, предварительно стерилизованного фильтрованием.

[0086] Состав может содержать наполнитель. Фармацевтически приемлемые наполнители, которые могут включаться в состав, являются буферами такими как цитратный буфер, фосфатный буфер, ацетатный буфер и бикарбонатный буфер, аминокислоты, мочевина, спирты, аскорбиновая кислота, фосфолипиды; белками, такими как сывороточный альбумин, коллаген и желатин; солями, такими как ЭДТА или ЭГТА, и хлорид натрия; липосомами; поливинилпироллидоном; сахарами, такими как декстран, маннитол, сорбит и глицерин; пропиленгликолем и полиэтиленгликолем {например, PEG-4000, PEG-6000); глицерином; глицином или другими аминокислотами и липидами. Буферные системы для применения с составами включают цитратный; ацетатный; бикарбонатный и фосфатный буферы. Фосфатные буфер является предпочтительным вариантом осуществления.

[0087] Состав может также содержать неионный детергент. Предпочтительные неионные детергенты включают Полисорбат 20, Полисорбат 80, Тритон Х-100, Тритон Х-114, Нонидет Р-40, октил α-глюкозид, октил β-глюкозид, Бридж 35, Плюроник и Твин 20.

Пути введения

[0088] Терапевтическое(ие) средство(средства) может вводиться перорально или парентерально, включая внутривенно, подкожно, внутриартериально, внутрибрюшинно, при помощи глазного введения, внутримышечно, буккально, ректально, вагинально, интраорбитально, интрацеребрально, внутрикожно, интракраниально, интраспинально, внутрижелудочково, интратекально, интрацистернально, внутрикапсулярно, внутрилегочно, интраназально, трансмукозально, трансдермально или путем ингаляции. В одном предпочтительном варианте осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) вводится(ятся) перорально.

[0089] Введение терапевтического(их) средства (средств) может осуществляться путем периодических инъекций болюса состава или может вводится внутривенным или внутрибрюшинным введением из резервуара, внешнего (например, контейнер для внутривенных вливаний) или внутреннего (например, биоразрушаемый имплант). См., например, патенты США №4407957 и 5798113, каждый включен в настоящий документ ссылкой. Способы внутрилегочной доставки и аппаратура описываются, например, в патентах США №5654007, 5780014 и 5814607, каждый включен в настоящий документ ссылкой. Другие пригодные системы парентеральной доставки включают этилен-винилацетатные сополимерные частицы, осмотические насосы, имплантируемые инфузионные системы, насосную доставку, инкапсулированную клеточную доставку, липосомальную доставку, игольную инъекцию, безыгольную инъекцию, ингалятор, аэрозоль, электропорацию и трансдермальный пластырь. Безыгольные инъекторные устройства описываются в патентах США №5879327; 5520639; 5846233 и 5704911, спецификации которых включены в настоящий документ ссылкой. Любой из составов, описанных выше, может вводиться с использованием этих способов.

[0090] Подкожные инъекции имеют преимущества, предусматривая самовведение, кроме того также приводя к удлиненному периоду полужизни в плазме, по сравнению с внутривенным введением. Кроме того, большое разнообразие устройств, разработанных для удобства пациента, таких как перезаполняемые шприцы-ручки и безыгольные инъекционные устройства, может использоваться с составами настоящего изобретения, как обсуждается в настоящем документе.

Дозировка

[0091] Подходящий фармацевтический препарат находится в стандартной лекарственной форме. В такой форме препарат разделяют на стандартные дозы, подходящего размера, содержащие соответствующие количества активного компонента, например, эффективное количество для достижения желаемой цели. В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) вводится(ятся) в одной или нескольких ежедневных дозах (например, раз в день, два раза в день, три раза в день). В определенных вариантах осуществления, терапевтическое(ие) средство(средства) вводится(ятся) с перерывами.

[0092] Примерные режимы дозирования описываются в Международной патентной заявке PCT/US08/61764, опубликованной как WO 2008/134628 11 июня 2008, и предварительной патентной заявке США 61/108192, зарегистрированной 24 октября 2008, обе из которых включены ссылкой в настоящий документ во всей своей полноте. В одном варианте осуществления, терапевтическое(ие) средство(средства) вводится(ятся) в прерывистом режиме дозирования, включающем начальную "ударную дозу", даваемую ежедневно, с последующим периодом неежедневного интервального дозирования.

[0093] Количество эффективного(ых) терапевтического(их) средства (средств) для предупреждения или лечения упомянутого расстройства может определяться в каждом конкретном случае специалистами в настоящем уровне техники. Количество и частота введения терапевтического(их) средства (средств) будут регулироваться в соответствии с решением лечащего клинициста (врача), с учетом таких факторов как возраст, состояние и размеры тела пациента, а также риска развития расстройства или тяжести симптомов упомянутого расстройства, которое лечат.

Комбинированная лекарственная терапия

[0094] Терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения могут вводиться в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством. Введение терапевтического(их) средства (средств) настоящего изобретения с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством понимается, как включающее введение, которое является последовательным или совместным. В одном варианте осуществления, терапевтические средства вводятся в отдельных лекарственных формах. В другом варианте осуществления, два или более терапевтических средства вводятся одновременно в одной и той же лекарственной форме.

[0095] В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое представляет собой антидискинетическое средство (например, карбидопа, леводопа), антибактериальное средство (например, миглустат), противоопухолевое средство (например, бусульфан, циклофосфамид), желудочно-кишечное средство (например, метилпреднизолон), витамин (например, кальцитриол, холекальциферол, эргокальциферолы, витамин D), сосудосуживающее средство (например, кальцитриол).

[0096] В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с аллопрегналоном, диетой с низким содержанием холестерина или средствами снижающими холестерин, такими как статины (например, Lipitor®); фибраты, такие как фенофибрат (Lipidil®); ниацин; и/или связывающие смолы, такие как холестирамин (Questran®).

[0097] В одном варианте осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с генной терапией. Генная терапия предусматривает как замещение генов, таких как ген глюкоцереброзидазы, так и введение ингибирующих РНК (siRNA) для гена SNCA. Генная терапия описывается более детально в Патенте США №7446098, зарегистрированном 17 февраля 2004.

[0098] В одном варианте осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое представляет собой противовоспалительное средство (например, ибупрофен или другое NSAID).

[0099] В одном варианте осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с субстратным ингибитором глюкоцереброзидазы, таким как N-бутил-деоксинойиримицин (Zavesca®; миглустат можно получить в Actelion Pharmaceuticals, US, Inc., South San Francisco, CA, USA).

[00100] Комбинации терапевтического(их) средства (средств) настоящего изобретения с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое представляет собой терапевтическое средство для одного или нескольких других лизосомных ферментов, также предусматриваются. Следующее представляет собой неограничивающий список терапевтических средств для лизосомных ферментов.

Таблица 1 ЛИЗОСОМНЫИ ФЕРМЕНТ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО α-глюкозидаза 1-деоксин ойиримицин (DNJ) № доступа GenBank Y00839 α-гомонойиримицин кастаноспермин кислая β-глюкозидаза глюкоцереброзидаза) (β-изофагомин № доступа GenBank J03059 С-бензил изофагомин и производные N-алкил (C9-12)-DNJ глюкоимидазол (и производные) С-алкил-IFG (и производные) N-алкил-β-валеинамины флуфенозин калистегины А₃, B₁, B₂ и C₁ α-галактозидаза А 1-деоксигалактонойиримицин (DGJ) № доступа GenBank NM000169 α-алло-гомонойиримицин α-галакто-гомонойиримицин β-1-С-бутил-деоксинойиримицин калистегины А₂ и В₂ N-метил калистегины А₂ и В₂ кислая β-галактозидаза 4-эпи-изофагомин № доступа GenBank M34423 1-деоксигалактонойиримицин галактоцереброзидаза (кислая галактозидаза) β-4-эпи-изофагомин № доступа GenBank D25283 1-деоксигалактонойиримицин кислая α-маннозидаза 1 -деоксиманнойиримицин № доступа GenBank U68567 свайнсонин манностатин А кислая β-Маннозидаза 2-гидрокси-изофагомин № доступа GenBank U60337 кислая α-L-фукозидаза 1-деоксифуконойиримицин

№доступа GenBank NM_000147 β-гомофуконойиримицин 2,5-имино-1,2,5-тридеокси-L-глюцитол 2,5-деокси-2,5-имино-D-фуцитол 2,5-имино-1,2,5-тридеокси-D-альтритол α-N-ацетилглюкозаминидаза 1,2-дидеокси-2-N-ацетамидо-нойиримицин №доступа GenBank U40846 α-N-ацетилгалактозаминидаза 1,2-дидеокси-2-N-ацетамидо-галактонойиримицин № доступа GenBank M62783 β-гексозаминидаза А 2-N-ацетиламино-изофагомин № доступа GenBank NM_000520 1,2-дидеокси-2-ацетамидо-нойиримицин нагстатин β-гексозаминидаза В 2-N-ацетамидо-изофагомин № доступа GenBank NM_000521 1,2-дидеокси-2-ацетамидо-нойиримицин нагстатин α-L-идуронидаза 1-деоксиидуронойиримицин № доступа GenBank NM_000203 2-карбокси-3,4,5-тридеоксипиперидин β-глюкуронидаза 6-карбокси-изофагомин № доступа GenBank NM_000181 2-карбокси-3,4,5-тридеоксипиперидин сиалидаза 2,6-дидеокси-2,6, имино-сиаловая кислота № доступа GenBank U84246 сиастатин В идуронат сульфатаза 2,5-ангидроманнитол-6-сульфат № доступа GenBank AF 011889 кислая сфингомиелиназа дезипрамин, фосфатидилинозитол-4,5-цифосфат № доступа GenBank M59916

[00101] В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним терапевтическим средством, которое представляет собой антидискинетическое средство (например, карбидопа, леводопа), антибактериальное средство (например, циклоспорин, миглустат, пириметамин), противоопухолевое средство (например, алемтузумаб, азатиоприн, бусульфан, клофарабин, циклофосфамид, мелфалан, метотрексат, ритуксимаб), противоревматическое средство (например, ритуксимаб), желудочно-кишечное средство (например, метилпреднизолон), витамин (например, кальцитриол, холекальциферол, эргокальциферолы, фолиевая кислота, витамин D), средство контроля размножения (например, метотрексат), средство для дыхательной системы (например, тетрагидрозолин), сосудосуживающее средство (например, кальцитриол, тетрагидрозолин).

[00102] В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним терапевтическим средством, которое представляет собой терапевтическое средство для β-гексозаминидазы А и/или терапевтическое средство для кислой β-галактозидазы. В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним терапевтическим средством, которое представляет собой антибактериальное средство (например, миглустат), противоопухолевое средство (например, алемтузумаб, бусульфан, циклофосфамид), желудочно-кишечное средство (например, метилпреднизолон).

[00103] Терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения может(гут) быть введены в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое включает, но не ограничиваясь, PHKi, замещение дофамина (например, левадопа (L-DOPA)), стабилизатор замещения дофамина (например, карбидопа и энтакапон), антихолинергическое средство (например, тригексифенидил, бензатропина мезилат (Cogentin®), тригексифенидил HCL (Artane®) и проциклидин), ингибитор катехол-0-метилтрансферазы (СОМТ) (например, энтакапон (Comtan®) и толкапон (Tasmar®)), агонист дофаминного рецептора (например, бромокриптин (Parlodel®), прамипексол (Mirapex®), ропинирол (Requip®)), перголид (Permax) и введение APOKYN™ (апоморфина гидрохлорид), ингибитор моноаминоксидазы (МАО) (т.е., МАО-А и/или МАО-В ингибиторы, например, селегилин (Deprenyl, Eldepryl®, Carbex®), перорально распадающаяся таблетка селегилин HCI (Zeiapar®) и разагилин (Azilect®)), ингибитор периферической декарбоксилазы, амантадин (Symmetrel®) и ривастигмина тартрат (Exelon®).

[00104] Также рассматриваются комбинации терапевтического(их) средства (средств) настоящего изобретения с более чем одним другим терапевтическим средством. Иллюстративные комбинации других терапевтических средств включают, но не ограничиваясь, карбидопу/леводопу (Sinemet® или Рагсора®), карбидопу, леводопу и энтакапон (Stalevo®), леводопу с агонистом рецептора дофамина, таким как бромокриптин (Parlodel®), прамипексол (Mirapex®), ропинирол (Requip®)), перголид (Permax) или введение APOKYN™ (апоморфина гидрохлорид).

[00105] В одном варианте осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с вакцинотерапией, такой как содержащий вакцину альфа-синуклеин и адъювант (Pilcher et al., Lancet Neurol. 2005; 4(8):458-9).

[00106] В одном варианте осуществления, терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое может быть протективным, таким как декстрометорфан (Li et al., FASEB J. 2005; Apr;19(6):489-96); генистеин (Wang et al., Neuroreport. 2005; Feb 28; 16(3):267-70) или миноциклин (Blum et al., Neurobiol Dis. 2004; Dec; 17(3):359-66).

[00107] В одном варианте осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое представляет собой терапевтическое средство для альфа-синуклеина (например, Hsp70).

[00108] Пациенты с заболеванием Паркинсона испытывают тремор, ригидность, брадикинезию и позотонический дисбаланс.У пациентов с деменцией телец Леви проявляются характерные психотические симптомы (зрительные галюцинации) дополнительно к умственным отклонениям, таким как потеря памяти и неспособность выполнить простые задания. Заметная положительная динамика в симптомах или задержка проявления определенных симптомов у пациентов с риском развития расстройства, или задержка в развитии расстройства будет доказательством положительного ответа на методы лечения, представленные в данном документе.

[00109] К тому же измеряемые суррогатные признаки также могут применяться для оценки ответной реакции на терапию. Например, некоторые исследователи описывают выявление более высоких уровней альфа-синуклеина или олигомерных форм альфа-синуклеина, обнаруженных в плазме пациентов с заболеванием Паркинсона (Lee et al., J Neural Transm. 2006; 113(10):1435-9; El-Agnaf et al., FASEB J. 2006; 20(3):419-25), в то время как некоторые описывают снижение плазменного альфа-синуклеина у пациентов с болезнью Паркинсона по сравнению с нормальным контрольным уровнем (Li et al., Exp Neurol. 2007; 204(2):583-8).

[00110] В определенных вариантах осуществления, терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое представляет собой спиртовый замедлитель (например, акампросат), наркотический анальгетик (например, ремифентанил), антидискинезийное средство (напр., амантадин, апоморфин, бензеразид, бромокриптин, каберголин, карбидопу, дексетимид, дроксидопу, энтакапон, леводопу, лизурид, мемантин, пирибедил, прамипексол, ропинерол, селегилин, синемет), противоинфекционное средство (напр., амантадин, амоксициллин, кларитромицин, этанол, интерфероны, миноциклин, PS-K), средство против ожирения (например, фенилпропаноламин, топирамат), антиконвульсант (например, этирацетам, топирамат), противорвотное средство (например, триметобензамид), антигипертензивное средство (например, трандолаприл), противоопухолевое средство (например, каберголин, PS-K), депрессант центральной нервной системы (например, арипипразол, бензокаин, клозапин, кокаин, дексмедетомидин, дифенгидрамин, изофлуран, литий, карбонат лития, метилперон, морфин, пропофол, кветиапин, раклоприд, ремифентанил, оксибат натрия), стимулятор центральной нервной системы (например, цитрат кофеина, модафинил, никотин полакрилекс), коагулянт (например, аргинин вазопрессин, деамино аргинин вазопрессин, вазопрессины), дерматологическое средство (например, лоратадин, прометазин), желудочно-кишечное средство (например, дифенгидрамин, домперидон, омепразол, триметобензамид), снотворное и/или седативное средство (например, ремифентанил), питательные микроэлементы (например, альфа-токоферол, коэнзим Q10, эргокальциферолы, гидроксокобаламин, железо, токоферол ацетат, токоферолы, витамин В 12, витамин D, витамин Е), нейрозащитное средство (например, элипродил, модафинил, разагилин, ривастигмин, топирамат), ноотропное средство (например, донепезил, этирацетам), психотропное лекарственное средство (например, арипипразол, циталопрам, клозапин, дулоксетин, литий, карбонат лития, метилперон, нортриптилин, пароксетин, кветиапин, раклоприд, венлафаксин), средство дыхательной системы (например, декстрометорфан, гвайфенезин, ипратропий, нафазолин, оксиметазолин, фенилефрин, Фенилпропаноламин), сосудосуживающее средство (например, нафазолин, оксиметазолин, фенилефрин, фенилпропаноламин).

[00111] В одном предпочтительном варианте осуществления вышеупомянутые другие терапевтические средства вводятся в случае, если расстройство представляет собой болезнь Паркинсона.

[00112] В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое является агонистом никотинового рецептора альфа-7 (например, MEM 3454 или MEM 63908, оба из которых доступны у Memory Pharmaceuticals). В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которым является R3487 и/или R4996 (оба из которых доступны у Roche). Также предполагаются комбинации терапевтического(их) средства (средств) настоящего изобретения с более чем одним другим терапевтическим средством. Иллюстративные комбинации других терапевтических средств включают, но не ограничиваясь, R3487/MEM 3454 и R4996/MEM 63908.

[00113] В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним ингибитором холинэстеразы (например, донепезилом (товарный знак Aricept), галантамином (товарный знак Razadyne) и ривастигмином (товарные знаки Exelon и Exelon Patch).

[00114] В определенных вариантах осуществления терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним неконкурентным антагонистом рецептора NMDA (например, мемантином (товарные знаки Akatinol, Axura, EbixalAbixa, Memox и Namendd)).

[00115] В определенных вариантах осуществления, терапевтическое(ие) средство(средства) настоящего изобретения вводится(ятся) в комбинации с по меньшей мере одним другим терапевтическим средством, которое представляет собой ненаркотический анальгетик (например, целекоксиб, ресвератрол, рофекоксиб, белок слияния TNFR-Fc), антидискинетическое средство (например, дексетимид, габапентин, леводопу, мемантин), средство против инфекций (например, ацетилцистеин, ацикловир, бензоаты, дезоксиглюкозу, доксициклин, интерферон альфа-2а, интерферон-альфа, интерфероны, моксифлоксацин, PS-K, акрихин, рифампин, салициловую кислоту, валацикловир), противовоспалительное средство (например, аспирин, целекоксиб, куркумин, ибупрофен, индометацин, напроксен, ресвератрол, рофекоксиб, белок слияния TNFR-Fc), средства против ожирения (например, фенилпропаноламин), противосудорожное средство (например, габапентин, гомотаурин, ламотриджин), противорвотное средство (например, оланзапин), противогипертоническое средство (например, трандолаприл), антилипемическое средство (например, аторвастатин, холин, клофибриновую кислоту, правастатин, симвастатин), противоопухолевое средство (например, бриостатин 1, кармустин, циклофосфамид, интерферон альфа-2а, леупролид, медроксипрогестерон 17-ацетат, метилтестостерон, РК 11195, преднизон, PS-K, ресвератрол, 2,3-дигидро-1Н-имидазо(1,2-b)пиразол), противоревматическое средство (например, аспирин, целекоксиб, куркумин, ибупрофен, индометацин, напроксен, ресвератрол, рофекоксиб, белок слияния TNFR-Fc), депрессант центральной нервной системы (например, арипипразол, бензокаин, кокаин, габапентин, галоперидол, галоперидола деканоат, литий, лития карбонат, лоразепам, мидазолам, оланзапин, перфеназин, пропофол, кветиапин, рисперидон, натрия оксибат, тразодон, вальпроевую кислоту, золпидем), стимулянт центральной нервной системы (например, кофеин цитрат, модафинил, никотиновый полакрилекс), блокатор каналов (например, габапентин, ламотриджин), коагулянт (например, антиплазмин, витамин К), дерматологическое средство (например, минеральное масло, салициловую кислоту), желудочно-кишечное средство (например, холин, галоперидол, лоразепам, оланзапин, омепразол, белок слияния TNFR-Fc), снотворное и/или седативное средство (например, золпидем), гипогликемическое средство (например, инсулин, Asp(B28)-, росиглитазон), питательные микроэлементы (например, альфа-токоферол, аскорбиновую кислоту, кофермент Q10, медь, фолиевую кислоту, гидроксокобаламин, инозитол, железо, ниацин, ниацинамид, никотиновые кислоты, пиридоксин, селен, липоевую кислоту, токоферол ацетат, токоферолы, витамин В 12, витамин В6, витамин Е, витамин К), нейрозащитное средство (например, гуперзин А, модафинил, нефирацетам, разагилин, ривастигмин, (3-аминопропил)(n-бутил)фосфиновую кислоту), ноотропное средство (например, донепезил, нефирацетам), ингибитор агрегации тромбоцитов (например, ресвератрол), психотропное лекарственное средство (например, арипипразол, бупропион, циталопрам, дулоксетин, габапентип, галоперидол, галоперидол деканоат, литий, лития карбонат, лоразепам, мидазолам, нефирацетам, оланзапин, пароксетин, перфеназин, кветиапин, рисперидон, сертралин, тразодон, триптофан, вальпроевую кислоту, венлафаксин), средство контроля размножения (например, эстрадиол 17 бета-ципионат, эстрадиол 3-бензоат, эстрадиол валерат, индометацин, леупролид, медроксипрогестероп, медроксипрогестерон 17-ацетат, мифепристон), средство для дыхательной системы (например, ацетилцистеин, декстрометорфан, гвайфенезин, нафазолин, оксиметазолин, фенилэфрин, фенилпропаноламин) или сосудосуживающее средство (например, нафазолин, оксиметазолин, фенилэфрин, фенилпропаноламин).

[00116] В одном предпочтительном варианте осуществления, вышеупомянутые другие терапевтические средства вводятся, если расстройство является болезнью Альцгеймера.

ПРИМЕРЫ

[00117] Настоящее изобретение далее описывается посредством примеров, представленных ниже. Применение таких примеров является только иллюстративным и ни в коей мере не ограничивает объем и содержание настоящего изобретения, или любого приведенного в примере выражения. Подобным образом, настоящее изобретение не ограничивается никаким особенным предпочтительным вариантом осуществления, описанным в настоящем документе. В действительности, множество модификаций и разновидностей настоящего изобретения будут очевидны для специалистов в настоящей области техники при прочтении этого описания. Настоящее изобретение, следовательно, ограничивается только выражениями приложенной формулы изобретения наряду с полным объемом эквивалентов, для которых формула является правомочной.

ПРИМЕР 1 Определение констант ингибирования

[00118] Связывающую способность (определяемая здесь К, константой связывания) GBA к новым соединениям настоящего изобретения определяли эмпирически, используя ферментные ингибиторные анализы. Кратко, ферментные проведенные ингибиторные анализы контролировали способность тестируемого соединения связываться и предотвращать гидролиз флуорогенного субстрата в зависимости от концентрации. В частности, ферментативная активность рекомбинантной человеческой GBA (rhGBA; Cerezyme®, Genzyme Corp.) измеряли, используя 4-метилумбеллиферил-β-D-глюкопиранозидный (4-MU-β-D-Glc) флуорогенный субстрат в отсутствие или в присутствии переменных количеств каждого тестируемого соединения. Полученные данные анализировали сравнением всех тестируемых образцов с неингибированным контрольным образцом (без соединения; в соответствии со 100% ферментативной активностью) для определения остаточной ферментативной активности в присутствии тестируемого соединения. Нормализованные данные остаточной активности затем нанесли на график (на y-оси) относительно концентрации тестируемого соединения (на x-оси) для экстраполяции концентрации тестируемого соединения, приводящей к 50% ингибированию ферментативной активности (обозначенной как IC₅₀). Значение IC₅₀ для каждого тестируемого соединения затем вставили в уравнение Ченга-Прусоффа (подробно рассмотренного ниже) для получения константы абсолютного ингибирования Ki, которая точно отражает связывающую способность GBA к тестируемому соединению. Ферментные ингибиторные анализы проводили как при рН 7,0 (рН эндоплазматического ретикулума), так и при рН 5,2 (рН лизосом), чтобы разобраться в связывающей способности (т.е., эффективности) соединений к GBA в эндоплазматическом ретикулуме и лизосоме.

In vitro анализ

[00119] Различные концентрации тестируемого соединения приготовили в буфере "М", содержащем 50 мМ натрий-фосфатного буфера с 0,25% таурохлората натрия при рН 7,0 и рН 5,2. Фермент (Cerezyme®, рекомбинантная форма человеческого фермента р-глюкоцереброзидазы) также разводили в том же самом буфере "М" при рН 7,0 и рН 5,2. Раствор субстрата состоял из 3 мМ 4-метилумбеллиферон-β-D-глюкопиранозида в буфере "М" с 0,15% Тритона Х-100 при обоих рН. Пять микролитров разведенного фермента добавили к 15 мкл различных концентраций ингибитора или одного лишь буфера "М" и инкубировали при 37ºС в течение 1 часа с 50 мкл приготовленного субстрата для оценки β-глюкозидазной активности при рН 7,0 и рН 5,2. Реакции останавливали добавлением равного объема 0,4 М глицина, рН 10,6. Флуоресцению измеряли на сканирующем спектрофотометре для прочтения планшетов со скоростью 1 сек/лунка, с использованием 355 нм возбуждения и 460 нм излучения. Инкубации без добавленных ферментов или без добавленных ингибиторов использовали для определения отсутствия ферментативной активности и максимальной активности, соответственно и нормализовали % ингибирования для данного анализа. Результаты таких анализов ингибирования in vitro для контрольного соединения IFG-тартрата и нескольких тестируемых соединений обобщаются ниже в таблице 2А

Таблица 2А In vitro определение констант ингибирования № соед. Название соединения IC₅₀ (мкМ) рН 5,2 Ki (мкМ) рН 5,2 IC₅₀ (МКМ) рН 7,0 К, (мкМ) рН 7,0 6 (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-пиперидин-3,4-диол 0,0259±0,0014 0,0136±0,0008 0,0058±0,00023 0,00306±0,00012 13 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 0,0946±0,0028 0,0498±0,0015 0,0171±0,000 8 0,009±0,0004 9 (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол* 0,107±0,0041 0,044±0,0017 0,020±0,0008 0,010±0,0004 10 (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4- 0,343±0,021 0,142±0,0088 0,066±0,0041 0,035±0,0021

  диол*         14 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 0,038±0,0016 0,016±0,0007 0,007±0,0003 0,004±0,0001 нет (3R,4R,5S)-5-((R). 1-фторпропил)-пиперидин-3,4-диол гидрохлорид 0,291±0,006 0,121±0,0026 0,060±0,0029 0,031±0,0015 нет (3R,4R,5S)-5-бензил-пиперидин-3,4-диол 0,659±0,028 0,273±0,012 0,127±0,01 0,067±0,005 нет (3R,4R,5R)-5-((S)-гидрокси(фенил)м етил)-пиперидин-3,4-диол 3,29±0,25 1,36±0,10 0,017±0,0035 0,0089±0,0018 нет (3R,4R,5S)-5-(2-гидроксипропан -2-ил)пиперидин-3,4-диол 0,234±0,0037 0,097±0,0015 0,029±0,0013 0,015±0,0007 нет IFG-тартрат 0,049±0,0029 0,026±0,0015 0,0074±0,00007 0,0039±0,000037 Примечания: * Стереоизомер А и/или В

In situ анализ

[00120] Эффект новых соединений настоящего изобретения на активность лизосомальный GBA анализировали in situ, используя фибробласты, полученные от нормального человека. Клетки, высеянные в 48-луночные планшеты, инкубировали с указанными концентрациями соединения в течение 16-24 ч. Для анализов эффекта реакции по отношению к дозе клетки инкубировали с in situ субстратом 5-(пентафторбензоиламино)флуоресцин ди-β-D-глюкопиранозидом (PFBFDβGlu) в течение 1 часа и затем лизировали для определения объема гидролиза субстрата в присутствии соединения. В анализе использовали диапазон из 12 концентраций, охватывающих 5 порядков величины, центрированных на IC₅₀. В частности, использовали следующие диапазоны концентрации: (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорид и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол: от 1,0×10^-3 до 3,0×10^-9 М; (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол: от 1,0×10^-4 до 3,0×10^-10 М и (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол: от 1,0×10^-3 до 3,0×10^-11 М, где соединение последовательно разводили в пропорции 1:3 от самой высокой концентрации в указанных диапазонах. Ингибирование определяли как соотношение активности в присутствие соединения к активности в отсутствии соединения. Для анализов отмывки клетки обрабатывали соединением в течение 16-24 часов при концентрации, равной IC90. Клетки тщательно промыли и инкубировали в среде без лекарственного средства, чтобы обеспечить вытекание чистого соединения из клеток. В клетках затем проверяли активность лизосомальной GBA с 2-часовыми интервалами в течение общего периода 8 часов после удаления соединения. Увеличение активности с течением времени аппроксимировали с единой экспоненциальной функцией для определения времени отмывки соединения. Результаты этих in situ анализов ингибирования для контрольного соединения IFG-тартрата и нескольких тестируемых соединений обещаются ниже в таблице 2В.

Таблица 2В In situ определение констант ингибирования № соед. Название соединения in situ IC50 (мкМ) in situ отмывка (ч) EC₅₀ (мкМ) E_max (%) 6 (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-пиперидин-3,4-диол 0,408±0,046 2,1±0,30 0,018±0,008 105,6±8,7 13 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 0,650±0,172 2,7±0,12 0,044±0,005 92,8±6,6 9 (3R,4R,5R)-5-(1- 0,518±0,02 10,5±1,75 0,49±0,06 83,7±2,9

  гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол* 2       10 (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол* 0,798±0,043 12±1,65 1,06±0,12 99,3±4,9 14 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 0,061±0,019 3,7±0,63 0,026±0,003 89,7±3,5 нет (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)-пиперидин-3,4-диол гидрохлорид 0,972±0,201 н.о. 0,086±0,002 84,0±4,1 нет (3R,4R,5S)-5-бензил-пиперидин-3,4-диол 1,299±0,323 1,2±0,13 0,18±0,01 98,0±4,5 нет (3R,4R,5R)-5-((S)-гидрокси (фенил)м етил)-пиперидин-3,4-диол н.о. н.о. 4,99±0,86 72,1±3,5 нет (3R,4R,5S)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-3,4-диол н.о. н.о. 0,791±0,162 109,3±3,6 нет IFG-тартрат 0,271±0,012 8,2±0,04 0,31±0,11 105,5±12,8 Примечания: * Стереоизомер А и/или В Уравнение Ченга-Прусоффа: Ki=IC₅₀/(1+[S]/K_m) где [S]=концентрация субстрата; использовали 2,5 мМ 4-MU-β-D-Glc K_m=константа Михаэлиса, которая определяет сродство к субстрату; 1,8±0,6 мМ для 4-MU-β-D-Glc (Liou et al., (2006) J Biol. Chem. 281 (7), 4242-53)

[00121] По сравнению с контрольным соединением IFG-тартратом отмечено следующее: (i) обнаружено, что тестируемые соединения (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорид и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол вызывают концентрация-зависимое увеличение активности GBA и улучшенную ферментативную активность до того же максимального уровня, что и контрольное соединение IFG-тартрат, при намного более низкой концентрации; (ii) тестируемые соединения (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол отмывались из лизосомального компартмента (in situ отмывка) намного быстрее, чем контрольное соединение IFG-тартрат; и (iii) тестируемые соединения (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорид и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол ингибировали активность GBA.

ПРИМЕР 2: Проникновение через гематоэнцефалический барьер

[00122] Проникновение через гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) контрольного соединения IFG-тартрата и нескольких соединений настоящего изобретения (а именно, (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорида и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола) анализировали после орального введения мышам. Для этой цели, 8-недельным самцам мыши дикого типа (C57BL/6) вводили однократную 30 мг/кг (эквивалент свободного основания) п/о дозу контрольного или тестируемого соединения через желудочный зонд (n=3 мыши на момент времени). Растворы дозировок готовили на воде. После введения доз, мышей умерщвляли CO₂ в следующие моменты времени: 0-, 0,5-, 1-, и 4-часа после введения дозы. После умерщвления, собрали цельную кровь из нижней полой вены в пробирки с литий-гепарином. Аналогично, собрали мозг от каждой мыши. Плазму получили центрифугированием цельной крови при 2700 х г в течение 10 минут при 4ºС с последующим хранением на сухом льду. Мозг целиком промыли в холодном PBS для удаления загрязняющей их крови, промокнули до сухости, быстро заморозили на сухом льду и, наконец, хранили при -80ºС до проведения анализа. Для приготовления образцов мозга для анализа, 50-100 мг ткани гомогенизировали в 400 мкл воды/мг ткани. Образцы затем очищали центрифугированием. Затем, 25 мкл супернатанта мозгового гомогената или 25 мкл плазмы смешали с 25 мкл ацетонитрил:водой (95/5). К этому добавили 25 мкл ацетонитрила и 50 мкл внутреннего стандарта (100 нг/мл IFG-тартрата 13C2-15N в 0,5% муравьиной кислоте в (70:30) ацетонитрил:метаноле). Образцы снова очистили центрифугированием и 75 мкл супернатанта смешали с 75 мкл ацетонитрила. Затем образцы проанализировали на уровни соединения с помощью LC-MS/MS в PPD Inc. (3230 Deming Way, Middleton, WI 53562). Вкратце, использовали колонку Thermo Betasil, Silica-100, 50×3 мм, 5 мк, уравновешенную смесью подвижной фазы, состоящей из 5 мМ формиата аммония и 0,05% муравьиной кислоты в (А) 95:5 ацетонитрил:воде или (В) 70:20:10 метанол:вода:ацетонитриле. Для анализа впрыскивали 20-30 мкл образца. Для вычисления концентраций лекарственного средства исходные данные для плазмы (нг/мл) и мозга (нг/г) преобразовали в нМ, используя молекулярный вес соответствующего соединения и принимая, что 1 г ткани эквивалентен 1 мл объема. Концентрация как функция времени нанесена на график в GraphPad Prism версии 4.02.

[00123] Уровни в плазме и мозге, определенные у мышей, которым была введена однократная 30 мг/кг (эквивалент в чистом основании) п/о доза контрольного соединения (т.е., IFG-тартрата) или тестируемого соединения (т.е., (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорида или (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола), отражают более легкий переход (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорида и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола через гематоэнцефалический барьер по сравнению с IFG-тартратом. Дополнительно, более высокие уровни (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорида и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола были обнаружены в мозге, чем те, которые наблюдали после введения IFG-тартрата.

ПРИМЕР 3: Усиление GBA

[00124] Способность перорально введенных тестируемых соединений ((3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорида или (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола) повышать уровни GBA оценивали на мышах. Для этой цели 8-недельным самцам мыши дикого типа (C57BL/6) вводили однократную п/о (через желудочный зонд) дозу соединения настоящего изобретения (т.е., (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол гидрохлорид или (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол). Детали вводимой дозы для каждого соединения даны в таблицах 3А и 3В. Растворы дозировок готовили на воде. Соединения вводили в течение 2 недель следующим образом: неделя 1, Пн-Пт (включены), Сб-Вс (исключены); неделя 2, Пн-Чт (включены); вскрытие в пятницу. Таким образом, всего 9 доз (растворы дозировок приготавливали свежими ежедневно) давали каждой мыши, с 24-часовой отмывкой между последней дозой и вскрытием.

[00125] После завершения введения доз, мышей умертвили при помощи СО₂ и цельную кровь брали из нижней полой вены в пробирки с литий-гепарином. Плазму собирали центрифугированием крови при 2700 г в течение 10 минут при 4ºС. Ткани печени, селезенки, легкого и мозга ткани отделили, промыли в холодном PBS, промокнули до сухости, быстро заморозили на сухом льду и хранили при -80ºС до проведения анализа. Уровни GBA измеряли гомогенизируя приблизительно 50 мг ткань в 500 мкл буфера Мак-Илвейна (MI) (100 мМ цитрата натрия, 200 мМ двузамещенного фосфата натрия, 0,25% таухлората натрия и 0,1% Тритона Х-100, рН 5,2) при рН 5,2 в течение 3-5 секунд на льду с помощью микрогомогенизатора. Затем гомогенаты инкубировали при комнатной температуре без и с 2,5 мМ кондуритол-В-эпоксидом (СВЕ) в течение 30 мин. Наконец, добавили 3,7 мМ 4-метилумбелиферрил-β-глюкозидного (4-MUG) субстрата и инкубировали при 37βC в течение 60 мин. Реакции останавливали добавлением 0,4 М глицина, рН 10,6. Флуоресценцию измеряли на сканирующем спектрофотометре для прочтения планшетов со скоростью 1 сек/лунка, используя 355 нм возбуждение и 460 нм излучение. Общий белок определяли в лизатах, используя набор MicroBCA в соответствии с инструкциями производителя. Стандартную кривую 4-метилумбеллиферона (4-MU), в диапазоне от 1,0 нМ до 50 мкМ, пустили параллельно для перевода исходных данных флуоресценции в абсолютную активность GBA (в присутствии и отсутствии СВЕ) и выразили как наномоли высвобожденного 4-MU на миллиграмм белка в час (нмоль/мг белка/ч). Уровни GBA и белка рассчитали, используя Microsoft Excel (Redmond, WA) и GraphPad Prism версии 4.02.

[00126] Таблицы 3А и 3В обобщают введенные дозы для каждого соединения, изученного на мышах, как описано выше, а также полученный уровень усиления GBA в мозге и селезенке, соответственно, концентрацию соединения в ткани, концентрацию соединения в анализе GBA и константу ингибирования (Ki).

Таблица 3А   Усиление GBA в мозге  

Название соединения Доза (мг/кг) FBE Усиление GBA (раз) Концентрация соединения в ткани 2,2 нмоль/кг Концентрация соединения в анализе GBA (мкМ) Ki pH 5,2 (мкМ) (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-пиперидин-3,4-диол 10 2,1 55 0,0002 0,0136±0,0008 (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-пиперидин-3,4-диол 100 2,6 301 0,0010   (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 10 1,5 50 0,0002 0,0498±0,0015 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 100 2,4 415 0,0014   (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол* н.о. н.о. н.о. н.о. 0,044±0,0017 (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол* н.о. н.о. н.о. н.о. 0,142±0,0088 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 10 1,5 BLQ (1) BLQ 0,016±0,0007 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 100 2,2 41 0,0001   (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)-пиперидин-3,4-диол гидрохлорид 10 0,9 BLQ (2) BLQ 0,121±0,0026 (3R,4R,5S)-5-((R)- 100 1,1 38 0,0001  

1-фторпропил)-пиперидин-3,4-диол гидрохлорид           (3R,4R,5S)-5-бензил-пиперидин-3,4-диол 10 1,2 н.о. н.о. 0,273±0,012 (3R,4R,5S)-5-бензил-пиперидин-3,4-диол 100 1,4 н.о. н.о.   (3R,4R,5R)-5-((S)-гидрокси(фенил)метил)-пиперидин-3,4-диол н.о. н.о. н.о. н.о. 1,36±0,10 (3R,4R,5S)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-3,4-диол и.о. н.о. н.о. н.о. 0,097±0,0015 Примечания: * Стереоизомер А и/или В (1) BLQ<7,4 нмоль/кг; (2) BLQ<2,2 нмоль/кг н.о.: не определяли

Таблица 3В Усиление GBA в селезенке Название соединения Доза (мг/кг) FBE Усиление GBA (раз) Концентрация соединения в ткани Концентрация соединения в анализе GBA Ki pH 5,2 (мкМ) (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-пиперидин-3,4-диол 10 1,9 100 0,0003 0,0136±0,0008 (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)-пиперидин-3,4-диол 100 2,4 435 0,0015   (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4- 10 1,0 BLQ (1) BLQ 0,0498±0,0015

диол*           (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 100 1,5 948 0,0032   (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол* н.о. н.о. н.о. н.о. 0,044±0,0017 (3R,4R,5R)-5-(1-гидроксиэтил)-пиперидин-3,4-диол* н.о. н.о. н.о. н.о. 0,142±0,0088 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 10 1,6 BLQ (2) BLQ 0,016±0,0007 (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)-пиперидин-3,4-диол* 100 2,3 99 0,0003   (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)-пиперидин-3,4-диол гидрохлорид 10 0,7 21 0,0001 0,121±0,0026 (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)-пиперидин-3,4-диол гидрохлорид 100 0,7 60 0,0002   (3R,4R,5S)-5-бензил-пиперидин-3,4-диол 10 1,0 н.о. н.о. 0,273±0,012 (3R,4R,5S)-5-бензил-пиперидин-3,4-диол 100 1,2 н.о. н.о.   (3R,4R,5R)-5- н.о. н.о. н.о. н.о. 1,36±0,10

((S)-гидрокси(фенил) метил)-пиперидин-3,4-диол           (3R,4R,5S)-5-(2-гидроксипропан-2-ил)пиперидин-3,4-диол н.о. и.о. н.о. н.о. 0,097±0,0015 Примечания: * Стереоизомер А и/или В (1) BLQ<6.8 нмоль/кг; (2) BLQ<7,9 нмоль/кг н.о.: не определяли

[00127] Как отражено в таблицах 3А и 3В, у мышей, которым вводили (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол или (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол, показано проявилось усиление GBA в мозге и селезенке.

ПРИМЕР 4: Фармакокинетика у крыс

[00128] Данные фармакокинетики (ФК) получали на крысах для оценки биодоступности тестируемого соединения. В частности, рассчитывали следующие параметры ФК: биодоступность, измеренная как площадь под кривой концентрация/время (AUC), доступную долю дозы (%F; дополнительно определена ниже), клиренс (CL), объем распределения (Vd), и период полужизни (t½). Для этой цели, 8-недельным самцам крысы линии Спраг Доули давали или однократную внутривенную (в/в) дозу, эквивалентную 3 мг/кг свободного основания, или однократные, вводящиеся п/о (через зонд), дозы тестируемого соединения, эквивалентные 10, 30, и 100 мг/кг свободного основания. На каждую группу дозировки использовали по три крысы. Кровь собирали в течение 24-часового периода. Моменты времени для забора крови после внутривенного введения были: 0, 2,5, 5, 10, 15, 30, 45 мин., 1, 2, 4, 8, 12 и 24 часа; моменты времени для сбора крови после п/о введений были: 0, 5, 15, 30, 45 мин., 1, 2, 3, 4, 8, 12 и 24 часа. Образцы плазмы исследовали на уровни соединения с помощью LC-MS/MS в PPD. Исходные данные анализировали некомпартменым методом в Win-nonLin для вычисления V_D, %F, CL, и t½.

[00129] Различные фармакокинетические параметры для (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диола, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диола и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диола на основе вышеупомянутого исследования раскрываются ниже в таблицах 4A-D.

Таблица 4А ФК у крыс для (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол-HCl Доза (мг/кг)   Соль Свободное основание Путь введения AUC_посл (ч*нг/мл) %F t½ (ч) C_max (нг/мл) CL (мл/ч/кг) V_D (мл/кг) 3.65 3 в/в AUC_{0-12 ч} н/д 1,1±0,05 2323±348 1555±218 2612±269 2044±294 12.18 10 п/о AUC_0-12ч 106±8,6 2,58±0,78 3363±219 Н/Д Н/Д 6714±524 36.54 30 п/о AUC_0-24ч 101±6,9 2,75±0,36 10037±865 Н/Д Н/Д 21685±1515 121.81 100 п/о AUC_0-24ч 121±12,9 2,41 33200±4990 Н/Д Н/Д 79389±8570 0,16 Примечание: Средние значения некомпартментного анализа (N=3 крысы) BLD Ниже предела определения (<0,5 нг/мл) BLD Ниже предела количественного определения %F=AUC п/о X 100 нормализованная доза AUC в/в AUC_посл = площадь под кривой концентрация/время для последней точки данных

Таблица 4В ФК у крыс для (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол-HCl* Доза (мг/кг)   Соль Свободное основание Путь введения AUC_посл (ч*нг/мл) %F t½ (ч) C_max (нг/мл) CL (мл/ч/кг) V_D (мл/кг) 3.67 3 в/в AUC_0-24ч Н/Д 2,6±0,64 2328±373 2708±410 9774±1551 1421±188,1 12.23 10 п/о AUC_0-24ч 148±12,5 2,8±0,50 2680±167 Н/Д Н/Д 7097±606 36.70 30 п/о AUC_0-24ч 155±12,2 2,7±0,12 6917±451 Н/Д Н/Д 21664±1708 122.34 100 п/о AUC_0-24ч 142±2,5 2,5±0,19 19433±3031 Н/Д Н/Д 59481±1005 Примечание: * Стереоизомер А и/или В

Таблица 4С ФК у крыс для (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол-HCl* Доза (мг/кг)   Соль Свободное основание Путь введения AUC_посл (ч*нг/мл) %F t½ (ч) C_max (нг/мл) CL (мл/ч/кг) V_D (мл/кг) 3.67 3 в/в AUC_0-24ч Н/Д 2,06±0,47 2427±192 2188±173 6304±927 1370±109 12.23 10 п/о AUC_0-24ч 98±1,85 3,0±0,22 1127±60 Н/Д Н/Д 4251±88 36.70 30 п/о AUC_0-24ч 104±0,88 2,6±0,16 4680±369 Н/Д Н/Д 14229±1

      27           122.34 100 п/о AUC_0-24ч 104±1,5 2,4±0,16 15733±622 Н/Д Н/Д 50946±713 Примечание: * Стереоизомер А и/или В

Таблица 4D ФК у крыс для (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол-HCl Доза (мг/кг)   Соль Свободное основание Путь введения AUC_посл (ч*нг/мл) %F t½ (ч) C_max (нг/мл) CL (мл/ч/кг) V_D (мл/кг) 3.53 3 в/в AUCo-12, Н/Д 1,7±1,5 969±104 5145±532 12570±1792 592±60,9 11.76 10 п/о AUC_0-24ч 61,7±2,4 3,86±0,6 641±48,7 Н/Д Н/Д 1200±46,4 35.28 30 п/о AUC_0-24ч 62,3±1,2 3,8±0,19 1703±133 Н/Д Н/Д 3690±71,5 117.5 9 100 п/о AUC_0-24ч 68,3±10,8 2,9±0,11 7140±1357 Н/Д Н/Д 13519±2177

[00130] Как отражено в таблицах 4A-D, (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол имеют подходящие фармакокинетические профили для разработки лекарственного средства. В частности, (3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол, (3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол и (3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол демонстрируют высокую оральную биодоступность (приблизительно 50-100%) и пропорциональность доле, период полужизни 1,0-4,0 ч. и объем распределения, предполагающий достаточное проникновение в периферические ткани.

Изобретение относится к производным пиперидина, перечисленным в формуле изобретения, обладающим свойством усиления активности глюкоцереброзидазы, фармацевтической композиции на их основе, способу лечения с их использованием и набору для лечения болезни Паркинсона. 4 н. и 12 з.п. ф-лы, 4 табл.

1. Соединение, выбранное из следующих:

(3R,4R,5S)-5-(дифторметил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-(1-фторэтил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол

(3R,4R,5S)-5-бензилпиперидин-3,4-диол,
или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п. 1, которое представляет собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

3. Соединение по п. 1, которое представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

4. Соединение по п. 1, которое представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

5. Соединение по п. 1, которое представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

6. Соединение по п. 1, которое представляет собой:

или его фармацевтически приемлемую соль.

7. Соединение по п. 1, которое представляет собой (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол, или его фармацевтически приемлемую соль.

8. Фармацевтическая композиция, которая усиливает активность глюкоцереброзидазы, содержащая соединение по п. 1 и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.

9. Способ лечения болезни Паркинсона у пациента с диагнозом этого заболевания, который включает введение нуждающемуся в лечении пациенту эффективного количества соединения по п. 1.

10. Способ по п. 9, где соединение представляет собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

11. Способ по п. 9, где соединение представляет собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

12. Способ по п. 9, где соединение представляет собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

13. Способ по п. 9, где соединение представляет собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

14. Способ по п. 9, где соединение представляет собой

или его фармацевтически приемлемую соль.

15. Способ по п. 9, где соединение представляет собой (3R,4R,5S)-5-((R)-1-фторпропил)пиперидин-3,4-диол, или его фармацевтически приемлемую соль.

16. Набор для усиления активности глюкоцереброзидазы, включающий:
- контейнер, содержащий эффективное количество соединения по п. 1, или его фармацевтически приемлемую соль, или любую комбинацию двух или нескольких из них; и
- инструкции по его применению для лечения болезни Паркинсона.