СИНЕРГИЧЕСКИЕ СЕЛЕНОПЕПТИДНЫЕ ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ЗАЩИТЫ ДЕРМАЛЬНЫХ СОСОЧКОВЫХ КЛЕТОК Российский патент 2017 года по МПК A61K38/00 A61K8/44 A61K8/64 A61K8/97 A61Q17/00 A61P17/16 

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к защитным композициям для дермальных сосочковых клеток. Более конкретно настоящее изобретение относится к препаратам, содержащим синергические композиции, включающие (а) β-глюкогаллин или β-глюкогаллин и галлаты, (б) концентрат жидкого эндосперма кокоса (Cocos nucifera) и (с) селенопептиды, для защиты дермальных сосочковых клеток.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Дермальные сосочковые клетки представляют собой мезенхимальные клетки кожи, не только регулирующие развитие стержня волоса, но также составляющие резервуар линий мультипотентных стволовых клеток (Driskell et al., 2011). Эти линии стволовых клеток функционируют в качестве "тканевых инженеров" и представляют собой ценные ресурсы в регенеративной медицине. Дермальные сосочковые клетки, экспрессирующие маркерные гены стволовых клеток Sox 2 (фактор транскрипции, незаменимый для плюрипотентного фенотипа стволовых клеток), проявляют способность к самообновлению, индуцируют образование стержня волоса и дифференцируются до фибробластов, способствующих формированию внеклеточного матрикса кожи. Действительно, дермальный сосочек играет жизненно важную роль в замене стареющих фибробластов здоровыми, поддерживая за счет этого численность фибробластов. В недавних исследованиях (Arnold I. Caplan, Diego Correa. The MSC: An Injury Drugstore. Cell Stem Cell, Volume 9, Issue 1, 11-15, 8 July 2011 DOI: 10.1016/j.stem.2011.06.008) также показана роль мезенхимальных стволовых клеток (МСК) как сильных "врожденных антител" в отношении их способности к следующим действиям: (i) к умеренным нежелательным воспалительным ответам, следующим за повреждением ткани, что, таким образом, способствует благоприятным условиям для спонтанной репарации ткани; и (b) к продуцированию белков, убивающих бактерии, подобные Escherichia coli и Staphylococcus aureus, и, следовательно, к усилению выведения микроорганизмов из систем организма. В свете упомянутых выше разнообразных функций дермальных сосочковых клеток важно поддерживать здоровое состояние этих клеток в отношении их численности и морфологии, а также защищать их свойства в качестве стволовых клеток.

Способность селенопептидов гамма-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина и γ-L-глутамил-L-селенометионина к увеличению фактора роста эндотелия сосудов (VEGF - vascular endothelial growth factor) и его 5-альфа-редуктазной активности было документировано в US 8003614 (Majeed et al.). Авторами настоящего изобретения неожиданно отмечено, что селенопептиды, хотя они сами по себе являются слабыми защитниками дермальных сосочковых клеток, синергическим путем усиливают защитную способность препаратов в отношении дермального сосочка, раскрытых авторами Majeed et al. в US 20110033565, где данные препараты содержат композиции, включающие (а) 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) или β-глюкогаллин и галлаты, и (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera.

В результате синергические препараты селенопептида по настоящему изобретению находят значительное применение при поддержании морфологически здоровых дермальных сосочковых клеток при достаточной численности и, следовательно, при защите их свойств стволовых клеток.

Основная задача настоящего изобретения состоит в разработке защитных препаратов, содержащих синергические композиции, включающие следующие компоненты: (а) β-глюкогаллин или β-глюкогаллин и галлаты, (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera и (с) селенопептиды, защищающие дермальные сосочковые клетки от стрессовых воздействий, а также связанных с ними применений.

Настоящее изобретение выполняет поставленную задачу и обеспечивает дополнительные связанные с ней преимущества.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении раскрыты препараты, содержащие синергические композиции, включающие следующие компоненты: (а) β-глюкогаллин или β-глюкогаллин и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera и (с) селенопептиды для защиты дермальных сосочковых клеток от стрессовых воздействий.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

На фиг. 1 показаны микрофотографии клеток, обработанных 0,5% концентратом жидкого эндосперма Cocos nucifera, причем указанный концентрат содержит не менее 40 масс. % всех растворенных твердых веществ, которые сами по себе не обладают способностью защищать дермальные сосочковые клетки.

На фиг. 2 показаны микрофотографии облученных ультрафиолетом В (УФ-В) дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-1 (композиции, содержащие по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) по сравнению с облученными УФ-В, но необработанными клетками. РС-1 неспособен защитить дермальные сосочковые клетки от УФ-В в дозе выше 0,43 Дж/см². Повреждение клеток, обработанных РС-1, происходит при дозе УФ-В 0,648 Дж/см² (показано как часть фиг. 4).

На фиг. 3 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-2 (композиции, содержащие по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов) по сравнению с облученными УФ-В, но необработанными клетками. РС-2 неспособен защитить дермальные сосочковые клетки от УФ-В в дозе выше 0,43 Дж/см². Повреждение клеток, обработанных РС-2, происходит при дозе УФ-В 0,648 Дж/см² (показано как часть фиг. 5).

На фиг. 4 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-3 (РС-1+0,5% концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом концентрат содержит не менее 40 масс. % всех растворенных твердых веществ). РС-3 защищает дермальные сосочковые клетки от воздействия УФ-В только вплоть до 0,648 Дж/см², и не защищает при 0,8 Дж/см². Гибель клеток при 0,8 Дж/см² показана на фигуре.

На фиг. 5 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-4 (РС-2+0,5% концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом концентрат содержит не менее 40 масс. % всех растворенных твердых веществ). РС-4 защищает дермальные сосочковые клетки от воздействия УФ-В только вплоть до 0,648 Дж/см², и не защищает при 0,8 Дж/см². Гибель клеток при 0,8 Дж/см² показана на фигуре.

На фиг. 6 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-5 (РС-3+0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина). РС-5 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток от воздействия УФ-В при 0,8 Дж/см².

На фиг. 7 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-6 (РС-3+0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина). РС-6 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток от воздействия УФ-В при 1,0 Дж/см².

На фиг. 8 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-7 (РС-4+0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина). РС-7 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток от воздействия облучения УФ-В при 0,8 Дж/см².

На фиг. 9 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-8 (РС-4+0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина). РС-8 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток от воздействия очень высоких доз облучения УФ-В при 1,0 Дж/см².

На фиг. 10 показаны микрофотографии облученных УФ-В дермальных сосочковых клеток, обработанных защитным препаратом РС-9 (0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина (фиг. 10а) или 0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина (фиг. 10b)). РС-9 не обеспечивает защиту дермальных сосочковых клеток, подвергнутых воздействию даже очень низкого уровня облучения УФ-В (УФ-В при 0,432 Дж/см²).

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к защитному препарату для дермальных сосочковых клеток, содержащему синергическую композицию, где указанная композиция включает 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин), концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera и селенопептиды.

В другом воплощении изобретения синергическая композиция содержит по меньшей мере 10 масс. % 1-О-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина).

В другом воплощении изобретения синергическая композиция содержит 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат содержит не менее 40 масс. % всех растворенных твердых веществ.

Еще в одном воплощении изобретения синергическая композиция содержит 0,001 масс. % селенопептидов.

Еще в одном воплощении изобретения селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин.

Еще в одном воплощении изобретения селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-L-селенометионин.

Настоящее изобретение относится к защитному препарату для дермальных сосочковых клеток, содержащему синергическую композицию, где указанная композиция включает 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и галлаты, концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera и селенопептиды.

Еще в одном воплощении изобретения синергическая композиция содержит по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов, включая 1,4-лактон-5-O-галлат муциновой кислоты, 2-O-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту.

Еще в одном воплощении изобретения синергическая композиция содержит 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат содержит не менее 40 масс. % всех растворенных твердых веществ.

Еще в одном воплощении изобретения синергическая композиция содержит 0,001 масс. % селенопептидов.

Еще в одном воплощении изобретения селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин.

Еще в одном воплощении изобретения селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-L-селенометионин.

Настоящее изобретение также относится к способу повышения устойчивости дермальных сосочковых клеток к стрессовым воздействиям, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитных препаратов, заявленных в пп. 1-7.

Настоящее изобретение также относится к способу поддержания морфологии и численности дермальных сосочковых клеток под влиянием стрессовых воздействий, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитных препаратов, заявленных в пп. 1-7.

В другом воплощении изобретения дермальные сосочковые клетки включают дермальные стволовые/прогениторные клетки.

В наиболее предпочтительном воплощении настоящее изобретение относится к следующим синергическим препаратам селенопептида для защиты дермальных сосочковых клеток:

(А) РС-5, содержащему синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин); (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат содержит по меньшей мере 40 масс. % всех растворенных твердых веществ, и (с) γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин. В конкретных воплощениях изобретения, указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-О-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина); (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат содержит по меньшей мере 40 масс. % растворенных твердых веществ; и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина.

(B) РС-6, содержащему синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин); (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат содержит по меньшей мере 40 масс. % растворенных твердых веществ, и (с) γ-L-глутамил-L-селенометионин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина); (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат содержит по меньшей мере 40 масс. % растворенных твердых веществ; и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина.

(C) РС-7, содержащему синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат включает по меньшей мере 40 масс. % растворенных твердых веществ; и (с) γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-О-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов, включая 1,4-лактон-5-O-галлат муциновой кислоты, 2-О-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-O-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту; (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ, и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина.

(D) РС-8, содержащему синергическую композицию, где указанные композиции содержат (а) 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) γ-L-глутамил-L-селенометионин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов, включая 1,4-лактон-5-O-галлат муциновой кислоты, 2-О-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту; (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина.

В других предпочтительных воплощениях изобретения другие дипептиды, встречающиеся в качестве комбинаций с другими аминокислотами, можно применять в описанных выше синергических защитных препаратах для дермальных сосочковых клеток.

В альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу повышения устойчивости дермальных сосочковых клеток к стрессовым воздействиям, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-5, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин); (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ, и (с) γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина); (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин.

В другом альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу повышения устойчивости дермальных сосочковых клеток к стрессовым воздействиям, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-6, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин); (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ, и (с) γ-L-глутамил-L-селенометионин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина); (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина.

В другом альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу повышения устойчивости дермальных сосочковых клеток к стрессовым воздействиям, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-7, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов, включая 1,4-лактон-5-O-галлат муциновой кислоты, 2-О-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту; (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина.

В другом альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу повышения устойчивости дермальных сосочковых клеток к стрессовым воздействиям, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-8, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) γ-L-глутамил-L-селенометионин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов, включая 1,4-лактон-5-O-галлат муциновой кислоты, 2-О-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту; (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ, и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина.

Еще в одном альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу поддержания морфологии и численности дермальных сосочковых клеток под влиянием стрессовых воздействий, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-5, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин); (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ, и (с) γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глкжозы (β-глюкогаллина); (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина.

Еще в одном альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу поддержания морфологии и численности дермальных сосочковых клеток под влиянием стрессовых воздействий, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-6, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин); (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ, и (с) γ-L-глутамил-L-селенометионин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина); (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина.

В другом альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу поддержания морфологии и численности дермальных сосочковых клеток под влиянием стрессовых воздействий, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-7, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) β-глюкогаллин и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин. В конкретных воплощениях изобретения указанные композиции содержат (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов, включая 1,4-лактон-5-O-галлат муциновой кислоты, 2-О-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту; (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина.

В другом альтернативном воплощении настоящее изобретение также относится к способу поддержания морфологии и численности дермальных сосочковых клеток под влиянием стрессовых воздействий, включающему стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и защитного препарата РС-8, содержащего синергические композиции, где указанные композиции содержат (а) β-глюкогаллин и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ; и (с) γ-L-глутамил-L-селенометионин. В конкретных воплощениях изобретения указанная композиция содержит (а) по меньшей мере 10 масс. % 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и 50 и более масс. % галлатов, включая 1,4-лактон-5-O-галлат муциновой кислоты, 2-О-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту; (b) 0,5 масс. % концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом указанный концентрат включает по меньшей мере 40% растворенных твердых веществ, и (с) 0,001 масс. % γ-L-глутамил-L-селенометионина.

В более конкретном воплощении дермальные сосочковые клетки, упомянутые в данном описании выше, включают дермальные стволовые/прогениторные клетки.

ПРИМЕР I

Общий метод

Дермальные сосочковые клетки человека высеивают на 96-луночный прозрачный планшет с плоским дном при плотности посева 5000 клеток на лунку. Через 24 часа монослой клеток подвергают дозам облучения УФ-В в диапазоне от 0,0072 Дж/см² до 1,0 Дж/см² (стрессовое воздействие) с обработкой образца или без нее (защитными препаратами). После облучения клетки инкубируют в СО₂ инкубаторе в течение 48 часов и проявляют с помощью методов окрашивания на основании поглощения нейтрального красного (NRU - Neutral Red Uptake) для анализа жизнеспособности клеток. Коэффициент поглощения, обеспечиваемый жизнеспособными клетками, считывается на 492 нм на планшет-ридере.

Тестируемый образец: 0,5% концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат включает не менее 40 масс. % всех растворенных твердых веществ.

На фиг. 1 показано, что 0,5% концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera, где указанный концентрат содержит не менее 40 масс. % всех растворенных твердых веществ, отдельно неспособен защищать дермальные сосочковые клетки при уровнях облучения УФ-В 0,43 Дж/см² и 0,648 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-1 в сравнении с облученными УФ-В необработанными клетками.

На фиг. 2 показано, что РС-1 сам по себе способен защитить дермальные сосочковые клетки от уровней облучения УФ-В только вплоть до 0,43 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-2 в сравнении с облученными УФ-В необработанными клетками.

На фиг. 3 показано, что РС-2 сам по себе способен защитить дермальные сосочковые клетки от уровней облучения УФ-В только вплоть до 0,43 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-3.

На фиг. 4 показано, что РС-3 способен защитить дермальные сосочковые клетки от уровней облучения УФ-В вплоть до 0,648 Дж/см², и гибель обработанных РС-3 дермальных сосочковых клеток наблюдают при уровне облучения УФ-В 0,8 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-4.

На фиг. 5 показано, что РС-4 способен защитить дермальные сосочковые клетки от уровней облучения УФ-В вплоть до 0,648 Дж/см², и гибель обработанных РС-4 дермальных сосочковых клеток наблюдают при уровне облучения УФ-В 0,8 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-9.

На фиг. 10 показано, что ни γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин (фиг. 10а), ни γ-L-глутамил-L-селенометионин (фиг. 10b) сами по себе неспособны защитить дермальные сосочковые клетки даже при низких уровнях облучения УФ-В (0,432 Дж/см²).

Тестируемый образец: РС-5.

На фиг. 6 показано, что РС-5 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток, подвергнутых облучению УФ-В при 0,8 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-6.

На фиг. 7 показано, что РС-6 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток, подвергнутых облучению УФ-В при 1,0 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-7.

На фиг. 8 показано, что РС-7 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток, подвергнутых облучению УФ-В при 0,8 Дж/см².

Тестируемый образец: РС-8.

На фиг. 9 показано, что РС-8 обеспечивает значимую (95%) защиту дермальных сосочковых клеток, облученных УФ-В при уровнях облучения 1,0 Дж/см².

Эффект различных образцов, используемых в изобретении, представлен ниже в виде таблицы 1.

На основании этих результатов очевидно следующее:

A. Селенопептиды и концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera по отдельности не защищают дермальные сосочковые клетки даже при низких уровнях облучения УФ-В (0,432 Дж/см²).

B. β-глюкогаллин или β-глюкогаллин и галлаты способны обеспечить защиту дермальных сосочковых клеток при уровне облучения УФ-В только вплоть до 0,432 Дж/см².

C. Хотя комбинация концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera и β-глюкогаллина или β-глюкогаллина и галлатов обеспечивает защиту дермальных сосочковых клеток от уровней облучения УФ-В вплоть до 0,648 Дж/см², указанная защита не распространяется дальше этого уровня. Скорее всего, уровень устойчивости тестируемого стрессового воздействия составляет 0,648 Дж/см².

D. Тем не менее, комбинация (а) β-глюкогаллина или β-глюкогаллина и галлатов, (b) концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera и (с) селенопептидов распространяет защиту дермальных сосочковых клеток до уровней облучения УФ-В даже выше 0,648 Дж/см^-2, в частности от 0,8 до 1,0 Дж/см². Селенопептиды, хотя сами по себе являются слабыми защитниками дермальных сосочковых клеток, синергическим путем усиливают защитную способность в отношении дермальных сосочковых клеток препаратов, содержащих (а) 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) или 1-O-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и галлаты и (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera. Таким образом, неожиданно улучшенная устойчивость дермальных сосочковых клеток к стрессовым воздействиям, придаваемая синергической комбинацией (а) 1-О-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) или 1-O-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина) и галлатов, (b) концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera и (с) селенопептидов, очевидна из настоящего изобретения. Композиция по настоящему изобретению проявляет лучшую активность по сравнению с отдельными компонентами или другими комбинациями.

Понятно, что, хотя настоящее изобретение раскрыто со ссылкой на конкретные предпочтительные примеры, для специалистов, обладающих обычной квалификацией в данной области техники, возможно проведение модификаций и изменений без отклонения от сущности изобретения. Соответственно, приведенное выше описание следует интерпретировать только как иллюстративное и не в ограничивающем смысле. Настоящее изобретение ограничено только объемом прилагаемой формулы изобретения, также включающей объем эквивалентов.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к клеточным технологиям, и может быть использовано для защиты дермальных сосочковых клеток от облучения ультрафиолетом В (УФ-В). Синергические композиции содержат в определенных соотношениях: (а) 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) или 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и галлаты; (b) концентрат жидкого эндосперма Cocos nucifera и (с) селенопептиды, выбранные из γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина или γ-L-глутамил-L-селенометионина. Настоящее изобретение обеспечивает эффективную защиту дермальных сосочковых клеток от УФ-В облучения. 6 н. и 6 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл., 1 пр.

1. Композиция для защиты дермальных сосочковых клеток от облучения ультрафиолетом В (УФ-В), содержащая по меньшей мере 10 мас.% 1-О-галлоил-β-D-глюкозы (β-глюкогаллина), 0,5 мас.% концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом концентрат содержит не менее 40 мас.% всех растворенных твердых веществ, и 0,001 мас.% селенопептидов, выбранных из γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина или γ-L-глутамил-L-селенометионина.

2. Композиция по п. 1, где селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин.

3. Композиция по п. 1, где селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-L-селенометионин.

4. Композиция для защиты дермальных сосочковых клеток от облучения ультрафиолетом В (УФ-В), содержащая по меньшей мере 10 мас.% 1-О-галлоил-β-D-глюкозу (β-глюкогаллин) и 50 и более мас.% галлатов, включая 1,4-лактон-5-О-галлат муциновой кислоты, 2-О-галлат муциновой кислоты, 6-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты, 1-метиловый эфир 2-О-галлат муциновой кислоты и эллаговую кислоту, 0,5 мас.% концентрата жидкого эндосперма Cocos nucifera, при этом концентрат содержит не менее 40 мас.% всех растворенных твердых веществ, и 0,001 мас.% селенопептидов, выбранных из γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеина или γ-L-глутамил-L-селенометионина.

5. Композиция по п. 4, где селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-селенометил-L-селеноцистеин.

6. Композиция по п. 4, где селенопептид представляет собой γ-L-глутамил-L-селенометионин.

7. Способ повышения устойчивости дермальных сосочковых клеток к облучению УФ-В, включающий стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и композиции по п. 1.

8. Способ поддержания морфологии и численности дермальных сосочковых клеток под влиянием облучения УФ-В, включающий стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и композиции по п. 1.

9. Способ по п. 7 или 8, где дермальные сосочковые клетки включают дермальные стволовые/прогениторные клетки.

10. Способ повышения устойчивости дермальных сосочковых клеток к облучению УФ-В, включающий стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и композиции по п. 4.

11. Способ поддержания морфологии и численности дермальных сосочковых клеток под влиянием облучения УФ-В, включающий стадию приведения в контакт дермальных сосочковых клеток и композиции по п. 4.

12. Способ по п. 10 или 11, где дермальные сосочковые клетки включают дермальные стволовые/прогениторные клетки.