СПОСОБ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ВИРУСНОГО ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА Российский патент 2017 года по МПК A61K31/195 A61K31/4164 A61K33/00 A61K33/04 A61K33/38 A61P35/02 

Предлагаемое техническое решение относится к области ветеринарии, в частности к способам профилактики и терапии вирусных лейкозов крупного рогатого скота (КРС), и может быть использовано в целях химиотерапии.

Известен способ профилактики и лечения лейкоза крупного рогатого скота (Патент РФ №2212887, 2003 г.). В способе дополнительно вводят йодированную поваренную соль, а в качестве лекарственного средства используют метронидазол, при этом метронидазол и йодированную поваренную соль вводят курсами один раз в сутки в течение 30 дней с интервалом в 6 месяцев. Препарат вводят животным вместе с кормом, поскольку он не растворим и не пригоден для внутривенного введения, соответственно процесс лечения им весьма продолжителен и недостаточно эффективен, особенно для лечения продуктивных животных. Способ используют преимущественно как средство профилактики заболевания молодняка КРС.

Известен способ профилактики и ликвидации лейкоза крупного рогатого скота (Патент РФ №2048093, 1992 г.), включающий периодическое серологическое исследование с последующим выводом малопродуктивных серопозитивных животных каждые 3-8 месяцев и вводом серонегативных животных, которые подвергаются контролю на лейкоз через 12 месяцев. Однако в указанном способе ликвидация лейкоза осуществляется на основе выбраковки стада без химиотерапевтических лечебно-профилактических воздействий на лейкозный процесс, что является неэкономичным и дорогостоящим подходом к ликвидации лейкоза КРС.

Известен также способ лечения лейкозов КРС на основе лекарственного препарата «Витасорб», включающего действующее вещество на основе соединений сурьмы, вводимое внутривенно, что обеспечивает высокую концентрацию препарата в крови в течение 1 часа в дозах 100-200 мг/кг. Однако он вызывает побочное токсическое действие.

За прототип взята заявка (№2009123832/10, 23.06.2009) на способ и фармацевтическую композицию для терапии и профилактики вирусного лейкоза КРС. Композиция содержит соль серебра, гексаметилентетрамин, тиосульфат натрия, а также транквилизатор рометар, вводимые в виде курса внутривенно, из 2-4 инъекций через 48-72 часа. Однако при введении композиции отмечается местнораздражающее действие. Композиция не хранится более 2 месяцев (с потерей активности), кроме того один из компонентов - гексаметилентетрамин в настоящее время исключен из реестра фармакопейных ветеринарных препаратов, что является существенным недостатком данной композиции.

Задачей является создание способа лечения лейкоза КРС на основе фармацевтической композиции, обладающей более высокой эффективностью и увеличенным сроком хранения.

Поставленная задача решается применением способа лечения вирусного лейкоза КРС на основе фармацевтической композиции, содержащей соль серебра, соль лития, имидазол, тиосульфат натрия и, дополнительно, нестероидное противовоспалительное средство, при этом полученную композицию вводят внутривенно в виде курса. Курс лечения - 5 инъекций в дозе 1 мг/кг массы животного, с интервалом между инъекциями в 96 часов, с последующим гематологическим контролем.

Фармацевтическая композиция для лечения вирусного лейкоза КРС содержит азотнокислое серебро, аспарагинат лития, имидазол, тиосульфат натрия, а также нестероидное противовоспалительное средство - диклофенак в следующем соотношении компонентов (мас.%):

азотнокислое серебро 20 аспарагинат лития 20 имидазол 20 тиосульфат натрия 20 диклофенак 20

Реализация заявляемого изобретения может быть проиллюстрирована на нижеперечисленных примерах.

Пример 1. Для получения композиции используют водный 0,5% раствор, включающий азотнокислое серебро, имидазол, аспарагинат лития, тиосульфат натрия и препарат диклофенак в указанном соотношении компонентов. Композиция и способ лечения вирусного лейкоза КРС апробировались на животных (КРС) в хозяйствах АПК Тульской области. Был проведен курс терапии вирусного лейкоза КРС, введение препарата осуществлялось в яремную вену. Численность лейкозных животных в эксперименте - 15 голов КРС черно-пестрой породы с РИД-положительной реакцией и гематологически подтвержденным диагнозом лейкоза. В качестве контрольной группы использовалось 15 гематологически и серологически здоровых голов КРС черно-пестрой породы. Схема лечения животных опытной группы включала курс из 5 инъекций 0,5% водного раствора заявляемой композиции с интервалом в 96 часов в дозе 1 мг/кг массы животного. Гематологический контроль проводят до и после лечения. Результаты лечения по предложенной схеме представлены в таблице 1, где показано содержание лейкоцитов в крови КРС до и после лечения по заявленной схеме. Как видно из таблицы 1, после курсового введения композиции по предложенной схеме наблюдалось выраженное терапевтическое действие, сопровождающееся достоверным снижением общего количества лейкоцитов с 18,1±2,2 (на 60%) до уровня в 7,3±0,9 тыс./мкл, (Р<0,01), нормализацией гематологического состава и гибелью злокачественных клеток, а также улучшением общего клинического состояния леченных животных и отсутствием воспалительных и аллергических реакций. Полученные результаты сравнивались с гематологическими показателями группы здоровых животных, общее количество лейкоцитов у которых составляло в среднем 7,8 тыс./мкл, существенно от них не отличаясь (таблица 1). Сравнение с прототипом показано на фигуре 1, где графически показано общее количество лейкоцитов в группах животных с лейкозом КРС до и после курса лечения заявленной композицией и прототипом. Как видно из данных фигуры 1, заявляемая композиция проявила более выраженный противолейкозный эффект и привела к нормализации гематологических показателей. Предложенный способ лечения в опытной группе приводит к нормализации состава крови с исчезновением лейкозных клеток при отсутствии побочного токсического действия.

Пример 2. Проведено сравнение антибластической противолейкозной активности заявляемой композиции и прототипа. Антибластический эффект препаратов изучен на культуре клеток линии К-562, культивируемых в среде RPMI-1640 с 10% эмбриональной телячьей сывороткой (2×10⁵ клеток/мл) по окраске трипановым синим через 48 часов инкубации. В таблице 2 показана цитотоксическая противолейкозная активность заявляемой композиции на клетках линии К-562, через 48 часов инкубации. Из материалов таблицы 2 видно, что заявляемая композиция оказывает выраженное цитотоксическое действие на бластные клетки, вызывая их полное подавление, в отличие от прототипа. После шестимесячного хранения препаратов при температуре +4°С отмечено образование осадка, что непригодно для парентерального введения, и снижение активности образца прототипа. Заявляемая композиция сохраняет стабильность в растворе и активность на протяжении 6 месяцев. Результаты контрольных испытаний свидетельствуют об эффективности предложенного способа лечения и наличии выраженной противолейкозной, антибластической активности у заявленной композиции.

Технический результат - повышение эффективности лечения вирусного лейкоза КРС за счет курсового применения фармацевтической композиции, обладающей антибластической активностью и увеличенным сроком хранения.

Заявленная группа изобретений относится к области ветеринарии и предназначена для лечения вирусных лейкозов КРС. Заявленная фармацевтическая композиция для лечения вирусного лейкоза крупного рогатого скота, содержащая азотнокислое серебро, аспарагинат лития, имидазол, тиосульфат натрия и нестероидное противовоспалительное средство - диклофенак при следующем соотношении компонентов, мас.%: азотнокислое серебро 20, аспарагинат лития 20, имидазол 20, тиосульфат натрия 20, диклофенак 20. Способ лечения вирусного лейкоза крупного рогатого скота включает введение заявленной фармацевтической композиции в виде курса из 5 внутривенных инъекций в дозе 1,0 мг/кг массы животного с интервалом в 96 часов с последующим гематологическим контролем. Использование заявленной группы высокоэффективно для лечения вирусного лейкоза крупного рогатого скота. 2 н.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

1. Фармацевтическая композиция для лечения вирусного лейкоза крупного рогатого скота, содержащая азотнокислое серебро, аспарагинат лития, имидазол, тиосульфат натрия и нестероидное противовоспалительное средство - диклофенак при следующем соотношении компонентов, мас. %:

азотнокислое серебро 20 аспарагинат лития 20 имидазол 20 тиосульфат натрия 20 диклофенак 20

2. Способ лечения вирусного лейкоза крупного рогатого скота, включающий введение фармацевтической композиции по п. 1 в виде курса из 5 внутривенных инъекций в дозе 1,0 мг/кг массы животного с интервалом в 96 часов с последующим гематологическим контролем.