Способ прогнозирования спаечной болезни у детей, перенесших оперативные вмешательства на органах брюшной полости Российский патент 2017 года по МПК G01N33/48 

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике и может быть использовано для ранней диагностики спаечного процесса с целью проведения своевременной и целенаправленной терапии.

Известны способы ранней диагностики спаечного процесса по активности уровня интерлейкина-1 в сыворотке крови и альфа-фактора некроза опухоли. Повышение уровней этих показателей в послеоперационном периоде указывает на образование послеоперационных спаек (Saba A., Godziachvili V., Mavani A., Silva Y. Serum levels of interleukin 1 and tumor necrosis factor alfa correlate with peritoneal adhesion grades in humans after mayor abdominal surgery. Am-Surg. 1998, Aug.; 64 (8): 734-6; discussion 737; USA).

Однако данные способы имеют ограничения, связанные с возможным течением воспалительного процесса другой локализации (тонзиллит, отит, сочетанные травмы других органов или тканей и др.); а также индивидуальной реакцией организма на вводимые лекарственные препараты, что снижает точность прогноза.

Наиболее близким к заявленному способу является способ прогнозирования спаечной болезни у детей, перенесших оперативные вмешательства на органах брюшной полости (патент РФ 2269133, МПК G01 33/53, 2006), включающий исследование жидкостной среды организма. Сущность способа состоит в том, что из лимфоцитов венозной крови выделяют ДНК, проводят генотипирование полиморфизма NAT2 методом полимеразной цепной реакции и при обнаружении одного из генотипов NAT2 прогнозируют риск развития спаечной болезни брюшины.

Однако данный способ имеет ряд недостатков, связанных с высокой дороговизной исследования, трудоемкостью, необходимостью высокой квалификации персонала, а взятие материала для исследования - дополнительное инвазивное вмешательство, нежелательное для детей.

Задачей изобретения являлось устранение указанных недостатков, повышение достоверности прогноза, снижение трудоемкости, высокая экономичность исследований и использование неинвазивного биологического материала. Кроме того, учитывая необходимость хирургического лечения острых состояний у детей, появилась бы возможность осуществить исследование в медицинских учреждениях любой мощности и позволить назначить раннюю и эффективную противоспаечную терапию.

Для этого в способе прогнозирования спаечной болезни у детей, перенесших оперативные вмешательства на органах брюшной полости, включающем исследование жидкостной среды организма, предложено в качестве жидкостной среды организма исследовать перитонеальный экссудат. При этом забор пробы осуществляют через 10-15 часов после операции, термостатируют ее в течение 30-40 минут при 37°C, после чего берут каплю надосадочной части экссудата, проводят микроскопическое исследование методом клиновидной дегидратации и при обнаружении языковых полей в краевой зоне фации прогнозируют спаечную болезнь.

В предлагаемом способе исходят из понятия об измененной реактивности организма ребенка при повреждении брюшины и создания условий, способствующих развитию спаечного процесса. Так, в условиях гипоксии, измененный в результате воспалительно-дистрофического процесса белок брюшины приобретает свойства антигена, на который в организме вырабатываются аутоантитела. При попадании в сенсибилизированный организм во время операции разрешающего фактора в брюшной полости возникают сращения как проявление реакции гиперчувствительности замедленного типа с асептическим воспалением и усиленной экссудацией в брюшную полость. Компоненты этой воспалительной реакции поступают в перитонеальный экссудат, которые проявляются в виде морфологического маркера воспаления при переводе экссудата в твердое состояние методом клиновидной дегидратации. То есть обнаружение морфологических признаков активности воспалительного процесса в перитонеальном экссудате характеризует наличие аутоиммунного компонента, который в условиях гипоксии способствует усиленной экссудации, приводящей к склеиванию и сращению брюшины с близлежащими органами.

Необходимость термостатирования выделенного из дренажа перитонеального экссудата в условиях физиологического температурного режима позволяет бережно, без разрыва волокнистых структур (которое имело бы место при центрифугировании), разделить его на две части: на насыщенный серозно-геморрагический экссудат в нижней части пробирки и на более светлый экссудат - в верхней части. Воспалительная реакция в виде языковых структур (полей) в фации экссудата может быть зафиксирована только при отсутствии в нем серозно-геморрагических масс.

На фиг. 1 представлен фрагмент фации перитонеального экссудата больного с аппендикулярным перитонитом в раннем послеоперационном периоде, а на фиг. 2 - в позднем послеоперационном периоде больного К. (пример 1). На фиг. 3 - фрагмент фации перитонеального экссудата больного с аппендикулярным перитонитом в раннем послеоперационном периоде, а на фиг. 4 - в позднем послеоперационном периоде больной Ф. (пример 2).

Способ осуществляется следующим образом.

Через 10-15 часов послеоперационного периода на органах брюшной полости у ребенка забирают 1 мл экссудата в пробирку из полимерной трубки дренажа брюшной полости. Далее экссудат помещают в термостат при 37°C на 30-40 минут. Затем из верхней части пробирки с экссудатом забирают каплю (20 мкл) и помещают ее на поверхность предметного стекла, проводят исследование методом клиновидной дегидратации. Спустя 16-18 часов дегидратации при температуре 25°C и относительной влажности 55-60%, фацию микроскопируют и при наличии в краевой зоне фации языковых полей прогнозируют спаечную болезнь.

Пример 1.

Больной К., 12 лет, поступил с клинической картиной острого живота, перитонита на 4-е сутки от начала заболевания. Диагноз: гангренозно-перфоративный аппендицит, разлитой перитонит. Через 3 часа предоперационной подготовки больной был прооперирован. Перитонеальный экссудат у больного взят через 10 часов после операции. Проведено исследование по предлагаемому способу.

В краевой зоне фации полученного экссудата обнаружены языковые поля в виде пламенеющих структур (фиг. 1, стрелка 1).

Заключение: прогнозируется спаечная болезнь.

Для подтверждения сделанного прогноза на пятый день послеоперационного периода у больного вновь был взят экссудат и проведено исследование заявляемым способом. При этом было установлено, что в фации экссудата на фоне «расщепленных» языковых полей (фиг. 2, стрелка 1) в некоторых отдельностях определялась особая субстанция сероватого цвета - так называемая «клейковина» (фиг. 2, стрелка 2), что свидетельствует о возникновении спаечного процесса (Муканов М.У. Острая спаечная кишечная непроходимость, обусловленная висцеропариетальными спайками. Автореф. диссерт. на соиск. уч. степени докт. мед. наук, М., 1997, 45 стр.).

Проведение консервативной противоспаечной терапии больному начато на 6 сутки послеоперационного периода, однако на девятые сутки у ребенка были выявлены ультрасонографические признаки спаечной болезни.

Больному был выполнен лапароскопический адгеолизис в связи с неэффективностью консервативной терапии.

Пример 2.

Больная Ф., 11 лет, поступила с клинической картиной острого живота, перитонита на 3-е сутки от начала заболевания. Диагноз: гангренозно-перфоративный аппендицит, разлитой перитонит. Через 2 часа предоперационной подготовки больная был прооперирована.

Перитонеальный экссудат у больной был взят через 15 часов после операции. В краевой зоне фации полученного экссудата определялись рыхлые массы, расположенные в виде грубых клубков (фибриновые отложения, фиг. 3, стрелка 3). Фрагменты языковых полей не обнаружены.

Заключение: спаечная болезнь не прогнозируется.

Для подтверждения сделанного прогноза на пятый день послеоперационного периода у больной вновь был взят экссудат и проведено исследование заявляемым способом. При этом было установлено, что в краевой зоне фации определяются нежно-волокнистые кольца (фиг. 4, стрелка 4), что свидетельствует о лизисе фибринозных отложений. Фрагменты языковых полей не обнаружены.

Послеоперационный период у больной протекал без осложнений. Ультрасонографические признаки спаечной болезни отсутствовали.

С помощью предлагаемого способа исследован перитонеальный экссудат у 46 детей с аппендикулярным перитонитом. У 11 из 46 детей дан прогноз спаечной болезни. Курс противоспаечной терапии этим больным начинали в более ранние сроки послеоперационного периода. У 7 детей из 11 на 10-12 дни после операции были выявлены ультрасонографические признаки спаечной болезни. Однако консервативная терапия оказалась неэффективной у 4 из 11. Этим больным было своевременно проведено дополнительное хирургическое вмешательство - лапароскопический адгеолизис. У остальных 35 детей, которым не был дан прогноз спаечной болезни, лечение протекало без осложнений до полного выздоровления.

Предлагаемый способ является высокоэкономичным, доступным для постановки в лабораториях учреждений здравоохранения любой мощности и позволяет быстро и эффективно выявлять детей с высоким риском по развитию спаечной болезни для раннего и эффективного назначения противоспаечной терапии.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для ранней диагностики спаечного процесса у детей. Проводят исследование перитонеального экссудата. Забор пробы осуществляют через 10-15 часов после операции, термостатируют ее в течение 30-40 минут при 37°C, после чего берут каплю надосадочной части экссудата, проводят микроскопическое исследование методом клиновидной дегидратации, и при обнаружении языковых полей в краевой зоне фации прогнозируют спаечную болезнь. Способ позволяет быстро и эффективно выявлять детей с высоким риском по развитию спаечной болезни для раннего и эффективного назначения противоспаечной терапии. 2 пр., 4 ил.

Способ прогнозирования спаечной болезни у детей, перенесших оперативные вмешательства на органах брюшной полости, включающий исследование жидкостной среды организма, отличающийся тем, что в качестве жидкостной среды организма исследуют перитонеальный экссудат, причем забор пробы осуществляют через 10-15 часов после операции, термостатируют ее в течение 30-40 минут при 37°C, затем берут каплю надосадочной части экссудата, проводят микроскопическое исследование методом клиновидной дегидратации и при обнаружении языковых полей в краевой зоне фации прогнозируют спаечную болезнь.