Способ получения гомосклерального трансплантата Российский патент 2017 года по МПК A61F2/14 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено в качестве трансплантата для хирургического лечения прогрессирующей миопии и укрепления склеры в зонах истончения и стафилом, а также для закрытия и укрепления мест истончения и разрыва склеры при травмах глаза.

Известен способ получения биоматериала для использования в офтальмологии "Склероплант" (патент RU 2290899 от 10.01.2007 г.). Способ включает механическую очистку соединительной ткани животных или человека, выдерживание в 3-6% растворе перекиси водорода 2-4 часа, замораживание, оттаивание, обработку щелочным раствором детергента с рН 7,0-14,0, затем - 3-6% раствором перекиси водорода или борной кислоты в течение 2-4 часа, отмывание водой очищенной, тепловую обработку при 40-90°С, придание биоматериалу необходимой формы и его стерилизацию.

Недостатками данного способа является то, что для изготовления материала используют ткани животных или аллогенные ткани человека (в основном сосуды, сухожилия и кожу пяток), из-за чего материал, получаемый таким способом, может содержать различные типы коллагена, не характерные для склеры и не обладающие хорошим сродством к тканям глаза. Кроме этого в описанном способе материал подвергают нагреванию, что может привести к денатурации коллагена и ухудшению его сродства с коллагеном склеры реципиента.

Также известен способ получения биоматериала для использования в офтальмологии путем обработки соединительной ткани животных или человека, которую сначала механически очищают, а затем последовательно обрабатывают растворами перекиси водорода, мочевины, смеси хлороформа и этилового спирта, отмывают водой очищенной, высушивают, лиофилизируют и стерилизуют дозой от 1,7 до 2,5 Мрад (патент РФ №2234289 от 20.08.2004 г.).

Недостатками данного способа является то, что мочевина, используемая для обработки соединительной ткани по описанному способу, является хорошим растворителем коллагена и частично разрушает структуру ткани, что ухудшает ее механические свойства. Кроме этого в описанном способе используют обработку хлороформом, который является сильным аллергеном.

Задачи: создание гомосклерального органотипичного, безопасного коллагенового биоматериала для укрепления фиброзной оболочки глаза, обладающего высокой биосовместимостью со склерой реципиента.

Техническим результатом, достигаемым при использовании изобретения, является получение органотипичного, биосовместимого коллагенового материала, максимально очищенного от антигенов, который может быть использован для имплантации при склеропластических операциях. Это возможно благодаря использованию трансплантата для склеропластики из склеры трупов-доноров, получаемой во время заготовки роговично-склеральных дисков для кератопластики как побочного продукта этого процесса.

Сущностью изобретения является то, что имплантат готовят из аллогенной склеры, при этом после механической очистки ее замачивают в 6% растворе перекиси водорода и выдерживают 4 часа (достигается разрушение тканевых пигментов, липидных структур и обеззараживание), затем промывают стерильной дистиллированной водой и замораживают при температуре -20°С 1-2 часа (что позволяет разрушить клеточные мембраны), затем после дефростации замачивают в водном растворе гидроксида аммония 10% на 2 часа при температуре 40°С (что способствует вымыванию липидов, но не вызывает денатурацию коллагена), после отмывают стерильным физиологическим раствором, замачивают в 6% растворе перекиси водорода и выдерживают 6 часов, затем промывают стерильным физиологическим раствором, помещают в 75% раствор этилового спирта и герметично упаковывают для хранения до использования.

Способ осуществляют следующим образом. Имплантат готовят из аллогенной склеры, полученной от неинфицированных гемотрансмиссивными заболеваниями (ВИЧ, гепатит В, С, сифилис) трупов доноров во время заготовки роговично-склеральных дисков для кератопластики, при этом после антисептической обработки глаз донора 0,5% раствором бетадина в течение 5 минут и последующем его отмывании готовят роговично-склеральный диск, который используют для кератопластики, а из оставшейся склеры выкраивают фрагменты необходимой формы, механически очищают ее и замачивают в 6% растворе перекиси водорода 4 часа, благодаря чему достигают разрушения тканевых пигментов, липидных структур и обеззараживания. Затем фрагменты склеры промывают стерильной дистиллированной водой и замораживают при температуре -20°С в течение 1-2 часов. Замораживание помогает разрушить клеточные мембраны. Затем, после дефростации, склеру замачивают в водном растворе гидроксида аммония 10% на 2 часа при температуре 40°С. Такое незначительное нагревание способствует вымыванию липидов и не вызывает денатурации коллагена. После этого склеру отмывают стерильным физиологическим раствором и замачивают в 6% растворе перекиси водорода и выдерживают 6 часов, после чего промывают стерильным физиологическим раствором и помещают в 75% раствор этилового спирта и герметично упаковывают для хранения до использования.

Пример №1. Пациент Н., 34 года. Была выполнена пластика дефекта склеры после проникающего ранения глазного яблока, путем закрытия образовавшегося дефекта склеры гомосклеральным трансплантатом. В сроки наблюдения от операции до 1 года не наблюдалось никакой отрицательной реакции на наличие трансплантата, отсутствовала как воспалительная, так и аллергическая реакция. К 1 году наблюдений трансплантат уплощился и пророс собственной соединительной тканью пациента.

Пример №2. Пациент Д. 12 лет (длина глаза по данным бесконтактной биометрии до операции составила OD 25.53, OS 25.70 мм), была произведена склеропластика по поводу прогрессирующей близорукости предложенным гомосклеральным трансплантатом на оба глаза. Как в ранние сроки после операции, так и в поздние (через 6 и 12 мес) не наблюдали отрицательных реакций на наличие гомосклерального трансплантата. Длина глаза по данным бесконтактной биометрии через 12 мес после операции составила OD 25.54, OS 25.68 мм.

Пример №3. Пациентка С. 46 лет. После глубокой склерэктомии по поводу развитой глаукомы развилась несостоятельность поверхностного лоскута склеры, развилась гипотония, мелкая передняя камера, отслойка сосудистой оболочки. Пациентке была выполнена пластика зоны антиглаукоматозной операции гомосклеральным трансплантатом. На первые сутки после операции не наблюдалось воспалительных и аллергических реакций, давление стабилизировалось до нормотонии, субъективно трансплантат пациенткой не ощущался. В сроки наблюдения 6 месяцев реакции на трансплантат не наблюдалось, он уплостился и пророс соединительной тканью. На рисунке в приложении показан вид гомосклерального трансплантата через 6 мес. после операции.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначено для лечения миопии и укрепления склеры в зонах истончения, стафилом и разрывов. Трансплантат готовят из аллогенной склеры. После механической очистки ее замачивают в течение 4 часов в 6% растворе перекиси водорода. Промывают дистиллированной водой. Замораживают на 1-2 часа при -20°С. Дефростируют и замачивают на 2 часа в 10% растворе гидроксида аммония при температуре 40°С. Отмывают стерильной дистиллированной водой и вновь замачивают на 6 часов в 6% растворе перекиси водорода. Промывают стерильным физиологическим раствором и помещают в 75% раствор этилового спирта. Герметично упаковывают для хранения до использования. Использование изобретения обеспечивает получение органотипичного аллогенного биосовместимого коллагенового трансплантата из склеры со значительно сниженными антигенными свойствами. 1 ил., 3 пр.

Способ получения гомосклерального трансплантата, включающий механическую очистку, обработку и фрагментирование донорской склеры, отличающийся тем, что трансплантат готовят из аллогенной склеры, при этом после механической очистки ее 4 часа замачивают в 6% растворе перекиси водорода, затем промывают стерильной дистиллированной водой и замораживают при температуре -20°C на 1-2 часа, затем после дефростации замачивают 2 часа в 10% растворе гидроксида аммония при температуре 40°C, отмывают стерильной дистиллированной водой и вновь замачивают 6 часов в 6% растворе перекиси водорода, промывают стерильным физиологическим раствором и помещают в 75% раствор этилового спирта, герметично упаковывают для хранения до использования.