СПОСОБЫ ОСВЕТЛЕНИЯ КОЖИ Российский патент 2017 года по МПК A61K8/36 A61K8/368 A61K8/97 A61Q19/02 

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится к способам осветления кожи путем нанесения на кожу определенных ароматических соединений или растительных экстрактов, содержащих такие соединения.

ОПИСАНИЕ СМЕЖНОЙ ОБЛАСТИ

Был установлен ряд ароматических соединений, которые использовали на коже для обеспечения ряда преимуществ по личной гигиене. Например, в патенте США № 4939171, присвоенном компании Henkel, раскрыто применение соединений, включающих 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту, для обеспечения противосеборейных свойств. Однако в патенте не упоминаются свойства осветления кожи, связанные с описанными в нем композициями.

Кроме того, в заявке на патент США № 2011/0318439, переданной компании Ecobiotics LTD., раскрыты соединения, полученные из растений рода Acronychia, включающие 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту, для применения в качестве антиоксидантов, антибактериальных веществ, антигельминтных средств, противовоспалительных средств, средств для химиопрофилактики рака, пищевых добавок и/или ароматизирующих компонентов. Однако в патенте не упоминаются свойства осветления кожи, связанные с описанными в нем композициями.

Более того, заявители признали, что выявление других преимуществ не является показателем преимуществ осветления кожи. Например, известно несколько антиоксидантов, придающих коже более темный оттенок за счет индуцирования меланина (смотрите, например, публикацию Solano et al. Pigment Cell Res. 2006 г., 19 (стр. 550-571)).

Настоящее изобретение относится к открытию того факта, что определенные ароматические соединения и/или растительные экстракты, содержащие молекулы таких соединений, показывают неожиданные комбинации таких свойств, как осветление кожи, низкая цитотоксичность, фотозащитные и/или другие ожидаемые потребителями свойства для использования на коже.

ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Заявители неожиданно обнаружили, что определенные ароматические соединения, в частности, соединения, представленные ниже в формуле I, и растительные экстракты, содержащие такие соединения, включая растения рода Acronychia, можно использовать на коже для достижения эффекта существенного осветления кожи или комбинации эффекта осветления кожи и фотозащитного эффекта и/или сравнительно низкой цитотоксичности.

Соответственно, в одном аспекте настоящее изобретение относится к способам осветления кожи, содержащим нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, соединения формулы I:

(I),

где:

R₁ выбирают из группы, состоящей из C₁-C₂₀ алкила, C₂-C₂₀ алкенила, C₂-C₂₀ алкинила и C₃-C₈ циклоалкила или арила;

R₂ выбирают из группы, состоящей из водорода, гидроксила, C₁-C₆ алкила, C₂-C₆ алкенила, C₂-C₆ алкинила, C₃-C₈ циклоалкила или арила, -OC₁-C₆ алкила, -OC₂-C₆ алкенила, -OC₂-C₆ алкинила, -OC₃-C₈ циклоалкила или арила, тиола, -SC₁-C₆ алкила, -SC₂-C₆ алкенила, -SC₂-C₆ алкинила, -SC₃-C₈ циклоалкила или арила, -NR₄C₁-C₆ алкила, -NR₄C₂-C₆ алкенила, -NR₄C₂-C₆ алкинила и -NR₄C₃-C₈ циклоалкила или арила;

R₃ выбирают из -CO₂H, -CO₂R₄ или изостерического эквивалента карбоксильной группы, где R₄ представляет собой C₁-C₆ алкил, C₂-C₆ алкенил, C₃-C₈ циклоалкил или арил; и

Y представляет собой -(CH₂-CH₂)-, -(CH=CH)- или -(C≡C)-;

или его косметически приемлемой соли.

ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ

Все процентные значения, указанные в настоящем техническом описании, при отсутствии особых указаний, представляют собой процентные доли активных/твердых материалов по весу.

В настоящем документе термин «осветление кожи» по существу относится к осветлению, отбеливанию и/или выравниванию тона кожи, цвета кожи и/или оттенка кожи, и/или уменьшению желтоватого цвета кожи, и/или осветлению и/или уменьшению гиперпигментированных пятен и/или повреждений, включая, без ограничений, пигментные пятна, меланиновые пятна, возрастные пятна, пятна от солнца, старческое лентиго, веснушки, простое лентиго, пигментный солнечный кератоз, себорейный кератоз, меланоз, угревые пятна, поствоспалительную гиперпигментацию, лентигиноз, эфелиды, комбинации двух или более из них и т.п. В определенных вариантах осуществления «осветление кожи» также относится к увеличению сияния кожи, полупрозрачности и свечения и/или получению более сияющего, светящегося, полупрозрачного или визуально высвеченного тона кожи или уменьшения желтоватого тона кожи. В определенных предпочтительных вариантах осуществления «осветление кожи» относится к осветлению тона кожи, выравниванию тона кожи, увеличению сияния кожи, осветлению возрастных пятен.

В настоящем документе термин «кожа, нуждающаяся в обработке осветлением» по существу относится к коже, обладающей одной или более характеристиками, выбранными из группы, состоящей из характеристик: кожа, имеющая измеренное значение ITA (классификация цвета кожи человека) менее 41, как определено по руководству Европейской косметической ассоциации (COLIPA): GUIDELINE FOR THE COLORIMETRIC DETERMINATION OF SKIN COLOUR TYPING AND PREDICTION OF THE MINIMAL ERYTHEMAL DOSE (MED) WITHOUT UV EXPOSURE, опубликованному в 2007 г., которое включено в настоящий документ путем ссылки и дополнительно описано ниже; потемневшая и/или желтоватая кожа, включая кожу, потемневшую под воздействием ультрафиолетового (УФ) излучения; кожа с неровным тоном или кожа с одним или более гиперпигментированными пятнами и/или повреждениями, включая, без ограничений, пигментные пятна, меланиновые пятна, возрастные пятна, пятна от солнца, старческое лентиго, веснушки, простое лентиго, пигментный солнечный кератоз, себорейный кератоз, меланоз, угревые пятна, поствоспалительную гиперпигментацию, лентигиноз, эфелиды, комбинации двух или более из них и т.п. В руководстве COLIPA цвет кожи определяют по значению ITA следующим образом: >55 - очень светлая кожа; 41-55 - светлая кожа, 28-41 - кожа промежуточного цвета и <28 - темная кожа. В определенных предпочтительных вариантах осуществления термин «кожа, нуждающаяся в осветлении» относится к людям с кожей, имеющей значение ITA менее 41, такое как приблизительно 40 или менее, приблизительно 35 или менее, приблизительно 30 или менее или более предпочтительно - приблизительно 28 или менее. В других определенных предпочтительных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композициям и способам их использования на коже, нуждающейся в обработке осветлением, выбранной из желтоватой и/или потемневшей кожи, включая кожу, потемневшую под воздействием УФ-излучения. В определенных предпочтительных вариантах осуществления термин «кожа, нуждающаяся в осветлении» относится к коже с неровным тоном. В других определенных предпочтительных вариантах осуществления настоящее изобретение относится к композициям и способам их использования на коже, нуждающейся в обработке осветлением, с дефектами, выбранными из группы, состоящей из возрастных пятен, веснушек, пятен после угревой сыпи и комбинаций двух или более из них.

В настоящем документе композиция, «по существу не содержащая» ингредиент, означает композицию, содержащую приблизительно 2% вес. или менее данного ингредиента от общего веса композиции. Предпочтительно композиция, по существу не содержащая ингредиент, содержит ингредиент в количестве приблизительно 1% или менее, более предпочтительно - приблизительно 0,5% или менее, более предпочтительно - приблизительно 0,1% или менее, более предпочтительно - приблизительно 0,05 или менее, более предпочтительно - приблизительно 0,01% вес. или менее от общего веса композиции. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления в композиции, по существу не содержащей ингредиент, данный ингредиент полностью отсутствует.

В настоящем документе «косметически/дерматологически приемлемый» означает, что ингредиенты, к которым относится термин, подходят для использования в контакте с тканями (например, кожей или волосами) без несоответствующей токсичности, несовместимости, нестабильности, раздражения, аллергической реакции и т.п. Как будет понятно специалисту в данной области, косметически приемлемая соль соединения формулы I в настоящем документе может включать соли присоединения оснований, образованные в результате взаимодействия с органическими или неорганическими основаниями. Приемлемые соли, полученные с использованием неорганических оснований, включают, например, соли натрия или калия и т.п. Приемлемые соли, полученные с использованием органических оснований, включают, например, соли, образованные при взаимодействии с первичными, вторичными или третичными аминами и т.п.

В настоящем документе термин «безопасное и эффективное количество» означает количество экстракта или композиции, достаточное для получения необходимого эффекта, но достаточно низкое для предотвращения серьезных побочных эффектов. Безопасное и эффективное количество соединения, экстракта или композиции будет меняться в зависимости от различных факторов, например, возраста, состояния здоровья конечного потребителя, воздействия условий окружающей среды, длительности и характера лечения, конкретного используемого экстракта, ингредиента или композиции, конкретного используемого фармацевтически приемлемого носителя и т.п.

В соответствии с настоящим изобретением способы осветления кожи включают нанесение на кожу соединения формулы I:

(I),

где:

R₁ выбирают из группы, состоящей из C₁-C₂₀ алкила, C₂-C₂₀ алкенила, C₂-C₂₀ алкинила и C₃-C₈ циклоалкила или арила;

R₂ выбирают из группы, состоящей из водорода, гидроксила, C₁-C₆ алкила, C₂-C₆ алкенила, C₂-C₆ алкинила, C₃-C₈ циклоалкила или арила, -OC₁-C₆ алкила, -OC₂-C₆ алкенила, -OC₂-C₆ алкинила, -OC₃-C₈ циклоалкила или арила, тиола, -SC₁-C₆ алкила, -SC₂-C₆ алкенила, -SC₂-C₆ алкинила, -SC₃-C₈ циклоалкила или арила, -NR₄C₁-C₆ алкила, -NR₄C₂-C₆ алкенила, -NR₄C₂-C₆ алкинила и -NR₄C₃-C₈ циклоалкила или арила;

R₃ выбирают из -CO₂H, -CO₂R₄ или изостерического эквивалента карбоксильной группы, где R₄ представляет собой C₁-C₆ алкил, C₂-C₆ алкенил, C₃-C₈ циклоалкил или арил; и

Y представляет собой -(CH₂-CH₂)-, -(CH=CH)- или -(C≡C)-;

или его косметически приемлемой соли.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления способ включает нанесение на кожу соединения формулы I, где:

R₁ выбирают из группы, состоящей из C₅-C₁₆ алкила, C₅-C₁₆ алкенила и C₅-C₁₆ алкинила, более предпочтительно - C₅-C₁₆ алкенила, включая, например, фарнезил;

R₂ выбирают из группы, состоящей из водорода, гидроксила, -OC₁-C₆ алкила, -OC₂-C₆ алкенила, -OC₂-C₆ алкинила, -OC₃-C₈ циклоалкила, более предпочтительно - водорода, гидроксила, -OC₁-C₆ алкила, еще более предпочтительно - водорода или -OC₁-C₃ алкила;

R₃ выбирают из -CO₂H, -CO₂R₄, где R₄ представляет собой C₁-C₆ алкил или изостерический эквивалент карбоксильной группы; и

Y представляет собой -(CH₂-CH₂)- или -(CH=CH)-;

или его косметически приемлемой соли.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления соединения формулы I в форме кислоты или сложного алкилового эфира выбирают из группы, состоящей из 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовой кислоты, 3-(4-фарнезилокси-3-гидроксифенил)-пропионовой кислоты, 3-(4-фарнезилокси-3-метоксифенил)-пропионовой кислоты, их сложных алкиловых эфиров, в частности, их сложных этиловых эфиров, а также комбинаций двух или более из них. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления способы, составляющие предмет настоящего изобретения, включают нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовой кислоты или ее сложного этилового эфира, наиболее предпочтительно - нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовой кислоты.

Предпочтительно способы, составляющие предмет настоящего изобретения, включают нанесение на кожу эффективного для осветления кожи количества соединения формулы I, предпочтительно безопасного и эффективного количества. В определенных предпочтительных вариантах осуществления способы включают нанесение на кожу, нуждающуюся в обработке, соединения формулы I в количестве от более нуля до приблизительно 20%. В других определенных предпочтительных вариантах осуществления способы включают нанесение на кожу, нуждающуюся в обработке, от приблизительно 0,0001 до приблизительно 20%, от приблизительно 0,001 до приблизительно 10%, от приблизительно 0,01 до приблизительно 5%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 5% или от приблизительно 0,2 до приблизительно 2% соединения формулы I. В других определенных предпочтительных вариантах осуществления способы включают нанесение на кожу от более нуля до приблизительно 1%, от приблизительно 0,0001 до приблизительно 1%, от приблизительно 0,001 до приблизительно 1% или от приблизительно 0,01 до приблизительно 1% соединения формулы I.

Соединения формулы I можно получить из любого из ряда натуральных источников, например, путем экстрагирования из растительного сырья, или можно синтезировать с использованием известных способов синтеза. В определенных предпочтительных вариантах осуществления соединения формулы I экстрагируют из растительного сырья, включая, например, растения рода Acronychia, включая, например, Acronychia aberrans, Acronychia acidula, Acronychia acronychioides, Acronychia acuminate, Acronychia baeuerlenii, Acronychia chooreechillum, Acronychia crassipetala, Acronychia eungellensis, Acronychia imperforate, Acronychia laevis, Acronychia laurifolia, Acronychia littoralis, Acronychia oblongifolia, Acronychia octandra, Acronychia parviflora, Acronychia pauciflora, Acronychia pedunculata, Acronychia pubescens, виды Acronychia (Batavia Downs), Acronychia suberosa, Acronychia vestita, Acronychia wilcoxiana, а также комбинации двух или более из них. В определенных предпочтительных вариантах осуществления экстракт получают из Acronychia acidula, Acronychia aberrans, Acronychia acronychioides, Acronychia crassipetala или комбинации двух или более из них. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления соединение формулы I экстрагируют из Acronychia acidula.

Acronychia vestita, Acronychia pedunculata и Acronychia laurifolia, как известно, содержат компонент акровестон. Акровестон представляет собой пренилированный ацетофенон, и дополнительные аналоги, как известно, получают из плодов и коры растений рода Acronychia, особенно из экстракта плодов Acronychia pedunculata (Phytochemistry, (1991 г.), 30(5), стр. 1709-10). Описание некоторых антиоксидантных и антитирозиназных действий акровестона представлено в Journal of Natural Products, (2003 г.), 66(7), стр. 990-3. В определенных предпочтительных вариантах осуществления экстракты, полученные из растений рода Acronychia, в которых, как известно, находятся пренилированные ацетофеноны, очищают от акровестона или его аналогов или по существу от пренилированных ацетофенонов.

Для вариантов осуществления, в которых способ включает нанесение экстракта, можно использовать любой из множества таких экстрактов из растений рода Acronychia. Экстракт может быть получен из любой части растения, такой как, например, плоды, семена, кора, листья, цветы, корни и древесина. В определенных предпочтительных вариантах осуществления экстракт получают из плодов растения. Подходящие экстракты плодов, семян, коры, листьев, цветов и древесины Acronychia можно получить с использованием стандартных способов, включая, без ограничений, прямое экстрагирование материала из биомассы путем измельчения, мацерации, прессования, отжимания, сминания, центрифугирования и/или таких способов, как холодная перколяция, перемешивание/дистилляция, микроволновое экстрагирование, экстрагирование газообразным CO₂ при надкритическом/субкритическом сжатии в присутствии или отсутствии полярных модификаторов, экстрагирование растворителем под давлением, ускоренное экстрагирование растворителем, экстрагирование горячей водой при повышенном или нормальном давлении, экстрагирование горячей водой при повышенном давлении в присутствии поверхностно-активного вещества, масляное экстрагирование, мембранное экстрагирование, экстрагирование Сокслета, дистилляция/экстрагирование «золотого пальца», и/или способов, раскрытых, например, в патентах США №№ 7442391, 7473435 и 7537791, выданных компании Integrated Botanical Technologies, LLC, включенных в настоящий документ путем ссылки, и т.п. либо с использованием других способов, таких как экстрагирование растворителем и т.п. В способах, включающих экстрагирование растворителем, можно использовать любой из ряда растворителей, включающих полярные растворители, неполярные растворители или комбинации двух или более из них. Подходящие полярные растворители включают полярные неорганические растворители, такие как вода и т.п., полярные органические растворители, такие как спирты и соответствующие органические кислоты, например, C₁-C₈ спирты, включая метанол, этанол, пропанол, бутанол и т.п., а также органические кислоты, включая уксусную кислоту, муравьиную кислоту, пропановую кислоту и т.п., полиолы и гликоли, включая C₁-C₈ полиолы/гликоли и т.п., а также комбинации двух или более из них. Подходящие неполярные растворители включают неполярные органические растворители, такие как алканы, включая C₁-C₈ алканы, циклоалканы, включая C₁-C₈ алканы, простые алкиловые эфиры, включая простые C₁-C₈ алкиловые эфиры, петролейные эфиры, кетоны, включая C₁-C₈ кетоны, метиленхлорид, этилацетат, ксилол, толуол, хлороформ, растительное масло, минеральное масло и т.п. В другом варианте осуществления экстрагирование можно проводить при помощи неполярных растворителей, описанных выше, или путем надкритического жидкостного экстрагирования в присутствии или отсутствии полярного модификатора, такого как C₁-C₈ спирты, вода, C₁-C₈ полиолы/гликоли или C₁-C₈ органические кислоты.

В других определенных предпочтительных вариантах осуществления экстракт, составляющий предмет настоящего изобретения, содержит комбинацию полярного и неполярного экстрактов из плодов Acronychia acidula.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления экстракт, составляющий предмет настоящего изобретения, содержит полярный экстракт, полученный экстрагированием из свежих лиофилизированных плодов Acronychia acidula с использованием полярного растворителя, содержащего воду, C₁-C₈ спирты, C₁-C₈ полиолы, C₁-C₈ гликоли, а также комбинации двух или более из них. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления экстракт получают с использованием одного или более C₁-C₄ спиртов, C₁-C₄ полиолов и/или C₁-C₄ гликолей. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления экстракт получают с использованием растворителя, содержащего метанол, этанол или их комбинацию в присутствии воды или без нее. В более предпочтительном варианте осуществления экстракт представляет собой полярный экстракт, полученный из плодов Acronychia acidula с использованием комбинации спирта и воды.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления экстракт содержит неполярный экстракт, полученный экстрагированием из плодов Acronychia acidula с использованием неполярного растворителя, содержащего один или более C₁-C₈ алканов, C₁-C₈ циклоалканов, простых C₁-C₈ алкиловых эфиров, сложных C₁-C₈ алкиловых эфиров и/или хлороформ, более предпочтительно - один или более C₁-C₈ алканов, сложных C₁-C₈ алкиловых эфиров и/или хлороформ. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления неполярный экстракт получают из плодов Acronychia acidula с использованием гексанов, этилацетата, хлороформа или смесей двух или более из них. В еще более предпочтительных вариантах осуществления неполярный экстракт получают из плодов Acronychia acidula с использованием этилацетата.

В определенных вариантах осуществления соединения формулы I можно получить экстрагированием культур клеток различных растений, включая культуры клеток растений рода Acronychia. Культуры клеток, которые экстрагируют для получения экстрактов/соединений формулы I для использования в настоящем изобретении, могут иметь любую форму, включая культуры клеток в виде суспензий и т.п.

В определенных вариантах осуществления способ, составляющий предмет настоящего изобретения, включает нанесение на кожу, нуждающуюся в обработке, композиции, содержащей растительный экстракт, причем экстракт содержит по меньшей мере приблизительно 5% вес. соединения формулы I. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления способ включает нанесение композиции, содержащей растительный экстракт, причем экстракт содержит по меньшей мере приблизительно 20% вес. соединения формулы I, например, по меньшей мере приблизительно 40% вес., по меньшей мере приблизительно 50% вес., по меньшей мере 60% вес., по меньшей мере 70% вес. или по меньшей мере 80% вес. соединения формулы I. В определенных вариантах осуществления способы, составляющие предмет настоящего изобретения, включают нанесение на кожу, нуждающуюся в обработке, композиции, содержащей соединение формулы I, выделенное и/или очищенное до по меньшей мере 90%. В определенных предпочтительных вариантах осуществления композиция содержит введенный в ее состав или добавленный в нее материал, содержащий соединение формулы I, включающий более 90% чистого соединения формулы I.

Экстракты, содержащие соединение формулы I, можно получить экстрагированием из целого растения или части растения, например, из корней, цветов, плодов, листьев, стеблей, коры, или можно получить из фракций материалов, полученных из различных растений или различных частей одного и того же растения с использованием любого из способов экстрагирования, описанных в настоящем документе. В определенных вариантах осуществления экстракты содержат фракцию или комбинацию из двух или более фракций, полученных из одного или более растений.

В композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, можно использовать любой подходящий носитель. Предпочтительный носитель для композиции для ухода за кожей представляет собой косметически приемлемый носитель. Как будет понятно специалистам в данной области, косметически приемлемые носители содержат носители, подходящие для применения в контакте с телом, в частности, с кожей в составах для отбеливания кожи без несоответствующей токсичности, несовместимости, нестабильности, раздражения, аллергической реакции и т.п. Безопасное и эффективное количество носителя составляет от приблизительно 50% до приблизительно 99,999%, предпочтительно - от приблизительно 80% до приблизительно 99,9%, более предпочтительно - от приблизительно 99,9% до приблизительно 95%, наиболее предпочтительно - от приблизительно 99,8% до приблизительно 98% композиции. Носитель может быть представлен широким рядом форм. Например, можно использовать эмульсионные носители, включая, без ограничений, эмульсии масло-в-воде, вода-в-масле, вода-в-масле-в-воде и масло-в-воде-в-силиконе. Данные эмульсии могут иметь вязкость в широком диапазоне значений, например, от приблизительно 100 сПз до приблизительно 200 000 сПз. Примеры подходящих косметически приемлемых носителей включают косметически приемлемые растворители и материалы для косметических растворов, суспензий, лосьонов, кремов, сывороток, эссенций, гелей, тонеров, помад, спреев, мазей, жидкостей для умывания и брусков мыла, шампуней, кондиционеров для волос, паст, пен, муссов, порошков, кремов для бритья, влажных салфеток, пластырей, полосок, пластырей с источником питания, микроигольчатых пластырей, бандажей, гидрогелей, пленкообразующих продуктов, масок для лица и кожи, декоративной косметики, жидких капель и т.п. Данные типы продуктов могут содержать несколько типов косметически приемлемых носителей, включая, без ограничений, растворы, суспензии, эмульсии, такие как микроэмульсии и наноэмульсии, гели, твердые носители, липосомы, другие технологии инкапсулирования и т.п.

Ниже приведены неограничивающие примеры таких носителей. Специалист в данной области может приготовить и другие носители. В одном варианте осуществления носитель содержит воду. В дополнительном варианте осуществления носитель также может содержать один или более водных или органических растворителей. Примеры органических растворителей включают, без ограничений: диметилизосорбид; изопропилмиристат; ПАВ катионной, анионной и неионной природы; растительные масла; минеральные масла; воски; камеди; синтетические и натуральные гелеобразующие вещества; алканолы; гликоли и полиолы. Примеры гликолей включают, без ограничений, глицерин, пропиленгликоль, бутиленгликоль, пентиленгликоль, гексиленгликоль, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, диэтиленгликоль, триэтиленгликоль, каприлгликоль, глицерин, бутандиол и гексантриол, а также их сополимеры или смеси. Примеры алканолов включают, без ограничений, алканолы, имеющие от приблизительно 2 атомов углерода до приблизительно 12 атомов углерода (например, от приблизительно 2 атомов углерода до приблизительно 4 атомов углерода), такие как изопропанол и этанол. Примеры полиолов включают, без ограничений, полиолы, имеющие от приблизительно 2 атомов углерода до приблизительно 15 атомов углерода (например, от приблизительно 2 атомов углерода до приблизительно 10 атомов углерода), такие как пропиленгликоль. Органические растворители могут присутствовать в носителе в количестве, которое зависит от общего веса носителя, составляющего от приблизительно 1 процента до приблизительно 99,99 процента (например, от приблизительно 20 процентов до приблизительно 50 процентов). Вода может присутствовать в носителе (до его применения) в количестве, которое зависит от общего веса носителя, составляющего от приблизительно 5 процентов до приблизительно 95 процентов (например, от приблизительно 50 процентов до приблизительно 90 процентов). Растворы могут содержать любые подходящие количества растворителя, включая от приблизительно 40% до приблизительно 99,99%. Определенные предпочтительные растворы содержат от приблизительно 50 до приблизительно 99,9%, от приблизительно 60 до приблизительно 99%, от приблизительно 70 до приблизительно 99%, от приблизительно 80 до приблизительно 99% или от приблизительно 90 до 99%.

Из такого раствора можно изготовить лосьон. Как правило, помимо растворителя лосьоны содержат по меньшей мере один умягчитель. Лосьоны могут содержать от приблизительно 1% до приблизительно 20% (например, от приблизительно 5% до приблизительно 10%) умягчителя(ей) и от приблизительно 50% до приблизительно 90% (например, от приблизительно 60% до приблизительно 80%) воды.

Другой тип продукта, который можно приготовить из раствора, представляет собой крем. Крем, как правило, содержит от приблизительно 5% до приблизительно 50% (например, от приблизительно 10% до приблизительно 20%) умягчителя(ей) и от приблизительно 45% до приблизительно 85% (например, от приблизительно 50% до приблизительно 75%) воды.

Еще один тип продукта, который можно приготовить из раствора, представляет собой мазь. Мазь может содержать простую основу из животных, растительных или синтетических масел или полутвердых углеводородов. Мазь может содержать от приблизительно 2% до приблизительно 10% умягчителя(ей) плюс от приблизительно 0,1% до приблизительно 2% загустителя(ей).

Композиции, используемые в настоящем изобретении, также можно приготовить в форме эмульсий. Если носитель представляет собой эмульсию, он содержит от приблизительно 1% до приблизительно 10% (например, от приблизительно 2% до приблизительно 5%) эмульгатора(ов). Эмульгаторы могут быть неионными, анионными или катионными.

Лосьоны и кремы можно приготовить в форме эмульсий. Как правило, такие лосьоны содержат от 0,5% до приблизительно 5% эмульгатора(ов), тогда как такие кремы, как правило, будут содержать от приблизительно 1% до приблизительно 20% (например, от приблизительно 5% до приблизительно 10%) умягчителя(ей); от приблизительно 20% до приблизительно 80% (например, от 30% до приблизительно 70%) воды и от приблизительно 1% до приблизительно 10% (например, от приблизительно 2% до приблизительно 5%) эмульгатора(ов).

Препараты для ухода за кожей на основе односторонней эмульсии, такие как лосьоны и кремы типа масло-в-воде и вода-в-масле, хорошо известны в данной области и используются в настоящем изобретении. В настоящем изобретении также можно использовать многофазные композиции эмульсии, такие как эмульсии типа вода-в-масле-в-воде или масло-в-воде-в-масле. В целом такие односторонние или многофазные эмульсии содержат воду, умягчители и эмульгаторы в качестве основных ингредиентов.

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, также можно приготовить в форме геля (например, водного, спиртового, водно-спиртового или масляного геля с использованием подходящего(их) гелеобразующего(их) вещества(веществ)). Подходящие гелеобразующие вещества для водных и/или спиртовых гелей включают, без ограничений, природные камеди, акриловую кислоту и акрилатные полимеры и сополимеры, а также производные целлюлозы (например, гидроксиметилцеллюлозу и гидроксипропилцеллюлозу). Подходящие гелеобразующие вещества для масел (таких как минеральное масло) включают, без ограничений, гидрогенизированный сополимер бутилена/этилена/стирола и гидрогенизированный сополимер этилена/пропилена/стирола. Содержание таких гелеобразующих веществ в таких гелях, как правило, составляет от приблизительно 0,1% до 5% вес.

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, также можно приготовить в твердой форме (например, в форме стика на основе воска, композиции бруска мыла, порошка или влажной салфетки). Композицию, составляющую предмет настоящего изобретения, также можно сочетать с твердым, полутвердым или растворимым субстратом (например, влажной салфеткой, маской, прокладкой, перчаткой или полоской).

Композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, могут дополнительно содержать любой из ряда дополнительных косметически активных веществ. Примеры подходящих дополнительных активных веществ включают: дополнительные вещества для осветления кожи, затемняющие вещества, противоугревые вещества, вещества для контроля сияния кожи, бактерицидные вещества, такие как противодрожжевые вещества, противогрибковые и антибактериальные вещества, противовоспалительные вещества, противопаразитарные вещества, внешние анальгетики, солнцезащитные средства, фотопротекторы, антиоксиданты, кератолитические вещества, детергенты/ПАВ, увлажнители, питательные вещества, витамины, вещества, повышающие энергию, антиперспиранты, вяжущие вещества, дезодоранты, средства для удаления волос, вещества для усиления роста волос, вещества для замедления роста волос, уплотнители, усилители гидратации, усилители эффективности, вещества против огрубения кожи, вещества для кондиционирования кожи, антицеллюлитные вещества, фториды, вещества для отбеливания зубов, вещества против образования зубного налета и вещества для растворения зубного налета, вещества для контроля запаха, такие как вещества, маскирующие запах или изменяющие pH, и т.п. Примеры различных подходящих дополнительных косметически приемлемых активных веществ включают гидроксикислоты, бензоилпероксид, D-пантенол, УФ-фильтры, такие как, без ограничений, авобензон (Parsol 1789), фенилдибензимидазолтетрасульфонат динатрия (Neo Heliopan AP), диэтиламиногидроксибензоилгексилбензоат (Uvinul A Plus), экамсул (Mexoryl SX), метилантранилат, 4-аминобензойная кислота (PABA), циноксат, этилгексилтриазон (Uvinul T 150), гомосалат, 4-метилбензилиденкамфора (Parsol 5000), октилметоксициннамат (Octinoxate), октилсалицилат (Octisalate), падимат O (Escalol 507), фенилбензимидазолсульфоновая кислота (Ensulizole), полисиликон-15 (Parsol SLX), троламинсалицилат, бемотризинол (Tinosorb S), бензофеноны 1-12, диоксибензон, дрометризол трисилоксан (Mexoryl XL), диэтилгексилбутамидотриазон (Uvasorb HEB), октокрилен оксибензон (Eusolex 4360), сулизобензон, бисоктризол (Tinosorb M), диоксид титана, оксид цинка, каротиноиды, вещества, захватывающие свободные радикалы, спиновые ловушки, ретиноиды и предшественники ретиноидов, такие как ретинол, ретиноевая кислота и ретинил пальмитат, керамиды, полиненасыщенные жирные кислоты, незаменимые жирные кислоты, ферменты, ингибиторы ферментов, минералы, гормоны, такие как эстрогены, стероиды, такие как гидрокортизон, 2-диметиламиноэтанол, соли меди, такие как хлорид меди, пептиды, содержащие медь, такие как Cu:Gly-His-Lys, кофермент Q10, аминокислоты, такие как пролин, витамины, лактобионовая кислота, ацетил-кофермент A, ниацин, рибофлавин, тиамин, рибоза, переносчики электронов, такие как НАДН и ФАДН₂, а также другие растительные экстракты, такие как экстракты овса, алоэ вера, пиретрума девичьего, сои, грибов шиитаке, а также их производные и смеси.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, представляют собой композиции для ухода за кожей, содержащие соединение формулы I и по меньшей мере одно дополнительное активное вещество для осветления кожи. Примеры подходящих дополнительных активных веществ для осветления кожи включают, без ограничений, ингибиторы тирозиназы, вещества, стимулирующие деградацию меланина, вещества, ингибирующие перенос меланосом, включая антагонисты PAR-2, эксфолианты, солнцезащитные средства, ретиноиды, антиоксиданты, транексамовую кислоту, вещества для отбеливания кожи, аллантоин, замутнители, тальки и диоксиды кремния, цинковые соли и т.п., а также другие вещества, описанные в работе Solano et al. Pigment Cell Res. 2006 г., 19 (стр. 550-571). Примеры подходящих ингибиторов тирозиназы включают, без ограничений, витамин C и его производные, витамин E и его производные, койевую кислоту, арбутин, резорцины, гидрохинон, флавоны (например, флавоноиды солодки, экстракт корня солодки, экстракт корня шелковицы, экстракт корня мексиканского ямса (Dioscorea Coposita), экстракт камнеломки (Saxifraga) и т.п.), эллаговую кислоту, салицилаты и производные, глюкозамин и производные, фуллерен, хинокитиол, дикарбоновую кислоту, ацетилглюкозамин, магнолигнан, комбинации двух или более из них и т.п. Примеры производных витамина С включают, без ограничений, аскорбиновую кислоту и ее соли, аскорбиновую кислоту-2-глюкозид, аскорбилфосфат натрия, аскорбилфосфат магния, а также натуральные экстракты, обогащенные витамином C. Примеры производных витамина E включают, без ограничений, альфа-токоферол, бета-токоферол, гамма-токоферол, дельта-токоферол, альфа-токотриенол, бета-токотриенол, гамма-токотриенол, дельта-токотриенол и их смеси, токоферолацетат, токоферолфосфат и натуральные экстракты, обогащенные производными витамина E. Примеры производных резорцина включают, без ограничений, резорцин, 4-замещенные резорцины, такие как 4-алкилрезорцины, такие как 4-бутилрезорцин (руцинол), 4-гексилрезорцин, фенилэтилрезорцин, 1-(2,4-дигидроксифенил)-3-(2,4-диметокси-3-метилфенил)-пропан и т.п., а также натуральные экстракты, обогащенные резорцинами. Примеры салицилатов включают, без ограничений, салициловую кислоту, ацетилсалициловую кислоту, 4-метоксисалициловую кислоту и их соли. В определенных предпочтительных вариантах осуществления ингибиторы тирозиназы включают 4-замещенный резорцин, производное витамина C или производное витамина E. В более предпочтительных вариантах осуществления ингибитор тирозиназы содержит фенилэтилрезорцин, 4-гексилрезорцин или аскорбил-2-глюкозид.

Примеры подходящих веществ, стимулирующих деградацию меланина, включают, без ограничений, пероксиды и ферменты, такие как пероксидазы и лигниназы. В определенных предпочтительных вариантах осуществления вещества, ингибирующие меланин, включают пероксид или лигниназу.

Примеры подходящих веществ, ингибирующих перенос меланосом, включают антагонисты PAR-2, такие как ингибитор соевого трипсина или ингибитор Баумана-Бирка, витамин B3 и производные, такие как ниацинамид, эфирное масло сои, цельную сою, экстракт сои. В определенных предпочтительных вариантах осуществления вещества, ингибирующие перенос меланосом, включают экстракт сои или ниацинамид.

Примеры эксфолиантов включают, без ограничений, альфа-гидроксикислоты, такие как молочная кислота, гликолевая кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота или любая комбинация любых из перечисленных веществ, бета-гидроксикислоты, такие как салициловая кислота, полигидроксикислоты, такие как лактобионовая кислота и глюконовая кислота, а также средства механического отшелушивания, такого как микродермабразия. В определенных предпочтительных вариантах осуществления эксфолиант включает гликолевую кислоту или салициловую кислоту.

Примеры солнцезащитных средств включают, без ограничений, авобензон (Parsol 1789), фенилдибензимидазолтетрасульфонат динатрия (Neo Heliopan AP), диэтиламиногидроксибензоилгексилбензоат (Uvinul A Plus), экамсул (Mexoryl SX), метилантранилат, 4-аминобензойную кислоту (PABA), циноксат, этилгексилтриазон (Uvinul T 150), гомосалат, 4-метилбензилиденкамфору (Parsol 5000), октилметоксициннамат (Octinoxate), октилсалицилат (Octisalate), падимат O (Escalol 507), фенилбензимидазолсульфоновую кислоту (Ensulizole), полисиликон-15 (Parsol SLX), троламинсалицилат, бемотризинол (Tinosorb S), бензофеноны 1-12, диоксибензон, дрометризол трисилоксан (Mexoryl XL), диэтилгексилбутамидотриазон (Uvasorb HEB), октокрилен, оксибензон (Eusolex 4360), сулизобензон, бисоктризол (Tinosorb M), диоксид титана, оксид цинка и т.п.

Примеры ретиноидов включают, без ограничений, ретинол, ретинальдегид, ретиноевую кислоту, ретинилпальмитат, изотретиноин, тазаротен, бексаротен и адапален. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления ретиноид представляет собой ретинол.

Примеры антиоксидантов включают, без ограничений, водорастворимые антиоксиданты, такие как сульфгидрильные соединения и их производные (например, метабисульфит натрия и N-ацетилцистеин, глутатион), липоевую кислоту и дигидролипоевую кислоту, стильбеноиды, такие как ресвератрол и производные, лактоферрин, а также аскорбиновую кислоту и производные аскорбиновой кислоты (например, аскорбил-2-глюкозид, аскорбилпальмитат и аскорбилполипептид). Растворимые в масле антиоксиданты, подходящие для применения в композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, включают, без ограничений, бутилированный гидрокситолуол, ретиноиды (такие как ретинол и ретинилпальмитат), токоферолы (например, токоферолацетат), токотриенолы и убихинон. Натуральные экстракты, содержащие антиоксиданты, подходящие для применения в композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, включают, без ограничений, экстракты, содержащие флавоноиды и изофлавоноиды, а также их производные (например, генистеин и диадзеин), экстракты, содержащие ресвератрол и т.п. Примеры таких натуральных экстрактов включают экстракт семян винограда, зеленый чай, экстракт сосновой коры, экстракт пиретрума девичьего, экстракт пиретрума девичьего, не содержащий партенолида, экстракты овса, экстракт помело, экстракт из зародышей пшеницы, гесперидин, экстракт винограда, экстракт портулака, ликохалкон, халкон, 2,2’-дигидроксихалкон, экстракт примулы, прополис и т.п.

Дополнительное косметически активное вещество может присутствовать в композиции в любом подходящем количестве, например, в количестве от приблизительно 0,0001% до приблизительно 20% вес. композиции, например, от приблизительно 0,001% до приблизительно 10%, как например, от приблизительно 0,01% до приблизительно 5%. В определенных предпочтительных вариантах осуществления может присутствовать в количестве от 0,1% до 5%, а в других предпочтительных вариантах осуществления - от 1% до 2%.

В композициях, составляющих предмет настоящего изобретения, также может присутствовать ряд других материалов. Они включают, например, хелатирующие вещества, увлажнители, замутнители, кондиционирующие добавки, консерванты, ароматизаторы и т.п. Композиции могут включать ПАВ, например, выбранные из группы, состоящей из анионных, неионных, амфотерных, катионных ПАВ или комбинации двух или более из них.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления настоящее изобретение включает нанесение соединения или композиции, составляющей предмет настоящего изобретения, посредством субстрата, содержащего такой материал. В настоящем изобретении можно использовать любой подходящий субстрат. Примеры подходящих субстратов и субстратных материалов раскрыты, например, в опубликованных заявках на патент США №№ 2005/0226834 и 2009/0241242, содержание которых полностью включено в настоящий документ путем ссылки.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления субстрат представляет собой влажную салфетку или маску для лица. Такие варианты осуществления предпочтительно содержат нерастворимый в воде субстрат, как описано в указанных выше источниках. В определенных вариантах осуществления нерастворимый в воде субстрат может иметь такие размер и форму, чтобы он мог покрывать лицо человека-пользователя, обеспечивая расположение нерастворимого в воде субстрата на лице пользователя в качестве маски в виде субстрата. Например, нерастворимая в воде маска в виде субстрата может иметь отверстия для рта, носа и/или глаз пользователя. В альтернативном варианте осуществления нерастворимый в воде субстрат может не иметь таких отверстий. Такую конфигурацию без отверстий можно использовать в вариантах осуществления настоящего изобретения, в которых нерастворимый в воде субстрат предназначен для оборачивания вокруг участков кожи, находящихся не на лице, либо нерастворимый в воде субстрат предназначен для применения в качестве влажной салфетки. Нерастворимый в воде субстрат может иметь различные формы, такие как угловая форма (например, прямоугольник) или дугообразная форма (например, круг или овал).

В одном варианте осуществления настоящего изобретения продукт включает множество нерастворимых в воде субстратов различной формы. В одном варианте осуществления настоящего изобретения продукт включает первый нерастворимый в воде субстрат и второй нерастворимый в воде субстрат. Первый нерастворимый в воде субстрат имеет форму, позволяющую нанести его на лоб, а второй нерастворимый в воде субстрат имеет форму, позволяющую нанести его на область в непосредственной близости ко рту, такую как области выше и/или ниже губ, подбородок и/или щеки. В одном варианте осуществления настоящего изобретения первый нерастворимый в воде субстрат также наносят на участок носа. Первый нерастворимый в воде субстрат может иметь площадь поверхности от приблизительно 100 см² до приблизительно 200 см², как например, от приблизительно 120 см² до приблизительно 160 см², и второй нерастворимый в воде субстрат имеет площадь поверхности от приблизительно 100 см² до приблизительно 300 см², как например, от приблизительно 150 см² до приблизительно 250 см². В одном варианте осуществления настоящего изобретения нерастворимый в воде субстрат имеет низкую жесткость, благодаря чему его можно, например, легко обернуть вокруг лица или других частей тела пользователя, или он может соответствовать им по форме.

Настоящее изобретение может содержать нанесение композиции на любой участок кожи, нуждающийся в обработке, на теле человека. Например, композицию можно нанести на один или более из участков кожи лица, шеи, груди, спины, рук, подмышечных впадин, кистей рук и/или ступней. В определенных предпочтительных вариантах осуществления способ включает нанесение соединения формулы I на кожу лица.

В соответствии с настоящим изобретением можно использовать любой подходящий способ нанесения экстракта на кожу, нуждающуюся в обработке. Например, экстракт можно наносить непосредственно из упаковки на кожу, нуждающуюся в обработке, при помощи руки на кожу, нуждающуюся в обработке, или можно переносить на кожу с субстрата, такого как влажная салфетка или маска, либо комбинации двух или более из них. В других вариантах осуществления экстракт можно наносить при помощи пипетки, пробирки, валика, спрея, пластыря или можно добавлять в ванну или другую емкость с водой для нанесения на кожу и т.п.

В определенных вариантах осуществления способы, составляющие предмет настоящего изобретения, дополнительно содержат стадию размещения соединения формулы I на коже на определенный период времени. Например, в определенных предпочтительных вариантах осуществления после нанесения соединение оставляют на коже приблизительно на 15 минут или более. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления экстракт оставляют на коже приблизительно на 20 минут или более, более предпочтительно - приблизительно на 1 час или более.

В определенных вариантах осуществления способ, составляющий предмет настоящего изобретения, включает режим, содержащий многократное нанесение на кожу соединения формулы I через выбранные периоды времени. Например, в определенных вариантах осуществления настоящее изобретение представляет способ осветления кожи, включающий нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, композиции, содержащей соединение формулы I, один или два раза в сутки в течение по меньшей мере 12 недель, предпочтительно - по меньшей мере 8 недель, а более предпочтительно - по меньшей мере 2 недель.

В определенных предпочтительных вариантах осуществления способы, составляющие предмет настоящего изобретения, включают нанесение на кожу по меньшей мере двух различных композиций или продуктов, содержащих соединение формулы I. Например, способы могут включать нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, первой композиции, содержащей соединение формулы I, с последующим нанесением на кожу, нуждающуюся в осветлении, второй композиции, содержащей соединение формулы I, но отличающейся от первой композиции. В определенных предпочтительных вариантах осуществления первую и вторую композицию можно по отдельности выбрать из группы, состоящей из лосьонов, очистителей, масок, влажных салфеток, кремов, сывороток, гелей и т.п. В определенных предпочтительных вариантах осуществления по меньшей мере одна из первой и второй композиций представляет собой очиститель, лосьон, крем, эссенцию или сыворотку, а другая - маску для лица или влажную салфетку. В других определенных предпочтительных вариантах осуществления по меньшей мере одна из первой и второй композиций представляет собой очиститель, а другая - лосьон или крем.

В других определенных предпочтительных вариантах осуществления способ включает нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, по меньшей мере трех продуктов, содержащих соединение формулы I. Такие три продукта предпочтительно выбирают из группы, состоящей из очистителей, лосьонов, кремов, эссенций и масок для лица.

ПРИМЕРЫ

В примерах использовали следующие способы тестирования.

Тест на ингибирование синтеза меланина

Контрольные образцы клеток мышиной меланомы B16(F10) подготовили и отобрали, как указано ниже, но без добавления тестируемого образца и без обработки УФ-B (необработанный контроль). Другие контрольные образцы подготовили и отобрали, как указано ниже, без добавления тестируемого образца и при обработке УФ-B, как описано ниже (обработанный контроль). Подготовили один или более образцов клеток B16(F10), каждый из которых предварительно обработали тестируемым образцом (например, E1) с последующей обработкой УФ-B, как описано ниже. При обработке УФ-B происходила стимуляция меланогенеза в клетках, и тестируемые соединения оценивали на способность ингибировать или замедлять скорость меланогенеза. Клетки лизировали для измерения содержания белка при 595 нм и содержания меланина при 470 нм. Потенциал тестируемых соединений определяли при сравнении % ингибирования, достигнутого тестируемыми соединениями, и при обработанном контроле.

Процедура тестирования

На первые сутки клетки мышиной меланомы B16(F10) высевали на планшеты 60 мм с плотностью приблизительно 1 миллион клеток на планшет и инкубировали в течение 48 ч при 37°C, 5% CO₂. На вторые сутки клетки с показателем слияния 90-100% обрабатывали тестируемым соединением при заданной концентрации (например, 25 мкг/мл) в течение двух часов (только для образцов тестируемого соединения) с последующей обработкой УФ-B 20 мДж/см² (для тестируемых образцов и обработанного контроля). Клетки отбирали на третьи сутки (24 ч после обработки УФ-B для тестируемых образцов и обработанного контроля) и лизировали в белковом лизирующем буферном растворе (50 мМ Tris, pH 8, 2 мМ ЭДТА, 150 мМ NaCl и 1% Triton X 100 - неионное ПАВ производства BioRad, № по каталогу: 161-0407), а также центрифугировали. Полученную надосадочную жидкость хорошо перемешивали с красителем для анализа белков (реагент для анализа белков Bio-rad) и определяли оптическую плотность (ОП для анализа содержания белков) с помощью спектрофотометра (Molecular Devices VERSAmax) при длине волны 595 нм. Сгусток клеток после удаления надосадочной жидкости растворяли в щелочном буферном растворе ДМСО и полученный раствор применяли для анализа поглощения меланина при 470 нм для определения ОП для анализа содержания меланина.

Приготовили по три образца каждого из необработанного контроля, обработанного контроля и каждого тестируемого образца и для каждого из них определяли ОП для оценки содержания меланина и белков. Нормализованный меланин для каждого необработанного контроля (3 образца), обработанного контроля (3 образца) и тестируемого образца (3 образца для каждого тестируемого соединения) вычисляли по следующему уравнению:

Нормализованный меланин = ОП для анализа содержания меланина/ОП для анализа содержания белков.

Вычислили среднюю величину показателя нормализованного меланина для образцов необработанного контроля (сумма трех вычисленных значений/3), аналогичным образом вычислили среднюю величину показателя нормализованного меланина для образцов обработанного контроля.

Показатель индукции для контроля вычисляли по уравнению:

Показатель индукции для контроля = средняя величина показателя нормализованного меланина для обработанного контроля - средняя величина показателя нормализованного меланина для необработанного контроля.

Затем вычисляли показатель индукции для каждого тестируемого образца по уравнению:

Показатель индукции для тестируемого образца = показатель нормализованного меланина для тестируемого образца - средняя величина показателя нормализованного меланина для необработанного контроля.

Затем вычисляли % ингибирования для каждого тестируемого образца по уравнению:

100×[(показатель индукции для контроля - показатель индукции для тестируемого образца)/показатель индукции для контроля].

Средний % ингибирования вычисляли как сумму трех полученных показателей % ингибирования для каждого тестируемого образца, разделенную на три.

Последовательность вычислений % ингибирования объясняется на теоретическом примере, смотрите следующую таблицу.

Средний показатель нормализованного меланина, необработанный контроль 0,98 Средний показатель нормализованного меланина, контроль, обработанный УФ-B 2,56 Показатель индукции для контроля 2,56-0,98=1,58 Средний показатель нормализованного меланина, тестируемый образец 1,04 Показатель индукции для тестируемого образца 1,04-0,98=0,06 % ингибирования для тестируемого образца [(1,58-0,06)/1,58]×100=96,20%

Тест на ингибирование тирозиназы

Активность ингибирования тирозиназы оценивали по двум различным протоколам испытаний. В одном эксперименте белок-фермент тирозиназу получали из клеток мыши B16(F10). В другом эксперименте применяли доступный в продаже фермент тирозиназу грибов. Ниже приведено подробное описание процедур и полученных данных.

Белок-фермент тирозиназу получали из клеток мыши B16(F10). Клетки мышиной меланомы B16(F10) из 10 флаконов T-175 с конфлюэнтным монослоем лизировали с использованием 5 мл лизирующего буферного раствора (50 мМ Tris, pH 8, 2 мМ ЭДТА, 150 мМ NaCl, 1% Triton X и 1× смесь ингибиторов протеаз). Лизат выдерживали на льду в течение 30 минут при периодическом интенсивном перемешивании, а затем центрифугировали при 21000 g в течение 10 минут при температуре 4°C. Концентрацию белка в надосадочной жидкости определяли по методу Бредфорда. Надосадочную жидкость аликвотировали по 500 мкл в пробирки компании Eppendorf и хранили при температуре -80°C до 2 недель.

Для проведения типичного анализа 50 мкг белкового лизата инкубировали с тестируемым соединением в концентрации 200 мкг/мл, затем добавляли свежеприготовленный раствор 10 мМ L-ДОФА в 50 мМ фосфатного буферного раствора, pH 6,8 (объем реакционной смеси = 100 мл). Образцы инкубировали при 37°C в CO₂-инкубаторе в течение 3 часов, затем измеряли конечное значение ОП. В качестве положительного контроля использовали койевую кислоту (100 мкг/мл). Процедура тестирования каждого образца включала анализ контрольного образца (образец + буферный раствор + L-ДОФА).

Тест на ингибирование тирозиназы с использованием L-тирозина. Для проведения анализа с использованием L-тирозина 6-8 МЕ тирозиназы грибов (Sigma T3824) инкубировали с тестируемым соединением в концентрации 200 мкг/мл, затем добавляли свежеприготовленный раствор 1 мМ L-тирозина в 50 мМ фосфатного буферного раствора, pH 6,8 (объем реакционной смеси = 120 мл). Образцы инкубировали при 37°C в течение 30 минут, затем измеряли конечное значение ОП. В качестве положительного контроля использовали койевую кислоту (100 мкг/мл) и SymWhite 377 (0,001%). Процедура тестирования каждого образца включала анализ контрольного образца (образец + буферный раствор + L-ДОФА).

Модель кожных эпидермальных эквивалентов как тест на осветление кожи (ΔL)

Для следующих тестов использовали кожные эпидермальные эквиваленты тканей, доступные в продаже под названием система MelanoDerm™ производства компании MatTek. Система MelanoDerm™ производства компании MatTek состоит из нормальных человеческих эпидермальных кератиноцитов (NHEK) и меланоцитов (NHM), которые культивировали для образования многослойной и высокодифференцированной модели эпидермиса человека. В частности, в следующих тестах использовали ткани MEL-300-B по 9 мм в диаметре каждая.

Тестируемые материалы, приготовленные в соответствующей несущей среде и тестируемых концентрациях, ежедневно топически наносили на модели кожи, эксперимент продолжали в течение 8 суток. Измерение проводили на 9 сутки.

Макроскопические и микроскопические визуальные параметры степени затемнения ткани измеряли путем получения изображений с помощью цифровой камеры. Степень осветления для каждой ткани (L-значение) измеряли с помощью спектрофотометра (Konica Minolta CM-2600d). ΔL (степень осветления по сравнению с контролем) для каждого тестируемого образца вычисляли по следующей формуле:

ΔL = L-значение обработанного образца - L-значение контрольного образца.

В соответствии с определенными предпочтительными вариантами осуществления композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, эффективны для достижения значений ΔL в соответствии с данным тестом более нуля. Более предпочтительно композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, эффективны для достижения значений ΔL, равных приблизительно 0,5 или более, более предпочтительно - приблизительно 1 или более. В определенных более предпочтительных вариантах осуществления композиции, составляющие предмет настоящего изобретения, эффективны для достижения значений ΔL, равных приблизительно 2 или более, более предпочтительно - приблизительно 3 или более и более предпочтительно - приблизительно 4 или более.

Тест на жизнеспособность клеток

Жизнеспособность клеток ткани в ходе эксперимента оценивали с использованием МТТ-анализа, описанного ниже. MTT-анализ на жизнеспособность клеток представляет собой систему колориметрического анализа, которая измеряет восстановление желтого бромида метилтиазолилдифенил-тетразолия (МТТ) с образованием нерастворимого фиолетового продукта в митохондриях жизнеспособных клеток.

Эпидермальные ткани кожи, ранее применяемые для определения степени осветления для каждого тестируемого материала и необработанных тканей, использовали для определения процента жизнеспособных клеток, остающихся в конце эксперимента. Эпидермальные ткани кожи после теста на степень осветления инкубировали с реагентом МТТ в течение 3 часов. После инкубации к тканям добавили экстрагирующий буферный раствор для лизирования клеток и оставили на ночь. Образцы оценивали с использованием спектрофотометра для прочтения планшетов при длине волны 570 нм и сравнивали с необработанным контролем, результат описывали в % жизнеспособных клеток относительно контроля. Снижение жизнеспособности клеток на >30% относительно контроля рассматривали как существенный показатель цитотоксичности клеток, обусловленной тестируемыми материалами. Количество фиолетового окрашивания прямо пропорционально количеству жизнеспособных клеток.

Анализ ингибирования NF-κB

Анализ промотора NF-κB проводили следующим образом. Клетки кардиомиобластов крысы H9c2 закупили у компании ATCC (г. Манассас, штат Вирджиния). Культуры поддерживали в модифицированной по способу Дульбекко среде Игла (DMEM) (Invitrogen Life Technologies, г. Карлсбад, штат Калифорния) с добавлением 10% эмбриональной бычьей сыворотки, 100 единиц/мл пенициллина и 50 мкг/мл стрептомицина (Invitrogen Life Technologies, г. Карлсбад, штат Калифорния). Как правило, 1×10⁴ клеток, выращенных на 96-луночных планшетах, временно трансфицировали введением в каждую лунку по 0,45 мкг общей ДНК с использованием Lipofectamine 2000 (Invitrogen Life Technologies, г. Карлсбад, штат Калифорния). Во всех случаях трансфекции в качестве внутреннего контроля помимо промотора люциферазы использовали конструкт с промотором тимидинкиназы и репортерным геном люциферазы Renilla (pRL-TK, Promega, г. Мадисон, штат Висконсин). Через сутки после трансфекции клетки обработали экстрактами в указанных концентрациях и стимулировали воздействием 100 нг/мл фактора некроза опухоли-альфа (ФНО-α, Sigma-Aldrich, г. Сент-Луис, штат Миссури) в течение приблизительно 24 часов, затем их лизировали для анализа люциферазы с использованием системы Dual-Luciferase Reporter System производства компании Promega (г. Мадисон, штат Висконсин) в соответствии с протоколом производителя. Иными словами, сначала измеряли активность люциферазы светляка (отображающую активность промотора NF-κB), затем активность люциферазы Renilla (внутренний контроль) с использованием люменометра LMAX производства Molecular Devices (г. Саннивейл, штат Калифорния). Для оценки активности каждого промотора использовали соотношение активностей двух данных люцифераз (RLU).

Ингибирование NF-κB=[1-(RLU_{образец}/RLU_{контроль})]*100,

где RLU_{образец} и RLU_{контроль} представляют собой нормализованные показатели активности люциферазы для образца и контроля соответственно.

Пример 1. Приготовление экстракта плодов Acronychia acidula (E1)

Экстракт (E1). Ниже в качестве примера описан типичный способ экстрагирования. 500 г лиофилизированных плодов Acronychia acidula нарезали кубиками размером приблизительно 5 мм, заливали 5 л этанола в соотношении 1:10 (сырье/растворитель) и выдерживали при комнатной температуре в течение 12 часов при перемешивании. Затем суспензию фильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении для получения концентрата. Концентрат дополнительно сушили лиофилизацией для получения в остатке 325 г неочищенного экстракта (выход 65%). Образец неочищенного экстракта (200 г) смешивали с 1 л этанола и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь фильтровали и сушили при пониженном давлении и низкой температуре. Вязкий материал.

Пример 2. Ингибирование меланогенеза экстрактом плодов Acronychia acidula (E1)

Экстракт E1 тестировали на ингибирование меланогенеза в соответствии с описанной выше процедурой теста на ингибирование синтеза меланина. Результаты показаны ниже в таблице 1.

Таблица 1
Ингибирование меланогенеза экстрактом плодов Acronychia acidula Описание теста Концентрация экстракта (мкг/мл) Ингибирование (%) Меланогенез, индуцированный УФ-излучением B16(F10) 20 84 200 122

Пример 3. Ингибирование тирозиназы экстрактом плодов Acronychia acidula (E1)

Следующий пример демонстрирует активность ингибирования тирозиназы экстрактом E1. Экстракты E1 тестировали в концентрациях, указанных в таблице 2, для определения активности ингибирования тирозиназы в соответствии с описанными выше тестами на ингибирование тирозиназы. Результаты показаны ниже в таблице 2.

Таблица 2
Ингибирование тирозиназы экстрактом плодов Acronychia acidula Описание теста Концентрация экстракта (мкг/мл) Ингибирование (%) Тирозиназа B16(F10) 200 6 Тирозиназа грибов 200 0

Пример 4. Активность экстракта плодов Acronychia acidula (E1) по осветлению кожи

В следующем примере продемонстрированы свойства экстракта E1 по осветлению кожи. Экстракт тестировали на осветление кожи (ΔL) в соответствии с описанной выше моделью кожных эпидермальных эквивалентов. Цитотоксический потенциал определяли путем МТТ-анализа для экстракта E1 и вычисляли как % снижения жизнеспособности клеток в сравнении с контролем, причем снижение клеточной жизнеспособности на >30% рассматривали как показатель существенных проблем, связанных с цитотоксичностью. Результаты показаны ниже в таблице 3.

Таблица 3
Активность экстрактов по осветлению кожи (ΔL) Экстракт (концентрация (%)) ΔL Снижение синтеза меланина (%) E1 (1%)* 5,8 26 * Цитотоксичность для клеток не наблюдалась.

Пример 5. Фракционирование первого экстракта плодов Acronychia acidula (E1)

0,1 г первого экстракта (E1) помещали на 2 г обращеннофазового C18 силикагеля и последовательно элюировали 100 мл чистой воды, 100 мл 50% водного раствора метанола, затем 100 мл чистого метанола с получением фракций 1-3 соответственно. Все три фракции сушили при пониженном давлении с получением 78 мг (выход 78%) материала из фракции 1 (F1), 19 мг (выход 19%) материала из фракции 2 (F2) и небольших количеств материала из фракции 3 (выход<3%).

Пример 6. Активность фракций F1 и F2 плодов Acronychia acidula по осветлению кожи

Фракции (F1 и F2) плодов Acronychia acidula тестировали на осветление кожи (ΔL) в соответствии с описанной выше моделью кожных эпидермальных эквивалентов при концентрациях, указанных в таблице 4. Результаты показаны ниже в таблице 4.

Таблица 4
Активность фракций плодов Acronychia acidula по осветлению кожи (ΔL) Фракция Концентрация (%) Осветление кожи (значение DL) F1 2 1 F2 2 4,5

Пример 7. Очистка фракции F2 для получения чистого основного компонента (M-1)

Основное соединение из фракции F2 плодов Acronychia acidula выделили методом флэш-хроматографии на силикагеле и идентифицировали как 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту (M-1) методом H-ЯМР и МС высокого разрешения. Исходя из молекулярной массы 370,54, молекулярную формулу соединения M-1 установили как C₂₄H₃₄O₃. Идентичность соединения М-1 подтвердили методом многомерной ЯМР-спектроскопии. Как было установлено, естественное содержание M-1 в составе экстракта плодов Acronychia acidula составляет приблизительно 19%. Кроме того, также были предположительно установлены пять второстепенных соединений, которые не были очищены. Как было установлено, два из них представляют собой новые соединения, аналоги M-1 с дополнительной гидроксильной группой в одном случае и метоксильной группой в другом случае. Также были обнаружены разновидности сложных этиловых эфиров данных соединений, которые считаются продуктами экстрагирования. Общее естественное содержание всех этих соединений было определено на уровне приблизительно 20%. Кроме того, был проведен анализ данных спектроскопии для определения присутствия химических соединений с функциональными группами, содержащими азот, пренилированный ацетофенон или простой ацетофенон. Такие соединения не были обнаружены.

Пример 8. Активность 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовой кислоты (M-1) по осветлению кожи

3-(4-Фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту (M-1), выделенную описанным выше способом, тестировали на осветление кожи (ΔL) в соответствии с описанной выше моделью кожных эпидермальных эквивалентов. Для контроля также тестировали первый экстракт (E1) в той же концентрации. Компонент M-1 показал эффективность осветления кожи, равную эффективности первого экстракта E1. Результаты показаны ниже в таблице 5.

Таблица 5
Активность основного компонента Acronychia acidula по осветлению кожи (ΔL) Фракция Концентрация (%) Осветление кожи (значение DL) M-1 0,5 1,2 E1 0,5 1,0

Пример 9. Приготовление композиции

Формула продукта в виде крема, содержащего экстракт в соответствии с настоящим изобретением, указана в следующей таблице 6.

Таблица 6
Состав продукта № п/п Ингредиент/функция Торговое название/название по INCI % вес. 1. Очищенная вода Вода Баланс 2. ЭДТА BD Двунатриевая ЭДТА 0,10 3. Эмульгаторы Pemulen TR-1, Brij72, Brij 721, Lanette 22, Amphisol K, Simulgel EG 4,90 4. Загустители Carbopol Ultrez 20, ксантановая камедь 180 0,20 5. Увлажнители Бутиленгликоль, глицерин 9,00 6. Кондиционирующее вещество для кожи Prodew 300, Cetiol SB-45, Edenor ST 1 MY, Miglyol 812N, Finsolve TN, DC 200 cps, DC 345 Fluid, DC 1403, SP-500 15,75 7. Экстракт портулака Экстракт портулака (Portulaca oleracea), бутиленгликоль, вода 2,00 8. Глицирризат дикалия Глицирризат дикалия 0,25 9. Экстракт лимонной осины Экстракт плодов Acronychia acidula 1,00 10. Консерванты Метилпарабен, этилпарабен, пропилпарабен 0,60 11. Нейтрализующее основание Гидроксид натрия По потребности 12. УФ-фильтр Диоксид титана 0,20 13. Ароматизаторы Fragrance for Memory 161FF 0,20 14. Диглюконат хлоргексидина 20% Диглюконат хлоргексидина 0,25 15. Hydrolite-5 Пентиленгликоль 1,00 16. Ацетат витамина Е Токоферолацетат 0,25 17. Альфа-бисаболол Бисаболол 0,25

Ингредиенты смешивают в соответствии со стандартными процедурами. Общая процедура кратко описана ниже в качестве руководства.

Предварительно приготовленная смесь A: растворить экстракт лимонной осины в бутиленгликоле и воде.

Предварительно приготовленная смесь B: перемешивать глицерин и ксантан 180 до однородного состояния.

Предварительно приготовленная смесь C: диспергировать SP 500 в бутиленгликоле.

ВОДНАЯ ФАЗА

- В емкость налить воду, начать перемешивание, добавить ЭДТА BD и перемешивать до однородного состояния.

- Добавить Pemulen TR-1 и Carbopol Ultrez 20 и перемешивать до получения полупрозрачной смеси.

- Добавить Prodew 300, бутиленгликоль и предварительно приготовленную смесь В на основе Xantural и перемешать до однородного состояния.

- Начать нагревание до 80-83°C.

- При 70-75°C добавить метилпарабен и перемешать до однородного состояния.

- При 80°C добавить гидроксид натрия для нейтрализации водной фазы и поддерживать температуру до соединения фаз.

МАСЛЯНАЯ ФАЗА

Смешать Miglyol 815, Finsolve TN, Lanette 22, Edenor ST1 MY, Brij 721, Cetiol SB45, этилпарабен и пропилпарабен и нагревать до 80°C. Проверить, получен ли прозрачный расплав, затем добавить UV Titan M262 и перемешивать в течение 20 минут. При 80°C добавить Amphisol K и перемешивать до равномерного диспергирования. Поддерживать температуру 80-83°C до соединения фаз.

СОЕДИНЕНИЕ ФАЗ

- При гомогенизации добавить масляную фазу в водную фазу.

- Добавить Simulgel EG и перемешивать до однородного состояния. Дождаться загущения.

- Начать охлаждение до 60-65°C.

- При 60-65°C медленно добавить предварительно приготовленную смесь A.

- При 55-60°C добавить DC 200 вязкостью 50 сСт, DC 345 и DC 1403 и перемешивать до однородного состояния.

- При 45°C добавить предварительно приготовленную смесь C.

- При температуре ниже 35°C добавить Hydrolite-5, диглюконат хлоргексидина, экстракт портулака, альфа-бисаболол, ацетат витамина E, ароматизатор, перемешивать до однородного состояния и гомогенизировать партию в течение 5 минут.

Пример 10. Приготовление композиции

Формула продукта, содержащего экстракт в соответствии с настоящим изобретением, указана в следующей таблице 7.

Таблица 7
Состав продукта № п/п Название по INCI Торговое название % вес. 1. Вода Очищенная вода 71,59 2. Ксантановая камедь Keltrol CG 0,16 3. Динатрия эдетат Versene NA 0,15 4. Белый вазелин Perfecta 5 5. Триглицерид средней цепи Labrafac CC 0,75 6. Глицерин Глицерин 5,50 7. Масло семян клещевины обыкновенной (Ricinus Communis) Касторовое масло 1,8 8. Цетиловый спирт, Национальный формуляр Lanette 16 2,2 9. Эмульгирующий воск, Национальный формуляр PolaWax, Национальный формуляр 1,5 10. Масло какао Масло какао, Национальный формуляр 2 11. Глицерилстеарат SE Глицерилстеарат SE 3,00 12. Глицерилстеарат/ПЭГ 100 стеарат Lexemul 561 5,00 13. Диазолидинилмочевина Germall II 0,25 14. Acronychia acidula (1% активного вещества) Экстракт лимонной осины 1,00 15. 3-Йод-2-пропинилбутилкарбамат Glycacil L 0,1

ВОДНАЯ ФАЗА

- Стадия 1. В основную емкость залить очищенную воду при температуре 20-40°C.

- Стадия 2. В основную емкость добавить ксантановую камедь, Национальный формуляр. *Примечание. При наличии комков ксантановую камедь пропустить через сито с размером ячеек 30.

- Стадия 3. Сполоснуть стенки основной емкости с очищенной водой для удаления со стенок ксантановой камеди.

- Стадия 4. Перемешивать партию в течение 15-25 минут. Проверить набухание камеди, при удовлетворительном результате перейти к следующей стадии.

- Стадия 5. Продолжать перемешивание и добавить глицерин (по Фармакопее США) и динатрия эдетат (по Фармакопее США).

- Стадия 6. Начать нагревание партии до 65°C (63-67°C) и продолжать перемешивание.

МАСЛЯНАЯ ФАЗА

- Стадия 1. В подходящую чистую емкость добавить следующие химические вещества в данном порядке: триглицериды средней цепи, касторовое масло, масло какао и предварительно растопленный вазелин (по Фармакопее США).

- Стадия 2. Довести температуру масляной фазы до 65°C (63-67°C) и начать перемешивание на средней скорости.

- Стадия 3. При нагревании партии до 65°C добавить следующие химические вещества в данном порядке, добавляя каждое вещество после растворения предыдущего: глицерилстеарат SE, цетиловый спирт, эмульгирующий воск и глицерилстеарат.

- Стадия 4. При достижении температуры 65°C (63-67°C) перемешивать в течение 15-25 минут.

СОЕДИНЕНИЕ ФАЗ

- Стадия 1. Когда обе фазы находятся в однородном состоянии и при температуре 63-67°C, масляную фазу перенести в водную фазу при перемешивании водной фазы на средней скорости.

- Стадия 2. После завершения переноса масляной фазы сполоснуть емкость из-под масляной фазы очищенной водой. Воду, оставшуюся от полоскания, нагреть до 63-67°C и добавить в основную емкость.

- Стадия 3. Перемешивать партию в течение 10-20 минут.

- Стадия 4. Включить охлаждение и охладить партию до 40°C (38-42°C).

- Стадия 5. При достижении температуры 48-50°C увеличить скорость перемешивания со средней до высокой.

- Стадия 6. Добавить экстракт плодов Acronychia acidula (1% активного вещества).

- Стадия 7. При температуре 44°C или ниже добавить предварительно приготовленную смесь диазолидинилмочевины.

- Стадия 8. Добавить 3-йод-2-пропинилбутилкарбамат.

- Стадия 9. Перемешивать партию в течение 5-10 минут.

- Стадия 10. При необходимости добавить в партию достаточное количество очищенной воды.

- Стадия 11. Продолжать перемешивание и начать охлаждение партии до 32-34°C.

- Стадия 12. При достижении партией температуры 33°C (32-34°C) выключить мешалку и прекратить охлаждение.

Предварительно приготовленная смесь диазолидинилмочевины (Germall II)

- Стадия 1. В емкость из нержавеющей стали для предварительно приготовленной смеси налить очищенную воду.

- Стадия 2. Начать перемешивание воды и добавить диазолидинилмочевину.

- Стадия 3. Дополнительно перемешивать в течение 10-20 минут до полного растворения.

- Стадия 4. Отставить предварительно приготовленную смесь для добавления в партию.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу осветления кожи, включающему нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, соединения, представляющего собой 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту, или его косметически приемлемой соли. Изобретение обеспечивает достижение эффекта существенного осветления кожи и низкой цитотоксичности. 10 з.п. ф-лы, 7 табл., 10 пр.

1. Способ осветления кожи, включающий нанесение на кожу, нуждающуюся в осветлении, соединения, представляющего собой 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту, или его косметически приемлемой соли.

2. Способ по п. 1, включающий нанесение на кожу композиции, содержащей от 0,001 до 10% 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовой кислоты.

3. Способ по п. 1, включающий нанесение на кожу композиции, содержащей от 0,01 до 1% 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовой кислоты.

4. Способ по п. 1, включающий нанесение на кожу растительного экстракта, содержащего 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту.

5. Способ по п. 4, в котором указанный растительный экстракт представляет собой экстракт растения рода Acronychia.

6. Способ по п. 5, в котором указанный растительный экстракт представляет собой экстракт Acronychia acidula.

7. Способ по п. 6, в котором указанный экстракт представляет собой полярный экстракт.

8. Способ по п. 2, в котором указанная композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно дополнительное активное вещество для осветления кожи.

9. Способ по п. 6, в котором указанная композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно дополнительное активное вещество для осветления кожи.

10. Способ по п. 1, в котором указанная кожа, нуждающаяся в осветлении, представляет собой кожу на лице человека.

11. Способ по п. 10, в котором указанную композицию наносят с использованием маски для лица, где маска представлена в виде субстрата, содержащего композицию, содержащую 3-(4-фарнезилоксифенил)-пропионовую кислоту.