Заготовка для изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата и способ изготовления тест-системы Российский патент 2017 года по МПК C12M1/34 C12Q1/04 G01N33/569 

Группа изобретений относится к области медицинских технологий, а именно к экспресс-диагностике инфекции Helicobacter pylori (Н. pylori) по уреазной активности биоптата, полученного в ходе эндоскопического обследования слизистой оболочки желудка, в частности к устройству-заготовке для изготовления такой тест-системы и способу ее изготовления.

Известно, что для определения уреазной активности биоптатов использовались жидкие среды (Н.В. Сафонова, А.В. Жебрун. Гастрит, язвенная болезнь и хеликобактериоз. Рекомендации для врачей, НИИ им. Пастера, Спб., 1993, 40 с., с. 32), приготовляемые ex tempore из растворов, содержащих мочевину в воде, 50% этаноле или фосфатном буфере с кислотно-основным индикатором, обычно феноловым красным (рН перехода 6,8-8,4). Например, используемая в микробиологии среда Христиансена: мочевина 20 г/л, феноловый красный 0,012 г/л, KH₂PO₄ 2 г/л, пептон 1 г/л, NaCl 5 г/л, глюкоза 10 г/л.

Изготовление такой тест-системы заключалось в размещении жидкой среды в некоторой емкости и ее герметичном закрытии. Для проведения обследования открывали емкость с жидкой средой и помещали биоптат в нее. По изменению окраски жидкой среды судили о наличии инфекции Н. pylori.

Известен уреазный тест, где в качестве реакционной среды используется гель (B.J. Marshall and coll. Rapid urease test in the management of Campylobacter pyloridis-associated gastritis. Am. J. Gastroenterol. 1987; v. 82, p. 200-210; Westblom T.U. and coll. Evaluation of a rapid urease test to detect Campylobacter pylori infectim. J. Clin. Microbiol., 1988, v. 26, p. 1393-1394).

Изготовление такой тест-системы заключалось в размещении гелеобразной среды в некоторой емкости и ее герметичном закрытии. Для проведения обследования открывали емкость с гелеобразной средой и помещали биоптат в нее. По изменению окраски гелеобразной среды судили о наличии инфекции Н. pylori.

Известна тест-система (US №2013273583 «Testing apparatus for detection of gastrointestinal disorders)), МПК C12Q 1/58, опубл. 17.10.2013), представляющая собой сухую индикаторную композицию в форме таблетки или тонкой пластины. В состав индикаторной композиции входят мочевина 2-50 г, индикатор феноловый красный 2-100 мг/л, NaH₂PO₄⋅H₂O 0,01-2,0 г, NaHPO₄ 0,01-5,0 г и азид натрия 2-1000 мг.

Способ изготовления такой тест-системы заключается в получении индикаторной композиции и прессовании (формовке) из нее таблетки или тонкой платины.

Для проведения обследования таблетку или тонкую пластину помещают в некоторую емкость, изготовленную, например, из прозрачного пропилена методом литья под давлением (например, в форме ложки) и растворяют в воде или водном растворе. Биоптат помещают в получившийся раствор индикаторной композиции. По изменению окраски раствора судят о наличии инфекции Н. pylori.

Тест-системы в виде жидких и гелеобразных сред требуют их размещения в контейнерах, что приводит к увеличению их объема. Кроме того, такие тест-системы требуют соблюдать осторожность при их использовании из-за возможности повреждения контейнера.

Тест-система в виде сухой таблетки или тонкой пластины требует использования дополнительного растворителя (воды) и емкости для растворения, и также требуется соблюдать осторожность при использовании из-за возможности повреждения емкости.

Известен быстрый уреазный тест на основе твердого пористого гигроскопичного волокнистого носителя (Корниенко Е.А., Милейко В.Е., Григорян Т.М. Гастробюллетень. Приложение №1: материалы 2-й Объединенной Всероссийской и Всеармейской научной конференции «Санкт-Петербург - Гастро-2000», 20-22 сентября 2000 г., №170, с. 45), содержащий субстрат (мочевину) в количестве от 1,0 кг до 2,5 кг на 1 м², один из кислотно-основных индикаторов с интервалом перехода в области от рН 3,2-5,0 до 8,2-9,0 в количестве от 21 г до 50 г на 1 м (например, бромтимоловый синий), буфер (например, фосфатный) до рН 7.0, повышающий осмотическое давление агент (например, хлористый натрий) 1200 кг на 1 м, фермент, разрушающий клеточную мембрану микроорганизма (например, муромидазу) - 0.001 кг на м², нанесенный на твердый пористый гигроскопичный волокнистый носитель.

Изготовление такой тест-системы проводится при последовательной кристаллизации растворов вышеперечисленных веществ на фильтровальной бумаге в вытяжном шкафу при использовании в качестве растворителя воды и изопропилового спирта. Далее формируют индикаторные диски.

При проведении диагностики биоптат помещают на индикаторный диск и по изменению окраски индикаторного диска судят о наличии инфекции Н. pylori.

Такая тест-система представляет собой отдельный индикаторный диск, малый размер которого соответствует малым размерам биоптата. При проведении обследования такие индикаторные диски неудобны для размещения на них биоптата из-за их малого размера, малой массы и отсутствия их фиксации. Кроме того, такие индикаторные диски подвержены воздействию летучих веществ (аммиак, амины и др.) в составе окружающего воздуха, что может привести к ложному изменению окраски индикаторного диска. Из-за этого необходимо при проведении обследования размещать индикаторный диск в герметичной емкости, что не обеспечено такой тест-системой и обуславливает трудности и недостаточную чувствительность и специфичность диагностики.

Этого недостатка лишены тест-системы, представляющие собой гибкую пластиковую подложку с закрепленным на ней индикаторным диском и герметично закрытую покрывной пленкой.

Известна тест-система (http://www.amamed.ru/index.php?i=7), представляющая собой гибкую пластиковую подложку с закрепленным на ней индикаторным диском, который изготовлен из пористого гигроскопичного волокнистого носителя, пропитанного раствором мочевины и рН индикатора, и герметично закрытую покрывным язычком.

Способ изготовления такой тест-системы заключается в вырубке пластиковой подложки с покрывным язычком, закреплении на ней индикаторного диска и закрытии его покрывным язычком.

Для проведения обследования открывают покрывной язычок, помещают биоптат на индикаторный диск и снова закрывают язычок. По изменению окраски индикаторного диска судят о наличии инфекции Н. pylori.

Известна тест-система (СА №2260323 «Test strip for detecting gastric problems based on the presence of urease», МПК C12Q 1/58, опубл. 22.01.1998), представляющая собой гибкую пластиковую подложку с приклеенным к ней гибким прозрачным пластиковым покрывным листом. На подложке расположен тонкий сухой чувствительный элемент (индикаторный диск), представляющий собой носитель, пропитанный раствором мочевины и индикатора с pKa от 6,5 до 8,5 в эффективной концентрации, притом упомянутый раствор имеет рН от 5,0 до 6,5.

Способ изготовления такой тест-системы заключается в получении гибкой пластиковой подложки, на которой закрепляют чувствительный элемент, и затем к подложке приклеивают покрывной лист со стороны чувствительного элемента.

Для проведения обследования отклеивают от подложки покрывной лист, размещают биоптат на чувствительном элементе и снова накрывают подложку покрывным листом. По изменению окраски сухого чувствительного элемента, наблюдаемому сквозь прозрачный покрывной лист, судят о наличии инфекции Н. pylori.

Такие тест-системы предусмотрены только для однослойных чувствительных элементов, которые обеспечивают недостаточно точную диагностику по сравнению с многослойными чувствительными элементами.

Известна тест-система (US №5420016 «Test device and kit for detecting Helicobacter pylori», МПК C12Q 1/00; C12Q 1/04; C12Q 1/58, опубл. 30.05.1995), представляющая собой прозрачную подложку с линией перфорации. Чувствительный элемент представляет собой многослойную структуру, при этом по одну сторону от линии перфорации к подложке приклеен индикаторный слой, к которому приклеен диффузионный слой, а по другую сторону от линии перфорации к подложке приклеен субстратный слой, при этом слои расположены на сторонах подложки таким образом, чтобы при ее сложении по линии перфорации слои совмещались.

Способ изготовления такой тест-системы заключается в получении подложки с линией перфорации, на которую по одну сторону от линии перфорации приклеивают индикаторный слой, к которому прикрепляют диффузионный слой, а по другую сторону от линии перфорации приклеивают субстратный слой таким образом, что, когда сгибают подложку по линии перфорации, то слои совмещаются.

Для проведения обследования размещают биоптат на диффузионном слое и сгибают подложку по линии перфорации так, чтобы субстратный слой соприкасался с биоптатом. Для достижения лучшего контакта биоптата с субстратным и диффузионным слоями могут использовать зажим, который одевают на согнутую подложку. По изменению окраски индикаторного слоя судят о наличии инфекции Н. pylori.

Недостатками способа изготовления такой тест-системы является сложность способа изготовления, обусловленная необходимостью изготовления подложки, обеспечивающая корректное размещение слоев многослойного чувствительного элемента на сторонах подложки для совмещения слоев после сгибания подложки.

Кроме того, при проведении обследования такой тест-системой необходимо использование дополнительного зажима или держателя для обеспечения более сильного прижатия слоев чувствительного элемента, расположенных на сторонах подложки, что обуславливает высокую чувствительность диагностики.

Наиболее близкими к заявляемым заготовке для изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата и способу изготовления тест-системы являются заготовка для тест-системы и способ ее изготовления, представленные в заявке US №2012094371 «Test strip for H. pylori detection», МПК C12M 1/34, опубл. 19.04.2012, в которой описана тест-система, представляющая собой жесткую подложку с прозрачным углублением, в котором расположены несколько слоев чувствительного элемента, с приклеенным к подложке гибким покрывным листом, имеющим выпуклую часть, которая совпадает с углублением в подложке.

Способ изготовления такой тест-системы заключается в отливке пластиковой подложки с углублением, в которое послойно размещают многослойный чувствительный элемент, и изготовлении гибкого покрывного листа с выпуклой частью, который приклеивают к подложке так, чтобы выпуклая часть покрывного листа совпадала с углублением в подложке.

Заготовкой для изготовления тест-системы являются конструктивные части такой тест-системы, а именно пластиковая прозрачная подложка с углублением, покрывной лист с выпуклой частью, закрепленный на подложке таким образом, чтобы выпуклая часть покрывного листа совпадала с углублением в подложке.

Для проведения обследования частично отклеивают покрывной лист от подложки, укладывают биоптат в углубление подложки на чувствительный элемент, затем снова приклеивают покрывной лист к подложке так, чтобы биоптат был плотно зажат между выпуклой частью покрывного листа и чувствительным элементом. По изменению окраски индикаторного слоя чувствительного элемента, наблюдаемого со стороны прозрачного углубления подложки, судят о наличии инфекции Н. pylori.

Недостатком способа изготовления такой тест-системы является сложность способа, обусловленная необходимостью проведения отдельных технологических операций по изготовлению подложки, покрывного листа и соединению их между собой с обязательным совпадением углубления и выпуклой части покрывного листа, чтобы обеспечить плотное прижатие биоптата.

Конструкция получаемой таким способом тест-системы не обеспечивает достаточную чувствительность тест-системы в силу относительно большого внутреннего объема, в котором размещен чувствительный элемент, что приводит к тому, что не весь объем выделяющегося в ходе реакции аммиака достигает индикаторного слоя чувствительного элемента. Плотное прижатие биоптата к чувствительному элементу, осуществляемое при помощи углубления подложки и выпуклой части покрывного листа, не позволяет достичь максимально возможной чувствительности, поскольку указанные составные части (заготовка) предполагают щели при несовпадении деталей.

Задачей заявляемой группы изобретений является создание заготовки для изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата и способа изготовления тест-системы, позволяющих достигать технический результат, заключающийся в повышении чувствительности тест-системы при упрощении способа ее изготовления.

Сущность изобретения, касающаяся заготовки для тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата, характеризуется тем, что заготовка представляет собой продольную полосу из листа из гибкой пленки, состоящую из последовательно расположенных секторов, разделенных поперечными линиями перфорации для складывания секторов относительно друг друга, где заготовка содержит:

N секторов для размещения чувствительного элемента, расположенных со стороны одного из краев заготовки, где каждый из N секторов выполнен с отверстием для образования лунки, размер которого обеспечивает размещение чувствительного элемента, где количество N секторов определяют по формуле:

N=В_чэ/В_заг

где В_чэ - толщина чувствительного элемента, В_заг - толщина заготовки;

сектор для фиксации чувствительного элемента, где сектор выполнен с отверстием, размер которого обеспечивает с отверстиями N секторов для размещения чувствительного элемента, образование лунки в тест-системе и фиксацию чувствительного элемента;

сектор для визуального просмотра чувствительного элемента;

сектор для закрывания чувствительного элемента, причем данный сектор имеет зону, не предназначенную для адгезивного покрытия со стороны поверхности, входящей в контакт с чувствительном элементом, где размеры зоны соответствуют закрываемому отверстию сектора для фиксации чувствительного элемента, при этом форма сектора для закрывания чувствительного элемента обеспечивает область упора на предыдущем секторе для отсоединения от него, а также область захвата тест-системы, выходящую за пределы закрываемых секторов, кроме того, за счет области упора и области захвата обеспечивается возможность открывания тест-системы.

Гибкая пленка может быть выполнена из поливинилхлорида или полипропилена.

Форму отверстий секторов для размещения чувствительного элемента и сектора для фиксации чувствительного элемента выбирают из ряда: прямоугольник, треугольник, окружность и овал.

Сектор для визуального просмотра чувствительного элемента может быть выполнен частично или полностью прозрачным.

Область захвата сектора для закрывания чувствительного элемента может иметь вид язычка.

Сущность изобретения, касающаяся способа изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата, включает

(а) изготовление заготовки по п. 1 для тест-системы, где для изготовления такой заготовки осуществляют:

нанесение контуров заготовки на одну из сторон листа из гибкой пленки,

нанесение адгезивного покрытия на одну из поверхностей листа из гибкой пленки на области, ограниченные нанесенным контуром заготовки,

проведение сушки и отверждения адгезивного покрытия,

покрытие антиадгезивным покрытием поверхности с отвердевшим адгезивным покрытием,

нанесение слоев краски в соответствии с изобразительными элементами, представляющими собой маркировку, метки для автоматического считывания результата, на другую поверхность листа из гибкой пленки на области, ограниченные нанесенным контуром заготовки, и

сушку;

(б) отделение заготовки со слоем адгезивного покрытия и слоями красок от листа из гибкой пленки;

(в) снятие антиадгезивного покрытия с заготовки со слоем адгезивного покрытия и слоями красок;

(г) складывание секторов по линиям перфорации, где

складывание начинают с первого из N секторов для размещения чувствительного элемента, включая сектор для фиксации чувствительного элемента, после чего размещают чувствительный элемент в образовавшейся лунке,

далее складывают сектор для визуального просмотра чувствительного элемента на сформированную из вышеуказанных секторов подложку с размещенным чувствительным элементом в ее лунке, и

складывают сектор для закрывания чувствительного элемента, тем самым, покрывая чувствительный элемент;

(д) горячее ламинирование полученной тест-системы.

Нанесение контуров заготовки могут производить вручную или осуществлять как одну из операций по изготовлению заготовки при использовании программы станка с числовым программным управлением.

Для нанесения адгезивного покрытия изготавливают маски для нанесения на заготовку адгезивного покрытия, размещают их на заготовке и наносят адгезивное покрытие методом шелкографии.

Для нанесения на заготовку изобразительных элементов, представляющих собой маркировки, метки для использования автоматического считывания результатов изготавливают маски для нанесения на заготовку слоев краски, размещают их на заготовке и наносят слои краски.

Отделение заготовки со слоем адгезивного покрытия и слоями красок от листа гибкой пленки со стороны адгезивного покрытия проводят вручную резаком либо посредством вырубного штампа, изготовленного в соответствии с формой заготовки.

Отличительными особенностями заявляемого способа являются изготовление единственной детали-заготовки для тест-системы, которая совмещает в себе и подложку с отверстиями для формирования лунки для размещения чувствительного элемента, и покрывной лист. Сборка такой тест-системы заключается в последовательном складывании секторов такой заготовки, что принципиально упрощает технологию изготовления тест-системы, исключая необходимость отслеживания правильности сопоставления нескольких деталей тест-системы относительно друг друга. Толщина детали-заготовки существенно снижена относительно аналогичных технических решений, а операция ламинирования обеспечивает максимально возможное плотное склеивание секторов между собой и со слоями чувствительного элемента, формируя лунку минимального объема. Когда в ходе обследования биоптат помещается на тест-систему, склеенные со слоями чувствительного элемента сектора подложки исключают потери выделяющегося аммиака, направляя весь его объем к индикаторному слою чувствительного элемента, повышая, таким образом, чувствительность тест-системы. Кроме того, минимизация объема лунки, в которой размещен чувствительный элемент, обеспечивает полноту достижения аммиаком индикаторного слоя чувствительного элемента за минимально возможное время, что приводит к повышению чувствительности тест-системы.

Группу изобретений поясняют следующие графические изображения:

Фиг. 1. Заготовка для тест-системы с тремя секторами, образующими лунку для размещения чувствительного элемента.

Фиг. 2. Тест-система в сборе с однослойным чувствительным элементом.

Фиг. 3. Размещение биоптата в лунке тест-системы на трехслойном чувствительном элементе.

Фиг. 4. Множественная заготовка, состоящая из пяти одинарных заготовок.

Заготовка для тест-системы (фиг. 1) представляет собой продольную полосу из листа из гибкой пленки, состоящую из шести секторов, разделенных поперечными линиями перфорации для складывания секторов относительно друг друга. Три сектора для размещения чувствительного элемента 1 расположены последовательно друг за другом со стороны одного из краев заготовки и выполнены с прямоугольным отверстием, размеры которого обеспечивают размещение чувствительного элемента 5 (фиг. 2).

Следующий сектор для фиксации чувствительного элемента 2 выполнен с отверстием, размер которого обеспечивает с отверстиями секторов для размещения чувствительного элемента 1 образование лунки 6 и фиксацию чувствительного элемента 5 в лунке 6. Следующий сектор для визуального просмотра чувствительного элемента 3 выполнен таким образом, что обеспечивает визуальный просмотр чувствительного элемента 5 (он может быть прозрачным полностью или иметь прозрачную зону). Следующий сектор для закрывания чувствительного элемента 4 со стороны поверхности, входящей в контакт с чувствительном элементом 5, имеет зону, не предназначенную для адгезивного покрытия (которым покрывают при изготовлении одну из сторон заготовки), размеры которой соответствуют закрываемому отверстию сектора для фиксации чувствительного элемента 2, при этом форма сектора для закрывания чувствительного элемента 4 обеспечивает область упора на секторе для фиксации чувствительного элемента 2 для отсоединения от него, а также область захвата тест-системы, выходящую за пределы закрываемых секторов, кроме того, за счет области упора и области захвата обеспечивается возможность открывания тест-системы. Область может быть выполнена в виде язычка.

После изготовления тест-система имеет вид, представленный на фиг. 2. После складывания секторов заготовки 1, 2, 3, 4 чувствительный элемент 5 размещен в лунке 6.

Для проведения обследования с использованием заявляемой тест-системы (фиг. 2, 3) один или несколько биоптатов любого отдела желудка, полученный в ходе гастроскопии, помещают на поверхность чувствительного элемента 5 и закрывают сектором для закрывания чувствительного элемента 4. По истечении периода экспозиции тест-систему переворачивают и оценивают появление цветного пятна на поверхности индикаторного слоя чувствительного элемента, видимого через прозрачную область сектора для визуального просмотра чувствительного элемента 3.

В соответствии с заявляемым техническим решением форма заготовки представляет собой продольную полосу, а ее габаритные размеры зависят от размеров чувствительного элемента и толщины листа из гибкой пленки, из которого изготавливается заготовка. В связи с этим могут изменяться габаритные размеры отверстий в секторах заготовки, количество секторов для размещения чувствительного элемента и соответственно габаритные размеры самой заготовки.

В случае изменения продольного или поперечного размера чувствительного элемента соответственно изменяется продольный или поперечный размер отверстий секторов для размещения чувствительного элемента и, следовательно, продольный или поперечный размер всей заготовки.

В случае изменения толщины чувствительного элемента при постоянной толщине листа из гибкой пленки, из которого изготавливается заготовка, может измениться количество N секторов для размещения чувствительного элемента и соответственно продольный размер всей заготовки.

В случае изменения толщины листа из гибкой пленки, из которого изготавливается заготовка, при постоянной толщине чувствительного элемента может измениться количество N секторов для размещения чувствительного элемента и соответственно продольный размер всей заготовки, при этом изменяется толщина заготовки.

При пропорциональном изменении толщины листа из гибкой пленки, из которого изготавливается заготовка, и толщины чувствительного элемента при его постоянном продольном размере не изменяются количество N секторов для размещения чувствительного элемента и соответственно продольный размер всей заготовки, при этом изменяется толщина заготовки.

Этим способом может быть изготовлена множественная заготовка, состоящая из нескольких одинарных заготовок (фиг. 4), разделенных перфорационными линиями. Тест-система, получаемая из такой множественной заготовки, позволяет проводить ряд обследований одновременно или одно за другим. Отверстия секторов для размещения чувствительного элемента 1 выполнены в форме овала. Сектор для фиксации чувствительного элемента 2 имеет три отдельных отверстия в форме окружности, которые могут быть использованы для размещения отдельно друг от друга на чувствительном элементе 5 нескольких биоптатов, взятых из слизистой оболочки разных отделов желудка.

Тест-система, получаемая таким способом изготовления, позволяет получать результат обследования визуально или с помощью считывающего устройства. Для получения результата с помощью считывающего устройства тест-систему в начале периода экспозиции размещают в лотке считывающего устройства, габаритные размеры которого обеспечивают его точное позиционирование в считывающем устройстве.

В таблице представлены виды чувствительных элементов, используемых в тест-системах для экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата.

При увеличении количества слоев чувствительного элемента увеличивается время ожидания изменения окраски чувствительного элемента, и при этом увеличивается специфичность диагностики.

Примеры конкретной реализации способа изготовления тест-системы

Пример 1.

Для изготовления тест-системы использовали чувствительный элемент прямоугольной формы с габаритными размерами 15×6 мм и общей толщиной 0,53 мм, состоящий из трех слоев, а также лист полипропилена толщиной 0,2 мм для изготовления заготовки.

Далее определяли количество N секторов для размещения чувствительного элемента по формуле N=В_чэ/В_заг,

где В_чэ=0,53 мм - толщина чувствительного элемента;

В_заг=0,2 мм - толщина заготовки;

N=0,53/0,2=2,65.

Для определения количества секторов для размещения чувствительного элемента округляли полученное значение N в большую сторону.

N=3.

Сделав вывод, что требуются три сектора для размещения чувствительного элемента, определяли размеры прямоугольных отверстий в этих секторах, которые составили 17×8 мм.

Следующий сектор для фиксации чувствительного элемента выполнен с прямоугольным отверстием 13×4 мм.

Размер прозрачной прямоугольной зоны сектора для визуального просмотра чувствительного элемента составил 13×4 мм.

Сектор для закрывания чувствительного элемента со стороны поверхности, входящей в контакт с чувствительном элементом, имеет прямоугольную зону 13×4 мм, не предназначенную для адгезивного покрытия. При этом форма этого сектора обеспечивает область захвата на секторе для фиксации чувствительного элемента в форме прямоугольного треугольника с катетами длиной 10 мм и 10 мм, а также область, выходящую за пределы закрываемых секторов, имеющую форму квадрата с размерами 10×10 мм.

Габаритные размеры секторов для размещения чувствительного элемента, начиная с левого края, составили 29×20 мм, 31×20 мм и 33×20 мм. Габаритные размеры сектора для фиксации чувствительного элемента составили 35×20 мм. Габаритные размеры сектора для визуального просмотра чувствительного элемента задавали 37×20 мм. Габаритные размеры сектора для закрывания чувствительного элемента задавали 47×20 мм. Габаритные размеры заготовки составили 212×20×0,2 мм.

Используя полученные размеры заготовки, при помощи векторного графического редактора на ПК создавали электронный макет заготовки, который позволил изготовить маски для нанесения на заготовку адгезивного покрытия и слоев краски и осуществить нанесение контуров заготовки и изобразительных элементов, представляющих собой маркировку и метки для использования автоматического считывания результата, на листы полипропилена с одной стороны, а адгезивное покрытие с другой стороны, используя известный метод шелкографии. Далее в сушильных камерах проводили сушку и покрывали листы антиадгезивным покрытием из вощеной бумаги. После этого заготовку вырубали, используя вырубной штамп, изготовленный в соответствии с электронным макетом заготовки.

Далее проводили сборку тест-системы, для этого с заготовки снимали антиадгезивное покрытие и проводили складывание секторов по линиям перфорации, при этом начинали с первого из трех секторов для размещения чувствительного элемента, включая сектор для фиксации чувствительного элемента, до образования лунки для размещения чувствительного элемента.

Размещали в образовавшуюся лунку три слоя чувствительного элемента. Далее на сформированную подложку с размещенным в ее лунке чувствительным элементом складывали сектор для визуального просмотра чувствительного элемента и, складывая сектор для закрывания чувствительного элемента, покрывали чувствительный элемент. После этого проводили ламинирование полученной тест-системы.

Пример 2.

Для изготовления тест-системы использовали чувствительный элемент круглой формы с диаметром 6 мм и общей толщиной 0,38 мм, состоящий из трех слоев, а также лист полипропилена толщиной 0,2 мм для изготовления заготовки.

Далее определяли количество N секторов для размещения чувствительного элемента по формуле N=В_чэ/В_заг,

где В_чэ=0,38 мм - толщина чувствительного элемента;

В_заг=0,2 мм - толщина заготовки;

N=0,38/0,2-1,9.

Для определения количества секторов для размещения чувствительного элемента округляли полученное значение N в большую сторону.

N=2.

Сделав вывод, что требуются два сектора для размещения чувствительного элемента, определяли размеры круглых отверстий в этих секторах, которые составили ∅8 мм.

Следующий сектор для фиксации чувствительного элемента выполнен с круглым отверстием ∅4 мм.

Размер прозрачной круглой зоны сектора для визуального просмотра чувствительного элемента составил ∅4 мм.

Сектор для закрывания чувствительного элемента со стороны поверхности, входящей в контакт с чувствительном элементом, имеет круглую зону ∅4 мм, не предназначенную для адгезивного покрытия. При этом форма этого сектора обеспечивает область захвата на секторе для фиксации чувствительного элемента в форме прямоугольного треугольника с катетами длиной 10 мм и 10 мм, а также область, выходящую за пределы закрываемых секторов, имеющую форму квадрата с размерами 10×10 мм.

Габаритные размеры секторов для размещения чувствительного элемента, начиная с левого края, составили 20×20 мм, 22×20 мм и 24×20 мм. Габаритные размеры сектора для фиксации чувствительного элемента составили 26×20 мм. Габаритные размеры сектора для визуального просмотра чувствительного элемента задавали 28×20 мм. Габаритные размеры сектора для закрывания чувствительного элемента задавали 38×20 мм. Габаритные размеры заготовки составили 158×20×0,2 мм.

По сравнению с тест-системой, изготовление которой приведено в Примере 1, продольный размер и толщина чувствительного элемента уменьшились, следовательно, уменьшился продольный размер отверстий секторов для размещения чувствительного элемента и соответственно уменьшился продольный размер заготовки, при этом поперечный размер и толщина заготовки не изменились.

Далее проводили действия в соответствии с действиями, указанными в Примере 1.

Пример 3.

Для изготовления тест-системы использовали чувствительный элемент квадратной формы с габаритными размерами 15×15 мм и общей толщиной 0,53 мм, состоящий из трех слоев, а также лист полипропилена толщиной 0,15 мм для изготовления заготовки.

Далее определяли количество N секторов для размещения чувствительного элемента по формуле N=В_чэ/В_заг,

где В_чэ=0,53 мм - толщина чувствительного элемента;

В_заг=0,15 мм - толщина заготовки;

N=0,53/0,15=3,53.

Для определения количества секторов для размещения чувствительного элемента округляли полученное значение N в большую сторону.

N=4.

Сделав вывод, что требуются четыре сектора для размещения чувствительного элемента, определяли размеры квадратных отверстий в этих секторах, которые составили 17×17 мм.

Следующий сектор для фиксации чувствительного элемента выполнен с квадратным отверстием 13×13 мм.

Размер прозрачной квадратной зоны сектора для визуального просмотра чувствительного элемента составил 13×13 мм.

Сектор для закрывания чувствительного элемента со стороны поверхности, входящей в контакт с чувствительном элементом, имеет квадратную зону 13×13 мм, не предназначенную для адгезивного покрытия. При этом форма этого сектора обеспечивает область захвата на секторе для фиксации чувствительного элемента в форме прямоугольного треугольника с катетами длиной 14 мм и 14 мм, а также область, выходящую за пределы закрываемых секторов, имеющую форму квадрата с размерами 15×15 мм.

Габаритные размеры секторов для размещения чувствительного элемента, начиная с левого края, составили 29×29 мм, 31×29 мм, 33×29 мм и 35×29 мм. Габаритные размеры сектора для фиксации чувствительного элемента составили 37×29 мм. Габаритные размеры сектора для визуального просмотра чувствительного элемента задавали 39×29 мм. Габаритные размеры сектора для закрывания чувствительного элемента задавали 49×29 мм. Габаритные размеры заготовки составили 253×29×0,15 мм.

По сравнению с тест-системой, изготовление которой приведено в Примере:

поперечный размер чувствительного элемента увеличился, следовательно, увеличился поперечный размер отверстий секторов для размещения чувствительного элемента и соответственно увеличился поперечный размер заготовки;

толщина листа полипропилена, из которого изготавливалась заготовка, уменьшилась, следовательно, увеличилось количество N секторов для размещения чувствительного элемента и соответственно увеличился продольный размер заготовки, при этом толщина заготовки уменьшилась.

Далее проводили действия в соответствии с действиями, указанными в Примере 1.

Таким образом, тест-систему можно легко изготовить предлагаемым в изобретении способом, используя хорошо известные специалистам методы печати, вырубки в специальном штампе и ламинирования. Конструкция предлагаемой в изобретении заготовки позволяет изготавливать тест-систему простым, дешевым и предпочтительно, но необязательно, непрерывным способом, получая тест-систему с достаточно высокой чувствительностью.

Группа изобретений относится к области медицины. Предложены заготовка для изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата и способ изготовления вышеуказанной тест-системы. Заготовка представляет собой продольную полосу из листа гибкой пленки с разделенными линиями перфорации секторами. Заготовка содержит N секторов для размещения чувствительного элемента, сектор для фиксации чувствительного элемента, сектор для визуального просмотра чувствительного элемента и сектор для закрывания чувствительного элемента. Способ включает изготовление заготовки путем нанесения контуров заготовки на одну из сторон листа гибкой пленки, нанесения адгезивного покрытия на одной из поверхностей листа гибкой пленки на области, ограниченные нанесенным контуром, сушки и отверждения адгезивного покрытия, покрытия антиадгезивным покрытием поверхности с отвердевшим адгезивным покрытием, нанесения слоев краски на другой поверхности листа гибкой пленки на области, ограниченные нанесенным контуром, сушки слоев краски и отделения заготовки от листа гибкой пленки, а также снятие антиадгезивного покрытия, складывание секторов, размещение чувствительного элемента в образовавшейся лунке и горячее ламинирование. Изобретения обеспечивают упрощение способа изготовления тест-системы при повышении ее чувствительности. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 3 пр.

1. Заготовка для изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата, характеризующаяся тем, что заготовка представляет собой продольную полосу из листа из гибкой пленки, состоящую из последовательно расположенных секторов, разделенных поперечными линиями перфорации для складывания секторов относительно друг друга, где заготовка содержит:

N секторов для размещения чувствительного элемента, расположенных со стороны одного из краев заготовки, где каждый из N секторов выполнен с отверстием для образования лунки, размер которого обеспечивает размещение чувствительного элемента, где количество N секторов определяют по формуле:

N=В_чэ/В_заг

где В_чэ - толщина чувствительного элемента, В_заг - толщина заготовки;

сектор для фиксации чувствительного элемента, где сектор выполнен с отверстием, размер которого обеспечивает с отверстиями N секторов для размещения чувствительного элемента образование лунки в тест-системе и фиксацию чувствительного элемента;

сектор для визуального просмотра чувствительного элемента;

сектор для закрывания чувствительного элемента, причем данный сектор имеет зону, не предназначенную для адгезивного покрытия со стороны поверхности, входящей в контакт с чувствительном элементом, где размеры зоны соответствуют закрываемому отверстию сектора для фиксации чувствительного элемента, при этом форма сектора для закрывания чувствительного элемента обеспечивает область упора на предыдущем секторе для отсоединения от него, а также область захвата тест-системы, выходящую за пределы закрываемых секторов, кроме того, за счет области упора и области захвата обеспечивается возможность открывания тест-системы.

2. Заготовка для изготовления тест-системы по п. 1, отличающаяся тем, что гибкая пленка выполнена из поливинилхлорида или полипропилена.

3. Заготовка для изготовления тест-системы по п. 1, отличающаяся тем, что форму отверстий секторов для размещения чувствительного элемента и сектора для фиксации чувствительного элемента выбирают из ряда: прямоугольник, треугольник, окружность и овал.

4. Заготовка для изготовления тест-системы по п. 1, отличающаяся тем, что сектор для визуального просмотра чувствительного элемента выполнен частично или полностью прозрачным.

5. Заготовка для изготовления тест-системы по п. 1, отличающаяся тем, что область захвата сектора для закрывания чувствительного элемента, имеет вид язычка.

6. Способ изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата, включающий:

(а) изготовление заготовки по п. 1 для тест-системы, где для изготовления такой заготовки осуществляют:

нанесение контуров заготовки на одну из сторон листа из гибкой пленки,

нанесение адгезивного покрытия на одну из поверхностей листа из гибкой пленки на области, ограниченные нанесенным контуром заготовки,

проведение сушки и отверждения адгезивного покрытия, и

покрытие антиадгезивным покрытием поверхности с отвердевшим адгезивным покрытием,

нанесение слоев краски в соответствии с изобразительными элементами, представляющими собой маркировку, метки для автоматического считывания результата, на другую поверхность листа из гибкой пленки на области, ограниченные нанесенным контуром заготовки, и

сушку;

(б) отделение заготовки со слоем адгезивного покрытия и слоями красок от листа из гибкой пленки;

(в) снятие антиадгезивного покрытия с заготовки со слоем адгезивного покрытия и слоями красок;

(г) складывание секторов по линиям перфорации, где

складывание начинают с первого из N секторов для размещения чувствительного элемента, включая сектор для фиксации чувствительного элемента, после чего размещают чувствительный элемент в образовавшейся лунке,

далее складывают сектор для визуального просмотра чувствительного элемента на сформированную из вышеуказанных секторов подложку с размещенным чувствительным элементом в ее лунке, и

складывают сектор для закрывания чувствительного элемента, тем самым, покрывая чувствительный элемент;

(д) горячее ламинирование полученной тест-системы.

7. Способ изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата по п. 6, отличающийся тем, что нанесение контуров заготовки проводят вручную или осуществляют как одну из операций по изготовлению заготовки при использовании программы станка с числовым программным управлением.

8. Способ изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата по п. 6, отличающийся тем, что для нанесения адгезивного покрытия изготавливают маски, размещают их на заготовке и наносят адгезивное покрытие методом шелкографии.

9. Способ изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата по п. 6, отличающийся тем, что для нанесения на заготовку изобразительных элементов, представляющих собой маркировки, метки для использования автоматического считывания результатов, изготавливают маски для нанесения на заготовку слоев краски, размещают их на заготовке и наносят слои краски.

10. Способ изготовления тест-системы для проведения экспресс-диагностики инфекции Helicobacter pylori по уреазной активности биоптата по п. 6, отличающийся тем, что отделение заготовки со слоем адгезивного покрытия и слоями красок от листа гибкой пленки со стороны адгезивного покрытия проводят вручную резаком либо посредством вырубного штампа, изготовленного в соответствии с формой заготовки.