Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной медицине, и может применяться при моделировании болезни Гиршпрунга в эксперименте.
Известен способ моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте путем иссечения серозного и мышечного слоя дистального участка толстой кишки с замещением полихлорвиниловой трубкой. У крысы рассекают наружную оболочку толстой кишки, удаляют на необходимом протяжении серозную и мышечную оболочку вместе с ауэрбаховским нервным сплетением, а на подслизистую основу обнаженного участка наносят 5% раствор нитрата серебра (повреждая мейснеровское нервное сплетение). На внутренний футляр кишечной стенки накладывают, фиксируя, полихлорвиниловую трубку. (Чепурной Г.И., Морозов В.Г., Кивва А.Н., Панченко С.Н., патент РФ №2144699, 2000 г.)
Недостатками этого способа являются:
1. Высокая техническая сложность.
2. Несоответствие морфологии модели морфологии болезни Гиршпрунга (отсутствие у животного в зоне моделирования серозной и мышечной оболочек кишки).
3. Отсутствие возможности исследования на данной модели патогенетически обоснованных методов лечения на основе биотехнологий, в связи с несоответствием морфофизиологической картины указанной модели и болезни Гиршпрунга.
Ближайшим к заявляемому является способ моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте с использованием HgCl2 (Imamura et al,.. Pathophysiology of aganglionic colon segment: An experimental study on aganglionosis produced by a new method in the rat. Journal of Paediatric Surgery 10, 865-873, 1975).
Способ заключается в инъекционном введении в стенку толстой кишки крысы 0,01% раствора HgCl2.
Недостатками способа, выбранного в качестве прототипа, являются:
1. Низкая избирательность воздействия раствора HgCl2 вызывает повреждение не только нервной, но и других тканей (мышечной, эпителиальной и др.), что не соответствует морфофизиологической картине болезни Гиршпрунга и ограничивает возможности по исследованию новых методов лечения.
2. Высокая токсичность сухого HgCl2, что исключает возможность активного привлечения студентов младших курсов высших учебных заведений к научной деятельности, а также приводит к необходимости использования специального лабораторного оборудования.
Задачей настоящего изобретения является создание условий для исследований новых, патогенетически обоснованных методов лечения болезни Гиршпрунга с применением биотехнологий в эксперименте повышения безопасности способа.
Технический результат поставленной задачи достигается тем, что в способе моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте, включающем введение препарата в стенку толстой кишки, в качестве препарата используют 1% раствор глутамата натрия, который вводят крысе через анальное отверстие инсулиновым шприцем в стенку кишки, при этом вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки на протяжении 1,5 см, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата при общем объеме вводимого раствора в 1 мл.
При разработке модели болезни Гиршпрунга, пригодной для исследования новых, патогенетически обоснованных методов лечения на основе биотехнологий, основным требованием является соответствие морфофизиологической картины, наблюдаемой у модельного животного, морфофизиологической картине, наблюдаемой у пациентов, страдающих болезнью Гиршпрунга, а именно:
1. Наличие всех оболочек кишки (серозной, мышечной и слизистой).
2. Отсутствие в пораженном участке кишки нервных сплетений (Мейснеровского и Ауэрбаховского).
3. Полная морфологическая и функциональная сохранность в пораженном участке кишки всех тканей, кроме нервной.
Использование 1% раствора глутамата натрия вызывает избирательное поражение нервных клеток в зоне введения, приводящее к их гибели, путем апоптоза за счет использования эффекта эксайтотоксичности. Рецепторы к глутамату натрия присутствуют только на мембранах нервных клеток, соответственно, для других клеток глутамат натрия безвреден и может быть метаболизирован ими в качестве протеиногенной аминокислоты. Таким образом, введение глутамата натрия в стенку толстой кишки животного приводит к получению денервированного участка кишки, без повреждения тканей другой гистологической принадлежности, что соответствует морфофизиологической картине болезни Гиршрунга, и обеспечивает условия для исследования патогенетически обоснованных методов лечения на основе биотехнологий. Хирургическое иссечение оболочек кишки при воспроизведении предложенной модели также не выполняют.
Работа с глутаматом натрия, в том числе в сухом виде, не связана с риском для сотрудников и не требует использования специального оборудования, так как он не токсичен и свободно распространяется, в том числе как изделие пищевой промышленности.
Способ осуществляется следующим образом. Крысу линии Wistar вводят в ингаляционный эфирный наркоз. Фиксируют лигатурами в положении на спине. После подготовки операционного поля к краям анального отверстия крысы подшивают 4 лигатуры на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата. Затем фиксируют лигатуры зажимами Бильрота и выполняют девульсию ануса. Далее через анальное отверстие инсулиновым шприцом в стенку кишки вводят 1% раствор глутамата натрия. Вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки, затем продвигают ее глубже, инфильтрируя подслизистый слой и мышечную оболочку кишки на протяжении 1,5 см. Таким образом, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата. Общий объем 1% раствора глутамата натрия, введенного одному животному, составляет 1 мл. Далее лигатуры снимают, животное выводят из наркоза.
Способ позволяет воспроизводить моделирование болезни Гиршпрунга в рамках доклинических исследований новых методик лечения, в том числе с применением биотехнологий.
Способ безопасен для исследователей, прост в исполнении и, соответственно, может быть осуществлен специалистами, не обладающими высокой квалификацией, в том числе студентами. Широкая доступность и низкая стоимость глутамата натрия создают условия для активного применения метода в исследованиях.
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ БОЛЕЗНИ ГИРШПРУНГА | 1997 |
|
RU2144699C1 |
СПОСОБ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ ГИРШПРУНГА | 1998 |
|
RU2192790C2 |
Способ парциальной пластики наружного анального сфинктера у детей | 2023 |
|
RU2820000C1 |
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ ГИРШПРУНГА | 1998 |
|
RU2128952C1 |
СПОСОБ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ БОЛЕЗНИ ГИРШПРУНГА У ДЕТЕЙ | 1994 |
|
RU2095027C1 |
СПОСОБ ТРАНСАНАЛЬНОЙ РЕЗЕКЦИИ ПРЯМОЙ КИШКИ ПРИ БОЛЕЗНИ ГИРШПРУНГА У ДЕТЕЙ | 2009 |
|
RU2410046C1 |
СПОСОБ НАЛОЖЕНИЯ АНАСТОМОЗА МЕЖДУ ПОЛЫМИ ОРГАНАМИ БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ | 2011 |
|
RU2456943C1 |
СПОСОБ МАЛОИНВАЗИВНОГО ЛЕЧЕНИЯ ПАЦИЕНТОВ С ГЕМОРРОЕМ 3 И 4 СТАДИИ | 2014 |
|
RU2553937C1 |
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЛОКАЛЬНОГО НЕКРОЗА СТЕНКИ КИШКИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ | 2015 |
|
RU2594978C1 |
СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ БОЛЕЗНИ ГИРШПРУНГА У ДЕТЕЙ | 2014 |
|
RU2547614C1 |
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано при моделировании болезни Гиршпрунга. Способ моделирования включает в стенку толстой кишки 1% раствора глутамата натрия. Препарат вводят крысе через анальное отверстие инсулиновым шприцем. При этом вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки на протяжении 1,5 см, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата при общем объеме вводимого раствора в 1 мл. Способ безопасен, прост в исполнении и может быть осуществлен, в том числе студентами. Широкая доступность и низкая стоимость глутамата натрия создают условия для активного использования способа в различных исследованиях болезни Гиршпрунга в эксперименте.
Способ моделирования болезни Гиршпрунга в эксперименте, включающий введение препарата в стенку толстой кишки, отличающийся тем, что в качестве препарата используют 1% раствор глутамата натрия, который вводят крысе через анальное отверстие инсулиновым шприцем в стенку кишки, при этом вкол осуществляют в слизистую оболочку кишки на протяжении 1,5 см, выполняют 4 инъекции на 3, 6, 9 и 12 часов условного циферблата при общем объеме вводимого раствора в 1 мл.
.
FUJIMURA T et al | |||
Fluorescence Visualization of the Enteric Nervous Network in a Chemically Induced Aganglionosis Model | |||
PLoS One | |||
Токарный резец | 1924 |
|
SU2016A1 |
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ БОЛЕЗНИ ГИРШПРУНГА | 1997 |
|
RU2144699C1 |
МУТАНТНЫЙ ШТАММ Glarea lozoyensis И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ | 2009 |
|
RU2507252C2 |
I ВСЕСОЮЗНАЯ * •' " TPL'~"'n " rV'f''Jf*r'"lf ^ ft/ | 0 |
|
SU383531A1 |
ПОРТСИГАР С ПРИСПОСОБЛЕНИЕМ ДЛЯ СКРУЧИВАНИЯ ПАПИРОС | 1922 |
|
SU621A1 |
Паровоз для отопления неспекающейся каменноугольной мелочью | 1916 |
|
SU14A1 |
КИВВА А.Н | |||
Моделирование болезни Гиршпрунга | |||
Актуальные вопросы гастроэнтерологии | |||
Печь для непрерывного получения сернистого натрия | 1921 |
|
SU1A1 |
науч.-практ | |||
конф | |||
студентов, молодых ученых и специалистов, 1997, с | |||
Прибор для промывания газов | 1922 |
|
SU20A1 |
СКИБО Г.Г | |||
Изменения процессов рециклинга везикул в пресинапсах гиппокампа в условиях моделирования глутамат-нейротоксичности | |||
Нейрофизиология, 1990, т.22, N6, с | |||
Накладной замок с электрической сигнализацией | 1923 |
|
SU819A1 |
Авторы
Даты
2017-10-23—Публикация
2016-05-24—Подача