ИНГИБИТОРЫ КИНАЗЫ Российский патент 2017 года по МПК C07D471/04 A61K31/437 

Настоящее изобретение относится к соединениям и композициям, которые представляют собой ингибиторы р38 МАПК, пригодные в качестве противовоспалительных агентов при лечении, в частности, заболеваний дыхательных путей.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Митоген-активируемые протеинкиназы (МАПК) составляют семейство пролин-направленных серин/треонинкиназ, которые активируют свои субстраты двойным фосфорилированием. Существует четыре известных человеческих изоформы р38 МАР-киназы, p38α, p38β, p38γ и p38δ. р38-киназы, которые также известны как цитокин-супрессирующие белки, связывающие противовоспалительные лекарственные средства (CSBP), стресс-активируемые протеинкиназы (SAPK) и RK, являются ответственными за фосфорилирование (Stein et al., Ann. Rep. Med Chem., 1996, 31, 289-298) и активирующие факторы транскрипции (такие как ATF-2, MAX, CHOP и C/ERPb), также как другие киназы (такие как MAPKAP-K2/3 или MK2/3), и сами активируются при физическом и химическом стрессе (например, УФ, осмотический стресс), провоспалительными цитокинами и бактериальными липополисахаридами (ЛПС) (Herlaar E. & Brown Z., Molecular Medicine Today, 1999, 5, 439-447). Было показано, что продукты фосфорилирования р38 опосредуют выработку воспалительных цитокинов, включая фактор некроза опухолей-альфа (ФНОα), и интерлейкин (ИЛ-)-1, и циклооксигеназу-2 (ЦОГ-2). Также известно, что ИЛ-1 и ФНОα стимулируют выработку других провоспалительных цитокинов, таких как ИЛ-6 и ИЛ-8.

ИЛ-1 и ФНОα представляют собой биологические вещества, продуцируемые различными клетками, такими как моноциты или макрофаги. Было продемонстрировано, что ИЛ-1 опосредует разнообразные биологические активности, считаемые важными при иммунорегуляции и других физиологических условиях, таких как воспаление (например, Dinarello et al., Rev. Infect. Disease, 1984, 6, 51). Избыточная или нерегулируемая выработка ФНО (в частности, ФНОα) вовлечена в опосредование или обострение множества заболеваний, и считается, что ФНО может вызвать или усилить эффекты воспаления в целом. ИЛ-8 представляет собой хемотаксический фактор, вырабатываемый некоторыми типами клеток, включая мононуклеарные клетки, фибробласты, эндотелиальные клетки и кератиноциты. Его выработка из эндотелиальных клеток индуцируется ИЛ-1, ФНО или липополисахаридом (ЛПС). ИЛ-8 стимулирует множество функций in vitro. Было показано, что он обладает хемоаттрактантными свойствами в отношении нейтрофилов, Т-лимфоцитов и базофилов. Увеличение в выработке ИЛ-8 также ответственно за хемотаксис нейтрофилов в месте воспаления in vivo.

Ингибирование сигнальной трансдукции через р38, который в дополнение к ИЛ-1, ФНО и ИЛ-8, описанным выше, также необходим для синтеза и/или действия некоторых дополнительных провоспалительных белков (например, ИЛ-6, GM-CSF, ЦОГ-2, коллагеназа и стромелизин), как ожидается, будет весьма эффективным механизмом для регулирования чрезмерной и разрушительной активации иммунной системы. Данный ожидаемый результат поддерживается сильными и разнообразными противовоспалительными активностями, описанными для ингибиторов киназы р38 (Badger et al., J. Pharm. Exp. Thera., 1996, 279, 1453-1461; Griswold et al, Pharmacol. Comm.,1996, 7, 323-229). В частности, ингибиторы киназы р38 были описаны в качестве потенциальных средств для лечения ревматоидного артрита. В дополнение к связям между активацией p38 и хроническим воспалением и артритом существуют также данные, подразумевающую роль р38 в патогенезе заболеваний дыхательных путей, в частности ХОБЛ и астмы. Стрессорные раздражители (включая табачный дым, инфекции или продукты окисления) могут вызвать воспаление в области легких. Было показано, что ингибиторы р38 ингибируют индуцированные ЛПС и овальбумином в дыхательных путях ФНО-α, ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-4, ИЛ-5 и ИЛ-13 (Haddad et al, Br. J. Pharmacol., 2001, 132 (8), 1715-1724; Underwood et al, Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. 2000, 279, 895-902; Duan et al., 2005 Am. J. Respir. Crit. Care Med., 171, 571-578; Escott et al Br. J. Pharmacol., 2000, 131, 173-176; Underwood et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 2000, 293, 281-288). Кроме того, они значительно ингибируют нейтрофилез и высвобождение MMP-9 в моделях животных с применением ЛПС, озона или табачного дыма. Имеется также значительный комплекс данных доклинических исследований, указывающий на потенциальные преимущества ингибирования киназы p38, которые имеют отношение к легкому (Lee et al., Immunopharmacology, 2000, 47, 185-200). Таким образом, терапевтическое ингибирование активации p38 может быть важным для регуляции воспаления дыхательных путей.

Роль пути р38МАПК в различных заболеваниях была рассмотрена P. Chopra et al. (Expert Opinion on Investigational Drugs, 2008, 17(10), 1411-1425). Полагают, что соединения настоящего изобретения могут быть использованы для лечения р38-опосредованных заболеваний, таких как астма, хронический или острый бронхостеноз, бронхит, острое повреждение легких и бронхоэктаз, легочная артериальная гипертензия, туберкулез, рак легкого, воспаление в общем (например, воспалительное заболевание кишечника), артрит, нейровоспаление, боль, лихорадка, фиброзные заболевания, легочные нарушения и заболевания (например, гипероксическое альвеолярное повреждение), сердечно-сосудистые заболевания, реперфузионное повреждение после ишемии и застойная сердечная недостаточность, кардиомиопатия, инсульт, ишемия, реперфузионное повреждение, почечное реперфузионное повреждение, отек головного мозга, травма нервной системы и травма головного мозга, нейродегенеративные нарушения, нарушения центральной нервной системы, заболевание печени и нефрит, желудочно-кишечные заболевания, язвенные заболевания, болезнь Крона, заболевания глаз, офтальмологические состояния, глаукома, сильное повреждение глазной ткани и глазные травмы, диабет, диабетическая нефропатия, заболевания кожи, миалгия в результате инфекции, грипп, эндотоксиновый шок, синдром токсического шока, аутоиммунное заболевание, отторжение трансплантата, связанные с резорбцией костной ткани заболевания, множественный склероз, псориаз, экзема, нарушения женской репродуктивной системы, патологические (но не злокачественные) состояния, такие как гемангиомы, ангиофиброма носоглотки и бессосудистый некроз костей, доброкачественные и злокачественные опухоли/неоплазия, включая рак, лейкемию, лимфому, системную красную волчанку (СКВ), ангиогенез, включая неоплазию, кровотечение, коагуляцию, радиационное повреждение и/или метастаз. Постоянное высвобождение активного ФНО может вызывать кахексию и анорексию, и ФНО может приводить к смерти. ФНО также вовлечен в инфекционные заболевания. Они включают, например, малярию, микобактериальную инфекцию и менингит. Они также включают вирусные инфекции, такие как ВИЧ, вирус гриппа и вирус герпеса, включая вирус простого герпеса 1-го типа (ВПГ-1), вирус простого герпеса 2-го типа (ВПГ-2), цитомегаловирус (ЦМВ), вирус ветряной оспы (ВВО), вирус Эпштейна-Барр, человеческий вирус герпеса-6 (HHV-6), человеческий вирус герпеса-7 (HHV-7), человеческий вирус герпеса-8 (HHV-8), псевдобешенство и ринотрахеит, среди прочих.

Известные ингибиторы киназы р38 были рассмотрены G. J. Hanson (Expert Opinions on Therapeutic Patents, 1997, 7, 729-733) J Hynes et al. (Current Topics in Medicinal Chemistry, 2005, 5, 967-985), C. Dominguez et al (Expert Opinions on Therapeutics Patents, 2005, 15, 801-816) и L. H. Pettus & R. P. Wurtz (Current Topics in Medicinal Chemistry, 2008, 8, 1452-1467). Ингибиторы киназы р38, содержащие триазолопиридиновый фрагмент, известны в данной области техники, например, WO07/091152, WO04/072072, WO06/018727.

Другие ингибиторы р38 МАР-киназы описаны в одновременно рассматриваемых заявках PCT/EP2011/072375, РСТ/EP2012/074446 и РСТ/EP2012/074450.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Соединения настоящего изобретения представляют собой ингибиторы p38 митоген-активируемой протеинкиназы («p38 MAПK», «p38-киназы» или «p38»), включая киназу p38α, и представляют собой ингибиторы выработки цитокинов и хемокинов, включая выработку ФНОα и ИЛ-8. Они имеют ряд терапевтических применений для лечения воспалительных заболеваний, в частности аллергических и неаллергических заболеваний дыхательных путей, более определенно обструктивных или воспалительных заболеваний дыхательных путей, таких как хроническая обструктивная болезнь легких («ХОБЛ») и астма. Следовательно, они наиболее подходят для доставки в легкие с помощью ингаляции через нос или рот.

СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Одновременно рассматриваемые международные заявки № PCT/EP2012/074446 и РСТ/EP2012/074450 относятся, в частности, к соединениям формулы (I), описанным в данных заявках, которые представляют собой ингибиторы р38 МАПК, пригодные в качестве противовоспалительных агентов для лечения, в частности, заболеваний дыхательных путей.

Настоящее изобретение относится к соединениям, которые представляют собой ингибиторы р38 МАПК, находящиеся в пределах объема Формулы (I) № PCT/EP2012/074446 и Формулы (I) PCT/EP2012/074450, но особым образом не раскрытые там.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В соответствии с настоящим изобретением обеспечивают соединение, выбранное из группы, состоящей из:

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(4-[3-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-метил-пиперазин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пиперидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(3-диметиламино-пропил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[3-(4-метил-пиперазин-1-ил)-пропил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[5-трет-Бутил-2-(2-диметиламино-этил)-2H-пиразол-3-ил]-3-{4-[3-(2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-2-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{-4-[3-(2,6-дихлор-фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3[4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пирролидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-метокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-гидрокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(3-метокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(этил-метил-амино)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(5-метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

и его фармацевтически приемлемые соли.

В частности, настоящее изобретение обеспечивает соединение, выбранное из группы, состоящей из соединений, перечисленных в указанной ниже Таблице, или его фармацевтически приемлемую соль:

Название соединения Пр. № 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 1 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-метил-пиперазин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 2 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']-бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 3 1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']-бипиразолил-5-ил)-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]-триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина 4 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пиперидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 5 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 6 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[(1S,4R)-4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]мочевины формиат 7 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((R)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 8 1-[3-трет-Бутил-1'-(3-диметиламино-пропил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 9 1-{3-трет-Бутил-1'-[3-(4-метил-пиперазин-1-ил)-пропил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 10 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 11 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 12 1-[5-трет-Бутил-2-(2-диметиламино-этил)-2H-пиразол-3-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил}-мочевины формиат 13 1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 14 1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 15 1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-2-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 16 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-(2,6-дихлор-фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 17 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3[(1S,4R)-4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевина 18 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пирролидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 19 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-метокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 20 1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-гидрокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 21 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']-бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло-[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 22 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(3-метокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 23 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(этил-метил-амино)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 24 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 25 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((1S,4S)-5-метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 26 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина 27 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 28 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 29 1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат 30

В другом аспекте изобретение включает фармацевтические композиции, содержащие соединение изобретения вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями и/или эксципиентами. Наиболее предпочтительными являются композиции, адаптированные для ингаляции при введении в легкие.

В другом аспекте изобретение включает применение соединения изобретения для лечения заболеваний или состояний, которые имеют положительный результат от ингибирования активности р38 МАР-киназы. Лечение обструктивных или воспалительных заболеваний дыхательных путей представляет собой предпочтительное применение. Все формы обструктивных или воспалительных заболеваний дыхательных путей можно потенциально лечить с помощью соединений настоящего изобретения, в частности обструктивное или воспалительное заболевание дыхательных путей, которое является членом, выбранным из группы, состоящей из хронической эозинофильной пневмонии, астмы, ХОБЛ, ХОБЛ, которая включает хронический бронхит, эмфизему легких или одышку, связанную или не связанную с ХОБЛ, ХОБЛ, которая характеризуется необратимой, прогрессивной обструкцией дыхательных путей, респираторного дистресс-синдрома взрослых (РДСВ), обострения гиперреактивности дыхательных путей вследствие другой лекарственной терапии и заболевания дыхательных путей, которое связано с легочной гипертензией, хронических воспалительных заболеваний, включая муковисцидоз, бронхоэктаз и легочный фиброз (идиопатический). Предполагается эффективность при введении ингибиторов киназы p38 или местно в легкое (например, с помощью ингаляции и интраназальной доставки) или посредством системных путей (например, пероральная, внутривенная и подкожная доставка).

Соединения изобретения могут существовать в одной или более геометрических, оптических, энантиомерных, диастереомерных и таутомерных формах, включая, но не ограничиваясь ими, цис- и трансформы, R-, S- и мезоформы. Если не указано иначе, ссылка на определенное соединение включает все данные изомерные формы, включая их рацемические и другие смеси. В случае необходимости данные изомеры можно выделять из их смесей с помощью применения или адаптации известных способов (например, хроматографических методик и методик перекристаллизации). В случае необходимости данные изомеры могут быть получены с помощью применения адаптации известных способов (например, асимметрического синтеза).

Используемый в настоящем описании термин «соли» включает основно-аддитивные, кислотно-аддитивные и соли аммония. Соединения изобретения, которые являются кислотными, могут образовывать соли, включая фармацевтически приемлемые соли, с основаниями, такими как гидроксиды щелочных металлов, например, гидроксиды натрия и калия; гидроксиды щелочноземельных металлов, например, гидроксиды кальция, бария и магния; с органическими основаниями, например, N-метил-D-глюкамином, холином, трис(гидроксиметил)аминометаном, L-аргинином, L-лизином, N-этилпиперидином, дибензиламином и подобными. Те соединения изобретения, которые являются основными, могут образовывать соли, включая фармацевтически приемлемые соли, с неорганическими кислотами, например, с галогенводородными кислотами, такими как хлористоводородная и бромистоводородная кислоты, серной кислотой, азотной кислотой или фосфорной кислотой и подобными и с органическими кислотами, например, уксусной, трифторуксусной, винной, янтарной, фумаровой, малеиновой, яблочной, салициловой, лимонной, метансульфоновой, п-толуолсульфоновой, бензойной, бензолсульфоновой, глютаминовой, молочной и миндальной кислотами и подобными. Те соединения изобретения, которые содержат основный атом азота, могут также образовывать четвертичные соли аммония с фармацевтически приемлемым противоионом, таким как аммоний, хлорид, бромид, ацетат, формиат, п-толуолсульфонат, сукцинат, гемисукцинат, нафталин-биссульфонат, метансульфонат, трифторацетат, ксинафоат и подобный. Для обзора солей см. Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germany, 2002).

Ожидается, что соединения изобретения могут быть получены в форме гидратов и сольватов. Любая ссылка в настоящем описании, включая формулу изобретения настоящего описания, на «соединения, относящиеся к изобретению», или «соединения изобретения», или «настоящие соединения» и подобные включает ссылку на соли, гидраты и сольваты таких соединений. Термин «сольват» применяют в настоящем изобретении для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение изобретения и стехиометрическое количество одной или более молекул фармацевтически приемлемого растворителя, например, этанола. Термин «гидрат» применяют, когда указанный растворитель представляет собой воду.

Отдельные соединения изобретения могут существовать в нескольких полиморфных формах и могут быть получены с различными кристаллическими структурами.

Соединения можно также вводить в форме их пролекарств. Таким образом, некоторые производные соединений, которые могут быть активными в своей собственной форме или сами могут обладать небольшой или не обладать фармакологической активностью, могут при введении в или на тело превращаться в соединения изобретения, обладающие желаемой активностью, например, с помощью гидролитического расщепления. Данные производные называют «пролекарствами». Дополнительную информацию о применении пролекарств можно найти в Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi and V.J. Stella) и Bioreversible Carriers in Drug Design, Pergamon Press, 1987 (ed. E. B. Roche, American Pharmaceutical Association; C.S. Larsen and J. Østergaard, Design and application of prodrugs, In Textbook of Drug Design and Discovery, 3^rd Edition, 2002, Taylor and Francis).

Пролекарства в соответствии с изобретением могут, например, получить заменой подходящих функциональных групп, присутствующих в соединениях изобретения, определенными фрагментами, известными специалисту в данной области техники как «профрагменты», как описано, например, в Design of Prodrugs by H. Bundgaard (Elsevier, 1985).

ВАРИАНТЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В одном варианте осуществления соединения изобретения представляют собой соединения формулы (Ia) или их фармацевтически приемлемые соли:

в которой группа R₂ выбрана из группы, состоящей из:

- 1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этила);

- 2-[1,4]оксазепан-4-ил-этила;

- 2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этила;

- {2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этила};

- 1'-(2-диметиламино-этила);

- 1'-(3-диметиламино-пропила);

- 1'-[3-(4-метил-пиперазин-1-ил)-пропила];

- 1'-(2-диметиламино-этила);

- 1'-(2-пирролидин-1-ил-этила);

- 1'-[2-(4-метокси-пиперидин-1-ил)-этила];

- 1'-{2-[(2-гидрокси-этил)-метил-амино]-этила};

- 1'-[2-((S)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-этила];

- 1'-[2-(3-метокси-пирролидин-1-ил)-этила];

- 1'-[2-(этил-метил-амино)-этила];

- 1'-[2-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-этила];

- 1'-[2-((1S,4S)-5-метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил)этила];

- 2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ила].

В другом варианте осуществления соединения изобретения представляют собой соединения формулы (Ib) или их фармацевтически приемлемые соли:

в которой группа R₂ выбрана из группы, состоящей из:

- 1'-(2-пиперидин-1-ил-этила);

- 1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этила);

- 1'-(2-диметиламино-этила).

В другом варианте осуществления соединения изобретения представляют собой соединения формулы (Ic) или их фармацевтически приемлемые соли:

в которой группа R₃ выбрана из группы, состоящей из:

- 2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ила];

- 2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-2-ила];

- 2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ила].

В другом варианте осуществления соединения изобретения представляют собой соединения формулы (Id) или их фармацевтически приемлемые соли:

в которой группа R₄ выбрана из группы, состоящей из:

- 2-(2-диметиламино-этила);

- 2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ила].

Полезность

Как упоминалось выше, соединения изобретения представляют собой p38MAПK-ингибиторы и, таким образом, их можно применять для лечения заболеваний или состояний, для которых благоприятно ингибирование фермента p38. Данные заболевания и состояния являются известными из литературы, и некоторые упоминались выше. Однако соединения обычно применяют в качестве противовоспалительных агентов, в частности для применения при лечении респираторных заболеваний. В частности, соединения можно применять для лечения хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), хронического бронхита, фиброза легкого, пневмонии, респираторного дистресс-синдрома взрослых (РДСВ), легочной эмфиземы или вызванной курением эмфиземы, внутренней (неаллергической) астмы и внешней (аллергической) астмы, мягкой астмы, умеренной астмы, тяжелой астмы, устойчивой к стероидам астмы, нейтрофильной астмы, бронхиальной астмы, вызванной упражнениями астмы, профессиональной астмы и вызванной постбактериальной инфекцией астмы, муковисцидоза, легочного фиброза и бронхоэктаза.

Настоящее изобретение обеспечивает применение соединений изобретения для профилактики и/или лечения любого заболевания или состояния, для которого благоприятно ингибирование фермента p38.

В дополнительном аспекте настоящее изобретение обеспечивает применение соединений изобретения для получения лекарственного средства для профилактики и/или лечения любого заболевания или состояния, для которого благоприятно ингибирование фермента p38.

Кроме того, настоящее изобретение обеспечивает способ профилактики и/или лечения любого заболевания, для которого благоприятно ингибирование фермента p38, указанный способ включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения изобретения.

Композиции

Как упоминалось выше, соединения изобретения представляют собой ингибиторы киназы р38 и являются пригодными для лечения некоторых заболеваний, например, воспалительных заболеваний дыхательных путей. Примеры данных заболеваний приводятся выше и включают астму, ринит, аллергический синдром дыхательных путей, бронхит и хроническую обструктивную болезнь легких.

Следует понимать, что определенный уровень доз для любого конкретного пациента будет зависеть от ряда факторов, включая активность определенного применяемого соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, режим питания, время введения, путь введения, скорость экскреции, комбинацию лекарственных средств и тяжесть определенного подвергаемого лечению болезни. Оптимальные уровни доз и частота введения дозы будут определяться с помощью клинических испытаний, как требуется в фармацевтической области техники. В общем, диапазон дневной дозы для перорального введения будет находиться в пределах диапазона от приблизительно 0,001 мг до приблизительно 100 мг на кг массы тела человека, часто от 0,01 мг до приблизительно 50 мг на кг, например, от 0,1 до 10 мг на кг в единичных или разделенных дозах. В общем, диапазон дневной дозы для ингаляционного введения будет находиться в пределах диапазона от приблизительно 0,1 мкг до приблизительно 1 мг на кг массы тела человека, предпочтительно от 0,1 мкг до 50 мкг на кг в единичных или разделенных дозах. С другой стороны, может быть необходимо применять дозы вне данных пределов в некоторых случаях. Для целей изобретения ингаляционное введение является предпочтительным.

Соединения изобретения могут получить для введения любым путем, соответствующим их фармакокинетическим свойствам. Перорально вводимые композиции могут быть в форме таблеток, капсул, порошков, гранул, пастилок, жидких или гелеобразных препаратов, таких как пероральные, местные или стерильные парентеральные растворы или суспензии. Таблетки и капсулы для перорального введения могут представлять собой единичную лекарственную форму и могут содержать стандартные эксципиенты, такие как связующие агенты, например, сироп, камедь, желатин, сорбит, трагант или поливинилпирролидон; наполнители, например, лактоза, сахар, кукурузный крахмал, фосфат кальция, сорбит или глицин; скользящее вещество для изготовления таблеток, например, стеарат магния, тальк, полиэтиленгликоль или диоксид кремния; разрыхлители, например, картофельный крахмал или приемлемые смачивающие агенты, такие как лаурилсульфат натрия. Таблетки могут быть покрыты в соответствии со способами, хорошо известными в стандартной фармацевтической практике. Пероральные жидкие препараты могут быть в форме, например, водных или масляных суспензий, растворов, эмульсий, сиропов или эликсиров или могут быть представлены в виде сухого продукта для разведения в воде или другом подходящем наполнителе перед применением. Данные жидкие препараты могут содержать стандартные добавки, такие как суспендирующие агенты, например, сорбит, сироп, метилцеллюлоза, сироп глюкозы, желатин, гидрированные пищевые жиры; эмульгаторы, например, лецитин, сорбитан моноолеат или камедь; неводные наполнители (которые могут содержать пищевые масла), например, миндальное масло, фракционированное кокосовое масло, жирные сложные эфиры, такие как глицерин, пропиленгликоль или этиловый спирт; консерванты, например, метил или пропил-п-гидроксибензоат или сорбиновая кислота и по желанию стандартные ароматизаторы или красители.

Для местного применения на кожу лекарственное средство можно изготавливать в виде крема, лосьона или мази. Кремовые или мазевые составы, которые можно применять для лекарственного средства, представляют собой стандартные составы, хорошо известные в данной области техники, например, как описано в стандартных руководствах по фармацевтике, таких как Британская фармакопея.

Активный ингредиент можно также вводить парентерально в стерильной среде. В зависимости от используемого наполнителя и концентрации лекарственное средство можно или суспендировать, или растворять в наполнителе. Предпочтительно, вспомогательные вещества, такие как местный анестетик, консервант и буферные вещества можно растворять в наполнителе.

Однако для лечения воспалительного заболевания дыхательных путей соединения изобретения можно также составить для ингаляции, например, в виде назального спрея, или сухого порошка, или аэрозольных ингаляторов. Для доставки путем ингаляции активное соединение находится предпочтительно в форме микрочастиц. Их можно получить рядом методик, включая высушивание распылением, лиофилизацию и микронизацию. Аэрозоль можно получить, применяя, например, струйные распылители под давлением или ультразвуковые распылители, предпочтительно применяя дозированные аэрозоли, распыляющиеся под действием пропеллента, или введение без применения пропеллента микронизированных активных соединений из, например, ингаляционных капсул или других систем доставки на основе «сухого порошка».

В качестве примера композицию изобретения можно получить в виде суспензии для доставки из ингалятора или в виде аэрозоля в жидком пропелленте, например, для применения в ингаляторе отмеренных доз с распылением сжатым воздухом (PMDI). Пропелленты, пригодные для применения в PMDI, являются известными специалисту в данной области техники и включают CFC-12, HFA-134a, HFA-227, HCFC-22 (CCl₂F₂) и HFA-152 (CH₄F₂ и изобутан).

В предпочтительном варианте осуществления изобретения композиция изобретения находится в форме сухого порошка для доставки, применяя порошковый ингалятор (DPI). Многие типы DPI являются известными.

Микрочастицы для доставки введением можно составить с эксципиентами, которые способствуют доставке и высвобождению. Например, в порошковом составе микрочастицы можно составлять с большими частицами носителя, которые способствуют протеканию из DPI в легкое. Подходящие частицы носителей являются известными и включают частицы лактозы; они могут обладать масс-медианным аэродинамическим диаметром более чем 90 мкм.

В случае состава на основе аэрозоля пример представляет собой:

Соединение изобретения 24 мг/емкость Лецитин, NF жидк. конц. 1,2 мг/емкость Трихлорфторметан, NF 4,025 г/емкость Дихлордифторметан, NF 12,15 г/емкость

Активные соединения можно дозировать, как описано в зависимости от применяемой системы для ингаляции. В добавление к активным соединениям формы для введения могут дополнительно содержать эксципиенты, такие как, например, пропелленты (например, фриген в случае дозированных аэрозолей), поверхностно-активные вещества, эмульгаторы, стабилизаторы, консерванты, ароматизаторы, наполнители (например, лактоза в случае порошковых ингаляторов) или при необходимости дополнительные активные соединения.

Для целей ингаляции является доступным большой ряд систем, с помощью которых можно генерировать и вводить аэрозоли с оптимальным размером частиц, применяя методику ингаляции, которая является пригодной для пациента. В добавление к применению вспомогательных устройств (спейсерные устройства, расширительные устройства), и грушевидных емкостей (например, Nebulator®, Volumatic®), и автоматических устройств, испускающих распыляемый спрей (Autohaler®), для дозированных аэрозолей, в частности в случае порошковых ингаляторов имеется ряд технических решений (например, Diskhaler®, Rotadisk®, Turbohaler® или ингаляторы, например, как описано в EP-A-0505321). Дополнительно, соединения изобретения можно доставлять в многокамерных устройствах, таким образом, обеспечивая доставку комбинированных агентов.

Комбинации

Другие соединения можно комбинировать с соединениями, относящимися к изобретению, для профилактики и лечения воспалительных заболеваний, в частности респираторных заболеваний. Таким образом, настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим терапевтически эффективное количество соединения изобретения и один или более других терапевтических агентов. Подходящие терапевтические агенты для комбинированной терапии с соединениями изобретения включают, но не ограничиваются ими: (1) кортикостероиды, такие как флутиказона пропионат, флутиказона фуроат, мометазона фуроат, беклометазона дипропионат, циклесонид, будесонид, GSK 685698, GSK 870086, QAE 397, QMF 149, TPI-1020; (2) агонисты β2-адренорецепторов, такие как сальбутамол, альбутерол, тербуталин, фенотерол и агонисты β2-адренорецепторов пролонгированного действия, такие как сальметерол, индакатерол, формотерол (включая формотерола фумарат), арформотерол, кармотерол, GSK 642444, GSK 159797, GSK 159802, GSK 597501, GSK 678007, AZD3199, вилантерол, олодатерол, абедитерол; (3) комбинированные продукты, состоящие из кортикостероида/β2-агониста пролонгированного действия, такие как сальметерол/флутиказона пропионат (Адваир/Серетид), формотерол/будесонид (Симбикорт), формотерол/флутиказона пропионат (Флутиформ), формотерол/циклесонид, формотерол/мометазона фуроат, индакатерол/мометазона фуроат, индакатерол/QAE 397, GSK 159797/GSK 685698, GSK 159802/GSK 685698, GSK 642444/GSK 685698, GSK 159797/GSK 870086, GSK 159802/GSK 870086, GSK 642444/GSK 870086, арформотерол/циклесонид; (4) антихолинергические средства, например, антагонисты мускариновых-3 (M3) рецепторов, такие как ипратропия бромид, тиотропия бромид, аклидиний (LAS-34273), NVA-237, GSK 233705, даротропий, GSK 573719, GSK 961081, QAT 370, QAX 028; (5) M3-антихолиноэргические/β2-адренорецепторные агонисты с двойным фармакологическим действием, такие как GSK961081; (6) модуляторы лейкотриенов, например, антагонисты лейкотриенов, такие как монтелукаст, зафируласт или пранлукаст, или ингибиторы биосинтеза лейкотриенов, такие как Зилетуон или BAY-1005, или антагонисты LTB4, такие как Амелубант, или ингибиторы FLAP, такие как GSK 2190914, AM-103; (7) ингибиторы фосфодиэстеразы-IV (ФДЭ-IV) (пероральные или ингаляционные), такие как рофлумиласт, циломиласт, оглемиласт, ONO-6126, тетомиласт, тофимиласт, UK 500,001, GSK 256066; (8) антигистаминовые препараты, например, селективные антагонисты гистамин-1 (H1) рецептора, такие как фексофенадин, цетиризин, лоратадин или астемизол или двойные антагонисты H1/H3-рецепторов, такие как GSK 835726, GSK 1004723; (9) антитуссивные вещества, такие как кодеин или декстраморфан; (10) муколитик, например, N-ацетилцистеин или фудостеин; (11) отхаркивающее средство/мукокинетический модулятор, например, амброксол, гипертонические растворы (например, солевой раствор или маннит) или поверхностно-активное вещество; (12) пептидный муколитик, например, рекомбинантная человеческая дезоксирибонуклеаза I (дорназа-альфа и рчДНКаза) или гелицидин; (13) антибиотики, например, азитромицин, тобрамицин и азтреонам; (14) неселективные ингибиторы ЦОГ-1/ЦОГ-2, такие как ибупрофен или кетопрофен; (15) ингибиторы ЦОГ-2, такие как целекоксиб и рофекоксиб; (16) антагонисты VLA-4, такие как те, что описаны в WO97/03094 и WO97/02289; (17) ингибиторы TACE и ингибиторы ФНО-α, например, анти-ФНО моноклональные антитела, такие как Ремикейд и CDP-870 и ФНО-рецепторные иммуноглобулиновые молекулы, такие как Энбрел; (18) ингибиторы матриксной металлопротеиназы, например, MMP-12; (19) ингибиторы человеческой нейтрофильной эластазы, такие как ONO-6818 или те, что описаны в WO2005/026124, WO2003/053930 и WO06/082412; (20) антагонисты A2b, такие как те, что описаны в WO2002/42298; (21) модуляторы функции хемокиновых рецепторов, например, антагонисты CCR3 и CCR8; (22) соединения, которые модулируют действие других простаноидных рецепторов, например, антагонист тромбоксана A₂; антагонисты DP1, такие как MK-0524, антагонисты CRTH2, такие как ODC9101 и AZD1981 и смешанные антагонисты DP1/CRTH2, такие как AMG 009; (23) агонисты PPAR, включая агонисты PPAR альфа (такие как фенофибрат), агонисты PPAR дельта, агонисты PPAR гамма, такие как пиоглитазон, розиглитазон и балаглитазон; (24) метилксантины, такие как теофиллин или аминофиллин и комбинации метилксантин/кортикостероид, такие как теофиллин/будесонид, теофиллин/флутиказона пропионат, теофиллин/циклесонид, теофиллин/мометазона фуроат и теофиллин/беклометазона дипропионат; (25) агонисты A2a, такие как те, что описаны в EP1052264 и EP1241176; (26) CXCR2 или ИЛ-8-антагонисты, такие как SCH 527123 или GSK 656933; (27) модуляторы IL-R передачи сигнала, такие как кинерет и ACZ 885; (28) антагонисты MCP-1, такие как ABN-912.

Изобретение также относится к набору, содержащему фармацевтические композиции соединений изобретения отдельно, или в комбинации, или в смеси с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями и/или эксципиентами и устройство, которое может быть одно- или многодозовым порошковым ингалятором, ингалятором отмеренных доз или небулайзером.

Общая экспериментальная информация

Сокращения, используемые в экспериментальной части: АсОН=уксусная кислота; водн.=водный; ДХМ=дихлорметан; ДИАД=диизопропилазодикарбоксилат; ДИПЭА=диизопропилэтиламин; ДМАП=N,N-диметиламинопиридин; ДМФ=N,N-диметилформамид; d₆-ДМСО=дейтерированный диметилсульфоксид; EDC=1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимида гидрохлорид; EtOAc=этилацетат; EtOH=этанол; Et₂O=диэтиловый эфир; Et₃N=триэтиламин; EtNiPr₂=диизопропилэтиламин; КФХ=колоночная флэш-хроматография; ч=час; HATU=2-(7-аза-1H-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфат; HOBt=1-гидрокси-бензотриазол; ВЭЖХ=высокоэффективная жидкостная хроматография; ПДС=промышленный денатурированный спирт; ЖХМС=жидкостная хроматография - масс-спектрометрия; NaOH=гидроксид натрия; MeCN=ацетонитрил; МеОН=метанол; мин=минуты; NH₃=аммиак; ЯМР=ядерный магнитный резонанс; КТ=комнатная температура; R_t=время удерживания; нысыщ.=насыщенный; SCX-2=сильная катионообменная хроматография; ТФУК=трифторуксусная кислота; ТГФ=тетрагидрофуран; Н₂О=вода; Xantphos=4,5-Бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен; X-Select=колонка ВЭЖХ Waters X-select; ИПС=пропан-2-ол; LDA=диизопропиламид лития; MDAP=масса-направленная автоочистка; Ph₃P=трифенилфосфин; ТБАФ=фторид тетрабутиламмония.

В методиках, которые следуют, после каждого исходного материала обычно предоставляется ссылка на номер Промежуточного продукта/Примера. Это предусмотрено только для помощи специалисту в области химии. Исходный материал не обязательно может быть получен из называемой партии.

При ссылке на использование «подобная» или «аналогичная» методика специалисту в данной области техники будет очевидно, что такая методика может включать незначительные изменения, например, температура реакции, количество реагента/растворителя, время реакции, условия обработки или условия хроматографической очистки.

Номенклатуру структур определяли с использованием Autonom 2000 наименование программного обеспечения от MDL Inc. Когда номенклатуру структур не могли определить с использованием Autonom, применяли ACD/Название сервисной программы части ACD/Labs Версия 12.00 Версия продукта 12.5 (Build 45133, 16 Dec 2010). Стереохимические расположения соединений основывались на сравнениях с данными, изложенными в WO2008/043019 для ключевых Промежуточных продуктов. Все реакции проводили в безводных условиях и в атмосфере азота или аргона, если не указано иначе. Если не указано иначе, все превращения проводили при температуре окружающей среды (комнатной температуре).

ЯМР-спектры получали на спектрометре Varian Unity Inova 400 с 5 мм датчиком тройного резонанса с инверсным детектированием, функционирующим при 400 МГц, или на спектрометре Bruker Avance DRX 400 с 5 мм датчиком TXI тройного резонанса с инверсным детектированием, функционирующим при 400 МГц, или на спектрометре Bruker Avance DPX 300 со стандартным 5 мм двухчастотным датчиком, функционирующим при 300 МГц. Сдвиги даны в м.д. относительно тетраметилсилана (δ=0 м.д.). Значения J приведены в Гц повсеместно. ЯМР-спектры определяли с использованием DataChord Spectrum Analyst Версия 4.0.b21 или SpinWorks версия 3.

Когда продукты очищали колоночной флэш-хроматографией (КФХ), «флэш диоксид кремния» относится к силикагелю для хроматографии от 0,035 до 0,070 мм (от 220 до 440 меш) (например, Fluka силикагель 60), и применяемое давление азота вплоть до 10 фунт/кв.дюйм ускоряло элюирование с колонки, или применение системы очистки CombiFlash® Companion, или применение системы очистки Biotage SP1. Все растворители и коммерческие реагенты применяли в том виде, в каком они были получены.

Соединения, очищенные с помощью препаративной ВЭЖХ, очищали с использованием С18-колонки с обращенной фазой (100×22,5 мм в. д. колонки Genesis с размером частиц 7 мкм), или колонки Phenyl-Hexyl (250×21,2 мм в. д. колонки Genesis с размером частиц 5 мкм), УФ-детектирование от 220 до 254 нм, поток 5-20 мл/мин), элюируя градиентами от 100-0 до 0-100% вода/ацетонитрил (содержащий 0,1% ТФУК или 0,1% муравьиную кислоту) или вода/МеОН (содержащий 0,1% ТФУК или 0,1% муравьиную кислоту), или С18-колонки с обращенной фазой (19×250 мм, XBridge OBD, с размером частиц 5 мкм), элюируя градиентами от 100-0 до 0-100% вода/ацетонитрил (содержащий 0,1% NH₄OH); или колонки ChiralPak IC (10×250 мм в.д., с размером частиц 5 мкм), если не указано иначе. Фракции, содержащие требуемый продукт (идентифицированный с помощью ЖХМС-анализа), объединяли, органический растворитель удаляли с помощью испарения и оставшийся водный остаток лиофилизировали с получением конечного продукта. Продукты, очищенные с помощью препаративной ВЭЖХ, выделяли в виде свободного основания, формиата или солей ТФУК, если не указано иначе.

Применяемые системы жидкостная хроматография - масс-спектрометрия (ЖХМС) и системы ВЭЖХ представляют собой:

Способ 1

Квадрупольный масс-спектрометр Waters Platform LC с C18-колонкой с обращенной фазой (30×4,6 мм Phenomenex Luna, размер частиц 3 мкм), элюирование A: вода + 0,1% муравьиная кислота; B: ацетонитрил + 0,1% муравьиная кислота. Градиент:

Градиент-Время Поток мл/мин %A %B 0,00 2,0 95 5 0,50 2,0 95 5 4,50 2,0 5 95 5,50 2,0 5 95 6,00 2,0 95 5

Детектирование - МС, ELS, УФ (отбор 200 мкл для проведения МС с линейным детектором HP1100 DAD). МС способ ионизации - электрораспыление (положительный и отрицательный ион).

Способ 2

Квадрупольный масс-спектрометр Waters ZMD с C18-колонкой с обращенной фазой (30×4,6 мм Phenomenex Luna, размер частиц 3 мкм), элюирование A: вода + 0,1% муравьиная кислота; B: ацетонитрил + 0,1% муравьиная кислота. Градиент:

Градиент-Время Поток мл/мин %A %B 0,00 2,0 95 5 0,50 2,0 95 5 4,50 2,0 5 95 5,50 2,0 5 95 6,00 2,0 95 5

Детектирование - МС, ELS, УФ (отбор 200 мкл для проведения МС с линейным детектором Waters 996 DAD). МС способ ионизации - электрораспыление (положительный и отрицательный ион).

Способ 3

Квадрупольный масс-спектрометр Waters ZMD с C18-колонкой с обращенной фазой (30×4,6 мм Phenomenex Luna, размер частиц 3 мкм), элюирование A: вода + 0,1% муравьиная кислота; B: ацетонитрил + 0,1% муравьиная кислота. Градиент:

Градиент-Время Поток мл/мин %A %B 0,00 2,0 95 5 0,50 2,0 95 5 4,50 2,0 5 95 5,50 2,0 5 95 6,00 2,0 95 5

Детектирование - МС, ELS, УФ (отбор 200 мкл для проведения МС с линейным детектором HP1100 DAD). МС способ ионизации - электрораспыление (положительный и отрицательный ион).

Способ 4

Квадрупольный спектрометр VG Platform II с C18-колонкой с обращенной фазой (30 мм × 4,6 Phenomenex Luna, размер частиц 3 мкм), элюирование А: вода + 0,1% муравьиная кислота, В: ацетонитрил + 0,1% муравьиная кислота. Градиент:

Градиент-Время Поток мл/мин %A %B 0,00 2,0 95 5 0,30 2,0 95 5 4,30 2,0 5 95 5,30 2,0 5 95 5,80 2,0 95 5 6,00 2,0 95 5

Детектирование - МС, ELS, УФ (отбор 200 мкл для проведения ESI с линейным детектором HP1050 DAD). МС способ ионизации - электрораспыление (положительный и отрицательный ион).

Способ 5

Квадрупольный масс-спектрометр Waters micromass ZQ2000 с Acquity BEH C18 1,7 мкм 100 × 2,1 мм, Acquity BEH Shield RP18 1,7 мкм 100 × 2,1 мм или Acquity HSST3 1,8 мкм 100 × 2,1 мм, поддерживаемыми при 40°С. Элюирование А: вода + 0,1% муравьиная кислота; В: ацетонитрил + 0,1% муравьиная кислота. Градиент:

Градиент-Время Поток мл/мин %A %B 0,00 0,4 95 5 0,40 0,4 95 5 6,00 0,4 5 95 6,80 0,4 5 95 7,00 0,4 95 5 8,00 0,4 95 5

Детектирование - МС, УФ ФДМ. МС способ ионизации - электрораспыление (положительный и отрицательный ион).

Способ 6

C18-колонка с обращенной фазой Phenomenex Gemini (250 × 21,20 мм, размер частиц 5 мкм), элюирование А: вода + 0,1% муравьиная кислота; В: CH₃CN + 0,1% муравьиная кислота. Градиент - от 90% А/10% В до 2% А/98% B более 20 мин - скорость потока 18 мл/мин. Детектирование - линейный УФ-детектор, установленный при длине волны 254 нм.

Способ 7

Система очистки Agilent 1260 infinity. Колонка: XSELECT CSH Prep C18 OBD, размер частиц 5 мкм, 30 × 150 мм, КТ. Элюирование А: вода + 0,1% муравьиная кислота; В: CH₃CN + 0,1% муравьиная кислота. Градиент - от 90% А/10% В до 2% А/95% В более 22 мин - скорость потока 60 мл/мин. Детектирование - линейный одноквадрупольный ЖХ/МС серии Agilent 6100.

Способ 8

Система очистки Agilent 1260 infinity. Колонка: XBridge Prep C18 OBD, размер частиц 5 мкм, 30×150 мм, КТ. Элюирование А: вода + 0,1% аммиак; В: CH₃CN + 0,1% аммиак. Градиент - от 90% А/10% В до 2% А/95% В более 22 мин - скорость потока 60 мл/мин. Детектирование - линейный одноквадрупольный ЖХ/МС серии Agilent 6100.

Пример 1

Промежуточный продукт 1

(1R,4S)-4-амино-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ол

а. 2,2,2-Трифтор-N-(S)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил-ацетамид (Промежуточный продукт 1а)

К механически перемешиваемому раствору (S)-(+)-(1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил)амина (CAS: 23357-52-0, 175 г, 1,19 моль) и триэтиламина (250 мл, 1,79 моль) в MeOH (1,75 л) добавляли по каплям этилтрифторацетат (170 мл, 1,43 моль) при такой скорости, чтобы поддерживать внутреннюю температуру ниже 30°C (прибл. более 20 мин). Полученный раствор перемешивали при КТ в течение ночи. Смесь концентрировали под вакуумом. Распределяли между ДХМ (1 л) и водой (1 л). Слои разделяли и водный слой экстрагировали ДХМ (2×600 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали (Na₂SO₄), отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением Промежуточного продукта 1а (289,4 г, 100%). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,80-1,95 (3Н, м), 2,05-2,15 (1H, м), 2,75-2,90 (2H, м), 5,18-5,25 (1Н, к, J=5,0 Гц), 6,38-6,48 (1H, уш.с), 7,12-7,16 (1H, м), 7,20-7,26 (3Н, м).

b. 2,2,2-Трифтор-N-((S)-4-оксо-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил)-ацетамид (Промежуточный продукт 1b)

В 20 л колбу загружали Промежуточный продукт 1а (288 г, 1,19 моль) и ацетон (7 л). Добавляли моногидрат сульфата магния (328 г, 2,37 моль) в воде (3 л), и смесь перемешивали механически, и охлаждали до внутренней температуры ~1,5°C. Затем добавляли перманганат калия (562,1 г, 3,56 моль) в 7 равных частях (то есть 80,3 г) каждые 15 мин в течение 105 мин. Добавляли воду (0,5 л) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 17 ч. Смесь охлаждали до 15°С и добавляли по каплям раствор пентагидрата тиосульфата натрия (883 г, 3,56 моль) в воде (3 л) более 1 ч, в то время как поддерживая внутреннюю температуру ниже 18°С. Полученную суспензию перемешивали в течение 1 ч и смесь оставляли при КТ в течение ночи. Твердое вещество оседало на дно колбы, и раствор декантировали и затем концентрировали, получая остаток. Оставшееся твердое вещество обрабатывали этилацетатом (7 л) и водой (2 л) и смесь отфильтровывали через целит. Фильтрат объединяли с остатком, выделенным выше. Смесь разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (2×1 л). Органические фазы объединяли и добавляли сушильный агент (Na₂SO₄) и обесцвечивающий уголь. Смесь отфильтровывали через целит и концентрировали досуха под вакуумом с получением Промежуточного продукта 1b (260 г, 85%). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 2,20-2,30 (1H, дддд, J=13,3, 10,0, 8,8, 4,5 Гц), 2,43-2,52 (1Н, дддд, J=13,3, 7,2, 4,6, 4,6 Гц), 2,67-2,77 (1H, ддд, J=17,4, 10,1, 4,6 Гц), 2,78-2,88 (1H, ддд, J=17,4, 7,1, 4,6 Гц), 5,39-5,47 (1H, тд, J=8,5, 4,5 Гц), 7,32-7,37 (1H, д, J=7,7 Гц), 7,44-7,49 (1H, т, J=7,6 Гц), 7,59-7,64 (1H, тд, J=7,6, 1,4 Гц), 8,03-8,07 (1H, дд, J=7,7, 1,4 Гц).

с. 2,2,2-Трифтор-N-((1S,4R)-4-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил)ацетамид (Промежуточный продукт 1c)

Раствор Промежуточного продукта 1b (161 г, 624 ммоль) в ДМФ (2 л) под вакуумом дегазировали аргоном. Затем добавляли [N-[(1R,2R)-2-(амино-κN)-1,2-дифенилэтил]-4-метилбензолсульфонамидато-κN]хлор[(1,2,3,4,5,6-η)-1-метил-4-(1-метилэтил)бензол]-рутений (CAS: 192139-92-7, 9,95 г, 15,6 ммоль). Медленно добавляли муравьиную кислоту (57,5 г, 1,25 моль) к охлажденному льдом триэтиламину (126 г, 1,25 моль) при перемешивании, затем добавляли к раствору ДМФ. Полученную реакционную смесь нагревали до 50°C (внутренняя температура) в течение 41 ч при перемешивании. ЖХМС-анализ реакционной смеси указал, что реакция была незавершенной, поэтому раствор муравьиной кислоты (14,4 г, 313 ммоль) медленно добавляли к охлажденному льдом триэтиламину (31,6 г, 312 ммоль), затем добавляли к реакционной смеси. Нагревание продолжали в течение дополнительных 22 ч. После охлаждения смесь концентрировали под вакуумом с получением оранжевого остатка. Остаток разбавляли этилацетатом (1,5 л) и раствор промывали солевым раствором (2×0,5 л). Органические слои высушивали (Na₂SO₄), отфильтровывали и концентрировали под вакуумом. Очистка с помощью колоночной хроматографии (диоксид кремния, 3 кг, 0-50% этилацетат в циклогексане) обеспечивала Промежуточный продукт 1с (118 г, 73%). 97,5 диаст. изб.% определение с помощью ЖХМС (Способ 4) Rt 3,37 мин, М-Н 258 (93,7%, желаемый); Rt 3,25 мин, M-H 258 (1,2%, трансизомер). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,88-1,92 (1Н, д, J=4,8 Гц), 1,98-2,18 (4H, м), 4,80-4,88 (1Н, м), 5,165-5,24 (1Н, м), 6,70-6,80 (1Н, уш.с), 7,25-7,30 (1H, м), 7,30-7,40 (2H, м), 7,45-7,50 (1H, м).

d. (1R,4S)-4-Амино-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ол (Промежуточный продукт 1)

К перемешиваемому раствору Промежуточного продукта 1с (117 г, 451 ммоль) в метаноле (0,7 л) добавляли 6N водный раствор гидроксида натрия (190 мл, 1,14 моль) и перемешивали при КТ в течение 20 ч. Смесь концентрировали под вакуумом и остаток разбавляли этилацетатом (1 л) и водой (0,5 л). Медленно при перемешивании добавляли концентрированный раствор HCl (95 мл, 1,14 моль). Дополнительное количество HCl использовали для доведения рН водного слоя до рН=2. Смесь затем разделяли и органический слой экстрагировали раствором HCl (2М водный, 3×500 мл). Объединенные водные слои подщелачивали до рН ~ 12 с помощью добавления концентрированного водного раствора NH₄OH и затем экстрагировали этилацетатом (5×750 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (200 мл), высушивали (Na₂SO₄), отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением твердого вещества (50,8 г). Данное вещество перекристаллизовывали (циклогексан/этилацетат [2:1], 350 мл) с получением Промежуточного продукта 1 в виде твердого вещества (44,4 г, 60%). ¹Н ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 1,66-1,90 (4H, м), 3,71-3,77 (1H, т, J=5,4 Гц), 4,46-4,54 (1H, т, J=5,4 Гц), 7,14-7,22 (2H, м), 7,32-7,38 (1H, м), 7,40-7,46 (1H, м).

Промежуточный продукт 2

(1S,4R)-4-[3-((S)-2-Метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин

а. (R)-Гидрокси-фенил-ацетат(S)-2-метил-пиперидиний (Промежуточный продукт 2а)

2-Метилпиперидин (99,7 г, 1,0 моль) [CAS 109-05-7] растворяли в МеОН (100 мл) в 2л флорентийской колбе и охлаждали на ледяной бане. Затем добавляли (R)-(-)-миндальную кислоту (152,9 г, 1,0 моль) [CAS 611-71-2] и реагенты перемешивали при умеренном нагревании до получения однородного раствора. Раствор оставляли охлаждаться и добавляли Et₂O (900 мл). Стенки колбы царапали, чтобы помочь кристаллизации, и затем хранили в холодильнике в течение 18 ч. Полученные кристаллы затем отфильтровывали и промывали холодным Et₂O. Продукт снова перекристаллизовывали из MeOH (100 мл) и Et₂O (500 мл) и оставляли в холодильнике в течение 48 ч. Кристаллы отфильтровывали, промывали Et₂O и высушивали в вакуумном сушильном шкафу при 50°С в течение ночи с получением Промежуточного продукта 2а (66,97 г, 53%) в виде бесцветных кристаллов. ¹Н ЯМР (300 МГц, d₆-ДМСО-d₆): 1,12 (3H, д, J=6,5 Гц), 1,20-1,57 (3Н, м), 1,58-1,74 (3Н, м), 2,72 (1H, дт, J=3,2, 12,4 Гц), 2,88-3,02 (1Н, м), 3,06-3,18 (1H, м), 4,51 (1H, с), 7,11-7,19 (1H, м), 7,19-7,29 (2H, м), 7,33-7,42 (2H, м).

Диастереомерную чистоту определяли с помощью метода Марфи; соединение 2 (1 мг, 3,68 мкмоль) растворяли в EtOAc (1 мл) и H₂O (1 мл) и добавляли реагент Марфи (N_α-(2,4-динитро-5-фторфенил)-L-аланинамид, FDAA [CAS 95713-52-3], 1 мг, 3,68 мкмоль) с последующим добавлением насыщенного раствора NaHCO₃ (50 мкл) и нагревали до 50°С в течение 1 ч. Затем смесь разбавляли H₂O (1 мл) и подвергали аналитической ВЭЖХ (Waters X-Select C18, 2,5 мкм, 4,6×50 мм, 32-34% CH₃CN/H₂O (+ 0,1% муравьиная кислота), 16 мин градиент, 1 мл/мин, 340 нм). Rt 10,82 мин, >99% диаст. изб.

Рацемический 2-метилпиперидин также подвергали методу Марфи; ВЭЖХ: Rt 10,75 мин (50%), 11,581 мин (50%).

b. (S)-2-Метил-пиперидин-1-карбонилхлорид (Промежуточный продукт 2b)

Промежуточный продукт 2а (12,0 г, 47,75 ммоль) обрабатывали водным раствором NaOH (1N; 96 мл, 96 ммоль) и экстрагировали ДХМ (2×75 мл). Данный раствор (S)-2-метилпиперидина переносили в 3-горлую колбу RB, перемешивали в инертной атмосфере и охлаждали на ледяной бане перед добавлением пиридина (11,6 мл, 143,72 ммоль) с последующим добавлением трифосгена (14,17 г , 47,75 ммоль) в течение 30 мин при <10°С. Охлаждающую баню удаляли через 30 мин и смесь перемешивали при КТ в течение дополнительных 3,5 часов. Реакцию гасили очень осторожным добавлением водного раствора НСl (1N, 300 мл) при 0-5°С. Через 30 мин фазы разделяли и водный слой экстрагировали ДХМ (2×100 мл). Объединенные экстракты ДХМ промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением Промежуточного продукта 2b (8,6 г, >100% еще содержащий некоторое количество ДХМ). ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,25 (3H, д, J=6,8), 1,40-1,80 (6H, м), 3,0 (1Н, уш.с), 4,12-4,21 (1Н, м), 4,56-4,67 (1Н, м).

с. (S)-2-Метил-пиперидин-1-карбоновой кислоты N'-(5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразид (Промежуточный продукт 2c)

Перемешиваемый раствор Промежуточного продукта 2b (17,20 г, предположительное 95,49 ммоль) и (5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразина (12,14 г, 95,51 ммоль) в ДХМ (300 мл) при КТ обрабатывали ДИПЭА (34 мл, 195,18 ммоль) в течение 5 мин. Данную смесь продолжали перемешивать при КТ в течение 4 дней перед добавлением в воду (500 мл) и фазы разделяли. Водный слой дополнительно экстрагировали ДХМ (4×100 мл), объединенные экстракты промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением остаточного твердого вещества. Данный продукт обрабатывали Et₂O - пентан и полученные твердые вещества отфильтровывали и высушивали с получением Промежуточного продукта 2с (18,74 г, 77%). ЖХМС (Способ 3) Rt 2,26 мин, m/z 253 [МН⁺]. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,23 (3H, д, J=6,9), 1,40-1,74 (6H, м), 2,97 (1H, тд, J=13,1, 3,0), 3,82-3,91 (1H, м), 4,27-4,38 (1H, м), 6,54 (1H, с), 6,78 (1H, дд, J=9,1, 3,7, 0,6), 7,30 (1H, ддд, J=9,1, 7,8, 2,9), 8,00 (1Н, д, J=2,6).

d. 6-Фтор-3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 2d)

К перемешиваемому раствору Промежуточного продукта 2с (14,70 г, 58,27 ммоль), Ph₃P (30,56 г, 116,51 ммоль) и Et₃N (33 мл, 236,76 ммоль) в ТГФ (300 мл) при КТ добавляли гексахлорэтан (27,60 г, 116,58 ммоль) в течение 10 мин перед последующим нагреванием при 60°С в течение ночи. Охлажденную смесь отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением остаточного масла, которое растворяли в ДХМ (200 мл) и экстрагировали разбавленной HCl (2М) до тех пор, пока большее количество продукта не было удалено из фазы ДХМ с помощью ЖХМС. Данные водные экстракты обрабатывали твердым NaOH (при охлаждении) для достижения ~рН 9 и экстрагировали ДХМ. Объединенные экстракты ДХМ промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄), пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением Промежуточного продукта 2d (11,30 г, 82%) в виде коричневого масла. ЖХМС (Способ 3) Rt 2,99 мин, m/z 235 [МН⁺]. ¹Н ЯМР (300 МГц, d₆-d₆-ДМСО): 0,89 (3H, д, J=6,3), 1,40-1,88 (6H, м), 2,85-2,96 (1H, м), 3,18 (1H, дт, J=12,0, 4,5), 3,28-3,35 (1H, м), 7,42 (1H, ддд, J=10,0, 8,0, 2,3), 7,76 (1H, ддд, J=10,0, 4,9, 0,9), 8,31-8,35 (1Н, м).

е. (1S,4R)-4-[3-((S)-2-Метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин (Промежуточный продукт 2)

Гидрид натрия (60% дисперсия в масле, 12 г, 300 ммоль) суспендировали в ДМФ (800 мл) и охлаждали до 0°С с использованием ледяной бани. (24,45 г, 150 ммоль) затем добавляли небольшими порциями в атмосфере N₂ и полученную непрозрачную коричневую суспензию перемешивали при КТ в течение 45 мин (ВНИМАНИЕ: выделение газа). Добавляли раствор Промежуточного продукта 2d (35,1 г, 150 ммоль) в сухом ДМФ (200 мл) и темно-коричневый раствор перемешивали при КТ в течение 18 ч. Раствор концентрировали под вакуумом, остаток выливали в смесь солевой раствор/1N водный раствор NaOH/H₂O (1:1:1; 200 мл); продукт экстрагировали с использованием смеси EtOAc и Ме-ТГФ (300 мл × 5). Органические экстракты объединяли, промывали небольшим количеством солевого раствора, высушивали над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Продукт очищали с помощью КФХ, элюируя 0-20% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (27,1 г, 48%). ЖХМС (Способ 3): Rt 2,29 мин, m/z 378 [МН⁺].

Промежуточный продукт 3

(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-Диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин

а. (2S,6R)-2,6-Диметил-пиперидин-1-карбонилхлорид (Промежуточный продукт 3а)

К раствору трифосгена (20,8 г, 70,0 ммоль) в ДХМ (400 мл) при 5°С добавляли по каплям пиридин (16,2 мл, 200 ммоль) более 10 мин, поддерживая температуру ниже 10°C. Раствор затем перемешивали при 5-10°С в течение 1 ч, затем добавляли по каплям цис-2,6-диметил пиперидин (CAS: 766-17-6, 27,0 мл, 200 ммоль) более 10 мин и полученный красный раствор перемешивали при КТ в течение 4 дней (реакция завершилась в пределах <4 ч). Раствор охлаждали до 3°С, затем добавляли предварительно охлажденный (3°C) 1М водный раствор НСl (400 мл) и смесь перемешивали при 5°С в течение 30 мин. Смесь разделяли и водный слой экстрагировали ДХМ (200 мл), затем объединенные органические экстракты пропускали через гидрофобную фритту и концентрировали под вакуумом, получая Промежуточный продукт 3a в виде красного масла (31,5 г, 90%). ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,30 (6H, д, J=7,09 Гц), 1,49-1,87 (6H, м), 4,46-4,56 (2H, м).

b. (2S,6R)-2,6-Диметил-пиперидин-1-карбоновой кислоты N'-(5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразид (Промежуточный продукт 3b)

Темно-красный раствор (5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразина (21,7 г, 171 ммоль), Промежуточного продукта 3a (31,5 г, 180 ммоль) и ДИПЭА (44,7 ммоль, 256 ммоль) в ДХМ (350 мл) перемешивали при КТ в течение 4 дней. Добавляли воду (350 мл), затем водный слой экстрагировали ДХМ (100 мл). Объединенные органические экстракты пропускали через гидрофобную фритту и концентрировали под вакуумом с получением твердого вещества. Растирание со смесью диэтиловый эфир/пентан (1:4, 150 мл) и высушивание под вакуумом при 50°С обеспечивало Промежуточный продукт 3b (31,7 г, 70%, ~90% чистота). ЖХМС: Rt 2,58 мин, m/z 289 [МН⁺]. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,29 (6H, д, J=7,0 Гц), 1,45-1,89 (6H, м), 4,26 (2H, видимый квин, J=6,5 Гц), 6,53 (1H, с), 6,65 (1H, уш.с), 6,77 (1H, дд, J=9,0, 3,6 Гц), 7,29-7,28 (1H, ддд, J=9,0, 8,0, 3,0), 8,02 (1H, д, J=2,9 Гц).

с. 3-((2S,6R)-2,6-Диметил-пиперидин-1-ил)-6-фтор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 3c)

К темно-красной суспензии Промежуточного продукта 3b (27,4 г, 102,9 ммоль) и пиридина (25 мл, 309,1 ммоль) в толуоле (250 мл) при 50°С добавляли POCl₃ (11,0 мл, 118 ммоль) в 3 порции через интервалы 30 с. (ВНИМАНИЕ: экзотермический эффект до 70°С) Коричневую суспензию перемешивали при 50°С в течение 1 ч, затем охлаждали до КТ. Добавляли воду (100 мл) и насыщ. водный раствор NaHCO₃ (100 мл) (ВНИМАНИЕ: выделение газа) и смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. Водный слой экстрагировали EtOAc (2×250 мл), затем объединенные органические слои промывали солевым раствором (250 мл), высушивали (Na₂SO₄), отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением коричневого масла (26,3 г, избыточная масса). Масло повторно растворяли в МеОН (150 мл), затем добавляли уголь (6 г) и смесь перемешивали с помощью вращения в течение 30 мин. Суспензию отфильтровывали через целит и осадок на фильтре промывали MeOH (25 мл). Фильтрат концентрировали под вакуумом с получением красного масла. Его подвергали азеотропной перегонке с пентаном (25 мл) с получением твердого вещества (24,0 г). Твердое вещество суспендировали в смеси диэтиловый эфир/пентан (1:1, 40 мл), отфильтровывали и высушивали под вакуумом с получением Промежуточного продукта 3c (20,6 г, 81%). Маточный раствор концентрировали под вакуумом, остаток растворяли в горячем циклогексане (50°С, 30 мл), затем охлаждали до КТ и выдерживали в течение выходных дней. Смесь отфильтровывали, твердое вещество промывали циклогексаном (5 мл), затем высушивали под вакуумом при 45°С с получением дополнительного количества Промежуточного продукта 3c в виде твердого вещества (1,8 г, 6%). ЖХМС: Rt 3,30 мин, m/z 249 [МН⁺]. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 0,68 (6H, д, J=6,2 Гц), 1,36-1,49 (2Н, м), 1,52-1,68 (1H, м), 1,75-1,90 (3Н, м), 3,29-3,40 (2H, м), 7,16 (1H, ддд, J=10,0, 7,6, 2,3 Гц), 7,67 (1H, дд, J=10,0, 4,7 Гц), 8,03 (1H, т, J=2,7 Гц).

d. (1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-Диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин (Промежуточный продукт 3)

К раствору Промежуточного продукта 1 (6,59 г, 40,4 ммоль) в сухом ДМФ (80 мл) в атмосфере N₂ добавляли гидрид натрия (60% дисперсия в масле, 3,20 г, 80,0 ммоль) и полученный непрозрачный коричневый раствор перемешивали при КТ в течение 45 мин (ВНИМАНИЕ: выделение газа). Добавляли раствор Промежуточного продукта 3c (9,93 г, 40,0 ммоль) в сухом ДМФ (20 мл) и темно-коричневый раствор перемешивали при КТ в течение 24 ч. Реакционную смесь осторожно гасили насыщенным раствором NH₄Cl (ВНИМАНИЕ: выделение газа) и Н₂О. Коричневую смесь перемешивали в течение 30 мин. Смесь концентрировали под вакуумом, обеспечивая темно-коричневую смолу, которую растворяли в МеОН (125 мл), к раствору добавляли уголь, и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, и затем отфильтровывали через целит. Раствор испаряли при пониженном давлении с получением темно-коричневого остатка. Остаток суспендировали в H₂O (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (75 мл), высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением пены (14,6 г, 93%). Пену растирали с пентаном (2×75 мл) с использованием ультразвука и перемешивания, раствор декантировали и твердое вещество оставляли сохнуть под вакуумом и при КТ, обеспечивая твердое вещество (14,2 г, 90%). ЖХМС (Способ 3): Rt 2,32 мин, m/z 392 [МН⁺].

Промежуточный продукт 4

[6-((1R,4S)-4-Амино-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-илокси)[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-3-ил]-диметиламин

а. 2-(5-Фторпиридин-2-ил)-N,N-диметилгидразинкарбоксамид (Промежуточный продукт 4а)

Раствор (5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразина (500 мг, 3,93 ммоль), диметилкарбамилхлорида (505 мг, 4,72 ммоль) и ДИПЭА (1,01 г, 7,86 ммоль) в ДХМ (20 мл) перемешивали с обратным холодильником в течение 16 ч. Реакционную смесь наносили на картридж SCX-2 (25 г), промывали MeOH и продукт элюировали 2М NH₃ в МеОН. Фракции, содержащие продукт, концентрировали под вакуумом и затем растирали с диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения (600 мг, 77%). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 2,99 (6H, с), 6,46 (2H, м), 6,75 (1H, дд, J=9,1, 3,5 Гц), 7,22-7,32 (1H, м), 8,03 (1H, д, J=2,7 Гц).

b. (6-Фтор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)диметиламин (Промежуточный продукт 4b)

К раствору Промежуточного продукта 4а (590 мг, 2,98 ммоль), Ph₃P (1,56 г, 5,96 ммоль) и Et₃N (1,20 г, 11,9 ммоль) в ТГФ (40 мл) добавляли гексахлорэтан (1,41 г, 5,96 ммоль) и смесь перемешивали при 60°С в течение 9 ч. Смесь разбавляли EtOAc (100 мл), промывали водой, солевым раствором, высушивали (MgSO₄) и затем концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью КФХ с использованием 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, затем растирали с диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения (78 мг, 14%). ЖХМС (Способ 1): Rt 2,24 мин, m/z 181 [МН⁺].

с. [6-((1R,4S)-4-Амино-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-илокси)[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил]диметиламин (Промежуточный продукт 4)

К раствору Промежуточного продукта 1 (75,0 мг, 0,458 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляли гидрид натрия (60% в масле, 50,0 мг, 1,25 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 20 мин до добавления Промежуточного продукта 4b (75,0 мг, 0,416 ммоль). Данную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч. Охлажденную реакционную смесь затем наносили на картридж SCX-2 (10 г), промывали MeOH и продукт элюировали 2М NH₃ в МеОН. Полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (82,0 мг, 61%). ЖХМС (Способ 4): Rt 1,49 мин, m/z 324 [МН⁺].

Промежуточный продукт 5

а. (1S,4R)-4-[3-((R)-2-Метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин

Указанное в заголовке соединение получали, исходя из (R)-2-метилпиперидина (ABCR) с использованием методик, аналогичных описанным при получении Промежуточного продукта 2. ЖХМС (Способ 3): Rt 2,26 мин, m/z 378 [MH⁺]. ¹Н ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,92 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,39-2,15 (11H, м), 2,29-2,42 (1Н, м), 3,05-3,22 (2Н, м), 3,32-3,45 (1H, м), 3,97-4,05 (1H, м), 5,24 (1H, т, J=4,6 Гц), 7,06 (1H, дд, J=9,9, 2,1 Гц), 7,23-7,42 (3H, м, скрытый растворителем), 7,50 (1H, д, J=1,9 Гц), 7,55-7,64 (2H, м).

Промежуточный продукт 6

[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлор-этиловый эфир

а. 2-(4-Иод-пиразол-1-ил)этанол (Промежуточный продукт 6а)

Раствор 4-иодпиразола (14,3 г, 73,9 ммоль) и этиленкарбонат (6,83 г, 77,6 ммоль) в ДМФ (50 мл) перемешивали при 125°С в течение 24 ч. Охлажденный раствор концентрировали под вакуумом с получением коричневого масла. Остаток очищали с помощью КФХ, используя 30-70% EtOAc в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (9,36 г, 53%). ЖХМС (Способ 3): Rt 2,24 мин, m/z 239 [МН⁺].

b. 2-(5-Амино-3-трет-бутил-[1,4']бипиразолил-1'-ил)-этанол (Промежуточный продукт 6b)

Раствор Промежуточного продукта 6а (9,36 г, 39,3 ммоль) в ксилоле (40 мл) продували аргоном в течение 30 мин. В отдельной колбе смесь 3-трет-бутил-1Н-пиразол-5-амина (5,75 г, 41,3 ммоль), иодида меди (375 мг, 1,97 ммоль), транс-N,N-диметилциклогексан-1,2-диамина (1,12 г, 7,87 ммоль) и карбоната калия (11,4 г, 82,6 ммоль) дегазировали и продували аргоном три раза. Раствор ксилола затем добавляли через канюлю в колбу и полученный коричневый раствор нагревали с обратным холодильником в течение 3 ч. Охлажденный раствор разбавляли EtOAc (40 мл) и промывали насыщенным водным раствором аммиака/водой (1:1, 40 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (40 мл) и объединенные органические слои промывали водой (40 мл) и солевым раствором (40 мл), высушивали (Na₂SO₄), отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением твердого вещества. Его очищали с помощью КФХ, используя 4-7,5% МеОН в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (6,01 г, 61%). ЖХМС (Способ 3): Rt 1,84 мин, m/z 250 [МН⁺].

с. [3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлор-этиловый эфир (Промежуточный продукт 6)

К раствору Промежуточного продукта 6b (6,01 г, 24,1 ммоль) и водному раствору NaOH (36 мл, 36 ммоль) в EtOAc (40 мл) добавляли 2,2,2-трихлорэтилхлорформиат (4,15 мл, 30,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 16 ч. Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (40 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (40 мл), высушивали (Na₂SO₄), отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением коричневой смолы. Ее очищали с помощью КФХ, используя 2-7% МеОН в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения. ЖХМС (Способ 3): Rt 3,61 мин, m/z 424, 426 [МН⁺].

Промежуточный продукт 7

{3-трет-Бутил-1'-[3-(тетрагидро-пиран-2-илокси)-пропил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлор-этиловый эфир

а. 4-Иод-1-[3-(тетрагидро-пиран-2-илокси)-пропил]-1H-пиразол (Промежуточный продукт 7а)

К смеси 4-иод-1Н-пиразола (2,0 г, 10,3 ммоль) и Cs₂CO₃ (5,04 г, 15,5 ммоль) в MeCN (28 мл) добавляли 2-(3-бромпропокси)тетрагидро-2Н-пиран (1,84 мл, 10,8 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Неочищенную реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc (×3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄) и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя градиент 0-80% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения (2,95 г, 81%). ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,50-1,58 (4H, м), 1,65-1,90 (2H, м), 2,12 (2H, кв, J=6,4 Гц), 3,35 (1H, дт, J=10,2, 5,9 Гц), 3,46-3,54 (1H, м), 3,73 (1H, дт, J=10,2, 5,9 Гц), 3,80-3,88 (1H, м), 4,26 (2H, тд, J=6,9, 1,5 Гц), 4,54 (1H, дд, J=4,5, 3,1 Гц), 7,46 (1H, с), 7,50 (1H, с).

b. 3-трет-Бутил-1'-[3-(тетрагидро-пиран-2-илокси)-пропил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-иламин (Промежуточный продукт 7b)

К смеси Промежуточного продукта 7а (1,50 г, 4,46 ммоль), 5-трет-бутил-2Н-пиразол-3-иламина (620 мг, 4,46 ммоль), иодида меди (I) (42 мг, 0,22 ммоль) и K₂CO₃ (1,29 г, 9,37 ммоль) добавляли толуол (4,6 мл; предварительно дегазированный с помощью потока аргона). Затем добавляли (R,R)-(-)-N,N'-диметил-1,2-циклогександиамин (141 мкл, 0,89 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 140°С в течение 2,5 ч при микроволновом облучении. Неочищенную реакционную смесь выливали в воду и экстрагировали EtOAc (×3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄) и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя градиент 0-100% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения (1,14 г, 73%). ЖХМС (Способ 4): Rt 2,34 мин, m/z 348 [МН⁺].

с. {3-трет-Бутил-1'-[3-(тетрагидро-пиран-2-илокси)-пропил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлор-этиловый эфир (Промежуточный продукт 7)

К перемешиваемой смеси Промежуточного продукта 7b (1,14 г, 3,28 ммоль) в воде (6 мл) и EtOAc (12 мл) добавляли NaOH (263 мг, 6,57 ммоль). Через 10 мин добавляли 2,2,2-трихлорэтилхлорформиат (543 мкл, 3,94 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Водный слой экстрагировали EtOAc (×3) и объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄) и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя градиент 0-100% EtOAc в циклогексане, с получением указанного в заголовке соединения (1,57 г, 91%). ЖХМС (Способ 4): Rt 3,99 мин, m/z 522, 524 [МН⁺].

Промежуточный продукт А

Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((R)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир.

а. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидроксиэтил)1'H[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((R)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина. (Промежуточный продукт Аа)

Смесь Промежуточного продукта 6 (100 мг, 0,235 ммоль), Промежуточного продукта 5 (89 мг, 0,235 ммоль) и ДИПЭА (61 мкл, 0,353 ммоль) в диоксане (1,5 мл) нагревали при 60°С в течение 48 ч. Смесь охлаждали до КТ, разбавляли ДХМ (5 мл) и промывали водой (5 мл) и солевым раствором (5 мл). Органический слой пропускали через фазовый разделитель и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (77 мг, 50%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,39 мин, m/z 653 [МН⁺].

b. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((R)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир. (Промежуточный продукт А)

Смесь Промежуточного продукта Аа (75 мг, 0,115 ммоль), метансульфонилхлорида (11,6 мкл, 0,149 ммоль) и ДИПЭА (60 мкл, 0,345 ммоль) в ДХМ (1 мл) перемешивали при КТ в течение 30 мин. Реакционную смесь распределяли между ДХМ (5 мл) и водой (2×5 мл). Органический слой промывали солевым раствором (5 мл), разделяли через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (84 мг, 100%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,61 мин, m/z 731 [МН⁺].

Промежуточный продукт B

Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир. (Промежуточный продукт B)

а. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина. (Промежуточный продукт Bа)

Оранжевый раствор Промежуточного продукта 6 (446 мг, 1,05 ммоль), Промежуточного продукта 3 (392 мг, 1,00 ммоль) и ДИПЭА (218 мкл, 1,25 ммоль) в диоксане (10 мл) перемешивали при 60°С в течение 64 ч. Охлажденный раствор концентрировали под вакуумом, суспендировали в воде (10 мл) и экстрагировали ДХМ (2×10 мл). Объединенные органические слои пропускали через гидрофобную фритту и концентрировали под вакуумом с получением коричневого масла. КФХ с использованием 6-13% МеОН в ДХМ обеспечивала указанное в заголовке соединение (510 мг, 76%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,54 мин, m/z 667 [МН⁺]. ¹Н ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 0,60 (3H, д, J 6,3), 0,62 (3Н, д, J 6,3), 1,25-1,60 (3Н, м), 1,31 (9Н, с), 1,68-1,86 (3H, м), 1,93 (1H, т, J 10,6), 2,03-2,25 (3Н, м), 3,07-3,24 (2Н, м), 3,81 (2Н, т, J 4,6), 4,07 (2H, дд, J 5,6, 3,7), 5,10 (1H, тд, J 8,6, 5,0), 5,20 (1H, т, J 4,0), 6,37 (1H, с), 6,43 (1H, уш.д, J 8,6), 6,88 (1H, дд, J 9,8, 2,2), 7,21-7,34 (4H, м), 7,42 (1H, д, J 7,7), 7,62-7,64 (2Н, м), 7,70 (1H, с), 7,84 (1H, уш.с).

b. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир. (Промежуточный продукт B)

К раствору Промежуточного продукта Bа (510 мг, 0,765 ммоль) и ДИПЭА (400 мкл, 1,53 ммоль) в ДХМ (10 мл) при КТ добавляли метансульфонилхлорид (118 мкл, 1,53 ммоль) и полученный оранжевый раствор перемешивали при КТ в течение 1 ч. Добавляли воду (5 мл) и насыщ. водн. раствор NaHCO₃ (5 мл) и смесь встряхивали. Водный слой экстрагировали ДХМ (10 мл), затем объединенные органические слои пропускали через гидрофобную фритту и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (100%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,83 мин, m/z 745 [МН⁺].

Промежуточный продукт С

Метансульфоновой кислоты 2-(3-трет-бутил-5-{3-[(1S,4R)-4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-уреидо}-[1,4']бипиразолил-1'-ил)-этиловый эфир

а. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[(1S,4R)-4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевина (Промежуточный продукт Са)

Смесь Промежуточного продукта 6 (254 мг, 0,59 ммоль), Промежуточного продукта 4 (202 мг, 0,59 ммоль) и ДИПЭА (208 мкл, 1,20 ммоль) в диоксане (6,0 мл) перемешивали при 70°С в течение 14 ч. Полученную смесь выливали в воду и водную фазу экстрагировали EtOAc (×3). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄) и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали с помощью КФХ с использованием градиента 0-10% МеОН в ДХМ с получением указанного в заголовке соединения (300 мг, 85%). ЖХМС (Способ 4): Rt 2,64 мин, m/z 598 [МН⁺].

b. Метансульфоновой кислоты 2-(3-трет-бутил-5-{3-[(1S,4R)-4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-уреидо}-[1,4']бипиразолил-1'-ил)-этиловый эфир. (Промежуточный продукт С)

К охлажденному на ледяной бане раствору Промежуточного продукта Ca (300 мг, 0,50 ммоль) в ДХМ (5,0 мл) добавляли ДИПЭА (349 мкл, 2,01 ммоль) с последующим добавлением метансульфонилхлорида (98,0 мкл, 1,00 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч и затем гасили водой. Водную фазу экстрагировали ДХМ (×3) и объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали (MgSO₄) и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (количественный выход). Продукт использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС (Способ 4): Rt 2,86 мин, m/z 677 [МН⁺].

Промежуточный продукт D

Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир.

а. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидроксиэтил)1'H[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина. (Промежуточный продукт Da)

Указанное в заголовке соединение получали, исходя из Промежуточного продукта 6 и Промежуточного продукта 2, с помощью методики, аналогичной описанной для Промежуточного продукта А стадии а. ЖХМС (Способ 3): Rt 3,32 мин, m/z=653 [МН⁺].

b. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир. (Промежуточный продукт D)

Указанное в заголовке соединение получали, исходя из Промежуточного продукта Da, с помощью методики, аналогичной описанной для Промежуточного продукта А стадии b. ЖХМС (Способ 3): Rt 3,54 мин, m/z 731 [МН⁺].

Промежуточный продукт Е

Метансульфоновой кислоты 3-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-пропиловый эфир

а. 1-{3-трет-Бутил-1'-[3-(тетрагидро-пиран-2-илокси)-пропил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт Еа)

Смесь Промежуточного продукта 7 (865 мг, 1,49 ммоль), Промежуточного продукта 2 (561 мг, 1,49 ммоль) и ДИПЭА (390 мкл, 2,24 ммоль) в 2-метилтетрагидрофуране (8 мл) перемешивали при 60°С в течение 20 ч. Смесь охлаждали, разбавляли водой и экстрагировали ДХМ (2×20 мл). Объединенные органические фазы высушивали, концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 0-12% МеОН в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (958 мг, 86%). ЖХМС (Способ 3): R 3,85 мин, m/z 751,5 [МН⁺].

b. 1-[3-трет-Бутил-1'-(3-гидрокси-пропил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина. (Промежуточный продукт Eb)

К раствору Промежуточного продукта Еа (930 мг, 1,24 ммоль) в метаноле (10 мл) добавляли пиридиния п-толуолсульфонат (930 мг, 3,72 ммоль). Смесь нагревали до 45°С в течение 7 ч и 50°С в течение 16 ч. После охлаждения смесь разбавляли насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали ДХМ (2×25 мл). Объединенные органические экстракты высушивали, концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 0-10% МеОН в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (719 мг, 87%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,36 мин, m/z 667,5 [МН⁺].

с. Метансульфоновой кислоты 3-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-пропиловый эфир. (Промежуточный продукт Е)

Смесь Промежуточного продукта Eb (355 мг, 0,53 ммоль), метансульфонилхлорида (62,0 мкл, 0,80 ммоль) и ДИПЭА (272 мкл, 1,56 ммоль) в ДХМ (10 мл) перемешивали при КТ в течение 0,4 ч. Реакционную смесь разбавляли насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и экстрагировали ДХМ (2×10 мл). Органический слой пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (400 мг, количественный выход). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,59 мин, m/z 745,4 [МН⁺].

Примеры 1-11:

а. Общая методика замещения

Смесь Промежуточного продукта A-E (0,115 ммоль) и соответствующего амина [см. таблицу 1] (2,30 ммоль) в безводном ТГФ (1 мл) перемешивали при 60°С в течение 18 ч в герметично закрытом сосуде. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью или MDAP (способ 7), или ВЭЖХ (Gemini С18, 20-40% MeCN в H₂O, 0,1% HCO₂H, 18 мл/мин.), или и того и другого для получения указанного в заголовке соединения (40-80%).

Пример № Амин Используемый промежуточный продукт Структура примера ЯМР (400 MГц) δ ЖХМС 1 [1,4]Оксазепан D
1-[3-трет-Бутил-1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этил)-1'H[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,25 (9H, с), 1,47-1,55 (2H, м), 1,62-2,18 (10H, м), 2,66-2,72 (4H, м), 2,87-2,96 (3H, м), 3,12-3,19 (1H, м, скрытый водой), 3,28-3,36 (1H, м, скрытый водой), 3,55-3,59 (2H, м), 3,64 (2H, т, J=5,9 Гц), 4,23 (2H, т, J=6,8 Гц), 4,80-4,89 (1H, м), 5,52 (1H, т, J=4,6 Гц), 6,27 (1H, с), 7,15 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,20 (1H, дд, J=9,8, 2,2 Гц), 7,26-7,31 (1H, м), 7,33-7,40 (3H, м), 7,62-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=1,8 Гц), 8,00 (1H, с), 8,06 (1H, д, J=0,5 Гц), 8,17 (0,6H, с). (Способ 5): Rt 3,56 мин, m/z 736,4 [MH⁺]. 2
1-Метилпиперазин D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-метил-пиперазин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,0 Гц), 1,25 (9H, с), 1,47-1,57 (2H, м), 1,62-1,73 (2H, м), 1,74-2,17 (6H, м), 2,14 (3H, с), 2,26-2,38 (4H, уш., м), 2,38-2,49 (4H, уш., м), 2,73 (2H, т, J=6,6 Гц), 2,86-2,95 (1H, м), 3,12-3,20 (1H, м), 3,27-3,37 (1H, м), 4,23 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,80-4,89 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=5,5 Гц), 6,27 (1H, с), 7,16 (1H, д, J=8,3 Гц), 7,20 (1H, дд, J=10,0, 2,2 Гц), 7,25-7,31 (1H, м), 7,31-7,40 (3H, м), 7,61-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=2,0 Гц), 8,01 (1H, с), 8,05 (1H, д, J=0,6 Гц), 8,17 (1H, с). (Способ 5): Rt 3,50 мин, m/z 735,4 [MH⁺]. 3
Пиперидин-4-ол D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (9H, с), 1,30-1,41 (2H, м), 1,46-1,56 (2H, м), 1,62-1,72 (4H, м), 1,74-2,04 (4H, м), 2,05-2,16 (4H, м), 2,68-2,78 (4H, м), 2,86-2,95 (1H, м), 3,12-3,20 (м, скрытый водой), 3,28-3,36 (м, скрытый водой), 3,38-3,47 (м, скрытый водой), 4,21 (2H, т, J=6,8 Гц), 4,81-4,88 (1H, м), 5,41 (1H, т, J=4,5 Гц), 6,27 (1H, с), 7,15 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,20 (1H, дд, J=9,8, 2,2 Гц), 7,25-7,31 (1H, м), 7,31-7,40 (3H, м), 7,62-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=2,0 Гц), 8,00 (1H, с), 8,05 (1H, с), 8,16 (1H, с). (Способ 5): Rt 3,50 мин, m/z 736,4 [MH⁺]. 4 D
1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (9H, с), 1,46-1,57 (2H, м), 1,61-1,73 (2H, м), 1,74-2,01 (4H, м), 2,01-2,18 (2H, м), 2,24 (3H, с), 2,54 (2H, т, J=5,8 Гц), 2,80 (2H, т, J=6,6 Гц), 2,87-2,95 (1H, м), 3,13-3,18 (м, скрытый водой), 3,19 (3H, с), 3,29-3,34 (м, полностью скрытый водой), 3,36 (2H, т, J=5,8 Гц), 4,19 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,80-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,5 Гц), 6,26 (1H, с), 7,17 (1H, дд, J=8,3 Гц), 7,20 (1H, дд, J=9,8, 2,2 Гц), 7,25-7,31 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,62-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=1,9 Гц), 8,01 (1H, с), 8,06 (1H, с), 8,19 (0,9H, с). (Способ 5): Rt: 3,62 мин, m/z 724,6 [MH⁺]. 5
Пиперидин B
1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пиперидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,60 (3H, д, J=6,2 Гц), 0,63 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (9H, с), 1,32-1,38 (2H, м), 1,40-1,60 (7H, м), 1,68-1,74 (2H, м), 1,77-1,92 (2H, м), 1,95-2,02 (1H, м), 2,04-2,12 (2H, м), 2,40 (4H, т, J=4,9 Гц), 2,71 (2H, т, J=6,8 Гц), 3,13-3,23 (2H, м), 4,23 (2H, т, J=6,8 Гц), 4,85 (1H, тд, J=8,5, 5,4 Гц), 5,54 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,26 (1H, с), 7,14 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,21 (1H, дд, J=9,8, 2,2 Гц), 7,25-7,29 (1H, м), 7,33-7,38 (3H, м), 7,63 (1H, д, J=0,7 Гц), 7,67 (1H, д, J=9,8 Гц), 7,89 (1H, д, J=2,1 Гц), 8,00 (1H, с), 8,05 (1H, с), 8,15 (1H, с). (Способ 5): Rt 3,79 мин, m/z 734 [MH⁺]. 6
[1,4]оксазепан B
1-[3-трет-Бутил-1'-(2-[1,4]оксазепан-4-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,60 (3H, д, J=6,2 Гц), 0,63 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (9H, с), 1,38-1,60 (3H, м), 1,68-1,83 (5H, м), 1,84-1,92 (1H, м), 1,95-2,01 (1H, м), 2,05-2,12 (2H, м), 2,67-2,71 (4H, м), 2,92 (2H, т, J=6,6 Гц), 3,13-3,23 (2H, м), 3,57 (2H, т, J=4,6 Гц), 3,63 (2H, т, J=6,0 Гц), 4,21 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,85 (1H, тд, J=8,5, 5,4 Гц), 5,54 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,26 (1H, с), 7,15 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,21 (1H, дд, J=9,8, 2,2 Гц), 7,25-7,30 (1H, м), 7,32-7,38 (3H, м), 7,64 (1H, д, J=0,7 Гц), 7,67 (1H, д, J=9,8 Гц), 7,89 (1H, д, J=2,1 Гц), 8,00 (1H, с), 8,06 (1H, с), 8,17 (1H, с). (Способ 5): Rt 3,71 мин, m/z 750,6 [MH⁺]. 7
Диметиламин C
1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[(1S,4R)-4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 1,19 (9H, с), 1,76-1,86 (1H, м), 1,87-1,97 (1H, м), 1,98-2,10 (2H, м), 2,12 (6H, с), 2,63 (2H, т, J=6,5 Гц), 2,83 (6H, с), 4,15 (2H, т, J=6,5 Гц), 4,79 (1H, тд, J=8,3, 5,4 Гц), 5,50 (1H, т, J=4,5 Гц), 6,21 (1H, с), 7,07 (1H, дд, J=9,8, 2,1 Гц), 7,11 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,22-7,32 (3H, м), 7,34 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,55 (1H, д, J=10,0 Гц), 7,57 (1H, с), 7,76 (1H, д, J=2,0 Гц), 7,95 (1H, с), 7,99 (1H, с), 8,10 (0,7H, с). (Способ 5): Rt 3,14 мин, m/z 626 [MH⁺]. 8
Диметиламин A
1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((R)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,88 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,25 (9H, с), 1,44-1,56 (2H, м), 1,63-1,72 (2H, м), 1,75-2,01 (4H, м), 2,04-2,13 (2H, м), 2,17 (6H, с), 2,67 (2H, т, J=6,6 Гц), 2,90-2,99 (1H, м), 3,14-3,21 (1H, м), 3,39 (м, скрытый водой), 4,20 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,79-4,88 (1H, м), 5,56 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,27 (1H, с), 7,13-7,21 (2H, м), 7,25-7,41 (4H, м), 7,61-7,66 (2H, м), 7,71 (1H, д, J=1,0 Гц), 8,01 (1H, с), 8,05 (1H, с), 8,20 (0,5H, с). (Способ 5): Rt 3,52 мин, m/z 680,4 [MH⁺]. 9
Диметиламин E
1-[3-трет-Бутил-1'-(3-диметиламино-пропил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J 6,4), 1,25 (9H, с), 1,44-1,57 (2H, м), 1,62-1,73 (2H, м), 1,74-2,01 (6H, м), 2,02-2,17 (2H, м), 2,20 (6H, с), 2,33 (2H, т, 7,1), 2,87-2,95 (1H, м), 3,13-3,20 (1H, м), 3,27-3,36 (1H, м), 4,15 (2H, т, J 7,1), 4,81-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J 4,4), 6,27 (1H, с), 7,15-7,22 (2H, м), 7,25-7,31 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,62-7,67 (2H, м), 7,69-7,72 (1H, м), 8,02-8,06 (2H, м), 8,18 (1,4H, с). (Способ 5): Rt 3,53 мин, m/z 694,5 [MH⁺] 10
1-Метилпиперазин E
1-{3-трет-Бутил-1'-[3-(4-метил-пиперазин-1-ил)-пропил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J 6,4), 1,25 (9H, с), 1,44-1,58 (2H, м), 1,62-1,73 (2H, м), 1,74-2,01 (6H, м), 2,02-2,15 (2H, м), 2,16 (3H, с), 2,24-2,48 (10H, м), 2,86-2,95 (1H, м), 3,13-3,20 (1H, м), 3,27-3,36 (1H, м), 4,14 (2H, т, J 7,0), 4,80-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J 4,3), 6,26 (1H, с), 7,13-7,22 (2H, м), 7,26-7,31 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,62-7,67 (2H, м), 7,69-7,72 (1H, м), 7,99-8,04 (2H, м), 8,16 (1,9H, с). (Способ 5): Rt 3,43 мин, m/z 749,5 [MH⁺]

Пример 11

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 2-(3-Иод-пиразол-1-ил)-этанол (Промежуточный продукт 11a)

Раствор 3-иод-1Н-пиразола (500 мг, 2,6 ммоль) и этиленкарбоната (238 мг, 2,7 ммоль) образовывали в ДМФ (5 мл) и нагревали при 150°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали, затем испаряли под вакуумом, чтобы удалить растворитель. Очистка остатка с помощью КФХ с элюированием градиентом 0-100% EtOAc в циклогексане обеспечивала неочищенное указанное в заголовке соединение (444 мг, 72%). ЖХМС (Способ 3): Rt 2,17 мин, m/z 239 [МН⁺].

b. 3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-иламин (Промежуточный продукт 11b)

Раствор Промежуточного продукта 11а (444 мг, 1,9 ммоль), 3-трет-бутил-1Н-пиразол-5-амина (312 мг, 2,2 ммоль) и транс-N,N'-диметил-циклогексан-диамина (53,0 мг, 0,4 ммоль) образовывали в толуоле (5 мл). Добавляли карбонат калия (543 мг, 3,9 ммоль) и смесь дегазировали с помощью барботирования через нее азота. Добавляли иодид меди (I) (36,0 мг, 0,2 ммоль), и смесь герметизировали в виале для микроволнового облучения, и нагревали при микроволновом облучении при 150°С в течение 2 ч. Полученную смесь распределяли между смесью EtOAc/вода и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали и испаряли. Очистка с помощью КФХ с элюированием градиентом 25-100% EtOAc в циклогексане обеспечивала указанное в заголовке соединение (200 мг, 43%). ЖХМС (Способ 3): Rt 2,30 мин, m/z 250 [МН⁺].

с. [3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлор-этиловый эфир (Промежуточный продукт 11с)

Раствор Промежуточного продукта 11b (200 мг, 0,80 ммоль) образовывали в EtOAc (8 мл). Добавляли раствор гидроксида натрия (1М водный раствор, 1,6 мл, 1,60 ммоль) с последующим добавлением 2,2,2-трихлорэтилхлорформиата (121 мкл, 0,88 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение выходных. Полученную смесь распределяли между смесью EtOAc/вода и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали и испаряли. Очистка с помощью КФХ с элюированием градиентом 0-100% EtOAc в циклогексане обеспечивала указанное в заголовке соединение (277 мг, 82%). ЖХМС (Способ 3): Rt 4,21 мин, m/z 424, 426 [МН⁺].

d. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 11d)

Раствор Промежуточного продукта 11с (113 мг, 0,26 ммоль), Интермедиата 2 (100 мг, 0,26 ммоль) и триэтиламина (91,0 мкл, 0,52 ммоль) образовывали в диоксане (3 мл) и нагревали при 90°С в течение 24 ч, затем при 110°С в течение 4 ч. Полученную смесь распределяли между смесью EtOAc/вода и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали и испаряли. Очистка с помощью КФХ с элюированием градиентом 0-10% МеОН в ДХМ обеспечивала указанное в заголовке соединение (92 мг, 54%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,71 мин, m/z 653 [МН⁺].

е. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-умидо)-[1,3']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир (Промежуточный продукт 11е)

Раствор Промежуточного продукта 11d (92,0 мг, 0,14 ммоль) и ДИПЭА (73,0 мкл, 0,42 ммоль) образовывали в ДХМ (5 мл). Добавляли метансульфонилхлорид (22,0 мкл, 0,28 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч. Распределяли между смесью вода/ДХМ и выделенную органическую фракцию пропускали через картридж для разделения фаз. Испарение обеспечивало неочищенное указанное в заголовке соединение (предполагаемое количество 100%), которое использовали в следующей стадии без очистки. ЖХМС (Способ 3): Rt 4,01 мин, m/z 731 [МН⁺].

f. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 11)

Раствор Промежуточного продукта 11d образовывали в растворе 2М диметиламина в ТГФ (5 мл) и нагревали при 60°С в течение 16 ч. Полученную смесь охлаждали до КТ, затем распределяли между смесью EtOAc/вода и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали и испаряли. Очистка с помощью КФХ, элюируя градиентом 0-20% МеОН в ДХМ. Повторно растворяли в MeCN (5 мл) и добавляли несколько капель муравьиной кислоты. Испаряли и подвергали азеотропной перегонке с MeCN. Растирание с Et₂O и сушка под вакуумом обеспечивала указанное в заголовке соединение (76 мг, 75%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,70 мин, m/z 680 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,92 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,27 (9Н, с), 1,48-1,56 (2H, м), 1,64-1,72 (2Н, м), 1,76-1,86 (2H, м), 1,88-2,12 (3Н, м), 2,16 (6Н, с), 2,18-2,26 (1H, м), 2,67 (2Н, т, J=6,3 Гц), 2,88-2,95 (1Н, м), 3,14-3,21 (1Н, м), 3,29-3,36 (1Н, м), 4,23 (2Н, т, J=6,3 Гц), 4,90-4,97 (1Н, м), 5,54 (1H, т, J=3,8 Гц), 6,32 (1H, д, J=2,3 Гц), 6,42 (1H, с), 7,20 (1H, дд, J=5,0, 2,2 Гц), 7,27-7,42 (4H, м), 7,65 (1H, д, J=10,0 Гц), 7,70 (1H, д, J=7,6 Гц), 7,83 (1H, д, J=2,3 Гц), 7,89 (1H, д, J=8,7 Гц), 8,16 (1H, с), 9,24 (1H, с).

Пример 12

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 12а)

Смесь Промежуточного продукта 12с (83,0 мг, 195 мкмоль), Промежуточного продукта 3 (76,3 мг, 195 мкмоль) и ДИПЭА (102 мкл, 585 мкмоль) в диоксане (2,5 мл) нагревали до 60°С в течение 90 ч и затем 80°С в течение 24 ч. После охлаждения смесь концентрировали под вакуумом и остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-10% МеОН в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения в виде оранжевого остатка (60,0 мг, 46%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,91 мин, m/z 667 [МН⁺].

b. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,3']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир (Промежуточный продукт 12b)

Метансульфонилхлорид (10,4 мкл, 135 мкмоль) добавляли к перемешиваемой смеси Промежуточного продукта 12а (60,0 мг, 90,0 мкмоль), ДИПЭА (47,0 мкл, 270 мкмоль) в ДХМ (2 мл) при КТ. Перемешивание продолжали в течение 2 ч и полученную смесь разбавляли ДХМ, промывали (водой, нас. водным раствором NaHCO₃ и солевым раствором), пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали досуха. Указанное в заголовке соединение выделяли в виде оранжевого остатка, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХМС (Способ 3): Rt 4,20 мин, m/z 745 [МН⁺].

с. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 12)

Промежуточный продукт 12b (предполагаемое количество 90,0 мкмоль) обрабатывали диметиламином (2М в ТГФ, 0,9 мл, 1,80 ммоль) в ТГФ (1,1 мл) при КТ в течение 96 ч. Растворитель удаляли под вакуумом и остаток очищали с помощью MDAP (Способ 7) с получением указанного в заголовке соединения (27 мг, 43%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,91 мин, m/z 694 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,62 (6H, дд, J=10,5, 6,1 Гц), 1,26 (9Н, с), 1,40-1,60 (3Н, м), 1,72 (2H, м), 1,81 (1H, м), 1,88-2,20 (4H, м), 2,16 (6Н, с), 2,66 (2Н, т, J=6,2 Гц), 3,19 (м, сигнал, частично скрытый пиком воды), 4,23 (2Н, т , J=6,2 Гц), 4,94 (1H, м), 5,55 (1H, м), 6,32 (1H, д, J=2,5 Гц), 6,42 (1H, с), 7,22 (1H, дд, J=9,6, 2,2 Гц), 7,28 (1H, м), 7,37 (3Н, м), 7,66 (1H, д, J=9,5 Гц), 7,83 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,88 (2H, м), 8,19 (0,8Н, с), 9,24 (1H, уш.с).

Пример 13

1-[5-трет-Бутил-2-(2-диметиламино-этил)-2H-пиразол-3-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 2-(5-Амино-3-трет-бутил-пиразол-1-ил)-этанол (Промежуточный продукт 13а)

Раствор 4,4-диметил-3-оксо-пентаннитрила (5,00 г, 40,0 ммоль), концентрированной НСl (0,1 мл) и 2-гидразиноэтанола (2,98 мл, 44,0 ммоль) в этаноле (40 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 20 ч. Реакционную смесь затем концентрировали под вакуумом. Полученное твердое вещество промывали циклогексаном (30 мл), и растворяли в МеОН (5 мл) и Н₂О (5 мл), и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения в виде белого порошка (7,13 г, 97%). ЖХМС (Способ 3): Rt 0,43 мин, m/z 184 [МН⁺].

b. 5-трет-Бутил-2-(2-гидроксиэтил)-2Н-пиразол-3-ил}-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлор-этиловый эфир (Промежуточный продукт 13b)

К раствору Промежуточного продукта 13а (4,11 г, 22,4 ммоль) в водном растворе NaOH (1М, 33,6 мл) и EtOAc (35 мл) при 0°С добавляли по каплям 2,2,2-трихлорхлорформиат (3,24 мл, 23,5 ммоль) более 5 мин. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 5 ч. Добавляли дополнительное количество 2,2,2-трихлорхлорформиата (462 мкл, 3,36 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение дополнительных 16 ч. Добавляли дополнительное количество 2,2,2-трихлорхлорформиата (462 мкл, 3,36 ммоль) и водный раствор NaOH (1M, 15 мл) и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Смесь экстрагировали EtOAc (20 мл) и промывали солевым раствором (20 мл), высушивали (Na₂SO₄), отфильтровывали и концентрировали под вакуумом с получением оранжевого масла. Его растворяли в циклогексане (100 мл) и оставляли на 5 дней. Суспензию отфильтровывали и полученное твердое вещество промывали циклогексаном (50 мл) и затем высушивали под вакуумом при 45°С в течение 20 ч с получением указанного в заголовке соединения (3,64 г, 45%). Органические экстракты концентрировали под вакуумом и остаток очищали с помощью КФХ, используя 50% EtOAc в циклогексане, с получением оранжевого масла. Его распределяли между ДХМ (50 мл) и водой (50 мл) и органический слой пропускали через разделитель фаз и концентрировали под вакуумом с получением дополнительного количества указанного в заголовке соединения в виде оранжевой смолы (1,43 г, 18%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,72 мин, m/z 358/360 [МН⁺].

с. 1-[5-трет-Бутил-2-(2-гидрокси-этил)-2H-пиразол-3-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 13с)

Смесь Промежуточного продукта 14b (92,0 мг, 0,26 ммоль), Промежуточного продукта 3 (100 мг, 0,26 ммоль) и ДИПЭА (67,0 мкл, 0,38 ммоль) в диоксане (2 мл) нагревали при 60°С в течение 24 ч. Смесь охлаждали до КТ, разбавляли ДХМ (15 мл) и промывали водой (2×15 мл). Органический слой пропускали через разделитель фаз и концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (89 мг, 58%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,55 мин, m/z 601 [МН⁺].

d. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-пиразол-1-ил]-этиловый эфир (Промежуточный продукт 13d)

Смесь Промежуточного продукта 13с (85,0 мг, 0,14 ммоль), метансульфонилхлорида (14,0 мкл, 0,18 ммоль) и ДИПЭА (74,0 мкл, 0,42 ммоль) в ДХМ (1 мл) перемешивали при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между ДХМ (5 мл) и водой (3×5 мл). Органический слой пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (96 мг, 100%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,81 мин, m/z 679 [МН⁺].

е. 1-[5-трет-Бутил-2-(2-диметиламино-этил)-2H-пиразол-3-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 13)

Смесь Промежуточного продукта 13d (96,0 мг, 141 мкмоль) и диметиламина (2,0М в ТГФ, 1,41 мл, 2,83 ммоль) в безводном ТГФ (1 мл) перемешивали при 60°С в течение 18 ч в герметично закрытом сосуде. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью MDAP (способ 7) с получением указанного в заголовке соединения (44 мг, 49%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,75 мин, m/z 628,4 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,61 (3H, д, J=3,2 Гц), 0,63 (3Н, д, 3,2 Гц), 1,21 (9Н, с), 1,40-1,61 (3Н, м), 1,67-1,75 (2H, м), 1,77-1,84 (1H, м), 1,90-2,03 (2H, м), 2,04-2,17 (2Н, м), 2,19 (6Н, с), 2,60 (2Н, т, J=7,0 Гц), 3,13-3,24 (м, скрытый водой), ~3,39 (м, полностью скрытый водой), 3,99 (2Н, т, J=6,9 Гц), 4,84-4,92 (1Н, м), 5,55 (1H, т, J=4,0 Гц), 6,03 (1H, с), 7,00 (1H, д, J=8,9 Гц), 7,21-7,30 (2H, м), 7,33-7,42 (3Н, м), 7,67 (1H, д, J=9,8 Гц), 7,90 (1H, д, J=1,8 Гц), 8,18 (0,8Н, с), 8,48 (1H, с).

Пример 14

1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 5-(5-Амино-3-трет-бутил-пиразол-1-ил)-пиридин-3-ол (Промежуточный продукт 14а)

3-(трет-Бутил)-1Н-пиразол-5-амин (1,00 г, 7,18 ммоль), 3-бром-5-гидроксипиридин (1,14 г, 6,53 ммоль), иодид меди (I) (62,0 мг, 0,33 ммоль), K₂CO₃ (1,90 г, 13,7 ммоль) и транс-N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (186 мг, 1,31 ммоль) взвешивали в 20 мл виале для микроволнового облучения, снабженной магнитной мешалкой и герметично закрытой уплотняющей септой. Из виалы затем откачивали воздух, и продували N₂, и добавляли безводный толуол (10 мл). Полученную смесь вакуумировали, и продували N₂, и затем нагревали при 100°С в течение 24 ч. Полученную темную суспензию разбавляли EtOAc и отфильтровывали через целит, промывали EtOAc и фильтраты концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 0-8% MeOH/ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (1,15 г, 76%). ЖХМС (Способ 3): Rt 2,31 мин, m/z 233,2 [МН⁺]. ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,32 (9Н, с), 3,49 (1H, с), 5,55 (1H, с), 7,37 (1H, т, J=2,3 Гц), 8,04 (1H, д, J=2,5 Гц), 8,27 (1H, д, J=2,1 Гц).

b. 5-трет-Бутил-2-{5-[2-(тетрагидро-пиран-2-илокси)-этокси]-пиридин-3-ил}-2Н-пиразол-3-иламин (Промежуточный продукт 14b)

К перемешиваемому охлажденному льдом раствору Промежуточного продукта 14а (1,15 г, 4,95 ммоль), 2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этанола (1,09 г, 7,43 ммоль) и трифенилфосфина (2,60 г, 9,90 ммоль) в безводном ТГФ (30 мл) медленно добавляли диэтилазодикарбоксилат (1,72 г, 1,56 мл, 7,43 ммоль) (ВНИМАНИЕ: это приводило к экзотермическому эффекту). Ледяную баню удаляли и перемешивание продолжали при КТ в течение 45 мин. Затем смесь распределяли между водой и EtOAc. Органический слой отделяли и водный слой снова экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, концентрировали под вакуумом и подвергали КФХ, элюируя 0-7% MeOH/ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого масла (637 мг, 36%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,22 мин, m/z 361,3 [МН⁺]. ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,31 (9Н, с), 1,46-1,90 (6H, м), 3,47-3,58 (1H, м), 3,75 (2H, уш.с), 3,80-3,94 (2H, м), 4,08 (1H, дт, J=4,5, 11,5 Гц), 4,23-4,29 (2Н, м), 4,67-4,73 (1Н, м), 5,56 (1H, с), 7,54 (1H, т, J=2,3 Гц), 8,28 (1H, д, J=2,5 Гц), 8,51 (1H, д, J=1,8 Гц).

с. 2-[5-(5-Амино-3-трет-бутил-пиразол-1-ил)-пиридин-3-илокси]-этанол (Промежуточный продукт 14с)

Промежуточный продукт 14b (0,64 г, 1,77 ммоль) и п-толуолсульфонат пиридиния (1,33 г, 5,30 ммоль) суспендировали в МеОН (20 мл) и нагревали до 50°С в течение 18 ч. Реакционную смесь наносили на 20 г картридж SCX-2 SPE, промывали МеОН и продукт элюировали 2М NH₃ в MeOH и основной элюент концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 0-8% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения, которое кристаллизовали (392 мг, 80%). ЖХМС (Способ 3): Rt 2,35 мин, m/z 277,3 [МН⁺]. ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,31 (9Н, с), 3,97-4,03 (2H, м), 4,14-4,21 (2Н, м), 5,57 (1H, с), 7,54 (1H, т, J=2,3 Гц), 8,26 (1H, д, J=2,7 Гц), 8,53 (1H, д, J=2,0 Гц).

d. {5-трет-Бутил-2-[5-(2-гидрокси-этокси)-пиридин-3-ил]-2Н-пиразол-3-ил}-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлорэтиловый эфир (Промежуточный продукт 14d)

К охлажденному льдом раствору Промежуточного продукта 14с (392 мг, 1,42 ммоль) в EtOAc (5 мл) и 1N водному раствору NaOH (3,6 мл), добавляли по каплям 2,2,2-трихлорэтилхлорформиат (331 мг, 215 мкл, 1,56 ммоль), и ледяную баню удаляли, и реакционную смесь нагревали до КТ. Дополнительные 4,4 экв. 2,2,2-трихлорэтилхлорформиата добавляли порциями с интервалами более 6 ч и затем перемешивали в течение 18 ч. Затем смесь распределяли между H₂O и EtOAc, и органический слой отделяли, и водный слой снова экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, концентрировали под вакуумом и подвергали КФХ, элюируя 0-5% MeOH/ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения в виде стекловидной пленки (262 мг, 41%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,64 мин, m/z 451,1 [МН⁺]. ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,35 (9Н, с), 3,98-4,04 (2H, м), 4,15-4,22 (2Н, м), 4,81 (2H, с), 6,44 (1H, с), 7,47 (1H, т, J=2,2 Гц), 8,26 (1H, д, J=1,8 Гц), 8,40 (1H, с).

е. 1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-гидрокси-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 14е)

Смесь Промежуточного продукта 14d (130 мг, 0,29 ммоль), Промежуточного продукта 3 (113 мг, 0,29 ммоль) и ДИПЭА (75 мкл, 0,43 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 80°С в течение 24 ч. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 1-8% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (160 мг, 80%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,61 мин, m/z 694,5 [МН⁺].

f. Метансульфоновой кислоты 2-{5-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-пиразол-1-ил]-пиридин-3-илокси}-этиловый эфир (Промежуточный продукт 14f)

Смесь Промежуточного продукта 14е (160 мг, 0,23 ммоль), метансульфонилхлорида (23 мкл, 0,30 ммоль) и ДИПЭА (118 мкл, 0,70 ммоль) в ДХМ (5 мл) перемешивали при КТ в течение 20 мин. Реакционную смесь распределяли между ДХМ и водой, энергично перемешивали, разделяли через картридж для фазового разделения и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (178 мг, 100%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,87 мин, m/z 771,95 [MH⁺].

g. 1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 14)

Смесь Промежуточного продукта 14f (160 мг, 0,21 ммоль) и диметиламина (2,0М в ТГФ, 4 мл, 8,00 ммоль) перемешивали при 60°С в течение 24 ч в герметично закрытом сосуде. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ с элюированием 1-6% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ. Полученный остаток растирали со смесью пентан/Et₂O. Проводили дополнительную очистку с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (Способ 6), и фракции продукта концентрировали под вакуумом, и растирали с Et₂O, и высушивали в вакуумном сушильном шкафу при 50°С с получением указанного в заголовке соединения (63 мг, 42%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,73 мин, m/z 721,5 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,60 (3H, д, J=6,2 Гц), 0,63 (3Н, д, J=6,2 Гц), 1,29 (9Н, с), 1,38-1,63 (3Н, м), 1,66-1,75 (2H, м), 1,76-1,98 (3Н, м), 2,00-2,15 (2H, м), 2,18 (6Н, с), 2,62 (2Н, т, J=5,7 Гц), 3,13-3,24 (1H, м), 3,38 (м, скрытый водой), 4,16 (2Н, т, J=5,6 Гц), 4,76-4,85 (1Н, м), 5,52 (1H, т, J=4,1 Гц), 6,37 (1H, с), 7,15 (1H, д, J=8,5 Гц), 7,21 (1H, дд, J=2,2, 9,8 Гц), 7,23-7,29 (2H, м), 7,30-7,37 (2H, м), 7,56 (1H, т, J=2,3 Гц), 7,64-7,69 (1H, м), 7,88 (1H, д, J=1,5 Гц), 8,20 (0,6Н, с), 8,28 (1H, с), 8,31 (1H, д, J=2,6 Гц), 8,36 (1H, д, J=2,0 Гц).

Пример 15

1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-гидрокси-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 15а)

Смесь Промежуточного продукта 14d (130 мг, 0,29 ммоль), Промежуточного продукта 2 (109 мг, 0,29 ммоль) и ДИПЭА (75,0 мкл, 0,43 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 80°С в течение 24 ч. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 1-8% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (158 мг, 81%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,44 мин, m/z 680,5 [МН⁺].

b. Метансульфоновой кислоты 2-{5-[3-трет-Бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-пиразол-1-ил]-пиридин-3-илокси}-этиловый эфир (Промежуточный продукт 15b)

Смесь Промежуточного продукта 15а (158 мг, 0,23 ммоль), метансульфонилхлорида (23,0 мкл, 0,30 ммоль) и ДИПЭА (119 мкл, 0,70 ммоль) в ДХМ (5 мл) перемешивали при КТ в течение 20 мин. Реакционную смесь распределяли между ДХМ и водой, энергично перемешивали, разделяли через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (176 мг, 100%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,66 мин, m/z 758,4 [МН⁺].

с. 1-{5-трет-Бутил-2-[5-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-3-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 15)

Смесь Промежуточного продукта 15b (176 мг, 0,23 ммоль) и диметиламина (2,0М в ТГФ, 4 мл, 8,00 ммоль) перемешивали при 60°С в течение 5 ч в герметично закрытом сосуде. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 1-7% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ. Проводили дополнительную очистку с помощью ВЭЖХ с обращенной фазой (Способ 6), и фракции продукта концентрировали под вакуумом, и растирали с Et₂O, и высушивали в вакуумном сушильном шкафу при 50°С с получением указанного в заголовке соединения (53 мг, 32%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,56 мин, m/z 707,5 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,87 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,25 (9Н, с), 1,42-1,53 (2Н, м) 1,58-1,69 (2H, м), 1,70-1,92 (3H, м), 1,94-2,05 (1H, м), 2,05-2,12 (1H, м), 2,14 (6Н, с), 2,59 (2Н, т, J=5,6 Гц), 2,82-2,91 (1Н, м), 3,08-3,16 (1H, м), 3,28 (м, скрытый водой), 4,13 (2Н, т, J=5,9 Гц), 4,72-4,81 (1Н, м), 5,47 (1H, т, J=4,1 Гц), 6,33 (1H, с), 7,1 (1Н, д, J=8,6 Гц), 7,15 (1H, дд, J=2,1, 9,8 Гц), 7,19-7,26 (2H, м), 7,26-7,35 (2H, м), 7,51 (1H, т, J=2,4 Гц), 7,6 (1Н, д, J=9,9 Гц), 7,65 (1H, д, J=1,7 Гц), 8,15 (0,7H, с), 8,23 (1H, с), 8,28 (1H, д, J=2,6 Гц), 8,32 (1H, д, J=2,0 Гц).

Пример 16

1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-2-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-2-ил]-2Н-пиразол-3-иламин (Промежуточный продукт 16а)

Раствор [2-(6-бром-пиридин-2-илокси)-этил]-диметиламина (WO2003/082278, 500 мг, 2,00 ммоль), 3-трет-бутил-1Н-пиразол-5-амина (341 мг, 2,50 ммоль) и транс-N,N'-диметил-циклогексан-диамина (58,0 мг, 0,40 ммоль) образовывали в толуоле (5 мл). Добавляли карбонат калия (592 мг, 4,30 ммоль) и смесь дегазировали с помощью барботирования через нее N₂. Добавляли иодид меди (I) (39,0 мг, 0,20 ммоль) и смесь герметизировали в виале для микроволнового облучения, и нагревали при микроволновом облучении при 150°С в течение 2 ч. Полученную смесь распределяли между смесью EtOAc/вода и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали и испаряли. Очистка с помощью КФХ с элюированием градиентом 0-10% [2М NH₃/MeOH] в ДХМ обеспечивала указанное в заголовке соединение (428 мг, 69%) в виде коричневого масла. ЖХМС (Способ 3): Rt 2,29 мин, m/z 304 [МН⁺].

b. {5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-2-ил]-2Н-пиразол-3-ил}-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлорэтиловый эфир (Промежуточный продукт 16b)

Раствор Промежуточного продукта 16а (100 мг, 0,33 ммоль) образовывали в ДХМ (3 мл). Добавляли пиридин (40,0 мкл, 0,49 ммоль) с последующим добавлением 2,2,2-трихлорэтилхлорформиата (50,0 мкл, 0,36 ммоль). Смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Добавляли дополнительное количество 2,2,2-трихлорэтилхлорформиата (25,0 мкл, 0,18 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Смесь распределяли между ДХМ/водой, и фазы разделяли через картридж для разделения фаз, и испаряли. Очистка с помощью КФХ с элюированием градиентом 0-10% МеОН в ДХМ обеспечивала указанное в заголовке соединение (115 мг, 73%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,10 мин, m/z 478, 480 [МН⁺].

с. 1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридин-2-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 16)

Раствор Промежуточного продукта 16b (115 мг, 0,24 ммоль), Промежуточного продукта 2 (91,0 мг, 0,24 ммоль) и триэтиламина (84,0 мкл, 0,48 ммоль) образовывали в диоксане (3 мл) и нагревали при 80°С в течение 72 ч. Полученную смесь распределяли между EtOAc/водой и экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали и испаряли. Очистка с помощью КФХ, элюируя градиентом 0-20% МеОН в ДХМ, с последующей дополнительной очисткой с использованием MDAP (Способ 7) обеспечивала указанное в заголовке соединение (35 мг, 20%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,98 мин, m/z 707,5 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,29 (9Н, с), 1,46-1,55 (2Н, м), 1,65-1,72 (2Н, м), 1,76-1,86 (2H, м), 1,87-1,95 (1H, м), 1,98-2,11 (2Н, м), 2,06 (6Н, с), 2,17-2,24 (1H, м), 2,59 (2Н, т, J=6,4 Гц), 2,88-2,95 (1H, м), 3,14-3,20 (1H, м), 3,29-3,35 (1Н, м), 4,40-4,45 (2H, м), 4,90-4,96 (1Н, м), 5,54 (1H, т, J=3,9 Гц), 6,52 (1H, с), 6,71 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,17 (1H, дд, J=4,9, 2,2 Гц), 7,26-7,31 (1H, м), 7,34-7,42 (4H, м), 7,64-7,69 (2H, м), 7,78 (1H, д, J=8,7 Гц), 7,87 (1H, т, J=7,9 Гц), 8,17 (1H, с), 9,80 (1H, с).

Пример 17

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-(2,6-дихлор-фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 2,6-Дихлор-бензойной кислоты N'-(5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразид (Промежуточный продукт 17а)

ДИПЭА (2,73 мл, 15,7 ммоль) добавляли по каплям к раствору (5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразина (Для исходной методики см. WO2010022076; 1,00 г, 7,87 ммоль) и 2,6-дихлор-бензоила (1,65 г, 7,87 ммоль) в ДХМ (50 мл). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин и затем суспендировали в ДХМ и воде. Полученную суспензию отфильтровывали, и твердое вещество промывали водой, и высушивали на воздухе с получением указанного в заголовке соединения (1,66 г, 71%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,04 мин, m/z 300, 302 [МН⁺].

b. 3-(2,6-Дихлор-фенил)-6-фтор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 17b)

Гексахлорэтан (2,60 г, 11,0 ммоль) добавляли порциями более 5 мин при КТ к перемешиваемой смеси Промежуточного продукта 17а (1,65 г, 5,50 ммоль), трифенилфосфина (2,88 г, 11,0 ммоль) и триэтиламина (3,06 мл, 22,0 ммоль) в ТГФ (50 мл). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 18 ч и затем оставляли при КТ на 72 ч. Полученную суспензию отфильтровывали, и фильтрат концентрировали под вакуумом, и очищали с помощью КФХ, используя картридж SCX-2. Картридж промывали MeOH и продукт элюировали 2М NH₃ в МеОН с получением указанного в заголовке соединения (1,44 г, 93%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,08 мин, m/z 282, 284 [МН⁺].

с. (1S,4R)-4-[3-(2,6-Дихлор-фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин (Промежуточный продукт 17с)

Промежуточный продукт 1 (404 мг, 2,48 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору гидрида натрия (60% в минеральном масле, 298 мг, 7,44 ммоль) в безводном ДМФ (15 мл) при КТ в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 15 мин, затем добавляли Промежуточный продукт 17b (0,70 г, 2,48 ммоль) и перемешивание продолжали при 60°С в течение 1 ч. После охлаждения реакционную смесь гасили с помощью осторожного добавления насыщенного водного раствора NH₄Cl и воды (1:1) и экстрагировали EtOAc (×3). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором NaHCO₃, затем солевым раствором, высушивали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-20% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (345 мг, 33%) в виде коричневого остатка. ЖХМС (Способ 3): Rt 2,34 мин, m/z 425, 427 [МН⁺].

d. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-(2,6-дихлор-фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 17d)

Смесь Промежуточного продукта 6 (118 мг, 279 мкмоль), Промежуточного продукта 17с (108 мг, 254 мкмоль) и ДИПЭА (73,0 мкл, 419 мкмоль) в диоксане (2,5 мл) перемешивали при 60°С в течение 42 ч. После охлаждения смесь разбавляли ДХМ, промывали (водой и солевым раствором) и концентрировали досуха. Остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-10% МеОН в ДХМ, с получением указанного в заголовке соединения (160 мг, 90%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,54 мин, m/z 700, 702 [МН⁺].

е. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-(2,6-дихлор-фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир (Промежуточный продукт 17е)

Смесь Промежуточного продукта 17d (160 мг, 228 мкмоль), метансульфонилхлорида (26,5 мкл, 342 мкмоль) и ДИПЭА (119 мкл, 684 мкмоль) в ДХМ (5 мл) перемешивали при КТ в течение 2 ч. Реакционную смесь распределяли между ДХМ и водой. Органический слой промывали (водой (2×) и солевым раствором) и затем пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (140 мг, 79%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,78 мин, m/z 778, 780 [МН⁺].

f. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-(2,6-дихлор-фенил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 17)

Смесь Промежуточного продукта 17e (140 мг, 180 мкмоль) и диметиламина (2,0M в ТГФ, 0,9 мл, 1,80 ммоль) в ТГФ (1,1 мл) перемешивали при КТ в течение 48 ч в герметично закрытом сосуде. Смесь разбавляли ДХМ, промывали (водой и солевым раствором) и концентрировали досуха. Полученный остаток очищали с помощью MDAP (Способ 7) с получением указанного в заголовке соединения (75 мг, 57%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,68 мин, m/z 727 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 1,24 (9Н, с), 1,80-2,10 (4H, м), 2,17 (6Н, с), 2,68 (2Н, т, J=6,4 Гц), 4,21 (2H, т, J=6,4 Гц), 4,81 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,5 Гц), 6,25 (1H, с), 7,13 (1H, д, J=8,4 Гц), 7,26 (1H, м), 7,29-7,36 (4H, м), 7,62 (1H, д, J=0,9 Гц), 7,69-7,79 (3Н, м), 7,90 (1H, д, J=9,7 Гц), 7,97 (1Н, д, J=1,8 Гц), 7,99 (1H, с), 8,04 (1H, с), 8,16 (1H, с).

Пример 18

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3[(1S,4R)-4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевина

а. Изомасляной кислоты N'-(5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразид (Промежуточный продукт 18а)

EDC (11,25 г, 58,6 ммоль) добавляли порциями к раствору (5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразина (Для исходной методики см. WO2010022076; 6,2 г, 48,8 ммоль), изомасляной кислоты (5,15 г, 58,4 ммоль) и HOBt (0,66 г, 4,88 ммоль) в ДХМ (200 мл). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 2 ч перед промыванием насыщенным водным раствором Na₂CO₃, высушивали над Na₂SO₄ и концентрировали под вакуумом. Остаток растирали с диэтиловым эфиром с получением указанного в заголовке соединения (6,15 г, 64%). ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,23 (6H, д, J=6,9 Гц), 2,49 (1H, септет, J=6,9 Гц), 6,64 (1H, дд, J=9,0, 3,5 Гц), 6,76 (1H, уш.с), 7,24-7,32 (1H, м), 7,71 (1H, уш.с), 8,02 (1H, д, J=2,8 Гц).

b. 6-Фтор-3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 18b)

Гексахлорэтан (14,6 г, 61,9 ммоль) добавляли к перемешиваемой смеси Промежуточного продукта 18а (6,10 г, 31,0 ммоль), трифенилфосфина (16,2 г, 61,9 ммоль) и триэтиламина (12,5 г, 123,8 ммоль) в ТГФ (110 мл), предварительно охлажденном на ледяной бане. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, затем при КТ в течение 1,5 ч. Полученную суспензию отфильтровывали и фильтрат концентрировали под вакуумом. Остаток очищали с помощью КФХ, используя картридж SCX-2: Картридж промывали MeOH и продукт затем элюировали 2М NH₃ в МеОН с получением указанного в заголовке соединения (4,49 г, 81%). ¹H ЯМР (300 МГц, CDCl₃): 1,54 (6H, д, J=6,9 Гц), 3,32 (1H, септет, J=6,9 Гц), 7,17 (1H, ддд, J=10,0, 7,5, 2,2 Гц), 7,73-7,80 (1H, м), 7,81-7,86 (1Н, м).

с. (1S,4R)-4-(3-Изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-цис-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин (Промежуточный продукт 18с)

Промежуточный продукт 1 (0,48 г, 2,94 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору гидрида натрия (60% в минеральном масле, 0,34 г, 8,50 ммоль) в безводном ДМФ (15 мл) при КТ в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 45 мин, затем добавляли Промежуточный продукт 18b (0,50 г, 2,79 ммоль) и перемешивали при 50°С в течение 2 ч. После охлаждения реакционную смесь гасили с помощью осторожного добавления насыщенного водного раствора NH₄Cl и воды (1:1) и экстрагировали ДХМ (8×50 мл). Объединенные органические слои промывали водой с последующим промыванием солевым раствором, высушивали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ с получением указанного в заголовке соединения (0,61 г, 67%) в виде коричневого остатка. ЖХМС (Способ 3): Rt 1,98 мин, m/z 323 [МН⁺].

d. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[(1S,4R)-4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевина (Промежуточный продукт 18d)

Смесь Промежуточного продукта 6 (0,80 г, 1,88 ммоль), Промежуточного продукта 18с (0,61 г, 1,89 ммоль) и ДИПЭА (0,49 мл, 2,81 ммоль) в диоксане (10 мл) перемешивали при 70°С в течение 18 ч. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя 50% ДХМ в циклогексане, затем элюируя 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ с получением указанного в заголовке соединения (0,97 г, 85%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,12 мин, m/z 598 [МН⁺].

е. Метансульфоновой кислоты 2-(3-трет-бутил-5-{3-[(1S,4R)-4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-уреидо}-[1,4']бипиразолил-1'-ил)-этиловый эфир. (Промежуточный продукт 18е)

Смесь Промежуточного продукта 18d (0,30 г, 0,50 ммоль), метансульфонилхлорида (58,0 мкл, 0,75 ммоль) и ДИПЭА (260 мкл, 1,49 ммоль) в ДХМ (8 мл) перемешивали при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между ДХМ и водой. Органический слой промывали солевым раствором, пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (0,34 г, 100%). ЖХМС (Способ 3): Rt 3,35 мин, m/z 676 [МН⁺].

f. [3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[(1S,4R)-4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевина (Пример 18)

Смесь Промежуточного продукта 18е (0,34 г, 0,50 ммоль) и диметиламина (2,0М в ТГФ, 5,0 мл, 10,0 ммоль) перемешивали при 60°С в течение 18 ч в герметично закрытом сосуде. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью КФХ, используя 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ. Выделенный продукт дополнительно очищали с помощью ВЭЖХ (Gemini С18, 20-60% MeCN в H₂O, 0,1% HCO₂H) и высушивали сублимацией с получением указанного в заголовке соединения (90 мг, 29%). ЖХМС (способ 5): Rt 3,20 мин, m/z 625,4 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 1,24 (9Н, с), 1,36-1,41 (6H, м), 1,83-2,02 (2Н, м), 2,07-2,14 (2H, м), 2,17 (6Н, с), 2,67 (2Н, т, J=6,6 Гц), 3,57 (1H, септет, J=6,8 Гц), 4,20 (2Н, т, J=6,6 Гц), 4,81-4,89 (1Н, м), 5,55 (1H, т, J=4,8 Гц), 6,27 (1H, с), 7,14-7,19 (2H, м), 7,26-7,42 (4H, м), 7,62 (1H, с), 7,69 (1Н, д, J=9,9 Гц), 8,00 (1H, с), 8,04 (1H, с), 8,18 (0,5H, с), 8,21 (1H, с).

Примеры 19-24:

а. Общая методика замещения

Смесь Промежуточного продукта A-E (0,115 ммоль) и соответствующего амина [см. таблицу 2] (2,30 ммоль) в безводном ТГФ (1 мл) перемешивали при 60°С в течение 18 ч в герметично закрытом сосуде. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью или MDAP (способ 7), или ВЭЖХ (Gemini С18, 20-40% MeCN в H₂O, 0,1% HCO₂H, 18 мл/мин), или и того и другого для получения указанного в заголовке соединения (40-80%).

Пример № Амин Используемый промежуточный продукт Структура примера ЯМР (400 МГц) δ ЖХМС 19
Пирролидин D
1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пирролидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (9H, с), 1,45-1,57 (2H, м), 1,61-1,73 (6H, м), 1,75-2,18 (6H, м), ~2,48 (4H, м, скрытый растворителем), 2,87 (2H, т, J=6,6 Гц), 2,89-2,95 (1H, м), 3,12-3,20 (1H, м, скрытый водой), 3,27-3,36 (1H, м, скрытый водой), 4,23 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,80-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,5 Гц), 6,27 (1H, с), 7,16 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,20 (1H, дд, J=9,9, 2,1 Гц), 7,25-7,32 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,62-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=1,9 Гц), 8,01 (1H, с), 8,06 (1H, с), 8,16 (1,2H, с). (Способ 5): Rt 3,55 мин, m/z 706,4 [MH⁺]. 20
4-Метокси-пиперидин D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-метокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,25 (9H, с), 1,32-1,44 (2H, м), 1,45-1,57 (2H, м), 1,61-2,19 (12H, м), 2,65-2,75 (2H, м), 2,71 (2H, т, J=6,7 Гц), 2,86-2,95 (1H, м), 3,09-3,18 (2H, м, скрытый водой), 3,19 (3H, с), ~3,32 (1H, м, полностью скрытый водой), 4,22 (2H, т, J=6,7 Гц), 4,79-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,26 (1H, с), 7,14 (1H, д, J=8,8Гц), 7,20 (1H, дд, J=10,0, 2,0 Гц), 7,25-7,32 (1H, м), 7,32-7,41 (3H, м), 7,62-7,67 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=1,8 Гц), 8,00 (1H, с), 8,04 (1H, с), 8,15 (1,3H, с). (Способ 5): Rt 3,60 мин, m/z 750,5 [MH⁺]. 21
2-Метиламино-этанол D
1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-гидрокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (9H, с), 1,44-1,57 (2H, м), 1,60-1,73 (2H, м), 1,73-2,19 (6H, м), 2,23 (3H, с), 2,46 (2H, т, J=6,2 Гц), 2,81 (2H, т, J=6,6 Гц), 2,86-2,95 (1H, м), 3,12-3,20 (1H, м, скрытый водой), ~3,32 (1H, м, полностью скрытый водой), 3,44 (2H, т J=6,2 Гц, скрытый водой), 4,20 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,80-4,89 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,5 Гц), 6,27 (1H, с), 7,15 (1H, д, J=8,4Гц), 7,20 (1H, дд, J=9,8, 2,2 Гц), 7,25-7,32 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,61-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=1,7 Гц), 7,99 (1H, с), 8,07 (1H, с), 8,16 (1H, с). (Способ 5): Rt 3,49 мин, m/z 710,5 [MH⁺]. 22
(S)-Пирролидин-3-ол D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,25 (9H, с), 1,44-1,57 (3H, м), 1,61-2,18 (9H, м), 2,34 (1H, дд, J=9,5, 3,6 Гц), 2,44-2,50 (1H, м, скрытый растворителем), 2,56-2,64 (1H, м), 2,75 (1H, дд, J=9,5, 2,8 Гц), 2,84 (2H, т, J=6,7 Гц), 2,87-2,95 (1H, м), 3,12-3,20 (1H, м, скрытый водой), ~3,32 (1H, полностью скрытый водой), 4,12-4,18 (1H, м), 4,21 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,80-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,27 (1H, м), 7,16 (1H, д, J=8,6 Гц), 7,20 (1H, дд, J=10,0, 2,1 Гц), 7,25-7,31 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,62-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=2,0 Гц), 8,01 (1H, с), 8,06 (1H, с), 8,18 (1H, с). (Способ 5): Rt 3,48 мин, m/z 722,5 [MH⁺]. 23
3-Метокси-пирролидин D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(3-метокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Способ 5): Rt 3,58 мин, m/z 736,4 [MH⁺]. 24
Этил-метил-амин D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(этил-метил-амино)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Способ 5): Rt 3,55 мин, m/z 694,4 [MH⁺]. 25
(S)-1-Пирролидин-2-ил-метанол D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,25 (9H, с), 1,39-2,18 (16H, м), 2,18-2,26 (1H, м), 2,67-2,75 (1H, м), 2,86-2,95 (1H, м), 2,99-3,05 (1H, м), 3,12-3,37 (4H, м, скрытый водой), 4,20 (2H, т, J=6,8 Гц), 4,36 (1H, уш.с), 4,80-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,26 (1H, с), 7,14-7,22 (2H, м), 7,25-7,32 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,61-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=1,7 Гц), 8,01 (1H, с), 8,07 (1H, с), 8,27 (0,3H, с). (Способ 5): Rt 3,56 мин, m/z 736,6 [MH⁺]. 26
(1S,4S)-2-Метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]-гептан D
1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((1S,4S)-5-метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат ¹H ЯМР (400 MГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,25 (9H, с), 1,45-2,18 (12H, м), 2,28 (3H, с), ~2,52 (1H, м, скрытый растворителем), 2,63 (2H, с), 2,68-2,73 (1H, м), 2,80-2,97 (3H, м), 3,13-3,22 (2H, м, скрытый водой), 3,25-3,34 (2H, м, скрытый водой), 4,14 (2H, т, J=6,6 Гц), 4,80-4,88 (1H, м), 5,53 (1H, т, J=4,4 Гц), 6,26 (1H, с), 7,16-7,22 (2H, м), 7,25-7,31 (1H, м), 7,32-7,40 (3H, м), 7,61-7,66 (2H, м), 7,70 (1H, д, J=1,9 Гц), 8,04-8,07 (2H, м), 8,26 (0,9H, с). (Способ 5): Rt 3,48 мин, m/z 747,5 [MH⁺].

Пример 27

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина

а. 6-Фтор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 27а)

(5-Фтор-пиридин-2-ил)-гидразин (500 мг, 3,93 ммоль) в диэтоксиметилацетате (5 мл) перемешивали при КТ в течение 2 ч. Полученный осадок разбавляли циклогексаном (5 мл) и отфильтровывали с получением указанного в заголовке соединения (379 мг, 70%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 7,25 (1H, м), 7,84 (1H, м), 8,09 (1H, т), 8,84 (1H, с).

b. 3-Хлор-6-фтор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 27b)

Раствор Промежуточного продукта 27а (789 мг, 5,98 ммоль) и N-хлорсукцинимида (878 мг, 6,57 ммоль) в хлороформе (15 мл) нагревали при 65°С в течение ночи. Охлажденную смесь промывали насыщ. водн. раствором NaHCO₃ (2×15 мл) и высушивали (Na₂SO₄). Растворитель испаряли, затем остаток суспендировали в диэтиловом эфире (10 мл) и отфильтровывали с получением указанного в заголовке соединения (730 мг, 76%). ЖХМС (Способ 1): Rt 1,83 мин, m/z 172 [МН⁺].

с. [(S)-1-(6-Фтор-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин-3-ил)-пирролидин-2-ил]-метанол (Промежуточный продукт 27с)

Смесь Промежуточного продукта 27b (300 мг, 1,74 ммоль) и L-пролинола (704 мг, 9,96 ммоль) в NMP (4 мл) нагревали в микроволновой печи при 160°С в течение 2 ч. Реакционную смесь наносили на картридж SCX-2 (70 г) и промывали МеОН. Продукт элюировали 2М NH₃ в МеОН; концентрирование под вакуумом обеспечивало остаток. КФХ с использованием 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ обеспечивала указанное в заголовке соединение (210 мг, 50%). ЖХМС (Способ 4): Rt 1,50 мин, m/z 237 [МН⁺].

d. 6-Фтор-3-((S)-2-триизопропилсиланилоксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 27d)

Триизопропилсилилтрифторметансульфонат (327 мг, 1,06 ммоль) добавляли к раствору Промежуточного продукта 27с (210 мг, 0,89 ммоль) и Et₃N (135 мг, 1,33 ммоль) в ДМФ (3 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Реакционную смесь наносили на картридж SCX-2 (25 г) и промывали МеОН. Продукт элюировали 2М NH₃ в МеОН; концентрирование под вакуумом обеспечивало остаток. КФХ с использованием 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ обеспечивала указанное в заголовке соединение (110 мг, 31%). ЖХМС (Способ 1): Rt 4,45 мин, m/z 393 [МН⁺].

е. (1S,4R)-4-[3-((S)-2-Триизопропилсиланилоксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин (Промежуточный продукт 27е)

К раствору Промежуточного продукта 1 (50 мг, 0,309 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляли NaH (60% в масле, 33 мг, 0,80 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение 20 мин до добавления Промежуточного продукта 27d (110 мг, 0,280 ммоль). Данную смесь нагревали при 60°С в микроволновой печи в течение 1,25 ч. Реакционную смесь наносили на картридж SCX-2 (25 г) и промывали МеОН. Продукт элюировали 2М NH₃ в МеОН; концентрирование под вакуумом обеспечивало остаток. КФХ с использованием 0-7% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ обеспечивала указанное в заголовке соединение в виде вязкого желтого масла (42 мг, 28%). ЖХМС (Способ 4): Rt 2,55 мин, m/z 536 [МН⁺].

f. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-триизопропилсиланилоксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 27f)

Указанное в заголовке соединение получали, исходя из Промежуточного продукта 6 и Промежуточного продукта 27е, с помощью методики, аналогичной описанной для Примера 18 стадии d. ЖХМС (Способ 3): Rt 4,19 мин, m/z 811,6 [МН⁺].

g. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-триизопропилсиланилоксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир (Промежуточный продукт 27g)

Указанное в заголовке соединение получали, исходя из Промежуточного продукта 27f, с помощью методики, аналогичной описанной для Примера 18 стадии е. ЖХМС (Способ 3): Rt 4,37 мин, m/z 889,5 [МН⁺].

h. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-триизопропилсиланилоксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 27h)

Указанное в заголовке соединение получали, исходя из Промежуточного продукта 27g, с помощью методики, аналогичной описанной для Примера 18 стадии f. ЖХМС (Способ 3): Rt 3,28 мин, m/z 838,6 [МН⁺].

i. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Пример 27)

К раствору Промежуточного продукта 27h (139 мг, 0,166 ммоль) в 2-метилТГФ (3 мл) добавляли раствор ТБАФ в ТГФ (1 М, 0,21 мл, 0,21 ммоль). Перемешивали при КТ в течение 1 ч, затем разбавляли водой и экстрагировали ДХМ (4×20 мл). Объединенные органические фазы пропускали через трубку для разделения фаз, затем испаряли досуха. Остаток очищали с помощью КФХ, элюируя 0-16% 2М NH₃/MeOH в ДХМ, с получением бледно-желтого стекловидного вещества. Его растворяли в смеси ацетонитрил/вода и сушили сублимацией, получая указанное в заголовке соединение в виде бледно-кремового твердого вещества (90 мг, 80%). ЖХМС (Способ 5): Rt 2,93 мин, m/z 682,4 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 1,25 (9Н, с), 1,72-2,13 (8H, м), 2,17 (6Н, с), 2,67 (2Н, т, J 6,5), 3,31-3,39 (2Н, м), 3,41-3,48 (1H, м), 3,69 (1H, дт, J 9,5, 6,9), 4,02-4,10 (1H, м), 4,20 (2Н, т, J 6,6), 4,77-4,87 (2Н, м), 5,46 (1H, т, J 4,5), 6,27 (1H, с), 7,06 (1H, дд, J 9,9, 2,0), 7,15 (1H, д, J 8,5), 7,27-7,43 (4Н, м), 7,54 (1Н, д, J 9,9), 7,63 (1H, с), 7,98 (1H, уш.с), 8,03-8,06 (2Н, м).

Пример 28

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. (S)-1-Метил-пирролидин-2-карбоновой кислоты N'-(5-фтор-пиридин-2-ил)-гидразид (Промежуточный продукт 28а)

EDC (271 мг, 1,41 ммоль) добавляли порциями к раствору 5-фтор-2-гидразинил-пиридина (для исходной методики см. WO2010022076; 0,15 г, 1,18 ммоль), N-метил-L-пролина моногидрата (0,20 г, 1,36 ммоль) и HOBt (16 мг, 0,12 ммоль) в сухом ДХМ (5 мл) при КТ и перемешивали в течение 16 ч. Раствор разбавляли ДХМ (15 мл), промывали водой (150 мл), высушивали (Na₂SO₄) и испаряли с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтой смолы (189 мг, 67%). ЖХМС (Способ 1): Rt 0,31 мин, m/z 239 [МН⁺].

b. 6-Фтор-3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиридин (Промежуточный продукт 28b)

Гексахлорэтан (375 мг, 1,59 ммоль) добавляли порциями к раствору Промежуточного продукта 28а (189 мг, 0,79 ммоль), трифенилфосфина (416 мг, 1,59 ммоль) и триэтиламина (0,44 мл, 3,17 ммоль) в сухом ТГФ (10 мл) при КТ и перемешивали в течение 4 ч. Полученный осадок отфильтровывали и фильтрат испаряли. Остаток очищали с помощью SCX-2, элюируя MeOH, с последующим 2М NH₃ в МеОН с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневой пены (136 мг, 78%). ЖХМС (Способ 1): Rt 0,45 мин, m/z 221 [МН⁺].

с. (1S,4R)-4-[3-((S)-1-Метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-иламин. (Промежуточный продукт 28с)

Промежуточный продукт 1 (128 мг, 0,77 ммоль) добавляли порциями к суспензии гидрида натрия (60% в минеральном масле, 92 мг, 2,30 ммоль) в сухом ДМФ (3 мл) при КТ и перемешивали в течение 15 минут. Промежуточный продукт 28b (169 мг, 0,77 ммоль) затем добавляли в виде одной порции и смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. После охлаждения добавляли насыщенный NH₄Cl (прибл. 0,2 мл). Смесь распределяли между водой (10 мл) и этилацетатом (3×10 мл). Водную фазу концентрировали под вакуумом и остаток очищали с помощью SCX-2, элюируя MeOH, с последующим 2М NH₃ в МеОН с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневой окрашенной пены (103 мг, 36%). ЖХМС (Способ 1): Rt 1,34 мин, m/z 364 [МН⁺].

d. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 28)

Смесь Промежуточного продукта 6 (0,23 г, 0,54 ммоль), Промежуточного продукта 28с (0,195 г, 0,54 ммоль) и ДИПЭА (0,18 мл, 1,03 ммоль) в диоксане (5 мл) перемешивали при 70°С в течение 18 ч. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток повторно растворяли в ДХМ (50 мл), промывали водой и солевым раствором, затем высушивали и испаряли с получением коричневого остатка. Этот продукт очищали с помощью КФХ, используя 0-10% [2М NH₃ в МеОН] в ДХМ, с последующим MDAP с получением указанного в заголовке соединения (96 мг, 26%) в виде стекловидного вещества. ЖХМС (Способ 5): Rt 2,99 мин, m/z 639,4 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО): 1,25 (9Н, с), 1,83-2,25 (9Н, м), 2,13 (3Н, с), 2,35-2,39 (1Н, м), 3,11-3,17 (1Н, м), 3,77 (2Н, т, J 5,7 Гц), 3,99 (1H, т, J 8,1 Гц), 4,17 (2Н, т, J 5,7 Гц), 4,81-4,89 (1Н, м), 5,40 (1H, т, J 4,4 Гц), 6,27 (1H, с), 7,18 (1H, д, J 8,5 Гц), 7,25-7,39 (5Н, м), 7,64 (1Н, д, J 0,7 Гц), 7,79 (1Н, д, J 9,7 Гц), 8,00 (1H, с), 8,01 (1Н, д, J 0,6 Гц), 8,15 (1H, с), 8,24-8,26 (1Н, м).

Пример 29

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. Метансульфоновой кислоты 2-[3-трет-Бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-[1,4']бипиразолил-1'-ил]-этиловый эфир (Промежуточный продукт 29а)

Смесь Примера 28 (0,140 г, 0,219 ммоль), метансульфонилхлорида (26 мкл, 0,336 ммоль) и ДИПЭА (115 мкл, 0,660 ммоль) в ДХМ (1 мл) перемешивали при КТ в течение 1 часа. Реакционную смесь распределяли между ДХМ и водой. Органический слой промывали солевым раствором, разделяли через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения (0,17 г, 100%) в виде бледно-желтого твердого вещества. ЖХМС (Способ 3): Rt 2,65 мин, m/z 717 [МН⁺].

b. 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 29)

Смесь Промежуточного продукта 29а (0,17 г, 0,22 ммоль) и диметиламина (2,0М в ТГФ, 1,2 мл, 2,4 ммоль) перемешивали при КТ в течение 18 ч в герметично закрытом сосуде. Летучие вещества концентрировали под вакуумом и полученный остаток очищали с помощью MDAP с получением указанного в заголовке соединения (93 мг, 57%). ЖХМС (Способ 5): Rt 2,57 мин, m/z 666,4 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО): 1,25 (9Н, с), 1,83-2,25 (8H, м), 2,13 (3Н, с), 2,19 (6Н, с), 2,31-2,39 (1H, м), 2,70 (2Н, т, J 6,5 Гц), 3,11-3,17 (1Н, м), 4,00 (1H, т, J 8,1 Гц), 4,21 (2Н, т, J 6,5 Гц), 4,81-4,89 (1Н, м), 5,41 (1H, т, J 4,4 Гц), 6,27 (1H, с), 7,16 (1H, т, J 8,6 Гц), 7,25-7,39 (5Н, м), 7,63 (1Н, д, J 0,6 Гц), 7,75 (1H, дд, J 10,0, 0,5 Гц), 7,99 (1H, с), 8,05 (1Н, д, J 0,6 Гц), 8,14 (1,6H, с), 8,24-8,26 (1Н, м).

Пример 30

1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат

а. 5-Иод-3-[2-(тетрагидро-пиран-2-илокси)-этокси]-пиридазин (Промежуточный продукт 30а)

К раствору 5-иод-3(2Н)-пиридазинона (917 мг, 4,13 ммоль), 2-(тетрагидро-2Н-пиран-2-илокси)этанола (755 мг, 701 мкл, 5,16 ммоль) и трифенилфосфина (1,63 г, 6,20 ммоль) в ТГФ при 3°С добавляли по каплям диэтилазодикарбоксилат (1,08 г, 976 мкл, 6,20 ммоль) более 10 мин, обеспечивая, чтобы температура не превышала 10°С. Через 15 мин реакционную смесь концентрировали под вакуумом и подвергали КФХ, элюируя 5-40% EtOAc/циклогексан, с получением указанного в заголовке соединения в виде белого с желтоватым или сероватым оттенком твердого вещества (1,35 г, 93%). ЖХМС (Способ 4): Rt 3,15 мин, m/z 373 [M+Na⁺].

b. 2-(5-Иод-пиридазин-3-илокси)-этанол (Промежуточный продукт 30b)

К раствору Промежуточного продукта 30а (1,25 г, 3,57 ммоль) в МеОН (25 мл) добавляли пиридиния п-толуолсульфонат (2,69 г, 10,7 ммоль) и реакционную смесь нагревали до 40°С. Через 1 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом, растворяли в воде (20 мл) и насыщенном растворе NaHCO₃ (20 мл) и экстрагировали ДХМ (3×20 мл). Объединенные органические слои пропускали через картридж для разделения фаз и концентрировали под вакуумом с получением бледно-желтого твердого вещества. Остаточный пиридин затем удаляли с помощью азеотропной перегонки с толуолом с получением указанного в заголовке соединения в виде белого с желтоватым или сероватым оттенком твердого вещества (815 мг, 86%). ЖХМС (Способ 4): Rt 1,99 мин, m/z 267 [МН⁺].

с. 2-[5-(5-Амино-3-трет-бутил-пиразол-1-ил)-пиридазин-3-илокси]-этанол (Промежуточный продукт 30c)

3-(трет-Бутил)-1Н-пиразол-5-амин (503 мг, 3,61 ммоль), Промежуточный продукт 30b (915 мг, 3,44 ммоль), иодид меди (I) (32,8 мг, 0,172 ммоль), транс-N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин (97,8 мг, 0,688 ммоль) и K₂CO₃ (998 мг, 7,22 ммоль) взвешивали в круглодонной колбе, герметизировали с помощью септы, и создавали вакуум, и продували Ar 3 раза. Ксилол (4 мл, барботированный Ar в течение 45 мин) затем вводили в колбу и коричневую суспензию нагревали до 150°С в течение 90 мин. Реакционную смесь охлаждали, разбавляли EtOAc (10 мл), водой (10 мл) и насыщенным водным раствором NH₄OH (5 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл) и объединенные органические слои промывали солевым раствором (15 мл), высушивали над Na₂SO₄, отфильтровывали, концентрировали под вакуумом и подвергали КФХ, элюируя 0-4% MeOH/EtOAc, с получением указанного в заголовке соединения в виде бледно-желтого твердого вещества (457 мг, 48%). ЖХМС (Способ 4): Rt 2,81 мин, m/z 278 [МН⁺].

d. {5-трет-Бутил-2-[6-(2-гидрокси-этокси)-пиридазин-4-ил]-2Н-пиразол-3-ил}-карбаминовой кислоты 2,2,2-трихлор-этиловый эфир (Промежуточный продукт 30d)

К охлажденному льдом перемешиваемому раствору Промежуточного продукта 30с (382 мг, 1,38 ммоль) в 1М водном растворе NaOH (3,4 мл, 3,4 ммоль) и EtOAc (5 мл) добавляли по каплям 2,2,2-трихлорэтилхлорформиат (321 мг, 209 мкл, 1,52 ммоль) и ледяную баню удаляли. Через 2 ч добавляли дополнительное количество 1,1 экв. 2,2,2-трихлорэтилхлорформиата. Еще через 2 ч добавляли другие 1,1 экв. 2,2,2-трихлорэтилхлорформиата и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Затем реакционную смесь распределяли между H₂O и EtOAc; органический слой отделяли и водный слой снова экстрагировали EtOAc. Объединенные органические слои высушивали над MgSO₄, концентрировали под вакуумом и подвергали КФХ, элюируя 20-60% EtOAc/циклогексан, с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой пены (476 мг, 76%). ЖХМС (Способ 4): Rt 3,70 мин, m/z 452, 454 [МН⁺].

е. 1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-гидрокси-этокси)-пиридазин-4-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевина (Промежуточный продукт 30е)

Раствор Промежуточного продукта 30d (476 мг, 1,05 ммоль), Промежуточного продукта 2 (397 мг, 1,05 ммоль) и ДИПЭА (204 мг, 269 мкл, 1,58 ммоль) в 2-метилтетрагидрофуране нагревали до 60°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали, концентрировали под вакуумом и распределяли между Н₂О и ДХМ. Смесь пропускали через картридж для разделения фаз, и органический слой концентрировали под вакуумом, и растирали с Et₂O с получением указанного в заголовке соединения в виде светло-коричневого твердого вещества (703 мг, 98%). ЖХМС (Способ 4): Rt 3,40 мин, m/z 681,4 [МН⁺].

f. Метансульфоновой кислоты 2-{5-[3-трет-бутил-5-(3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-уреидо)-пиразол-1-ил]-пиридазин-3-илокси}-этиловый эфир (Промежуточный продукт 30f)

К раствору Промежуточного продукта 30е (125 мг, 0,18 ммоль) и ДИПЭА (71 мг, 94 мкл, 0,24 ммоль) в ДХМ (6 мл) добавляли метансульфонилхлорид (27 мг, 19 мкл, 0,24 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при КТ. Через 30 мин добавляли дополнительные 0,65 экв. метансульфонилхлорида; через дополнительные 20 мин реакционную смесь распределяли между H₂O и ДХМ, энергично перемешивали и пропускали через картридж для разделения фаз. Органический слой концентрировали под вакуумом с получением указанного в заголовке соединения в виде желтой пены (139 мг, 100%). Rt 3,88 мин, m/z 759,4 [МН⁺].

g. 1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиат (Пример 30)

Промежуточный продукт 30f (139 мг, 0,18 ммоль) растворяли в растворе диметиламина (2М в ТГФ, 3 мл) в закрытой виале для микроволнового облучения и перемешивали при КТ в течение 72 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, и подвергали КФХ, элюируя 1-7% 2М NH₃ в MeOH/ДХМ, и концентрировали под вакуумом с получением коричневого стекловидного вещества. Его дополнительно очищали с помощью ВЭЖХ (колонка Gemini С18, 10-98% MeCN в H₂O, 0,1% муравьиная кислота), получая указанное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества после лиофилизации (32,8 мг, 25%). ЖХМС (Способ 5): Rt 3,55 мин, m/z 708,5 [МН⁺]. ¹H ЯМР (400 МГц, d₆-ДМСО): 0,91 (3H, д, J=6,0 Гц), 1,28 (9Н, с), 1,45-1,58 (2Н, м), 1,61-1,74 (2H, м), 1,74-1,87 (2H, м), 1,88-1,97 (2H, м), 1,98-2,10 (1H, м), 2,16 (6Н, с), 2,19 (1H, м, скрытый синглетом), 2,61 (2Н, т, J=6,6 Гц), 2,86-2,95 (1H, м), 3,13-3,20 (2H, м), 4,17 (2Н, т, J=6,5 Гц), 4,82 (1H, к, J=7,8 Гц), 5,52 (1H, т, J=4,1 Гц), 6,42 (1H, с), 7,00 (1H, д, J=2,2 Гц), 7,20 (1H, дд, J=2,1, 9,7 Гц), 7,26-7,31 (1H, м), 7,34-7,41 (4H, м), 7,64 (1H, д, J=10,0 Гц), 7,70 (1H, д, J=1,9 Гц), 8,18 (1H, с), 8,35 (1H, д, J=2,5 Гц), 8,51 (0,84H, уш.с).

Биологические анализы

Анализ ингибирования фермента P38альфа

Ингибирующую активность соединений определяли с использованием Alphascreen® (Perkin Elmer) на основе анализа активности киназы. Реакции киназы состояли из 25 мМ HEPES рН 7,5, 10 мМ MgCl₂, 100 мкМ Na₃VO₄, 2 мМ DTT, 0,05 мг/мл Твина 20, 100 рМ p38альфа (Invitrogen, PV3304), 1% ДМСО и 0,3 мкг/мл АТF-2 гибридного белка (New England Biolabs, 9224). Соединения инкубировали в данных условиях в течение 2 часов при 25°С до инициирования киназной активности с помощью добавления 250 мкМ АТФ. Объемы реакции представляли собой 20 мкл. Через 1 час при 25°С реакции останавливали с помощью добавления 10 мкл 25 мМ HEPES рН 7,5, содержащего 62,5 мМ ЭДТА, 0,05% Тритон Х-100, 10% БСА и 0,83 нг/мкл анти-фосфо-ATF2 антитела (Abcam, ab28812). Детекцию проводили с помощью измерения люминесценции после добавления гранул донора AlphaScreen (Perkin Elmer 6765300) и гранул акцептора протеина А AlphaScreen (Perkin Elmer 6760137), оба при конечной концентрации 20 мкг/мл. Значения IC₅₀ определяли из кривых концентрация-эффект.

Все соединения изобретения проявляют p38α-связывающие активности (значения IC₅₀) ниже, чем 10 нМ.

Анализ ЛПС-стимулированного МКПК высвобождения ФНОα

Мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) выделяли из крови здоровых добровольцев с помощью стандартной методики центрифугирования в градиенте плотности. Цитратную кровь помещали на Histopaque^TM и центрифугировали. МКПК удаляли с поверхности раздела градиента плотности и промывали фосфатно-солевым буфером (ФСБ). МКПК суспендировали в среде RPMI 1640 (без сыворотки), разливали в 96-луночный планшет и инкубировали при 37°С в течение 3 ч в увлажненном инкубаторе. После инкубирования среду заменяли (средой, содержащей 1% фетальную бычью сыворотку) и планшет инкубировали при 37°С в течение 1 ч в присутствии исследуемого соединения или соответствующего наполнителя. ЛПС (10 нг/мл) или соответствующий контрольный наполнитель затем добавляли к клеткам и планшет возвращали в инкубатор на 18 ч. Бесклеточные супернатанты удаляли и анализировали на уровни ФНОα с использованием набора ELISA от R&D Systems.

Кривую доза-ответ для каждого исследуемого соединения проводили и эффект соединения в каждом эксперименте выражали в качестве процентного ингибирования высвобождения контрольного ФНОα. Строили кривые доза-ответ и определяли активность соединения (IC₅₀). Соединения исследовали, по меньшей мере, в трех отдельных экспериментах.

Все соединения изобретения показывают p38α активности (значения IC₅₀) ниже, чем 10 нМ.

Изобретение относится к соединению, выбранному из группы, состоящей из: 1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата; 1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины; 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевины формиата; 1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата; 1-[3-трет-Бутил-1'-(3-диметиламино-пропил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата; остальные соединения указаны в формуле изобретения. Изобретение также относится к фармацевтической композиции, к способу лечения заболеваний или состояний у человека, который имеет положительный результат от ингибирования активности p38 МАР-киназы и к применению соединения при изготовлении лекарственного средства. Технический результат: получены новые соединения, обладающие ингибирующим действием в отношении активности p38 митоген-активируемой протеинкиназы (p38 МАР-киназы). 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 30 пр.

1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(3-диметиламино-пропил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[5-трет-Бутил-2-(2-диметиламино-этил)-2H-пиразол-3-ил]-3-{4-[3-(2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3[4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пирролидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-гидрокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(3-метокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(этил-метил-амино)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(5-метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{4-[3-(1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{4-[3-(2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

и его фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение по п.1, которое выбрано из группы, состоящей из:

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-[(1S,4R)-4-(3-диметиламино-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((R)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(3-диметиламино-пропил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,3']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[5-трет-Бутил-2-(2-диметиламино-этил)-2H-пиразол-3-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((2S,6R)-2,6-диметил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидронафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3[(1S,4R)-4-(3-изопропил-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси)-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил]-мочевины;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-пирролидин-1-ил-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-(3-трет-Бутил-1'-{2-[(2-гидрокси-этил)-метил-амино]-этил}-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил)-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(3-метокси-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-(этил-метил-амино)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{3-трет-Бутил-1'-[2-((1S,4S)-5-метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил)-этил]-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-гидрокси-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-[3-трет-Бутил-1'-(2-диметиламино-этил)-1'H-[1,4']бипиразолил-5-ил]-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-1-метил-пирролидин-2-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

1-{5-трет-Бутил-2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ил]-2H-пиразол-3-ил}-3-{(1S,4R)-4-[3-((S)-2-метил-пиперидин-1-ил)-[1,2,4]триазоло[4,3-a]пиридин-6-илокси]-1,2,3,4-тетрагидро-нафталин-1-ил}-мочевины формиата;

или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п.1 или 2, которое представляет собой соединение формулы (Ia)

в которой группа R₂ выбрана из группы, состоящей из:

- 2-(4-гидрокси-пиперидин-1-ил)-этила;

- {2-[(2-метокси-этил)-метил-амино]-этила};

- 1'-(2-диметиламино-этила);

- 1'-(3-диметиламино-пропила);

- 1'-(2-пирролидин-1-ил-этила);

- 1'-{2-[(2-гидрокси-этил)-метил-амино]-этила};

- 1'-[2-((S)-3-гидрокси-пирролидин-1-ил)-этила];

- 1'-[2-(3-метокси-пирролидин-1-ил)-этила];

- 1'-[2-(этил-метил-амино)-этила];

- 1'-[2-((S)-2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-этила];

-1'-[2-((1S,4S)-5-метил-2,5-диаза-бицикло[2.2.1]гепт-2-ил)этила].

4. Соединение по п.1 или 2, которое представляет собой соединение формулы (Ib)

в которой группа R₂ выбрана из группы, состоящей из:

- 1'-(2-диметиламино-этила).

5. Соединение по п.1 или 2, которое представляет собой соединение формулы (Ic)

в которой группа R₃ выбрана из группы, состоящей из:

- 2-[6-(2-диметиламино-этокси)-пиридазин-4-ила].

6. Соединение по п.1 или 2, которое представляет собой соединение формулы (Id):

в которой группа R₄ выбрана из группы, состоящей из:

- 2-(2-диметиламино-этила).

7. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующим действием в отношении активности p38 митоген-активируемой протеинкиназы (p38 МАР-киназы), содержащая терапевтически эффективное количество соединения по любому из предшествующих пунктов вместе с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями.

8. Композиция по п.7, которая приспособлена для ингаляции при введении в легкие.

9. Соединение по п.1 или 2 для применения при лечении заболеваний или состояний, которые имеют положительный результат от ингибирования активности p38 МАР-киназы.

10. Способ лечения заболеваний или состояний у человека, который имеет положительный результат от ингибирования активности p38 МАР-киназы, включающий введение данному объекту, нуждающемуся в таком лечении, соединения по любому из пп.1-6.

11. Применение соединения по любому одному из пп.1-6 при изготовлении лекарственного средства для лечения заболеваний или состояний, которые имеют положительный результат от ингибирования активности p38 МАР-киназы.