БОРСОДЕРЖАЩИЕ ДИАЦИЛГИДРАЗИНЫ Российский патент 2017 года по МПК C07F5/02 C07F5/04 A01N55/08 A61K31/69 A61P35/00 

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Область техники

[0001] Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, генной инженерии, экспрессии генов и медицинской химии. В настоящем изобретении предложены новые борсодержащие диацилгидразины и применение данных соединений в системах экспрессии индуцибельного гена на основе ядерного рецептора.

Уровень техники

[0002] В области генной инженерии точный контроль экспрессии генов является ценным инструментом для изучения, управления и контроля развития и других физиологические процессов. Экспрессия генов является сложным биологическим процессом, вовлекающим ряд специфических взаимодействий белок-белок. Для инициации экспрессии гена, чтобы продуцировать РНК, необходимую в качестве первой стадии в синтезе белка, активатор транскрипции должен находиться в непосредственной близости от промотора, который контролирует транскрипцию гена. Как правило, сам активатор транскрипции ассоциирован с белком, который имеет по меньшей мере один ДНК-связывающий домен, который связывается с сайтами связывания ДНК, присутствующими в промоторных участках генов. Таким образом, для возникновения экспрессии генов белок, содержащий ДНК-связывающий домен и домен трансактивации, расположенный на соответствующем расстоянии от ДНК-связывающего домена, должен быть приведен в надлежащее положение в промоторном участке гена.

[0003] В традиционном трансгенном подходе применяют промотор, специфический для типа клеток, чтобы управлять экспрессией сконструированного трансгена. Структурный элемент ДНК, содержащий трансген, сначала вводят в геном хозяина. При инициации посредством активатора транскрипции в клетках данного типа возникает экспрессия трансгена.

[0004] Другие средства для регулирования экспрессии чужеродных генов в клетках действуют посредством индуцибельных промоторов. Примеры применения таких индуцибельных промоторов включают PR1-a промотор, прокариотические системы репрессор-оператор, системы иммуносупрессор-иммунофилин и системы активации транскрипции высших эукариот, такие как системы рецепторов стероидных гормонов и описанные ниже.

[0005] PR1-a промотор табака индуцируется в процессе приобретенного соматического устойчивого ответа после атаки патогена. Применение PR1-a может быть ограничено, так как оно часто обусловлено эндогенными материалами и внешними факторами, такими как патогены, УФ-Б излучение и загрязняющие агенты. Были описаны системы регулирования генов на основе промоторов, индуцируемых тепловым шоком, интерфероном и тяжелыми металлами (Wurn et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:5414-5418 (1986); Arnheiter et al., Cell 62:51-61 (1990); Filmus et al., Nucleic Acids Research 20:27550-27560 (1992)). Тем не менее данные системы имеют ограничения из-за их влияния на экспрессию нецелевых генов. Данные системы также являются растекающимися.

[0006] В прокариотических системах репрессор-оператор применяют бактериальные репрессорные белки и уникальные последовательности оператора ДНК, с которыми они связываются. Для контроля экспрессии генов у растений и животных применяли как системы репрессор-оператор тетрациклина («Tet»), так и лактозы («Lac») из бактерии Escherichia coli. В системе Tet тетрациклин связывается с TetR репрессорным белком, приводя к конформационному изменению, которое высвобождает репрессорный белок из оператора, что в результате позволяет возникать транскрипции. В системе Lac, lac оперон активируется в ответ на присутствие лактозы или синтетических аналогов, таких как изопропил-b-D-тиогалактозид. К сожалению, применение таких систем ограничено нестабильной химией лигандов, т.е. тетрациклина и лактозы, их токсичностью, их природным присутствием или относительно высокими уровнями, необходимыми для индукции или репрессии. По тем же причинам целесообразность таких систем у животных ограничена.

[0007] Иммуносупрессорные молекулы, такие как FK506, рапамицин и циклоспорин А, могут связываться с иммунофилинами FKBP12, циклофилином и т.д. Используя данную информацию, разработана общая стратегия сближения любых двух белков просто посредством помещения FK506 на каждый из двух белков, или посредством помещения FK506 на один белок и циклоспорина А на другой. Синтетический гомодимер FK506 (FK1012) или соединение, полученное в результате слияния FK506-циклоспорин (FKCsA), затем можно применять, чтобы вызывать димеризацию данных молекул (Spencer et al., Science 262:1019-24 (1993); Belshaw et al., Proc Natl Acad Sci USA 93:4604-7 (1996)). Gal4 ДНК связывающий домен, слитый с FKBP12, и VP16 активаторный домен, слитый с циклофилином, и соединение FKCsA применяли, чтобы показать гетеродимеризацию и активацию репортерного гена под контролем промотора, содержащего Gal4 связывающие сайты. К сожалению, данная система включает иммуносупрессанты, которые могут иметь нежелательные побочные эффекты и, таким образом, ограничивать ее применение для переключения генов у различных млекопитающих.

[0008] Также применяли системы активации транскрипции высших эукариот, такие как системы рецепторов стероидных гормонов. Рецепторы стероидных гормонов являются членами суперсемейства ядерных рецепторов и находятся в клетках позвоночных и беспозвоночных. К сожалению, применение стероидных соединений, которые активируют рецепторы для регуляции экспрессии генов, в частности у растений и млекопитающих, ограничено из-за их участия во многих других природных биологических путях в таких организмах. Для того чтобы преодолеть такие трудности, была разработана альтернативная система с применением рецепторов экдизона насекомых (EcR).

[0009] Рост, линька и развитие насекомых регулируются стероидным гормоном экдизоном (гормон линьки) и ювенильными гормонами (Dhadialla et al., Annu. Rev. Entomol. 43: 545-569 (1998)). Молекулярная мишень экдизона у насекомых состоит по меньшей мере из рецептора экдизона (EcR) и белка ультраспиракл (ultraspiracle) (USP). EcR является членом суперсемейства ядерных стероидных рецепторов, которое характеризуется сигнатурой ДНК и лигандсвязывающими доменами и доменом активации (Koelle et al., Cell, 67:59-77 (1991)). Рецепторы EcR восприимчивы к ряду стероидных соединений, таких как понастерон А и муристерон А. Описаны нестероидные соединения с экдистероидной агонистической активностью, включая коммерчески доступные инсектициды тебуфенозид и метоксифенозид, которые продаются во всем мире фирмой Rohm and Haas Company (см. WO 96/27673 и US 5530028). Оба аналога имеют исключительные профили безопасности для других организмов.

[0010] Рецептор экдизона насекомых (EcR) гетеродимеризуется с белком Ультраспиракл (USP), имеющимся у насекомых гомологом Х-ретиноидного рецептора (RXR) млекопитающих, и связывает экдистероиды и элементы ответа рецептора экдизона для активации транскрипции генов, чувствительных к экдизону. Комплексы EcR/USP/лиганд играют важную роль в развитии и размножении насекомых. EcR имеет пять модульных доменов, А/В (трансактивация), С (ДНК связывание, гетеродимеризация), D (шарнирный, гетеродимеризация), Ε (связывание лиганда, гетеродимеризация и трансактивация) и F (трансактивация) домены. Некоторые из этих доменов, такие как А/В, С и Е, сохраняют свои функции после слияния с другими белками.

[0011] Строго регулируемая система экспрессии индуцибельных генов или «генные переключатели» подходит для различных областей применения, таких как генная терапия, крупномасштабное производство белков в клетках, высокопроизводительные скрининг-анализы на основе клеток, функциональная геномика и регулирование признаков трансгенных растений и животных.

[0012] В первой версии генного переключателя на основе EcR использовали EcR Drosophila melanogaster (DmEcR) и RXR Mus musculus (MmRXR), и было показано, что эти рецепторы в присутствии стероида понастерона А трансактивируют репортерные гены в клеточных линиях млекопитающих и у трансгенных мышей (Christopherson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 89:6314-6318 (1992); No et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93:3346-3351 (1996)). Позднее Suhr et al., Proc. Natl. Acad. Sci. 95:7999-8004 (1998) показали, что нестероидный экдизоновый агонист тебуфенозид индуцирует высокий уровень трансактивации репортерных генов в клетках млекопитающих посредством EcR Bombyx mori (BmEcR) в отсутствие экзогенного гетеродимерного партнера.

[0013] Международные патентные заявки WO 97/38117 и WO 99/58155 описывают способы модулирования экспрессии экзогенного гена, в которых структурный элемент ДНК, содержащий экзогенный ген и экдизоновый элемент ответа, активируется вторым структурным элементом ДНК, содержащим рецептор экдизона, который в присутствии лиганда и необязательно в присутствии рецептора, способного выступать в роли молчащего партнера, связывается с экдизоновым элементом ответа для индуцирования экспрессии генов. Выбранный рецептор экдизона выделяли из Drosophila melanogaster. Обычно такие системы требуют присутствия молчащего партнера, предпочтительно ретиноидного Х-рецептора (RXR), для обеспечения оптимальной активации. В клетках млекопитающих рецептор экдизона насекомых (EcR) гетеродимеризуется с ретиноидным Х-рецептором (RXR) и регулирует экспрессию целевых генов лиганд-зависимым образом. Международная патентная заявка WO 99/02683 раскрывает, что рецептор экдизона, выделенный из тутового шелкопряда Bombyx mori, является функциональным в системах млекопитающих без необходимости в экзогенном партнере димеризации.

[0014] Патент США US 6265173 В1 описывает, что различные члены суперсемейства стероидных/тиреоидных рецепторов могут связываться с рецептором белка ультраспиракл (ultraspiracle) (USP) Drosophila melanogaster или его фрагментами, содержащими по меньшей мере домен димеризации USP, для применения в системе генной экспрессии. Патент США US 5880333 описывает EcR Drosophila melanogaster и систему гетеродимера ультраспиракл (ultraspiracle) (USP), используемую в растениях, в которой домен трансактиваций и ДНК-связывающий домен расположены на двух разных гибридных белках. К сожалению, эти системы на основе USP являются конститутивными в клетках животных и потому не могут эффективно регулировать экспрессию репортерного гена.

[0015] В каждом из этих случаев домен трансактивации и ДНК-связывающий домен (в виде нативного EcR, как описано в WO 99/02683, или модифицированного EcR, как описано в международной патентной заявке WO 97/38117) вводили в состав одной молекулы, а другие гетеродимерные партнеры, как USP, так и RXR, применяли в их нативном состоянии.

[0016] Недостатки описанных выше систем генной регуляции на основе EcR включают значительную фоновую активность в отсутствие лигандов и невозможность применения этих систем для использования как в растениях, так и в животных (см. US 5880333). Таким образом, в данной области существует потребность в усовершенствованных системах на основе EcR для точного модулирования экспрессии экзогенных генов как у растений, так и у животных. Такие усовершенствованные системы были бы подходящими в таких областях применения, как генная терапия, крупномасштабное производство белков и антител, системы высокопроизводительного скрининг-анализа на основе клеток, функциональная геномика и регулирование признаков у трансгенных животных. Для некоторых областей применения, таких как генная терапия, может быть необходимо иметь систему экспрессии индуцибельного гена, которая хорошо взаимодействует с синтетическими неэкдистероидными лигандами, и в то же время является нечувствительной к природным стероидам. Таким образом, усовершенствованные системы, которые являются простыми, компактными и зависящими от относительно недорогих лигандов, легкодоступными и низкотоксичными для хозяина, были бы подходящими для регулирования биологических систем.

[0017] Было показано, что система экспрессии индуцибельного гена на основе рецептора экдизона, в которой трансактивирующий и ДНК-связывающий домены отделены друг от друга посредством помещения их на два разных белка, приводит к значительно сниженной фоновой активности в отсутствие лиганда и значительно повышенной активности по сравнению с фоновой в присутствии лиганда (см. международную патентную заявку WO 01/70816 A1). Эта двухгибридная система представляет собой значительно усовершенствованную систему модулирования экспрессии индуцибельного гена по сравнению с двумя системами, раскрытыми в заявках WO 97/38117 и WO 99/02683. Двухгибридная система использует способность пары взаимодействующих белков приводить домен активации транскрипции в более благоприятное положение по отношению к ДНК-связывающему домену таким образом, что когда ДНК-связывающий домен связывается с сайтом связывания ДНК в гене, домен трансактивации более эффективно активирует промотор (см., например, US 5283173). Вкратце, двухгибридная система экспрессии генов включает две кассеты экспрессии генов; при этом первая кодирует ДНК-связывающий домен, слитый с полипептидом ядерного рецептора, и вторая кодирует домен трансактивации, слитый с другим полипептидом ядерного рецептора. В присутствии лиганда взаимодействие первого полипептида со вторым полипептидом эффективно сцепляет ДНК-связывающий домен с доменом трансактивации. Поскольку домены связывания ДНК и трансактивации находятся в двух разных молекулах, фоновая активность в отсутствие лиганда значительно уменьшается.

[0018] Двухгибридная система также обеспечивает улучшенную чувствительность к нестероидным лигандам, например диацилгидразинам, по сравнению со стероидными лигандами, например понастероном А («PonA») или муристероном А («MurA»). Это означает, что, по сравнению со стероидами, нестероидные лиганды обеспечивают более высокую активность при меньших концентрациях. Более того, двухгибридная система позволяет избежать некоторых побочных эффектов благодаря сверхэкспрессии RXR, которая часто возникает при использовании немодифицированного RXR в качестве гетеродимерного рецепторного партнера. В одной двухгибридной системе нативный ДНК-связывающий домен и домен трансактивации EcR или RXR удалены, и в результате данные гибридные молекулы имеют меньше возможностей взаимодействия с другими рецепторами стероидных гормонов, присутствующими в клетке, приводя к уменьшению побочных эффектов. Дополнительные системы генных переключателей включают описанные в следующих патентах и патентных заявках: US 7091038; WO 2004078924; ЕР 1266015; US 20010044151; US 20020110861; US 20020119521; US 20040033600; US 20040197861; US 20040235097; US 20060020146; US 20040049437; US 20040096942; US 20050228016; US 20050266457; US 20060100416; WO 2001/70816; WO 2002/29075; WO 2002/066612; WO 2002/066613; WO 2002/066614; WO 2002/066615; WO 2005/108617; US 6258603; US 20050209283; US 20050228016; US 20060020146; ЕР 0965644; US 7304162 и US 7304161.

[0019] С улучшением в системах генной регуляции на основе рецепторов экдизона возросло их применение в различных областях. Диацилгидразиновые («ДАГ») соединения и их применение в качестве лигандов в системах генной регуляции на основе рецепторов экдизона описаны в патентах США №8076517; 7456315; 7304161; и 6258603, и патентах, приведенных в них. Тем не менее существует потребность в ДАГ с улучшенными физико-химическими и/или фармакологическими свойствами.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

[0020] На фиг. 1 представлена векторная карта для вектора RheoSwitch^® (RS-1).

[0021] На фиг. 2А-2Е изложена нуклеотидная последовательность (SEQ ID NO: 1) для векторной карты, представленной на фиг. 1. Нуклеотидная последовательность, изложенная в скобках, представляет следующие компоненты последовательности вектора: [6х GalRE]¹, [fLuc]², [VP16]³, [RXR]⁴, [Gal4DBD]⁵ и [EcR VY]⁶.

[0022] На фиг. 3 представлена гистограмма, которая показывает экспрессию люциферазы в икроножной мышце мышей посредством инъекции Ad-RTS-fLUC внутримышечно в правую и левую икроножную мышцу и перорального применения соединений №13, 59, 67, 85, и 86 по 100 мг/кг массы тела.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0023] В одном аспекте в настоящем описании предложены борсодержащие диацилгидразиновые соединения, представленные формулами I-XI ниже, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, совместно именуемые в настоящем документе как «соединения согласно настоящему описанию». Соединения согласно настоящему описанию содержат по меньшей мере один атом бора в своей структуре.

[0024] В другом аспекте в настоящем описании предложены композиции, содержащие соединения согласно настоящему описанию и одно или более вспомогательных веществ. В другом аспекте композиция представляет собой фармацевтически приемлемую композицию.

[0025] В другом аспекте в настоящем описании предложены соединения согласно настоящему описанию для применения в качестве лигандов в системах генной экспрессии индуцибельного гена на основе рецептора экдизона. Преимуществом настоящего описания является то, что оно обеспечивает средства регулирования экспрессии генов и адаптации уровней экспрессии в соответствии с требованиями потребителя.

[0026] В другом аспекте в настоящем описании предложены способы регулирования генной экспрессии гена, представляющего интерес, в изолированной клетке-хозяине или нечеловеческом организме, включающие приведение клетки-хозяина или нечеловеческого организма в контакт с соединением согласно настоящему описанию или его композицией.

[0027] В другом аспекте в настоящем описании предложены способы лечения заболевания, расстройства, травмы или состояния у субъекта, включающие введение субъекту соединения согласно настоящему описанию или его композиции.

[0028] В другом аспекте в настоящем описании предложено соединение согласно настоящему описанию или его композиция для применения для лечения заболевания, расстройства, травмы или состояния.

[0029] В другом аспекте в настоящем описании предложено соединение согласно настоящему описанию или его композиция для применения для получения лекарственного средства для лечения заболевания, расстройства, травмы или состояния.

[0030] В другом аспекте в настоящем описании предложен способ контроля насекомых, включающий приведение в контакт указанных насекомых или среды их обитания с инсектицидно эффективным количеством соединения согласно настоящему описанию или его композиции.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0031] В одном варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I:

где:

[0032] R¹ и R² каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила и галогеналкила; или

[0033] R¹ и R² совместно с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют 4-8-членный циклоалкил;

[0034] R³ выбран из группы, состоящей из водорода, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила;

[0035] R⁴ выбран из группы, состоящей из:

и

[0036] X¹ выбран из группы, состоящей из -O- и -N(R^8a)-;

[0037] Y¹ представляет собой -(CR^9aR^9b)_m-;

[0038] Z¹ выбран из группы, состоящей из -O- и -N(R^8b)-, или Z¹ отсутствует;

[0039] R^6a выбран из группы, состоящей из гидрокси, алкила и алкокси; или

[0040] R^6a образует аддукт гидроксикислоты или аддукт аминокислоты;

[0041] R^7a и R^7b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси и алкилтио;

[0042] R^7a' и R^7b' каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси и алкилтио;

[0043] R^8a и R^8b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0044] R^9a и R^9b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0045] m составляет 1, 2, 3 или 4;

[0046] X² выбран из группы, состоящей из -O- и -N(R^8c)-;

[0047] Y² представляет собой -(CR^9cR^9d)_n-;

[0048] Z² выбран из группы, состоящей из -O- и -N(R^8d)-, или Z² отсутствует;

[0049] R^6b выбран из группы, состоящей из гидрокси, алкила и алкокси; или

[0050] R^6b образует аддукт гидроксикислоты или аддукт аминокислоты;

[0051] R^7c и R^7d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси и алкилтио;

[0052] R^8c и R^8d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0053] R^9c и R^9d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0054] n составляет 1, 2, 3 или 4;

[0055] X выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8e)-;

[0056] R^6c выбран из группы, состоящей из гидрокси, алкила и алкокси; или

[0057] R^6c образует аддукт гидроксикислоты или аддукт аминокислоты;

[0058] R^7e и R^7f каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси и алкилтио;

[0059] R^8e выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0060] R^6d выбран из группы, состоящей из гидрокси, алкила и алкокси; или

[0061] R^6d образует аддукт гидроксикислоты или аддукт аминокислоты;

[0062] R^6f выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, амино и гидрокси;

[0063] X⁵ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8k)-;

[0064] R^7g и R^7h каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси и алкилтио;

[0065] R^8k выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0066] X⁶ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8l)-;

[0067] X⁷ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R⁸ⁿ)-;

[0068] R^8l выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0069] R^8m выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0070] R⁸ⁿ выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0071] R^10a выбран из группы, состоящей из водорода и -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); и

[0072] R^10b, R^10c, и R^10d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, -N(H)CHO, -N(H)CN, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, алкоксиалкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероцикла, алкокси, арилокси, арилалкилокси, алкилтио, гетероалкила, карбоксамидо, сульфонамидо, -COR¹⁶, -SO₂R¹⁷, -N(R¹⁸)COR¹⁹, -N(R¹⁸)SO₂R²⁰ или N(R¹⁸)C=N(R²¹)-амино; или

[0073] R^10b выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, -N(H)CHO, -N(H)CN, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероцикла, алкокси, арилокси, арилалкилокси, алкилтио, гетероалкила, карбоксамидо, сульфонамидо, -COR¹⁶, -SO₂R¹⁷, -N(R¹⁸)COR¹⁹, -N(R¹⁸)SO₂R²⁰ или N(R¹⁸)C=N(R²¹)-амино; или

[0074] R^10c и R^10d совместно с двумя смежными атомами углерода образуют конденсированную необязательно замещенную циклоалкильную, необязательно замещенную гетероцикло или необязательно замещенную гетероарильную группу; например, R⁴-5 представляет собой:

или

например, R⁴-6 представляет собой:

или

например, R⁴-7 представляет собой:

или

[0075] R^11a и R^11b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0076] R^12a и R^12b выбраны из группы, состоящей из гидрокси и алкокси; или

[0077] R^12a и R^12b совместно образуют сочленение -O(CR^13aR^13b)_pO-; или

[0078] -B(R^12a)(R^12b) образует аддукт фторида;

[0079] R^13a и R^13b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

[0080] о составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5;

[0081] р составляет 2, 3 или 4;

[0082] R⁵ представляет собой R⁴-3, R⁴-4, R⁴-8, R⁴-9 или R⁴-10; или R⁵ выбран из группы, состоящей из:

и

[0083] X³ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8f)-;

[0084] Y³ представляет собой -(CR^9eR^9f)_q-;

[0085] Z³ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8g)-, или Z³ отсутствует;

[0086] R^6e выбран из группы, состоящей из гидрокси и алкила; или

[0087] R^6e образует аддукт гидроксикислоты или аддукт аминокислоты;

[0088] R⁷ⁱ и R^7j каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси и алкилтио;

[0089] R^8f и R^8g каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0090] R^9e и R^9f каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0091] q составляет 1, 2, 3 или 4;

[0092] X⁴ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8h)-;

[0093] Y⁴ представляет собой -(CR^9gR^9h)_r;

[0094] Ζ⁴ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R⁸ⁱ)-, или Z⁴ отсутствует;

[0095] R^6g выбран из группы, состоящей из гидрокси и алкила; или

[0096] R^6g образует аддукт гидроксикислоты или аддукт аминокислоты

[0097] R^7k и R^7l каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси и алкилтио;

[0098] R^8h и R⁸ⁱ каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0099] R^9g и R^9h каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0100] r составляет 1, 2, 3 или 4;

[0101] R^10e выбран из группы, состоящей из водорода и -(CR^11cR^11d)_s-B(R^12c)(R^12d); и

[0102] R^10f, R^10g, и R^10h независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, -N(H)CHO, -N(H)CN, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероцикла, алкокси, арилокси, арилалкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, -COR¹⁶, -SO₂R¹⁷, -N(R¹⁸)COR¹⁹, -N(R¹⁸)SO₂R²⁰ или N(R¹⁸)C=N(R²¹)-амино; или

[0103] R^10f выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, -N(H)CHO, -N(H)CN, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероцикла, алкокси, арилокси, арилалкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, -COR¹⁶, -SO₂R¹⁷, -N(R¹⁸)COR¹⁹, -N(R¹⁸)SO₂R²⁰ или N(R¹⁸)C=N(R²¹)-амино; и

[0104] R^10g и R^10h совместно с двумя смежными атомами углерода образуют конденсированную необязательно замещенную циклоалкильную, необязательно замещенную гетероцикло или необязательно замещенную гетероарильную группу; например, R³-3 представляет собой:

или

[0105] R^11c и R^11d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и алкила;

[0106] R^12c и R^12d выбраны из группы, состоящей из гидрокси и алкокси; или

[0107] R^12c и R^12d совместно образуют сочленение -O(CR^13cR^13d)_tO-; или

[0108] -B(R^12c)(R^12d) образует аддукт фторида;

[0109] R^13c и R^13d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

[0110] s составляет 0, 1, 2, 3,4 или 5;

[0111] t составляет 2, 3 или 4;

[0112] R^14a и R^14b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, -N(H)CHO, -N(H)CN, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероцикла, алкокси, арилокси, арилалкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, -COR¹⁶, -SO₂R¹⁷, -N(R¹⁸)COR¹⁹, -N(R¹⁸)SO₂R²⁰ или N(R¹⁸)C=N(R²¹)-амино;

[0113] R^15a и R^15b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, -N(H)CHO, -N(H)CN, необязательно замещенного алкила, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, необязательно замещенного гетероцикла, алкокси, арилокси, арилалкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, -COR¹⁶, -SO₂R¹⁷, -N(R¹⁸)COR¹⁹, -N(R¹⁸)SO₂R²⁰ или N(R¹⁸)C=N(R²¹)-амино;

[0114] R¹⁶ выбран из группы, состоящей из водорода, гидрокси, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного гетероцикла, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, алкокси, арилокси и арилалкилокси;

[0115] R¹⁷ выбран из группы, состоящей из галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного гетероцикла, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила;

[0116] R¹⁸ выбран из группы, состоящей из водорода, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного гетероцикла, необязательно замещенного арила и необязательно замещенного гетероарила;

[0117] R¹⁹ выбран из группы, состоящей из водорода, галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного гетероцикла, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила, алкокси, арилокси, арилалкилокси и амино;

[0118] R²⁰ выбран из группы, состоящей из галогеналкила, гидроксиалкила, арилалкила, необязательно замещенного алкила, необязательно замещенного циклоалкила, необязательно замещенного алкенила, необязательно замещенного алкинила, необязательно замещенного гетероцикла, необязательно замещенного арила, необязательно замещенного гетероарила и амино;

[0119] R²¹ выбран из группы, состоящей из водорода, алкила, арила, циано и нитро;

[0120] при условии:

[0121] а) когда R⁴ представляет собой R⁴-5, R⁴-6 или R⁴-7 и R⁵ представляет собой R⁵-3, тогда один из R^10a или R^10e не является водородом; или

[0122] b) когда R⁴ представляет собой R⁴-5, R⁴-6 или R⁴-7 и R⁵ представляет собой R⁵-4 или R⁵-5, тогда R^10a не является водородом,

[0123] и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0124] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-1, R⁵-2, R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; и R¹, R², R³, и R⁴ представляют собой, как определено для формулы I.

[0125] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-1; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0126] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-2; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0127] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-3; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0128] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-4; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; и R¹, представляют собой, как определено для формулы I.

[0129] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-5; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10a представляет собой -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0130] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-5; R⁵ представляет собой R⁵-3; R^10e представляет собой -(CR^11cR^11d)_s-B(R^12c)(R^12d); и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0131] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-6; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10a представляет собой -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0132] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-7; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10a представляет собой -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0133] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-8; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; и R^10a представляет собой -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0134] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-9; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; и R^10e представляет собой водород; и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I.

[0135] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу II:

где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; и R¹, R², R³, R^10b, R^10c и о представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации о составляет 0. В другом варианте реализации R^10b и R^10c каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, алкоксиалкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси. В другом варианте реализации R^10b и R^10c каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, алкоксиалкила и С_1-4 алкокси. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0136] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу III:

где R¹, R², R³, R^10b, R^10c, R^10d, R^10f, R^10g и s представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации s составляет 0. В другом варианте реализации R^10b, R^10c, и R^10d независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси; или

[0137] R^10b выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси; и

[0138] R^10c и R^10d совместно с двумя смежными атомами углерода образуют конденсированную необязательно замещенную циклоалкильную, необязательно замещенную гетероцикло или необязательно замещенную гетероарильную группу.

[0139] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу IV:

где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4 и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; R^6a представляет собой гидрокси; и R¹, R², R³, R^7a, X¹, Y¹ и Z¹ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7a выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и алкила. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует. В другом варианте реализации Z¹ представляет собой -О-. В другом варианте реализации Z¹ представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации X¹ представляет собой -О-. В другом варианте реализации X¹ представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации R^9a и R^9b выбраны из группы, состоящей из водорода и метила. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует, и m составляет 1, 2 или 3. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует, и m составляет 1. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0140] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу V:

где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4 и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; R^6a представляет собой гидрокси; и R¹, R², R³, R^7a, X¹, Y¹ и Z¹ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7a выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и алкила. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует. В другом варианте реализации Z¹ представляет собой -О-. В другом варианте реализации Z¹ представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации X¹ представляет собой -О-. В другом варианте реализации X¹ представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации R^9a и R^9b выбраны из группы, состоящей из водорода и метила. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует, и m составляет 1, 2 или 3. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует, и m составляет 1. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0141] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу VI:

где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4 и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; R^6a представляет собой гидрокси; и R¹, R², R³, R^7a, X¹, Y¹ и Z¹ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7a выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и алкила. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует. В другом варианте реализации Z¹ представляет собой -О-. В другом варианте реализации Z¹ представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации X¹ представляет собой -О-. В другом варианте реализации X¹ представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации R^9a и R^9b выбраны из группы, состоящей из водорода и метила. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует, и m составляет 1, 2 или 3. В другом варианте реализации Z¹ отсутствует, и m составляет 1. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0142] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу VII:

где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4 и R⁵-5; R^6b представляет собой гидрокси; R^10e представляет собой водород, и R¹, R², R³, R^7c, X², Y² и Z² представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7c выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и алкила. В другом варианте реализации Z² отсутствует. В другом варианте реализации Z² представляет собой -О-. В другом варианте реализации Z² представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации X² представляет собой -О-. В другом варианте реализации X² представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации R^9c и R^9d выбраны из группы, состоящей из водорода и метила. В другом варианте реализации Z² отсутствует, и n составляет 1, 2 или 3. В другом варианте реализации Z² отсутствует, и n составляет 1. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0143] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу VIII:

где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4 и R⁵-5; R^6b представляет собой гидрокси; R^10e представляет собой водород, и R¹, R², R³, R^7c, X², Y² и Z² представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7c выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и алкила. В другом варианте реализации Z² отсутствует. В другом варианте реализации Z² представляет собой -О-. В другом варианте реализации Z² представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации X² представляет собой -О-. В другом варианте реализации X² представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации R^9c и R^9d выбраны из группы, состоящей из водорода и метила. В другом варианте реализации Z² отсутствует, и n составляет 1, 2 или 3. В другом варианте реализации Z² отсутствует, и n составляет 1. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0144] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу IX:

где R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4 и R⁵-5; R^6b представляет собой гидрокси; R^10e представляет собой водород, и R¹, R², R³, R^7c, X², Y² и Z² представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7c выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и алкила. В другом варианте реализации Z² отсутствует. В другом варианте реализации Z² представляет собой -О-. В другом варианте реализации Z² представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации X² представляет собой -О-. В другом варианте реализации X² представляет собой -N(H)-. В другом варианте реализации R^9c и R^9d выбраны из группы, состоящей из водорода и метила. В другом варианте реализации Z² отсутствует, и n составляет 1, 2 или 3. В другом варианте реализации Z² отсутствует, и n составляет 1. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0145] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, где R⁴ выбран из группы, состоящей из:

R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; R^10e представляет собой водород; и R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7a выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, C_1-4 алкила, C_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси; R^8a выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; и R^6f выбран из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила, гидрокси, и -NH₂.

[0146] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, где:

[0147] R⁴ представляет собой R⁴-5;

[0148] R^10a представляет собой водород;

[0149] R^10b, R^10c, и R^10d независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, амино, циано, -N(H)CHO, -N(H)CN, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси; или

[0150] R^10b выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, амино, циано, -N(H)CHO, -N(H)CN, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси; и

[0151] R^10c и R^10d совместно с двумя смежными атомами углерода образуют конденсированную необязательно замещенную циклоалкильную, необязательно замещенную гетероцикло или необязательно замещенную гетероарильную группу;

[0152] R⁵ выбран из группы, состоящей из:

и

[0153] R^7a выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси; и

[0154] R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0155] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, где:

[0156] R⁴ выбран из группы, состоящей из:

и

[0157] R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5;

[0158] R^10e представляет собой водород; и

[0159] R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0160] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу I, где:

[0161] R⁴ выбран из группы, состоящей из:

и

[0162] R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5; и

[0163] R^10e представляет собой водород.

[0164] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где R¹ представляет собой необязательно замещенный C_1-6 алкил; R² выбран из группы, состоящей из водорода и необязательно замещенного C_1-6 алкила; R³ представляет собой необязательно замещенный C_1-6 алкил; и R⁴ и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0165] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где R¹ выбран из группы, состоящей из метила, этила, n-пропила и n-бутила; R² выбран из группы, состоящей из водорода и метила; и R⁴ и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R³ выбран из группы, состоящей из метила и трет-бутила. В другом варианте реализации R² представляет собой водород, и R³ представляет собой трет-бутил.

[0166] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где R¹ представляет собой необязательно замещенный C_1-6 алкил; R² представляет собой водород; R³ выбран из труппы, состоящей из необязательно замещенного фенила, необязательно замещенного пиридила и необязательно замещенного пиримидинила; и R⁴ и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R³ выбран из группы, состоящей из необязательно замещенного пиридила и необязательно замещенного пиримидинила.

[0167] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где R¹, R², и R³ каждый представляют собой метил; и R⁴ и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0168] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, при этом соединения не проявляют оптической активности, т.е. соединение является ахиральным или рацемическим, или их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0169] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где атом углерода, несущий R¹, R², и R³, является асимметричным атомом углерода, и абсолютная конфигурация указанного асимметричного атома углерода представляет собой R, т.е. соединение является энантиомерно обогащенным R изомером, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где энантиомерный избыток изомера R составляет по меньшей мере примерно 60%, например, по меньшей мере примерно 65%, по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере примерно 75%, по меньшей мере примерно 80%, по меньшей мере примерно 85%, по меньшей мере примерно 90%, по меньшей мере примерно 91%, по меньшей мере примерно 92%, по меньшей мере примерно 93%, по меньшей мере примерно 94%, по меньшей мере примерно 95%, по меньшей мере примерно 96%, по меньшей мере примерно 97%, по меньшей мере примерно 98% или по меньшей мере примерно 99%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера R составляет по меньшей мере примерно 90%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера R составляет по меньшей мере примерно 95%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера R составляет по меньшей мере примерно 98%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера R составляет по меньшей мере примерно 98%.

[0170] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где атом углерода, несущий R¹, R², и R³, является асимметричным атомом углерода, и абсолютная конфигурация указанного асимметричного атома углерода представляет собой S, т.е., соединение является энантиомерно обогащенным S изомером, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-IX, где энантиомерный избыток изомера S составляет по меньшей мере примерно 60%, например, по меньшей мере примерно 65%, по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере примерно 75%, по меньшей мере примерно 80%, по меньшей мере примерно 85%, по меньшей мере примерно 90%, по меньшей мере примерно 91%, по меньшей мере примерно 92%, по меньшей мере примерно 93%, по меньшей мере примерно 94%, по меньшей мере примерно 95%, по меньшей мере примерно 96%, по меньшей мере примерно 97%, по меньшей мере примерно 98% или по меньшей мере примерно 99%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера S составляет по меньшей мере примерно 90%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера S составляет по меньшей мере примерно 95%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера S составляет по меньшей мере примерно 98%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток изомера S составляет по меньшей мере примерно 99%.

[0171] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу X:

где R¹ не равен R³, и R¹, R³, R⁴, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу X, в смеси соединений, имеющих формулы X и XI, составляет по меньшей мере примерно 60%, например, по меньшей мере примерно 65%, по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере примерно 75%, по меньшей мере примерно 80%, по меньшей мере примерно 85%, по меньшей мере примерно 90%, по меньшей мере примерно 91%, по меньшей мере примерно 92%, по меньшей мере примерно 93%, по меньшей мере примерно 94%, по меньшей мере примерно 95%, по меньшей мере примерно 96%, по меньшей мере примерно 97%, по меньшей мере примерно 98% или по меньшей мере примерно 99%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу X, составляет по меньшей мере примерно 90%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу X, составляет по меньшей мере примерно 95%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу X, составляет по меньшей мере примерно 98%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу X, составляет по меньшей мере примерно 99%.

[0172] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу XI:

где R¹ не равен R³, и R¹, R³, R⁴, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу XI, в смеси соединений, имеющих формулы X и XI, составляет по меньшей мере примерно 60%, например, по меньшей мере примерно 65%, по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере примерно 75%, по меньшей мере примерно 80%, по меньшей мере примерно 85%, по меньшей мере примерно 90%, по меньшей мере примерно 91%, по меньшей мере примерно 92%, по меньшей мере примерно 93%, по меньшей мере примерно 94%, по меньшей мере примерно 95%, по меньшей мере примерно 96%, по меньшей мере примерно 97%, по меньшей мере примерно 98% или по меньшей мере примерно 99%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу XI, составляет по меньшей мере примерно 90%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу XI, составляет по меньшей мере примерно 95%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу XI, составляет по меньшей мере примерно 98%. В другом варианте реализации энантиомерный избыток соединения, имеющего формулу XI, составляет по меньшей мере примерно 99%.

[0173] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу X или XI, где:

[0174] R⁴ выбран из группы, состоящей из:

[0175] R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4, и R⁵-5;

[0176] R^10e представляет собой водород; и

[0177] R¹, R², и R³ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты. В другом варианте реализации R^7a выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси. В другом варианте реализации R^10b и R^10c каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, алкоксиалкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси. В другом варианте реализации R^10b и R^10c каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, алкоксиалкила и С_1-4 алкокси. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой R⁵-3. В другом варианте реализации R^10f, R^10g и R^10h каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси. В другом варианте реализации R¹ выбран из группы, состоящей из этила и n-пропила, и R³ представляет собой трет-бутил. В другом варианте реализации R¹ представляет собой трет-бутил, и R³ представляет собой необязательно замещенный фенил. В другом варианте реализации R⁵ представляет собой 3,5-диметилфенил.

[0178] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-1 или R⁴-8; R^6a образует аддукт гидроксикислоты, и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0179] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему рписанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-2; R^6b образует аддукт гидроксикислоты; и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0180] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-3; R^6c образует аддукт гидроксикислоты, и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0181] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-4; R^6d образует аддукт гидроксикислоты, и R¹, R², R³ и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0182] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁵ представляет собой R⁵-l; R^6e образует аддукт гидроксикислоты, и R¹, R², R³, и R⁴ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0183] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁵ представляет собой R⁵-2; R^6g образует аддукт гидроксикислоты, и R¹, R², R³, и R⁴ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0184] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-1 или R⁴-8; R^6a образует аддукт аминокислоты, и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0185] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-2; R^6b образует аддукт аминокислоты; и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0186] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-3; R^6c образует аддукт аминокислоты, и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0187] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-4; R^6d образует аддукт аминокислоты, и R¹, R², R³ и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0188] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁵ представляет собой R⁵-1; R^6e образует аддукт аминокислоты, и R¹, R², R³, и R⁴ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0189] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁵ представляет собой R⁵-2; R^6g образует аддукт аминокислоты, и R¹, R², R³, и R⁴ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0190] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-5, R⁴-6 или R⁴-7; R^10a представляет собой -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); -B(R^12c)(R^12d) образует аддукт фторида; и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0191] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие любую из формул I-XI, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, где R⁴ представляет собой R⁴-5, R⁴-6 или R⁴-7; R^10e представляет собой -(CR^11cR^11d)_s-B(R^12c)(R^12d); -B(R^12a)(R^12b) образует аддукт фторида; и R¹, R², R³, и R⁵ представляют собой, как определено для формулы I, и их фармацевтически приемлемые соли и сольваты.

[0192] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения, имеющие формулу:

[0193] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию представляют собой соединения таблицы А.

[0194] В целях настоящего описания термин «алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к прямой или разветвленной цепи алифатического углеводорода, содержащей от одного до двенадцати атомов углерода (т.е. C_1-12 алкил) или обозначенное количество атомов углерода (т.е. C₁ алкил, такой как метил, С₂ алкил, такой как этил, а С₃ алкил, такой как пропил или изопропил и т.д.). В одном варианте реализации алкильная группа выбрана из С_1-10 алкильной группы с прямой цепью. В другом варианте реализации алкильная группа выбрана из С_3-10 алкильной группы с разветвленной цепью. В другом варианте реализации алкильная группа выбрана из C_1-6 алкильной группы с прямой цепью. В другом варианте реализации алкильная группа выбрана из С_3-6 алкильной группы с разветвленной цепью. В другом варианте реализации алкильная группа выбрана из С_1-4 алкильной группы с прямой цепью. В другом варианте реализации алкильная группа выбрана из С_3-4 алкильной группы с разветвленной цепью. В другом варианте реализации алкильная группа выбрана из С_3-4 алкильной группы с прямой или разветвленной цепью. В другом варианте реализации алкильная группа частично или полностью дейтерирована, т.е. один или более атомов водорода в алкильной группе замещены атомами дейтерия. Неограничивающие примерные С_1-10 алкильные группы включают метил (включая -CD₃), этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, трет-бутил, изо-бутил, 3-пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил и подобные. Неограничивающие примерные С_1-4 алкильные группы включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, втор-бутил, трет-бутил и изо-бутил.

[0195] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, означает, что алкил, определенный выше, является как незамещенным, так и замещенным одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из нитро, галогеналкокси, арилокси, аралкилокси, алкилтио, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, циклоалкила и подобных. В одном варианте реализации необязательно замещенный алкил замещен двумя заместителями. В другом варианте реализации необязательно замещенный алкил замещен одним заместителем. Неограничивающие примерные необязательно замещенные алкильные группы включают -CH₂CH₂NO₂, -CH₂CH₂CO₂H, -СН-₂CH₂SO₂CH₃, -CH₂CH₂COPh, -CH₂C₆H₁₁ и подобные.

[0196] В целях настоящего описания термин «циклоалкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к насыщенным или частично ненасыщенным (содержащим одну или две двойные связи) циклическим алифатическим углеводородам, содержащим от одного до трех колец, имеющим от трех до двенадцати атомов углерода (т.е. С_3-12 циклоалкил) или указанное количество атомов углерода. В одном варианте реализации циклоалкильная группа имеет два кольца. В одном варианте реализации циклоалкильная группа имеет одно кольцо. В другом варианте реализации циклоалкильная группа выбрана из С_3-8 циклоалкильной группы. В другом варианте реализации циклоалкильная группа выбрана из С_3-6 циклоалкильной группы. Неограничивающие примерные циклоалкильной группы включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, норборнил, декалин, адамантил, циклогексенил и подобные.

[0197] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный циклоалкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, означает, что циклоалкил, определенный выше, является как незамещенным, так и замещенным одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси, галогеналкокси, арилокси, аралкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила, гетероцикло, алкоксиалкила, (амино)алкила, гидроксиалкиламино, (алкиламино)алкила, (диалкиламино)алкила, (циано)алкила, (карбоксамидо)алкила, меркаптоалкила, (гетероцикло)алкила и (гетероарил)алкила. В одном варианте реализации необязательно замещенный циклоалкил замещен двумя заместителями. В другом варианте реализации необязательно замещенный циклоалкил замещен одним заместителем.

[0198] В целях настоящего описания термин «циклоалкенил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к частично ненасыщенной циклоалкильной группе, определенной выше. В одном варианте реализации циклоалкенил имеет одну двойную связь углерод-углерод. В другом варианте реализации циклоалкенильная группа выбрана из С_4-8 циклоалкенильной группы. Примерные циклоалкенильные группы включают циклопентенил, циклогексенил и подобные.

[0199] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный циклоалкенил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, означает, что циклоалкенил, определенный выше, является как незамещенным, так и замещенным одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, моногидроксиалкила, дигидроксиалкила, алкокси, галогеналкокси, арилокси, аралкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила, гетероцикло, алкоксиалкила, (амино)алкила, гидроксиалкиламино, (алкиламино)алкила, (диалкиламино)алкила, (циано)алкила, (карбоксамидо)алкила, меркаптоалкила, (гетероцикло)алкила и (гетероарил)алкила. В одном варианте реализации необязательно замещенный циклоалкенил замещен двумя заместителями. В другом варианте реализации необязательно замещенный циклоалкенил замещен одним заместителем. В другом варианте реализации циклоалкенил незамещен.

[0200] В целях настоящего описания термин «алкенил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, определенной выше, содержащей одну, две или три двойные связи углерод-углерод. В одном варианте реализации алкенильная группа выбрана из С_2-6 алкенильной группы. В другом варианте реализации алкенильная группа выбрана из С_2-4 алкенильной группы. Неограничивающие примерные алкенильные группы включают этенил, пропенил, изопропенил, бутенил, втор-бутенил, пентенил и гексенил.

[0201] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный алкенил», используемый в настоящем документе самостоятельно или как часть другой группы, означает алкенил, определенный выше, как незамещенный, так и замещенный одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси, галогеналкокси, арилокси, аралкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила или гетероцикло.

[0202] В целях настоящего описания термин «алкинил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, определенной выше, содержащей от одной до трех тройных связей углерод-углерод. В одном варианте реализации алкинил имеет одну тройную связь углерод-углерод. В одном варианте реализации алкинильная группа выбрана из С_2-6 алкинильной группы. В другом варианте реализации алкинильная группа выбрана из С_2-4 алкинильной группы. Неограничивающие примерные алкинильные группы включают этинильную, пропинильную, бутинильную, 2-бутинильную, пентинильную и гексинильную группы.

[0203] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный алкинил», используемый в настоящем документе самостоятельно или как часть другой группы, означает алкинил, определенный выше, как незамещенный, так и замещенный одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси, галогеналкокси, арилокси, аралкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила или гетероцикло.

[0204] В целях настоящего описания термин «галогеналкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной одним или более атомами фтора, хлора, брома и/или йода. В одном варианте реализации алкильная группа замещена одним, двумя или тремя атомами фтора и/или хлора. В другом варианте реализации галогеналкильная группа выбрана из С_1-4 галогеналкильной группы. Неограничивающие примерные галогеналкильные группы включают фторметильную, дифторметильную, трифторметильную, пентафторэтильную, 1,1-дифторэтильную, 2,2-дифторэтильную, 2,2,2-трифторэтильную, 3,3,3-трифторпропильную, 4,4,4-трифторбутильную и трихлорметильную группы.

[0205] В целях настоящего описания термин «гидроксиалкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной одной или более, например, одной, двумя или тремя гидроксильными группами. В одном варианте реализации гидроксиалкильная группа представляет собой моногидроксиалкильную группу, т.е. замещенную одной гидрокси группой. В другом варианте реализации гидроксиалкильная группа представляет собой дигидроксиалкильную группу, т.е. замещенную двумя гидрокси группами. В другом варианте реализации гидроксиалкильная группа выбрана из С_1-4 гидроксиалкильной группы. Неограничивающие примерные гидроксиалкильные группы включают гидроксиметильную, гидроксиэтильную, гидроксипропильную и гидроксибутильную группы, такие как 1-гидроксиэтил, 2-гидроксиэтил, 1,2-дигидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 3-гидроксипропил, 3-гидроксибутил, 4-гидроксибутил, 2-гидрокси-1-метилпропил и 1,3-дигидроксипроп-2-ил.

[0206] В целях настоящего описания термин «алкокси», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к необязательно замещенному алкилу, необязательно замещенному циклоалкилу, необязательно замещенному алкенилу или необязательно замещенному алкинилу, присоединенному к терминальному атому кислорода. В одном варианте реализации алкокси группа выбрана из С_1-4 алкокси группы. В другом варианте реализации алкокси группа выбрана из С_1-4 алкила, присоединенного к терминальному атому кислорода, например, метокси, этокси и трет-бутокси.

[0207] В целях настоящего описания термин «алкилтио», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к атому серы, замещенному необязательно замещенной алкильной группой. В одном варианте реализации алкилтио группа выбрана из С_1-4 алкилтио группы. Неограничивающие примерные алкилтио группы включают -SCH₃ и -SCH₂CH₃.

[0208] В целях настоящего описания термин «алкоксиалкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной алкокси группой. Неограничивающие примерные алкоксиалкильные группы включают метоксиметил, метоксиэтил, метоксипропил, метоксибутил, этоксиметил, этоксиэтил, этоксипропил, этоксибутил, пропоксиметил, изо-пропоксиметил, пропоксиэтил, пропоксипропил, бутоксиметил, трет-бутоксиметил, изобутоксиметил, втор-бутоксиметил и пентилоксиметил.

[0209] В целях настоящего описания термин «галогеналкокси», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к галогеналкилу, присоединенному к терминальному атому кислорода. Неограничивающие примерные галогеналкокси группы включают фторметокси, дифторметокси, трифторметокси и 2,2,2-трифторэтокси.

[0210] В целях настоящего описания термин «гетероалкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к стабильному углеводородному радикалу с прямой или разветвленной цепью, содержащему от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере два гетероатома, которые могут быть одинаковыми или разными, выбранными из О, N или S, где: 1) атом(ы) азота и атом(ы) серы необязательно могут быть окислены; и/или 2) атом(ы) азота необязательно могут быть кватернизованы. Гетероатомы могут быть помещены в любой внутренней позиции гетероалкильной группы или в позиции, в которой гетероалкильная группа присоединена к остатку молекулы. В одном варианте реализации гетероалкильная группа содержит два атома кислорода. Неограничивающие примерные гетероалкильные группы включают -CH₂OCH-₂CH₂OCH₃, -OCH₂CH₂OCH₂CH₂OCH₃, -CH₂NHCH₂CH₂OCH₂, -OCH₂CH₂NH₂, -NHCH₂CH₂N(H)CH₃ и -OCH₂CH₂OCH₃.

[0211] В целях настоящего описания термин «арил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к моноциклической или бициклической ароматической кольцевой системе, имеющей от шести до четырнадцати атомов углерода (т.е. С₆-С₁₄ арил). Неограничивающие примерные арильные группы включают фенильную (сокращенно как «Ph»), нафтильную, фенантрильную, антрацильную, инденильную, азуленильную, бифенильную, бифениленильную и флуоренильную группы. В одном варианте реализации арильная группа выбрана из фенила или нафтила. В одном варианте реализации арильная группа представляет собой фенил.

[0212] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный арил», используемый в настоящем документе самостоятельно или как часть другой группы, означает, что арил, определенный выше, является как незамещенным, так и замещенным от одного до пяти заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси, галогеналкокси, арилокси, гетероарилокси, аралкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила, гетероцикло, алкоксиалкила, (амино)алкила, гидроксиалкиламино, (алкиламино)алкила, (диалкиламино)алкила, (циано)алкила, (карбоксамидо)алкила, меркаптоалкила, (гетероцикло)алкила, (циклоалкиламино)алкила, (С₁-С₄ галогеналкокси)алкила или (гетероарил)алкила. В одном варианте реализации необязательно замещенный арил представляет собой необязательно замещенный фенил. В одном варианте реализации необязательно замещенный фенил имеет четыре заместителя. В другом варианте реализации необязательно замещенный фенил имеет три заместителя. В другом варианте реализации необязательно замещенный фенил имеет два заместителя. В другом варианте реализации необязательно замещенный фенил имеет один заместитель. Неограничивающие примерные замещенные арильные группы включают 2-метилфенил, 2-метоксифенил, 2-фторфенил, 2-хлорфенил, 2-бромфенил, 3-метилфенил, 3-метоксифенил, 3-фторфенил, 3-хлорфенил, 4-метилфенил, 4-этилфенил, 4-метоксифенил, 4-фторфенил, 4-хлорфенил, 2,6-дифторфенил, 2,6-дихлорфенил, 2-метил, 3-метоксифенил, 2-этил, 3-метоксифенил, 3,4-диметоксифенил, 3,5-дифторфенил 3,5-диметилфенил, 3,5-диметокси, 4-метилфенил, 2-фтор-3-хлорфенил и 3-хлор-4-фторфенил. Термин «необязательно замещенный арил» означает включение групп, имеющих конденсированное необязательно замещенное циклоалкильное и конденсированное необязательно замещенное гетероциклическое кольца. Примеры включают:

[0213] В целях настоящего описания термин «арилокси», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к необязательно замещенному арилу, присоединенному к терминальному атому кислорода. Неограничивающая примерная арилокси группа представляет собой PhO-.

[0214] В целях настоящего описания термин «гетероарилокси», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к необязательно замещенному гетероарилу, присоединенному к терминальному атому кислорода.

[0215] В целях настоящего описания термин «аралкилокси» или «арилалкилокси», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к аралкильной труппе, присоединенной к терминальному атому кислорода. Неограничивающая примерная аралкилокси группа представляет собой PhCH₂O-.

[0216] В целях настоящего описания термин «гетероарил» или «гетероароматический» относится к моноциклическим или бициклическим ароматическим кольцевым системам, имеющим от 5 до 14 атомов в кольце (т.е. С₅-С₁₄ гетероарил) и 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранных из кислорода, азота и серы. В одном варианте реализации гетероарил имеет три гетероатома. В другом варианте реализации гетероарил имеет два гетероатома. В другом варианте реализации гетероарил имеет один гетероатом. В одном варианте реализации гетероарил представляет собой С₅ гетероарил. В другом варианте реализации гетероарил представляет собой С₆ гетероарил. Неограничивающие примерные гетероарильные группы включают тиенил, бензо[b]тиенил, нафто[2,3-b]тиенил, тиантренил, фурил, бензофурил, пиранил, изобензофуранил, бензоксазонил, хроменил, ксантенил, 2H-пирролил, пирролил, имидазолил, пиразолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, изоиндолил, 3H-индолил, индолил, индазолил, пуринил, изохинолил, хинолил, фталазинил, нафтиридинил, циннолинил, хиназолинил, птеридинил, 4aH-карбазолил, карбазолил, β-карболинил, фенантридинил, акридинил, пиримидинил, фенантролинил, феназинил, тиазолил, изотиазолил, фенотиазолил, изоксазолил, фуразанил и феноксазинил. В одном варианте реализации гетероарил выбран из тиенила (например, тиен-2-ила и тиен-3-ила), фурила (например, 2-фурила и 3-фурила), пирролила (например, 1H-пиррол-2-ила и 1Н-пиррол-3-ила), имидазолила (например, 2Н-имидазол-2-ила и 2Н-имидазол-4-ила), пиразолила (например, 1Н-пиразол-3-ила, 1Н-пиразол-4-ила и 1Н-пиразол-5-ила), пиридила (например, пиридин-2-ила, пиридин-3-ила и пиридин-4-ила), пиримидинила (например, пиримидин-2-ила, пиримидин-4-ила и пиримидин-5-ила), тиазолила (например, тиазол-2-ила, тиазол-4-ила и тиазол-5-ила), изотиазолила (например, изотиазол-3-ила, изотиазол-4-ила и изотиазол-5-ила), оксазолила (например, оксазол-2-ила, оксазол-4-ила и оксазол-5-ила) и изоксазолила (например, изоксазол-3-ила, изоксазол-4-ила и изоксазол-5-ила). Термин «гетероарил» также означает включение возможных N-оксидов. Примерные N-оксиды включают пиридил Ν-оксид и подобные.

[0217] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный гетероарил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, означает, что гетероарил, определенный выше, является как незамещенным, так и замещенным от одного до четырех заместителями, например, одним или двумя заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси, галогеналкокси, арилокси, аралкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила, гетероцикло, алкоксиалкила, (амино)алкила, гидроксиалкиламино, (алкиламино)алкила, (диалкиламино)алкила, (циано)алкила, (карбоксамидо)алкила, меркаптоалкила, (гетероцикло)алкила и (гетероарил)алкила. В одном варианте реализации необязательно замещенный гетероарил имеет один заместитель. В одном варианте реализации необязательно замещенный представляет собой необязательно замещенный пиридил, т.е. 2-, 3- или 4-пиридил. Любой доступный атом углерода или азота может быть замещен. В другом варианте реализации необязательно замещенный гетероарил представляет собой необязательно замещенный индол.

[0218] В целях настоящего описания термин «гетероцикл» или «гетероцикло», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к насыщенным или частично ненасыщенным (например, содержащим одну или две двойные связи) циклическим группам, содержащим одно, два или три кольца, имеющих от трех до четырнадцати членов в кольце (т.е. от 3- до 14-членный гетероцикло) и по меньшей мере один гетероатом. Каждый гетероатом независимо выбран из группы, состоящей из атомов кислорода, серы, включая сульфоксид и сульфон, и/или азота, который может быть кватернизован. Термин «гетероцикло» означает включение циклических уреидо групп, таких как 2-имидазолидинон, и циклических амидных групп, таких как β-лактам, γ-лактам, δ-лактам и ε-лактам. Термин «гетероцикло» означает включение групп, имеющих конденсированные необязательно замещенные арильные группы, например, индолинил. В одном варианте реализации гетероцикло группа выбрана из 5- или 6-членной циклической группы, содержащей одно кольцо и один или два атома кислорода и/или азота. Гетероцикло необязательно может быть связан с остатком молекулы через атом углерода или азота. Неограничивающие примерные гетероцикло группы включают 2-оксопирролидин-3-ил, 2-имидазолидинон, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил, пирролидинил и индолинил.

[0219] В целях настоящего описания термин «необязательно замещенный гетероцикло», используемый в настоящем документе самостоятельно или как часть другой группы, означает гетероцикло, определенный выше, как незамещенный, так и замещенный от одного до четырех заместителями, независимо выбранными из галогена, нитро, циано, гидрокси, амино, алкиламино, диалкиламино, галогеналкила, гидроксиалкила, алкокси, галогеналкокси, арилокси, аралкилокси, алкилтио, карбоксамидо, сульфонамидо, алкилкарбонила, арилкарбонила, алкилсульфонила, арилсульфонила, уреидо, гуанидино, карбокси, карбоксиалкила, алкила, циклоалкила, алкенила, алкинила, арила, гетероарила, гетероцикло, алкоксиалкила, (амино)алкила, гидроксиалкиламино, (алкиламино)алкила, (диалкиламино)алкила, (циано)алкила, (карбоксамидо)алкила, меркаптоалкила, (гетероцикло)алкила, (гетероарил)алкила и подобных. Замещение может происходить на любом доступном атоме углерода или азота, и может образовывать спироцикл.

[0220] В целях настоящего описания термин «амино», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к -NH₂.

[0221] В целях настоящего описания термин «алкиламино», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к -NHR²², где R²² представляет собой алкил.

[0222] В целях настоящего описания термин «диалкиламино», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к -NR^23aR^23b, где R^23a и R^23b каждый независимо представляет собой алкил или R^23a и R^23b совместно образуют от 3- до 8-членный необязательно замещенный гетероцикло.

[0223] В целях настоящего описания термин «гидроксиалкиламино», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к -NHR²⁴, где R²⁴ представляет собой гидроксиалкил.

[0224] В целях настоящего описания термин «циклоалкиламино», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к -NR^25aR^25b, где R^25a представляет собой необязательно замещенный циклоалкил, и R^25b представляет собой водород или алкил.

[0225] В целях настоящего описания термин «(амино)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной аминогруппой. Неограничивающие примерные аминоалкильные группы включают -CH₂CH₂NH₂, -CH₂CH₂CH₂NH₂, -CH₂CH₂CH₂CH₂NH₂ и подобные.

[0226] В целях настоящего описания термин «(алкиламино)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной алкиламино группой. Неограничивающая примерная (алкиламино)алкильная группа представляет собой -CH₂CH₂N(H)CH₃.

[0227] В целях настоящего описания термин «(диалкиламино)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной диалкиламино группой. Неограничивающая примерная (диалкиламино)алкильная группа представляет собой -CH₂CH₂N(СН₃)₂.

[0228] В целях настоящего описания термин «(циклоалкиламино)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной циклоалкиламино группой. Неограничивающие примерные (циклоалкиламино)алкильные группы включают -CH₂N(Н)циклопропил, -CH₂N(Н)циклобутил и -CH₂N(Н)циклогексил.

[0229] В целях настоящего описания термин «(циано)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной одной или более циано, например, -CN, группами. Неограничивающие примерные (циано)алкильные группы включают -CH₂CH₂CN, -CH₂CH₂CH₂CN и -CH₂CH₂CH₂CH₂CN.

[0230] В целях настоящего описания термин «карбоксамидо», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к радикалу формулы -C(=O)NR^26aR^26b, где R^26a и R^26b каждый независимо представляет собой водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный арил или необязательно замещенный гетероарил, или R^26a и R^26b совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют от 3- до 8-членную гетероцикло группу. В одном варианте реализации R^26a и R^26b каждый независимо представляет собой водород или необязательно замещенный алкил. Неограничивающие примерные карбоксамидо группы включают -CONH₂, -CON(H)CH₃, CON(CH₃)₂ и CON(H)Ph.

[0231] В целях настоящего описания термин «(карбоксамидо)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной карбоксамидо группой. Неограничивающие примерные (карбоксамидо)алкильные группы включают -CH₂CONH₂, -C(H)CH₃-CONH₂ и -CH₂CON(H)CH₃.

[0232] В целях настоящего описания термин «сульфонамидо», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к радикалу формулы -SO₂NR^27aR^27b, где R^27a и R^27b каждый независимо представляет собой водород, необязательно замещенный алкил или необязательно замещенный арил, или R^27a и R^27b совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют от 3-до 8-членную гетероцикло группу. Неограничивающие примерные сульфонамидо группы включают -SO₂NH₂, -SO₂N(H)CH₃ и -SO₂N(H)Ph.

[0233] В целях настоящего описания термин «алкилкарбонил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к карбонильной группе, т.е. -С(=O)-, замещенной алкильной группой. Неограничивающая примерная алкилкарбонильная группа представляет собой -СОСН₃.

[0234] В целях настоящего описания термин «арилкарбонил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к карбонильной группе, т.е. -С(=O)-, замещенной необязательно замещенной арильной группой. Неограничивающая примерная арилкарбонильная группа представляет собой -COPh.

[0235] В целях настоящего описания термин «алкилсульфонил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к сульфонильной группе, т.е., -SO₂-, замещенной любой из вышеуказанных необязательно замещенных алкильных групп. Неограничивающая примерная алкилсульфонильная группа представляет собой -SO₂CH₃.

[0236] В целях настоящего описания термин «арилсульфонил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к сульфонильной группе, т.е. -SO₂-, замещенной любой из вышеуказанных необязательно замещенных арильных групп. Неограничивающая примерная арилсульфонильная группа представляет собой -SO₂Ph.

[0237] В целях настоящего описания термин «меркаптоалкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к любой из вышеуказанных алкильных групп, замещенных -SH группой.

[0238] В целях настоящего описания термин «карбокси», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к радикалу формулы -СООН.

[0239] В целях настоящего описания термин «карбоксиалкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к любой из вышеуказанных алкильных групп, замещенных посредством -СООН. Неограничивающая примерная карбоксиалкильная группа представляет собой -CH₂CO₂H.

[0240] В целях настоящего описания термин «алкоксикарбонил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к карбонильной группе, т.е. -С(=O)-, замещенной алкокси группой. Неограничивающие примерные алкоксикарбонильные группы представляют собой -СО₂Ме и -CO₂Et.

[0241] В целях настоящего описания термин «аралкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя необязательно замещенными арильными группами. В одном варианте реализации аралкильная группа представляет собой С_1-4 алкил, замещенный одной необязательно замещенной арильной группой. Неограничивающие примерные аралкильные группы включают бензил, фенэтил, -CHPh₂ и -CH(4-F-Ph)₂.

[0242] В целях настоящего описания термин «уреидо», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к радикалу формулы -NR^30a-C(=O)-NR^30bR^30c, где R^22a представляет собой водород, алкил или необязательно замещенный арил, и R^30b и R^30c каждый независимо представляет собой водород, алкил или необязательно замещенный арил, или R^30b и R^30c совместно с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-8-членную гетероцикло группу. Неограничивающие примерные уреидо группы включают -NH-C(C=O)-NH₂ и -NH-C(C=O)-NHCH₃.

[0243] В целях настоящего описания термин «гуанидино», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к радикалу формулы -NR^28a-C(=NR²⁹)-NR^28bR^28c, где R^28a, R^28b, и R^28c каждый независимо представляет собой водород, алкил или необязательно замещенный арил, и R²⁹ представляет собой водород, алкил, циано, алкилсульфонил, алкилкарбонил, карбоксамидо или сульфонамидо. Неограничивающие примерные гуанидино группы включают -NH-C(C=NH)-NH₂, -NH-C(C=NCN)-NH₂, -NH-C(C=NH)-NHCH₃ и подобные.

[0244] В целях настоящего описания термин «(гетероцикло)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя необязательно замещенными гетероцикло группами. В одном варианте реализации (гетероцикло)алкил представляет собой С_1-4 алкил, замещенный одной необязательно замещенной гетероцикло группой.

[0245] В целях настоящего описания термин «(гетероарил)алкил», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя необязательно замещенными гетероарильными группами. В одном варианте реализации (гетероарил)алкильная группа представляет собой С_1-4 алкил, замещенный одной необязательно замещенной гетероарильной группой.

[0246] В целях настоящего описания термин «алкилкарбониламино», используемый самостоятельно или как часть другой группы, относится к алкилкарбонильной группе, присоединенной к амино. Неограничивающая примерная алкилкарбониламино группа представляет собой -NHCOCH₃.

[0247] Настоящее описание охватывает любое из соединений согласно настоящему описанию, изотопно-меченое (т.е., меченое радиоактивной меткой) посредством замещения одного или более атомов атомом, имеющим другую атомную массу или массовое число. Примеры изотопов, которые могут быть включены в описанные соединения, включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, такие как ²Н (или дейтерий (D)), ³Н, ¹¹С, ¹³С, ¹⁴С, ¹⁵N, ¹⁸O, ¹⁷O, ³¹Р, ³²Р, ³⁵S, ¹⁸F и ³⁶Cl, соответственно, например, ³Н, ¹¹С и ¹⁴С. В одном варианте реализации предложена композиция, в которой по существу все атомы в позиции в пределах соединения согласно настоящему описанию замещены атомом, имеющим другую атомную массу или массовое число. В другом варианте реализации предложена композиция, в которой часть атомов в позиции в пределах соединения согласно настоящему описанию замещены, т.е., соединение согласно настоящему описанию в позиции обогащено атомом, имеющим другую атомную массу или массовое число. Изотопно-меченые соединения согласно настоящему описанию могут быть получены способами, известными в данной области.

[0248] Соединения согласно настоящему описанию могут содержать один или более асимметричных центров и могут таким образом приводить к образованию энантиомеров, диастереомеров и других стереоизомерных форм. Настоящее описание охватывает применение всех таких возможных форм, а также их рацемических и разделенных форм и их смесей. Индивидуальные энантиомеры могут быть разделены в соответствии с методами, известными в данной области, с точки зрения настоящего описания. Когда соединения, описанные в настоящем документе, содержат олефиновые двойные связи или другие центры геометрической асимметрии, и если не указано иное, предполагается, что они включают как Е, так и Ζ геометрические изомеры. Все таутомеры также охвачены настоящим описанием. Например, следующие таутомеры R⁴-5 формулы I охвачены настоящим описанием:

[0249] Следующие таутомеры R⁴-6 и R⁵-4 формулы I охвачены настоящим описанием:

[0250] В настоящем документе термин «стереоизомеры» является общим термином для всех изомеров отдельных молекул, которые отличаются только ориентацией их атомов в пространстве. Он включает энантиомеры и изомеры соединений более чем с одним хиральным центром, которые не являются зеркальным отражением друг друга (диастереомеры).

[0251] Термин «хиральный центр» или «асимметричный атом углерода» относится к атому углерода, к которому присоединены четыре разные группы.

[0252] Термины «энантиомер» и «энантиомерный» относятся к молекуле, которая не может быть наложена на ее зеркальное изображение и, следовательно, является оптически активной, при этом энантиомер вращает плоскость поляризации света в одном направлении, а его зеркально изображенное соединение вращает плоскость поляризации света в противоположном направлении.

[0253] Термин «рацемический» относится к смеси равных частей энантиомеров, которая также является оптически неактивной.

[0254] Термин «абсолютная конфигурация» относится к пространственному расположению атомов хиральной молекулярной единицы (или группы) и его стереохимическому описанию, например, R или S.

[0255] Стереохимические термины и соглашения, используемые в настоящем описании, согласуются с описанными в Pure & Appl. Chem 68:2193 (1996), если не обозначено иное.

[0256] Термин «энантиомерный избыток» или «ее» относится к величине, которая показывает количество одного энантиомера присутствует по сравнению с другим. Для смеси R и S энантиомеров процент энантиомерного избытка определяют как |R-S|*100, где R и S представляют собой соответственно молярные или массовые фракции энантиомеров в смеси таким образом, чтобы R+S=1. При известном оптическом вращении хирального вещества процент энантиомерного избытка определяют как ([α]_obs/[α]_max)*100, где [α]_obs представляет собой оптическое вращение смеси энантиомеров, и [α]_max представляет собой оптическое вращение чистого энантиомера. Определение энантиомерного избытка возможно с применением различных аналитических методик, включая ЯМР спектроскопию, хиральную колоночную хроматографию или оптическую поляриметрию.

[0257] Термины «энантиомерно чистый» или «энантиочистый» относится к образцу хирального вещества, все молекулы которого (в пределах обнаружения) имеют одинаковую хиральность.

[0258] Термины «энантиомерно обогащенный» или «энантиообогащенный» относятся к образцу хирального вещества, энантиомерное отношение которого составляет более чем 50:50. Энантиомерно обогащенные соединения могут быть энантиомерно чистыми.

[0259] Настоящее описание охватывает получение и применение солей соединения согласно настоящему описанию, включая нетоксичные фармацевтически приемлемые соли. Примеры фармацевтически приемлемых аддитивных солей включают неорганические и органические кислотно-аддитивные соли и основные соли. Фармацевтически приемлемые соли включают, но не ограничиваются ими, соли металлов, такие как соль натрия, соль калия, соль цезия и подобные; щелочноземельных металлов, такие как соль кальция, соль магния и подобные; соли органических аминов, такие как соль триэтиламина, соль пиридина, соль пиколина, соль этаноламина, соль триэтаноламина, соль дициклогексиламина, соль N,N'-дибензилэтилендиамина и подобные; соли неорганических кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, фосфат, сульфат и подобные; соли органических кислот, такие как цитрат, лактат, тартрат, малеат, фумарат, манделат, ацетат, дихлорацетат, трифторацетат, оксалат, формиат и подобные; сульфонаты, такие как метансульфонат, бензолсульфонат, р-толуолсульфонат и подобные; и соли аминокислот, такие как аргинат, аспарагинат, глутамат и подобные.

[0260] Кислотно-аддитивные соли могут быть получены смешиванием раствора определенного соединения согласно настоящему описанию с раствором фармацевтически приемлемой нетоксичной кислоты, такой как хлористоводородная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, уксусная кислота, лимонная кислота, винная кислота, угольная кислота, фосфорная кислота, щавелевая кислота, дихлоруксусная кислота или подобные. Основные соли могут быть получены смешиванием раствора соединения согласно настоящему описанию с раствором фармацевтически приемлемого нетоксичного основания, такого как гидроксид натрия, гидроксид калия, гидроксид холина, карбонат натрия и подобные.

[0261] Термин «фармацевтически приемлемая соль» подразумевает включение солей бороновой кислоты, имеющих общую формулу:

где М⁺ представляет собой Н⁺ или моновалентный катион. В качестве примера, соединение 53 (см. ниже) преобразуют в фармацевтически приемлемую соль посредством взаимодействия с NaOH согласно следующей схеме:

[0262] Настоящее описание охватывает получение и применение сольватов соединения согласно настоящему описанию. Сольваты обычно по существу не изменяют физиологическую активность или токсичность соединений и как таковые могут функционировать в качестве фармакологических эквивалентов. Термин «сольват» в настоящем документе представляет собой комбинацию, физическую ассоциацию и/или сольватацию соединения согласно настоящему описанию с молекулой растворителя, такой как, например, дисольват, моносольват или полусольват, где соотношение количества молекул растворителя к соединению согласно настоящему описанию составляет примерно 2:1, примерно 1:1 или 1:2, соответственно. Эта физическая ассоциация включает различные степени ионной и ковалентной связи, включая водородные связи. В некоторых случаях сольват может быть выделен, например, когда одна или более молекул растворителя включены в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. Таким образом, «сольват» охватывает как фазу раствора, так и выделяемые сольваты. Соединения согласно настоящему описанию могут быть предложены в сольватированных формах с фармацевтически приемлемым растворителем, таким как вода, метанол, этанол и подобные, и предполагают, что данное описание включает как сольватированные, так и несольватированные формы соединений согласно настоящему описанию. Один тип сольвата представляет собой гидрат. «Гидрат» относится к конкретной подгруппе сольватов, где молекула растворителя представляет собой воду. Сольваты обычно могут функционировать в качестве фармакологических эквивалентов. Получение сольватов известно в данной области. См., например, М. Caira et al, J. Pharmaceut. Sci., 93(3):601-611 (2004), где описано получение сольватов флуконазола с этилацетатом и водой. Аналогичное получение сольватов, полусольватов, гидратов и подобных описано Е.С. van Tonder et al., AAPS Pharm. Sci. Tech., 5(1): Article 12 (2004) и A.L. Bingham et al., Chem. Commun. 603-604 (2001). Обычный неограничивающий способ получения сольвата включает растворение соединения согласно настоящему описанию в необходимом растворителе (органическом, воде или их смеси) при температуре от выше 20°С до примерно 25°С, затем охлаждение раствора до состояния, достаточного для образования кристаллов, и выделение кристаллов известными способами, например, фильтрацией. Для подтверждения присутствия растворителя в кристаллах сольвата можно применять аналитические методики, такие как инфракрасная спектроскопия.

[0263] Термин «аддукт фторида» в настоящем документе относится к продукту конденсации бороновой кислоты, имеющей общую формулу RB(OH)₂, и KHF₂. Общая структура аддукта фторида представляет собой:

где М⁺ представляет собой моновалентный катион. Например, аддукт фторида группы R⁴-5 формулы I, где R^10a представляет собой -В(ОН)₂, представляет собой:

[0264] Термин «аддукт гидроксикислоты» в настоящем документе относится к продукту конденсации бороновой кислоты, имеющей общую формулу (R)(RO)B-OH, и гидроксикислоты, имеющей формулу HOOC-C(R')(R")-OH. R' и R" каждый независимо выбран из водорода, карбокси, необязательно замещенного алкила, аралкила, аминоалкила, галогеналкила, циано, (циано)алкила, (карбоксамидо)алкила, (карбокси)алкила или гидроксиалкила и подобных. R' и R'' совместно с атомом углерода, к которому они присоединены, образуют циклоалкильную или гетероцикло группу. Неограничивающие примерные R'/R" группы включают водород, -СН₃, -ОН, -СН(СН₃)₂, -CH(CH₃)(Et), -CH₂Ph, -CH₂CH₂SCH₃, -CH₂CO₂H, -CH₂CH₂CO₂H, -(CH₂)₄NH₂, -CH₂OH, -СН(СН₃)ОН, -CH₂Ph-OH, -CH₂-имидазол, -CH₂SH, -CH₂C(O)NH₂, -CH₂CH₂C(O)NH₂, -CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂CH₂-, -CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂- и -CH₂CH₂OCH₂CH₂-. В одном варианте реализации R' выбран из группы, состоящей из -CH₂Ph, -СО₂Н, -CH₂CO₂H и -CH₂CONH₂. Общая структура аддукта гидроксикислоты представляет собой:

где М⁺ представляет собой моновалентный катион. Например, аддукт гидроксикислоты группы R⁴-1 формулы I представляет собой:

[0265] Термин «аддукт аминокислоты» в настоящем документе относится продукту конденсации бороновой кислоты, имеющей общую формулу (R)(RO)B-OH, и природной или не природной D- или L- аминокислоты, включая β-аминокислоты, например, аминокислоту, имеющую формулу HOOC-C(R''')(R"")-NH₂. Подходящие неприродные аминокислоты включают, без ограничения, энантиомерные и рацемические формы 2-метилвалина, 2-метилаланина, (2-i-пропил)-β-аланина, фенилглицина, 4-метилфенилглицина, 4-изопропилфенилглицина, 3-бромфенилглицина, 4-бромфенилглицина, 4-хлорфенилглицина, 4-метоксифенилглицина, 4-этоксифенилглицина, 4-гидроксифенилглицина, 3-гидроксифенилглицина, 3,4-дигидроксифенилглицина, 3,5-дигидроксифенилглицина, 2,5-дигидрофенилглицина, 2-фторфенилглицина, 3-фторфенилглицина, 4-фторфенилглицина, 2,3-дифторфенилглицина, 2,4-дифторфенилглицина, 2,5-дифторфенилглицина, 2,6-дифторфенилглицина, 3,4-дифторфенилглицина, 3,5-дифторфенилглицина, 2-(трифторметил)фенилглицина, 3-(трифторметил)фенилглицина, 4-(трифторметил)фенилглицина, 2-(2-тиенил)глицина, 2-(3-тиенил)глицина, 2-(2-фурил)глицина, 3-пиридилглицина, 4-фторфенилаланина, 4-хлорфенилаланина, 2-бромфенилаланина, 3-бромфенилаланина, 4-бромфенилаланина, 2-нафтилаланина, 3-(2-хиноил)аланина, 3-(9-антраценил)аланина, 2-амино-3-фенилбутановой кислоты, 3-хлорфенилаланина, 3-(2-тиенил)аланина, 3-(3-тиенил)аланина, 3-фенилсерина, 3-(2-пиридил)серина, 3-(3-пиридил)серина, 3-(4-пиридил)серина, 3-(2-тиенил)серина, 3-(2-фурил)серина, 3-(2-тиазолил)аланина, 3-(4-тиазолил)аланина, 3-(1,2,4-триазол-1-ил)-аланина, 3-(1,2,4-триазол-3-ил)-аланина, гексафторвалина, 4,4,4-трифторвалина, 3-фторвалина, 5,5,5-трифторлейцина, 2-амино-4,4,4-трифтормасляной кислоты, 3-хлораланина, 3-фтораланина, 2-амино-3-фтормасляной кислоты, 3-фторнорлейцина, 4,4,4-трифтортреонина, L-аллилглицина, трет-лейцина, пропаргилглицина, винилглицина, S-метилцистеина, циклопентилглицина, циклогексилглицина, 3-гидроксинорвалина, 4-азалейцина, 3-гидроксилейцина, 2-амино-3-гидрокси-3-метилбутановой кислоты, 4-тиаизолейцина, активицина, иботеновой кислоты, квискваловой кислоты, 2-инданилглицина, 2-аминоизомасляной кислоты, 2-циклобутил-2-фенилглицина, 2-изопропил-2-фенилглицина, 2-метилвалина, 2,2-дифенилглицина, 1-амино-1-циклопропанкарбоновой кислоты, 1-амино-1-циклопентанкарбоновой кислоты, 1-амино-1-циклогексанкарбоновой кислоты, 3-амино-4,4,4-трифтормасляной кислоты, 3-фенилизосерина, 3-амино-2-гидрокси-5-метилгексановой кислоты, 3-амино-2-гидрокси-4-фенилмасляной кислоты, 3-амино-3-(4-бромфенил)пропионовой кислоты, 3-амино-3-(4-хлорфенил)пропионовой кислоты, 3-амино-3-(4-метоксифенил)пропионовой кислоты, 3-амино-3-(4-фторфенил)пропионовой кислоты, 3-амино-3-(2-фторфенил)пропионовой кислоты, 3-амино-3-(4-нитрофенил)пропионовой кислоты и 3-амино-3-(1-нафтил)пропионовой кислоты. Эти неприродные аминокислоты являются коммерчески доступными у следующих коммерческих поставщиков, включая Aldrich, Sigma, Fluka, Lancaster, ICN, TCI, Advanced ChemTech, Oakwood Products, Indofine Chemical Company, NSC Technology, PCR Research Chemicals, Bachem, Acros Organics, Celgene, Bionet Research, Tyger Scientific, Tocris, Research Plus, Ash Stevens, Kanto, Chiroscience и Peninsula Lab. Следующие аминокислоты могут быть синтезированы согласно литературным методикам: 3,3,3-трифтораланин (Sakai, T.; et al.. Tetrahedron 1996, 52, 233) и 3,3-дифтораланин (D'Orchymont, H. Synthesis 1993, 10, 961). Другие N-защитные группы, которые можно применять вместо Z, включая ацетил (Ас), трет-бутоксикарбонил (Boc), метоксикарбонил или этоксикарбонил. Неограничивающие примерные R'''7R”” группы включают водород, СН₃, ОН, -СН(СН₃)₂, -CH(CH₃)(Et), -CH₂Ph, -CH₂CH₂SCH₃, -CH₂CO₂H, -CH₂CH₂CO₂H, -(CH₂)₄NH₂, -CH₂OH, -СН(СН₃)ОН, -CH₂Ph-OH, -CH₂-имидазол, -CH₂SH, -CH₂C(O)NH₂ и -CH₂CH₂C(O)NH₂. Общая структура адцукта гидроксикислоты представляет собой:

где М⁺ представляет собой Н⁺ или моновалентный катион. В качестве примера, аддукт аминокислоты группы R⁴-1 формулы I представляет собой:

[0266] Термин «моновалентный катион» в настоящем документе относится к неорганическим катионам, таким как, но не ограничиваясь ими, ионы щелочных металлов, например, Na⁺ и K⁺, а также органическим катионам, таким как, но не ограничиваясь ими, ионы аммония или замещенного аммония, например, NH₄⁺, NHMe₃⁺, NH₂Me₂⁺, NHMe₃⁺ и HMe₄⁺.

[0267] В настоящем документе термин «микронизация» относится к процессу или способу, посредством которого размер совокупности частиц уменьшают, обычно до размера порядка микронов.

[0268] В настоящем документе термин «микрон» или «мкм» относится к «микрометру», который составляет 1×10^-6 метра.

[0269] В другом аспекте в настоящем описании предложены композиции, содержащие соединение согласно настоящему описанию и одно или более вспомогательных веществ. В одном варианте реализации вспомогательное вещество включает диметилсульфоксид или ацетон. В одном варианте реализации композиция содержит фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество для обеспечения «фармацевтически приемлемой композиции». В другом варианте реализации композиция содержит микронизированные соединения согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество включает Miglyol 812, фосфолипон 90G или токоферил полиэтиленгликоль 1000 сукцинат или их смесь. В другом варианте реализации фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество по существу включает Miglyol 812, фосфолипон 90G и токоферил полиэтиленгликоль 1000 сукцинат. В другом варианте реализации фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество включает Labrasol^®. В другом варианте реализации фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество включает сорбитан монолаурат, гидроксипропилметилцеллюлозы ацетат сукцинат, натрия таурохолат, ethocel™ или пальмитоил-олеоил-фосфатидилхолин или их смесь. В другом варианте реализации фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество включает гидрогенизированный соевый лецитин. Соединение согласно настоящему описанию может быть смешано с одним или более вспомогательными веществами с применением способа, хорошо известного специалисту в данной области.

[0270] В другом варианте реализации вспомогательное вещество включает этанол, изопропанол, пропиленгликоль, бензиловый спирт, глицерин, сорбитол, сахарозу, карбопол, мальтодекстрин, lycasin (мальтитол), бензоат натрия, сахарид натрия, лутрол Е, F, метилпарабен, пропилпарабен, лимонную кислоту, каприол 90, Твин 80 (полисорбат 80), Коллидон^® CL-M, полиоксилстеарат, гидроксипропилметилцеллюлозу, Кремофор^® RH 40, Кремофор^® EL, натрия карбоксиметилцеллюлозу (КМЦ), гуаровую камедь, ксантановую камедь, полиэтиленгликоль или поливинилпирролидон или их смесь.

[0271] В другом варианте реализации вспомогательное вещество включает Labrafil^®, Labrasol^®, Gelucire^®, Labrafac^®, Lauroglycol™ 90, Peceol™, Transcutol^®, Compritol^®, Geloil^®, Geleol™ или Precirol^® или их смесь.

[0272] В другом варианте реализации вспомогательное вещество включает capmul, Captex^® или Acconon^® или их смесь.

[0273] В другом варианте реализации вспомогательное вещество включает DYNACERIN^®, DYNACET^®, DYNASAN, GALENOL^®, IMWITOR (глицерил моноолеат, стеарат, каприлат), ISOFOL^® (длинноцепочечные спирты), LIPOXOL^® (макрогол), MASSA ESTARINUM (гидрогенизированные кокоглицериды), MIGLYOL (триглицерид каприловой/каприновой кислот), NACOL^®, Nafol (спирты), SOFTIGEN^®, SOFTISAN^®, WITEPSOL (гидрогенизированные кокоглицериды) или WITOCAN^® (гидрогенизированные коко-Gly) или их смесь.

[0274] В другом варианте реализации вспомогательное вещество включает гипромеллозы ацетат сукцинат.

[0275] В другом варианте реализации вспомогательное вещество включает Soluplus^® (поливинилкапролактама-поливинилацетата-полиэтиленгликоля графт-сополимер.

[0276] Композиции могут содержать от 0,01% до 99% по массе соединения согласно настоящему описанию, например, примерно 1%, примерно 2%, примерно 3%, примерно 4%, примерно 5%, примерно 6%, примерно 7%, примерно 8%, примерно 9% или примерно 10%, примерно 15%, примерно 20%, примерно 25%, примерно 30%, примерно 35%, примерно 40%, примерно 45%, примерно 50%, примерно 55%, примерно 60%, примерно 65%, примерно 70%, примерно 75%, примерно 80%, примерно 85%, примерно 90% или примерно 95%. Количество в любой конкретной композиции будет зависеть от эффективной дозы, то есть, дозы, необходимой, чтобы вызвать необходимый уровень экспрессии генов.

[0277] В другом аспекте в настоящем описании предложены микронизированные соединения согласно настоящему описанию и их композиции. В одном варианте реализации среднее распределение частиц по размеру микронизированной формы соединения согласно настоящему описанию составляет примерно 20 мкм или менее, например, примерно 19 мкм, примерно 18 мкм, примерно 17 мкм, примерно 16 мкм, примерно 15 мкм, примерно 14 мкм, примерно 13 мкм, примерно 12 мкм или примерно 11 мкм или менее. В другом варианте реализации среднее распределение частиц по размеру составляет примерно 10 мкм или менее, например, примерно 9 мкм, примерно 8 мкм, примерно 7 мкм, примерно 6 мкм или примерно 5 мкм или менее. В другом варианте реализации среднее распределение частиц по размеру составляет примерно 5 мкм или менее, например, примерно 4 мкм, примерно 3 мкм, примерно 2 мкм или примерно 1 мкм или менее. В другом варианте реализации среднее распределение частиц по размеру составляет примерно 1 мкм или менее, например, примерно 0,9 мкм, примерно 0,8 мкм, примерно 0,7 мкм, примерно 0,6 мкм, примерно 0,5 мкм, примерно 0,4 мкм, примерно 0,3 мкм, примерно 0,2 мкм, примерно 0,1 мкм, примерно 0,09 мкм, примерно 0,08 мкм, примерно 0,07 мкм, примерно 0,06 мкм, примерно 0,05 мкм, примерно 0,04 мкм, примерно 0,03 мкм, примерно 0,02 мкм или примерно 0,01 мкм или менее.

[0278] В другом аспекте в настоящем описании предложены способы получения композиции, включающие смешивание соединения согласно настоящему описанию или микронизированного соединения согласно настоящему описанию с одним или более вспомогательными веществами. В одном варианте реализации вспомогательное вещество представляет собой фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.

[0279] В другом аспекте в настоящем описании предложены способы регулирования генной экспрессии гена, представляющего интерес, в клетке-хозяине, включающие приведение в контакт клетки-хозяина с соединением согласно настоящему описанию или его композицией. В одном варианте реализации клетка-хозяин включает полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, при этом уровень экспрессии гена, представляющего интерес, увеличивается по отношению к уровню экспрессии гена, представляющего интерес, при отсутствии соединения согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации клетка-хозяин представляет собой изолированную клетку-хозяин. В других конкретных вариантах реализации изолированная клетка-хозяин является генетически модифицированной ex-vivo (например, трансформированной, трансфицированной или инфицированной) полинуклеотидным структурным элементом, кодирующим генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации exvivo генетически модифицированную клетку-хозяина вводят субъекту. В конкретных вариантах реализации экспрессия гена, представляющего интерес, находится под контролем генного переключателя, содержащего лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации клетка-хозяин находится в субъекте, например, животном, например, человеке. Например, одна или более клеток (клеток-хозяев) у субъекта могут быть генетически модифицированы in-vivo посредством введения вирусного вектора субъекту (или выбранной совокупности его клеток-хозяев), при этом вирусный вектор содержит полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В других вариантах реализации клетка-хозяин представляет собой собственную клетку-хозяина, полученную у субъекта млекопитающего, при этом собственная клетка-хозяин генетически модифицирована полинуклеотидным структурным элементом, кодирующим генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации клетка-хозяин представляет собой аллогенную стволовую клетку или иммунную клетку, при этом аллогенная клетка-хозяин генетически модифицирована полинуклеотидным структурным элементом, кодирующим генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию вводят субъекту в форме фармацевтически приемлемой композиции. В другом варианте реализации генный переключатель содержит лигандсвязывающий домен рецептора экдизона (EcR), который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации генный переключатель дополнительно содержит второй лигандсвязывающий домен, который димеризуется с первым лигандсвязывающим доменом (например, лигандсвязывающим доменом EcR), который связывает соединение согласно настоящему описанию. В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен EcR содержит одно или более замещений аминокислот по сравнению с соответствующей EcR полипептидной последовательностью дикого типа. В другом варианте реализации второй лигандсвязывающий домен представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора. В другом варианте реализации второй лигандсвязывающий домен представляет собой USP (белок Ультраспиракл) дикого типа насекомых. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора (R×R) представляет собой химерный лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора. В другом варианте реализации химерный лигандсвязывающий домен представляет собой гибрид R×R млекопитающих/USP беспозвоночных. В другом варианте реализации клетка-хозяин дополнительно содержит полинуклеотид, кодирующий пептид, белок или полипептид, экспрессия которого регулируется генным переключателем.

В другом аспекте в настоящем описании предложены способы лечения заболевания, расстройства, травмы или состояния у субъекта, включающие введение субъекту соединения согласно настоящему описанию или его композиции. В одном варианте реализации вектор (или два или более векторов) включает полинуклеотид (или полинуклеотиды), кодирующий генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В одном варианте реализации вектор (или векторы) может представлять собой ДНК или РНК вектор. В одном варианте реализации вектор (или векторы) может представлять собой плазмидный или вирусный вектор (например, аденовирусный вектор или аденоассоциированный вирусный вектор). В одном варианте реализации вектор (или векторы), содержащий полинуклеотид (или полинуклеотиды), кодирующий генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, вводят субъекту для лечения заболевания, расстройства, травмы или состояния у субъекта. В одном варианте реализации после введения соединения согласно настоящему описанию, ген, представляющий интерес (GOI), экспрессируется in vivo у субъекта из вектора (или векторов), содержащего полинуклеотид (или полинуклеотиды), кодирующий GOI, и содержащего генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В одном варианте реализации клетка-хозяин в пределах субъекта или нечеловеческого организма содержит полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации субъектом является человек. В другом варианте реализации заболевание, расстройство, травма или состояние выбраны из группы, состоящей из рака, расстройства, связанного с метаболизмом, заболевания почек, анемии, аутоиммунного расстройства, расстройства зрения, расстройства крови, неврологического расстройства, пульмонологического расстройства (легких), ревматологического расстройства, кардиологического расстройства, расстройства печени (печени) и инфекционного заболевания. В другом варианте реализации заболевание, расстройство, травма или состояние представляет собой рак. В другом варианте реализации рак представляет собой меланому. В другом варианте реализации генный переключатель содержит лигандсвязывающий домен рецептора экдизона (EcR). В другом варианте реализации генный переключатель дополнительно содержит второй лигандсвязывающий домен, который димеризуется с первым лигандсвязывающим доменом (например, лигандсвязывающим доменом EcR), который связывает соединение согласно настоящему описанию. В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен EcR содержит одно или более замещений аминокислот по сравнению с соответствующей EcR полипептидной последовательностью дикого типа. В другом варианте реализации второй лигандсвязывающий домен представляет собой USP (белок Ультраспиракл) дикого типа насекомых. В другом, варианте реализации второй лигандсвязывающий домен представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора (R×R) представляет собой химерный лигандсвязывающий домен ретиноидного X-рецептора. В другом варианте реализации химерный лигандсвязывающий домен представляет собой гибрид R×R млекопитающих/USP беспозвоночных. В другом варианте реализации клетка-хозяин дополнительно содержит полинуклеотид, кодирующий пептид, белок или полипептид, экспрессия которого регулируется генным переключателем. В другом варианте реализации генный переключатель регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего IL-12 или его субъединицу (См., например, US 2011/0268766).

[0281] В другом варианте реализации в настоящем описании предложено соединение согласно настоящему описанию или его композиция для применения для лечения заболевания, расстройства, травмы или состояния у субъекта.

[0282] В другом варианте реализации в настоящем описании предложено соединение согласно настоящему описанию или его композиция для применения для получения лекарственного средства для лечения заболевания, расстройства, травмы или состояния у субъекта.

[0283] В другом аспекте в настоящем описании предложены наборы, содержащие соединение согласно настоящему описанию, или наборы, содержащие композицию соединения согласно настоящему описанию и одно или более вспомогательных веществ. В одном варианте реализации набор дополнительно содержит инструкции по введению соединения согласно настоящему описанию изолированной клетке-хозяину или субъекту. В другом варианте реализации набор дополнительно содержит RHEOSWITCH THERAPEUTIC SYSTEM^® (см., например, инструкцию по применению "RHEOSWITCH^® Mammalian Inducible Expression System," New England BioLabs^® Inc., Version 1,3, November 2007; Karzenowski, D. et al., BioTechiques 39:191-196 (2005); Dai, X. et al., Protein Expr. Purif. 42:236-245 (2005); Palli, S.R. et al., Eur. J. Biochem. 270:1308-1515 (2003); Dhadialla, T.S. et al., Annual Rev. Entomol. 43:545-569 (1998); Kumar, M.В, et al., J. Biol. Chem. 279:27211-27218 (2004); Verhaegent, M. and Christopoulos, T. K., Annal. Chem. 74:4378-4385 (2002); Katalam, A. K., et al., Molecular Therapy 13:S103 (2006); и Karzenowski, D. et al., Molecular Therapy 13:S194 (2006)).

[0284] Соединения согласно настоящему описанию могут быть введены субъекту в сочетании с другими фармацевтически активными соединениями. Специалистам в данной области будет понятно, что фармацевтически активные соединения для применения в комбинации с соединением согласно настоящему описанию выбирают таким образом, чтобы избежать побочных эффектов у реципиента или нежелательных взаимодействий между соединениями. Примеры других фармацевтически активных соединений, которые можно применять в комбинации с соединением согласно настоящему описанию, представляют собой, например, химиотерапевтические агенты против СПИД, производные аминокислот, анальгетики, анестетики, аноректальные продукты, антациды и ветрогонные средства, антибиотики, антикоагулянты, антидоты, противофибринолитические агенты, антигистаминные средства, противовоспалительные агенты, противоопухолевые средства, противопаразитарные средства, протиопротозойные средства, жаропонижающие средства, антисептические средства, спазмолитические средства и противохолинергические средства, противовирусные средства, средства для подавления аппетита, лекарственные средства против артрита, модификаторы биологического ответа, регуляторы метаболизма костной ткани, средства для очищения кишечника, сердечно-сосудистые агенты, стимуляторы центральной нервной системы, усилители метаболизма головного мозга, церуменолитики, ингибиторы холинэстеразы, лекарственные средства от простуды и кашля, колониестимулирующие факторы, контрацептивы, цитозащитные агенты, зубные средства, дезодоранты, дерматологические средства, детоксицирующие агенты, агенты против диабета, диагностические агенты, лекарственные средства против диареи, агонисты дофаминовых рецепторов, электролиты, ферменты и средства для улучшения пищеварения, средства на основе спорыньи, половые факторы, волокнистые добавки, противогрибковые агенты, ингибиторы галактореи, ингибиторы секреции кислоты в желудке, желудочно-кишечные прокинетические агенты, ингибиторы гонадотропина, стимуляторы роста волос, лекарственные средства, повышающие количество гемоглобина в крови, гемореологические агенты, гемостатики, антагонисты рецепторов гистамина Нг, гормоны, гипергликемические агенты, гиполипидемические средства, иммунодепрессанты, слабительные, лепростатики, агенты, способствующие лейкаферезу, легочные сурфактанты, лекарственные средства против мигрени, муколитики, антагонисты миорелаксантов, миорелаксанты, антагонисты наркотических средств, назальные спреи, лекарственные средства против тошноты, аналоги нуклеозидов, пищевые добавки, препараты против остеопороза, окситоцические агенты, парасимпатолитики, парасимпатомиметики, лекарственные средства против паркинсонизма, адъюванты пенициллина, фосфолипиды, ингибиторы тромбоцитов, агенты против порфирии, аналоги простагландина, простагландины, ингибиторы протонного насоса, противозудные средства, психотропные средства, хинолоны, респираторные стимуляторы, стимуляторы слюноотделения, заменители соли, склерозирующие агенты, лекарственные средства от кожных ран, средства, помогающие прекращению курения, сульфаниламиды, симпатолитики, тромболитики, агенты против синдрома Туретта, лекарственные средства от тремора, лекарственные средства от туберкулеза, агенты, способствующие выведению мочевой кислоты, агенты мочевыводящих путей, агенты, сокращающие матку, релаксанты матки, вагинальные лекарственные средства, агенты против вертиго, аналоги витамина D, витамины и медицинские диагностические контрастные средства. В некоторых случаях соединение согласно настоящему описанию может подходить в качестве дополнения к терапии лекарственным средством, например, чтобы «отключить» ген, который продуцирует фермент, который метаболизирует конкретное лекарственное средство.

[0285] Для сельскохозяйственного применения соединения согласно настоящему описанию или их композиции можно применять для контроля экспрессии пестицидных белков, таких как токсин Bacillus thuringiensis (Bt). Такая экспрессия может быть специфичной к ткани или растению. Кроме того, в частности, когда также необходим контроль вредителей растений, один или более пестицидов могут быть объединены с соединением согласно настоящему описанию или его композициями, таким образом, обеспечивая дополнительные преимущества и эффективность, в том числе меньшее общее количество внесений по сравнению с применением пестицидов отдельно. Когда применяют смеси с пестицидами, относительные пропорции каждого компонента в композиции будут зависеть от относительной эффективности и необходимой нормы расхода каждого пестицида по отношению к сельскохозяйственным культурам, вредителям и/или сорнякам, подлежащим обработке. Специалистам в данной области будет понятно, что смеси пестицидов могут обеспечить преимущества, такие как более широкий спектр активности, чем один пестицид, используемый отдельно. Примеры пестицидов, которые могут быть объединены в композиции с соединениями согласно настоящему описанию, включают фунгициды, гербициды, инсектициды, майтициды и бактерицидные средства.

[0286] В других сельскохозяйственных вариантах реализации соединения согласно настоящему описанию можно применять для контроля экспрессии одного или более генов, представляющих интерес (GOIs). Примерные GOIs включают любой необходимый признак, будь то агрономический признак, исходный признак, такой как устойчивость к гербицидам или инсектицидам, GOIs, необходимые с точки зрения питательной ценности для конечного потребителя (животного или человека), а также GOIs, необходимые для эффективной переработки растительного продукта. Таким образом, в конкретных вариантах реализации растительная клетка, растительная ткань, целое растение и подобные, генетически модифицированы полинуклеотидом, кодирующим генный переключатель, при этом экспрессия одного или более GOIs находится под контролем генного переключателя. Аналогичным образом, в конкретных вариантах реализации клетка гриба, бактериальная клетка или дрожжевая клетка генетически модифицирована полинуклеотидом, кодирующим генный переключатель, при этом экспрессия одного или более GOIs находится под контролем генного переключателя.

[0287] Рецепторы экдизона у насекомых в природе отвечают за стероидный гормон экдизон (гормон линьки) и другие стероидные соединения, такие как понастерон А и муристерон A. (Graham et al., Insect Biochemistry and Molecular Biology 37:611-626 (2007); Dinan and Hormann, "Ecdysteroid Agonists and Antagonists," Comprehensive Molecular Insect Science, 1st ed.:197-242, (2005)). Диацилгидразины, имеющие агонистическую активность рецептора экдизона, описаны как инсектициды. (См. патент США №5530028).

[0288] В другом аспекте в настоящем описании предложен способ контроля, например, уменьшения или предотвращения распространения или уничтожения насекомых, включающий приведение насекомых или среды их обитания в контакт с инсектицидно эффективным количеством соединения согласно настоящему описанию или его композиции. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции являются инсектицидно активными против:

[0289] (1) насекомых порядка чешуекрылых (Lepidoptera), например, Agrotis ypsilon, Agrotis segetum, Alabama argillacea, Anficarsia gemmatalis, Argyresthia conjugella, Autographa gamma, Bupalus piniarius, Cacoecia murinana, Capua reticulana, Cheimatobia brumata, Choristoneura fumiferana, Choristoneura occidentalis, Cirphis unipuncta, Cydia pomonella, Dendrolimus pini, Diaphania nitidalls, Dlatraea grandiosella, Earias insulana, Elasmopalpus lignosellus, Eupoecilia ambiguella, Evetria bouliana, Feltia subterranea, Galleria mellonella, Grapholitha funebrana, Grapholitha molesta, Hellothis armígera, Hellothis virescens, Heliothis zea, Hellula undalis, Hibernia defoliaria, Hyphantria cunea, Hyponomeuta malinellus, Keiferia lycopersicella, Lambdina fiscellaria, Laphygma exigua, Leucoptera coffeella, Leucoptera scitella, Lithocolletis blancardella, Lobesia botrana, Loxostege sticticalis, Lymantria dispar, Lymantria monacha, Lyonetia clerkella, Malacosoma neustria, Mamestra brassicae, Orgyia pseudotsugata, Ostrinia nubilalls, Panolls flammea, Pectinophora gossypiella, Peridroma saucia, Phalera bucephala, Phthorimaea operculella, Phyllocnistis citrella, Pieris brassicae, Plathypena scabra, Plutella xylostella, Pseudoplusia includens, Rhyacionia frustrana, Scrobipalpula absoluta, Sitotroga cerealella, Sparganothis pilleriana, Spodoptera fruglperda, Spodoptera littoralls, Spodoptera litura, Thaumatopoea pityocampa, Tortrix viridana, Trichoplusia ni и Zeiraphera Canadensis;

[0290] (2) жуков (Coleoptera), например, Agrilus sinuatus, Agriotes lineatus, Agriotes obscurus, Amphimallus solstitialis, Anisandrus dispar, Anthonomus grandis, Anthonomus pomorum, Aphthona euphoridae, Athous haemorrhoidals, Atomaria linearis, Blastophagus piniperda, Blitophaga undata, Bruchus ruflmanus, Bruchus pisorum, Bruchus lentis, Byctiscus betulae, Cassida nebulosa, Cerotoma trifurcata, Cetonia aurata, Ceuthorrhynchus assimilis, Ceuthorrhynchus napi, Chaetocnema tibialis, Conoderus vespertinus, Crioceris asparagi, Ctenicera ssp., Diabrotica longicornis, Diabrotica semipunctata, Diabrotica 12-punctata Diabrotica speciosa, Diabrotica virgifera, Epilachna varivestis, Epitrix hiirtpennis, Eutinobothrus brasiilensis, Hylobius abietis, Hypera brunneipennis, Hypera postica, Ips typographus, Lema bilineata, Lema melanopus, Leptinotarsa decemlineata, Limonius californicus, Lissorhoptrus oryzophilus, Melanotus communis, Meligethes aeneus, Melolontha hippocastani, Melolontha melolontha, Oulema oryzae, Otiorrhynchus sulcatus, Otiorrhynchus ovatus, Phaedon cochleariae, Phyllobius pyri, Phyllotreta chrysocephala, Phyllophaga sp., Phyllopertha horticola, Phyllotreta nemorum, Phyllotreta striolata, Popillia japonica, Sitona lineatus и Sitophilus granaria;

[0291] (3) мух, москитов (Diptera), например, Aedes aegypti, Aedes albopictus, Aedes vexans, Anastrepha ludens, Anopheles maculipennis, Anopheles crucians, Anopheles albimanus, Anopheles gambiae, Anopheles freeborni, Anopheles leucosphyrus, Anopheles minimus, Anopheles quadrimaculatus, Calliphora vicina, Ceratitis capitata, Chrysomya bezziana, Chrysomya hominivorax, Chrysomya macellaria, Chrysops discails, Chrysops silacea, Chrysops allanticus, Cochliomyla hominivorax, Contarinia sorghicola Cordylobia anthropophaga, Culicoides furens, Culex pipiens, Culex nigripalpus, Culex quinquefasciatus, Culex tarsalis, Culiseta inornata, Culiseta melanura, Dacus cucurbitae, Dacus oleae, Dasineura brassicae, Delia antique, Delia coarctata, Delia platura, Della radicum, Dermatobia hominis, Fannia canicularis, Geomyza Tripunctata, Gasterophilus intestinalis, Glossina morsiftans, Glossina palpalis, Glossina fuscipes, Glossina tachinoides, Haematobia irritans, Haplbdiplosis equestris, Hippelates spp., Hylemyia platura, Hypoderma lineata, Leptoconops torrens, Liriomyza sativae, Liriomyza trifolii, Lucilia caprina, Lucilia cuprina, Lucilla sericata, Lycoria pectoralis, Mansonia titillanus, Mayetiola destructor, Musca domestica, Muscina stabulans, Oestrus ovis, Opomyza florum, Oscinella frit, Pegomya hysocyami, Phorbia antigua, Phorbia brassicae, Phorbia coarctata, Phlebotomus argentipes, Psorophora columbiae, Psila rosae, Psorophora discolor, Prosimullum mixtum, Rhagoletis cerasi, Rhagoletis pomonella, Sarcophaga haemorrhoidalis, Sarcophaga sp, Simulium vittatum, Stomoxys calcitrans, Tabanus bovinus, Tabanus atratus, Tabanus lineola и Tabanus similis, Tipula oleracea и Tipulapaludosa:

[0292] (4) бахромчатокрылых (Thysanoptera), например, Dichromothrips corbetti, Dichromothrips ssp, Frankliniella fusca, Frankllniella occidentalls, Frankllniella tritici, Scirtothrlps citri, Thrips olyzae, Thrips palmi и Thrips tabaci,

[0293] (5) термитов (Isoptera), например, Calotermes flavicollis, Leucotermes flavipes, Heterotermes aureus, Reticulltermes flavipes, Retfculltermes virginicus, Reticulltermes lucifugus, Termes natalensis и Coptotermes formosanus,

[0294] (6) тараканов (Blattaria-Blattodea), например, Blattella germanica, Blattella asahinae, Periplaneta americana, Periplaneta japonica, Periplaneta brunnea, Periplaneta fuligginosa, Periplaneta australasiae и Blatta orientalis;

[0295] (7) клопов (Hemiptera), например, Acrosternum hilare, Blissus leucopterus, Cyrtopeltis notatus, Dysdercus cingulatus, Dysdercus intermedius, Eurygaster integriceps, Euschistus impictivenfris, Leptoglossus phyllopus, Lygus llneolaris, Lygus pratensis, Nezara viriduia, Piesma quadrata, Solubea insularis, Thyanta perditor, Acyrthosiphon onobrychis, Adelges laricis, Aphidula nasturti; Aphis fabae, Aphis forbesi, Aphis pomi, Aphis gossypii, Aphis grossulariae, Aphis schneideri, Aphis spiraecola, Aphis sambuci, Acyrthosiphon pisum, Aulacofthum solani, Bemisia argentifolii, Brachycaudus cardui, Brachycaudus helichrysi, Brachycaudus persicae, Brachycaudus prunicola, Brevicoryne brassicae, Capiftophorus horni, Cerosipha gossypii, Chaetosiphon fragaefolii, Cryptomyzus ribis, Dreyfusia nordmannianae, Dreyfusia piceae, Dysaphis radicola, Dysaulacorthum pseudosolani, Dysaphis plantaginea, Dysaphis pyri, Empoasca fabae, Hyalopterus pruni, Hyperomyzus lactucae, Macrosiphum avenae, Macrosiphum euphorbiae, Macrosiphon rosae, Megoura viciae, Melanaphis pyrarius, Metopolophium dirhodum, Myzus persicae, Myzus ascalonicus, Myzus cerasi, Myzus varians, Nasonovia ribis-nigri, Nilaparvata lugens, Pemphigus bursarius, Perkinsiella saccharicida, Phorodon humuli, Psylla mall, Psylla piri, Rhopalomyzus ascalonicus, Rhopalosiphum maidis, Rhopalosiphum padi, Rhopalosiphum inserfum, Sappaphis mala, Sappaphis mali, Schizaphis graminum, Schizoneura lanuginosa, Sitobion avenae, Trialeurodes vaporariorum, Toxoptera aurantiiand, Viteus vitifolli, Cimex lectularius, Cimex hemipterus, Reduvius senilis, Triatoma spp. и Arilus critatus;

[0296] (8) муравьев, пчел, ос, пилильщиков (Hymenoptera), например, Athalia rosae, Atta cephalotes, Atta capiguara, Atta cephalotes, Afta laevigata, Atta robusta, Atta sexdens, Atta texana, Crematogaster spp., Hoplocampa minuta, Hoplocampa testudinea, Monomorium pharaonls, Solenopsis geminata, Solenopsis invicta, Solenopsis richteri, Solenopsis xyloni, Pogonomyrmex barbatus, Pogonomyrmex californicus, Pheidole megacephala, Dasymutilla occidentalis, Bombus spp. Vespula squamosa, Paravespula vulgaris, Paravespula pennsylvanica, Paravespula germanica, Dolichovespula maculata, Vespa crabro, Polistes rubiginosa, Camponotus floridanus и Linepithema humile;

[0297] (9) сверчков, кузнечиков, саранчи (Orthoptera), например, Acheta domestica, Gryllotalpa gryllotalpa, Locusta migratoria, Melanoplus bivittatus, Melanoplus femurrubrum, Melanoplus mexicanus, Melanoplus sanguinipes, Melanoplus spretus, Nomadacris septemfasciata, Schistocerca americans, Schistocerca gregaria, Dociostaurus maroccanus, Tachycines asynamorus, Oedaleus senegalensis, Zonozerus variegatus, Hieroglyphus daganensis, Kraussaria angulifera, Calliptamus itallcus, Chortoicetes terminifera и Locustana pardalina;

[0298] (10) Arachnoidea, таких как паукообразные (Acarina), например, семейств Argasidae, Ixodidae и Sarcoptidae, такие как Amblyomma americanum, Amblyomma variegatum, Ambryomma maculatum, Argas persicus, Boophilus annulatus, Boophilus decoloratus, Boophilus microplus, Dermacentor silvarum, Dermacentor andersoni, Dermacentor variabilis, Hyalomma truncatum, Ixodes ricinus, Ixodes rubicundus, Ixodes scapularis, Ixodes holocyclus, Ixodes pacificus, Ornithodorus moubata, Ornithodorus hermsi, Ornithodorus turicata, Ornithonyssus bacoti, Otobius megnini, Dermanyssus gallinae, Psoroptes ovis, Rhipicephalus sanguineus, Rhipicephalus appendiculatus, Rhipicephalus evertsi, Sarcoptes scabiei и Eriophyidae spp., таких как Aculus schlechtendali, Phyllocoptrata oleivora и Eriophyes sheldoni, Tarsonemidae spp., таких как Phytonemus pallidus и Polyphagotarsonemus latus; Tenuipalpidae spp, таких как Brevipalpus phoenicis; Tetranychidae spp., таких как Tetranychus cinnabarinus, Tetranychus kanzawai, Tetranychus pacificus, Tetranychus telarius и Tetranychus urticae, Panonychus ulmi, Panonychus citri и Oligonychus pratensis; Araneida, например, Lafrodectus mactans и Loxosceles reclusa,

[0299] (11) блох (Siphonaptera), например, Ctenocephalides felis, Ctenocephalides canis, Xenopsylla cheopis, Pulex irriftans, Tunga penefrans и Nosopsyllus fasciatus;

[0300] (12) чешуйниц, термобий (Thysanura), например, Lepisma saccharins и Thermobia domestics:

[0301] (13) губоногих (Chilopoda), например, Scutigera coleoptrata,

[0302] (14) многоножек (Diplopoda), например, Narceus spp.,

[0303] (15) уховерток (Dermaptera), например, forifcula auricularia; и/или

[0304] (16) вшей (Phthiraptera), например, Pediculus humanus capitis, Pediculus humanus corporis, Pthirus pubis, Haematopinus eurysternus, Haematopinus suis, Linognathus vituli, Bovicola bovis, Menopon gallinae, Menacanthus stramineus и Solenopotes capillatus.

[0305] В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции являются инсектицидно активными против насекомых порядка Diptera, Hemiptera и/или Lepidoptera. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции являются инсектицидно активными против насекомых порядка Lepidoptera. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции являются инсектицидно активными против насекомых порядка Hemiptera.

[0306] Соединения согласно настоящему описанию или их композиции можно наносить на листву растений в форме водного спрея способами, которые обычно применяют, например, традиционные многолитровые гидравлические распылители, малолитровые распылители, пневматические и воздушные распылители. Разбавление и норма нанесения будет зависеть от типа используемого оборудования, способа и частоты необходимого нанесения и нормы нанесения лиганда. Может быть необходимо добавлять дополнительные адъюванты в резервуар распылителя. Такие адъюванты могут включать поверхностно-активные вещества, диспергирующие агенты, наполнители, клейкие вещества, противопенные агенты, эмульгаторы и другие аналогичные материалы, описанные в McCutcheon's Emulsifiers and Detergents, McCutcheon's Emulsifiers and Detergents/Functional Materials и McCutcheon's Functional Materials, все ежегодно опубликованы McCutcheon Division of MC Publishing Company (New Jersey). Соединения согласно настоящему описанию или их композиции также могут быть смешаны с удобрениями или удобряющими материалами перед их нанесением. Соединения согласно настоящему описанию или их композиции и твердые удобряющие материалы могут также быть смешаны в оборудовании для смешивания или перемешивания или они могут быть включены в удобрения в форме гранулированных составов. Можно применять любое относительное содержание удобрения, которое подходит для сельскохозяйственных культур и сорняков, подлежащих обработке. Соединения согласно настоящему описанию или их композиции обычно содержат от 5% до 50% удобряющей композиции. Эти композиции обеспечивают внесение удобряющих материалов, которые способствуют быстрому росту необходимых растений, и в то же время контроль экспрессии генов.

[0307] В настоящем документе термин «терапевтически эффективное количество» относится к количеству соединения согласно настоящему описанию, достаточному для лечения одного или более симптомов заболевания, состояния, травмы или расстройства или предотвращения прогрессирования заболевания, состояния, травмы или расстройства, или вызывающему регрессию заболевания, состояния, травмы или расстройства. Например, в отношении лечения рака, в одном варианте реализации терапевтически эффективное количество относится к количеству соединения согласно настоящему описанию, которое снижает скорость роста опухоли, снижает массу опухоли, снижает количество метастазов, увеличивает время прогрессирования опухоли или увеличивает время выживания по меньшей мере примерно на 5%, по меньшей мере примерно на 10%, по меньшей мере примерно на 15%, по меньшей мере примерно на 20%, по меньшей мере примерно на 25%, по меньшей мере примерно на 30%, по меньшей мере примерно на 35%, по меньшей мере примерно на 40%, по меньшей мере примерно на 45%, по меньшей мере примерно на 50%, по меньшей мере примерно на 55%, по меньшей мере примерно на 60%, по меньшей мере примерно на 65%, по меньшей мере примерно на 70%, по меньшей мере примерно на 75%, по меньшей мере примерно на 80%, по меньшей мере примерно на 85%, по меньшей мере примерно на 90%, по меньшей мере примерно на 95% или по меньшей мере примерно на 100%.

[0308] В настоящем документе термин «инсектицидно эффективное количество» относится к количеству соединения согласно настоящему описанию, достаточному для контроля, например, снижения или предотвращения распространения или уничтожения насекомых. Например, инсектицидно эффективное количество относится к количеству соединения согласно настоящему описанию, которое вызывает преждевременную линьку и гибель насекомого.

[0309] Артикли единственного числа неопределенной формы относятся к количеству, составляющему один или более одного.

[0310] Термин «примерно» в настоящем документе включает указанное число ±10%. Таким образом, «примерно 10» означает от 9 до 11.

[0311] В настоящем документе термин «вспомогательное вещество» относится к любому ингредиенту в композиции, отличному от соединения согласно настоящему описанию. Вспомогательное вещество обычно представляет собой инертное вещество, добавляемое в композицию для облегчения переработки, обработки, введения и т.д., соединения согласно настоящему описанию. Подходящие вспомогательные вещества включают, но не ограничиваются ими, адьюванты, антиадгезивные агенты, связывающие агенты, носители, разрыхлители, наполнители, вкусовые агенты, красители, разбавители, смазывающие вещества, скользящие вещества, консерванты, сорбенты, растворители, поверхностно-активные вещества и подсластители.

[0312] Традиционные фармацевтические вспомогательные вещества хорошо известны специалистам в данной области. В частности, специалисту в данной области будет понятно, что можно применять большое разнообразие фармацевтических вспомогательных веществ в смеси с соединениями согласно настоящему описанию, включая перечисленные в Handbook of Pharmaceutical Excipients, Pharmaceutical Press 4th Ed. (2003), и Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins, 21st ed. (2005). В одном варианте реализации композиция содержит одно или более из следующих вспомогательных веществ: вода, Labrasol, Lauroglycol 90, Phosal 53 МСТ, Miglyol, Кремофор^® EL, пблисорбат 80, Crillet 1 HP, изопропилмиристат, олеиновая кислота и/или PEG 400 NF. В другом варианте реализации композиция содержит липид.

[0313] Фармацевтически приемлемые носители включают наполнители, такие как сахариды, например, трегалоза, лактоза или сахароза, маннитол или сорбитол, производные целлюлозы и/или фосфаты кальция, например трикальция фосфат или кальция гидрофосфат, а также связывающие вещества, такие как крахмальная паста с применением, например, кукурузного крахмала, пшеничного крахмала, рисового крахмала, картофельного крахмала, желатин, трагакантовая камедь, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натрия карбоксиметилцеллюлоза и/или поливинилпирролидон. Если необходимо, можно добавлять разрыхляющие агенты, такие как вышеперечисленные крахмалы, а также карбоксиметилкрахмал, поперечно сшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия. Вспомогательные вещества представляют собой агенты, регулирующие текучесть, и смазывающие вещества, например, диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота или ее соли, такие как стеарат магния или стеарат кальция и/или полиэтиленгликоль. В одном варианте реализации ядра драже покрывают подходящими покрытиями, которые, если необходимо, устойчивы к желудочному соку. Для этой цели можно применять концентрированные растворы сахаридов, которые необязательно могут содержать аравийскую камедь, тальк, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль и/или титана диоксид, глазирующие растворы и подходящие органические растворители или смеси растворителей. Для того чтобы получить покрытия, устойчивые к желудочному соку, применяют растворы подходящих производных целлюлозы, таких как фталат ацетилцеллюлозы или фталат гидроксипропилметилцеллюлозы. В таблетки или покрытия драже могут быть добавлены красители или пигменты, например, для идентификации или для того, чтобы охарактеризовать дозировки комбинаций активного соединения.

[0314] Фармацевтические лекарственные средства, которые можно применять перорально, включают твердые капсулы, изготовленные из желатина, а также мягкие герметичные капсулы, изготовленные из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбитол. Твердые капсулы могут содержать активные соединения в форме гранул или наночастиц, которые могут быть необязательно смешаны с наполнителями, такими как лактоза, связывающими веществами, такими как крахмалы, и/или смазывающими агентами, такими как тальк или стеарат магния, и необязательно стабилизаторами. В одном варианте реализации растворяют или суспендируют в подходящих жидкостях, таких как жирные масла или жидкий парафин, необязательно со стабилизаторами.

[0315] Жирные масла могут включать мoнo-, ди- или триглицериды. Моно-, ди- и триглицериды включают полученные из С₆, С₈, С₁₀, С₁₂, С₁₄, С₁₆, С₁₈, С₂₀ и С₂₂ кислот. Примерные диглицериды включают, в частности, диолеин, дипальмитолеин и смешанные каприлин-каприн диглицериды. Предпочтительные триглицериды включают растительные масла, рыбий жир, животные жиры, гидрогенизированные растительные масла, частично гидрогенизированные растительные масла, синтетические триглицериды, модифицированные триглицериды, фракционированные триглицериды, триглицериды со средней и длинной цепью, структурированные триглицериды и их смеси. Примерные триглицериды включают: миндальное масло; масло бабассу, масло бурачника; масло семян черной смородины; масло канолы; касторовое масло; кокосовое масло; кукурузное масло; хлопковое масло; масло примулы вечерней; масло виноградных косточек; масло земляного ореха; масло горчичного семени; оливковое масло; пальмовое масло; пальмоядровое масло; арахисовое масло; рапсовое масло; сафлоровое масло; кунжутное масло; масло печени акулы; соевое масло; подсолнечное масло; гидрогенизированное касторовое масло; гидрогенизированное кокосовое масло; гидрогенизированное пальмовое масло; гидрогенизированное соевое масло; гидрогенизированное растительное масло; гидрогенизированное хлопковое и касторовое масло; частично гидрогенизированное соевое масло; частично соевое и хлопковое масло; глицерил трикапроат; глицерил трикаприлат; глицерил трикапрат; глицерил триундеканоат; глицерил трилаурат; глицерил триолеат; глицерил трилинолеат; глицерил трилиноленат; глицерил трикаприлат/капрат; глицерил трикаприлат/ капрат/лаурат; глицерил трикаприлат/капрат/линолеат и глицерил трикаприлат/капрат/стеарат.

[0316] В одном варианте реализации триглицерид представляет собой триглицерид со средней цепью, доступный под торговым наименованием LABRAFAC СС. Другие триглицериды включают нейтральные масла, например, нейтральные растительные масла, в частности, фракционированные кокосовые масла, такие как известные и коммерчески доступные под торговым наименованием MIGLYOL, включая продукты: MIGLYOL 810; MIGLYOL 812; MIGLYOL 818 и САРТЕХ^® 355. Другие триглицериды представляют собой триглицериды каприловой-каприновой кислот, такие как известные и коммерчески доступные под торговым наименованием MYRITOL, включая продукт MYRITOL 813. Другие триглицериды данного класса представляют собой CAPMUL МСТ, САРТЕХ^® 200, САРТЕХ^® 300, САРТЕХ^® 800, NEOBEE М5 и MAZOL 1400.

[0317] Фармацевтические композиции, содержащие триглицериды, могут дополнительно содержать липофильные и/или гидрофильные поверхностно-активные вещества, которые могут образовывать прозрачные растворы при растворении водным растворителем. Одно такое поверхностно-активное вещество представляет собой токоферил полиэтиленгликоль 1000 сукцинат (витамин Ε TPGS). Примеры таких композиций описаны в патенте США 6267985.

[0318] В другом варианте реализации фармацевтически приемлемый носитель включает LABRASOL (Gattefosse SA), который представляет собой PEG-8 глицериды каприловой/каприновой кислот. В другом варианте реализации фармацевтически приемлемый носитель включает PL90G, витамин Ε TPGS и Miglyol 812N.

[0319] В настоящем документе термин «лечить», «обработка» или «лечение» охватывает введение субъекту соединения согласно настоящему описанию или его композиции в целях улучшения или излечения заболевания, расстройства, травмы или состояния, включая предупредительное лечение.

[0320] В настоящем документе термин «субъект» относится к насекомому, растению, водоросли или животному, например, человеку или ветеринарному животному, например, корове, овце, свинье, лошади, собаке или кошке. В одном варианте реализации клетка-хозяин субъекта содержит полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию.

[0321] В настоящем документе термин «ген, представляющий интерес» представляет собой любой ген, экспрессия которого необходима, который кодирует пептид, белок или полипептид.

[0322] В настоящем документе термин «экспрессия генов» относится к транскрипции ДНК в матричную РНК (мРНК) и/или трансляции мРНК в последовательность аминокислот.

[0323] В настоящем документе термин «регулирование экспрессии генов» относится к увеличению уровня экспрессии генов в ответ на контакт соединения согласно настоящему описанию с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, относительно уровня экспрессии генов при отсутствии контакта лигандсвязывающего домена, который связывает соединение согласно настоящему описанию.

[0324] В настоящем документе термин «генный переключатель» относится к пептидному, белковому или полипептидному комплексу, который действует, чтобы (а) связывать соединение согласно настоящему описанию, т.е. лиганд, и (b) регулировать транскрипцию гена, представляющего интерес, лиганд-зависимым образом. Генные переключатели подходят для различных целей применения, таких как генная терапия, производство белков в клетках, системы высокопроизводительного скрининг-анализа на основе клеток, функциональная геномика и регулирование признаков у трансгенных животных.

[0325] В одном варианте реализации полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, представляет собой рекомбинантный полинуклеотид, т.е. полинуклеотид, который был сконструирован посредством молекулярной биологической манипуляции для кодирования генного переключателя. В другом варианте реализации рекомбинантный полинуклеотид представляет собой синтетический полинуклеотид. См., например, публикации заявок на патент США №2012/0322148, 2012/0185954 и 2011/0059530.

[0326] В настоящем документе термин «ген» относится к полинуклеотиду, содержащему нуклеотиды, которые кодируют функциональную молекулу, включая функциональные молекулы, полученные только посредством транскрипции (например, биоактивные виды РНК) или посредством транскрипции и трансляции (например, полипептид). Термин «ген» охватывает нуклеиновые кислоты кДНК и геномную ДНК. «Ген» также относится к фрагменту нуклеиновой кислоты, который экспрессирует специфическую РНК, белок или полипептид, включая регуляторные последовательности, предшествующие (5' некодирующие последовательности) и последующие (3' некодирующие последовательности) кодирующей последовательности. «Природный ген» относится к гену, обнаруженному в природе с его собственными регуляторными последовательностями. «Химерный ген» относится к любому гену, который не является природным геном, включая регуляторные и/или кодирующие последовательности, которые совместно в природе не обнаруживают. Соответственно, химерный ген может содержать регуляторные последовательности и кодирующие последовательности, которые получены из разных источников, или регуляторные последовательности и кодирующие последовательности, полученные из одного источника, но расположенные способом, отличным от обнаруженного в природе. Химерный ген может содержать кодирующие последовательности, полученные из разных источников, и/или регуляторные последовательности, полученные из разных источников. «Эндогенный ген» относится к природному гену в его природном положении в геноме организма. «Чужеродный» ген или «гетерологичный» или «экзогенный» ген относится к гену, обычно не обнаруживаемому в организме хозяина, но который вводят в организм хозяина посредством передачи генов. Чужеродные гены могут содержать природные гены, введенные в неприродный организм, или химерные гены. «Трансген» представляет собой ген, который был введен в геном посредством методики трансформации.

[0327] В одном варианте реализации соединения согласно настоящему описанию вводят в изолированную клетку-хозяин или субъект в форме композиции. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию вводят в изолированную клетку-хозяин или субъект в форме фармацевтически приемлемой композиции.

[0328] В настоящем документе термин «димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию» относится к селективному взаимодействию белок-белок.

[0329] В одном варианте реализации эффективность генного переключателя или «ЕС₅₀» соединения согласно настоящему описанию составляет примерно 20 мкМ или менее, примерно 10 мкМ или менее, примерно 5 мкМ или менее, примерно 3 мкМ или менее, примерно 2 мкМ или менее, примерно 1 мкМ или менее, примерно 500 нМ или менее, примерно 300 нМ или менее, примерно 200 нМ или менее или примерно 100 нМ или менее, например, примерно 75 нМ, примерно 50 нМ, примерно 25 нМ, примерно 15 нМ, примерно 10 нМ, примерно 9 нМ, примерно 8 нМ, примерно 7 нМ, примерно 6 нМ, примерно 5 нМ, примерно 4 нМ, примерно 3 нM, примерно 2 нМ, примерно 1 нМ, примерно 0,5 нМ или менее в клеточном анализе генного переключателя. Примеры анализов in vitro для измерения экспрессии генов, регулируемых генным переключателем, хорошо известны специалистам в данной области. См., например, Karzenowski et al., BioTechniques 39: 191-200 (2005).

[0330] В настоящем документе «ЕС₅₀» представляет собой «половину максимальной эффективной концентрации», которая относится к концентрации соединения согласно настоящему описанию, которая индуцирует регулируемое генным переключателем изменение в экспрессии полинуклеотида, кодирующего ген, представляющий интерес, которая находится посередине между базовым уровнем экспрессии и максимальным уровнем экспрессии после определенного времени воздействия.

[0331] В настоящем документе термин «лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию» относится к последовательности аминокислот, которая селективно связывает соединение согласно настоящему описанию. В способах, описанных в настоящем документе, соединение согласно настоящему описанию связывается с лигандсвязывающим доменом, например, лигандсвязывающим доменом рецептора экдизона, который является частью лигандзависимого комплекса активации транскрипции, который регулирует экспрессию полинуклеотидной последовательности, кодирующей ген, представляющий интерес. Следовательно, экспрессия гена, представляющего интерес, регулируется лигандзависимым образом (соединение согласно настоящему описанию).

[0332] В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, например, лигандсвязывающий домен рецептора экдизона, димеризуется с другим лигандсвязывающим доменом, например, лигандсвязывающим доменом ретиноидного Х-рецептора, с образованием комплекса белок-белок.

[0333] В одном варианте реализации экспрессия гена, представляющего интерес, регулируется соединением согласно настоящему описанию способом включения/выключения, который не зависит от концентрации или дозировки соединения согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации экспрессия гена, представляющего интерес, регулируется соединением согласно настоящему описанию способом, зависимым от концентрации (или дозировки), т.е. между концентрацией (или дозировкой) соединения согласно настоящему описанию и уровнем генной экспрессии гена, представляющего интерес, существует взаимоотношение доза/ответ. См., например, патент США 2009/0123441.

[0334] Термин «функционально связанный» относится к ассоциации полинуклеотидной последовательности на одном полинуклеотиде таким образом, что функция одного находится под влиянием другого. Например, промотор функционально связан с кодирующей последовательностью, когда он способен влиять на экспрессию этой кодирующей последовательности (т.е. кодирующая последовательность находится под транскрипционным контролем промотора). Кодирующие последовательности могут быть функционально связаны с регуляторными последовательностями в смысловой или антисмысловой ориентации.

[0335] В одном варианте реализации клетка-хозяин представляет собой изолированную клетку-хозяин. В одном варианте реализации «изолированная» клетка-хозяин относится к клетке, которая не присутствует у субъекта. В одном варианте реализации «изолированная» клетка-хозяин относится к одной или более клеткам-хозяевам в аппарате клеточной культуры или в препарате клеточной культуры.

[0336] В одном варианте реализации клетка-хозяин находится в пределах субъекта, и клетку-хозяина приводят в контакт с соединением согласно настоящему описанию посредством введения субъекту соединения согласно настоящему описанию или его композиции. В другом варианте реализации клетку-хозяина приводят в контакт с соединением согласно настоящему описанию или его композицией in vitro. В другом варианте реализации клетку-хозяина приводят в контакт с соединением согласно настоящему описанию или его композицией ех vivo. В другом варианте реализации клетка-хозяин находится в субъекте человеке. В другом варианте реализации клетка-хозяин находится в субъекте животном. В другом варианте реализации клетка-хозяин находится в субъекте растении. В другом варианте реализации клетка-хозяин находится в субъекте водоросли.

[0337] В одном варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции вводят субъекту. В одном варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции вводят субъекту перорально. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции вводят субъекту парентерально. В другом варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции вводят подкожно, внутримышечно, внутривенно, внутрибрюшинно или внутритуморально.

[0338] В дополнение к или совместно с вышеуказанными способами введения соединения согласно настоящему описанию или их композиции можно вводить в пищу, употребляемую субъектом. В одном варианте реализации соединения согласно настоящему описанию или их композиции объединяют, перемешивают или смешивают с пищевым материалом «пищевого продукта». Термин «пищевой материал» используется в самом широком смысле и включает любую форму, например, твердый материал, эмульсию, жидкость, принимаемых материалов, употребляемых животным, например, человеком. Пищевые продукты могут быть приготовлены таким образом, что субъект принимает подходящее количество соединения согласно настоящему описанию или его композиции с приемом пищи. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композиция приготовлены в форме премикса для добавления в пищевой материал. В одном варианте реализации пищевой продукт или премикс содержит соединение согласно настоящему описанию или его композицию и один или более липидов.

[0339] В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен в генном переключателе, который связывает соединение согласно настоящему описанию, представляет собой лигандсвязывающий домен ядерного рецептора группы H или его мутант, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ядерного рецептора группы H выбран из группы, состоящей из лигандсвязывающего домена рецептора экдизона, лигандсвязывающего домена убиквитарного рецептора, лигандсвязывающего домена «сиротского» рецептора-1, лигандсвязывающего домена NER-1, лигандсвязывающего домена рецептора, взаимодействующего с белком-15, лигандсвязывающего домена X рецептора-3 печени, лигандсвязывающего домена белка, подобного рецептору стероидного гормона, лигандсвязывающего домена рецептора X печени, лигандсвязывающего домена рецептора X печени, лигандсвязывающего домена фарнезоидного Х-рецептора, лигандсвязывающего домена рецептора, взаимодействующего с белком-14 и лигандсвязывающего домена рецептора фарнезола или его мутанта, который связывает соединение согласно настоящему описанию.

[0340] В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ядерного рецептора группы H представляет собой лигандсвязывающий домен рецептора экдизона или его мутант, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен рецептора экдизона выбран из группы, состоящей из лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Arthropod, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Lepidopteran, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Dipteran, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Orthopteran, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Homopteran и лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Hemipteran, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона еловой листовертки Choristoneura fumiferana, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона жука Tenebrio molitor, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Manduca sexta, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона Heliothies virescens, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона звонца Chironomus tentans, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона тутового шелкопряда Bombyx mori, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона бархатницы Bicyclus anynana, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона бабочки бакай Junonia coenia, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона плодовой мушки Drosophila melanogaster, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона москита Aedes aegyptI, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона мясной мухи Lucilia capitata, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона мясной мухи Lucilia cuprina, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона мясной мухи Calliphora vicinia, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона средиземноморской плодовой мушки Ceratitis capitata, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона саранчи Locusta migratoria, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона тли Myzus persicae, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона краба-скрипача Celuca pugilator, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона иксодового клеща Amblyomma americanum, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона белокрылки Bamecia argentifoli, лигандсвязывающего домена рецептора экдизона цикадки Nephotetix cincticeps или их мутантов, которые связывают соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен рецептора экдизона представляет собой лигандсвязывающий домен рецептора экдизона еловой листовертки Choristoneura fumiferana, последовательность аминокислот которого приведена в публикации патента США №2006/0100416 A1.

[0341] В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен рецептора экдизона представляет собой мутант лигандсвязывающего домена рецептора экдизона еловой листовертки Choristoneura fumiferana, который связывает соединение согласно настоящему описанию.

[0342] Подходящий лигандсвязывающий домен рецептора экдизона включает описанные, например, в патентах США №. 7935510; 7919269; 7563879 и в публикации патента США №2006/0100416 A1.

[0343] В одном варианте реализации генный переключатель содержит лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию. В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, представляет собой лигандсвязывающий домен ядерного рецептора группы В. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ядерного рецептора группы В выбран из группы, состоящей из лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора, лигандсвязывающего домена белка, связывающего Н-2 участок II, лигандсвязывающего домена ко-регулятора ядерного рецептора 1, лигандсвязывающего домена белка ультраспиракл, лигандсвязывающего домена ядерного рецептора 2С1 и лигандсвязывающего домена хорионического фактора 1. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, представляет собой не лигандсвязывающий домен рецептора экдизона.

[0344] В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора позвоночных. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора Homo sapiens. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора представляет собой α изоформу ретиноидного Х-рецептора. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора представляет собой β изоформу ретиноидного Х-рецептора. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора представляет собой γ изоформу ретиноидного Х-рецептора.

[0345] В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного X-рецептора представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного X-рецептора беспозвоночных. В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора беспозвоночных представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора Locusta migratoria.

[0346] В другом варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного X-рецептора беспозвоночных представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора, не относящийся к Lepidopteran, не относящийся к Dipteran.

[0347] В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен ретиноидного рецептора представляет собой лигандсвязывающий домен ретиноидного X рецептора позвоночных, лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора беспозвоночных, лигандсвязывающий домен белка ультраспиракл или химерный лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора.

[0348] В одном варианте реализации химерный лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора содержит два полипептидных фрагмента, при этом первый полипептидный фрагмент выделен из лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора позвоночных, лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора беспозвоночных или лигандсвязывающего домена белка ультраспиракл, и второй полипептидный фрагмент выделен из другого лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора позвоночных, другого лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора беспозвоночных или другого лигандсвязывающего домена белка ультраспиракл.

[0349] В другом варианте реализации химерный лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора представляет собой описанный в патенте США №7531326.

[0350] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-6, спираль 1-7, спираль 1-8, спираль 1-9, спираль 1-10, спираль 1-11 или спираль 1-12 первого вида ретиноидного Х-рецептора, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 7-12, спираль 8-12, спираль 9-12, спираль 10-12, спираль 11-12, спираль 12 или F домен второго вида ретиноидного Х-рецептора, соответственно.

[0351] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-6 первого вида RXR согласно настоящему описанию, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 7-12 второго вида ретиноидного Х-рецептора.

[0352] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-7 первого вида ретиноидного Х-рецептора согласно настоящему описанию, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 8-12 второго вида ретиноидного X-рецептора.

[0353] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-8 первого вида ретиноидного Х-рецептора, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 9-12 второго вида ретиноидного Х-рецептора.

[0354] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-9 первого вида ретиноидного Х-рецептора, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 10-12 второго вида ретиноидного Х-рецептора.

[0355] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-10 первого вида ретиноидного Х-рецептора, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 11-12 второго вида ретиноидного Х-рецептора.

[0356] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-11 первого вида ретиноидного Х-рецептора, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 12 второго вида ретиноидного Х-рецептора.

[0357] В другом предпочтительном варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-12 первого вида ретиноидного Х-рецептора, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит F домен второго вида ретиноидного Х-рецептора.

[0358] В одном варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора представляет собой последовательность ретиноидного Х-рецептора человека, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора представляет собой последовательность ретиноидного Х-рецептора беспозвоночного. В другом варианте реализации последовательность ретиноидного Х-рецептора беспозвоночного представляет собой последовательность ретиноидного Х-рецептора Locusta migratoria.

[0359] В другом варианте реализации первый полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 1-8 ретиноидного Х-рецептора человека, и второй полипептидный фрагмент химерного лигандсвязывающего домена ретиноидного Х-рецептора содержит спираль 9-12 ретиноидного Х-рецептора Locusta migratoria.

[0360] В одном варианте реализации генный переключатель дополнительно содержит ДНК-связывающий домен («DBD»). В другом варианте реализации DBD выбран из группы, состоящей из GAL4 DBD, LexA DBD, фактора транскрипции DBD, DBD члена суперсемейства ядерных рецепторов стероидных/тиреоидных гормонов, бактериального LacZ DBD и дрожжевого DBD.

[0361] В одном варианте реализации генный переключатель дополнительно содержит домен трансактивации («TD»). В другом варианте реализации домен трансактивации выбран из группы, состоящей из VP 16 TD, GAL4 TD, NF-κΒ TD, BP64 TD и B42 кислотного TD.

[0362] В одном варианте реализации ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, лигандсвязьшающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактиваЦии кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся в одном и том же полинуклеотиде.

[0363] В другом варианте реализации ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактивации кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся в одной или более разных полинуклеотидных последовательностях.

[0364] В другом варианте реализации ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, лигандсвязьшающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактивации кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся в двух разных полинуклеотидных последовательностях.

[0365] В другом варианте реализации ДНК-связывающий домен и лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся в первой полинуклеотидной последовательности, и лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактивации кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся во второй полинуклеотидной последовательности.

[0366] В другом варианте реализации ДНК-связывающий домен и лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся в первой полинуклеотидной последовательности, и лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактивации кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся во второй полинуклеотидной последовательности.

[0367] В вариантах реализации, в которых один или более ДНК-связывающих доменов, лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактивации кодируются полинуклеотидными последовательностями, которые содержатся в одной или более разных полинуклеотидных последовательностях, то одна или более разных полинуклеотидных последовательностей функционально связаны с одним или более разными промоторами. В другом варианте реализации одна или более разных полинуклеотидных последовательностей функционально связаны с одним или более элементами разных энхансеров. В другом варианте реализации промотор(ы) и/или энхансер(ы) являются постоянно активными. В другом варианте реализации промотор(ы) и/или энхансер(ы) представляют собой тканеспецифичные промоторы и/или энхансеры.

[0368] В одном варианте реализации генный переключатель содержит ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен рецептора экдизона, лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом рецептора экдизона, и домен трансактивации.

[0369] В другом варианте реализации генный переключатель содержит ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен рецептора экдизона, лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора и домен трансактивации.

[0370] В другом варианте реализации генный переключатель содержит ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен рецептора экдизона, химерный лигандсвязывающий домен ретиноидного Х-рецептора позвоночных/беспозвоночных и домен трансактивации.

[0371] В другом варианте реализации генный переключатель содержит первый полипептид, содержащий ДНК-связывающий домен (DBD), и первый лигандсвязывающий домен (LBD), и содержит второй полипептид, содержащий домен трансактивации (TAD) и второй LBD. В одном варианте реализации первый LBD представляет собой лигандсвязывающий домен EcR. В одном варианте реализации первый LBD представляет собой R×R, USP, химерный LBD или химерный R×R/USP LBD. В одном варианте реализации второй LBD представляет собой лигандсвязывающий домен EcR. В одном варианте реализации второй LBD представляет собой R×R, USP, химерный LBD или химерный R×R/USP LBD. В одном варианте реализации DBD представляет собой Gal4 ДНК-связывающий домен. В одном варианте реализации TAD представляет собой VP16 домен трансактивации. В одном варианте реализации генный переключатель содержит первый полипептид, содержащий Gal4 ДНК-связывающий домен и лигандсвязывающий домен EcR (LBD), и содержит второй полипептид, содержащий VP16 домен трансактивации и химерный R×R/USP лигандсвязывающий домен. В одном варианте реализации лигандсвязывающий домен EcR содержит одно или более замещений аминокислот по сравнению с соответствующей EcR полипептидной последовательностью дикого типа.

[0372] В другом варианте реализации генный переключатель содержит GAL4 ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен рецептора экдизона Choristoneura fumiferana, который сконструирован с содержанием мутаций V107I и Y127E последовательности рецептора экдизона Choristoneura fumifrana, которая приведена в публикации патента США №2006/0100416 A1, химерный ретиноидный лигандсвязывающий домен Х-рецептора Homo sapiens/Locusta migratoria и VP16 домен трансактивации.

[0373] Термин «V107I» означает, что аминокислотный остаток валина в позиции 107 в последовательности рецептора экдизона Choristoneura fumifrana, которая приведена в публикации патента США №2006/0100416 A1, заменен на изолейцин. Термин «Y127E» означает, что аминокислотный остаток тирозина в позиции 127 в последовательности рецептора экдизона Choristoneura fumifrana, которая приведена в публикации патента США №2006/0100416 A1, заменен на глутамат.

[0374] В другом варианте реализации клетка-хозяин дополнительно содержит полинуклеотид, кодирующий пептид, белок или полипептид, экспрессия которого регулируется генным переключателем. Промотор, который связывает комплекс генного переключателя, функционально связан с полинуклеотидом, кодирующим пептид, белок или полипептид, экспрессия которого регулируется генным переключателем.

[0375] В другом варианте реализации полинуклеотид, кодирующий белок или полипептид, экспрессия которого регулируется генным переключателем, содержится в том же полинуклеотиде, что и полинуклеотид, который кодирует один или более ДНК-связывающих доменов, лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактивации. Такие структурные элементы описаны, например, в публикации патента США №2009/0123441.

[0376] В другом варианте реализации полинуклеотид, кодирующий пептид, белок или полипептид, экспрессия которого регулируется генным переключателем, содержится в другом полинуклеотиде, чем полинуклеотид, который кодирует один или более ДНК-связывающих доменов, лигандсвязывающий домен, который связывает соединение согласно настоящему описанию, лигандсвязывающий домен, который димеризуется с лигандсвязывающим доменом, который связывает соединение согласно настоящему описанию, и домен трансактивации.

[0377] В одном варианте реализации генный переключатель является более чувствительным к соединению согласно настоящему описанию, чем к стероидному гормону. В другом варианте реализации генный переключатель является более чувствительным к соединению 1 согласно настоящему описанию, чем к другому диацилгидразиновому соединению.

[0378] Чувствительность генного переключателя к соединению согласно настоящему описанию по отношению к другому лиганду может быть легко определена посредством анализа in vitro, например, анализа in vitro, в котором применяют репортерный ген, такой как люцифераза светлячка. Примеры таких анализов in vitro хорошо известны специалистам в данной области. См., например, Karzenowski et al., BioTechniques 39: 191-200 (2005).

[0379] В одном варианте реализации полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, содержится в векторе. В одном варианте реализации вектор выбран из группы, состоящей из плазмиды, экспрессионного вектора, репликона, фагового вектора, космиды, вирусного вектора, липосомы, электрически заряженного липида (например, цитофектина), комплекса ДНК-белок и биополимера.

[0380] В другом варианте реализации вектор представляет собой вектор на основе ретровируса. В другом варианте реализации вектор выбран из группы, состоящей из адено-ассоциированного вирусного вектора, вектора на основе вируса оспы, вектора на основе бакуловируса, вектора на основе вируса осповакцины, вектора на основе вируса простого герпеса, вектора на основе вируса Эпштейна-Барра, вектора на основе аденовируса, вектора на основе геминивируса и вектора на основе колимовируса.

[0381] В одном варианте реализации клетка-хозяин представляет собой прокариотическую клетку-хозяин. В другом варианте реализации клетка-хозяин представляет собой эукариотическую клетку-хозяин. В других вариантах реализации клетка-хозяин представляет собой иммунную клетку (например, Т-клетку, В-клетку, природную клетку-киллер и подобные) или стволовую клетку (например, мезенхимальную стволовую клетку (MSC), стволовую клетку, полученную из эндометрия, эндометриальную регенеративную клетку и подобные).

[0382] В другом варианте реализации клетка-хозяин представляет собой клетку-хозяин позвоночных. В другом варианте реализации клетка-хозяин представляет собой клетку-хозяин беспозвоночных.

[0383] В другом варианте реализации клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из бактериальной клетки, грибной клетки, клетки дрожжей, клетки нематоды, клетки насекомого, клетки рыбы, клетки растения, клетки птицы, клетки водоросли, клетки животного и клетки млекопитающего.

[0384] В другом варианте реализации клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки данио, клетки курицы, клетки хомяка, клетки мыши, клетки крысы, клетки кролика, клетки кошки, клетки собаки, клетки быка, клетки козы, клетки коровы, клетки свиньи, клетки лошади, клетки овцы, клетки человекообразной обезьяны, клетки обезьяны, клетки шимпанзе и клетки человека.

[0385] В другом варианте реализации клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки Aspergillus, клетки Trichoderma, клетки Saccharomyces, клетки Pichia, клетки Candida, клетки Hansenula.

[0386] В другом варианте реализации клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки Synechocystis, клетки Synechococcus, клетки Salmonella, клетки Bacillus, клетки Acinetobacter, клетки Rhodococcus, клетки Streptomyces, клетки Escherichia, клетки Pseudomonas, клетки Methylomonas, клетки Methylobacter, клетки Alcaligenes, клетки Synechocystis, клетки Anabaena, клетки Thiobacillus, клетки Methanobacterium и клетки Klebsiella.

[0387] В другом варианте реализации клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки яблока, клетки арабидопсиса, клетки африканского просо, клетки банана, клетки ячменя, клетки боба, клетки свеклы, клетки фасоли мунго, клетки нута, клетки чили, клетки огурца, клетки баклажана, клетки стручковой фасоли, клетки кукурузы, клетки дыни, клетки пшена, клетки золотистой фасоли, клетки овса, клетки окры, клетки просо, клетки папайи, клетки арахиса, клетки гороха, клетки перца, клетки голубиного гороха, клетки ананаса, клетки фасоли, клетки картофеля, клетки тыквы, клетки риса, клетки сорго, клетки сои, клетки тыквы крупноплодной, клетки сахарного тростника, клетки сахарной свеклы, клетки подсолнечника, клетки батата, клетки чая, клетки томата, клетки табака, клетки арбуза, клетки гриба и клетки пшеницы.

[0388] В другом варианте реализации клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки хомяка, клетки мыши, клетки крысы, клетки кролика, клетки кошки, клетки собаки, клетки быка, клетки козы, клетки коровы, клетки свиньи, клетки лошади, клетки овцы, клетки обезьяны, клетки шимпанзе и клетки человека.

[0389] Трансформация клетки-хозяина хорошо известна в данной области и может быть достигнута разнообразными способами, включая, но не ограничиваясь ими, электропорацию, вирусную инфекцию, трансфекцию плазмиды (или вектора), трансфекцию, опосредованную невирусным вектором, трансформацию, опосредованную Agrobacterium, бомбардировку частицами и подобные. Экспрессия необходимых генных продуктов включает культивирование трансформированных клеток-хозяев в подходящих условиях и индуцирование экспрессии трансформированного гена. Условия протоколов культивирования и экспрессии генов в прокариотических и эукариотических клетках хорошо известны в данной области. Клетки могут быть собраны, и генные продукты выделены согласно протоколам, специфическим для данного генного продукта.

[0390] Кроме того, может быть выбрана клетка-хозяин, которая модулирует экспрессию введенного полинуклеотида или модифицирует и производит полипептидный продукт определенным необходимым образом. Разные клетки-хозяева имеют характерные и специфические механизмы трансляционного и посттрансляционного процессинга и модификации (например, гликозилирование, отщепление (например, сигнальной последовательности)) белков. Подходящие клеточные линии или системы хозяев могут быть выбраны для обеспечения необходимой модификации и процессинга экспрессированного чужеродного белка. Например, экспрессию в бактериальной системе можно применять для продуцирования негликозилированного ядерного белкового продукта. Однако полипептид, экспрессированный в бактериях, может иметь неправильную укладку. Экспрессия в дрожжах может дать гликозилированный продукт. Экспрессия в эукариотических клетках может повышать вероятность «нативного» гликозилирования и укладки гетерологичного белка. Более того, экспрессия в клетках млекопитающих может дать инструмент для реконституции или конституции активности полипептида. Кроме того, разные системы экспрессии вектор/хозяин могут в разной степени влиять на реакции процессинга, такие как протеолитическое расщепление.

[0391] В одном варианте реализации клетка-хозяин включает два или более ортогональных генных переключателя. Две или более индивидуально функционирующих системы генной регуляции называются «ортогональньши», когда (а) модуляция каждого из данных генных переключателей посредством их соответствующих лигандов приводит к измеримому изменению величины экспрессии гена, который регулируется данным переключателем, и (b) изменение является статистически значимо отличным от изменения экспрессии всех других генных переключателей, которые находятся в клетке-хозяине. В одном варианте реализации регуляция каждой индивидуально функционирующей системы генных переключателей вызывает изменение генной экспрессии по меньшей мере в 2 раза, в 3 раза, в 4 раза, в 5 раз, в 10 раз, в 20 раз, в 50 раз, в 70 раз, в 100 раз, в 200 раз, в 300 раз, в 400 раз или в 500 раз большее, чем все другие функционирующие генные переключатели в клетке-хозяине. Неограничивающие примеры ортогональных систем генных переключателей приведены в публикации патента США №US 2002/0110861 Al.

[0392] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения рака у субъекта, например, рака, выбранного из группы, состоящей из миелодисплазии, рака молочной железы, рака предстательной железы, лимфомы, рака кожи, рака поджелудочной железы, рака толстой кишки, меланомы, злокачественной меланомы, рака яичников, рака головного мозга, первичной карциномы головного мозга, рака головы и шеи, глиомы, глиобластомы, рака печени, рака мочевого пузыря, немелкоклеточного рака легкого, карциномы головы или шеи, карциномы молочной железы, карциномы яичников, карциномы легких, мелкоклеточной карциномы легких, опухоли Вильмса, карциномы шейки матки, карциномы семенников, карциномы мочевого пузыря, карциномы поджелудочной железы, карциномы желудка, карциномы толстой кишки, карциномы предстательной железы, карциномы мочеполовой системы, карциномы щитовидной железы, карциномы пищевода, миеломы, множественной миеломы, карциномы надпочечников, почечноклеточной карциномы, карциномы эндометрия, карциномы коры надпочечников, злокачественной инсулиномы поджелудочной железы, злокачественной нейроэндокринной карциномы, хориокарциномы, грибовидного микоза, злокачественной гиперкальциемии, гиперплазии шейки матки, лейкемии, острой лимфоцитарной лейкемии, хронической лимфоцитарной лейкемии, острой миелогенной лейкемии, хронической миелогенной лейкемии, хронической гранулоцитарной лейкемии, острой гранулоцитарной лейкемии, лейкемии ворсистых клеток, нейробластомы, рабдомиосаркомы, саркомы Капоши, истинной полицитемии, эссенциальной тромбоцитемии, болезни Ходжкина, неходжкинской лимфомы, саркомы мягких тканей, мезотелиомы, остеогенной саркомы, первичной макроглобулинемии и ретинобластомы и подобных.

[0393] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения расстройства, связанного с метаболизмом, у субъекта, например, метаболического расстройства, выбранного из группы, состоящей из дислипидемии, атеросклероза, резистентности к инсулину, диабета (например диабета I типа, диабета II типа, юношеского инсулиннезависимого сахарного диабета (MODY) и гестационного диабета), ожирения, нарушения толерантности к глюкозе, атероматозного заболевания, гипертензии, заболевания сердца (которое включает, но не ограничивается ими, ишемическую болезнь сердца, инсульт, сердечную недостаточность, коронарную недостаточность и высокое кровяное давление), гиперлипидемии, нарушения толерантности к глюкозе, резистентности к инсулину, гипергликемии, гиперинсулинемии, метаболического синдрома X (или синдрома X или синдрома резистентности к инсулину или синдрома Ривена или метаболического сердечнососудистого синдрома), гипертензии, хронической усталости, ускоренного старения, дегенеративного заболевания, эндокринных нарушений при старении, G_ml ганглиозидоза, болезни Моркио-Б, болезни Краббе, болезни Фабри, болезни Гоше, болезни Тея-Сакса, болезни Сандгоффа, фукозидоза, расстройств метаболизма углеводов (например, нарушения отложения гликогена), расстройств метаболизма аминокислот (например, фенилкетонурйи, болезни кленового сиропа, глутаровой ацидемии типа 1), расстройств метаболизма органических кислот (например, алкаптонурии), расстройств окисления жирных кислот и митохондриального метаболизма (например, дефицита среднецепочечной ацилдегидрогеназы), расстройств метаболизма порфирина (например, острой интермиттирующей порфирии), расстройств метаболизма пурина или пиримидина (например, синдрома Леша-Найхана), расстройств метаболизма стероидов (например, врожденной гиперплазии надпочечников), расстройств митохондриальной функции (например, синдрома Кирнса-Сейра) и расстройств функций пероксисом (например, синдрома Цельвегера).

[0394] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения заболевания почек у субъекта. В одном варианте реализации заболевание почек представляет собой почечную недостаточность. В другом варианте реализации заболевание почек представляет собой хроническую почечную недостаточность.

[0395] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения анемии у субъекта. В одном варианте реализации анемия представляет собой анемию, связанную с заболеванием почек, например, почечной недостаточностью или хронической почечной недостаточностью. В другом варианте реализации анемия связана с противораковой терапией, например, одним или более химиотерапевтическими агентами. В другом варианте реализации анемия связана с пожилым возрастом. В другом варианте реализации анемия связана с нарушением функции легких. В другом варианте реализации анемия связана с миелодисплазией. В другом варианте реализации анемия связана с лучевой терапией. В другом варианте реализации анемия связана с критическим заболеванием. В другом варианте реализации анемия связана с заболеванием сердца. В другом варианте реализации анемия представляет собой не заболевание сердца. Неограничивающие типы «заболевания сердца» представляют собой застойную сердечную недостаточность, гипоксию, ишемическую болезнь сердца, гипертоническую болезнь сердца, заболевание коронарной артерии, заболевание периферических сосудов и ишемические кардиологические явления, например, инфаркт миокарда, инфаркт, сердечную недостаточность, аритмию, перфорацию миокарда, перикардит, кардиогенный шок, тромбоз, эмболию, атеросклероз и артериальный стеноз.

[0396] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения аутоиммунного расстройства у субъекта, например, аутоиммунного расстройства, выбранного из группы, состоящей из ахлоргидрического аутоиммунного активного хронического гепатита, острого рассеянного энцефаломиелита, острого геморрагического лейкоэнцефалита, болезни Аддисона, гаммаглобулинемии, агаммаглобулинемий, гнездной алопеции, бокового амиотрофического склероза, анкилозирующего спондилита, анти-ГБМ/ТБМ нефрита, антифосфолипидного синдрома, антисинтетазного синдрома, артрита, атопической аллергии, атопического дерматита, апластической анемии, аутоиммунной кардиомиопатии, аутоиммунной гемолитической анемии, аутоиммунного гепатита, аутоиммунного заболевания внутреннего уха, аутоиммунного лимфопролиферативного синдрома, аутоиммунной периферической нейропатии, аутоиммунного панкреатита, аутоиммунного полиэндокринного синдрома типов I, II и III, аутоиммунного прогестеронового дерматита, аутоиммунной тромбоцитопенической пурпуры, аутоиммунного увеита, болезни Бало/концентрического склероза Бало, синдрома Бехчета, болезни Бергера, энцефалита Бикерстаффа, синдрома Блау, буллезного пемфигоида, болезни Кастлемана, синдрома хронической усталости и иммунной дисфункции, хронической воспалительной демиелинизирующей полинейропатии, мультифокального хронического рецидивирующего остеомиелита, синдрома Черджа-Стросса, рубцующегося пемфигоида, глютеновой болезни, синдрома Когана, синдрома холодовой агглютинации, дефицита компонента 2 системы комплемента, краниального артериита, CREST-синдрома, болезни Крона, синдрома Кушинга, кожного лейкоцитокластического ангиита, болезни Дего, герпетиформного дерматита, дерматомиозита, сахарного диабета 1 типа, диффузного кожного системного склероза, синдрома Дресслера, дискоидной красной волчанки, экземы, энтезит-ассоциированного артрита, эозинофильного фасциита, приобретенного буллезного эпидермолиза, узловой эритемы, эссенциальной криоглобулинемии смешанного типа, синдрома Эвана, прогрессирующей оссифицирующей фибродисплазии, фибромиозита, фиброзирующего альвеолита, гастрита, гастроинтестинального пемфигоида, гигантоклеточного артериита, синдрома Гудпасчера, болезни Грейвса, синдрома Гийена-Барре (СГБ), энцефалита Хашимото, тиреоидита Хашимото, гемолитической анемии, пурпуры Геноха-Шенлейна, гестационного герпеса, синдрома Хьюза (или антифосфолипидного синдрома), гипогаммаглобулинемии, идиопатических воспалительных демиелинизирующих заболеваний, идиопатического легочного фиброза, идиопатической тромбоцитопенической пурпуры, IgA нефропатии (или болезни Бергера), миозита с включенными тельцами, воспалительной демиелинизирующей полинейропатии, ювенильного идиопатического артрита, ювенильного ревматоидного артрита, миастенического синдрома Ламберта-Итона, лейкоцитокластического васкулита, красного плоского лишая, склерозирующего лишая, IgA зависимого линейного дерматоза (LAD), болезни Лу Герига, волчаночного гепатита, красной волчанки, синдрома Маджида, болезни Меньера, микроскопического полиангиита, синдрома Миллера-Фишера, смешанного заболевания соединительной ткани, болезни Муха-Хаберманна, синдрома Макла-Уэлса, множественной миеломы, тяжелой миастении, миозита, нарколепсии, оптиконейромиелита (также болезни Девика), глазного рубцового пемфигоида, тиреоидита Орда, палиндромного ревматизма, PANDAS (детские аутоиммунные нервно-психические расстройства, связанные с Streptococcus), паранеопластической мозжечковой дегенерации, паранеопластической мозжечковой дегенерации, синдрома Парри Ромберга, синдрома Персонейдж-Тернера, парспланита, пузырчатки, пузырчатки обыкновенной, злокачественной анемии, перивенозного энцефаломиелита, POEMS-синдрома, узелкового полиартрита, ревматической полимиалгии, полимиозита, первичного билиарного цирроза, псориаза, псориатического артрита, гангренозной пиодермии, истинной эритроцитарной аплазии, энцефалита Расмуссена, феномена Рейно, рецидивирующего полихондрита, синдрома Рейтера, ретроперитонеального фиброза, ревматоидного артрита, ревматоидной лихорадки, синдрома Шмидта, синдрома Шницлера, склерита, синдрома Шегрена, спондилоартропатии, синдрома липкой крови, болезни Стилла, подострого бактериального эндокардита (SBE), синдрома Сушаца, синдрома Свита, хореи Сиденгама, симпатической офтальмии, артериита Такаясу, темпорального артериита, синдрома Толоса-Ханта, поперечного миелита, язвенного колита, недифференцированного заболевания соединительной ткани, недифференцированной спондилоартропатии, васкулита, гранулематоза Вегенера, синдрома Вильсона и синдрома Вискотта-Олдрича.

[0397] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения расстройства зрения у субъекта, например, расстройства зрения, выбранного из группы, состоящей из глаукомы, включая открытоугольную глаукому (например, первичную открытоугольную глаукому, пигментную глаукому и эксфолиативную глаукому, глаукому с низким давлением), закрытоугольную глаукому (Angle Closure Glaucoma) (также клинически известную как закрытоугольная глаукома (closed angle glaucoma), узкоугольная глаукома, глаукома, вызванная зрачковым блоком, и глаукома, вызванная блоком ресничного тела) (например, острую закрытоугольную глаукому и хроническую закрытоугольную глаукому), аниридической глаукомы, врожденной глаукомы, ювенильной глаукомы, глаукомы, индуцированной хрусталиком, неоваскулярной глаукомы (например, с применением векторов, составленных из ловушки фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), фактора роста пигмента (PDGF), эндостатина, ангиостатина или ангиопоэтина-1), посттравматической глаукомы, стероид-индуцированной глаукомы, глаукомы синдрома Стерджа-Вебера и увеит-индуцированной глаукомы, диабетической ретинопатии (например, с применением векторов, составленных из ловушки VEGF, PDGF, эндостатина, ангиостатина или ангиопоэтина-1), макулярной дегенерации (например, векторами, составленными из ловушки VEGF, PDGF, эндостатина, ангиостатина или ангиопоэтина-1, АТФ-связывающей кассеты члена 4 подсемейства А), макулярной дегенерации (например, с применением векторов, составленных из ловушки VEGF, PDGF, эндостатина, ангиостатина или ангиопоэтина-1, АТФ-связывающей кассеты члена 4 подсемейства А), хориоидальной неоваскуляризации, (например, с применением векторов, составленных из ловушки VEGF, PDGF, эндостатина, ангиостатина или ангиопоэтина-1), пропотевания жидкости из сосудов и/или ретинальной эдемы, бактериального конъюнктивита, грибкового конъюнктивита, вирусного конъюнктивита, увеита, роговичных преципитатов, макулярной эдемы (например, с применением векторов, составленных из ловушки VÈGF, PDGF, эндостатина, ангиостатина или ангиопоэтина-1), воспалительного ответа после имплантации интраокулярной линзы, синдромов увеита (например, хронического иридоциклита или хронического эндофтальмита), ретинального васкулита (например, как видно при ревматоидном артрите, ювенильном ревматоидном артрите, системной красной волчанке, прогрессирующем системном склерозе, узелковом полиартрите, гранулематозе Вегенера, темпоральном артериите, болезни Адамантиада-Бехчета, Шегрена, рецидивирующем полихондрите и HLA-В27-ассоциированном спондилите), саркоидоза, болезни Илса, острого ретинального некроза, синдрома Фогта Коянаги Харада, глазного токсоплазмоза, лучевой ретинопатии, пролиферативной витреоретинопатии, эндофтальмита, окулярных глауком (например, воспалительных глауком), неврита зрительного нерва, ишемической оптической нейропатии (например, векторами, составленными из аллотопной единицы 4 НАДН-дегидрогеназы), тиреоидной орбитопатии, орбитальной псевдоопухоли, синдрома диспергирования пигмента (пигментной глаукомы), склерита, эписклерита, хороидопатий (например, синдрома «белой точки», включая, но не ограничиваясь, острый задний мультифокальный плакоидный синдром), ретинопатии (например, кистозной макулярной эдемы, центральной серозной хориоретинопатии и синдрома предполагаемого гистоплазмоза глаз (например, векторами, составленными из нейротрофического фактора, полученного из глиальной клетки, периферина-2)), ретинальной васкулярной болезни (например, диабетической ретинопатии, болезни Коутса и артериальной макроаневризмы сетчатки), окклюзии артерии сетчатки, окклюзии вены сетчатки, ретинопатии недоношенных, пигментной дистрофии сетчатки (например, векторами, составленными из белка, специфичного ретинального пигмента 65КДа), семейной эксудативной витреоретинопатии (FEVR), идиопатической полипоидной хориоидальной васкулопатии, эпиретинальной макулярной мембраны и катаракты.

[0398] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения расстройства зрения у субъекта, причем расстройство зрения выбрано из группы, состоящей из глаукомы, влажной и сухой возрастной макулярной дегенерации, диабетической ретинопатии и макулярного отека.

[0399] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения расстройства крови у субъекта, например, расстройства крови, выбранного из группы, состоящей из расстройства крови, выбранного из группы, состоящей из анемии, нарушений, связанных с повышенной кровоточивостью и свертываемостью крови (например, синдрома диссеминированного внутрисосудистого свертывания (ДВС-синдрома), гемофилии, пурпуры Шенлейна-Геноха, наследственной геморрагической телеангиэктазии, тромбоцитопении (ITP, ТТР), тромбофилии, болезни фон Виллебранда), лейкемий (например, острой лимфоцитарной лейкемии, острой миелолейкемии, хронической лимфолейкемии, хронической миелолейкемии), лимфом (например, лимфомы Ходжкина, неходжкинской лимфомы), миелопролиферативных расстройств (например, миелофиброза, полицитемии Вера, тромбоцитемии), расстройств плазматических клеток (например, макроглобулинемии, моноклональной гаммапатии неясного генеза, множественной миеломы), расстройств селезенки, расстройств белых кровяных клеток (например, расстройства базофилов, расстройства эозинофилов, лимфоцитопении, расстройств моноцитов, нейтропении, нейтрофильного лейкоцитоза), тромбоза, тромбоза глубоких вен (ТГВ), гемохроматоза, меноррагии, серповидно-клеточной анемии и талассемии.

[0400] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения неврологического расстройства у субъекта, например, неврологического расстройства, выбранного из группы, состоящей из болезни Гоше, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, бокового амиотрофического склероза (БАС), рассеянного склероза (MS), болезни Хантингтона, атаксии Фридриха, умеренного когнитивного нарушения, церебральной амилоидной ангиопатии, паркинсонизма, болезни телец Леви, лобно-височной деменции (FTD), множественной системной атрофии (MSA), прогрессирующего надъядерного паралича и двигательных расстройств (включая атаксию, церебральный паралич, хореоатетоз, дистонию, синдром Туретта, билирубиновую энцефалопатию) и треморных расстройств и лейкодистрофии (включая адренолейкодистрофию, метахроматическую лейкодистрофию, болезнь Канавана, болезнь Александера, болезнь Пелицеуса-Мерцбахера), нейронального цероидного липофусциноза, телеангиоэктатической атаксии, синдрома Ретта, альфа-синуклеопатии (например, болезни телец Леви, множественной системной атрофии, болезни Галлервордена-Шпатца или лобно-височной деменции), болезни Ниманна-Пика типа С (NPCD), спиноцеребеллярной атаксии типа 1, типа 2 и типа 3 и дентато-рубро-паллидо-льюисовой атрофии (DRLPA).

[0401] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения расстройства легких у субъекта, например, расстройства легких, выбранного из группы, состоящей из астмы, ателектаза, бронхита, COPD (хронического обструктивного заболевания легких), эмфиземы, рака легкого, мезотелиомы, пневмонии, асбестоза, аспергилломы, аспергиллеза, острого инвазивного аспергиллеза, бронхоэктаза, облитерирующего бронхиолита с организующейся пневмонией (ВООР), эозинофильной пневмонии, некротической пневмонии, плеврального выпота, пневмокониоза, пневмоторакса, легочного актиномикоза, легочно-альвеолярного протеиноза, легочной формы сибирской язвы, легочной артериовенозной мальформации, легочного фиброза, легочной эмболии, легочного гистиоцитоза X (эозинофильной гранулемы), легочной гипертензии, отека легких, легочного кровотечения, легочного нокардиоза, туберкулеза легких, окклюзионного поражения легочных вен, ревматоидного заболевания легких, саркоидоза, лучевого фиброза, пневмонита гиперчувствительности, острого респираторного дистресс-синдрома (ОРДС), младенческого респираторного дистресс-синдрома, идиопатического фиброза легких, идиопатической интерстициальной пневмонии, лимфангиолейомиоматоза, легочного лангергансоклеточного гистиоцитоза, легочного альвеолярного протеиноза, синусита, тонзиллита, среднего отита, фарингита, ларингита, гамартомы легких, легочной секвестрации, врожденной кистозной аденоматозной мальформации (ССАМ) и муковисцидоза.

[0402] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения ревматологического расстройства у субъекта, например, ревматологического расстройства, выбранного из группы, состоящей из системной красной волчанки, дерматомиозита, склеродермии, системного некротизирующего артериита, кожного некротизирующего венулита, ревматоидного артрита, синдрома Шегрена, синдрома Рейно, синдрома Рейтера, артрита, псориатического артрита, серонегативной спондилоартропатии, синдрома Шегрена, системного склероза, дерматомиозита/полимиозита, смешанного заболевания соединительной ткани и анкилозирующего спондилита.

[0403] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения инфекционного заболевания у субъекта, например, инфекционного заболевания, выбранного из группы, состоящей из грибковых заболеваний, таких как дерматофитоз (например, трихофитоза, стригущего лишая или опоясывающего лишая), нога атлета, паронихия, отрубевидный лишай, эритразма, интертриго, грибковый пеленочный дерматит, кандидозный вульвит, кандидозный баланит, наружный отит, кандидоз (кожный и кожно-слизистый), хронический кандидоз слизистых (например, молочница и вагинальный кандидоз), криптококкоз, геотрихоз, трихоспороз, аспергиллез, пенициллез, фузариоз, зигомикоз, споротрихоз, хромомикоз, кокцидиоидомикоз, гистоплазмоз, бластомикоз, паракокцидиоидомикоз, псевдоалешериоз (pseudallescheriosis), мицетома, грибковый кератит, отомикоз, пневмоцистоз и фунгемия, инфекции Acinetobacter, актиномикоз, африканской сонной болезни, СПИДа (синдрома приобретенного иммунодефицита человека), амебиаза, анаплазмоза, сибирской язвы, инфекции Arcanobacterium haemolyticum, аргентинской геморрагической лихорадки, аскаридоза, аспергиллеза, инфекции atrovirus, бабезиоза, инфекции Bacillus cereus, бактериальной пневмонии, бактериального вагиноза (BV), инфекции Bacteroides, балантидоза, инфекции Baylisascaris, ВК вирусной инфекции, черной пьедры, инфекции Blastocystis hominis, инфекции Borrelia, ботулизма (и ботулизма младенцев), бразильской геморрагической лихорадки, бруцеллеза, инфекции Burkholderia, язвы Бурули, кальцивирусной инфекции (норовирус и саповирус), кандидоза, болезни кошачьей царапины, флегмоны, болезни Чагаса (американского трипаносомоза), венерической язвы, ветряной оспы, хламидиоза, холеры, хромобластомикоза, клонорхоза, Clostridium difficile, кокцидиоидомикоза, колорадской клещевой лихорадки (CTF), простуды (острого вирусного ринофарингита; острой вирусной инфекции верхних дыхательных путей), болезни Крейтцфельда-Якоба (CJD), криптококкоза, криптоспоридиоза, синдрома "блуждающей личинки" (CLM), лихорадки денге, диэнтамебиаза, дифтерии, дифиллоботриоза, дифиллоботриоза, дракункулеза, геморрагической лихорадки Эбола, эхинококкоза, эрлихиоза, энтеробиоза (инфекции остриц), инфекции Enter ococcus, энтеровирусной инфекции, эпидемического сыпного тифа, инфекционной эритемы, внезапной экзантемы, фасциолопсидоза, фасциолеза, фатальной семейной бессонницы (FFI), филяриоза, инфекции Fusobacterium, газовой гангрены (клостридиального мионекроза), геотрихоза, синдрома Герстманна-Штраусслера-Шейнкера (GSS), лямблиоза, сапа, гнатостомоза, гонореи, паховой гранулемы (донованоза), стрептококковой инфекции группы А, стрептококковой инфекции группы В, Haemophilus influenzae, заболевания кистей рук, стоп и полости рта (HFMD), хантавирусного легочного синдрома (HPS), инфекции Helicobacter Pylori инфекции, уремического синдрома (HUS), геморрагической лихорадки с почечным синдромом (HFRS), гепатита А, В, С, D, Е, простого вируса герпеса, гистоплазмоза, анкилостомоза, бокавирусной инфекции, эрлихиоза ewingii человека, гранулоцитарного анаплазмоза человека (HGA), гранулоцитарного анаплазмоза человека (HGA), моноцитарного эрлихиоза человека, вирусной инфекции папилломы человека (ВПЧ), вирусной инфекции парагриппа человека, гименолепидоза, вирусного инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барра (Mono), инфлюэнца (гриппа), изоспороза, болезни Кавасаки, кератита, инфекции Kingella kingae, куру, лихорадки Ласса, легионеллеза (болезни легионеров), легионеллеза (лихорадки Понтиак), лейшманиоза, лепры, лептоспироза, листериоза, болезни Лайма (боррелиоза Лайма), лимфатического филяриоза (слоновой болезни), лимфоцитарного хориоменингита, малярии, геморрагической лихорадки Марбург (MHF), кори, мелиоидоза (болезни Витмора), менингита, менингококковой болезни, метагонимоза, микроспоридиоза, контагиозного моллюска (МС), инфекционного паротита, сыпного тифа (эндемического сыпного тифа), пневмонии, вызванной микоплазмой, мицетомы, миаза, конъюнктивита новорожденных (офтальмии новорожденных), (нового) варианта болезни Крейтцфельда-Якоба (vCJD, nvCJD), нокардиоза, онхоцеркоза (речной слепоты), паракокцидиоидомикоза (южноамериканского бластомикоза), парагонимоза, пастереллеза, педикулеза волосистой части головы (головные вши), нательного педикулеза (нательные вши), лобкового педикулеза (лобковые вши, плошицы), воспалительного заболевания органов малого таза (PID), коклюша (судорожного кашля), чумы, пневмококковой инфекции, пневмоцистной пневмонии (PCP), пневмонии, полиомиелита, полиомиелита, инфекции Prevotella, первичного амебного менингоэнцефалита (ПАМ), прогрессирующей многоочаговой лейкоэнцефалопатии, орнитоза, австралийской лихорадки Q, бешенства, лихорадки от укуса крыс, респираторной синцитиальной вирусной инфекции, риноспоридиоза, inovirus инфекции, риккетсиозной инфекции, риккетсиоза, лихорадки долины Рифт (RVF), пятнистой лихорадки Скалистых гор (RMSF), ротавирусной инфекции, краснухи, сальмонеллеза, ТОРС (тяжелого острого респираторного синдрома), чесотки, шистосомоза, сепсиса, шигеллиоза (бактериальной дизентерии), опоясывающего лишая (Herpes zoster), оспы (натуральной оспы), споротрихоза, стафилококкового пищевого отравления, стафилококковой инфекции, стронгилоидоза, сифилиса, тениидоза, тетануса (спазма жевательной мышцы), дерматомикоза бороды и усов (зуда Барбера), глубокой трихофитии (стригущего лишая головы), дерматомикоза (стригущего лишая тела), пахового дерматомикоза (зуда Джока), дерматомикоза кистей (стригущего лишая рук), черного лишая, дерматофитного онихомикоза (онихомикоза), разноцветного лишая (отрубевидного лишая), токсокароза (синдрома larva migrans висцеральной формы (VLM)), токсоплазмоза, трихинеллеза, трихомониаза, трихуриаза (инфекции власоглавами), туберкулеза, туляремии, инфекции Ureaplasma urealyticum, венесуэльского конского энцефалита, венесуэльской геморрагической лихорадки, вирусной пневмонии, лихорадки Западного Нила, белой пьедры (Tinea blanca), инфекции Yersinia pseudotuberculosis, иерсиниоза, желтой лихорадки и зигомикоза.

[0404] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения ангиоэдемы у субъекта. В другом варианте реализации ангиоэдема представляет собой врожденную ангиоэдему.

[0405] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения заболевания, состояния или расстройства, выбранного из группы, состоящей из сепсиса, гиперкоагуляции, легочной дисфункции, гипоксемии, геморрагического панкреатита, инфаркта миокарда, трансплантации легких, травмы, термической травмы и пропотевания жидкости из сосудов у субъекта.

[0406] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения заболевания, состояния или расстройства, в котором ингибирование калликреина обеспечивает терапевтически благоприятный эффект. Примеры таких заболеваний, состояний или расстройств включают, но не ограничиваются ими, заболевания, состояния или расстройства контактной системы. См., например, Shariat-Madar et al., Innate Immunity, vol. 10, no. 1, 3-13 (2004) и Frick, et al., EMBO J., (2006) 25, 5569-5578 (2006). В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения заболевания, состояния или расстройства выбранного из группы, состоящей из атеротромбоза, ишемической болезни сердца, болезни Альцгеймера, воспалительного заболевания кишечника (например, болезни Крона), пропотевания жидкости из сосудов, синдрома острой дыхательной недостаточности и брадикинин-опосредованного воспаления у субъекта.

[0407] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения заболевания, состояния или расстройства, в котором ингибирование рецептора брадикинина В2 обеспечивает терапевтически благоприятный эффект. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения заболевания, состояния или расстройства, выбранного из группы, состоящей из гломерулосклероза, болезни Альцгеймера, церебральной эдемы, пропотевания жидкости из сосудов, синдрома острой дыхательной недостаточности, боли, воспаления, травмы, ожогов, шока, аллергии и сердечнососудистого заболевания у субъекта.

[0408] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения инфекционного заболевания у субъекта, например, инфекционного заболевания, выбранного из группы, состоящей из респираторного заболевания крупного рогатого скота, респираторного заболевания свиней, птичьего гриппа, инфекционного бронхита птиц, губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота, лейшманиоза собак, хронического акобальтоза, вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), гепатита, гепатита А, гепатита В, гепатита С, классической чумы свиней, эхинококка, энзоотической пневмонии, FIP, эпизоотического стоматита, эпизоотического легочного аденоматоза овец, меди-висна, мастита у животных, дерматита, вызванного Microsporum canis (заболевания животных), чумы мелких жвачных животных, оспы, болезни клюва и перьев у попугаев, бешенства, средиземноморской лихорадки (бруцеллеза) или болезни Банга или ундулирующей лихорадки, мальтийской лихорадки, инфекционного аборта, эпизоотического аборта, пищевого отравления, вызванного сальмонеллой, кишечного паратифоза, бактериальной дизентерии, псевдотуберкулеза, чумы, чумной лихорадки, туберкулеза, вибриоза, листериоза, болезни Вейля (лептоспироза) или желтушного лептоспироза, иктерогеморрагической лихорадки (Leptospira icterohaemorrhagiae), молочной лихорадки (L. hardjo), возвратной лихорадки, клещевой возвратной лихорадки, спирохетовой лихорадки, лихорадки бродяг, сыпного тифа, артрита Лайма, синдрома Баннварта (болезни лайма), клещевого менингополиневрита, хронической мигрирующей эритемы, вибриоза, колибактериоза, колитоксемии, инфекционной диареи, отека кишечника у свиней, брюшного паратифа, стафилококкового пищевого отравления, стафилококкового гастроэнтерита, коронавируса собак (CCV) или парвовирусного энтерита собак, инфекционного вирусного перитонита кошек, вирусного трансмиссивного гастроэнтерита (TGE), болезни «красный рот» (ERMD), инфекционного гемопоэтического некроза (IHN), актинобациллярной плевропневмонии свиней (Haemophilus), болезни Хансена, стрептотрихоза, микозного дерматоза овец, мелиоидоза, болезни Уитмора, болезни Франциска, лихорадки оленьей мухи, кроличьей лихорадки, болезни О'Хара, стрептобациллярной лихорадки, хейверхиллской лихорадки, эпидемической суставной эритемы, содоку, дорожной лихорадки, геморрагической септицемии, орнитоза, попугайной лихорадки, хламидиоза, североамериканского бластомикоза, чикагской болезни, болезни Гилкриста, болезни кошачьей царапины, доброкачественного лимфоретикулеза, доброкачественного небактериального лимфаденита, бациллярного ангиоматоза, бациллярной печеночной пурпуры, квадрилатеральной лихорадки, балканского гриппа (Balkan influenza), балканского гриппа (Balkan grippe), лихорадки скотобоен, клещевой лихорадки, пневмориккетсиоза, американской сыпной лихорадки, клещевого сыпного тифа, везикулярного риккетсиоза, пятнистой лихорадки Кью-Гардена, блошиного тифа, эндемичного сыпного тифа, городского тифа, трихофитии, дерматофитоза, стригущего лишая, трихофитоза, микоспории, зуда Джока, ноги атлета, Sporothrix schenckii, заболевания, вызываемого диморфными грибами, криптококкоза и гистоплазмоза, доброкачественной эпидермальной обезьяньей оспы, БЭМП (ВЕМР), герпесной инфекции обезьян, инфекции вируса В обезьян, венесуэльского конского энцефалита, эпидемического летаргического энцефалита типа С, желтой лихорадки, черной рвоты, хантавирусного легочного синдрома, корейской геморрагической лихорадки, эпидемической нефропатии, эпидемической геморрагической лихорадки, геморрагического нефрозонефрита, лимфоцитарного хориоменингита, калифорнийского энцефалита/энцефалита, вызванного вирусом Ла Кросс, африканской геморрагической лихорадки, болезни зеленых мартышек или верветок, гидрофобии, водобоязни, инфекционного гепатита, эпидемического гепатита, эпидемической желтухи, краснухи, кори, гриппа свиней и лошадей, чумы домашней птицы, болезни Ньюкасла, пироплазмоза, токсоплазмоза, африканской сонной болезни, трипаносомоза Гамбии, родезийского трипаносомоза, болезни Шагаса, болезни Шагаса-Маца, южноамериканского трипанозомоза, дизентерийной амебы, балантидной дизентерии, криптоспоридиоза, гиардиоза, кожного лейшманиоза: кожного лейшманиоза (Chiclero ulcer), эспундии, pianbols, кожно-слизистого лейшманиоза и тропической гранулемы (в Америке); восточной язвы, алеппского фурункула (в Старом Свете); багдадского фурункула, делийского фурункула, язвы Бауру, висцерального лейшманиоза: кала-азар, микроспоридиоза, анизакиаза, трихинеллеза, ангиостронгилеза, эозинофильного менингита или менингоэнцефалита (A. cantonensis), брюшного ангиостронгилеза (А. costaricensis), анкилостомоза, некатороза, анкилостомидоза, капилляриоза, бругиоза, токсокароза, эзофагостомоза, стронгилоидоза, трихостронгилеза, аскаридоза, дифиллоботриоза, спарганоза, эхинококкоза, эхинококковой болезни, эхинококкового гранулеза, кистозного эхинококкоза, инфекции солитера и шистосомы.

[0409] В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту для лечения хронического заболевания почек, остеоартрита, онкологии, вирусной инфекции верхних дыхательных путей, плазмоклеточного стоматита кошек, эзинофильной гранулемы кошек, вирусной инфекции лейкемии кошек, вирусной инфекции собачьей чумки, системных грибковых инфекций, кардиомиопатии и мукополисахаридоза VII у субъекта.

[0410] В способах согласно настоящему описанию генный переключатель регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего пептид, белок или полипептид. В одном варианте реализации генный переключатель регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего пептид, белок или полипептид, представляющий интерес с терапевтической точки зрения для лечения заболевания, состояния или расстройства у субъекта, например, человека. В другом варианте реализации представляющий интерес пептид, белок или полипептид выбран из группы, состоящей из Her-2/neu (ERBB2/c-erbB-2), остеокальцина, стромелизина-1, простатоспецифического антигена, натрий-йодидного симпортера человека, H19, IF-1, IGF-2, тимозина β15, Т-клеточного фактора, хрящевого белка, чувствительного к ретиноевой кислоте, простазина, каталитической субъединицы теломеразы, циклина-А, мидкина; с-erbB-2, простатоспецифического мембранного антигена, р51, РНК-теломеразы, простатической кислой фосфатазы, PCA3dd3, DF3/MUC1, hex II, циклооксигеназы-2, супер ΡSA, skp2, PRL-3, CA125/M17S2, IAI.3B, CRG-L2, TRPM4, RTVP, TARP, теломеразной обратной транскриптазы, A4 амилоидного белка, предшественника амилоидного β-белка, предшественника A4 амилоидного белка болезни Альцгеймера, нейропептида FF, элементов стресса эндоплазматического ретикулума, урокортина II, тирозин гидроксилазы, фактора комплемента 3; сывороточного амилоида A3, тканевого ингибитора металлопротеазы-3 (TIMP-3), рецептора фактора некроза опухолей р75, фактора некроза опухолей-α, TRPM4, RTVP, TARP, теломеразной обратной транскриптазы, A4 амилоидного белка, предшественника амилоидного β-белка, предшественника A4 амилоидного белка болезни Альцгеймера, нейропептида FF, элементов стресса эндоплазматического ретикулума, урокортина II, тирозин гидроксилазы, фактора комплемента 3; сывороточного амилоида A3, тканевого ингибитора металлопротеазы-3 (TIMP-3), рецептора фактора некроза опухолей р75, фактора некроза опухолей-α, рецептора, активируемого пролифератором пероксисом /IIA-1 секреторной непанкреатической фосфолипазы А2, SOCS-3, SR-BI, Ob, сайт-1 протеазы, TIGR, VL30, переносчика возбуждающих аминокислот-2, MDTS9, LIM, пирролин 5-карбоксилат редуктазы, SIM2, Вах, Fas, bbc3, PINK-1, тропонина Т, myoD, актина, 22α гладкой мускулатуры, атрофина, миостатина, тяжелой цепи миозина гладкой мускулатуры, сердечного белка с анкириновым повтором, MLP, смутелина, MYBPC3, Tα1 α-тубулина, молекулы межклеточной адгезии -4 (ICAM-4), β1 субъединицы рецептора γ-аминомасляной кислоты типа А, β2-субъединицы нейронного никотинового рецептора ацетилхолина, пресенилина-1, кальций-кальмодулин-зависимой киназы IIα, рецептора CRF2α, фактора роста нервов, рецептора GLP-2, трансглутаминазы типа I, К14, стеароил-КоА десатуразы, Megsin, пролактина, GDF-9, PSP94, NRL, NGAL, длинного сывороточного кислого белка, амилоида А из молока млекопитающих (mammary associated amyloid А), эндотелина-1, серглицина, молекулы адгезии тромбоцит-эндотелиальных клеток -1 (РЕСАМ-1), рецепторной тирозинкиназы Tie, KDR/flk-1, эндоглина, CCR5, CD11d, гликопротеина тромбоцитов IIb, препроэндотелина-1, интерлейкин-18 связывающего белка, CD34, Тес тирозинкиназы, MLH1, MSH2, MSH6, PMS1, APC, LEF-1, рецептора F2, TGF-β рецептора типа II, EYA4, РСА3, К2, PROST 03, РСАМ-1, PCADM-1, PCA3dd3, PCAV, РАсР, АТВ₀, CSA-1, SYG972, Urb-ctf, BCU399, ТВХ2, Cyr61, DIAPH3, ВЕНАВ, IL-8, BLSA, ВР1, DAP-киназы, НОХА9, ARP, Nbk, CD43, β7-hcG, β6-hCG, β6e-hCG, β5-hCG, β8-hcG, β3-hCG, MTA1s, Old-35, Old-64, LAGE-1, CIF150/hTAFII150, P65 онкофетального белка, теломеразы, CYP1B1, 14-3-3σ, NES1, CAR-1, HMGI, MAG, ELL2, эфрина B2, WAF1, CIF130, C35, BMP2, BUB3, полимеразы каппа, EAG1, EAG2, HMG I, HLTF, Barx2, Pp 32r1, BMP4, TS10q23,3, ядерного белка, связанного с веретеном (Nuclear spindle-associating protein), PFTAIRE, SEMA3B, MOGp, фортилина, IGFBP-3, полигомеотического 2, PNQALRE, SCN5A, miR15, miR16, Headpin, PAOh1/SMO, Hippo, Mst2, PSMA-like, JAB1, NF-AT, P28ING5, MTG16, ErbB-2, HDAC9, GPBP, MG20, KLF6, ARTS1, Dock 3, аннексина 8, MH15, DELTA-N p73, RapR6, StarDIO, Ciz1, HLJ1, RapR7, A34, Sef, Killin, SGA-1M, рецептора TGFβ типа II, GCA-ассоциированных генов, PRV-1, Vezf1, MLP, VEGI, PRO256, AOP2, ремоделина, фосфодиэстеразы 4D, рецептора простагландина подтипа ЕР3, CARP, HOP, PLTP, UCP-2, FLJ11011, коданина-1, резистина, архипелина, нейронатина, Ncb5or, 7В2, PTHrP, РЕХ, KChIP1, SLIT-3, CX3CR1, SMAP-2, IC-RFX, E2IG4, UCP2, Ob рецептора, Ob, Dp1, NRG-1, синапсина III, NRG1AG1, AL-2, пролин дегидрогеназы, MNR2, ATM, Но-1, CON202, атаксина-1, NR3B, NIP ΑΙ, DEPP, адреномедуллина, csdA, Inf-20, EOPA, SERT, FRP-1, сывороточного амилоида А, BMP2, BMPR1A, ACLP, резистин-подобной молекулы β, Dlg5, TRANCE, матрилина-3, синовиолина, HIV LTR, SHIVA, ΕΒΙ 1, ΕΒΙ 2, ΕΒΙ 3, HM23, Eps8, Beta-10, фактора роста волосяных фолликулов, корнеодесмозина, GCR9, Bg, FGF23, BBSR, MIC-1, MIA-2, IL-17B, фермента, образующего формилглицин, LPLA2, CXCL1O, HFE2A, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10R DN или его субъединицы, IL-15, IL-18, IL-21, IL-23, IL-24, IL-27, GM-CSF, IFN-альфа, IFN-гамма, IFN-альфа 1, IFN альфа 2, IL-15-R- альфа, CCL3 (MIP-1a), CCL5 (RANTES), CCL7 (МСР3), XCL1 (лимфотактина), CXCL1 (MGSA-альфа), CCR7, CCL19 (MIP-3b), CXCL9 (MIG), CXCL10 (IP-10), CXCL12 (SDF-1), CCL21 (6Ckine), OX40L, 4-1BBL, CD40, CD70, GITRL, LIGHT, b-дефензина, HMGB1, Flt3L, IFN-бета, TNF-альфа, dnFADD, BCG, TGF-альфа, PD-L1 RNAI, PD-L1 антисмыслового олигонуклеотида, TGFbRII DN, ICOS-L, S100, CD40L, p53, сурвивина, р53-сурвивин рекомбинанта, MAGE3, основного миелинового белка, PSA и PSMA.

[0411] В другом варианте реализации пептид, белок или полипептид, представляющий интерес, представляет собой цилиарный нейротрофический фактор, вазохибин, IL-10, эритропоэтин, ловушку VEGF или PDGF.

[0412] В другом варианте реализации пептид, белок или полипептид, представляющий интерес, представляет собой ингибитор JUN-киназы, вазоингибин, ЕРО или CTNF.

[0413] В другом варианте реализации генный переключатель регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего IL-12 или его субъединицу. В другом варианте реализации IL-12 или его субъединица представляет собой IL-12 человека или его субъединицу.

[0414] В другом варианте реализации генный переключатель регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего ингибитор эстеразы C1 (например, ингибитор эстеразы C1 человека), ингибитор калликреина или антагонист рецептора брадикинина В2.

[0415] Примеры ингибиторов калликреина включают, но не ограничиваются ими, экаллантид и ингибиторы калликреина, приведенные в публикациях патентов США 2010/0034805, 2009/0264350, 2009/0234009, 2008/0221031, 2007/0213275, 2006/0264603 и 2005/0089515.

[0416] Примеры ингибиторов рецептора брадикинина В2 включают, но не ограничиваются ими, хелокинестатин и антитела к рецептору брадикинина В2. Последовательность аминокислот хелокинестатина приведена в Kwok, H.F. et al., Peptides 29I 65-72 (2008). Неограничивающие примеры антител к рецептору брадикинина В2 приведены в Alla, S.A. et al., J. Biol. Chem. 271: 1748-1755 (1996).

[0417] В другом варианте реализации генный переключатель регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего IL-12 или его субъединицу для лечения рака, например, меланомы, у субъекта, например, человека.

[0418] В другом варианте реализации полинуклеотид кодирует (а) генный переключатель, который содержит GAL4 ДНК-связывающий домен, лигандсвязывающий домен рецептора экдизона Choristoneura fumiferana, имеющий мутации V107I и Y127E (относительно последовательности рецептора экдизона Choristoneura fumifrana, приведенной в публикации патента США №2006/0100416 A1), химерный RXR лигандсвязывающий домен, состоящий из спирали 1-8 Homo sapiens RXR и спирали 9-12 Locusta migratoria RXR, VP 16 домен трансактивации и (b) IL-12 человека, и генный переключатель, закодированный полинуклеотидом, регулирует экспрессию IL-12 человека, когда лигандсвязывающий домен рецептора экдизона в генном переключателе связывает соединение согласно настоящему описанию. В другом варианте реализации полинуклеотид вводят субъекту, имеющему рак, такой как меланома. Полинуклеотид можно вводить внутритуморально как в фармацевтически приемлемом носителе, так и содержащийся в иммунной клетке, такой как дендритная клетка. В одном варианте реализации полинуклеотид вводят субъекту после введения соединения согласно настоящему описанию или его композиции. В другом варианте реализации соединение согласно настоящему описанию или его композицию вводят субъекту после введения полинуклеотида. Например, соединение согласно настоящему описанию или его композицию можно вводить субъекту в дни -1, 0, +1, +2, +3, +4, +5, +6, +7 или более относительно дня введения субъекту полинуклеотида.

[0419] В другом варианте реализации генный переключатель регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего фактор транскрипции, например, GATA-1, кофактор GATA (friend of GATA) (FOG-1), EKLF (Круппель-подобный фактор транскрипции), р45/ядерный фактор-эритроид 2 (NF-E2), недифференцируемую лейкемию (SCL) или Т-клеточную острую лимфоцитарную лейкемию-1, ОСТ4 или фактор транскрипции Sry-связанный HMG-бокс (Sox6), или фактор роста, например, IGFII, bFGF, Flt3, фактор стволовых клеток (SCF), тромбопоэтин (TPO), костный морфогенетический белок 4 (ВМР4), рекомбинантный человеческий фактор роста эндотелия сосудов (VEGF-A165), интерлейкин-3 (IL-3) интерлейкин-6 (IL-6) или интерлейкин-11 (IL-11) или эритропоэтин для применения в регенеративной медицине, например, дифференцировки, трансдифференцировки, перепрограммирования, самообновления или экспансии гемопоэтических стволовых клеток, гемопоэтических клеток-предшественников или индуцированных плюрипотентных стволовых клеток в процессе «фарминга» крови, т.е. производства красных кровяных клеток или других продуктов крови, у субъекта.

Общие способы синтеза

[0420] Соединения согласно настоящему описанию получали с применением способов, известных специалистам в данной области с точки зрения настоящего описания (см., например, патенты США №8076517, 7456315, 7304161 и 6258603) и/или иллюстративными способами, показанными на общих схемах ниже.

где J представляет собой СН или N

[0421] Соединения согласно настоящему описанию, имеющие формулу I, где R⁴ представляет собой R⁴-1 (где J представляет собой СН) или R⁴-8 (где J представляет собой N), могут быть получены, как описано на общих схемах 2 и 3. Вкратце, на общей схеме 2, пинаколборановое соединение формулы А преобразуют в бороксол формулы В, и бороксол приводят во взаимодействие с гидразином, имеющим формулу С, с получением ацилгидразина, имеющего формулу D. Ацилгидразин приводят во взаимодействие с хлорангидридом с получением диацилгидразина, имеющего формулу Е.

[0422] На общей схеме 3 соединение, имеющее формулу F, приводят во взаимодействие с гидразином, имеющим формулу С, с получением ацилгидразина, имеющего формулу G. Ацилгидразин приводят во взаимодействие с хлорангидридом с получением диацилгидразина, имеющего формулу Н. Бромидную группу соединения, имеющего формулу Н, преобразуют в пинаколборан, имеющий формулу J, затем преобразуют в бороновую кислоту, которую зацикливают в получением диацилгидразинов, имеющих формулу K.

[0423] Соединения согласно настоящему описанию, имеющие формулу I, где R⁴ представляет собой R⁴-2, могут быть получены, как описано на общей схеме 4. Вкратце, олефин диацилгидразина, имеющий формулу L, преобразуют в пинаколборан, имеющий формулу М. Пинаколборан преобразуют в бороновую кислоту, имеющую формулу N, и соединение, имеющее формулу N, зацикливают с получением соединения О.

[0424] Соединения согласно настоящему описанию, имеющие формулу I, где R⁴ представляет собой R⁴-3, R^6c представляет собой ОН, и R^7e и R^7f представляют собой водород, могут быть получены, как описано на общей схеме 5.

[0425] Соединения согласно настоящему описанию, имеющие формулу I, где R⁴ представляет собой R⁴-4, R^6d представляет собой ОН, и R^7g и R^7h представляют собой водород, могут быть получены, как описано на общих схемах 6, 7 и 8.

[0426] Соединения согласно настоящему описанию, имеющие формулу I, где R⁴ представляет собой R⁴-9, и R^7a' и R^7b' каждый представляет собой водород, могут быть получены, как описано на общей схеме 9.

[0427] Соединения согласно настоящему описанию, имеющие формулу I, где R⁴ представляет собой R⁴-10, Х⁶ представляет собой -О-, и R^7a' и R^7b' каждый представляет собой водород, могут быть получены, как описано на общей схеме 10. Соединения согласно настоящему описанию, имеющие формулу I, где R⁴ представляет собой R⁴-10, X⁶ представляет собой -N(R⁸¹)-, и R^7a' и R^7b' каждый представляет собой водород, также могут быть получены, как описано на общей схеме 7.

ПРИМЕРЫ

ПРИМЕР 1

Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида (Соединение №50)

Стадия 1: Синтез 3-бороно-4-метилбензойной кислоты

[0428] 3-Бром-4-метилбензойную кислоту (11,00 г, 51,2 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (150 мл) в атмосфере аргона в 500 мл 3-горл ой кругл о донной колбе, оснащенной двумя капельными воронками и притоком аргона. Перемешанный раствор охлаждали до -78°С и по каплям добавляли n-BuLi (1,6М в гексане, 60,7 мл, 97,0 ммоль) из капельной воронки (в течение 1 ч). После окончания добавления раствор перемешивали при -78°С в течение еще одного 1 ч. Из второй капельной воронки к нему медленно добавляли В(ОМе)₃ (17,7 мл, 159,0 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч при -78°С, и затем нагревали до комнатной температуры в течение ночи. Растворитель выпаривали при пониженном давлении. Неочищенный продукт растворяли в эфире и выливали в водный раствор HCl (1 н.). Смесь экстрагировали эфиром (3×150 мл), и объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и выпаривали досуха. Неочищенный продукт очищали с применением системы химического окисления in situ (ISCO) (колонка 220 г диоксида кремния, градиент гексан/EtOAc, и позже градиент ДХМ/МеОН). Примеси вымывали в гексане/EtOAc, и чистый продукт элюировали в смеси растворителей МеОН/ДХМ (5:95) с получением 3,3 г (33% выход) чистого SKC-01-126. ¹Н ЯМР (400 МГц, Ацетон-d₆) δ 12,10 (br s, 1Н), 8,16 (s, 1Н), 7,90-7,63 (m, 1Н), 7,11 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 2,42 (s, 3Н).

Стадия 2: Синтез метил 4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата

[0429] К перемешанному раствору SKC-01-126 (3,3 г, 18,3 ммоль) в МеОН (100 мл) в 250 мл кругл о донной колбе, оснащенной обратным холодильником и осушительной защитной трубкой, добавляли 3 мл концентрированной H₂SO₄. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до комнатной температуры растворитель выпаривали под вакуумом. Добавляли воду, и продукт экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои промывали солевым раствором, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и выпаривали досуха с получением метилового сложного эфира SKC-01-127 в форме белого твердого вещества. Без дальнейшей очистки, метиловый сложный эфир (4,00 г, 20,6 ммоль) растворяли в сухом толуоле (100 мл) в 250 мл круглодонной колбе, оснащенной ловушкой Дина-Старка. К перемешанной реакционной смеси добавляли 2,3-диметилбутан-2,3-диол (3,66 г, 30,9 ммоль), после чего добавляли каталитическое количество p-TSOH⋅H₂O (0,196 г, 1,03 ммоль). Реакционную смесь нагревали до кипения в течение ночи в течение 2 дней. Воду собирали (~2 мл) и удаляли. После охлаждения реакционная смесь становилась твердой. Неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (колонка 80 г диоксида кремния, градиент гексан/EtOAc) с получением SKC-01-138. ЖХ-МС (М+Н) 277. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 8,32 (d, J=1,9 Гц, 1H), 7,87 (dd, J=8,0, 2,0 Гц, 1Н), 7,12 (d, J=8,0 Гц, 1H), 3,79 (s, 3Н), 2,48 (s, 3Н), 1,25 (s, 12Н).

Стадия 3: Синтез 1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбоновой кислоты

[0430] К раствору SKC-01-138 (1,50 г, 5,43 ммоль) в безводном CCl₄ (30 мл) добавляли N-бромсукцинимид (1,01 г, 5,70 ммоль). К данной перемешанной смеси добавляли дициклогексанкарбонитрил в качестве катализатора (0,07 г, 0,27 ммоль) четырьмя частями в течение 1 ч. Смесь перемешивали при 70°С в течение ночи. ЖХ-МС показала основной пик при 5,75 мин с ожидаемой массой бензилбромида. После охлаждения растворитель выпаривали под вакуумом. Неочищенный продукт растворяли в эфире и фильтровали для удаления любого количества сукцинимида. Фильтрат экстрагировали посредством КОН (15% масс./об. в Н₂О, 3×70 мл). Водную фазу перемешивали в течение 1-2 ч при комнатной температуре («rt»). Раствор охлаждали при 0°С, и медленно добавляли HCl (6 н. в Н₂О, ~120 мл) до достижения рН <2. Белый осадок собирали посредством фильтрации через воронку из фриттованного стекла, и сушили на воздухе с получением 5-карбоксибензобороксола SKC-01-150 (0,800 г, 83% выход) в форме белого твердого порошка. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 12,91 (s, 1Н), 9,35 (s, 1Н), 8,38 (s, 1Н), 8,04 (dd, J=8,0, 1,5 Гц, 1H), 7,52 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 5,05 (s, 2H).

Стадия 4: Синтез N'-(трет-бутил)-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида

[0431] К перемешанному раствору SKC-01-150 (150 мг, 0,84 ммоль) в безводном ДМФА (1,5 мл) добавляли ВОР (373 мг, 0,84 ммоль), HOBt (129 мг, 0,84 ммоль) и DIPEA (0,294 мл, 1,68 ммоль) в атмосфере аргона при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин. К ней добавляли трет-бутил гидразин гидрохлорид (105 мг, 0,84 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 1 ч. ЖХ-МС показала полное превращение бороксозол карбоновой кислоты. Реакционную смесь помещали в сцинтилляционный флакон, и ДМФА удаляли с применением Genevac. Липкую неочищенную смесь растворяли в 15% водном КОН и эфире. Реакционную смесь экстрагировали эфиром и трижды промывали водным КОН. Водные фракции, содержащие продукт, охлаждали на ледяной бане, и медленно добавляли 6 н. HCl до получения рН 1-2. Смесь экстрагировали с применением этилацетата. Продукт оставался в водных фракциях, и их выпаривали досуха под вакуумом. Твердый KCl удаляли из продукта, промывая его 5% МеОН в ДХМ и собирая фильтрат с получением 95% чистого продукта. Далее его очищали с применением системы ISCO после адсорбции продукта на нейтральном оксиде алюминия (колонка 24 г оксида алюминия, смесь растворителей МеОН:ДХМ). Продукт элюировали с применением ~5% МеОН в ДХМ. Фракции собирали и сушили с получением (0,187 г, 89% выход) чистого бороксазол карбогидразида SKC-02-011. Вязкий продукт растворяли в воде и небольшом количестве ТГФ, замораживали и лиофилизировали с получением светло-желтого порошка. ¹Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 8,11 (s, 1H), 7,93 (dd, J=8,0, 1,7 Гц, 1Н), 7,52 (dd, J=8,0, 0,7 Гц, 1H), 5,16 (s,2H), 1,19 (s, 10Н).

[0432] С применением вышеописанной методики следующее взаимодействие осуществляли с получением SCK-02-021:

[0433] Для осуществления вышеуказанного взаимодействия объединяли SKC-01-150 (170 мг, 0,96 ммоль) в безводном ДМФА (1,7 мл), ВОР (423 мг, 0,96 ммоль), HOBt (146 мг, 0,96 ммоль), DIPEA (0,834 мл, 4,78 ммоль) и гидразина гидрохлорид (105 мг, 0,84 ммоль). Неочищенную смесь очищали с применением системы ISCO (24 г нейтрального оксида алюминия, градиент МеОН/ДХМ). ¹Н ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 8,05 (s, 1Н), 7,87 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,50 (d, J=7,8 Гц, 1H), 5,12 (s, 1H), 2,51-2,44 (m, 1H), 1,76-1,59 (m, 1H), 1,51-1,27 (m, 1H), 1,11 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 1,02 (s, 9H).

[0434] С небольшой модификацией методики, описанной выше, следующее взаимодействие осуществляли с получением (R)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-7-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида:

Стадия 4: Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида (Соединение №50):

[0435] К раствору хлорангидрида (0,061 г, 0,363 ммоль) в безводном ДХМ (2 мл) в 100 мл круглодонной колбе в атмосфере аргона добавляли бороксазол карбогидразид SKC-02-011 (0,090 г, 0,363 ммоль), после чего добавляли триэтиламин (0,051 мл, 0,0363 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. ЖХ-МС показала несколько пиков совместно с ожидаемым продуктом. Очисткой посредством препаративной ВЭЖХ получали 20 мг (14%) соединения №50. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,63 (s, 1Н), 7,89 (s, 1Н), 7,54 (dd, J=8,0, 1,5 Гц, 1Н), 7,42 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7,09 (s, 2Н), 6,91 (s, 1Н), 4,99 (s, 2Н), 2,20 (s, 6Н), 1,49 (s, 9Н).

[0436] Соединение №50 также получали с применением одностадийной методики с SKC-01-150 (100 мг, 0,56 ммоль), ВОР (249 мг, 0,56 ммоль), HOBt (86 мг, 0,56 ммоль), DIPEA (0,098 мл, 0,56 ммоль). Все реагенты, за исключением гидразида, перемешивали в 100 мл круглодонной колбе и растворяли в безводном ДМФА (2 мл) и перемешивали в атмосфере аргона в течение 5 мин при комнатной температуре. К смеси добавляли N-(трет-бутил)-3,5-диметилгидразид (124 мг, 0,56 ммоль), и реакционную смесь нагревали при 75°С в течение ночи. ЖХ-МС показала два близких пика, один из пиков показал массу ожидаемого продукта (mwt. 380,24) в ES+ и ES-режиме. Реакционную смесь разбавляли эфиром и экстрагировали 10% масс./об. водным КОН. ЖХ-МС водных фракций показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. Водный слой охлаждали до 0°С, обрабатывали 6 н. HCl по каплям до кислой реакции (рН 1-2), и экстрагировали этилацетатом. Органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с применением препаративной ВЭЖХ с получением 20 мг (9%) соединения №50.

[0437] С применением вышеописанной методики следующее взаимодействие осуществляли с получением соединения №51.

[0438] Взаимодействие осуществляли с применением SKC-02-021 (70 мг, 0,24 ммоль), 3,5-диметил бензоил хлорида (40,7 мг, 0,24 ммоль) и триэтиламина (0,101 мл, 0,72 ммоль) в 2 мл дихлорметана. Неочищенную реакционную смесь очищали с применением препаративной ВЭЖХ с получением соединения №51.

[0439] С применением вышеописанной методики следующее взаимодействие осуществляли с получением (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-7-фтор-1-гидрокси-1,3- дигидробензо[с][1,2] оксаборол-6-карбогидразида (Соединение №59):

[0440] Соединение №59: ЖХ-МС [МН+]=441. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,37 (d, J=54,9 Гц, 1H), 9,39 (t, J=7,9 Гц, 1H), 7,34-6,93 (m, 4Н), 6,75 (td, J=13,6, 7,5 Гц, 1Н), 5,16-4,87 (m, 2Н), 4,54-4,17 (m, 1Н), 3,17 (d, J=5,2 Гц, 1H), 1,79-1,41 (m, 2Н), 1,10-0,93 (m, 12Н).

[0441] N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-((R)-2,2-диметилпентан-3-ил)-7-фтор-5'-оксо-3H-114-спиро[бензо[с][1,2]оксаборол-1,2'-[1,3,2]оксазаборолидин]-6-карбогидразид (Соединение №95) получали из соединения №59 следующим образом:

[0442] Раствор глицина (11,93 мг, 0,159 ммоль) в 5,3 мл сухого толуола и 1 мл диметилсульфоксида помещали в 25 мл колбу, оборудованную мешалкой. Добавляли (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-7-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразид (70 мг, 0,159 ммоль), и смесь выдерживали с обратным холодильником в течение 28 ч. После удаления толуола под вакуумом раствор продукта в ДМСО помещали в обратнофазную колонку 15,5 г Teledyne ISCO С18 и элюировали посредством 0-100% CH₃CN-H₂O (30 мин). Необходимые фракции объединяли и лиофилизировали с получением 19 мг (11,4% выход) спиро аддукта в форме белого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,43-10,18(m, 1Н - смесь NH ротамеров), 7,19-6,72 (m, 5Н), 6,41-6,37 (t, 0,46 Н, частичный ротамер) 4,98-4,76 (m, 2Н), 4,43-4,21(два d, 1Н, СН), 3,56-3,52(перекрывающиеся s, 2Н), 3,32 (s, ДМСО-d₆ водный пик), 2,50 (ДМСО-d₆), 2,32 и 2,24 (s, 6Н), 1,54-1,46 (m, 2Н), 1,07-0,88 (m, 12Н); MS (ESI), рассчитанное для C₂₆H₃₂BFN₃O₅^- ([М+2Н]⁺) 498, обнаружено 498.

[0443] С применением вышеописанной методики следующие взаимодействия осуществляли с получением (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2] оксаборол-5-карбогидразида (Соединение №67):

Метил 2-фтор-3-метил-4-(4,4,5,5,-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат:

[0444] Метил 4-бром-2-фтор-3-метилбензоат (2,6 г, 10,52 ммоль), ацетат калия (3,61 г, 36,8 ммоль) и димер 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2-2'бис(1,3,2-диоксаборолана (4,01 г, 15,79 ммоль) в безводном диоксане (90 мл) вместе перемешивали в круглодонной колбе. Смесь выгружали и трижды продували аргоном и перемешивали при комнатной температуре. К этой смеси добавляли Pd(dppf)₂Cl₂.ДXM, и смесь выгружали и трижды продували аргоном, смесь нагревали при 80°С в течение ночи. Темно-окрашенную реакционную смесь охлаждали, фильтровали через короткую пластинку целита и растворитель удаляли. Добавляли воду и EtOAc, и смесь экстрагировали. Органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, и растворитель удаляли. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния и очищали посредством колоночной хроматографии с получением указанного в заголовке соединения SKC-09-031 (2,8 г, 90% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,81-7,60 (m, 1H), 7,54 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 3,92 (s, 3H), 2,62-2,31 (m, 3H), 1,36 (s, 12H). 4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбоновая кислота:

[0445] К раствору вышеуказанного сложного эфира (2,00 г, 6,80 ммоль) в безводном CCl₄ (80 мл) в 200 мл круглодонной колбе, оборудованной обратным холодильником, добавляли NBS (1,20 г, 6,80 ммоль) и (E)-1,1'-(диазен-1,2-диил)дициклогексанкарбонитрил (0,166 г, 0,68 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи в атмосфере аргона. Общее количество NBS (1,2 г) и катализатора (0,166 г) добавляли четырьмя частями в течение 1 ч. ЖХ-МС показала один основной пик при 4,59. Реакционную смесь охлаждали, растворитель удаляли на роторном испарителе под вакуумом. Твердое вещество суспендировали в эфире и фильтровали для удаления твердого вещества. Фильтрат концентрировали для удаления растворителя; разбавляли водой и экстрагировали EtOAc. Органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, и растворитель удаляли на роторном испарителе. ЖХ-МС (М+2) 374,60.

[0446] К неочищенному промежуточному соединению добавляли 7% водный КОН (~80 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. При экстракции эфиром продукт находился в водной фракции (по данным ЖХ-МС), эфирный слой, содержащий некоторое количество примесей, отбрасывали. Водные фракции охлаждали и медленно подкисляли до рН 3 посредством 6 н. HCl. Образовывался белый осадок, осадок собирали посредством фильтрации и сушили под вакуумом. ЖХ-МС показала единичный пик при 2,55. ЖХ-МС (М+1) 197,17. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 13,34 (s, 1H), 9,58 (s, 1H), 8,00-7,69 (m, 1Н), 7,61 (d, J=7,5 Гц, 1H), 5,11 (s, 2Н).

[0447] Общая методика для двух стадий сочетания: в сцинтилляционном флаконе вместе смешивали 4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбоновую кислоту (1,0 экв.), РуВОР (1,0 экв.), DIEА (2,0 экв.) в ДМФА и перемешивали при 40°С в течение 3 минут в атмосфере аргона. К данной смеси добавляли соль гидразина (1 экв.), и смесь перемешивали при 40°С в течение 1-2 ч. Реакцию контролировали посредством ЖХ-МС. Растворитель удаляли с применением Genevac. Добавляли 7% водн. KОН, перемешивали в течение 15 мин и экстрагировали эфиром. Водные фракции собирали, охлаждали и подкисляли до рН 3 посредством 6 н. HCl. Немедленно экстрагировали EtOAc, и органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, и растворитель удаляли. Неочищенную смесь окончательно очищали с применением колонки с нейтральным оксидом алюминия (градиент растворителей МеОН/ДХМ) или с применением колонки RediSep С18 на ISCO (градиент растворителей 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил).

[0448] На 2^й стадии к перемешанному раствору вышеуказанного промежуточного соединения (1,0 экв.) в ДХМ добавляли TEA (1,2 экв.) и хлорангидрид (1,0 экв.) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и смесь перемешивали в течение 35 минут. Реакцию контролировали посредством ЖХ-МС. Растворитель удаляли, и неочищенную смесь очищали с применением колонки RediSep С18 на ISCO (градиент растворителей 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил).

[0449] 4-Фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбоновую кислоту (1,0 г, 5,10 ммоль), РуВОР (2,66 г, 5,10 ммоль), DIEА (1,78 мл, 10,21 ммоль) вместе перемешивали в ДМФА (15 мл), и добавляли (R)-(2,2-диметил-пентан-3-ил)гидразин 4-метилбензолсульфонат (1,54 г, 5,10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 1,5 ч. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. После проведения общего синтеза неочищенную смесь окончательно очищали с применением колонки RediSep С18 (100 г колонка, градиент растворителей 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил) на ISCO, чтобы выделить SKC-09-034 (0,820 г, 52% выход) в форме бесцветного твердого вещества. ЖХ-МС (М+1) 308,81. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,77 (s, 1Н), 9,52 (s, 1H), 7,66-7,43 (m, 2Н), 5,10 (s, 2Н), 4,20-3,58 (m, 1H), 1,56-1,53 (m, 1Н), 1,31-1,22 (m, 1H), 1,05-0,86 (m, 12Н).

[0450] Соединение №67 синтезировали с применением промежуточного соединения SKC-09-034 (0,600 г, 1,95 ммоль), TEA (0,326 мл) в ДХМ (10 мл) и 3,5-диметилбензоил хлорида (0,328 г, 1,95 ммоль) при комнатной температуре. Реакцию останавливали через 35 минут, при наличии 3 пиков (по данным ЖХ-МС), одного основного пика с ожидаемой массой продукта (441,91, М+1). После очистки с применением колонки Redisep С18 (С 18 100 г, градиент растворителей 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил), конечный ДАГ выделяли как соединение №67 (0,575 г, 67% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,48 (d, J=48,2 Гц, 1Н), 9,53 (s, 1Н), 7,47 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 7,21-6,94 (m, 3H), 6,61 (t, J=6,3 Гц, 1H), 5,06 (s, 2Н), 4,34 (dd, J=72,7, 10,2 Гц, 1Н), 2,25 (s, 6Н), 1,74-1,39 (m, 2Н), 1,10-0,91 (m, 12Н).

[0451] Вышеуказанное взаимодействие осуществляли с применением SKC-07-068 (0,200 г, 0,65 ммоль), TEA (0,109 мл, 0,779 ммоль) и 3,5-бис(метил-d₃)бензоил хлорида (0,136 г, 0,779 ммоль) в ДХМ (2 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, в течение ночи. ЖХ-МС показала пик с ожидаемой массой продукта 447,14 (М+1), совместно с двумя дополнительными пиками. Продукт выделяли.

N'-(трет-бутил)-4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбогидразид:

[0452] Следуя общей методике, 4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбоновую кислоту (0,500 г, 2,55 ммоль), РуВОР (1,34 г, 2,55 ммоль), DIEA (0,89 мл, 5,10 ммоль) в ДМФА (6 мл) перемешивали вместе, после чего добавляли трет-бутил гидразин гидрохлорид (0,318 г, 2,55 ммоль), и смесь перемешивали при 40°С в течение 1 ч. ЖХ-МС показала основной пик при 2,43 с ожидаемой массой продукта 267,01 (М+1). После проведения общего синтеза, неочищенный сухой образец (SKC-07-069, 0,800 г, содержащий некоторое количество ДМФА) применяли на следующей стадии без дальнейшей очистки.

N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбогидразид:

[0453] К перемешанному раствору вышеуказанного синтезированного моноВ (SKC-7-069, 0,400 г, 1,50 ммоль) в ДХМ (3 мл) добавляли TEA (0,210 мл, 1,50 ммоль) и 3,5-диметилбензоил хлорид (0,253 г, 1,50 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение ночи. ЖХ-МС показала несколько пиков, совместно с острым пиком при 3,45 с ожидаемой массой продукта 399,09 (М+1). Растворитель удаляли на роторном испарителе, и неочищенную смесь очищали с применением препаративной ВЭЖХ (градиент растворителей 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил) с получением 0,080 г продукта соединения №65. ЖХ-МС: 399,09 (М+1). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,70 (s, 1Н), 9,51 (s, 1Н), 7,46 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7,04 (d, J=7,2 Гц, 3H), 6,80-6,66 (m, 1H), 5,05 (s, 2Н), 2,25 (s, 6Н), 1,49 (s, 9Н).

N'-(3,5-бис(метил-d₃)бензоил)-N'-(трет-бутил-4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбогидразид:

[0454] Указанное в заголовке соединение синтезировали с применением моноВ (SKC-07-069 неочищенного соединения, 0,400 г, 1,50 ммоль), TEA (0,210 мл, 1,50 ммоль) и 3,5-бис(метил-d₃)бензоил хлорида (0,263 г, 1,50 ммоль) в ДХМ (3 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона, в течение ночи. После очистки посредством препаративной ВЭЖХ (градиент растворителей 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил) выделяли 0,148 г чистого продукта соединения №66. ЖХ-МС: 405,07 (М+1). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,70 (s, 1Н), 9,51 (s, 1Н), 7,46 (d, J=7,3 Гц, 1Н), 7,04 (dd, J=8,4, 1,6 Гц, 3H), 6,83-6,41 (m, 1Н), 5,05 (s, 2Н), 2,54 (s, 1H), 1,48 (d, J=5,4 Гц, 9Н).

N'-(2,2-диметил-1-фенилпропил)-4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2] оксаборол-5-карбогидразид:

[0455] Следуя общей методике, 4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбоновую кислоту (0,500 г, 2,55 ммоль), РуВОР (1,34 г, 2,55 ммоль), DIEA (0,89 мл, 5,10 ммоль) в ДМФА (10 мл) смешивали вместе, после чего добавляли (2,2-диметил-1-фенилпропил)гидразид гидрохлорид (0,548 г), и смесь перемешивали при 40°С в течение 1,5 ч. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. После проведения общего синтеза, неочищенную смесь окончательно очищали с применением колонки RediSep С18 на ISCO (градиент растворителей 0,1% муравьиной кислоты в воде/ацетонитрил), и выделяли указанное в заголовке соединение SKC-09-041 (0,400 г, 44% выход) в форме бесцветного твердого вещества. ЖХ-МС (М+1) 357,25.

[0456] N'-(2,2-диметил-1-фенилпропил)-N'(3,5-диметилбензоил)-4-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-5-карбогидразид:

[0457] К перемешанному раствору вышеуказанного синтезированного моноВ (SKC-09-041, 0,200 г, 0,56 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли TEA (0,094 мл, 0,67 ммоль) и 3,5-диметилбензоил хлорид (0,095 г, 0,56 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение 35 минут. ЖХ-МС показала несколько пиков, совместно с маленьким пиком с ожидаемой массой продукта и непрореагировавшим исходным материалом. Растворитель удаляли на роторном испарителе, и неочищенную смесь очищали с применением колонки RediSep (С18, 13 г, градиент 0,1% муравьиная кислота в воде/ацетонитрил), и выделяли соединение №89 (0,070 г, 25% выход). ЖХ-МС (М+1) 489,28. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,84 (s, 1H), 9,50 (s, 1H), 7,58-7,00 (m, 9Н), 6,58-6,45 (m, 1Н), 5,69 (d, J=33,9 Гц, 1H), 5,06 (s, 2Н), 2,23 (s, 6Н), 1,08 (s, 9Н).

ПРИМЕР 2

Синтез (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилгексан-3-ил)-2-гидрокси-9-метил-2,3,4,5-тетрагидробензо[f][1,2]оксаборепин-8-карбогидразида (Соединение №70):

Стадия 1: Синтез метил 3-гидрокси-2-метилбензоата

[0458] В 1 л 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную холодильником и магнитной мешалкой, добавляли 3-гидрокси 2-метил бензойную кислоту (15,2 г, 100 ммоль) и безводный МеОН (400 мл). К ним добавляли 7 мл конц. H₂SO₄, и смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере аргона. ЖХ-МС показала полное превращение в продукт. Реакционную смесь собирали, и растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенную смесь разбавляли этилацетатом. После удаления воды и экстракции этилацетатом смесь очищали с применением системы ISCO (120 г колонка с силикагелем, смесь растворителей гексан:этилацетат) с получением производного метилбензоата (основной пик, элюировали посредством ~12% EtOAc в гексане) с выходом очищенного вещества 84%. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,57 (dd, J=7,8, 1,0 Гц, 1H), 7,26 (t, J=7,9 Гц, 1H), 7,10 (dd, J=8,0, 0,9 Гц, 1H), 5,49 (s, 1H), 4,06 (s, 3H), 2,62 (s, 3H).

Стадия 2: Синтез метил 3-(аллилокси)-2-метилбензоата

[0459] К перемешанному раствору метил 3-гидрокси-2-метилбензоата (30 г, 180,0 ммоль) в ацетоне в 1 л круглодонной колбе при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли карбонат калия (42,4 г, 30,6 ммоль). К нему добавляли аллилбромид (39,3 г, 28,1 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После удаления воды и экстракции этилацетатом неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (колонка с силикагелем, смесь растворителей гексан:EtOAc) с получением продукта в форме масла (89% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,41 (dd, J=7,8, 0,9 Гц, 1Н), 7,22-7,08 (m, 1H), 6,97 (d, J=7,9 Гц, 1H), 6,10-6,03 (m, 1H), 5,43 (dq, J=17,3, 1,7 Гц, 1H), 5,29 (dq, J=10,6, 1,5 Гц, 1H), 4,55 (dt, J=5,0, 1,6 Гц, 2H), 3,89 (s, 3H), 2,47 (s, 3H).

Стадия 3: Синтез метил 4-аллил-3-гидрокси-2-метилбензоата

[0460] Метил 4-аллил-3-гидрокси-2-метилбензоат (3,5 г, 16,97 ммоль) растворяли в 1-метил пирролидин-2-оне (4 мл) в колбе для микроволновой печи, закрывали пробкой и подвергали действию микроволнового излучения (СЕМ discover) при перемешивании при 220°С, максимальном давлении 300 psi, время обработки 5 мин, время выдерживания 50 мин. После охлаждения неочищенную смесь непосредственно загружали в колонку с силикагелем (220 г) и очищали с применением системы ISCO (смесь растворителей гексан: EtOAc, продукт элюировали посредством ~12% EtOAc в гексане) с получением 2,1 г (основной пик, 60% выход) продукта SKC-03-012 в форме светло-желтого твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,40 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,00 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 6,04-5,95 (m, 1Н), 5,21-5,16 (m, 3H), 3,88 (s, 3H), 3,44-3,43 (d, 2Н), 2,47 (s, 3H).

Стадия 4: Синтез 4-аллил-3-гидрокси-2-метилбензойной кислоты

[0461] К перемешанному раствору метил 4-аллил-3-гидрокси-2-метилбензоата (6,5 г, 31,6 ммоль) в смеси ТГФ:МеОН (соотношение 3:1, 80 мл) при комнатной температуре добавляли 25,3 г (316 ммоль) 50 масс./масс. % водного раствора NaOH, и реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 4 ч. ЖХ-МС показала чистое превращение. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, и метанол удаляли на роторном испарителе, и разбавляли этилацетатом. Неочищенную реакционную смесь подкисляли посредством 1 н. HCl. Некоторое количество продукта выпадало в осадок. Его разбавляли водой и экстрагировали с применением этилацетата. Органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (колонка 80 г диоксида кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~30% EtOAc в гексане, и фракции продукта собирали и концентрировали. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,58 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,03 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 6,12-5,78 (m, 1Н), 5,30-5,08 (m, 2Н), 3,45 (d, J=6,3 Гц, 2Н), 2,54 (d, J=3,7 Гц, 3H).

Стадия 5: Синтез 3-ацетокси-4-аллил-2-метилбензойной кислоты

[0462] 4-Аллил-3-гидрокси-2-метилбензойную кислоту (2,0 г, 10,4 ммоль) суспендировали в 6 мл воды в 500 мл круглодонной колбе, охлаждали на ледяной бане и перемешивали. Медленно добавляли водный раствор NaOH (4,2 г 50% NaOH в 6 мл воды). Смесь перемешивали в течение нескольких минут до получения прозрачного раствора. По каплям добавляли уксусный ангидрид до получения рН 6, к этому времени реакционная смесь становилась густой суспензией почти белого цвета. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционная смесь становилась густой белой суспензией. Доводили рН до 2 посредством конц. HCl. Образовывался осадок, и его отфильтровывали под вакуумом и сушили. Объединенный сухой продукт растворяли в ДХМ и очищали с применением системы ISCO с применением 40 г колонки с диоксидом кремния и градиента растворителей гексан/EtOAc. Продукт элюировали посредством ~30% EtOAc в гексане, и фракции собирали и сушили под вакуумом с получением (2,4 г, 98%) SKC-01-116. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 12,0 (br s, 1Н), 7,92 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 7,18 (d, J=8,1 Гц, 1H), 6,03-5,67 (m, 1H), 5,26-4,89 (m, 2Н), 3,31 (d, J=6,6 Гц, 2Н), 2,44 (s, 3H), 2,37 (s, 3H).

Стадия 6: Синтез (R)-6-аллил-3-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-2-метилфенил ацетата

[0463] К раствору 3-ацетокси-4-аллил-2-метилбензойной кислоты (1,5 г, 6,40 ммоль) в 250 мл круглодонной колбе, закрытой осушительной трубкой, добавляли безводный ДХМ (10 мл), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. К ней добавляли избыток тионилхлорида (2 мл) и каплю безводного ДМФА, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Избыток тионилхлорида удаляли под вакуумом при 40°С на водяной бане после охлаждения ловушки сухим льдом. Добавляли безводный ДХМ, и удаляли под вакуумом для высушивания продукта. Его непосредственно применяли на следующей стадии.

[0464] Вышеуказанный хлорангидрид (1,55 г, 6,15 ммоль) растворяли в безводном ДХМ (6 мл) и добавляли к перемешанному раствору ранее синтезированного (R)-N-(2,2-диметилгексан-3-ил)-3,5-диметилбензгидразида (1,7 г, 6,15 ммоль, 95% ее) в 6 мл безводного ДХМ при комнатной температуре в атмосфере аргона. Добавляли безводный триэтиламин (0,86 мл, 6,15 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. ЖХ-МС показала основной пик с ожидаемой массой продукта. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния и сушили под вакуумом. Сухой порошок загружали на картридж, и очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~20% EtOAc в гексане, и фракции продукта собирали и концентрировали с получением SKC-03-019 (2,8 г, 93%). Его непосредственно применяли на следующей стадии деацетилирования. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,38 (d, J=63,8 Гц, 1Н), 7,22-6,93 (m, 4Н), 6,72 (dd, J=45,7, 7,8 Гц, 1Н), 6,02-5,60 (m, 1H), 5,25-4,91 (m, 2Н), 4,45 (dd, J=67,4, 10,2 Гц, 1H), 3,19 (d, J=6,7 Гц, 2Н), 2,30 (s, 3H), 2,24 (m, 2Н), 1,99 (s, 6Н), 1,15-1,41 (m, 5Н), 1,04 (s, 9Н), 0,88-0,79 (m, 3H).

[0465] Аналогичным образом, нижеуказанное взаимодействие осуществляли с применением хлорангидрида (400 мг, 1,58 ммоль), N-(трет-бутил)-3,5-диметилбензгидразида (291 мг, 1,32 ммоль), TEA (0,184 мл, 1,32 ммоль) в безводном эфире (25 мл). ЖХ-МС показала основной пик с ожидаемой массой продукта, и неочищенную смесь очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~35% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали и сушили под вакуумом с получением SKC-01-120 (260 мг, 45%). ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,64 (s, 1H), 7,06 (s, 2Н), 7,00 (s, 1H), 6,93 (d, J=7,7 Гц, 1H), 5,93-5,66 (m, 1H), 5,14-4,96 (m, 2H), 3,20 (d, J=6,6 Гц, 2H), 2,29 (d, J=12,3 Гц, 9H), 1,81 (br s, 3H), 1,58 (s, 9H).

Стадия 7: Синтез (R)-4-аллил-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'(2,2-диметилгексан-3-ил)-3-гидрокси-2-метилбензгидразида

[0466] SKC-03-019 (2,7 г, 5,48 ммоль) растворяли в смеси МеОН:H₂O (соотношение 3:1, 40 мл) в 250 мл круглодонной колбе. К ней добавляли избыток бикарбоната натрия (6,91 г, 82 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 60°С. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. Реакционную смесь охлаждали, и МеОН удаляли на роторном испарителе под вакуумом. После удаления воды и экстракции этилацетатом, органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь растворяли в ДХМ, адсорбировали на диоксиде кремния и сушили до хорошо сыпучего состояния. Ее загружали на картридж, и очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством 30% EtOAc в гексане, и фракции собирали и сушили под вакуумом с получением 2,2 г (89%) SKC-03-023. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,17 (d, J=65,5 Гц, 1Н), 8,37 (s, 1H), 7,10-7,03 (m, 3H), 6,87-6,84 (m, 1Н), 6,24-6,23 (m, 1Н), 5,90-5,83 (m, 1H), 5,20-4,87 (m, 2Н), 4,52-4,42 (m, 1H), 3,64-3,60 (m, 2Н), 2,24 (d, J=4,7 Гц, 6Н), 1,61-1,78 (m, 4Н), 1,41 (br s, 3H), 1,03 (d, J=7,2 Гц, 9Н), 0,85 (t, J=6,9 Гц, 3H).

[0467] Аналогичным образом, следующее взаимодействие осуществляли с применением SKC-01-120 (710 мг, 1,63 ммоль) и бикарбоната натрия (1,37 г, 16,26 ммоль) в смеси МеОН:Н₂О (соотношение 3:1, 12 мл), и смесь перемешивали при 45°С в течение ночи. После удаления воды и экстракции EtOAc, неочищенную смесь очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~38% EtOAc в гексане с получением SKC-01-135 (320 мг, 50%). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃+ДМСО-d₆) δ 9,49 (s, 1Н), 6,49 (d, J=4,7 Гц, 2Н), 6,36 (d, J=3,6 Гц, 1H), 6,17 (t, J=6,8 Гц, 1Н), 5,82-5,48 (m, 1Н), 5,38-5,11 (m, 1Н), 5,40-5,15 (m, 1Н), 4,53-4,15 (m, 2Н), 3,57-3,09 (m, 1Н), 2,72 (d, J=5,0 Гц, 2Н), 1,66 (s, 6Н), 1,25 (d, J=6,2 Гц, 3H), 0,95 (dd, J=8,7, 6,9 Гц, 9Н).

Стадия 8: Синтез (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилгексан-3-ил)-3-гидрокси-2-метил-4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пропил бензгидразида

[0468] Высушенную в печи 100 мл двугорлую круглодонную колбу оснащали магнитной мешалкой, покрытой тефлоном, и двумя резиновыми мембранами, при этом одну мембрану с иглой присоединяли к каналу аргон/вакуум. В эту круглодонную колбу, заполненную аргоном, загружали SKC-01-140 (510 мг, 1,13 ммоль), безводный ТГФ (5 мл) и модифицированный катализатор Вилкинсона (40 мг, 0,057 ммоль). Через три цикла продувания вакуум/аргон, смесь перемешивали при комнатной температуре до растворения всех реагентов (<2 мин). К этой перемешанной прозрачной реакционной смеси добавляли 4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (Bpin-H) (0,494 мл, 3,40 ммоль) через шприц, после чего проводили еще одну продувку аргон/вакуум/аргон. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Цвет реакционной смеси изменялся со светло-желтого до темно-коричневого раствора. После перемешивания в течение ночи ЖХ-МС показала полное превращение в продукт. Реакционную смесь гасили осторожным добавлением нескольких капель воды (<1 мл) и МеОН (5 мл), и растворитель удаляли под вакуумом на роторном испарителе. Сухой неочищенный продукт растворяли в ДХМ и адсорбировали на диоксиде кремния и сушили под вакуумом. После того, как он становился хорошо сыпучим, его загружали в пустой картридж и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Фракции продукта собирали (при 10% EtoAc/гексан) и сушили под вакуумом (630 мг, 96% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,16 (d, J=64,4 Гц, 1H), 8,21 (s, 1H), 7,92 (s, 1Н), 7,11 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,83 (d, J=7,6 Гц, 1Н), 6,42-6,16 (m, 1H), 4,62-4,24 (m, 1Н), 2,25 (d, J=4,5 Гц, 5Н), 2,00 (s, 6Н), 1,60 (s, 2Н), 1,55-1,38 (m, 4Н), 1,17 (s, 9Н), 1,08 (s, 9Н), 1,05-0,99 (m, 3H), 0,88-0,78 (m, 2Н).

[0469] С применением процедуры, аналогичной вышеописанной, проводили следующее взаимодействие.

[0470] Высушенную в печи 100 мл двугорлую круглодонную колбу оснащали магнитной мешалкой, покрытой тефлоном, и двумя резиновыми мембранами, при этом одну мембрану с иглой присоединяли к каналу аргон/вакуум. В эту круглодонную колбу, заполненную аргоном, загружали 4-аллил-3-гидрокси-ДАГ (320 мг, 0,811 ммоль), модифицированный катализатор Вилкинсона (28 мг, 0,041 ммоль) и безводный ТГФ (5 мл). Через три цикла продувания вакуум/аргон смесь перемешивали при комнатной температуре до растворения всех реагентов (<2 мин). К этой перемешанной прозрачной реакционной смеси добавляли 4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (Bpin-H) (0,354 мл, 2,43 ммоль) через шприц, после чего проводили еще одну продувку аргон/вакуум/аргон. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После перемешивания в течение ночи ЖХ-МСЖХ-МС показала полное превращение в продукт. Реакционную смесь гасили осторожным добавлением нескольких капель воды (<1 мл) и МеОН (5 мл), и растворитель удаляли под вакуумом на роторном испарителе. Сухой неочищенный продукт растворяли в ДХМ и адсорбировали на диоксиде кремния и сушили под вакуумом. После того, как он становился хорошо сыпучим, его загружали в пустой картридж и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~30% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали и сушили под вакуумом (310 мг, 73% выход). Данный эксперимент повторяли. (SKC-01-128, 63% выход, и SKC-01-134, 73% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,34 (s, 1H), 8,24 (s, 1H), 7,13-6,96 (m, 3H), 6,80 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 6,14 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 2,26 (s, 6Н), 1,74 (s, 3H), 1,51-1,47 (m, 11Н), 1,17 (s, 12Н), 1,12-1,00 (m, 2Н), 0,65 (t, J=7,9 Гц, 2Н).

Стадия 9: Синтез соединения №70:

[0471] Вышеуказанный Bpin-ДАГ (630 мг, 1,09 ммоль) перемешивали со смесью ТГФ:вода (4:1, 20 мл) и натрия периодата (1,4 г, 6,53 ммоль), и добавляли 2,0 М раствор HCl в ТГФ (1,09 мл, 2,18 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МСЖХ-МС показала один основной пик. Растворитель удаляли на роторном испарителе, и остаток разбавляли EtOAc и экстрагировали. Органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт адсорбировали на нейтральном оксиде алюминия и очищали с применением системы ISCO (8 г колонка с нейтральным оксидом алюминия, смесь растворителей ДХМ/МеОН). Продукт элюировали посредством ~5% МеОН в ДХМ, и собирали и сушили. ¹Н ЯМР спектр в ДМСО-d₆ показал смесь по меньшей мере трех продуктов. Добавляли D₂O. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆+D₂O) δ 7,23-7,00 (m, 3H), 6,98-6,79 (m, 1Н), 6,55-6,17 (m, 1H), 4,72-4,17 (m, 1H), 2,30 (s, 6H), 1,91-1,69 (m, 2H), 1,72-1,31 (m, 9H), 1,08 (s, 9H), 0,94-0,83 (m, 3H), 0,67 (t, J=7,8 Гц, 2H).

[0472] Аналогичным образом, получали соединение №69 следующим образом:

[0473] Вышеуказанный Bpin-ДАГ (75 мг, 0,11 ммоль) перемешивали со смесью ТГФ:Н₂О (4:1, 10 мл) и перйодата натрия (184 мг, 0,861 ммоль), и добавляли 2,0 М раствор HCl в ТГФ (0,144 мл, 0,287 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МСЖХ-МС показала единичный пик. Растворитель удаляли на роторном испарителе под вакуумом, и остаток разбавляли EtOAc и экстрагировали. Органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт адсорбировали на нейтральном оксиде алюминия и очищали с применением системы ISCO (8 г колонка с нейтральным оксидом алюминия, смесь растворителей ДХМ/МеОН). Единичный продукт, элюированный посредством ~5% МеОН в ДХМ, собирали и сушили. Продукт не растворялся в CDCl₃, поэтому его растворяли в ДМСО-d₆ для ¹Н ЯМР анализа. ¹Н ЯМР спектр в ДМСО-d₆ показал смесь по меньшей мере трех продуктов. Несколько капель D₂O добавляли для дейтерирования любых протонов, способных к обмену. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆+D₂O) δ 7,01 (s, 3H), 6,87-6,72 (m, 1H), 6,13 (d, J=7,7 Гц, 1Н), 2,47-2,37 (m, 2Н), 2,22 (s, 6Н), 1,72 (s, 3H), 1,47 (d, J=3,5 Гц, 11Н), 0,58 (t, J=7,9 Гц, 2Н).

ПРИМЕР 3

Синтез (R)-(3-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-2-метокси-3-метилфенил)пропил)бороновой кислоты

(Соединение №27):

Стадия 1: Синтез (R)-4-аллил-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'(2,2-диметилгексан-3-ил)-3-метокси-2-метилбензгидразида

[0474] К раствору SKC-03-023 (500 мг, 1,11 ммоль) в безводном ацетоне (5 мл) в 1-горлой 100 мл круглодонной колбе, оснащенной обратным холодильником, при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли безводный K₂СО₃ (169 мг, 1,22 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 30 мин. К ней добавляли MeI (0,104 мл, 1,66 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 50°С. ЖХ-МС показала чистое превращение. Реакционную смесь разбавляли EtOAc и фильтровали для удаления K₂СО₃. Фильтрат сушили под вакуумом. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния, сушили до хорошо сыпучего состояния, загружали на картридж и очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~15% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали и концентрировали с получением метилированного продукта SKC-03-036 (270 мг, 52%). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,16-6,83 (m, 4Н), 6,48 (d, J=7,8 Гц, 1H), 5,92 (m, 1H), 5,08 (m, 2H), 4,66 (t, J=25,6 Гц, 1H), 3,663 (s, 3H), 3,38 (d, J=6,5 Гц, 2H), 2,27 (s, 6H), 1,85-1,76 (m, 4H), 1,54-1,34 (m, 3H), 1,11 (d, J=19,7 Гц, 9H), 0,94-0,86 (m, 3H).

[0475] Стадия 2: Синтез (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилгексан-3-ил)-3-метокси-2-метил-4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пропил бензгидразида

[0476] Высушенную в печи 100 мл двугорлую круглодонную колбу оснащали магнитной мешалкой, покрытой тефлоном, и двумя резиновыми мембранами, при этом одну мембрану с иглой присоединяли к каналу аргон/вакуум. В эту круглодонную колбу, заполненную аргоном, загружали 4-аллил-3-гидрокси-ДАГ (SKC-03-036, 270 мг, 0,58 ммоль) в безводном ТГФ (2 мл) и модифицированный катализатор Вилкинсона (20,08 мг, 0,029 ммоль), и проводили три цикла продувки вакуум/аргон. Смесь перемешивали при комнатной температуре до растворения всех реагентов (<2 мин). К этой перемешанной прозрачной реакционной смеси добавляли 4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (Bpin-H) (0,254 мл, 1,74 ммоль) через шприц, проводили еще одну продувку аргон/вакуум/аргон, и реакционную смесь перемешивали в течение 5 ч. Цвет реакционной смеси изменялся со светло-желтого до темно-коричневого. ЖХ-МС показала, что реакция была окончена через 5 ч, но смесь оставляли для перемешивания в течение ночи. Медленно добавляли несколько капель воды. После прекращения выделения пузырьков газа добавляли МеОН, и реакционную смесь концентрировали. Неочищенную смесь очищали посредством системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством 20% EtOAc/гексан. Фракцию продукта собирали и сушили под вакуумом с получением 230 мг (67%) соединения №29. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,15 (s, 1Н), 7,11 (s, 1H), 7,08-6,91 (m, 3H), 6,48 (d, J=7,8 Гц, 1H), 4,53-4,28 (m, 1H), 3,55 (d, J=4,2 Гц, 3H), 2,25 (d, J=4,5 Гц, 6Н), 1,79-1,74 (m, 2Н), 1,66)s. 3H), 1,7-1,39 (m, 6Н), 1,17 (s, 12Н), 1,03 (d, J=5,8 Гц, 9Н), 0,93 (t, J=7,1 Гц, 1Н), 0,85 (t, J=6,9 Гц, 3H), 0,69 (t, J=7,6 Гц, 2H).

Стадия 3: Синтез (R)-(3-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-2-метокси-3-метилфенил)пропил)бороновой кислоты (Соединение №27):

[0477] К раствору соединения №29 (230 мг, 0,388 ммоль) в смеси ТГФ/вода (соотношение 4:1, 5 мл) добавляли натрия периодат (498 мг, 2,33 ммоль), и затем 2М HCl в эфире (0,388 мл, 0,776 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение нескольких часов, проверяли посредством ЖХ-МС, и продолжали перемешивать реакционную смесь в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали для удаления твердых веществ, промывали посредством ДХМ и сушили под вакуумом. Неочищенную реакционную смесь адсорбировали на нейтральном оксиде алюминия и сушили. После того, как она становилась хорошо сыпучей, ее загружали на картридж ISCO и очищали (колонка 24 г оксида алюминия, смесь растворителей МеОН-ДХМ). Продукт элюировали посредством 2% МеОН в ДХМ) с получением 130 мг соединения №27 (66%) при >95% ее. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,43-9,78 (m, 1H), 8,35-8,03 (m, 1H), 7,18-6,89 (m, 4Н), 6,66-6,38 (m, 1H), 4,67-4,36 (m, 1H), 3,60-3,51 (m, 3H), 3,30 (s, 3H), 3,18 (d, J=5,3 Гц, 2Н), 2,64-2,51 (m, 2Н), 2,25 (d, J=4,3 Гц, 6Н), 1,88-1,16 (m, 8Н), 1,03 (d, J=5,9 Гц, 9Н), 0,89-0,80 (m, 3H).

ПРИМЕР 4

Синтез (R)-(3-(2-дифторметокси)-4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-3-метилфенил)пропил)бороновой кислоты (Соединение №28)

Стадия 1: Синтез (R)-4-аллил-3-(дифторметокси)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилгексан-3-ил)-2-метилбензгидразида

[0478] 3-гидрокси-4-аллил ДАГ (2,8 г, 6,21 ммоль) растворяли в смеси ДМФА/вода (соотношение 6:1, 11,6 мл) в круглодонной колбе, оборудованной обратным холодильником. К ней добавляли карбонат цезия (4,05 г, 12,43 ммоль) и натриевую соль дифторацетата (1,42 г, 9,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 130°С (холодильник открыт для сообщения с воздухом) в течение 2 ч 30 мин. ЖХ-МС показала превращение 67% продукта и 33% исходного материала. После удаления воды и экстракции EtOAc, неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~18% EtOAc в гексане, и исходный материал элюировали посредством 25% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали и сушили с получением 1,13 г чистого продукта в форме бесцветного твердого вещества (64% выход в расчете на прореагировавший исходный материал). 1,2 г исходного материала восстанавливали. Структуру продукта подтверждали по данным ЖХ-МС.

Стадия 2: Синтез (R)-3-(дифторметокси)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилгексан-3-ил)-2-метил-4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) пропилбензгидразида

[0479] К раствору вышеуказанного синтезированного 4-аллил-3-(дифторметокси)-ДАГ (600 мг, 1,2 ммоль) в безводном ТГФ (6 мл) в 100 мл 2-горлой круглодонной колбе при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли катализатор (41,4 мг, 0,06 ммоль). Через 3 цикла продувки вакуум/аргон добавляли Bpin-H (0,523 мл, 3,60 ммоль) через шприц, и проводили 2 других цикла продувки вакуум/аргон. Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч при нагревании с обратным холодильником в атмосфере аргона. Через 20 мин цвет реакционной смеси изменялся до светло-коричневого. ЖХ-МС через 2 ч показала ~46% превращение продукта. Температуру снижали до 76°С, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. ЖХ-МС показала два дополнительных менее полярных пика совместно с непрореагировавшим исходным материалом и ожидаемым продуктом. После осуществления взаимодействия к реакционной смеси добавляли 2 мл МеОН и несколько капель воды, растворители удаляли на роторном испарителе под вакуумом, и неочищенную смесь растворяли в ДХМ и адсорбировали на диоксиде кремния. После того как она становилась сухой и хорошо сыпучей, ее загружали на картридж и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). 660 мг смеси (элюировали посредством ~15% EtOAc в гексане, исходный материал + продукт, соотношение 36:62) собирали после колонки ISCO и непосредственно применяли на следующей стадии.

Стадия 3: Синтез (R)-(3-(2-дифторметокси)-4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-3-метилфенил)пропил)бороновой кислоты (Соединение №28):

[0480] Вышеуказанную смесь (660 мг) растворяли в смеси ТГФ:вода (4:1, 30 мл) и добавляли натрия периодат (1,35 г, 6,30 ммоль) и 2,0 М HCl в ТГФ (1,05 мл, 2,10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 1 ч. ЖХ-МС показала основной пик ожидаемого продукта. Продолжали перемешивать реакционную смесь при 40°С в течение дополнительных 30 мин и при комнатной температуре в течение ночи. После удаления воды и экстракции этилацетатом органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь очищали с применением препаративной ВЭЖХ с получением соединения №28 по данным ЖХ-МС. (>95% ее).

ПРИМЕР 5

Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-6-метил-3,4-дигидро-1H-бензо[с][1,5,2]диоксаборепин-7-карбогидразида (Соединение №75):

Стадия 1: Синтез метил 3-гидрокси-2-метилбензоата

[0481] Экспериментальная методика, как описано в примере 1.

Стадия 2: Синтез метил 4-бром-3-гидрокси-2-метилбензоата:

[0482] 500 мл 3-горлую круглодонную колбу оснащали двумя капельными воронками. В нее помещали раствор трет-бутиламина (4,4 г, 60,2 ммоль) в CH₂Cl₂ (140 мл), и колбу охлаждали до -78°С. По каплям добавляли раствор брома (9,6 г, 60,2 ммоль) в CH₂Cl₂ (60 мл) в течение 30 минут из капельной воронки. Смесь перемешивали при -78°С в течение дополнительного 1 ч. Раствор метил 3-гидрокси-2-метилбензоата (10,0 г, 60,2 ммоль) в CH₂Cl₂ (25 мл) добавляли из второй капельной воронки в течение 1 ч. (US 2005110979). Реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. ЖХ-МС показала 3 пика. Водную часть удаляли, и смесь экстрагировали посредством ДХМ, после чего проводили колоночную флэш-хроматографию с применением системы ISCO (2×80 г колонка с силикагелем, смесь растворителей гексан/EtOAc) с получением продукта (1^й пик, фракции 4-5, 3,3 г, 22% выход). Побочные продукты отделяли и характеризовали как дибром и 5-бром производные. 1Н ЯМР (CDCl₃): 7,29-7,21 (dd, 2Н), 5,64 (s, 1H), 3,81(s, 3H), 2,45(s, 3H).

Стадия 2: Синтез метил 4-бром-2-метил-3-2((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси) этокси)бензоата:

[0483] К раствору метил 4-бром-3-гидрокси-2-метилбензоата (1,0 г, 4,08 ммоль) в безводном ДМФА (20 мл) в атмосфере аргона добавляли безводный K₂СО₃ (1,12 г, 8,16 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. К данной перемешанной смеси добавляли 2-(2-бромэтокси) тетрагидро-2Н-пиран (1,28 г, 6,12 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 4 ч. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. Нагревание прекращали, и перемешивание продолжали в течение ночи при комнатной температуре. После удаления воды и экстракции посредством EtOAc органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~10% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали и концентрировали с получением 1,48 г (97% выход) SKC-02-034. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,53 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7,46 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,78 (t, J=3,5 Гц, 1Н), 4,22-4,03 (m, 3H), 4,07-3,76 (m, 5Н), 3,60-3,52 (m, 1H), 2,61 (s, 3H), 1,98-1,38 (m, 6Н).

Стадия 3: Синтез 4-бром-2-метил-3-2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)этокси) бензойной кислоты:

[0484] К вышеуказанному метиловому сложному эфиру (330 мг, 0,884 ммоль) в 2 мл МеОН добавляли водный раствор KОН (1,0 г KОН в 10 мл воды), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. ЖХ-МС показала образование ~5% продукта. К реакционной смеси добавляли 3 мл МеОН и нагревали до 60°С. ЖХ-МС показала единичный пик. Добавляли насыщенный NaHCO₃ до рН 9. Продукт пробовали экстрагировать посредством EtOAc, но он оставался в водной фракции. Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и медленно добавляли 1 н. HCl до получения рН 4. Продукт экстрагировали с применением EtOAc, и ЖХ-МС обеих фракций показала почти одинаковое количество продукта. Водную фракцию снова подкисляли до рН 0-1, ЖХ-МС показала дополнительный пик (побочный), кроме основного пика. Органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством 25% EtOAc в гексане с получением 220 мг (70% выход) продукта.

[0485] Эксперимент повторяли в объеме 2,2 г в смеси 30 мл МеОН и 50 мл 10% водного KОН. Реакция была окончена через 6 ч при 55°С. Добавляли насыщенный NaHCO₃, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь охлаждали на ледяной бане, медленно добавляли 1 н. HCl до получения рН 3-4. Экстрагировали с применением EtOAc, и затем водные фракции снова подкисляли посредством 1 н. HCl до рН 1-2. Экстрагировали второй раз. Объединенные органические фракции концентрировали и очищали с применением системы ISCO (40 г колонка silica gold, градиент гексан/EtOAc). Основной пик элюировали посредством 35% EtOAc в гексане с получением SKC-02-042. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,67 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 7,48 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,77 (t, J=3,5 Гц, 1Н), 4,26-4,02 (m, 3H), 3,91-3,80 (m, 2Н), 3,69-3,40 (m, 1H), 2,65 (s, 3H), 2,01-1,39 (m, 6Н).

Стадия 4: Синтез перфторфенил-4-бром-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)этокси)бензоата

[0486] Вышеуказанную кислоту (SKC-02-042, 770 мг, 2,14 ммоль) растворяли в безводном этилацетате (9 мл) в 200 мл круглодонной колбе в атмосфере аргона и перемешивали при комнатной температуре. К ней добавляли пентафторфенол (434 мг, 2,36 ммоль) и 1М DCC в ДХМ (2,36 мл, 2,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли 5 мл воды при перемешивании в течение дополнительных 10 мин. Осадок отфильтровывали. Фильтрат разбавляли EtOAc и водой и экстрагировали этилацетатом. Органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄; фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~8% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали и сушили с получением SKC-02-044 (1,1 г, 98% выход). ¹H ЯМР (400 МГц, MeOD) δ 7,93 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 7,74 (t, J=11,3 Гц, 1H), 4,84 (t, J=3,3 Гц, 1H), 4,26-4,10 (m, 3H), 4,06-3,87 (m, 2H), 3,72-3,55 (m, 1H), 2,74 (s, 3H), 2,03-1,70 (m, 6H).

Стадия 5: Синтез 4-бром-N'-(трет-бутил)-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)этокси)бензгидразида

[0487] EtOAc (4 мл) добавляли к перемешанному водному раствору K₂СО₃ (25 масс. %, 600 мг K₂СО₃ в 3,4 мл воды) в 200 мл кругл о донной колбе при комнатной температуре. К нему добавляли трет-бутил гидразин гидрохлорид (267 мг, 2,14 ммоль), после чего добавляли производное Pf сложного эфира (750 мг, 1,43 ммоль), растворенное в EtOAc (3 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Для контроля посредством ЖХ-МС маленькое количество образца перемешивали с слегка кислым буферным раствором (рН 6,5 от Aldrich) чтобы погасить любое непрореагировавшее количество свободного гидразина. Неочищенную смесь разбавляли буферным раствором (рН 6,5) и перемешивали в течение нескольких минут. ЖХ-МС показала два пика, основной пик с ожидаемой массой продукта. После обычного удаления воды и экстракции этилацетатом органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь повторно растворяли в ДХМ, адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~45% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали с получением 490 мг, 80% выход продукта гидразида SKC-02-050. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,38 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 7,26 (s, 1H), 6,96 (d, J=8,2 Гц, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,72 (d, J=2,8 Гц, 1Н), 4,15-4,03 (m, 3H), 3,97-3,73 (m, 2Н), 3,51-3,49 (m, 1Н), 2,41 (s, 3H), 1,91-1,44 (m, 6Н), 1,13 (s, 9Н).

Стадия 6: Синтез 4-бром-N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)этокси)бензгидразида

[0488] К перемешанному раствору SKC-02-045 (500 мг, 1,16 ммоль) в ДХМ (2 мл) в 100 мл кругл о донной колбе добавляли 3,5-диметилбензоилхлорид (196 мг, 1,16 ммоль). Раствор становился прозрачным. К нему по каплям добавляли TEA (0,162 мл, 1,16 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала два пика, основной пик показал ожидаемую массу продукта. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~40% EtOAc в гексане. Фракции продукта собирали с получением 560 мг (86% выход) твердого продукта SKC-02-047. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,55 (s, 1H), 7,45 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,03 (d, J=4,2 Гц, 3H), 6,42 (dd, J=8,2, 1,9 Гц, 1Н), 4,65 (t, J=3,1 Гц, 1Н), 4,14-3,58 (m, 5Н), 3,55-3,37 (m, 1H), 2,24 (s, 6Н), 1,79 (s, 3H), 1,77-1,37 (m, 15Н).

Стадия 7: Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)этокси)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразида

[0489] К перемешанному раствору вышеуказанного синтезированного 4-бром-ДАГ (200 мг, 0,36 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (2 мл) в 100 мл 2-горлой круглодонной колбе при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли ацетат палладия (II) (4,0 мг, 0,018 ммоль), фосфиновый лиганд (25,0 мг, 0,071 ммоль) и триэтиламин (0,15 мл, 1,069 ммоль). Через 3 цикла продувки вакуум/аргон, добавляли Bpin-H (0,16 мл, 1,069 ммоль) через шприц, после чего проводили еще два цикла продувки вакуум/аргон. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, и затем нагревали до 40°С и перемешивали в течение 4 ч. ЖХ-МС показала пик продукта. После взаимодействия к реакционной смеси добавляли 2 мл МеОН и несколько капель воды, и растворители удаляли на роторном испарителе. Неочищенную смесь повторно растворяли в ДХМ и адсорбировали на диоксиде кремния. После того, как она становилась сухой и хорошо сыпучей, ее загружали на картридж и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc) с получением 50 мг SKC-02-048.

Стадия 8: Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-6-метил-3,4-дигидро-1Н-бензо[с][1,5,2]диоксаборепин-7-карбогидразида

[0490] 50 мг SKC-02-048 перемешивали в 2 мл смеси 1:1 вода/ацетонитрил, содержащей 0,1% муравьиной кислоты, при 40°С в течение ночи, и контролировали посредством ЖХ-МС. После окончания реакции растворитель удаляли на роторном испарителе под вакуумом, и неочищенный продукт очищали посредством препаративной ВЭЖХ и лиофилизировали с получением 17 мг соединения №75 в форме чистого сухого порошка. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,49 (s, 1Н), 8,39 (s, 1H), 7,57 (d, J=7,8 Гц, 1H), 7,04 (s, 3H), 6,19 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 4,41-4,18 (m, 2Н), 4,16-3,96 (m, 2Н), 2,25 (s, 6Н), 1,70 (s, 3H), 1,49 (s, 9Н).

ПРИМЕР 6

Синтез (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-1-гидрокси-6-метил-3,4-дигидро-1H-бензо[с][1,5,2]диоксаборепин-7-карбогидразида

(Соединение №79)

Стадия 1: Синтез 4-бром-N'-((R)-2,2-диметилпентан-3-ил)-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)этокси)бензгидразида

[0491] EtOAc (6 мл) добавляли к перемешанному 25 масс. % водному раствору K₂СО₃ (800 мг K₂СО₃ в 3,2 мл воды) в круглодонной колбе при комнатной температуре. К нему добавляли трет-бутил гидразин, после чего добавляли Pf сложноэфирное соединение (1,0 г, 1,904 ммоль), растворенное в EtOAc (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала единичный пик. Неочищенную смесь разбавляли МеОН, концентрировали, растворяли в ДХМ, адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~35% EtOAc в гексане с получением 610 мг (68%) продукта. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,66 (s, 1Н), 7,52 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 6,97 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 4,85 (s, 1Н), 4,70 (t, J=3,3 Гц, 1Н), 4,06-4,01 (m, 2Н), 3,97-3,89 (m, 1H), 3,84-3,70 (m, 2Н), 3,51-3,40 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 1,82-1,35 (m, 8Н), 1,04 (t, J=7,5 Гц, 3H), 0,93 (s, 9Н).

Стадия 2: Синтез 4-бром-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-((R)-2,2-диметилпентан-3-ил)-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)этокси)бензгидразида

[0492] К раствору SKC-03-034 (310 мг, 0,658 ммоль) в 2 мл ДХМ добавляли хлорангидрид (111 мг, 0,658 ммоль). Раствор становился прозрачным. По каплям добавляли TEA (66,5 мг, 0,092 мл), и реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционная смесь становилась бесцветной густой суспензией, и ее перемешивали в течение ночи. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. Реакционную смесь адсорбировали на силикагеле и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~20% EtOAc в гексане с получением 380 мг (96%) SKC-03-037. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,33 (d, J=57,6 Гц, 1Н), 7,47 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,10 (s, 1Н), 7,06-6,97 (m, 2Н), 6,62-6,41 (m, 1H), 4,70-4,60 (m, 1H), 4,33 (dd, J=82,0, 10,4 Гц, 1Н), 3,99-3,82 (m, 3H), 3,82-3,71 (m, 1H), 3,71-3,58 (m, 1Н), 3,52-3,34 (m, 1Н), 2,24 (d, J=4,9 Гц, 6Н), 1,83-1,28 (m, 11Н), 1,12-0,99(m, 12Н).

Стадия 3: Синтез (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-1-гидрокси-6-метил-3,4-дигидро-1Н-бензо[с][1,5,2] диоксаборепин-7-карбогидразида (Соединение №79)

[0493] К раствору SKC-03-037 (380 мг, 0,630 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (3 мл) в 100 мл 2-горлой кругл о донной колбе при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли ацетат палладия (II) (7,07 мг, 0,031 ммоль), фосфиновый лиганд (44,1 мг, 0,126 ммоль) и триэтиламин ((0,263 мл, 1,889 ммоль). Через 3 цикла продувки вакуум/аргон добавляли Bpin-H (0,273 мл, 1,889 ммоль) через шприц, после чего проводили еще два цикла продувки вакуум/аргон. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, и затем нагревали до 40°С и перемешивали в течение 4 ч. ЖХ-МС показала пик продукта и более полярный пик, соответствующий протонированному продукту (SKC-03-040-1). После взаимодействия, к реакционной смеси добавляли 2 мл МеОН и несколько капель воды, и концентрировали ее под вакуумом. Неочищенную смесь повторно растворяли в ДХМ и адсорбировали на диоксиде кремния. После того, как она становилась сухой и хорошо сыпучей, ее загружали на картридж и очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Основную фракцию (Соединение №70) элюировали посредством 20% EtOAc в гексане. Второй пик (SKC-03-040-1) элюировали посредством 25% EtOAc в гексане. Два пика продукта разделяли. ¹Н ЯМР SKC-03-040 (400 МГц, ДМСO-d₆) δ 10,33 (d, J=58,0 Гц, 1Н), 7,48 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 7,07 (d, J=25,0 Гц, 3H), 6,70-6,23 (m, 1Н), 4,78-4,60 (m, 1Н), 4,43 (d, J=9,9 Гц, 1Н), 3,99-3,80 (m, 3H), 3,84-3,71 (m, 1Н), 3,68 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 3,50-3,39 (m, 1Н), 2,24 (d, J=4,9 Гц, 6Н), 1,80-1,34 (m, 8Н), 1,09-0,92 (m, 24Н).

[0494] Полученный Bpin-илированный продукт (SKC-03-040) перемешивали с 2 мл смеси 1:1 вода/ацетонитрил, содержащей 0,1% муравьиной кислоты, при 40°С в течение ночи. ЖХ-МС показала чистое превращение. Растворитель удаляли, и остаток очищали посредством препаративной ВЭЖХ и лиофилизировали с получением соединения №79 (83 мг; >95% ее) в форме сухого порошка.

[0495] Протонированный продукт, полученный на первой стадии, также перемешивали с 2 мл смеси 1:1 вода/ацетонитрил, содержащей 0,1% муравьиной кислоты, при 40°С в течение ночи с получением 41 мг SKC-03-040-2 (>95% ее) в форме сухого порошка.

[0496] С применением вышеописанной методики соединение №82 получали из SKC-06-005:

[0497] Соединение №82 ЖХ-МС [МН+]=443.

ПРИМЕР 7

Синтез (R)-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилпентан-3-ил) гидразинкарбонил)-2-(2-метоксиэтокси)-3-метилфенил)бороновой кислоты

(Соединение №26):

Стадия 1: Синтез метил 4-бром-3-(2-метоксиэтокси)-2-метилбензоата

[0498] 2-Метил-3-гидроксил-4-бромметиловый сложный эфир (2,0 г, 8,16 ммоль) растворяли в безводном ДМФА (20 мл) в 100 мл круглодонной колбе, оснащенной обратным холодильником, и к нему добавляли безводный карбонат калия (2,26 г, 16,32 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение 15 мин. К ней добавляли 1-бром-2-метоксиэтан (1,70 г, 12,24 ммоль), и реакционную смесь нагревали до 90°С и перемешивали в течение ночи в атмосфере аргона. ЖХ-МС показала единичный пик. Реакционную смесь охлаждали. После удаления воды и экстракции посредством EtOAc органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Их применяли на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия 2: Синтез 4-бром-3-(2-метоксиэтокси)-2-метилбензойной кислоты

[0499] К раствору МеОН (25 мл) вышеуказанного метилового сложного эфира SKC-04-011, (масса неочищенного 3,1 г, но в пересчете на 2,0 г чистого соединения) добавляли 50 мл 10% водного раствора КОН. Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. ЖХ-МС показала, что реакция была окончена только на 75%. Реакционную смесь нагревали в течение дополнительных 7 часов, и затем перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. Весь МеОН удаляли под вакуумом. Водную реакционную смесь охлаждали на ледяной бане, медленно добавляли 1 н. HCl до рН 4-5. Белый продукт выпадал в осадок. Его фильтровали и сушили под вакуумом при 40°С в течение ночи с получением 1,34 г (70%) кислоты SKC-04-012 в форме бесцветного порошка. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 13,15 (br s, 3H), 7,54 (d, J=8,4 Гц, 1H), 7,46 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,09-3,90 (m, 2H), 3,73-3,63 (m, 2H), 3,33 (s, 3H), 2,47 (s, 3H).

Стадия 3: Синтез перфторфенил 4-бром-3-(2-метоксиэтокси)-2-метилбензоата

[0500] 4-бром-3-(2-метоксиэтокси)-2-метилбензойную кислоту (SKC-04-012, 1,37 г, 4,74 ммоль) растворяли в безводном EtOAc (20 мл) в 250 мл круглодонной колбе в атмосфере аргона и перемешивали при комнатной температуре. К нему добавляли пентафторфенол (0,959 г, 5,21 ммоль) и 1М DCC в ДХМ (5,21 мл, 5,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли 2 мл воды с перемешиванием в течение дополнительных 10 мин. Осадок отфильтровывали. Фильтрат разбавляли EtOAc и экстрагировали. После удаления воды органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Фракции продукта элюировали посредством 5%EtOAc в гексане с получением 1,79 г (83% выход) производного Pf сложного эфира SKC-04-017 в форме бесцветного твердого вещества.

Стадия 4: Синтез (R)-4-бром-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3-(2-метоксиэтокси)-2-метилбензгидразида

[0501] EtOAc (12 мл) добавляли к перемешанному водному раствору 25 масс. % K₂СО₃ (1,63 г K₂СО₃ в 6,5 мл воды) в круглодонной колбе при комнатной температуре. К нему добавляли соль трет-бутил гидразина (1,784 г, 5,90 ммоль), после чего добавляли вышеуказанное производное Pf сложного эфира (1,79 г, 3,93 ммоль), растворенное в EtOAc (8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала основной пик с ожидаемой массой продукта. Неочищенную смесь разбавляли кислым буферным раствором (Aldrich, рН 6,5) и экстрагировали EtOAc. Органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт повторно растворяли в ДХМ, адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали ~30% смесью EtOAc в гексане с получением 1,6 г (99%) SKC-04-026. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,66 (d, J=6,5 Гц, 1Н), 7,51 (d, J=8,2 Гц, 1H), 6,96 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 4,84 (dd, J=6,5, 3,3 Гц, 1H), 4,01-3,96 (m, 2Н), 3,72-3,63 (m, 2Н), 3,34 (s, 3H), 2,38-2,31 (m, 1Н), 2,29 (s, 3H), 1,60-1,49 (m, 1Н), 1,34-1,21 (m, 1Н), 1,03 (t, J=7,5 Гц, 3H), 0,93 (s, 9Н).

Стадия 5: Синтез (R)-4-бром-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3-(2-метоксиэтокси)-2-метилбензгидразида

[0502] К раствору (R)-4-бром-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3-(2-метоксиэтокси)-2-метилбензгидразида (SKC-04-026, 750 мг, 1,869 ммоль) в безводном ДХМ (2 мл) добавляли 3,5-диметилбензоилхлорид (315 мг, 1,869 ммоль) и триэтиламин (0,260 мл, 1,869 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере аргона в течение ночи. ЖХ-МС показала два основных пика. Неочищенную смесь растворяли в ДХМ и адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Фракцию продукта элюировали посредством 30% EtOAc в гексане с получением SKC-04-028-3. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,57-10,08 (m, 1H), 7,48 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 7,19-6,96 (m, 3H), 6,49 (dd, J=50,2, 8,2 Гц, 1Н), 4,33 (dd, J=82,0, 10,2 Гц, 1Н), 3,96-3,78 (m, 2Н), 3,62 (t, J=4,6 Гц, 2Н), 3,31 (s, 3H), 2,25 (s, 6Н), 1,78-1,29 (m, 5Н), 1,12-0,92 (m, 12Н).

Стадия 6: Синтез (R)-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилпентан-3-ил) гидразинкарбонил)-2-(2-метоксиэтокси)-3-метилфенил)бороновой кислоты (Соединение №26)

[0503] К раствору вышеуказанного синтезированного 4-бром-ДАГ (SKC-04-028-3, 400 мг, 0,750 ммоль) в безводном 1,4-диоксане (4 мл) в 100 мл 2-горлой круглодонной колбе при комнатной температуре в атмосфере аргона добавляли ацетат палладия (II) (8,42 мг, 0,037 ммоль), фосфиновый лиганд (52,6 мг, 0,150 ммоль) и триэтиламин (0,314 мл, 2,249 ммоль) Через 3 цикла продувки вакуум/аргон, добавляли Bpin-H (0,327 мл, 2,249 ммоль) через шприц, после чего проводили еще два цикла продувки вакуум/аргон. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин, и затем нагревали до 40°С и перемешивали в течение ночи. ЖХ-МС показала пик Bpin-илированного продукта и более полярный пик с массой, соответствующей протонированному продукту. После взаимодействия, к реакционной смеси добавляли 2 мл МеОН и несколько капель воды. Растворители удаляли на роторном испарителе под вакуумом, и неочищенную смесь повторно растворяли в ДХМ и адсорбировали на диоксиде кремния. После того, как она становилась сухой и хорошо сыпучей, ее загружали на картридж и очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Два продукта элюировались совместно. Фракции собирали и очищали с применением препаративной ВЭЖХ. Выделяли SKC-04-032 Pkl (31 мг, >95% ее). В течение очистки посредством ВЭЖХ Bpin-илированный продукт медленно гидролизовали до производного бороновой кислоты. После перемешивания в течение ночи в смеси растворителей для ВЭЖХ (0,1% НСО₂Н в смеси вода/ACN, 2 мл) при 40°С, материал повторно очищали посредством препаративной ВЭЖХ с получением соединения №26 (9 мг) (>95% ее).

ПРИМЕР 8

Синтез (R)-(3-(1-(2,2-диметилпентан-3-ил)-2-(3-метокси-2-метилбензоил) гидразинкарбонил)-5-метилфенил)бороновой кислоты (Соединение №33)

Стадия 1: Синтез 3-метил-5-(4,4,5,5,-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоилхлорида:

[0504] 3-Метил-5-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-бензойную кислоту (700 мг, 2,67 ммоль) помещали в 100 мл круглодонную колбу, оснащенную мешалкой. В колбу добавляли 3,0 мл безводного хлороформа, после чего добавляли 2,0 мл тионилхлорида и 1 каплю безводного ДМФА. Реакционную смесь перемешивали при 35°С в течение 3 часов, и затем при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС образца после гашения небольшого количества посредством МеОН показала, что кислоты не осталось. Растворитель и избыток тионилхлорида удаляли под вакуумом с получением SKC-03-071. SKC-03-071 применяли на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия 2: Синтез (R)-N'-2,2-диметилпентан-3-ил)-3-метокси-2-метил-N'-(3-метил-5-(4,4,5,5,-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил)бензгидразида:

[0505] Вышеуказанный хлорангидрид (SKC-03-071, 403 мг, 1,437 ммоль) растворяли в безводном ДХМ (2 мл) и добавляли к перемешанному раствору ранее синтезированного (R)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3-метокси-2-метилбензгидразида (400 мг, 1,437 ммоль, >95% ее) в 3 мл безводного ДХМ при комнатной температуре в атмосфере аргона. Добавляли безводный триэтиламин (0,200 мл, 1,437 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. ЖХ-МС показала основной пик с ожидаемой массой продукта совместно с несколькими другими побочными пиками. Неочищенную смесь адсорбировали на нейтральном оксиде алюминия и сушили под вакуумом. Сухой порошок загружали на картридж и очищали с применением системы ISCO (колонка 24 г нейтрального оксида алюминия, градиент гексан/EtOAc). При ~15% EtOAc в гексане продукт элюировали совместно с гидролизом продукта с получением SKC-03-072 (270 мг) в форме смеси. Его непосредственно применяли для следующей стадии гидролиза.

Стадия 3: Синтез (R)-(3-(1-(2,2-диметилпентан-3-ил)-2-(3-метокси-2-метилбензоил)гидразинкарбонил)-5-метилфенил)бороновой кислоты (Соединение №33)

[0506] Вышеуказанную смесь SKC-03-072 (270 мг, 0,517 ммоль) перемешивали со смесью ТГФ:Н₂О (4:1, 15 мл) и добавляли натрия периодат (221 мг, 1,034 ммоль) и 2,0 М раствор HCl в ТГФ (1,55 мл, 3,10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой бороновой кислоты. Растворитель удаляли на роторном испарителе под вакуумом. После удаления воды и экстракции посредством EtOAc, органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт очищали с применением препаративной ВЭЖХ с получением 32 мг (14%) соединения №33. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,51-9,87 (m, 1H), 7,99 (br s, 1Н), 7,64 (dd, J=20,2, 11,7 Гц, 2Н), 7,40-7,25 (m, 1Н), 7,13-7,03 (m, 1H), 6,98-6,89 (m, 1Н), 6,48-6,17 (m, 1H), 4,58-4,12 (m, 1Н), 3,76-3,68 (m, 3H), 2,28 (d, J=6,5 Гц, 3H), 1,49 (d, J=31,9 Гц, 5Н), 1,16-0,92 (m, 12Н).

[0507] С применением вышеописанного способа (R)-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-3-фторфенил)бороновую кислоту (Соединение №13) получали из SKC-07-018:

[0508] Соединение №13 ЖХ-МС [МН+]=443.

[0509] Калия (R)-(4-(2-(3,5-диметилбензоил-2(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразин-1-карбонил)-3-фторфенил)трифторборат (Соединение №93) получали из соединения №13 следующим образом:

[0510] Раствор гидрофторида калия (1,81 мл, 5,43 ммоль, 3,0 М в Н₂О от Aldrich) добавляли к перемешиваемому раствору соединения №13 (0,300 г, 0,68 ммоль) при комнатной температуре (J. Org. Chem. 77:6384-6393 (2012)). Бесцветный прозрачный раствор начинал медленно выпадать в осадок через 5 мин, и образовывал густой белый осадок через 20 мин. Смесь перемешивали в течение 2,5 ч при комнатной температуре, и затем концентрировали при пониженном давлении с получением белого твердого вещества. К белому твердому веществу добавляли ацетон и фильтровали через фильтрующую воронку. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении на роторном испарителе до появления небольшого количества осадка. К полученному белому твердому веществу добавляли диэтиловый эфир для ускорения осаждения. Осадок собирали посредством фильтрации, промывали эфиром и сушили с получением белой соли бората соединения №93 (0,276 г, 81% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,18 (d, J=56,9 Гц, 1Н), 7,00-6,92 (m, 5Н), 6,52 (dd, J=14,2, 7,1 Гц, 1Н), 4,43 (dd, J=58,4, 8,6 Гц, 1H), 2,24 (s, 6Н), 1,79-1,34 (m, 4Н), 1,02 (d, J=3,2 Гц, 9Н), 0,88 (dt, J=31,9, 6,9 Гц, 3H).

[0511] С применением вышеописанного способа (R)-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-2-фторфенил)бороновую кислоту (Соединение №22) получали из SKC-07-055A:

[0512] Соединение №22 ЖХ-МС [МН+]=443.

[0513] С применением вышеописанного способа (4-(2-(трет-бутил)-2-(3,5-диметилбензоил) гидразинкарбонил)-2-фторфенил)бороновую кислоту (Соединение №23) получали из SKC-07-055B:

[0514] С применением вышеописанного способа (R)-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилгексан-3-ил)гидразинкарбонил)-3,5-дифторфенил)бороновую кислоту (Соединение №24) получали из SKC-07-043A:

[0515] Соединение №24 ЖХ-МС [МН+]=461.

[0516] С применением вышеописанного способа (4-(2-(трет-бутил)-2-(3,5-диметилбензоил) гидразинкарбонил)-3,5-дифторфенил)бороновую кислоту (Соединение №25) получали из SKC-07-043B:

ПРИМЕР 9

Получение синтетических промежуточных веществ

Стадия 1: Синтез метил 3-гидрокси-2-метил-4-(проп-1-ен-1ил)бензоата

[0517] В круглодонную колбу, оснащенную капельной воронкой, добавляли метил 4-аллил-3-гидрокси-2-метилбензоат (4,12 г, 20 ммоль) в безводном ДМСО (20 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. К перемешанному раствору по каплям добавляли t-BuOK в 1,0 М ТГФ (5,61 г, 50 ммоль). После добавления реакционную смесь нагревали при 55°С в течение ночи. Реакцию контролировали с применением ЖХ-МС. После окончания реакции, смесь охлаждали, подкисляли 1 н. HCl и перемешивали в течение 30 мин. Посредством удаления водной части и экстракции этилацетатом получали неочищенную смесь, которую очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с силикагелем, градиент растворителей гексан/EtOAc) с получением 4,12 г (77%) продукта. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,42 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,18 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 6,61 (dd, J=15,9, 1,7 Гц, 1H), 6,37-6,13 (m, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,50 (s, 3H), 1,96 (dd, J=6,6, 1,7 Гц, 3H).

Стадия 2: Синтез метил 4-формил-3-гидрокси-2-метилбензоата

[0518] К раствору метил 3-гидрокси-2-метил-4-(проп-1-ен-1ил)бензоата (1,66 г, 8,05 ммоль) в диоксан/вода (280 мл, соотношение 2,5/1) добавляли натрия периодат (3,96 г, 18,51 ммоль) и 2,5 масс. % раствор тетраоксида осмия в трет-бутаноле (3,3 мл, 2,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. После удаления воды и экстракции посредством EtOAc, неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc) с получением 1,2 г (77% выход) альдегида. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 11,39 (s, 1H), 9,93 (s, 1Н), 7,45 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,38 (d, J=8,1 Гц, 1Н), 3,93 (s, 3H), 2,44 (s, 3H).

Стадия 3: Синтез метил 4-формил-2-метил-3-(((трифторметил)сульфонил)окси)бензоата

[0519] К перемешанному раствору метил 4-формил-3-гидрокси-2-метилбензоата (1,1 г, 5,66 ммоль) в безводном ДХМ (22 мл) при -78°С в атмосфере аргона по каплям добавляли трифторметансульфоновый ангидрид (1,6 г, 5,66 ммоль), после чего добавляли триэтиламин (0,79 мл, 5,66 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи и оставляли нагреваться до комнатной температуры. Реакционная смесь в процессе добавления из бесцветной становилась желтой, и затем в течение ночи светло-коричневой. ЖХ-МС после перемешивания в течение ночи показала единичный пик. После обычного удаления воды и экстракции посредством ДХМ органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь адсорбировали на силикагеле и сушили. Ее загружали на картрижд и очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с силикагелем, градиент гексан/EtOAc). Фракции продукта собирали и сушили под вакуумом с получением 1,58 г (85% конечного продукта). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 10,26 (s, 1Н), 7,99 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,89 (d, J=8,1 Гц, 1H), 3,96 (s, 3H), 2,63 (s, 3H).

Стадия 4: Синтез метил 4-(гидроксиметил)-2-метил-3-(((трифторметил) сульфонил)окси)бензоата

[0520] К перемешанному раствору вышеуказанного соединения (1,58 г, 4,84 ммоль) в МеОН (10 мл) при температуре льда в атмосфере аргона добавляли борогидрид натрия (0,183 г, 4,84 ммоль). ЖХ-МС через 2 часа показала новый основной пик. Реакционную смесь гасили добавлением воды (~2 мл). МеОН удаляли на роторном испарителе. Реакционную смесь экстрагировали посредством EtOAc, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, концентрировали и очищали с применением системы ISCO (24 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан-EtOAc). Фракции продукта собирали с получением 970 мг (61%) конечного спирта. ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,93 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,56 (d, 1Н), 4,84 (d, J=6,2 Гц, 2H), 3,92 (s, 3H), 2,59 (s, 3H), 2,14 (t, J=6,2 Гц, 1H).

Стадия 5: Синтез метил 2-метил-4-(((тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)метил)-3-(((трифторметил)сульфонил)окси)бензоата:

[0521] К перемешанному раствору вышеуказанного спирта (970 мг, 2,95 ммоль) в безводном ДХМ (35 мл) в кругл о донной колбе добавляли 3,4-дигидро-2Н- пиран (2,48 г, 29,5 ммоль) и пиридиния р-толуолсульфонат (371 мг, 1,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре в атмосфере аргона. ЖХ-МС показала единичный пик. После удаления воды и экстракции посредством ДХМ неочищенную реакционную смесь очищали с применением системы ISCO - колонки с силикагелем, (24 г, градиент гексан/EtOAc), с получением 780 мг (64%) конечного продукта. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,90 (d, J=8,1 Гц, 1H), 7,55 (d, J=8,2 Гц, 1H), 4,90 (d, J=13,9 Гц, 1H), 4,75-4,56 (m, 2H), 3,91 (s, 3H), 3,89-3,82 (m, 1H), 3,60-3,48 (m, 1H), 2,59 (s, 3H), 1,93-1,50 (m, 6H).

Стадия 1: Синтез 2-(триметилсилил)этил 3-ацетокси-2-метилбензоата:

[0522] К раствору вышеуказанной бензойной кислоты (15,54 г, 80,00 ммоль) в безводном ДХМ (100 мл) в 500 мл круглодонной колбе добавляли 10 мл тионилхлорида и 1 каплю безводного ДМФА. Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Растворитель и избыток тионилхлорида удаляли под вакуумом с получением продукта SKC-01-048. SKC-01-048 применяли без дальнейшей очистки на следующей стадии.

[0523] К перемешанному раствору вышеуказанного хлорангидрида (13,61 г, 64,00 ммоль) в безводном ДХМ (100 мл) в 500 мл круглодонной колбе, оснащенной осушительной трубкой, добавляли силанольный спирт (11,35 г, 96,00 ммоль). К данной смеси по каплям добавляли триэтиламин. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. ЖХ-МС показала новый основной пик. Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре до 48 ч. После удаления воды и экстракции посредством ДХМ органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь очищали с применением системы ISCO (120 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством 5% EtOAc в гексане с получением 18,84 г (77%) SKC-01-049. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,73-7,57 (m, 1H), 7,25-6,98 (m, 2H), 4,37-4,23 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 1,09-1,00 (m, 2H), -0,00 (s, 9H).

Стадия 2: Синтез 2-(триметилсилил)этил 3-гидрокси-2-метилбензоата

[0524] Вышеуказанный силанольный сложный эфир (SKC-01-049, 14,43 г, 49,00 ммоль) перемешивали с МеОН:вода (1:4, 100 мл) и бикарбонатом натрия (20,57 г, 245,00 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала единичный пик. Метанол удаляли, и реакционную смесь экстрагировали посредством ДХМ. Органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Неочищенную смесь очищали с применением системы ISCO (120 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc) с получением 12,0 (99%) SKC-01-053. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,56 (dd, J=7,8, 1,1 Гц, 1H), 7,26 (t, J=7,9 Гц, 1Н), 7,11 (dd, J=8,0, 0,9 Гц, 1H), 5,47 (s, 1H), 4,61-4,53 (m, 2H), 2,63 (s, 3H), 1,38-1,18 (m, 2H), 0,25 (s, 9H).

Стадия 3: Синтез 2-(триметилсилил)этил 3-(аллилокси)-2-метилбензоата

[0525] К перемешанному раствору силанольного сложного эфира (SKC-01-053, 290 мг, 1,15 ммоль) в безводном ацетоне (20 мл) в 100 мл круглодонной колбе добавляли безводный карбонат кальция (318 мг, 2,30 ммоль), после чего добавляли аллилбромид (0,15 мл, 1,73 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала единичный пик с ожидаемой массой продукта. Растворитель удаляли на роторном испарителе, и реакционную смесь экстрагировали посредством ДХМ. Неочищенный продукт очищали с применением системы ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~5% EtOAc в гексане с получением 180 мг (54%) продукта SKC-01-055. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,31 (dd, J=7,8, 0,9 Гц, 1H), 7,08 (t, J=8,0 Гц, 1Н), 6,88 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,08-5,88 (m, 1H), 5,40-5,29 (m, 1H), 5,26-5,15 (m, 1H), 4,50-4,41 (m, 2H), 4,35-4,24 (m, 2H), 2,38 (s, 3H), 1,10-0,99 (m, 2H), -0,00 (s, 9H).

Стадия 4: Синтез 2-(триметилсилил)этил 4-аллил-3-гидрокси-2-метилбензоата

[0526] 2-(Триметилсилил)этил 3-(аллилокси)-2-метилбензоат (500 мг, 1,70 ммоль) растворяли в 1-метил пирролидин-2-оне (1 мл) в колбе для микроволновой печи, закрывали пробкой и подвергали действию микроволнового излучения (СЕМ discover) при перемешивании при 220°С, максимальном давлении 300 psi, время обработки 5 мин, время выдерживания 15 мин. ЖХ-МС показала 3 пика, включая основной пик с ожидаемой массой продукта. После охлаждения неочищенную смесь непосредственно загружали в колонку с силикагелем (12 г) и очищали с применением системы ISCO (смесь растворителей гексан:EtOAc, продукт элюировали посредством ~5% EtOAc в гексане) с получением SKC-01-056. Вышеуказанный эксперимент повторяли несколько раз в объеме 1-2 г. Общая масса выделенного продукта составляла 3,6 г.

Стадия 5: Синтез 2-(триметилсилил)этил-3-гидрокси-2-метил-4-(3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пропил)бензоата

[0527] Высушенную в печи 100 мл двугорлую круглодонную колбу оснащали магнитной мешалкой, покрытой тефлоном, и двумя резиновыми мембранами, при этом одну мембрану с иглой присоединяли к каналу аргон/вакуум. В эту круглодонную колбу, заполненную аргоном, загружали 2-(триметилсилил)этил 4-аллил-3-гидрокси-2-метилбензоат (1,2 г, 4,10 ммоль), модифицированный катализатор Вилкинсона (129 мг, 0,129 ммоль) и безводный ТГФ (13 мл). Проводили три цикла продувки вакуум/аргон, и смесь перемешивали при комнатной температуре до растворения всех реагентов (<2 мин). К этой перемешанной прозрачной реакционной смеси добавляли 4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (Bpin-H) (1,790 мл, 12,31 ммоль) через шприц, после чего проводили еще одну продувку аргон/вакуум/аргон. После перемешивания в течение ночи ЖХ-МС показала полное превращение в продукт. Реакционную смесь гасили осторожным добавлением нескольких капель воды (<1 мл) и МеОН (5 мл), и растворитель удаляли под вакуумом на роторном испарителе. Сухой неочищенный продукт растворяли в ДХМ, адсорбировали на диоксиде кремния и сушили под вакуумом. После того, как он становился хорошо сыпучим, его загружали в пустой картридж и очищали с применением системы ISCO (40 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~5% EtOAc в гексане с получением SKC-02-014 (1,32 г, 77% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,32 (d, 1Н), 6,95 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 6,60 (s, 1H), 4,48-4,30 (m, 2Н), 2,69-2,54 (m, 2Н), 2,50 (s, 3H), 1,76-1,60 (m, 2Н), 1,33 (s, 12Н), 1,19-1,07 (m, 2Н), 1,05-0,83 (m, 2Н), 0,14-0,04 (m, 8Н).

Стадия 6: Синтез (3-(2-гидрокси-3-метил-4-((2-(триметилсилил)этокси)карбонил) фенил)пропил)бороновой кислоты

[0528] К раствору SKC-02-014 (1,32 г, 3,14 ммоль) в смеси ТГФ/вода (соотношение 4:1, 90 мл) добавляли натрия периодат (4,03 г, 18,84 ммоль), и затем 2М HCl в эфире (3,14 мл, 6,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали посредством EtOAc. Неочищенную реакционную смесь адсорбировали на силикагеле и сушили. После того, как она становилась хорошо сыпучей, ее загружали на ISCO картридж (40 г колонка с диоксидом кремния, смесь растворителей гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~32% EtOAc в гексане с получением 700 мг (66%) SKC-02-016. Наиболее предпочтительная структура представляет собой закрытую форму на основании ¹Н ЯМР. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,50 (d, J=7,9 Гц, 1H), 7,00 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 4,44-4,31 (m, 2Н), 2,74-2,59 (m, 2Н), 2,46 (s, 3H), 2,01-1,82 (m, 2Н), 1,21-1,05 (m, 2Н), 1,00-0,75 (m, 2Н), 0,08 (s, 9Н).

Стадия 7: Синтез 2-гидрокси-9-метил-2,3,4,5-тетрагидробензо[f][1,2]оксаборепин-8-карбоновой кислоты

[0529] SKC-02-16 (150 мг, 0,443 ммоль) растворяли в безводном толуоле в круглодонной колбе, оснащенной капельной воронкой, содержащей некоторое количество 5А молекулярных сит, и холодильником, в атмосфере аргона. К нему добавляли моногидрат р-толуолсульфоновой кислоты (56,2 мг, 0,296). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч и охлаждали. ЖХ-МС показала полное превращение. Толуол удаляли под вакуумом, и неочищенный продукт адсорбировали на силикагеле и очищали с применением системы ISCO (с применением 4 г колонки с диоксидом кремния и градиента растворителей гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством 30% EtOAc в гексане с получением продукта. ¹H ЯМР (400 МГц, Ацетон) δ 7,57 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 7,09 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 2,69 (t, J=6,8 Гц, 2Н), 2,46 (s, 3H), 1,95-1,83 (m, 2Н), 0,85-0,71 (m, 2Н).

ПРИМЕР 10

Стадия 1: 2-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-бензойная кислота.

[0530] В 300 мл круглодонную трехгорлую колбу, оснащенную холодильником, магнитной мешалкой и выходом инертного газа, добавляли 3-йод-2-метилбензойную кислоту (10 г, 38,2 ммоль), бис(пинаколато)диборон (11,64 г, 46,0 ммоль), ацетат калия (11,23 г, 112,0 ммоль) и 100 мл безводного ДМСО. Колбу продували азотом в течение 15-20 мин. Через открытое горло под легким положительным потоком азота добавляли катализатор дихлор [1,1-бис(дифенилфосфино)ферроцен]палладия дихлорметан (0,85 г, 1,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Реакционную смесь оставляли остывать, затем выливали в 500 мл воды. Через 1 час перемешивания при комнатной температуре коричневатый осадок отфильтровывали через фильтрующую воронку из фриттованного стекла и промывали водой. Осадок повторно растворяли в 200 мл эфира и фильтровали через слой целита толщиной 1" для удаления следов Pd. Остаток на фильтре промывали посредством 100 мл эфира. Объединенный эфирный раствор промывали 4×200 мл посредством 2 н. NaOH. Водную фазу объединяли и подкисляли 6 н. HCl до рН=5-6 (приблизительно 100 мл). Белый осадок отфильтровывали на фильтре из фриттованного стекла, промывали 200 мл воды и сушили в вакуумной печи при 60°С в течение 2 часов. Фильтрат помещали в холодильник в течение ночи, и вторую часть белого осадка выделяли посредством фильтрации. Общее количество полученного продукта составляло 5,5 г (55% выход). ¹Н ЯМР (CDCl₃, 300 МГц) δ 8,05 (d, 1H), 7,9 (d, 1Н), 7,25 (t, 1Н), 2,6 (s, 3H), 1,4 (s, 12Н).

Стадия 2: 2-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-бензоил хлорид

[0531] 2-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-бензойную кислоту (1,2 г, 46,0 ммоль) помещали в 40 мл сцинтилляционный флакон, оснащенный маленькой мешалкой. Добавляли 10,0 мл безводного хлороформа, после чего добавляли 1,8 мл тионилхлорида и 2 капли безводного ДМФА. Через 3 часа растворитель и избыток тионилхлорида выпаривали под вакуумом. Коричневый остаток обрабатывали посредством 40 мл гексана, фильтровали и концентрировали с получением 985 мг (Выход = 70,5%) продукта в форме зеленоватого масла. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 8,15 (d, 1Н), 7,95 (d, 1Н), 7,3 (t, 1Н), 2,75 (s, 3H), 1,4 (s, 12Н). Взаимодействие осуществляли несколько раз, и выход составлял от 60 до 99%.

Стадия 2: 3-метокси-2-метил-бензойной кислоты N'-(1-этил-2,2-диметил-пропил)-гидразид

[0532] Реакцию проводили в 20 мл сцинтилляционном флаконе с мини-мешалкой. К перемешанной суспензии 2,2-ди-ме-пентилгидразин хлорида (0,181 г, 1,0 моль) в безводном эфире (10 мл) при комнатной температуре добавляли 2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-бензоил хлорид (0,281 г, 1,0 ммоль) и избыток триэтиламина (0,28 мл, 2,0 ммоль). Осадок образовывался сразу. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, и осадок отфильтровывали и промывали метиленхлоридом (20 мл). Растворитель выпаривали, и остаток повторно растворяли в 20 мл пентана с несколькими каплями эфира. Колбу охлаждали в течение 2 часов с получением осадка, который отфильтровывали и сушили под вакуумом в течение 1 часа. W₁=0,05 г. ¹Н ЯМР и MS показали, что он представляет собой IXS-1-52-1. Фильтрат выпаривали, повторно растворяли в 1 мл метиленхлорида и очищали с применением 24 г ISCO колонки с градиентом гексан/этилацетат. Фракции продукта объединяли с получением 0,110 г (выход = 44%) IXS-1-52-2. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7,85 (d, 1Н), 7,4 (d, 1H), 7,25 (t, 1H), 7,05 (s, 1H), 4,9 (m, 1Н), 2,65 (s, 3H), 2,05 (d, 1H), 1,8 (m, 1Н), 1,6 (m, 2Н), 1,4 (s, 12Н), 1,35 (s, 3H), 1,15 (m, 1Н), 1,05 (s, 9Н). MS: [МН+]=389 мВ.

Стадия 3: 2-Метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2]диоксаборолан-2-ил)-бензойной кислоты N'-(1-трет-бутил-бутил)-гидразид.

[0533] Взаимодействие осуществляли в 20 мл сцинтилляционном флаконе с мини-мешалкой. К перемешанной суспензии 2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-[1,3,2] диоксаборолан-2-ил)-бензойной кислоты N'-(1-трет-бутил-бутил)-гидразида (IXS-1-44-1, 0,194 г, 0,5 ммоль) в эфире (5 мл) добавляли 3,5-диметил-бензоил хлорид (0,084 г, 0,0005 моль), после чего добавляли триэтиламин (0,07 мл, 0,5 ммоль). Осадок образовывался сразу. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем осадок отфильтровывали, промывали некоторым количеством эфира (10-20 мл). ТСХ эфирного раствора в 50:50=гексан: этилацетат показала, что основное пятно представляет собой монозамещенный продукт с Rf=0,6. Растворитель выпаривали почти досуха, и повторно растворяли в 20 мл гексана. Образовывался осадок, и его промывали холодным гексаном и сушили под вакуумом в течение 2 часов с получением 0,177 г IXS-1-54-1 (Выход=68%). Структуру подтверждали посредством ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) и MS:([МН+]=521 мВ).

ПРИМЕР 11

Синтез соединения №58

Стадия 1: Синтез 2-Фтор-3-йод-4-метил-бензонитрила

[0534] Высушенную в печи 3-горлую 500 мл круглодонную колбу с магнитной мешалкой, термометром, капельной воронкой и притоком азота продували N₂ в течение 20 мин. 2,2,6,6-тетраметилпиперидин (41,84 мл, 241 ммоль) вводили в колбу через шприц, после чего вводили 100 мл безводного ТГФ. Реакционную смесь охлаждали до -78°С, и через иглу вводили n-BuLi (2,5М раствор в гексане, 102 мл, 254 ммоль). Добавление проводили медленно, по каплям, убеждаясь, чтобы температура оставалась в диапазоне от -70°С до -80°С. (~40 мин). Капельную воронку промывали 100 мл безводного ТГФ, и реакционную смесь нагревали до -50°С в течение 30 мин., в течение которых прозрачный раствор становился мутным. Реакционную смесь снова охлаждали до -78°С, и к перемешанному раствору по каплям добавляли 2-фтор-4-метилбензонитрил (30 г, 222 ммоль), растворенный в 80 мл безводного ТГФ, в то время как внутреннюю температуру поддерживали ниже -70°С (приблизительно 20 мин). Капельную воронку однократно промывали 100 мл порцией ТГФ, и реакционную смесь нагревали до -50°С в течение 60 мин. Реакционную смесь снова охлаждали до -78°С, и в капельную воронку вводили насыщенный раствор йода (62 г, 244 ммоль) в 100 мл ТГФ. Гашение проводили поэтапно, и полученную желтую смесь выдерживали при внутренней температуре ниже -60°С (приблизительно 20 мин). Капельную воронку дважды промывали 50 мл ТГФ, и затем смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры. После перемешивания в течение ночи смесь полностью добавляли к раствору 20 г тиосульфита в 1000 мл воды, перемешивали в течение 1 часа и промывали этилацетатом 3×250 мл. Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с применением системы ISCO. Фракции продукта объединяли и концентрировали. Продукт перекристаллизовывали из смеси эфир/гексан с получением 33 г (57%) продукта. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7,50 (dd, 1Н), 7,16 (d, 1H), 2,50 (s, 3H). LC-MS (М+1)=262 M/Z.

Стадия 2: Синтез 2-фтор-3-йод-4-метилбензойной кислоты

[0535] В 500 мл круглодонную трехгорлую колбу, оснащенную холодильником и магнитной мешалкой, добавляли 2-фтор-3-йод-4-метил-бензонитрил (33 г, 126,4 ммоль), 70 мл метанола и 70 мл 60% водного раствора серной кислоты. Колбу запечатывали, и температуру повышали до 115°С. Реакционную смесь перемешивали при данной температуре в течение ночи. Образовавшийся осадок отфильтровывали на фильтре из фриттованного стекла, промывали посредством 1 л воды и сушили под вакуумом в течение 2 ч, и затем в вакуумной печи при 60°С в течение 3 ч с получением 31,5 г IXS-4-95-1. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ 13,2 (уширенный s, 1H), 7,74 (t, 1Н), 7,26 (d, 1H), 2,47 (s, 3H) и MS [МН+]=280.

Стадия 3: Синтез 2-фтор-3-йод-4-метилбензойной кислоты метилового сложного эфира

[0536] В 500 мл одногорлую колбу, оснащенную магнитной мешалкой и холодильником, добавляли 2-фтор-3-йод-4-метил-бензойную кислоту (31,5 г, 112,5 ммоль), 250 мл метанола и 10 мл серной кислоты. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение ночи. ЖХ-МС показала, что реакция была окончена на 90%. Метанол выпаривали, и остаток растворяли в этилацетате и промывали водой. Органическую фазу медленно подщелачивали до рН=9 посредством 25% NaOH раствора в воде. Органическую фазу промывали 2×200 мл воды. Отделенные водные слои после промывки дважды экстрагировали посредством 100 мл этилацетата. Все органические фазы объединяли и концентрировали с получением масляного остатка, который перекристаллизовывали из смеси эфир/гексан. Кристаллы выделяли двумя партиями, промывали чистым гексаном и сушили под вакуумом в течение 2 часов с получением 31 г (94%) продукта. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7,78 (t, 1H), 7,08 (d, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,50 (s, 3H) и MS: [МН+]=295.

Стадия 4: Синтез метил 2-фтор-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата

[0537] В 100 мл 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную холодильником, магнитной мешалкой и выходом азота, помещали метил 2-фтор-3-йод-4-метилбензоат (2,0 г, 6,80 ммоль), 10,0 мл безводного 1,4-диоксана, диацетоксипалладий (0,076 г, 0,340 ммоль) и [1,1'-бифенил]-2-илдициклогексилфосфин (0,477 г, 1,360 ммоль) в атмосфере азота. 4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан (2,96 мл, 20,40 ммоль) по каплям добавляли через шприц. Реакционную смесь нагревали при 60°С в течение 2 часов и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала почти 100% превращение. Диоксан удаляли, и остаток очищали на 80 г ISCO колонке с диоксидом кремния с применением градиента этилацетат/гексан, и затем меняли градиент на метанол/ДХМ с получением 1,25 г (62,5%) IXS-5-48-1, 1,25 г (62,5%). ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ 7,81 (t, 1Н), 7,16 (d, 1H), 3,83 (s, 3H), 2,42 (s, 3H), 1,33 (s, 12Н) и MS: [МН+]=295.

Стадия 5: Синтез 7-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбоновой кислоты.

[0538] К раствору метил 2-фтор-4-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил) бензоата (0,6 г, 2,040 ммоль) в 40 мл CCl₄ добавляли N-бромсукцинимид (0,363 г, 2,040 ммоль) и (Е)-1,1'-(диазен-1,2-диил)дициклогексанкарбонитрил (0,050 г, 0,204 ммоль). Смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Реакционную смесь экстрагировали посредством 5% КОН в воде (3× 20 мл). Водную фазу перемешивали в течение 1 часа, и затем раствор охлаждали до 0°С, и медленно подкисляли до рН<1 посредством 1 н. HCl. Образовавшийся остаток отфильтровывали на фильтре из фриттованного стекла и сушили под вакуумом в течение ночи с получением 0,137 г IXS-5-49-1, ¹Н ЯМР в ДМСО-d₆ соответствует необходимому продукту. MS [МН+]=196.

Стадия 6: Синтез N'-(трет-бутил)-7-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида:

[0539] К перемешанному раствору бороксозол карбоновой кислоты (INX-5-49-1, 130,0 мг, 0,663 ммоль) в безводном ДМФА (1,5 мл) в 20 мл сцинтилляционном флаконе, который продували азотом, добавляли ВОР (197,0 мг, 0,663 ммоль), HOBt (90,0 мг, 0,663 ммоль) и DIPEA (0,579 мл, 3,32 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин. К ней добавляли трет-бутил гидразин гидрохлорид (105 мг, 0,84 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала полное превращение бороксозол карбоновой кислоты в форме нового пика. ДМФА удаляли с применением Genevac. Липкую неочищенную смесь растворяли в 5% водном КОН (50 мл) и EtOAc (50 мл) и экстрагировали. Объединенные водные фракции, содержащие продукт, нейтрализовали посредством 0,1 н. HCl, и затем воду удаляли на роторном испарителе. Остаток промывали посредством 10% МеОН в ДХМ и очищали с применением системы ISCO. Продукт элюировали в ~2% МеОН в ДХМ с получением 100 мл (57%) бороксазол карбогидразида INX-5-57-1, который применяли на следующей стадии. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 9,69 (d, J=6,2 Гц, 1Н), 7,67 (t, J=7,1 Гц, 1H), 7,27 (d, J=22,8 Гц, 1Н), 5,03 (s, 2Н), 4,92 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 1,06 (s, 9Н).

Стадия 7: Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-7-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида (Соединение №58):

[0540] 3,5-диметилбензоил хлорид (0,076 г, 0,451 ммоль) в круглодонной колбе растворяли в диэтиловом эфире (2,0 мл). К нему добавляли N'-(трет-бутил)-7-фтор-1-гидрокси-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразид (0,100 г, 0,376 ммоль), после чего добавляли TEA (0,105 мл, 0,752 ммоль). После добавления триэтиламина из раствора выпадал осадок. После 90 мин перемешивания добавляли другой эквивалент TEA, и реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение 60 мин при комнатной температуре. Растворитель выпаривали, и остаток очищали с применением препаративной ВЭЖХ с получением соединения №58. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-d₆) δ 10,39 (s, 1H), 6,97 (d, J=7,7 Гц, 1H), 6,89-6,83 (m, 3H), 6,72-6,64 (m, 1Н), 4,76 (s, 2Н), 2,04 (d, J=4,5 Гц, 6Н), 1,29 (s, 9Н).

ПРИМЕР 12

Синтез 4-гидроксиметил-2-фтор-бензойной кислоты

Стадия 1: Синтез 2-фтор-4-метил-бензойной кислоты

[0541] В 1 л трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой, капельной воронкой и притоком азота добавляли 1-бром-2-фтор-4-метил-бензол (43,0 г, 227,47 ммоль) и 300 мл безводного ТГФ. Колбу продували азотом в течение 30 мин, и затем охлаждали до -78°С с применением бани ацетон-сухой лед. 2,5 М раствор T-BuLi в гексане (100,00 мл, 250,00 ммоль) по каплям добавляли в течение 30 мин. Капельную воронку промывали посредством 100 мл безводного ТГФ в реакционную колбу. Полученную слегка желтую реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 часа. Смесь полностью выливали в 200 г сухого льда в 150 мл ТГФ через иглу. Смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры при перемешивании, разбавляли 500 мл воды, помещали в делительную воронку и экстрагировали эфиром (2×500 мл). Эфирную фазу отбрасывали. Водную фазу подкисляли посредством 1 н. HCl до рН <<2 (затем снова экстрагировали эфиром (2×500 мл) и этилацетатом (2×200 мл). Объединенные органические фазы сушили над сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Белый кристаллический остаток, полученный таким образом, сушили под вакуумом в течение 1 часа с получением 35,06 г IXS-4-49-неочищенного вещества. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ 13,04 (bs, 1Н), 7,76 (t, 1Н), 7,15 (t, 2Н), 2,36 (s, 3H). Общий выход составил 89,55%. Стадия 2: Синтез 2-Метил-3-гидрокси-бензойной кислоты метилового сложного эфира

[0542] В 500 мл одногорлую круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой и холодильником, добавляли 2-фтор-4-метил-бензойную кислоту (10,0 г, 64,88 ммоль), 250 мл метанола и 5 мл серной кислоты. Реакционную смесь нагревали при 90°С в течение ночи. Метанол выпаривали, и остаток очищали на 125 г фильтрующей колонке ISCO с диоксидом кремния с применением градиента гексан/этилацетат с получением 10,01 г IXS-4-52-1. Общий выход составил 91,75%. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7,80 (t, 1H), 6,95 (2d, 2Н), 3,89 (s, 3H), 2,37 (s, 3H).

Стадия 3: Синтез 4-бромметил-2-фтор-метилбензоата

[0543] В 250 мл трехгорлую круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой и холодильником и стеклянной пробкой, добавляли 2-фтор-4-метил метилбензоат (10,01 г, 59,52 ммоль), 100 мл тетрахлорида углерода, N-бромсукцинимид (10,70 г, 60,12 ммоль) и 2,2'-азобисизобутиронитрил (AIBN, 0,39 г, 2,38 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°С в течение 6 часов, затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Колбу охлаждали во льду в течение 30 мин, и полученный осадок собирали посредством фильтрации и промывали гексаном. Фильтрат отбрасывали. Осадок повторно растворяли в этилацетате, и гексан добавляли до начала образования твердого вещества. Колбу оставляли в течение 1 часа. Осажденное твердое вещество собирали посредством фильтрации и сушили. Твердое вещество помещали в колбу Эрленмейера и перемешивали с 100 мл воды в течение 3 часов. Твердое вещество повторно выделяли посредством фильтрации, промывали гексаном и сушили в вакуумной печи при 60°С в течение 2 часов с получением 4,36 г 4-бромметил-2-фтор-метил-бензоата (IXS-4-53-1), что отображено посредством ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 7,89 (t, 1H), 7,18 (2d, 2Н), 4,42 (s, 2Н) 3,91 (s, 3H).

Стадия 4: Синтез 4-гидроксиометил-2-фторбензойной кислоты

[0544] В 250 мл одногорлую круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой и холодильником, добавляли 2-фтор-4-бромметил метилбензоат (5,94 г, 24,04 ммоль), 70 мл уксусного ангидрида и ацетат натрия (2,56 г, 31,26 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 150°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и контролировали посредством ТСХ. Осторожно добавляли 200 мл воды, и реакционную смесь помещали в делительную воронку. Водную фазу экстрагировали эфиром 2×100 мл и этилацетатом 3×100 мл. Органические фракции объединяли и концентрировали. Остаток растворяли в 50 мл метанола и помещали в 250 мл одногорлую колбу, оснащенную магнитной мешалкой. Гидроксид калия (6,75 г, 120 ммоль) растворяли в 20 мл метанола и добавляли в реакционную колбу, и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и контролировали посредством ТСХ. Осторожно добавляли 100 мл воды, и реакционную смесь осторожно подкисляли посредством 3М раствора HCl до рН<2. Водную фазу экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу концентрировали и очищали с применением системы ISCO с применением градиента этилацетат/гексан с получением 2,32 г IXS-4-60-2. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) Общий выход составил 57,0%. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 13,02 (bs, 1Н), 7,80 (t, 1Н), 7,21 (t, 2Н), 5,44 (bs, 1H), 4,45 (s, 2Н).

ПРИМЕР 13

Синтез N'-бензоил-N'-(трет-бутил)-1-бутил-7-фтор-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида (Соединение №64)

Стадия 1: Синтез 2-фтор-4-метилбензойной кислоты

[0545] Высушенную в печи 1 л 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой, капельной воронкой и обратным холодильником и притоком азота, продували азотом в течение 45 мин. В колбу загружали 1-бром-2-фтор-4-метил бензол (43,0 г, 227,47 ммоль) и безводный ТГФ (250 мл). Смесь охлаждали до -78°С в бане сухой лед-ацетон, и к перемешанной реакционной смеси по каплям добавляли n-BuLi (2,5М раствор в гексане, 100,09 мл, 250,22 ммоль), при этом поддерживали температуру примерно -78°С. Капельную воронку промывали двумя 10 мл частями безводного ТГФ, и затем реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Смесь полностью выливали в твердый диоксид углерода в ТГФ (50 мл) и оставляли нагреваться до комнатной температуры. Добавляли 300 мл воды и все растворялось. Полученную смесь помещали в делительную воронку и экстрагировали эфиром (2×500 мл). Эфирную фазу отбрасывали. Объединенную водную фазу подкисляли посредством 3 н. HCl до рН<3, и образовывался белый осадок. Водную фазу экстрагировали эфиром (2×500 мл) и этилацетатом (3×500 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали с получением 31,4 г IXS-3-48 в форме розовато-белого кристаллического порошка. ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 12,99 (s, 1Н), 7,77-7,73 (t, 1Н), 7,14-7,09 (m, 2Н), 2,30 (s, 3H).

Стадия 2: Синтез 4-(бромметил)-2-фторбензойной кислоты

[0546] 4-фтор-4-метилбензойную кислоту (10,0 г, 64,88 ммоль) добавляли в 500 мл 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную обратным холодильником, магнитной мешалкой и осушительной трубкой. Добавляли 100 мл CCl₄. Реакционную смесь нагревали до 80°С. NBS взвешивали в 20 мл сцинтилляционном флаконе и добавляли 8 частями с применением шпателя в течение периода 4 часа. Аналогичным образом добавляли AIBN 8 частями. Полученную смесь перемешивали в течение дополнительных 3 ч при 80°С, затем охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Светло-желтую суспензию фильтровали через фильтрующую воронку с примерно 1,5 дюймовым слоем силикагеля, затем промывали посредством 1 л дихлорметана. Из фильтрата выпадало некоторое количество осадка, поэтому для того, чтобы сделать его прозрачным, добавляли этилацетат. Фильтрат собирали по 100 мл аликвотам в маленькие колбы Эрленмейера, которые анализировали посредством ТСХ. Аликвоты, содержащие исходный материал и другие примеси, отбрасывали. Аликвоты с продуктом объединяли и концентрировали. Остаток растирали с 50 мл эфира, фильтровали через фильтр из фриттованного стекла и сушили под вакуумом в течение 1 ч с получением 14,98 г неочищенного продукта. ¹Н ЯМР показал смесь 1:2 продукта и сукцинимидного побочного продукта. Продукт помещали в воронку из фриттованного стекла, промывали водой и гексаном и сушили под вакуумом в течение 2 часов. ¹Н ЯМР показал, что он все еще содержал 20% сукцинимидного побочного продукта. Смесь очищали с применением системы ISCO (40 г колонки с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc) с получением IXS-2-56-3 (800 мг). ¹Н ЯМР (CDCl₃, 400 МГц) δ 12,25 (s, 1Н), 6,87-6,83 (t, 1Н), 6,42-6,36 (m, 2Н), 3,73 (s, 2Н).

Стадия 3: Синтез N'-бензоил-4-(бромметил)-N'-(трет-бутил)-2-фторбензгидразида:

[0547] Вышеуказанную бензойную кислоту (IXS-3-56-3, 8,0 г, 0,034 ммоль) добавляли в 250 мл 1-горлую круглодонную колбу, оснащенную осушительной трубкой. Добавляли 50 мл безводного хлороформа, и реакционную смесь перемешивали. К данной перемешанной смеси добавляли тионилхлорид (12,49 мл, 0,17 ммоль), после чего добавляли 3 капли безводного ДМФА. После перемешивания в течение ночи, растворитель и избыток тионилхлорида удаляли под вакуумом, и полученный остаток промывали несколько раз безводным дихлорметаном, выпаривали и сушили под вакуумом. Добавляли 40 мл гексана, и полученную смесь фильтровали через фильтрующую воронку из фриттованного стекла с получением 8,0 г зеленоватого окрашенного масла, которое применяли на следующей стадии без дальнейшей очистки.

[0548] Для следующей стадии в 250 мл 1-горлую круглодонную колбу добавляли гидразин (4,89 г, 25,45 ммоль), хлорангидрид (8,0 г, 31,81 ммоль) и 100 мл эфира, и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре. К ней добавляли триэтиламин (4,43 мл, 31,81 ммоль). После перемешивания в течение ночи, ТСХ показала полное превращение в продукт. Добавляли дихлорметан для растворения всего осадка, и продукт очищали с применением ISCO системы (2X колонка с 80 г диоксида кремния, градиент гексан/EtOAc) с получением 8,75 г IXS-3-58. ¹Н ЯМР (ДМСO-d₆, 400 МГц) δ 10,72 (s, 1H), 7,53-7,28 (m, 6Н), 7,23-7,21 (d, 1Н), 6,84-6,75 (t, 1Н), 4,60 (s, 2Н), 1,50 (s, 9Н).

Стадия 4: Синтез N'-бензоил-N'-(трет-бутил)-2-фтор-4-(гидроксиметил) бензгидразида:

[0549] В 250 мл 1-горлую круглодонную колбу добавляли вышеуказанное производное 4-бромметил ДАГ (8,75 г, 21,48 ммоль), СаСО₃ (1,08 г, 10,74 ммоль) и смесь 1:1 диоксана и воды (140 мл), и смесь перемешивали в течение ночи при 85°С. Большую часть диоксана удаляли на роторном испарителе. После удаления воды и экстракции посредством EtOAc, органические фазы объединяли, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с применением системы ISCO (колонка 80 г диоксида кремния, градиент гексан/EtOAc) с получением IXS-3-59-2 (6,35 г, 86%) ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆, 400 МГц) δ 10,56 (s, 1Н), 7,41-7,26 (m, 5Н), 7,18-7,04 (m, 2Н), 6,73-6,69 (m, 1Н), 5,37-5,32 (t, lh)4,47-4,46 (d, 2Н), 1,54 (s, 9Н).

Стадия 5: Синтез N'-бензоил-N'-(трет-бутил)-1-бутил-7-фтор-1,3-дигидробензо[с][1,2]оксаборол-6-карбогидразида (Соединение №64):

[0550] Высушенную в печи 3-горлую 250 мл круглодонную колбу с магнитной мешалкой, термометром, градуированной капельной воронкой, выравнивающей давление, и притоком азота, продували азотом в течение 20 мин. Колбу загружали 2,2,6,6-тетраметилпиперидином (3,65 мл, 21,48 ммоль) и безводным ТГФ (40 мл) и охлаждали до -30°С в бане сухой лед-ацетон. К перемешанной реакционной смеси по каплям добавляли n-BuLi (13,07 мл, 20,91 ммоль), при этом температуру поддерживали между -30°С и -35°С (~10 мин). Капельную воронку дважды промывали 10 мл частями безводного ТГФ, и реакционную смесь охлаждали до -76°С.К перемешанному кремово-желтому раствору по каплям добавляли триизопропилборат (5,34 мл, 23,23 ммоль), при этом внутреннюю температуру поддерживали ниже -73°С (~10 мин). IXS-3-59-2 (2,0 г, 5,81 ммоль), растворенное в безводном ТГФ (10 мл), по каплям добавляли к реакционной смеси в течение 10 мин. Капельную воронку дважды промывали 10 мл частями безводного ТГФ, реакционную смесь охлаждали до -76°С в течение 3,5 часов и оставляли медленно нагреваться до комнатной температуры. Через 1 ч при комнатной температуре реакционную смесь гасили посредством 20 мл 2М H₂SO₄ в воде. Полученную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре, затем разбавляли водой и эфиром. Органическую фазу отделяли, и водную фазу промывали эфиром (2×100 мл) и EtOAc (2×100 мл). Органические фракции объединяли, концентрировали и очищали с применением системы ISCO (колонка 80 г диоксида кремния, градиент гексан/EtOAc) с получением 71 мг соединения №69. ¹Н ЯМР (ДМСО-d₆ 400 МГц) δ 10,55 (s, 1H), 7,42-7,39 (m, 2H), 7,34-7,30 (m, 3H), 7,14-7,12 (m, 1H), 6,76-6,66 (m, 1H), 5,10 (s, 2H), 1,55 (s, 9H), 1,40-1,29 (m, 4H), 1,25-1,09 (m, 2 H), 0,88-0,83 (m, 3H).

ПРИМЕР 14

Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-6-метил-1,2,3,4-тетрагидробензо[f][1,4,5]оксазаборепин-7-карбогидразида (Соединение №91)

и

(R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'(2,2-диметилпентан-3-ил)-1-гидрокси-6-метил-1,2,3,4-тетрагидробензо[f][1,4,5]оксазаборепин-7-карбогидразида (Соединение №92)

3-Ацетокси-4-бром-2-метилбензойная кислота

[0551] Воду (12 мл) добавляли к 4-бром-3-гидрокси-2-метилбензойной кислоте (5 г, 21,6 ммоль) в колбе Эрленмейера и охлаждали на ледяной бане. Добавляли 50% водный раствор NaOH (8,06 г перемешивали с 12 мл воды, 108 ммоль), и смесь перемешивали в течение нескольких минут до получения прозрачного раствора. По каплям добавляли уксусный альдегид (2,04 мл, 21,6 ммоль) до достижения рН 5; в это время реакционная смесь становилась густой суспензией, имеющей почти белый цвет. Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. ЖХ-МС показала основной пик с ожидаемой массой продукта и побочный полярный пик исходного материала. рН доводили до 2, и осадок отфильтровывали. ЖХ-МС осадка показала, что он представляет собой смесь 3:1 ожидаемого ацетата и исходного фенола. Фильтрат также содержал некоторое количество продукта, поэтому все объединяли, сушили и адсорбировали на диоксиде кремния и подвергали колоночной хроматографии с силикагелем с применением ISCO. Основной пик собирали, растворитель удаляли, и продукт сушили под вакуумом. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 13,27 (s, 1H), 7,81-7,33 (m, 2Н), 2,37 (s, 6Н), 2,34 (s,3H).

[0552] К раствору вышеуказанной кислоты SKC-09-060 (3,3 г, 12,1 ммоль) в безводном хлороформе (12 мл) добавляли оксалилхлорид (2,12 мл, 24,2 ммоль) и 1 каплю ДМФА. Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 1 ч. ЖХ-МС показала полное превращение в хлорангидрид. Растворитель удаляли под вакуумом на роторном испарителе и сушили с получением 6-бром-3-(хлоркарбонил)-2-метилфенил ацетата (SKC-09-062) в форме твердого вещества.

(R)-6-бром-3-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилпентан-3-ил)гидразин-1-карбонил)-2-метилфенил ацетат:

[0553] К перемешанному раствору (R)-N-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3,5-диметилбензгидразида (2,86 г, 10,9 ммоль, >95% ее) в безводном ДХМ (10 мл) добавляли TEA (2,288 мл, 16,4 ммоль) при комнатной температуре в атмосфере аргона. К нему добавляли раствор хлорангидрида (3,5 г, 12,0 ммоль) в ДХМ (5 мл) и перемешивали при комнатной температуре. ЖХ-МС через 30 минут показала, что реакция окончена. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния и очищали посредством колоночной хроматографии с силикагелем с применением ISCO (градиент гексан/EtOAc). Основные фракции собирали и сушили с получением бесцветного твердого продукта SKC-09-063 (2,2 г, 39%). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,47 (d, J=61,1 Гц, 1H), 7,60 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,06 (t, J=15,3 Гц, 3H), 6,70 (dd, J=45,3, 8,0 Гц, 1Н), 4,33 (dd, J=80,7, 9,5 Гц, 1Н), 2,34 (s, 3H), 2,24 (d, J=5,5 Гц, 6Н), 1,48 (d, J=24,5 Гц, 4Н), 1,11-1,02 (m, 12Н), 0,91 (dt, J=42,5, 7,2 Гц, 5Н).

6-бром-3-(2-(трет-бутил)-2-(3,5-диметилбензоил)гидразин-1-карбонил)-2-метилфенил ацетат:

[0554] Следуя аналогичной методике, получали указанное в заголовке соединение с выходом 77% (2,29 г), исходя из N-(трет-бутил)-3,5-диметилбензгидразида (1,37 г, 6,2 ммоль), TEA (1,3 мл, 9,4 ммоль) и хлорангидрида (2,0 г, 6,9 ммоль) в ДХМ (10 мл). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,68 (s, 1H), 7,56 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 7,04 (s, 3H), 6,56 (d, J=8,2 Гц, 1H), 2,34 (s, 3H), 2,24 (s,6H), 1,65 (s, 3H), 1,49 (s, 9Н).

(R)-4-бром-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3-гидрокси-2-метилбензги дразид:

[0555] K₂СО₃ (1,76 г, 12,8 ммоль) добавляли к бесцветной суспензии SKC-09-063 (2,2 г, 4,3 ммоль) в 20 мл МеОН при комнатной температуре. Через несколько минут цвет реакционной смеси становился светло-желтым, и ацетат начинал растворяться. Реакция была окончена через 30 мин по данным ЖХ-МС. Смесь фильтровали для удаления твердых веществ, промывали EtOAc, и растворитель удаляли под вакуумом, и неочищенную смесь очищали посредством колоночной хроматографии с силикагелем на ISCO (градиент гексан/EtOAc) с получением белого порошка SKC-09-066 (1,8 г, 89%). ЖХ-МС: 477,19 (М+1).

4-бром-N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-3-гидрокси-2-метилбензгидразид:

[0556] Следуя вышеуказанной методике с SKC-09-015 (2,29 г, 4,8 мл) и K₂СО₃ (1,99 г, 14,5 ммоль) в 20 мл МеОН в течение 30 мин, SKC-09-021 выделяли после растирания в смеси растворителей пентан/эфир (1,83 г, 88% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,47 (s, 1Н), 9,32 (s, 1H), 7,30 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,03 (s, 3H), 6,09 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 2,24 (s, 6Н), 1,73 (s, 3H), 1,48 (s, 9Н). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО+2 drops of D₂O) δ 7,27 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,01 (d, J=7,1 Гц, 3H), 6,09 (d, J=8,2 Гц, 1H), 2,22 (s, 6H), 1,70 (s, 3H), 1,46 (s, 9H).

(R)-4-бром-3-(цианометокси)-N'(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-2-метилбензгидразид:

[0557] SKC-09-066 (1,35 г, 2,8 ммоль), К₂СО₃ (0,510 г, 3,7 ммоль) и 2-бромацетонитрил (0,24 мл, 3,4 ммоль) в безводном ДМФА (10 мл) перемешивали вместе в круглодонной колбе в атмосфере аргона и нагревали до 50°С. Реакция была окончена через 10' (по данным ЖХ-МС), бесцветная реакционная смесь по цвету превращалась в желтую. Смесь разбавляли водой, экстрагировали посредством EtOAc и сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, и растворитель удаляли. Неочищенную смесь адсорбировали на диоксиде кремния и очищали с применением ISCO (12 г колонка с диоксидом кремния, градиент гексан/EtOAc). Белый твердый продукт SKC-09-068 (1,53 г) выделяли с количественным выходом. ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,40 (d, J=59,5 Гц, 1H), 7,95 (s, 1Н), 7,56 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 7,16-6,95 (m, 3H), 6,58 (dd, J=46,5, 8,2 Гц, 1Н), 5,01-4,91 (m, 2Н), 4,50-4,17 (m, 1Н), 2,89 (s, 1H), 2,73 (s, 1H), 2,25 (d, J=5,1 Гц, 6H), 1,99 (s, 1H), 1,76-1,62 (m, 4H), 1,62-1,33 (m, 2H), 1,12-0,82 (m, 14H).

4-Бром-N'-(трет-бутил)-3-(цианометокси)-N'-(3,5-диметилбензоил)-2-метилбензгидразид:

[0558] Следовали вышеуказанной методике с применением SKC-09-021 (1,8 г, 4,2 ммоль), K₂СО₃ (0,750 г, 5,4 ммоль) и 2-бромацетонитрила (0,35 мл, 4,9 ммоль) в безводном ДМФА (7 мл) при 50°С. Реакция была окончена через 2 ч. После хроматографии выделяли 1,67 г продукта SKC-09-023 с выходом 85% (ЖХ-МС: 473, М+1).

(R)-3-(цианометокси)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразид:

[0559] К раствору SKC-09-068 (1,53 г, 2,9 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) добавляли КОАс (0,876 г, 8,9 ммоль), Pin₂B₂ (1,13 г, 4,5 ммоль). Смесь выгружали и продували аргоном, данный процесс повторяли три раза. Добавляли PdCl₂[dppf].ДХМ (0,097 г, ОД 19 ммоль). Реакционную смесь быстро оценивали и трижды продували аргоном в целом, и реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при 80°С в течение ночи, охлаждали, фильтровали и выпаривали. В неочищенную смесь добавляли воду и экстрагировали этилацетатом. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением ISCO, градиент растворителей гексан/EtOAc, и выделяли SKC-09-071 (0,600 г, 36% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,39 (dd, J=62,5, 11,4 Гц, 1H), 7,64-7,38 (m, 1H), 7,15-6,97 (m, 3H), 6,57 (dd, 1Н), 4,95-4,68 (m, 2Н), 4,33 (dd, J=82,4, 10,3 Гц, 1H), 2,25 (d, J=5,9 Гц, 6Н), 1,71-1,62 (m, 3H), 1,29 (s, 12Н), 1,14-0,91 (m, 15Н).

N'-(трет-бутил)-3-(цианометокси)-N'-(3,5-диметилбензоил)-2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразид:

[0560] К раствору SKC-09-023 (1,20 г, 2,5 ммоль) в 1,4-диоксане (8 мл) добавляли KОАс (0,748 г, 7,6 ммоль), Pin₂B₂ (0,968 г, 3,8 ммоль). Смесь выгружали и продували аргоном, данный процесс повторяли три раза. Добавляли PdCl₂[dppf].ДХМ (0,062 г, 0,076 ммоль). Реакционную смесь быстро оценивали и трижды продували аргоном в целом, и реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при 80°С в течение ночи, охлаждали, фильтровали и выпаривали. В неочищенную смесь добавляли воду и экстрагировали этилацетатом. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии на силикагеле с применением ISCO, градиент растворителей гексан/EtOAc, и выделяли SKC-09-071 (0,650 г, 49% выход, ЖХ-МС: 520,41, М+1).

[0561] В ледяной раствор метоксинитрила (SKC-09-028, 0,200 г, 0,39 ммоль) в МеОН (8 мл) в 100 мл 2-горлой круглодонной колбе в атмосфере аргона добавляли Вос-ангидрид и NiCl₂. гексагидрат. Реакционную смесь быстро оценивали и трижды продували аргоном в целом и перемешивали при 0°С в течение 5 мин. К нему добавляли борогидрид натрия 3 частями. Прозрачный бесцветный раствор становился черным по цвету через несколько минут, также замечали образование большого количества пузырьков. Реакционную смесь продолжали перемешивать в течение ночи, оставляя ее нагреваться до комнатной температуры. ЖХ-МС показала 3 пика, менее полярный пик с ожидаемой массой продукта. Реакционную смесь гасили посредством добавления нескольких капель воды. МеОН удаляли под вакуумом. После удаления воды и экстракции посредством EtOAc, органические фракции собирали, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, и растворитель удаляли на роторном испарителе. Неочищенную смесь окончательно очищали с применением колонки С18 RediSep (100 г) с применением градиента растворителей ацетонитрил/вода. Выделяли три пика, и менее полярный пик характеризовали как ожидаемый N-Boc защищенный амин (SKC-09-035; 0,040 г) на основании ¹Н ЯМР и ЖХ-МС. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,60-10,35 (m, 1Н), 7,47-7,26 (m, 1H), 7,01 (d, J=20,0 Гц, 3H), 6,46-6,31 (m, 1Н), 3,82-3,58 (m, 2Н), 3,24 (dt, J=14,4, 5,6 Гц, 2Н), 2,25 (s, 5Н), 1,72 (d, J=7,5 Гц, 3H), 1,48 (d, J=6,4 Гц, 9Н), 1,38 (s, 9Н), 1,33-1,25 (m, 12Н).

(R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'(2,2-диметилпентан-3-ил)-1-гидрокси-6-метил-1,2,3,4-тетрагидробензо[f][1,4,5]оксазаборепин-7-карбогидразид (Соединение №92):

[0562] К раствору SKC-09-071 (0,500 г, 0,89 ммоль) в МеОН (20 мл) в колбе для гидрирования добавляли образец Raney-Ni (после промывки коммерчески доступного образца Raney-Ni в воде с МеОН несколько раз). Смесь гидрогенизировали в шейкере Парра в течение 24 часов (Н₂, 50 psi). Контролировали посредством ЖХ-МС, при этом она показала два основных пика, один с ожидаемой массой продукта, и второй представлял собой фенольное соединение, как показано на схеме. Неочищенную смесь (рН 8,0) фильтровали через короткую пластинку целита, и растворитель удаляли под вакуумом. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Продукт находился в водных фракциях, в то время как побочный продукт (фенольное производное) оставалось в органической фракции. Водную фракцию подкисляли до рН ~3 на ледяной бане, немедленно экстрагировали этилацетатом. Продукт, который переходил в фракции EtOAc, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, и растворитель удаляли под вакуумом. В конце неочищенную смесь очищали с применением обратнофазной колонки посредством ISCO (С18 колонка, градиент растворителей CH₃CN/вода) с получением соединения №92 (0,233 г, 56% выход). ЖХ-МС: 466,3 (М+1).

[0563] Согласно ¹Н ЯМР спектру предполагали, что соединение представляет собой смесь; она может представлять собой разные таутомеры и/или равновесие между открытой и закрытой формами. После добавления 2 капель D₂O к тому же образцу снимали другой спектр ¹Н ЯМР. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,49-9,90 (m, 1Н), 8,35-7,51 (m, 1Н), 7,37-6,87 (m, 4Н), 6,66-5,99 (m, 2Н), 4,52-3,83 (m, 4Н), 3,29-2,76 (m, 2Н), 2,26 (dd, J=19,3, 14,3 Гц, 6Н), 1,76-1,33 (m, 5Н), 1,15-0,90 (m, 12Н). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО+2 капли D₂O) δ 8,37-7,15 (m, 2Н), 7,15-6,94 (m, 3H), 6,59-6,22 (m, 1Н), 4,29 (dd, J=79,9, 10,3 Гц, 1H), 4,07 (s, 1H), 3,89(d, J=4,8 Гц, 1H), 3,19-2,88 (m, 2Н), 2,44-2,11 (m, 6Н), 1,79-1,27 (m, 5Н), 1,14-0,72 (m, 12Н).

N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-6-метил-1,2,3,4-тетрагидробензо[][1,4,5]оксазаборепин-7-карбогидразид (Соединение №91)

[0564] Следуя вышеописанной методике, получали соединение №91 (0,040 г), исходя из SKC-09-028 (240 мг), Raney-Ni в атмосфере водорода (50 psi) в шейкере Парра. ЖХ-МС: 424 (М+1). Согласно ¹Н ЯМР спектру предполагали, что соединение представляет собой смесь; она может представлять собой разные таутомеры и/или равновесие между открытой и закрытой формами. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,54-10,09 (m, 1H), 7,81 (dt, J=26,6, 11,2 Гц, 1Н), 7,29-6,94 (m, 4Н), 6,52-6,03 (m, 1Н), 4,11 (s, 2Н), 2,95 (d, J=26,1 Гц, 3H), 2,28-2,14 (m, 6Н), 1,78-1,68 (m, 3H), 1,48 (d, J=4,2 Гц, 9Н).

ПРИМЕР 15

Синтез N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-2-фтор-4-(метоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразида (Соединение №94); (3-(2-трет-бутил)-2-(3,5-диметилбензоил)гидразин-1-карбонил)-2-фтор-6-(метоксиметил)фенил)бороновой кислоты (Соединение №88); (R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-2-фтор-4-(метоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразида (Соединение №87);

и

(R)-(3-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилпентан-3-ил)гидразин-1-карбонил)-2-фтор-6-(метоксиметил)фенил)бороновой кислоты (Соединение №86):

Метил 2-фтор-4-(метоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат:

[0565] К перемешанному раствору SKC-10-014 (2 г, 5,4 ммоль) в ДХМ (40 мл) добавляли 100 мл холодного раствора NH₃ в МеОН (от Aldrich) при комнатной температуре. ЖХ-МС показала, что реакция была окончена через 15 мин. Растворитель удаляли под вакуумом на роторном испарителе, смесь разбавляли водой и EtOAc, реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и медленно подкисляли посредством 6 н. HCl. Немедленно экстрагировали холодной смесью с EtOAc, сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, и растворитель удаляли. Неочищенную смесь очищали с применением колонки RediSep С18 (градиент ацетонитрил/вода). ¹Н ЯМР выделенного основного продукта подтвердил, что он представляет собой метоксиметильное производное (SKC-10-015-Pk2, 1,34 г, 74% выход) и представляет собой не бензиламиновое соединение, как ожидали. ¹Н ЯМР (400 МГц, CDCl₃) δ 7,89 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7,11 (d, J=8,0 Гц, 1H), 4,55 (s, 2Н), 3,89 (s, 3H), 3,33 (s, 3H), 1,37 (s, 12Н). ¹³С ЯМР (101 МГц, CDCl₃) δ 166,34, 164,98, 150,36, 150,27, 133,42, 122,36, 122,33, 84,28, 77,36, 77,05, 76,73, 73,51, 58,17, 52,21, 24,85.

2-фтор-4-(метоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойная кислота:

[0566] К перемешанной суспензии вышеуказанного сложного эфира SKC-10-015-Pk2 (620 мг, 1,9 ммоль) в воде (2 мл) на ледяной бане добавляли 10 мл 7% водного раствора КОН. ЖХ-МС через 5 мин показала, что весь исходный материал прореагировал, и наблюдали новый полярный пик с ожидаемой массой продукта. К перемешанной реакционной смеси медленно добавляли 6 н. HCl при 0°С, доводили рН ~2, образовывался белый осадок. Немедленно отфильтровывали его через фильтрующую воронку и собирали осадок, промывали водой, и затем пентаном, сушили под вакуумом с получением SKC-10-016 (460 мг, 78% выход) в форме белого порошка.

[0567] Соответствующий хлорангидрид (SKC-10-017) получали посредством взаимодействия SKC-10-016 (350 мг, 1,1 ммоль), оксалилхлорида (0,19 мл, 2,3 ммоль) в 2 мл хлороформа и 1 капли ДМФА при 0°С. Реакция была окончена через <30 мин. Растворитель удаляли под вакуумом на роторном испарителе, сушили под глубоким вакуумом, и непосредственно применяли на следующей стадии. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 13,15 (s, 1H), 7,84 (t, J=7,9 Гц, 1Н), 7,20 (d, J=7,9 Гц, 1H), 4,49 (s, 2Н), 3,26 (s, 3H), 1,31 (s, 12Н). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО+2 drops of D₂O) δ 7,82 (s, 1H), 7,19 (d, J=7,9 Гц, 1H), 4,46 (s, 2H), 3,24 (s, 3H), 1,29 (s, 12H).

N'-(трет-бутил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-2-фтор-4-(метоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразид (Соединение №94) и (3-(2-трет-бутил)-2-(3,5-диметилбензоил)гидразин-1-карбонил)-2-фтор-6-(метоксиметил)фенил)бороновая кислота (Соединение №88):

[0568] К перемешанному раствору N-(трет-бутил)-3,5-диметилбензгидразида (0,300 г, 0,83 ммоль) в безводном ДХМ (2 мл) добавляли TEA (0,17 мл, 1,25 ммоль) в атмосфере аргона. Реакционную смесь охлаждали на бане с ледяной водой. К ней добавляли раствор вышеприготовленного хлорангидрида (SKC-10-019), и смесь перемешивали в течение нескольких минут. ЖХ-МС через 5 минут показала основной пик при 4,02 мин с ожидаемой массой продукта 513 (М+1), побочный пик при 2,98 с массой, которая соответствует массе соответствующей бороновой кислоты 431 (М+1), и весь исходный материал был израсходован. Растворитель удаляли под вакуумом, адсорбировали на диоксиде кремния, и очищали посредством колоночной хроматографии (колонка RediSep, диоксид кремния 24 г), продукт Bpin соединения №94 элюировали первым с градиентом гексан/EtOAc, и позже меняли растворитель на ДХМ/МеОН, содержащий 2% NH₄OH, чтобы выделить 2^й продукт (Соединение №88). Фракции собирали, растворитель удаляли под вакуумом на роторном испарителе и в конце лиофилизировали с получением соединения №94 (0,220 г, 52% выход) и соединения №88 (0,120 г, 34% выход) а форме порошка. Соединение №94: ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,58 (s, 1H), 7,05 (dd, J=26,3, 13,0 Гц, 4Н), 6,86 (t, J=7,5 Гц, 1Н), 4,41 (s, 2Н), 3,21 (s, 3H), 2,24 (s, 6Н), 1,47 (s, 9Н), 1,29 (s, 12Н). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО + 2 drops of D₂O) δ 7,03 (dd, J=24,9, 10,3 Гц, 4H), 6,84 (t, J=7,5 Гц, 1Н), 4,39 (s, 2Н), 3,19 (s, 3H), 2,22 (s, 6Н), 1,46 (s, 9Н), 1,27 (s, 12Н). Соединение №88: ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,49 (s, 1Н), 8,22 (s, 2Н), 7,14-6,89 (m, 4Н), 6,72 (t, J=7,5 Гц, 1H), 4,38 (s, 2Н), 3,22 (s, 3H), 2,24 (s, 6Н), 1,48 (s, 9Н).

(R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-2-фтор-4-(метоксиметил)-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразид (Соединение №87) и (R)-(3-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилпентан-3-ил) гидразин-1-карбонил)-2-фтор-6-(метоксиметил)фенил)бороновая кислота (Соединение №86):

[0569] Следуя вышеописанной методике, вместе смешивали (R)-N-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3,5-диметилбензгидразид (0,254 г, 0,97 ммоль, >96% ее), TEA (0,202 мл, 1,45 ммоль) в ДХМ (2 мл), после чего добавляли хлорангидрид, SKC-10-017 (0,350 г, 1,07 ммоль) и перемешивали в течение 10 минут, окончательно очищали с применением колоночной хроматографии с получением соединения №87 (0,070 г) и соединения №86 (0,100 г) после 2^й очистки на колонке RedeisepC18 (вода/ацетонитрил, с 0,1% муравьиной кислоты) в качестве смеси растворителей. Соединение №87: ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,36 (d, J=60,2 Гц, 1Н), 7,20-6,92 (m, 4Н), 6,64 (t, J=7,4 Гц, 1H), 4,48-4,20 (m, 3H), 3,21 (s, 3H), 2,24 (s, 6Н), 1,75-1,50 (m, 2Н), 1,29 (s, 12Н), 1,04-0,84 (m, 12Н). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО+D₂O) δ 7,13-6,94 (m, 4Н), 6,63 (t, J=7,3 Гц, 1H), 4,44-4,00 (m, 3H), 3,18 (s, 3H), 2,22 (s, 6H), 1,68-1,51 (m, 2H), 1,28 (d, J=12,5 Гц, 12H), 1,03-0,81 (m, 12H). Соединение №86: ¹H ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,29 (d, J=54,2 Гц, 1H), 8,21 (d, J=23,6 Гц, 2Н), 7,22-6,92 (m, 4Н), 6,54 (dd, J=13,1, 5,7 Гц, 1H), 4,43-4,34 (m 3H), 3,22 (s, 3H), 2,25 (s, 6Н), 1,76-1,38 (m, 2Н), 1,09-0,95 (m, 12Н). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО+2 капли D₂O) δ 7,14-6,86 (m, 4Н), 6,55 (t, J=7,5 Гц, 1H), 4,44-4,15 (m, 3H), 3,20 (s, 3H), 2,23 (s, 6Н), 1,68-1,48 (m, 2Н), 1,06-0,91 (m, 12Н).

ПРИМЕР 16

Синтез (R)-(4-(2-(3,5-диметилбензоил)-2-(2,2-диметилпентан-3-ил)гидразин-1-карбонил)-3-фторфенил)бороновой кислоты (Соединение №85)

Стадия 1

[0570] В 25 мл круглодонную колбу, оснащенную магнитной мешалкой, добавляли (R)-N-(2,2-диметилпентан-3-ил)-3,5-диметилбензгидразид (1,317 г, 5,02 ммоль) в 7 мл CH₂Cl₂ и раствор карбоната калия (1,388 г, 10,04 ммоль) в дистиллированной воде (4 мл), охлаждали на ледяной бане при 0-4°С и перемешивали в течение 10 мин. Добавляли 2-фтор-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоил хлорид (1,714 г, 6,02 ммоль) в форме раствора в 3,5 мл дихлорметана. Реакционную смесь перемешивали при 0-4°С в течение 30 мин, удаляли ледяную баню, и смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь анализировали посредством ЖХ-МС, и она показала, что реакция была окончена. Органические слои разделяли с применением фазовой разделительной колонки Biotage, и помещали в 40 г колонку Redisep SiO₂ на ISCO ВЭЖХ системе. Соединение элюировали посредством 0-100% EtOAc -гексан, и затем 10% МеОН - CH₂Cl₂. Необходимые фракции собирали и концентрировали на роторном испарителе с получением необходимого соединения в форме почти белой пены (1,518 г, 59% выход). MS (ESI) рассчитанное для C₂₉H₄₀BFN₂O₄ ([М+Н]⁺) 511, обнаружено 511.

Стадия 2

[0571] Раствор ((R)-N'-(3,5-диметилбензоил)-N'-(2,2-диметилпентан-3-ил)-2-фтор-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензгидразида (1,518 г, 2,97 ммоль) в ТГФ (24 мл) и воде (6 мл) обрабатывали периодатом натрия (2,148 г, 10,04 ммоль) и HCl (2,0 М) (3,77 мл, 7,53 ммоль), и полученную желтую смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь фильтровали, и твердые вещества промывали EtOAc. Фильтрат разбавляли 10 мл Н₂О и экстрагировали посредством EtOAc (2×20 мл). Объединенные органические слои сушили над MgSO₄, фильтровали и концентрировали на роторном испарителе. Полученный остаток элюировали посредством 0-100% EtOAc - гексан, и затем 10% МеОН - CH₂Cl₂ на ISCO ВЭЖХ системе. Необходимые фракции собирали и концентрировали при пониженном давлении на роторном испарителе с получением соединения №85 в форме белого порошка (1,25 г, 58% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,47-10,30 (d, 1H), 8,33 (s, 2Н), 7,57-7,49 (m, 2Н), 7,17-7,00 (m, 3H), 6,63-6,60 (t, 1H), 4,44-4,24 (d, 1H), 2,26 (s, 6H), 1,66-1,46 (br m, 2H), 1,11-0,96 (m, 12H); MS (ESI) рассчитанное для C₂₃H₃₀BFN₂O₄ ([M+H]⁺) 429, обнаружено 429.

ПРИМЕР 17

Синтез N'-(2,2-диметил-1-фенилпропил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-6-метил-3,4-дигидро-1Н-бензо[с][1,5,2]диоксаборепин-7-карбогидразида

(Соединение №83)

4-Бром-N'-(2,2-диметил-1-фенилпропил)-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)бензгидразид:

[0572] EtOAc (6 мл) добавляли к перемешанному 25 масс. % водному раствору K₂СО₃ (0,947 г K₂СО₃ в 6 мл воды) в круглодонной колбе при комнатной температуре. К нему добавляли (2,2-диметил-1-фенилпропил)гидразин гидрохлорид (0,736 г, 3,43 ммоль), после чего добавляли Pf сложноэфирное соединение (SKC-05-069, 1,20 г, 2,28 ммоль), растворенное в EtOAc (6 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала основной пик при 4,77 с массой 521,14. После удаления воды и экстракции посредством EtOAc, органические фракции сушили над безводным MgSO₄, фильтровали, и растворитель удаляли на роторном испарителе под вакуумом. В конце очищали посредством колоночной хроматографии с применением колонки RediSep (диоксид кремния 40 г, градиент растворителей гексан/EtOAc) и выделяли ожидаемый продукт 1,15 г SKC-06-023 (1,15 г, 97% выход). ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 9,43 (d, J=5,8 Гц, 1Н), 7,54-7,13 (m, 6Н), 6,67 (d, J=8,2 Гц, 1H), 5,39 (dd, J=5,5, 4,3 Гц, 1Н), 4,78-4,46 (m, 1H), 3,97-3,59 (m, 6H), 3,44 (dd, J=10,6, 5,4 Гц, 1H), 1,96 (s, 3H), 1,78-1,38 (m, 7H), 1,24 (s, 1H), 0,93 (s, 9H).

4-Бром-N'-(2,2-диметил-1-фенилпропил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-2-метил-3-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)бензгидразид:

[0573] К раствору SKC-06-023 (0,600 г, 1,16 ммоль) в 3 мл ДХМ добавляли хлорангидрид (0,195 г, 1,16 ммоль. Раствор становился прозрачным. По каплям добавляли TEA (0,161 мл, 1,16 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение ночи. ЖХ-МС показала пик с ожидаемой массой продукта 651,09 (М+1), и еще один с массой 569,01. Реакционную смесь адсорбировали на силикагеле и очищали с применением системы ISCO (колонка RediSep, диоксид кремния 24 г, градиент гексан/EtOAc). Продукт элюировали посредством ~30% EtOAc в гексане с получением 0,230 г (30% выход) ожидаемого продукта SKC-06-025. Соединение SKC-06-025-пик4 элюировали посредством ~40% EtOAc в гексане и охарактеризовали как 2-гидроксиэтокси производное (0,450 г, 69% выход). Взаимодействие повторяли, и очистку проводили на колонке RediSep (Al₂O₃ рН=7, 24 г) и выделяли ожидаемый продукт (46% выход). Снятие защиты ТГФ группы в данном случае не наблюдали. ¹Н ЯМР SKC-06-025; (400 МГц, ДМСО) δ 10,67 (s, 1H), 7,48 (dd, J=7,4, 3,7 Гц, 3H), 7,36-7,19 (m, 4Н), 7,14 (s, 2Н), 7,01 (s, 1Н), 6,66 (dd, J=8,3, 3,9 Гц, 1Н), 6,14 (d, J=5,4 Гц, 1Н), 5,77 (s, 1Н), 4,73-4,53 (m, 2Н), 3,97-3,59 (m, 6Н), 3,52-3,38 (m, 2Н), 2,24 (s, 6Н), 1,78-1,42 (m, 9Н), 1,35 (s, 3H), 1,08 (s, 9Н). ¹Н ЯМР of SKC-06-025 РК4; (400 МГц, ДМСО) δ 10,67 (s, 1Н), 7,57-7,43 (m, 3H), 7,37-7,25 (m, 3H), 7,15 (s, 2Н), 7,04 (s, 1H), 6,64 (d, J=8,3 Гц, 1H), 5,77 (br s, 1Н), 4,85 (s, 1Н), 3,68 (dd, J=24,1, 4,7 Гц, 4Н), 2,24 (s, 6Н), 1,37 (s, 4Н), 1,08 (s, 10Н).

(4-2-(2,2-диметил-1-фенилпропил)-2-(3,5-диметилбензоил)гидразин-1-карбонил-3-метил-2-(2-((тетрагидро-2H-пиран-2-ил)окси)этокси)фенил)бороновая кислота:

[0574] К раствору SKC-06-025 (0,410 г, 0,63 ммоль) в 1,4-диоксане (2 мл) добавляли KОАс (0,185 г, 1,88 ммоль), Pin₂B₂ (0,240 г, 0,94 ммоль). Смесь выгружали и продували аргоном, данный процесс повторяли трижды. Добавляли PdCl₂[dppf].ДХМ аддукт (0,015 г, 0,02 ммоль). Реакционную смесь быстро оценивали и трижды продували аргоном в целом, и реакционную смесь перемешивали и ставили нагреваться до 80°С. Случайным образом температуру подняли до 190°С, и реакционная смесь изменила цвет со светло-красного до темно-коричневого. Реакция была окончена через 10 мин. ЖХ-МС показала основной пик при 5,35 с ожидаемой массой продукта Bpin-илированного соединения (697,32, М+1) и побочный пик при 4,80 с массой 571,34, соответствующей побочному продукту без присоединенного атома бора. Реакционную смесь охлаждали, фильтровали, и растворитель удаляли под вакуумом. Неочищенную смесь адсорбировали на нейтральном оксиде алюминия и очищали с применением колонки RediSep (Al₂O₃ рН=7, 24 г). Побочный продукт элюировали посредством ~15% EtOAc в гексане, и основной продукт элюировали посредством 90% EtOAc в гексане, и получали 0,041 г указанного в заголовке соединения SKC-09-029. Похоже, Bpin гидролизовался до бороновой кислоты (по данным ЖХ-МС: 615,24 М+1). Снова применяли ту же колонку с градиентом МеОН/ДХМ и выделяли 0,196 г другого производного бороновой кислоты (SKC-06-029, 0,237 г в целом, 61% выход). ЖХ-МС: 615,24 (М+1). Применяли непосредственно на следующей стадии.

N'-2,2-диметил-1-фенилпропил)-N'-(3,5-диметилбензоил)-1-гидрокси-6-метил-3,4-дигидро-1H-бензо[с][1,5,2]диоксаборепин-7-карбогидразид:

[0575] Вышеуказанное синтезированное производное бороновой кислоты (SKC-06-030, 0,236 г) перемешивали с 10 мл смеси вода/ацетонитрил, содержащей муравьиную кислоту (10 мл воды: 20 мл ацетонитрила и 0,5 мл муравьиной кислоты) при 40°С в течение ночи. ЖХ-МС показала чистое превращение, единичный пик при 4,22 с ожидаемой массой продукта 515,28 (М+1). Растворитель удаляли, и остаток очищали с применением колонки RediSep (Al₂O₃ рН=7, 24 г, градиент растворителей дихлорметан/МеОН). Продукт элюировали посредством смеси ~7% МеОН в ДХМ. После высушивания фракций соединение №83 (0,140 г, 71% выход) выделяли в форме твердого вещества. ¹Н ЯМР (400 МГц, ДМСО) δ 10,63 (s, 1Н), 8,37 (s, 1Н), 7,60 (d, J=7,9 Гц, 1Н), 7,55-6,78 (m, 8Н), 6,44 (d, J=7,9 Гц, 1H), 5,76 (s, 1Н), 4,24 (d, J=4,4 Гц, 3H), 4,08 (d, J=4,4 Гц, 2Н), 2,25 (s, 6Н), 1,26 (s, 3H), 1,08 (d, J=12,0 Гц, 9Н).

ПРИМЕР 18

In vitro активность

[0576] Представители соединений согласно настоящему описанию тестировали на биологическую активность посредством анализа генного переключателя in vitro (таблицы 1 и 1А). Анализы генного переключателя описаны, например, в патентах США №. 8076517; 7456315; 7304161; и 6258603.

Получение стабильной клеточной линии

[0577] СНО-К1 клетки стабильно трансфицировали плазмидой (RS-1, фиг. 1), кодирующей люциферазу светлячка (fLUC) под контролем Rheo Switch^®, в результате чего получили стабильную клеточную линию CHO-K1_RS-1. Главный созданный банк клеток содержал приблизительно 100 флаконов по 5×10⁶ клеток во флаконе. Один флакон с CHO-K1_RS-1 оттаивали и культивировали в течение двух недель до проведения каждого скрининга активности in vitro. Последовательность нуклеиновых кислот RS-1, которая показывает расположение компонентов, представлена на фигурах 2А-2Е.

Скрининг активности

[0578] За двадцать четыре (24) часа до обработки контрольным и тестируемым соединениями клетки CHO-K1_RS-1 высевали на белые непрозрачные 384-луночные планшеты для культивирования клеток по 3600 клеток в лунку в 30 мкл среды для культивирования. Клетки инкубировали в среде увлажненного CO₂ инкубатора при 37°С до обработки соединением.

[0579] Соединения готовили с концентрацией 25 мМ в 100% сухом ДМСО и хранили при комнатной температуре в запечатанных 1 мл пробирках до последующего разведения и анализа. В день обработки клеток пробирки, содержащие контрольное и тестируемые соединения, сортировали, и лиганды помещали в 96-луночные полипропиленовые планшеты для последующего разведения. Соединения разводили в 100% сухом ДМСО по 8-точек разведений в 10 раз в диапазоне от 25 мМ до 2,5 нМ с применением Biomek FX автоматического жидкостного дозатора.

[0580] Разведенные соединения затем помещали в каждую лунку 384-луночного полипропиленового планшета в четырех параллельных опытах, получая один 384-луночный планшет с четырьмя повторами разведения каждого соединения в разных секторах планшета. В каждую лунку 384-луночного планшета добавляли 20 мкл разведенного соединения. 384-луночные планшеты, содержащие разведенные соединения, и планшеты, содержащие клетки в среде культивирования, загружали в Biomek FX, и в каждую лунку, содержащую клетки, добавляли по 30 нл соединения с применением 384-pin V&P Scientific Pin Tool. Полученное разведение в 1000 раз (от 30 нл до 30 мкл) образовывало конечный диапазон дозирования от 25 мкМ до 2,5 пМ в 0,1% ДМСО. Два повторных планшета готовили для получения непосредственно планшета для анализа экспрессии люциферазы и анализа жизнеспособности клеток ΑΡΗ.

[0581] Клетки инкубировали с соединением в течение 24 часов в среде увлажненного CO₂ инкубатора при 37°С. После инкубирования клетки анализировали на предмет экспрессии люциферазы (fLUC анализ) с применением анализа Steady Glo assay от Promega. Клетки уравновешивали до комнатной температуры в течение 15 минут до добавления реагента. Тридцать микролитрбв (30 мкл) реагента для анализа добавляли в каждую лунку 384-луночного планшета с применением Biomek FX. Реагент инкубировали с клетками в течение 10-120 минут до считывания на люминометре Molecular Devices Spectramax L. Реагенты для анализа готовили согласно инструкциям производителя.

Данные анализа

[0582] Данные экспрессии люциферазы нормализовали относительно базового сигнала клеток, обработанных только ДМСО. Отношение сигнала обработанных клеток к сигналу клеток, обработанных носителем, наносили на график и проводили нелинейную регрессию с использованием программного обеспечения Graph Pad Prism software. EC₅₀, (log)EC₅₀ и данные Hill slope генерировали. Экспрессия репортерного гена, например, экспрессия люциферазы, служит посредником для экспрессии гена, представляющего интерес. См., например, патент США 2009/0123441 и WO 2011/119773.

[0583] Сокращения, использованные в таблице 1, приведены в таблице 2.

ПРИМЕР 19

Фармакокинетическое (РК) исследование

[0584] Фармакокинетику представителей соединений согласно настоящему описанию (Карта 1) и представителей ДАГ, которые не содержат атом бора (Карта 2), определяли согласно следующему протоколу:

Дозировки животным

[0585] Самок крыс линии Спраг Доули не кормили в течение по меньшей мере 8 часов (в течение ночи) перед пероральным дозированием соединения через зонд (10 мг/кг; носитель = 2 мг/мл Каприол 90 / Триацетин (1:1, об./об.); 3 животных/соединение) и взвешивали перед дозированием. Правильный объем соответствующего состава вводили на основании массы тела (животных) в этот день. Массу тела, объем дозы и время дозирования регистрировали для каждого животного. Животных не кормили в течение по меньшей мере 4 часов после введения активатора лиганда.

Сбор плазмы

[0586] Приблизительно 200 мкл/образца крови отбирали катетером из точек отбора в пробирки с ЭДТА в каждой временной точке от каждого животного. Точное время отбора крови регистрировали для каждого животного. Образцы крови выдерживали при 4°С (мокрый лед), начиная непосредственно после сбора, и центрифугировали в промежутке 15 минут после сбора в течение 12 минут при 2500 об/мин. После центрифугирования образцы плазмы хранили при ^-80°С до анализа. Время отбора образцов было следующим: День 0: 0, 0,5, 1, 2, 3, 4, 6 и 8 часов; День 1: 24 часа.

Определение соединения в плазме

[0587] LC-MS/MS способ: способ жидкостной хроматографии с тандемной масс-спектрометрией с осаждением белка применяли для количественного определения соединения в образцах плазмы крыс, отобранных у всех животных, которым дозировали лиганд. Линейный диапазон составлял от 1 нг/мл до 1000 нг/мл, с коэффициентом корреляции для калибровочных кривых выше 0,99, и анализируемое вещество количественно определяли в пределах ±15% от целевого при всех концентрациях калибровочного стандарта.

Определение фармакокинетических (РК) параметров

[0588] Следующие фармакокинетические РК параметры соединения в плазме рассчитывали с применением модельно-независимого способа программного обеспечения WinNonlin, Version 5.3 или выше: максимальная концентрация (C_max), время максимальной концентрации (T_max), период полураспада (t_1/2), область под кривой от нулевого момента времени до отбора последнего образца (AUC_0-t) и клиренс при пероральном приеме.

Статистические анализы

[0589] Описательную статистику (среднее значение, стандартное отклонение [SD], вариационный коэффициент [CV%], медиана, минимум и максимум) применяли для обобщения параметров РК для соединений во всех группах (данные не представлены).

Результаты и обсуждение

[0590] Концентрацию лиганда в плазме рассчитывали посредством экстраполирования значений области под кривой для образцов от стандартной кривой, полученной с помощью программного обеспечения analyst^® software program. Значения в нг/мл для образцов плазмы, представленные для всех животных, применяли для получения фармакокинетических (РК) параметров. Как показано в таблице 3, соединения согласно настоящему описанию имеют неожиданно высокие значения C_max и T_max и неожиданно низкие значение клиренса, по сравнению с ДАГ, которые не содержат атом бора.

ПРИМЕР 20

Экспрессия Ad-RTS-fLUC у мышей in vivo

[0591] Экспрессию fLUC после внутримышечной (ВМ) инъекции Ad-RTS-fLUC и представителей соединений согласно настоящему описанию посредством перорального введения через зонд у самок мышей CD1 определяли согласно следующему протоколу:

Состав соединений

[0592] Соединения готовили с концентрацией 20 мг/мл в Каприол90/Триацетин (1:1, об./об.) и для перорального введения через зонд с дозировкой 100 мг/кг.

ДНК

[0593] Ad-RTS-fLUC (начальная концентрация 1,1×10¹² вирусных частиц/мл) хранили в А195 буфере для хранения (10 мМ Tris, рН 7,4, 0,1 мМ ЭДТА, 1 мМ MgCl₂, 10 мМ гистидина, 75 мМ NaCl, 5% сахарозы, 0,02% Ps-80 и 0,5% EtOH) (Evans et al., 1997). Пути введения для Ad-RTS-fLUC в данном исследовании представляли собой посредством внутримышечного введения в правую и левую икроножную мышцу.

Введение дозы

[0594] Самкам мышей CD1 вводили дозы согласно нижеприведенным таблицам.

GOI структурный элемент

Соединения согласно настоящему описанию (перорально через зонд)

Обзор исследования in vivo

[0595] В день исследования-1 мыши получали дозу 1×10¹⁰ вирусных частиц (100 мкл в целом) Ad-RTS-fLUC внутримышечно в правую и левую икроножные мышцы по 50 мкл в каждую.

[0596] Тестируемое соединение однократно вводили образованным группам через зонд на основании массы тела, начиная через 24 часа после последней серии инъекций Ad-RTS-fLUC в день 0.

В условиях вне живого организма (IVIS)

[0597] IVIS проводили через 6, 24 и 48 часов после последнего дозирования через пероральный зонд в день 0. После того, как животное анестезировали надлежащим образом, вводили 150 мг/кг люциферина (разбавленного в PBS) внутрибрюшинно. Животных помещали в передний конус на поверхности IVIS. Параметры изображения и калибровочную кривую получали эмпирически (Caliper Life Sciences Living Image Software). Изображения получали приблизительно в пределах 15 минут после инъекции. После обработки изображений, животных возвращали в их клетку и контролировали до полного восстановления от анестезии.

[0598] Данные анализа и реконструкцию изображения проводили с применением программного обеспечения Living Image Software Version 4.0. Уровни люминесценции количественно определяли посредством измерения маркеров области, представляющей интерес (ROI), нанесенных вручную вокруг зоны, представляющей интерес. Данные маркеры изолируют ROI, отфильтровывая любые нежелательные уровни экспрессии. С применением инструментов коррекции программного обеспечения, фоновый шум и точечные помехи удаляли для уменьшения вариабельности. Уровни свечения поверхности (интенсивность света, испускаемая поверхностью ткани) определяли посредством количества фотонных частиц в секунду (фотон/сек), испускаемых ROI. Эти величины выражены как Максимальное свечение или Общий поток.

Статистические анализы

[0599] Данные IVIS суммировали и сравнивали между обработанными группами для оценки индуцибельности fLUC. Результаты представлены на фиг. 3. Данные показали, что представители соединений согласно настоящему описанию активируют Rheoswitch in vivo. Данные плацебо, представленные на фиг. 3, взяты из аналогичного исследования.

[0600] Следует понимать, что вышеприведенные описанные варианты реализации и примеры не предназначены для ограничения объема настоящего описания в любом отношении, и что представленная формула изобретения предназначена для того, чтобы охватывать все варианты реализации и примеры, явно и не явно представленные в настоящем описании.

[0601] Все патенты и публикации, процитированные в настоящем описании, полностью включены посредством ссылки во всей их полноте.

Изобретение относится к соединению, имеющему формулу I, или его фармацевтически приемлемым солям, которые могут найти применение для модулирования экспрессии экзогенного гена. В формуле I R¹ и R² каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила и C_1-4 галогеналкила; R³ выбран из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила и С_6-14 арила; R⁴ выбран из группы, состоящей из R⁴-1, R⁴-2 и R⁴-5; X¹ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8a)-; Y¹ представляет собой -(CR^9aR^9b)_m-; Z¹ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8b)-, или Z¹ отсутствует; R^6a выбран из группы, состоящей из гидрокси, С_1-4 алкила и С_1-4 алкокси; или R^6a образует аддукт аминокислоты; R^7a и R^7b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и С_1-4 алкила; R^8a и R^8b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; R^9a и R^9b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; m составляет 1, 2, 3 или 4; X² представляет собой -О-; Y² представляет собой -(CR^9cR^9d)_n-; Z² отсутствует; R^6b выбран из группы, состоящей из гидрокси, С_1-4 алкила и С_1-4 алкокси; или R^6b образует аддукт аминокислоты; R^7c и R^7d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и С_1-4 алкила; R^9c и R^9d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; n составляет 1, 2, 3 или 4; R^10a выбран из группы, состоящей из водорода и -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); R^10b, R^10c и R^10d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкокси, С_1-4 гидроксиалкила и С_1-4 алкокси; R^11a и R^11b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; R^12a и R^12b выбраны из группы, состоящей из гидрокси и С_1-4 алкокси; или R^12a и R^12b совместно образуют сочленение -O(CR^13aR^13b)_pO-; или -B(R^12a)(R^12b) образует аддукт фторида; R^13a и R^13b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и C_1-4 алкила; о составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5; p составляет 2, 3 или 4; R⁵ выбран из группы, состоящей из R⁵-3, R⁵-4 и R⁵-5; R^10e выбран из группы, состоящей из водорода и -(CR^11cR^11d)_s-B(R^12c)(R^12d); R^10f, R^10g и R^10h независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 гидроксиалкила и С_1-4 алкокси; R^11c и R^11d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; R^12c и R^12d выбраны из группы, состоящей из гидрокси и С_1-4 алкокси; или R^12c и R^12d совместно образуют сочленение -O(CR^13cR^13d)_tO-; или -B(R^12c)(R^12d) образует аддукт фторида; R^13c и R^13d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; s составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5; t составляет 2, 3 или 4; R^14a и R^14b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 гидроксиалкила, С_1-4 алкокси и -COR¹⁶; R^15a и R^15b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 гидроксиалкила и С_1-4 алкокси; R¹⁶ представляет собой С_1-4 алкил. Изобретение относится также к фармацевтической композиции, способу лечения рака, способу уменьшения или предотвращения распространения насекомых и набору для регулирования экспрессии экзогенного гена с использованием указанных соединений. 5 н. и 19 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 20 пр.

и

и

1. Соединение, имеющее формулу I:

,

где

R¹ и R² каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила и C_1-4 галогеналкила;

R³ выбран из группы, состоящей из водорода, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила и С_6-14 арила;

R⁴ выбран из группы, состоящей из:

и

X¹ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8a)-;

Y¹ представляет собой -(CR^9aR^9b)_m-;

Z¹ выбран из группы, состоящей из -О- и -N(R^8b)-, или Z¹ отсутствует;

R^6a выбран из группы, состоящей из гидрокси, С_1-4 алкила и С_1-4 алкокси; или

R^6a образует аддукт аминокислоты;

R^7a и R^7b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и С_1-4 алкила;

R^8a и R^8b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

R^9a и R^9b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

m составляет 1, 2, 3 или 4;

X² представляет собой -О-;

Y² представляет собой -(CR^9cR^9d)_n-;

Z² отсутствует;

R^6b выбран из группы, состоящей из гидрокси, С_1-4 алкила и С_1-4 алкокси; или

R^6b образует аддукт аминокислоты;

R^7c и R^7d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена и С_1-4 алкила;

R^9c и R^9d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

n составляет 1, 2, 3 или 4;

R^10a выбран из группы, состоящей из водорода и -(CR^11aR^11b)_o-B(R^12a)(R^12b); и

R^10b, R^10c и R^10d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкокси, С_1-4 гидроксиалкила и С_1-4 алкокси;

R^11a и R^11b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

R^12a и R^12b выбраны из группы, состоящей из гидрокси и С_1-4 алкокси; или

R^12a и R^12b совместно образуют сочленение -O(CR^13aR^13b)_pO-; или

-B(R^12a)(R^12b) образует аддукт фторида;

R^13a и R^13b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и C_1-4 алкила;

о составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5;

p составляет 2, 3 или 4;

R⁵ выбран из группы, состоящей из:

и

R^10e выбран из группы, состоящей из водорода и -(CR^11cR^11d)_s-B(R^12c)(R^12d); и

R^10f, R^10g и R^10h независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 гидроксиалкила и С_1-4 алкокси;

R^11c и R^11d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

R^12c и R^12d выбраны из группы, состоящей из гидрокси и С_1-4 алкокси; или

R^12c и R^12d совместно образуют сочленение -O(CR^13cR^13d)_tO-; или

-B(R^12c)(R^12d) образует аддукт фторида;

R^13c и R^13d каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила;

s составляет 0, 1, 2, 3, 4 или 5;

t составляет 2, 3 или 4;

R^14a и R^14b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 гидроксиалкила, С_1-4 алкокси и -COR¹⁶;

R^15a и R^15b каждый независимо выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 гидроксиалкила и С_1-4 алкокси;

R¹⁶ представляет собой С_1-4 алкил;

при условии:

a) когда R⁴ представляет собой R⁴-5 и R⁵ представляет собой R⁵-3, тогда один из R^10a или R^10e не является водородом; и

b) когда R⁴ представляет собой R⁴-5 и R⁵ представляет собой R⁵-4 или R⁵-5, тогда R^10a не является водородом,

или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что:

R⁴ представляет собой R⁴-5;

R⁵ представляет собой R⁵-3; и

R^10e представляет собой -(CR^11cR^11d)_s-B(R^12c)(R^12d),

или его фармацевтически приемлемая соль.

3. Соединение по п.1, имеющее формулу II:

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

4. Соединение по п.3, отличающееся тем, что о составляет 0.

5. Соединение по п.1, имеющее формулу III:

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

6. Соединение по п.5, отличающееся тем, что:

s составляет 0, и

R^10b, R^10c и R^10d независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, галогена, гидрокси, С_1-4 алкила, С_1-4 галогеналкила, С_1-4 алкокси и С_1-4 галогеналкокси;

или его фармацевтически приемлемая соль.

7. Соединение по п.1, имеющее формулу V:

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

8. Соединение по п.1, имеющее формулу VI:

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

9. Соединение по п.7 или 8, отличающееся тем, что:

Z¹ отсутствует или представляет собой -О-, и

X¹ представляет собой -О- или -N(H)-,

или его фармацевтически приемлемая соль.

10. Соединение по п.9, отличающееся тем, что:

R^9a и R^9b выбраны из группы, состоящей из водорода и метила,

Z¹ отсутствует, и

m составляет 1, 2 или 3,

или его фармацевтически приемлемая соль.

11. Соединение по п.1, имеющее формулу VIII:

,

или его фармацевтически приемлемая соль.

12. Соединение по п.11, отличающееся тем, что:

R^9c и R^9d выбраны из группы, состоящей из водорода и метила, и

n составляет 1, 2 или 3,

или его фармацевтически приемлемая соль.

13. Соединение по п.1, отличающееся тем, что:

R⁴ выбран из группы, состоящей из:

,

и

R^10e представляет собой водород,

или его фармацевтически приемлемая соль.

14. Соединение по п.1, отличающееся тем, что:

R¹ представляет собой С_1-4 алкил;

R² выбран из группы, состоящей из водорода и С_1-4 алкила; и

R³ представляет собой С_1-4 алкил,

или его фармацевтически приемлемая соль.

15. Соединение по п.14, отличающееся тем, что R² представляет собой водород и R³ представляет собой трет-бутил, или его фармацевтически приемлемая соль.

16. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R¹, R² и R³ каждый представляет собой метил, или его фармацевтически приемлемая соль.

17. Соединение по п.1, имеющее формулу XI:

,

в котором R¹ не равен R³, или его фармацевтически приемлемая соль.

18. Соединение по п.17, отличающееся тем, что:

R⁴ выбран из группы, состоящей из:

и

R^10e представляет собой водород,

или его фармацевтически приемлемая соль.

19. Соединение по п.1, выбранное из группы, состоящей из:

и

или его фармацевтически приемлемая соль.

20. Соединение по п.19, выбранное из группы, состоящей из:

и

или его фармацевтически приемлемая соль.

21. Фармацевтическая композиция для модулирования экспрессии экзогенного гена, содержащая эффективное количество соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.

22. Способ лечения рака молочной железы, лимфомы, рака поджелудочной железы, рака толстой кишки, меланомы, глиомы, немелкоклеточного рака легкого, карциномы головы или шеи, карциномы легких, карциномы шейки матки, почечно-клеточной карциномы, грибовидного микоза, лейкемии, острой лимфоцитарной лейкемии, хронической лимфоцитарной лейкемии, саркомы Капоши, болезни Ходжкина, неходжкинской лимфомы у субъекта, включающий введение указанному субъекту соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой соли, при этом клетка-хозяин у субъекта включает полинуклеотид, кодирующий генный переключатель, содержащий лигандсвязывающий домен рецептора экдизона, который связывает указанное соединение, при этом указанная клетка-хозяин дополнительно включает полинуклеотид, кодирующий пептид, белок или полипептид, экспрессия которого регулируется указанным генным переключателем.

23. Способ уменьшения или предотвращения распространения или уничтожения насекомых, включающий приведение указанных насекомых или среды их обитания в контакт с инсектицидно эффективным количеством соединения по п.1 или его фармацевтически приемлемой солью.

24. Набор для регулирования экспрессии экзогенного гена, содержащий соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемую соль и инструкции по введению соединения изолированной клетке-хозяину или субъекту.