СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ФОРМЫ ТЯЖЕСТИ ИНФЕКЦИОННОГО МОНОНУКЛЕОЗА Российский патент 2017 года по МПК G01N33/53 

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, детским инфекционным болезням, и может быть использовано для диагностики формы тяжести вызванного вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей.

Инфекционный мононуклеоз является серьезной эпидемической и клинической проблемой современного здравоохранения. Связано это с повсеместной распространенностью самого частого этиологического агента - ВЭБ, который обладает широким тканевым тропизмом, уникальным действием на иммунную систему, способностью вызывать развитие множества клинических форм с неблагоприятными последствиями (Тимченко В.Н. и соавт. Клинико-лабораторные критерии тяжести и принципы терапии острого инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр вирусной этиологии у детей. - Педиатр. - 2015. - Т. 4, №4. - С. 150). Инфекционный мононуклеоз может развиться как при первичном инфицировании ВЭБ, так и при реактивации ВЭБ инфекции (Шарипова Е.В. Герпес-вирусные инфекции и инфекционный мононуклеоз. - Журнал инфектологии. - 2013. - Т. 5, №2. - С. 6). ВЭБ способствует снижению местного иммунитета за счет угнетения продукции провоспалительных цитокинов, необходимых для адекватного локального иммунного ответа (Дроздова М.В. и соавт. Продукция провоспалительных цитокинов в ткани глоточной миндалины при хроническом лимфопролиферативном синдроме у детей. - Российская оториноларингология. - 2009. - №5. - С. 35). Это, в свою очередь, способствует множественной адсорбции и массивной бактериальной колонизации небных миндалин стрептококками, стафилококками и другими возбудителями (Адеишвили П.С. и соавт. Дисбиотические нарушения микробиоценоза слизистых оболочек ротоглотки и их роль в этиопатогенезе инфекционного мононуклеоза. - Вестник РГМУ. - 2013. - №3. - С. 45). Наличие ассоциантов при вирусной инфекции приводит к изменению течения заболевания и тактики его лечения (Esposito S. Infectious Diseases: Pathophysiology, Diagnostics and Prevention. - Int. J. Mol. Sci. - 2016. - Vol. 17, N 9. - P. 539).

В литературе описаны различные способы диагностики легкой, среднетяжелой и тяжелой формы инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ, основанные в основном на исследовании сыворотки крови (Шарипова Е.В. и соавт. Лабораторные подходы к диагностике инфекционного мононуклеоза у детей на современном этапе. - Вестник гематологии. - 2012. - Т. VIII, №1. - С. 93; Симованьян Э.Н., Ким М.А. Инфекционный мононуклеоз Эпштейна-Барр вирусной этиологии: поиск информативных критериев тяжести. - В сборнике: Актуальные вопросы современной медицины. - СПб. - 2014. - С. 176; Тимченко В.Н. и соавт. Клинико-лабораторные критерии тяжести и принципы терапии острого инфекционного мононуклеоза Эпштейна-Барр вирусной этиологии у детей. - Педиатр. - 2015. - Т. 4, №4. - С. 150). Вместе с тем, данные о диагностике формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями, отсутствуют.

Поэтому актуальной проблемой современной педиатрии является разработка достоверных, высокоэффективных и неинвазивных способов диагностики формы тяжести вызванного ВЭБ и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей.

Проведенным поиском по научно-медицинской и патентной литературе выявлены различные способы диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза у детей.

В монографии Тимченко В.Н. (Инфекционные болезни у детей: учебник для педиатрических факультетов медицинских вузов / под ред. проф. В.Н. Тимченко. - 4-е изд., испр. и доп. - Спб.: СпецЛит, 2012. - С. 238) описан способ определения формы тяжести вызванного ВЭБ инфекционного мононуклеоза на основании анализа клинических критериев. При обследовании ребенка определяют выраженность интоксикации, высоту температуры тела, характер воспалительных изменений в носо- и ротоглотке, размеры лимфатических узлов, печени, селезенки, длительность клинических проявлений заболевания.

При условии, что температура тела больного выше 38,5°C, имеют место головная боль, снижение аппетита, недомогание, значительное затруднение носового дыхания, отечность лица, значительное увеличение размеров лимфатических узлов шеи, печени и селезенки, лакунарный тонзиллит, гипертрофия небных миндалин 2-3 степени, жалобы на боль в горле при глотании, диагностируют среднетяжелую форму вызванного ВЭБ инфекционного мононуклеоза.

При условии, что температура тела больного 39,6°C и более, имеют место вялость, адинамия, рвота, головная боль, анорексия, одутловатость и пастозность лица, отсутствие носового дыхания, значительное увеличение лимфатических узлов шеи, тяжелый лакунарный тонзиллит, выраженная гепатоспленомегалия, диагностируют тяжелую форму вызванного ВЭБ инфекционного мононуклеоза.

Недостатком этого способа является его недостаточная достоверность, обусловленная отсутствием четких клинических критериев, что не позволяет достоверно диагностировать формы тяжести вызванного ВЭБ инфекционного мононуклеоза.

Патентом РФ №2172956 (опубликован в 2001 г., БИПМ №24) защищен «Способ диагностики тяжелых форм инфекционного мононуклеоза, вызванного вирусом Эпштейна-Барр у детей». Способ предусматривает определение в сыворотке крови специфических иммунных комплексов с данным ДНК-содержащим вирусом по увеличению активности экзогенного комплемента при одновременном внесении его в реакцию со специфическими антителами (СИК-1) или вирусом Эпштейна-Барр (СИК-2) с дальнейшим расчетом активности иммунных комплексов по формуле СИК (1, 2)=(К_к-К_оп)×К_к, где К_к - количественный показатель фермента в контроле исследуемой сыворотки; К_оп - то же в опытной пробе. Тяжелые от легких форм инфекционного мононуклеоза дифференцируют по наличию в крови специфических иммунных комплексов СИК-1 более 0,10 относительных единиц или СИК-2 более 0,20 относительных единиц.

Патентом РФ №2247390 (опубликован в 2005 г., БИПМ №6) защищен «Способ диагностики инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр». Способ предусматривает проведение непрямой иммунопероксидазной реакции с последующим гистохимическим окрашиванием и выявлением антигена вируса Эпштейна-Барр. Тяжесть течения инфекционного мононуклеоза диагностируют по характеру экспрессии антигена вируса Эпштейна-Барр. Легкую форму инфекционного мононуклеоза диагностируют при наличии 5-6 мелких гранул в свободнолежащих лимфоцитах. Тяжелую форму инфекционного мононуклеоза диагностируют при наличии перинуклеарной экспрессии в слипшихся лимфоцитах и 6-7 крупных гранул как в слипшихся, так и в свободнолежащих лимфоцитах.

Недостатками этих способов являются их инвазивность и ограниченные функциональные способности, так как невозможно с их помощью выполнять диагностику тяжелой и среднетяжелой формы заболевания.

Наиболее близким техническим решением, взятым за прототип, является «Способ диагностики формы тяжести вызванного вирусом Эпштейна-Барр острого инфекционного мононуклеоза у детей», защищенный патентом РФ №2471196 (опубликован в 2012 г., БИПМ №36).

Способ предусматривает обследование больного ребенка и исследование его биологической жидкости. В биологической жидкости - сыворотке крови ребенка определяют концентрации интерлейкина-1β (ИЛ-1β) и рецепторного антагониста интерлейкина-1β (РА ИЛ-1β). При выполнении условия (ИЛ-1β)≥20 пг/мл и (РА ИЛ-1β)≤1197 пг/мл, диагностируют среднетяжелую форму. При выполнении условия (ИЛ-1β)<20 пг/мл и (РА ИЛ-1β)>1197 пг/мл диагностируют тяжелую форму вызванного ВЭБ острого инфекционного мононуклеоза. При этом время диагностики составляет в среднем 4 часа.

Недостатками прототипа являются инвазивность, связанная с риском заражения ВИЧ, вирусами гепатитов В, С и др., как ребенка, так и медицинского персонала во время процедуры, связанной с повреждением кожных покровов при пункции вен, наличие дискомфорта и болевых ощущений, связанных с забором крови, ограниченные функциональные возможности способа, поскольку с его помощью невозможно диагностировать формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями, а также длительность диагностики.

Задачей предлагаемого технического решения является разработка высокоэффективного, достоверного и неинвазивного способа диагностики формы тяжести вызванного ВЭБ и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей.

Техническим результатом, проявляющимся при реализации предлагаемого способа, является расширение функциональных возможностей способа, исключение инвазивности, а также сокращение времени диагностики формы тяжести вызванного ВЭБ и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей.

Технический результат достигается тем, что выполняют обследование ребенка, больного инфекционным мононуклеозом, вызванным ВЭБ и бактериями, при котором определяют наличие или отсутствие сплошного налета на небных миндалинах ребенка. Исследуют его биологическую жидкость - слюну, в которой определяют концентрацию IFN-γ, пг/мл. При наличии сплошного налета и значении IFN-γ<7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета и значении IFN-γ<3,0 пг/мл диагностируют тяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. При наличии сплошного налета и значении IFN-γ≥7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета и значении IFN-γ≥3,0 пг/мл диагностируют среднетяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями.

Для разработки данного способа 97 больных детей с подтвержденным диагнозом в возрасте от 3 до 15 лет были разделены на 2 группы. В первую группу вошли 75 больных детей со среднетяжелой формой инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. Вторую группу составили 22 больных ребенка с тяжелой формой инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. Учитывая, что задачей исследования являлась разработка неинвазивного способа, а также тот факт, что слизистая ротоглотки является «входными воротами» для инфицирования ВЭБ и бактериями, в качестве биологической жидкости решили исследовать слюну, в которой определяли концентрацию важнейших цитокинов - IFN-α, IFN-γ, IL-4.

При обследовании ротоглотки 97 детей с тяжелой и среднетяжелой формами инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями, рассматривали следующие клинические признаки: наличие или отсутствие сплошного налета на небных миндалинах, наличие налета в лакунах, болезненность подчелюстных лимфоузлов, стекание гнойного отделяемого по задней стенке носоглотки.

Был проведен статистический анализ значений концентрации IFN-α, IFN-γ, IL-4 в слюне с использованием непараметрического теста Манна-Уитни (Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. - М.: МедиаСфера. - 2003. - С. 143). Наиболее высокозначимым диагностическим предиктором для диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями, оказалась концентрация IFN-γ (р<0,0001).

Далее рассмотрены значимые клинические признаки, дополняющие IFN-γ в слюне - налеты в лакунах, сплошные налеты, болезненность подчелюстных лимфоузлов, стекание гнойного отделяемого по задней стенке носоглотки. Была проведена оценка коэффициентов логистической регрессии развития тяжелой и среднетяжелой формы заболевания при различных сочетаниях перечисленных выше клинических признаков и значений концентрации IFN-γ в слюне ребенка, больного инфекционным мононуклеозом, вызванным ВЭБ и бактериями.

В результате проведенной оценки наиболее высокий уровень качества (AUC=0,9561) был выявлен для признаков: наличие или отсутствие сплошного налета на небных миндалинах (р<0,05) (Ким М.А. «Клинико-иммуно-микробиологические аспекты, диагностические подходы к определению форм тяжести Эпштейна-Барр вирусной инфекции, ассоциированной с бактериями» Автореф. дис. … канд. мед. наук, Москва, 2016, с. 18).

Подробное описание способа

Выполняют обследование ребенка, больного инфекционным мононуклеозом, вызванным ВЭБ и бактериями. При обследовании визуально в ротоглотке определяют наличие или отсутствие сплошных налетов на небных миндалинах.

Утром натощак производят сбор слюны больного ребенка в количестве 2,0 мл в пробирки типа «эппендорф». Перед сбором слюны предварительно ротовую полость ребенка полоскают 0,9% раствором натрия хлорида. Исследуют слюну. В слюне, с помощью набора реагентов А-8752 для иммуноферментного определения концентрации интерферона гамма в биологических жидкостях человека «гамма-ИНТЕРФЕРОН-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-бест», г. Новосибирск, по методике, описанной в пункте 2.1 инструкции по применению набора, определяют концентрацию IFN-γ в пг/мл.

При наличии сплошного налета на небных миндалинах и IFN-γ<7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета на небных миндалинах и IFN-γ<3,0 пг/мл диагностируют тяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями.

При наличии сплошного налета на небных миндалинах и IFN-γ≥7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета на небных миндалинах и IFN-γ≥3,0 пг/мл диагностируют среднетяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями.

Практическая реализуемость предлагаемого способа иллюстрируется примерами из клинической практики:

Пример 1. Больная Л., 13 лет, поступила в детское инфекционное отделение муниципального бюджетного учреждения здравоохранения «Городская больница №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону» (МБУЗ «ГБ №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону») на 4-й день болезни с жалобами на вялость, повышение температуры тела до 38°C, боль при глотании, затруднение носового дыхания.

Объективно при поступлении: общее состояние средней тяжести. Температура тела - 37,9°C. Носовое дыхание затруднено, отделяемого нет. Кожные покровы бледные без патологических элементов, Подчелюстные лимфоузлы - 1,5×1,0 см, задне- и переднешейные - 1,0×0,8 см, паховые 0,5×0,5 см, безболезненные, не спаяны между собой, кожа над ними не изменена. Слизистая ротоглотки ярко гиперемирована, гипертрофированные небные миндалины без налетов. В легких везикулярное дыхание, хрипов нет. Тоны сердца громкие, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный. Печень пальпируется у края реберной дуги, селезенка - на 1 см выступает от края реберной дуги. Стул, диурез в норме.

В крови больной Л. были выявлены маркеры активной ВЭБ инфекции: anti-EBV-EA IgG, anti-EBV-EBNA IgG, ДНК ВЭБ, в мазке из ротоглотки обнаружен Staphylococcus aureus 10⁶ КОЕ, что в совокупности с клинической картиной свидетельствовало о наличии инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Staphylococcus aureus.

С целью определения формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Staphylococcus aureus, было проведено исследование согласно заявляемому способу.

Выполнили обследование больной Л. При обследовании визуально в ротоглотке определяли наличие или отсутствие сплошных налетов на небных миндалинах. У больной Л. сплошные налеты на небных миндалинах отсутствовали.

Утром натощак выполнили сбор слюны больной Л. в количестве 2,0 мл в пробирки типа «эппендорф». Перед сбором слюны предварительно ротовую полость ребенка полоскали 0,9% раствором натрия хлорида. Исследовали слюну. В слюне, с помощью набора реагентов А-8752 для иммуноферментного определения концентрации интерферона гамма в биологических жидкостях человека «гамма-ИНТЕРФЕРОН-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-бест», г. Новосибирск, по методике, описанной в пункте 2.1 инструкции по применению набора, определяли концентрацию IFN-γ в пг/мл. Было получено следующее значение: IFN-γ=7,6 пг/мл.

Поскольку сплошной налет на небных миндалинах отсутствовал и значение IFN-γ=7,6>3,0 (пг/мл), больной Л. была диагностирована среднетяжелая форма инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Staphylococcus aureus. Время диагностики составило примерно 2 часа.

Больной Л. было назначено соответствующее лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями согласно заявляемому способу.

Пример 2. Больной И., 4 лет, поступил в детское инфекционное отделение МБУЗ «ГБ №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону» на 3-й день болезни с жалобами на повышение температуры тела до 38,6°C, затруднение носового дыхания.

Объективно при поступлении: общее состояние средней тяжести. Температура тела - 38,0°C. Носовое дыхание слегка затруднено, отделяемого нет. Кожные покровы бледные без патологических элементов. Подчелюстные лимфоузлы - 1,0×0,8 см, задне- и переднешейные - 1,0×0,5 см, паховые 0,5×0,5 см, безболезненные, не спаяны между собой, кожа над ними не изменена. Слизистая ротоглотки гиперемирована, гипертрофированные небные миндалины со сплошным налетом. В легких пуэрильное дыхание, хрипов нет. Тоны сердца громкие, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный. Печень пальпируется у края реберной дуги, селезенка не пальпируется. Стул, диурез в норме.

В крови больного выявлены маркеры активной ВЭБ инфекции: anti-EBV-EA IgG, anti-EBV-EBNA IgG, ДНК ВЭБ, в мазке из ротоглотки обнаружен Streptococcus pyogenes 10⁹ КОЕ, что в совокупности с клинической картиной свидетельствовало о наличии инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes.

С целью определения формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes, было проведено исследование согласно заявляемому способу.

Выполнили обследование больного И. При обследовании визуально в ротоглотке определяли наличие или отсутствие сплошных налетов на небных миндалинах. Обследование показало наличие сплошного налета на небных миндалинах.

Утром натощак выполнили сбор слюны больного И. в количестве 2,0 мл в пробирки типа «эппендорф». Перед сбором слюны предварительно ротовую полость ребенка полоскали 0,9% раствором натрия хлорида. Исследовали слюну. В слюне, с помощью набора реагентов А-8752 для иммуноферментного определения концентрации интерферона гамма в биологических жидкостях человека «гамма-ИНТЕРФЕРОН-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-бест», г.Новосибирск, по методике, описанной в пункте 2.1 инструкции по применению набора, определяли концентрацию IFN-γ в пг/мл. Было получено следующее значение: IFN-γ=9,1 пг/мл.

Поскольку было зафиксировано наличие сплошного налета на небных миндалинах и значение IFN-γ=9,1>7,5 (пг/мл), больному И. была диагностирована среднетяжелая форма инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes. Время диагностики составило примерно 2 часа.

Больному И. было назначено соответствующее лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями согласно заявляемому способу.

Пример 3. Больной М., 4 лет, поступил в детское инфекционное отделение МБУЗ «ГБ №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону» на 2-й день болезни с жалобами на повышение температуры тела до 37,8°C.

Объективно при поступлении: общее состояние средней тяжести. Температура тела - 37,7°C. Носовое дыхание слегка затруднено, отделяемого нет. Кожные покровы бледные без патологических элементов. Подчелюстные лимфоузлы - 0,8×0,5 см, задне- и переднешейные - 0,5×0,5 см, безболезненные, не спаяны между собой, кожа над ними не изменена. Слизистая ротоглотки гиперемирована, гипертрофированные небные миндалины со сплошными налетами. В легких пуэрильное дыхание, хрипов нет. Тоны сердца громкие, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный. Печень пальпируется на 1 см ниже края реберной дуги, селезенка у края реберной дуги. Стул, диурез в норме.

В крови больного выявлены маркеры активной ВЭБ инфекции: anti-EBV-VCA IgM, anti-EBV-EA IgG, ДНК ВЭБ, в мазке из ротоглотки обнаружен Streptococcus viridans 10⁷ КОЕ, что в совокупности с клинической картиной свидетельствовало о наличии инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus viridans.

С целью определения формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus viridans, было проведено исследование согласно заявляемому способу.

Выполнили обследование больного М. При обследовании визуально в ротоглотке определяли наличие или отсутствие сплошных налетов на небных миндалинах. Обследование показало наличие сплошного налета на небных миндалинах.

Утром натощак выполнили сбор слюны больного М. в количестве 2,0 мл в пробирки типа «эппендорф». Перед сбором слюны предварительно ротовую полость ребенка полоскали 0,9% раствором натрия хлорида. Исследовали слюну. В слюне, с помощью набора реагентов А-8752 для иммуноферментного определения концентрации интерферона гамма в биологических жидкостях человека «гамма-ИНТЕРФЕРОН-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-бест», г. Новосибирск, по методике, описанной в пункте 2.1 инструкции по применению набора, определяли концентрацию IFN-γ в пг/мл. Было получено следующее значение: IFN-γ=10,1 пг/мл.

Поскольку было зафиксировано наличие сплошного налета на небных миндалинах и значение IFN-γ=10,1>7,5 (пг/мл), больному М. была диагностирована среднетяжелая форма инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus viridans. Время диагностики составило примерно 2 часа.

Больному М. было назначено соответствующее лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями согласно заявляемому способу.

Пример 4. Больной А., 4 лет, поступил в детское инфекционное отделение муниципального бюджетного учреждения здравоохранения МБУЗ «ГБ №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону» на 3-й день болезни с жалобами на повышение температуры тела до 38,5°C, боль при глотании, затрудненное носовое дыхание, «храп» во сне, сонливость, снижение аппетита.

Объективно при поступлении: общее состояние ребенка тяжелое. Температура тела - 38,5°C. Ребенок капризный, отказывается от питья. Отмечается выраженное затруднение носового дыхания. Кожные покровы бледные без патологических элементов, лицо пастозное. Подчелюстные лимфоузлы - болезненные до 2,0×1,5 см, задне- и переднешейные - безболезненные до 1,5×1,0 см в виде «пакетов», не спаянные между собой и окружающими тканями, кожа над ними не изменена. Слизистая ротоглотки гиперемирована, небные миндалины гипертрофированы, по ходу лакун желтоватого цвета налеты, которые легко снимались шпателем без кровоточивости. По задней стенке глотки стекает гнойное отделяемое. В легких пуэрильное дыхание, хрипов нет. Тоны сердца громкие, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный. Печень - на 4 см ниже реберной дуги, селезенка - на 1 см. Стул, диурез в норме.

В крови больного выявлены маркеры активной ВЭБ инфекции: anti-EBV-EA IgG; anti-EBV-EBNA IgG, ДНК ВЭБ, в мазке из ротоглотки обнаружен Streptococcus pyogenes 10⁹ КОЕ, что в совокупности с клинической картиной свидетельствовало о наличии инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes.

С целью определения формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes, было проведено исследование согласно заявляемому способу.

Выполнили обследование больного А. При обследовании визуально в ротоглотке определяли наличие или отсутствие сплошных налетов на небных миндалинах. У больного А. сплошные налеты на небных миндалинах отсутствовали.

Утром натощак выполнили сбор слюны больного А. в количестве 2,0 мл в пробирки типа «эппендорф». Перед сбором слюны предварительно ротовую полость ребенка полоскали 0,9% раствором натрия хлорида. Исследовали слюну. В слюне, с помощью набора реагентов А-8752 для иммуноферментного определения концентрации интерферона гамма в биологических жидкостях человека «гамма-ИНТЕРФЕРОН-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-бест», г. Новосибирск, по методике, описанной в пункте 2.1 инструкции по применению набора, определяли концентрацию IFN-γ в пг/мл. Было получено следующее значение: IFN-γ=0 пг/мл.

Поскольку сплошной налет на небных миндалинах отсутствовал и значение IFN-γ=0<3,0 (пг/мл), больному А. была диагностирована тяжелая форма инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes. Время диагностики составило примерно 2 часа.

Больному А. было назначено соответствующее лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями согласно заявляемому способу.

Пример 5. Больной Т., 5 лет, поступил в детское инфекционное отделение МБУЗ «ГБ №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону» на 5-й день болезни с жалобами на повышение температуры тела до 38,9°C, боль при глотании, выраженное затрудненное носовое дыхание, «храп» во сне, сонливость, снижение аппетита.

Объективно при поступлении: общее состояние ребенка тяжелое. Температура тела - 39,1°C. Отмечается вялость, дыхание через рот. Кожные покровы бледные без патологических элементов, лицо пастозное. Подчелюстные лимфоузлы - болезненные до 2,5×2,0 см, задне- и переднешейные - безболезненные в форме «конгломерата», не спаянные между собой и окружающими тканями, кожа над ними не изменена. Слизистая ротоглотки ярко гиперемирована, небные миндалины гипертрофированы, по ходу лакун желтоватого цвета налеты, которые легко снимались шпателем без кровоточивости. По задней стенке глотки стекает гнойное отделяемое. В легких пуэрильное дыхание, хрипов нет. Тоны сердца громкие, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный. Печень - на 5 см ниже реберной дуги, селезенка - на 2 см. Стул, диурез в норме.

В крови больного выявлены маркеры активной ВЭБ инфекции: anti-EBV-EA IgG, ДНК ВЭБ, в мазке из ротоглотки обнаружен Streptococcus viridans 10⁹ КОЕ, что в совокупности с клинической картиной свидетельствовало о наличии инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus viridans.

С целью определения формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus viridans, было проведено исследование согласно заявляемому способу.

Выполнили обследование больного Т. При обследовании визуально в ротоглотке определяли наличие или отсутствие сплошных налетов на небных миндалинах. У больного Т. сплошные налеты на небных миндалинах отсутствовали.

Утром натощак выполнили сбор слюны больного Т. в количестве 2,0 мл в пробирки типа «эппендорф». Перед сбором слюны предварительно ротовую полость ребенка полоскали 0,9% раствором натрия хлорида. Исследовали слюну. В слюне, с помощью набора реагентов А-8752 для иммуноферментного определения концентрации интерферона гамма в биологических жидкостях человека «гамма-ИНТЕРФЕРОН-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-бест», г. Новосибирск, по методике, описанной в пункте 2.1 инструкции по применению набора, определяли концентрацию IFN-γ в пг/мл. Было получено следующее значение: IFN-γ=0 пг/мл.

Поскольку сплошной налет на небных миндалинах отсутствовал и значение IFN-γ=0<3,0 (пг/мл), больному Т. была диагностирована тяжелая форма инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus viridans. Время диагностики составило примерно 2 часа.

Больному Т. было назначено соответствующее лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями согласно заявляемому способу.

Пример 6. Больной М., 5 лет, поступил в детское инфекционное отделение МБУЗ «ГБ №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону» на 2-й день болезни с жалобами на повышение температуры тела до 39,5°C, выраженную боль при глотании, затрудненное носовое дыхание, «храп» во сне, вялость, снижение аппетита.

Объективно при поступлении: общее состояние ребенка тяжелое. Температура тела - 39,1°C. Ребенок капризен. Отмечается выраженное затруднение носового дыхания. Кожные покровы бледные без патологических элементов, лицо одутловатое. Подчелюстные лимфоузлы - болезненные до 2,0×1,5 см, заднешейные - безболезненные до 2,0×1,0 см в виде «пакетов», не спаянные между собой и окружающими тканями, кожа над ними не изменена. Слизистая ротоглотки гиперемирована, небные миндалины гипертрофированы, покрыты сплошным налетом, которые легко снимались шпателем без кровоточивости. По задней стенке глотки стекает гнойное отделяемое. В легких пуэрильное дыхание, хрипов нет. Тоны сердца громкие, ритмичные. Живот мягкий, безболезненный. Печень - на 3 см ниже реберной дуги, селезенка - на 2 см. Стул, диурез в норме.

В крови больного выявлены маркеры активной ВЭБ инфекции: anti-EBV-VCA IgM, anti-EBV-EA IgG, ДНК ВЭБ, в мазке из ротоглотки обнаружен Streptococcus pyogenes 10⁸ КОЕ, что в совокупности с клинической картиной свидетельствовало о наличии инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes.

С целью определения формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes, было проведено исследование согласно заявляемому способу.

Выполнили обследование больного М. При обследовании визуально в ротоглотке определяли наличие или отсутствие сплошных налетов на небных миндалинах. Обследование показало наличие сплошного налета на небных миндалинах.

Утром натощак выполнили сбор слюны больного М. в количестве 2,0 мл в пробирки типа «эппендорф». Перед сбором слюны предварительно ротовую полость ребенка полоскали 0,9% раствором натрия хлорида. Исследовали слюну. В слюне, с помощью набора реагентов А-8752 для иммуноферментного определения концентрации интерферона гамма в биологических жидкостях человека «гамма-ИНТЕРФЕРОН-ИФА-БЕСТ» производства ЗАО «Вектор-бест», г. Новосибирск, по методике, описанной в пункте 2.1 инструкции по применению набора, определяли концентрацию IFN-γ в пг/мл. Было получено следующее значение: IFN-γ=3,4 пг/мл.

Поскольку было зафиксировано наличие сплошного налета на небных миндалинах и значение IFN-γ 3,4<7,5=(пг/мл), больному М. была диагностирована тяжелая форма инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и Streptococcus pyogenes. Время диагностики составило примерно 2 часа.

Больному М. было назначено соответствующее лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями согласно заявляемому способу.

В 6-м детском инфекционном отделении МБУЗ «ГБ №1 им. Н.А. Семашко г. Ростова-на-Дону» нами для диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза с помощью предлагаемого способа было обследовано 138 детей в возрасте от 3 до 15 лет больных инфекционным мононуклеозом, вызванным ВЭБ и бактериями: ВЭБ и Streptococcus pyogenes - 58 чел. (42%), ВЭБ и Streptococcus viridans - 48 чел. (34,8%), ВЭБ и Staphylococcus aureus - 17 чел. (12,3%), ВЭБ и Streptococcus epidermidis - 8 чел. (5,8%), ВЭБ и Candida albicans - 6 чел. (4,4%), ВЭБ и Streptococcus pneumonia - 1 чел. (0,7%). По результатам исследования 112 пациентам была диагностирована среднетяжелая форма, 26 - тяжелая форма инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями.

Всем 138 больным детям в зависимости от формы тяжести заболевания было назначено соответствующее лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагностирования формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями согласно заявляемому способу.

Таким образом, предлагаемый способ диагностики формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями, неинвазивен, достоверен, позволяет диагностировать формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями, а также практически вдвое сокращает время диагностики.

Изобретение относится к области медицины, а именно к педиатрии, детским инфекционным болезням, и предназначено для диагностики формы тяжести вызванного вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей. Выполняют обследование детей, больных инфекционным мононуклеозом, вызванным ВЭБ и бактериями, при котором определяют наличие или отсутствие сплошного налета на небных миндалинах ребенка. Исследуют его слюну, в которой определяют концентрацию IFN-γ, пг/мл. При наличии сплошного налета и IFN-γ<7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета и значении IFN-γ<3,0 пг/мл диагностируют тяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. При наличии сплошного налета и IFN-γ≥7,5 пг/мл или при отсутствии сплошного налета и IFN-γ≥3,0 пг/мл диагностируют среднетяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. Использование изобретения позволяет исключить инвазивность и сократить время диагностики, а также обеспечивает возможность диагностировать формы тяжести инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями. 6 пр.

Способ диагностики формы тяжести вызванного вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) и бактериями инфекционного мононуклеоза у детей, включающий обследование ребенка и исследование его биологической жидкости, отличающийся тем, что при обследовании определяют наличие или отсутствие сплошного налета на небных миндалинах ребенка, также исследуют его слюну, в которой определяют концентрацию IFN-γ, пг/мл; при наличии сплошного налета и IFN-γ < 7,5 или отсутствии сплошного налета и IFN-γ < 3,0 диагностируют тяжелую форму, при наличии сплошного налета и IFN-γ ≥ 7,5 или отсутствии сплошного налета и IFN-γ ≥ 3,0 диагностируют среднетяжелую форму инфекционного мононуклеоза, вызванного ВЭБ и бактериями.