Показать метаданные Скрыть метаданные

(19)

(11)

2 640 197

(13)

(51)

МПК

C07C319/20(2006-01-01)

C07C319/28(2006-01-01)

(21) (22)

Заявка

2016114803, 2014-10-28

(24)

Дата начала отсчета патента

2014-10-28

(22)

дата подачи заявки

2014-10-28

(45)

опубликовано

2017-12-27

(72)

авторы

Даггер Роберт УэйнЛетендр Лео ДжозефПател Вималкумар БабубхайПрашад Амарнаут ШастриеЧзан Чуньчунь

(73)

патентообладатели

Пфайзер Инк.

(56)

Документы, цитированные в отчете о поиске

WO 2007098124 A3, 30.08.2007WO 2003092623 A2, 13.11.2003.

Промежуточные соединения и способы синтеза производных калихеамицина Российский патент 2017 года по МПК C07C319/20 C07C319/28

Описание патента на изобретение RU2640197C1

Область изобретения

Изобретение относится к синтезу производных калихеамицина. Изобретение также относится к промежуточным соединениям и линкерным молекулам, используемых для получения производных калихеамицина и для конъюгирования калихеамицина с биомакромолекулой, такой как моноклональное антитело.

Предшествующий уровень техники

MYLOTARG® (гемтузумаб озогамицин) состоит из моноклонального антитела к CD33, которое связано с калихеамицином посредством гидролизуемого кислотой линкера. Этот коммерческий продукт поступил на рынок как первый антитело-химиотерапевтический агент направленного воздействия и был одобрен для лечения острого миелоидного лейкоза (AML) у пожилых пациентов. Инотузумаб озогамицин представляет собой антитело к CD22, связанное с калихеамицином, и в настоящее время проходит клинические испытания для лечения некоторых типов рака.

Семейство сильнодействующих антибактериальных и

противоопухолевых агентов, известное в совокупности как калихеамицины, или комплекс LL-E33288, раскрыто в патенте США №4970198. В патенте США №5053394 также раскрыты метил-трисульфидные антибактериальные и противоопухолевые агенты. Эти соединения, раскрытые в патенте США №4970198 и в патенте США №5053394, содержат метилтрисульфидную группу, которая может взаимодействовать с подходящими тиолами с образованием дисульфидов с одновременным введением функциональной группы, такой как гидразид или подобный нуклеофил. Примеры этой реакции с калихеамицинами приведены в патенте США №5053394. Патент США №577070 относится к способу получения направленно доставляемых форм дисульфидных соединений комплекса LL-E33288. Линкер, 4-(4-ацетил-фенокси)бутановую кислоту, подвергают реакции конденсации с диметилгидразидом N-ацетил-гамма-калихеамицина с образованием карбоновая кислота-гидразона, который дополнительно обрабатывают N-гидроксисукцинимидом с получением сложного OSu эфира (N-сукцинимидилокси), который готов для конъюгирования с выбранной биомакромолекулой.

В патенте США №8273862 раскрыт синтетический способ создания линкерных промежуточных молекул (именуемых здесь "трилинкер-активированные сложные эфиры" или "трифункциональные линкерные промежуточные соединения"). Эти линкерные промежуточные соединения могут быть конъюгированы с калихеамицинами для получения производных калихеамицинов, которые затем могут быть дополнительно конъюгированы с биомакромолекулами, такими как моноклональные антитела. На стадиях, приводящих к получению линкерного промежуточного соединения, в способе синтеза, описанном в патенте США №8273862, в качестве промежуточного соединения используется меркаптосоединение ("соединение 2'' в указанном патенте), например гидразид 3-метил-3-меркаптобутановой кислоты.

В WO 2008/147765 раскрыт способ синтеза меркаптосодержащих промежуточных соединений, таких как гидразид 3-метил-3-меркаптобутановой кислоты, которые полезны в получении линкерных промежуточных соединений и производных калихеамицина, как описано в предыдущем абзаце. WO 2008/147765 альтернативно относится к гидразиду 3-метил-3-меркаптобутановой кислоты в качестве "DMH линкера". В WO 2008/147765 отмечено, что гидразид 3-метил-3-меркаптобутановой кислоты является предпочтительным меркаптосодержащим N-ацилгидразином в целях связывания калихеамицина с моноклональными антителами с получением, к примеру, гемтузумаба озогамицина или инотузумаба озогамицина.

В WO 2008/147765 гидразид 3-метил-3-меркаптобутановой кислоты получают путем удаления бензильной защитной группы с соединения гидразид пара-метоксибензилтиоэфира в кислотных условиях. Для того чтобы получить гидразид пара-метоксибензилтиоэфира, согласно WO 2008/137765 сначала подвергают взаимодействию пара-метоксибензилтиоэфирную кислоту с оксалилхлоридом в метиленхлориде с образованием хлорангидрида пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты. Хлорангидрид пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты затем добавляют в смесь безводного гидразина и метиленхлорида с получением гидразид пара-метоксибензилтиоэфира. Однако, как описано в WO 2008/147765, два реагента, пара-метилоксибензилтиоэфирная кислота и хлорангидрид пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты, сами вместе образуют нежелательный побочный продукт, гидразид бис-метоксибензилтиоэфира, что приводит к снижению выхода и качества. Кроме того, как описано в WO 2008/147765, вследствие реакционной и нестабильной природы молекулы хлорангидрида пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты необходимо использовать безводный гидразин и низкие температуры, например -70°С.

В другом аспекте получение производных калихеамицина включает в себя химическое связывание калихеамицина с линкерной молекулой. Для того чтобы конъюгировать калихеамицин с линкерным промежуточным соединением, в патенте США №8273862 проводят конечную реакцию между калихеамицином и "трилинкер-активированным сложным эфиром" (или "трифункциональным линкерным промежуточным соединением"). Структурно калихеамицины содержат трисульфидную группировку, как раскрыто выше, которую используют в их дериватизации, и химизм этой реакции между трисульфидной группировкой калихеамицина и трилинкер-активированным сложным эфиром важен для достижения хороших выходов и чистоты. Ранее используемые реакции обмена серы для производных калихеамицина давали сложные реакционные смеси, многочисленные побочные продукты и низкие выходы.

Наконец, производное калихеамицина должно быть очищено после его образования. Способ, описанный в патенте США №8273862, включает в себя очистку производного калихеамицина, включающую стадию нормально-фазной хроматографии. На стадии нормально-фазной хроматографии в процессе очистки, описанном в патенте США №8273862, используют метиленхлорид в качестве растворителя, и, как сказано выше, считается, что воздействие метил енхлорида свыше различных минимальных уровней наносит потенциальный вред здоровью. Поэтому при использовании нормально-фазной хроматографии с использованием метиленхлорида должны быть предприняты меры по ограничению воздействия метиленхлорида.

Краткое изложение сущности изобретения

Согласно настоящему изобретению предложены новые промежуточные соединения и способы синтеза и очистки линкерных промежуточных соединений, которые полезны для конъюгирования калихеамициновых противоопухолевых антибиотиков с биомакромолекулами, такими как моноклональные антитела. Согласно настоящему изобретению также предложены новые способы синтеза производного калихеамицина, которое содержит калихеамицин, ковалентно связанный с линкером. Производное калихеамицина, полученное таким способом, может быть конъюгировано с биомакромолекулой, такой как моноклональное антитело, с получением конъюгата антитело-лекарственное средство. Промежуточные соединения и способы синтеза по настоящему изобретению могут быть использованы, например, для получения производного калихеамицина для изготовления гемтузумаба озогамицина (MYLOTARG®) или инотузумаба озогамицина.

Согласно заявленному изобретению предложены усовершенствования способов синтеза и очистки производных калихеамицина предшествующего уровня техники, которые решают проблемы, ассоциированные с этими предшествующими способами.

Как указано выше, согласно WO 2008/137765 сначала промежуточное соединение пара-метоксибензилтиоэфирную кислоту подвергают взаимодействию с оксалилхлоридом в метиленхлориде с образованием промежуточного хлорангидрида пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты, используемого для синтеза производного калихеамицина. В WO 2008/137765 промежуточный хлорангидрид пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты затем добавляют в смесь безводного гидразина и метиленхлорида для получения промежуточного гидразида пара-метоксибензилтиоэфира. Однако, как описано в WO 2008/147765, эти два реагента, пара-метилоксибензилтиоэфирная кислота и хлорангидрид пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты сами вместе образуют нежелательный побочный продукт, гидразид бис-метоксибензилтиоэфира, что приводит к снижению выхода и качества. Настоящее изобретение всецело решает эту проблему образования побочного продукта гидразида бис-метоксибензилтиоэфира за счет устранения полностью использования хлорангидрида пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты в качестве промежуточного соединения. За счет устранения полностью использования хлорангидридного промежуточного хлорангидрида пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты заявленное изобретение теперь дает возможность также использовать гидратированные формы гидразина, которые не требуют таких же специальных процедур обработки, каких требует безводный гидразин, и новый способ также исключает обременительное требование низкой температуры. Наконец, поскольку хлорангидрид пара-метоксибензилтиоэфирной кислоты обойден в настоящем изобретении, меры предосторожности в отношении метиленхлорида и безопасности, используемые в связи с этим, нет необходимости использовать.

Настоящее изобретение также повышает выход реакции между калихеамицином и линкерным промежуточным соединением по сравнению со способами предшествующего уровня техники, такими как способ, описанный в патенте США №8273862. Настоящее изобретение повышает выход получаемого производного калихеамицина за счет включения в реакцию карбодиимида.

Было также установлено, как описано в данном документе, что может быть осуществлен новый способ очистки производных калихеамицина, включающий использование обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ), несмотря на присутствие двух водолабильных групп (гидразона и эфира N-гидроксисукцинимида) на производном калихеамицина. Данное изобретение решает упомянутые выше проблемы, связанные с очисткой производных калихеамицина с использованием нормально-фазной хроматографии, например с использованием метиленхлорида, как описано в патенте США №8273862.

Согласно настоящему изобретению предложены соединения формулы I

где R¹² выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из водорода и С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью, где каждый алкил, указанный для R⁸ и R⁹, независимо возможно замещен -NH₂, -NHR¹¹, -NR¹¹R¹³, -OR¹¹, -ОН или -SR¹¹, где каждый R¹¹ и каждый R¹³ независимо выбран из С₁-С₅алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает целое число 0 или 1;

G представляет собой кислород или серу;

Z¹ представляет собой Н или С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, возможно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴, или Ar представляет собой 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- или 2,7-нафтилиден, возможно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из C₁-C₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴;

где каждый R¹⁴ независимо выбран из (С₁-С₅)алкила, и каждый R¹⁴независимо возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(С₁-С₄)алкила и группы -S(С₁-С₄)алкил;

каждый n означает целое число, независимо выбранное из 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью или (С₂-С₆)алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью.

Соединения формулы I полезны в качестве промежуточных соединений для синтеза линкерных промежуточных соединений и производных калихеамицина, содержащих такие линкерные промежуточные соединения, и эти производные калихеамицина, в свою очередь, могут быть конъюгированы с биомакромолекулами, такими как моноклональные антитела.

В одном воплощении изобретения каждый R¹⁰ в соединении формулы I представляет собой водород. В еще одном воплощении каждый R¹⁰ в соединении формулы I представляет собой водород, и R¹² представляет собой метил.

В другом воплощении изобретения соединение формулы I представляет собой соединение, имеющее структуру

В другом воплощении изобретения R⁸ и R⁹ в соединении формулы I оба представляют собой метил, r означает О, G представляет собой кислород, Z¹представляет собой метил, Ar представляет собой 1,4-фенилен, W представляет собой -О-, и Y представляет собой -(СН₂)₃-.

В другом воплощении изобретения R⁸ и R⁹ в соединении формулы I оба представляют собой метил.

В другом воплощении изобретения r в соединении формулы I означает 0. В другом воплощении изобретения, r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой кислород. В другом воплощении изобретения r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой серу.

Согласно настоящему изобретению предложен также способ синтеза вышеупомянутых соединений формулы I, которые, как указано, полезны в качестве промежуточных соединений для синтеза линкерных промежуточных соединений и производных калихеамицина, содержащих указанные группы линкерных промежуточных соединений. В одном воплощении настоящего изобретения предложен способ синтеза соединения формулы I

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

r означает целое число 0 или 1;

G представляет собой кислород или серу;

Z¹ представляет собой Н или С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, возможно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴, или Ar представляет собой 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- или 2,7-нафтилиден, возможно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из C₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴;

где каждый R¹⁴ независимо выбран из (С₁-С₆алкила, и каждый R¹⁴независимо возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(C₁-С₄)алкила и группы -S(С₁-С₄)алкил;

каждый n означает целое число, независимо выбранное из 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

W выбран из -О-, -S-, -C(=O)NH-, -NHC(=O)- и -NR¹⁵-, где R¹⁵представляет собой (С₁-С₅)алкил, и R¹⁵ возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(С₁-С₄)алкила и группы -S(C₁-С₄)алкил; и Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью или (С₂-С₆)алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью; включающий взаимодействие соединения формулы II

где R¹⁰, R¹², R⁸, R⁹, r и G такие, как определено выше, с соединением формулы III

где Z¹, Ar, W и Y такие, как определено выше. В одном воплощении способа синтеза соединения формулы I r означает 0, G представляет собой кислород, Z¹ представляет собой метил, Ar представляет собой 1,4-фенилен, W представляет собой -О-, и Y представляет собой -(СН₂)₃-. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы I R⁸ и R⁹ представляют собой метил. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы I каждый R¹⁰ представляет собой водород. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы I каждый R¹⁰ представляет собой водород, и R¹²представляет собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы I R⁸ и R⁹ в соединении формулы II оба представляют собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы I r в соединении формулы II означает 0. В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы I r в соединении формулы II означает 0, и G представляет собой кислород. В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы I r в соединении формулы II означает 0, и G представляет собой серу.

Согласно настоящему изобретению предложен также способ синтеза соединения формулы II

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из водорода и C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью, где каждый алкил, указанный для R⁸ и R⁹, независимо возможно замещен -NH₂, -NHR¹¹, -NR¹¹R¹³, -OR¹¹, -ОН или -SR¹¹, где каждый R¹¹ и каждый R¹³ независимо выбраны из С₁-С₅алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает целое число, выбранное из 0 и 1; и

G представляет собой кислород или серу; включающий обработку соединения формулы VII

где R¹⁶ представляет собой -С(=O)ОН или -C(=V)SH, где V представляет собой кислород или серу, или R¹⁶ представляет собой -NH2;

азольным активирующим агентом формулы IX

где V' представляет собой кислород или серу; и

где Е представляет собой

; ; ;

; . или ;

где m означает целое число 0,1,2 или 3; q означает целое число 0, 1 или 2; и p означает целое число 0, 1, 2, 3 или 4; и где каждый R¹⁷, присоединенный к Е, независимо выбран из (С₁-С₆)алкильных групп с прямой и разветвленной цепью;

в органическом растворителе с образованием соединения формулы VIII

где когда R¹⁶ представляет собой -С(=O)ОН, тогда r означает 0, и G представляет собой кислород; когда R¹⁶ представляет собой -C(=V)SH, тогда r означает 0, и G представляет собой V; и когда R¹⁶ представляет собой -NH₂, тогда r означает 1, и G представляет собой V';

с последующим объединением соединения формулы VIII с гидразином с получением в результате соединения формулы II. Соединения формулы II полезны в качестве промежуточных соединений для синтеза линкерных промежуточных соединений и производных калихеамицина, содержащих указанные группы линкерных промежуточных соединений, и эти производные калихеамицина, в свою очередь, могут быть конъюгированы с биомакромолекулой, такой как моноклональное антитело.

Азольный активирующий агент представляет собой любое азол-содержащее соединение данной формулы IX, которое при взаимодействии с соединением формулы VII обеспечивает образование соединения формулы VIII, где Е такой, как описано выше. Примеры азольных активирующих агентов, которые могут быть использованы в заявленном изобретении, включают карбонилдиимидазол, тиокарбонилдиимидазол, карбонил-бис-пиразол, где каждый пиразол возможно замещен одной-тремя (С₁-С₆)алкильными группами, карбонил-бис-1,2,3-триазол, карбонил-бис-бензотриазол и карбонил-бис-1,2,4-триазол. Предпочтительно, азольный активирующий агент представляет собой карбонилдиимидазол.

Соединение формулы VIII возможно выделяют перед объединением с гидразином. В одном воплощении соединение формулы VIII не выделяют перед объединением с гидразином. В еще одном воплощении соединение формулы VIII выделяют перед объединением с гидразином.

Предпочтительно, R¹⁶ представляет собой -С(=O)ОН, и азольный активирующий агент представляет собой карбонилдиимидазол.

В одном воплощении настоящего способа получения соединения формулы II r означает 0, и G представляет собой кислород в соединении формулы II. В еще одном воплощении настоящего способа получения соединения формулы II r означает 0, и G представляет собой кислород в соединении формулы II, и R¹⁶ в соединении формулы VII представляет собой -С(=O)ОН. В дополнительном воплощении способа получения соединения формулы II r означает 0, и G представляет собой кислород в соединении формулы II, R¹⁶ в соединении формулы VII представляет собой -С(=O)ОН, и азольный активирующий агент представляет собой карбонилдиимидазол.

В еще одном воплощении настоящего способа получения соединения формулы II соединение формулы VIII имеет структуру:

В дополнительном воплощении способа получения соединения формулы II соединение формулы VIII имеет структуру:

и азольный активирующий агент представляет собой карбонилдиимидазол.

В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы II R⁸ и R⁹ в соединении формулы VII оба представляют собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы II соединение формулы VII содержит R¹⁶, представляющий собой -C(=V)SH, и V, представляющий собой кислород или серу. Следует иметь в виду, что когда соединение формулы VII содержит R¹⁶, представляющий собой -C(=V)SH, и V, представляющий собой кислород, тогда такое соединение формулы VII может существовать в таутомерной форме, которая представляет собой то же самое соединение формулы VII, но где R¹⁶ представляет собой -(C=S)OH. Когда соединение формулы VII содержит R¹⁶, представляющий собой -C(=O)SH, и его таутомер, где R¹⁶ представляет собой -C(=S)OH, тогда полученный продукт соединение формулы II содержит G, представляющий собой кислород.

В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы II соединение формулы VII содержит R¹⁶, представляющий собой -NH₂. Когда соединение формулы VII в способе синтеза соединения формулы II содержит R¹⁶, представляющий собой -NH₂, тогда r в соединении формулы II, полученном этим способом, означает 1. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы II способ включает использование соединения формулы VII, где R¹⁶ представляет собой -NH₂, и соединения формулы IX, где V представляет собой кислород, и соединение формулы II, полученное указанным способом, содержит r, означающий 1, и G, представляющий собой V (т.е. кислород). В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы II способ включает использование соединения формулы VII, где R¹⁶представляет собой -NH₂, и соединения формулы IX, где V' представляет собой серу, и соединение формулы II, полученное указанным способом, содержит r, означающий 1, и G, представляющий собой V' (т.е. серу).

В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы II способ включает использованием азольного активирующего агента формулы IX, где V' представляет собой кислород. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы II способ включает использование азольного активирующего агента формулы IX, где V' представляет собой серу.

В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы II гидразин представляет собой безводный гидразин. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы II гидразин представляет собой моногидрат гидразина. В еще одном воплощении гидразин представляет собой водный раствор гидразина. В еще одном воплощении гидразин представляет собой тетрагидрофурановый раствор гидразина.

Как раскрыто выше, соединения формулы I полезны в качестве промежуточных соединений для синтеза линкерных промежуточных соединений и производных калихеамицина, содержащих указанные группы линкерных промежуточных соединений. Соответственно, согласно заявленному изобретению предложен способ синтеза соединений формулы IV, которые также полезны в качестве промежуточных соединений для синтеза линкерных промежуточных соединений и производных калихеамицина, содержащих указанные группы линкерных промежуточных соединений. В одном воплощении заявленного изобретения предложен способ синтеза соединения формулы IV

где каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из водорода и С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью, где каждый алкил, указанный для R⁸ и R⁹, независимо возможно замещен -NH₂, -NHR¹¹, -NR¹¹R¹³, -OR¹¹, -ОН или -SR¹¹, где каждый R¹¹ и каждый R¹³ независимо выбран из С₁-С₅алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает целое число, выбранное из 0 и 1;

G представляет собой кислород или серу;

Z¹ представляет собой Н или С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, возможно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴, или Ar представляет собой 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- или 2,7-нафтилиден, возможно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴;

каждый n означает целое число, независимо выбранное из 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

W выбран из -О-, -S-, -C(=O)NH-, -NHC(=O)- и -NR¹⁵-, где R¹⁵представляет собой (С₁-С₅)алкил, и R¹⁵ возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(С₁-С₄)алкила и группы -S(С₁-С₄)алкил; и Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью или (С₂-С₆)алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью, включающий обработку соединения формулы I

где R¹² выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

и R⁸, R⁹, r, G, Z¹, Ar, W и Y такие, как определено; с сильной кислотой с образованием смеси, содержащей соединение формулы IV. Сильная кислота, используемая в способе синтеза соединения формулы IV, может быть определена специалистом в данной области техники, так как она является любой кислотой, которая будет удалять замещенный фенил-метиленовую группу с атома серы с получением в результате соединения формулы IV. В одном воплощении сильная кислота, используемая в способе по изобретению для синтеза соединения формулы IV, выбрана из трифторуксусной кислоты, серной кислоты, трифторметансульфоновой кислоты, HCl, HBr, HI. В одном воплощении способа синтеза соединения формулы IV R⁸ и R⁹ представляют собой метил, r означает 0, G представляет собой кислород, Z¹ представляет собой метил, Аr представляет собой 1,4-фенилен, W представляет собой -О-, и Y представляет собой -(СН₂)₃-. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы IV каждый R¹⁰ представляет собой водород. В еще одном воплощении способа синтеза соединения формулы IV каждый R¹⁰ представляет собой водород, и R¹² представляет собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы IV R⁸ и R⁹ в соединении формулы I оба представляют собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы IV r в соединении формулы I означает 0. В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы IV r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой кислород. В другом воплощении изобретения для синтеза соединения формулы IV r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой серу.

Согласно изобретению предложен также способ синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V с использованием промежуточных соединений формулы I и промежуточных соединений формулы IV. В одном воплощении изобретения предложен способ синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V

где каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из водорода и C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью, где каждый алкил, указанный для R⁸ и R⁹, независимо возможно замещен -NH₂, -NHR¹¹¹, -NR¹¹R¹³, -OR¹¹, -ОН или -SR¹¹, где каждый R¹¹ и каждый R¹³ независимо выбран из С₁-С₅алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает целое число, выбранное из 0 и 1;

G представляет собой кислород или серу;

Z¹ представляет собой Н или С₁-C₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, возможно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из C₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴, или Ar представляет собой 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- или 2,7-нафтилиден, возможно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из C₁-C₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴;

где каждый R¹⁴ независимо выбран из (С₁-С₅)алкила, и каждый R¹⁴независимо возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(C₁-С₄)алкила и группы -S(С₁-С₄)алкил;

каждый n означает целое число, независимо выбранное из 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью или (С₂-С₆)алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью; и

Z выбран из группы, состоящей из

, , , ,

и ;

включающий

а) обработку соединения формулы I

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью, и каждый R¹⁰независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²,

сильной кислотой с образованием смеси, содержащей соединение формулы IV

; и

б) взаимодействие соединения формулы IV с соединением ZH;

тем самым синтезируя линкерное промежуточное соединение формулы V. В одном воплощении способа синтеза линкерных промежуточных соединений формулы V сильная кислота представляет собой трифторуксусную кислоту или серную кислоту.

В другом воплощении изобретения для синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V R⁸ и R⁹ в соединении формулы I оба представляют собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V r в соединении формулы I означает 0. В другом воплощении изобретения для синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой кислород. В другом воплощении изобретения для синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой серу.

В еще одном воплощении способа синтеза линкерных промежуточных соединений формулы V ZH представляет собой

В еще одном воплощении способа синтеза линкерных промежуточных соединений формулы V линкерное промежуточное соединение представляет собой соединение, имеющее структуру

В еще одном воплощении способа синтеза линкерных промежуточных соединений формулы V соединение формулы I, используемое в способе, получают путем взаимодействия соединения формулы II

;

с соединением формулы III

Как раскрыто, линкерные промежуточные соединения полезны для получения производных калихеамицина, содержащих указанные группы линкерных промежуточных соединений. Производные калихеамицина, в свою очередь, могут быть крнъюгированы с биомакромолекулами, такими как моноклональные антитела. Соответственно, соединения формулы I и способы синтеза, описанные в данном документе, полезны для получения таких производных калихеамицина. Таким образом, согласно настоящему изобретению предложен способ синтеза производного калихеамицина формулы VI

где J представляет собой

;

R₁ представляет собой или СН₃;

R₂ представляет собой или Н;

R₃ представляет собой или Н;

R₄ представляет собой или Н;

R⁵ представляет собой -СН₃, -С₂Н₅ или -СН(СН₃)₂;

X представляет собой атом йода или брома;

R^5' представляет собой водород или группу RCO, где R представляет собой водород, разветвленный или неразветвленный алкил из 1-10 атомов углерода, алкилен из 2-10 атомов углерода, арил из 6-11 атомов углерода, группу (С₆-С₁₁)арил-алкил(С₁-С₅), или гетероарил или группу гетероарил-алкил(С₁-С₅), где гетероарил определен как 2- или 3-фурил, 2- или 3-тиенил, 2-или 3-(N-метилпирролил), 2-, 3- или 4-пиридинил, 2-, 4- или 5-(N-метилимидазолил), 2-, 4- или 5-оксазолил, 2-, 3-, 5- или 6-пиримидинил, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хинолил или 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-изохинолил, и все арильные и гетероарильные группы возможно замещены одной или более группами гидрокси, амино, карбокси, галогенами, нитро, (С₁-С₃)алкокси или тиоалкокси из 1-5 атомов углерода;

каждый из R₆ и R₇ независимо выбран из Н и

;

r означает целое число 0 или 1;

G представляет собой кислород или серу;

Z¹ представляет собой Н или С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, возможно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из C₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴, или Ar представляет собой 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- или 2,7-нафтилиден, возможно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из C₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴;

где каждый R¹⁴ независимо выбран из (С₁-С₅)алкила, и каждый R¹⁴ независимо возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(С₁-С₄)алкила и группы -S(С₁-С₄)алкил;

каждый n означает целое число, независимо выбранное из 0, 1, 2, 3, 4, и 5;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью или (С₁-C₆)алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью; и

Z выбран из группы, состоящей из

, , , ,

и ;

включающий

а) обработку соединения формулы I

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью,

и каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

сильной кислотой с образованием смеси, содержащей соединение формулы IV

;

б) взаимодействие соединения формулы IV с соединением ZH с образованием линкерного промежуточного соединения формулы V

в) взаимодействие линкерного промежуточного соединения формулы V, полученного на стадии (б), с метилтрисульфидным соединением СН₃-S-S-S-J; тем самым синтезируя производное калихеамицина формулы VI. В одном воплощении способа синтеза производного калихеамицина формулы VI сильная кислота представляет собой серную кислоту или трифторуксусную кислоту. В еще одном воплощении способа синтеза производного калихеамицина формулы VI R⁸ и R⁹ представляют собой метил, r означает 0, G представляет собой кислород, Z¹ представляет собой метил, Ar представляет собой 1,4-фенилен, W представляет собой -О-, и Y представляет собой -(СН₂)₃-. В еще одном воплощении способа синтеза производного калихеамицина формулы VI каждый R¹⁰ представляет собой водород. В еще одном воплощении способа синтеза производного калихеамицина формулы VI каждый R¹⁰ представляет собой водород, и R¹² представляет собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза производного калихеамицина формулы VI R⁸ и R⁹ в соединении формулы I оба представляют собой метил.

В другом воплощении изобретения для синтеза производного калихеамицина формулы VI r в соединении формулы I означает 0. В другом воплощении изобретения для синтеза производного калихеамицина формулы VI r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой кислород. В другом воплощении изобретения для синтеза производного калихеамицина формулы VI r в соединении формулы I означает 0, и G представляет собой серу.

В еще одном воплощении способа синтеза производного калихеамицина формулы VI соединение формулы I получают путем взаимодействия соединения формулы II

;

с соединением формулы III

В еще одном воплощении способа синтеза производного калихеамицина формулы VI один из R₆ и R₇ представляет собой водород, а другой из R₆ и R₇представляет собой

В одном воплощении промежуточных соединений формулы I и способов синтеза по настоящему изобретению Z¹ представляет собой метил. В еще одном воплощении промежуточных соединений и способов синтеза по настоящему изобретению r означает 0, и G представляет собой кислород. В еще одном воплощении промежуточных соединений и способов синтеза по настоящему изобретению Z¹ представляет собой метил, r означает 0, и G представляет собой кислород.

В еще одном воплощении способов синтеза по настоящему изобретению J представляет собой озогамициновую группировку.

В еще одном воплощении способов синтеза по настоящему изобретению производное калихеамицина формулы VI имеет структуру

Производные калихеамицина формулы VI, синтезированные способами по настоящему изобретению, могут быть конъюгированы с биомакромолекулой, например с моноклональным антителом. Производные калихеамицина формулы VI, синтезированные способами по настоящему изобретению, могут быть конъюгированы, например, с моноклональным антителом к CD22 инотузумабом (антитело, специфически связывающееся с антигеном CD22, экспрессированным на поверхности некоторых раковых клеток) или с антителом к CD33 гемтузумабом (антитело, специфически направленно воздействующее на анти-CD33 антиген, экспрессированный на поверхности некоторых раковых клеток). Производные калихеамицина формулы VI, синтезированные способами по настоящему изобретению, когда они конъюгированы с моноклональным антителом, в одном воплощении имеют структуру:

где Ab представляет собой моноклональное антитело. Примеры моноклонального антитела Ab включают, без ограничения, гемтузумаб и инотузумаб.

Термины, использованные в этом описании изобретения, обычно имеют их общепринятые в данной области техники значения, в контексте изобретения и в специфическом контексте, где использован каждый термин.

Термин "производное калихеамицина", используемый в данном документе, если не указано иное, относится к производному соединения формулы СН₃-S-S-S-J, где J такой, как определено в данном документе, которое содержит калихеамициновую группировку -S-S-J, связанную с группой линкерного промежуточного соединения:

где R⁸, R⁹, r, G, Z¹, Ar, W, Y и Z такие, как определено в данном документе. Производное калихеамицина может быть дополнительно конъюгировано (т.е. ковалентно связано) по концу, содержащему группировку -C(=O)Z, с биомакромолекулой, такой как моноклональное антитело. Примеры соединений формулы CH₃-S-S-S-J приведены, например, в патенте США №4970198 и в патенте США №5053394, которые оба во всей их полноте включены в данное описание посредством ссылки. Примером соединения СН₃-S-S-S-J является калихеамицин озогамицин.

Термин "линкерное промежуточное соединение", используемый в данном документе, если не указано иное, относится к тем выделенным молекулам формулы V, описанным в данном документе, которые способны ковалентно связываться по одному их концу с молекулой формулы СН₃-S-S-S-J, и которые имеют функциональную группу на другом конце (конец -C(=O)Z), с которым может быть ковалентно связана биомакромолекула, такая как моноклональное антитело. Выделенные линкерные промежуточные соединения полезны в качестве компонентов для получения производных калихеамицина и калихеамицина, связанного с биомакромолекулой, такой как моноклональное антитело.

Если не указано иное, термин "алкил", один или как часть другого термина, относится к прямоцепочечному или разветвленному, насыщенному или ненасыщенному углеводороду, имеющему указанное количество атомов углерода (например, "С₁-С₈алкил" относится к алкильной группе, имеющей от 1 до 8 атомов углерода). Когда количество атомов углерода не указано, тогда алкильная группа имеет от 1 до 8 атомов углерода (если она является ненасыщенной, в этом случае алкильная группа будет иметь от 2 до 8 атомов углерода). Репрезентативные C₁-С₈алкилы с прямой цепью включают, без ограничения, метил, этил, н-пропил, н-бутил, н-пентил, н-гексил, н-гептил и н-октил, а разветвленные С₁-С₈алкилы включают, без ограничения, -изопропил, -втор-бутил, -изобутил, -трет-бутил, -изопентил и -2-метилбутил; ненасыщенные С₂-С₈алкилы включают, без ограничения, винил, аллил, 1-бутенил, 2-бутенил, изобутиленил, 1-пентенил, 2-пентенил, 3-метил-1-бутенил, 2-метил-2-бутенил, 2,3-диметил-2-бутенил, 1-гексил, 2-гексил, 3-гексил, ацетиленил, пропинил, 1-бутинил, 2-бутинил, 1-пентинил, 2-пентенил и 3-метил-1-бутинил.

Если не указано иное, "алкилен", один или как часть другого термина, относится к насыщенному разветвленному или прямоцепочечному или циклическому углеводородному радикалу с указанным количеством атомов углерода, имеющему центры одновалентного радикала, получаемого в результате удаления двух атомов водорода с одного и того же или двух разных атомов углерода родительского алкана. В одном воплощении "алкилен" относится к насыщенному разветвленному или прямоцепочечному алкиленовому радикалу с указанным количеством атомов углерода, имеющему два центра одновалентного радикала. Типичные алкиленовые радикалы включают, без ограничения: метилен (-СН₂-), 1,2-этилен -СН₂СН₂-), 1,3-пропилен (-СН₂СН₂СН₂-), 1,4-бутилен (-СН₂СН₂СН₂СН₂-) и тому подобное. Термин "алкенилен" относится к разветвленному, или прямоцепочечному, или циклическому углеводородному радикалу с указанным количеством атомов углерода, но имеющему по меньшей мере два атома углерода, связанных двойной связью, где этот радикал имеет два центра одновалентного радикала, получаемого в результате удаления двух атомов водорода с двух разных атомов углерода родительского алкана. В одном воплощении "алкилен" относится к разветвленному или прямоцепочечному радикалу с указанным количеством атомов углерода, но имеющему по меньшей мере два атома углерода, связанных двойной связью, где этот радикал имеет два центра одновалентного радикала. Примеры алкениленовых радикалов включают, без ограничения, -СН=СН-, -СН₂СН=СН- и -СН(СН₃)СН=СН.

Если не указано иное, "арил", один или как часть другого термина, означает карбоциклический ароматический углеводородный радикал из 6-20, предпочтительно 6-14 атомов углерода, получаемый в результате удаления одного атома водорода с каждого одного или более атомов углерода родительской ароматической кольцевой системы. Типичные арильные группы включают, без ограничения, радикалы, получаемые из бензола, нафталина, антрацена, бифенила и тому подобного. Если указано, то арильная группа может быть возможно замещенной. Термин "арилен" относится к двухвалентному радикалу, получаемому из арильной группы, как определено в данном документе.

"Галоген" относится к атому фтора, хлора, брома или йода.

Согласно настоящему изобретению предложен также способ синтеза производного калихеамицина формулы VI

где J представляет собой

;

R₁ представляет собой или СН₃;

R₂ представляет собой или Н;

R₃ представляет собой или Н;

R₄ представляет собой или Н;

R⁵ представляет собой -СН₃, -С₂Н₅ или -СН(СН₃)₂;

X представляет собой атом йода или брома;

R^5' представляет собой водород или группу RCO, где R представляет собой водород, разветвленный или неразветвленный ал кил из 1-10 атомов углерода, алкилен из 2-10 атомов углерода, арил из 6-11 атомов углерода, группу (С₆-С₁₁)арил-алкил(С₁-С₅), или гетероарил или группу гетероарил-алкил(С₁-С₅), где гетероарил определен как 2- или 3-фурил, 2- или 3-тиенил, 2-или 3-(N-метилпирролил), 2-, 3- или 4-пиридинил, 2-, 4- или 5-(N-метилимидазолил), 2-, 4- или 5-оксазолил, 2-, 3-, 5- или 6-пиримидинил, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хинолил или 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-изохинолил, и все арильные и гетероарильные группы возможно замещены одной или более группами гидрокси, амино, карбокси, галогенами, нитро, (С₁-С₃)алкокси или тиоалкокси из 1-5 атомов углерода;

каждый из R₆ и R₇ независимо выбран из Н и

;

r означает целое число 0 или 1;

G представляет собой кислород или серу;

Z¹ представляет собой Н или C₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, возможно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴, или Ar представляет собой 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- или 2,7-нафтилиден, возможно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴;

где каждый R¹⁴ независимо выбран из (С₁-С₅)алкила, и каждый R¹⁴независимо возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(С₁-С₄)алкила и группы -S(C₁-С₄)алкил;

каждый n означает целое число, независимо выбранное из 0, 1, 2, 3, 4, and 5;

W выбран из -О-, -S-, -C(=O)NH-, -NHC(=O)- и -NR¹⁵-, где R¹⁵представляет собой (С₁-С₅)алкил, и R¹⁵ возможно замещен одной или двумя группами, выбранными из -ОН, -(C₁-С₄)алкила и группы -S(С₁-С₄)алкил;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью или (С₁-С₆)алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью; и

Z выбран из группы, состоящей из

, , , ,

и ;

включающий взаимодействие линкерного промежуточного соединения формулы V

с метилтрисульфидным соединением СН₃-S-S-S-J в присутствии карбодиимида, тем самым синтезируя производное калихеамицина формулы VI.

Согласно настоящему изобретению предложен также способ синтеза производного калихеамицина формулы X

где J представляет собой

;

R₁ представляет собой или СН₃;

R₂ представляет собой или Н;

R₃ представляет собой или Н;

R₄ представляет собой или Н;

R⁵ представляет собой -СН₃, -С₂Н₅ или -СН(СН₃)₂;

X представляет собой атом йода или брома;

R^5' представляет собой водород или группу RCO, где R представляет собой водород, разветвленный или неразветвленный алкил из 1-10 атомов углерода, алкилен из 2-10 атомов углерода, арил из 6-11 атомов углерода, группу (С₆-С₁₁)арил-алкил(С₁-С₅), или гетероарил или группу гетероарил-алкил(С₁-С₅), где гетероарил определен как 2- или 3-фурил, 2- или 3-тиенил, 2-или 3-(N-метилпирролил), 2-, 3- или 4-пиридинил, 2-, 4- или 5-(N-метилимидазолил), 2-, 4- или 5-оксазолил, 2-, 3-, 5- или 6-пиримидинил, 2-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-хинолил, или 1-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-изохинолил, и все арильные и гетероарильные группы возможно замещены одной или более группами гидрокси, амино, карбокси, галогенами, нитро, (С₁-С₃)алкокси или тиоалкокси из 1-5 атомов углерода;

каждый из R₆ и R₇ независимо выбран из Н и

;

Y' представляет собой (С₁-С₁₈)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью, (С₂-С₁₈)алкениленовую группу с прямой или разветвленной цепью, ариленовую группу или гетероариленовую группу, арилен(С₁-С₁₈)алкиленовую группу, арилен(С₂-С₁₈)алкениленовую группу, гетероарилен(С₁-С₁₈)алкиленовую группу или гетероарилен(С₁-С₁₈)алкениленовую группу, где указанная гетероариленовая группа представляет собой двухвалентный радикал, получаемый из фурила, тиенила, N-метилпирролила, пиридинила, N-метилимидазолила, оксазолила, пиримидинила, хинолила, изохинолила, N-метилкарбазоила, аминокумаринила или феназинила, и где указанный Y' возможно может быть замещен диалкиламино из 1-5 атомов углерода, алкокси из 1-5 атомов углерода, гидрокси, -SH или алкилтио из 1-5 атомов углерода;

Q выбран из -C(=O)NHN=, -C(=S)NHN=, -NHC(=O)NHN=, -NHC(=S)NHN=, и -O-N=;

Z¹ представляет собой H или С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен, возможно замещенный одной, двумя или тремя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴, или Ar представляет собой 1,2-, 1,3-, 1,4-, 1,5-, 1,6-, 1,7-, 1,8-, 2,3-, 2,6- или 2,7-нафтилиден, возможно замещенный одной, двумя, тремя или четырьмя группами, независимо выбранными из С₁-С₆алкила с прямой или разветвленной цепью, -OR¹⁴, -SR¹⁴, галогена, нитро, -COOR¹⁴, -C(=O)NHR¹⁴, -O(CH₂)_nCOOR¹⁴, -S(CH₂)_nCOOR¹⁴, -O(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴ и -S(CH₂)_nC(=O)NHR¹⁴;

каждый n означает целое число, независимо выбранное из 0, 1, 2, 3, 4 и 5;

Z выбран из группы, состоящей из

, , , ,

и ;

включающий взаимодействие линкерного промежуточного соединения формулы XI

с метилтрисульфидным соединением СН₃-S-S-S-J в присутствии карбодиимида, тем самым синтезируя производное калихеамицина формулы X.

В одном воплощении этого способа синтеза производного калихеамицина формулы VI или формулы X в присутствии карбодиимида один из R₆ и R₇ представляет собой водород, а другой из R₆ и R₇ представляет собой

В еще одном воплощении способа по настоящему изобретению для синтеза производного калихеамицина формулы VI или формулы X метилтрисульфид имеет начальную концентрацию в указанной реакции с линкерным промежуточным соединением формулы V (или формулы XI в случае необходимости) более примерно 3 г/л реакционной смеси. В еще одном воплощении метилтрисульфидное соединение имеет начальную концентрацию в указанной реакции с линкерным промежуточным соединением формулы V (или формулы XI в случае необходимости) от примерно 10 г/л до 110 г/л реакционной смеси.

В еще одном воплощении этого способа синтеза производного калихеамицина формулы VI или формулы X карбодиимид представляет собой 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид. Карбодиимид в этом способе по изобретению для синтеза производного калихеамицина формулы VI или формулы X может представлять собой любую молекулу, содержащую карбодиимидную группировку, и такие молекулы известны в данной области техники. Примеры карбодиимидов, которые могут быть использованы в настоящем изобретении, включают, без ограничения, 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (EDC), N,N'-дициклогексилкарбодиимид (DCC), N,N'-диизопропилкарбодиимид (DIC), N-циклогексил-N'-(2-морфолиноэтил)карбодиимид, тозилат N-циклогексил-N'-[2-(4-метилморфолин-4-ий-4-ил)этил]карбодиимида, тозилат N-циклогексил-N'-[4-(диэтилметиламмонио)циклогексил]карбодиимида, N,N'-бис(2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил)метил]карбодиимид и N-бензил-N'-изопропилкарбодиимид. Другие карбодиимиды, подходящие для использования в способах по настоящему изобретению, могут быть установлены специалистами в данной области техники.

Согласно настоящему изобретению предложен также способ очистки производного калихеамицина формулы VI или производного калихеамицина формулы X, где формула VI и формула X такие, как определено в данном документе выше, включающий подвергание производного калихеамицина формулы VI или производного калихеамицина формулы X процедуре очистки обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ОФ-ВЭЖХ). Неожиданным является то, что процедура обращено-фазной очистки может быть использована для очистки молекул производного калихеамицина формулы VI или формулы X с учетом того, что эти соединения имеют две водолабильные группы, а именно гидразоновую группу и N-гидрокси-сукцинимид (NHS)эфирную группу, каждая из которых имеет зависимость от разного рН для ее гидролиза. Кроме того, использование обращенно-фазной очистки имеет преимущество относительно очистки нормально-фазной хроматографией, описанной в предшествующем уровне техники (смотри патент США №8273862), поскольку в нормально-фазной хроматографии используется токсический, вредный для окружающей среды растворитель, такой как метиленхлорид и метанол. Процедура обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии (ОФ-ВЭЖХ) влечет за собой использование С-18 стационарной фазы, которая связывает компоненты реакционной смеси. Эти компоненты затем элюируют и разделяют с использованием градиента, состоящего из водной и органической подвижных фаз, в диапазоне рН от примерно 4 до примерно 6 для оптимальной стабильности двух присутствующих гидролизуемых групп. В одном воплощении градиент содержит по меньшей мере две фазы. В еще одном воплощении градиент содержит 1, 2, 3, 4 или 5 фаз. В еще одном воплощении градиент содержит 2 или 3 фазы. В еще одном воплощении градиент содержит 2 фазы. Каждая фаза может быть органической, водной или комбинированной. Градиент меняется во времени от водной составляющей фазы к увеличению органической составляющей фазы. В заявленном изобретении могут быть использованы водные фазы, известные в данной области техники. Примеры водных фаз, которые могут быть использованы в заявленном изобретении, включают, без ограничения, ацетат натрия (NaOAc), сукцинат натрия, N-метил-морфолин, цитрат натрия и 2-(N-морфолино)этансульфоновую кислоту. В заявленном изобретении могут быть использованы органические фазы, известные в данной области техники. Примеры органических фаз, которые могут быть использованы в заявленном изобретении, включают, без ограничения, ацетонитрил, изопропанол, ацетон, диметоксиэтан и N-метил-2-пирролидон. Как указано, любая фаза может содержать смесь водной фазы и органической фазы, например смесь NaOAc и ацетонитрила. Например, подвижная фаза, состоящая из 55% 20 мМ ацетата натрия, рН 5, и 45% ацетонитрила, представляет собой водную/органическую подвижную фазу, которая может быть использована для очистки методом ОФ-ВЭЖХ по изобретению. В качестве дополнительного примера, примером градиента, полезного в заявленном изобретении, является градиент, содержащий первую подвижную фазу, состоящую из 55% 20 мМ ацетата натрия, рН 5, и 45% ацетонитрила, с последующей второй подвижной фазой, состоящей из ацетонитрила.

В одном воплощении способа очистки производного калихеамицина формулы VI или формулы X, включающего процедуру ОФ-ВЭЖХ, производное калихеамицина формулы VI или формулы X содержит Z, выбранный из:

, , , ,

и .

В еще одном воплощении способа очистки производного калихеамицина формулы VI или формулы X, включающего процедуру ОФ-ВЭЖХ, производное калихеамицина формулы VI или формулы X содержит Z, выбранный из:

и .

После обращенно-фазной очистки полученное очищенное производное калихеамицина может быть выделено, как описано в данной области, например путем концентрирования и расслоения, или очищенное производное калихеамицина может быть выделено с использованием процедуры твердофазной экстракции (ТФЭ). Процедура твердофазной экстракции была идентифицирована как эффективная замена расслоения дихлорметаном выделением продукта из фракций ОФ-ВЭЖХ. В процессе твердофазной экстракции продукт связывают с обращенно-фазной смолой путем нанесения в слабом растворителе, промывают для удаления буферных солей (оставшихся после ОФ-ВЭЖХ очистки) и затем элюируют органическими растворителями, такими как ацетонитрил, с получением концентрированного раствора продукта, не содержащего или по существу не содержащего солей.

Таким образом, дополнительные воплощения любого из способов по изобретению, описанных в данном документе для синтеза производного калихеамицина формулы VI или формулы X, включают также очистку синтезированного производного калихеамицина формулы VI или формулы X путем подвергания процедуре обращенно-фазной очистки. В дополнительных воплощениях изобретения производное калихеамицина формулы VI или формулы X, полученное в результате процедуры обращенно-фазной очистки впоследствии подвергают процедуре твердофазной экстракции.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Способ по настоящему изобретению для синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V представлен на приведенных ниже реакционных Схемах I-IV. В химических формулах на Схемах I-IV R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹², Q, Ar, W, Y, Z¹ и Z такие, как определено в данном документе выше.

Схема I

В соответствии со Схемой I (4-алкоксифенил)метантиол 1, где R¹² такой, как определено в данном документе, подвергают взаимодействию с метилсенециоатом 2 с образованием промежуточного карбоновой кислоты 3. В промежуточное соединение 3 затем загружают подходящий органический растворитель, такой как тетрагидрофуран, и азольный активирующий агент формулы IX, как описано в данном документе, такой как карбонилдиимидазол (CDI). Получают промежуточное соединение 3.5. После этой реакции соединение 3.5 объединяют с гидразином. Источником гидразина может быть безводный гидразин, как описано в WO 2008/147765; однако предпочтительным источником гидразина является водный гидразин, такой как моногидрат гидразина. В результате этой реакции образуется промежуточное соединение 4. Соединение гидразид пара-метоксибензилтиоэфира, которое является промежуточным соединением 4,. где R¹² представляет собой метил, и каждый R¹⁰ представляет собой водород, описано в WO 2008/147765, полное содержание которого включено в данный документ посредством ссылки.

Схема II

На Схеме II промежуточное соединение 4 подвергают взаимодействию с соединением 5,. где Z¹ такой, как описано в данном документе, например 4-(4-ацил-фенокси)бутановая кислота, в инертном (другими словами нереакционноспособном) растворителе, возможно с кислотным катализатором, с получением промежуточного соединения 6. Примеры инертных растворителей, которые могут быть использованы в этой реакции, включают, без ограничения, спирты (например, метанол), простые эфиры и сложные эфиры, такие как этилацетат. Специалист в данной области может определить подходящий инертный растворитель для этой реакции. Кислотные катализаторы также могут быть определены специалистом в данной области техники; примеры кислотных катализаторов включают, без ограничения, уксусную кислоту.

Схема III

На Схеме III с промежуточного соединения 6 удаляют защитную группу с образованием соединения 7. В этой реакции в соединение 6 загружают метоксибензол и сильную кислоту, возможно при нагревании, например трифторуксусную кислоту при нагревании, с получением промежуточного соединения 7. Вместо трифторуксусной кислоты можно использовать другую сильную кислоту, например серную кислоту.

Схема IV

На Схеме IV промежуточное соединение 7 превращают в соединение 8, которое является воплощением линкерного промежуточного соединения формулы V, описанного в данном документе. Промежуточное соединение 7 может быть превращено в линкерное промежуточное соединение, такое как соединение 8,. которое описано в данной области техники, например в патенте США №8273862, который во всей его полноте включен в данное описание посредством ссылки. Однако предпочтительно, как изображено на Схеме IV, промежуточное соединение 7 подвергают взаимодействию с третичным аминным основанием, таким как триэтиламин (TEA), и с триметилацетилхлоридом (PivCl) в присутствии инертного растворителя, такого как тетрагидрофуран. Затем вводят соединение формулы ZH, например N-гидроксисукцинимид, для обеспечения получения линкерного промежуточного соединения 8.

После синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V (например соединения 8) затем синтезируют производное калихеамицина формулы VI, используя линкерное промежуточное соединение, полученное в результате реакции, представленной на Схеме IV, и способами, известными в данной области техники, например как описано в патенте США №8273862. Например, линкерное промежуточное соединение формулы V сначала может быть подвергнуто реакции с карбонатом щелочного металла, включая, без ограничения, карбонат натрия, с образованием натриевой соли линкерного промежуточного соединения в ацетонитриле при нагревании в условиях умеренной дефлегмации. Дополнительно, в результате реакции натриевой соли линкерного промежуточного соединения с метилтрисульфидом СН₃-S-S-S-J при примерно -15°С в инертном органическом растворителе, предпочтительно ацетонитриле, получают производное калихеамицина формулы VI. Предпочтительной является реакция в ацетонитриле при примерно 0°С. Возможно, вместо карбоната щелочного металла может быть использовано органическое основание, которое предпочтительно представляет собой триэтиламин, в ацетонитриле при примерно 0°С.

Альтернативно, производное калихеамицина формулы VI может быть синтезировано из линкерного промежуточного соединения формулы V в результате реакции с молекулой формулы CH₃-S-S-S-J с использованием способа, описанного в данном документе, включающего использование карбодиимида.

Производное калихеамицина формулы VI затем может быть конъюгировано с биомакромолекулой, такой как моноклональное антитело, с образованием конъюгата антитело-лекарственное средство, способами, описанными в данной области техники, например способами, описанными в патенте США №5053394 и в патенте США №5770701, которые оба во всей их полноте включены в данное описание посредством ссылки.

Приведенные ниже примеры представлены для иллюстрации некоторых воплощений настоящего изобретения, но их не следует толковать как ограничивающие объем данного изобретения. Специалистам в данной области техники будет понятно, что могут быть использованы известные варианты конкретных условий, приведенных в примерах.

Пример 1

3-(4-метоксибензилтио)-3-метилбутановая кислота

85 г соединения 1 и 255 мл 2-метилтетрагидрофурана добавляли в реактор при 20-25°С. 125,05 г соединения 2 добавляли в этот реактор, и реактор дегазировали барботированием потока азота в перемешиваемый раствор в течение 15-20 мин. В реактор добавляли бромид тетрабутиламмония (1M в THF, 0,05 экв., 36,1 мл) и поддерживали температуру реакции 20-30°С в течение 2 часов.

Добавляли раствор дигидрата хлорида кальция (0,35 экв., 28,060 г) в 255 мл воды. После перемешивания в течение 20 минут нижнюю водную фазу удаляли. К верхней органической фазе добавляли 252 мл метанола и 3 экв. NaOH в 252 мл воды. Реакционную смесь перемешивали до полного расходования промежуточного сложного эфира (3).

Реакционную смесь охлаждали до 15°С и добавляли 2-метилтетрагидрофуран (252 мл), затем 252 мл воды. Медленно добавляли концентрированную HCl (3,1 экв., 184 мл), поддерживая температуру реакционной смеси в пределах 15-30°С. Нижнюю водную фазу удаляли. Органический слой промывали 1М HCl (252 мл) и добавляли гептаны (1940 мл). Раствор дистиллировали для удаления 2-метилтетрагидрофурана. Полученную суспензию перемешивали в течение часа, затем фильтровали и сушили. Маточную жидкость концентрировали с получением второй порции твердого вещества.

Суммарный выход указанной в заголовке кислоты 4 составил 162,59 г (88,5%). ¹Н ЯМР (CDCl₃): δ (м.д.) 1.5 (s, 6Н), 2.3 (s, 2Н), 3.6 (m, 5Н), 6.7 (d, 2Н), 7.6 (d, 2Н).

Пример 2

3-(4-метоксибензилтио)-3-метилбутангидразид

Кислоту 4 (81,67 г, 321 ммоль) добавляли к 375 мл THF (тетрагидрофуран). CDI (1,05 экв., 54,7 г) загружали тремя порциями, и реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 2,5 часов. В отдельном реакторе готовили раствор моногидрата гидразина (2,5 экв., 40,19 г) в 200 мл THF. Раствор промежуточного соединения 5 добавляли в раствор гидразингидрата, поддерживая внутреннюю температуру 20°С. После окончания добавления реакционную смесь перемешивали в течение 18 часов, затем концентрировали до 100 мл. Добавляли 850 мл EtOАс (этилацетат), и раствор промывали 3 раза 500 мл воды, затем 200 мл рассола. Органический слой сушили Na₂SO₄, фильтровали через диатомитовую землю и концентрировали на роторном испарителе до белой суспензии. Добавляли 300 мл гептана, и 200 мл удаляли на роторном испарителе. Добавляли еще 200 мл гептана и выпаривали до густой белой суспензии. Смесь фильтровали, промывали гептанами и сушили. Из соединения 4 было получено 83,15 г (96,5%) указанного в заголовке соединения 6. МС (масс-спектрометрия) 269 (М+1), 121, 120.

Пример 3

4-(4-(1-(2-(3-(4-метоксибензилтио)-3-метилбутаноил)гидразоно)-этил)фенокси)бутановая кислота

68 г соединения 6 и 57,43 г соединения 7 добавляли к 680 мл метанола (МеОН). Добавляли 68 мл уксусной кислоты (НОАс), и эту смесь нагревали при 45°С в течение 3 часов, охлаждали до 20°С и выдерживали в течение 16 часов. Суспензию фильтровали, промывали метанолом и сушили. Было получено 112,60 г указанного в заголовке соединения 8 в виде смеси Е- и Z-изомеров. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆): δ (м.д.) 1.5 (m, 6Н), 2.0 (m, 2Н), 2.2 (m, 3Н), 2.4 (m, 2Н), 2.7 (s, 1.1Н), 3.0 (s, 0.9Н), 3.7 (m, 3Н), 3.8 (m, 2Н), 4.0 (m, 2Н), 6.8 (m 2Н), 6.9 (m, 2Н), 7.3 (m, 2Н), 7.7 (m, 2Н), 10.2&10.3 (s, 1Н), 12.1 (s, 1Н). ЖХ/МС (жидкофазная хроматография/масс-спектрометрия) m/z 473 [М+Н]⁺.

Пример 4

4-(4-(1-(2-(3-меркапто-3-метилбутаноил)гидразоно)этил)-(ренокси)бутановая кислота

290,5 г (614,7 ммоль) соединения 8 и 1162 мл анизола загружали в реактор при 20-25°С. Добавляли трифторуксусную кислоту (1162 мл) в течение 2 минут, и эту реакционную смесь нагревали до 65-70°С в течение 2,5 часов. Реакционную смесь охлаждали до 40°С. TFA (трифторуксусную кислоту) отгоняли вакуумной дистилляцией и заменяли 2-метилтетрагидрофураном (2905 мл). Проводили дистилляцию до образования густой суспензии (конечный объем суспензии составлял приблизительно 2 л). Суспензию охлаждали до 15°С и фильтровали. Неочищенный продукт ресуспендировали в метаноле (1836,6 мл), нагревали до 55°С и затем охлаждали до 20°С в течение ночи. Суспензию фильтровали, промывали метанолом и сушили. Из соединения 8 было получено 171,80 г (93,54%) указанного в заголовке соединения 9 в виде смеси Е- и Z-изомеров. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆): δ (м.д.) 1.5 (m, 6Н), 2.0 (m, 2Н), 2.2 (m, 3Н), 2.4 (m, 2Н), 2.7 (s, 1.1Н), 3.0 (s, 0.9Н), 3.3 (s 1Н), 4.0 (m, 2Н), 6.9 (m, 2Н), 7.7 (m, 2Н), 10.2&10.3 (s, 1Н), 12.1 (s, 1Н).

Пример 5

2,5-диоксопирролидин-1-ил-4-(4-(1-(2-(3-меркапто-3-метилбутаноил)-гидразоно)этил)фенокси)бутаноат

Реактор: 2-литровый реактор с рубашкой, Tr датчик (температурный датчик), вход для подачи азота.

60 г (170,3 ммоль) добавляли к 2400 мл THF и охлаждали до 10°С. Медленно добавляли триэтиламин (2 экв., 34,46 г), затем триметилацетилхлорид (1,1 экв., 22,81 г) в течение 10 минут, поддерживая температуру в пределах 10-20°С Смесь перемешивали при 10-20°С в течение 30 минут. В реактор добавляли N-гидроксисукцинимид (1,1 экв., 21,99 г), и смесь перемешивали при 20-25°С в течение 30 минут.

Суспензию фильтровали для удаления TEA-HCI солей и концентрировали в вакууме до объема приблизительно 800 мл. Медленно добавляли гексан (780 мл) для кристаллизации продукта. Суспензию перемешивали в течение 1,5 часов, затем фильтровали, промывали гептанами и сушили. Из соединения 9 было получено 70,4 г (выход 92%) указанного в заголовке линкерного промежуточного соединения 10.

Неочищенный продукт подвергали перекристаллизации путем добавления 144 г соединения 10 к 2100 мл THF и нагревали до 60°С. Смесь фильтровали через диатомитовую землю и медленно добавляли 2100 мл гексана и охлаждали до 20°С в течение 1,5 часов. Суспензию фильтровали, промывали холодной смесью THF/гексан (1:1), затем гексаном и сушили. Из соединения 9 было получено 126 г (выход 87,5%) указанного в заголовке линкерного промежуточного соединения 10. ¹Н ЯМР (DMSO-d₆): δ (м.д.) 1.5 (m, 6Н), 2.1 (m, 2Н), 2.2 (m, 3Н), 2.7 (s, 1.1Н), 2.9 (М, 5Н) 3.0 (s, 1.9Н), 3.3 (s 1Н), 4.3 (m, 2Н), 7.0 (m, 2Н), 7.5 (m, 2Н), 10.2&10.3 (s, 1Н).

Пример 6

Получение бутановой кислоты, 3-[[(2Е)-2-[(1R,4Z,8S)-8-[[2-O-[4-(ацетилэтиламино)-2,4-дидеокси-3-O-метил-a-L-трео-пентопиранозил]-4,6-дидеокси-4-[[[2,6-дидеокси-4-S-[4-[(6-деокси-3-O-метил-а-L-маннопиранозил)окси]-3-йод-5,6-диметокси-2-метилбензоил]-4-тио-β-D-рибо-гексопиранозил]окси]амино]-β-D-глюкопиранозил]окси]-1-гидрокси-10-[(метоксикарбонил)амино]-11-оксобицикло[7.3.1]тридека-4,9-диен-2,6-диин-13-илиден]этил]дитио]-3-метил-, 2-[(1Е)-1-[4-[4-[(2,5-диоксо-1-пирролидинил)окси]-4-оксобутокси]фенил]этилиден]гидразида

К раствору N-ацетил-калихеамицина (50 мг, 0,035 ммоль) в ацетонитриле (1,0 мл) при комнатной температуре добавляли линкерное промежуточное соединение бутановую кислоту, 3-меркапто-3-метил-,2-[(Е)-1-[4-[4-[(2,5-диоксо-1-пирролидинил)-окси]-4-оксобутокси]фенил]этилиден]гидразид (31,9 мг, 0,07 ммоль) одной порцией, после чего добавляли 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид (6,7 мг, 0,035 ммоль) и затем триэтиламин (5,3 мг, 7,3 мкл, 0,053 ммоль). Эту реакционную смесь (суспензию) перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре, и в этой точке она стала представлять собой желтый раствор. Выход определяли в виде процента площади относительно стандартного производного (выход 60%).

Масс-спектрометрия:

(M+Na)=1801,4578

¹Н ЯМР:

¹Н ЯМР (CDCl₃ + 5% CD₃OD, 400 МГц): 8.69 (s, 1Н, 18C-NH-N=), 7.75 (d, J=8.7 Гц, 2Н, 22), 6.95 (d, J=8.7 Гц, 2Н, 23), 6.38 (br t, J=7 Гц, 1H, 14), 6.23 (d, J=1.5 Гц, 1H, 8), 5.90 (d, J=9.5 Гц, 1H, 4), 5.80 (dd, J=9.5, 1.5 Гц, 1H, 5), 5.72 (d, J=1.5 Гц, 1H, 1D), 5.63 (br d, J=2.2 Гц, 1H, 1E), 5.03 (dd, J=11.5, 1.6 Гц, 1H, 1B), 4.70 (m, 1H, 5E), 4.61 (d, J=7.8 Гц, 1H, 1A), 4.6 (m, 1H, 3E), 4.49 (m, 1H, 2D), 4.31 (m, 1H, 3B), 4.20 (m, 1H, 5D), 4.10 (m, 2H, 25), 4.07 (m, 1H, 5B), 4.03 (m, 1H, 3А), 3.91 (m, 1H, 15), 3.89 (s, 3H, 2C-OCH₃), 3.84 (s, 3Н, 3С-ОСН₃), 3.8 (m, 1H, 3D), 3.76 (m, 1H, 15), 3.75 (m, 1H, 4B), 3.65 (m, 1H, 5A), 3.63 (bs, 3H, 10-NHCOOCH₃), 3.62 (m, 1H, 2A), 3.6 (m, 1H, 4D), 3.57 (s, 3H, 3D-OCH₃), 3.4 (m, 1H, 5E), 3.37 (s, 3Н, 3Е-ОСН₃), 3.30 (m, 2H, 4E-N-CH₂CH₃), 3.12 (d, J=17.6 Гц, 1H, 12), 3.0 (m, 1H, 4E), 2.85 (m, 2H, 27), 2.85 (bs, 4, 30), 2.72 (d, J=17.6 Гц, 1H, 12), 2.5 (m, 2H, 17), 2.4 (m, 1H, 2E экваториальный), 2.33 (m, 1H, 4A), 2.25 (m, 2H, 26), 2.18 (s, 3H, 19), 2.08 (s, 3H, 4E-N-COCH₃), 2.0 (m, 1H, 2B), 1.8 (m, 1H, 2B), 1.50 (s, 3H, 16a), 1.44 (s, 3H, 16b), 1.42 (d, J=6.2 Гц, 3Н, 6B), 1.4 (m, 1H, 2E аксиальный), 1.31 (d, J=6.1 Гц, 3Н, 6А), 1.31 (d, J=6.1 Гц, 3Н, 6D), 1.19 (t, J=7.2 Гц, 3Н, 4E-N-CH₂CH₃).

Пример 7

Получение бутановой кислоты, 3-[[(2Е)-2-[(1R,4Z,8S)-8-[[2-O-[4-(ацетилэтиламино)-2,4-дидеокси-3-O-метил-а-L-трео-пентопиранозил]-4,6-дидеокси-4-[[[2,6-дидеокси-4-S-[4-[(6-деокси-3-O-метил-а-L-маннопиранозил)окси]-3-йод-5,6-диметокси-2-метилбензоил]-4-тио-β-D-рибо-гексопиранозил]окси]амино]-β-D-глюкопиранозил]окси]-1-гидрокси-10-[(метоксикарбонил)амино]-11-оксобицикло[7.3.1]тридека-4.9-диен-2.6-диин-13-илиден]этил]дитио]-3-метил-, 2-[(1Е)-1-[4-[4-[(2.5-диоксо-1-пирролидинил)окси]-4-оксобутокси]фенил]этилиден] гидразида. без использования ЕDС

Для сравнения со способом по настоящему изобретению, проиллюстрированном в Примере 6, была проведена следующая реакция: К раствору N-ацетил-калихеамицина (50 мг, 0,035 ммоль) в ацетонитриле (1,0 мл) при комнатной температуре добавляли линкерное промежуточное соединение бутановую кислоту, 3-меркапто-3-метил-, 2-[(Е)-1-[4-[4-[(2,5-диоксо-1-пирролидинил)окси]-4-оксобутокси]фенил]-этилиден]-гидразид (31,9 мг, 0,07 ммоль) одной порцией, после чего добавляли триэтиламин (5,3 мг, 7,3 мкл, 0,053 ммоль). Эту реакционную смесь (суспензию) перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре, и в этой точке она стала представлять собой желтый раствор. Выход определяли в виде процента площади относительно стандартного производного (выход 35%).

Масс-спектрометрия:

(M+Na)=1801,4578

¹Н ЯМР:

¹Н ЯМР (CDCl₃ + 5% CD₃OD, 400 МГц): 8.69 (s, 1Н, 18C-NH-N=), 7.75 (d, J=8.7 Гц, 2H, 22), 6.95 (d, J=8.7 Гц, 2H, 23), 6.38 (br t, J=7 Гц, 1H, 14), 6.23 (d, J=1.5 Гц, 1H, 8), 5.90 (d, J=9.5 Гц, 1H, 4), 5.80 (dd, J=9.5, 1.5 Гц, 1H, 5), 5.72 (d, J=1.5 Гц, 1H, 1D), 5.63 (br d, J=2.2 Гц, 1H, 1E), 5.03 (dd, J=11.5, 1.6 Гц, 1H, 1B), 4.70 (m, 1H, 5E), 4.61 (d, J=7.8 Гц, 1H, 1A), 4.6 (m, 1H, 3E), 4.49 (m, 1H, 2D), 4.31 (m, 1H, 3B), 4.20 (m, 1H, 5D), 4.10 (m, 2H, 25), 4.07 (m, 1H, 5B), 4.03 (m, 1H, 3А), 3.91 (m, 1H, 15), 3.89 (s, 3H, 2C-OCH₃), 3.84 (s, 3Н, 3С-ОСН₃), 3.8 (m, 1H, 3D), 3.76 (m, 1H, 15), 3.75 (m, 1H, 4B), 3.65 (m, 1H, 5A), 3.63 (bs, 3H, 10-NHCOOCH₃), 3.62 (m, 1H, 2A), 3.6 (m, 1H, 4D), 3.57 (s, 3H, 3D-OCH₃), 3.4 (m, 1H, 5E), 3.37 (s, 3Н, 3Е-ОСН₃), 3.30 (m, 2H, 4E-N-CH₂CH₃), 3.12 (d, J=17.6 Гц, 1H, 12), 3.0 (m, 1H, 4E), 2.85 (m, 2H, 27), 2.85 (bs, 4, 30), 2.72 (d, J=17.6 Гц, 1H, 12), 2.5 (m, 2H, 17), 2.4 (m, 1H, 2E экваториальный), 2.33 (m, 1H, 4A), 2.25 (m, 2H, 26), 2.18 (s, 3H, 19), 2.08 (s, 3H, 4E-N-COCH₃), 2.0 (m, 1H, 2B), 1.8 (m, 1H, 2B), 1.50 (s, 3H, 16a), 1.44 (s, 3H, 16b), 1.42 (d, J=6.2 Гц, 3Н, 6B), 1.4 (m, 1H, 2E аксиальный), 1.31 (d, J=6.1 Гц, 3Н, 6А), 1.31 (d, J=6.1 Гц, 3Н, 6D), 1.19 (t, J=7.2 Гц, 3Н, 4E-N-CH₂CH₃)

Пример 8

Получение в укрупненном масштабе бутановой кислоты, 3-[[(2Е)-2-[(1R,4Z,8S)-8-[[2-O-[4-(ацетилэтиламино)-2,4-дидеокси-3-O-метил-а-L-трео-пентопиранозил]-4,6-дидеокси-4-[[[2,6-дидеокси-4-S-[4-[(6-деокси-3-O-метил-а-L-маннопиранозил)окси]-3-йод-5,6-диметокси-2-метилбензоил]-4-тио-β-D-рибо-гексопиранозил]окси]амино]-β-D-глюкопиранозил]окси]-1-гидрокси-10-[(метоксикарбонил)амино]-11-оксобицикло[7.3.1]тридека-4,9-диен-2,6-диин-13-илиден]этил]дитио]-3-метил-, 2-[(1Е)-1-[4-[4-[(2.5-диоксо-1-пирролидинил)окси]-4-оксобутокси]фенил]этилиден]гидразида, с последующей очисткой

К раствору N-ацетил-калихеамицина (60,2 г, 42,7 ммоль) в ацетонитриле (900 мл) при 4°С добавляли линкерное промежуточное соединение бутановую кислоту, 3-меркапто-3-метил-, 2-[(Е)-1-[4-[4-[(2,5-диоксо-1-пирролидинил)окси]-4-оксобутокси]-фенил]этилиден]гидразид (38,4 г, 85,4 ммоль) одной порцией, после чего добавляли 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид (8,2 г, 42,7 ммоль). Сосуды, содержащие линкер и 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид, ополаскивали ацетонитрилом (300 мл), и смывы добавляли в реакционную смесь. Затем в реакционную смесь добавляли триэтиламин (6,5 г, 8,9 мл, 64,1 ммоль). Реакционную смесь (суспензию) перемешивали в течение 1 часа при 4°С, и в этой точке она стала представлять собой желтый раствор. Реакционную смесь дополнительно разбавляли ацетонитрилом (600 мл) и 20 мМ буферным раствором ацетата натрия, рН 5,0 (1200 мл), и очищали обращенно-фазной колоночной HPLC, используя градиент подвижных фаз А и В (подвижная фаза А: 55:45 (об./об.) 20 мМ буферный раствор NaOAc с рН 5,0 (рН 4,5-5,5) : ацетонитрил : подвижная фаза В : ацетонитрил). Фракции желаемой чистоты собирали и затем подвергали твердофазной экстракции (ТФЭ). При ТФЭ очищенные фракции наносили на колонку, затем промывали смесью вода/ацетонитрил и затем элюировали ацетонитрилом с получением концентрированных фракций, содержащих продукт. Полученные фракции концентрировали в вакууме, переносили в этилацетат и осаждали добавлением гексана. Твердое вещество отфильтровывали и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества с чистотой 96,9% по результатам HPLC (45,2 г, выход 60%).

Масс-спектрометрия:

(M+Na)=1801,4578

¹Н ЯМР:

¹Н ЯМР (CDCl₃ + 5% CD₃OD, 400 МГц): 8.69 (s, 1Н, 18C-NH-N=), 7.75 (d, J=8.7 Гц, 2Н, 22), 6.95 (d, J=8.7 Гц, 2Н, 23), 6.38 (br t, J=7 Гц, 1H, 14), 6.23 (d, J=1.5 Гц, 1H, 8), 5.90 (d, J=9.5 Гц, 1H, 4), 5.80 (dd, J=9.5, 1.5 Гц, 1H, 5), 5.72 (d, J=1.5 Гц, 1H, 1D), 5.63 (br d, J=2.2 Гц, 1H, 1E), 5.03 (dd, J=11.5, 1.6 Гц, 1H, 1B), 4.70 (m, 1H, 5E), 4.61 (d, J=7.8 Гц, 1H, 1 A), 4.6 (m, 1H, 3E), 4.49 (m, 1H, 2D), 4.31 (m, 1H, 3B), 4.20 (m, 1H, 5D), 4.10 (m, 2H, 25), 4.07 (m, 1H, 5B), 4.03 (m, 1H, 3А), 3.91 (m, 1H, 15), 3.89 (s, 3H, 2C-OCH₃), 3.84 (s, 3Н, 3С-ОСН₃), 3.8 (m, 1H, 3D), 3.76 (m, 1H, 15), 3.75 (m, 1H, 4B), 3.65 (m, 1Н, 5А), 3.63 (bs, 3Н, 10-NHCOOCH₃), 3.62 (m, 1H, 2A), 3.6 (m, 1H, 4D), 3.57 (s, 3Н, 3D-OCH₃), 3.4 (m, 1H, 5E), 3.37 (s, 3Н, 3Е-ОСН₃), 3.30 (m, 2H, 4E-N-CH₂CH₃), 3.12 (d, J=17.6 Гц, 1H, 12), 3.0 (m, 1H, 4E), 2.85 (m, 2H, 27), 2.85 (bs, 4, 30), 2.72 (d, J=17.6 Гц, 1H, 12), 2.5 (m, 2H, 17), 2.4 (m, 1H, 2E экваториальный), 2.33 (m, 1H, 4A), 2.25 (m, 2H, 26), 2.18 (s, 3H, 19), 2.08 (s, 3H, 4E-N-COCH₃), 2.0 (m, 1H, 2B), 1.8 (m, 1H, 2B), 1.50 (s, 3H, 16a), 1.44 (s, 3H, 16b), 1.42 (d, J=6.2 Гц, 3Н, 6B), 1.4 (m, 1H, 2E аксиальный), 1.31 (d, J=6.1 Гц, 3Н, 6А), 1.31 (d, J=6.1 Гц, 3Н, 6D), 1.19 (t, J=7.2 Гц, 3Н, 4E-N-CH₂CH₃)

Реферат патента 2017 года Промежуточные соединения и способы синтеза производных калихеамицина

Изобретение относится к промежуточным соединениям формулы I

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью; каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²; каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью; r означает 0; G представляет собой кислород; Z¹ представляет собой С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью; Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен; W выбран из -О- и -S-; и Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью, а также к способам синтеза и очистки производных калихеамицина. 8 н. и 16 з.п. ф-лы, 8 пр.

Формула изобретения RU 2 640 197 C1

1. Соединение формулы I

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает 0;

G представляет собой кислород;

Z¹ представляет собой С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен;

W выбран из -О- и -S-; и

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью.

2. Соединение по п. 1, имеющее структуру

3. Способ синтеза соединения формулы I

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из С₁-С₈алкила с прямой и

разветвленной цепью;

r означает 0;

G представляет собой кислород;

Z¹ представляет собой С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен;

W выбран из -О- и -S; и Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью; включающий взаимодействие соединения формулы II

с соединением формулы III

4. Способ по п. 3, где r означает 0, G представляет собой кислород, Z¹ представляет собой метил, Ar представляет собой 1,4-фенилен, W представляет собой -О-, и Y представляет собой -(СН₂)₃-.

5. Способ синтеза соединения формулы IV

включающий обработку соединения формулы I

где R¹² выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает целое число 0;

G представляет собой кислород;

Z¹ представляет собой С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен;

W выбран из -О- и -S; и

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью,

сильной кислотой с образованием смеси, содержащей соединение формулы IV.

6. Способ по п. 5, где R⁸ и R⁹ представляют собой метил, r означает 0, G представляет собой кислород, Z¹ представляет собой метил, Ar представляет собой 1,4-фенилен, W представляет собой -О-, и Y представляет собой -(СН₂)₃-.

7. Способ синтеза линкерного промежуточного соединения формулы V

где каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает 0;

G представляет собой кислород;

Z¹ представляет собой C₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен;

W выбран из -О- и -S;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью; и

Z представляет собой

включающий

а) обработку соединения формулы I

где R¹² выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью и каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²,

сильной кислотой с образованием смеси, содержащей соединение формулы IV

б) взаимодействие соединения формулы IV с соединением ZH; тем самым синтезируя линкерное промежуточное соединение формулы V.

8. Способ по п. 7, где линкерное промежуточное соединение имеет структуру

9. Способ по п. 7, где соединение формулы I получают путем

взаимодействия соединения формулы II

с соединением формулы III

10. Способ синтеза производного калихеамицина формулы VI

где J представляет собой

R₁ представляет собой

R₂ представляет собой

R₃ представляет собой Н;

R₄ представляет собой

R⁵ представляет собой -СН₃, -С₂Н₅ или -СН(СН₃)₂;

X представляет собой атом йода или брома;

R^5' представляет собой группу RCO, где R представляет собой водород или разветвленный или неразветвленный алкил из 1-10 атомов углерода;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает 0;

G представляет собой кислород;

Z¹ представляет собой С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен;

W выбран из -О- и -S;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью; и

Z представляет собой

включающий

а) обработку соединения формулы I

где R¹² выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью,

и каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

сильной кислотой с образованием смеси, содержащей соединение формулы IV

в) взаимодействие линкерного промежуточного соединения формулы V, полученного на стадии (б), с метилтрисульфидным соединением CH₃-S-S-S-J; тем самым синтезируя производное калихеамицина формулы VI.

11. Способ по п. 10, где соединение формулы I получают путем взаимодействия соединения формулы II

с соединением формулы III

12. Способ по п. 10, где метилтрисульфидное соединение СН₃-S-S-S-J представляет собой озогамицин.

13. Способ по п. 12, дополнительно включающий

г) конъюгирование производного калихеамицина формулы VI, полученного на стадии (в), с моноклональным антителом, выбранным из инотузумаба и гемтузумаба.

14. Способ синтеза производного калихеамицина формулы VI

где J представляет собой

R₁ представляет собой

R₂ представляет собой

R₃ представляет собой Н;

R₄ представляет собой

R⁵ представляет собой -СН₃, -С₂Н₅ или -СН(СН₃)₂;

X представляет собой атом йода или брома;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает 0;

G представляет собой кислород;

Z¹ представляет собой С₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен;

W выбран из -О- и -S;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью; и

Z представляет собой

включающий взаимодействие линкерного промежуточного соединения формулы V

с метилтрисульфидным соединением СН₃-S-S-S-J в присутствии карбодиимида; тем самым синтезируя производное калихеамицина формулы VI.

15. Способ по п. 14, где метилтрисульфидное соединение CH₃-S-S-S-J представляет собой озогамицин.

16. Способ по п. 15, дополнительно включающий конъюгирование полученного производного калихеамицина формулы VI с моноклональным антителом, выбранным из инотузумаба и гемтузумаба.

17. Способ очистки производного калихеамицина формулы VI

где J представляет собой

R₁ представляет собой

R₂ представляет собой

R₃ представляет собой Н;

R₄ представляет собой

R⁵ представляет собой -СН₃, -С₂Н₅ или -СН(СН₃)₂;

X представляет собой атом йода или брома;

R⁵ представляет собой группу RCO, где R представляет собой водород, разветвленный или неразветвленный алкил из 1-10 атомов углерода;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает 0;

G представляет собой кислород;

Z¹ представляет собой C₁-С₅алкил с прямой или разветвленной цепью;

Ar представляет собой 1,2-, 1,3- или 1,4-фенилен;

W выбран из -О- и -S-;

Y представляет собой (С₁-С₆)алкиленовую группу с прямой или разветвленной цепью; и

Z представляет собой

включающий подвергание производного калихеамицина формулы VI процедуре очистки методом обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии.

18. Способ по п. 17, где процедура очистки методом обращенно-фазной высокоэффективной жидкостной хроматографии включает элюирование фазами, содержащими водные и органические смеси, и эти фазы имеют значение рН в пределах от примерно 4 до примерно 6.

19. Способ по п. 18, где производное калихеамицина формулы VI, полученное в результате процедуры обращенно-фазной очистки, затем подвергают процедуре твердофазной экстракции.

20. Способ по п. 18 или 19, где J представляет собой озогамициновую группировку.

21. Способ по п. 20, дополнительно включающий конъюгирование очищенного производного калихеамицина формулы VI с моноклональным антителом, выбранным из инотузумаба и гемтузумаба.

22. Способ синтеза соединения формулы II

где R¹² выбран из С₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

каждый R¹⁰ независимо выбран из водорода, R¹² и -OR¹²;

каждый из R⁸ и R⁹ независимо выбран из C₁-С₈алкила с прямой и разветвленной цепью;

r означает 0; и

G представляет собой кислород;

включающий обработку соединения формулы VII

где R¹⁶ представляет собой -С(=O)ОН;

азольным активирующим агентом формулы IX

где V' представляет собой кислород; и

где Е представляет собой

или ;

где m означает целое число 0, 1, 2 или 3; q означает целое число 0, 1 или 2; и р означает целое число 0, 1, 2, 3 или 4; и где каждый R¹⁷, присоединенный к Е, независимо выбран из (С₁-С₆)алкильных групп с прямой и разветвленной цепью;

в органическом растворителе с образованием соединения формулы VIII

с последующим объединением соединения формулы VIII с гидразином с получением в результате соединения формулы II.

23. Способ по п. 22, где азольный активирующий агент выбран из карбонилдиимидазола, карбонил-бис-пиразола, где каждый пиразол возможно замещен одной-тремя (С₁-С₆)алкильными группами; карбонил-бис-1,2,3-триазола, карбонил-бис-бензотриазола и карбонил-бис-1,2,4-триазола.

24. Способ по п. 22 или 23, где гидразин представляет собой безводный гидразин, моногидрат гидразина, водный раствор гидразина или тетрагидрофурановый раствор гидразина.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2017 года RU2640197C1

УСОВЕРШЕНСТВОВАННЫЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИДРАЗИДОВ	2008	Чиарелло Джордж А. Сахли Айман	RU2484849C2
WO 2007098124 A3, 30.08.2007
WO 2003092623 A2, 13.11.2003.

RU 2 640 197 C1

Авторы

Даггер Роберт Уэйн

Летендр Лео Джозеф

Пател Вималкумар Бабубхай

Прашад Амарнаут Шастрие

Чзан Чуньчунь

Даты

2017-12-27—Публикация

2014-10-28—Подача

название	год	авторы	номер документа
Бифункциональные цитотоксические агенты, содержащие CTI фармакофор	2016	Мадерна Андреас Субраманиам Чакрапани Тьюми Лоуренс Н. Чен Зеченг Касавант Джеффри М.	RU2682645C1
НОВЫЕ КОНЪЮГАТЫ АНАЛОГОВ СС-1065 И БИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ЛИНКЕРЫ	2011	Бескер Патрик Хенри Кауманс Руди Герардус Элизабет Элгерсма Роналд Христиан Менге Виро Михаэль Петрус Бернардус Йостен Йоханнес Альбертус Фредерикус Спейкер Хенри Йоханнес Де Грот Франсискус Маринус Хендрикус	RU2578719C9
НОВЫЕ КОНЪЮГАТЫ АНАЛОГОВ СС-1065 И БИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ЛИНКЕРЫ	2011	Бескер, Патрик, Хенри Кауманс, Руди Герардус Элизабет Элгерсма, Роналд, Христиан Менге, Виро, Михаэль, Петрус, Бернардус Йостен, Йоханнес, Альбертус, Фредерикус Спейкер, Хенри, Йоханнес Де Грот, Франсискус, Маринус, Хендрикус	RU2730502C2
ПРОИЗВОДНЫЕ ТЕТРАГИДРОНАФТАЛИНА И ТЕТРАГИДРОИЗОХИНОЛИНА В КАЧЕСТВЕ РАЗРУШИТЕЛЕЙ ЭСТРОГЕНОВОГО РЕЦЕПТОРА	2017	Крю, Эндрю, П. Цянь, Иминь Дун, Ханьцин Ван, Цзин Хорнбергер, Кейт, Р.	RU2797244C2
МОДУЛЯТОРЫ ПРОТЕОЛИЗА ЭСТРОГЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ И СВЯЗАННЫЕ С НИМИ СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ	2018	Цянь, Иминь Крю, Эндрю, П. Крюс, Крэйг, М. Дун, Ханьцин Хорнбергер, Кейт, Р. Ван, Цзин	RU2797808C2
ТРИГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ, ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ НА ИХ ОСНОВЕ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ РАКА	2004	Аттардо Джорджио Даири Кенза Лавалле Жан-Франсуа Риу Элиз Трипатхи Сасмита	RU2360913C2
МОДИФИЦИРОВАННЫЙ КРАСИТЕЛЬ РОДАМИНОВОГО РЯДА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В БИОЛОГИЧЕСКИХ АНАЛИЗАХ	2019	Эванс, Брайан Бенсон, Скотт Мулла, Хайруззаман Башар Янь, Сёнвэй	RU2809712C2
Модулирующие стабильность линкеры для использования с конъюгатами антитело-лекарственное средство	2015	Душин Расселл Джордж Строп Павел Дорывальская Магдалена Гразына Муан Людивин	RU2680238C2
МОДУЛЯТОРЫ ПРОТЕОЛИЗА И СООТВЕТСТВУЮЩИЕ СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ	2019	Крю, Эндрю, П. Хорнбергер, Кейт, Р. Ван, Цзин Дун, Ханьцин Берлин, Михаэль Крюс, Крэйг М.	RU2805511C2
ЛИГАНДЫ ЦЕРЕБЛОНА И БИФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, СОДЕРЖАЩИЕ ИХ	2018	Крю, Эндрю, П. Берлин, Михаэль Дун, Ханьцин Хорнбергер, Кейт, Р. Цянь, Иминь Снайдер, Лоуренс, Б. Ван, Цзин Циммерманн, Курт	RU2795146C2

Промежуточные соединения и способы синтеза производных калихеамицина Российский патент 2017 года по МПК C07C319/20 C07C319/28

Описание патента на изобретение RU2640197C1

Похожие патенты RU2640197C1

Реферат патента 2017 года Промежуточные соединения и способы синтеза производных калихеамицина

Формула изобретения RU 2 640 197 C1

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2017 года RU2640197C1

RU 2 640 197 C1