СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТАУРИНА И АЛЛАНТОИНА ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ ГЕЛЬ Российский патент 2018 года по МПК G01N33/15 G01N21/25 

Описание патента на изобретение RU2652355C1

Изобретение относится к области медицины и фармации, а именно к количественному определению таурина и аллантоина при совместном присутствии в лекарственных формах и смесях методом спектрофотомерии.

Таурин (2-аминоэтансульфоновая кислота) - условно незаменимая аминокислота, проявляющая антиоксидантное, мембраностабилизирующее действие, уменьшающая перекисное окисление липидов, стимулирующая репаративные процессы (Effect of taurine on wound healing / S. Dinger [et al.] // AminoAcids. - 1996. - Vol. 10. - P. 59-71).

Известен способ количественного определения таурина методом ВЭЖХ с предколоночной дериватизацией 2,4-динитрохлорбензолом (Determination of free amino acids and taurine in Sinonova culaconstricta with 2, 4-dinitrochlorobenzene precolumn derivatization, Wang Yue Hong, International Conferenceon New Technology of Agricultural Engineering - ICAE, 2011).

Недостатком известного способа является длительность пробоподготовки и количество реактивов, одним из которых является ацетонитрил (класс опасности - 3).

Известен способ количественного определения алифатических аминокислот (RU 2167410, G01N 21/78, 20.05.2001), где определение проводят путем обработки исследуемого образца 1% спиртовым раствором нингидрина в среде фосфатного буферного раствора с рН от 6,4 до 7,6 в присутствии 1 мг аскорбиновой кислоты. Полученный окрашенный раствор разбавляют водой и измеряют оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 568 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.

Недостатком указанного способа является неселективность методики вследствие того, что аминогруппы находятся как в молекуле аллантоина, так и в молекулах хитозана и таурина, что затрудняет количественное определение действующих веществ в разработанном композитном составе.

Известен способ количественного определения таурина с помощью формольного титрования (ФС.2.1.0039.15 Государственная Фармакопея XIII), где 0,15 г субстанции растворяют в 30 мл воды, прибавляют 5 мл формалина и титруют 0,1 М раствором натрия гидроксида до появления слабо-розового окрашивания (индикатор фенолфталеин) или определяют точку эквивалентности потенциометрически. Параллельно проводят контрольный опыт.

Недостатком указанного способа является неселективность метода при совместном присутствии таурина, хитозана и аллантоина.

Аллантоин - производное аминокислоты аланин. Образуется при окислении мочевой кислоты. Обладает антиоксидантными, антимутагенными свойствами (П.А. Федосов и др. Обоснование выбора компонентов и их совместимости для разработки ранозаживляющего геля на основе хитозана. Международный научно-исследовательский журнал. Екатеринбург. - 2015. - №9 (40). Часть 4. - С. 83-85).

Известен способ количественного определения аллантоина с фенилгидразином (Chen, Х.В. and M.J. Gomes, 1992. Estimation of microbial protein supply to sheep and cattle based on urinary excretion of purine derivatives An overview of the technical details, International Feed Resources Unit, Rowett Research Institute, Bucksburn Aberdeen AB2 9SB, UK Occasional Publication). Недостатком указанного способа является принадлежность фенилгидразина к 3 классу опасности.

Известен способ количественного определения аллантоина с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (Final report of the safety assessment of allantoin and its related complexes. Int J Toxicol. 2010 May; 29 (3 Suppl): 84S-97S. doi: 10.1177/1091581810362805).

Недостатком указанного способа является длительность пробоподготовки и большое количество реактивов.

Авторами настоящего изобретения была подана заявка РФ №2015115143, в которой приведен состав ранозаживляющего геля ХТА для наружного применения, включающий таурин, хитозан, аллантоин, уксусную кислоту, воду очищенную, разработанный гель обладает ранозаживляющим действием.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа проверки подлинности геля ХТА, а также определения количественного содержания таурина и аллантоина при совместном присутствии в лекарственных формах и смесях.

Техническим результатом изобретения является разработка экспрессного, точного, экономически целесообразного спектрофотометрического способа, позволяющего производить количественную оценку содержания таурина и аллантоина в лекарственной форме гель при совместном присутствии. Для выполнения анализа необходим распространенный спектрофотометр, время проведения анализа менее 1 часа вместе с пробоподготовкой, все используемые реактивы легко доступны.

Технический результат достигается осуществлением двух различных пробоподготовок с гелем, измерением оптической плотности полученных растворов и определением концентрации исследуемых веществ по калибровочным графикам, причем для количественного определения таурина к водному раствору геля, полученному из расчета на 100 мл 1,875 г геля и доведение объема водой, добавляют 0,1% спиртовой раствор 2,4-динитрохлорбензола и фосфатный буферный раствор с рН=9,18 в объемном соотношении 1:1:1, полученную смесь нагревают, разбавляют в соотношении смесь: вода 3:7, а оптическую плотность измеряют при длине волны 359±2 нм; а для количественного определения аллантоина раствор геля в 0,5 М гидроксида натрия, полученный из расчета на 100 мл 0.2 г геля и доведение объема гидроксидом натрия, разбавляли 1:9 0,5 М раствором гидроксида натрия, а оптическую плотность измеряют при длине волны 218±2 нм.

На фиг. 1 представлена метрологическая оценка результатов количественного определения таурина и аллантоина при совместном присутствии в геле на основе хитозана с таурином и аллантоином. На фиг. 2(а) и (b) представлены спектры поглощения таурина и аллантоина соответственно. На фиг. 3(а) и (b) приведены калибровочные графики таурина и аллантоина соответственно.

Пример

Проводили исследования геля ХТА на основе хитозана, таурина и аллантоина, описанного авторами в заявке РФ №2015115143.

Пробоподготовка №1 для количественного определения таурина: помещали 1,875 г геля ХТА в колбу на 100 мл и доводили водой очищенной до метки, осуществляли забор 1 мл получившегося раствора с добавлением 1,0 мл 0,1%-ного спиртового раствора (используя 95% этиловый спирт) 2,4-динитрохлорбензола и 1,0 мл фосфатного буферного раствора с рН=9,18. Нагревали полученную смесь на кипящей водяной бане с температурой 90°С в течение 30 мин, затем добавляли 7,0 мл воды очищенной, измеряли оптическую плотность на спектрофотометре при длине волны 359±2 нм. Оптическая плотность составляла 0,53±0,01, что соответствует концентрации таурина 73,52±0,85 мкг/мл. Статистическая обработка данных показала, что средняя ошибка определения количественного содержания таурина заявленным методом не превышала 1,19%.

Пробоподготовка №2 для количественного определения аллантоина: 0,2 г геля ХТА помещали в колбу на 100 мл и доводили до метки 0,5 М раствором гидроксида натрия, далее отбирали 10 мл полученного раствора в колбу на 100 мл и доводили 0,5 М раствором гидроксида натрия до метки, измеряли оптическую плотность конечного раствора при длине волны 218±2 нм. Оптическая плотность составляла 0,59±0,01, что соответствует концентрации аллантоина 10,05±0,05 мкг/мл. Статистическая обработка данных показала, что средняя ошибка определения количественного содержания аллантоина заявленным методом не превышала 0,72%.

Похожие патенты RU2652355C1

название год авторы номер документа
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТАУРИНА И АЛЛАНТОИНА ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ МЕТОДОМ ВЭЖХ 2017
  • Ворфоломеева Елена Викторовна
  • Федосов Павел Александрович
  • Провоторова Светлана Ильинична
  • Сливкин Алексей Иванович
  • Панов Алексей Валерьевич
  • Кедик Станислав Анатольевич
  • Фролов Владислав Геннадьевич
  • Николаевский Владимир Анатольевич
RU2643312C1
Способ количественного определения декспантенола и хитозана при их совместном присутствии в геле 2021
  • Доба Солайман Хассеб
  • Карлов Павел Михайлович
  • Бузлама Анна Витальевна
  • Гудкова Алевтина Алексеевна
  • Дагир Сали Руфаиль
  • Аль-Мардини Мухаммад Амир Мухаммад Махжуб
RU2760525C1
Способ количественного определения ионов алюминия атомно-абсорбционной спектрометрией с электротермической атомизацией 2022
  • Макарищева Дарья Дмитриевна
  • Трегубова Варвара Евгеньевна
  • Колесникова Оксана Николаевна
  • Устинникова Ольга Борисовна
RU2799235C1
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЦЕФАЛОСПОРИНОВЫХ АНТИБИОТИКОВ В БИОСРЕДАХ 2010
  • Кулапина Елена Григорьевна
  • Кулапина Ольга Ивановна
  • Утц Ирина Александровна
  • Михайлова Мария Сергеевна
RU2445624C2
СПОСОБ ПРОБОПОДГОТОВКИ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБРАЗЦОВ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ЙОДА 2023
  • Смолин Евгений Сергеевич
  • Иоутси Виталий Алексеевич
  • Усольцева Лилия Олеговна
  • Трошина Екатерина Анатольевна
  • Мокрышева Наталья Георгиевна
  • Дедов Иван Иванович
RU2808066C1
СПОСОБ АНАЛИЗА ГИМАТОМЕЛАНОВЫХ КИСЛОТ ПЕЛОИДОВ 2006
  • Аввакумова Надежда Петровна
  • Кривопалова Мария Ариевна
  • Катунина Елена Евгеньевна
  • Аввакумова Анна Альбертовна
  • Глубокова Мария Николаевна
RU2338188C2
Способ количественного определения содержания дубильных веществ с учетом их групповой принадлежности в лекарственных растительных препаратах 2018
  • Калинин Артем Михайлович
  • Антонова Наталия Петровна
  • Боковикова Татьяна Николаевна
  • Прохватилова Светлана Степановна
  • Шефер Елена Павловна
RU2691178C1
СПОСОБ АНАЛИЗА ГУМИНОВЫХ КИСЛОТ ПЕЛОИДОВ 2005
  • Аввакумова Надежда Петровна
  • Кривопалова Мария Ариевна
  • Ткаченко Михаил Лукич
  • Аввакумова Анна Альбертовна
  • Захарова Елена Александровна
  • Глубокова Мария Николаевна
  • Бонцевич Андрей Иванович
RU2312343C2
Определение полисорбата 80 в биологических лекарственных препаратах 2023
  • Рунова Ольга Борисовна
  • Коротков Михаил Геннадиевич
  • Устинникова Ольга Борисовна
RU2812788C1
СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ НАЛИЧИЯ ЦИАНИДИН-3-О-ГЛЮКОЗИДА В БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКОЙ ЖИДКОСТИ 2018
  • Апрелев Алексей Викторович
  • Давыдова Елена Викторовна
  • Прядка Алексей Александрович
  • Лавров Евгений Александрович
  • Смирнов Виталий Алексеевич
  • Оганесянц Лев Арсенович
  • Панасюк Александр Львович
  • Кузьмина Елена Ивановна
  • Егорова Олеся Сергеевна
RU2709021C1

Иллюстрации к изобретению RU 2 652 355 C1

Реферат патента 2018 года СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТАУРИНА И АЛЛАНТОИНА ПРИ СОВМЕСТНОМ ПРИСУТСТВИИ В ЛЕКАРСТВЕННОЙ ФОРМЕ ГЕЛЬ

Изобретение относится к области медицины и фармации, а именно к количественному определению таурина и аллантоина при совместном присутствии в лекарственных формах и смесях методом спектрофотомерии. Способ количественного спектрофотометрического определения таурина и аллантоина при совместном присутствии в лекарственной форме гель заключается в осуществлении двух различных пробоподготовок с гелем, измерении оптической плотности полученных растворов и определении концентрации исследуемых веществ по калибровочным графикам, причем для количественного определения таурина к водному раствору геля, полученному из расчета на 100 мл 1,875 г геля и доведение объема водой, добавляют 0,1% спиртовой раствор 2,4-динитрохлорбензола и фосфатный буферный раствор с рН=9,18 в объемном соотношении 1:1:1, полученную смесь нагревают, разбавляют в соотношении смесь: вода 3:7, а оптическую плотность измеряют при длине волны 359±2 нм; а для количественного определения аллантоина раствор геля в 0,5 М гидроксида натрия, полученный из расчета на 100 мл 0.2 г геля и доведение объема гидроксидом натрия, разбавляют 1:9 0,5 М раствором гидроксида натрия, а оптическую плотность измеряют при длине волны 218±2 нм. 3 ил., 1 пр.

Формула изобретения RU 2 652 355 C1

Способ количественного спектрофотометрического определения таурина и аллантоина при совместном присутствии в лекарственной форме гель, заключающийся в осуществлении двух различных пробоподготовок с гелем, измерении оптической плотности полученных растворов и определении концентрации исследуемых веществ по калибровочным графикам, причем для количественного определения таурина к водному раствору геля, полученному из расчета на 100 мл 1,875 г геля и доведение объема водой, добавляют 0,1% спиртовой раствор 2,4-динитрохлорбензола и фосфатный буферный раствор с рН=9,18 в объемном соотношении 1:1:1, полученную смесь нагревают, разбавляют в соотношении смесь : вода 3:7, а оптическую плотность измеряют при длине волны 359±2 нм; а для количественного определения аллантоина раствор геля в 0,5 М гидроксида натрия, полученный из расчета на 100 мл 0,2 г геля и доведение объема гидроксидом натрия, разбавляли 1:9 0,5 М раствором гидроксида натрия, а оптическую плотность измеряют при длине волны 218±2 нм.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2018 года RU2652355C1

Т.И.Ярыгина
РАЗРАБОТКА МЕТОДИКИ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ТАУФОНА (ТАУРИНА) / Вестник РУДН, серия Медицина, 2010, N 4, стр
Передвижной дровокольный станок 1913
  • Гольдберг С.
SU522A1
СПОСОБ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ ИМИДАЗОЛА (ГРУППЫ ИМИДАЗОЛИНА) 2014
  • Калашников Валентин Петрович
  • Сливкин Алексей Иванович
  • Дьяковва Нина Алексеевна
RU2597787C2
Устройство для поверхностной закалки индукционными токами цилиндрических деталей 1936
  • Романов Б.Н.
SU53185A1
Напитки безалкогольные и слабоалкогольные тонизирующие
Методы испытания, 01.01.2010.

RU 2 652 355 C1

Авторы

Федосов Павел Александрович

Провоторова Светлана Ильинична

Сливкин Алексей Иванович

Фролов Владислав Геннадьевич

Николаевский Владимир Анатольевич

Сафонова Елена Федоровна

Бузлама Анна Витальевна

Даты

2018-04-25Публикация

2017-03-06Подача