Способ диагностики миелодиспластического синдрома Российский патент 2018 года по МПК G01N33/50 

Изобретение относится к медицине и может быть применено для диагностики миелодиспластического синдрома.

Известен способ прогнозирования течения миелодиспластического синдрома с использованием цитогенетического критерия (1 - Bennet J.M. Meeting highlights: therapeutic strategies and supportive care in myelodysplastic syndromes: yesterday, today and tomorrow / Leuk. Res. - 1998. - May; 22 Suppl 1:S1-2), на основании которого выделяют относительно благоприятные (РА и РАС) и неблагоприятные (РАИБ и РАИБТ) формы миелодиспластического синдрома. Данный способ принят за аналог.

Известен способ диагностики миелодиспластического синдрома, принятый за прототип и отличающийся тем, что определяют уровень путресцина в моче пациента, по которому судят о наличии синдрома, и при содержании путресцина в моче менее 3,12 мкмоль/ммоль креатинина определяют относительно благоприятное течение заболевания, а при значении более 4,84 мкмоль/ммоль креатинина - неблагоприятное (2 - патент РФ №2213975, G01N 33/70, 2000).

Однако точность диагностики миелодиспластического синдрома способом-прототипом сравнительно ограничена.

Целью является повышение точности диагностики миелодиспластического синдрома.

Технический результат достигается тем, что определяют экспрессию гена фактора роста эндотелия сосудов VEGF-A и генов его рецепторов – VEGFR1 и VEGFR2 в мононуклеарных фракциях клеток пациентов и при превышении уровня экспрессии VEGF-A в 4 раза и более, экспрессии гена VEGFR1 в 1,5 раза и более и экспрессии гена VEGFR2 в 25 раз и более по сравнению с нормой судят о наличии миелодиспластического синдрома.

Способ реализуется следующим образом.

Больные поступают с жалобами на общую слабость, головокружение, одышку при физической нагрузке.

Из анамнеза известно, что около 2-3 месяцев одышка, сердцебиение при физической нагрузке. В гемограмме выявлена анемия (гемоглобин 55-65 г/л), лейкоцитоз до 25-29 тыс. и лимфоцитоз до 70-75%, СОЭ - 38-42 мм/ч. Рентгенологически: очаговых и инфильтративных изменений не выявлено. Корни фиброзно уплотнены. Диафрагма расположена обычно, контуры ее четкие. Тень сердца без особенностей. Для уточнения диагноза и подбора терапии был госпитализирован в онкогематологическое отделение. Проведено иммуноферментное исследование крови и костного мозга, исследование крови. По трепанобиоптату не исключалось миелопролиферативное заболевание, выявлено значительное повышение уровня антител к эритроцитам. После постепенной отмены преднизолона отмечалось появление множественных высыпаний по типу дерматита с признаками воспаления. На фоне введения дексаметазона, ципрофлоксацина - значительная регрессия высыпаний. Повторная госпитализация в онкогематологическое отделение для дообследования и лечения. Проведены гемотрансфузии, терапия гидреа, омез. Принимал преднизолон 10-12 табл. в день с хорошим эффектом. Высыпания регрессировали.

В онкогематологическом отделении проведена терапия Мабтерой 500 мг в/в капельно однократно, гемотрансфузии. Проведена гемотрансфузионная терапия. Проведена успешная гемотрансфузионная терапия. На фоне прием гидреа 500 мг в день. Последние 2 недели постепенно нарастают клинико-лабораторные признаки анемии.

Госпитализирован в онкогематологическое отделение для лечения.

Общее состояние средней степени тяжести (ECOG - 0-1). Достаточно активен. Телосложение нормостеничное, питание умеренное. Кожные покровы бледноватые, остаточные явления в виде дерматита на коже головы, рук, туловища. Периферические лимфоузлы мелкие и 0,8-1,0 см. Костно-мышечная система - без видимой патологии. Щитовидная железа - не увеличена.

Органы дыхания: Перкуторно над легкими легочный звук. Дыхание с жестковатым оттенком. ЧДД 16-18 в 1 минуту. Органы кровообращения: Тоны приглушены, пульс 72-80 ударов в 1 мин, ритмичный, ЧСС 72-80 в 1 мин, АД 110/60-125/75 мм рт.ст. Органы пищеварения: язык влажный, чистый. Живот мягкий безболезненный во всех отделах, участвует в акте дыхания. Печень по краю реберной дуги. Селезенка не пальпируется, размеры селезенки - 13/14×8/9 см. Стул ежедневный оформленный. Органы мочевыделения: область почек не изменена, симптом “поколачивания” отрицательный с обеих сторон, мочевыделение свободное, дизурии нет. ЦНС: в сознании, ориентирован в пространстве и времени, менингеальных симптомов нет.

Определяют экспрессию гена фактора роста эндотелия сосудов VEGF-A и генов его рецепторов – VEGFR1 и VEGFR2 в мононуклеарных фракциях клеток пациентов и при превышении уровня экспрессии VEGF-A в 4 раза и более, экспрессии гена VEGFR1 в 1,5 раза и более и экспрессии гена VEGFR2 в 25 раз и более по сравнению с нормой судят о наличии миелодиспластического синдрома. Проведено лечение, после которого проведен контрольный анализ крови.

Лечение: омез 20 мг×2 раза в день, аллопуринол 300 мг в день, Гемотрансфузии №5-6. ЭКГ: синусовый ритм, ЧСС 72-80 в 1 минуту. Синусовая тахикардия. Нормальное положение ЭОС.

Общий анализ крови: гемоглобин - 71-73 г/л, эритроциты - 2,46-2,9 млн, тромбоциты - 320-350 тыс., лейкоциты - 8-10 тыс., MCV - 83-85 Fl, бласты - 0%, промиелоциты - 0%, метамиелоциты - 0%, пал - 0%, сегм - 27-30%, эозин - 2-3%, базоф - 2,5-3,5%, пролимф - 0%, лимф - 42-44%, мон - 11-13%, СОЭ - 95-114 мм/ч.

Со стороны показателей красной крови отмечается положительная динамика.

Биохимический анализ крови: общ. белок - 71-73 г/л, альбумин - 36-38 г/л, АЛТ - 8-10 ед./л, ACT - 9-11 ед./л, общ. билирубин - 8-9 мкмоль/л, ЛДГ - 201-212 ед./л, креатинин - 86-90 мкмоль/л, мочевая кислота - 358-364 мкмоль/л, мочевина - 3,3-3,5 ммоль/л, калий - 4,0-4,5 ммоль/л, натрий - 135-140 ммоль/л, глюкоза - 4,8-5,0 ммоль/л, СРБ - 33-35 мг/л.

Общий анализ мочи: 1008-1010, реакция - 6,0-6,5, белок - 0 г/л, лейкоциты отр., нитриты отр., цвет соломенно-желтый, эритроциты отр., билирубин отр., кетоны отр., глюкоза отр., уробилиноген норма. Микроскопия осадка без особенностей.

Коагулограмма: АЧТВ - 24-26 сек, MHO-1,29-1,31, протромбин - 66-69%, ПТВ - 16-17,5 сек.

Группа крови 0(I) - отрицательная, Kell+положительная.

УЗИ: эхопризнаки гепатоспленомегалии, жировой инфильтрации печени, диффузных изменений почек. Селезенка - 135/140×50/55 мм.

Основной клинический диагноз при выписке: Хроническое миелопролиферативное заболевание/Миелодиспластический синдром: рефрактерная анемия с избытком бластов, с аутоиммунной гемолитической анемией (АИГА), спленомегалия. Выписан: с улучшением общего самочувствия, повысились показатели красной крови.

Пример 1

Больная М., 61 год, поступила с жалобами на одышку при физической нагрузке общую слабость, головокружение.

Из анамнеза известно, что около 2 месяцев одышка, сердцебиение при физической нагрузке. В гемограмме выявлена анемия (гемоглобин 55 г/л), лейкоцитоз до 25 тыс. и лимфоцитоз до 70%, СОЭ - 38 мм/ч. Рентгенологически: в легких патология не выявлена. Диафрагма расположена обычно, контуры ее четкие. Тень сердца без особенностей. Проведено иммуноферментное исследование крови и костного мозга, исследование крови. По трепанобиоптату не исключалось миелопролиферативное заболевание, выявлено значительное повышение уровня антител к эритроцитам. После постепенной отмены преднизолона отмечалось появление множественных высыпаний по типу дерматита с признаками воспаления. На фоне введения дексаметазона, ципрофлоксацина - значительная регрессия высыпаний. Повторная госпитализация в онкогематологическое отделение для дообследования и лечения. Проведены гемотрансфузии, терапия гидреа, омез. Принимала преднизолон 10 табл. в день с хорошим эффектом. Высыпания регрессировали.

Госпитализирована в онкогематологическое отделение для лечения.

Общее состояние средней степени тяжести (ECOG - 0-1). Достаточно активна. Телосложение нормостеничное, питание умеренное. Кожные покровы бледноватые, остаточные явления в виде дерматита на коже головы, рук, туловища. Периферические лимфоузлы мелкие и 0,8 см. Костно-мышечная система - без видимой патологии. Щитовидная железа - не увеличена.

Органы дыхания: Перкуторно над легкими легочный звук. Дыхание с жестковатым оттенком. ЧДД 16 в 1 минуту. Органы кровообращения: Тоны приглушены, пульс 72 ударов в 1 мин, ритмичный, ЧСС 72 в 1 мин, АД 110/60 мм рт.ст. Органы пищеварения: язык влажный, чистый. Живот мягкий безболезненный во всех отделах, участвует в акте дыхания. Печень по краю реберной дуги. Селезенка не пальпируется, размеры селезенки - 13×8 см. Стул ежедневный оформленный. Органы мочевыделения: область почек не изменена, симптом “поколачивания” отрицательный с обеих сторон, мочевыделение свободное, дизурии нет.

ЦНС: в сознании, ориентирована в пространстве и времени, менингеальных симптомов нет.

Определяют экспрессию гена фактора роста эндотелия сосудов VEGF-A и генов его рецепторов - VEGFR1 и VEGFR2 в мононуклеарных фракциях клеток пациентов. Установлено превышение уровня экспрессии VEGF-A в 4 раза, экспрессии гена VEGFR1 в 1,5 раза и экспрессии гена VEGFR2 в 25 раз по сравнению с нормой. Сделан вывод о наличии миелодиспластического синдрома. Проведено лечение, после которого проведен контрольный анализ крови.

Проведена терапия Мабтерой 500 мг в/в капельно однократно, гемотрансфузии на фоне прием гидреа 500 мг в день. Кроме того, лечение: омез 20 мг × 2 раза в день, аллопуринол 300 мг в день, Гемотрансфузии №5. ЭКГ: синусовый ритм, ЧСС 72 в 1 минуту. Синусовая тахикардия. Нормальное положение ЭОС.

Общий анализ крови: гемоглобин - 71 г/л, эритроциты - 2,46 млн, тромбоциты - 320 тыс., лейкоциты - 8 тыс., MCV - 83 Fl, бласты - 0%, промиелоциты - 0%, метамиелоциты - 0%, пал - 0%, сегм - 27%, эозин - 2%, базоф - 2,5%, пролимф - 0%, лимф - 42%, мон -11%, СОЭ - 95 мм/ч.

Со стороны показателей красной крови отмечается положительная динамика.

Биохимический анализ крови: общ. белок - 71 г/л, альбумин - 36 г/л, АЛТ - 8 ед./л, ACT - 9 ед./л, общ. билирубин - 8 мкмоль/л, ЛДГ - 201 ед./л, креатинин - 86 мкмоль/л, мочевая кислота - 358 мкмоль/л, мочевина - 3,3 ммоль/л, калий - 4,0 ммоль/л, натрий - 135 ммоль/л, глюкоза - 4,8 ммоль/л, СРБ - 33 мг/л.

Общий анализ мочи: 1008, реакция - 6,0, белок - 0 г/л, лейкоциты отр., нитриты отр., цвет соломенно-желтый, эритроциты отр., билирубин отр., кетоны отр., глюкоза отр., уробилиноген норма. Микроскопия осадка без особенностей.

Коагулограмма: АЧТВ - 24 сек, MHO-1,29, протромбин - 66%, ПТВ - 16 сек.

Группа крови 0(I) - отрицательная, Kell+положительная.

УЗИ: эхопризнаки гепатоспленомегалии, жировой инфильтрации печени, диффузных изменений почек. Селезенка - 135×50 мм.

Основной клинический диагноз при выписке: Хроническое миелопролиферативное заболевание/Миелодиспластический синдром: рефрактерная анемия с избытком бластов, с аутоиммунной гемолитической анемией (АИГА), спленомегалия.

Выписана: с улучшением общего самочувствия, повысились показатели красной крови.

Пример 2

Больной З., 77 лет, поступил с жалобами на общую слабость, головокружение, одышку при физической нагрузке.

Из анамнеза известно, что около 3 месяцев тому назад возникла одышка, сердцебиение при физической нагрузке. В гемограмме выявлена анемия (гемоглобин 65 г/л), лейкоцитоз до 29 тыс. и лимфоцитоз до 75%, СОЭ - 42 мм/ч. Рентгенологически: очаговых и инфильтративных изменений не выявлено. Корни фиброзно уплотнены. Диафрагма расположена обычно, контуры ее четкие. Тень сердца без особенностей. Для уточнения диагноза и подбора терапии был госпитализирован в онкогематологическое отделение. Проведено иммуноферментное исследование крови и костного мозга, исследование крови. По трепанобиоптату не исключалось миелопролиферативное заболевание, выявлено значительное повышение уровня антител к эритроцитам. Проведены гемотрансфузии, терапия гидреа, омез. Принимал преднизолон 10-12 табл. в день с хорошим эффектом. Высыпания регрессировали.

В онкогематологическом отделении проведена терапия Мабтерой 500 мг в/в капельно однократно, гемотрансфузии. Проведена гемотрансфузионная терапия. Проведена успешная гемотрансфузионная терапия. На фоне прием гидреа 500 мг в день.

Общее состояние средней степени тяжести (ECOG - 0-1). Активен. Телосложение нормостеничное, питание умеренное. Кожные покровы бледноватые, остаточные явления в виде дерматита на коже головы, рук, туловища. Периферические лимфоузлы мелкие, 1,0 см. Костно-мышечная система - без видимой патологии. Щитовидная железа - не увеличена.

Органы дыхания: Перкуторно над легкими легочный звук. Дыхание с жестковатым оттенком. ЧДД 18 в 1 минуту. Органы кровообращения: Тоны приглушены, пульс 80 ударов в 1 мин, ритмичный, ЧСС 80 в 1 мин, АД 110-125 мм рт.ст. Органы пищеварения: язык влажный, чистый. Живот мягкий безболезненный во всех отделах, участвует в акте дыхания. Печень по краю реберной дуги. Селезенка не пальпируется, размеры селезенки - 14×9 см. Стул ежедневный оформленный. Органы мочевыделения: область почек не изменена, симптом “поколачивания” отрицательный с обеих сторон, мочевыделение свободное, дизурии нет.

ЦНС: в сознании, ориентирован в пространстве и времени.

Определяют экспрессию гена фактора роста эндотелия сосудов VEGF-A и генов его рецепторов - VEGFR1 и VEGFR2 в мононуклеарных фракциях клеток пациентов. Определено превышение уровня экспрессии VEGF-A в 5 раз, экспрессии гена VEGFR1 в 2,7 раза и экспрессии гена VEGFR2 в 28 раз по сравнению с нормой. Поставлен диагноз - миелодиспластический синдром. Проведено лечение, после которого проведен контрольный анализ крови.

Лечение: омез 20 мг × 2 раза в день, аллопуринол 300 мг в день, Гемотрансфузии №6. ЭКГ: синусовый ритм, ЧСС 80 в 1 минуту. Синусовая тахикардия. Нормальное положение ЭОС.

Общий анализ крови: гемоглобин - 73 г/л, эритроциты - 2,9 млн, тромбоциты - 350 тыс., лейкоциты - 10 тыс., MCV - 85 Fl, бласты - 0%, промиелоциты - 0%, метамиелоциты - 0%, пал - 0%, сегм - 30%, эозин - 3%, базоф - 3,5%, пролимф - 0%, лимф - 44%, мон -13%, СОЭ - 114 мм/ч.

Со стороны показателей красной крови отмечается положительная динамика.

Биохимический анализ крови: общ. белок - 73 г/л, альбумин - 38 г/л, АЛТ - 10 ед./л, ACT - 11 ед./л, общ. билирубин - 9 мкмоль/л, ЛДГ - 212 ед./л, креатинин - 90 мкмоль/л, мочевая кислота - 364 мкмоль/л, мочевина - 3,5 ммоль/л, калий - 4,5 ммоль/л, натрий - 140 ммоль/л, глюкоза - 5,0 ммоль/л, СРБ - 35 мг/л.

Общий анализ мочи: 1010, реакция - 6,5, белок - 0 г/л, лейкоциты отр., нитриты отр., цвет соломенно-желтый, эритроциты отр., билирубин отр., кетоны отр., глюкоза отр., уробилиноген норма. Микроскопия осадка без особенностей.

Коагулограмма: АЧТВ - 26 сек, MHO-1,31, протромбин - 69%, ПТВ - 17,5 сек.

Группа крови 0(I) - отрицательная, Kell+положительная.

УЗИ: эхопризнаки гепатоспленомегалии, жировой инфильтрации печени, диффузных изменений почек. Селезенка - 140×55 мм.

Основной клинический диагноз при выписке: Хроническое миелопролиферативное заболевание/Миелодиспластический синдром: рефрактерная анемия с избытком бластов, с аутоиммунной гемолитической анемией (АИГА), спленомегалия. Выписан: с улучшением общего самочувствия, повысились показатели красной крови.

Проведена диагностика миелодиспластического синдрома у 19 больных. Повышение точности диагностики миелодиспластического синдрома подтверждено данными трепанобиопсии.

Источники информации

1. Bennet J.M. Meeting highlights: therapeutic strategies and supportiv care in myelodysplastic syndromes: yesterday, today and tomorrow / Leuk. Res. - 1998. - May; 22 Suppl 1:S1-2.

2. Патент РФ №2213975, G01N 33/70, 2000.

Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики миелодиспластического синдрома. В мононуклеарных фракциях клеток пациентов определяют экспрессию VEGF-A, VEGFR1 и VEGFR2. При превышении уровня экспрессии VEGF-A в 4 раза и более, экспрессии гена VEGFR1 в 1,5 раза и более и экспрессии гена VEGFR2 в 25 раз и более по сравнению с нормой судят о наличии миелодиспластического синдрома. Изобретение обеспечивает повышение точности диагностики миелодиспластического синдрома. 2 пр.

Способ диагностики миелодиспластического синдрома путем биохимического исследования, отличающийся тем, что определяют экспрессию гена фактора роста эндотелия сосудов VEGF-A и генов его рецепторов - VEGFR1 и VEGFR2 в мононуклеарных фракциях клеток пациентов и при превышении уровня экспрессии VEGF-A в 4 раза и более, экспрессии гена VEGFR1 в 1,5 раза и более и экспрессии гена VEGFR2 в 25 раз и более по сравнению с нормой судят о наличии миелодиспластического синдрома.