Способ моделирования ятрогенного повреждения желчевыводящих протоков на экспериментальном животном Российский патент 2018 года по МПК G09B23/28 A61B17/94 

Описание патента на изобретение RU2664622C2

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине, и может быть использовано для моделирования ятрогенного повреждения желчевыводящих протоков на свиньях. Выбор животных для экспериментального исследования определялся следующими факторами: 1) свиньи являются стандартным объектом для моделирования различного рода повреждений в биомедицинских исследованиях; 2) они обладают сопоставимой с человеком массой тела, сходными по строению и функционированию сердечнососудистой, дыхательной и пищеварительной системами, системой гемостаза [Adams D., McKinley М., 2009].

При ятрогенном повреждении желчевыводящих протоков (ЯПЖП) в зависимости от механизма повреждения (механическом, энергетическом) образуются микроскопические изменения стенки протока в области повреждения, которые представляют большой исследовательский интерес и играют важную роль в процессе выбора реконструктивно-восстановительных операций. Однако оценить распространенность этих изменений во время операции не представляется возможным, так как специальное нанесение ЯПЖП на человеке с целью исследования недопустимо, а забор биологического материала у человека, в данном случае проксимальной и дистальной культи пересеченного желчевыводящего протока, для проведения исследования невозможно по этическим соображениям.

Известен способ моделирования ближней-инфракрасной холангиографии на желчных протоках мышей, включающий исследование функции экскреции желчи при помощи липофильного ультрафиолетового флуоресцентного агента, который вводили внутривенно группе контрольных мышей в следующих условиях: 1) хронической обструкции желчных путей; 2) острой обструкции желчных путей; 3) перфорации желчных протоков и 4) холедо-холитиаз [Figueiredo J. et al., 2010]. Данная модель позволяет оценить экскрецию конкретного флуоресцентного агента и проходимость желчевыводящих протоков, в том числе и при их повреждении.

Недостатком данной модели является то, что оно не позволяет осуществлять исследования на желчевыводящих протоках морфологического характера, влияющего на выбор варианта хирургического вмешательства, направленного на его восстановление или реконструкция и носит только лишь диагностический характер.

Известен способ моделирования острого панкреатита у белой крысы, включающий блокирование выводных протоков поджелудочной железы путем установки катетера внутрь общего желчного протока через разрез его стенки; наложение 3 лигатур поверх катетера с обеих сторон от разреза протока и перед местом разветвления общего желчного протока на долевые печеночные; стимуляцию секреции поджелудочной железы подкожной инъекцией прозерина и внутрижелудочным введением смеси жирного мясного бульона с этиловым спиртом; определение в сыворотке крови протеолитических ферментов поджелудочной железы; изучение морфологических изменений в поджелудочной железе (заявка на изобретение РФ №99116 667, G09B 23/28, опубл. 10.05.2001).

Недостатком данного способа является то, что он проводился на маленьких биологических объектах, для достижения сопоставимого экспериментального исследования необходимо использование крупных биообъектов.

Известен способ моделирования острого деструктивного панкреатита у крыс, который позволяет разработать модель, наиболее оптимально соответствующую патогенетическим механизмам развития острого деструктивного панкреатита у человека. Вводят в общий желчный проток соли желчных кислот, при этом в него 0,3 мл буферного раствора, содержащего 0,3 г трис-гидроксиметил-аминометана и 0,6 г дезоксихолата натрия в 100 мл с pH 8,8, со скоростью потока 0,07 мл в минуту и регулируют площадь панкреонекроза наложением лигатур выше или ниже места впадения дополнительного протока поджелудочной железы (патент РФ №2236709, G09B 23/28, опубл. 20.05.2004).

Недостатком данного способа является то, что для изучения патогенеза острого деструктивного панкреатита необходимо выполнение хронического эксперимента позволяющего оценить морфологические изменения в паренхиме поджелудочной железы в течение нескольких фаз течения панкреатита.

Известен способ моделирования острого гнойного холангита у экспериментальных животных, в котором с целью получения технического результата в виде оптимизации модели острого гнойного холангита и максимального приближения к клиническому течению заболевания проводится лапаротомия, общий желчный проток берут на две держалки, проксимальная при этом выполняет функцию лигатуры, и завязывают ее на игле выше места пункции общего желчного протока сразу после введения в него штамма №195 гемолитической E.Coli в концентрации 1⋅105 КОЕ в 1 мл физиологического раствора в дозе 0,2 мл/кг массы с последующим ушиванием брюшной полости (патент РФ №2232430, G09B 23/28, опубл. 10.07.2004).

Недостатком данного способа является то, что согласно источникам литературы острый холангит возникает при концентрации E.Coli в концентрации 1⋅108 КОЕ, вводимый в данном случае концентрат мог быть недостаточным для моделирования максимально приближенного к клиническому течению острого холангита.

Предлагаемая нами модель ЯПЖП на свиньях является оригинальной и предназначена для создания травмы желчевыводящих путей с разным механизмом воздействия на протоки (механически и при помощи энергии), сопоставимой с ЯПЖП у человека при выполнении лапароскопической холецистэктомии (ЛХЭ). Реализация разработанной модели ЯПЖП позволяет создавать более точные сопоставимые с человеком травмы желчевыводящих путей и проводить связанные с ними экспериментальные исследования, которые могут быть направленны на реконструкцию и/или восстановление поврежденного протока. Применение лапароскопии позволяет минимизировать травму и величину кровопотери в отличие от открытой операции, позволяет воспроизвести ЯПЖП аналогично с повреждениями желчных протоков при ЛХЭ у человека.

Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе моделирования ЯПЖП на крупном экспериментальном животном - свинье, включающем седацию экспериментального животного, фиксацию опытного животного на лабораторном столе в положении «на спине» с разведенными в стороны и фиксированными конечностями, проведение анестезии и инфузионной терапии, формируют карбоксиперитонеум иглой Вереша над пупком с парциальным давлением углекислого газа 14 мм рт.ст. в условиях общей комбинированной анестезии с интубацией трахеи и искусственной вентиляцией легких (ИВЛ), вводят 4 троакара, для манипуляторов, а именно над пупком вводят троакар диаметром 10 мм, под мечевидным отростком - 2 троакара диаметром 5 мм на расстоянии 3 см друг от друга, а в правой подреберной области - троакар диаметром 5 мм, затем при помощи мягкого зажима и диссектора частично выделяют холедох из печеночно-двенадцатиперстной связки в месте впадения пузырного протока в общий печеночный проток, а через отдельный прокол передней брюшной стенки под мечевидным отростком диаметром 10 мм вводят клипатор диаметром 10 мм, клипируют холедох, с фиксацией 2-х клипс проксимальнее от места впадения пузырного протока и 1-й клипсы дистальнее; затем общий желчный проток (ОЖП) полностью пересекают ниже места впадения в пузырный проток, между 2-мя проксимальными и 1-й дистальной клипсой, при этом при механическом повреждении ОЖП пересекают при помощи эндоскопических ножниц, а при термическом повреждении - при помощи L-образного электрода для диссекции, под воздействием монополярного диатермического генератора, установленного в режиме диссекции в заданной силе тока 70А в течение всех диатермических воздействий.

Изобретение поясняется фиг. 1, на которой показано фото экспериментального животного (свиньи), фиксированного на операционном столе: произведена интубация трахеи для выполнения искусственной вентиляции легких аппаратом «MinorVet», фиг. 2, на которой показаны места введения троакаров для эндовидеохирургических инструментов и моделирования ЯПЖП: а - троакар 10 мм; б, в, г - троакары 5 мм, и фиг. 3, на которой представлена схема области нанесения ЯПЖП в эксперименте: а - желчный пузырь; б - 2 клипсы в области ОПП; в - 1 клипса в области ОЖП; г - место пересечения.

Способ моделирования ЯПЖП на экспериментальном животном включает седацию экспериментального животного, фиксацию опытного животного на лабораторном столе в положении «на спине» с разведенными в стороны и фиксированными конечностями, проведение анестезии и инфузионной терапии путем установки венозного катетера через большую ушную вену. После проведения этих предварительных процедур формируют карбоксиперитонеум иглой Вереша над пупком с парциальным давлением углекислого газа 14 мм рт.ст. в условиях общей комбинированной анестезии с интубацией трахеи и искусственной вентиляцией легких (фиг. 1). Для нанесения ЯПЖП мы использовали эндовидеохирургическую аппаратуру ЭФА-медика, позволяющую произвести доступ к общему желчному протоку через отдельные проколы на передней брюшной стенке от 5 мм до 10 мм. Вводят 4 троакара, для манипуляторов, а именно над пупком вводят троакар диаметром 10 мм, под мечевидным отростком - 2 троакара диаметром 5 мм на расстоянии 3 см друг от друга, а в правой подреберной области - троакар диаметром 5 мм (фиг. 2). Затем при помощи мягкого зажима и диссектора частично выделяют холедох из печеночно-двенадцатиперстной связки в месте впадения пузырного протока в общий печеночный проток, а через отдельный прокол передней брюшной стенки под мечевидным отростком диаметром 10 мм вводят клипатор диаметром 10 мм, клипируют холедох, с фиксацией 2-х клипс проксимальнее от места впадения пузырного протока и 1-й клипсы дистальнее (фиг. 3). Затем общий желчный проток (ОЖП) полностью пересекают ниже места впадения в пузырный проток, между 2-мя проксимальными и 1-й дистальной клипсой, при этом при механическом повреждении ОЖП пересекают при помощи эндоскопических ножниц, а при термическом повреждении - при помощи L-образного электрода для диссекции, под воздействием монополярного диатермического генератора, установленного в режиме диссекции в заданной силе тока 70А в течение всех диатермических воздействий. Эндотрахеальный наркоз и ИВЛ проводилось в течение 4 часов после завершения операции, а затем выводили из эксперимента с проведением секционного исследования.

Проведение острого эксперимента малоинвазивным способом позволило воспроизвести точную модель ЯПЖП. Техническим результатом изобретения явилась возможность проведения исследований на поврежденном протоке, путем его полного забора. Так после реализации изобретенной оригинальной модели ЯПЖП нами установлена возможность гистологического морфометрического исследования поврежденного протока, как проксимальной так дистальной культи протока, что недопустимо выполнять у людей при возникновении ЯПЖП (фиг. 4). Проведенное нами морфометрическое исследование позволило определить степень распространенности повреждения в зависимости от механизма воздействия на проток, несмотря на отсутствие макроскопических изменений в нем. Так, при механическом воздействии необратимые изменения в стенке протока возникли на расстоянии 3 мм от места диссекции, а при термическом повреждении на 7 мм, как в проксимальном, так и в дистальном направлениях [Майстренко Н.А. и соавт., 2016; Maystrenko N. et al., 2016]. Данные микроскопические изменения в стенке поврежденного протока должны учитываться при выполнении реконструктивно-восстановительных оперативных вмешательствах на протоках, а именно необходимо выполнять резекцию культи протока на 3 мм при механическом воздействии и на 7 мм при энергетическом.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Майстренко, Н.А. Острое повреждение желчевыводящих протоков / Н.А. Майстренко, П.Н. Ромащенко, А.К. Алиев, С.А. Сибирев // Вестник Российской Военно-медицинской академии. - 2016. - №1(53). - С. 124-130.

2. Adams, D. The Sheep / D. Adams, M. McKinley // [Электронный ресурс] ANZCCART Fact Sheet A9. - 2009. - URL: http://www.adelaide.edu.au.

3. Figueiredo, J. Intraoperative near-infrared fluorescent cholangiography (NIRFC) in mouse models of bile duct injury / J. Figueiredo, S. Cory, N. Matthias, R. Weissleder // World J. Surg. - 2010. Vol. №34. - P. 336-343.

4. Maystrenko, N. Acute injury of bile ducts / N. Maystrenko, P. Romashchenko, A. Aliev [et al.] // Research Journal of Medical Sciences - 2016. - Vol. №10 (1). - P. 740-744.

Похожие патенты RU2664622C2

название год авторы номер документа
СПОСОБ НАРУЖНОГО ДРЕНИРОВАНИЯ ЖЕЛЧНЫХ ПУТЕЙ ПРИ ЛАПАРОСКОПИЧЕСКОЙ ОПЕРАЦИИ 2002
  • Турбин М.В.
  • Черкасов М.Ф.
  • Ситников В.Н.
  • Ситникова Д.Э.
RU2218949C1
СПОСОБ ИНТРАОПЕРАЦИОННОЙ ДИАГНОСТИКИ ПАТОЛОГИИ ЖЕЛЧЕВЫВОДЯЩИХ ПРОТОКОВ ПРИ ЛАПАРОСКОПИЧЕСКИХ ОПЕРАЦИЯХ 2006
  • Редькин Александр Николаевич
  • Самойлов Владимир Сергеевич
  • Вдовин Виктор Васильевич
  • Чвикалов Евгений Сергеевич
  • Лебедев Дмитрий Николаевич
RU2310386C1
СПОСОБ ЭНДОВИДЕОХИРУРГИЧЕСКОЙ ХОЛЕЦИСТЭКТОМИИ 2006
  • Черкасов Михаил Федорович
  • Буриков Максим Алексеевич
RU2325131C1
СПОСОБ ЛАПАРОСКОПИЧЕСКОЙ ХОЛЕЦИСТЭКТОМИИ 1997
  • Никитенко А.И.
  • Никитенко Е.Г.
  • Желаннов А.М.
RU2123808C1
СПОСОБ ЛАПАРОСКОПИЧЕСКОЙ ХОЛЕЦИСТЭКТОМИИ 1998
  • Оноприев А.В.
RU2145198C1
Способ декомпрессии желчных протоков с клипированием культи пузырного протока и фиксацией к коже на тефлоновом проводнике 2022
  • Кабанов Максим Юрьевич
  • Яковлева Диана Михайловна
  • Семенцов Константин Валерьевич
  • Дегтерёв Денис Борисович
  • Беликова Мария Яковлевна
  • Савченков Дмитрий Константинович
  • Ежова Марина Павловна
  • Агурбаш Анастасия Николаевна
RU2786733C1
СПОСОБ ХИРУРГИЧЕСКОГО ЛЕЧЕНИЯ ОСЛОЖНЕННОГО ХРОНИЧЕСКОГО ПАНКРЕАТИТА 2000
  • Оноприев В.И.
  • Рогаль М.Л.
  • Гладкий Е.Ю.
RU2181027C1
СПОСОБ ПЛАСТИКИ ВНЕПЕЧЕНОЧНЫХ ЖЕЛЧНЫХ ПРОТОКОВ 2000
  • Оноприев В.И.
  • Марков П.В.
  • Григоров С.П.
RU2173958C1
СПОСОБ СТЕНТИРОВАНИЯ ЖЕЛЧНЫХ ПРОТОКОВ С ПОМОЩЬЮ ПОКРЫТОГО НИТИНОЛОВОГО САМОРАСПРАВЛЯЮЩЕГОСЯ БИЛИАРНОГО СТЕНТА 2019
  • Кабанов Максим Юрьевич
  • Яковлева Диана Михайловна
  • Семенцов Константин Валерьевич
  • Дегтерёв Денис Борисович
  • Здасюк Сергей Олегович
  • Алексеев Валентин Валериевич
  • Самко Кристина Витальевна
RU2722880C1
ВОЛНОВОД ДЛЯ КОНТАКТНОЙ УЛЬТРАЗВУКОВОЙ ЛИТОТРИПСИИ В ПРОСВЕТЕ ОБЩЕГО ЖЕЛЧНОГО ПРОТОКА 2013
  • Размахнин Евгений Владимирович
  • Лашук Николай Владимирович
  • Хышиктуев Баир Сергеевич
  • Лобанов Сергей Леонидович
  • Сепп Андрей Валентинович
RU2556519C2

Иллюстрации к изобретению RU 2 664 622 C2

Реферат патента 2018 года Способ моделирования ятрогенного повреждения желчевыводящих протоков на экспериментальном животном

Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования ятрогенного повреждения желчевыводящих протоков (ЯПЖП) на свиньях. Моделирование проводят на свинье. Способ включает седацию животного, фиксацию на лабораторном столе в положении «на спине» с разведенными в стороны и фиксированными конечностями, проведение анестезии и инфузионной терапии. Далее формируют карбоксиперитонеум иглой Вереша над пупком с парциальным давлением углекислого газа 14 мм рт.ст. в условиях общей комбинированной анестезии с интубацией трахеи и искусственной вентиляцией легких. Вводят 4 троакара для манипуляторов: над пупком троакар диаметром 10 мм, под мечевидным отростком - 2 троакара диаметром 5 мм на расстоянии 3 см друг от друга, а в правой подреберной области - троакар диаметром 5 мм. Затем при помощи мягкого зажима и диссектора частично выделяют холедох из печеночно-двенадцатиперстной связки в месте впадения пузырного протока в общий печеночный проток. Через отдельный прокол передней брюшной стенки под мечевидным отростком диаметром 10 мм вводят клипатор диаметром 10 мм. Клипируют холедох, с фиксацией 2-х клипс проксимальнее от места впадения пузырного протока и 1-й клипсы дистальнее. Затем общий желчный проток (ОЖП) полностью пересекают ниже места впадения в пузырный проток, между 2-мя проксимальными и 1-й дистальной клипсой. При механическом повреждении ОЖП пересекают при помощи эндоскопических ножниц. При термическом повреждении пересекают при помощи L-образного электрода для диссекции под воздействием монополярного диатермического генератора, установленного в режиме диссекции в заданной силе тока 70А в течение всех диатермических воздействий. Предложенная оригинальная модель при минимизации травмы и величины кровопотери сопоставима с ЯПЖП у человека при выполнении лапароскопической холецистэктомии, что позволяет проводить экспериментальные исследования, направленные на реконструкцию и/или восстановление поврежденного протока. 4 ил.

Формула изобретения RU 2 664 622 C2

Способ моделирования ятрогенного повреждения желчевыводящих протоков на крупном экспериментальном животном - свинье, включающий седацию экспериментального животного, фиксацию опытного животного на лабораторном столе в положении «на спине» с разведенными в стороны и фиксированными конечностями, проведение анестезии и инфузионной терапии, отличающийся тем, что формируют карбоксиперитонеум иглой Вереша над пупком с парциальным давлением углекислого газа 14 мм рт.ст. в условиях общей комбинированной анестезии с интубацией трахеи и искусственной вентиляцией легких (ИВЛ), вводят 4 троакара, для манипуляторов, а именно над пупком вводят троакар диаметром 10 мм, под мечевидным отростком - 2 троакара диаметром 5 мм на расстоянии 3 см друг от друга, а в правой подреберной области - троакар диаметром 5 мм, затем при помощи мягкого зажима и диссектора частично выделяют холедох из печеночно-двенадцатиперстной связки в месте впадения пузырного протока в общий печеночный проток, а через отдельный прокол передней брюшной стенки под мечевидным отростком диаметром 10 мм вводят клипатор диаметром 10 мм, клипируют холедох, с фиксацией 2-х клипс проксимальнее от места впадения пузырного протока и 1-й клипсы дистальнее; затем общий желчный проток (ОЖП) полностью пересекают ниже места впадения в пузырный проток, между 2-мя проксимальными и 1-й дистальной клипсой, при этом при механическом повреждении ОЖП пересекают при помощи эндоскопических ножниц, а при термическом повреждении - при помощи L-образного электрода для диссекции, под воздействием монополярного диатермического генератора, установленного в режиме диссекции в заданной силе тока 70А в течение всех диатермических воздействий.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2018 года RU2664622C2

FIGUEIREDO JL et al
Intraoperative near-infrared fluorescent cholangiography (NIRFC) in mouse models of bile duct injury
World J Surg
Приспособление для суммирования отрезков прямых линий 1923
  • Иванцов Г.П.
SU2010A1
СПОСОБ ФОРМИРОВАНИЯ ХОЛЕДОХОДУОДЕНОАНАСТОМОЗА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ 2002
  • Павлов В.Н.
  • Нартайлаков М.А.
  • Палтусов А.И.
RU2218103C1
СПОСОБ СОЗДАНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ МОДЕЛИ ПАНКРЕОНЕКРОЗА У КРЫС 2008
  • Ранцев Максим Анатольевич
  • Сарапульцев Петр Алексеевич
  • Дмитриев Анатолий Николаевич
  • Плаксин Кирилл Владимирович
  • Малков Артем Павлович
  • Медведева Светлана Юрьевна
RU2400820C2
Штамп для изготовления автоматических пробок для бутылок 1929
  • Гримм Л.Ю.
SU19192A1
CN 102440848 A, 09.05.2012
КРИГЕР А.Г
и др
Опасности, ошибки, осложнения при лапароскопических операциях на желчных путях
Анналы хирургической гепатологии
ЩИТОВОЙ ДЛЯ ВОДОЕМОВ ЗАТВОР 1922
  • Гебель В.Г.
SU2000A1
Кипятильник для воды 1921
  • Богач Б.И.
SU5A1
Печь для непрерывного получения сернистого натрия 1921
  • Настюков А.М.
  • Настюков К.И.
SU1A1
Пожарный двухцилиндровый насос 0
  • Александров И.Я.
SU90A1
YANG FQ et al
Затвор для дверей холодильных камер 1920
  • Комаров Н.С.
SU182A1
Hepatobiliary Pancreat Dis Int
Топчак-трактор для канатной вспашки 1923
  • Берман С.Л.
SU2002A1

RU 2 664 622 C2

Авторы

Майстренко Николай Анатольевич

Ромащенко Павел Николаевич

Алиев Арсен Камильевич

Даты

2018-08-21Публикация

2017-01-09Подача