Средство, обладающее антимикотической активностью на основе цветков трехреберника продырявленного Российский патент 2018 года по МПК A61K36/28 B01D11/02 A61P31/10 

Изобретение относится к медицине, в частности к фармации, и касается лекарственного средства растительного происхождения, обладающего антимикотической активностью. Предложено спиртовое извлечение из цветков трехреберника продырявленного. Цветки трехреберника обладают антимикотическим действием, нетоксичны.

В настоящее время арсенал антимикотических средств чрезвычайно велик. Среди них выделяют антимикотики различных фармакологических групп, антисептики. В этом качестве могут быть использованы и препараты на основе лекарственного растительного сырья.

Трехреберник продырявленный является малоизученным лекарственным растением, в отечественной фармации рассматривается как примеськ ромашке аптечной; за рубежом - как растение для озеленения. Трехреберник продырявленный встречается по всему миру и в отличие от ромашки аптечной более доступен в плане заготовки, в связи с неприхотливостью к условиям произростания. На данный момент нет примера о получении и применении в качестве противомикробного и антимикотического средства, представляющего собой настойку из цветков трехреберника.

Известно антимикотическое средство, [патент РФ 2352343, «Способ лечения микозов и гнойной инфекции», 20.04.2009], которое содержит водную примочку ихтиола и дополнительно содержащее спиртовую настойку почек тополя, смешанные из расчета 1 часть настойки на 10 частей ихтиола. Недостатком данного средства является комплексный состав, сложность изготовления средства. Также данный препарат может применяться только как наружное средство.

Известна фармацевтическая композиция, [патент РФ 2486912, «Средство для спринцевания влагалища в первую фазу лечения кандидозногокольпита (молочницы)», от 10.07.2013], которое представляет собой порошок, содержащий соль поваренную, соду пищевую и сухой экстракт ромашки аптечной (Matricaria chamomilla L), при определенном содержании компонентов. Данное средство является наиболее близким аналогом. Недостатком данного средства является длительность приготовления и экономическая затратность, связанные с получением сухого экстракта, а также необходимость приготовления раствора ex tempore.

Анализ биологически активных веществ, содержащихся в трехребернике продырявленном показал весьма незначительное содержание эфирного масла, но, в отличие от цветков ромашки, большое содержание фенольных соединений. Фармакологическое действие цветков ромашки связано с присутствуем эфирного масла, поэтому антимикотическое действие средства на основе цветков трехреберника, не очевидно.

Возможность использования спиртового извлечения из цветков трехреберника в качестве противомикотического средства из известного уровня техники не выявлена.

Технический результат заявленного изобретения состоит в расширении арсенала средств, обладающих антимикотической активностью, и содержащих спиртовое извлечение из цветков трехреберника продырявленного.

Спиртовое извлечение из цветков трехреберника характеризуются высоким содержанием флавоноидов, в том числе рутина и кверцетина, обладающих антимикотической активностью. Также здесь содержатся органические кислоты, среди них аскорбиновая кислота, оказывающая неспецифическое общестимулирующее влияние на организм, повышает адаптационные способности организма и его сопротивляемость к инфекциям; способствует процессам регенерации.

Технический результат достигается за счет того, что из цветков трехреберника продырявленного получают спиртовое извлечение, обладающее антимикотическим действием, путем экстракции в соотношении сырье: экстрагент - 1:10, с использованием в качестве экстрагента этанола с концентрацией 70-95%.

Предлагаемая нами совокупность признаков позволяет получить средство, устойчивое при хранении, обладающие антимикотической активностью. Новые средства расширяют сырьевую базу средств растительного происхождения, активных против Candida albicans, особенно у людей с непереносимостью к антибиотикам, что соответствует критерию «промышленная применимость».

Практически экстракт получают следующим образом: навеску сырья помещают в коническую колбу, заливают спиртом в концентрации 70-96%, в соотношении сырье: экстрагент - 1:10 и кипятят на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 минут. Именно такое соотношение сырья и экстрагента и концентрация спирта этилового позволяют получить экстракт с выраженной антимикотической активностью. Меньшее время экстракции не дает полный выход действующих веществ в экстракт, а большее время не рационально, так как содержание действующих веществ в экстракте практически не меняется, следовательно, уровень активности остается прежним. Полученное извлечение охлаждают при комнатной температуре, затем фильтруют через воронку с бумажным фильтром.

Пример 1.

Измельченное сырье цветков трехреберника массой 2 г помещали в коническую колбу и заливали 20 мл 70% этанола. Полученное извлечение охлаждали при комнатной температуре, затем фильтровали через воронку с бумажным фильтром и кипятили на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 минут.

Пример 2.

Измельченное сырье цветков трехреберника массой 2 г помещали в коническую колбу и заливали 20 мл 95% этанола. Полученное извлечение охлаждали при комнатной температуре, затем фильтровали через воронку с бумажным фильтром и кипятили на водяной бане с обратным холодильником в течение 30 минут.

Пример 3.

Антимикотическую активность экстрактов определяли на твердой питательной среде «Сабуро». Для этого на пластину среды «Сабуро» толщиной 5 мм с помощью шпателя засевали "газоном" Candida albicans, затем помещали в среду диски, пропитанные настойками. Чашки Петри со средами ставили в термостат при температуре 37°С. Через 24 часа определяли антимикробную и антимикотическую активность по зоне задержки роста тест-культур в миллиметрах. Единицы действия настоек в пересчете на бензилпенициллин определяли по калибровочному графику действия бензилпенициллина на Staphylococcus aureus, на котором по оси абсцисс отмечали диаметр зоны задержки роста микроорганизмов, по оси ординат -единицы действия бензилпенициллина.

Сумму дубильных веществ (фенольных соединений) определяли по методике ГФ XIII изд. ОФС 1.5.3.0008.15 «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах», метод 1. Полученные данные представлены в табл. 1.

Сумму флавоноидов, в пересчете на рутин, определяли путем спектрофотометрического метода. При проведении спектрофотометрического анализа флавоноидов основывались на методике, описанной в [Сорокина А.А., Марахова А.И., Ковалева Т.Ю., Станишевский Я.М. Фотометрические методы в анализе лекарственного растительного сырья и препаратов на его основе. Монография. Издательство РУДН. - Москва. - 2015. - 155 с.].

Полученные данные представлены в табл. 1.

Данные по антимикробной и антимикотической активности экстракта на основе цветков трехреберника представлены в табл 2.

При сравнении данных по антимикробной и антимикотической активности экстрактов цветков трехреберника и водно-спиртовых растворов с концентрацией спирта 70 и 95%, и зона задержки роста микроорганизмов в чашках Петри с дисками, пропитанными экстрактом, больше. Это свидетельствует о том, что антимикробный и антимикотический эффекты проявляются за счет свойств биологически активных соединений, входящих в состав экстрактов.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству, обладающему антимикотическим действием. Средство, обладающее антимикотическим действием, содержащее компоненты, извлеченные экстракцией из воздушно-высушенных цветков трехреберника продырявленного в соотношении сырье:экстрагент - 1:10, с использованием в качестве экстрагента водно-спиртового раствора с концентрацией этанола 70-95% путем экстрагирования с обратным холодильником. Вышеописанное средство обладает выраженным антимикотическим действием. 2 табл., 3 пр.

Средство, обладающее антимикотическим действием, содержащее следующие компоненты, извлеченные экстракцией из воздушно-высушенных цветков трехреберника продырявленного в соотношении сырье:экстрагент - 1:10, с использованием в качестве экстрагента водно-спиртового раствора с концентрацией этанола 70-95% путем экстрагирования с обратным холодильником при следующем соотношении извлеченных компонентов, мас. %:

дубильные вещества 8,6-9,2 флавоноиды 6,06 до 6,1 70-95% раствор этанола остальное