Способ идентификации цветков ромашки аптечной Российский патент 2018 года по МПК G01N21/33 A61K36/28 

Изобретение относится к фармакогностическому анализу, в частности к установлению подлинности (идентификации) цветков ромашки аптечной.

Определение подлинности лекарственного растительного сырья в настоящее время является особенно актуальным вопросом в связи с его импортом и появлением родственных по морфологии видов.

Часто встречающаяся в Средней полосе России примесь к цветкам ромашки аптечной - цветки трехреберника продырявленного.

Известным способом установления подлинности растительного сырья является макроскопический микроскопический анализ (ГОСТ 2237-93; ГФ XIII изд., ФС. 2.5.0037.15). Первый вид анализа часто затруднен. Это вызвано тем, что многие лекарственные растения обладают аберратными формами размножения (например, апомиксисом) или склонны к образованию межвидовых гибридов. Эти проблемы характерны для большого числа лекарственных растений семейств, среди которых сложноцветные (представитель - ромашка аптечная).

Известен пример спектрофотометрического анализа экстракта ромашки аптечной, где описаны полосы поглощения при 205, 254, 340, 370 нм {Павлова Лариса Викторовна. Экстракционно-хроматографическое определение физиологически активных компонентов «ромашки аптечной» и листьев «эвкалипта прутовидного»: дисс. … кандидата химических наук: 02.00.02 / Павлова Лариса Викторовна; Самара, 2015, С. 111). Однако в том же труде указано, что общий профиль спектра экстракта ромашки аптечной совпадает с профилем спектра поглощения экстракта эвкалипта прутовидного, не являющегося родственным видом. Таким образом, можно заключить, что данный подход не дает возможности однозначной идентификации лекарственного растительного сырья.

Микроскопический анализ достаточно трудоемкий и требует высокой квалификации специалиста.

Известен также молекулярно-биологический метод установления подлинности с использованием RAPD-анализа лекарственных растений (Баева Вера Михайловна. Фармакогностическое изучение лекарственных растений с использованием молекулярно-биологических методов: автореферат дис. … доктора фармацевтических наук : 15.00.02 / Баева Вера Михайловна; [Место защиты: Моск. мед. акад. им. И.М. Сеченова]. - Москва, 2009. - 48 с.). Однако этот метод требует дорогостоящего оборудования и расходных материалов.

Качественный химический анализ, основанный на тонкослойной хроматографии или качественных общегрупповых реакциях, предложенных в фармакопее, часто не дает однозначности в вопросах отличия лекарственного растительного сырья от примесей ввиду схожести химического состава.

Одним из наиболее перспективных способов установления подлинности лекарственных субстанций и препаратов является спектрофотометрический метод, который может быть использован в случае, если между определяемым веществом и примесью есть существенные различия в спектральных характеристиках или если подобраны условия, при которых эти различия проявляются.

Техническим результатом изобретения является упрощение подтверждения подлинности лекарственного растительного сырья - цветков ромашки аптечной.

Технический результат достигается путем сравнения абсорбционных спектров растворов, отличающийся тем, что способ идентификации цветков ромашки аптечной путем сравнения абсорбционных спектров растворов включает анализ растворов, содержащих спиртовые извлечения цветков ромашки аптечной и цветков трехреберника продырявленного, комплексообразователь и буферный раствор с рН, равным 4-5, спектрофотометрическим методом при длине волны 340±2 нм и при наличии максимума поглощения при указанной длине волны на спектре поглощения извлечения цветков идентифицируют цветки трехреберника продырявленного, а при отсутствии максимума поглощения извлечения цветков при указанной длине волны идентифицируют цветки ромашки аптечной. В качестве комплексообразователя используют алюминия хлорид.

Практически способ осуществляется следующим образом.

Навеску сырья (ромашки аптечной/трехреберника продырявленного) массой 0,5-2 г помещают в колбу со шлифом, заливают 100 мл 70% спирта этилового. Колбу соединяют с обратным холодильником и проводят экстракцию при нагревании на плитке с закрытой спиралью в течение 30 мин после закипания, поддерживая слабое кипение.

Полученное извлечение охлаждают, фильтруют. Аликвоту фильтрата, равную 1 мл, помещают в мерную колбу объемом 25 мл, добавляют 2 мл 2% спиртового раствора алюминия хлорида, 5 мл ацетатного буферного раствора с рН 4-5 и доводят до метки спиртом этиловым с концентрацией 70%.

Через 20-30 минут снимают спектр поглощения в диапазоне длин волн 300-550 нм на фоне раствора сравнения. Данное время выбрано в связи с тем, что комплекс флавоноидов с алюминия хлоридом до 20 минут образуется не количественно, а после 30 минут начинает разрушаться.

Раствор сравнения получают следующим образом: аликвоту фильтрата, равную 1 мл, помещают в мерную колбу объемом 25 мл, добавляют 2 мл 90% спирта этилового, 5 мл ацетатного буферного раствора с рН 4 и доводят до метки спиртом этиловым с концентрацией 70%.

Полученные спектры извлечения представлены на фиг. 1. Как видно, при длине волны 340±2 нм на спектре поглощения извлечения цветков трехреберника (2) присутствует максимум поглощения, которого нет на спектре поглощения извлечения цветков ромашки аптечной (1).

Предлагаемый способ прост, позволяет качественно отличить цветки ромашки аптечной от примеси - цветков трехреберника продырявленного.

При этом не требуется проведения трудоемкого, требующего высокой квалификации специалиста, микроскопического анализа.

Использование данного способа приводит к ускорению фармакогностического анализа, так как для доказательства подлинности можно может быть использовано то же извлечение, что и для количественного анализа на содержание флавоноидов.

Изобретение относится к фармакогностическому анализу, а именно к идентификации цветков ромашки аптечной. Способ включает анализ растворов, содержащих спиртовые извлечения цветков ромашки аптечной и цветков трехреберника продырявленного, комплексообразователь и буферный раствор с рН, равным 4-5, спектрофотометрическим методом при длине волны 340±2 нм, и при наличии максимума поглощения при указанной длине волны на спектре поглощения извлечения цветков идентифицируют цветки трехреберника продырявленного, а при отсутствии максимума поглощения извлечения цветков при указанных длинах волн идентифицируют цветки ромашки аптечной. Способ обеспечивает упрощение процесса подтверждения подлинности лекарственного растительного сырья - цветков ромашки аптечной. 1 з.п. ф-лы, 1 ил.

1. Способ идентификации цветков ромашки аптечной, позволяющий качественно отличить цветки ромашки аптечной от примеси – цветков трехреберника продырявленного путем сравнения абсорбционных спектров растворов, отличающийся тем, что анализируют растворы, содержащие спиртовые извлечения цветков ромашки аптечной и цветков трехреберника продырявленного, комплексообразователь и буферный раствор с рН, равным 4-5, спектрофотометрическим методом при длине волны 340±2 нм, и при наличии максимума поглощения при указанной длине волны на спектре поглощения извлечения цветков идентифицируют цветки трехреберника продырявленного, а при отсутствии максимума поглощения извлечения цветков при указанных длинах волн идентифицируют цветки ромашки аптечной.

2. Способ идентификации цветков ромашки аптечной, позволяющий качественно отличить цветки ромашки аптечной от примеси – цветков трехреберника продырявленного путем сравнения абсорбционных спектров растворов по п. 1, отличающийся тем, что в качестве комплексообразователя используют алюминия хлорид.