Способ получения микроклубней картофеля IN VITRO Российский патент 2018 года по МПК A01H4/00 

Описание патента на изобретение RU2671102C1

Изобретение относится к сельскому хозяйству, биотехнологии и семеноводству картофеля, в частности к способу получения микроклубней картофеля на агаризованной питательной среде с уменьшенным содержанием NH4NO3, увеличенной в два раза концентрацией хелата железа, добавлением 80 г/л сахарозы без каких-либо фитогормонов.

Известен способ ускоренного получения микроклубней (см. Трофимец Л.Н., Остапенко Д.П., Бойко В.В. и др. Оздоровление и ускоренное размножение семенного картофеля // Методические рекомендации, М, 1985, с. 36), который осуществляют путем выдерживания растений после черенкования в течение 12 суток при обычном 16-часовом фотопериоде и дальнейшим переводом на 30-45 дней на короткодневный - 10-12-часовой фотопериод.

Известен способ получения микроклубней из базальной части расчеренкованных растений картофеля, культивируемых in vitro на питательной среде, содержащей макро- и микроэлементы по прописи Мурасиге-Скуга, Fe-хелат, агар-агар, витамины по Уайту и сахарозу в количестве 80 г/л в темноте при температуре 8-10°C [патент РФ №2329639, МПК А01Н 4/00, опубл. 27.07.2008 г. (аналог)]. В питательную среду дополнительно вводят 3 мг/ л глицина, 1000-2000 мг/л активированного угля и 1-2 мг/л аскорбиновой кислоты.

Наиболее близким по технической сущности к заявленному изобретению является способ получения микроклубней за счет высадки одноузловых черенков пробирочных растений картофеля на агаризованную питательную среду, содержащую 80000 мг/л сахарозы и по 1 мг/л 6-БАП и кинетина, и культивирование их при 16-часовом фотопериоде и температуре 25°C с последующим переносом регенерантов на вторые-третьи сутки в условия полной темноты при температуре 18-20°C [патент KZ 24419 кл. А01Н 3/00, А01Н 4/00 опубл. 15.08.2011 (прототип)].

Недостатками данных способов является сложность создания условий получения микроклубней in vitro, а также необходимость использования дорогостоящих фитогормонов, стимулирующих клубнеобразование картофеля in vitro.

Техническим результатом заявленного изобретения является упрощенный способ получения микроклубней без использования фитогормонов за счет изменения минерального состава питательной среды и физических условий культивирования.

Указанный технический результат достигается тем, что культивируемые in vitro растения картофеля черенкуются и помещаются на питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы по прописи Мурасиге и Скуга, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу (см. таблицу 1). При достижении ими высоты 5-6 см в условиях ламинарного бокса в пробирки с растениями доливается охлажденная до 30°C разработанная питательная среда, состав которой указан в таблице 1. Затем пробирки с растениями помещают в условия полной темноты на 45-60 дней при температуре 21-25°C. В конце этого периода 98% растений образуют 1-2 микроклубня на 1 побег.

Использование разработанной питательной среды также эффективно при использовании в процессе получения микроклубней колб, банок и контейнеров. При этом зафиксирован факт увеличения выхода клубней при использовании емкостей большего объема - колб емкостью 100 мл и банок емкостью 200 мл по сравнению с использованием пробирок с 1-2 клубня на 1 побег в пробирках до 2-3 клубней на 1 побег в колбах и банках.

Экспериментально было установлено, что концентрация сахарозы в питательном растворе напрямую влияла на количество микроклубней. Влияние сахарозы на размер микроклубней было не достоверно (таблица 2).

Опытным путем было доказано, что температурный шок, вызванный доливом теплой питательной среды в культуральные сосуды с последующим помещением растений в темноту, стимулирует у них клубнеобразование без фитогормонов, что удешевляет производство микроклубней. Этому же способствует снижение концентрации аммонийного азота в питательной среде и повышение концентрации сахарозы до 80 г/л.

Данным способом микроклубни получаются физиологически зрелыми. Они хорошо хранятся в условиях пониженных температур (4-8°C) и в дальнейшем после высадки в открытый грунт позволяют получать хороший урожай оздоровленных семенных клубней. Предлагаемый способ получения микроклубней прост и не требует использования дорогостоящих фитогормонов. Его можно рекомендовать предприятиям, занимающимся производством оздоровленного посадочного материала картофеля.

Сущность предлагаемого способа получения микроклубней иллюстрируется следующим примером.

Пример 1. Меристемные растения, достигшие высоты, необходимой для черенкования, черенкуют в стерильных условиях. Полученные черенки помещают в пробирки, колбы или банки, в которые налита агаризованная питательная среда с минеральной основой по Мурасиге и Скугу (графа стандарт таблица 1) на высоту 1,0-1,5 см. При достижении ими высоты 5-6 см в условиях ламинарного бокса в пробирки с растениями доливается охлажденная до 30°C разработанная питательная среда, состав которой указан в таблице 1 до высоты 2,0-2,5 см. Затем пробирки с растениями помещают в условия полной темноты на 45-60 дней при температуре 21-25°C. Для экономии места возможно складировать культуральные сосуды в 2-3 яруса. В конце этого периода 98% растений образуют 1-2 микроклубня на 1 побег в пробирках и 2-3 клубня на 1 побег в колбах и банках. Полученные микроклубни отделяются от побегов, промываются 2-3 раза дистиллированной водой для удаления остатков питательной среды, просушиваются при комнатной температуре и направляются для хранения в условия пониженных температур 4-8°C. В дальнейшем микроклубни направляются на посадку в грунт или на реализацию семеноводческим хозяйствам.

Похожие патенты RU2671102C1

название год авторы номер документа
Способ получения микроклубней картофеля 2019
  • Гамбург Ким Захарович
RU2716413C1
СПОСОБ МИКРОКЛОНАЛЬНОГО РАЗМНОЖЕНИЯ КАРТОФЕЛЯ 2006
  • Паршина Светлана Александровна
  • Лукаткин Александр Степанович
RU2329639C2
Способ микроклонального размножения картофеля в культуре in vitro 2022
  • Чураков Андрей Андреевич
  • Попова Наталья Михайловна
RU2788851C1
СПОСОБ МИКРОКЛОНАЛЬНОГО РАЗМНОЖЕНИЯ КАРТОФЕЛЯ IN VITRO СОРТА КАРТОФЕЛЯ "ЕРМАК" 2016
  • Артюхова Светлана Ивановна
  • Киргизова Ирина Васильевна
RU2632938C2
СПОСОБ МИКРОКЛОНАЛЬНОГО РАЗМНОЖЕНИЯ КАРТОФЕЛЯ IN VITRO СОРТА КАРТОФЕЛЯ АЛЕНА 2016
  • Артюхова Светлана Ивановна
  • Киргизова Ирина Васильевна
RU2637361C1
Способ получения укорененного подвойного материала ВСЛ-2 invitro 2019
  • Батукаев Абдулмалик Абдулхамидович
  • Шаипов Адлан Нажмудинович
  • Эдельгериев Руслан Сайд-Хусайнович
  • Баматов Ибрагим Мусаевич
  • Буцаева Элина Минеровна
RU2732230C1
СПОСОБ КЛОНАЛЬНОГО МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ РАСТЕНИЙ 1994
  • Чережанова Л.В.
  • Овчинникова В.Н.
  • Мелик-Саркисов О.С.
RU2080780C1
Способ получения подвойного материала Гизела 5 и ВСЛ-2 в in vitro 2018
  • Батукаев Абдулмалик Абдулхамидович
  • Шаипов Адлан Нажмудинович
  • Эдельгериев Абубакар Сайд-Хусайнович
  • Баматов Ибрагим Мусаевич
  • Буцаева Элина Минеровна
RU2729832C1
Способ мультипликации подвойного материала Л-2 в условиях in vitro 2020
  • Баматов Ибрагим Мусаевич
  • Баматов Джабраил Мусаевич
  • Арсанов Магомед Маулаевич
RU2749614C1
Способ получения подвойного материала Л-2 в условиях in vitro 2021
  • Джабраилов Ахмед Лечаевич
  • Батукаев Абдулмалик Абдулхамидович
  • Адаев Нурбек Ломалиевич
RU2783895C1

Реферат патента 2018 года Способ получения микроклубней картофеля IN VITRO

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения микроклубней картофеля in vitro, включающий черенкование пробирочных растений и высадку одноузловых черенков на агаризованную питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы и витамины на основе прописи питательной среды Мурасиге и Скуга, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу. Согласно изобретению по достижении растением высоты 5-6 см в культуральный сосуд в асептических условиях ламинарного бокса доливается охлажденная до 30°C агаризованная питательная среда, содержащая макро- и микроэлементы и витамины на основе прописи питательной среды Мурасиге и Скуга, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу с уменьшенной до 220 мг/л концентрацией NH4NO3 и увеличенной до 80 г/л концентрацией сахарозы без каких-либо фитогормонов с последующим переносом растений в условия полной темноты при температуре 21-25°С на 45-60 дней. В конце этого периода 98% растений образуют 1-2 микроклубня на 1 побег в пробирках и 2-3 клубня на 1 побег в колбах и банках. Изобретение позволяет упростить получение микроклубней за счет отказа от использования в процессе их получения дорогостоящих фитогормонов. 2 табл., 1 пр.

Формула изобретения RU 2 671 102 C1

Способ получения микроклубней картофеля in vitro, включающий черенкование пробирочных растений и высадку одноузловых черенков на агаризованную питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы и витамины на основе прописи питательной среды Мурасиге и Скуга, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу, отличающийся тем, что по достижении растением высоты 5-6 см в культуральный сосуд в асептических условиях ламинарного бокса доливается охлажденная до 30°C агаризованная питательная среда, содержащая макро- и микроэлементы и витамины на основе прописи питательной среды Мурасиге и Скуга, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу с уменьшенной до 220 мг/л концентрацией NH4NO3 и увеличенной до 80 г/л концентрацией сахарозы без каких-либо фитогормонов с последующим переносом растений в условия полной темноты при температуре 21-25°С на 45-60 дней.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2018 года RU2671102C1

Установка для использования тепла остывающих чугунных чушек 1931
  • Богаевский О.А.
SU24419A1
КОЛАЧЕВСКАЯ О.О
Печь для непрерывного получения сернистого натрия 1921
  • Настюков А.М.
  • Настюков К.И.
SU1A1
Автореферат диссертации, Москва, 2015, с.5
СПОСОБ МИКРОКЛОНАЛЬНОГО РАЗМНОЖЕНИЯ КАРТОФЕЛЯ 2006
  • Паршина Светлана Александровна
  • Лукаткин Александр Степанович
RU2329639C2

RU 2 671 102 C1

Авторы

Сибиряткин Сергей Васильевич

Эдельгериев Абубакар Сайд-Хасанович

Баматов Ибрагим Мусаевич

Шаипов Адлан Нажмутдинович

Даты

2018-10-29Публикация

2017-12-29Подача