Способ прогнозирования развития дилатации левого предсердия у пациентов с нарушениями ритма сердца Российский патент 2019 года по МПК G01N33/68 G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования развития дилатации левого предсердия (ЛП) у пациентов с нарушениями ритма сердца.

Известно, что развитие дилатации ЛП является неблагоприятным фактором риска возникновения и прогрессирования нарушений ритма сердца [1]. Предсердия являются субстратом воздействия большинства факторов риска фибрилляции предсердий (ФП) (артериальная гипертензия, ожирение, длительные физические нагрузки, сахарный диабет, генетические нарушения), а их размер - маркером, позволяющим прогнозировать вероятность возникновения, прогрессирования ФП и ее рецидивирования после радиочастотной абляции.

Таким образом, создание способа прогнозирования риска развития дилатации ЛП у пациентов с нарушениями ритма сердца является весьма актуальным.

В проанализированной патентной и научной литературе адекватного прототипа не обнаружено.

Задачей изобретения является создание способа, позволяющего прогнозировать риск развития дилатации ЛП у пациентов с нарушениями ритма сердца.

Поставленная задача решается следующим образом. В условиях стационара пациентам выполняют исследование полиморфизма rs6684209 гена CASQ2 кодирующего белок кальсеквестрин. При обнаружении у пациента носительства генотипа СС гена CASQ2 прогнозируют повышенный риск развития дилатации ЛП. Такие пациенты нуждаются в более тщательном наблюдении для своевременной коррекции проводимой терапии.

Вне зависимости от этиологии ремоделирование ЛП, которое проявляется фиброзом и дилатацией миокарда, обуславливают появления очагов, поддерживающих ФП [2]. Интерстициальный фиброз в предсердном пейсмейкерном комплексе нарушает ритмовождение синоатриального узла, приводя к синдрому слабости синусового узла (СССУ), и увеличивает вероятность развития предсердной эктопии. Функциональные и структурные изменения образуют субстрат для развития как ФП, так и СССУ [3].

Нами впервые выявлена ассоциация полиморфизма гена CASQ2 с увеличением размера ЛП у пациентов с персистирующей формой ФП и СССУ. Получена статистически достоверная разница передне-заднего размера ЛП по данным эхокардиографического исследования у пациентов с генотипом СС и СТ гена кальсеквестрина. У пациентов с гетерозиготным генотипом белка кальсеквестрина размер ЛП достоверно меньше, чем с гомозиготным генотипом.

Прогнозирование развития дилатации ЛП позволит в дальнейшем выделять группы пациентов повышенного риска возникновения грозных тромбэмболических осложнений ФП, прогрессирования ФП с развитием хронической сердечной недостаточности.

Существенные признаки изобретения проявили в заявляемой совокупности новые свойства явным образом не вытекающие из уровня техники и не очевидные для специалиста. Идентичной совокупности признаков не обнаружено в патентной и научно-медицинской литературе.

Предлагаемый в качестве изобретения способ может быть применен в практическом здравоохранении для повышения качества лечения пациентов с нарушениями ритма.

Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности «новизна», «изобретательский уровень», «промышленная применимость».

Способ осуществляют следующим образом. У пациента с диагнозом ФП и СССУ забирают 2 мл венозной крови в вакутейнер с ЭДТА. Из этого биологического материала получают лейкоциты и выделяют ДНК.

Проводится полимеразная цепная реакция (ПЦР) с использованием праймеров, синтезированных ООО «ТестГен» (Россия). Структура прямого праймера: CCAGAACTATAAGCTGAATACACCA; структура обратного праймера: AATAATAATAAATCATAAAACCCATTTGATTTTTCTTGCACA. Амплификация выполняется при следующих условиях: первая денатурация при 95°С в течение 2 мин; затем 35 циклов: 94°С - 10 сек, 62°С - 20 сек, 72°С - 20 сек; последний синтез цепи при 72°С в течение 2 мин.

Для определения генотипов производится последующее расщепление продуктов ПЦР рестриктазой CASQ2-rs6684209 (BssT1I, НПО «СибЭнзим», Россия). Регистрация результатов рестрикции осуществляется электрофоретическим методом. Фрагмент длиной 207 пар нуклеотидов (п.н.) соответствует генотипу СС; фрагменты длиной 182 и 25 п. н. - генотипу ТТ; фрагменты длиной 207, 182, 25 п.н. - генотипу СТ. При выявлении носительства гомозиготного генотипа СС прогнозируется высокий риск развития дилатации ЛП.

Предлагаемый способ апробирован на 95 пациентах, имеющих нарушения ритма (средний возраст 61,1±14,3 лет). Генотип СС выявлен у 70 пациентов, передне-задний размер их ЛП составил 42,24±5,5 мм. Это статистически значимо больше (t=-2,65; р=0,009) чем у носителей генотипа СТ и ТТ.

Пример 1. Больной К. 60 лет находился в отделении хирургического лечения сложных нарушения ритма сердца и электрокардиостимуляции с 7.04.2017 по 12.04.2017 с диагнозом: ИБС: Стенокардия напряжения ФК I. Нарушение ритма в виде - Пароксизмальная форма фибрилляция предсердий. ХСН I. ФК II. фоновое: Гипертоническая болезнь III ст., достигнуты целевые значения АД. Ожирение I. Риск 4. Выполнена эхокардиография, передне-задний размер ЛП составил 50 мм. Пациенту взята кровь из кубитальной вены. Из лейкоцитов периферической крови выделены образцы ДНК и проведена полимеразная цепная реакция (ПЦР). Выполнена амплификация ДНК и расщепление продуктов ПЦР с использованием рестриктазы CASQ2-rs6684209. При разделении продуктов рестрикции получился фрагмент длиной 207 пар нуклеотидов (п.н.), что соответствует генотипу СС. Определено, что пациент имеет высокий риск развития дилатации ЛП.

Пациенту проведена операция РЧА ФП. Подобрана антиаритмическая и антикоагулянтная терапия. Выписан в удовлетворительном состоянии.

Пример 2. Больная С. 78 лет находилась в отделении хирургического лечения сложных нарушения ритма сердца и электрокардиостимуляции с 12.04.2017 по 20.04.2017 с диагнозом: ИБС: Стенокардия напряжения ФК П. Нарушение ритма в виде - синдрома слабости синусового узла I типа. Эквиваленты синдрома МЭС. ХСН IIA. ФК II. Фоновое: Гипертоническая болезнь III ст., достигнуты целевые значения АД. Атеросклероз сонных артерий. Риск 4. Выполнена эхокардиография, передне-задний размер ЛП составил 45 мм. Пациентке взята кровь из кубитальной вены, проведен анализ полиморфизма rs6684209 гена CASQ2. Выявлен генотип СС. Пациентке имплантирован двухкамерный электрокардиостимулятор. Выписана в удовлетворительном состоянии.

Предлагаемый в качестве изобретения способ апробирован на 95 больных с нарушениями ритма сердца и позволяет выявлять пациентов с высоким риском развития дилатации ЛП, что позволяет своевременно скорректировать проводимую терапию и повысить качество лечения нарушения ритма сердца.

Список литературы:

1. Nabauer М., Gerth A., Limbourg Т., et al. The Registry of the German Competence NETwork on Atrial Fibrillation: patient characteristics and initial management. Europace 2009; 11: 423-434

2. Tsang TS, Gersh BJ, Appleton CP, et al. Left ventricular diastolic dysfunction as a predictor of the first diagnosed nonvalvular atrial fibrillation in 840 elderly men and women. J Am Coll Cardiol. Nov 6 2002; 40(9): 1636-1644.

3. Glukhov AV, Kalyanasundaram A, Lou Q. et al. Calsequestrin 2 deletion causes sinoatrial node dysfunction and atrial arrhythmias associated with altered sarcoplasmic reticulum calcium cycling and degenerative fibrosis within the mouse atrial pacemaker complex. Eur Heart J. 2015; 14;36(11):686-97

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и представляет собой способ прогнозирования развития дилатации левого предсердия у пациентов с нарушениями ритма сердца, характеризующийся тем, что пациентам проводят генотипирование, определяют полиморфизм rs6684209 гена кальсеквестрина CASQ2 и при выявлении носительства генотипа СС прогнозируют высокий риск развития дилатации левого предсердия. Изобретение обеспечивает выявление пациентов с высоким риском развития дилатации левого предсердия и прогрессирования пароксизмальной и персистирующей форм фибрилляции предсердий и синдромом слабости синусового узла. 2 пр.

Способ прогнозирования развития дилатации левого предсердия у пациентов с нарушениями ритма сердца, характеризующийся тем, что пациентам проводят генотипирование, определяют полиморфизм rs6684209 гена кальсеквестрина CASQ2 и при выявлении носительства генотипа СС прогнозируют высокий риск развития дилатации левого предсердия.