Способ оценки эффективности нейроретинопротекции первичной открытоугольной глаукомы на основе определения нейронспецифической энолазы Российский патент 2019 года по МПК G01N33/50 

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для оценки эффективности нейроретинопротекции в консервативном лечении первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ).

Первичная открытоугольная глаукома (ПОУГ) - характеризуется дегенерацией ганглиозных клеток сетчатки. Потеря ганглиозных клеток сетчатки (ГКС) связана с уровнем внутриглазного давления (ВГД), но другие факторы также могут играть определенную роль [Weinreb R.N., Aung Т., and Medeiros F.A. The Pathophysiology and treatment of glaucoma. JAMA. 2014; 311(18):1901-1911]. Биологическая основа глаукомы плохо изучена, и факторы, способствующие ее прогрессированию, не были полностью охарактеризованы [Nickells RW, Howell GR, Soto I, John SW. Under pressure: cellular and molecular responses during glaucoma, a common neurodegeneration with axonopathy. Annu Rev Neurosci. 2012; 35:153-179].

Повышение ВГД при ПОУГ вызывает механическую компрессию и деформацию решетчатой пластинки и прилегающих тканей [Quigley НА, Addicks ЕМ, Green WR, Maumenee АЕ. Optic nerve damage in human glaucoma, II: the site of injury and susceptibility to damage. Arch Ophthalmol. 1981; 99(4):635-649], что приводит к повреждению аксонов и нарушению аксонального переноса, а также прерывает ретроградную доставку основных трофических факторов в ГКС [Burgoyne CF, Downs JC, Bellezza AJ, Suh JK, Hart RT. The optic nerve head as a biomechanical structure: a new paradigm for understanding the role of IOP-related stress and strain in the pathophysiology of glaucomatous optic nerve head damage. Prog Retin Eye Res. 2005; 24(1):39-73]. В связи с вышеизложенным актуальна оценка состояния нейрональной сетчатки на молекулярном уровне при нейроретинопротекторной терапии ПОУГ.

Известен способ оценки прогностической значимости нейронспецифической энолазы (neuron specific enolase или NSE) в диагностике оптических невритов. При этом исследуется содержание NSE в слезной жидкости (СЖ) и в сыворотке крови (СК) у больных с невритом зрительного нерва. Описанная патология также сопровождается повреждением зрительного нерва, но не может в полном объеме охарактеризовать глаукомный процесс [Камилов Х.М., Касимова М.С., Хамраева Г.Х. Специфический маркер нейродегенерации при диагностике оптических невритов // Офтальмология. 2015; 12(2):25-30].

В диссертационной работе Н.А. Юдиной (2013) описано содержание NSE у пациентов с ПОУГ в разных стадиях: в начальной стадии - 5,715 нг/мл, в развитой стадии - 6,989 нг/мл и далекозашедшей стадии - 8,58 нг/мл. В исследовании не измеряли динамику NSE на фоне лечения [Юдина, Н.А. Некоторые патегенетические механизмы первичной открытоугольной глаукомы /Н.А. Юдина// дисс. … канд. мед. наук. Чита. - 2013. С. 111].

Наиболее близким аналогом изобретения является способ определения содержания NSE и аутоантител к ней в слезной и внутриглазной жидкостях у больных ПОУГ [Цыбиков Н.Н., Заиграева Н.А., Харинцева С.В. и др. Содержание нейроспецифической енолазы и аутоантител в слезной и внутриглазной жидкостях у больных с открытоугольной глаукомой (предварительное сообщение) // Вестник офтальмологии. 2012. №2. - с. 49-51]. Однако этот способ не включает определение изменения уровня NSE на фоне лечения.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа оценки эффективности нейроретинопротекции ПОУГ.

Технический результат при использовании изобретения - повышение точности диагностики ПОУГ за счет получения достоверных критериев оценки эффективности нейроретинопротекции.

Предлагаемый способ оценки эффективности нейроретинопротекции ПОУГ осуществляется следующим образом. У пациентов с ПОУГ до и после 10-тидневного курса нейроретинопротекции, включавшего местное гипотензивное лечение и внутримышечное введение препарата «Ретиналамин^®» (ООО ГЕРОФАРМ, Санкт-Петербург) согласно инструкции применения препарата, рекомендованной производителем, осуществляют сбор СЖ с обоих глаз. Методом иммуноферментного анализа (ИФА) (Multiskan, Финляндия) с помощью набора реагентов для иммуноферментного определения концентрации нейронспецифической энолазы (АО «Вектор-Бест», Россия) определяют содержание NSE в СЖ. При снижении уровня NSE в слезной жидкости не менее чем на 20% от исходного показателя лечение считают эффективным. При снижении содержания менее чем на 20% от исходного показателя или повышении показателя лечение считают не эффективным.

Обоснованием заявляемого способа являются результаты исследования содержания NSE в СЖ до и после лечения у 25 пациентов (50 глаз) с ПОУГ II и III стадии в возрасте 66,3±10,8 лет. Группу контроля составили здоровые лица в количестве 6 человек (12 глаз). Для статистического анализа данных был использован программный пакет Statistica 12.0. Количественные данные обработаны методами описательной статистики и представлены в виде средней арифметической и ее стандартного отклонения. Достоверность различий между пациентами разных групп наблюдения подтверждена непараметрической статистикой (критерий Манна - Уитни, Уилкоксона). Сопоставимость выборки проверен критерием Шапиро-Уилка. Достоверность различий считалась значимым при р<0,05.

Лечение включало внутримышечное введение «Ретиналамина^®» в дозе 5 мг 1 раз в день в течение 10 дней. Препарат предварительно растворяли в 1-2 мл воды для инъекций. Всем пациентам до и после курса лечения определяли авторефрактометрию, визометрию, тонометрию, периметрию, офтальмоскопию и биомикроскопию на щелевой лампе, а также сбор слезной жидкости для определения содержания NSE. Средние показатели остроты зрения у пациентов без коррекции равнялись 0,51±0,30, максимально корригируемая острота зрения - 0,70±0,34. Средний уровень ВГД у пациентов с ПОУГ составил 19,50±2,52 мм рт.ст. Результаты суммарной периметрии по 8 меридианам равнялась 332±92,7. Все пациенты получали различные виды местной гипотензивной терапии. После проведенной нейроретинопротекторной терапии с препаратом «Ретиналамин^®» отмечалось некоторое статистически недостоверное улучшение показателей остроты зрения, ВГД и поля зрения. Средние показатели остроты зрения у пациентов без коррекции равнялись 0,53±0,21, максимально корригируемая острота зрения - 0,74±0,29. Средний уровень ВГД у пациентов с ПОУГ составил 18,10±2,0 мм рт.ст. Результаты суммарной периметрии по 8 меридианам равнялась 341,0±86,5. После лечения у 72% (36 глаз) больных отмечалась статистически достоверное снижение уровня NSE не менее 20% от исходного (р<0,05). У 4% (2 глаз) пациентов отмечалось снижение менее 20%, а также у 24% (12 глаз) больных установлен статистически недостоверное повышение NSE в слезной жидкости (р>0,05).

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Больная Н., 50 лет, диагноз ПОУГ II а стадии.

Гиперметропия слабой степени.

ВГД (БТ) 20/19 мм рт.ст.

Биомикроскопия: роговица прозрачная, передняя камера средней глубины, зрачок круглый, реакция на свет сохранена. Хрусталик прозрачный, стекловидное тело прозрачное. Глазное дно: OU - диск зрительного нерва бледный, границы четкие, расширение физиологической экскавации, артерии узкие, вены умеренно полнокровные.

Суммарное поле зрения: OD - 330. OS - 340.

Уровень NSE в слезной жидкости до лечения составил OD - 0,823 нг/мл,

OS-1,121 нг/мл.

ВГД (БТ) 18/18 мм рт.ст.

Биомикроскопия: роговица прозрачная, передняя камера средней глубины, зрачок круглый, реакция на свет сохранена. Хрусталик прозрачный, стекловидное тело прозрачное. Глазное дно: OU - диск зрительного нерва бледный, границы четкие, расширение физиологической экскавации, артерии узкие, вены умеренно полнокровные.

Суммарное поле зрения: OD - 335. OS - 355.

В результате лечения данный показатель снизился до OD - 0,263 нг/мл, (снижение на 68,04%), OS - 0,180 (снижение на 83,94%).

У пациента в динамическом наблюдении через 3, 6 месяцев показатели остроты зрения и поля зрения оставались стабильными.

Авторефрактометрия: OD:+0,25+0,25 ах 9

OS:+0,25+0,0 ax 30

ВГД (БТ) 18/17.

Биомикроскопия: роговица прозрачная, передняя камера средней глубины, зрачок круглый, реакция на свет сохранена. Хрусталик частично - мутный, стекловидное тело прозрачное. Глазное дно: OU - диск зрительного нерва бледноватый, границы четкие, расширение физиологической экскавации, артерии узкие, вены полнокровные.

Суммарное поле зрения: OD - 400. OS - 410.

Уровень NSE в слезной жидкости до лечения составил OD - 1,741 нг/мл,

OS-1,609 нг/мл.

ВГД (БТ) 18/18.

Биомикроскопия: роговица прозрачная, передняя камера средней глубины, зрачок круглый, реакция на свет сохранена. Хрусталик частично - мутный, стекловидное тело прозрачное. Глазное дно: OU - диск зрительного нерва бледноватый, границы четкие, расширение физиологической экскавации, артерии узкие, вены полнокровные.

Суммарное поле зрения: OD - 395. OS - 415.

В результате лечения уровень BDNF снизился до OD - 1,502 нг/мл, (снижение на 13,73%), OS - 1,301 (снижение на 19,1%).

В динамическом наблюдении пациента выявлено сужение полей зрения через 6 месяцев, а также фиксировано неоднократное повторное обращение пациента к офтальмологу.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и представляет собой способ оценки эффективности нейроретинопротективного лечения первичной открытоугольной глаукомы с применением препарата Ретиналамина, включающий определение содержания нейронспецифической энолазы (neuron specific enolase или NSE) в слезной жидкости, согласно изобретению ее определяют до и после лечения и при снижении содержания NSE не менее чем на 20% от исходного показателя результат нейроретинопротекции оценивают как эффективный. Использование изобретения повышает точность диагностики ПОУГ за счет получения достоверных критериев оценки эффективности нейроретинопротекции. 2 пр.

Способ оценки эффективности нейроретинопротективного лечения первичной открытоугольной глаукомы с применением препарата Ретиналамина, включающий определение содержания нейронспецифической энолазы (neuron specific enolase или NSE) в слезной жидкости, отличающийся тем, что ее определяют до и после лечения и при снижении содержания NSE не менее чем на 20% от исходного показателя результат нейроретинопротекции оценивают как эффективный.