Субстанция и способ для модуляции активности агента в организме Российский патент 2019 года по МПК A61K39/395 A61K49/00 A61K49/18 

Изобретение относится к области биомедицины и наномедицины. Изобретение позволяет увеличивать диагностическую и терапевтическую эффективность различных агентов (в т.ч. диагностических или терапевтических агентов на основе нано- и микрочастиц), улучшать эффективность доставки агентов к их мишеням в организме (в т.ч. направленной или пассивной доставки веществ к клеткам-мишеням и т.п.), а также увеличивать время циркуляции агентов в кровотоке, что в том числе может быть использовано для повышения эффективности существующих лекарственных препаратов, а также создания новых агентов, препаратов и методов для диагностики, мониторинга и терапии различных заболеваний и состояний организма.

В последнее время наблюдается неуклонный рост использования нанотехнологий в биологии и медицине, а также других областях науки и техники. При лечении заболеваний наночастицы имеют ряд преимуществ перед обычными молекулярными лекарствами, например, они обладают способностью переносить большое количество препарата, защищая его от распада, способностью осуществления целевой доставки при использовании даже низкоафинных рецепторов за счет их многоточечного связывания наночастиц с мишенями. Кроме того, наночастицы используются для диагностики заболеваний, как метки в различных биосенсорах, а также - в качестве контрастирующих агентов. Особый интерес вызывает применение различных наночастиц для лечения и диагностики таких заболеваний, как рак, инсульт, атеросклероз, инфекционных заболеваний (McAteer, М.А., et al. In vivo magnetic resonance imaging of acute brain inflammation using microparticles of iron oxide, Nat Med. vol. 13, pp. 1253-1258, 2007) и др. Так, например, магнитные наночастицы на основе оксидов железа являются очень интересными агентами для диагностики и терапии заболеваний. В настоящее время они уже допущены для внутривенных инъекций человеку в качестве контрастирующих веществ при магнитно-резонансной томографии, проходят клинические испытания для гипертермии раковых опухолей и магнитоуправляемой очистки крови от токсинов, сепарации клеток, кроме того, магнитные частицы перспективны для магнитоуправляемой доставки лекарственных препаратов.

Важной задачей является разработка универсальных подходов, позволяющих увеличивать эффективность доставки лекарственных препаратов к мишеням в организме и повышающих эффективность диагностики и терапии различных заболеваний и состояний организма с помощью таких агентов.

Так, например, известен способ (WO 2009065065 A1), в котором агент, представляющий собой наночастицу (липосому), покрывают молекулами полиэтиленгликоля и за счет это поверхность частицы становится более гидрофильной и менее «заметной» для клеток ретикуло-эндотелиальной системы (РЭС, или как ее еще называют система мононуклеарных фагоцитов). Клетки РЭС способны чрезвычайно эффективно удалять наночастицы из кровотока, сокращая время циркуляции многих типов частиц до единичных минут, и как следствие, частицы теряют тераностическую эффективность, т.к., например, с точки зрения направленной доставки лекарств, большая часть частиц удаляется клетками РЭС до того, как те могут хотя бы раз столкнуться со своей целью. При ПЭГилировании частиц снижается неспецифические взаимодействия агента, а также возрастает время его циркуляции в кровотоке [Kojima et al., Dendrimer-based MRI contrast agents: the effects of PEGylation on relaxivity and pharmacokinetics. Nanomedicine. 2011], и возрастает эффективность доставки агента к мишени, а также производимый им диагностический и/или терапевтический эффект.

Недостатки этого способа заключаются в том что:

1) Такой подход может быть неподходящим для сложных частиц, у которых ПЭГилирование ухудшит их основную функцию. Для некоторых агентов поверхностные свойства являются ключевой компонентой их активности. Соответственно, хотя время циркуляции агента при его ПЭГилировании в кровотоке увеличится, его полезная активность может ухудшиться. Например, это может происходить за счет стерических затруднений, который молекулы ПЭГ будут создавать для рецепторных молекул, которые должны связаться с мишенью, или для частиц, поведение которых связано с непостоянством состава внешней оболочки [см. М.Р. Nikitin, V.O. Shipunova, S.M. Deyev, P.I. Nikitin. Biocomputing based on particle disassembly, Nat Nanotechnol, 9(9), 716-722 (2014)], или частиц, активность которых заключается в катализаторных свойствах поверхности, и т.п.

2) Эффект от ПЭГилирования многих частиц может быть весьма невысок, а для каких-то частиц ПЭГилирование не только не приводит к улучшению характеристик, но может и ухудшить их.

3) Известно, что при повторном введении ПЭГилированных частиц в организм, эффект увеличения времени циркуляции частиц может существенно снижаться [Zhao et al. Repeated injection of PEGylated solid lipid nanoparticles induces accelerated blood clearance in mice and beagles. Int J Nanomedicine. Vol. 7, 2891-2900, 2012], а иногда частицы начинают выводиться даже быстрее, чем их не ПЭГилированные варианты.

Известен наиболее близкий способ (WO 2014039874 А2), в котором пассивная доставка частиц в моноциты (пассивная - в том смысле, что она не опосредуется какими-либо специфическими рецепторами) улучшается, если помимо агента в кровоток вводят препарат жировую эмульсию (в частности, препарат Интралипид). Препарат Интралипид, будучи введенным в кровоток, насыщает клетки ретикуло-эндотелиальной системы (в данном случае преимущественно Купферовы клетки печени) и приводят к их блокировке (блокаде) с точки зрения их фагоцитирующей активности. За счет этого, введенный после препарата Интралипид агент (магнитные нано- и микрочастицы) дольше циркулирует в кровотоке и поглощается циркулирующими в кровотоке моноцитами/макрофагами намного эффективнее, чем без введения препарата Интралипид. Таким образом удается улучшить доставку агента в моноциты, что может быть использовано для диагностики и терапии определенных заболеваний.

Недостатки этого метода состоят в том, что:

1) Для блокировки РЭС требуется очень высокая доза вводимой эмульсии - 2 г/кг. Такая доза чужеродного вещества может оказывать существенное нежелательное и отрицательное влияние на организм.

2) Даже введение столь больших доз эмульсии дает лишь слабый эффект от блокировки РЭС в смысле увеличения времени циркуляции частиц: в 3.1 и 2.5 раза для наночастиц и микрочастиц, соответственно.

3) В данном способе реализуется доставка агента только к активно фагоцитирующим клеткам крови - моноцитам и макрофагам, причем доставка происходит за счет специфической активности не агентов, а целевых клеток, задача которых в самом организме заключается, в том числе, в поглощении чужеродных частиц. Т.е. в этом случае происходит не таргетинг (адресная доставка) определенных клеток за счет специфической активности агента, например, за счет конъюгированных с агентом специфических рецепторов (например, антител) на поверхностные маркеры клеток-мишеней, а лишь изменение биораспределения частиц по органам и клеткам, которые в организме фагоцитируют чужеродные частицы.

4) В данном способе введение препарата, блокирующего РЭС, существенным образом меняется состав крови организма, в т.ч. компоненты препарата - жиры, находясь в крови в большой концентрации, могут взаимодействовать с потенциальными мишенями агента. Это взаимодействие может оказывать нежелательное влияние на мишень или мешать взаимодействию агента с мишенью, например, маскируя их (если мишенью являются поверхностные клеточные маркеры), ингибировать фагоцитоз клеток мишеней и запрещать интернализацию агента в клетку-мишень и т.п. Это, в свою очередь, может существенно снижать эффективность агента, не смотря на увеличение времени его циркуляции в кровотоке.

Таким образом, требуемый технический результат состоит в создании метода повышения диагностической и терапевтической эффективности агентов, повышения эффективности доставки агента в организма и/или увеличения времени циркуляции агентов (в т.ч. на основе нано- и микрочастиц) в кровотоке организма (желательно применимого для повышения эффективности максимально широкого круга агентов) с помощью введения в организм минимального количества потенциально чужеродных и/или токсичных объектов, по возможности, минимально меняющих состав крови.

Для достижения указанного технического результата предложена субстанция для повышения диагностической или терапевтической эффективности вводимого в организм агента, включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении субстанции в организм способствует выведению ретикуло-эндотелиальной системой из кровотока по крайней мере, объектов, циркулирующих в кровотоке, но не являющихся искусственно-созданными нано- или микрочастицами или опсонинами, связывающимися с упомянутым компонентом неспецифически, причем упомянутое выведение упомянутых объектов вызывает, по крайней мере, частичную блокировку ретикуло-эндотелиальной системы.

При этом, подразумевается, что блокировка происходит не за счет насыщения РЭС лишь упомянутым компонентом - компонент лишь способствует выведению упомянутых объектов. Предпочтительно, чтобы компонент был отдельным веществом, которое способно взаимодействовать с упомянутыми объектами, или предпочтительно связываться с упомянутыми объектами или вступать в ними в реакцию химическую или биохимическую, предпочтительно ферментативную.

В данном случае способствование компонента выведению означает, что при введении субстанции без такого компонента, выведение упомянутых объектов из кровотока было бы более медленным, предпочтительнее существенно более медленным (в несколько раз), или еще предпочтительнее не возникало было бы блокировки РЭС.

Под блокировкой (блокадой) ретикуло-эндотелиальной системы понимают состояние, в котором способность выведения ретикуло-эндотелиальной системой каких-либо агентов из кровотока снижается, в т.ч. это может происходить как результат активного фагоцитоза клетками РЭС каких-либо объектов. При этом может, в частности, наблюдаться снижение их фагоцитирующей активности и, как результат, увеличение времени циркуляции в кровотоке вводимых агентов. При этом предпочтительно существенное увеличение времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке, однако увеличение времени циркуляции агента может и не происходить, если, например, агент способен быстро распознавать свою мишень в организме и связываться с ней. При этом блокировка РЭС позволит агентам избежать поглощения клетками РЭС и связаться с мишенью, но за счет быстрого присоединения к мишени, агент будет практически столь же быстро выводиться из кровотока. При этом будет происходить изменение биораспределения агента между клетками РЭС и мишенью.

Кроме того, субстанция для доставки агента в организм, включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении субстанции в организм способствует выведению ретикуло-эндотелиальной системой из кровотока по крайней мере, объектов, циркулирующих в кровотоке, но не являющихся искусственно-созданными нано- или микрочастицами или опсонинами, связывающимися с упомянутым компонентом неспецифически, причем упомянутое выведение упомянутых объектов вызывает, по крайней мере, частичную блокировку ретикуло-эндотелиальной системы.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются клетки.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются эритроциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются тромбоциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются лейкоциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются молекулы. При этом как отмечено, важно, что эти молекулы не выступают исключительно в роли опсонинов, а есть дополнительное взаимодействие между компонентом и упомянутыми объектами, т.к. понятно, что если компонент, например, является какой-либо искусственной частицей, то его введение практически всегда будет сопровождаться выведением из кровотока опсонинов (различных молекул, таких как иммуноглобулины, белки системы комплемента и т.п., которые неспецифически присоединяются к данным частицам и опосредуют их фагоцитоз клетками РЭС).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые объекты являются частью субстанции, но не входят в состав компонента.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются клетки или молекулы самого организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые объекты выводятся из свободной циркуляции в кровотоке.

Под свободной циркуляцией в кровотоке понимается циркуляция в свободном виде, например, если эритроцит поглощается циркулирующим в кровотоке макрофагом, то эритроцит считается выведенным из свободной циркуляции в кровотоке.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются клетки, не покидавшие организм.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются клетки или молекулы, попавшие в организм искусственным путем.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются клетки или молекулы, попавшие в организм путем трансфузии крови или компонентов крови донора.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются клетки или молекулы, входящие в состав субстанции, но не являющиеся компонентом.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент специфически взаимодействует с упомянутыми объектами, а это взаимодействие приводит к их упомянутому выведению ретикуло-эндотелиальной системой.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое взаимодействие упомянутого компонента с упомянутыми объектами является связыванием компонента с упомянутыми объектами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент взаимодействует с упомянутыми объектами нековалентно.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент образовывает специфический комплекс с упомянутыми объектами за счет прямого или косвенного распознавания и присоединения к упомянутым объектам.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из антитела, которое образовывает упомянутый специфический комплекс с упомянутыми объектами за счет прямого или косвенного распознавания и присоединения к упомянутым объектам.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно упомянутого компонента к упомянутым объектам вызывает преимущественно фагоцитоз упомянутых объектов клетками организма, опосредуемый Fc-рецептором.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против эритроцитов или тромбоцитов организма или их аллогенных вариантов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из высокогомологичного видовым антителам организма антитела (или его варианта), в т.ч. аутологичного, аллогенного, гуманизированого или химерного антитела.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из моноклонального антитела.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент способствует выведению упомянутых объектов, которыми являются клетки, входящие в состав субстанции, за счет распознавания упомянутых клеток и способствования их фагоцитозу ретикуло-эндотелиальной системой.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из нескольких антител, нацеленных на несколько разных типов клеток или молекул организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из нескольких, по крайней мере моноклональных, или по крайней мере высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их комбинаций и вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител, против клеток или молекул организма или их аллогенных аналогов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из антитела, соединенного с другими веществами, включающими в себя, в том числе молекулы, частицы, клетки или их объединения.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против эритроцитов организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против тромбоцитов организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против лейкоцитов организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно упомянутого компонента к упомянутым объектам вызывает фагоцитоз упомянутых объектов другими клетками организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое выведение ретикуло-эндотелиальной системой упомянутых объектов вызывается их агглютинацией под действием упомянутого компонента субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое выведение ретикуло-эндотелиальной системой упомянутых объектов вызывается их старением под действием упомянутого компонента субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое выведение ретикуло-эндотелиальной системой упомянутых объектов вызывается их повреждением под действием упомянутого компонента субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое выведение ретикуло-эндотелиальной системой упомянутых объектов вызывается их модификацией под действием упомянутого компонента субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент вызывает увеличение фагоцитирующей активности клеток ретикуло-эндотелиальной системы организма, которые выводят упомянутые объектов из кровотока.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент является химическим соединением, молекулой, частицей или клеткой (в т.ч. бактерией, лейкоцитом и т.п.) или объединением таких объектов, но не содержит в себе эритроцитов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент является химическим соединением, молекулой, частицей или клеткой (в т.ч. бактерией, лейкоцитом и т.п.) или объединением таких объектов, но не содержит в себе объектов, полученных какой-либо модификацией эритроцитов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент отличен от эритроцита или модифицированного эритроцита.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм приводит к упомянутой блокировке ретикуло-эндотелиальной системы так, что время циркуляции агента в кровотоке увеличивается.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм приводит к упомянутой блокировке ретикуло-эндотелиальной системы так, что время полувыведения (или время выведения) агента из циркуляции в кровотоке увеличивается не менее чем в 1.2, предпочтительнее в 1.5, предпочтительнее в 1.75, предпочтительнее в 2, предпочтительнее в 3, предпочтительнее в 5, предпочтительнее в 7, предпочтительнее в 10, предпочтительнее в 15, предпочтительнее в 20, и еще предпочтительнее в 25 раз по сравнению со временем полувыведения агента без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм приводит к упомянутой блокировке ретикуло-эндотелиальной системы так, что время полувыведения агента из циркуляции в кровотоке увеличивается не менее чем в 5 раз по сравнению со временем полувыведения агента без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, для которой упомянутая блокировка ретикуло-эндотелиальной системы носит временный характер.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что масса компонента не превышает 20% от массы объектов, вызывающих блокировку ретикуло-эндотелиальной системы.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что масса компонента не превышает 75%, предпочтительнее 50%, еще предпочтительнее 25%, еще предпочтительнее 10%, еще предпочтительнее 1%, еще предпочтительнее 0.1%, еще предпочтительнее 0.01% и еще предпочтительнее 0.001% от массы объектов, выводимых ретикуло-эндотелиальной системой из кровотока для обеспечения блокировки РЭС. При этом под массой клеток, например, можно понимать массу с учетом содержащихся в них воды и без нее.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что в ее составе доза активных компонент, наличие которых вызывает блокировку ретикуло-эндотелиальной системы, не превышает 5 мг/кг веса организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что в ее составе доза активных компонент, наличие которых вызывает блокировку ретикуло-эндотелиальной системы, не превышает, по крайней мере, одной из следующих доз: 5, 2.5,1, 0.5, 0.25, 0.1, 0.05, 0.025, 0.01, 0.005, 0.0025, 0.0015 г/кг веса организма.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм повышает эффективность пассивной или направленной доставки упомянутого агента к мишени, по крайней мере, в 2 раза, предпочтительнее в 3, предпочтительнее в 5, предпочтительнее в 7, и еще предпочтительнее в 10 раз по сравнению со случаем доставки агента к мишени без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из моноклонального или, по крайней мере, высокогомологичного видовым антителам организма антитела, в т.ч. аутологичного, аллогенного, гуманизированного или химерного антитела (или их вариантов), способного специфично распознавать и присоединяться прямо или косвенно к клеткам или молекулам, циркулирующим в кровотоке (естественно циркулирующим или привнесенным извне).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела соединены с другими объектами, включающими в себя, в том числе молекулы, частицы, клетки или их объединения.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что введение упомянутых антител вызывает агглютинацию клеток или молекул.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно к клеткам упомянутых антител вызывает фагоцитоз упомянутых клеток.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно к клеткам упомянутых антител вызывает преимущественно Fc-опосредованный фагоцитоз упомянутых клеток.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм повышает диагностическую или терапевтическую эффективность упомянутого агента, по крайней мере, в 1.3 раза по сравнению со случаем доставки агента к мишени без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, для которой упомянутый агент состоит в том числе из, по крайней мере одной из следующих нано или микрочастиц: магнитной, флуоресцентной, белковой (в том числе представляющую собой кросс-сшитый, полимеризованный или агрегированный белок), полимерной (в т.ч. из полистирола, декстрана, полипептида, полилактид гликолевой кислоты или иных полимеров и блок-кополимеров т.п.) или кристаллической (золотой, серебряной, полупроводниковой и т.п.) нано-или микрочастицы.

Кроме того, субстанция, для которой упомянутый агент представляет собой нано- или микрочастицы (в т.ч. частицы включающие в себя нано- или микрочастицы).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент представляет собой нано- или микрочастицу с средним размером в одном из измерений (т.е. учитывая дисперсию) превышающим 10 нм, или 19 нм, или 29 нм, или 29 нм, или 49 нм, или 74 нм, или 99 нм, или 199 нм, или 299 нм, или 399 нм, или 499 нм, или 599 нм, или 699 нм, или 799 нм, или 899 нм, или 999 нм, или 1299 нм, или 1499 нм, или 1999 нм, или 2499 нм, или 2999 нм.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент представляет собой нано- или микрочастицу с средним размером в одном из измерений (т.е. учитывая дисперсию) не превышающим 10 нм, или 19 нм, или 29 нм, или 29 нм, или 49 нм, или 74 нм, или 99 нм, или 199 нм, или 299 нм, или 399 нм, или 499 нм, или 599 нм, или 699 нм, или 799 нм, или 899 нм, или 999 нм, или 1299 нм, или 1499 нм, или 1999 нм, или 2499 нм, или 2999 нм.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент используется для диагностики или терапии заболеваний или состояний организма, включающих в себя одно или несколько заболеваний из следующего списка: рак, атеросклероз, инсульт, инфаркт, в т.ч. включая проведения диагностики заболеваний или состояний организма с использованием ангиоконтрастирования.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент осуществляет визуализирующую функцию за счет произведения детектируемого сигнала, в т.ч. по крайней мере, одного из следующего списка: флуоресцентного, люминесцентного, ПЭТ-сигнала, МРТ-контрастирующего сигнала, УЗИ-контрастирования, рентгеноконтрастирующего, магнитного сигнала или сигнала за счет плазмонного резонанса или другого способа, основанного на поглощении агентом света, электромагнитных, акустических волн (сигналов) и т.п.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент осуществляет терапевтическую функцию, например, за счет доставки к мишеням агентов для гипертермии (магнитных или золотых частиц), цитостатических или цитотоксический соединений, или лекарственных соединений, в т.ч. низкомолекулярных, ферментных, радиоактивных, химиотерапевтических, веществ для проведения фотодинамической терапии.

Кроме того, субстанция для повышения диагностического или терапевтического эффекта вводимого в организм агента, включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении в организм вызывает, по крайней мере, частичную блокировку ретикуло-эндотелиальной системы клетками.

Кроме того, субстанция для доставки агента в организм, включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении в организм вызывает, по крайней мере, частичную блокировку ретикуло-эндотелиальной системы клетками.

В данном случае, под блокировкой РЭС клетками подразумевается, что органы РЭС выводят существенное количество упомянутых клеток, «которыми РЭС блокируется», при этом понятно, что помимо данных клеток РЭС выводит и другие объекты (т.к. это является одной из основных функций клеток РЭС). При этом, например, в одном воплощении изобретения, введение субстанции существенно увеличивает количество выводимых клеток (по сравнению со случаем без введения субстанции), и их выведение играет существенную роль в насыщении РЭС. В преимущественном воплощении изобретения, количество выводимых из кровотока клеток в определенный промежуток времени (10 минут, 1 час, 3 часа, 6 часов, 9 часов, 12 часов, 15 часов, 18 часов, 24 часа, 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 7 дней или 10 дней) существенно увеличивается (в 1.5, 2, 3, 4, 5, 7,10, 20, 30, 40, 50, 75 или более раз) по сравнению с количеством выводимых клетками РЭС из кровотока клеток без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из высокогомологичного видовым антителам организма антитела против упомянутых клеток, которыми обеспечивается упомянутая блокировка ретикуло-эндотелиальной системы, в т.ч. аутологичного, аллогенного, гуманизированного или химерного антитела.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент приводит к усиленному выведению клеток, циркулирующих в кровотоке, ретикуло-эндотелиальной системой, за счет чего достигается упомянутая, по крайней мере, частичная блокировка ретикуло-эндотелиальной системы клетками.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент содержит в себе упомянутые клетки, которыми блокируется, по крайней мере, частично ретикуло-эндотелиальная система, за счет их быстрого выведения из циркуляции в кровотоке достаточного для обеспечения упомянутой блокировки ретикуло-эндотелиальной системы.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками, которыми вызывается упомянутая блокировка ретикуло-эндотелиальной системы, являются эритроциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками, которыми вызывается упомянутая блокировка ретикуло-эндотелиальной системы, являются тромбоциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками, которыми вызывается упомянутая блокировка ретикуло-эндотелиальной системы, являются лейкоциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые клетки, являются клетками, введенными в организм путем трансфузии материала донора или организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются обработанные варианты клеток организма или аллогенных клеток.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые обработанные варианты клеток организма или аллогенных клеток, являются клетками, в том числе, инкубированными со специфическими антителами, распознающими и связывающимися прямо или косвенно с упомянутыми вариантами клеток организма или аллогенными клетками.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые специфические антитела являются высокогомологичными видовым антителам организма антителами (или их вариантами), в т.ч. аутологичными, аллогенными, гуманизированными или химерными антителами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые специфические антитела являются моноклональными антителами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые клетки являются частью упомянутого компонента.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками, являются клетки, не покидавшие организм.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент специфически взаимодействует с циркулирующими в кровотоке клетками, а это взаимодействие приводит к их выведению из кровотока ретикуло-эндотелиальной системой, что приводит к упомянутой блокировке ретикуло-эндотелиальной системы.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое взаимодействие упомянутого компонента с циркулирующими в кровотоке клетками является связыванием компонента с упомянутыми клетками.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент взаимодействует с циркулирующими в кровотоке клетками нековалентно.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент образовывает специфический комплекс с упомянутыми клетками за счет прямого или косвенного распознавания и присоединения к упомянутым клеткам.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из антитела, которое образовывает упомянутый специфический комплекс с упомянутыми клетками за счет прямого или косвенного распознавания и присоединения к упомянутым клеткам.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое антитело нацелено против эритроцитов организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против тромбоцитов организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против лейкоцитов организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно упомянутого компонента к клеткам вызывает фагоцитоз упомянутых клеток другими клетками организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно упомянутого компонента к клеткам вызывает преимущественно фагоцитоз упомянутых клеток другими клетками организма, опосредуемый Fc-рецептором.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые клетки являются агглютинированными клетками и либо входят в состав упомянутого компонента, либо агглютинируют под действием упомянутого компонента.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые клетки являются поврежденными клетками и либо входят в состав упомянутого компонента либо повреждаются под действием упомянутого компонента.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые клетки являются модифицированными клетками и либо входят в состав упомянутого компонента, либо модифицируются под действием упомянутого компонента.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые модифицированные клетки модифицированы ферментно, в т.ч. с помощью нейраминидазы, трипсина, галактозоксидазы, и т.п.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые модифицированные клетки модифицированы химически, в т.ч. с помощью глутарового альдегида, перекиси водорода.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые клетки являются состаренными клетками и либо входят в состав упомянутого компонента либо состариваются под действием упомянутого компонента.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из нескольких антител, нацеленных на несколько разных типов клеток организма или их аллогенных вариантов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент состоит, по крайней мере, из нескольких, по крайней мере, моноклональных, или по крайней мере высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их комбинаций и вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител, против клеток организма или их аллогенных вариантов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент отличен от эритроцита или модифицированного эритроцита.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент представляет собой нано- или микрочастицы (в т.ч. частицы включающие в себя нано- или микрочастицы).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент представляет собой нано- или микрочастицу с размером в одном из измерений превышающий 10 нм.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм приводит к упомянутой блокировке ретикуло-эндотелиальной системы так, что время полувыведения (или время выведения) агента из циркуляции в кровотоке увеличивается не менее чем в 1.2, предпочтительнее в 1.5, предпочтительнее в 1.75, предпочтительнее в 2, предпочтительнее в 3, предпочтительнее в 5, предпочтительнее в 7, предпочтительнее в 10, предпочтительнее в 15, предпочтительнее в 20, и еще предпочтительнее в 25 раз по сравнению со временем полувыведения агента без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что в ее составе доза активных компонент, наличие которых вызывает блокировку (или так или иначе приводит к блокировке) ретикуло-эндотелиальной системы, не превышает 5 мг/кг веса организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что в ее составе доза активных компонент, наличие которых вызывает блокировку (или так или иначе приводит к блокировке) ретикуло-эндотелиальной системы, не превышает, по крайней мере, одной из следующих доз: 5, 2.5, 1, 0.5, 0.25, 0.1, 0.05, 0.025, 0.01, 0.005, 0.0025, 0.0015 г/кг веса организма.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм повышает эффективность доставки (пассивной или направленной) упомянутого агента к мишени, по крайней мере, в 2 раза, предпочтительнее в 3, предпочтительнее в 5, предпочтительнее в 7, и еще предпочтительнее в 10 раз по сравнению со случаем доставки агента к мишени без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм повышает диагностическую или терапевтическую эффективность упомянутого агента, по крайней мере, в 1.3 раза по сравнению со случаем доставки агента к мишени без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент состоит в том числе из, по крайней мере, одной из следующих нано или микрочастиц: магнитной, флуоресцентной, белковой (в том числе представляющую собой кросс-сшитый, полимеризованный или агрегированный белок), полимерной (из полистирола, декстрана, полипептида, полилактид гликолевой кислоты и т.п.) или кристаллической (золотой, серебряной, полупроводниковой и т.п.) нано- или микрочастицы.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент используется для диагностики или терапии заболеваний или состояний организма, включающих в себя одно или несколько заболеваний из следующего списка: рак, атеросклероз, инсульт, инфаркт, в т.ч. включая проведения диагностики заболеваний или состояний организма с использованием ангиоконтрастирования.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент осуществляет визуализирующую функцию за счет произведения детектируемого сигнала, в т.ч. по крайней мере, одного из следующего списка: флуоресцентного, люминесцентного, ПЭТ-сигнала, МРТ-контрастирующего сигнала, рентгеноконтрастирующего, магнитного сигнала или сигнала за счет плазмонного резонанса

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент осуществляет терапевтическую функцию, например, за счет доставки к мишеням цитостатических или цитотоксический соединений, или лекарственных соединений, в т.ч. низкомолекулярных, ферментных, радиоактивных, химиотерапевтических, веществ для проведения фотодинамической терапии, гипертермии.

Кроме того, субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тромбоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того, субстанция, содержащая, в том числе, эритроциты или тромбоциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела связаны с эритроцитами или тромбоцитами организма или их аллогенными вариантами.

Кроме того, субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента или для доставки агента или для повышения времени циркуляции агента в кровотоке, и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тромбоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того, субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тромбоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того, субстанция для доставки агента и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тробмоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того, субстанция для повышения времени циркуляции агента в кровотоке и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тромбоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того способ диагностики или терапии заболеваний или состояний организма, в котором:

i) вводят в организм, по крайней мере, одну из вышеперечисленных субстанций,

ii) до или после ввода упомянутой субстанции или одновременно с вводом упомянутой субстанции вводят агент, опосредующий диагностическое или терапевтическое действие.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый агент вводят спустя не менее 6 часов и не более 18 часов после введения упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый агент вводят спустя не менее 11 часов и не более 13 часов после введения упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый агент вводят не позднее 20 дней, предпочтительнее 15 дней, предпочтительнее 10 дней, предпочтительнее 7 дней, предпочтительнее 5 дней, предпочтительнее 4 дней, предпочтительнее 3 дней, предпочтительнее 2 дней, предпочтительнее 1 дня и еще предпочтительнее 15 часов после введения упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутое введение в организм упомянутой субстанции повышает эффективность диагностического или терапевтического действия упомянутого агента за счет увеличения времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке организма.

Кроме того способ, отличающийся тем, что наряду с введением упомянутой субстанции и упомянутого агента в организм вводят восстанавливающий агент, вызывающий повышение (по сравнению со случаем без введения упомянутого восстанавливающего агента) уровня клеток или молекул, выведение которых из кровотока вызывает упомянутый компонент упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый восстанавливающий агент является кровью самого организма или ее компонентами или донорской кровью или ее компонентами.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый восстанавливающий агент является эритропоэтином.

Кроме того, субстанция для доставки агента в организм и/или повышения диагностической или терапевтической эффективности агента, и включающая в себя, по крайней мере, компонент или компоненты, которые i) при введении в организм приводят к усиленному выведению из циркуляции в кровотоке клеток или молекул организма, или ii) при введении в организм приводят к усиленному выведению из циркуляции в кровотоке клеток или молекул, введенных в организм, или iii) сами являются клетками, причем после введения субстанции в организм быстро выводятся из циркуляции в кровотоке, причем в любом из этих случаев упомянутое усиленное или быстрое выведение упомянутых клеток или молекул из циркуляции в кровотоке приводит к увеличению времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке.

Кроме того, субстанция для доставки агента в организм и/или способствующая доставке агента в организм и/или для повышения диагностической или терапевтической эффективности агента, и включающая в себя, по крайней мере, компонент или компоненты, которые i) при введении в организм приводят к усиленному выведению из циркуляции в кровотоке клеток или молекул организма, или ii) при введении в организм приводят к усиленному выведению из циркуляции в кровотоке клеток или молекул, введенных в организм, или iii) сами являются клетками, причем после введения субстанции в организм быстро выводятся из циркуляции в кровотоке, причем в любом из этих случаев упомянутое усиленное или быстрое выведение упомянутых клеток или молекул из циркуляции в кровотоке приводит к увеличению времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке.

Кроме того способ доставки агента в организм, в котором:

i) вводят в организм, по крайней мере, одну из вышеперечисленных субстанций,

ii) до или после ввода упомянутой субстанции или одновременно с вводом упомянутой субстанции вводят упомянутый агент, если он не является компонентом субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый агент опосредует диагностическое или терапевтическое действие.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый агент вводят спустя не менее 6 часов и не более 18 часов после введения упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый агент вводят спустя не более, чем через 4, 7, 13, 30, 50, 70, 100, 125, 150, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900 или 1000 часов после введения упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый агент вводят спустя не менее 11 часов и не более 13 часов после введения упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что наряду с введением упомянутой субстанции и упомянутого агента в организм вводят восстанавливающий агент, вызывающий повышение (по сравнению со случаем без введения упомянутого восстанавливающего агента) уровня клеток или молекул, усиленное или быстрое удаление которых из кровотока вызывает упомянутый компонент упомянутой субстанции.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый восстанавливающий агент является кровью (или ее компонентами) самого организма или донора.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый восстанавливающий агент является эритропоэтином.

Кроме того, субстанция, вводимая в организм с целью увеличения времени циркуляции агента в кровотоке организма, содержащая, по крайней мере:

i) компонент 1, который при введении в организм приводит к усиленному выведению из циркуляции в кровотоке эритроцитов или тромбоцитов, попавших в кровоток либо естественным, либо искусственным путем, по сравнению с темпом их удаления в случае без введения упомянутого компонента,

или ii) компонент 2, состоящий, по крайней мере, из высокогомологичного видовым антителам организма антитела (или его вариантов), в т.ч. аутологичного, аллогенного, гуманизированного или химерного антитела, способного образовывать прямо или косвенно специфический комплекс с объектами, находящихся в организме естественно, либо попавшие в организм искусственным путем.

При этом упомянутыми объектами могут быть молекулы, частицы, клетки, а также различные их варианты или их объединения, в т.ч. комплексы.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое антитело упомянутого компонента 2 является гамма-иммуноглобулином.

В одном воплощении изобретения, упомянутыми объектами могут быть клетки. Под клетками попавшими в организм (или кровоток) естественным путем подразумеваются клетки самого организма, которые естественным образом были созданы в организме и не покидали организм, в то время как под клетками попавшими искусственным путем подразумеваются клетки, которые были введены в организм, в т.ч. клетки организма, которые были выделены из организма, а потом были введены в него обратно. Подобное верно и для иных объектов, например, молекул.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые эритроциты или тромбоциты, попавшие в кровоток искусственным путем, или упомянутые объекты, попавшие в организм искусственным путем, были введены в организм путем трансфузии материала от донора или материала организма.

В одном из воплощений метода, упомянутым материалом, вводимым в организм путем трансфузии, является кровь донора или самого организма или ее компоненты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые эритроциты или тромбоциты, попавшие в кровоток искусственным путем, или упомянутые объекты, попавшие в организм искусственным путем, являются компонентом упомянутой субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые эритроциты или тромбоциты, попавшие в кровоток искусственным путем, являются частью упомянутого компонента 1 субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми эритроцитами или тромбоцитами, которые усиленно выводятся из циркуляции в кровотоке являются обработанные варианты клеток организма или аллогенных клеток либо являющиеся одним из компонентов субстанции, либо попавшие в организм искусственным путем.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутая обработка вариантов клеток организма или аллогенных клеток включает в себя инкубацию со специфическими антителами, распознающими и связывающимися прямо или косвенно с упомянутыми вариантами клеток организма или аллогенными клетками.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые специфические антитела являются моноклональными антителами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются эритроциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются лейкоциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются тромбоциты.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются альбумин.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами являются иммуноглобулины.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутыми объектами, попавшими в кровоток искусственным путем, являются объектами, введенными в организм.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 приводит преимущественно к усиленному удалению из упомянутой циркуляции эритроцитов или тромбоцитов, не покидавших организм.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 специфически взаимодействует с упомянутыми эритроцитами или тромбоцитами или объектами, и это взаимодействие приводит к усиленному выведению из циркуляции упомянутых эритроцитов или тромбоцитов или объектов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое взаимодействие упомянутого компонента 1 или упомянутого компонента 2 с упомянутыми эритроцитами или тромбоцитами или объектами является связыванием компонента с упомянутыми эритроцитами или тромбоцитами или объектами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 взаимодействует с циркулирующими в кровотоке эритроцитами или тромбоцитами или объектами нековалентно.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое связывание упомянутого компонента 1 или упомянутого компонента 2 с упомянутыми эритроцитами или тромбоцитами или объектами является нековалентным.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент представляет собой нано- или микрочастицы (в т.ч. частицы включающие в себя нано- или микрочастицы).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый агент представляет собой нано- или микрочастицу с размером в одном из измерений превышающим 10 нм.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое усиленное выведение эритроцитов или тромбоцитов вызывается их старением под действием упомянутого компонента 1.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое усиленное выведение эритроцитов или тромбоцитов или объектов вызывается их агглютинацией под действием упомянутого компонента 1 или упомянутого компонента 2 субстанции.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое усиленное выведение эритроцитов или тромбоцитов вызывается их повреждением под действием упомянутого компонента 1.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или компонент 2 вызывает увеличение фагоцитирующей активности клеток организма, что приводит к усиленному удалению из циркуляции упомянутых эритроцитов или тромбоцитов или объектов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутому увеличению времени циркуляции упомянутого агента вызывается, по крайней мере, частичной блокировкой ретикуло-эндотелиальной системы организма за счет выведения из циркуляции в кровотоке упомянутых эритроцитов или тромбоцитов или объектов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 состоит, по крайней мере, из высокогомологичного видовым антителам организма антитела (или его вариантов), в т.ч. аутологичного, аллогенного, гуманизированного или химерного антитела, способного специфично распознавать и присоединяться прямо или косвенно к эритроцитам или тромбоцитам.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 образовывает специфический комплекс с эритроцитами или тромбоцитами за счет прямого или косвенного распознавания и присоединения к упомянутым эритроцитам или тромбоцитам.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое антитело упомянутого компонента 2 образовывает упомянутый специфический комплекс с упомянутыми объектами за счет прямого или косвенного распознавания и присоединения к упомянутым объектам.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против эритроцитов организма или их аллогенных аналогов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против тромбоцитов организма эритроцитов организма или их аллогенных аналогов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела нацелены против лейкоцитов организма эритроцитов организма или их аллогенных аналогов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что введение упомянутых антител вызывает агглютинацию упомянутых объектов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно упомянутого компонента 1 или упомянутого компонента 2 к эритроцитам или тромбоцитам или объектам вызывает фагоцитоз упомянутых эритроцитов или тромбоцитов или объектов клетками организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое распознавание и присоединение прямо или косвенно упомянутого компонента 1 или упомянутого компонента 2 к эритроцитам или тромбоцитам или объектам вызывает преимущественно фагоцитоз упомянутых к эритроцитов или тромбоцитов или объектов клетками организма, опосредуемый Fc-рецептором.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 является химическим соединением, молекулой, частицей или клеткой (в т.ч. бактерией, лейкоцитом и т.п.) или объединением таких объектов, но не содержит в себе эритроцитов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 является химическим соединением, молекулой, частицей или клеткой (в т.ч. бактерией, лейкоцитом и т.п.) или объединением таких объектов, но не содержит в себе объектов, полученных какой-либо модификацией эритроцитов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из нескольких высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела упомянутого компонента 2 являются моноклональными антителами или упомянутый компонент 1 состоит, по крайней мере, из моноклонального антитела.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое антитело упомянутого компонента 2 соединено с другими веществами, включающими в себя, в том числе молекулы, частицы, клетки или их объединения, или в которой упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из антитела, соединенного с другими веществами, включающими в себя, в том числе молекулы, частицы, клетки или их объединения.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из нескольких высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител, нацеленных против клеток или молекул организма или их аллогенных вариантов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из комплекса вещества (в т.ч. молекулы, клетки, частицы) с клетками или молекулами, выделенными из организма или их аллогенными аналогами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из комплекса выделенных из организма молекул или клеток (или их аллогенных вариантов) и связанных прямо или косвенно с ними антителами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из комплекса выделенных из организма молекул или клеток (или их аллогенных вариантов) и связанных прямо или косвенно с ними высокогомологичными видовым антителам организма антителами (или их вариантами), в т.ч. аутологичными, аллогенными, гуманизированными или химерными антителами.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из комплекса выделенных из организма молекул или клеток (или их аллогенных вариантов) и высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител, к данным молекулам или клеткам (или к их вариантам).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутым компонентом 1 или упомянутым компонентом 2 являются комплексы выделенных из организма клеток или молекул или их аллогенных аналогов специфично связанных с антителами против эритроцитов или тромбоцитов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из комплекса вещества (молекулы, клетки, частицы и т.п.) нековалентно соединенного специфичной биомолекулярной связью с выделенным из организма эритроцитом или тромбоцитом (или их аллогенным аналогом).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из высокогомологичного видовым антителам организма антитела (или его вариантов), в т.ч. аутологичного, аллогенного, гуманизированного или химерного антитела, способного специфично распознавать и присоединяться прямо или косвенно к клеткам или молекулам, циркулирующим в кровотоке (естественно циркулирующим или искусственно привнесенным).

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое антитело, способное специфично распознавать и присоединяться прямо или косвенно к клеткам или молекулам, циркулирующим в кровотоке, является моноклональным антителом.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутое антитело (или его варианты), способное специфично распознавать и присоединяться прямо или косвенно к клеткам или молекулам, циркулирующим в кровотоке, соединены с другими веществами, включающими в себя, в том числе молекулы, частицы, клетки или их объединения.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутые антитела специфически взаимодействует с клетками или молекулами организма, и это взаимодействие приводит к усиленному выведению из циркуляции упомянутых клеток или молекул организма.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из нескольких, по крайней мере моноклональных, или по крайней мере высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их комбинаций и вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител, против клеток или молекул организма или их аллогенных аналогов. Естественно, здесь и в других подобных случаях, имеется в виду, что антитело может быть направлено против, например, клеточных маркеров данных клеток, определенных эпитопов клеточных маркеров, т.п.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 или упомянутый компонент 2 состоит, по крайней мере, из нескольких, по крайней мере моноклональных, или по крайней мере высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их комбинаций и вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител против разных клеток или молекул организма или их аллогенных аналогов.

Кроме того, субстанция, отличающаяся тем, что упомянутый компонент 1 отличен от эритроцита или модифицированного эритроцита.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм приводит к упомянутому увеличению времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке так, что время полувыведения упомянутого агента из упомянутой циркуляции увеличивается не менее чем в 3 раза по сравнению со временем полувыведения упомянутого агента без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм приводит к упомянутому увеличению времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке так, что время полувыведения (или время выведения) агента из циркуляции в кровотоке увеличивается не менее чем в 1.2, предпочтительнее в 1.5, предпочтительнее в 1.75, предпочтительнее в 2, предпочтительнее в 3, предпочтительнее в 5, предпочтительнее в 10, предпочтительнее в 12.5, предпочтительнее в 15, предпочтительнее в 20, и еще предпочтительнее в 25 раз по сравнению со временем полувыведения агента без введения субстанции.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм приводит к упомянутому увеличению времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке, причем феномен увеличения времени циркуляции упомянутого агента носит временный характер.

Кроме того, субстанция, введение которой в организм увеличивает время циркуляции агента, введение которого в свою очередь используется для диагностики или мониторинга или терапии заболевания, причем увеличение времени циркуляции упомянутого агента повышает эффективность диагностики или терапии заболевания.

Кроме того способ увеличения времени циркуляции агента в кровотоке организма, в котором:

i) вводят в упомянутый организм, по крайней мере, одну из вышеперечисленных субстанций,

ii) вводят в упомянутый организм упомянутый агент.

Кроме того способ, в котором введение агента используется для диагностики или мониторинга или терапии, причем увеличение времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке организма повышает эффективность диагностики или терапии.

Кроме того способ, отличающийся тем, что подбирают дозу упомянутой субстанции при ее введении в организм для увеличения упомянутого времени циркуляции в необходимое количество раз, оптимизируя полезный эффект от увеличения времени циркуляции, и возможных негативных эффектов (например, понижения концентрации молекул или клеток крови, выводимых органами РЭС).

Кроме того способ, отличающийся тем, что подбирают дозу упомянутой субстанции при ее введении в организм для увеличения упомянутого времени циркуляции в необходимое количество раз, оптимизируя полезный эффект от увеличения времени циркуляции, и возможных негативных эффектов.

Кроме того способ, отличающийся тем, что введение упомянутой субстанции или ее вариантов повторяется многократно.

Кроме того способ, отличающийся тем, что введение упомянутой субстанции или ее вариантов повторяется многократно. Под вариантом субстанции подразумевается субстанция отличная по составу от упомянутой, но также являющаяся предметом данного изобретения по своим признакам.

Кроме того способ, отличающийся тем, что наряду с введением упомянутого агента и упомянутой субстанции в организм вводят восстанавливающий агент, вызывающий повышение уровня клеток или молекул, которые усиленно выводятся из циркуляции в кровотоке под действием упомянутой субстанции, по сравнению с уровнем без введения упомянутого восстанавливающего агента.

Кроме того способ, отличающийся тем, что наряду с введением упомянутого агента и упомянутой субстанции в организм вводят восстанавливающий агент, вызывающий повышение уровня эритроцитов или тромбоцитов в крови по сравнению с уровнем без введения упомянутого восстанавливающего агента.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый восстанавливающий агент является кровью самого организма или ее компонентами или донорской кровью или ее компонентами.

Кроме того способ, отличающийся тем, что упомянутый восстанавливающий агент является эритропоэтином.

Кроме того субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта вводимого в организм агента, и включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении в организм приводит, по крайней мере, к частичной блокировке ретикулоэндотелиальной системы за счет активного выведения ею из циркуляции в кровотоке по крайней мере, одного из следующих веществ:

i) клеток или молекул самого организма,

или ii) клеток или молекул, попавших в организм искусственным путем, но не входящих в состав субстанции,

или iii) клеток, входящих в состав субстанции, в т.ч. входящих в состав упомянутого компонента.

Кроме того субстанция для повышения диагностического или терапевтического эффекта агента включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении субстанции в организм способствует выведению ретикуло-эндотелиальной системой из циркуляции в кровотоке, по крайней мере, объектов, являющихся клетками или молекулами, если упомянутые молекулы не выводятся из кровотока преимущественно в качестве неспецифически взаимодействующих с упомянутым компонентом опсонинов, причем упомянутое выведение упомянутых объектов из циркуляции в кровотоке приводит, по крайней мере, к частичной блокировке ретикуло-эндотелиальной системы.

Кроме того субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента, и включающая в себя, по крайней мере, компонент, который, при введении в организм вызывает активное выведение (способствует выведению) из циркуляции в кровотоке объектов организма или объектов, привнесенных в организм независимо от введения субстанции, или клеток, входящих в состав упомянутого компонента,

Кроме того субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента, и включающая в себя, по крайней мере, компонент, который, при введении в организм вызывает активное выведение (способствует выведению) из циркуляции в кровотоке (клеток организма или клеток, входящих в состав упомянутой субстанции, или объектов, привнесенных в организм независимо от введения субстанции)

Кроме того субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента, и включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении в организм вызывает, по крайней мере, частичную блокировку ретикулоэндотелиальной системы, по крайней мере, одним из следующих веществ: клетками или способными образовывать специфический комплекс с упомянутым компонентом молекулами.

Кроме того субстанция для повышения диагностического или терапевтического эффекта агента, и включающая в себя, по крайней мере, компонент, который при введении субстанции в организм способствует выведению из циркуляции в кровотоке объектов, включающих в себя клетки или молекулы, если упомянутые молекулы не выводятся преимущественно в качестве опсонинов, неспецифически взаимодействующих с упомянутым компонентом, причем упомянутое выведение приводит, по крайней мере, к частичной блокировке ретикуло-эндотелиальной системы

Кроме того субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента или для доставки агента или для повышения времени циркуляции агента в кровотоке, и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тробмоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того субстанция, вводимая в организм с целью повышения диагностического или терапевтического эффекта агента и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тробмоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того субстанция для доставки агента в организм и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тробмоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того субстанция для повышения времени циркуляции агента в кровотоке и содержащая, по крайней мере, высокогомологичные видовым антителам организма антитела против эритроцитов или тробмоцитов (или их вариантами), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела.

Кроме того, способ увеличения времени циркуляции агентов в кровотоке организма за счет введения в упомянутый живой организм упомянутого агента наряду с субстанцией, введение которой приводит к усиленному удалению из циркуляции в кровотоке эритроцитов или тромбоцитов организма по сравнению с темпом их удаления в случае без введения субстанции, причем субстанция отлична от эритроцитов.

Кроме того, способ увеличения времени циркуляции агента в кровотоке организма за счет введения в упомянутый живой организм упомянутого агента наряду с субстанцией, введение которой приводит к усиленному удалению из циркуляции в кровотоке эритроцитов или тромбоцитов организма по сравнению с темпом их удаления в случае без введения субстанции, причем субстанция отлична от модифицированных каким-либо образом эритроцитов, в т.ч. разрушенных эритроцитов.

Кроме того, метод продвижения продукции на рынок, включающий в себя, по крайней мере, продвижение для диагностики, мониторинга или терапии заболеваний или состояний организма, или для научных исследований, по крайней мере, одной из вышеперечисленных субстанций или способов.

Кроме того, метод, отличающийся тем, что продвижение осуществляется вкладышем в упаковке с коммерческой субстанцией, содержащей, по крайней мере, одну из вышеперечисленных субстанций.

Кроме того, метод, отличающийся тем, что продвижение осуществляется письменным или устным сообщением врачу или предоставляющему медицинские услуги.

Кроме того, бизнес метод, включающий в себя, по крайней мере, маркетинг для диагностики и терапии или для повышения эффективности диагностики или терапии или для доставки агента в организм или для увеличения времени циркуляции агента в кровотоке организма, по крайней мере, одной из вышеперечисленных субстанций и способов.

Кроме того, для достижения указанного технического результата предложены субстанции и способы, обладающие комбинациями вышеназванных признаков. Кроме того, надо отметить, что во всех случаях упоминания, например, клеток или молекул могут подразумеваться, например, как клетки и молекулы организма, так и аллогенные клетки, или же варианты клеток организма или аллогенных клеток.

Все варианты реализации изобретения, приводимые здесь, описаны лишь для иллюстрации многообразия возможных вариантов изобретения, а не для ограничения.

В одном воплощении изобретения, увеличение времени циркуляции агента в кровотоке организма или блокировка РЭС достигается за счет введения в упомянутый живой организм субстанции, введение которой приводит к усиленному удалению из циркуляции в кровотоке нативных (или интактных) эритроцитов или тромбоцитов организма по сравнению с темпом их удаления в случае без введения субстанции. Под нативными эритроцитами или тромбоцитами подразумеваются неизмененные клетки, не подвергшиеся гемолизу или же какой-либо физической, химической или биохимической обработке (такая обработка может, например, представлять собой ультразвуковое воздействие, осмотический лизис, фиксацию формалином и т.д.). Соответственно, в одном из воплощений изобретения, выведение нативных клеток опосредуется биомолекулами, которые взаимодействуют с клетками нековалентно.

В одном воплощении изобретения субстанцию выбирают такой, чтобы она не содержала в себе эритроцитов, или же в более общем случае, модифицированных эритроцитов. В другом воплощении метода, компоненты субстанции взаимодействуют с эритроцитами или тромбоцитами или другими клетками или молекулами организма, которые находятся непосредственно в организме, т.е. которые не превносятся в организм в рамках данного воздействия на организм (т.е. если организм подвергался ранее трансфузии или пересадке материала, не связанной с необходимостью модуляции поведения агента в организме, то речь может идти и о таких клетках и молекулах). Под модифицированными эритроцитами понимаются вещества полученные путем какой-либо физической, химической или биохимической обработке эритроцитов или компонентов крови, содержащих эритроциты. Такая обработка может, например, представлять собой ультразвуковое воздействие, осмотический лизис, фиксацию формалином и т.д. Подобные модификации могут привести к негативному токсичному эффекту данных агентов.

Кроме того, в одном воплощении изобретения, субстанция может содержать комплексы предварительно отобранных эритроцитов или других клеток или молекул организма с комплементарными гомологичными видовым антителам организма антителами (или их вариантами), в т.ч. аутологичными, аллогенными, гуманизированными или химерными антителами. Субстанция, содержащая такие комплексы, не будет вызывать, например, анемии, а введенные клетки или молекулы будут выводиться органами РЭС, что будет приводить к блокировке органов РЭС.

В другом воплощении изобретения, подобные комплексы могут быть образованы с использованием других специфичных веществ вместо антител. Важно, что при использовании нековалентно связывающихся веществ, не образуются новые ковалентные связи, которые могут привести к нежелательным токсическим эффектам субстанций. Так, например, в одном из воплощений изобретения вместо антител используют лектины, которые в том числе могут агглютинировать эритроциты или иные клетки и также приводить к их ускоренному выведению из кровотока клетками РЭС. Забор клеток или молекул организма можно проводить заранее, чтобы организм успевал восстановить уровни данных веществ к моменту введения агента и субстанции. Кроме того, восстановление уровня упомянутых веществ можно проводить не только ожидая, когда организм восстановит их содержание, но и активно способствовать этому, вводя восстановительные агенты. Таким восстановительным агентом, например, может быть эритропоэтин, вызывающий ускорение созревания эритроцитов. Другим вариантом введения восстановительного агента может быть переливание донорской крови. Введение восстановительного агента может проводиться как до, так и вовремя или после введения агента и субстанции.

В одном воплощении изобретения выведению клеток из кровотока способствуют за счет их обработки ферментами. Так, например, обработка эритроцитов ферментом, например, нейраминидазой, трипсином, галактоз оксидазой и т.п. или комбинацией ферментов приводит к их быстрому выведению ретикуло-эндотелиальной системой из циркуляции в кровотоке. Это происходит за счет, например, изменения профиля гликозилирования поверхности эритроцитов, что могут распознавать клетки РЭС и удалять «устаревшие» эритроциты, или за счет, появления новых антигенных детерминант на эритроците, что будет вызывать его связывание с циркулирующими антителами и приводить к выведению из кровотока, например, путем Fc-рецептор опосредованного фагоцитоза. Понятно, что хотя обработка клеток ферментами имеет определенные преимущества из-за доступности ферментов, обработка клеток антителами является более мягким воздействием на организм (с точки зрения токсичности - из-за возможности появления новых антигенных детерминант, воспроизводимости и т.п.).

В любом из приведенных воплощений изобретения активный компонент или компоненты субстанции могут состоять из совокупности разных объектов, включая те, которые обладают описанными свойствами, так и те, которые ими не обладают. Т.е. субстанция может содержать не только, например, аллогенное антитело против эритроцитов, но и различные вспомогательные компоненты, такие как буферные соли и т.п., и кроме того, подобное антитело может быть, например, конъюгировано с другими молекулами, частицами и т.п.

Под клетками и молекулами организма подразумеваются как молекулы и клетки самого организма, так и, например, молекулы, образованные организмом в результате переваривания пищи и т.п.

Агентом могут быть самые различные вещества, например, это могут быть нано- и микрочастицы в обычном понимании коллоидной химии, бактерии или клетки (в преимущественном воплощении изобретения), различные молекулы (в преимущественном воплощении - макромолекулы), макромолекулярные комплексы и т.п. Агенты могут быть, в том числе, диагностическими и/или терапевтическими (в т.ч. тераностическими) агентами или веществами, которые тем или иным образом опосредуют диагностические и/или терапевтические функции. Например, агент может выполнять визуализирующую функцию с точки зрения диагностики или мониторинга состояния/заболевания организма, так, например, это может быть агент, непосредственно производящий детектируемый сигнал (флуоресцентный, люминесцентный или радиоактивный агент), или меняющий сигнал, детектируемый от других веществ (например, от протонов воды для МРТ-контрастирующих агентов). Помимо физических сигналов, агент может участвовать в продуцировании биохимических сигналов, которые, например, позволяют протестировать организм на наличие какого-либо заболевания и, в случае необходимости сигнализировать об этом. Кроме того, агент может выполнять и другие функции (в т.ч. терапевтические), например, для направленной доставки препаратов, осуществления гипертермического воздействия на организм (если он, например, содержит магнитные наночастицы), фотодинамической терапии (тем или иным способом вызывая, например, цитотоксичность под воздействием внешнего излучения), и т.п.

Способность вещества образовывать прямо или косвенно специфический комплекс с чем-либо, например, с клетками организма означает, что либо данное вещество (например, антитело) напрямую может распознавать и связываться с какой-либо клеткой или молекулой, либо распознавать и связываться с другими дополнительными молекулами, которые могут в свою очередь (тоже прямо или посредством иных молекул) связываться с этими клетками организма. Такие дополнительные молекулы могут быть созданы самим организмом, либо тоже введены в организм, в том числе как часть субстанции. Кроме того, под косвенным распознаванием и связыванием подразумевается, что, например, антитело может связываться не непосредственно с клеткой, а связываться с другой молекулой, связавшейся с клеткой. Например, гуманизированное антитело против крысиных иммуноглобулинов G может распознавать и связываться с крысиным антителом против эритроцитов человека, связанных с эритроцитами.

Во всех выше- и нижеперечисленных случаях под циркуляцией в кровотоке может пониматься как циркуляция в кровотоке вообще (в «пространственном» смысле, т.е. внутри кровяного русла, сосудов, капилляров и т.п.), так и свободная циркуляция в кровотоке (т.е. циркуляция в свободном виде, например, если эритроцит поглощается циркулирующим в кровотоке макрофагом, то эритроцит считается выведенным из свободной циркуляции в кровотоке, хотя в пространственном смысле он все еще находится при этом в русле кровеносного сосуда). В преимущественном воплощении изобретения под выведением из циркуляции понимается выведение из свободной циркуляции.

В одном воплощении изобретения достигается обратимое кратковременное перенацеливание РЭС на собственные клетки/молекулы организма с целью предотвращения «атаки» на агент, что кардинально отличается от известных методов, т.к. доза вводимого чужеродного агента может быть снижена в 10-100 раз по сравнению с существующими методиками для достижения 1000% увеличения времени полувыведения агента (по сравнению с временем циркуляции агента без введения каких-либо дополнительных субстанций). Это возможно, благодаря тому, что большая часть массы/объема суммарных комплексов выводимых органами РЭС и вызывающих блокировку органов РЭС, принадлежит собственным компонентам крови (компонентам самого организма) и является для него естественным собственным материалом. Это также позволяет максимально снизить токсичность метода, т.к. требуется лишь малое количество чужеродного (а потому потенциально токсичного) агента для создания необходимого эффекта.

В одном из воплощений изобретения, используют субстанцию, содержащую, по крайней мере, компонент, состоящий, по крайней мере, из высокогомологичного антителам организма антитела (или его вариантов), в т.ч. аутологичного, аллогенного, гуманизированного или химерного антитела, способного образовывать прямо или косвенно специфический комплекс с клетками или молекулами, находящихся в организме естественно, либо попавшие в организм искусственным путем. В другом воплощении изобретения для блокировки органов РЭС вводят гомологичные (преимущественно высокогомологичные) видовым антителам организма антитела (или их варианты), в т.ч. аутологичные, аллогенные, гуманизированные или химерные антитела против клеток крови пациента, например, его эритроцитов, тромбоцитов или лейкоцитов. В этом случае органы РЭС активно поглощают клетки крови, связавшиеся с антителами, после чего их фагоцитирующая активность в отношении агента падает, в частности, при этом может увеличиваться время полувыведения агента из кровотока. После введения антител эффект нарастает в течение какого-то времени, затем спадает. В одном воплощении изобретения, если вводить агент после введения антител, то время их полувыведения будет увеличиваться в течение какого-то времени, а затем спадет до интервала, который наблюдался до введения антител (см. Примеры 2-3). В реализации способа с антителами против эритроцитов, вызываемая анемия (за счет понижения гематокрита) кратковременна и через определенное время уровень эритроцитов в кровотоке, как правило, восстанавливается до того уровня наблюдавшегося до введения антител.

Введение высокогомологичных видовым антителам организма антител (или их вариантов), в т.ч. аутологичных, аллогенных, гуманизированных или химерных антител, а не, например, гетерологичной анти-лимфоцитной сыворотки, для блокировки РЭС позволяет задействовать только лишь естественный механизм удаления клеток из крови за счет фагоцитоза клетками РЭС опосредованного Fc-рецептором и не вносит ненужной опасности (токсичности) за счет, например, «атаки» фагоцитов белками анти-лимфоцитной сыворотки. В предпочтительном воплощении изобретения Fc-фрагмент антитела идентичен, Fc-фрагменту антител самого организма. Кроме того, высокая гомологичность антителам организма позволит избежать или минимизировать иммунный ответ на компоненты субстанции, что позволит вводить ее для достижения эффекта многократно. Кроме того, будут отсутствовать различные побочные эффекты от иммунного ответа вплоть до таких, как невозможность проведения иммуноанализов крови, в которой используются определенные антитела (например, если в человека введено мышиное антитело против человеческих эритроцитов, и в результате иммунного ответа в организме человека образовываются антитела против мышиных иммуноглобулинов, то использование многих тестов для проведения иммуноанализов крови, в которых участвуют мышиные антитела, будет затруднено из-за возможности ошибок в результатах теста).

Кроме того, т.к. количество эритроцитов в крови многократно превышает количество лейкоцитов и тромбоцитов, использование субстанций для удаления эритроцитов клетками РЭС для блокировки РЭС, в т.ч. для увеличения времени циркуляции агента, предпочтительнее в виду меньшего количества негативных эффектов для здоровья организма. В частности, после удаления определенной части эритроцитов из кровотока клетками РЭС, в одной реализации изобретения, восстанавливают гематокрит с помощью переливания крови. Это позволяет избежать негативных последствий анемии, связанной с пониженным гематокритом.

Одно из воплощений изобретения (когда клетками РЭС удаляются компоненты собственной крови) характеризуется низкой токсичностью подхода, т.к. поглощение органами РЭС компонентов крови (в т.ч. эритроцитов) происходит на протяжении всей жизни млекопитающих, здесь лишь кратковременно ускоряется данный процесс. Так, например, в течение суток в естественных условиях организм перерабатывает около 1% эритроцитов, а для достижения блокировки РЭС требуется выведение из кровотока менее 10% эритроцитов (в Примере 2, максимальное падение гематокрита было на 10-15%, т.е. со значений 50% до 45%, и то, минимум гематокрита наблюдался не в первые сутки), при этом эффект блокировки держится около 5-10 дней, за которые переработалось бы прблизительно то же количество эритроцитов. Поэтому данный метод характерен низкими рисками для здоровья. Кроме того, например, в случае применения антител против клеток крови для повышения времени циркуляции агента, используется природный механизм для выведения клеток из кровотока клетками РЭС. А именно антитело нековалентно присоединяется к клетке и сигнализирует клеткам РЭС, что этот комплекс необходимо вывести из кровотока. Важным преимуществом способа является то, что при этом не происходит никакой химической модификации молекул/клеток крови, не происходит образования никаких новых ковалентных связей, или новых химических соединений и т.п., которые могли бы вызывать какие-либо токсические эффекты.

В одном воплощении изобретения, выбирают антитело (и/или дозу антитела), которое не приводит или приводит к незначительной активации системы комплемента, преимущественно содействуя Fc-рецептор опосредованному фагоцитозу клетками РЭС.

Кроме того, в одном воплощении изобретения, субстанция не вызывает агглютинации клеток крови. В этом случае доза вводимого агента может варьировать в широких диапазонах без опасений эмболизации сосудов.

Кроме того, в одном воплощении изобретения, компоненты субстанция, наоборот, вызывают агглютинацию клеток крови. В таком случае, требуется выбор дозы субстанции для недопущения тромбообразования, которое приводит в эмболии сосудов.

Кроме того, в одном воплощении изобретения, подбирают дозу вводимой субстанции, для увеличения эффекта блокировки РЭС или для увеличения времени циркуляции агента в кровотоке в необходимое количество раз, оптимизируя полезный эффект от увеличения времени циркуляции, и возможных негативных эффектов понижения концентрации молекул/клеток крови, выводимых клетками РЭС.

Такой подход может быть использован и для блокировки фагоцитирующих клеток РЭС в других естественных жидкостях, а также тканях организма. При введении соответствующих агентов, которые заставляют фагоцитирующие клетки РЭС активно поглощать клетки и/или молекулы организма или иные объекты, их способность к фагоцитированию агента снижается, что приводит к росту целевой эффективности агента.

Данное изобретение может быть использовано для диагностических и/или терапевтических целей. В том числе для целей улучшения направленной доставки различных агентов к различным мишеням в организме. Характер и тип мишеней может быть самым разнообразным, например, это могут быть специфические клетки, ткани, области организма (в т.ч. злокачественные новообразования и очаги воспаления).

Применение данного изобретения может быть, например, следующим. В организм внутривенно вводят субстанцию, вызывающую блокировку РЭС (например, гуманизированные антитела против эритроцитов), а затем внутривенно вводят полимерные частицы содержащие токсичные молекулы (например, противоопухолевый препарат доксорубицин или цисплатин). Частицы либо за счет эффекта усиленного проникновения (англ. - Enhanced permeability and retention effect), либо за счет специфических противораковых антител накапливаются в опухоли (как показано в Примере 6), где доксорубицин или цисплатин десорбируется и вызывает гибель опухолевых клеток.

В одном воплощении изобретения, используют моноклональное антитело, предпочтительно против эритроцитов или тромбоцитов, еще предпочтительнее связанное с аллогенными эритроцитами или тромбоцитами, предпочтительно, с эритроцитами или тромбоцитами организма или их аллогенными вариантами. При этом в одном воплощении метода, моноклональное антитело выбирают по типу и изотипу таким, чтобы достичь контролируемого удаления клеток из циркуляции преимущественно по определенному механизму, например, за счет фагоцитоза клеток, с которыми связались антитела, по Fc-рецептор опосредованному механизму (для блокировки, например, купферовых клеток организма), агглютинации эритроцитов для фильтрации агрегатов селезенкой, за счет комплемент-опосредуемого гемолиза клеток для нагрузки почек и т.п. При этом в одном воплощении изобретения, используют комбинацию различных антител для влияния как на биораспределение выводимых клеток или других объектов, блокирующих клетки РЭС, так и на биораспределение агента по тканям организма. Т.е. например, в случае преимущественной блокировки печени, агент будет преимущественно накапливаться в мишени (например, в опухоли), а также селезенке, легких и т.п. Кроме того, использование моноклональных антител позволяет создавать субстанцию с точным и хорошо воспроизводимым составом, что полезно для контроля качества и минимизации вредных эффектов от введения такой субстанции.

В одном из воплощений изобретения, используют гуманизированное или химерное антитело, предпочтительно против эритроцитов или тромбоцитов, еще предпочтительнее связанное с аллогенными эритроцитами или тромбоцитами, предпочтительно, с эритроцитами или тромбоцитами организма или их аллогенными вариантами. Кроме того, изготовление моноклонального антитела, например, мышиного или крысиного, против, например, человеческих эритроцитов, и его последующая гуманизация позволяют получить высокоафинное антитело нужного изотипа, с нужным Fc-фрагментом и т.п. Также возможно получение нужного варианта антитела с помощью технологии фагового дисплея.

В одном воплощении изобретения, субстанция содержит компонент, который приводит к усиленному выведению из циркуляции молекул организма, преимущественно макромолекул или макромолекулярных комплексов. Это важно, в том числе для всесторонней блокировки клеток, способных выводить агенты из циркуляции в кровотоке, преимущественно для блокировки всех типов таких клеток. Это позволяет существенно снизить дозу агента, которую необходимо ввести, чтобы доставить определенное его количество к мишени и повысить специфичность доставки, т.е. доставлять как можно большую часть вводимой дозы агента к мишени.

В одном из воплощений изобретения, используют антитело или смесь антител одновременно против эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов (в т.ч. связанные с эритроцитами, лейкоцитами и тромбоцитами), преимущественнее вместе с компонентами, способствующими усиленному выведению различных молекул (преимущественно, макромолекул или макромолекулярных комплексов) из организма. Это позволяет блокировать наибольшую часть клеток, способных выводить агент из циркуляции в кровотоке, а потому позволяет снизить необходимую дозу агента.

Работа предлагаемого способа иллюстрируется чертежами фиг. 1-3.

Список фигур чертежей.

Фиг. 1. Динамика циркуляции магнитных частиц введенных в кровоток мыши, измеренная как указано в Примере 1. Введение частиц произведено через приблизительно 1.2 минуты после начала записывания динамики.

Фиг. 2. Аппроксимация средней части динамики магнитных частиц (показанной на Фиг. 1 - сегмент с 2 минут до ~6.3 минут) экспоненциальной зависимостью для определения времени полувыведения частиц из кровотока.

Фиг. 3. Среднее содержание магнитных частиц в опухолях мышей, которым магнитные частицы вводили без введения антител и после введения антител, как описано в Примере 6.

ПРИМЕРЫ

Варианты реализации изобретения разнообразны. Приведем различные примеры. Нижеприведенные примеры даны в качестве иллюстрации данного изобретения и не ограничивают его применения.

Пример 1.

Измерение времени циркуляции магнитных частиц в кровотоке мыши.

Хвост мыши Balb/c помещали в катушку детектора магнитных наночастиц, созданного автором изобретения и описанного ранее в [Никитин П.И., Ветошко П.М. Измеритель магнитной восприимчивости. Патент РФ 2177611 (2000)], и фиксировали. Затем, в ретроорбитальный синус вводили 100 мкл суспензии магнитных частиц и регистрировали динамику содержания магнитных частиц в кровотоке хвостовых вен и артерий мыши (см. Фиг 1). Время полувыведения частиц из кровотока вычисляли либо с помощью аппроксимации полученных данных экспоненциальной зависимостью (см. Фиг. 2), либо как среднее время, требуемое для уменьшения сигнала в 2 раза на среднем участке кривой.

Пример 2.

Увеличение времени циркуляции нано- и микроагентов в кровотоке мыши.

Раствор моноклональных мышиных антител против мышиных эритроцитов (клон 34-3с) (или равный объем - 100 мкл - физиологического раствора в контрольном эксперименте) вводили мышам Balb/c в дозировке 1.3-3 мг/кг внутрибрюшинно или в ретроорбитальный синус. Затем, спустя 10-15 часов вводили в ретроорбитальный синус магнитные частицы с характерным размером 100 нм (гидродинамический размер), 240 нм, 1 мкм и измеряли динамику концентрации частиц в кровотоке как описано в примере 1. Время полувыведения частиц при введении антител было в среднем в 9 раз выше для 100 нм частиц, в 26 раз выше для 240-нм частиц, в 10 раз выше для 1 мкм частиц, чем в контрольных экспериментах.

Пример 3.

Увеличение времени циркуляции нано- и микроагентов в кровотоке мыши с помощью комплекса клеток и антител.

Раствор моноклональных мышиных антител против мышиных эритроцитов (клон 34-3с) (или равный объем физиологического раствора в контрольном эксперименте) инкубировали в течение 1 часа с эритроцитами выделенными из 100-200 мкл мышиной крови (трижды очищенных на центрифуге фосфатно-солевым буферным раствором). Вводили полученные комплексы эритроцитов и антител мышам Balb/c в ретроорбитальный синус. Затем, спустя 10 часов вводили в ретроорбитальный синус магнитные частицы с характерным размером 100 нм (гидродинамический размер), 240 нм, 1 мкм и измеряли динамику концентрации частиц в кровотоке как описано в примере 1. Время полувыведения частиц при введении антител было в 3-22 раза выше, чем в контрольном эксперименте.

Пример 4.

Обратимость эффекта увеличения времени циркуляции нано- и микроагентов в кровотоке мыши.

Раствор моноклональных мышиных антител против мышиных эритроцитов (клон 34-3с) (или равный объем физиологического раствора в контрольном эксперименте) вводили мышам Balb/c в дозировке 1.5 мг/кг внутрибрюшинно. Затем, спустя 10 дней вводили в ретроорбитальный синус магнитные частицы с характерным размером 100 нм (гидродинамический размер), 240 нм, 1 мкм и измеряли динамику концентрации частиц в кровотоке как описано в примере 1. Время полувыведения частиц в случае введения антител не отличалось от времени полувыведения в контрольном эксперименте (в рамках погрешности эксперимента).

Пример 5.

Повышение эффективности адресной доставки агента к мишени.

Раствор моноклональных мышиных антител против мышиных эритроцитов (клон 34-3с) (или равный объем физиологического раствора в контрольном эксперименте) вводили мышам Balb/c в дозировке 1.5 мг/кг внутрибрюшинно. Затем, спустя 10-15 часов вводили в ретроорбитальный синус магнитные наночастицы с характерным размером 240 нм, конъюгированные с флуоресцентно-меченными антителами против мышиного CD4 (клеточный маркер Т-клеток). Спустя 30 минут делали забор крови из ретроорбитального синуса, и окрашивали антителом против мышиного CD4, меченным вторым флуоресцентным красителем. Методом цитофлуориметрии измеряли процент клеток, прокрашенных обоими упомянутыми красителями. В случае при введении мышам антител против эритроцитов средняя окрашенность CD4+ клеток первым красителем (а, следовательно, и частицами) была в 3-9 раз большей, чем в случае с введением физиологического раствора.

Пример 6.

Повышение эффективности доставки агента в опухоль.

Мышам вводили подкожно 10^6 клеток меланомы B16F10. После развития опухолей, мышам с опухолью размером 150-200 куб. мм вводили агент (нано- и микрочастицы), как описано в Примере 2 (после введения и без введения раствора моноклональных мышиных антител против мышиных эритроцитов). Через 5 часов после введения частиц экстрагировали органы и опухоль. Измеряли содержание магнитных частиц в опухоли с помощью детектора магнитных наночастиц, созданного автором изобретения и описанного ранее в [Никитин П.И., Ветошко П.М. Измеритель магнитной восприимчивости. Патент РФ 2177611 (2000)]. Содержание частиц (на грамм ткани) в опухолях мышей в случае введения анти-эритроцитных антител было в 2-3 раза выше, чем содержание частиц в опухолях мышей в случае без введения анти-эритроцитных антител (см. соотношение на Фиг. 3 для 100-нм частиц).

Изобретение относится к области биомедицины и наномедицины. Изобретение позволяет повышать диагностическую или терапевтическую эффективность вводимого в организм агента и может быть использовано для повышения эффективности методов диагностики и терапии различных заболеваний, за счет более эффективной доставки (пассивной или направленной) агента к клеткам-мишеням, улучшения фармакокинетических показателей агента (времени циркуляции) и т.п. Сущность изобретения заключается в субстанции для повышения диагностической или терапевтической эффективности вводимого в организм агента, включающей в себя, по крайней мере, компонент, который при введении субстанции в организм способствует выведению ретикуло-эндотелиальной системой из кровотока, по крайней мере, объектов, циркулирующих в кровотоке, но не являющихся искусственно-созданными нано- или микрочастицами или опсонинами, связывающимися с упомянутым компонентом неспецифически, причем упомянутое выведение упомянутых объектов вызывает, по крайней мере, частичную блокировку ретикуло-эндотелиальной системы. Технический результат при использовании изобретения состоит в создании метода блокировки клеток ретикуло-эндотелиальной системы с помощью введения малого количества чужеродного вещества или безопасного биосовместимого вещества и усилении эффекта блокировки. 3 н. и 24 з.п. ф-лы, 3 ил., 6 пр.

1. Субстанция для повышения диагностической или терапевтической эффективности вводимого в организм агента, включающая в себя антитело против клеток крови, которое приводит к выведению клеток крови из кровотока ретикуло-эндотелиальной системой, вызывая, по крайней мере, частичную блокировку ретикуло-эндотелиальной системы.

2. Субстанция для повышения диагностической или терапевтической эффективности вводимого в организм агента, состоящая из клеток крови и антитела против клеток крови, которое способствует выведению ретикуло-эндотелиальной системой упомянутых клеток из кровотока, вызывая, по крайней мере, частичную блокировку ретикуло-эндотелиальной системы.

3. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются эритроциты.

4. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются тромбоциты.

5. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются лейкоциты.

6. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются клетки самого организма.

7. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутые клетки выводятся из свободной циркуляции в кровотоке.

8. Субстанция по п. 1, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются клетки, не покидавшие организм.

9. Субстанция по п. 1, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются клетки, попавшие в организм искусственным путем.

10. Субстанция по п. 1, отличающаяся тем, что упомянутыми клетками являются клетки, попавшие в организм путем трансфузии крови или компонентов крови донора.

11. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутое антитело способствует выведению упомянутых клеток крови за счет их распознавания и способствования их фагоцитозу ретикуло-эндотелиальной системой.

12. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что связывание упомянутого антитела с упомянутыми клетками крови вызывает преимущественно Fc-рецептор-опосредованный фагоцитоз упомянутых клеток в организме.

13. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутое выведение ретикуло-эндотелиальной системой упомянутых клеток крови вызывается их агглютинацией под действием упомянутого антитела.

14. Субстанция по пп. 1, 2, в которой упомянутое антитело является высокогомологичным видовым антителом организма (или его вариантом), в т.ч. аутологичным, аллогенным, гуманизированным или химерным антителом.

15. Субстанция по пп. 1, 2, в которой упомянутое антитело является моноклональным антителом.

16. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что включает в себя несколько различных антител.

17. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что масса вводимого упомянутого антитела субстанции не превышает 20% от массы клеток крови, выводимых ретикуло-эндотелиальной системой и вызывающих блокировку ретикуло-эндотелиальной системы.

18. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что ее доза не превышает 5 мг/кг веса организма.

19. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутый агент состоит в том числе из, по крайней мере, одной из следующих нано- или микрочастиц: магнитной, флуоресцентной, белковой (в том числе представляющей собой кросс-сшитый, полимеризованный или агрегированный белок), полимерной, в т.ч. состоящей, по крайней мере, из одного из следующих полимеров: полистирола, декстрана, полипептида, полилактид гликолевой кислоты или блок-кополимеров, или кристаллической (золотой, серебряной, полупроводниковой или металлической) нано- или микрочастицы.

20. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутый агент используется для диагностики или терапии заболеваний или состояний организма, включающих в себя одно или несколько заболеваний из следующего списка: рак, атеросклероз, инсульт, инфаркт, в т.ч. включая проведения диагностики заболеваний или состояний организма с использованием ангиоконтрастирования.

21. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутый агент осуществляет визуализирующую функцию за счет произведения детектируемого сигнала, в т.ч., по крайней мере, одного из следующего списка: флуоресцентного, люминесцентного, ПЭТ-сигнала, МРТ-контрастирующего сигнала, рентгеноконтрастирующего, магнитного сигнала, или сигнала за счет плазмонного резонанса, или сигнала за счет поглощения света или иных электромагнитных или акустических волн.

22. Субстанция по пп. 1, 2, отличающаяся тем, что упомянутый агент осуществляет терапевтическую функцию, например, за счет доставки к мишеням цитостатических или цитотоксических соединений или лекарственных соединений, в т.ч. низкомолекулярных, ферментных, радиоактивных, химиотерапевтических, веществ для проведения фотодинамической терапии, гипертермии.

23. Способ повышения диагностической или терапевтической эффективности вводимого в организм агента, в котором:

i) вводят в организм субстанцию по пп. 1-22,

ii) до или после ввода упомянутой субстанции или одновременно с вводом упомянутой субстанции вводят упомянутый агент, опосредующий диагностическое или терапевтическое действие.

24. Способ по п. 23, отличающийся тем, что упомянутый агент вводят спустя не менее 6 часов и не более 18 часов после введения упомянутой субстанции.

25. Способ по п. 23, отличающийся тем, что упомянутое введение в организм упомянутой субстанции повышает эффективность диагностического или терапевтического действия упомянутого агента за счет увеличения времени циркуляции упомянутого агента в кровотоке организма.

26. Способ по п. 23, отличающийся тем, что наряду с введением упомянутой субстанции и упомянутого агента в организм вводят восстанавливающий агент, вызывающий повышение (по сравнению со случаем без введения упомянутого восстанавливающего агента) уровня клеток, выведение которых из кровотока вызывает упомянутая субстанция или упомянутый компонент упомянутой субстанции.

27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что упомянутый восстанавливающий агент является кровью самого организма или ее составляющими или донорской кровью или ее составляющими.