Гетероциклические амиды тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием Российский патент 2019 года по МПК C07D263/06 C07D277/06 A61K31/421 A61K31/426 A61P7/10 A61P29/00 

Гетероциклические производные тирозина, обладающие анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием

Изобретение относится к физиологически активным производным тирозина, обладающим анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием. Заявляемые производные могут использоваться в косметических и лечебных целях в составе кремов, мазей или гелей с указанным спектром активности.

Известен целый ряд медицинских и косметических средств, в состав которых включены нестероидные противовоспалительные агенты, обладающие обезболивающими и противовоспалительными свойствами. Это малые молекулы различной химической структуры, наиболее важные из них для наружного использования:

1) производные салициловой кислоты, например в комбинации с бетаметазоном дипропионата (патент РФ №2223465, МПК А61К 31/573, опубл. 20.02.2004);

2) производные индолуксусной кислоты, а именно индометацин в составе мази «Индометацин» (Инструкция к применению, Индометацин мазь 10%, производитель Биосинтез, Россия) и геля «Индовазин» (Инструкция к применению, Индовазин гель, 45 г);

3) производные фенилуксусной кислоты, а именно диклофенак в составе препаратов «Вольтарен Эмульгель» (Инструкция к применению, Вольтарен эмульгель, гель), «Дикловит» и др. (Инструкция к применению, Дикловит гель 1%);

4) производные пропионовой кислоты, а именно ибупрофен - «Нурофен гель» (Инструкция к применению Нурофен гель, 5%), кетопрофен - «Фастум гель» (Инструкция к применению Фастум гель) и «Кетонал гель» (Инструкция к применению Кетонал гель);

5) оксикамы, а именно пироксикам - «Пироксикам-гель» (Инструкция к применению Пироксикам гель), «Финалгель» (Инструкция к применению Финалгель);

6) производные сульфонамида, а именно нимесулид - «Найз гель» (Инструкция к применению Найз гель)

Перечисленные вещества входят в состав различных мазей, гелей и кремов, которые применяются в качестве обезболивающих и противовоспалительных средств, главным образом при лечении острых и хронических воспалительных заболеваниях опорно-двигательного аппарата, а также спортивных травм (ушибов, повреждения связок и мышц). Известным недостатком нестероидных противовоспалительных средств является прямое или косвенное поражение слизистой желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) особенно при длительном применении (диарея, язва желудка и двенадцатиперстной кишки, желудочно-кишечные кровотечения), а также риск развития сердечно-сосудистых осложнений (инсульты, инфаркты миокарда, тромбозы периферических артерий). Кроме того, если эти средства применяются на обширных участках в течение длительного времени и в высоких дозах, возможно возникновение системных побочных эффектов.

Известны также нестероидные противовоспалительные средства на основе физиологически активных компонентов ядов пчел и змей.

Пчелиный яд представляет собой комплексную смесь биологически активных веществ. Он содержит ферменты, биогенные амины, аминокислоты (триптофан), пептиды - меллитин, апамин, а также холин, свободные жирные кислоты, сахара, липиды, свободные основания, органические кислоты (фосфорную), магний, микроэлементы. Пептиды составляют более 50% сухого веса пчелиного яда и обусловливают большую часть его физиологической активности. Наиболее известным средством на основе пчелиного яда является мазь «Апизартрон» (Инструкция к применению Апизартрон, мазь).

Близкой противовоспалительной и обезболивающей активностью обладают яды кобры и гадюки. В змеином яде содержатся аминокислоты и белки (в том числе ферменты); жирные кислоты, микроэлементы. Мази «Випросал», Кобратокс и др.

Препараты на основе ядов пчел и змей используются в низких дозах и не имеют таких побочных эффектов, как соединения, перечисленные выше, однако яды пчел и змей являются сильными аллергенами и могут вызвать у пациента аллергическую реакцию. Кроме того, сырье для подобных мазей является труднодоступным и дорогим. Это сырье трудно стандартизировать, что очень важно для промышленного производства.

Известна группа нейропептидов, являющихся эндогенными лигандами - агонистами опиоидных рецепторов. Эти пептиды обладают анальгезирующим действием. К эндогенным опиоидным пептидам относят эндорфины, энкефалины, динорфины и др. Система опиоидных пептидов головного мозга играет важную роль в формировании мотиваций, эмоций, поведенческой привязанности, реакции на стресс и боль и в контроле приема пищи. Пептиды, как правило, нетоксичны, действуют в низких дозах, не вызывают привыкания, в организме имеются ферментные системы для их деградации до аминокислот.Низкомолекулярные пептиды и производные аминокислот не обладают антигенными и иммуногенными свойствами. Пептидные субстанции доступны и легко поддаются стандартизации.

Особенностью структуры нейропептидов является наличие в их составе тирозина, который является функционально значимой аминокислотой. Сам тирозин также обладает физиологичекой активностью, однако его применение в качестве лекарственного препарата ограничено из-за низкой растворимости этой аминокислоты в водных средах.

Задачей данного изобретения является разработка производных тирозина для применения в составе косметических или лекарственных кремов, гелей или мазей, обладающих анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием, не вызывающих побочных эффектов при наружном использовании со стороны ЖКТ, сердечно-сосудистой системы, аллергических реакций и привыкания.

Технический результат изобретения заключается в достижении анальгетического, противовоспалительного и противоотечного действия без побочных эффектов, аллергических реакций и привыкания.

Технический результат достигается путем синтеза производных тирозина формулы Н - Tyr - X, где X является группой, обеспечивающей растворимость соединения в водных средах.

Атом углерода в пятичленном гетероцикле, помеченный звездочкой, является оптически активным и может иметь как L, так и D- конфигурацию.

Неочевидность изобретения обусловлена тем, что любой дизайн органических молекул на основе аминокислот является чисто теоретическим подходом. В ряду производных аминокислот или их аналогов не существует четкой взаимосвязи структура-активность, так как каждое модифицированное производное аминокислоты является уникальным химическим соединением, его биологическая активность не является очевидной и требует экспериментального подтверждения.

Синтез заявляемых соединений формулы (I) осуществляется методами пептидной химии в растворе путем конденсации соответствующей гетероциклической иминокислоты (оксазолидикарбоновой - для производных (Ia) или тиазолидинкарбоновой - для соединений (Ib)), полученных по описанным методикам, с активированным эфиром ди-Вос-L-тирозина с последующим удалением защитных групп до соединений формулы (I). Для очистки соединений формулы (I) применяли переосаждение и кристаллизацию, а в случае необходимости ионообменную хроматографию на катионообменной смоле.

Структура полученных соединений подтверждена данными ¹Н-ЯМР-спектроскопии, а их гомогенность данными высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Противовоспалительное и анальгезирующее действие заявляемых производных тирозина изучали в остром эксперименте на модели формалинового отека лапы у мышей и в субхроническом эксперименте на модели адъювантного артрита у крыс. По окончании субхронического эксперимента проводили оценку синдрома отмены. Заявляемые соединения для изучения биологической активности вводили в состав нейтрального косметического крема (крем А содержал заявляемое соединение формулы (Ia), а крем В - заявляемое соединение формулы (Ib)). Острую воспалительную реакцию воспроизводили субплантарным введением в правую заднюю лапу 2% раствора формалина. Кремы, содержащие заявляемые производные тирозина (далее «Крем А», «Крем В»), наносили на лапу за 2 и 1 час до введения формалина. Противовоспалительное действие «Кремов А и В» оценивали по выраженности отека, анальгезирующее действие по поведению животных (в баллах), по двигательной активности (в тесте «открытое поле»).

Результаты проведенного исследования показали, что при накожном применении заявляемых косметических средств - «Крема А» и «Крема В» снижается болевая чувствительность и происходит уменьшение выраженности индуцированного формалином отека лапы. Угнетение отека составило в среднем около 10%.

Хроническое воспаление (адъювантный артрит) моделировали на крысах самках путем субплантарного введения в правую заднюю лапу 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ) (Becton, Dickinson and Company, U.S.A. Lot 6292862). Контрольный крем и заявляемые косметические средства наносили крысам через сутки после введения ПАФ и далее ежедневно в течение 27 дней. Воспалительную реакцию оценивали в динамике каждые 2-3 дня по интенсивности воспалительных изменений в суставах пораженной конечности, выраженной в проценте отека, а также по изменению порогов болевой чувствительности. Первичную реакцию (отек на лапе введения) оценивали на 3-й день после инъекции адъюванта.

На второй день после отмены крема тестировали животных на наличие синдрома отмены. Синдром отмены оценивали на второй день после отмены заявляемых косметических средств - «Крем А» и» Крем В», регистрируя анальгетическую активность, двигательную активность в тесте «открытое поле», общее состояние по нарушению ушного и корнеального рефлексов, наличию судорог, тремора, птоза, прыжков, встряхивания, стука зубами, чесания, чихания, бокового положения.

В процессе субхронического эксперимента было установлено, что применение «Кремов А и В» после создания аъювантного артрита тормозит развитие воспалительного процесса. Максимальное угнетение отека составляло 20 - 25% на 7-15 сутки исследования для «Крема В».

После прекращения использования заявляемых косметических средств не было выявлено синдрома отмены. Поведение и рефлексы животных не изменились.

Полученные результаты свидетельствуют о высокой эффективности заявляемого «Крема В» как противовоспалительного и анальгезирующего средства.

Пример 1. Получение N-тирозил-4-карбонил-5-метил-1,3-оксозолидина (Ia)

К суспензии 1.95 г (15,0 ммоль) 4-карбокси-5-метил-1,3-оксозолидина [М.R. Vishnumaya, V.K. Singh Highly efficient small organic molecules for enantioselective direct aldol reaction in organic and aqueous media // J.Org. Chem. 2009, v. 74, p. 4289-4297] в 40 мл сухого диметилфорамида (DMF) при перемешивании прибавляли 4.1 мл (29.3 ммоль) триэтиламина и 7.2 г (15.0 ммоль) Вос₂-Tyr-ONSu и перемешивали при комнатной температуре 15 часов. Растворители упаривали, остаток растворяли в 50 мл этилацетата и последовательно промывали 5% раствором серной кислоты и водой до нейтрального значения рН, этилацетатный слой упаривали. Остаток растворяли в 20 мл хлористого метилена и прибавляли 16.5 мл трифторуксусной кислоты. Реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре 1 час и трифторуксусную кислоту упаривали, остаток растворяли в воде и полученный раствор наносили на колонку с катионообменной смолой (СПС БИО Сульфопропил). Продукт элюировали градиентом концентрации пиридин-ацетатного буфера рН 5.5 от 0.05 М (500 мл) до 0.3 М (500 мл). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли, упаривали и маслообразный остаток еще дважды упаривали с водой. Продукт кристаллизовали из 60 мл изо-пропилового спирта. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали на фильтре изо-пропиловым спиртом и высушивали. Выход 3.2 г. (72%). Rf 0.5 (система хлороформ-метанол-32% уксусная кислота 60:45:20). Чистота продукта по данным ВЭЖХ 95.1%. Структура соединения подтверждена данными спектра ¹Н-ЯМР. На Фиг. 1 показан Спектр ¹Н ЯМР N-тирозил-4-карбонил-5-метил-1,3-оксозолидина (Ia) в DMSO-d₆ при 300К.

Пример 2. Получение N-тирозил-4-карбокси-1,3-тиазолидина (Ib)

К суспензии 5.6 г (42.0 ммоль) 4-карбокси-1,3-тиазолидина, полученного по известной методике [М.R. Vishnumaya, V.K. Singh Highly efficient small organic molecules for enantioselective direct aldol reaction in organic and aqueous media // J.Org. Chem. 2009, v. 74, p. 4289-4297] в 100 мл сухого DMF при перемешивании прибавляли 7.6 мл (54.0 ммоль) триэтиламина и 20.1 г (42.0 ммоль) Вос₂-Tyr -ONSu. Реакционную смеси перемешивали при комнатной температуре 15 часов. Растворители упаривали, остаток растворяли в 150 мл этилацетата и последовательно промывали 5% раствором серной кислоты и водой до нейтрального значения рН, органический слой упаривали. Остаток растворяли в 50 мл хлористого метилена и прибавляли 50 мл трифторуксусной кислоты. Реакционную смесь выдерживали при комнатной температуре 1 час и упаривали. Остаток растворяли в воде и полученный раствор наносили на колонку с катионобменной смолой (СПС БИО Сульфопропил). Колонку последовательно промывали двумя объемами пиридин-ацетатного буфера рН 5.5 увеличивая ионную силу буфера от 0.05 М до 0.3 М. Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали. Остаток кристаллизовали из 200 мл изо-пропилового спирта. Выпавший осадок отфильтровывали, промывали на фильтре изо-пропиловым спиртом и высушивали. Выход 9.2 г (86.6%), Rf 0.5 (система хлороформ-метанол-32% уксусная кислота -60:45:20). Чистота продукта по данным ВЭЖХ более 95.3%. Структура соединения подтверждена данными спектра ¹Н-ЯМР. На Фиг. 2 показан Спектр ¹Н ЯМР N-тирозил-4-карбокси-1,3-тиазолидина (Ib) в DMSO-d₆ при 300К.

¹H-ЯМР-спектры снимали на спектрометре WM-500 (Bruker) 500 МГц в DMSO-d₆ при 300 K, концентрация производных тирозина составляла 2-3 мг/мл Химические сдвиги измерялись относительно тетраметилсилана.

Исследование биологической активности выполнено в соответствии с регламентирующими документами.

Все процедуры в исследовании выполнены согласно утвержденному Плану исследования и Стандартным Операционным Процедурам (СОП).

Биологическая тест-система

Количество животных, задействованных в исследовании, было достаточным для полной регистрации изучаемых эффектов и статистической обработки полученных данных. Самки не были беременными или рожавшими.

Вид животных, порода/линия:

Мыши - В ALB/c (самцы)

Крысы - аутбредные (самки)

Начальный вес: Мыши - 25-28 г. Крысы - 210-260 г

Принципы отбора животных и распределения по группам: по весу и возрасту методом случайного отбора. Масса тела каждого животного не отклонялась от средней по группе более чем на 20%.

Все манипуляции с животными проводили согласно правилам, принятым Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для исследований и других научных целей (European Conventionforthe Protectionof Vertebrate Animals Usedfor Experimentalandother Scientific Purposes (ETS 123) Strasbourg, 1986) и Директивой 2010/63/EU Европейского парламента и совета Европейского Союза от 22 сентября 2010 года по охране животных, используемых в научных целях.

Методика эксперимента

Исследуемый препараты - кремы для наружного применения (далее «Крем А» и «Крем В»)

Действующее вещество - заявляемые производные тирозина формулы (I)

Мышам наносили и втирали в лапку 0,02 мл тестируемого косметического средства, крысам 0,1 мл. Это максимально возможный объем крема, который хорошо впитывался и не оставался на поверхности кожи. Экспериментально было установлено, что 1 мл косметического средства весит 1008 мг. Для мышей со средней массой тела 25 г доза составила 20 мг на мышь или 800 мг/кг. Для крыс со средней массой тела 250 г доза составила 101 мг или 404 мг/кг.

«Крем А» и «Крем В» набирали в шприц, объемом 1 мл и дозировано наносили мышам и крысам на опытную лапу, втирая массирующими движениями до полного впитывания крема.

Пример 3. Изучение противовоспалительного действия заявляемых кремов в остром эксперименте при создании формалинового отека

Острую воспалительную реакцию воспроизводили субплантарным введением в правую заднюю лапу 2% раствора формалина в объеме 0,02 мл.

Заявляемые «Кремы А и В» наносили на правую лапу за 2 и 1 час до введения формалина. Контрольным животным в правую лапку втирали нейтральный косметический крем, используемый в качестве основы при создании тестируемых косметических средств (далее «Контрольный крем»).

После окончания наблюдения животных подвергали эвтаназии методом цервикальной дислокации. В таблице 1 показаны условия проведения острого эксперимента.

В результате субплантарного введения 0,02 мл 2% водного раствора формалина в правую заднюю лапу у мышей развивался выраженный отек. Толщину лапок измеряли до введения формалина, через 3 часа, 1 и 2 суток после индукции воспаления с помощью микрометра МКЦ-25 (ООО НПП «ЧИЗ»). Выраженность отека оценивали в процентах по разнице толщины лапки в момент измерения и до формалинового отека. Противовоспалительную активность рассчитывали по формуле:

По полученным данным проводили сравнительный анализ в группах, получавших «Контрольный крем», «Крем А» и «Крем В», результаты влияния заявляемых кремов на выраженность «формалинового» отека лапы мыши (толщина лапки, мкм) приведены в табл. 2 и на Фиг. 3 изображен график влияния заявляемых кремов на выраженность «формалинового» отека лапы мыши (% отека).

Отмечено, что на всех сроках измерения лап, у мышей обработанных «Кремом В» процент отека был меньше, чем у животных обработанных «Контрольным кремом» и «Кремом А».

Пример 4. Изучение анальгетического действия заявляемых кремов в остром эксперименте при создании формалинового отека

Как и в примере 3, острую воспалительную реакцию воспроизводили субплантарным введением в правую заднюю лапу 2% раствора формалина в объеме 0,02 мл.

Заявляемые «Кремы А и В» наносили на правую лапу за 2 и 1 час до введения формалина. Контрольным животным в правую лапку втирали «Контрольный крем».

После окончания наблюдения животных подвергали эвтаназии методом цервикальной дислокации. Дизайн исследования в условиях острого эксперимента аналогичен таковому в примере 3 (см. табл. 1).

В течение первого часа после создания формалинового воспаления вели наблюдение за каждым животным, отмечая признаки боли. Через 3 часа, 1 и 2 суток мышей тестировали по двигательной активности, статико-силовой выносливости и длительности плавания. В эти периоды проводили измерение пораженной конечности и наблюдали за состоянием животных. После окончания наблюдения животных подвергали эвтаназии методом цервикальной дислокации.

Изучение аналъгетического действия по поведению животных

После введения формалина у мышей в течение первых 60 минут учитывали число болевых реакций по 4 типам поведения:

0 - отсутствие реакции;

1 - лапа остается на полу, но животное на нее не опирается;

2 - лапа поднята;

3 - животное облизывает или грызет лапу, либо встряхивает или подергивает ей.

Критерием анальгетического эффекта считали достоверное уменьшение числа болевых реакций в группах, получавших заявляемые «Крем А и В», относительно контрольной группы.

Сразу после субплантарного введения формалина мыши проявляли сильное беспокойство. После возвращения в клетку они начинали усиленно облизывать инъецированную лапу. В течение часа все мыши не опирались на пораженную конечность. Замечено, что мыши, чьи лапы были обработаны «Кремом В» проявляли меньше беспокойства, чем мыши двух других групп. В таблице 4 указано количество поднятия лапы и облизывания ее, выраженное в баллах. В таблице 3 приведены данные о влиянии заявляемых кремов на болевой порог. На Фиг. 4 показан график влияния тестируемых кремов на болевой порог. Из предоставленных данных видно, что применение «Крема В» больше других кремов снижает интенсивность болевого ответа на введение формалина.

Изучение аналъгетического действия по двигательной активности в тесте «открытое поле»

Через 3, 24 и 48 часов после создания формалиновой модели животных по одной особи помещали в экспериментальную установку «открытое поле», которая представляет собой камеру размером 330×430×205 мм. Пол камеры разделен на 20 квадратов. В течение 2 минут учитывали количество вертикальных стоек и количество пересеченных (4 лапами) квадратов. Критерием анальгезирующего действия считали увеличение показателей горизонтальной и вертикальной активности. Данные о влиянии тестируемых кремов на двигательную активность мышей представлены в табл. 4. На Фиг. 5 также показан график влияния заявляемых кремов на двигательную активность мышей. Через 3 часа после введения формалина все мыши активно двигались по арене и вставали на задние лапы, опираясь и на пораженную конечность. Отмечено, что животные, чьи опытные лапы получали крем «Крем В», через 3 часа и 24 часа активнее вставали на задние лапы по сравнению с группой, которой вводили «Контрольный крем». Однако наилучший результат показан в группе, чьи лапы обрабатывали гелем «Крем А». В этой группе мыши чаще пересекали квадраты и вставали на задние конечности.

Пример 5. Изучение противовоспалительного действия «Крема» в субхроническом эксперименте при создании адъювантного артрита.

Методика исследования

Хроническое воспаление (адъювантный артрит) моделировали на крысах самках путем субплантарного введения в правую заднюю лапу 0,1 мл полного адъюванта Фрейнда (ПАФ) (Becton, Dickinson and Company, U.S.A. Lot 6292862). Контрольный крем и заявляемые косметические средства наносили крысам через сутки после введения ПАФ и далее ежедневно в течение 27 дней. Воспалительную реакцию оценивали в динамике каждые 2-3 дня по интенсивности воспалительных изменений в суставах пораженной конечности, выраженной в проценте отека, а также по изменению порогов болевой чувствительности. Первичную реакцию (отек на лапе введения) оценивали на 3-й день после инъекции адъюванта.

На второй день после отмены «Крема» тестировали животных на наличие синдрома отмены.

В таблице 5 показаны условия проведения субхронического эксперимента.

Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью программного обеспечения Microsoft Office Excel 2010. Вычисляли групповое среднее арифметическое (М) и стандартную ошибку среднего (m). Статистическую достоверность различий оценивали по t-критерию Стьюдента. Достоверным считали различие данных групп при р<0,05.

Течение экспериментального адъювант-индуцированного артрита характеризовалось изменением различных показателей. В течение первых 24 часов у всех крыс визуально наблюдалась гиперемия и отек задней правой конечности (место инъекции полного адъюванта Фрейнда). Также отмечалось изменение походки - животные оберегали поврежденную конечность, избегая наступать на нее, поджимали лапу кверху. Анальгезирующий эффект тестируемых кремов отмечали в процессе измерения пораженной конечности. Установлено, что у большинства животных групп, получавших заявляемые косметические средства - «Крем А» и «Крем В», слабый анальгезирующий эффект наступил к 5 суткам эксперимента, в контрольной группе животных, получавших крема «Контрольный крем» - к 7 суткам. Далее болевая реакция у крыс снижалась с уменьшением отека пораженной конечности.

Течение экспериментального адъювант-индуцированного артрита характеризовалось изменением различных показателей. В течение первых 24 часов у всех крыс визуально наблюдалась гиперемия и отек задней правой конечности (место инъекции полного адъюванта Фрейнда). Также отмечалось изменение походки - животные оберегали поврежденную конечность, избегая наступать на нее, поджимали лапу кверху. С течением времени у контрольных животных отек на правой лапе увеличивался, с 12 суток эксперимента начала отекать и другая конечность (вторичная иммунологическая реакция), двигательная активность была снижена, крысы не опирались на поврежденную конечность. Опытные животные, получавшие заявляемые косметические средства, были подвижны, опирались на все конечности, вставали на задние лапы. Разница между левой и правой лапой была не заметна.

Динамику объема пораженной конечности оценивали по толщине опытной лапки, которую измеряли с помощью микрометра МКЦ-25. Полученные данные о влиянии заявляемых кремов на динамику толщины пораженной конечности крыс приведены в таблице 6. На Фиг. 6 приведена Динамика прироста объема лап крысы с адъювантным артритом, %. На протяжении исследования у крыс, которых обрабатывали «Кремом В» процент отека был ниже, чем у крыс, обрабатываемых «Кремом А» и «Контрольным кремом».

Пример 6. Изучение развития синдрома отмены

С целью оценки возможного синдрома отмены проводили оценку основных показателей поведения и рефлексов животных после отмены длительного нанесения заявляемых кремов.

Общее состояние животных на вторые сутки после отмены кремов не изменилось. При нажатии пинцетом на поврежденную конечность все крысы одергивали ее, при раздражении кожи наружного слухового прохода при помощи бумажной трубочки встряхивали головой (ушной рефлекс положительный), при прикосновении к роговице глаза волоска смыкали веки (корнеальный рефлекс положительный). При наблюдении за крысами не было выявлено судорог, тремора, прыжков, встряхиваний, стука зубами, чесания, чихания.

Данные о влиянии заявляемых кремов на эмоционально-двигательную активность крыс в тесте «открытое поле» представлены в таблице 7. После прекращения нанесения заявляемых кремов показатели эмоционально-двигательной активности крыс достоверно не отличались между группами.

После прекращения использования заявляемых косметических средств «Крем А» и «Крем В» не было выявлено синдрома отмены.

Таким образом, проведенное экспериментальное исследование сравнительной фармакологической активности косметических средств: «Контрольного крема», «Крема А», содержащего N-тирозил-4-карбонил-5-метил-1,3-оксозолидин и «Крема В», содержащего N-тирозил-4-карбокси-1,3-тиазолидина показало, что заявляемые кремы обладают противовоспалительным, анальгезирующим и антиэкссудативным действием.

Наиболее выраженными эффектами обладает «Крем В».

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Беленький М.Л. // Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. - Л., 1968, 151 с.

2. Гублер Е.В., Генкин А.А. // Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях, Л., 1973 г.

3. Западнюк И.П., Западнюк В.И., Захария Е.А. // Лабораторные животные, их разведение, содержание и использование в эксперименте. - Государственное медицинское издательство УССР, 1982 - 350 с.

4. Международные рекомендации по проведению медико-биологических исследований с использованием животных // Ланиматология. - 1993. - №1 - С. 29.

5. Национальный стандарт Российской Федерации ГОСТ 33044-2014 «Принципы надлежащей лабораторной практики».

6. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств, ред. А.Н. Миронов, М., «Гриф и К», 2012.

7. Требования Международного комитета по науке по использованию в экспериментальных исследованиях лабораторных животных // Бюллетень ИКЛАС. - 1978. - №24. - С. 4-5.

8. Энциклопедия лекарств. 2017. РЛС. Вып. 25 (под ред. Г.Л. Вышковского) Изд: «Веданта», 2016, 1288 стр.

9. Х.-Д. Якубке, X. Ешкайт. Аминокислоты, пептиды, белки Пер. с нем. под ред. Ю.В. Митина. Москва, «Мир» 1985. 455 стр.

10. В.К. Хугаева, В.В. Сучков, М.И. Титов. Влияние лейэнкефалина и тирозина на лимфатические и тирозина на лимфатические и кровеносные сосуды. Кардиология. 1982. т 22, №6. с. 83-86

11. М.R. Vishnumaya, V.K. Singh Highly efficient small organic molecules for enantioselective direct aldol reaction in organic and aqueous media // J.Org. Chem. 2009, v. 74, p. 4289-4297.

Изобретение раскрывает гетероциклические производные тирозина общей формулы (I) обладающие противовоспалительным, обезболивающим и противоотечным действием. Заявляемые производные могут использоваться в косметических и лечебных целях в составе кремов, мазей или гелей, обладающих анальгетическим, противовоспалительным и противоотечным действием, не вызывающих побочных эффектов при наружном использовании. 6 ил., 7 табл., 2 пр.

Гетероциклические производные тирозина общей формулы

обладающие противовоспалительным, обезболивающим и противоотечным действием.