Способ лечения комбинированных радиационно-термических поражений и средство для его реализации Российский патент 2019 года по МПК A61K36/15 A61P17/02 

Изобретение относится к области медицины, ветеринарии и радиационной биологии и может быть использовано для лечения пострадавших при авариях на ядерных энергетических установках, когда возможно комбинированное действия ионизирующих излучений и термических факторов: пламени, пожара, нагретого пара и др; лечение населения, животных, воинских контингентов после ядерного взрыва с радиационным и термическим поражением, лечение осложнений, наблюдаемых при комбинированной лучевой терапии онкологических больных, способ может быть также рекомендован для применения при лечении ожоговой болезни.

Известен способ лечения радиационных поражений организма, предусматривающий введение противолучевой сыворотки млекопитающих подкожно в дозе 100-125 мг/кг массы тела мелким и 200-250 мг/кг - взрослым в течение первых 10 суток после облучения, и способ получения препарата для лечения радиационных поражений организма (патент RU №2169572, А61К 35/28, опубликовано 27.06.2001 г.).

Недостатком способа является ограниченность применения препарата - он защищает только от радиационных поражений организма.

Известен способ лечения организма при ожогах путем внутривенного введения 40%-ного раствора гексаметилентетрамина, 10%-ного раствора бромида натрия с кофеином и нанесение на пораженный участок 10%-ной салициловой мази, удаления мертвых тканей, обработка гранулирующих дефектов мазью Вишневского (см. статью «Ожог». - Ветеринарный энциклопедический словарь. - М.: Советская энциклопедия. - 1981. - С. 350-351).

Недостатком способа является низкая лечебная эффективность используемых средств и отсутствие их защиты при комбинированном радиационно-термическом поражении.

Известен способ лечение комбинированных радиационно-термических поражений организма путем внутримышечного введения противовоспалительного цитокина-пентоксифилина в дозе 5 мг/кг и моноклональных антител из расчета 10 мкг/моль (см. статью Р.С. Будагова и Л.П. Ульяновой «Эффекты модуляторов уровня цитокинов на выживаемость мышей и крыс при радиационно-термических поражениях // Радиационная биология. Радиоэкол. - 2004. - Т. 44. - №4. - С. 302-304).

Недостатком способа лечения является то, что, во-первых, облучение животных проходило в дозе 7,0 Гр, что составляет ЛД₉₀, и, во-вторых, моделирование термического ожога проводили с помощью вспышек света, которая вызывает просто эритему кожи без развития некротических поражений. Естественный ожог IIIб степени сопровождается сильным поражением кожного покрова с развитием кожного воспаления с последующей демаркацией некротической ткани, что диктует необходимость проведения более радикальных методов лечения ожогов и лучевой болезни при их комбинированном воздействии.

Известно, что радиационные поражения и ожоговая травма сопровождаются дисфункцией иммунитета на почве эндогенной кишечной инфекции с трансформации системной воспалительной реакцией, заканчивающейся радиационно-ожоговым сепсисом. Нанесение ожога на фоне радиационного поражения, вследствие дисфункции иммунитета, вызывает усиление развития условно-патогенной микрофлоры, существенный вклад в которое вносят кишечная палочка (E.coli) и энтеробактерии (Enterobacter) - основные продуценты эндо- и экзотоксинов, ведущие к развитию эндогенной кишечной инфекции, а основной вклад в развитии ожогового поражения на месте нанесения травмы - стафилококки (St. aureus), инфицированные ожоговые (термотоксины) и микробные токсины (стафилотоксины). На этом фоне действенным средством борьбы с последствием радиационного-термического поражения является применение антибиотиков, оказывающих антимикробное действие.

Известен способ лечения при массовых радиационных поражениях, лечения постлучевой раневой инфекции и сепсиса, заключающийся во введении антибиотиков (тетрациклинов) совместно с сорбентом окисью магния (патент RU №2161486 С2. А61К 31/65, опубликован 10.01.2001).

Недостатком способа является использование известных антибиотиков, не устраняющих всех нарушений микробных ассоциаций организма, возникающих после лучевых и термических воздействий, отсутствие влияние на патогенетические факторы радиогенного стресса и ожоговой патологии на месте нанесения ожоговой травмы.

Известен также способ лечения радиационно-термического поражения организма путем однократного подкожного введения облученного гамма-лучами в дозе 14 Гр бифидобактерина в дозе 1,43*10⁶КОЕ/кг с последующим нанесением на обожженный участок 10%-ного зверобойного масла, затем через 3-4 сутки - 10% мази из зверобоя (патент RU №2549451, А61К 35/66, опубликован 27.04.2015. Бюл. №12). Недостатком способа является слабая радиозащитная, антитермотоксическая активность препарата и слабая антисептическая активность против раневой инфекции использованных мазей.

Вместе с тем известно, что препараты растительного происхождения из класса терпеноидов, обладающих стресспротективным действием путем ингибирования токсических радикалов - продуктов пероксидации липидов (ПОЛ) - малондиальдегида, играющих ключевую роль в развитии радиоиндуцированной токсемии (радиотоксинемии) (см. статью Т.В. Панфиловой и др. «Тритерпеиноид мелиацин снижает индуцированное стрессом ПОЛ» // Бюл. экстер. биология и медецина - 2004. - Т. 141. - №6. - С. 633-635).

Следовательно, препараты растительного происхождения (фитопрепараты) - терпеноиды из сосны обладают важнейшим механизмом -протекторным действием при стрессорных патологиях путем блокирования образования токсических радикалов на фоне воздействия на организм стрессоров (ионизирующие излучения, патогенные агенты, химические токсиканты и т.д.). Одним из важнейших терпенов, применяемых в медицине и ветеринарии, является терпентинное масло - скипидар, обладающий широким спектром действия: противовоспалительное, болеутоляющее, антибактериальное, антипаразитарное, грануляционное, иммуно-гемопоэзстимулирующее, нейроседативное и активирующее функцию центральной нервной системы (см. кн. Е.М. Мозгов - Фармакология: Руководство для ветеринарных врачей. - М.: Гос. изд-во с.-х. литературы. - 1954. - С. 207-209). Следовательно, указанное средство (скипидар) обладает всеми свойствами, способными устранять патологические процессы, индуцированные радиогенным стрессом и ожоговой травмой.

Сказанное явилось основанием для использования очищенного скипидара, полученного из живицы (Скипидар живичный, производство - ООО «Реактив», ГОСТ 1571-82) в качестве противорадиационного и противоожогового средства при комбинированном радиационно-термическом поражении.

Задачей изобретения является упрощение и удешевление способа с одновременным повышением антирадиационной активности препарата и исключение посттравматической раневой инфекции после нанесения ожоговой травмы на фоне радиогенного поражения организма.

Задача решается тем, что для лечения комбинированных радиационно-термических поражений организма животных используют биологический препарат растительного происхождения - очищенный скипидар в дозе 0,4 мл, который вводят животным однократно подкожно под раневую поверхность пораженного участка в течение первых 24 часов после радиационно-термического воздействия, а затем через 3,7, 11, 15, 20 и 24 суток.

Примеры реализации способа изложены в нижеследующих примерах.

Пример 1. Контрольную группу белых крыс массой 200-220 г подвергали общему равномерному гамма-облучению в дозе 7,0 Гр (мощность дозы 5,49 Р/мин) на установке «Пума» с источником излучения ¹³⁷Cs. Через несколько минут после облучения путем наложения на выстриженный участок кожи верхней трети бедра нагретого до 180°С латунного пяточка (d=25 мм) в печи «Ricci» (Регенератор активирования угля, модель ТО 10BTQS, размер печи 450×330×350, вес 3 кг).

Использовали два латунных пятачка, один оставляли в печи в момент нанесения другим животным ожоговую травму. По степени поражения кожного покрова и низлежащих тканей данный ожог соответствовал ожогу III-Б степени площадью 15% кожных покровов в области бедра. Все контрольные животные с указанной формой комбинированного радиацинно-термического поражения (КРТП) погибали в течение 20 дней после двухфакторного воздействия.

Пример 2. Для оценки действия предлагаемого фармакопейного препарата - очищенного скипидара использовали группу крыс аналогичную контрольной. Очищенный скипидар в дозе 1,0 мл вводили однократно подкожно в область пораженного ожогом участка (непосредственно под ожоговую поверхность) кожи животных, сразу же после нанесения ожога, а затем - через 3, 7, 11, 15, 20 и 24 суток. В этой группе к 30 суткам после КРТП выжило 50±5% крыс.

Пример 3. После КРТП, описанного в п. 1, пораженным крысам вводили однократно подкожно (под ожоговый участок кожи) очищенный скипидар в дозе 0,6 мл сразу же после нанесения ожога, а затем - через 3, 7, 11, 15, 20 и 24 суток. К 30 суткам после КРТП выжило 73,3±3,4% крыс.

Пример 4. После КРТП, описанного в п. 1, пораженным крысам подкожно однократно вводили очищенный скипидар в дозе 0,4 мл сразу же после нанесения ожога, а затем - через 3, 7, 11, 15, 20 и 24 суток. В этой группе крыс к 30 суткам после двухфакторного воздействия выжило 100±0% крыс.

Введение очищенного скипидара в этой дозе в течение двух суток после КРТП приводит к снижению бактериальной токсемии у пораженных крыс с 82,9 до 21% (Р<0,01), количество токсических продуктов липопераксидации (малондильдегида - МДА) в сыворотки крови уменьшается в два раза, количество радиотоксинов и термотоксинов в РБФ (реакция бентонитовой флокуляции с сенсибилизированными хиноидным радиотоксином и ожоговым токсином эритроцитами барана) - тесте снижается в 1,9 и 2,1 раза соответственно.

Пример 5. После КРТП, описанного в п. 1, пораженным крысам подкожно однократно вводили очищенный скипидар в дозе 0,2 мл сразу же после нанесения ожога, а затем - через 3, 7, 11, 15, 20 и 24 суток. В этой группе крыс к 30 суткам после двухфакторного воздействия выжило 37±5% крыс.

Пример 6. После КРТП, описанного в п. 1, пораженным крысам под пораженный ожогом участок кожи вводили очищенный скипидар в дозе 0,4 мл через 2, 4, 6, 8, 10 суток после облучения и нанесения ожоговой травмы. К 30 суткам после двухфакторного поражения введения испытуемого препарата через 2 суток выжило 80% крыс, через 4 суток - 50%, через 6 суток - 37,5%, через 8 суток - 21,3% и через 10 суток - 5,1% крыс.

Пример 7. Для оценки ранозаживляющей (грануляционной) эффективности очищенного скипидара на фоне двухфакторного поражения, контрольную (1-я) и опытную (2-я) групп крыс подвергали комбинированному радиационно-термическому поражению, описанному в п. 1 и лечили очищенным скипидаром согласно п. 4. Затем в динамике за контрольными и леченными животными ввели наблюдения, учитывая тяжесть течения, сроки заживления и отторжения струпов с ожоговых поверхностей.

У контрольных крыс, подвергнутых радиационно-термическому воздействию, наблюдали нагноения пораженного участка тела, и заживление ожоговой раны не наступало - животные погибали на фоне тканевого нагноения ран - раневой сепсис. В отличие от контрольных, у пораженных радиацией и обожженных опытных животных леченных скипидаром, течение лучевой и ожоговой болезни протекало по модифицированному (облегченному) варианту. У крыс 2-й группы, которым под раневую (обожженную) поверхность вводили очищенный скипидар в дозе 0,4 мл, процесс образования ожогового струпа начинался на 2 сутки против 6 суток у контрольных животных. Появление линии демаркации и грануляционной ткани, вокруг пораженных участков у леченных очищенным скипидаром животных наступало на 19-е сутки после начала лечения против 25-е сутки у контрольных животных. Полное заживление ожоговых ран у животных 2-й группы, на фоне применения предлагаемого средства, наступало на 35-е сутки после лечения ожогов. У контрольных животных до конца срока наблюдения и вплоть до гибели заживление ожоговых ран не наступало. Опыты многократно повторены в течение 2015-2017 г.

Таким образом, использование очищенного скипидара (ГОСТ 1571-82) в качестве биологического препарата растительного происхождения для лечения КРТП организма животных при непосредственном введении его под обожженный участок кожного покрова обеспечивает значительное увеличение выживаемости пораженных животных за счет ускоренного заживления (грануляции) пораженной ткани, ингибирования общей интоксикации организма радиотоксинами и термотоксинами, снижения бактериальной токсемии организма.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и может быть использовано для лечения комбинированных радиационно-термических поражений у крыс. Для этого животным вводят биологический препарат растительного происхождения - очищенный скипидар. Скипидар вводят в дозе 0,4 мл подкожно под раневую поверхность пораженного участка сразу же после радиационно-термического ожога, а затем через 3, 7, 11, 15, 20 и 24 суток. Изобретение обеспечивает лечение комбинированных радиационно-термических поражений у крыс за счет противорадиационного и противоожогового действия скипидара. 7 пр.

Способ лечения комбинированных радиационно-термических поражений у крыс путем введения биологического препарата растительного происхождения - очищенного скипидара, который вводят в дозе 0,4 мл подкожно под раневую поверхность пораженного участка сразу же после радиоционно-термического ожога, а затем через 3, 7, 11, 15, 20 и 24 суток.