СПОСОБ ДЛЯ СТИМУЛИРОВАНИЯ РОСТА ВОЛОС И ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ВЫПАДЕНИЯ ВОЛОС ПАЦИЕНТА, ВЕЩЕСТВО ДЛЯ НЕГО И СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЕЩЕСТВА Российский патент 2019 года по МПК A61K38/18 A61K35/18 A61K8/64 A61P17/14 A61Q7/00 

[Область техники]

[1] Настоящее изобретение относится к способу стимулирования роста волос или предотвращения выпадения волос, включающему введение внутрикожно или подкожно основного фактора роста фибробластов (bFGF - basic fibroblast growth factor) или смеси bFGF с тромбоцитарно-обогащенной плазмой (PRP - platelet rich plasma), и/или плазмой крови.

[Уровень техники]

[2] Из-за выпадения волос человек выглядит заметно старше своего фактического возраста и менее привлекательно. Выпадение волос является частью процесса естественного старения и происходит из-за нарушений цикла роста волос, генетической предрасположенности, нежелательных побочных эффектов от лекарств и/или лечения, проблем окружающей среды, включая аллергию, инфекции, стресс, неправильное питание, нарушения сна и/или другие систематические расстройства.

[3] Согласно результатам исследований, доступных в Интернете (например, www.statisticbrain.com/hairloss-statistics), по оценкам, к 35 годам у 40% мужчин в Соединенных Штатах наблюдается заметное выпадение волос. С возрастом эта проблема усугубляется. Подсчитано, что к 60 годам 65% мужчин в Соединенных Штатах страдают от заметного выпадения волос.

[4] (См.: www.statisticbrain.com/hairloss-statistics).

[5] На Фиг. 1 показано, что облысение по мужскому типу происходит в различных формах и наблюдается у значительной части мужского населения.

[6] Женщины также страдают от выпадения волос. Выпадение волос по женскому типу, в отличие от мужского типа, обычно характеризуется заметным поредением волос по всей голове и линии роста волос. Американская академия дерматологии сообщает, что у 40% женщин наблюдается заметное выпадение волос к 40-летнему возрасту.

[7] Несмотря на такое широкое распространение проблемы, выпадение волос не может рассматриваться как нормальное или приемлемое для женщин, отчасти из-за социальных норм, обязывающих женщин уделять большое внимание своей внешности. Даже небольшое поредение волос, если оно заметно, может негативно отразиться на самооценке женщины и отношении к ней окружающих.

[8] По этой причине на рынке было предпринято множество попыток предотвратить и вылечить выпадение волос, включая создание лекарств, инвазивных хирургических процедур и инъекций. Такие препараты как MINOXIDIL® (Rogaine), FINASTERIDE® (Propecia) и DUTASTERIDE® (Avodart), являются одобренным методом лечения выпадения волос. Тем не менее, эти препараты имеют недостаток: они эффективны, только если пациент принимает препарат ежедневно. Кроме того, препарат будет работать в долгосрочной перспективе только в том случае, если пациент продолжает его принимать. Отмена препарата может привести к потере восстановленных волос. Кроме того, некоторые из этих препаратов не одобрены для использования женщинами из соображений безопасности.

[9] Доступная инвазивная процедура для лечения выпадения волос включает в себя хирургические процедуры, такие как трансплантация фолликулярной единицы, сокращение скальпа или кожных лоскутов и инъекционные методы. Указанные хирургические процедуры имеют риск возможного некроза кожи или образования келоидной рубцовой ткани в донорской области. Кроме того, указанные хирургические процедуры также часто приводят к неудовлетворительным результатам, таким как неестественный вид волос из-за направления роста волос и ограниченного количества волосяных фолликулов, которые могут быть безопасно перенесены (за каждую процедуру можно перенести не более 4000 волосяных фолликулов, при этом на протяжении жизни пациента возможно проведение не более 3 процедур). Хирургическое лечение также неудобно для пациентов, так как в большинстве случаев оно занимает 3-4 часа работы, требует послеоперационного ухода и предполагает нарушение нормального образа жизни в течение примерно 2 недель после операции (даже при отсутствии осложнений).

[10] В настоящее время также существует множество различных типов инъекционных методов, таких как мезототерапия, однократная инъекция тромбоцитарно-обогащенной плазмы (PRP), инъекция PRP+ACELL® и другие. Существует множество литературы, в которой рассматривается использование PRP в спортивной медицине, ортопедической хирургии, стоматологической хирургии и ряде других медицинских и хирургических областей для ускорения восстановления и заживления тканей после хирургических вмешательств или травм.

[11] Каждый тромбоцит является биохимическим хранилищем регуляторных молекул, сигнальных молекул и молекул факторов роста, которые участвуют в восстановлении и заживлении тканей, а также в стрессовой реакции на травму. Молекулы факторов роста, связанные с тромбоцитами, содержат: Тромбоцитарный фактор роста (PDGF), трансформирующий ростовой фактор бета (TGF-b), факторы роста эндотелия сосудов (VEGF), эпидермальный фактор роста (EGF), фактор роста фибробластов-2 (FGF-2) и инсулиноподобный фактор роста (IGF) (Международное общество хирургии восстановления волос, «Использование тромбоцитарно-обогащенной плазмы при трансплантации волос», 1 октября 2009 г.).

[12] Согласно указанному источнику, инъекции PRP и инъекции PRP+ACELL® используют для лечения выпадения волос. Однако результаты этих инъекционных методов сильно различаются. Зачастую они противоречивы и сомнительны. Существующее лечение инъекционным методом позволяет восстановить волосы у некоторых пациентов, но имеет нестабильный результат для значительных групп людей, страдающих от выпадения волос.

[13] Учитывая отсутствие эффективного лечения выпадения волос, изобретатель рассмотрел ведущие теории по выпадению волос, включая (а) теорию дигидротестостерона, (б) теорию гравитации и (в) теорию кровоснабжения.

[14] Теория дигидротестостерона в настоящее время является ведущей теорией, согласно которой дигидротестостерон (DHT) привязывается к волосяным фолликулам и сжимает волосяные фолликулы, что негативно влияет на здоровье волос. Однако эта теория не объясняет, почему высокие уровни DHT не влияют на выпадение волос у некоторых людей. У большинства мужчин с высоким уровнем DHT все еще растут волосы в задней части головы и по бокам. Кроме того, у этих мужчин также растут здоровые волосы на других участках тела, включая подмышки, ноги, грудь и лобковую область.

[15] Теория гравитации выпадения волос («теория гравитации») делает попытку объяснить такой парадоксальный результат теории дигидротестостерона. Указанная теория предполагает, что гравитация способствует выпадению волос.

[16] В одной из специальных статей в области пластической и реконструктивной хирургии сообщается, что андрогенный эффект вызывает истончение кожи головы. Это истончение приводит к тому, что скальпу сложнее удерживать вес волос. Это, в свою очередь, приводит к тому, что волосы выпадают проще и раньше, чем при нормальном завершении анагенной фазы (период роста волос). Гравитация постепенно истончает кожу на скальпе человека что приводит к тому, что пораженный участок теряет способность удерживать волосы и обеспечивать их рост. Эмин Тункай Устунер сообщает, что тонкая кожа недолго выдерживает вес волос, и волосы легко извлекаются.

[17] (См. статью «Причины андрогенной алопеции», журнал Plastic & Reconstructive Surgery Global Open 2013; 1 DOI: 10.1097/GOX.0000000000000005).

[18] В цикле развития волоса существует три фазы: анаген, катаген и телоген. Анаген -это фаза роста волоса в цикле, которая у здорового человека обычно длится от 4 до 6 лет. Катаген является фазой окончания роста волос, которая у здорового человека обычно длится от 2 до 3 недель. А телоген - это пассивная фаза (отдыха), которая характеризуется отсутствием роста волос и обычно длится 3 месяца у здорового человека. Согласно теории гравитации, истончение кожи в лысый области головы приводит к существенному сокращению анагенной фазы (фазы роста). При истончении кожи также увеличивается телогенная фаза.

[19] В еще одной теории - теории кровоснабжения - утверждается, что причина облысения заключается в недостаточном кровоснабжении фолликулов, которое существенно сокращает анагенную фазу (фазу роста волос) и продлевает телогенную фазу (фазу покоя, волосы не растут). Эта теория опирается на препарат под названием MINOXIDIL®, который изначально появился на рынке как лекарственный препарат для лечения высокого кровяного давления и в основе которого лежит его способность к вазодилатации при гипертонии.

[20] Обнаружено, что одним из побочных эффектов препарата MINOXIDIL® является рост волос на лысых и поредевших участках. Поскольку MINOXIDIL® улучшает кровоснабжение за счет вазодилатации, в настоящее время его используют для лечения выпадения волос. У пациентов, принимающих MINOXIDIL®, наблюдается улучшение кровоснабжения фолликулов и временное усиление роста волос.

[21] Вне зависимости от теорий, объясняющих причины истончения или выпадения волос, не существует лечения, обеспечивающего удовлетворительные результаты восстановления волос или повышения темпа роста волос.

[22] Использование bFGF в лечении старения кожи и морщин раскрыто в данной области техники, например, в патенте США №8518878. Различные причины и симптомы выпадения или истончения волос описаны в данной области техники, например, в патенте США №2012/0322882. Указанные патенты включены в настоящий документ посредством ссылки, где это необходимо.

[Раскрытие сущности]

[Техническая проблема]

[23] Для решения проблем, возникающих в связи с вышеописанной технологией, основным объектом настоящего изобретения является предоставление способа применения вещества для стимулирования роста волос и предотвращения выпадения волос более эффективно в сравнении со способами и приемами использования bFGF предшествующего уровня техники.

[24] Еще одним объектом настоящего изобретения является предоставление дополнительной смеси веществ на основе bFGF.

[25] Еще одним объектом настоящего изобретения является предоставление ряда оптимальных соотношений состава смеси, содержащей bFGF.

[26] Еще одним объектом настоящего изобретения является предоставление способа получения вещества, содержащего bFGF.

[Техническое решение]

[27] Для достижения вышеуказанных объектов способ стимулирования роста волос и предотвращения выпадения волос пациента в соответствии с настоящим изобретением отличается тем, что вещество, содержащее эффективное количество активного ингредиента на основе bFGF, вводится внутрикожно или "подкожно на пораженный участок тела пациента, страдающего от выпадения волос.

[28] Кроме того, вещество для стимулирования роста волос и предотвращения выпадения волос пациента содержит смесь bFGF и PRP (тромбоцитарно-обогащенная плазма), смеси bFGF и плазмы, а также смесь bFGF, PRP и плазмы.

[29] Кроме того, пациент может лечиться от апластической анемии, очаговой алопеции, системной алопеции, дегенеративной алопеции, волосистой стенки, выпадения волос в фазе покоя, выпадения волос в фазе роста, рубцового выпадения волос, выпадения волос на шрамах, истончения кожи головы, гормонального дисбаланса, грибковой инфекции или вызванного лекарством выпадения волос.

[Преимущества]

[30] Согласно настоящему изобретению, способ стимулирования роста волос и предотвращения выпадения волос, вещество на его основе и способ получения вещества имеют следующие преимущества:

[31] 1) приводит к утолщению кожи в целевой области путем инициирования фиброгенеза и регенерации ткани;

[32] 2) улучшает кровоснабжение в целевой области путем образования новых кровеносных сосудов.

[33] Таким образом, настоящее изобретение может оказать весьма существенное воздействие на предотвращение и лечение выпадения волос.

[Описание чертежей]

[34] На ФИГ. 1 показано, что облысение по мужскому типу происходит в различных формах и наблюдается у значительной части мужского населения.

[35] На ФИГ. 2а показана шкала Норвуда-Гамильтона со стадиями облысения по мужскому типу;

[36] На ФИГ. 26 показана шкала Людвига со стадиями облысения по женскому типу;

[37] На ФИГ. 3а показан пример варианта осуществления целевой области перед лечением в соответствии с настоящим изобретением в Случае 1;

[38] На ФИГ. 3б показан пример варианта осуществления целевой области через 4 месяца после лечения в соответствии с настоящим изобретением в Случае 1;

[39] На ФИГ. 4а показан пример варианта осуществления целевой области перед лечением в соответствии с настоящим изобретением в Случае 2;

[40] На ФИГ. 4б показан пример варианта осуществления целевой области через 56 дней после лечения в соответствии с настоящим изобретением в Случае 2;

[41] На ФИГ. 5а и 5б показан пример варианта осуществления целевой области перед первым лечением, отображающим левую и правую височные области в соответствии с настоящим изобретением в Случае 3;

[42] На ФИГ. 5в и 5г показан пример варианта осуществления целевой области через 56 дней после первого лечения в соответствии с настоящим изобретением в Случае 3;

[43] На ФИГ. 6а показан пример варианта осуществления целевой области перед первым лечением в соответствии с настоящим изобретением в Случае 4;

[44] На ФИГ. 6б показан пример варианта осуществления целевой области через 3 месяца после первого лечения в соответствии с настоящим изобретением в Случае 4;

[45] На ФИГ. 7а показан пример варианта осуществления целевой области перед первым лечением в соответствии с настоящим изобретением в Случае 5;

[46] На ФИГ. 7б показан пример варианта осуществления целевой области через 2 месяца после первого лечения в соответствии с настоящим изобретением в Случае 5;

[47] На ФИГ. 8а показана диаграмма, сравнивающая плотность волос до и после лечения в соответствии с настоящим изобретением в Случаях 1-5; а также

[48] На ФИГ. 8б показана диаграмма, показывающая средний темп роста волос в соответствии с настоящим изобретением в случаях 1-5.

[Наилучший вариант осуществления]

[49] В соответствии с вариантами осуществления настоящего изобретения, bFGF или смесь bFGF с PRP и/или плазмой эффективны для стимулирования роста волос при введении внутрикожно или подкожно в кожу головы пациентов.

[Принцип изобретения]

[50] Далее подробно описаны предпочтительные примеры варианта осуществления настоящего изобретения со ссылкой на сопроводительные чертежи.

[51] Во-первых, термины, описанные в настоящем изобретении, определяются следующим образом.

[52] Основный фактор роста фибробластов (bFGF) - это биофармацевтический препарат, который широко распространен на коммерческом рынке и используется для лечения многих кожных заболеваний и заживления ран. Например: коммерческий bFGF-продукт «Трафермин» фирмы Daewoong Pharmaceutical, Co., Ltd (Республика Корея), одного из дистрибьюторов Kaken Pharmaceutical, Co., LTD и т.д.

[53] Он эффективно используется для профилактики и лечения выпадения волос согласно настоящему изобретению, компонент bFGF может быть bFGF естественного или генетически измененного типа или соответствующим белком-предшественником; белком, в котором одна или более составных аминокислот bFGF естественного или генетически измененного типа заменены, удалены или вставлены; белком, кодируемым кДНК, который может гибридизоваться в жестких условиях (65°С, 1XSSC, 0,1% SDS или 0,1XSSC, 0,1% SDS) с bFGF естественного типа человека; белком, имеющим гомологию 75% или, более предпочтительно, 80% или более, или, более предпочтительно, 85% или более, еще более предпочтительно, 90% или более и, еще более предпочтительно, 95% или более, с кДНК bFGF естественного типа. Кроме того, он может представлять собой нуклеиновую кислоту, кодирующую ген каждого белка (кДНК или кДНК-плазмида; далее «ген»). Указанные гены могут быть введены в виде одной плазмиды или в виде комплекса плазмид, в которой липосома и т.д., объединена с экспрессионным вектором.

[54] «Плазма» представляет собой верхнюю жидкую часть крови, получаемую центрифугированием из крови пациента, желающего предотвратить и вылечить выпадение волос. Плазма - это белково-солевой раствор, в котором растворены красные и белые кровяные клетки и тромбоциты. Плазма на 92% состоит из воды и составляет 55% от объема крови. Плазма содержит альбумин (главный компонент белка), фибриноген (частично, отвечает за свертывание крови) и глобулин (включая антитела).

[55] Плазма выполняет целый ряд функций, от поддержания достаточного давления и объема крови до предоставления белков, критически важных для свертывания крови и иммунитета. Она также служит средством обмена важными минералами, такими, как натрий и калий, а также помогает поддерживать надлежащий баланс рН (кислотно-щелочной) в теле, что имеет решающее значение для функции клеток. Плазму получают путем отделения жидкой части крови от клеток.

[56] «Тромбоцитарно-обогащенная плазма» или «PRP» представляет собой среднюю часть крови, получаемую центрифугированием из крови, взятой у пациента, желающего предотвратить и вылечить выпадение волос, при этом плазма крови обогащена тромбоцитами. Будучи концентрированным источником аутологичных тромбоцитов, PRP содержит несколько различных факторов роста и других цитокинов, стимулирующих заживление костной и мягкой тканей.

[57] «Плазма гелевого типа» представляет собой продукт, полученный в результате погружения плазмы в стерилизованный полипропиленовый контейнер при безопасной и подходящей температуре на определенное время с целью получения гелеобразной формы для лучшего удержания при введении в целевую область кожи. Может быть создана с помощью Этапа 3, описанного в примере ниже.

[58] «Раствор bFGF» представляет собой продукт, полученный в результате лиофилизации приобретенного на коммерческой основе bFGF и его растворения в соляном растворе, хлориде бензалкония или аналогичном растворителе. Может быть создан с помощью Этапа 4, описанного в примере ниже.

[59] «PRP и раствор bFGF» представляет собой продукт, полученный в результате смешивания PRP с раствором bFGF. Может быть создан с помощью Этапа 5(a), описанного в примере ниже.

[60] «Анестетик» означает местную анестезию, блокадную анестезию или общую анестезию в процедуре введения лекарств либо путем инъекции, либо путем ингаляции; блокирует чувство боли и другие ощущения или вызывает глубокое бессознательное состояние, которое устраняет все ощущения, что позволяет проводить медицинские и хирургические процедуры без чрезмерного стресса или дискомфорта.

[61] «Клинические исследования» представляют собой процедуры, проведенные изобретателем в клинике конфиденциально, как описано в приведенных далее Случаях, которые подтвердили воздействие Препарата на рост волос.

[62] Термин «Внутрикожно» применяется при введении препарата (предпочтительно путем инъекции) в дермальную ткань кожи. Термин «Подкожно» применяется при введении препарата (предпочтительно путем инъекции) в жировую ткань под кожей.

[63] «Волосы» означают волосы головы, лица и/или тела, включая без ограничения скальп, ресницы, брови, усы, бороду, уши, нос, грудь, лобковую область и прочие части тела.

[64] «Рост волос» означает заранее вызванный новый цикл роста волос, продление активной фазы роста (анаген) цикла развития волос, увеличение темпов роста волос и/или увеличение ширины стержня волос, включая без ограничения вызывание роста волос и достижения более заметного эффекта.

[65] «Выпадение волос» и «истончение волос» означает снижение нормальной плотности волос и/или сокращение обычной фазы роста (анагена) цикла развития волос и/или уменьшения ширины стержня волос, а также сокращение количества волос, вызванное старением, генетической предрасположенностью и/или другим причинами; вышеперечисленные признаки могут наблюдаться как у мужчин, так и женщин, как у молодых, так и у старых людей.

[66] Термины «стимулировать рост волос» или «лечение», используемые в настоящем описании, обозначают как минимум один из результатов увеличения количества и/или длины и/или толщины волос как минимум на участке обработанной кожи (или скальпа).

[67] Термины «Предотвращать» и «Предотвращение», используемые в настоящем описании в отношении выпадения или истончения волос, означают уменьшение выпадения или истончение волос заблоговременными действиями.

[68] Термин «Процедура» обозначает последовательность шагов, описанных в примере под названием «Методология и этапы», включая сбор крови и отделение крови; приготовление и использование определенных растворов с содержанием bFGF, подготовку пациента и целевой области с использованием анестетиков и мезороллера, а также внутрикожной и подкожной инъекцией целевой области.

[69] Термин «Безопасное и эффективное количество» означает количество, достаточное для того, чтобы Препарат мог обеспечить эффект стимуляции роста волос при разумном соотношении преимуществ/риска, сопровождающем любое медицинское лечение. По результатам тщательной медицинской оценки количество и пропорции используемых активных ингредиентов могут варьироваться в зависимости от конкретного случая лечения, серьезности состояния, причины состояния, продолжительности лечения, конкретного активного ингредиента, применяемого для лечения, его концентрации, конкретной используемой несущей среды, общего состояние здоровья пациента, переносимость пациентом различных последствий введения препарата и других лекарств, находящихся в ведении пациента, а также таких факторов, как знания и опыт пациента или лечащего врача.

[70] Далее, настоящее изобретение охватывает использование bFGF при изготовлении препарата для профилактики и лечения выпадения волос; способ использования bFGF в препарате для профилактики и лечения выпадения волос; использование bFGF для профилактики и лечения выпадения волос; способ профилактики и лечения выпадения волос, включающий в себя введение внутрикожно или подкожно bFGF млекопитающим (в частности, человеку); способ создания смеси bFGF с другими веществами, такими как PRP и/или плазма, для указанных целей.

[71] В соответствии с примерами вариантов осуществления, 1) bFGF (Основный фактор роста фибробластов), 2) смесь bFGF и PRP (тромбоцитарно-обогащенной плазмы) или 3) смесь bFGF, плазмы и PRP могут быть введены в эффективном количестве внутрикожно или подкожно для достижения желаемых преимуществ стимулирования роста волос.

[72] bFGF, опционально в сочетании с плазмой (в одном варианте осуществления в гелеобразной плазме) и/или PRP, может вводиться внутрикожно или подкожно либо до, либо после стерилизованного мезороллера, что более эффективно стимулирует регенерацию кожи в обработанных областях. С этой целью коже наносятся легкие контролируемые повреждения на приемлемой скорости и стимулируется восстановление указанной области. Мезороллер создает легкую контролируемую травму эпидермиса целевой области, вызванную многократным прокалыванием эпидермиса микроиглами, что вызывает стимуляцию коллагена и эластина. Введенная смесь раствора плазмы, PRP и bFGF способствует восстановлению кожи и регенерации целевой области. Плазма, PRP и bFGF обладают свойствами генерации фибробластов. Поэтому указанный способ способствует утолщению кожи в обработанной области.

[73] Сообщается, что как PRP, так и bFGF обладают индуцирующей регенерацию тканей активностью in vitro и in vivo. И PRP, и bFGF используются для лечения ран. Благодаря смеси PRP и bFGF настоящие исследования показали, что возможно более мощное формирование кровеносных сосудов.

[74] Другими словами, использование мезороллера вызывает легкую контролируемую травму эпидермиса целевой области в результате многократного прокалывания эпидермиса с помощью микроигл. Введенная смесь плазмы и PRP помогает восстановить указанную травму, при этом формируя новые кровеносные сосуды в целевой области. Новые кровеносные сосуды помогают привлечь больше крови в целевую область.

[75] Препарат в соответствии с процедурой стимулирования роста волос не имеет конкретного ограничения, если содержит 1) bFGF, 2) смесь bFGF и плазмы, 3) смесь bFGF и PRP или 4) смесь bFGF, плазмы и PRP, а также вводится внутрикожно или подкожно различными инструментами для инъекций.

[76] Согласно настоящему изобретению, рост волос включает без ограничения, стимулирование перехода фазы телогена цикла развития волос в фазу анагена для нормализации (или как минимум сокращения прерывания) цикла развития волос и нормализации укороченной фазы анагена, что приводит к восстановлению волос, улучшению здоровья волос и утолщению волос в обработанной области.

[77] Эффективное количество плазмы, PRP и bFGF или их дозировка не имеет конкретных ограничений и, в целом, может быть введено в количестве от 0,1 мкг до 1 мг bFGF на см² поверхности кожи в целевой области лечение роста волос. В примере варианта осуществления bFGF может использоваться в объеме от 1 мкг до 100 мкг, либо от 0,1 мкг до 50 мкг, либо от 10 мкг до 100 мкг bFGF на 1 см² поверхности кожи в целевой области лечение роста волос.

[78] Плазму можно использовать в количестве от 0,05 до 40 мл на см² поверхности кожи. В примере варианта осуществления плазма может использоваться в количестве от 0,05 мл до 20 мл, от 0,05 мл до 15 мл или от 10 мл до 30 мл на см² поверхности кожи.

[79] PRP может быть получен непосредственно из цельной крови пациента, подлежащего лечению. В качестве альтернативы можно использовать коммерчески доступный продукт.PRP содержит большее количество тромбоцитов по сравнению с обычной плазмой. Например, PRP, которая может использоваться в примерах вариантов осуществления, может содержать как минимум в два раза, как минимум в три раза, как минимум в четыре раза, как минимум в пять раз, как минимум в шесть раз, как минимум в семь раз, как минимум в восемь раз, как минимум в девять раз, как минимум в десять раз, как минимум в одиннадцать раз или как минимум в двенадцать раз по сравнению с нормальным количеством тромбоцитов в крови человека. PRP можно использовать в количестве от 0,01 до 20 мл на см² поверхности кожи. В примере варианта осуществления PRP может использоваться в количестве от 0,01 мл до 15 мл, от 0,01 мл до 10 мл или от 5 мл до 20 мл на см² поверхности кожи.

[80] Препарат в соответствии с вариантом осуществления может содержать (a) bFGF в количестве, эффективном для стимулирования роста волос; а также тромбоцитарно-обогащенную плазму (PRP) (б-1), плазму крови (б-2) или смесь PRP и плазмы крови (б-3). Количество PRP и плазмы в препарате составляет 0,1-10 и 0,2-20 единиц объема, соответственно, на основе 1 мл раствора bFGF, причем указанный 1 мл раствора bFGF содержит 100 мкг bFGF.

[81] Препарат в соответствии с вариантом осуществления, по существу, может содержать (a) bFGF в количестве, эффективном для стимулирования роста волос; а также, выборочно, тромбоцитарно-обогащенную плазму (PRP) (б-1), плазму крови (б-2) или смесь PRP и плазмы крови (б-3).

[82] В другом варианте осуществления препарат может выборочно содержать (a) bFGF в количестве, эффективном для стимулирования роста волос; а также тромбоцитарно-обогащенную плазму (PRP) (б-1), плазму крови (б-2) или смесь PRP и плазмы крови (б-3).

[83] Эти соединения могут вводиться последовательно или в виде смеси. Например, в примерном варианте осуществления смешивание может быть выполнено непосредственно перед введением Препарата в кожу головы пациента.

[84] Кроме того, частота введения не имеет конкретного ограничения и может оказывать достаточное воздействие при одном введении. С точки зрения поддержания наилучшего эффекта предпочтение отдается периодическому введению смеси в течение определенного периода, например, раз в месяц в течение 3 месяцев. Рекомендуется, чтобы периодичность варьировалась в зависимости от здоровья и состояния волос пациента, а также от ожидаемых результатов.

[85] Фактор bFGF в настоящее время доступен на рынке только для местного применения или распыления. Например, bFGF можно купить под торговым названием TRAFERMIN ™ (KAKEN PHARMACEUTICAL CO., LTD). Однако для получения аналогичных результатов можно использовать другие коммерчески доступные bFGF. bFGF можно использовать в виде, в котором они доступны в настоящее время, либо разбавлены, либо диспергированы в растворителе, смешанном с суспендирующим веществом или эмульгатором (подробно описано далее).

[86] PRP и плазма могут быть получены у пациента, проходящего лечение. Например, достаточное количество цельной крови может быть взято у пациента в день лечения, после чего цельная кровь центрифугируется для отделения плазмы и PRP. Отделение может проводиться с использованием известных методов. Собранная цельная кровь или отделенная кровь (то есть PRP и плазма) могут храниться в надлежащих условиях до тех пор, пока не будут использованы для лечения. Надлежащее количество цельной крови может быть определено в зависимости от общего состояния здоровья пациента и состояния целевой области. Цельная кровь может быть взята не только у пациента, проходящего лечение. Ее можно взять за один день или более до лечения и хранить в соответствующих условиях. Как подробно описано далее, плазму можно использовать в гелеобразном виде.

[87] Следующее описание неограничивающего примера варианта осуществления процедуры лечения роста волос включает в себя 9 шагов.

[88] Однако один или несколько шагов могут быть опущены и/или выполнены в другой последовательности, если препарат, содержащий bFGF, при необходимости в сочетании с PRP и плазмой, введен пациенту внутрикожно или подкожно.

[89] Этап 1: Забирают кровь у пациента в различных количествах

[90] В день лечения цельная кровь берется у пациента, проходящего лечение, обычным способом взятия крови. Объем взятой крови зависит от общего состояния здоровья пациента и характера выпадения волос. Вся взятая кровь используется для процедуры пациента в этот же день. Взятие крови допускается только в объеме, минимально необходимом для лечения.

[91] Этап 2: Разделяют полученную кровь

[92] Плазма, PRP (тромбоцитарно-обогащенная плазма) и эритроциты (красные кровяные тельца) из крови, взятой на Этапе 1, отделяются друг от друга с помощью оборудования для центрифугирования. Центрифугирование отделяет тромбоцитарно-обогащенную плазму от бедной тромбоцитами плазмы и эритроцитов из-за различий в удельном весе. В настоящее время существует два способа получения PRP, утвержденных Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США (FDA). Оба процесса включают в себя забор цельной крови пациента (антикоагулированной цитратом декстроза) перед тем, как пройти две стадии центрифугирования (TruPRP) (Harvest), предназначенные для отделения аликвоты PRP от бедной тромбоцитами плазмы и эритроцитов.

[93] В человеческом организме типичное базовое количество тромбоцитов крови составляет приблизительно 200000 на литр; терапевтическая PRP концентрирует тромбоциты примерно в четыре раза. Тем не менее, существует большая изменчивость в производстве PRP при использовании различных приборов и технологий концентрирования. Большинство коммерчески доступных наборов используют антикоагулянтный раствор декстрозы А («ACD-А» в качестве антикоагулянта; при этом существуют другие антикоагулянты, включая гепарин или ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота). Более того, ни один из наборов не учитывает ингибитор агрегации тромбоцитов, хотя коагуляция и агрегация тромбоцитов очень различны и антикоагулянты никогда не подавляют агрегацию тромбоцитов (см. журнал Plastic and Reconstructive Surgery - Global Open: Июнь 2014, vol. 2, issue 6, p e162 doi: 10.1097/GOX.0000000000000109).

[94] Этап 3: Погружают стерилизованный контейнер из полипропилена, содержащий плазму, в воду безопасной и эффективной температуры на определенное время для получения плазмы гелевого типа

[95] Отделенную плазму в стерилизованном контейнере погружают в кипяченую воду оптимальной температуры (от 0°С до 100°С) на оптимальное время (от 0 минут до 10 минут) для создания гелеобразной формы под названием «Плазма гелевого типа». Плазма гелевого типа, полученная на этом шаге, будет смешана с раствором bFGF, полученным на Этапе 4 далее, в безопасном и эффективном количестве относительно плазмы и bFGF. Полученный раствор снова смешивают с некоторой частью приготовленной смеси PRP и bFGF (из Этапа 5 (б)).

[96] Желатиновая форма (или полутвердая форма) демонстрирует более высокие показатели удерживания при введении раствора на целевую область кожи. Однако использование обычной смеси плазмы (без погруженния в оптимальную температуру в течение определенного времени) и bFGF также допустимо. Количество и пропорции bFGF и плазмы могут варьироваться в зависимости от состояния выпадения волос. Указанный раствор будет способствовать утолщению целевой области кожи и скальпа.

[97] Этап 4: Получают раствор bFGF

[98] 500 мкг лиофилизированного bFGF, доступного на коммерческой основе, растворяют в 5 мл физиологического раствора для приготовления 100 мкг/мл раствора bFGF. Растворение bFGF происходит мгновенно для создания раствора bFGF. Раствор bFGF готовят в инъекционной форме. Раствор bFGF хранят в холодильном оборудовании до 10°С до готовности для использования в течение дня или до двух недель для будущего использования.

[99] Этап 5: Подготавливают следующие два соединения

[100] (а) Смешивают следующие компоненты для получения раствора PRP+bFGF:

[101] (1) PRP (от 0,5 мл до 20 мл), полученная на Этапе 2, а также

[102] (2) Раствор bFGF (от 0,1 мкг от 10 мг), полученный на Этапе 4.

[103] (б) Смешивают следующие компоненты для получения раствора плазмы + bFGF + PRP:

[104] (1) Плазму (от 0,5 мл до 20 мл), полученная на Этапах 2,

[105] (2) Раствор bFGF (от 0,1 мкг от 10 мг), полученный на Этапе 4, а также

[106] (3) PRP+раствор bFGF, полученный на Этапе 5(a).

[107] Отделенные PRP и bFGF смешивают в безопасном и эффективном количестве относительно PRP и bFGF для создания инъекционного раствора, способствующего стимулированию роста волос. Фактический объем компонентов, перечисленных выше, зависит от общего состояния здоровья и характера выпадения волос пациента.

[108] bFGF, PRP и плазма могут быть смешаны в соотношении приблизительно 1: 0,5-2,0: 1,5-3,0. Однако в предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения bFGF, PRP и плазму смешивают в соотношении приблизительно 1:1,09:2,36 (bFGF: PRP: Плазма). Не существует специального порядка смешивания или введения вещества. Для удобства при введении bFGF в сочетании с PRP и/или плазмой указанные вещества можно не вводить по отдельности, а ввести как смесь.

[109] Кроме того, в примере варианта осуществления допустимо введение смеси PRP и bFGF, смеси bFGF и плазмы или смеси bFGF, PRP и плазмы. Введение веществ по отдельности не ограничивается. Когда для одного пациента проводится комплексное лечение, каждая процедура может содержать идентичное вещество/смесь или различные вещества/соединения, которые могут быть определены лечащим врачом на основе результата первой/предыдущей процедуры. Например, как в примере варианта осуществления смесь PRP и bFGF, смесь плазмы, bFGF и PRP могут быть введены в указанном порядке во время первой и второй процедуры соответственно. В еще одном примере варианта осуществления различные препараты, например смесь плазмы гелевого типа + PRP + bFGF и смесь PRP + раствора bFGF могут быть последовательно в указанном порядке за одну процедуру.

[110] Этап 6: Проводят процедуру анестезии пациента

[111] В зависимости от состояния и предпочтений пациента возможно использование различных анестетиков, включая местную анестезию, блокадную анестезию или общую анестезию.

[112] Этап 7: Подготавливают целевую область с помощью мезороллера

[113] Стерилизованный мезороллер стимулирует регенерацию кожи в обработанных районах. С этой целью коже наносятся легкие контролируемые повреждения на приемлемой скорости и стимулируется восстановление указанной области. Мезороллер способствует поглощению приготовленных смесей и запускает процесс воспаления. Мезороллер создает легкую контролируемую травму эпидермиса целевой области, вызванную многократным прокалыванием эпидермиса микроиглами, что вызывает стимуляцию коллагена и эластина.

[114] Этап 8: Вводят вещество в целевые области

[115] В целевую область вводят следующие вещества в следующей предпочтительной последовательности:

[116] (а) Плазма гелевого типа + PRP + раствор bFGF (полученный на Этапе 5 (а)]

[117] (б) PRP + раствор bFGF [получают на Этапе 5(a)].

[118] Две инъекции вводят последовательно внутрикожно или подкожно на целевой участок или целевые участки различными инъекционными инструментами в безопасном и эффективном количестве, например, от 0,1 мкг до 50 мкг или от 1 мкг до 100 мкг bFGF на см² области обработки, не более 1000 мкг bFGF в день. Количество может варьироваться в зависимости от характера выпадения волос и общего состояния здоровья пациента. Указанная последовательность введения двух инъекций считается предпочтительной.

[119] Описанный шаг 8 относительно удобен, так как требует приблизительно 20-180 минут на введение инъекции, что позволяет пациентам вернуться к нормальному образу жизни на следующий день, например, принимать душ.

[120] Этап 9: Повторяют Этапы с 1 по 8

[121] Предпочтительно, этапы с 1 по 8 повторяются как минимум один раз в месяц (но не чаще одного раза в неделю), более предпочтительно каждый месяц в течение как минимум 3 месяцев и наиболее предпочтительно в течение более длительного периода времени, например, около 1 года. Периодичность инъекций может быть различной, и процедур может быть несколько.

[122] Препарат согласно настоящему изобретению может быть использован для лечения различных нарушений выпадения волос, включая без ограничения диффузную алопецию, выпадение волос в стадии телогена, выпадение волос в стадии анагена, рубцовое выпадение волос, истончение кожи головы; нарушения волосяного стержня, включая трихорхексис узловатый, синдром ослабленных анагенных волос, трихотилломания и тракционная алопеция; инфекционные заболевания волос, включая поверхностные инфекции, себорейный дерматит и фолликулит кожи головы; генетические нарушения, включая андрогенную алопецию и выпадение волос из-за химиотерапии, лучевой терапии, гормонального дисбаланса (например, состояния щитовидной железы, такие как гипотиреоз и гипертиреоз, беременность, рождение ребенка, прекращение приема противозачаточных таблеток и изменения менструального цикла), грибковые инфекции кожи головы, включая стригущий лишай, лекарства, вызывающие выпадение волос, такие как антикоагулянты, лекарства от подагры, депрессия, высокое кровяное давление и некоторые препараты для сердца. Препарат может также использоваться для лечения выпадения волос, связанного с факторами окружающей среды и химическими веществами, используемыми при лечении волос (окрашивание, тонирование и обеспечивание). Кроме того, препарат согласно настоящему изобретению может использоваться для лечения выпадения волос, связанного с другими заболеваниями, такими как диабет, волчанка и плохое питание, психическое/физическое напряжение, например, из-за операции, болезни и высокой температуры.

[123] Предпочтительно препарат согласно настоящему изобретению вводится в целевую область тела несколько раз с определенным интервалом, например, 2-6 недель или 3-5 недель. В одном аспекте препарат можно вводить как минимум один раз в месяц (но не чаще одного раза в неделю), более предпочтительно каждый месяц в течение как минимум 3 месяцев и наиболее предпочтительно в течение более длительного периода времени, например, около 1 года.

[124] Препарат согласно настоящему изобретению может содержать фармацевтически приемлемый носитель. Фактор bFGF, используемый в настоящем изобретении, может быть включен в подходящую смесь обычным способом. Препарат может представлять собой твердое вещество: порошок и гранулы. Однако с точки зрения получения наибольшей эффективности профилактики и лечения выпадения волос препарат предпочтительно приготовить в жидком виде для инъекций: как раствор, эмульсию, суспендирующий агент или гелеобразующий агент. В качестве способа получения жидкого агента, например, предпочтительно использовать способ, включающий смешивание bFGF с растворителем, и способ, включающий дополнительное смешивание bFGF с суспендирующим агентом или эмульгирующим агентом. В качестве способа получения гелеобразующего агента, предпочтительным примером может быть способ смешивания bFGF с желатином. При включении bFGF согласно настоящему изобретению в состав подходящего фармацевтически приемлемого носителя, например, такого компонента, как эксципиент, связывающий агент, растворитель, солюбилизирующий агент, суспендирующий агент, эмульгатор, изотонический агент, буферный агент, стабилизирующий агент, успокоительное, антисептический агент, антиоксидант, красящий агент могут быть смешаны в соответствии с потребностями к составу.

[125] Примеры растворителей включают гидрофильный растворитель, такой как очищенная вода, физиологический раствор, раствор Рингера, этанол, пропиленгликоль, глицерин, полиэтиленгликоль, макрогол и т.д.; а также липофильный растворитель, такой как оливковое масло, арахисовое масло, кунжутное масло, масло камелии, масло канолы, моноглицерид жирной кислоты, диглицерид жирной кислоты, сложный эфир высшей жирной кислоты, жидкий парафиин и т.д.

[126] Примеры вышеуказанного суспендирующего агента включают стеарилтриэтаноламин, лаурилсульфат натрия, лауриламинопропионат, лецитин, бензалконийхлорид, бензетонийхлорид, глицерилмоностеарат, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, гидроксиметилцеллюлозу, гидроксиэтил целлюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, полисольваты, полиоксиэтиленовое гидрированное касторовое масло, гуммиарабик, бентонит и т.д.

[127] Примеры вышеуказанного эмульгатора включают гуммиарабик, желатин, лецитин, холестерин, желток, бентонит, вигум, цетанол, глицерилмоностеарат, метилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, стеариновую кислоту и т.д.

[128] Примеры вышеуказанного солюбилизирующего агента включают полиэтиленгликоль, пропиленгликоль, D-маннит, трегалозу, бензилбензоат, этанол, трисаминометан, холестерин, триэтаноламин, карбонат натрия, цитрат натрия, салицилат натрия, ацетат натрия и т.д.

[129] Примеры вышеуказанного эксципиента включают лактозу, белый мягкий сахар, D-сорбит, крахмал, предварительно желатинированный крахмал, кукурузный крахмал, D-маннит, декстрин, кристаллическую целлюлозу, гуммиарабик, низкозамещенную гидроксипропилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, метилцеллюлозу, сывороточный альбумин и т.д.

[130] Примеры вышеуказанного связывающего агента включают предварительно желатинизированный крахмал, сахарозу, желатин, гуммиарабик, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, кристаллическую целлюлозу, белый мягкий сахар, D-маннит, трегалозу, декстрин, пуллулан, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлоза, поливинилпирролидон, поливиниловый спирт и т.д.

[131] Примеры вышеуказанного изотонического агента включают хлорид натрия, хлорид калия, глюкозу, фруктозу, маннит, сорбит, лактозу, сахарозу, глицерин, мочевину и т.д. Кроме того, примеры вышеуказанного буферного агента включают цитрат натрия, глицерин и т.д. Примеры вышеуказанного антисептического агента включают эфиры параоксибензойной кислоты, хлорбутанол, бензиловый спирт, фенэтиловый спирт, дегидроуксусную кислоту, сорбиновую кислоту и т.д.

[132] Примеры вышеуказанного стабилизирующего агента включают полиэтиленгликоль, декстрансульфат натрия, аминокислоту, человеческий сывороточный альбумин и т.д. Примеры вышеуказанного успокоительного включают сахар глюкозы, глюконат кальция, гидрохлорид прокаина и т.д. Кроме того, примеры вышеуказанного антиоксидантного агента включают сульфит, аскорбиновую кислоту, витамин D и т.д. Примеры вышеуказанного красящего агента включают смолы пигмент, карамель, колькотар, диоксид титана, FD&C пигменты, такие как голубой №2 FD&C и красный №40 FD&C фирмы Ellis & Everard и т.д.

[133] Кроме того, препарат для стимулирования роста волос и лечения выпадения волос может содержать, помимо bFGF, вещество, способствующее или предназначенное для способствования профилактике и лечению выпадения волос. Примеры веществ, которые могут иметь вышеуказанный эффект, предпочтительно включают одно или несколько веществ из группы, состоящей из морфогенов, таких как фактор роста фибробластов 10 (FGF10), кислый фактор роста фибробластов (FGF1), фактор роста эндотелия сосудов (VGEF), инсулиноподобный фактор роста (ILGF), фактор роста гепатоцитов (HGF), эпидермальный фактор роста (EGF) и т.д. Они могут использоваться в дополнение к препарату для профилактики и лечения выпадения волос путем введения этих веществ внутрикожно или подкожно.

[134] Способ введения препарата для профилактики и лечения выпадения волос согласно настоящему изобретению внутрикожно или подкожно не имеет конкретного ограничения, поскольку представляет собой способ введения препарата внутрикожно или подкожно на участке выпадения волос или окружающей его части для профилактики или лечения.

[135] Пример

[136] На ФИГ. 2а показана шкала Норвуда-Гамильтона со стадиями облысения по мужскому типу; На ФИГ. 2б показана шкала Людвига со стадиями облысения по женскому типу;

[137] Пример 1 (Методология и этапы)

[138] Информация о пациенте:

[139] Пол: мужской

[140] Возраст: 49

[141] Состояние волос перед лечением: степень 4 по шкале Н-Г (Норвуда-Гамильтона) (ФИГ. 2а).

[142] Методология и этапы:

[143] 1. У пациента забрали 60 мл крови, включая 8 мл антикоагулянта.

[144] 2. Полученную кровь отделили, используя HARVEST™ SmartPReP 2 в течение 14 минут, чтобы получить 12 мл плазмы, 6 мл PRP (тромбоцитарно-обогащенной плазмы, которая может содержать некоторое количество обычной плазмы) и эритроцитов.

[145] 3. Стерилизованный контейнер из полипропилена, содержащий плазму, погрузили в воду при температуре 100°С в течение 5 минут, чтобы получить 12 мл плазмы гелевого типа.

[146] 4. 500 мкг лиофилизированного коммерческого продукта bFGF (TRAFERMIN™: KAKEN PHARMACEUTICAL CO., LTD.) растворили в 5 мл солевого раствора для инъекции, чтобы получить 100 мкг/мл раствора bFGF.

[147] 5. Подготовили следующие два препарата (а) и (б):

[148] (а) 12 мл плазмы гелевого типа + 2 мл полученного раствора bFGF+2 мл раствора соединения, полученного на Этапе 5 (б) далее (общее количество полученного раствора составляет 16 мл)

[149] (б) 6 мл PRP+3 мл полученного раствора bFGF (общее количество полученного раствора составляет 9 мл, 2 мл добавили для приготовления раствора (а), в результате чего осталось 7 мл).

[150] 6. Анестетическая процедура. В частности, выполнили блокадную анестезию двустороннего супраорбитального нерва, супратрохлеарного нерва и большого затылочного нерва.

[151] 7. Целевые области обработали с помощью мезороллера.

[152] 8. В целевую область, обработанную мезороллером, последовательно ввели препарат (а) раствор гелевого типа + PRP + раствор bFGF и препарат (б) раствор PRP + bFGF.

[153] 9. Пациент прошел 3 одинаковые процедуры в общей сложности с интервалом в 28 дней.

[154] Пример 2 (Клинические исследования пациентов и результаты)

[155] Процент плотности волос измеряли с помощью оборудования Digital Scope BEAUTOPIA IS5000 с контрольной точкой в височной области, которая наименее подвержена выпадению волос для сравнения с целевой областью.

[156] Случай 1

[157] Пол: мужской

[158] Возраст: 52

[159] Состояние волос перед лечением: Степень 3 по шкале Н-Г (Норвуда-Гамильтона) типа vertex (на ФИГ. 26).

[160] Изменение плотности волос: 5% 43% (через 4 месяца после 3 процедур, проведенных в течение 3 месяца)

[161] Этапы процедуры:

[162] Этап 1 - Забрали 40 мл крови у пациента;

[163] Этап 2 - Полученную таким образом кровь отделили центрифугой для получения 4 мл PRP (тромбоцитарно-обогащенной плазмы) и 8 мл плазмы;

[164] Этап 3 - Плазму, полученную на Этапе 2, поместили в стерильный контейнер и погрузили в 100°С воду на 5 минут, чтобы получить 8 мл плазмы гелевого типа;

[165] Этап 4-500 мкг лиофилизированного bFGF, доступного на коммерческой основе, растворили в 5 мл физиологического раствора для приготовления 100 мкг/мл раствора bFGF.

[166] Этап 5 - Приготовили следующие два препарата (а) и (б):

[167] (а) плазму гелевого типа (8 мл) + раствор bFGF (1 мл) + полученный далее раствор (б) (1,5 мл),

[168] (б) PRP (4 мл) + раствор bFGF (2 мл);

[169] Этап 6 - Анестетическую процедуру провели на коже головы пациента;

[170] Этап 7 - Целевую область обработали с помощью мезороллера;

[171] Этап 8 - Препараты (а) плазма гелевого типа + PRP + bFGF и (б) PRP + раствор bFGF последовательно ввели путем инъекции в область, обработанную мезороллером; а также

[172] Этап 9 - Вышеуказанное лечение повторили еще 2 раза в течение четырехмесячного периода.

[173] На ФИГ. 3а показана целевая область перед первым лечением. На ФИГ. 3б показана целевая область через 4 месяца после первой процедуры.

[174] Субъектом в Случае 1 является мужчина с облысением - андрогенной алопецией степени 3 по шкале N-H (Норвуда-Гамильтона) типа vertex. Выпадение волос началось около 10 лет назад. После процедур, проводимых каждый месяц в течение 4 месяцев, плотность волос пациента увеличалась с 5% (ФИГ. За) до 43% (ФИГ. 3б) соответственно в целевой области на четвертый месяц. При наблюдении обработанной области через 1 месяц после первой процедуры, испытуемый заметил, что новые волосы растут там, где раньше их не было, и фолликулы старых волос потемнели. На четвертый месяц было отмечено значительное количество новых волос, продолжающих увеличиваться по плотности.

[175] Случай 2

[176] Пол: мужской

[177] Возраст: 45

[178] Состояние волос перед лечением: Степень 4 по шкале Н-Г (Норвуда-Гамильтона) (ФИГ. 2а).

[179] Изменение плотности волос: 5% 49% (56 дней после первой процедуры)

[180] Этапы процедуры:

[181] Этап 1 - Забрали 60 мл крови у пациента;

[182] Этап 2 - Полученную таким образом кровь отделили центрифугой для получения 6 мл PRP (тромбоцитарно-обогащенной плазмы) и 12 мл плазмы;

[183] Этап 3 - Плазму, полученную на Этапе 2, поместили в стерильный контейнер и погрузили в 100°С воду на 5 минут, чтобы получить 12 мл плазмы гелевого типа;

[184] Этап 4 - 500 мкг лиофилизированного bFGF, доступного на коммерческой основе, растворили в 5 мл физиологического раствора для приготовления 100 мкг/мл раствора bFGF.

[185] Этап 5 - Приготовили следующие два препарата (а) и (б):

[186] (а) плазму гелевого типа (12 мл) + раствор bFGF (2 мл) + полученный далее раствор (б) (2 мл),

[187] (б) PRP (6 мл) + раствор bFGF (3 мл);

[188] Этап 6 - Анестетическую процедуру провели на коже головы пациента;

[189] Этап 7 - Целевую область обработали с помощью мезороллера;

[190] Этап 8 - Препараты (а) плазма гелевого типа + PRP + bFGF и (б) PRP + раствор bFGF последовательно ввели путем инъекции в область, обработанную мезороллером; а также

[191] Этап 9 - После первой процедуры вышеуказанное лечение повторили еще 1 раз.

[192] На ФИГ. 4а показана целевая область перед первым лечением. На ФИГ. 4б показана целевая область через 56 дней после первой процедуры.

[193] Субъектом в Случае 2 является мужчина с андрогенной алопецией степени 4 по шкале N-H (Норвуда-Гамильтона). Выпадение волос началось около 5 лет назад. После двух процедур плотность его волос увеличилась с 5% (ФИГ. 4а) до 49% (ФИГ. 4б) в целевой области. Фото на Фиг. 4b было сделано на 56-й день после первой процедуры, перед третьей процедуры.

[194] Случай 3

[195] Пол: женский

[196] Возраст: 44

[197] Состояние волос перед лечением: двустороннее временное выпадение волос из-за предшествующей лучевой терапии

[198] Изменение плотности волос: 3% 43% (56 дней после первой процедуры)

[199] Этапы процедуры:

[200] Этап 1 - Забрали 20 мл крови у пациента;

[201] Этап 2 - Полученную кровь отделили центрифугой для получения 2 мл PRP (тромбоцитарно-обогащенной плазмы) и 4 мл плазмы;

[202] Этап 3 - Полученную плазму поместили в стерильный контейнер и погрузили в 100°С воду на 5 минут, чтобы получить 4 мл плазмы гелевого типа;

[203] Этап 4 - 500 мкг лиофилизированного bFGF, доступного на коммерческой основе, растворили в 5 мл физиологического раствора для приготовления 100 мкг/мл раствора bFGF.

[204] Этап 5 - Приготовили следующие два препарата (а) и (б):

[205] (а) плазма гелевого типа (4 мл) + раствор bFGF (0,5 мл) + раствор (б) (0,5 мл),

[206] (б) PRP (2 мл) + раствор bFGF (2 мл);

[207] Этап 6 - Анестетическую процедуру провели на коже головы пациента;

[208] Этап 7 - Целевую область подготовили с помощью мезороллера;

[209] Этап 8 - Ввели в обработанную целевую область соединение (а) плазмы гелевого типа + PRP + раствора bFGF и соединения (б) PRP + bFGF в последовательности; а также

[210] Этап 9 - После первой процедуры вышеуказанное лечение повторили еще 1 раз.

[211] На ФИГ. 5а и 5б показана целевая область перед первой обработкой, представляющая собой левую и правую височные области. На ФИГ. 5в и 5г показана целевая область через 56 дней после первой процедуры.

[212] Субъектом в Случае 3 является женщина, прошедшая лучевую терапию в левой височной области из-за опухоли в левой височной доле головного мозга 5 лет назад. Выпадение волос на левой стороне височной области было более выраженным, чем на правой стороне. После проведения двух процедур с 4 недельным интервалом плотность ее волос увеличилась с 3% (ФИГ. 5а и 5б) до 43% (ФИГ. 5в и 5г) в целевой области на 56-й день.

[213] Случай 4

[214] Пол: мужской

[215] Возраст: 67

[216] Состояние волос перед лечением: М-образное мужское облысение степени 4 по шкале N-H (Норвуда-Гамильтона) (на ФИГ. 2а).

[217] Изменение плотности волос: 6% 49% (через 3 месяца после 3 процедуры, проведенных с интервалом в 4 недели).

[218] Этапы процедуры:

[219] Этап 1 - Забрали 60 мл крови у пациента;

[220] Этап 2 - Полученную кровь отделили центрифугой для получения 6 мл PRP (тромбоцитарно-обогащенной плазмы) и 12 мл плазмы;

[221] Этап 3 - Полученную плазму поместили в стерильный контейнер и погрузили в 100°С воду на 5 минут, чтобы получить 82 мл плазмы гелевого типа;

[222] Этап 4 - 500 мкг лиофилизированного bFGF, доступного на коммерческой основе, растворили в 5 мл физиологического раствора для приготовления 100 мкг/мл раствора bFGF.

[223] Этап 5 - Приготовили следующие два препарата (а) и (б):

[224] (а) плазму гелевого типа (12 мл) + раствор bFGF (2 мл) + раствор (б) (2 мл),

[225] (6) PRP (6 мл) + раствор bFGF (3 мл);

[226] Этап 6 - Анестетическую процедуру провели на коже головы пациента;

[227] Этап 7 - Целевую область подготовили с помощью мезороллера;

[228] Этап 8 - Ввели в обработанную мезороллером целевую область соединения (а) плазмы гелевого типа + PRP + раствора bFGF и (б) PRP + bFGF в последовательности; а также

[229] Этап 9 - После первой процедуры вышеуказанное лечение повторили еще 2 раза с интервалом в 4 недели.

[230] На ФИГ. 6а показана целевая область перед первым лечением. На ФИГ. 6б показана целевая область через 3 месяца после первой процедуры.

[231] Субъектом в Случае 4 является мужчина с облысением степени 4 по шкале N-H (Норвуда-Гамильтона). Выпадение волос началось около 25 лет назад. После процедур, проводимых каждые 4 недели в течение 3 месяцев, плотность волос пациента увеличалась с 6% (ФИГ. 6а) до 49% (ФИГ. 6б) в целевой области на третий месяц. При наблюдении обработанной области через 1 месяц после первой процедуры, испытуемый заметил появление новых волос и утолщение волосяного стержня.

[232] Этап 5

[233] Пол: женский

[234] Возраст: 37

[235] Состояние волос перед лечением: очаговая алопеция степени 1-3 по шкале Людвига

[236] Изменение плотности волос: 0% 59% (56 дней после первой процедуры).

[237] Этапы процедуры:

[238] Этап 1 - Забрали 20 мл крови у пациента;

[239] Этап 2 - Полученную кровь отделили центрифугой для получения 2 мл PRP (тромбоцитарно-обогащенной плазмы) и 4 мл плазмы;

[240] Этап 3 - Полученную плазму поместили в стерильный контейнер и погрузили в 100°С воду на 5 минут, чтобы получить 4 мл плазмы гелевого типа;

[241] Этап 4 - 500 мкг лиофилизированного bFGF, доступного на коммерческой основе, растворили в 5 мл физиологического раствора для приготовления 100 мкг/мл раствора bFGF;

[242] Этап 5 - Приготовили следующие два препарата (а) и (б):

[243] (а) плазма гелевого типа (4 мл) + раствор bFGF (0,5 мл) + раствор (б) (0,5 мл),

[244] (б) PRP (2 мл) + раствор bFGF (2 мл);

[245] Этап 6 - Анестетическую процедуру провели на коже головы пациента;

[246] Этап 7 - Целевую область подготовили с помощью мезороллера;

[247] Этап 8 - Ввели в обработанную целевую область соединение (а) плазмы гелевого типа + PRP + раствора bFGF и соединение (б) PRP + bFGF в последовательности; а также

[248] Этап 9 - Через 4 недели после первой процедуры вышеуказанное лечение повторили еще один раз.

[249] На ФИГ. 7а показана целевая область перед первым лечением. На ФИГ. 7б показана целевая область через 56 дней после первой процедуры.

[250] Субъектом в Случае 5 является женщина с очаговой алопецией степени 1-3 по шкале Людвига. Выпадение волос началось около года назад. После проведения 2 процедур с интервалом в 4 недели, плотность волос увеличилась с 0% (ФИГ. 7а) до 59% (ФИГ. 7б) в целевой области через 56 дней после первой процедуры.

[251] Таблица 1

[252] На ФИГ. 8а показана диаграмма, сравнивающую плотность волос до и после лечения в Случаях 1-5. На ФИГ. 8б показана диаграмма среднего темпа роста волос в Случаях 1-5.

[253] Как показано на ФИГ. 8б, средняя плотность волос субъекта была меньше 5% перед процедурами. Средняя плотность волос в 5 Случаях увеличилась более чем на 45% после 1-3 процедур, в зависимости от характера выпадения волос.

[254] Препарат в соответствии с настоящим изобретением может стимулировать или значительный рост волос и предотвращать нежелательное выпадение волос.

[255] Хотя различные варианты осуществления выше содержат различные процедуры и признаки, при прочтении спецификации, специалист в данной области техники легко поймет, что такие процедуры и признаки в одном варианте осуществления могут быть включены или объединены с процедурами и признаками другого варианта осуществления. Кроме того, настоящее описание вариантов осуществления приведено для того, чтобы специалист в данной области техники могу создать и применить настоящее изобретение.

[256] Более того, различные модификации указанных вариантов осуществления будут очевидны специалистам в данной области техники, а общие принципы и конкретные примеры, определенные в настоящем описнии, могут применяться к другим вариантам осуществления без приложения изобретательских усилий. Следовательно, настоящее изобретение не ограничивается вариантами осуществления, описанными в настоящем описании, и подлежит рассмотрению в самом широком объеме, как определено в формуле изобретения и ее эквивалентах.

[Промышленная применимость]

[257] Вещество и способ его получения, а также способ лечения в соответствии с настоящим изобретением могут быть количественно обработаны для пациентов на основе технологии массового производства и, разумеется, существует возможность промышленного применения.

Группа изобретений относится к способу стимулирования роста волос и предотвращения выпадения волос у пациента, к композиции, используемой в способе, а также к способу получения указанной композиции. Способ стимулирования роста волос и предотвращения выпадения волос у пациента характеризуется тем, что композицию, содержащую эффективное количество активного ингредиента на основе bFGF и тромбоцитарно-обогащенной плазмы (PRP), вводят внутрикожно или подкожно на пораженный участок тела пациента, страдающего от выпадения волос. Группа изобретений имеет эффект, при котором на пораженном участке создаются новые кровеносные сосуды, что улучшает кровоснабжение, стимулирует рост волокнистых тканей и способствует регенерации тканей, что в свою очередь приводит к утолщению кожной ткани на пораженном участке. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 пр., 1 табл.

1. Способ стимулирования роста волос или предотвращения выпадения волос у субъекта, включающий введение внутрикожно или подкожно в целевую область субъекта, страдающего от выпадения волос, препарата, состоящего из смеси bFGF, тромбоцитарно-обогащенной плазмы (PRP) и плазмы крови, причем bFGF вводят в количестве от 1 мкг до 100 мкг на см² целевой области, плазму крови вводят в количестве от 10,1 до 40 мл на см² целевой области, a PRP вводят в количестве от 0,05 до 20 мл на см² целевой области.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что PRP и плазму крови получают из крови субъекта.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что препарат вводят два раза или более с интервалом 2-6 недель.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что субъектом является человек в возрасте от 18 лет и старше.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что целевой областью является как минимум одна из следующих частей тела: волосистая часть кожи головы, лицо, борода, голова, лобковая область, верхняя губа, тело, брови и веки.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что целевую область обрабатывают с помощью мезороллера.

7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что обработку мезороллером производят перед введением препарата.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что у субъекта наблюдается один из следующих видов выпадения волос: андрогенная алопеция, очаговая алопеция, а также выпадение волос из-за предшествующей лучевой терапии.

9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют плазму гелевого типа.

10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что препарат дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель.

11. Композиция для стимулирования роста волос и предотвращения выпадения волос у субъекта, содержащая

(а) bFGF в количестве, эффективном для стимулирования роста волос; а также

(б) смесь PRP и плазмы крови,

где количество PRP и плазмы составляет 0,1-10 и 0,2-20 единиц объема соответственно на основе 1 мл раствора bFGF, причем указанный 1 мл раствора bFGF содержит 100 мкг bFGF.

12. Композиция по п. 11, отличающаяся тем, что используют плазму крови гелевого типа.

13. Способ получения композиции для стимулирования роста волос или предотвращения выпадения волос, причем способ содержит следующие этапы:

отделяют кровь с помощью центрифуги для получения PRP и плазмы;

растворяют лиофилизированный bFGF, доступный на коммерческой основе, в физиологическом растворе для приготовления раствора bFGF;

смешивают PRP и раствор bFGF для приготовления смеси PRP и bFGF;

смешивают плазму, раствор bFGF и смесь PRP и bFGF.

14. Способ по п. 13, дополнительно содержащий следующие этапы:

погружают стерилизованный контейнер, содержащий плазму, в кипящую воду на 3-10 минут для получения плазмы гелевого типа между этапом отделения крови с помощью центрифуги для получения PRP и плазмы и этапом растворения лиофилизированного bFGF, доступного на коммерческой основе, в физиологическом растворе для приготовления раствора bFGF.

15. Способ по п. 13, отличающийся тем, что при смешивании PRP и раствора bFGF смешивают от 0,5 до 20 мл PRP и от 0,1 мкг до 10 мг раствора bFGF.

16. Способ по п. 13,

отличающийся тем, что при смешивании плазмы, раствора bFGF и смеси PRP и bFGF смешивают от 1 мл до 40 мл плазмы, от 0,1 мкг до 10 мг раствора bFGF и указанную смесь bFGF и PRP.

17. Способ по п. 13, отличающийся тем, что раствор bFGF представляет собой 100 мкг/мл раствора bFGF, растворяющего лиофилизированный bFGF, доступный на коммерческой основе, в физиологическом растворе.