Средства, обладающие антирадикальной активностью Российский патент 2019 года по МПК A61K31/4164 A61P43/00 C07D233/60 

Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средств, обладающих антирадикальной активностью.

Известны средства, обладающие антирадикальной активностью: ионол (дибунол), аскорбиновая кислота, токоферола ацетат, эмоксипин, β-каротин [1, 2, 3, 4]. Наиболее близким к заявляемым в формуле патента веществам средством (прототипом) является 4-метил-2,6-диизобутилфенол (ионол), как соединение близкое по структуре, относящееся к пространственно-затрудненным фенолам и обладающее выраженной антирадикальной активностью [5, 6].

Задачей изобретения является расширение номенклатуры средств, обладающих антирадикальной активностью.

Поставленная задача достигается применением 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида (Ten-138-1), 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола (Ten-119-1), 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола (Ten-102-2) и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида (Sal-2b) в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью.

Использование 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью в литературе не описано.

Данный вид активности 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида явным образом не вытекает для специалиста из уровня техники.

2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксид, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ол, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ол и 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксид могут быть использованы в качестве средств обладающих антирадикальной активностью при заболеваниях, характеризующихся активацией свободнорадикальных процессов и оксидативным стрессом.

Таким образом, данное техническое решение соответствует критериям изобретения: "новизна", "изобретательский уровень", "промышленная применимость".

Для оценки антирадикальной активности соединения была использована реакция со свободным стабильным радикалом 1,1-дифенил-2-пикрилгидразилом (ДФПГ) (Sigma, США). ДФПГ легко окисляет соединения, обладающие подвижным протоном, оставаясь при этом устойчивым к действию молекулярного кислорода. Активность соединения в отношении радикалов, возникающих в липидной фазе, оценивали, используя в качестве растворителя 95% этиловый спирт. Исходные концентрации растворов ДФПГ и исследуемых соединений составляли 0,25 мМ. Раствор ДФПГ и исследуемых соединений смешивали в объемном соотношении 1:1. Для контрольной пробы раствор ДФПГ смешивали в объемном соотношении 1:1 с 95% этиловым спиртом. Измерение оптической плотности проводили на спектрофотометре Cary 50 (Varian, Австралия) при длине волны 517 нМ в кювете из кварцевого стекла с длинной оптического пути 5 мм в течение 60 минут. Антирадикальную активность оценивали по показателю эффективного времени ЕТ_50% - время, за которое оптическая плотность уменьшается на 50%.

Статистическую обработку полученных результатов проводили с использованием пакета статистических программ «Statistica 8.0». Данные представлены в виде М±m, где М - среднее значение, m - стандартная ошибка среднего значения. Различия считались достоверными при уровне значимости p<0,05. Для оценки достоверности межгрупповых различий использовали непараметрический критерий Манна-Уитни.

Изобретение будет понятно из следующего описания к приложенной к нему фигуре 1.

На фигуре 1 изображено изменение оптической плотности ДФПГ при λ=517 нм в ходе взаимодействия с ионолом и исследуемыми соединениями.

Результаты исследования антирадикальной активности соединений представлены в примерах 1-6.

Пример 1.

Для контрольной пробы раствор ДФПГ смешивали в объемном соотношении 1:1 с 95% этиловым спиртом. Исходная оптическая плотность раствора ДФПГ со спиртом составляла 99±1%. Оптическая плотность контрольной пробы не менялась со временем и через час составила 99±2% (табл., фиг. 1)

Пример 2.

При добавлении 0,25 мМ раствора ионола к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности по сравнению с контролем (фиг. 1). Через час ионол снижал оптическую плотность раствора до 42%. Показатель эффективного времени ЕТ_50% ионола составил 12,66±0,70 с (табл.).

Примечание: * - достоверные различия по сравнению со значениями в контроле (p<0,05);

⁺ - достоверные различия по сравнению с ионолом (p<0,05).

Пример 3.

При добавлении 0,25 мМ раствора Ten-119-1 к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Ten-119-1 к 60-й минуте достигло 22±5% относительно исходного значения и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 1,21±0,28 мин и было в 10 раз ниже, чем у ионола (табл.).

Пример 4.

При добавлении 0,25 мМ раствора Ten-102-2 к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Ten-102-2 к 60-й минуте достигло 27±1%, относительно исходного значения, и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 1,52±0,08 мин и было в 8 раз ниже, чем у ионола (табл.).

Пример 5.

При добавлении 0,25 мМ раствора Ten-138-1 к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Ten-138-1 к 60-й минуте достигло 23±1% относительно исходного значения и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 4,97±0,22 мин и было в 2,6 раз ниже, чем у ионола (табл.).

Пример 6.

При добавлении 0,25 мМ раствора Sal-2b к раствору ДФПГ наблюдалось снижение оптической плотности (фиг. 1). Значение оптической плотности раствора ДФПГ с Sal-2b к 60-й минуте достигло 27±1% относительно исходного значения и было достоверно ниже по сравнению с контрольными значениями и ионолом (табл.). Эффективное время составило 4,78±0,26 мин и было в 2,5 раз ниже, чем у ионола (табл.).

Таким образом, соединения Ten-119-1, Ten-102-2, Ten-138-1, Sal-2b обладают антирадикальной активностью превышающей ионол.

Таким образом, соединения Ten-119-1, Ten-102-2, Ten-138-1, Sal-2b в модельной системе со свободным стабильным радикалом 1,1-дифенил-2-пикрилгидразилом проявляют большую антирадикальную активность, чем ионол.

Источники литературы, принятые во внимание

1. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., Бондарь И.А. и др. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты. - М.: Фирма «Слово», 2006. - С. 193-196.

2. Пожилова Е.В., Новиков В.Е., Новикова А.В. Фармакодинамика и клиническое применение препаратов на основе гидроксипиридина // Вестник Смоленской государственной медицинской академии - 2013. - Т. 12, №3. - С. 56-66.

3. Теплый Д.Л., Кондратенко Е.И., Нестеров Ю.В., Курьянова Е.В., Ломтева Н.А. Влияние витамина Е на физиологические процессы: результаты и перспективные направления исследований // Фундаментальные исследования. - 2005. - №9. - С. 92-93.

4. Плотников М.Б., Иванов И.С., Смольякова В.И., Чернышева Г.А., Кучин А.В., Чукичева И.Ю., Краснов Е.А. Антиоксидантная активность производного О-изоборнилфенола при ишемии головного мозга у крыс // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. - 2010. - Т. 8, №5. - С. 23-25.

5. Зарудий Ф.С., Гульмутдинов Г.З., Зарудий Р.Ф. и др. 2,6-Ди-трет-бутил-4-метилфенол (дибунол, ионол, тонарол) классический антиоксидант (обзор) // Хим.-фарм. журнал. - 2001. - Т. 35, №3. - С. 42-48.;

6. Меньщикова Е.Б., Ланкин В.З., Кандалинцева Н.В. Фенольные антиоксиданты в биологии и медицине. - LAP LAMBERT Academic Publishing, 2012. - 344-362 с.

Изобретение раскрывает применение 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1H-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1H-имидазол-3-оксида. Технический результат заключается в применении указанных соединений в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью. 1 ил., 1 табл., 6 пр.

Применение 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-(4-фторфенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-3-оксида, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-4-этил-5,5-диметил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-1-ола, 2-(3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)-1-гидрокси-5,5-диметил-4-фенил-2,5-дигидро-1Н-имидазол-3-оксида в качестве средств, обладающих антирадикальной активностью.