Способ проведения экстракорпорального оплодотворения Российский патент 2020 года по МПК A61B17/435 

Описание патента на изобретение RU2714124C1

Изобретение относится к медицине, а именно к вспомогательным технологиям в акушерстве и может быть использовано для повышения эффективности имплантации эмбрионов к слизистой полости матки при процедуре экстракорпорального оплодотворения (ЭКО)

В течение почти 37 лет применяется и развивается оплодотворение in vitro и перенос эмбриона. Несмотря на технологические успехи, ведущие к повышению частоты зачатий, частота наступления имплантации при подсадке зародышей заметно не улучшилась и остается между 10 и 15%. Поэтому именно наступление или ненаступление имплантации отличает успешный цикл ЭКО от безуспешного.

Неудачная имплантация может быть следствием либо аномалий зародыша, либо аномалий эндометрия. По некоторым оценкам, частота зародышей с аномалиями хромосомного набора, доступных для имплантации, составляет 30%. Однако при подсадке 2-х и более эмбрионов частота результативных ЭКО не увеличивается и остается в том же диапазоне 10-15%. Успешная имплантация прежде всего требует наличия рецептивного эндометрия и нормальных взаимодействий между рецептивным эндометрием и зародышем. Большое значение в этом имеет состояние эндометрия (слизистой оболочки матки).

Эндометрий состоит из железистого эпителия, стромы и лимфомиелоидных клеток. Для поддержки нормальной беременности, эндометрий должен дифференцироваться в децидуальную оболочку. У человека эндометрий превращается в децидуальную оболочку под действием гормонов, лимфоидных и трофобластных клеток. К факторам, которые могут помешать децидуальной функции, относят эндометриты, эндометриоз, полипы эндометрия, подслизистые узлы миомы, внутриматочные сращения и др.

Этап прикрепления эмбриона к эндометрию и его имплантации в настоящий момент является наиболее уязвимым этапом программы экстракорпорального оплодотворения. Доказано, что существенным моментом является первоначальное тесное соприкосновение имплантируемого эмбриона с предецидуальным эндометрием.

Так с целью улучшения контакта эмбриона с эндометрием компанией Vitrolife разработана среда для трансфера (переноса) эмбриона (EmbryoGlue), в состав которой входит гиалуроновая кислота в высокой концентрации и рекомбинантный альбумин. Вязкий раствор EmbryoGlue быстро диффундирует в вязкий секрет матки и эмбрион оказывается в тесном контакте с эндометрием. Эндометрий матки и эмбрион имеют рецепторы к гиалуроновой кислоте, которая «связывает» их друг с другом. Также высокая концентрация гиалуроновой кислоты делает раствор более густым. Это способствует лучшему смешиванию среды, в которой находится эмбрион с естественными жидкостями матки для более комфортного переноса. Рекомбинантный глобулин повышает резерв питания тканей. В результате осуществления трансфера в среде EmbryoGlue повышается вероятность беременностей с 5 до 11,2% (по данным конгресса ESHRE (European Societyof Human Reproduction and Embriology). (Fluori С et al. The effect of EmbryoGlue on clinical outcome P-179 Fertility, 2017, Edinburg, UK, 2017).

Важно понимать, что процесс прикрепления и имплантации эмбриона не является кратковременным. После переноса эмбриона в полость матки он начинает прикрепляться к ее слизистой оболочке в течение нескольких часов, реже - в течение первых суток. В то же время сам процесс имплантации протекает относительно медленно, занимая в среднем около 40 часов (www.tiensmed.ru). Так как перенос эмбриона производят в небольшом объеме питательной среды (обязательным условием для всех переносов не более 30 мкл) и раствор EmbryoGlue быстро смешивается с секретом полости матки, то продолжительность сохранения локальной концентрации раствора в месте подсадки эмбриона занимает очень короткое время и недостаточно для всего периода прикрепления. Так же микрообъем среды переноса не может изменить среду всей полости матки, что является важным при патологии эндометрия. После внедрения в секрет матки эмбрион не прикрепляется в месте подсадки сразу, а вращается, пока он не будет готов к вылуплению. После вылупления эмбрион увеличивается в диаметре в 4-5 раз. Вылупившийся эмбрион выставляет наружу рецепторы и продолжает вращаться и двигаться в полости матки, чтобы зацепиться на поверхности эндометрия в благоприятном для эмбриона месте.

Таким образом, данный способ не учитывает индивидуальное состояние эндометрия и имеет короткий период контакта эмбриона с эндометрием в среде переноса.

Из уровня техники, известен способ проведения экстракорпорального оплодотворения, включающий оплодотворение in vitro, перенос эмбриона и создание в полости матки условий обеспечивающих улучшение контакта эмбриона с эндометрием (пат. RU 2444315, кл. А61В 17/435, публ. 2012 г.).

Для создания условий, обеспечивающих улучшение контакта эмбриона с эндометрием, используют воздушную смесь, состоящую из 89% кислорода и 11% азота, которую вводят в матку через катетер с коническим концом и сеткой рассекателем. Конический конец катетера прижимают к наружному отверстию цервикального канала шейки матки, затем впрыскивают воздушную смесь в полость матки, которая проходя через сетку-рассекатель равномерно распределяется в полости матки.

Способ позволяет создать давление в полости матки, необходимое для более тесного контакта эмбриона с эндометрием.

Недостатком данного метода является короткий период экспозиции воздушной смеси и отсутствие создания среды для усиления рецепторного взаимодействия с предецидуальным эндометрием, что особенно важно у пациенток с патологией эндометрия.

Важно напомнить, что после внедрения в секрет матки эмбрион не прикрепляется механически, а выставляет наружу рецепторы для взаимодействия с рецепторами эндометрия.

В соответствии с этим, поставлена задача, направленная на повышение эффективности способа и расширение его возможностей за счет создания в полости матки среды с использованием концентрата плазменного аутофибронектина, обладающего свойствами «молекулярного клея», что обеспечивает «слипание» переносимого в полость матки эмбриона с предецидуальным эндометрием даже в случаях нарушения децидуальной функции у пациентки за счет патологии эндометрия.

Эта задача решена тем, что в способе проведения экстракорпорального оплодотворения, включающем оплодотворение in vitro перенос эмбриона и создание в полости матки условий, обеспечивающих улучшение контакт эмбриона с эндометрием, предложено в качестве условий, обеспечивающих улучшение контакта эмбриона с эндометрием, предварительно перед переносом эмбриона в полости матки создавать среду, для чего, использовать, концентрат плазменного аутофибронектина, который с помощью катетера в объеме 1,0-1,5 мл, вводить в шейку матки, равномерно распределять его по стенкам, затем в течение 1,5-2 ч выдерживать препарат для экспозиции к слизистой матки.

Помимо свойств «клея» фибринонектин обладает регенеративной способностью, противовоспалительным и антибактериальным действием, что улучшает состояние эндометрия в процедуре ЭКО.

Фибронектин - один из ключевых адгезивных белков межклеточного матрикса, неколлагеновый структурный гликопротеин. Фибронектин способен связываться с клеточными рецепторами, коллагенами, фибрином и протеогликанами, гиалуроновой кислотой. Благодаря своей структуре фибронектин может выполнять интегрирующую роль в организации межклеточного вещества, а также способствовать адгезии клеток. Такая особенность строения фибронектина придает ему свойство «молекулярного клея».

Экспозиция концентрата плазменного аутофибронектина в течение 1,5-2 часов выбрана экспериментальным путем и является необходимой и достаточной для полной равномерной диффузии препарата в среду полости и всасывания слизистой матки излишек жидкости, которая может привести к нежелательному «скольжению» эмбриона.

Известны способы получения фибронектина.

Способ лечения пациентов с трофическими язвами (С.А, Васильев и др. «Плазменный гепариновый преципитат как источник фибронектина для лечения больных с трофическими поражениями кожи» - «Терапевтический архив» 1987 г, №6, с. 127-130.

Известен способ получения аутофибронектина по И.В. Макарову, Н.Н. Навасардян «Применение концентрата плазменного аутофибронектина в комплексном лечении пациентов с трофическими язвами нижних конечностей».- «Казанский медицинский журнал», 2008 г., том 89, №3, с. 227-280. Полученный концентрат аутофибронектина применялся у пациентов с трофическими язвами нижних конечностей на фоне хронической венозной недостаточности.

Способ осуществляют следующим образом.

Первоначально пациентке проводят эксфузию крови путем пункции периферических вен в пластиковые контейнеры типа «Гемакон 500/300», кровь центрифугируется в режиме 3200 об/мин 7 минут. По окончании центрифугирования 350-450 мл плазмы переводят в отдельный контейнер, а оставшийся концентрат эритроцитов возвращается пациентке. Удаляемый объем плазмы замещается адекватным количеством 0,9% раствора натрия хлорида в изоволемическом режиме.

Плазму в стерильных условиях инкубируют с нефракционированным гепарином 20-30 МЕ/мл и помещают на 12-16 часов в морозильную камеру npnt минус 20С, затем размораживают при t+4-5 С и центрифугируют при 3500-4000 об/мин в течение 10-15 минут, получают осадок в виде плотного белого сгустка желеобразной консистенции. Выделенный гепариновый аутопреципитат растворяют в стерильном физиологическом растворе или 4% растворе бикарбоната натрия при t+37C. Полученный препарат хранят в замороженном состоянии и размораживают перед употреблением. Из 350-450 мл аутоплазмы получают до 10-15 доз концентрата по 3-5 мл, расфасовывают в стерильные одноразовые шприцы и перед использованием размораживают дозированно при комнатной температуре. Полученный фибронектин в замороженном состоянии можно хранить до 1 года, при хранении при +4°С фибронектин сохраняет свою активность до 2 недель.

Предварительно до переноса эмбриона (эмбрионов) в шейку матки вводят наконечник имплантатора в форме катетера, через который в полость матки вводят концентрат плазменного аутофибронектина в объеме 1,0-1,5 мл, распределяя по стенкам матки, в течение 1,5-2 ч создают экспозицию препарата к слизистой матки.

Через 1,5-2 часа после введения концентрата плазменного аутофибронектина проводят перенос эмбриона.

Конкретные примеры.

Пациентка Г.Ю., 35 лет. Бесплодие II на фоне хронического эндометриоза, спаечного процесса в малом тазу. С 2015-2018 гг. 8 неэффективных протоколов ЭКО, 1 неразвивающаяся беременность в 9 недель (после ЭКО). В предыдущих протоколах проводилось лечение курсами плазмафереза, гирудотерапией, введение внутривенного иммуноглобулина. Пациентке был проведен успешный протокол ЭКО данным способом. Предварительно, перед пересадкой эмбрионов в полость матки ввели 1,5 мл концентрата плазменного аутофибронектина, после чего выдерживали его в течение 2 часов для экспозиции с слизистой матки. Затем была проведена подсадка 2-х эмбрионов. Наступила беременность двойней. К настоящему моменту беременность 12 недель, прогрессирующая, протекала без осложнений.

Пациентка Т.О., 40 лет. Бесплодие 1-15 лет, 1 внематочная беременность в 2016 г., тубэктомия с обеих сторон (гидросальпингс). Второй брак. Бесплодие II (абсолютный трубный фактор, снижение овариального резерва, мужской фактор, множественная миома матки). В анамнезе 4 неудачи ЭКО в 2017 г., 2018 г. с использованием донорских яйцеклеток. Пациентке проведен протокол ЭКО с яйцеклеткой донора и с использованием концентрата плазменного аутофибронектина, наступила беременность.

Пациентка А.Н., 30 лет, Бесплодие II (в анамнезе медицинский аборт). У пациентки выявлены спаечный процесс в малом тазу, наружный генитальный эндометриоз, трубно-перитонеальный фактор, миома матки, хронический эндометрит. Проводилось лечение - резекция правого яичника по поводу эндометриодной кисты, миомэктомия, хирургической удаление очагов эндометриоза в 2016 г. Проведено 4 неэффективных протокола ЭКО с 2016-2018 гг. После проведения протокола ЭКО с концентратом плазменного аутофибронектина наступила беременность. К настоящему моменту беременность 24 недели.

Положительным результатом протоколов ЭКО с использованием концентрата плазменного аутофибронектина нами считается не только наступление, но и прогрессирование беременности. Проведено 35 переносов эмбрионов с применением аутофибронектина у пациенток 2 групп с наиболее отягощенным акушерским анамнезом - с многократными неэффективными протоколами ЭКО (более 3), во всех случаях с патологией эндометрия. Первую группу составили пациентки позднего репродуктивного возраста со снижением овариального резерва, вторую группу только с патологией эндометрия.

Анализ статистических данных результатов наступления беременностей в 2-х группах пациенток приведен в табл. 1

Как видно из таблицы 1 высокий процент результативных ЭКО было в обеих группах пациенток с патологией эндометрия, ниже результативность наблюдалась в группе пациенток позднего репродуктивного возраста.

Использование данного способа позволит повысить возможность удачной имплантации эмбриона к эндометрию с последующим его развитием за счет создания в полости матки среды, улучшающей контакт «слипание» переносимого в полость матки эмбриона с предецидуальным эндометрием, в том числе у пациенток с многократными неэффективными проколами ЭКО из-за патологии эндометрия.

Похожие патенты RU2714124C1

название год авторы номер документа
Способ внутриматочной инфузии аутологичной плазмы женщины для повышения эффективности программ вспомогательных репродуктивных технологий 2021
  • Храмцова Александра Юрьевна
  • Башмакова Надежда Васильевна
  • Газиева Ирина Александровна
  • Чистякова Гузель Нуховна
  • Гришкина Анастасия Александровна
RU2762159C1
Способ проведения экстракорпорального оплодотворения 2016
  • Краснопольская Ксения Владиславовна
  • Федоров Антон Андреевич
  • Ершова Ирина Юрьевна
RU2616272C1
СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ НАСТУПЛЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ В ПРОГРАММЕ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ И ПЕРЕНОСА ЭМБРИОНОВ В СТАНДАРТНОМ ДЛИННОМ ПРОТОКОЛЕ СТИМУЛЯЦИИ СУПЕРОВУЛЯЦИИ 2010
  • Савельева Галина Михайловна
  • Шимановский Николай Львович
  • Клименко Петр Афанасьевич
  • Карева Елена Николаевна
  • Каппушева Лаура Магомедовна
  • Сукновалова Мария Владимировна
  • Крамаренко Мария Петровна
RU2430379C1
СПОСОБ ВОССТАНОВЛЕНИЯ РЕЦЕПТИВНОСТИ ЭНДОМЕТРИЯ У ЖЕНЩИН С МАТОЧНОЙ ФОРМОЙ БЕСПЛОДИЯ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ КАВИТИРОВАННОГО РАСТВОРА ГРАНУЛОЦИТАРНОГО КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩЕГО ФАКТОРА РОСТА 2017
  • Мелкозерова Оксана Александровна
  • Башмакова Надежда Васильевна
  • Есарева Алена Валерьевна
RU2667611C1
Способ лечения цервицита и хронического эндометрита 2019
  • Обоскалова Татьяна Анатольевна
  • Глухов Евгений Юрьевич
  • Бучок Григорий Яковлевич
  • Козырева Елена Николаевна
  • Росюк Елена Александровна
  • Богданова Анна Михайловна
  • Чернова Татьяна Олеговна
  • Кононов Юрий Викторович
  • Локшин Семен Лейбович
  • Койнов Андрей Васильевич
  • Касьянова Виктория Владимировна
  • Цветкова Марина Сергеевна
  • Щепитова Марина Сергеевна
  • Новоторкина Дарья Антоновна
  • Астрюхина Ирина Игоревна
RU2749812C2
СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ РЕЦИДИВОВ ВНУТРИМАТОЧНЫХ СИНЕХИЙ 2015
  • Лихачева Виктория Васильевна
  • Баженова Людмила Григорьевна
  • Сотникова Лариса Степановна
  • Маркдорф Аркадий Геннадьевич
  • Третьякова Яна Николаевна
  • Лихачев Александр Геннадьевич
RU2582226C1
Способ восстановления фертильности у женщин с эндометриальным бесплодием в анамнезе на фоне "тонкого эндометрия" 2023
  • Мотовилова Татьяна Михайловна
  • Боровкова Людмила Васильевна
  • Качалина Татьяна Симоновна
  • Симакова Виктория Юрьевна
  • Пономарева Ирина Владимировна
RU2800236C1
СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ РЕЦЕПТИВНОСТИ ЭНДОМЕТРИЯ У ПАЦИЕНТОК С МАТОЧНОЙ ФОРМОЙ БЕСПЛОДИЯ, ОБУСЛОВЛЕННОЙ ЭНДОМЕТРИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИЕЙ, ПРИ ПОДГОТОВКЕ К ПРОВЕДЕНИЮ ПРОЦЕДУРЫ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ (ЭКО) ПО КРИОПРОТОКОЛУ 2021
  • Оразов Мекан Рахимбердыевич
  • Краснопольская Ксения Владиславовна
  • Силантьева Елена Сергеевна
  • Михалева Людмила Михайловна
  • Лагутина Елена Владимировна
  • Орехов Роман Евгеньевич
  • Семёнов Павел Александрович
RU2746643C1
СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ 1999
  • Мелконова К.Ю.
  • Кузьмин А.В.
  • Орлов В.И.
  • Волошин В.В.
  • Азарова Т.Е.
  • Ломтева С.В.
RU2181581C2
Способ проведения ЭКО при наличии миомы матки, деформирующей ее полость 2019
  • Попов Александр Анатольевич
  • Федоров Антон Андреевич
  • Чечнева Марина Александровна
  • Сопова Юлия Игоревна
  • Барто Руслан Александрович
  • Тюрина Светлана Сергеевна
  • Ершова Ирина Юрьевна
RU2707059C1

Реферат патента 2020 года Способ проведения экстракорпорального оплодотворения

Изобретение относится к медицине, более конкретно к вспомогательным технологиям в акушерстве. Предложен способ проведения экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), согласно которому осуществляют оплодотворение in vitro и переносят эмбрион, при этом перед переносом эмбриона в полость матки с помощью катетера вводят концентрат плазменного аутофибронектина, равномерно распределяя его по стенкам, а затем в течение 1,5-2 ч выдерживают указанный концентрат для экспозиции к слизистой матки. Изобретение обеспечивает улучшение контакта эмбриона с эндометрием. 3 пр., 1 табл.

Формула изобретения RU 2 714 124 C1

Способ проведения экстракорпорального оплодотворения, включающий оплодотворение in vitro, перенос эмбриона и создание в полости матки условий, обеспечивающих улучшение контакта эмбриона с эндометрием, отличающийся тем, что в качестве условий, обеспечивающих улучшение контакта эмбриона с эндометрием, предварительно перед переносом эмбриона в полости матки создают среду, для чего используют концентрат плазменного аутофибронектина, который с помощью катетера в объеме 1,0-1,5 мл вводят в полость матки, равномерно распределяя его по стенкам, затем в течение 1,5-2 ч выдерживают указанный концентрат для экспозиции к слизистой матки.

Документы, цитированные в отчете о поиске Патент 2020 года RU2714124C1

СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ВОЗМОЖНОСТИ УДАЧНОЙ ИМПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНА К ЭНДОМЕТРИЮ ПОЛОСТИ МАТКИ 2010
  • Шнейдерман Михаил Григорьевич
  • Колесников Лев Львович
RU2444315C1
US 20070275366 A1, 29.11.2007
Приспособление для закрепления на валу пропеллера системы Рида 1925
  • Рид С.А.
SU4526A1
N-ацетил-L-цистеин для применения в экстракорпоральном оплодотворении 2013
  • Лундеберг Томас
  • Паразасси Тицьяна
  • Питталуга Эуджениа
  • Брунелли Роберто
RU2641606C2

RU 2 714 124 C1

Авторы

Суханова Галина Александровна

Таусон Ирина Владимировна

Кузнецова Ирина Всеволодовна

Калинин Николай Николаевич

Рудницкая Мария Андреевна

Кармызова Татьяна Савельевна

Даты

2020-02-12Публикация

2019-06-24Подача