Область техники

Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим в качестве активного ингредиента антигенсвязывающую молекулу, которая индуцирует иммунный ответ на антиген-мишень, или к терапевтическим способам, в которых используются эти фармацевтические композиции. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим в качестве активного ингредиента антигенсвязывающую молекулу, которая индуцирует упомянутый выше иммунный ответ и также обладает цитотоксичностью (цитотоксической активностью) или антипролиферативным действием (активность ингибирования пролиферации клеток) против клеток, экспрессирующих антиген-мишень, или к терапевтическим способам, в которых используются фармацевтические композиции.

Уровень техники

До настоящего времени были предприняты попытки разработать ряд терапевтических вакцин, направленных на опухолевые клетки. Это является следствием того, что считается, что существуют качественные и количественные различия между опухолевыми клетками и нормальными клетками, которые могут распознаваться иммунной системой живого организма, и иммунная система, стимулированная посредством активной и специфической сенсибилизацией вакцинами, в которых используются такие различия (неоэпитопы), может распознавать и устранять опухолевые клетки.

Для достижения такого противоопухолевого ответа должны удовлетворяться по меньшей мере два условия. Во-первых, опухолевые клетки должны экспрессировать антиген, который не встречается в нормальных клетках, или экспрессируют антиген в такой степени, чтобы нормальные клетки и опухолевые клетки могли различаться только качественно. Во-вторых, иммунная система должна активироваться вакцинами или сходными с ними для взаимодействия с представляющим интерес антигеном. Основным препятствием для иммунотерапии опухоли считается то, что иммуногенность опухолей является особенно слабой у человека.

В последние годы были открыты связанные с опухолью или опухолеспецифические антигены, включающие такие неоэпитопы, которые могут представлять собой мишени для атаки иммунной системы. Тем не менее, иммунная система не может устранить опухоли, экспрессирующие такие неоэпитопы, и это может быть следствием недостаточного иммунного ответа на эти неоэпитопы, а не следствием отсутствия неоэпитопов.

Для клеточной иммунотерапии злокачественных опухолей было разработано две общих стратегии. Одной из них является адоптивная иммунотерапия, где реактивные в отношении опухоли T-лимфоциты, увеличенные в количестве in vitro, повторно вводят пациенту, а другой является активная иммунотерапия, в которой используются опухолевые клетки для индукции системного ответа на опухоль путем запуска нового или более сильного иммунного ответа на опухолевый антиген.

Вакцины против опухоли на основе активной иммунотерапии получают различными способами. Для индукции иммунного ответа на опухолевый антиген получают облученные опухолевые клетки, смешанные со стимулирующим иммунитет адъювантом, таким как бацилла Кальмета-Герена (BCG) (непатентный документ 1), опухолевые клетки, генетически модифицированные для продуцирования, например, цитокинов (непатентный документ 2), и отчужденные аутологичные опухолевые клетки (непатентный документ 3). Однако иммуногенность опухолевых клеток является низкой, и это считается следствием количества опухолевого антигена, но не его качества.

С другой стороны, известно, что антитела индуцируют гуморальный иммунный ответ (продукция антител против антигена) и клеточный иммунный ответ (продукция CD8-положительных T-клеток против антигена) на антигены посредством перекрестного представления связанных антигенов антигенпредставляющим клеткам, и было описано, что введение антитела может индуцировать приобретенный иммунитет на антиген (непатентный документ 4). Недавно для противоопухолевого эффекта антитела против HER2 в модели на мышах in vivo было показано, что приобретенный иммунитет на антиген HER2, индуцированный введением антитела, играет более важную роль, чем прямая ADCC вводимого антитела (непатентный документ 5). В действительности, при клиническом применении герцептина, который представляет собой лекарственное средство на основе антитела подкласса IgG1 против HER2, при введении герцептина индуцировался приобретенный иммунитет, и наблюдали гуморальный иммунный ответ на HER2 (непатентный документ 6). Поскольку у пациентов, у которых было эффективным введение герцептина, в частности, был продемонстрирован увеличенный титр антител против HER2, считали, что индукция приобретенного иммунитета при введении герцептина играет важную роль в противоопухолевом эффекте.

Антитела являются высокостабильными в крови и имеют мало побочных эффектов, и, таким образом, привлекают внимание в качестве фармацевтических средств (непатентные документы 7 и 8). До настоящего времени было проведено множество исследований антителозависимой клеточной цитотоксичности (далее обозначаемой как ADCC) и комплементзависимой цитотоксичности (далее обозначаемой как CDC), которые являются эффекторными функциями антител класса IgG. Было описано, что в классе IgG человека, антитела полкласса IgG1 обладают наиболее высокой активностью ADCC и активностью CDC (непатентный документ 9). Более того, также полагают, что одной из эффекторных функций антител является антителозависимый клеточно-опосредуемый фагоцитоз (ADCP), который представляет собой фагоцитоз клеток-мишеней, опосредуемый антителами класса IgG (непатентные документы 10 и 11). Поскольку антитела подкласса IgG1 могут индуцировать эти эффекторные функции против опухолей, антитела подкласса IgG1 используют для большинства фармацевтических средств против антигенов злокачественной опухоли.

Для того, чтобы IgG-антитела опосредовали активность ADCC и ADCP, Fc-область IgG-антитела должна связываться с рецепторами антител (далее обозначаемыми как FcγR), которые присутствуют на поверхности эффекторных клеток, таких как киллерные клетки, натуральные киллерные клетки и активированные макрофаги. У человека описаны изоформы FcγRIa, FcγRIIa, FcγRIIb, FcγRIIIa и FcγRIIIb в качестве представителей семейства FcγR, и также описаны их соответствующие аллотипы (непатентный документ 12).

Усиление цитотоксических эффекторных функций, таких как ADCC и ADCP, привлекло внимание в качестве перспективных средств для усиления противоопухолевых эффектов антител против злокачественной опухоли. Важность опосредуемых FcγR эффекторных функций, являющихся целью противоопухолевых эффектов антител, описана с использованием моделей на мышах (непатентные документы 13 и 14). Более того, было выявлено, что клинические эффекты у человека коррелировали с высокоаффинным полиморфным аллотипом (V158) и низкоаффинным полиморфным аллотипом (F158) FcγRIIIa (непатентный документ 15). В этих сообщениях указано, что антитела с Fc-областью, оптимизированной для связывания с конкретными FcγR, опосредует более мощные эффекторные функции, и, тем самым, проявляют более эффективные противоопухолевые эффекты. Баланс между аффинностью антител против активирующих рецепторов, включая FcγRIa, FcγRIIa, FcγRIIIa и FcγRIIIb, и ингибирующих рецепторов, включающих FcγRIIb, является важным фактором при оптимизации эффекторных функций антител. Повышение аффинности к активирующим рецепторам может обеспечить антитела со свойством опосредования более мощных эффекторных функций (непатентный документ 16), и, таким образом, описано в различных сообщениях до настоящего времени в качестве способа модификации с помощью инженерии антител для повышения или усиления противоопухолевой активности фармацевтических средств на основе антител против антигенов злокачественной опухоли.

Что касается связывания между Fc-областью и FcγR, было показано, что несколько остатков в шарнирной области антитела и CH2-домене антитела и цепь сахара, связанная с Asn в положении 297 (нумерация EU) в CH2-домене, являются важными (непатентные документы 9, 17 и 18). Фокусируясь на этих участках связывания, до настоящего времени проводили исследования на мутантах Fc-области, имеющих различные свойства связывания FcγR, и были получены мутанты Fc-области с более высокой аффинностью в отношении активирующего FcγR (патентные документы 1 и 2). Например, Lazar et al. успешно увеличили связывание IgG1 человека с FcγRIIIa человека (V158) приблизительно в 370 раз посредством замены Ser в положении 239, Ala в положении 330 и Ile в положении 332 (нумерация EU) IgG1 человека на Asn, Leu и Glu, соответственно (непатентный документ 19 и патентный документ 2). Соотношение связывания FcγRIIIa и FcγRIIb (соотношение A/I) для этого мутанта было приблизительно в 9 раз выше, чем для дикого типа. Более того, Shinkawa et al. успешно увеличили связывание с FcγRIIIa вплоть до приблизительно 100 раз посредством удаления фукозы из цепи сахара, связанной с Asn в положении 297 (нумерация EU) (непатентный документ 20). Эти способы могут значительно повысить активность IgG1 человека в отношении ADCC по сравнению со встречающимся в природе IgG1 человека.

Хотя, как описано выше, существует много сообщений о способах усиления ADCC с помощью модификации антител способами инженерии, до настоящего времени отсутствуют сообщения о способах модификации антител способами инженерии для усиления или улучшения индукции приобретенного иммунитета посредством введения антитела. Существует сообщение о способах индукции приобретенного иммунитета против антигена злокачественной опухоли, в которых антиген злокачественной опухоли, против которого является желательной индукция приобретенного иммунитета, подвергают слиянию с антителом, которое связывается с рецептором с высоким содержанием маннозы или DEC-205, экспрессируемым на антигенпредставляющих клетках, тем самым, ускоряя включение и представление злокачественного антигена антигенпредставляющими клетками (непатентный документ 21). Однако в этих способах мишенью для связывания антителом не является антиген злокачественной опухоли, как в случае упомянутого выше антитела против HER2. Следовательно, поскольку эти способы индуцируют приобретенный иммунитет против антигена злокачественной опухоли, слитого с самим антителом, антитело само по себе не может связываться с антигеном злокачественной опухоли, и имеет недостаток, состоящий в том, что оно не способно проявлять прямое действие на антиген злокачественной опухоли. Более того, поскольку этот способ индуцирует приобретенный иммунитет не только против антигена злокачественной опухоли, слитого с антителом, но также против самого антитела, используемого для нацеливания на антигенпредставляющие клетки, появляются антитела против лекарственного средства, и это приводит к ослаблению эффектов. Таким образом, этот способ может не быть предпочтительным для терапевтических целей.

В соответствии с вышеуказанным, хотя является желательной индукция приобретенного иммунитета против антигена-мишени посредством введения антигенсвязывающей молекулы, обладающей активностью связывания с антигеном-мишенью, отсутствуют сообщения о способах инженерии для улучшения или усиления приобретенного иммунитета такими способами.

Документы уровня техники

Патентные документы

Патентный документ 1: WO 2000/042072

Патентный документ 2: WO 2006/019447

Непатентные документы

Непатентный документ 1: Oettgen, H. F., and Old, L. J., The history of cancer immunotherapy., Biological Therapy of Cancer (1991) 87-119 DeVita et al. ed.

Непатентный документ 2: Zatloukal K, Schmidt W, Cotten M, Wagner E, Stingl G, Birnstiel ML., Somatic gene therapy for cancer: the utility of transferrinfection in generating 'tumor vaccines'., Gene (1993) 135, 199-207

Непатентный документ 3: Bronte V, Tsung K, Rao JB, Chen PW, Wang M, Rosenberg SA, Restifo NP., IL-2 enhances the function of recombinant poxvirus-based vaccines in the treatment of established pulmonary metastases., J. Immunol. (1995) 154, 5282-5292

Непатентный документ 4: Adams GP, Weiner LM., Monoclonal antibody therapy of cancer., Nat. Biotechnol. (2005) 23, 1147-1157

Непатентный документ 5: Park S, Jiang Z, Mortenson ED, Deng L, Radkevich-Brown O, Yang X, Sattar H, Wang Y, Brown NK, Greene M, Liu Y, Tang J, Wang S, Fu YX., The therapeutic effect of anti-HER2/neu antibody depends on both innate and adaptive immunity., Cancer Cell (2010) 18, 160-170 (2010)

Непатентный документ 6: Taylor C, Hershman D, Shah N, Suciu-Foca N, Petrylak DP, Taub R, Vahdat L, Cheng B, Pegram M, Knutson KL, Clynes R. Augmented HER-2 specific immunity during treatment with trastuzumab and chemotherapy., Clin. Cancer Res, (2007) 13, 5133-43

Непатентный документ 7: anice M Reichert, Clark J Rosensweig, Laura B Faden & Matthew C Dewitz, Monoclonal antibody successes in the clinic., Nat. Biotechnol. (2005) 23, 1073-1078

Непатентный документ 8: avlou AK, Belsey MJ., The therapeutic antibodies market to 2008., Eur. J. Pharm. Biopharm. (2005) 59(3), 389-396

Непатентный документ 9: Clark, M., Antibody Engineering IgG Effector Mechanisms., Chemical Immunology (1997), 65, 88-110

Непатентный документ 10: Horton HM, Bernett MJ, Pong E, Peipp M, Karki S, Chu SY, Richards JO, Vostiar I, Joyce PF, Repp R, Desjarlais JR, Zhukovsky EA., Potent in vitro and in vivo activity of an Fc-engineered anti-CD19 monoclonal antibody against lymphoma and leukemia., Cancer Res. (2008) 68, 8049-8057

Непатентный документ 11: Zalevsky J, Leung IW, Karki S, Chu SY, Zhukovsky EA, Desjarlais JR, Carmichael DF, Lawrence CE., The impact of Fc engineering on an anti-CD19 antibody: increased Fcγ receptor affinity enhances B-cell clearing in nonhuman primates., Blood (2009) 113, 3735-3743

Непатентный документ 12: Jefferis R, Lund J., Interaction sites on human IgG-Fc for FcgammaR: current models., Immunol. Lett. (2002) 82, 57-65

Непатентный документ 13: Clynes, R., Yoshizumi, T., Moroi, Y., Houghton, A.N., and Ravetch, J.V., Fc Receptors are required for passive and active immunity to melanoma., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. (1998) 95, 652-656

Непатентный документ 14: Clynes RA, Towers TL, Presta LG, Ravetch JV., Inhibitory Fc receptors modulate in vivo cytoxicity against tumor targets., Nat. Med. (2000) 6, 443-446

Непатентный документ 15: Cartron G, Dacheux L, Salles G, Solal-Celigny P, Bardos P, Colombat P, Watier H., Therapeutic activity of humanized anti-CD20 monoclonal antibody and polymorphism in IgG Fc receptor FcgammaRIIIa gene., Blood (2002) 99, 754-758

Непатентный документ 16: Nimmerjahn F, Ravetch JV., Divergent immunoglobulin g subclass activity through selective Fc receptor binding., Science (2005), 310, 1510-1512

Непатентный документ 17: Greenwood J, Clark M, Waldmann H., Structural motifs involved in human IgG antibody effector functions., Eur. J. Immunol. 23, 1098-1104 (1993)

Непатентный документ 18: Morgan A, Jones ND, Nesbitt AM, Chaplin L, Bodmer MW, Emtage JS., The N-terminal end of the CH2 domain of chimeric human IgG1 anti-HLA-DR is necessary for C1q, Fc gamma RI and Fc gamma RIII binding., Immunology (1995) 86, 319-324

Непатентный документ 19: Lazar GA, Dang W, Karki S, Vafa O, Peng JS, Hyun L, Chan C, Chung HS, Eivazi A, Yoder SC, Vielmetter J, Carmichael DF, Hayes RJ, Dahiyat BI., Engineered antibody Fc variants with enhanced effector function., Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. (2006) 103, 4005-4010

Непатентный документ 20: Shinkawa T, Nakamura K, Yamane N, Shoji-Hosaka E, Kanda Y, Sakurada M, Uchida K, Anazawa H, Satoh M, Yamasaki M, Hanai N, Shitara K., The absence of fucose but not the presence of galactose or bisecting N-acetylglucosamine of human IgG1 complex-type oligosaccharides shows the critical role of enhancing antibody-dependent cellular cytotoxicity., J. Biol. Chem. (2003) 278, 3466-3473

Непатентный документ 21: Tsuji T, Matsuzaki J, Kelly MP, Ramakrishna V, Vitale L, He LZ, Keler T, Odunsi K, Old LJ, Ritter G, Gnjatic S., Antibody-Targeted NY-ESO-1 to Mannose Receptor or DEC-205 In Vitro Elicits Dual Human CD8+ and CD4+ T Cell Responses with Broad Antigen Specificity., J. Immunol. (2011) 186, 1218-1827

Сущность изобретения

Проблемы, решаемые с помощью изобретения

Настоящее изобретение было осуществлено с учетом описанных выше обстоятельств. Задачей настоящего изобретения является предоставление фармацевтических композиций, содержащих в качестве активного ингредиента антигенсвязывающую молекулу, которая индуцирует иммунный ответ у индивидуумов, страдающих злокачественной опухолью или инфицированных чужеродными биологическими видами при введении этим индивидуумам, или терапевтических способов, в которых используются эти фармацевтические композиции. Другой задачей является предоставление фармацевтических композиций, содержащих в качестве активного ингредиента антигенсвязывающую молекулу, которая индуцирует упомянутый выше иммунный ответ и также обладает цитотоксичностью (цитотоксическая активность) или антипролиферативным действием (активность ингибирования пролиферации клеток) против злокачественных клеток или инфицирующих чужеродных биологических видов, или терапевтических способов, в которых используются фармацевтические композиции.

Способы решения проблем

Авторы настоящего изобретения открыли, что в живых организмах, в которые вводили антигенсвязывающую молекулу, содержащую антигенсвязывающий домен, активность связывания которого с антигеном изменяется в зависимости от условий концентрации ионов, и содержащую FcRn-связывающий домен, обладающий активностью связывания FcRn в диапазоне нейтральных значений pH, индуцируется иммунный ответ на антиген. Более того, авторы настоящего изобретения открыли, что в живых организмах, которым вводили антигенсвязывающую молекулу, содержащую антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от условий концентрации ионов, и FcRn-связывающий домен, обладающий активностью связывания FcRn в диапазоне нейтральных значений pH, индуцируется иммунный ответ на антиген, и антигенсвязывающая молекула также может обладать цитотоксичностью или антипролиферативным эффектом против злокачественных клеток, чужеродных биологических видов и т.п., которые экспрессируют антиген, с которым связывается антигенсвязывающая молекула. Исходя из этих открытий авторы настоящего изобретения установили, что антигенсвязывающие молекулы по настоящему изобретению пригодны в качестве фармацевтических композиций для индукции иммунного ответа у индивидуума, инфицированного чужеродными биологическими видами или страдающего злокачественной опухолью при введении индивидууму. Авторы настоящего изобретения также установили, что антигенсвязывающие молекулы по настоящему изобретению пригодны в качестве фармацевтических композиций, которые при введении индивидууму, инфицированному чужеродными биологическими видами или страдающему злокачественной опухолью, индуцируют иммунный ответ у индивидуума и также обладают цитотоксичностью или антипролиферативным эффектом против злокачественных клеток и чужеродных биологических видов. Также были разработаны способы получения этих фармацевтических композиций.

Более конкретно, настоящее изобретение относится к [1]-[47] ниже:

[1] фармацевтическая композиция, которая индуцирует иммунный ответ на антиген, которая содержит в качестве активного ингредиента антигенсвязывающую молекулу, где антигенсвязывающая молекула содержит антигенсвязывающий домен, активность связывания которого с антигеном изменяется в зависимости от условий концентрации ионов, и содержит FcRn-связывающий домен, обладающий активностью связывания с FcRn в диапазоне нейтральных значений pH;

[2] фармацевтическая композиция согласно [1], где концентрация ионов представляет собой концентрацию ионов кальция;

[3] фармацевтическая композиция согласно [2], где антигенсвязывающий домен представляет собой антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого является более высокой в условиях высокой концентрации ионов кальция, чем в условиях низкой концентрации ионов кальция;

[4] фармацевтическая композиция согласно [1], где условия концентрации ионов представляют собой условия pH;

[5] фармацевтическая композиция согласно [4], где антигенсвязывающий домен представляет собой антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого является более высокой в диапазоне нейтральных значений pH, чем в диапазоне кислых значений pH;

[6] фармацевтическая композиция согласно любому из [1]-[5], где антигенсвязывающая молекула обладает нейтрализующей активностью в отношении антигена;

[7] фармацевтическая композиция согласно любому из [1]-[6], где антигенсвязывающая молекула обладает цитотоксической активностью в отношении клетки, экспрессирующей антиген;

[8] фармацевтическая композиция согласно любому из [1]-[7], где FcRn-связывающий домен содержит Fc-область антитела;

[9] фармацевтическая композиция согласно [8], где Fc-область представляет собой Fc-область, в которой по меньшей мере одна или несколько аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот в положениях 257, 308, 428 и 434 в соответствии с нумерацией EU в Fc-области, отличаются от аминокислот в соответствующих положениях во встречающейся в природе Fc-области;

[10] фармацевтическая композиция согласно [8] или [9], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или несколько аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Ala в положении аминокислоты 257;

Pro в положении аминокислоты 308;

Leu в положении аминокислоты 428; и

Tyr в положении аминокислоты 434,

в соответствии с нумерацией EU в Fc-области;

[11] фармацевтическая композиция согласно любому из [8]-[10], где активность Fc-области в отношении связывания Fcγ-рецептора является более высокой, чем у встречающейся в природе Fc-области IgG человека, в которой цепь сахаров, присоединенная в положении 297 в соответствии с нумерацией EU, представляет собой содержащую фукозу цепь сахаров;

[12] фармацевтическая композиция согласно [11], где Fcγ-рецептор представляет собой FcγRIa, FcγRIIa(R), FcγRIIa(H), FcγRIIb, FcγRIIIa(V) и FcγRIIIa(F);

[13] фармацевтическая композиция согласно [11] или [12], где Fc-область представляет собой Fc-область, в которой по меньшей мере одна или несколько аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот в положениях 221, 222, 223, 224, 225, 227, 228, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 246, 247, 249, 250, 251, 254, 255, 256, 258, 260, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 311, 313, 315, 317, 318, 320, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 339, 376, 377, 378, 379, 380, 382, 385, 392, 396, 421, 427, 428, 429, 434, 436 и 440 в соответствии с нумерацией EU в Fc-области, отличаются от аминокислот в соответствующих положениях во встречающейся в природе Fc-области;

[14] фармацевтическая композиция согласно любому из [11]-[13], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или несколько аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

либо Lys, либо Tyr в положении аминокислоты 221;

любой из Phe, Trp, Glu и Tyr в положении аминокислоты 222;

любой из Phe, Trp, Glu и Lys в положении аминокислоты 223;

любой из Phe, Trp, Glu и Tyr в положении аминокислоты 224;

любой из Glu, Lys и Trp в положении аминокислоты 225;

любой из Glu, Gly, Lys и Tyr в положении аминокислоты 227;

любой из Glu, Gly, Lys и Tyr в положении аминокислоты 228;

любой из Ala, Glu, Gly и Tyr в положении аминокислоты 230;

любой из Glu, Gly, Lys, Pro и Tyr в положении аминокислоты 231;

любой из Glu, Gly, Lys и Tyr в положении аминокислоты 232;

любой из Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 233;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 234;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 235;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 236;

любой из Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 237;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 238;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 239;

любой из Ala, Ile, Met и Thr в положении аминокислоты 240;

любой из Asp, Glu, Leu, Arg, Trp и Tyr в положении аминокислоты 241;

любой из Leu, Glu, Leu, Gln, Arg, Trp и Tyr в положении аминокислоты 243;

His в положении аминокислоты 244;

Ala в положении аминокислоты 245;

любой из Asp, Glu, His и Tyr в положении аминокислоты 246;

любой из Ala, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Thr, Val и Tyr в положении аминокислоты 247;

любой из Glu, His, Gln и Tyr в положении аминокислоты 249;

либо Glu, либо Gln в положении аминокислоты 250;

Phe в положении аминокислоты 251;

любой из Phe, Met и Tyr в положении аминокислоты 254;

любой из Glu, Leu и Tyr в положении аминокислоты 255;

любой из Ala, Met и Pro в положении аминокислоты 256;

любой из Asp, Glu, His, Ser и Tyr в положении аминокислоты 258;

любой из Asp, Glu, His и Tyr в положении аминокислоты 260;

любой из Ala, Glu, Phe, Ile и Thr в положении аминокислоты 262;

любой из Ala, Ile, Met и Thr в положении аминокислоты 263;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp и Tyr в положении аминокислоты 264;

любой из Ala, Leu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 265;

любой из Ala, Ile, Met и Thr в положении аминокислоты 266;

любой из Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 267;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Thr, Val и Trp в положении аминокислоты 268;

любой из Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 269;

любой из Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp и Tyr в положении аминокислоты 270;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 271;

любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 272;

либо Phe, либо Ile в положении аминокислоты 273;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 274;

либо Leu, либо Trp в положении аминокислоты 275;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 276;

любой из Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val и Trp в положении аминокислоты 278;

Ala в положении аминокислоты 279;

любой из Ala, Gly, His, Lys, Leu, Pro, Gln, Trp и Tyr в положении аминокислоты 280;

любой из Asp, Lys, Pro и Tyr в положении аминокислоты 281;

любой из Glu, Gly, Lys, Pro и Tyr в положении аминокислоты 282;

любой из Ala, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg и Tyr в положении аминокислоты 283;

любой из Asp, Glu, Leu, Asn, Thr и Tyr в положении аминокислоты 284;

любой из Asp, Glu, Lys, Gln, Trp и Tyr в положении аминокислоты 285;

любой из Glu, Gly, Pro и Tyr в положении аминокислоты 286;

любой из Asn, Asp, Glu и Tyr в положении аминокислоты 288;

любой из Asp, Gly, His, Leu, Asn, Ser, Thr, Trp и Tyr в положении аминокислоты 290;

любой из Asp, Glu, Gly, His, Ile, Gln и Thr в положении аминокислоты 291;

любой из Ala, Asp, Glu, Pro, Thr и Tyr в положении аминокислоты 292;

любой из Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 293;

любой из Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 294;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 295;

любой из Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr и Val в положении аминокислоты 296;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 297;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Met, Asn, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 298;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 299;

любой из Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val и Trp в положении аминокислоты 300;

любой из Asp, Glu, His и Tyr в положении аминокислоты 301;

Ile в положении аминокислоты 302;

любой из Asp, Gly и Tyr в положении аминокислоты 303;

любой из Asp, His, Leu, Asn и Thr в положении аминокислоты 304;

любой из Glu, Ile, Thr и Tyr в положении аминокислоты 305;

любой из Ala, Asp, Asn, Thr, Val и Tyr в положении аминокислоты 311;

Phe в положении аминокислоты 313;

Leu в положении аминокислоты 315;

либо Glu, либо Gln в положении аминокислоты 317;

любой из His, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val и Tyr в положении аминокислоты 318;

любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Asn, Pro, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 320;

любой из Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Pro, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 322;

Ile в положении аминокислоты 323;

любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 324;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 325;

любой из Ala, Asp, Glu, Gly, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 326;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 327;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 328;

любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 329;

любой из Cys, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 330;

любой из Asp, Phe, His, Ile, Leu, Met, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 331;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 332;

любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr, Val и Tyr в положении аминокислоты 333;

любой из Ala, Glu, Phe, Ile, Leu, Pro и Thr в положении аминокислоты 334;

любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Val, Trp и Tyr в положении аминокислоты 335;

любой из Glu, Lys и Tyr в положении аминокислоты 336;

любой из Glu, His и Asn в положении аминокислоты 337;

любой из Asp, Phe, Gly, Ile, Lys, Met, Asn, Gln, Arg, Ser и Thr в положении аминокислоты 339;

либо Ala, либо Val в положении аминокислоты 376;

либо Gly, либо Lys в положении аминокислоты 377;

Asp в положении аминокислоты 378;

Asn в положении аминокислоты 379;

любой из Ala, Asn и Ser в положении аминокислоты 380;

либо Ala, либо Ile в положении аминокислоты 382;

Glu в положении аминокислоты 385;

Thr в положении аминокислоты 392;

Leu в положении аминокислоты 396;

Lys в положении аминокислоты 421;

Asn в положении аминокислоты 427;

либо Phe, либо Leu в положении аминокислоты 428;

Met в положении аминокислоты 429;

Trp в положении аминокислоты 434;

Ile в положении аминокислоты 436; и

любой из Gly, His, Ile, Leu и Tyr в положении аминокислоты 440;

в соответствии с нумерацией EU в Fc-области;

[15] фармацевтическая композиция согласно любому из [11]-[14], где встречающаяся в природе Fc-область представляет собой Fc-область любого из IgG1 человека, IgG2 человека, IgG3 человека и IgG4 человека, в которой цепь сахаров, присоединенная в положении 297 в соответствии с нумерацией EU, представляет собой содержащую фукозу цепь сахаров;

[16] фармацевтическая композиция согласно любому из [11]-[15], где Fc-область модифицирована так, чтобы процент Fc-областей, с которыми связана цепь сахаров с дефицитом фукозы или к которым добавлен бисекторный N-ацетилглюкозамин в положении 297 в соответствии с нумерацией EU в Fc-области, стал более высоким;

[17] способ индукции иммунного ответа в живом организме, который включает стадию введения антигенсвязывающей молекулы согласно любому из [1]-[16] в живой организм;

[18] способ получения антигенсвязывающей молекулы, которая индуцирует иммунный ответ, который включает сообщение активности связывания FcRn в диапазоне нейтральных значений pH с FcRn-связывающим доменом, который содержится в антигенсвязывающей молекуле, содержащей антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от условий концентрации ионов;

[19] способ согласно [18], где концентрация ионов представляет собой концентрацию ионов кальция;

[20] способ согласно [19], где антигенсвязывающий домен представляет собой антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого является более высокой в условиях высокой концентрации ионов кальция, чем в условиях низкой концентрации ионов кальция;

[21] способ согласно [18], где условия концентрации ионов представляют собой условия pH;

[22] способ согласно [21], где антигенсвязывающий домен представляет собой антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого является более высокой в диапазоне нейтральных значений pH, чем в диапазоне кислых значений pH;

[23] способ согласно любому из [18]-[22], где антигенсвязывающая молекула обладает нейтрализующей активностью в отношении антигена;

[24] способ согласно любому из [18]-[23], где антигенсвязывающая молекула обладает цитотоксической активностью в отношении клетки, экспрессирующей антиген;

[25] способ согласно любому из [18]-[24], где FcRn-связывающий домен содержит Fc-область антитела;

[26] способ согласно [25], включающий стадию замены по меньшей мере одной или нескольких аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот в положениях 239, 252, 257, 286, 307, 308, 428 и 434 в соответствии с нумерацией EU в Fc-области;

[27] способ согласно [25] или [26], включающий стадию проведения по меньшей мере одной или нескольких аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из:

аминокислотная замена на Ala в положении 257;

аминокислотная замена на Pro в положении 308;

аминокислотная замена на Leu в положении 428; и

аминокислотная замена на Tyr в положении 434,

в соответствии с нумерацией EU в Fc-области;

[28] способ согласно любому из [25]-[27], включающий стадию повышения активности Fc-области в отношении связывания Fcγ-рецептора по сравнению со встречающейся в природе Fc-областью IgG человека, в которой цепь сахаров, присоединенная в положении 297 в соответствии с нумерацией EU, представляет собой содержащую фукозу цепь сахаров;

[29] способ согласно [28], где Fcγ-рецептор представляет собой FcγRIa, FcγRIIa(R), FcγRIIa(H), FcγRIIb, FcγRIIIa(V) и FcγRIIIa(F);

[30] способ согласно [28] или [29], включающий стадию замены по меньшей мере одной или нескольких аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот в положениях 221, 222, 223, 224, 225, 227, 228, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 246, 247, 249, 250, 251, 254, 255, 256, 258, 260, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 311, 313, 315, 317, 318, 320, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 339, 376, 377, 378, 379, 380, 382, 385, 392, 396, 421, 427, 428, 429, 434, 436 и 440 в соответствии с нумерацией EU в Fc-области;

[31] способ согласно любому из [28]-[30], включающий стадию проведения по меньшей мере одной или нескольких замен аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

аминокислотная замена либо на Lys, либо на Tyr в положении 221;

аминокислотная замена на любой из Phe, Trp, Glu и Tyr в положении 222;

аминокислотная замена на любой из Phe, Trp, Glu и Lys в положении 223;

аминокислотная замена на любой из Phe, Trp, Glu и Tyr в положении 224;

аминокислотная замена на любой из Glu, Lys и Trp в положении 225;

аминокислотная замена на любой из Glu, Gly, Lys и Tyr в положении 227;

аминокислотная замена на любой из Glu, Gly, Lys и Tyr в положении 228;

аминокислотная замена на любой из Ala, Glu, Gly и Tyr в положении 230;

аминокислотная замена на любой из Glu, Gly, Lys, Pro и Tyr в положении 231;

аминокислотная замена на любой из Glu, Gly, Lys и Tyr в положении 232;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 233;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 234;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 235;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 236;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 237;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 238;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 239;

аминокислотная замена на любой из Ala, Ile, Met и Thr в положении 240;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Leu, Arg, Trp и Tyr в положении 241;

аминокислотная замена на любой из Leu, Glu, Leu, Gln, Arg, Trp и Tyr в положении 243;

аминокислотная замена на His в положении 244;

аминокислотная замена на Ala в положении 245;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, His и Tyr в положении 246;

аминокислотная замена на любой из Ala, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Thr, Val и Tyr в положении 247;

аминокислотная замена на любой из Glu, His, Gln и Tyr в положении 249;

аминокислотная замена либо на Glu, либо на Gln в положении 250;

аминокислотная замена на Phe в положении 251;

аминокислотная замена на любой из Phe, Met и Tyr в положении 254;

аминокислотная замена на любой из Glu, Leu и Tyr в положении 255;

аминокислотная замена на любой из Ala, Met и Pro в положении 256;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, His, Ser и Tyr в положении 258;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, His и Tyr в положении 260;

аминокислотная замена на любой из Ala, Glu, Phe, Ile и Thr в положении 262;

аминокислотная замена на любой из Ala, Ile, Met и Thr в положении 263;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp и Tyr в положении 264;

аминокислотная замена на любой из Ala, Leu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Val, Trp и Tyr в положении 265;

аминокислотная замена на любой из Ala, Ile, Met и Thr в положении 266;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 267;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Thr, Val и Trp в положении 268;

аминокислотная замена на любой из Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 269;

аминокислотная замена на любой из Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp и Tyr в положении 270;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 271;

аминокислотная замена на любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 272;

аминокислотная замена либо на Phe, либо на Ile в положении 273;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 274;

аминокислотная замена либо на Leu, либо на Trp в положении 275;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 276;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val и Trp в положении 278;

аминокислотная замена на Ala в положении 279;

аминокислотная замена на любой из Ala, Gly, His, Lys, Leu, Pro, Gln, Trp и Tyr в положении 280;

аминокислотная замена на любой из Asp, Lys, Pro и Tyr в положении 281;

аминокислотная замена на любой из Glu, Gly, Lys, Pro и Tyr в положении 282;

аминокислотная замена на любой из Ala, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg и Tyr в положении 283;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Leu, Asn, Thr и Tyr в положении 284;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Lys, Gln, Trp и Tyr в положении 285;

аминокислотная замена на любой из Glu, Gly, Pro и Tyr в положении 286;

аминокислотная замена на любой из Asn, Asp, Glu и Tyr в положении 288;

аминокислотная замена на любой из Asp, Gly, His, Leu, Asn, Ser, Thr, Trp и Tyr в положении 290;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Gly, His, Ile, Gln и Thr в положении 291;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Pro, Thr и Tyr в положении 292;

аминокислотная замена на любой из Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 293;

аминокислотная замена на любой из Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 294;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 295;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr и Val в положении 296;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 297;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Met, Asn, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 298;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp и Tyr в положении 299;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val и Trp в положении 300;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, His и Tyr в положении 301;

аминокислотная замена на Ile в положении 302;

аминокислотная замена на любой из Asp, Gly и Tyr в положении 303;

аминокислотная замена на любой из Asp, His, Leu, Asn и Thr в положении 304;

аминокислотная замена на любой из Glu, Ile, Thr и Tyr в положении 305;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Asn, Thr, Val и Tyr в положении 311;

аминокислотная замена на Phe в положении 313;

аминокислотная замена на Leu в положении 315;

аминокислотная замена либо на Glu, либо на Gln в положении 317;

аминокислотная замена на любой из His, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val и Tyr в положении 318;

аминокислотная замена на любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Asn, Pro, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 320;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Pro, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 322;

аминокислотная замена на Ile в положении 323;

аминокислотная замена на любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 324;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 325;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Gly, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 326;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 327;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 328;

аминокислотная замена на любой из Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 329;

аминокислотная замена на любой из Cys, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 330;

аминокислотная замена на любой из Asp, Phe, His, Ile, Leu, Met, Gln, Arg, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 331;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp и Tyr в положении 332;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr, Val и Tyr в положении 333;

аминокислотная замена на любой из Ala, Glu, Phe, Ile, Leu, Pro и Thr в положении 334;

аминокислотная замена на любой из Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Val, Trp и Tyr в положении 335;

аминокислотная замена на любой из Glu, Lys и Tyr в положении 336;

аминокислотная замена на любой из Glu, His и Asn в положении 337;

аминокислотная замена на любой из Asp, Phe, Gly, Ile, Lys, Met, Asn, Gln, Arg, Ser и Thr в положении 339;

аминокислотная замена либо на Ala, либо на Val в положении 376;

аминокислотная замена либо на Gly, либо на Lys в положении 377;

аминокислотная замена на Asp в положении 378;

аминокислотная замена на Asn в положении 379;

аминокислотная замена на любой из Ala, Asn и Ser в положении 380;

аминокислотная замена либо на Ala, либо на Ile в положении 382;

аминокислотная замена на Glu в положении 385;

аминокислотная замена на Thr в положении 392;

аминокислотная замена на Leu в положении 396;

аминокислотная замена на Lys в положении 421;

аминокислотная замена на Asn в положении 427;

аминокислотная замена либо на Phe, либо на Leu в положении 428;

аминокислотная замена на Met в положении 429;

аминокислотная замена на Trp в положении 434;

аминокислотная замена на Ile в положении 436; и

аминокислотная замена на любой из Gly, His, Ile, Leu и Tyr в положении 440,

в соответствии с нумерацией EU в Fc-области;

[32] способ согласно любому из [28]-[31], где встречающаяся в природе Fc-область представляет собой Fc-область любого из IgG1 человека, IgG2 человека, IgG3 человека и IgG4 человека, в которой цепь сахаров, присоединенная в положении 297 в соответствии с нумерацией EU, представляет собой содержащую фукозу цепь сахаров;

[33] способ согласно любому из [28]-[32], включающий стадию модификации Fc-области так, чтобы процент Fc-областей, с которыми связана цепь сахаров с дефицитом фукозы или к которым добавлен бисекторный N-ацетилглюкозамин в положении 297 в соответствии с нумерацией EU в Fc-области, стал более высоким;

[34] способ получения фармацевтической композиции, которая индуцирует иммунный ответ, который включает стадии:

(a) определение антигенсвязывающей активности антигенсвязывающего домена в условиях высокой концентрации ионов кальция;

(b) определение антигенсвязывающей активности антигенсвязывающего домена в условиях низкой концентрации ионов кальция;

(c) выбор антигенсвязывающего домена, антигенсвязывающая активность которого, определенная согласно (a), является более высокой, чем антигенсвязывающая активность, определенная согласно (b);

(d) связывание полинуклеотида, кодирующего антигенсвязывающий домен, выбранный согласно (c), с полинуклеотидом, кодирующим FcRn-связывающий домен, обладающий активностью связывания FcRn в диапазоне нейтральных значений pH;

(e) культивирование клетки, в которую введен вектор, с которым функционально связан полинуклеотид, полученный согласно (d); и

(f) сбор антигенсвязывающей молекулы из культуральной жидкости клеток, культивированных согласно (e);

[35] способ получения фармацевтической композиции, которая индуцирует иммунный ответ, который включает стадии:

(a) определение антигенсвязывающей активности антитела в условиях высокой концентрации ионов кальция;

(b) определение антигенсвязывающей активности антитела в условиях низкой концентрации ионов кальция;

(c) выбор антитела, антигенсвязывающая активность которого, определенная согласно (a), является более высокой, чем антигенсвязывающая активность, определенная согласно (b);

(d) связывание полинуклеотида, кодирующего антигенсвязывающий домен антитела, выбранного согласно (c), с полинуклеотидом, кодирующим FcRn-связывающий домен, обладающий активностью связывания FcRn в диапазоне нейтральных значений pH;

(e) культивирование клетки, в которую введен вектор, с которым функционально связан полинуклеотид, полученный согласно (d); и

(f) сбор антигенсвязывающей молекулы из культуральной жидкости клеток, культивированных согласно (e);

[36] способ получения антигенсвязывающей молекулы, который включает стадии:

(a) определение антигенсвязывающей активности антигенсвязывающего домена в диапазоне нейтральных значений pH;

(b) определение антигенсвязывающей активности антигенсвязывающего домена в диапазоне кислых значений pH;

(c) выбор антигенсвязывающего домена, антигенсвязывающая активность которого, определенная согласно (a), является более высокой, чем антигенсвязывающая активность, определенная согласно (b);

(d) связывание полинуклеотида, кодирующего антигенсвязывающий домен, выбранный согласно (c), с полинуклеотидом, кодирующим FcRn-связывающий домен, обладающий активностью связывания FcRn в диапазоне нейтральных значений pH;

(e) культивирование клетки, в которую введен вектор, с которым функционально связан полинуклеотид, полученный согласно (d); и

(f) сбор антигенсвязывающей молекулы из культуральной жидкости клеток, культивированных согласно (e);

[37] способ получения антигенсвязывающей молекулы, который включает стадии:

(a) определение антигенсвязывающей активности антитела в диапазоне нейтральных значений pH;

(b) определение антигенсвязывающей активности антитела в диапазоне кислых значений pH;

(c) выбор антитела, антигенсвязывающая активность которого, определенная согласно (a), является более высокой, чем антигенсвязывающая активность, определенная согласно (b);

(d) связывание полинуклеотида, кодирующего антигенсвязывающий домен антитела, выбранного согласно (c), с полинуклеотидом, кодирующим FcRn-связывающий домен, обладающий активностью связывания FcRn в диапазоне нейтральных значений pH;

(e) культивирование клетки, в которую введен вектор, с которым функционально связан полинуклеотид, полученный согласно (d); и

(f) сбор антигенсвязывающей молекулы из культуральной жидкости клеток, культивированных согласно (e);

[38] способ согласно любому из [34]-[37], где антигенсвязывающая молекула обладает нейтрализующей активностью против антигена;

[39] способ согласно любому из [34]-[38], где антигенсвязывающая молекула обладает цитотоксической активностью в отношении клетки, экспрессирующей антиген;

[40] способ согласно любому из [34]-[39], где FcRn-связывающий домен содержит Fc-область антитела;

[41] способ согласно [40], где Fc-область представляет собой Fc-область, в которой по меньшей мере одна или несколько аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот в положениях 257, 308, 428 и 434 в соответствии с нумерацией EU в Fc-области, отличаются от аминокислот в соответствующих положениях во встречающейся в природе Fc-области;

[42] способ согласно [40] или [41], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или несколько аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Ala в положении аминокислоты 257;

Pro в положении аминокислоты 308;

Leu в положении аминокислоты 428; и

Tyr в положении аминокислоты 434,

в соответствии с нумерацией EU в Fc-области;

[43] способ согласно любому из [40]-[42], где активность Fc-области в отношении связывания Fcγ-рецептора является более высокой, чем у встречающейся в природе Fc-области IgG человека, в которой цепь сахаров, присоединенная в положении 297 в соответствии с нумерацией EU, представляет собой содержащую фукозу цепь сахаров;

[44] способ согласно [43], где Fcγ-рецептор представляет собой FcγRIa, FcγRIIa(R), FcγRIIa(H), FcγRIIb, FcγRIIIa(V) и FcγRIIIa(F);

[45] способ согласно [43] или [44], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или несколько аминокислот, выбранных из группы, состоящей из: