Область техники

Настоящее изобретение относится к применению антигенсвязывающих молекул для элиминации антигенов из плазмы; способам элиминации антигенов из плазмы, которые включают введение антигенсвязывающих молекул; фармацевтическим композициям, содержащим антигенсвязывающие молекулы, которые способны элиминировать антигены из плазмы; способам скрининга антигенсвязывающих молекул для элиминации антигенов из плазмы и способам получения антигенсвязывающих молекул для элиминации антигенов из плазмы.

Уровень техники

Антитела привлекают внимание в качестве лекарственных средств, так как они обладают высокой стабильностью в плазме и имеют малое количество побочных эффектов. В настоящее время ряд подобных фармацевтических средств IgG-типа являются коммерчески доступными и на сегодняшний день разрабатываются многие лекарственные средства на основе антител (непатентные документы 1 и 2). Между тем, описаны различные способы, применимые для второго поколения лекарственных средств на основе антител, включающие способы, которые усиливают эффекторную функцию, антигенсвязывающую способность, фармакокинетику и стабильность, и способы, которые снижают риск развития иммуногенности (непатентный документ 3). Как правило, требуемая доза лекарственного средства на основе антитела является очень высокой. Это, в свою очередь, привело к возникновению проблем, таких как высокая стоимость производства, а также к трудностям при получении подкожных составов. В теории, доза фармацевтического средства на основе антитела может быть снижена путем улучшения фармакокинетики антитела или повышения аффинности между антителами и антигенами.

В литературе описаны способы улучшения фармакокинетики антител с использованием искусственных замен аминокислот в константных областях (непатентные документы 4 и 5). Аналогично описано созревание аффинности как способ улучшения антигенсвязывающей способности или активности нейтрализации антигена (непатентный документ 6). Этот способ дает возможность увеличения антигенсвязывающей способности посредством внесения аминокислотной мутации в область CDR вариабельной области или сходные с ней. Повышение антигенсвязывающей способности обеспечивает улучшение биологической активности in vitro или обеспечивает возможность снижения дозы и дополнительно обеспечивает повышенную эффективность in vivo (в организме) (непатентный документ 7).

Между тем, способность одной молекулы антитела нейтрализовать антиген зависит от ее аффинности. Путем увеличения аффинности антиген можно нейтрализовать меньшим количеством антитела. Для увеличения аффинности антитела можно использовать различные способы (непатентный документ 6). Кроме того, если бы аффинность можно было сделать бесконечной посредством ковалентного связывания антитела с антигеном, одна молекула антитела могла бы нейтрализовать одну молекулу антигена (двухвалентное антитело могло бы нейтрализовать две молекулы антигена). Однако общепринятые способы имеют ограничение, состоящее в том, что одна молекула антитела связывается с одной молекулой антигена (двумя антигенами, когда она является двухвалентной). Однако недавно было описано, что одна антигенсвязывающая молекула может связываться с несколькими молекулами антигена при использовании антигенсвязывающей молекулы, которая связывается с антигеном pH-зависимым образом (патентный документ 1 и непатентный документ 8). Молекула с pH-зависимым связыванием антигена связывается прочно с антигеном в нейтральных условиях в плазме и высвобождает антиген в кислых условиях в эндосоме. Более того, после высвобождения антигена антигенсвязывающая молекула высвобождается в плазму через FcRn и вновь связывается с антигеном; таким образом, одна молекула с pH-зависимым связыванием антигена может неоднократно связываться с множеством антигенов.

Более того, поскольку молекулы с pH-зависимым связыванием антигена, которые были модифицированы так, чтобы усилить связывание FcRn в нейтральных условиях (pH 7,4), имеют преимущество, состоящее в том, что они способны неоднократно связываться с антигенами и обеспечивать элиминацию антигенов из плазмы, сообщалось, что введение таких антигенсвязывающих молекул обеспечивает элиминацию антигена из плазмы (патентный документ 2). Традиционные молекулы с pH-зависимым связыванием антигена, содержащие Fc-область IgG-антитела, практически не демонстрируют связывания FcRn в нейтральных условиях. Таким образом, захват комплексов, образовавшихся между антигенсвязывающей молекулой и антигеном, в клетки может осуществляться в основном через неспецифический захват. В соответствии с этим сообщением, молекулы с pH-зависимым связыванием антигена, которые модифицированы так, чтобы усиливалось связывание FcRn в нейтральных условиях (pH 7,4), могут ускорять элиминацию антигена в большей степени, чем традиционные молекулы с pH-зависимым связыванием антигена, содержащие Fc-область IgG-антитела (патентный документ 2).

Поскольку антигены имеют очень короткое время удержания в плазме по сравнению с антителами, имеющими механизм опосредуемого FcRn рециклирования, связывание антигена в плазме с антителом, имеющим механизм рециклирования (где связывание не является pH-зависимым) увеличивает нормальное время удержания в плазме и повышает концентрацию антигена в плазме. Например, когда антиген в плазме имеет несколько типов физиологических функций, даже если один тип физиологической активности блокируется при связывании антитела, концентрация антигена в плазме может обострить симптомы, вызываемые другими физиологическими функциями, вследствие связывания с антителом. С такой точки зрения, элиминация антигенов из плазмы иногда является полезной, и были описаны способы, сходные со способами, описанными выше, для внесения модификаций в Fc-область для усиления связывания FcRn с целью ускорения элиминации антигена, однако до настоящего времени не были описаны другие способы ускорения элиминации антигена.

Документы уровня техники настоящего изобретения представлены ниже.

[Документы уровня техники]

[Патентные документы]

[Патентный документ 1] Международная публикация WO2009/125825.

[Патентный документ 2] Международная публикация WO2011/122011.

[Непатентные документы]

[Непатентный документ 1] Monoclonal antibody successes in the clinic, Janice M Reichert, Clark J Rosensweig, Laura B Faden & Matthew C Dewitz, Nat. Biotechnol. (2005) 23, 1073-1078.

[Непатентный документ 2] Pavlou AK, Belsey MJ., The therapeutic antibodies market to 2008, Eur. J. Pharm. Biopharm. (2005) 59 (3), 389-396.

[Непатентный документ 3] Kim SJ, Park Y, Hong HJ., Antibody engineering for the development of therapeutic antibodies, Mol. Cells. (2005) 20 (1), 17-29.

[Непатентный документ 4] Hinton PR, Xiong JM, Johlfs MG, Tang MT, Keller S, Tsurushita N, J. Immunol. (2006) 176 (1), 346-356.

[Непатентный документ 5] Ghetie V, Popov S, Borvak J, Radu C, Matesoi D, Medesan C, Ober RJ, Ward ES., Nat. Biotechnol. (1997) 15 (7), 637-640.

[Непатентный документ 6] Rajpal A, Beyaz N, Haber L, Cappuccilli G, Yee H, Bhatt RR, Takeuchi T, Lerner RA, Crea R., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. (2005) 102 (24), 8466-8471.

[Непатентный документ 7] Wu H, Pfarr DS, Johnson S, Brewah YA, Woods RM, Patel NK, White WI, Young JF, Kiener PA., J. Mol. Biol. (2007) 368, 652-665.

[Непатентный документ 8] Igawa T, et al., Nat. Biotechnol. (2010) 28, 1203-1207.

Сущность изобретения

[Проблемы, решаемые с помощью изобретения]

Настоящее изобретение было осуществлено ввиду указанных выше обстоятельств. Задачей настоящего изобретения является обеспечение применений антигенсвязывающих молекул для элиминации антигенов из плазмы; способов элиминации антигенов из плазмы, которые включают введение антигенсвязывающих молекул; фармацевтических композиций, содержащих антигенсвязывающие молекулы, которые способны элиминировать антигены из плазмы; способов скрининга антигенсвязывающих молекул для элиминации антигенов из плазмы; и способов получения антигенсвязывающих молекул для элиминации антигенов из плазмы.

[Способы решения проблем]

Авторы настоящего изобретения провели тщательные исследования для достижения описанных выше задач. В результате авторы настоящего изобретения получили антигенсвязывающие молекулы, содержащие (i) Fc-область и (ii) два или более антигенсвязывающих доменов, где по меньшей мере один из доменов представляет собой антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от концентрации ионов, которые представляют собой антигенсвязывающие молекулы, которые могут образовывать иммунный комплекс, содержащий (a) две или более антигенсвязывающих молекул и (b) две или более молекул антигена, содержащих два или более антигенных элементов связывания. Более того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что антигенсвязывающие молекулы можно использовать для элиминации антигенов из плазмы. Более того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что антигенсвязывающие молекулы являются пригодными в качестве фармацевтических композиций, и они разработали способы элиминации антигенов из плазмы, которые включают введение антигенсвязывающих молекул. Более того, авторы настоящего изобретения разработали способы скрининга антигенсвязывающих молекул, имеющих упомянутые выше свойства, и разработали способы получения этих молекул, тем самым осуществив изобретение.

Более конкретно, настоящее изобретение относится к следующему:

[1] применение антигенсвязывающей молекулы, содержащей

(i) Fc-область и

(ii) два или более антигенсвязывающих доменов,

где по меньшей мере один из доменов представляет собой антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от условий концентрации ионов, и

где антигенсвязывающая молекула может образовывать иммунный комплекс, который содержит

(a) две или более антигенсвязывающих молекул и

(b) два или более антигенов, где антигены содержат два или более антигенных элементов связывания,

для элиминации антигенов из плазмы;

[2] применение согласно [1], где условия концентрации ионов представляют собой условия концентрации ионов кальция;

[3] применение согласно [2], где антигенсвязывающий домен обладает антигенсвязывающей активностью в условиях низкой концентрации ионов кальция, которая является более низкой, чем антигенсвязывающая активность в условиях высокой концентрации ионов кальция;

[4] применение согласно любому из [1]-[3], где условия концентрации ионов представляют собой условия pH;

[5] применение согласно [4], где антигенсвязывающий домен обладает антигенсвязывающей активностью в диапазоне кислых значений pH, которая является более низкой, чем антигенсвязывающая активность в условиях диапазона нейтральных значений pH;

[6] применение согласно любому из [1]-[5], где антигены, содержащие два или более антигенных элементов связывания, являются мультимерами;

[7] применение согласно [6], где антиген представляет собой любой из GDF, GDF-1, GDF-3 (Vgr-2), GDF-5 (BMP-14, CDMP-1), GDF-6 (BMP-13, CDMP-2), GDF-7 (BMP-12, CDMP-3), GDF-8 (миостатин), GDF-9, GDF-15 (MIC-1), TNF, TNF-альфа, TNF-альфа-бета, TNF-бета-2, TNFSF10 (лиганд Apo-2 TRAIL, TL2), TNFSF11 (лиганд ODF TRANCE/RANK, лиганд OPG), TNFSF12 (лиганд Apo-3 TWEAK, лиганд DR3), TNFSF13 (APRIL TALL2), TNFSF13B (BAFF BLYS, TALL1, THANK, TNFSF20), TNFSF14 (лиганд LIGHT HVEM, LTg), TNFSF15 (TL1A/VEGI), TNFSF18 (лиганд AITR лиганда GITR, TL6), TNFSF1A (TNF-a коннектин, DIF, TNFSF2), TNFSF1B (TNF-b LTa, TNFSF1), TNFSF3 (LTb TNFC, p33), TNFSF4 (лиганд gp34 OX40, TXGP1), TNFSF5 (лиганд CD154 CD40, gp39, HIGM1, IMD3, TRAP), TNFSF6 (лиганд Apo-1 лиганда Fas, лиганд APT1), TNFSF7 (лиганд CD70 CD27), TNFSF8 (лиганд CD153 CD30), TNFSF9 (лиганд CD137 лиганда 4-1BB), VEGF, IgE, IgA, IgG, IgM, RANKL, TGF-альфа, TGF-бета, панспецифического TGF-бета и IL-8;

[8] применение согласно любому из [1]-[5], где антигены, содержащие два или более антигенных элементов связывания, являются мономерами;

[9] применение согласно любому из [1]-[8], где антигенсвязывающие молекулы представляют собой мультиспецифическую или мультипаратопную антигенсвязывающую молекулу, или смесь антигенсвязывающих молекул;

[10] применение согласно любому из [1]-[9], где Fc-область соответствует любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[11] применение согласно любому из [1]-[9], где Fc-область представляет собой Fc-область с усиленной активностью связывания FcRn в условиях диапазона кислых значений pH по сравнению с Fc-областью, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[12] применение согласно [11], где Fc-область представляет собой Fc-область с заменой по меньшей мере одной или нескольких аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот в положениях 238, 244, 245, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 260, 262, 265, 270, 272, 279, 283, 285, 286, 288, 293, 303, 305, 307, 308, 309, 311, 312, 314, 316, 317, 318, 332, 339, 340, 341, 343, 356, 360, 362, 375, 376, 377, 378, 380, 382, 385, 386, 387, 388, 389, 400, 413, 415, 423, 424, 427, 428, 430, 431, 433, 434, 435, 436, 438, 439, 440, 442 и 447 (нумерация EU) в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[13] применение согласно [12], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или более аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Leu в качестве аминокислоты в положении 238;

Leu в качестве аминокислоты в положении 244;

Arg в качестве аминокислоты в положении 245;

Pro в качестве аминокислоты в положении 249;

Gln или Glu в качестве аминокислоты в положении 250;

Arg, Asp, Glu или Leu в качестве аминокислоты в положении 251;

Phe, Ser, Thr или Tyr в качестве аминокислоты в положении 252;

Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 254;

Arg, Gly, Ile или Leu в качестве аминокислоты в положении 255;

Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu, Pro или Thr в качестве аминокислоты в положении 256;

Ala, Ile, Met, Asn, Ser или Val в качестве аминокислоты в положении 257;

Asp в качестве аминокислоты в положении 258;

Ser в качестве аминокислоты в положении 260;

Leu в качестве аминокислоты в положении 262;

Lys в качестве аминокислоты в положении 270;

Leu или Arg в качестве аминокислоты в положении 272;

Ala, Asp, Gly, His, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 279;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 283;

Asn в качестве аминокислоты в положении 285;

Phe в качестве аминокислоты в положении 286;

Asn или Pro в качестве аминокислоты в положении 288;

Val в качестве аминокислоты в положении 293;

Ala, Glu, Gln или Met в качестве аминокислоты в положении 307;

Ala, Glu, Ile, Lys, Leu, Met, Ser, Val или Trp в качестве аминокислоты в положении 311;

Pro в качестве аминокислоты в положении 309;

Ala, Asp или Pro в качестве аминокислоты в положении 312;

Ala или Leu в качестве аминокислоты в положении 314;

Lys в качестве аминокислоты в положении 316;

Pro в качестве аминокислоты в положении 317;

Asn или Thr в качестве аминокислоты в положении 318;

Phe, His, Lys, Leu, Met, Arg, Ser или Trp в качестве аминокислоты в положении 332;

Asn, Thr или Trp в качестве аминокислоты в положении 339;

Pro в качестве аминокислоты в положении 341;

Glu, His, Lys, Gln, Arg, Thr или Tyr в качестве аминокислоты в положении 343;

Arg в качестве аминокислоты в положении 375;

Gly, Ile, Met, Pro, Thr или Val в качестве аминокислоты в положении 376;

Lys в качестве аминокислоты в положении 377;

Asp, Asn или Val в качестве аминокислоты в положении 378;

Ala, Asn, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 380;

Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 382;

Ala, Arg, Asp, Gly, His, Lys, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 385;

Arg, Asp, Ile, Lys, Met, Pro, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 386;

Ala, Arg, His, Pro, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 387;

Asn, Pro или Ser в качестве аминокислоты в положении 389;

Asn в качестве аминокислоты в положении 423;

Asn в качестве аминокислоты в положении 427;

Leu, Met, Phe, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 428;

Ala, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Tyr в качестве аминокислоты в положении 430;

His или Asn в качестве аминокислоты в положении 431;

Arg, Gln, His, Ile, Lys, Pro или Ser в качестве аминокислоты в положении 433;

Ala, Gly, His, Phe, Ser, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 434;

Arg, Asn, His, Ile, Leu, Lys, Met или Thr в качестве аминокислоты в положении 436;

Lys, Leu, Thr или Trp в качестве аминокислоты в положении 438;

Lys в качестве аминокислоты в положении 440; и

Lys в качестве аминокислоты в положении 442; Ile, Pro или Thr в качестве аминокислоты в положении 308;

как указано в соответствии с нумерацией EU в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[14] применение согласно любому из [1]-[9], где Fc-область представляет собой Fc-область с усиленной активностью связывания FcRn в условиях диапазона нейтральных значений pH по сравнению с Fc-областью, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[15] применение согласно [14], где Fc-область представляет собой Fc-область с заменой по меньшей мере одной или нескольких аминокислот, выбранных из группы, состоящей из положений 237, 248, 250, 252, 254, 255, 256, 257, 258, 265, 286, 289, 297, 298, 303, 305, 307, 308, 309, 311, 312, 314, 315, 317, 332, 334, 360, 376, 380, 382, 384, 385, 386, 387, 389, 424, 428, 433, 434 и 436 (нумерация EU) в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[16] применение согласно [15], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или более аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Met в качестве аминокислоты в положении 237;

Ile в качестве аминокислоты в положении 248;

Ala, Phe, Ile, Met, Gln, Ser, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 250;

Phe, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 252;

Thr в качестве аминокислоты в положении 254;

Glu в качестве аминокислоты в положении 255;

Asp, Asn, Glu или Gln в качестве аминокислоты в положении 256;

Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Asn, Ser, Thr или Val в качестве аминокислоты в положении 257;

His в качестве аминокислоты в положении 258;

Ala в качестве аминокислоты в положении 265;

Ala или Glu в качестве аминокислоты в положении 286;

His в качестве аминокислоты в положении 289;

Ala в качестве аминокислоты в положении 297;

Ala в качестве аминокислоты в положении 303;

Ala в качестве аминокислоты в положении 305;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 307;

Ala, Phe, Ile, Leu, Met, Pro, Gln или Thr в качестве аминокислоты в положении 308;

Ala, Asp, Glu, Pro или Arg в качестве аминокислоты в положении 309;

Ala, His или Ile в качестве аминокислоты в положении 311;

Ala или His в качестве аминокислоты в положении 312;

Lys или Arg в качестве аминокислоты в положении 314;

Ala, Asp или His в качестве аминокислоты в положении 315;

Ala в качестве аминокислоты в положении 317;

Val в качестве аминокислоты в положении 332;

Leu в качестве аминокислоты в положении 334;

His в качестве аминокислоты в положении 360;

Ala в качестве аминокислоты в положении 376;

Ala в качестве аминокислоты в положении 380;

Ala в качестве аминокислоты в положении 382;

Ala в качестве аминокислоты в положении 384;

Asp или His в качестве аминокислоты в положении 385;

Pro в качестве аминокислоты в положении 386;

Glu в качестве аминокислоты в положении 387;

Ala или Ser в качестве аминокислоты в положении 389;

Ala в качестве аминокислоты в положении 424;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 428;

Lys в качестве аминокислоты в положении 433;

Ala, Phe, His, Ser, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 434; и

His, Ile, Leu, Phe, Thr или Val в качестве аминокислоты в положении 436;

как указано в соответствии с нумерацией EU в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[17] применение согласно любому из [1]-[13], где Fc-область включает Fc-область, которая обладает более высокой активностью связывания Fcγ-рецептора, чем Fc-область нативного IgG человека;

[18] применение согласно [17], где Fc-область содержит в ее аминокислотной последовательности по меньшей мере одну или более аминокислот, которые отличаются от аминокислот нативной Fc-области IgG человека, выбранных из группы, состоящей из положений 221, 222, 223, 224, 225, 227, 228, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 246, 247, 249, 250, 251, 254, 255, 256, 258, 260, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 311, 313, 315, 317, 318, 320, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 339, 376, 377, 378, 379, 380, 382, 385, 392, 396, 421, 427, 428, 429, 434, 436 и 440 (нумерация EU);

[19] применение согласно [18], где Fc-область содержит в ее аминокислотной последовательности по меньшей мере одну или более аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Lys или Tyr в качестве аминокислоты в положении 221;

Phe, Trp, Glu или Tyr в качестве аминокислоты в положении 222;

Phe, Trp, Glu или Lys в качестве аминокислоты в положении 223;

Phe, Trp, Glu или Tyr в качестве аминокислоты в положении 224;

Glu, Lys или Trp в качестве аминокислоты в положении 225;

Glu, Gly, Lys или Tyr в качестве аминокислоты в положении 227;

Glu, Gly, Lys или Tyr в качестве аминокислоты в положении 228;

Ala, Glu, Gly или Tyr в качестве аминокислоты в положении 230;

Glu, Gly, Lys, Pro или Tyr в качестве аминокислоты в положении 231;

Glu, Gly, Lys или Tyr в качестве аминокислоты в положении 232;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 233;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 234;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 235;

Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 236;

Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 237;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 238;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 239;

Ala, Ile, Met или Thr в качестве аминокислоты в положении 240;

Asp, Glu, Leu, Arg, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 241;

Leu, Glu, Leu, Gln, Arg, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 243;

His в качестве аминокислоты в положении 244;

Ala в качестве аминокислоты в положении 245;

Asp, Glu, His или Tyr в качестве аминокислоты в положении 246;

Ala, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Thr, Val или Tyr в качестве аминокислоты в положении 247;

Glu, His, Gln или Tyr в качестве аминокислоты в положении 249;

Glu или Gln в качестве аминокислоты в положении 250;

Phe в качестве аминокислоты в положении 251;

Phe, Met или Tyr в качестве аминокислоты в положении 254;

Glu, Leu или Tyr в качестве аминокислоты в положении 255;

Ala, Met или Pro в качестве аминокислоты в положении 256;

Asp, Glu, His, Ser или Tyr в качестве аминокислоты в положении 258;

Asp, Glu, His или Tyr в качестве аминокислоты в положении 260;

Ala, Glu, Phe, Ile или Thr в качестве аминокислоты в положении 262;

Ala, Ile, Met или Thr в качестве аминокислоты в положении 263;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 264;

Ala, Leu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 265;

Ala, Ile, Met или Thr в качестве аминокислоты в положении 266;

Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 267;

Asp, Glu, Phe, Gly, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Thr, Val или Trp в качестве аминокислоты в положении 268;

Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 269;

Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 270;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 271;

Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 272;

Phe или Ile в качестве аминокислоты в положении 273;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 274;

Leu или Trp в качестве аминокислоты в положении 275;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 276;

Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Trp в качестве аминокислоты в положении 278;

Ala в качестве аминокислоты в положении 279;

Ala, Gly, His, Lys, Leu, Pro, Gln, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 280;

Asp, Lys, Pro или Tyr в качестве аминокислоты в положении 281;

Glu, Gly, Lys, Pro или Tyr в качестве аминокислоты в положении 282;

Ala, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Arg или Tyr в качестве аминокислоты в положении 283;

Asp, Glu, Leu, Asn, Thr или Tyr в качестве аминокислоты в положении 284;

Asp, Glu, Lys, Gln, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 285;

Glu, Gly, Pro или Tyr в качестве аминокислоты в положении 286;

Asn, Asp, Glu или Tyr в качестве аминокислоты в положении 288;

Asp, Gly, His, Leu, Asn, Ser, Thr, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 290;

Asp, Glu, Gly, His, Ile, Gln или Thr в качестве аминокислоты в положении 291;

Ala, Asp, Glu, Pro, Thr или Tyr в качестве аминокислоты в положении 292;

Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 293;

Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 294;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 295;

Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr или Val в качестве аминокислоты в положении 296;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 297;

Ala, Asp, Glu, Phe, His, Ile, Lys, Met, Asn, Gln, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 298;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 299;

Ala, Asp, Glu, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Trp в качестве аминокислоты в положении 300;

Asp, Glu, His или Tyr в качестве аминокислоты в положении 301;

Ile в качестве аминокислоты в положении 302;

Asp, Gly или Tyr в качестве аминокислоты в положении 303;

Asp, His, Leu, Asn или Thr в качестве аминокислоты в положении 304;

Glu, Ile, Thr или Tyr в качестве аминокислоты в положении 305;

Ala, Asp, Asn, Thr, Val или Tyr в качестве аминокислоты в положении 311;

Phe в качестве аминокислоты в положении 313;

Leu в качестве аминокислоты в положении 315;

Glu или Gln в качестве аминокислоты в положении 317;

His, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Thr, Val или Tyr в качестве аминокислоты в положении 318;

Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Asn, Pro, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 320;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Pro, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 322;

Ile в качестве аминокислоты в положении 323;

Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 324;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 325;

Ala, Asp, Glu, Gly, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 326;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 327;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 328;

Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 329;

Cys, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 330;

Asp, Phe, His, Ile, Leu, Met, Gln, Arg, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 331;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 332;

Ala, Asp, Glu, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Pro, Ser, Thr, Val или Tyr в качестве аминокислоты в положении 333;

Ala, Glu, Phe, Ile, Leu, Pro или Thr в качестве аминокислоты в положении 334;

Asp, Phe, Gly, His, Ile, Leu, Met, Asn, Pro, Arg, Ser, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 335;

Glu, Lys или Tyr в качестве аминокислоты в положении 336;

Glu, His или Asn в качестве аминокислоты в положении 337;

Asp, Phe, Gly, Ile, Lys, Met, Asn, Gln, Arg, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 339;

Ala или Val в качестве аминокислоты в положении 376;

Gly или Lys в качестве аминокислоты в положении 377;

Asp в качестве аминокислоты в положении 378;

Asn в качестве аминокислоты в положении 379;

Ala, Asn или Ser в качестве аминокислоты в положении 380;

Ala или Ile в качестве аминокислоты в положении 382;

Glu в качестве аминокислоты в положении 385;

Thr в качестве аминокислоты в положении 392;

Leu в качестве аминокислоты в положении 396;

Lys в качестве аминокислоты в положении 421;

Asn в качестве аминокислоты в положении 427;

Phe или Leu в качестве аминокислоты в положении 428;

Met в качестве аминокислоты в положении 429;

Trp в качестве аминокислоты в положении 434;

Ile в качестве аминокислоты в положении 436; и

Gly, His, Ile, Leu или Tyr в качестве аминокислоты в положении 440;

как указано в соответствии с нумерацией EU;

[20] применение согласно любому из [1]-[16], где Fc-область обладает более высокой активностью связывания с ингибиторным Fcγ-рецептором, чем с активирующим Fcγ-рецептором;

[21] применение согласно [20], где ингибиторный Fcγ-рецептор представляет собой FcγRIIb человека;

[22] применение согласно [20] или [21], где активирующий Fcγ-рецептор представляет собой FcγRIa человека, FcγRIIa (R)человека, FcγRIIa (H) человека, FcγRIIIa (V) человека или FcγRIIIa (F) человека;

[23] применение согласно любому из [20]-[22], где аминокислота в положении 238 или 328 (нумерация EU) в Fc-области отличается от аминокислоты в нативной Fc-области IgG человека;

[24] применение согласно [23], где аминокислота в положении 238 Fc-области представляет собой Asp или аминокислота в положении 328 Fc-области представляет собой Glu, как указано в соответствии с нумерацией EU;

[25] применение согласно [23] или [24], где аминокислотная последовательность Fc-области содержит по меньшей мере одну или более аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Asp в качестве аминокислоты в положении 233;

Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 234;

Ala, Asp, Glu, Leu, Met, Phe, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 237;

Asp в качестве аминокислоты в положении 239;

Ala, Gln или Val в качестве аминокислоты в положении 267;

Asn, Asp или Glu в качестве аминокислоты в положении 268;

Gly в качестве аминокислоты в положении 271;

Ala, Asn, Asp, Gln, Glu, Leu, Met, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 326;

Arg, Lys или Met в качестве аминокислоты в положении 330;

Ile, Leu или Met в качестве аминокислоты в положении 323; и

Asp в качестве аминокислоты в положении 296;

как указано в соответствии с нумерацией EU;

[26] способ скрининга антигенсвязывающей молекулы, обладающей функцией элиминации антигена из плазмы, где способ включает:

(a) получение антигенсвязывающего домена, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от условий концентрации ионов;

(b) получение гена, кодирующего антигенсвязывающий домен, выбранный согласно (a) выше;

(c) функциональное связывание гена, полученного согласно (b) выше, с геном, кодирующим Fc-область;

(d) культивирование клетки, содержащей гены, функционально связанные согласно (c) выше;

(e) выделение антигенсвязывающей молекулы из культурального раствора, полученного согласно (d) выше;

(f) контактирование антигенсвязывающей молекулы, полученной согласно (e) выше, с антигеном; и

(g) оценку образования иммунного комплекса, содержащего антигенсвязывающую молекулу и антиген;

[27] способ получения антигенсвязывающей молекулы, обладающей функцией элиминации антигена из плазмы, где способ включает:

(a) контактирование антигена с антигенсвязывающей молекулой, содержащей Fc-область и два или более антигенсвязывающих доменов, где по меньшей мере один из антигенсвязывающих доменов обладает антигенсвязывающей активностью, которая изменяется в зависимости от условий концентрации ионов;

(b) оценку образования иммунного комплекса, содержащего антигенсвязывающую молекулу и антиген;

(c) культивирование клетки-хозяина, содержащей вектор, который содержит ген, кодирующий антигенсвязывающую молекулу, для которой подтверждено, что она образует иммунный комплекс, согласно (b) выше; и

(d) выделение антигенсвязывающей молекулы из культурального раствора, полученного согласно (c) выше;

[28] способ получения антигенсвязывающей молекулы, обладающей функцией элиминации антигена из плазмы, где способ включает:

(a) получение антигенсвязывающего домена, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от условий концентрации ионов;

(b) получение гена, кодирующего антигенсвязывающий домен, выбранный согласно (a) выше;

(c) функциональное связывание гена, полученного согласно (b) выше, с геном, кодирующим Fc-область;

(d) культивирование клетки, содержащей гены, функционально связанные согласно (c) выше;

(e) выделение антигенсвязывающей молекулы из культурального раствора, полученного согласно (d) выше;

(f) контактирование антигенсвязывающей молекулы, полученной согласно (e) выше, с антигеном;

(g) оценку образования иммунного комплекса, содержащего антигенсвязывающую молекулу и антиген;

(h) культивирование клетки-хозяина, содержащей вектор, который содержит ген, кодирующий антигенсвязывающую молекулу, для которой подтверждено, что она образует иммунный комплекс, согласно (g) выше; и

(i) выделение антигенсвязывающей молекулы из культурального раствора, полученного согласно (h) выше; и

[29] способ получения антигенсвязывающей молекулы, обладающей функцией элиминации антигена из плазмы, где способ включает:

(a) получение антигенсвязывающего домена, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от условий концентрации ионов;

(b) получение гена, кодирующего антигенсвязывающий домен, выбранный согласно (a) выше;

(c) функциональное связывание гена, полученного согласно (b) выше, с геном, кодирующим Fc-область;

(d) культивирование клетки, содержащей гены, функционально связанные согласно (c) выше; и

(e) выделение антигенсвязывающей молекулы из культурального раствора, полученного согласно (d) выше; и

где способ дополнительно включает контактирование антигенсвязывающей молекулы, полученной способом получения, с антигеном, и оценку образования иммунного комплекса, содержащего антигенсвязывающую молекулу и антиген.

Упомянутые выше [1]-[25] могут быть переформулированы следующим образом:

[1’] фармацевтическая композиция для элиминации антигена из плазмы, где фармацевтическая композиция содержит антигенсвязывающую молекулу, содержащую

(i) Fc-область и

(ii) два или более антигенсвязывающих доменов,

где по меньшей мере один из доменов представляет собой антигенсвязывающий домен, антигенсвязывающая активность которого изменяется в зависимости от условий концентрации ионов, и

где антигенсвязывающая молекула может образовывать иммунный комплекс, который содержит

(a) две или более антигенсвязывающих молекул и

(b) два или более антигенов, где антигены содержат два или более антигенных элементов связывания;

[2’] фармацевтическая композиция согласно [1’], где условия концентрации ионов представляют собой условия концентрации ионов кальция;

[3’] фармацевтическая композиция согласно [2’], где антигенсвязывающий домен обладает антигенсвязывающей активностью в условиях низкой концентрации ионов кальция, которая является более низкой, чем антигенсвязывающая активность в условиях высокой концентрации ионов кальция;

[4’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[3’], где условия концентрации ионов представляют собой условия pH;

[5’] фармацевтическая композиция согласно [4’], где антигенсвязывающий домен обладает антигенсвязывающей активностью в диапазоне кислых значений pH, которая является более низкой, чем антигенсвязывающая активность в условиях диапазона нейтральных значений pH;

[6’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[5’], где антигены, содержащие два или более антигенных элементов связывания, являются мультимерами;

[7’] фармацевтическая композиция согласно [6’], где антиген представляет собой любой из GDF, GDF-1, GDF-3 (Vgr-2), GDF-5 (BMP-14, CDMP-1), GDF-6 (BMP-13, CDMP-2), GDF-7 (BMP-12, CDMP-3), GDF-8 (миостатин), GDF-9, GDF-15 (MIC-1), TNF, TNF-альфа, TNF-альфа-бета, TNF-бета-2, TNFSF10 (лиганд Apo-2 TRAIL, TL2), TNFSF11 (лиганд ODF TRANCE/RANK, лиганд OPG), TNFSF12 (лиганд Apo-3 TWEAK, лиганд DR3), TNFSF13 (APRIL TALL2), TNFSF13B (BAFF BLYS, TALL1, THANK, TNFSF20), TNFSF14 (лиганд LIGHT HVEM, LTg), TNFSF15 (TL1A/VEGI), TNFSF18 (лиганд AITR лиганда GITR, TL6), TNFSF1A (TNF-a коннектин, DIF, TNFSF2), TNFSF1B (TNF-b LTa, TNFSF1), TNFSF3 (LTb TNFC, p33), TNFSF4 (лиганд gp34 OX40, TXGP1), TNFSF5 (лиганд CD154 CD40, gp39, HIGM1, IMD3, TRAP), TNFSF6 (лиганд Apo-1 лиганда Fas, лиганд APT1), TNFSF7 (лиганд CD70 CD27), TNFSF8 (лиганд CD153 CD30), TNFSF9 (лиганд CD137 лиганда 4-1BB), VEGF, IgE, IgA, IgG, IgM, RANKL, TGF-альфа, TGF-бета, панспецифического TGF-бета и IL-8;

[8’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[5’], где антигены, содержащие два или более антигенных элементов связывания, являются мономерами;

[9’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[8’], где антигенсвязывающие молекулы представляют собой мультиспецифическую или мультипаратопную антигенсвязывающую молекулу, или смесь антигенсвязывающих молекул;

[10’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[9’], где Fc-область соответствует любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[11’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[9’], где Fc-область представляет собой Fc-область с усиленной активностью связывания FcRn в условиях диапазона кислых значений pH по сравнению с Fc-областью, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[12’] фармацевтическая композиция согласно [11’], где Fc-область представляет собой Fc-область с заменой по меньшей мере одной или нескольких аминокислот, выбранных из группы, состоящей из аминокислот в положениях 238, 244, 245, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 260, 262, 265, 270, 272, 279, 283, 285, 286, 288, 293, 303, 305, 307, 308, 309, 311, 312, 314, 316, 317, 318, 332, 339, 340, 341, 343, 356, 360, 362, 375, 376, 377, 378, 380, 382, 385, 386, 387, 388, 389, 400, 413, 415, 423, 424, 427, 428, 430, 431, 433, 434, 435, 436, 438, 439, 440, 442 и 447 (нумерация EU) в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[13’] фармацевтическая композиция согласно [12’], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или более аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Leu в качестве аминокислоты в положении 238;

Leu в качестве аминокислоты в положении 244;

Arg в качестве аминокислоты в положении 245;

Pro в качестве аминокислоты в положении 249;

Gln или Glu в качестве аминокислоты в положении 250;

Arg, Asp, Glu или Leu в качестве аминокислоты в положении 251;

Phe, Ser, Thr или Tyr в качестве аминокислоты в положении 252;

Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 254;

Arg, Gly, Ile или Leu в качестве аминокислоты в положении 255;

Ala, Arg, Asn, Asp, Gln, Glu, Pro или Thr в качестве аминокислоты в положении 256;

Ala, Ile, Met, Asn, Ser или Val в качестве аминокислоты в положении 257;

Asp в качестве аминокислоты в положении 258;

Ser в качестве аминокислоты в положении 260;

Leu в качестве аминокислоты в положении 262;

Lys в качестве аминокислоты в положении 270;

Leu или Arg в качестве аминокислоты в положении 272;

Ala, Asp, Gly, His, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 279;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Thr, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 283;

Asn в качестве аминокислоты в положении 285;

Phe в качестве аминокислоты в положении 286;

Asn или Pro в качестве аминокислоты в положении 288;

Val в качестве аминокислоты в положении 293;

Ala, Glu, Gln или Met в качестве аминокислоты в положении 307;

Ala, Glu, Ile, Lys, Leu, Met, Ser, Val или Trp в качестве аминокислоты в положении 311;

Pro в качестве аминокислоты в положении 309;

Ala, Asp или Pro в качестве аминокислоты в положении 312;

Ala или Leu в качестве аминокислоты в положении 314;

Lys в качестве аминокислоты в положении 316;

Pro в качестве аминокислоты в положении 317;

Asn или Thr в качестве аминокислоты в положении 318;

Phe, His, Lys, Leu, Met, Arg, Ser или Trp в качестве аминокислоты в положении 332;

Asn, Thr или Trp в качестве аминокислоты в положении 339;

Pro в качестве аминокислоты в положении 341;

Glu, His, Lys, Gln, Arg, Thr или Tyr в качестве аминокислоты в положении 343;

Arg в качестве аминокислоты в положении 375;

Gly, Ile, Met, Pro, Thr или Val в качестве аминокислоты в положении 376;

Lys в качестве аминокислоты в положении 377;

Asp, Asn или Val в качестве аминокислоты в положении 378;

Ala, Asn, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 380;

Phe, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 382;

Ala, Arg, Asp, Gly, His, Lys, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 385;

Arg, Asp, Ile, Lys, Met, Pro, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 386;

Ala, Arg, His, Pro, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 387;

Asn, Pro или Ser в качестве аминокислоты в положении 389;

Asn в качестве аминокислоты в положении 423;

Asn в качестве аминокислоты в положении 427;

Leu, Met, Phe, Ser или Thr в качестве аминокислоты в положении 428;

Ala, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Gln, Arg, Ser, Thr, Val или Tyr в качестве аминокислоты в положении 430;

His или Asn в качестве аминокислоты в положении 431;

Arg, Gln, His, Ile, Lys, Pro или Ser в качестве аминокислоты в положении 433;

Ala, Gly, His, Phe, Ser, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 434;

Arg, Asn, His, Ile, Leu, Lys, Met или Thr в качестве аминокислоты в положении 436;

Lys, Leu, Thr или Trp в качестве аминокислоты в положении 438;

Lys в качестве аминокислоты в положении 440; и

Lys в качестве аминокислоты в положении 442; Ile, Pro или Thr в качестве аминокислоты в положении 308;

как указано в соответствии с нумерацией EU в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[14’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[9’], где Fc-область представляет собой Fc-область с усиленной активностью связывания FcRn в условиях диапазона нейтральных значений pH по сравнению с Fc-областью, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[15’] фармацевтическая композиция согласно [14’], где Fc-область представляет собой Fc-область с заменой по меньшей мере одной или нескольких аминокислот, выбранных из группы, состоящей из положений 237, 248, 250, 252, 254, 255, 256, 257, 258, 265, 286, 289, 297, 298, 303, 305, 307, 308, 309, 311, 312, 314, 315, 317, 332, 334, 360, 376, 380, 382, 384, 385, 386, 387, 389, 424, 428, 433, 434 и 436 (нумерация EU) в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[16’] фармацевтическая композиция согласно [15’], где Fc-область содержит по меньшей мере одну или более аминокислот, выбранных из группы, состоящей из:

Met в качестве аминокислоты в положении 237;

Ile в качестве аминокислоты в положении 248;

Ala, Phe, Ile, Met, Gln, Ser, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 250;

Phe, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 252;

Thr в качестве аминокислоты в положении 254;

Glu в качестве аминокислоты в положении 255;

Asp, Asn, Glu или Gln в качестве аминокислоты в положении 256;

Ala, Gly, Ile, Leu, Met, Asn, Ser, Thr или Val в качестве аминокислоты в положении 257;

His в качестве аминокислоты в положении 258;

Ala в качестве аминокислоты в положении 265;

Ala или Glu в качестве аминокислоты в положении 286;

His в качестве аминокислоты в положении 289;

Ala в качестве аминокислоты в положении 297;

Ala в качестве аминокислоты в положении 303;

Ala в качестве аминокислоты в положении 305;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Met, Asn, Pro, Gln, Arg, Ser, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 307;

Ala, Phe, Ile, Leu, Met, Pro, Gln или Thr в качестве аминокислоты в положении 308;

Ala, Asp, Glu, Pro или Arg в качестве аминокислоты в положении 309;

Ala, His или Ile в качестве аминокислоты в положении 311;

Ala или His в качестве аминокислоты в положении 312;

Lys или Arg в качестве аминокислоты в положении 314;

Ala, Asp или His в качестве аминокислоты в положении 315;

Ala в качестве аминокислоты в положении 317;

Val в качестве аминокислоты в положении 332;

Leu в качестве аминокислоты в положении 334;

His в качестве аминокислоты в положении 360;

Ala в качестве аминокислоты в положении 376;

Ala в качестве аминокислоты в положении 380;

Ala в качестве аминокислоты в положении 382;

Ala в качестве аминокислоты в положении 384;

Asp или His в качестве аминокислоты в положении 385;

Pro в качестве аминокислоты в положении 386;

Glu в качестве аминокислоты в положении 387;

Ala или Ser в качестве аминокислоты в положении 389;

Ala в качестве аминокислоты в положении 424;

Ala, Asp, Phe, Gly, His, Ile, Lys, Leu, Asn, Pro, Gln, Ser, Thr, Val, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 428;

Lys в качестве аминокислоты в положении 433;

Ala, Phe, His, Ser, Trp или Tyr в качестве аминокислоты в положении 434; и

His, Ile, Leu, Phe, Thr или Val в качестве аминокислоты в положении 436;

как указано в соответствии с нумерацией EU в аминокислотной последовательности Fc-области, соответствующей любой из SEQ ID NO:13, 14, 15 и 16;

[17’] фармацевтическая композиция согласно любому из [1’]-[13’], где Fc-область включает Fc-область, которая обладает более высокой активностью связывания Fcγ-рецептора, чем Fc-область нативного IgG человека;

[18’] фармацевтическая композиция согласно [17’], где Fc-область содержит в ее аминокислотной последовательности по меньшей мере одну или более аминокислот, которые отличаются от аминокислот нативной Fc-области IgG человека, выбранных из группы, состоящей из положений 221, 222, 223, 224, 225, 227, 228, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 246, 247, 249, 250, 251, 254, 255, 256, 258, 260, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 288, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 311, 313, 315, 317, 318, 320, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 339, 376, 377, 378, 379, 380, 382, 385, 392, 396, 421, 427, 428, 429, 434, 436 и 440 (нумерация EU);

[19’] фармацевтическая композиция согласно [18’], где Fc-область содержит в ее аминокислотной последовательности по меньшей мере одну или более аминокислот, выбранных из группы, состоящей из: