Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к анти-TIM3 антителам и к способам их применения.

Предпосылки создания изобретения

TIM3 - белок человека, принадлежащий к суперсемейству иммуноглобулинов и к семейству TIM-белков. У людей, и сходным образом у мышей, TIM3 экспрессируется на Т-клетках, а также на фагоцитах, например, макрофагах и дендритных клетках. Связывание TIM3 с белковым лигандом (например, галектином-9) может ингибировать ответ Th1 через механизм индукции апоптоза, и, следовательно, приводит к индукции периферийной толерантности. Снижение экспрессии TIM3 человека с помощью малой интерферирующей РНК (siRNA) или ингибирование TIM3 человека блокирующим антителом увеличивает секрецию интерферона альфа CD4-положительными Т-клетками, поддерживая ингибирующую роль TIM3 в Т-клетках человека. В фагоцитах TIM3 также функционирует в качестве рецептора для распознавания апоптозных клеток. Анализ клинических образцов от пациентов с аутоиммунными заболеваниями не показывает экспрессии TIM3 в CD4-положительных клетках. В частности, в клонах Т-клеток, полученных из спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом, уровень экспрессии TIM-3 был ниже, а уровень секреции IFN-гамма был выше, чем у клонов, полученных от нормальных здоровых людей (Koguchi с соавт., J Exp Med. 203, 2006, сс. 1413-1418).

Имеются сообщения о связи TIM3 с аллергическими заболеваниями или астмой (WO 96/27603 и WO 2003/063792).

Согласно анализу на микрочипах гематопоэтических стволовых клеток при остром миелоидном лейкозе (acute myeloid leukemia - AML) и нормальных гематопоэтических стволовых клеток, TIM3 экспрессируется на стволовых клетках AML, и поэтому анализ предполагает участие TIM3 в случаях злокачественных заболеваний крови (Majeti с соавт., PNAS, 106, 2009, 3396-3401 и WO 2009/091547).

К примерам анти-TIM3 моноклональных антител относят моноклональное антитело крысы против TIM3 человека (клон 344823, фирма R&D Systems) и моноклональное антитело мыши против TIM3 человека (клон F38-2E2, фирма R&D Systems). В WO 0201/06490 описывают анти-TIM3 антитела, которые проявляют быструю интернализацию, а также их иммуноконъюгаты для лечения рака и уменьшения воспаления. В US 2012/189617 описывают анти-TIM3 антитела, которые проявляют повышенную эффекторную активность, например, антителозависимую клеточную цитотоксичность (antibody-dependent cellular cytotoxicity - ADCC) для заболеваний, связанных с клетками, экспрессирующими TIM3 человека.

Краткое описание изобретения

Настоящее изобретение предусматривает анти-TIM3 антитела и способы их применения.

Одним из объектов настоящего изобретения является выделенное антитело, которое связывается с TIM3, причем антитело:

- индуцирует интернализацию TIM3 (по данным анализа FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3 (ATCC®CCL-155™)), по меньшей мере, на 45% после 120 мин при 37°С.

Другим объектом настоящего изобретения является анти-TIM3 антитело, которое:

- конкурирует за связывание с TIM3 с анти-Tim3-антителом, включающим VH SEQ ID NO: 7 и VL SEQ ID NO: 8,

- связывается с TIM3 человека и макака крабоеда,

- проявляет иммуноконъюгирующую цитотоксическую активность в отношении клеток, экспрессирующих TIM3,

- индуцирует высвобождение интерферона гамма.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антителом по настоящему изобретению является моноклональное антитело.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антителом по настоящему изобретению является антитело человека, гуманизированное или химерное антитело.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антителом по настоящему изобретению является фрагмент антитела, который связывается с TIM3.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антителом по настоящему изобретению является Fab-фрагмент.

В одном варианте осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антитело по настоящему изобретению включает:

A) (а) домен VH, включающий гипервариабельные области (HVR) (i) HVR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2 и (iii) HVR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Б) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2 и (iii) HVR-H3 Содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

B) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2 и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Г) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14 и (iii) HVR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 15, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17 и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, или

Д) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22 и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 23, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25 и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, или

Е) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30 и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 31, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33 и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, или

Ж) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38 и (iii) HVR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 39, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (ii) HVR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42, или

З) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46 и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 47, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49. и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50, или

И) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54 и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 55, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58, или

К) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62 и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 63, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.

Настоящее изобретение также предусматривает выделенное антитело, которое связывается с TIM-3 человека, причем антитело содержит (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

Настоящее изобретение также предусматривает выделенное антитело, которое связывается с TIM3 человека, причем антитело включает

i) последовательность VH SEQ ID NO: 79 и последовательность VL SEQ ID NO: 80, или

ii) последовательность VН SEQ ID NO: 81 и последовательность VL SEQ ID NO: 82.

Настоящее изобретение также предусматривает выделенное антитело, которое связывается с TIM3 человека, причем антитело включает (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 39, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42.

Настоящее изобретение также предусматривает выделенное антитело, которое связывается с TIM3 человека, причем антитело включает

i) последовательность VH SEQ ID NO: 83 и последовательность VL SEQ ID NO: 84, или

ii) последовательность VH SEQ ID NO: 85 и последовательность VL SEQ ID NO: 86.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антитело по настоящему изобретению является антителом IgG1 полной длины.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антитело по настоящему изобретению является антителом IgG1 полной длины с мутациями L234A, L235A и P329G (нумерация по индексу EU по Kabat).

Другим объектом настоящего изобретения является выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по настоящему изобретению.

Другим объектом настоящего изобретения является иммуноконъюгат, включающий антитело по настоящему изобретению и цитотоксический агент.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения в таком иммуноконъюгате цитотоксическим агентом является экзотоксин A Pseudomonas или аматоксин.

Другим объектом настоящего изобретения является фармацевтический состав, включающий антитело по настоящему изобретению или иммуноконъюгат по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый носитель.

Другим объектом настоящего изобретения является антитело по настоящему изобретению или иммуноконъюгат по настоящему изобретению для применения в качестве лекарственного средства.

Другим объектом настоящего изобретения является антитело по настоящему изобретению или иммуноконъюгат по настоящему изобретению для применения в лечении рака.

Другим объектом настоящего изобретения является применение антитела по настоящему изобретению или иммуноконъюгата по настоящему изобретению при получении лекарственного средства.

Другим объектом настоящего изобретения является применение антитела по настоящему изобретению или иммуноконъюгата по настоящему изобретению при получении лекарственного средства для лечения рака.

Другим объектом настоящего изобретения является способ лечения больного раком индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела по настоящему изобретению или иммуноконъюгата по настоящему изобретению.

Анти-TIM3 антитела по настоящему изобретению проявляют очень ценные свойства, например, быструю и сильную интернализацию на TIM3-экспрессирующих раковых клетках, сильную цитотоксическую активность в качестве иммуноконъюгата (например, при конъюгации с экзотоксинами Pseudomonas или аматоксинами). В связи с этим они применимы для лечения различных онкологических заболеваний, особенно рака крови, например, лейкозов и лимфом. Кроме того, они показывают интенсивное выделение иммуностимулирующих цитокинов в реакции смешанных лимфоцитов (Mixed Lymphocyte Reaction - MLR), что делает их применимыми для иммуностимулирующего лечения рака. Кроме того, версии гуманизированных антител проявляют улучшенную завязываемость при наличии связывающей специфичности с CD4-Т-клеткам по сравнению с исходными антителами.

Краткое описание фигур

Фиг. 1А. Определение методом сортировки клеток по флуоресценции (FACS - fluorescence activated cell sorting) зависимости от времени интернализации анти-TIM3 антитела Tim3_0022 (сокращенное обозначение «TIM3 Ab(022)»), интернализованного на экспрессирующих TIM3 человека (huTIM3) клетках rec CHOK1, после инкубирования при 37°C.

Фиг. 1Б. Результаты интернализации, полученные методом FACS, показывают, что Fab-фрагмент анти-TIM3 антитела Tim3_0022 (сокращенное обозначение антитела «TIM3 Ab(022)»), интернализуется на экспрессирующих TIM3 человека (обозначение «huTIM3») клетках rec CHOK1 после инкубирования при 37°C с кинетикой, схожей с кинетикой IgG полного формата.

Фиг. 2А. Связывание анти-TIM3 антител с клетками RPMI-8226 (обозначение антитела «клон 0016» относится к антителу Tim3_0016, «клон 0018» относится к варианту антитела Tim3_0016 (антитело Tim3_0018), «клон 0022» относится к антителу Tim3_00122, и т.д.).

Фиг. 2Б. Связывание анти-TIM3 антител с клетками Пфейффера (обозначение антитела «клон 0016» относится к антителу Tim3_0016, «клон 0018» относится к варианту антитела Tim3_0016 (антитело Tim3_0018), «клон 0022» относится к антителу Tim3_00122, и т.д.).

Фиг. 3. Уровень экспрессии TIM-3 на образцах клеток от разных пациентов с AML, полученные методом FACS с применением анти-TIM-3 моноклональных антител (mAb).

Фиг. 4. Прямое сравнение связывания TIM3-антител с разными мононуклеарными клетками периферической крови (моноцитами, клетками NK, Т-клетками, CD4 Т-клетками):

Фиг. 4А: % положительных клеток, с которыми связывается вариант Tim3_0016 (антитело Tim3_0018) и гуманизированные версии.

Фиг. 4Б: Средняя интенсивность флуоресценции - связывание варианта Tim3_0016 (антитело Tim3_0018) и гуманизированных версий с разными мононуклеарными клетками периферической крови.

Фиг. 4В: % положительных клеток, с которыми связывается Tim3_0028, а также химерные и гуманизированные версии.

Фиг. 4Г: Средняя интенсивность флуоресценции - связывание Tim3_0028, а также химерных и гуманизированных версий, с разными мононуклеарными клетками периферической крови.

Подробное описание вариантов осуществления настоящего изобретения

I. Определения

Понятие «акцепторный каркас человека» по настоящему изобретению представляет собой каркас, содержащий аминокислотную последовательность каркаса вариабельного домена легкой цепи (VL) или каркаса вариабельного домена тяжелой цепи (VH), производных от каркаса иммуноглобулина человека или каркаса консенсусной последовательности человека, согласно описанному ниже. Акцепторный каркас человека, «производный от» каркаса иммуноглобулина человека или каркаса консенсусной последовательности человека, может содержать одну и ту же аминокислотную последовательность или может включать изменения аминокислотной последовательности. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения количество аминокислотных изменений составляет 10 или менее, 9 или менее, 8 или менее, 7 или менее, 6 или менее, 5 или менее, 4 или менее, 3 или менее, или 2 или менее. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения последовательность акцепторного каркаса VL идентична последовательности каркаса VL иммуноглобулина человека или консенсусной последовательности каркаса человека, (обозначить зародышевые линии, если это необходимо)

Понятия «анти-TIM3 антитело» и «антитело, которое связывается с TIM3» относятся к антителу, которое способно связывать TIM3 с такой аффинностью, что антитело становится применимым в качестве диагностического и/или терапевтического агента, нацеливающегося на TIM3. В одном варианте осуществления настоящего изобретения степень связывания анти-TIM3 антитела с неродственным белком, не являющимся TIM3, составляет примерно менее 10% от связывания антитела с TIM3 по данным измерения, например, методом поверхностного плазмонного резонанса (например, BIACORE). В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения антигенсвязывающий белок, который связывается с TIM3 человека, имеет величину KD аффинности для связывания с TIM3 человека ≤1 мкМ, ≤100 нМ, ≤10 нМ, ≤1 нМ, ≤0,1 нМ, ≤0,01 нМ или ≤0,001 нМ (например, 10^-8 М или менее, например от 10^-8 М до 10^-13 М, например, от 10^-9 М до 10^-13 М). В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения соответствующее значение KD аффинности определяют методом поверхностного плазмонного резонанса с использованием внеклеточного домена (Extracellular domain - ECD) TIM3 человека (TIM3-ECD) для аффинности TIM3.

Понятие «антитело» в контексте настоящего изобретения используют в самом широком смысле, охватывая разные структуры антител, включая, но ими не ограничиваясь, моноклональные антитела, поликлональные антитела, мультиспецифичные антитела (например, биспецифичные антитела) и фрагменты антител, при условии, что они проявляют требуемую антигенсвязывающую активность.

Понятие «фрагмент антитела» относится к молекуле, отличающейся от интактного антитела тем, что она представляет часть исходного антитела, связывающую антиген, с которым связывается исходное антитело. К примерам фрагментов антитела относят, но ими перечень не ограничивается, Fv, Fab, Fab', Fab'-SH, F(ab')₂, диатела, линейные антитела, молекулы одноцепочечных антител (например, scFv) мультиспецифичные антитела, сформированные из фрагментов антител.

Понятие «антитело, которое связывает тот же эпитоп», что и контрольное антитело, относится к антителу, которое блокирует связывание контрольного антитела с его антигеном в конкурентном исследовании на 50% или более, и, напротив, контрольное антитело блокирует связывание антитела с его антигеном в конкурентном исследовании на 50% или более. Пример конкурентного исследования предусмотрен в настоящем изобретении.

Понятие «химерное» антитело относится к антителу, в котором часть тяжелой и/или легкой цепи происходит от определенного источника или вида, хотя оставшаяся часть тяжелой и/или легкой цепи происходит от другого источника или вида.

Понятие «класс» антитела относится к типу константного домена или константной области, расположенной на тяжелой цепи антитела. Имеется пять больших классов антител: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, причем некоторые из них могут быть дополнительно поделены на подклассы (изотипы), например, IgG₁, IgG₂, IgG₃, IgG₄, IgA₁ и IgA₂. Константные домены тяжелой цепи, соответствующие разным классам иммуноглобулинов, называют α, δ, ε, γ и μ, соответственно.

Понятие «цитотоксический агент» в контексте настоящего изобретения относится к веществу, которое ингибирует или предупреждает осуществление клеточной функции и/или вызывает гибель клеток или их деструкцию. К цитотоксическим агентам относят, но ими перечень не ограничивают, радиоактивные изотопы (например, At²¹¹, I¹³¹, I¹²⁵, Y⁹⁰, Re¹⁸⁶, Re¹⁸⁸, Sm¹⁵³, Bi²¹², P³², Pb²¹² и радиоактивные изотопы Lu), химиотерапевтические агенты или лекарственные средства (например, метотрексат, адриамицин, алкалоиды винка (винкристин, винбластин, этопозид), доксорубицин, мелфалан, митомицин С, хлорамбуцил, даунорубицин или другие интеркаляторы), ингибиторы роста, ферменты и их фрагменты, например, нуклеотические ферменты, антибиотики, токсины, например, низкомолекулярные токсины или токсины с энзиматической активностью бактериального, грибного, растительного или животного происхождения, включая фрагменты и/или их варианты, а также различные противоопухолевые или противораковые агенты, описываемые ниже.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения понятие «цитотоксический агент» относится к экзотоксину А Pseudomonas (или его вариантам), описанным в WO 2005052006, WO 2007016150, WO 2007014743, WO 2007031741, WO 200932954, WO 201132022, WO 2012/154530 и WO 2012/170617, Liu с соавт., PNAS, 109, 2012, сс. 11782-11787, Mazor с соавт., PNAS, 111, 2014, сс. 8571-8576, Alewine с соавт., Mol Cancer Ther., 2014, сс. 2653-2661 В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения понятие «экзотоксин A Pseudomonas» означает аминокислотные последовательности SEQ ID NO: 69 или SEQ ID NO: 70 (их получение также описано Mazor с соавт., PNAS, 111, 2014, сс. 8571-8576, Alewine с соавт., Mol Cancer Ther., 2014, сс. 2653-2661).

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения понятие «цитотоксический агент» означает аматоксин (или его варианты) согласно описанию, например, WO 2010/115630, WO 2010/115629, WO 2012/119787, WO 2012/041504 и WO 2014135282, предпочтительные варианты описаны в WO 2012/041504 (например, конъюгированные через 6' С-атом аминокислоты 4 аматоксина, особенно через атом кислорода, связанный с 6' С-атомом аминокислоты аматоксина, где TIM3 антитело соединено линкером через молекулу мочевины) и WO 2014135282.

Понятие «эффективное количество» агента, например фармацевтического состава, относят к такому количеству, которое в определенных дозах и на протяжении определенного времени, позволяет достичь требуемого терапевтического или профилактического результата.

Понятие «Fc-область» по настоящему изобретению применяют для определения С-концевой области тяжелой цепи иммуноглобулина, которая содержит, по меньшей мере, часть константной области. Это понятие включает нативные последовательности Fc-областей и вариантов Fc-областей. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения Fc-область тяжелой цепи IgG человека располагается от Cys226 или от Pro230 до С-конца тяжелой цепи. Однако, C-концевой лизин (Lys447) Fc-области может быть или может отсутствовать. Если не указано иное, нумерация аминокислотных остатков в Fc-области или в константной области соответствует системе нумерации EU, также называемой индексом EU, в соответствии с описанием Kabat с соавт. в кн.: Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд., изд-во Bethesda MD, 1-3, 1991, cc. 91-3242.

Понятие «каркасный участок (Framework - FR)» относят к остаткам вариабельного домена, отличным от остатков гипервариабельной области. (hypervariable region - HVR). FR вариабельного домена в целом состоит из четырех доменов FR: FR1, FR2, FR3 и FR4. Соответственно, последовательности HVR и FR обычно возникают в следующей последовательности в VH (или VL): FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4.

Понятия «антитело полной длины», «интактное антитело» и «целое антитело» в контексте настоящего изобретения применяют взаимозаменяемо по отношению к антителу, имеющему в существенной степени схожую структуру со структурой нативного антитела или имеющего тяжелые цепи, которые содержат Fc-область согласно описанному в настоящем изобретении.

Понятия «клетка-хозяин», «линия клеток-хозяев» и «культура клеток- хозяев» в контексте настоящего изобретения применяют взаимозаменяемо и относят к клеткам, в которые интродуцируют экзогенную нуклеиновую кислоту, в том числе к потомству таких клеток. К клеткам-хозяевам относят «трансформантов» и «трансформированные клетки», к которым относят первично трансформированные клетки и полученное от них потомство, независимо от числа пассажей. По составу нуклеиновых кислот потомство может быть полностью идентично исходным клеткам, но может также содержать мутации. Мутантное потомство, имеющее ту же функцию или биологическую активность, которую искали или отбирали в первоначально трансформированных клетках, также относят к данным понятиям.

Понятие «антитело человека» является антителом, аминокислотная последовательность которого соответствует последовательности антитела, вырабатываемого в организме человека или происходящего от клеток человека, или происходящее от другого источника, в котором задействован спектр антител человека или другие последовательности, кодирующие антитела человека. Такое понятие «антитело человека» исключает гуманизированное антитело, содержащее не связанные с человеческим антигеном остатки.

Понятие «консенсусный каркас человека» означает каркас, в который входят наиболее часто встречающиеся остатки аминокислот при выборе последовательностей каркасных областей VL или VH иммуноглобулина человека. Обычно выбор последовательностей VL или VH иммуноглобулина человека производят из подгруппы последовательностей вариабельных доменов. Обычно подгруппа последовательностей представляет подгруппу по системе Kabat с соавт. в кн.: Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд., изд-во Bethesda MD, 1-3, 1991, cc. 91-3242. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения для VL выбор производят из подгруппы каппа I (по Kabat с соавт., 1991, см. ссылку выше). В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения для VH выбор производят из подгруппы III (по Kabat с соавт., 1991, см. ссылку выше).

Понятие «гуманизированное антитело» относится к химерному антителу, включающему аминокислотные остатки из гипервариабельных областей (HVR) и аминокислотные остатки из FR человека. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения гуманизированное антитело может включать по существу все, по меньшей мере, из одного, обычно двух, вариабельных доменов, в которых все или в существенной степени все из HVR (например, CDR) соответствуют тем HVR из антитела, не являющегося антителом человека, и всем или практически всем из FR, соответствующим FR антитела человека. Гуманизированное антитело необязательно может включать, по меньшей мере, часть константной области антитела, производной от антитела человека. Понятие «гуманизированная форма» антитела, например, антитела не человека, а другого вида, относится к антителу, которое претерпело гуманизирование.

Понятие «гипервариабельная область (hypervariable region - HVR») в контексте настоящего изобретения относится к каждой из областей вариабельного домена антитела, последовательность которых гипервариабельна («область, определяющая комплементарность (complementarity determining region - CDR»)), и/или которые формируют структурно выраженные петли («гипервариабельные петли»), и/или содержат остатки контакта с антигеном («антигенные контакты»). Обычно антитела включают шесть HVR - три в VH (H1, Н2, Н3) и три в VL (L1, L2, L3). К примерам HVR по настоящему изобретению относятся:

(а) гипервариабельные петли, происходящие из аминокислотных остатков 26-32 (L1), 50-52 (L2), 91-96 (L3), 26-32 (H1), 53-55 (Н2) и 96-101 (Н3) (Chothia, Lesk, J. Mol. Biol. 196, 1987, cc. 901-917),

(б) CDR, происходящие из аминокислотных остатков 24-34 (L1), 50-56 (L2), 89-97 (L3), 31-35b (H1), 50-65 (H2) и 95-102 (Н3) (Kabat с соавт. в кн.: Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5-е изд., изд-во Bethesda MD, 1-3, 1991).

(в) антигенные контакты, происходящие из аминокислотных остатков 27с-36 (L1), 46-55 (L2), 89-96 (L3), 30-35b (H1), 47-58 (Н2) и 93-101 (Н3) (MacCallum с соавт., J. Mol. Biol. 262, 1996, cc. 732-745), и

(г) комбинации (а), (б) и/или (в), включающие аминокислотные остатки HVR 46-56 (L2), 47-56 (L2), 48-56 (L2), 49-56 (L2), 26-35 (H1), 26-35b (H1), 49-65 (Н2), 93-102 (Н3) и 94-102 (Н3).

Если не указано иначе, остатки HVR и другие остатки в вариабельном домене (например, остатки FR) в настоящем изобретении нумеруют по Kabat с соавт.(ссылка приведена выше).

Понятие «иммуноконъюгат» означает антитело, конъюгированное с одной или несколькими гетерологичными молекулами, в том числе цитотоксический агент, но не только его. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения иммуноконъюгатом является анти-TIM3 антитело по настоящему изобретению, конъюгированное с одним или несколькими цитотоксическими агентами (предпочтительно с экзотоксином A Pseudomonas или с аматоксином).

Понятия «индивидуум» или «субъект» означает млекопитающее. К млекопитающим относятся, но ими перечень не ограничивается, домашние животные (например, коровы, овцы, кошки, собаки и лошади), приматы (например, люди и другие приматы, например, обезьяны), кролики и грызуны (например, мыши и крысы). В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения индивидуумом или субъектом является человек.

Понятие «выделенное» антитело означает антитело, которое отделено от компонентов его естественной окружающей среды. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения антитело очищают до чистоты больше чем 95% или 99%, что подтверждают, например, методами электрофореза (например, методом SDS-PAGE), изоэлектрического фокусирования (isoelectric focusing - IEF), капиллярного электрофореза или хроматографически (например, ионообменной или обратно фазовой ВЭЖХ). Обзор по методам контроля чистоты антител см., например, Flatman с соавт., J. Chromatogr. В 848, 2007, сс. 79-87.

Понятие «выделенная» нуклеиновая кислота относится к молекуле нуклеиновой кислоты, которая отделена от компонентов ее естественной окружающей среды. Выделенная нуклеиновая кислота представляет молекулу нуклеиновой кислоты, содержащуюся в клетках, которые обычно содержат молекулу нуклеиновой кислоты, но молекула нуклеиновой кислоты присутствует внехромосомно или локализована на хромосоме, отличающейся от природной хромосомной локализации.

Понятие «выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая анти-TIM3 антитело» относится к одной или нескольким молекулам нуклеиновой кислоты, кодирующим тяжелую и легкую цепи антитела (или их фрагменты), в том числе указанную молекулу (молекулы) такой нуклеиновой кислоты в едином векторе или в разных векторах, и такая молекула (молекулы) нуклеиновой кислоты присутствуют в одном или нескольких локализациях в клетке-хозяине.

Понятие «моноклональное антитело» в контексте настоящего изобретения относится к антителу, полученному от популяции в значительно степени гомогенных антител, т.е. отдельных антител, составляющих популяцию, которые идентичны и/или связывают один и тот же эпитоп, исключая возможные варианты антител, например, содержащие природные мутации или возникающие при получении моноклонального антитела, такие варианты обычно присутствуют в минорных количествах. В отличие от препаратов поликлонального антитела, которые обычно включают различные антитела, направленные против различных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело в препарате моноклонального антитела направлено против одного детерминанта на антигене. Таким образом, определение модифицированного «моноклонального» антитела указывает на характер антитела, получаемого из высоко гомогенной популяции антител, и не должно рассматриваться в качестве получения антитела каким-либо определенным методом. Например, моноклональные антитела по настоящему изобретению могут быть получены разными методами, включая, но ими не ограничиваясь, метод гибридом, методы рекомбинантной ДНК, методы фагового дисплея и методы с использованием трансгенных животных, содержащих целый локус иммуноглобулина человека или его часть, указанные методы и другие методы получения моноклональных антител описаны в настоящем изобретении.

Понятие «голое антитело» означает антитело, которое не конъюгировано с гетерологичной частью молекулы (например, с цитотоксической частью молекулы) или радиометкой. Голое антитело может находиться в фармацевтическом составе, (включить, если в предшествующем уровне есть иммуноконъюгаты).

Понятие «нативное антитело» означает природные молекулы иммуноглобулина разной структуры. Например, нативные антитела IgG являются гетеротетрамерными гликопротеинами массой примерно 150000 Да, состоящими из двух идентичных легких цепей и двух идентичных тяжелых цепей, которые связаны дисульфидной связью. От N- к С-концу каждая тяжелая цепь содержит вариабельную область (VH), также называемую вариабельным тяжелым доменом или вариабельным доменом тяжелой цепи, затем тремя константными доменами (CH1, СН2 и СН3). Сходным образом от N- к С-концу каждая легкая цепь содержит вариабельную область (VL), также называемую вариабельным легким доменом или вариабельным доменом легкой цепи, затем константным легким доменом (CL). Легкая цепь антитела может быть отнесена к одному из двух типов, называемых каппа (κ) и лямбда (λ), основанных на аминокислотной последовательности ее константного домена.

Понятие «листок-вкладыш» применяют для обозначения инструкций, которые обычно включают в коммерческие упаковки лекарственных средств для обеспечения информацией о назначениях, применении, дозах, способе введения, комбинированной терапии, противопоказаниях и/или возможных побочных эффектах от применения лекарственных средств.

Понятие «процент идентичности аминокислотной последовательности (%)» применительно к контрольной полипептидной последовательности выражают в виде процента аминокислотных остатков в последовательности-кандидате, которые идентичны по аминокислотным остаткам в контрольной полипептидной последовательности, после выравнивания последовательностей и интродукции гэпов, при необходимости, для достижения максимального процента идентичности последовательности, и не рассматривают какие-либо консервативные замещения в качестве части идентичности последовательностей. Выравнивание для определения процента идентичности аминокислотной последовательности может быть достигнуто разными способами, известными специалистам в данной области, например, используя общедоступное компьютерное обеспечение, например, BLAST, BLAST-2, ALIGN или Megalign (фирма DNASTAR). Специалисты в данной области могут определить соответствующие параметры для выравнивания последовательностей, в том числе какие-либо алгоритмы, требуемые для достижения максимального выравнивания по всей длине сравниваемых последовательностей. Однако для целей настоящего изобретения процент идентичности аминокислотных последовательностей определяют, используя для сравнения компьютерную программу ALIGN-2. Компьютерная программа сравнения последовательностей ALIGN-2 разработана фирмой Genentech, причем исходная программа подана с документацией в Бюро по защите авторских прав США, Вашингтон, округ Колумбия, 20559, и зарегистрирована под номером U.S. Copyright Registration No. TXU510087. Программу ALIGN-2 предоставляет фирма Genentech, Южный Сан-Франциско, Калифорния, или она может быть скомпилирована из исходного кода. Программу ALIGN-2 следует скомпилировать для использования в операционной системе UNIX, включая цифровую систему UNIX V4.0D. Все параметры сравнения последовательностей устанавливают программой ALIGN-2 и не изменяют.

В ситуациях, когда ALIGN-2 используют для сравнения аминокислотных последовательностей, процент идентичности данной аминокислотной последовательности А в отношении, вместе или против данной аминокислотной последовательности Б (которая в противоположном варианте может быть представлена как данная аминокислота последовательность А, которая имеет определенный процент идентичности аминокислотной последовательности в отношении, вместе или против данной аминокислотной последовательности Б) рассчитывают следующим образом:

100 раз фракция X/Y

где X означает количество аминокислотных остатков, определенных в качестве идентичных совпадений с помощью программы выравнивания последовательности ALIG-2 для выравнивания последовательностей А и Б, где Y означает общее количество аминокислотных остатков в Б. Следует учитывать, что если длина аминокислотной последовательности А не равна длине аминокислотной последовательности Б, процент идентичности аминокислотной последовательности А относительно Б не будет равным проценту идентичности аминокислотной последовательности Б по отношению к А. Если специально не указано иначе, все величины процентов аминокислотной идентичности в настоящем изобретении определяют в соответствии с описанием в предыдущем параграфе, используя компьютерную программу ALIGN-2.

Понятие «фармацевтический состав» относится к препарату, который находится в такой форме, которая позволяет проявить биологическую активность содержащегося в нем действующего ингредиента, и который не содержит дополнительных компонентов, которые неприемлемо токсичны для субъекта, которому могут вводить состав.

Понятие «фармацевтический приемлемый носитель» относится к ингредиенту в фармацевтическом составе, не являющемуся действующим ингредиентом, который не токсичен для субъекта. К фармацевтически приемлемым носителям относят, но ими перечень не ограничивают, буфер, эксципиент, стабилизатор или консервант.

Понятие «TIM3» в контексте настоящего изобретения относят к какому-либо нативному белку Т-клеточного иммуноглобулин и домена 3 муцина (также называемому клеточным рецептором 2 вируса гепатита A (hepatitis A virus cellular receptor 2 (HAVcr-2)), молекуле повреждения почки-3 (kidney injury molecule-3 - KIM-3), TIM-3, Tim3 или Tim-3) от какого-либо позвоночного животного, в том числе от млекопитающего, например, от приматов (например, людей) и грызунов (например, мышей и крыс), если не указано иначе. Понятие охватывает «полную длину» непроцессированного TIM3, а также какую-либо форму TIM3, полученную в результате процессинга в клетке. Понятие также охватывает природные варианты TIM3, например, сплайсированные варианты или аллельные варианты. Аминокислотная последовательность примера TIM3 человека представлена в виде SEQ ID NO: 77. Аминокислотная последовательность внеклеточного домена (Extracellular Domain - ECD) TIM3 представлена в виде SEQ ID NO: 78.

TIM3 является белком человека, который принадлежит к суперсемейству иммуноглобулинов и к семейству белков TIM. У людей, подобно тому, что наблюдают у мышей, TIM3 экспрессируется на Т-клетках, а также на фагоцитарных клетках, например, на макрофагах и дендритных клетках. Связывание TIM3 с белковым лигандом (например, галектином-9) может ингибировать Th1-ответ через механизм индукции апоптоза и, следовательно, приводить к индукции периферийной толерантности. Снижение экспрессии TIM-3 человека с помощью siRNA или ингибирование TIM3 человека блокирующим антителом увеличивает секрецию интерферона альфа из CD4-положительных Т-клеток, поддерживая ингибирующую роль TIM3 в Т-клетках человека. В фагоцитах TIM3 также функционирует в качестве рецептора распознавания апоптозных клеток. Анализ клинических образцов от пациентов с аутоиммунными заболеваниями не показал экспрессии TIM3 в CD4-положительных клетках. В частности, в клонах Т-клеток, полученных из спинномозговой жидкости пациентов с рассеянным склерозом, уровень экспрессии TIM3 ниже, а уровень секреции IFN- выше, чем у клонов, полученных от нормальных здоровых индивидуумов (Koguchi с соавт., J Exp Med. 203, 2006, сс. 1413-1418).

Имеются сообщения о связи TIM-3 с аллергическими заболеваниями или астмой ((WO 96/27603 и WO 2003/063792).

Согласно анализу на микрочипах гематопоэтических стволовых клеток при остром миелоидном лейкозе (acute myeloid leukemia - AML) и нормальных гематопоэтических стволовых клеток, TIM3 экспрессируется на стволовых клетках AML, и поэтому анализ предполагает участие TIM3 в злокачественных нарушениях кроветворения (Majeti с соавт., PNAS, 106, 2009, сс. 3396-3401, WO 2009/091547).

К примерам анти-TIM3 моноклональных антител относятся моноклональное антитело крысы против TIM3 человека (клон 344823, фирма R&D Systems) и моноклональное антитело мыши против TIM3 человека (клон F38-2E2, фирма R&D Systems).

В контексте настоящего изобретения понятие «лечение» (и грамматические вариации, например, «лечить» или «подвергаемый лечению») относится к клиническому вмешательству для изменения естественного состояния индивидуума, подвергаемого лечению, и может быть осуществлено или для профилактики, или в ходе развития клинической патологии. К желательным последствиям лечения относят, но ими перечень не ограничивают, предотвращение возникновения или рецидива заболевания, ослабление симптомов заболевания, уменьшение любых прямых или косвенных патологических последствий заболевания, предотвращение метастазов, снижение скорости прогрессирования заболевания, улучшение или ослабление состояние больного, ремиссию или улучшение прогноза. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения антитела по настоящему изобретению применяют для отсрочки развития заболевания или для снижения прогрессирования заболевания.

Понятие «вариабельная область» или «вариабельный домен» относится к домену тяжелой или легкой цепи антитела, которая участвует в связывании антитела с антигеном. Вариабельные домены тяжелой цепи и легкой цепи (VH и VL, соответственно) нативного антитела обычно имеют сходные структуры, каждый домен включает четыре консервативные каркасные области (FR) и три гипервариабельные области (HVR). (См., например, Kindt с соавт. в кн.: «Kuby Immunology», 6-е изд., W.H. Freeman и Co., Нью-Йорк, 2007, с. 91). Один домен VH или VL может быть достаточным для антигенсвязывающей специфичности. Кроме того, антитела, которые связывают определенный антиген, могут быть выделены с использованием домена VH или VL из антитела, которое связывает антиген для скрининга библиотеки комплементарных доменов VL или VH, соответственно (см., например, Portolano с соавт., J. Immunol. 150, 1993, сс. 880- 887, Clackson с соавт., Nature 352, 1991, сс. 624-628).

Понятие «вектор» в контексте настоящего изобретения относится к молекуле нуклеиновой кислоты, способной размножать другую нуклеиновую кислоту, с которой она связана. Понятие включает вектор в качестве самореплицирующейся структуры нуклеиновой кислоты, а также вектор, инкорпорированный в геном клетки-хозяина, в которую они интродуцированы. Определенные векторы способны направлять экспрессию нуклеиновых кислот, с которыми они оперативно связаны. Такие векторы в контексте настоящего изобретения называют «векторами экспрессии».

II. Композиции и методы

Один из объектов настоящего изобретение основывается, в частности, на выяснении того обстоятельства, что выбранные анти-TIM3 антитела по настоящему изобретению связываются с определенными эпитопами TIM3, проявляя сильную и быструю интернализацию и/или высокий уровень цитотоксической активности против раковых клеток в качестве иммуноконъюгата и/или проявляя высвобождение иммуностимулирующего цитокина (например, интерферона гамма). В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предусматривают антитела, которые связываются с TIM3. Антитела по настоящему изобретению применяют, например, для диагностики или лечения рака.

А. Примеры анти-TIM3 антител

В одном из объектов осуществления настоящего изобретения предусматривают антитела, связывающиеся с TIM3. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, которое:

• Индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3 (АТСС® CCL-155™)), по меньшей мере, на 45% через 120 мин при 37°C (см. пример 6).

• В одном из объектов настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3 (АТСС® CCL-155™)), по меньшей мере, на 50% через 120 мин при 37°C (см. пример 6).

• В одном из объектов настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3 (АТСС® CCL-155™)), по меньшей мере, на 55% через 120 мин при 37°C (см. пример 6).

• В одном из объектов настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3 (АТСС® CCL-155™)), по меньшей мере, на 60% через 240 мин при 37°C (см. пример 6).

• В одном из объектов настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3 (АТСС® CCL-155™)), по меньшей мере, на 65% через 240 мин при 37°C (см. пример 6).

В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, которое:

• конкурирует за связывание с TIM3 с анти-Tim3 антителом, включающим VH и VL Tim3_0016,

• связывается с TIM3 человека или макака крабоеда,

• проявляет в качестве иммуноконъюгата цитотоксическую активность на TIM3-экспрессирующих клетках (в одном из вариантов осуществления настоящего изобретения иммуноконъюгат обладает относительной величиной IC50 цитотоксической активности в качестве конъюгата с экзотоксином А Pseudomonas на клетках RPMI-8226, равной 0,1 или меньше (см. измерение в примере 11),

• индуцирует высвобождение интерферона гамма (анализ MLR, см. пример 5).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, или HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (д) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (е) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, или HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, или HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (e) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три VH HVR последовательности, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, или HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, или HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 и (в) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, или HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, или HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения антитело по настоящему изобретению включает (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения антитело по настоящему изобретению включает (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает

i) последовательность VH SEQ ID NO: 7 и последовательность VL SEQ ID NO: 8,

ii) последовательность VH SEQ ID NO: 9 и последовательность VL SEQ ID NO: 10,

iii) или гуманизированный вариант последовательности VH и VL антитела по пунктам i) или ii).

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает

i) последовательность VH SEQ ID NO: 79 и последовательность VL SEQ ID NO: 80, или

ii) последовательность VH SEQ ID NO: 81 и последовательность VL SEQ ID NO: 82.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, которое связывается с TIM3 антителом человека, причем антитело включает VH последовательность SEQ ID NO: 79 и VL последовательность SEQ ID NO: 80.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, которое связывается с TIM3 антителом человека, причем антитело включает VH последовательность SEQ ID NO: 81 и VL последовательность SEQ ID NO: 82.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три VH HVR последовательности, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и (б) домен VL, включающий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (iii) HVR-L3, представляющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, и (iii) HVR-Н3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает

i) последовательность VH SEQ ID NO: 19 и последовательность VL SEQ ID NO: 20,

ii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пункту i).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (б) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, (в) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23, (г) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (д) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25, и (е) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.

В одном из объектов настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, включающий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три VH HVR последовательности, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23, и (б) домен VL, содержащей, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25 и (iii) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23, и (б) домен VL, содержащую (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает:

i) последовательность VH SEQ ID NO: 27 и последовательность VL SEQ ID NO: 28,

ii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пункту i).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (б) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, (в) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, (г) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (д) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, и (е) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34.

В одном из объектов настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три VH HVR последовательности, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и (б) домен VL, включающий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33 и (iii) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, включающий (i) HVR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (ii) HVR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 31, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает

i) последовательность VH SEQ ID NO: 35 и последовательность VL SEQ ID NO: 36,

ii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пункту i).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 39, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42.

В одном из объектов настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 39, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (e) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три VH HVR последовательности, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 39, и (б) домен VL, включающий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41 и (в) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 39, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-ТIМ3 антитело включает:

i) последовательность VH SEQ ID NO: 43 и последовательность VL SEQ ID NO: 44,

ii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пункту i).

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает:

i) последовательность VH SEQ ID NO: 83 и последовательность VL SEQ ID NO: 84, или

ii) последовательность VH SEQ ID NO: 85 и последовательность VL SEQ ID NO: 86.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения антитело, связывающееся с антителом TIM3 человека, включает последовательность

VH SEQ ID NO: 83 и последовательность VL SEQ ID NO: 84.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения антитело, связывающееся с антителом TIM3 человека, включает последовательность

VH SEQ ID NO: 85 и последовательность VL SEQ ID NO: 86.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (б) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, (в) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, (г) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (д) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и (е) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50.

В одном из объектов настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три VH HVR последовательности, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, и (б) домен VL, включающий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49 и (в) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, включающий (i) HVR-Н1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (ii) HVR-Н2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 47, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает:

i) последовательность VH SEQ ID NO: 51 и последовательность VL SEQ ID NO: 52,

ii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пункту i).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (б) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54, (в) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55, (г) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (д) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и (е) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58.

В одном из объектов настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три VH HVR последовательности, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55, и (б) домен VL, включающий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57 и (в) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 55, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает:

i) последовательность VH SEQ ID NO: 59 и последовательность VL SEQ ID NO: 60,

ii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пункту i).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее, по меньшей мере, одну, две, три, четыре, пять или шесть HVR, выбранных из (a) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 63, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.

В одном из объектов настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело, включающее (a) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (б) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, (в) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 63, (г) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (д) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и (е) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VH HVR, выбранные из (i) HVR-H1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (ii) HVR-H2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, и (iii) HVR-H3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 63, и (б) домен VL, содержащий, по меньшей мере, одну, по меньшей мере, две или все три последовательности VL HVR, выбранные из (i) HVR-L1, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (ii) HVR-L2, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65 и (iii) HVR-L3, содержащей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, включающее (а) домен VH, содержащий (i) HVR-H1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (ii) HVR-H2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, и (iii) HVR-H3, содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 63, и (б) домен VL, содержащий (i) HVR-L1, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (ii) HVR-L2, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и (iii) HVR-L3, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения такое анти-TIM3 антитело включает:

i) последовательность VH SEQ ID NO: 67 и последовательность VL SEQ ID NO: 68,

ii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пункту i).

В каком-либо из приведенных выше вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антитело гуманизировано. В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антитело, подобно антителам в приведенных выше вариантах осуществления настоящего изобретения, содержит области HVR и дополнительно содержит акцепторный каркасный участок человека, например, каркасный участок иммуноглобулина человека или каркасный участок консенсусной последовательности человека. В другом варианте осуществления настоящего изобретения анти-TIM3 антитело, подобно антителам в приведенных выше вариантах осуществления настоящего изобретения, содержит области HVR и дополнительно содержит VH и VL, содержащие такие HVR.

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело. Например, в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 7 и последовательность VL SEQ ID NO: 8, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее VH-последовательность SEQ ID NO: 9 и последовательность VL SEQ ID NO: 10, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 19 и VL-последовательность SEQ ID NO: 20, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 27 и последовательность VL SEQ ID NO: 28, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 35 и последовательность VL SEQ ID NO: 36, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 43 и последовательность VL SEQ ID NO: 44, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 51 и последовательность SEQ ID NO: 52, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 59 и последовательность VL SEQ ID NO: 60, или антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, содержащее последовательность VH SEQ ID NO: 67 и последовательность VL SEQ ID NO: 68.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, которое связывается с тем же эпитопом, что и анти-TIM3 антитело, включающее последовательность VH SEQ ID NO: 7 и последовательность VL SEQ ID NO: 8.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают антитело, которое конкурирует за связывание с TIM3 человека с анти-TIM3 антителом, включающим последовательность VH SEQ ID NO: 7 и последовательность VL SEQ ID NO: 8 (что определено в конкурентном исследовании, описанном в примере 4, на клетках RPMI-8226 (АТСС® CCL-155™)).

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело (например, антитело, которое связывается с TIM3 человека), включающее:

A) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Б) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

B) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Г) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, или

Д) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 23, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, или

Е) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, или

Ж) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 39, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42, или

З) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50, или

И) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 55, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58, или

К) (a) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (б) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, (в) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 63, (г) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (д) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и (е) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело (например, антитело, которое связывается с TIM3 человека), включающее:

А) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Б) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

В) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Г) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 15, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, или

Д) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 23, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, или

Е) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 31, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, или

Ж) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 39, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42, или

З) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 47, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50, или

И) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 55, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58, или

К) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 63, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66.

В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело (например, антитело, которое связывается с TIM3 человека), которое:

А1)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 7 и последовательность VL SEQ ID NO: 8,

ii) включает последовательность VH SEQ ID NO: 9 и последовательность VL SEQ ID NO: 10,

iii) или гуманизированный вариант VH и VL антитела по пунктам i) или ii),

или А2)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 79 и последовательность VL SEQ ID NO: 80, или

ii) включает последовательность VH SEQ ID NO: 81 и последовательность VL SEQ ID NO: 82.

или Б)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 19 и последовательность VL SEQ ID NO: 20,

ii) или гуманизированные варианты VH и VL антитела по пункту i),

или В)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 27 и последовательность VL SEQ ID NO: 28,

ii) или гуманизированные варианты VH и VL антитела по пункту i),

или Г)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 35 и последовательность VL SEQ ID NO: 36,

ii) или гуманизированные варианты VH и VL антитела по пункту i),

или Д)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 43 и последовательность VL SEQ ID NO: 44,

ii) или гуманизированные варианты VH и VL антитела по пункту i),

или Е)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 51 и последовательность VL SEQ ID NO: 52,

ii) или гуманизированные варианты VH и VL антитела по пункту i),

или Ж1)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 59 и последовательность VL SEQ ID NO: 60,

ii) или гуманизированные варианты VH и VL антитела по пункту i),

или Ж2)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 83 и последовательность VL SEQ ID NO: 84, или

ii) включает последовательность VH SEQ ID NO: 85 и последовательность VL SEQ ID NO: 86.

или З)

i) включает последовательность VH SEQ ID NO: 67 и последовательность VL SEQ ID NO: 68,

ii) или гуманизированные варианты VH и VL антитела по пункту i).

В другом варианте осуществления настоящего изобретения предусматривают анти-TIM3 антитело (например, антитело, которое связывается с TIM3 человека), включающее:

A) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Б) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

B) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 3, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6, или

Г) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 15, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 18, или

Д) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 22, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 23, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 25, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 26, или

Е) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 31, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 33, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, или

Ж) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 37, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 38, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 39, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 40, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 41, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42, или

З) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 46, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 47, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 48, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 49, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 50, или

И) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 55, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 56, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58, или

К) (а) домен VH, включающий (i) HVR-H1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, (ii) HVR-H2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62, (iii) HVR-H3, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 63, и (б) домен VL, включающий (i) HVR-L1, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 64, (ii) HVR-L2, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 65, и (iii) HVR-L3, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 66,

причем антитело отличается независимо одним или несколькими из следующих свойств: анти-TIM3 антитело

- индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3), по меньшей мере, на 45% через 120 мин при 37°C (см. пример 6)

- В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3), по меньшей мере, на 50% через 120 мин при 37°C (см. пример 6)

- В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3), по меньшей мере, на 55% через 120 мин при 37°C (см. пример 6)

- В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3), по меньшей мере, на 60% через 240 мин при 37°C (см. пример 6)

- В одном из вариантов осуществления настоящего изобретения антитело индуцирует интернализацию TIM3 (исследуют методом FACS на клетках RPMI8226, экспрессирующих TIM3), по меньшей мере, на 65% через 240 мин при 37°C (см. пример 6).