Оптимизированная питательная среда для подвойного материала ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2 в условиях in vitro Российский патент 2021 года по МПК A01G31/00 

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к биотехнологии, и может быть использовано в питомниководстве для массового производства оздоровленного посадочного материала плодовых (косточковых) культур вишни (ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2).

Изобретение представляет собой способ получения подбойного материала (ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2) в условиях in vitro, черенкование пробирочных растений и высадку одноузловых черенков на агаризованную питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы и витамины на основе прописи питательной среды, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу, при этом в питательную среду добавляют высокую концентрацию солей (Хелат - Fe 50 мг/л и CaCl₂ 1000 мг/л) и для растительной активности растения пересаживают на питательную среду содержанием 1 мг 6 БАП и 8 мг/л глицина, при этом концентрация микросолей: ZnSO4*7H2O - 4.3 мг/л и Н3ВО3 - 3.1 мг/л., источник кальция тоже изменен в форме (от CaCl2*2H2O на Ca(NO3)2*4H2O), пересадку проводят через 3 недели, при размножении особое внимание уделяют стекловидности или сверховодненности тканей, при этом оптимальные условия культивирования ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2 являются: температура 22-26 градусов, освещенность 2500-5000 лк, при 16-ти часовом фотопериоде.

Наиболее близким техническим решением из известных является: разработка составов питательных сред для интродукции в культуру in vitro эксплантов сортов малины и крыжовника (Бунцевич, Л.Л. Разработка составов питательных сред для интродукции в культуру in vitro эксплантов сортов малины и крыжовника / Бунцевич Л.Л., Беседина Е.Н., Костюк М.А., Макаркина М.В. // Плодоводство и виноградарство Юга России [Электронный ресурс]. - Краснодар: СКЗНИИСиВ, 2014. - №28 (4). - С. 46-55. - Режим доступа: http://www.journal.kubansad.ru/pdf/14/04/06.pdf.), однако, получение подвойного материала ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2 в условииях in vitro не описывается в конкретных случаях.

Задача изобретения заключается в оптимизации питательной среды для подвойного материала (ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2) в условиях in vitro для массового производства оздоровленного посадочного материала плодовых (косточковых) культур.

Поставленная задача решается следующим образом: первый этап считается завершенным после получения небольшого конгламерата побегов длиной 0,5-1,5 см. Для увеличения коэффициента размножения в первых пассажах можно не разделять на отдельные единицы, а переносить на свежую питательную среду целиком. При использовании этого приема величина коэффициента размножения резко возрастает и может достигать 40-60 за пассаж. Содержание цитокининов на первом этапе колеблется от 0,1 до 1 мг/л, ауксинов от 0,001 до 1 мг/л. Полученные побеги пересаживают на питательную среду Мурасиге Скуга с добавлением в среду высокую концентрацию солей (Хелат - Fe 50 мг/л и CaCl₂ 1000 мг/л) и для растительной активности растения пересаживают на питательную среду содержанием 1 мг 6 БАП и 8 мг/л глицина, при этом концентрация микросолей: ZnSO4*7H2O - 4.3 мг/л и Н3ВО3 - 3.1 мг/л., источник кальция тоже изменен в форме (от CaCl2*2H2O на Ca(NO3)2*4H2O), пересадку проводят через 3 недели, при размножении особое внимание уделяют стекловидности или сверховодненности тканей, при этом оптимальные условия культивирования ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2 являются: температура 22-26 градусов, освещенность 2500-5000 лк, при 16-ти часовом фотопериоде.

Сравнительный анализ питательных сред:

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой способ получения подвойного материала (ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2) в условиях in vitro, черенкование пробирочных растений и высадку одноузловых черенков на агаризованную питательную среду, содержащую макро- и микроэлементы и витамины на основе прописи питательной среды, Fe-хелат, агар-агар, сахарозу, при этом в питательную среду добавляют высокую концентрацию солей (Хелат - Fe 50 мг/л и Са(Cl)2 1000 мг/л) и для растительной активности растения пересаживают на питательную среду содержанием 1 мг 6 БАЛ и 08 мг/л глицина, при этом концентрация микросолей: ZnSO4*7H2O - 4.3 мг/л и Н3ВО3 - 3.1 мг/л., источник кальция тоже изменен в форме (от CaCl2*2H2O на Ca(NO3)2*4H2O), пересадку проводят через 3 недели, при размножении особое внимание уделяют стекловидности или сверховодненности тканей, при этом оптимальные условия культивирования ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2 являются: температура 22-26 градусов, освещенность 2500-5000 лк, при 16-ти часовом фотопериоде. Изобретение позволяет _{увеличить} выход растений до 80% . 3 табл.

Питательная среда для подвойного материала ВСВ-1, ВСЛ-1 и ВСЛ-2 в условииях in vitro, при следующем содержании исходных данных компонентов, мг/л:

NH₄NO₃ - 3600

KNO₃ - 1400

MgSO₄*7H₂O -370

KH₂PO₄ - 170

Са(Cl)₂*4H₂O - 1000

MnSO₄*4H₂O - 22,3

Н₃ВО₃ - 3,1

ZnSO₄*7H₂O - 4,3

Na₂MoO₄*2H₂O - 0,25

CuSO₄*5H₂O - 0,025

CoCl₁*6H₂O - 0,025

KI - 0,83

FeSO₄*7H₂O - 50

Na₂ЭДTA*2H₂O - 37,3

Сахароза - 22500

Агар - 8000

Глицин - 8