Предпосылки создания изобретения
Разработка высокоактивной антиретровирусной терапии (ВААРТ) в середине 1990-х изменила клиническое лечение инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ) типа I. Было подтверждено, что ВААРТ режимы являются высокоэффективным лечением, существенно снижающим ВИЧ вирусную нагрузку у ВИЧ-инфицированных пациентов, замедляя, таким образом, развитие заболевания и снижая связанную с ВИЧ заболеваемость и смертность. При этом, успех ВААРТ лечения непосредственно связан с соблюдением режима терапии пациентом. Если не поддерживать подходящие уровни комбинаций антиретровирусных лекарственных средств в крови, будут развиваться мутации вируса, приводящие к резистентности к терапии и перекрестной резистентности к молекулам того же терапевтического класса, таким образом, подвергая риску длительную эффективность лечений. Различные клинические исследования показали снижение эффективности лечения при относительно небольших отклонениях в соблюдении режима терапии. Исследование, проведенное Musiime, показало, что 81% пациентов, соблюдающих режим терапии более чем на 95%, продемонстрировали вирусную супрессию, тогда как только 50% пациентов, которые соблюдали режим на 80-90%, достигали успеха. См. Musiime, S., et al., Adherence to Highly Active Antiretroviral Treatment in HIV-Infected Rwandan Women. PLOS one 2011, 6, (11), 1-6. Примечательно, что только 6% пациентов, которые соблюдали режим меньше чем на 70%, показали улучшения уровней вирусных маркеров. Таким образом, низкая комплаентность является основной причиной терапевтической неэффективности при лечении ВИЧ-1 инфекции.
Однако при этом степень соблюдения ВААРТ режимов все еще далека от оптимальной. Различные характеристики ВААРТ делают соблюдение режима особенно трудным. Терапевтические режимы являются сложными, требующими приема нескольких лекарственных средств ежедневно, часто в разное время дня, и для многих со строгими требованиями, касающимися приема пищи. Многие ВААРТ терапии также имеют неприятные побочные эффекты, включая тошноту, диарею, головные боли и периферическую невропатию. Социальные и физиологические факторы также могут негативно влиять на соблюдение режима терапии. Пациенты сообщают, что забывчивость, бытовые факторы, включая страх быть идентифицированным как ВИЧ-положительный, и утомительный терапевтический режим в течение долгого периода лечения - все это способствует нарушениям соблюдения режима терапии.
Новые лечебные мероприятия для лечения ВИЧ направлены на улучшение соблюдение режима путем уменьшения сложности лечений, частоты приема препаратов и/или побочных эффектов лекарственных терапий. Длительно действующие, примерно месяц или дольше, инъекционные лекарственные препараты (LAI), делающие возможным менее частое введение, являются все более привлекательными для решения проблемы соблюдения режима терапии. Однако большинство одобренных и исследуемых антиретровирусных средств не являются подходящими для изменения из состава таким образом, чтобы получить длительно действующие инъекционные продукты. Большей частью это из-за субоптимальных физико-химических свойств, ограничивающих их формулирование в виде традиционных суспензий лекарственных средств, а также недостаточной антивирусной активности, приводящей к необходимости в высоких ежемесячных дозах. Даже для каботегравира или рилпивирина, двух лекарственных препаратов, исследуемых в качестве длительно действующих инъекционных препаратов, требуются большие объемы инъекций и множество инъекций для достижения фармакокинетических профилей, подтверждающих возможность ежемесячного дозирования. См., например, Spreen, W. R., et al., Long-acting injectable antiretrovirals for HIV treatment and prevention. Current Opinion in Hiv and AIDS 2013, 8, (6), 565-571; Rajoli, R. K. R., et al., Physiologically Based Pharmacokinetic Modelling to Inform Development of Intramuscular Long-Acting Nanoformulations for HIV. Clinical Pharmacokinetics 2015, 54, (6), 639-650; Baert, L., et al., Development of a long-acting injectable formulation with nanoparticles of rilpivirine (TMC278) for HIV treatment. European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 2009, 72, (3), 502-508; Van 't Klooster, G., et al., Pharmacokinetics and Disposition of Rilpivirine (TMC278) Nanosuspension в виде Long-Acting Injectable Antiretroviral Formulation. Antimicrobial Agents and Chemotherapy 2010, 54, (5), 2042-2050. Таким образом, крайне желательны новые подходы к получению препаратов, способных обеспечивать фармакокинетические характеристики с увеличенной продолжительностью для молекул с разными физико-химическими свойствами при практически используемых объемах инъекций и при ограниченном количестве инъекций.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к новым имплантационным системам доставки лекарств для длительной доставки противовирусных лекарственных средств. Эти композиции являются полезными для лечения или профилактики инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ).
Краткое описание чертежей
Фиг. 1. Рентгенограмма имплантата, содержащего сульфат бария, у крысы (снимок сделан по прошествии 6-месячного периода in vivo).
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к новым имплантационным системам доставки лекарств для длительной доставки противовирусных лекарственных средств. Новые имплантационные системы доставки лекарственных средств включают полимер и противовирусное средство. Эти имплантационные системы доставки лекарственных средств полезны для лечения или профилактики инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ). Изобретение также относится к способам лечения и профилактики ВИЧ-инфекции с использованием новых имплантационных систем доставки лекарственных средств, описанных в настоящей заявке.
Новые имплантационные системы доставки по изобретению включают биосовместимый неэродируемый полимер для образования монолитных матриц с диспергированным или растворенным лекарственным средством. Химические свойства полимерных матриц регулируют для достижения диапазона характеристик высвобождения лекарственного средства, который дает возможность увеличить продолжительность дозирования. В одном варианте осуществления изобретения новые имплантационные системы доставки совместимы с молекулами, имеющими широкий спектр физико-химических свойств, включая молекулы с высокой водорастворимостью или аморфные фазы, которые не подходят для формулирования в виде суспензий твердых лекарственных средств.
В связи с этим, настоящее изобретение относится к новым имплантационным системам доставки лекарственных средств, включающим биосовместимый неэродируемый полимер и 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин, где указанную имплантационную систему доставки лекарственного средства имплантируют подкожно, и 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин непрерывно высвобождается in vivo при скорости, приводящей к концентрации в плазме в пределах от 0,01 нг/мл до 3000,0 нг/мл. Эти имплантационные системы доставки желательны и полезны для профилактики и/или лечения ВИЧ-инфекции как с точки зрения комплаентности, так и удобства.
В контексте настоящей заявки термин ʺбиосовместимый неэродируемый полимерʺ относится к полимерным материалам, которые являются достаточно стойкими к разложению (как химическому, так и физическому) в присутствии биологических систем. Биосовместимые неэродируемые полимеры достаточно устойчивы к химическому и/или физическому разрушению средой, в которой их используют, таким образом, полимер остается по существу неповрежденным на протяжении всего периода высвобождения. Полимер, как правило, является гидрофобным, поэтому он сохраняет свою целостность в течение подходящего периода времени при помещении его в водную среду, такую как организм млекопитающего, и является достаточно стабильным, чтобы его можно было хранить в течение продолжительного периода до использования. Неэродируемые полимеры остаются неповрежденными in vivo в течение продолжительных периодов времени, типично несколько месяцев или лет. Молекулы лекарственных средств, инкапсулированные в полимере, высвобождаются в течение продолжительного периода путем диффузии через каналы и поры непрерывным образом. Скорость высвобождения можно изменять путем изменения процента содержания лекарственного вещества, пористости полимера, структуры имплантируемого устройства или гидрофобности полимера, или путем нанесения покрытия на внешнюю сторону имплантируемого устройства.
Соответственно, любой полимер, который не может абсорбироваться организмом, можно использовать для получения имплантационных систем доставки лекарственных средств по настоящему изобретению, которые включают биосовместимый неэродируемый полимер. Биосовместимые неэродируемые полимеры по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, сополимер этилена и винилацетата (EVA), поли(уретан), силикон, гидрогели, такие как сшитый поли(виниловый спирт) и поли(гидроксиэтилметакрилат), ацетаты ацил-замещенной целлюлозы и их алкильные производные, частично и полностью гидролизованные алкилен-винилацетатные сополимеры, непластифицированный поливинилхлорид, сшитые гомо- и сополимеры поливинилацетата, сшитые полиэфиры акриловой кислоты и/или метакриловой кислоты, поливинилалкиловые эфиры, поливинилфторид, поликарбонат, полиамид, полисульфоны, стирол-акрилонитрильные сополимеры, сшитый поли(этиленоксид), поли(алкилены), поли(винилимидазол), поли(эфиры), поли(этилентерефталат), полифосфазены и хлорсульфированные полиолефины, и их комбинации. В одном классе изобретения биосовместимый неэродируемый полимер представляет собой этилен-винилацетатный сополимер (EVA).
В одном классе изобретения биосовместимый неэродируемый полимер выбран из группы, состоящей из этилен-винилацетатного сополимера (9% винилацетата), этилен-винилацетатного сополимера (15% винилацетата), этилен-винилацетатного сополимера (28% винилацетата) и этилен-винилацетатного сополимера (33% винилацетата). В одном подклассе изобретения биосовместимый неэродируемый полимер представляет собой этилен-винилацетатный сополимер (9% винилацетата). В одном подклассе изобретения биосовместимый неэродируемый полимер представляет собой этилен-винилацетатный сополимер (15% винилацетата). В одном классе изобретения биосовместимый неэродируемый полимер представляет собой поли(уретан).
В контексте настоящей заявки термин ʺдиффузионный барьерʺ относится к покрытию, которое является проницаемым для лекарственного средства и которое нанесено на по меньшей мере часть устройства для дополнительного регулирования скорости высвобождения. Например, можно использовать покрытие из биосовместимого неэродируемого полимерного материала, например, EVA, или покрытие из биосовместимого неэродируемого полимерного материала с более низким содержанием лекарственного вещества, чем в остальной части имплантационной системы доставки. Диффузионный барьер может быть образован, например, путем коэкструзии с устройством.
Подходящие диффузионные барьеры по настоящему изобретению включают, но не ограничиваются этим, этилен-винилацетатный сополимер (EVA), поли(уретан), силикон, гидрогели, такие как сшитый поли(виниловый спирт) и поли(гидроксиэтилметакрилат), ацетаты ацил-замещенной целлюлозы и их алкильные производные, частично и полностью гидролизованные алкилен-винилацетатные сополимеры, непластифицированный поливинилхлорид, сшитые гомо- и сополимеры поливинилацетата, сшитые полиэфиры акриловой кислоты и/или метакриловой кислоты, поливинилалкиловые эфиры, поливинилфторид, поликарбонат, полиамид, полисульфоны, стирол-акрилонитрильные сополимеры, сшитый поли(этиленоксид), поли(алкилены), поли(винилимидазол), поли(эфиры), поли(этилентерефталат), полифосфазены и хлорсульфированные полиолефины и их комбинации. В одном классе изобретения диффузионный барьер представляет собой поли(уретан). В одном классе изобретения диффузионный барьер представляет собой этилен-винилацетатный сополимер (EVA). В другом классе изобретения диффузионный барьер представляет собой поли(уретан).
В одном варианте осуществления изобретения диффузионный барьер содержит противовирусное лекарственное средство. В одном классе этого варианта осуществления диффузионный барьер содержит 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин.
В контексте настоящей заявки термин ʺдиспергированный или растворенный в биосовместимом неэродируемом полимереʺ относится к лекарственному средству и полимеру, которые смешивают и затем экструдируют из горячего расплава.
В контексте настоящей заявки термин ʺнепрерывно высвобождаемыйʺ относится к лекарственному средству, высвобождаемому из биосовместимого неэродируемого полимера с постоянной скоростью в течение продолжительного периода времени. Имплантационные системы доставки лекарственных средств по настоящему изобретению, как правило, демонстрируют линейную кинетику высвобождения для лекарственного средства in vivo, иногда после начального прорыва.
Необязательно, новые имплантационные системы доставки по настоящему изобретению могут дополнительно включать рентгеноконтрастный компонент. Рентгеноконтрастный компонент сделает имплантат видимым при просвечивании рентгеновскими лучами. Рентгеноконтрастный компонент может представлять собой любой такой элемент, известный из уровня техники, такой как сульфат бария, диоксид титана, оксид висмута, тантал, вольфрам или платина. В специальном варианте осуществления рентгеноконтрастный компонент представляет собой сульфат бария.
В одном варианте осуществления рентгеноконтрастное вещество составляет около 1%-30% по массе. В другом варианте осуществления рентгеноконтрастное вещество составляет около 1%-20% по массе. В другом варианте осуществления рентгеноконтрастное вещество составляет около 4%-25% по массе. Еще в одном варианте осуществления рентгеноконтрастное вещество составляет около 6%-20% по массе. В другом варианте осуществления рентгеноконтрастное вещество составляет около 4%-15% по массе. В другом варианте осуществления рентгеноконтрастное вещество составляет около 8%-15% по массе.
Рентгеноконтрастное вещество не влияет на высвобождение 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина из имплантата.
Новые имплантационные системы доставки по изобретению включают противовирусные средства. Подходящие противовирусные средства включают анти-ВИЧ средства. В одном варианте осуществления изобретения противовирусное средство вводят в виде монотерапии. В другом варианте осуществления изобретения вводят два или более противовирусных средств в комбинации.
"Анти-ВИЧ средство" представляет собой любое средство, которое эффективно, непосредственно или опосредованно, для ингибирования обратной транскриптазы ВИЧ или другого фермента, необходимого для репликации ВИЧ или инфекции, или для профилактики ВИЧ-инфекции и/или для лечения, профилактики или замедления начала или прогрессирования СПИДа. Должно быть понятно, что анти-ВИЧ средство является эффективным для лечения, профилактики или замедления начала или прогрессирования ВИЧ-инфекции или СПИДа и/или заболеваний или состояний, возникающих на их фоне или связанных с ними. Подходящие противовирусные средства для применения в имплантационных системах доставки лекарственных средств, описанных в настоящей заявке, включают, например, средства, перечисленные в Таблице A ниже:
Противовирусные средства для профилактики ВИЧ-инфекции или СПИДа
EI=ингибитор входа; FI=ингибитор слияния; InI=ингибитор интегразы; PI=ингибитор протеазы; nRTI=нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы; nnRTI=ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы.
Некоторые из лекарственных средств, перечисленных в таблице, можно использовать в форме соли; например, абакавир сульфат, делавирдин мезилат, индинавир сульфат, атазанавир сульфат, нелфинавир мезилат, саквинавир мезилат.
В некоторых вариантах осуществления противовирусные средства в имплантационных системах доставки лекарственных средств, описанных в настоящей заявке, используются в соответствии их обычными диапазонами доз и режимами введения, как известно из уровня техники, включая, например, дозы, описанные в изданиях Physicians' Desk Reference, таких как 63-е издание (2009) и более ранние издания. В других вариантах осуществления противовирусные средства в имплантационных системах доставки лекарственных средств, описанных в настоящей заявке, используются в более низких дозах, чем их обычные диапазоны доз. В других вариантах осуществления противовирусные средства в имплантационных системах доставки лекарственных средств, описанных в настоящей заявке, используются в более высоких дозах, чем их обычные диапазоны доз.
В одном варианте осуществления изобретения противовирусное средство может представлять собой ингибитор входа; ингибитор слияния; ингибитор интегразы; ингибитор протеазы; нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы; или ненуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы. В одном классе изобретения противовирусное средство представляет собой нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы.
В одном варианте осуществления изобретения противовирусное средство представляет собой нуклеозидный ингибитор обратной транскриптазы (NRTI). В одном классе изобретения NRTI представляет собой 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин.
4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин также известен как EFdA и имеет следующую химическую структуру:
Получение и способность 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина ингибировать обратную транскриптазу ВИЧ описаны в Международной заявке PCT WO2005090349, опубликованной 29 сентября 2005 года, и в публикации патентной заявки США № 2005/0215512, опубликованной 29 сентября 2005 года, обе принадлежат Yamasa Corporation, которые включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей полноте.
В одном варианте осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, противовирусное средство присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 0,10% - 80% масс. от загрузки лекарственного препарата. В других вариантах осуществления противовирусное средство присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 20%-60% масс., около 40%-60% масс., около 40%-50% масс. или около 40%-45% масс. от загрузки лекарственного препарата. В одном классе этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 0,10%-80% масс. от загрузки лекарственного препарата. В одном подклассе этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 20%-60% масс. от загрузки лекарственного препарата. В еще одном подклассе этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 30%-65% масс. от загрузки лекарственного препарата. В еще одном подклассе этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 40%-60% масс. от загрузки лекарственного препарата. В еще одном подклассе этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 40%-50% масс. от загрузки лекарственного препарата. В еще одном подклассе этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при около 40%-45% масс. от загрузки лекарственного препарата. В одном примере этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при 40% масс. от загрузки лекарственного препарата. В другом примере этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при 45% масс. от загрузки лекарственного препарата. В другом примере этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при 50% масс. от загрузки лекарственного препарата. В другом примере этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при 60% масс. от загрузки лекарственного препарата. В другом примере этого варианта осуществления имплантационной системы доставки лекарственного средства, описанной в настоящей заявке, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в биосовместимом неэродируемом полимере при 80% масс. от загрузки лекарственного препарата.
Имплантационные системы доставки лекарственных средств по настоящему изобретению можно получить с использованием метода экструзии, где измельченный биосовместимый неэродируемый полимер смешивают с противовирусным средством, расплавляют и экструдируют в виде стержневидных структур. Стержни нарезают на отдельные имплантируемые элементы нужной длины, упаковывают и стерилизуют перед использованием. Другие способы инкапсулирования терапевтических соединений в имплантируемые полимерные неэродируемые матрицы известны специалистам в данной области. Такие способы включают формование окунанием в раствор (см. Патенты США №№ 4883666, 5114719 и 5601835). Специалист в данной области легко сможет определить подходящий способ получения такой имплантационной системы доставки лекарственного средства в зависимости от формы, размера, загрузки лекарственного препарата и кинетики высвобождения, желательных для конкретного пациента или клинического применения.
Размер и форму имплантационных систем доставки лекарственных средств можно модифицировать для достижения желаемой общей дозы. Имплантационные системы доставки лекарственных средств по настоящему изобретению часто имеют размер от около 0,5 см до около 10 см в длину. В одном варианте осуществления изобретения имплантационные системы доставки лекарственных средств имеют размер от около 1,5 см до около 5 см в длину. В одном классе этого варианта осуществления имплантационные системы доставки лекарственных средств имеют размер от около 2 см до около 5 см в длину. В одном подклассе этого варианта осуществления имплантационные системы доставки лекарственных средств имеют размер от 2 см до около 4 см в длину. Имплантационные системы доставки лекарственных средств по настоящему изобретению часто имеют размер от около 0,5 мм до около 7 мм в диаметре. В одном варианте осуществления изобретения имплантационные системы доставки лекарственных средств имеют размер от около 1,5 мм до около 5 мм в диаметре. В одном классе этого варианта осуществления имплантационные системы доставки лекарственных средств имеют размер от около 2 мм до около 5 мм в диаметре. В одном подклассе этого варианта осуществления имплантационные системы доставки лекарственных средств имеют размер от около 2 мм до около 4 мм в диаметре.
Имплантационные системы доставки лекарственных средств, описанные в настоящей заявке, способны высвобождать 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин в течение периода 21 день, 28 дней, 31 день, 4 недели, 6 недель, 8 недель, 12 недель, один месяц, два месяца, три месяца, четыре месяца, пять месяцев, шесть месяцев, семь месяцев, восемь месяцев, девять месяцев, десять месяцев, одиннадцать месяцев, двенадцать месяцев, восемнадцать месяцев, двадцать четыре месяца или тридцать шесть месяцев при средней скорости в пределах 0,02-8,0 нг в день. В одном варианте осуществления изобретения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин высвобождается при терапевтических концентрациях в течение периода от трех месяцев до тридцати шести месяцев. В одном классе этого варианта осуществления 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин высвобождается при терапевтических концентрациях в течение периода от шести месяцев до двенадцати месяцев. В одном варианте осуществления изобретения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин высвобождается при профилактических концентрациях в течение периода от трех месяцев до тридцати шести месяцев. В одном классе этого варианта осуществления 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин высвобождается при профилактических концентрациях в течение периода от шести месяцев до двенадцати месяцев.
Можно использовать один или несколько имплантатов для достижения желаемой терапевтической дозы. В одном варианте осуществления изобретения можно использовать один или несколько имплантатов для достижения терапевтической дозы в течение продолжительного времени до 1 года. В другом варианте осуществления изобретения можно использовать один или несколько имплантатов для достижения терапевтической дозы в течение продолжительного времени до 2 лет.
Имплантационные системы доставки лекарственных средств, описанные в настоящей заявке, способны высвобождать 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин, приводя к концентрации в плазме в пределах 0,02-300 нг/мл в день. В одном варианте осуществления изобретения имплантационные системы доставки лекарственных средств, описанные в настоящей заявке, способны высвобождать 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин, приводя к концентрации в плазме в пределах 0,02-30,0 нг/мл в день. В одном классе этого варианта осуществления имплантационные системы доставки лекарственных средств, описанные в настоящей заявке, способны высвобождать 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин, приводя к концентрации в плазме в пределах 0,02-15,0 нг/мл в день. Еще в одном классе этого варианта осуществления имплантационные системы доставки лекарственных средств, описанные в настоящей заявке, способны высвобождать 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин, приводя к концентрации в плазме в пределах 0,02-8,0 нг/мл в день. В одном подклассе этого варианта осуществления имплантационные системы доставки лекарственных средств, описанные в настоящей заявке, способны высвобождать 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин, приводя к концентрации в плазме в пределах 0,1-1,0 нг/мл в день.
Следующие примеры представлены для иллюстрации настоящего изобретения и не должны рассматриваться как ограничение объема изобретения.
ПРИМЕР 1
ПОЛУЧЕНИЕ ИМПЛАНТАЦИОННЫХ СИСТЕМ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, СОДЕРЖАЩИХ 30-50% МАСС. 4'-ЭТИНИЛ-2-ФТОР-2'-ДЕЗОКСИАДЕНОЗИНА, И ВЫСВОБОЖДЕНИЕ IN VITRO
Имплантаты получали с использованием процесса экструзии. Измельченный полимер и 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин смешивали при различных соотношениях: 30, 35, 40, 45 и 50% масс. лекарственного средства в EVA. Предварительную смесь подвергали экструзии из расплава с использованием двухшнекового экструдера при температурах в пределах 100-140°C, скорости вращения шнека 30 об/мин, и затем гранулировали. Гранулы затем экструдировали с использованием одношнекового экструдера с температурами в пределах 110-140°C и скоростью вращения шнека 20-25 об/мин с получением волокна диаметром 2±0,05мм, и затем его разрезали на отрезки длиной 40±2мм.
Скорость высвобождения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro определяли путем инкубации сегментов имплантатов, приблизительно 1 см в длину, в стеклянном сосуде, содержащем фосфатно-солевой буферный раствор (PBS), при 37°C и встряхивании при 50 об/мин в инкубаторе Innova 42. Объем PBS был достаточным для поддержания условий достаточного разбавления. Условия достаточного разбавления определяются как концентрация лекарственного средства, поддерживаемая на уровне или ниже 1/3 от максимальной растворимости (концентрация лекарственного средства ≤ 0,45 мг/мл в PBS при 37°C). Образцы отбирали (0,5 мл) в определенных точках времени и центрифугировали при 20800×g в течение 8 минут. Супернатант отделяли (0,4 мл), разбавляли 4-кратно и перемешивали вихревым способом. Образцы анализировали при помощи ВЭЖХ (Agilent 1100 series). Анализ 6 мкл объема осуществляли при 240 нм на колонке Supelco Ascentis® Express C18 (100 × 4,6 мм, 2,7мкм). Подвижная фаза представляла собой 0,1% H3PO4 и 50:50 ACN:MeOH (83:17 об/об) при скорости потока 1,5 мл/мин (40°C).
Для определения разложения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина при помощи ВЭЖХ объем 6 мкл вводили в колонку Agilent Zorbax SB-Aq (150 × 4,6 мм, 3,5мкм). Подвижная фаза представляла собой 0,1% H3PO4 и 50:50 ACN:MeOH при скорости потока 1,0 мл/мин (40°C). Градиент подвижной фазы показан в таблице ниже.
Химическая стабильность 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина, ВЭЖХ условия
Все образцы были откалиброваны по 0,5 мг/мл стандартным растворам 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в 50:50 MeOH:H2O.
Высвобождение 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro из имплантатов с 30% масс., 35% масс., 40% масс., 45% масс. и 50% масс. 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в EVA в условиях достаточного разбавления; указано как % высвобождения от общего количества [средн.=среднее значение, и ст.откл.=стандартное отклонение]
Скорости высвобождения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro из имплантатов с 30% масс., 35% масс., 40% масс., 45% масс. и 50% масс. 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в EVA (нормализованные к имплантату длиной 40 мм)
ПРИМЕР 2
ПОЛУЧЕНИЕ ИМПЛАНТАЦИОННЫХ СИСТЕМ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, СОДЕРЖАЩИХ 50-80% МАСС. 4'-ЭТИНИЛ-2-ФТОР-2'-ДЕЗОКСИАДЕНОЗИНА, И ВЫСВОБОЖДЕНИЕ IN VITRO
Имплантируемые устройства получали с использованием процесса экструзии. Первая стадия включала смешивание сухих микронизированных порошков активного соединения и криоизмельченного EVA с использованием смесителя Turbula T2F. Смеси лекарственного средства и полимера получали при содержании лекарственного вещества 50, 60 и 80% масс. Смеси 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина и полимера экструдировали из горячего расплава с использованием двухшнекового экструдера через головку диаметром 3 мм и растягивали до диаметра приблизительно 1,9-2,3 мм. Шнеки содержали преимущественно транспортные элементы с одной 90° смесительной секцией. 1-ю зону, куда поступали смеси лекарственное средство-полимер, охлаждали водой и поддерживали при комнатной температуре. Температура для зон 2-4 была 100°C. Экструдированные волокна диаметром 1,9-2,3 мм назрезали на отрезки длиной приблизительно 40 мм.
Скорость высвобождения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro определяли путем инкубации сегментов имплантатов, приблизительно 1 см в длину, в стеклянном сосуде, содержащем фосфатно-солевой буферный раствор (PBS), при 37°C и встряхивании при 50 об/мин в инкубаторе Innova 42. Объем PBS был достаточным для поддержания условий достаточного разбавления. Условия достаточного разбавления определяются как концентрация лекарственного средства, поддерживаемая на уровне или ниже 1/3 от максимальной растворимости (концентрация лекарственного средства ≤ 0,45 мг/мл в PBS при 37°C). Образцы отбирали (0,5 мл) в определенных точках времени и центрифугировали при 20800×g в течение 8 минут. Супернатант отделяли (0,4 мл), разбавляли 4-кратно и перемешивали вихревым способом. Образцы анализировали при помощи ВЭЖХ (Agilent 1100 series). Анализ образца объемом 6 мкл осуществляли при 240 нм на колонке Supelco Ascentis® Express C18 (100 × 4,6 мм, 2,7 мкм). Подвижная фаза представляла собой 0,1% H3PO4 и 50:50 ACN:MeOH (83:17 об/об) при скорости потока 1,5 мл/мин (40°C).
Для определения разложения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина при помощи ВЭЖХ объем 6 мкл вводили в колонку Agilent Zorbax SB-Aq (150 × 4,6 мм, 3,5мкм). Подвижная фаза представляла собой 0,1% H3PO4 и 50:50 ACN:MeOH при скорости потока 1,0 мл/мин (40°C). Градиент подвижной фазы показан в Таблице 1.
Все образцы были откалиброваны по 0,5 мг/мл стандартным растворам 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в 50:50 MeOH:H2O.
Высвобождение 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro из имплантатов с 50%, 60%, и 80% масс. 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в EVA в условиях достаточного разбавления; указано как % высвобождения от общего количества [средн.=среднее значение, и ст.откл.=стандартное отклонение]
Скорости высвобождения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro из содержащих 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин в EVA имплантатов с 50% EFdA, 60% EFdA и 80% масс. EFdA (нормализованные к имплантату длиной 40 мм) [n/d=не определяли]
ПРИМЕР 3
ПОЛУЧЕНИЕ ИМПЛАНТАЦИОННЫХ СИСТЕМ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, СОДЕРЖАЩИХ 40, 50, 60 И 80% МАСС. 4'-ЭТИНИЛ-2-ФТОР-2'-ДЕЗОКСИАДЕНОЗИНА, И ВЫСВОБОЖДЕНИЕ IN VIVO
Имплантируемые устройства получали с использованием процесса экструзии. Первая стадия включала смешивание сухих микронизированных порошков активного соединения и криоизмельченного EVA с использованием смесителя Turbula T2F. Смеси лекарственного средства и полимера получали при содержании лекарственного вещества 40, 50, 60 и 80% масс. Смеси 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина и полимера экструдировали из горячего расплава с использованием двухшнекового экструдера через головку диаметром 3 мм и растягивали до диаметра приблизительно 1,9-2,3 мм. Шнеки содержали преимущественно транспортные элементы, с одной 90° смесительной секцией. 1-ю зону, куда поступали смеси лекарственное средство-полимер, охлаждали водой и поддерживали при комнатной температуре. Температура для зон 2-4 была 100°C. Экструдированные волокна диаметром 1,9-2,3 мм нарезали на отрезки подходящей длины для достижения желаемого количества лекарственного средства на имплантат для исследования in vivo. Все исследования на животных осуществляли, следуя протоколам в соответствии с Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC), в NIRC и Merck, которые придерживаются правил, предусмотренных законом о благополучии животных USDA. Для каждой импалантации крысу Wistar Han анестезировали с использованием изофлурана перед подкожными введениями доз. С использованием иглы-троакар твердую лекарственную форму (~2мм в диаметре и разной длины, в зависимости от массы тела индивидуального животного, для достижения дозы, подходящей для каждой группы) вводили в лопаточную область. Четырех животных (2 самца и 2 самки) использовали для каждого состава препарата. Животных наблюдали до их выздоровления. В указанных точках времени образцы крови получали от анестезированных животных (с использованием изофлурана) и обрабатывали для получения плазмы для определения уровней 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина.
Концентрация 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в плазме крови из имплантатов с 40%, 50%, 60% и 80% масс. 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в EVA
(нМ)
(нМ)
(нМ)
Скорости высвобождения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vivo из имплантатов с 40%, 50%, 60% и 80% масс. 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в EVA (нормализованные к имплантату длиной 40 мм) [n/d=не определяли]
ПРИМЕР 4
ПОЛУЧЕНИЕ ИМПЛАНТАЦИОННЫХ СИСТЕМ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, СОДЕРЖАЩИХ 4'-ЭТИНИЛ-2-ФТОР-2'-ДЕЗОКСИАДЕНОЗИН С РЕНТГЕНОКОНТРАСТНЫМ СРЕДСТВОМ, И ВЫСВОБОЖДЕНИЕ IN VITRO
Имплантаты получали с использованием процесса экструзии. Измельченный полимер, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин и BaSO4 смешивали при различных соотношениях: 40 и 45% масс. лекарственного средства в EVA, и 35 и 40% масс. лекарственного средства с 10% масс. BaSO4 в EVA. Предварительную смесь подвергали экструзии из расплава с использованием двухшнекового экструдера при температурах в пределах 100-140°C, скорости вращения шнека 30 об/мин, и затем гранулировали. Гранулы затем экструдировали с использованием одношнекового экструдера, с температурами в пределах 110-140°C и скорости вращения шнека 20-25 об/мин, с получением волокна диаметром 2±0,05мм, и затем его нарезали на отрезки длиной 40±2мм.
Скорость высвобождения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro определяли путем инкубации сегментов имплантатов, приблизительно 1 см в длину, в стеклянном сосуде, содержащем фосфатно-солевой буферный раствор (PBS), при 37°C и встряхивании при 50 об/мин в инкубаторе Innova 42. Объем PBS был достаточным для поддержания условий достаточного разбавления. Условия достаточного разбавления определяются как концентрация лекарственного средства, поддерживаемая на уровне или ниже 1/3 от максимальной растворимости (концентрация лекарственного средства ≤ 0,45 мг/мл в PBS при 37°C). Образцы отбирали (0,5 мл) в определенных точках времени и центрифугировали при 20800×g в течение 8 минут. Супернатант отделяли (0,4 мл), разбавляли 4-кратно и перемешивали вихревым способом. Образцы анализировали при помощи ВЭЖХ (Agilent 1100 series). Анализ образца объемом 6 мкл осуществляли при 240 нм на колонке Supelco Ascentis® Express C18 (100 × 4,6 мм, 2,7мкм). Подвижная фаза представляла собой 0,1% H3PO4 и 50:50 ACN:MeOH (83:17 об/об) при скорости потока 1,5 мл/мин (40°C).
Для определения разложения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина при помощи ВЭЖХ объем 6 мкл вводили в колонку Agilent Zorbax SB-Aq (150 × 4,6 мм, 3,5мкм). Подвижная фаза представляла собой 0,1% H3PO4 и 50:50 ACN:MeOH при скорости потока 1,0 мл/мин (40°C). Градиент подвижной фазы показан в Таблице 1.
Все образцы были откалиброваны по 0,5 мг/мл стандартным растворам 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в 50:50 MeOH:H2O.
Высвобождение 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro из имплантатов с 35% масс. EFdA (с 10% масс. BaSO4), 40% масс. EFdA (с или без 10% масс. BaSO4) и 45% масс. EFdA в EVA в условиях достаточного разбавления
Скорости высвобождения 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина in vitro из имплантатов с 35% масс. EFdA (с 10% масс. BaSO4), 40% масс. EFdA (с или без 10% масс. BaSO4) и 45% масс. EFdA в EVA (нормализованные к имплантату длиной 40 мм)
ПРИМЕР 5
ПОЛУЧЕНИЕ ИМПЛАНТАЦИОННЫХ СИСТЕМ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, СОДЕРЖАЩИХ 4'-ЭТИНИЛ-2-ФТОР-2'-ДЕЗОКСИАДЕНОЗИН С РЕНТГЕНОКОНТРАСТНЫМ СРЕДСТВОМ, И ВЫСВОБОЖДЕНИЕ IN VIVO
Имплантаты получали с использованием процесса экструзии. Измельченный полимер, 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин и BaSO4 смешивали при различных соотношениях: 40 и 45% масс. лекарственного средства в EVA, и 35 и 40% масс. лекарственного средства с 10% масс. BaSO4 в EVA. Предварительную смесь подвергали экструзии из расплава с использованием двухшнекового экструдера при температурах в пределах 100-140°C, скорости вращения шнека 30 об/мин, затем гранулировали. Гранулы затем экструдировали с использованием одношнекового экструдера, с температурами в пределах 110-140°C и скорости вращения шнека 20-25 об/мин, с получением волокна диаметром 2±0,05мм, которое затем нарезали на отрезки желаемой длины для достижения желаемого количества лекарственного средства на имплантат для исследования in vivo. Все исследования на животных осуществляли, следуя протоколам в соответствии с Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC), в NIRC и Merck, которые придерживаются правил, предусмотренных законом о благополучии животных USDA. Для каждой импалантации крысу Wistar Han анестезировали с использованием изофлурана перед подкожными введениями доз. С использованием иглы-троакар твердую лекарственную форму (~2мм в диаметре и разной длины в зависимости от массы тела индивидуального животного для достижения дозы, подходящей для каждой группы) вводили в лопаточную область. Четырех животных (2 самца и 2 самки) использовали для каждого состава препарата. Животных наблюдали до их выздоровления. В указанных точках времени образцы крови получали от анестезированных (с использованием изофлурана) животных и обрабатывали для получения плазмы для определения уровней 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина.
Фиг. 1 показывает рентгенограмму имплантата, содержащего сульфат бария, у крысы по прошествии 6-месячного периода.
Концентрация 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в плазме крови из имплантатов с 35% масс. EFdA (с 10% масс. BaSO4), 40% масс. EFdA (с или без 10% масс. BaSO4) и 45% масс. EFdA в EVA
название | год | авторы | номер документа |
---|---|---|---|
УСТРОЙСТВО ДЛЯ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, ВИДИМОЕ В РЕНТГЕНОВСКИХ ЛУЧАХ | 2005 |
|
RU2384347C2 |
4'-ЗАМЕЩЕННЫЕ НУКЛЕОЗИДНЫЕ ИНГИБИТОРЫ ОБРАТНОЙ ТРАНСКРИПТАЗЫ И ИХ ПОЛУЧЕНИЕ | 2016 |
|
RU2720811C2 |
СИСТЕМЫ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ВНУТРЬ ГЛАЗА | 2007 |
|
RU2440102C2 |
СИСТЕМА ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ВЕЩЕСТВ | 2008 |
|
RU2488369C2 |
АДЕНОЗИНОВОЕ ПРОИЗВОДНОЕ И ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ, СОДЕРЖАЩАЯ ЕГО | 2020 |
|
RU2824528C2 |
ПОЛИМЕРНЫЕ КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ДОСТАВКИ ЛЕЙПРОЛИДА С УЛУЧШЕННОЙ ЭФФЕКТИВНОСТЬЮ | 2001 |
|
RU2271826C2 |
ИНТРАВАГИНАЛЬНЫЕ УСТРОЙСТВА ДЛЯ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСВ | 2012 |
|
RU2607179C2 |
БИОДЕГРАДИРУЕМЫЕ СИСТЕМЫ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ ДОЛГОВРЕМЕННОГО ВЫСВОБОЖДЕНИЯ БЕЛКОВ | 2013 |
|
RU2676102C2 |
ВНУТРИГЛАЗНЫЕ СИСТЕМЫ ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА С ЗАМЕДЛЕННЫМ ВЫСВОБОЖДЕНИЕМ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ГЛАЗНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ | 2010 |
|
RU2532333C2 |
СИСТЕМА ДОСТАВКИ ЛЕКАРСТВ | 2002 |
|
RU2302883C2 |
Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к монолитной имплантационной подкожной системе доставки лекарственного средства и её использованию в способе лечения и профилактики ВИЧ-инфекции. Монолитная имплантационная подкожная система доставки лекарственного средства, включающая этилен-винилацетатный сополимер и 4ʼ-этинил-2-фтор-2ʼ-дезоксиаденозин, где 4ʼ-этинил-2-фтор-2ʼ-дезоксиаденозин непрерывно высвобождается in vivo при скорости, приводящей к концентрации в плазме в пределах от 0,02 нг/мл до 300,0 нг/мл. Способ лечения или профилактики ВИЧ-инфекции с использованием имплантационной системы доставки лекарственного средства. Вышеописанное решение обеспечивает непрерывное высвобождения 4ʼ-этинил-2-фтор-2ʼ-дезоксиаденозин in vivo в течение длительного времени. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 1 ил., 11 табл., 5 пр.
1. Монолитная имплантационная подкожная система доставки лекарственного средства, включающая этилен-винилацетатный сополимер и 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин, где 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин непрерывно высвобождается in vivo при скорости, приводящей к концентрации в плазме в пределах от 0,02 нг/мл до 300,0 нг/мл.
2. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1, где концентрация 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в плазме составляет от 0,02 нг/мл до 30,0 нг/мл.
3. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1 или 2, где концентрация 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозина в плазме составляет от 0,02 нг/мл до 8,0 нг/мл.
4. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1, где этилен-винилацетатный полимер выбран из группы, состоящей из этилен-винилацетатного сополимера, включающего 9% винилацетата, этилен-винилацетатного сополимера, включающего 15% винилацетата, этилен-винилацетатного сополимера, включающего 28% винилацетата, и этилен-винилацетатного сополимера, включающего 33% винилацетата.
5. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 4, где этилен-винилацетатный полимер представляет собой этилен-винилацетатный сополимер, включающий 9% винилацетата.
6. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 4, где этилен-винилацетатный полимер представляет собой этилен-винилацетатный сополимер, включающий 15% винилацетата.
7. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1, где 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин диспергирован или растворен в этилен-винилацетатном полимере.
8. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1, где 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в этилен-винилацетатном полимере в количестве от 0,10% до 80% масс. от загрузки лекарственного препарата.
9. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 8, где 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в этилен-винилацетатном полимере в количестве от 30% до 65% масс. от загрузки лекарственного препарата.
10. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 9, где 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин присутствует в этилен-винилацетатном полимере в количестве от 40% до 50% масс. от загрузки лекарственного препарата.
11. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1, включающая от 1% до 20% масс. рентгеноконтрастного вещества.
12. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1, где 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин высвобождается в терапевтических концентрациях в течение периода от трех месяцев до тридцати шести месяцев.
13. Имплантационная система доставки лекарственного средства по п. 1, где 4'-этинил-2-фтор-2'-дезоксиаденозин высвобождается в профилактических концентрациях в течение периода от трех месяцев до тридцати шести месяцев.
14. Способ лечения или профилактики ВИЧ-инфекции с использованием имплантационной системы доставки лекарственного средства по п. 1.
WO 2015086489 A1, 18.06.2015 | |||
US 20130195950 A1, 01.08.2013 | |||
US 20110206745 A1, 25.08.2011 | |||
WO 2004103336 A2, 02.12.2004 | |||
US 6262137 B1, 17.07.2001 | |||
WO 2014123880 A1, 14.08.2014 | |||
US 8835615 B2, 16.09.2014 | |||
Сысуев Б | |||
Б., Плетнева И | |||
В | |||
Современное состояние исследований разработок в области инновационных лекарственных форм и их модификаций // |
Авторы
Даты
2021-09-13—Публикация
2017-05-08—Подача